RU2305559C2 - Вакцина свиней против респираторных патологий и патологий репродукции свиней - Google Patents
Вакцина свиней против респираторных патологий и патологий репродукции свиней Download PDFInfo
- Publication number
- RU2305559C2 RU2305559C2 RU2002133052/13A RU2002133052A RU2305559C2 RU 2305559 C2 RU2305559 C2 RU 2305559C2 RU 2002133052/13 A RU2002133052/13 A RU 2002133052/13A RU 2002133052 A RU2002133052 A RU 2002133052A RU 2305559 C2 RU2305559 C2 RU 2305559C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gene
- seq
- plasmid
- virus
- fragment
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 60
- 230000007170 pathology Effects 0.000 title abstract description 16
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 title abstract description 16
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 title abstract description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims abstract description 106
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 99
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 51
- 101000768957 Acholeplasma phage L2 Uncharacterized 37.2 kDa protein Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000823746 Acidianus ambivalens Uncharacterized 17.7 kDa protein in bps2 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000916369 Acidianus ambivalens Uncharacterized protein in sor 5'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000769342 Acinetobacter guillouiae Uncharacterized protein in rpoN-murA intergenic region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000823696 Actinobacillus pleuropneumoniae Uncharacterized glycosyltransferase in aroQ 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000786513 Agrobacterium tumefaciens (strain 15955) Uncharacterized protein outside the virF region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000618005 Alkalihalobacillus pseudofirmus (strain ATCC BAA-2126 / JCM 17055 / OF4) Uncharacterized protein BpOF4_00885 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000967489 Azorhizobium caulinodans (strain ATCC 43989 / DSM 5975 / JCM 20966 / LMG 6465 / NBRC 14845 / NCIMB 13405 / ORS 571) Uncharacterized protein AZC_3924 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000823761 Bacillus licheniformis Uncharacterized 9.4 kDa protein in flaL 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000819719 Bacillus methanolicus Uncharacterized N-acetyltransferase in lysA 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000789586 Bacillus subtilis (strain 168) UPF0702 transmembrane protein YkjA Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000792624 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YbxH Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000790792 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YckC Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000819705 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YlxR Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000948218 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YtxJ Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000718627 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Putative RNA polymerase sigma-G factor Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000641200 Bombyx mori densovirus Putative non-structural protein Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000947633 Claviceps purpurea Uncharacterized 13.8 kDa protein Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000948901 Enterobacteria phage T4 Uncharacterized 16.0 kDa protein in segB-ipI intergenic region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000805958 Equine herpesvirus 4 (strain 1942) Virion protein US10 homolog Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000790442 Escherichia coli Insertion element IS2 uncharacterized 11.1 kDa protein Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000788354 Escherichia phage P2 Uncharacterized 8.2 kDa protein in gpA 5'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000770304 Frankia alni UPF0460 protein in nifX-nifW intergenic region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000797344 Geobacillus stearothermophilus Putative tRNA (cytidine(34)-2'-O)-methyltransferase Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000748410 Geobacillus stearothermophilus Uncharacterized protein in fumA 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000772675 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) UPF0438 protein HI_0847 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000631019 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) Uncharacterized protein HI_0350 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000768938 Haemophilus phage HP1 (strain HP1c1) Uncharacterized 8.9 kDa protein in int-C1 intergenic region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000785414 Homo sapiens Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain-containing protein 1 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000782488 Junonia coenia densovirus (isolate pBRJ/1990) Putative non-structural protein NS2 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000811523 Klebsiella pneumoniae Uncharacterized 55.8 kDa protein in cps region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000818409 Lactococcus lactis subsp. lactis Uncharacterized HTH-type transcriptional regulator in lacX 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000878851 Leptolyngbya boryana Putative Fe(2+) transport protein A Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000758828 Methanosarcina barkeri (strain Fusaro / DSM 804) Uncharacterized protein Mbar_A1602 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101001122401 Middle East respiratory syndrome-related coronavirus (isolate United Kingdom/H123990006/2012) Non-structural protein ORF3 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101001055788 Mycolicibacterium smegmatis (strain ATCC 700084 / mc(2)155) Pentapeptide repeat protein MfpA Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000740670 Orgyia pseudotsugata multicapsid polyhedrosis virus Protein C42 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000769182 Photorhabdus luminescens Uncharacterized protein in pnp 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000961392 Pseudescherichia vulneris Uncharacterized 29.9 kDa protein in crtE 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000731030 Pseudomonas oleovorans Poly(3-hydroxyalkanoate) polymerase 2 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101001065485 Pseudomonas putida Probable fatty acid methyltransferase Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000711023 Rhizobium leguminosarum bv. trifolii Uncharacterized protein in tfuA 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000948156 Rhodococcus erythropolis Uncharacterized 47.3 kDa protein in thcA 5'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000917565 Rhodococcus fascians Uncharacterized 33.6 kDa protein in fasciation locus Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000790284 Saimiriine herpesvirus 2 (strain 488) Uncharacterized 9.5 kDa protein in DHFR 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000936719 Streptococcus gordonii Accessory Sec system protein Asp3 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000788499 Streptomyces coelicolor Uncharacterized oxidoreductase in mprA 5'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101001102841 Streptomyces griseus Purine nucleoside phosphorylase ORF3 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000708557 Streptomyces lincolnensis Uncharacterized 17.2 kDa protein in melC2-rnhH intergenic region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000649826 Thermotoga neapolitana Putative anti-sigma factor antagonist TM1081 homolog Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000827562 Vibrio alginolyticus Uncharacterized protein in proC 3'region Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 101000778915 Vibrio parahaemolyticus serotype O3:K6 (strain RIMD 2210633) Uncharacterized membrane protein VP2115 Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 102100020724 Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain-containing protein 1 Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 3
- 208000005342 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Diseases 0.000 claims abstract 8
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 14
- 208000009305 pseudorabies Diseases 0.000 claims description 10
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 9
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 8
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 claims description 6
- 241000725681 Swine influenza virus Species 0.000 claims description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 5
- 201000006465 actinobacillosis Diseases 0.000 claims description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 4
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 claims description 2
- 101150073872 ORF3 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims description 2
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 claims description 2
- 241000710778 Pestivirus Species 0.000 claims 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 84
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 67
- 241000606748 Actinobacillus pleuropneumoniae Species 0.000 description 37
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 32
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 25
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 23
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 23
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 22
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 22
- 239000000047 product Substances 0.000 description 18
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 12
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000701093 Suid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 9
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 9
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 9
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 9
- 241000710777 Classical swine fever virus Species 0.000 description 8
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 7
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 101001006364 Bacillus cereus Hemolysin-3 Proteins 0.000 description 5
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 108700001237 Nucleic Acid-Based Vaccines Proteins 0.000 description 5
- 241001135989 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus Species 0.000 description 5
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 5
- 101150036031 gD gene Proteins 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 108010006464 Hemolysin Proteins Proteins 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 239000003228 hemolysin Substances 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 208000001726 Classical Swine Fever Diseases 0.000 description 3
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 101150023663 flu gene Proteins 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 3
- 229940031346 monovalent vaccine Drugs 0.000 description 3
- 229940031348 multivalent vaccine Drugs 0.000 description 3
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 3
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 3
- 108010058147 pseudorabies virus glycoprotein D Proteins 0.000 description 3
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 3
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000830028 Escherichia phage Mu Uncharacterized protein gp25 Proteins 0.000 description 2
- 101150039660 HA gene Proteins 0.000 description 2
- 101150118742 NP gene Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101900328733 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus Glycoprotein 5 Proteins 0.000 description 2
- 101710142606 Sliding clamp Proteins 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 2
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 2
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 229940124551 recombinant vaccine Drugs 0.000 description 2
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NKDFYOWSKOHCCO-YPVLXUMRSA-N 20-hydroxyecdysone Chemical compound C1[C@@H](O)[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@@](C)(O)[C@H](O)CCC(C)(O)C)CC[C@]33O)C)C3=CC(=O)[C@@H]21 NKDFYOWSKOHCCO-YPVLXUMRSA-N 0.000 description 1
- 101000621943 Acholeplasma phage L2 Probable integrase/recombinase Proteins 0.000 description 1
- 101000657454 Actinobacillus pleuropneumoniae RTX-I toxin determinant A from serotypes 1/9 Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 101000618348 Allochromatium vinosum (strain ATCC 17899 / DSM 180 / NBRC 103801 / NCIMB 10441 / D) Uncharacterized protein Alvin_0065 Proteins 0.000 description 1
- 101000781117 Autographa californica nuclear polyhedrosis virus Uncharacterized 12.4 kDa protein in CTL-LEF2 intergenic region Proteins 0.000 description 1
- 101000708323 Azospirillum brasilense Uncharacterized 28.8 kDa protein in nifR3-like 5'region Proteins 0.000 description 1
- 101000770311 Azotobacter chroococcum mcd 1 Uncharacterized 19.8 kDa protein in nifW 5'region Proteins 0.000 description 1
