RU2319504C2 - Вакцина собак против бешенства (варианты), способ вакцинации (варианты), набор для вакцинации (варианты) - Google Patents

Вакцина собак против бешенства (варианты), способ вакцинации (варианты), набор для вакцинации (варианты) Download PDF

Info

Publication number
RU2319504C2
RU2319504C2 RU2002132833/13A RU2002132833A RU2319504C2 RU 2319504 C2 RU2319504 C2 RU 2319504C2 RU 2002132833/13 A RU2002132833/13 A RU 2002132833/13A RU 2002132833 A RU2002132833 A RU 2002132833A RU 2319504 C2 RU2319504 C2 RU 2319504C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
vaccine
plasmid
dog
promoter
nucleic acid
Prior art date
Application number
RU2002132833/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2002132833A (ru
Inventor
Жан-Кристоф ОДОННЕ (FR)
Жан-Кристоф Одонне
Аннабелль БУШАРДОН (FR)
Аннабелль Бушардон
Мишель РИВЬЕР (FR)
Мишель Ривьер
Original Assignee
Мериаль
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=9494495&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2319504(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Мериаль filed Critical Мериаль
Publication of RU2002132833A publication Critical patent/RU2002132833A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2319504C2 publication Critical patent/RU2319504C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/0225—Spirochetes, e.g. Treponema, Leptospira, Borrelia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18422—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/20011—Coronaviridae
    • C12N2770/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/20011—Coronaviridae
    • C12N2770/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области вирусологии и биотехнологии. Вакцина против бешенства собак содержит плазмиду, содержащую нуклеиновую кислоту, кодирующую белок G вируса бешенства. Вакцина обеспечивает полную защиту против бешенства в течение одного года после единственного введения этой вакцины. Предложены также способ вакцинации с помощью такой вакцины и набор, ее включающий. Изобретение может быть использовано в ветеринарии. 6 н.п. и 18 з.п. ф-лы, 10 ил.