- 101000765604 Bacillus subtilis (strain 168) FlaA locus 22.9 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101000748761 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized MFS-type transporter YcxA Proteins 0.000 description 1
- 101000765620 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YlxP Proteins 0.000 description 1
- 101000916134 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YqxJ Proteins 0.000 description 1
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 1
- 101000754349 Bordetella pertussis (strain Tohama I / ATCC BAA-589 / NCTC 13251) UPF0065 protein BP0148 Proteins 0.000 description 1
- 101000583086 Bunodosoma granuliferum Delta-actitoxin-Bgr2b Proteins 0.000 description 1
- 101000964402 Caldicellulosiruptor saccharolyticus Uncharacterized protein in xynC 3'region Proteins 0.000 description 1
- 101000827633 Caldicellulosiruptor sp. (strain Rt8B.4) Uncharacterized 23.9 kDa protein in xynA 3'region Proteins 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 101000947628 Claviceps purpurea Uncharacterized 11.8 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101000686796 Clostridium perfringens Replication protein Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 102100036912 Desmin Human genes 0.000 description 1
- 108010044052 Desmin Proteins 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 101710126499 Envelope glycoprotein E Proteins 0.000 description 1
- 101000788129 Escherichia coli Uncharacterized protein in sul1 3'region Proteins 0.000 description 1
- 101000788370 Escherichia phage P2 Uncharacterized 12.9 kDa protein in GpA 3'region Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000787096 Geobacillus stearothermophilus Uncharacterized protein in gldA 3'region Proteins 0.000 description 1
- 101000976889 Haemophilus phage HP1 (strain HP1c1) Uncharacterized 19.2 kDa protein in cox-rep intergenic region Proteins 0.000 description 1
- 101710125507 Integrase/recombinase Proteins 0.000 description 1
- 101000827627 Klebsiella pneumoniae Putative low molecular weight protein-tyrosine-phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 101000977779 Lymantria dispar multicapsid nuclear polyhedrosis virus Uncharacterized 33.9 kDa protein in PE 3'region Proteins 0.000 description 1
- 101001130841 Middle East respiratory syndrome-related coronavirus (isolate United Kingdom/H123990006/2012) Non-structural protein ORF5 Proteins 0.000 description 1
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 description 1
- 101000827630 Narcissus mosaic virus Uncharacterized 10 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 1
- 241000702619 Porcine parvovirus Species 0.000 description 1
- 101710185720 Putative ethidium bromide resistance protein Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 101000974028 Rhizobium leguminosarum bv. viciae (strain 3841) Putative cystathionine beta-lyase Proteins 0.000 description 1
- 101000756519 Rhodobacter capsulatus (strain ATCC BAA-309 / NBRC 16581 / SB1003) Uncharacterized protein RCAP_rcc00048 Proteins 0.000 description 1
- 101000948219 Rhodococcus erythropolis Uncharacterized 11.5 kDa protein in thcD 3'region Proteins 0.000 description 1
- 101000936711 Streptococcus gordonii Accessory secretory protein Asp4 Proteins 0.000 description 1
- 101000929863 Streptomyces cinnamonensis Monensin polyketide synthase putative ketoacyl reductase Proteins 0.000 description 1
- 101000788468 Streptomyces coelicolor Uncharacterized protein in mprR 3'region Proteins 0.000 description 1
- 101000845085 Streptomyces violaceoruber Granaticin polyketide synthase putative ketoacyl reductase 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101000711771 Thiocystis violacea Uncharacterized 76.5 kDa protein in phbC 3'region Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 101000711318 Vibrio alginolyticus Uncharacterized 11.6 kDa protein in scrR 3'region Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000001132 alveolar macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 210000004081 cilia Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 210000005045 desmin Anatomy 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N hydrogen thiocyanate Natural products SC#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000002205 phenol-chloroform extraction Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000009979 protective mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000004994 reproductive system Anatomy 0.000 description 1
- 210000001533 respiratory mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 101150115143 shroom2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/107—Vibrio
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/23—Parvoviridae, e.g. feline panleukopenia virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/285—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Pasteurellaceae (F), e.g. Haemophilus influenza
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
- C12N2750/14322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
- C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18611—Respirovirus, e.g. Bovine, human parainfluenza 1,3
- C12N2760/18622—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18611—Respirovirus, e.g. Bovine, human parainfluenza 1,3
- C12N2760/18634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/10011—Arteriviridae
- C12N2770/10022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/24011—Flaviviridae
- C12N2770/24311—Pestivirus, e.g. bovine viral diarrhea virus
- C12N2770/24322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/24011—Flaviviridae
- C12N2770/24311—Pestivirus, e.g. bovine viral diarrhea virus
- C12N2770/24334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
- Y10S424/815—Viral vaccine for porcine species, e.g. swine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области вирусологии. Вакцина свиней включает плазмиду, включающую ген вируса PRRS. Ген PRRS выбран из группы генов Е, ORF3 и М. Вакцина вызывает иммунный ответ против вируса PRRS. Изобретение может быть использовано в свиноводстве. 9 з.п. ф-лы, 25 ил.
Description
Настоящее изобретение относится к формуле вакцины, позволяющей, в частности, проводить вакцинацию свиней против респираторных патологий и патологий репродукции. Оно также относится к соответствующей методике вакцинации.
В ходе последних десятилетий произошло фундаментальное изменение методов разведения свиней. Всеобщее распространение получило интенсивное разведение в закрытом пространстве и, как следствие, драматическое развитие респираторных патологий.
Симптомы респираторных патологий свиней обычно объединяют под комплексным названием респираторного заболевания свиней, из чего следует большое разнообразие патогенных агентов, включающих как вирусы, так и бактерии и микоплазмы. Главными агентами, вызывающими респираторные нарушения, являются Actinobacillus pleuropneumoniae, вирус бесплодия и респираторного синдрома (PRRS), также называемый вирусом таинственной болезни, вирус болезни Aujeszky (PRV) и вирус гриппа свиней.
Другие вирусы вызывают нарушения репродуктивной функции, проявляющиеся в виде выкидышей, мумификации зародышей и бесплодия. Основными из таких вирусов являются PRRS, парвовирус и вирус классической чумы свиней (HCV). ВО вторую очередь такие нарушения могут вызывать вирусы PRV, гриппа свиней и A.Pleuropneumoniae. Смертность возможна в случае A.Pleuropneumoniae, HCV и PRV.
Кроме этого, в респираторном комплексе свиней очень важное значение имеют взаимодействия между микроорганизмами. Действительно, большая часть патогенных бактерий составляют обычную микрофлору носоглоточных зон и миндалин молодого животного. Эти патогены выделяются свиноматкой и часто вдыхаются поросятами в первые часы жизни, когда колостральный иммунитет еще не эффективен. Организмы, живущие в верхних отделах дыхательных путей, могут распространяться в нижние отделы, если защитные механизмы дыхательной системы ослаблены воздействием предшествующего агента, такого как Actinobacillus pleuropneumoniae или вирусы. Инвазия в легкие может быть очень быстрой, в частности, если предшествующими патогенами являются такие, как Actinobacillus pleuropneumoniae, которые выделяют сильные цитотоксины, способные вызывать повреждение ресничек клеток дыхательного эпителия и альвеолярных макрофагов.
Важные вирусные инфекции, такие как грипп, респираторные коронавирусные инфекции и вирус Aujeszky, могут играть роль в патогенезе респираторного комплекса вместе с бактериями респираторного тропизма и микроплазмами.
Наконец, некоторые агенты влияют одновременно на дыхательную и на репродуктивную системы. Также могут произойти взаимодействия в плане патологии репродукции. Необходимо, следовательно, постараться наладить эффективные превентивные методы против главных патогенных агентов, вызывающих респираторные патологии репродукции свиней.
Сочетания, разработанные до настоящего времени, были получены на основе инактивированных вакцин или живых вакцин и, в некоторых случаях, смесей таких вакцин. При их применении встают проблемы совместимости валентностей и стабильности. Так, нужно обеспечить одновременно совместимость различных валентностей вакцины как в отношении различных используемых антигенов, так и в отношении самих составов, в частности, если используют вместе инактивированные вакцины и живые вакцины. Также возникает проблема хранения таких комбинированных вакцин и их безвредности, в частности, в присутствии добавок. Эти вакцины обычно довольно дороги. В заявках WO-A-9011092, WO-A-9319183, WO-A-9421997 и WO-A-9520660 описано использование недавно разработанной технологии полинуклеотидных вакцин. Известно, что в этих вакцинах используют плазмиду, обеспечивающую в клетках хозяина экспрессию встроенного антигена. Были предложены все пути введения (внутрибрюшинный, внутривенный, внутримышечный, чрескожный, внутрикожный, через слизистую и т.д.). Также могут быть использованы различные средства вакцинации, такие как ДНК, помещенная на поверхность частиц золота и распыляемая таким образом, что она проникает в кожу животного (Tang и др., Nature 356, 152-154, 1992), и жидкоструйные впрыскиватели, позволяющие осуществить трансфекцию одновременно в кожу, в мышцы, в жировые ткани и в ткани молочной железы (Furth и др., Analytical Biochemistry, 205, 365-368, 1992).
В полинуклеотидных вакцинах можно использовать как неодетые ДНК, так и ДНК, например, в составе липосом и катионных липидов. M-F Le Potier и др. (Second International Symposium on the Eradication of Aujeszky's Disease (pseudo rabies) Virus August 6th tu 8th 1995 Copenhagen, Denmark) и М.Monteil и др. (Научные дни Кафедры Патологии животных, INRA-ENV, Лионская Государственная Ветеренарная школа. 13-14 декабря 1994, Lyon, Франция) осуществили попытку вакцинации свиней против вируса болезни Aujeszky с помощью плазмиды, обеспечивающей экспрессию гена gD под контролем сильного промотора, позднего мажорного промотора аденовируса типа 2. Несмотря на хороший уровень антительного ответа, не было выявлено установление защиты. Однако, хорошие результаты в отношении защиты были зафиксированы после заражения свиней рекомбинантным аденовирусом, в который был встроен ген gD и тот же промотор, что доказывает, что наличие гликопротеина gD достаточно для установления защиты у свиней.
Практика прошлого не дала никаких результатов в отношении установления защиты у свиней методом полинуклеотидной вакцинации.
Задачей изобретения является разработка формулы поливалентной вакцины, позволяющей осуществить вакцинацию свиней против определенного числа патогенных агентов, вызывающих, в частности, респираторные патологии и/или патологии репродукции. Другой целью изобретения является разработка такой формулы вакцины, сочетающей различные валентности, при сохранении всех требуемых критериев совместимости и стабильности валентностей.
Другой целью изобретения является разработка такой формулы вакцины, позволяющей сочетать различные валентности в оном носителе. Другой целью изобретения является разработка такой формулы вакцины, которая была бы проста в применении и не являлась бы дорогостоящей.
Еще одной целью изобретения является разработка формулы вакцины и методики вакцинации свиней, которая позволяет добиться установления высокоэффективной долговременной защиты, в т.ч. поливалентной, при безвредности и отсутствии отходов. Таким образом, объектом изобретения является формула вакцины, в частности, против респираторных патологий и/или патологий репродукции свиней, включающая по меньшей мере три валентности полинуклеотидной вакцины, каждая из которых включает плазмиду, содержащую и (обеспечивающую его экспрессию in vivo в клетках хозяина) ген одной валентности патогена свиней, причем эти валентности выбирают из группы, представленной вирусом болезни Aujeszky (вирус PRV или псевдобешенства), вирусом гриппа свиней (SIV), вирусом таинственной болезни свиней (вирус PRRS), вирусом парвовироза (вирус PRV), вирусом классической чумы свиней (вирус HCV или Hog Cholera virus) и бактерией, вызывающей актинобакциллоз (A.pleuropneumoniae), а плазмиды содержат, для каждой валентности, один или несколько генов, выбранных из группы, представленной gB и gD для вируса болезни Aujeszky, НА, NP, N для вируса гриппа свиней, ORFS (Е), ORF3, ORF 6 (М) для вируса PRRS, VP2 для вируса парвовироза, E1, E2 для вируса классической чумы свиней и apxI, apxII и apxIII для A.pleuropneumoniae.
Под валентностью в рамках настоящего изобретения понимают по меньшей мере один антиген, обеспечивающий защиту против вируса рассматриваемого патогена, причем валентность может содержать в качестве подвалентности один или несколько измененных природных генов одного или нескольких штаммов рассматриваемого патогена. Под геном патогенного агента понимают не только полный ген, но и различные нуклеотидные последовательности, включая фрагменты, сохраняющие способность индуцировать защитный ответ.
В понятие гена входят нуклеотидные последовательности, эквивалентные в точности описанным в примерах, т.е. различные, но не кодирующие один и тот же протеин последовательности. В него также входят нуклеотидные последовательности других штаммов рассматриваемого патогена, обеспечивающие перекрестную защиту или специфическую защиту от штамма или группы штаммов. В него также входят нуклеотидные последовательности, которые были изменены для облегчения экспрессии in vivo в организме животного хозяина, но кодирующие тот же протеин.
Предпочтительно, формула вакцины по изобретению включает валентности Aujeszky и гриппа свиней, к которым могут быть добавлены другие валентности, выбранные, предпочтительно, из валентностей PRRS и A.pleuropneumoniae (актинобациллоз). Можно добавить другие валентности, выбранные из валентностей парвовироза и классической чумы свиней.
Возможны, разумеется, все комбинации валентностей. Однако, в рамках изобретения, предпочтение отдают валентностям Aujeszky и гриппа свиней, во вторую очередь PRRS и A.Pleuropheumoniae. Для вакцинации, направленной более конкретно против респираторных патологий у свиней, предпочтение при выборе валентностей отдают Aujeszky, гриппу свиней, PRRS и актинобациллозу.
Для вакцинации, направленной конкретно против патологий репродукции, валентности выбирают, предпочтительно, из PRRS, парвовироза, классической чумы свиней и Aujeszky. В отношении валентности Aujeszky можно использовать один из генов gB и gD. Предпочтительно, используют оба гена, которые, в этом случае, встраивают в разные плазмиды или в одну плазмиду.
В отношении валентности гриппа свиней используют, предпочтительно, гены НА и NP. Можно использовать один из этих двух генов или оба гена одновременно, встроенными в разные плазмиды или в одну плазмиду. Предпочтительно, в одной вакцине сочетают последовательности НА более одного штамма вируса гриппа, в частности штаммов, встречающихся в данной местности. В отличие от этого, NP обеспечивает перекрестную защиту и, следовательно, можно ограничиться использованием последовательности одного единственного штамма вируса.
В отношении валентности PRRS используют, предпочтительно, гены Е и ORF3 или также М. Можно использовать эти гены отдельно или в комбинации; в случае комбинации, гены можно встраивать в отдельные плазмиды или в плазмиды, комбинирующие две или три из этих генов. Выгодно использовать в одной вакцине гены, происходящие от по меньшей мере двух штаммов, в частности, от одного европейского штамма и от одного американского штамма.
В отношении валентности классической чумы свиней можно использовать один из генов Е1 и Е2 или гены Е1 и Е2 вместе. В двух разных плазмидах или, возможно, в одной плазмиде. В отношении валентности актинобациллоза можно использовать один из трех вышеназванных генов или комбинацию 2 или 3 из этих генов, в разных плазмидах или в составе смешанных плазмид, чтобы обеспечить защиту против различных серотипов A.Pleuropheumoniae. В антигенах арх I, II и III можно изменить кодирующие последовательности, чтобы получить нетоксичные антигены, в частности, как указано в примерах.
Объем дозы формулы вакцины по изобретению может составлять, в целом, от 0,1 до 10 мл, и в частности, от 1 до 5 мл для вакцинации при внутримышечном введении.
Доза составляет от 10 нг до 1 мг, предпочтительно, от 100 нг до 500 мкг, еще лучше - от 1 мкг до 250 мкг на каждый тип плазмиды.
Используют, предпочтительно, неодетые плазмиды, просто помещенные в вакцинирующий носитель, которым обычно является физиологический раствор (0,9% NaCl), ультрачистая вода, буфер ТЕ и т.п. Можно использовать, разумеется, любые формы полинуклеотидных вакцин, описанные в практике прошлого.
Каждая плазмида содержит промотор, способный обеспечить экспрессию зависящего от него гена в клетках хозяина. Таким промотором является сильный эукариотический промотор, и в частности ранний промотор цитомегаловируса CMV-IE, происходящий от человека или мыши, или, возможно, от другого животного, такого как крыса, свинья, морская свинка.
В общем, промотор может быть как вирусного, так и клеточного происхождения. В качестве вирусного промотора можно назвать ранний или поздний промотор вируса SV 40 или промотор LTR вируса Саркомы Руса. Это может быть также промотор вируса, от которого происходит ген, например собственный промотор гена.
В качестве клеточного промотора можно назвать промотор гена цитоскелета, например промотор десмина (Bolmont и др. Journal of Submicroscopic Cytology and Patholigy, 1990, 22, 117-122; и ZHENLIN и др., GENE, 1989, 78, 243-254) или промотор актина. Если одна плазмида содержит несколько генов, они могут находиться в одной единице транскрипции или в двух разных единицах. Комбинация различных валентностей вакцины по изобретению может быть получена, предпочтительно, смешиванием полинуклеотидных плазмид, обеспечивающих экспрессию одного или нескольких антигенов каждой валентности, но можно также осуществить экспрессию антигенов нескольких валентностей с помощью одной плазмиды.
Еще одним объектом изобретения являются формулы одновалентной вакцины, включающие одну или несколько плазмид, кодирующих один или несколько генов одного из вирусов, выбранных из группы, представленной PRV, PRRS, PPV, HCV и A.Pleuropneumoniae, причем гены такие, как описано выше. За исключением из одновалентного характера, эти формулы могут обладать вышеперечисленными характеристиками в том, что касается выбора генов, их комбинаций, композиций плазмид, объемов доз, доз и т.д. Формулы одновалентной вакцины могут быть использованы (i) для получения формулы поливалентной вакцины как она описана выше, (ii) в индивидуальном порядке, против конкретной патологии, (iii) в сочетании с вакциной другого типа (цельной живой или инактивированной, рекомбинантной, субъединичной), против другой патологии или (iv) в качестве вторичной вакцины после вакцины, описанной ниже. Действительно, еще одним объектом настоящего изобретения является использование одной или нескольких плазмид по изобретению для получения вакцины, предназначенной для вакцинации свиней, первичновакцинированных с помощью первой, обычной, вакцины из числа тех, которые использовались в практике прошлого, а именно, выбранной из группы, представленной цельной живой вакциной, цельной инактивированной вакциной, субъединичной вакциной, рекомбинантной вакциной, причем эта первая вакцина (одновалентная или поливалентная) несет (т.е. содержит или обеспечивает его экспрессию) один или несколько антигенов, кодируемых одной или несколькими используемыми плазмидами, или антигенов, обеспечивающих перекрестную защиту. Заслуживает внимания тот факт, что полинуклеотидная вакцина оказывает сильное действие в качестве вторичной вакцины, проявляющееся в усилении иммунного ответа и в установлении долговременного иммунитета.
В целом, вакцины для первичной вакцинации могут быть выбраны из числа вакцин, предлагаемых для продажи различными производителями ветеринарных вакцин. Еще одним объектом изобретения является набор для вакцинации, в который входят вакцина для первичной вакцинации, как она описана выше, и формула вакцины по изобретению для использования в качестве вторичной вакцины. Изобретение также относится к формуле вакцины по изобретению с приложенной к ней инструкцией, в которой указано использование этой формулы для вторичной вакцинации, после первичной вакцинации как она описана выше.
Также объектом настоящего изобретения является методика вакцинации свиней против респираторных патологий и/или репродукции свиней, включающая введение эффективной дозы формулы вакцины, как она описана выше. Эта методика вакцинации включает введение одной или нескольких доз формулы вакцины, причем эти дозы могут быть введены последовательно через короткие промежутки времени и/или последовательно через длительные промежутки времени.
Формулы вакцины по изобретению могут быть введены, в рамках данной методики вакцинации, различными путями введения, предложенными в практике прошлого для полинуклеотидной вакцинации, и с помощью любой известной техники введения. В частности, можно использовать вакцинацию внутрикожным путем с помощью жидкоструйного, предпочтительно, многоструйного впрыскивателя, и в частности, впрыскивателя с впрыскивающей насадкой, имеющей несколько отверстий, в частности, от 5 до 6 отверстий, как в аппарате Pigjet, выпускаемом компанией Endoscoptic, Laons, Франция. Объем дозы при использовании такого аппарата составляет, предпочтительно, от 0,1 до 0,9 мл, в частности, от 0,2 до 0,6 мл, лучше, от 0,4 до 0,5 мл, причем данный объем может быть введен за один или несколько раз, предпочтительно, за два раза.
Наконец, объектом изобретения является методика вакцинации, заключающаяся в том, что проводят первичную вакцинацию, как она описана выше и вторичную вакцинацию формулой вакцины по изобретению. Согласно предпочтительной форме осуществления способа по изобретению, сначала животному вводят эффективную дозу вакцины классического типа, в частности, инактивированную, живую, ослабленную или рекомбинантную, или субъединичной вакцины таким образом, чтобы обеспечить первичную вакцинацию, и, через, предпочтительно, 2-6 недель, вводят поливалентную или одновалентную вакцину по изобретению.
Изобретение также относится к методике получения формул вакцины, а именно к получению валентностей и их смесей, как следует из данного описания.
Далее следует более детальное описание изобретения с помощью способов осуществления изобретения с опорой на рисунки приложения.