Description

Настоящее изобретение относится к формуле вакцины для вакцинации собак против большого числа инфекционных патологий, в частности респираторных патологий и патологий пищеварения. Оно также относится к соответствующей методике вакцинации.
Инфекционные патологии собак крайне разнообразны и зачастую с трудом поддаются контролю в силу обстоятельств, имеющих место на конкретной территории.
Уже существует ряд вакцин, в частности, против болезни Каре (вирус CDV), парвовироза (вирус CPV), коронавироза (вирус CCV), респираторного комплекса или собачьего кашля (вирус Р12) и бешенства (рабдовирус). Эти вакцины являются, в целом, живыми вакцинами ослабленных штаммов. Таков, в частности, случай вакцин болезней Каре, вакцин против собачьих аденовирозов, вакцин против парвовироза и вакцин против коронавируса собак.
В некоторых случаях предлагались также инактивированные вакцины, например, в отношении бешенства и коронавироза.
Эти разнообразные вакцины продаются как по отдельности, т.е. в виде одновалентных вакцин, так и в виде ассоциированных вакцин, т.е. поливалентных.
Поливалентные ассоциации, разработанные до настоящего времени, всегда вызывали проблемы совместимости валентностей и стабильности. Так, необходимо одновременно обеспечить совместимость различных валентностей вакцины, как в плане различных используемых антигенов, так и в плане самих составов, в частности, если используют одновременно инактивированные вакцины и живые вакцины. Также возникает проблема хранения таких комбинированных вакцин и их безвредности, в частности, в присутствии добавок. Эти вакцины являются, в целом, достаточно дорогими.
Степень защиты и длительность этой защиты могут, кроме этого, быть очень разными, и на них влияют местные особенности. Это особенно справедливо в отношении вакцинации щенков, у которых антитела материнского происхождения противостоят иммунизации инактивированными вакцинами и даже живыми вакцинами.
Таким образом, желательно усовершенствовать подход к вакцинации псовых, и в частности собак, учитывая требования экономии, не позволяющие использовать дорогостоящие вакцины или сложные способы.
Исследования по вакцинации против болезни Каре очищенными препаратами антигенов сплавления F и эквивалентов гемагглютинина Н в полной добавке Фройнда показали, что антиген F может представлять интерес в качестве иммуногена для защиты против вируса CDV (Е.Norrby и др., J. Of Virol. Mai 1986: 536-541) в субъединичной вакцине.
Другая статья (Р. De Vries и др., J. Gen. Virol. 1988, 69: 2071-2083) показывает, что протеины F и НА вируса CDV могут представлять интерес для вакцинации по технологии иммуностимулирующих комплексов (ISKOMS).
Мыши, иммунизированные рекомбинантной вакциной, содержащей ген протеина F вируса CDV, проявляли устойчивость к этому вирусу.
Эти результаты являются, однако, лабораторными, которые трудно интерпретировать, особенно в условиях конкретной местности.
В отношении парвовирозов исследования субъединичных вакцин, содержащих мажорный протеин капсида VP2 вируса CPV, полученного генной рекомбинацией в бакуловирусе, позволили показать, что у иммунизированных таким образом собак вырабатывалась защита против вируса CPV.
В отношении собачьих герпесвирусов CHV были проведены исследования по использованию гликопротеинов в качестве составляющих субъединичных вакцин. Эти исследования показали наличие индукции перекрестных ответов с другими герпесвирусами, такими как FHV, но не позволили сделать вывод о возможности получения защитных вакцин.
В отношении болезни Лима, OspA и OspB в сочетании друг с другом устанавливают защиту у мыши и у собаки, а OspA в отдельности - у мыши, хомяка и собаки.
В заявках WO-A-90 11092, WO-A-93 19183, WO-A-94 21797 и WO-A-95 20660 описано использование недавно разработанной технологии полинуклеотидных вакцин. Известно, что в этих вакцинах используют плазмиду, способную осуществлять в клетках хозяина экспрессию встроенного в плазмиду антигена. Были предложены все пути введения (внутрибрюшинный, внутривенный, внутримышечный, чрескожный, внутрикожный, через слизистую и т.д.). Также могут быть использованы различные средства вакцинации, такие как ДНК, помещенная на поверхность частиц золота и распыляемая таким образом, чтобы она проникала в кожу животного (Tang и др., Nature 356, 152-154, 1992), и жидкоструйные впрыскиватели, позволяющие осуществить трансфекцию одновременно в кожу, в мышцы, в жировые ткани и в ткани молочной железы (Furth и др., Analytical Biochemistry, 205, 365-368, 1992).
В полинуклеотидных вакцинах могут быть использованы как неодетые ДНК, так и ДНК в составе, например, липосом или катионных липидов.
В практике прошлого не отмечено никаких результатов в плане установления у собак защиты методом полинуклеотидной вакцинации против этих болезней. Еще меньше известно о собачих коронавирусах CCV и агентах, вызывающих респираторный комплекс.
В отношении бешенства было показано наличие защиты у мышей после обработки полинуклеотидной вакциной, несущей ген протеина G под контролем раннего промотора вируса SV 40 (Xiang и др., Virology 199, 1994: 132-140); сходный результат был получен и с промотором IE вируса CMV.