Список фигур | |
Фигура №1: | Плазмида pVR1012 |
Фигура №2а-2в: | Последовательность гена PRV gB (штамм NIA3) |
Фигура №3: | Конструкция плазмиды рАВ090 |
Фигура №4а-4в: | Последовательность гена PRV gD (штамм NIA3) |
Фигура №5: | Конструкция плазмиды рРВ098 |
Фигура №6а-6в: | Последовательность гена Грипп свиней НА (штамм HI N1) |
Фигура №7: | Конструкция плазмиды рРВ143 |
Фигура №8а-8в: | Последовательность гена Грипп свиней NP (штамм HI N1) |
Фигура №9: | Конструкция плазмиды рРВ142 |
Фигура №10а-10в: | Последовательность гена Грипп свиней НА (штамм Н3 N2) |
Фигура №11: | Конструкция плазмиды рРВ144 |
Фигура №12а-12в: | Последовательность гена Грипп свиней NP (штамм H3 N2) |
Фигура №13: | Конструкция плазмиды рРВ132 |
Фигура №14: | Плазмида рАВ025 |
Фигура №15: | Плазмида рАВ001 |
Фигура №16: | Плазмида рАВ091 |
Фигура №17: | Плазмида рАВ092 |
Фигура №18: | Плазмида рАВ004 |
Фигура №19: | Плазмида рАВ069 |
Фигура №20: | Плазмида рАВ061 |
Фигура №21: | Плазмида рРВ162 |
Фигура №22: | Плазмида рРВ163 |
Фигура №23: | Плазмида рРВ174 |
Фигура №24: | Плазмида рРВ189 |
Фигура №25: | Плазмида рРВ190 |
Список последовательностей SEQ ID № | |
SEQ ID №1: | Последовательность гена PRV gB (штамм NIA3) |
SEQ ID №2: | Олигонуклеотид АВ166 |
SEQ ID №3: | Олигонуклеотид АВ167 |
SEQ ID №4: | Олигонуклеотид АВ168 |
SEQ ID №5: | Олигонуклеотид АВ169 |
SEQ ID №6: | Последовательность гена PRV gD (штамм NIA3) |
SEQ ID №7: | Олигонуклеотид РВ101 |
SEQ ID №8: | Олигонуклеотид РВ102 |
SEQ ID №9: | Олигонуклеотид РВ107 |
SEQ ID №10: | Олигонуклеотид РВ108 |
SEQ ID №11: | Последовательность гена Грипп свиней НА (штамм H1N1) |
SEQ ID №12: | Олигонуклеотид РВ097 |
SEQ ID №13: | Олигонуклеотид РВ098 |
SEQ ID №14: | Последовательность гена Грипп свиней NP (штамм H1N1) |
SEQ ID №15: | Олигонуклеотид РВ095 |
SEQ ID №16: | Олигонуклеотид РВ096 |
SEQ ID №17: | Последовательность гена Грипп свиней НА (штамм H3N2) |
SEQ ID №18: | Последовательность гена Грипп свиней NP (штамм H3N2) |
SEQ ID №19: | Олигонуклеотид АВ055 |
SEQ ID №20: | Олигонуклеотид АВ056 |
SEQ ID №21: | Олигонуклеотид АВ001 |
SEQ ID №22: | Олигонуклеотид АВ002 |
SEQ ID №23: | Олигонуклеотид АВ170 |
SEQ ID №24: | Олигонуклеотид АВ171 |
SEQ ID №25: | Олигонуклеотид АВ172 |
SEQ ID №26: | Олигонуклеотид АВ173 |
SEQ ID №27: | Олигонуклеотид АВ007 |
SEQ ID №28: | Олигонуклеотид АВ010 |
SEQ ID №29: | Олигонуклеотид АВ126 |
SEQ ID №30: | Олигонуклеотид АВ127 |
SEQ ID №31: | Олигонуклеотид АВ118 |
SEQ ID №32: | Олигонуклеотид АВ119 |
SEQ ID №33: | Олигонуклеотид РВ174 |
SEQ ID №34: | Олигонуклеотид РВ189 |
SEQ ID №35: | Олигонуклеотид РВ190 |
SEQ ID №36: | Олигонуклеотид РВ175 |
SEQ ID №37: | Олигонуклеотид РB176 |
SEQ ID №38: | Олигонуклеотид РВ191 |
SEQ ID №39: | Олигонуклеотид РВ192 |
SEQ ID №40: | Олигонуклеотид РВ177 |
SEQ ID №41: | Олигонуклеотид РВ278 |
SEQ ID №42: | Олигонуклеотид РВ279 |
SEQ ID №43: | Олигонуклеотид РВ280 |
SEQ ID №44: | Олигонуклеотид РВ307 |
SEQ ID №45: | Олигонуклеотид РВ303 |
SEQ ID №46: | Олигонуклеотид РВ306 |
SEQ ID №47: | Олигонуклеотид РВ304 |
SEQ ID №48: | Олигонуклеотид РВ305 |
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Культура вирусов
Вирусы культивируют на соответствующей системе клеток до проявления цитопатического эффекта. Системы клеток, используемые для каждого вируса, хорошо известны специалистам. Коротко говоря, клетки, чувствительные к используемому вирусу, культивируемые в минимальной необходимой среде Игла (среда «MEM») или в другой подходящей среде, заражают исследуемым вирусным штаммом, используя множественность заражения 1. Инфицированные клетки инкубируют при 37°С в течение времени, необходимого для проявления полного цитопатического эффекта (в среднем 36 часов).
Пример 2: Культура бактерий и экстракция бактериальной ДНК
Штаммы Actinobacillus pleuropneumoniae культивируют как описано A.Rycroft и др. (J. Gen. Microbiol. 1991, 137, 561-568). ДНК с большой молекулярной массой (хромосомная ДНК) была получена по стандартным технологиям, описанным J.Sambrook и др. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2 издание. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor New York. 1989).
Пример 3: Экстракция геномных вирусных ДНК
После культивирования собирают разрушенные клетки и их плавающие на поверхности обломки, вирусную суспензию центрифугируют при 1000 g и +4°С в течение 10 минут, чтобы удалить обломки клеток. Вирусные частицы осаждают ультрацентрифугированием при 400000 g и +4°С в течение 1 часа. Осадок собирают в минимальном объеме буфера (Tris 10 мМ, EDTA 1 мМ; рН 8,0). Эту концентрированную вирусную суспензию обрабатывают протеиназой К (100 мкг/мл конечн.) в присутствии натрийдодецилсульфата (SDS) (0,5% конечн.) в течение 2 часов при 37°С. Затем вирусную ДНК экстрагируют смесью фенол/хлороформ, потом преципитируют 2 объемами абсолютного этанола. По прошествии ночи при -20°С, ДНК центрифугируют при 10000 g и +4°С в течение 15 минут. Осажденную ДНК высушивают, затем собирают в минимальном объеме стерильной ультрачистой воды. После этого она может быть расщеплена рестрикционными ферментами.
Пример 4: Изолирование геномных вирусных РНК
РНК-содержащие вирусы очищали по хорошо известным специалистам технологиям. Затем изолировали РНК генома каждого вируса, используя технику экстракции «тиоционат гуанидия/фенолхлороформ», описанную P.Chomczynski и N.Sacchi (Anal. Biochem. 1987, 162, 156-159).
Пример 5: Технологии молекулярной биологии
Все плазмидные конструкции были получены с использованием стандартных технологий молекулярной биологии, описанных J. Sambrook и др. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2 издание. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor New York. 1989). Все рестрикционные фрагменты, используемые в настоящем изобретении, изолировали, используя набор Geneclean (BIO 101 Inc. La Jolla, CA).
Пример 6: Технология RT-PCR
Специфические олигонуклеотиды (содержащие на своих 5' концах сайты рестрикции для облегчения клонирования расширенных фрагментов) были синтезированы таким образом, что они полностью охватывают кодирующие участки генов, которые должны быть расширены (см. специфические примеры). Реакцию обратной транскрипции (RT) и расширение в цепи полимеразой (PCR) проводили по стандартным технологиям (J. Sambrook (Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2 издание. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor New York. 1989)). Каждую реакцию RT-PCR проводили с парой специфических амплимеров, используя в качестве матрицы экстрагированную геномную вирусную РНК. Расширенную комплементарную ДНК экстрагировали смесью фенол/хлороформ/изоамиловый спирт (25:24:1) перед расщеплением рестрикционными ферментами.
Пример 7: Плазмида pVR1012
Плазмида pVR1012 (Фигура №1) была получена при Vical Inc. San Diedo, CA, USA. Ее конструкция была описана в J.Hartikka и др. (Human Gene Therapy. 1996, 7, 1205-1217).
Пример 8: Конструирование плазмиды рАВ090 (ген PRV gB)
Плазмиду pPR 2.15 (M.Riviere и др. J. Virol. 1992. 66. 3424-3434) расщепили с помощью ApaI и NaeI, чтобы высвободить фрагмент ApaI-NaeI (2665 pb) (фрагмент А), содержащий ген, кодирующий гликопротеин gB вируса болезни Aujeszky (Штамм NIA3) (Фигура №2 и SEQ ID №1).
Гибридизацией следующих 2 олигонуклеотидов:
АВ166 (33 mer) (SEQ ID №2)
5'GATGCCCGCTGGTGGCGGTCTTTGGCGCGGGCC 3'
AB167 (33 mer) (SEQ ID №3)
5'ACGTCTACGGGCGACCACCGCCAGAAACCGCGC 3'
фрагмент (33 pb), содержащий последовательность гена gD, от инициального кодона ATG до сайта ApaI, был преобразован с образованием сайта PstI на 5' (фрагмент В).
Гибридизацией следующих 2 олигонуклеотидов:
АВ168 (45 mer) (SEQ ID №4)
5'GGCACTACCAGCGCCTCGAGAGCGAGGACCCCGACGCCCTGTAGG 3'
AB169 (49 mer) (SEQ ID №5)
5 'GATCCCTACAGGGCGTCGGGGTCCTCGCTCTCGAGGCGCTGGTAGTGCC 3'
фрагмент (45 pb), содержащий последовательность гена gD, от сайта Nael до стопирующего кодона TAG был преобразован с образованием сайта BamH1 на 3' (фрагмент С). Фрагменты А, В и С вместе сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и BamHI, и получили плазмиду рАВ090 (7603 pb) (Фигура №3).
Пример 9: Конструирование плазмиды рРВ098 (ген PRV gD)
Плазмиду pPR29 (M.Riviere и др. J. Virol. 1992, 66, 3424-3434) расщепили с помощью SalI и BgIII, чтобы высвободить фрагмент SalI-BgIII (711 pb) (фрагмент А), содержащий 3'-конец гена, кодирующего гликопротеин gD вируса болезни Aujeszky (Штамм NIA3) (Фигура №4 и SEQ ID №6).
Плазмиду pPR29 расщепили с помощью Есо47III и SalI, чтобы высвободить фрагмент Eco47III-SalI (498 pb), содержащий 5'-конец гена, кодирующего гликопротеин gD вируса болезни Aujeszky (Штамм NIA3) (фрагмент В).
Гибридизацией следующих 2 олигонуклеотидов:
РВ101 (15 mer) (SEQ ID №7)
5'GATGCTGCTCGCAGC 3'
PB102 (19 mer) (SEQ ID №8)
5'GCTGCGAGCAGCATCTGCA 3'
фрагмент (55 pb), содержащий последовательность 5' гена gD, от инициального кодона ATG до сайта Eco47III, был преобразован с образованием сайта PstI на 5' (фрагмент С). После очистки фрагменты А, В и С вместе были сшиты с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и Bg1II, и получили плазмиду рРВ098 (6076 pb) (Фигура №5).
Пример 10: Конструирование плазмиды рРВ143 (ген Гриппа свиней НА штамм H1N1)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса гриппа свиней (штамм SIV HINI «SW»), полученной по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
РВ107 (32 mer) (SEQ ID №9)
5'GTTCTGCAGCACCCGGGAGCAAAAGCAGGGGA 3'
PB108 (33 mer) (SEQ ID №10)
5'ATTGCGGCCGCTAGTAGAAACAAGGGTGTTTTT 3'
чтобы точно изолировать ген, кодирующий протеин НА вируса SIV HINI (фигура №6 и SEQ ID №11), в форме фрагмента PCR (1803 pb). После очистки этот фрагмент сшили с вектором PCRII-прямой (Инвитроген №К2000-01), чтобы получить вектор рРВ137 (5755 pb); Вектор рРВ137 расщепили с помощью EcoRV и NotI, чтобы высвободить фрагмент EcoRV-NotI (1820 pb), содержащий ген НА. Затем этот фрагмент сшили с вектором PVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью EcoRV и NotI, и получили плазмиду рРВ143 (6726 pb) (фигура №7).
Пример 11: Конструирование плазмиды рРВ142 (ген Гриппа свиней NP штамм H1N1)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса гриппа свиней (штамм SIV HINI «SW»), полученный по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
РВ097 (36 mer) (SEQ ID №12)
5'CCGGTCGACCGGGATAATCACTCACTGAGTGACATC 3'
PB098 (33 mer) (SEQ ID №13)
5'TTGCGGCCGCTGTAGAAACAAGGGTATTTTTCT 3'
чтобы точно изолировать ген, кодирующий протеин NP SIV HINI (фигура №8 SEQ ID №14), в форме фрагмента SalI-NotI. После очистки продукт RT-PCR (1566 pb) сшили с вектором PCRII-прямой (Инвитроген №К2000-01), чтобы получить вектор рРВ127 (5519 pb). Вектор рРВ127 расщепили с помощью SalI и NotI, чтобы высвободить фрагмент SalI-NotI (1560 pb), содержащий ген NP.
Затем этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью Satl и NotI, и получили плазмиду рРВ142 (6451 pb) (фигура №9).
Пример 12: Конструирование плазмиды рРВ144 (ген гриппа свиней НА штамм H3N2)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса гриппа свиней (штамм SIV H3N2 Cotes du Nord 1987), полученной по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
РВ095 (31 mer) (SEQ ID №15)
5'GTTCTGCAGGCAGGGGATAATTCTATCAACC 3'
PB096 (36 mer) (SEQ ID №16)
5'TTGCGGCCGCAAGGGTGTTTTTAATTACTAATATAC 3'
чтобы точно изолировать ген, кодирующий протеин НА вируса SIV H3N2 (Фигура №10 и SEQ ID №17), в форме фрагмента PstI-NotI. После очистки продукт RT-PCR(1765 pb) сшили с вектором PCRII-прямой (Инвитроген №К2000-01), чтобы получить вектор рРВ120 (5716 pb).
Вектор рРВ120 расщепили с помощью NotI, чтобы высвободить фрагмент NotI-NotT (1797 pb), содержащий ген НА. Затем этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью NotI, и получили плазмиду рРВ144 (6712pb), содержащую ген НА H3N2 в нормальной ориентации по сравнению с промотором (фиг. №11).
Пример 13: Конструирование плазмиды рРВ132 (ген гриппа свиней NP штамм H3N2)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса гриппа свиней (штамм SIV H3N2 Cotes du Nord 1987), полученной по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
РВ097 (36 mer) (SEQ ID №12)
5'CCGGTCGACCGGGATAATCACTCACTGAGTGACATC 3'
PB098 (33 mer) (SEQ ID №13)
5'TTGCGGCCGCTGTAGAAACAAGGGTATTTTTCT 3'
чтобы точно изолировать ген, кодирующий протеин NP вируса SIV H3N2 (Фигура №12 и SEQ ID №18), в форме фрагмента SalI-NotI. После очистки продукт RT-PCR (1564 pb) сшили с вектором PCRII-прямой (Инвитроген №К2000-01), чтобы получить вектор рРВ123 (5485 pb). Вектор рРВ123 расщепили с помощью SalI и NotI, чтобы высвободить фрагмент SalI и NotI (1558 pb), содержащий ген NP. Затем этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и NotI, и получили плазмиду рРВ132 (6449 pb) (фигура №13).
Пример 14: Конструирование плазмиды рАВ025 (ген PRRSV ORF5)штамм Lelystad
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса PRRSV (штамм Lelystad) (J.Meulenberg и др. Virology. 1993, 19, 62-72), полученной по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
AB055 (34 mer) (SEQ ID №19)
5'ACGCGTCGACAATATGAGATGTTCTCACAAATTG 3'
AB056 (33 mer) (SEQ ID №20)
5'CGCGGATCCCGTCTAGGCCTCCCATTGCTCAGC 3'
чтобы точно изолировать ген «ORF5», кодирующий гликопротеин оболочки Е (gp25) вируса PRRS штамма Lelystad. После очистки продукт RT-PCR (630 pb) расщепили с помощью SalI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент SalI-BamHI (617 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и BamHI, и получили плазмиду рАВ025 (5486 pb) (фигура №14).
Пример 15: Конструирование плазмиды pAB001 PRRSV ORF5 штамм USA
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса PRRSV (Штамм ATCC-VR2332) (M.Murtaugh и др. Arch. Virol. 1995, 140, 1451-1460), полученной по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
АВ001 (30 mer) (SEQ ID №21)
5'AACTGCAGATGTTGGAGAAATGCTTGACCG 3'
AB002 (30 mer) (SEQ ID №22)
5'CGGGATCCCTAAGGACGACCCCATTGTTCC 3'
чтобы точно изолировать ген, кодирующий оболочечный гликопротеин Е (gp25) вируса PRRS штамма ATCC-VR2332. После очистки продукт RT-PCR (620 pb) расщепили с помощью PstI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент PstI-BamHI (606 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и BamHI, и получили плазмиду рАВ001 (5463 pb) (фигура №15).
Пример 16: Конструирование плазмиды рАВ091 (ген PRRSV ORF3 штамм Lelystad)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса PRRSV (Штамм Lelystad) (J.Meulenberg и др. Virology, 1993, 19, 62-72), полученной по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
АВ170 (32 mer) (SEQ ID №23)
5'AAACTGCAGCAATGGCTCATCAGTGTGCACGC 3'
AB171 (30 mer) (SEQ ID №24)
5'CGCGGATCCTTATCGTGATGTACTGGGGAG 3'
чтобы точно изолировать ген «ORF3», кодирующий оболочечный гликопротеин (gp45) вируса PRRS штамма Lelystad. После очистки продукт RT-PCR (818 pb) расщепили с помощью PstI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент PstI-BamHI (802 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и BamHI, и получили плазмиду рАВ091 (5660 pb) (фигура №16).
Пример 17: Конструирование плазмиды рАВ092 (ген PPRSV ORF3 штамм USA)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCP с РНК генома вируса PRRSV (Штамм ATCC-VR2332) (M.Murtaugh и др. Arch. Virol. 1995, 140, 1451-1460), полученной по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
АВ172 (32 mer) (SEQ ID №25)
5'AAACTGCAGCAATGGTTAATAGCTGTACATTC 3'
AB173 (32 mer) (SEQ ID №26)
5'CGCGGATCCCTATCGCCGTACGGCACTGAGGG 3'
чтобы точно изолировать ген ORF3, кодирующий оболочечный гликопротеин (gp45) вируса PRRS штамма ATCC-VR2332. После очистки продукт RT-PCR (785 pb) расщепили с помошью PstI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент PstI-BamHI (769 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и BamHI, и получили плазмиду рАВ092 (5627 pb) (фигура №17).
Пример 18: Конструирование плазмиды рАВ004 (ген Парвовируса свиней VP2)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома парвовируса свиней (Штамм NADL2) (J.Vasudevacharya и др. Virology. 1995, 178, 611-616), полученной по технологии, описанной в примере 4, и ее следующими олигонуклеотидами:
АВ007 (33 mer) (SEQ ID №27)
5'AAAACTGCAGAATGAGTGAAAATGTGGAACAAC 3'
АВО10 (33 mer) (SEQ ID №28)
5'CGCGGATCCCTAGTATAATTTTCTTGGTATAAG 3'
чтобы расширить фрагмент (1757 pb), содержащий ген, кодирующий протеин VP2 парвовируса свиней. После очистки продукт RT-PCR расщепили с помощью PstI и Bam HI, чтобы изолировать фрагмент PstI-BamHI (1740 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVP 1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и BamHI, и получили плазмиду рА3004 (6601 pb) (фигура №18).
Пример 19: Конструирование плазмиды рАВ069 (ген Чумы свиней HCVE1)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса чумы свиней (Hog Cholera Virus) (HCV) (Штамм Alfort) (G.Meyers и др. Virology. 1989, 171, 18-27), полученной по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
АВ126 (36 mer) (SEQ ID №29)
5'ACGCGTCGACATGAAACTAGAAAAAGCCCTGTTGGC 3'
AB127 (34 mer) (SEQ ID №30)
5'CGCGGATCCTCATAGCCGCCCTTGTGCCCCGGTC 3'
чтобы изолировать последовательность, кодирующую протеин Е1 вируса HCV, в форме фрагмента RT-PCR (1364 pb). После очистки этот фрагмент расщепили с помощью BamHI и SalI, чтобы получить фрагмент SalI-BamHI (1349 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно с помощью BamHI и SalI, и получили плазмиду рАВ069 (6218 pb) (фигура №19).
Пример 20: Конструирование плазмиды рАВ061 (ген Чумы свиней HCV E2)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса чумы свиней (Hog Cholera Virus) (HCV) (Штамм Alfort) (G.Meyers и др. Virology. 1989, 171, 18-27), полученной по технологии, описанной в примере 4, и со следующими олигонуклеотидами:
АВ118 (36 mer) (SEQ ID №31)
5'ACGCGTCGACATGTCAACTACTGCGTTTCTCATTTG 3'
АВ119 (33 mer) (SEQ ID №32)
5'CGCGGATCCTCACTGTAGACCAGCAGCGAGCTG 3'
чтобы изолировать последовательность, кодирующую протеин Е2 вируса HCV, в форме фрагмента RT-PCR (1246 pb). После очистки этот фрагмент расщепили с помощью BamHI и SalI, чтобы получить фрагмент SalI-BamHI (1232 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью BamHI и SalI, и получили плазмиду рАВ061 (6101 pb) (фигура №20).
Пример 21: Конструирование плазмиды рРВ162 (ген Actinobacillus pleuropneumoniae apxI делецированный)
Ген apxl (Actinobacillus pleuropneumoniae) был клонирован таким образом, чтобы имела место делеция участка аминокислот с большим содержанием глицина (участвующего в фиксации иона кальция), находящегося между аминокислотами 719 и 846.
Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae (Серотип 1) (J.Frey и др. Infect. Immun. 1991, 59, 3026-3032), полученной по технологии, описанной в примерах 2 и 3, и со следующими олигонуклеотидами:
РВ174 (32 mer) (SEQ ID №33)
5'TTGTCGACGTAAATAGCTAAGGAGACAACATG 3'
PB189 (29 mer) (SEQ ID №34)
5'TTGAATTCTTCTTCAACAGAATGTAATTC 3'
чтобы расширить часть 5' гена apxI, кодирующего протеин гемолизин I (Actinobacillus pleuropneumoniae), в форме фрагмента SalI-EcoRI. После очистки продукт PCR (2193 pb) расщепили с помощью SalI и EcoRI, чтобы изолировать фрагмент SalI-EcoRI (2183 pb) (фрагмент А). Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae (Серотип 1) (J.Frey и др. Infect Immun. 1991, 59, 3026-3032) и со следующими олигонуклеотидами:
РВ190 (31 mer) (SEQ ID №35)
5'TTGAATTCTATCGCTACAGTAAGGAGTACGG 3'
PB175 (31 mer) (SEQ ID №36)
5'TTGGATCCGCTATTTATCATCTAAAAATAAC 3'
чтобы расширить часть 3' гена apxI, кодирующего протеин гемолизин I (Actinobacillus pleuropneumoniae), в форме фрагмента EcoRI-BamHI. После очистки продукт PCR (576 pb) расщепили с помощью EcoRI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент EcoRI-BamHI (566 pb) (фрагмент В). Фрагменты А и В сшили вместе с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и BamHI, и получили плазмиду рРВ162 (7619 pb) (Фигура №21).
Пример 22: Конструирование плазмиды рРВ163 (ген Actinobacillus pleuropneumoniae apxII делецированный)
Ген apxII (Actinobacillus pleuropneumoniae) был клонирован таким образом, чтобы имела место делеция участка аминокислот с большим содержанием глицина (участвующего в фиксации иона кальция), находящегося между аминокислотами 716 и 813.
Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae (Серотип 9) (М.Smits и др., Infection and Immunity. 1991, 59, 4497-4504), полученной по технологии, описанной в примерах 2 и 3, и со следующими олигонуклеотидами:
РВ176 (31 mer) (SEQ ID №37)
5'TTGTCGACGATCAATTATATAAAGGAGACTC 3'
РВ191 (30 mer) (SEQ ID №38)
5'TTGAATTCCTCTTCAACTGATTTGAGTGAG 3'
чтобы расширить часть 5' гена apxII, кодирующего протеин гемолизин II (Actinobacillus pleuropneumoniae), в форме фрагмента SalI-EcoRI. После очистки продукт PCR (2190 pb) расщепили с помощью SalI и EcoRI, чтобы изолировать фрагмент SalI-EcoRI (2180 pb) (фрагмент А).
Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae (Серотип 9) (М.Smits и др., Infection and Immunity. 1991, 59, 4497-4504) и со следующими олигонуклеотидами:
РВ192 (29 mer) (SEQ ID №39)
5'TTGAATTCGTAAATCTTAAAGACCTCACC 3'
PB177 (30 mer) (SEQ ID №40)
5'TTGGATCCACCATAGGATTGCTATGATTTG 3'
чтобы расширить часть 3' гена apxII, кодирующего протеин гемолизин II (Actinobacillus pleuropneumoniae) в форме фрагмента EcoRI-BamHI. После очистки продукт PCR (473 pb) расщепили с помощью EcoRI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент EcoRI-BamHI (463 pb) (фрагмент В). Фрагменты А и В сшили вместе с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и BamHI, и получили плазмиду рРВ163 (7513 pb) (Фигура №22).
Пример 23: Конструирование плазмид рРВ174', рРВ189 и рРВ190 (ген Actinobacillus pleuropneumoniae apxIII делецированный). Первый пример делеции в ApxIII (плазмида рРВ174'):
Ген apxIII (Actinobacillus pleuropneumoniae) был клонирован таким образом, чтобы имела место делеция участка аминокислот с большим содержанием глицина (участвующего в фиксации иона кальция), находящегося между аминокислотами 733 и 860.
Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae (Серотип 8) (М.Smits 1992. № доступа последовательности в Genbank=X68815), полученной по технологии, описанной в примерах 2 и 3, и со следующими олигонуклеотидами:
РВ278 (30 mer) (SEQ ID №41)
5'TTTGTCGACATGAGTACTTGGTCAAGCATG 3'
PB279 (29 mer) (SEQ ID №42)
5'TTTATCGATTCTTCTACTGAATGTAATTC 3'
чтобы расширить часть 5' гена apxIII, кодирующего протеин геолизин III (Actinobacillus pleuropneumoniae) в форме фрагмента SaII-ClaI. После очистки, продукт PCR (2216 pb) расщепили с помощью SalI и ClaI, чтобы изолировать фрагмент SalI-ClaI (2205 pb) (фрагмент А). Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae (Серотип 8) (М.Smits 1992. № доступа последовательности в Genbank=X68815), и с следующими олигонуклеотидами:
РВ280 (33 mer) (SEQ ID №43)
5'TTTATCGATTTATGTTTATCGTTCCACTTCAGG 3'
PB307 (32 mer) (SEQ ID №44)
5'TTGGATCCTTAAGCTGCTCTAGCTAGGTTACC 3'
чтобы расширить часть 3' гена apxIII, кодирующего протеин гемолизин III (Actinobacillus pleuropneumoniae), в форме фрагмента ClaI-BamHI. После очистки продукт PCR (596 pb) расщепили с помощью Clal и BamHI, чтобы изолировать фрагмент ClaI-BamHI (583 pb) (фрагмент В). Фрагменты А и В сшили вместе с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и BamHI, и получили плазмиду рРВ174' (7658 pb) (Фигура №23).
Второй пример делении в ApxIII (плазмида pFB189):
Ген apxIII (Actinobacillus pleuropneumoniae) был клонирован таким образом, чтобы имела место делеция участка аминокислот с большим содержанием глицина (участвующего в фиксации иона кальция), находящегося между аминокислотами 705 и 886.
Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae (Серотип 8) (M.Smis 1992. № доступа последовательности в Genbank=X68815), полученной по технологии, описанной в примерах 2 и 3, и с следующими олигонуклеотидами:
РВ278 (30 mer) (SEQ ID №41)
5'TTTGTCGACATGAGTACTTGGTCAAGCATG 3'
РВ303 (32 mer) (SEQ ID №45)
5'TTTATCGATTTCTTCACGTTTACCAACAGCAG 3'
чтобы расширить часть 5' гена apxIII, кодирующего протеин гемолизин III (Actinobacillus pleuropneumoniae), в форме фрагмента SalI-ClaI. После очистки продукт PCR (2133 pb) расщепили с помощью SalI и ClaI, чтобы изолировать фрагмент SalI-ClaI (2122 pb) (фрагмент А).
Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae (Серотип 8) (М.Smits 1992. № доступа последовательности в Genbank=X68815), и следующими олигонуклеотидами:
РВ306 (31 mer) (SEQ ID №46)
5'TTTATCGATTCTGATTTTTCCTTCGATCGTC 3'
PB307 (32 mer) (SEQ ID №44)
5'TTGGATCCTTAAGCTGCTCTAGCTAGGTTACC 3'
чтобы расширить часть 3' гена apxIII, кодирующего протеин гемолизин III (Actinobacillus pleuropneumoniae), в форме фрагмента ClaI-BamHI. После очистки продукт PCR (518 pb) расщепили с помощью ClaI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент ClaI-BamHI (506 pb) (фрагмент В). Фрагменты А и В сшили вместе с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и BamHI, и получили плазмиду рРВ189 (7496 pb) (Фигура №24).
Третий пример делеции в ApxIII (плазмида рPВ190):
Ген apxIII (Actinobacillus pleuropneumoniae) был клонирован таким образом, чтобы имела место делеция участка аминокислот с большим содержанием глицина (участвующего в фиксации иона кальция), находящегося между аминокислотами 718 и 876.
Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae (Серотип 8) (М.Smits 1992. № доступа последовательности в Genbank=X68815), полученной по технологии, описанной в примерах 2 и 3, и со следующими олигонуклеогидами:
PB278 (30 mer) (SEQ ID №41)
5'TTTGTCGACATGAGTACTTGGTCAAGCATG 3'
РВ304 (33 mer) (SEQ ID №47)
5'TTTATCGATACCTGATTGCGTTAATTCATAATC 3'
чтобы расширить часть 5' гена apxIII, кодирующего протеин гемолизин III (Actinobacillus pleuropneumoniae), в форме фрагмента SalI-ClaI. После очистки продукт PCR (2172 pb) расщепили с помощью SalI и ClaI, чтобы изолировать фрагмент SalI-ClaI (2161 pb) (фрагмент А).
Провели реакцию PCR с ДНК генома Actinobacillus pleuropneumoniae) (Серотип 8) (М.Smits 1992. № доступа последовательности в Genbank=X68815), и со следующими олигонуклеотидами:
РВ305 (31 mer) (SEQ ID №48)
5'TTTATCGATAAATCTAGTGATTTAGATAAAC 3'
РВ307 (32 mer) (SEQ ID №44)
5'TTGGATCCTTAAGCTGCTCTAGCTAGGTTACC 3'
чтобы расширить часть 3' гена apxIII, кодирующего протеин гемолизин III (Actinobacillus pleuropneumoniae), в форме фрагмента ClaI и BamHI. После очистки продукт PCR (548 pb) расщепили с помощью ClaI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент ClaI-BamHI (536 pb) (фрагмент В). Фрагменты А и В сшили вместе с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и BamHI, и получили плазмиду рРВ190 (7565 pb) (Фигура №25).
Пример 24: Получение и очистка плазмид
Для получения плазмид, предназначенных для вакцинации животных, можно использовать любую технологию, позволяющую получить суспензию очищенных плазмид, по большей части, в сверхскрученной форме. Эти технологии хорошо известны специалистам. Можно назвать, в частности, технику щелочного лизиса с последующим двукратным центрифугированием в градиенте хлорида цезия и в присутствии бромида этидия, как описано J.Sambrook и др. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2-е изд. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor. New York. 1989). Можно также обратиться к материалам заявок РСТ WO 95/21250 и РСТ WO 96/02658, в которых описаны методики получения в промышленном масштабе плазмид для вакцинации. Для получения вакцин (см. пример 17) готовят суспензию очищенных плазмид таким образом, чтобы получить высококонцентрированные растворы (>2 мг/мл), пригодные для хранения. Для этого готовят суспензию плазмид или в ультрачистой воде, или в буфере ТЕ (Tris-HCl 10 мМ; EDTA 1 мМ, рН 8,0).
Пример 25: Получение ассоциированных вакцин
Различные плазмиды, необходимые для получения ассоциированной вакцины, смешивают в их концентрированных растворах (пример 16). Смеси готовят таким образом, чтобы конечная концентрация каждой плазмиды соответствовала эффективной дозе каждой плазмиды. В качестве растворов для доводки конечной концентрации вакцины можно использовать или раствор 0,9% NaCl, или буфер PBS.
Особые компоненты, такие как липосомы, катионные липиды, также могут быть использованы для получения вакцин.
Пример 26: Вакцинация свиней
Свиней вакцинируют дозами 100 мкг, 250 мкг или 500 мкг на каждую плазмиду.
Инъекции можно проводить с помощью иглы внутримышечно. В этом случае вакцинные дозы вводят в объеме 2 мл.
Инъекции можно проводить внутрикожно, используя жидкоструйный (без иглы) инъекционный аппарат и вводя дозы 0,2 мл в 5 точках (0,04 мл в каждой точке) (например, аппарат «PIGJET»). В этом случае вакцины вводят в объемах 0,2 или 0,4 мл, что соответствует одному или двум введениям. Если два последовательных введения осуществляют при помощи аппарата PIGJET, эти введения осуществляют таким образом, чтобы обе инъекционные зоны были удалены друг от друга на расстояние около 1-2 сантиметров.
Claims (10)
1. Вакцина свиней для получения иммунного ответа против вируса PRRS, содержащая по меньшей мере одну плазмиду, включающую ген вируса PRRS, причем указанный ген выбран из группы, включающей гены Е, ORF3 и М.
2. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что плазмида включает ген Е.
3. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что плазмида включает ген ORF3.
4. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что плазмида включает ген М.
5. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что она содержит две или три плазмиды, каждая из которых включает один ген вируса PRRS, выбранный из генов Е, ORF3 и М.
6. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что плазмида включает два или три гена вируса PRRS, причем указанные гены выбраны из генов Е, ORF3 и М.
7. Вакцина по одному из пп.1-6, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит плазмиду, включающую ген патогена свиней, отличного от вируса PRRS.
8. Вакцина по п.7, отличающаяся тем, что указанный ген выбирают из генов gB и gD вируса болезни Aujeszky, HA, NP и N вируса гриппа свиней, VR2 вируса парвовироза, E1 и Е2 вируса пестивироза и apxI, apxII и apxIII актинобациллоза.
9. Вакцина по одному из пп.1-8, отличающаяся тем, что плазмида включает ранний промотор цитомегаловируса CMV-IE.
10. Вакцина по одному из пп.1-8, отличающаяся тем, что плазмида включает промотор, выбранный из раннего промотора вируса SV40, позднего промотора вируса SV40, промотора LTR вируса саркомы Рауса, промотора гена цитоскелета.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR9609338A FR2751224B1 (fr) | 1996-07-19 | 1996-07-19 | Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies respiratoires et de reproduction des porcs |
FR9609338 | 1996-07-19 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99103293/13A Division RU99103293A (ru) | 1996-07-19 | 1997-07-15 | Формула полинуклеотидной вакцины против респираторных патологий и патологий репродукции свиней |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2002133052A RU2002133052A (ru) | 2005-01-20 |
RU2305559C2 true RU2305559C2 (ru) | 2007-09-10 |
Family
ID=9494450
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2002133052/13A RU2305559C2 (ru) | 1996-07-19 | 2002-12-09 | Вакцина свиней против респираторных патологий и патологий репродукции свиней |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US6207165B1 (ru) |
EP (1) | EP0912743B1 (ru) |
JP (1) | JP2001500111A (ru) |
KR (1) | KR100496249B1 (ru) |
CN (2) | CN1329513C (ru) |
AR (1) | AR007864A1 (ru) |
AU (1) | AU735291B2 (ru) |
BR (1) | BR9710740A (ru) |
CA (1) | CA2261346C (ru) |
CO (1) | CO4750676A1 (ru) |
DE (1) | DE69734284T2 (ru) |
DK (1) | DK0912743T3 (ru) |
ES (1) | ES2251030T3 (ru) |
FR (1) | FR2751224B1 (ru) |
HU (1) | HUP9903822A3 (ru) |
PL (1) | PL190615B1 (ru) |
RU (1) | RU2305559C2 (ru) |
TW (1) | TW589190B (ru) |
UA (2) | UA77935C2 (ru) |
WO (1) | WO1998003658A1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2628313C2 (ru) * | 2011-05-27 | 2017-08-15 | Синовет (Бейджинг) Байотекнолоджи Ко.,Лтд | Комбинированные вакцины для профилактики вирусных инфекций свиней |
Families Citing this family (62)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU762901B2 (en) * | 1996-07-19 | 2003-07-10 | Merial | Polynucleotide vaccine formula for treating porcine respiratory and reproductive diseases |
EP0863151A1 (en) * | 1997-02-12 | 1998-09-09 | Akzo Nobel N.V. | "Canine parvovirus dna vaccines" |
CA2223029A1 (en) * | 1997-02-12 | 1998-08-12 | Akzo Nobel Nv | Canine parvovirus dna vaccines |
FR2781159B1 (fr) * | 1998-07-06 | 2000-10-06 | Merial Sas | Vaccin circovirus et parvovirus porcin |
FR2776294B1 (fr) * | 1998-03-20 | 2001-06-22 | Merial Sas | Nouveaux circovirus porcins ; vaccins et reactifs de diagnostic |
US6517843B1 (en) | 1999-08-31 | 2003-02-11 | Merial | Reduction of porcine circovirus-2 viral load with inactivated PCV-2 |
US7192594B2 (en) * | 1997-10-03 | 2007-03-20 | Merial Limited | Postweaning multisystemic wasting syndrome and porcine circovirus from pigs |
US7211379B2 (en) * | 1997-10-03 | 2007-05-01 | Merial Sas | Prevention of myocarditis, abortion and intrauterine infection associated with porcine circovirus-2 |
FR2772047B1 (fr) * | 1997-12-05 | 2004-04-09 | Ct Nat D Etudes Veterinaires E | Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection |
CA2313806A1 (en) * | 1997-12-11 | 1999-06-17 | University Of Saskatchewan | Postweaning multisystemic wasting syndrome virus from pigs |
ES2170622B1 (es) * | 1999-12-03 | 2004-05-16 | Consejo Superior De Investigaciones Cientificas | Clones y vectores infectivos derivados de coronavirus y sus aplicaciones. |
FR2804028B1 (fr) * | 2000-01-21 | 2004-06-04 | Merial Sas | Vaccins adn ameliores pour animaux de rente |
KR20030054139A (ko) * | 2001-12-24 | 2003-07-02 | 학교법인 건국대학교 | 돼지 오제스키병 바이러스의 gD 유전자를 포함하는재조합 발현 벡터 및 이를 이용한 DNA 백신 |
US7906311B2 (en) | 2002-03-20 | 2011-03-15 | Merial Limited | Cotton rat lung cells for virus culture |
US20060160759A1 (en) * | 2002-09-28 | 2006-07-20 | Jianzhu Chen | Influenza therapeutic |
EP2390352A1 (en) | 2003-03-18 | 2011-11-30 | Quantum Genetics Ireland Limited | Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds |
US7468273B2 (en) | 2003-05-01 | 2008-12-23 | Meial Limited | Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use |
EP1689858B1 (en) | 2003-11-13 | 2013-05-15 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Methods of characterizing infectious bursal disease virus |
US7527967B2 (en) * | 2003-11-25 | 2009-05-05 | Academia Sinica | Recombinant baculovirus and virus-like particle |
US20050202484A1 (en) | 2004-02-19 | 2005-09-15 | The Governors Of The University Of Alberta | Leptin promoter polymorphisms and uses thereof |
CN101208104B (zh) | 2005-04-25 | 2012-10-31 | 梅瑞尔有限公司 | Nipah病毒疫苗 |
US20080241184A1 (en) | 2005-08-25 | 2008-10-02 | Jules Maarten Minke | Canine influenza vaccines |
US7771995B2 (en) | 2005-11-14 | 2010-08-10 | Merial Limited | Plasmid encoding human BMP-7 |
WO2007056614A1 (en) | 2005-11-14 | 2007-05-18 | Merial Limited | Gene therapy for renal failure |
US7862821B2 (en) | 2006-06-01 | 2011-01-04 | Merial Limited | Recombinant vaccine against bluetongue virus |
US20080274137A1 (en) * | 2007-05-02 | 2008-11-06 | Jean Christophe Francis Audonnet | DNA plasmids having improved expression and stability |
JP2010525812A (ja) | 2007-05-02 | 2010-07-29 | メリアル リミテッド | 発現及び安定性が改善されたdnaプラスミド |
WO2010063033A2 (en) | 2008-11-28 | 2010-06-03 | Merial Limited | Recombinant avian influenza vaccine and uses thereof |
EP2998315B2 (en) | 2009-04-03 | 2021-11-03 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Newcastle disease virus vectored avian vaccines |
PE20121685A1 (es) | 2009-12-28 | 2012-12-28 | Merial Ltd | Antigeno ndv recombinante y usos del mismo |
US20130197612A1 (en) | 2010-02-26 | 2013-08-01 | Jack W. Lasersohn | Electromagnetic Radiation Therapy |
EP2944322B1 (en) | 2010-03-12 | 2018-01-17 | Merial, Inc | Bluetongue virus recombinant vaccines and uses thereof |
CN102373181B (zh) * | 2010-08-09 | 2014-06-11 | 中山大学 | 猪流感病毒和猪蓝耳病病毒混合病毒样颗粒、制备方法和应用 |
CN102370976B (zh) * | 2010-08-09 | 2014-06-11 | 中山大学 | 猪流感病毒和猪口蹄疫病毒的混合病毒样颗粒、制备方法和应用 |
PL2611460T3 (pl) | 2010-08-31 | 2017-02-28 | Merial, Inc. | Szczepionki przeciw herpeswirusom przenoszone z pomocą wirusa choroby newcastle |
WO2012090073A2 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | The Netherlands Cancer Institute | Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity |
AU2012240240A1 (en) | 2011-04-04 | 2013-05-09 | Netherlands Cancer Institute | Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors |
US20140287931A1 (en) | 2011-04-04 | 2014-09-25 | Stichting Het Nederlands Kanker Instituut - Antoni Van Leeuwenhoek Ziekenhuis | Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment |
US9216213B2 (en) | 2011-04-20 | 2015-12-22 | Merial, Inc. | Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile |
CA2834288A1 (en) | 2011-04-25 | 2012-11-01 | Advanced Bioscience Laboratories, Inc. | Truncated hiv envelope proteins (env), methods and compositions related thereto |
WO2012153160A1 (es) | 2011-05-07 | 2012-11-15 | Laboratorio Avi-Mex, S.A. De C.V. | Vacuna recombinante contra prrs en vector viral |
CA2837582C (en) | 2011-05-27 | 2021-03-02 | Merial Limited | Genetic vaccines against hendra virus and nipah virus |
ES2674439T3 (es) | 2011-06-01 | 2018-06-29 | Merial, Inc. | Administración sin aguja de vacunas contra el VSRRP |
DK2741740T3 (en) | 2011-08-12 | 2017-06-06 | Merial Inc | VACUUM-SUPPORTED CONSERVATION OF BIOLOGICAL PRODUCTS, IN PARTICULAR OF VACCINES |
WO2013093629A2 (en) | 2011-12-20 | 2013-06-27 | Netherlands Cancer Institute | Modular vaccines, methods and compositions related thereto |
HUE033858T2 (en) | 2012-02-14 | 2018-01-29 | Merial Inc | Rotavirus unit vaccines and method for their preparation and use |
WO2013123242A1 (en) | 2012-02-14 | 2013-08-22 | Merial Limited | Recombinant poxviral vectors expressing both rabies and ox40 proteins, and vaccines made therefrom |
WO2013138776A1 (en) | 2012-03-16 | 2013-09-19 | Merial Limited | Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g |
MX364875B (es) | 2012-06-13 | 2019-05-09 | Univ Glasgow Court | Vacunas para btv y ashv reclasificantes. |
CN102807989B (zh) * | 2012-08-01 | 2014-04-23 | 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所 | 犬科和/或猫科动物疫病重组活载体疫苗的制备方法 |
EP2968514A1 (en) | 2013-03-12 | 2016-01-20 | Merial, Inc. | Reverse genetics schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof |
JP6236144B2 (ja) * | 2013-05-31 | 2017-11-22 | 普莱柯生物工程股▲ふん▼有限公司 | 豚ヘルペスウイルス、ワクチン組成物及びその製造方法と応用 |
JP6821429B2 (ja) | 2013-09-25 | 2021-01-27 | ゾエティス・サービシーズ・エルエルシー | Pcv2b分岐ワクチン組成物及び使用方法 |
CN104248757B (zh) * | 2014-09-30 | 2017-10-27 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 猪伪狂犬病病毒疫苗组合物及其制备方法和应用 |
US10010499B2 (en) | 2014-11-03 | 2018-07-03 | Merial Inc. | Methods of using microneedle vaccine formulations to elicit in animals protective immunity against rabies virus |
CA2990643C (en) | 2015-06-23 | 2023-10-17 | Merial, Inc. | Prrsv minor protein-containing recombinant viral vectors and methods of making and use thereof |
CN105693827B (zh) * | 2015-06-29 | 2020-05-15 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 一种猪伪狂犬病病毒亚单位疫苗及其制备方法和应用 |
CN104998256A (zh) * | 2015-07-14 | 2015-10-28 | 天津瑞普生物技术股份有限公司 | 一种猪用三联灭活疫苗的制备方法 |
CN108135997A (zh) | 2015-08-20 | 2018-06-08 | 梅里亚股份有限公司 | Fcv重组疫苗及其用途 |
FI3355915T3 (fi) | 2015-09-29 | 2024-01-12 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Koirien parvoviruksen (CPV) viruksen kaltaisten hiukkasten (VLP) rokotteet ja niiden käytöt |
AU2016361305B2 (en) | 2015-11-23 | 2020-02-06 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | FMDV and E2 fusion proteins and uses thereof |
TWI760322B (zh) | 2016-01-29 | 2022-04-11 | 美商百靈佳殷格翰動物保健美國有限公司 | 重組腺病毒載體裝載之fmdv疫苗及其用途 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NL8901651A (nl) * | 1989-06-29 | 1991-01-16 | Centraal Diergeneeskundig Inst | Vaccin tegen pestivirusinfecties, zoals varkenspest; daarvoor bruikbare nucleotidesequenties en polypeptiden. |
US6592873B1 (en) * | 1992-10-30 | 2003-07-15 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Polynucleic acids isolated from a porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) and proteins encoded by the polynucleic acids |
DE69536091D1 (de) * | 1994-01-27 | 2010-09-09 | Univ Massachusetts Medical | Immunisierung durch Impfung von DNS Transkriptionseinheit |
US5516905A (en) * | 1994-08-30 | 1996-05-14 | University Of Massachusetts Medical Center | Antibiotic compounds and methods to treat gram-positive bacterial and mycoplasmal infections |
AU711915B2 (en) * | 1995-12-21 | 1999-10-21 | Dimminaco Ag | Plasmid vaccine against pseudorabies virus |
-
1996
- 1996-07-19 FR FR9609338A patent/FR2751224B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-07-11 AR ARP970103116A patent/AR007864A1/es unknown
- 1997-07-15 BR BR9710740A patent/BR9710740A/pt not_active Application Discontinuation
- 1997-07-15 CA CA2261346A patent/CA2261346C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-15 DE DE69734284T patent/DE69734284T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-15 WO PCT/FR1997/001313 patent/WO1998003658A1/fr active IP Right Grant
- 1997-07-15 ES ES97933745T patent/ES2251030T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-15 UA UA99020959A patent/UA77935C2/ru unknown
- 1997-07-15 JP JP10506628A patent/JP2001500111A/ja not_active Ceased
- 1997-07-15 KR KR1019980710903A patent/KR100496249B1/ko active IP Right Grant
- 1997-07-15 CN CNB971965587A patent/CN1329513C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-15 HU HU9903822A patent/HUP9903822A3/hu unknown
- 1997-07-15 CN CNA200710127053XA patent/CN101121023A/zh active Pending
- 1997-07-15 PL PL97331249A patent/PL190615B1/pl unknown
- 1997-07-15 EP EP97933745A patent/EP0912743B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-15 DK DK97933745T patent/DK0912743T3/da active
- 1997-07-15 AU AU36991/97A patent/AU735291B2/en not_active Expired
- 1997-07-15 UA UAA200610210A patent/UA91675C2/ru unknown
- 1997-07-18 CO CO97040979A patent/CO4750676A1/es unknown
- 1997-09-03 TW TW086112707A patent/TW589190B/zh not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-01-15 US US09/232,468 patent/US6207165B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-02-16 US US09/784,984 patent/US6576243B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-12-09 RU RU2002133052/13A patent/RU2305559C2/ru active
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2628313C2 (ru) * | 2011-05-27 | 2017-08-15 | Синовет (Бейджинг) Байотекнолоджи Ко.,Лтд | Комбинированные вакцины для профилактики вирусных инфекций свиней |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR100496249B1 (ko) | 2006-01-27 |
CN101121023A (zh) | 2008-02-13 |
TW589190B (en) | 2004-06-01 |
KR20000065256A (ko) | 2000-11-06 |
CA2261346C (en) | 2012-01-03 |
AU3699197A (en) | 1998-02-10 |
FR2751224B1 (fr) | 1998-11-20 |
DE69734284T2 (de) | 2006-07-13 |
US6207165B1 (en) | 2001-03-27 |
CN1225684A (zh) | 1999-08-11 |
HUP9903822A2 (hu) | 2000-03-28 |
DK0912743T3 (da) | 2006-01-30 |
RU2002133052A (ru) | 2005-01-20 |
UA91675C2 (ru) | 2010-08-25 |
EP0912743B1 (fr) | 2005-09-28 |
HUP9903822A3 (en) | 2010-01-28 |
PL190615B1 (pl) | 2005-12-30 |
JP2001500111A (ja) | 2001-01-09 |
WO1998003658A1 (fr) | 1998-01-29 |
AU735291B2 (en) | 2001-07-05 |
FR2751224A1 (fr) | 1998-01-23 |
ES2251030T3 (es) | 2006-04-16 |
AR007864A1 (es) | 1999-11-24 |
PL331249A1 (en) | 1999-07-05 |
DE69734284D1 (de) | 2006-02-09 |
UA77935C2 (ru) | 2007-02-15 |
EP0912743A1 (fr) | 1999-05-06 |
CO4750676A1 (es) | 1999-03-31 |
BR9710740A (pt) | 1999-08-17 |
CN1329513C (zh) | 2007-08-01 |
US6576243B1 (en) | 2003-06-10 |
CA2261346A1 (en) | 1998-01-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2305559C2 (ru) | Вакцина свиней против респираторных патологий и патологий репродукции свиней | |
RU2319504C2 (ru) | Вакцина собак против бешенства (варианты), способ вакцинации (варианты), набор для вакцинации (варианты) | |
RU2312676C2 (ru) | Формула кошачьей вакцины | |
RU2305560C2 (ru) | Формула вакцины против респираторных патологий крупного рогатого скота | |
US6558674B1 (en) | Polynucleotide vaccine formulation against pathologies of the horse | |
US6803361B2 (en) | Bovine polynucleotide vaccine for the intradermal route | |
ES2283105T3 (es) | Vacunas en el adn con polimeros de acido acrilico o metacrilico o de ema (r) para los caballos. | |
ES2240968T3 (es) | Capsides y proteinas recombinantes del virus de la enfermedad hemorragica del conejo (rhdv), kits de diagnostico y vacunas que las contienen. | |
AU762901B2 (en) | Polynucleotide vaccine formula for treating porcine respiratory and reproductive diseases | |
US7294338B2 (en) | Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies | |
AU776827B2 (en) | Polynucleotide vaccine formula, particularly for treating bovine respiratory disease | |
AU5427401A (en) | Polynucleotide vaccine formula for treating horse diseases |