Задачей изобретения является разработка формулы поливалентной вакцины для вакцинации собак против определенного числа патогенных агентов.
Другой целью изобретения является разработка такой формулы вакцины, сочетающей различные валентности при сохранении всех требуемых критериев совместимости и стабильности валентностей.
Другой целью изобретения является разработка такой формулы вакцины, позволяющей использовать различные валентности в одном и том же носителе.
Другой целью изобретения является разработка такой формулы вакцины, которая была бы проста в применении и не являлась бы дорогостоящей.
Еще одной целью изобретения является разработка методики вакцинации, которая позволила бы существенно повысить эффективность вакцины по изобретению или сильно сократить необходимое количество вакцины и которая являлась бы безвредной.
Таким образом, объектом настоящего изобретения является формула вакцины против патологий псовых, включающая по меньшей мере две валентности вакцины, каждая из которых включает в себя плазмиду, содержащую (и обеспечивающую его экспрессию in vivo в клетках хозяина из семейства псовых) ген одной валентности собачьего патогена, а именно, валентность вируса болезни Каре CDV и валентность собачьего парвовируса CPV, а плазмиды содержат, для каждой валентности, один или несколько генов, выбранных из группы, представленной НА и F для вируса болезни Каре и геном VP2 для собачего парвовируса.
Предпочтительно для валентности болезни Каре одна или несколько плазмид содержат гены НА и F, встроенные в одну плазмиду или в разные плазмиды.
Поливалентная вакцина по изобретению может также включать в себя валентность собачьего коронавируса CCV с одной или несколькими плазмидами, содержащими один или несколько генов, выбранных из группы генов S и М, предпочтительно ген S или S и М. В этом случае также гены могут быть встроены в разные плазмиды или собраны в одной плазмиде так, чтобы была возможна их экспрессия. Двух- или трехвалентная вакцина по изобретению может также включать в себя, кроме этого, одну эффективную валентность для предупреждения респираторного комплекса, а именно валентность Р12, включающую одну или несколько плазмид, содержащих по меньшей мере один из генов НА и F. Предпочтительно, используют одновременно оба гена НА и F.
Другие валентности, представляющие интерес для настоящего изобретения, могут, таким образом, быть введены в состав вакцин по изобретению; в частности, это может быть одна или несколько валентностей, выбранных из группы, представленной герпесвирозом CHV, болезнью Лима и бешенством, при этом плазмиды содержат для каждой валентности, один или несколько генов, выбранных из группы, представленной генами gB, gD для вируса CHV, генами OspA, OspB и р100 для В. Burgdorferi (болезнь Лима) и геном G для бешенства.
Предпочтительно в отношении герпесвироза сочетают в двух разных плазмидах или в одной плазмиде оба гена gB и gD. В отношении болезни Лима предпочтение отдают гену OspA.
Предпочтительно вакцина по изобретению, включающая в себя валентность болезни Каре и парвовироза, включает в качестве другой валентности валентность коронавироза или, менее предпочтительно, валентность респираторного комплекса, или обе эти валентности, при этом само собой разумеется, что любая комбинация, включающая в себя одну, несколько или все из таких валентностей как коронавироз, респираторный комплекс, герпесвироз, болезнь Лима и бешенство, может сочетаться с обеими валентностями - болезни Каре и парвовироза.
Предпочтительно формула вакцины по изобретению находится в составе носителя, подходящего для введения, желательно, внутримышечным путем; объем дозы составляет при этом от 0,1 до 5 мл, предпочтительно от 0,5 до 2 мл.
Доза составляет обычно от 10 нг до 1 мг, предпочтительно от 100 нг до 500 мкг, еще лучше - от 1 мкг до 250 мкг на каждый тип плазмиды.
Используют предпочтительно неодетые плазмиды, просто помещенные в вакцинирующий носитель, которым является обычно физиологический раствор (0,9% NaCl), ультрачистая вода, буфер ТЕ и т.п. Можно, разумеется, использовать все описанные в практике формы полинуклеотидных вакцин.
Каждая плазмида содержит промотор, способный обеспечивать экспрессию зависящего от него гена в клетках хозяина. Им обычно является сильный эукариотический промотор, в частности, ранний протомотор цитомегаловируса CMV-IE, происходящий от человека или мыши, или, возможно, от другого животного, такого как крыса, свинья, морская свинка.
В общем, промотор может иметь как вирусное, так и клеточное происхождение. В качестве вирусного промотора, кроме CMV-IE, можно назвать ранний или поздний промотор вируса SV40 или промотор LTR вируса Саркомы Руса. Это также может быть промотор вируса, от которого получен ген, например собственный промотор данного гена.
В качестве клеточного промотора можно назвать промотор гена цитоскелета, например промотор десмина (Bolmont и др., Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology, 1990, 22, 117-122; и ZHENLIN и др., Gene, 1989, 78, 243-254) или промотор актина.
Если одна плазмида содержит несколько генов, они могут находиться в одной единице транскрипции или в двух разных единицах транскрипции.
Комбинация различных валентностей вакцины по изобретению может быть получена, предпочтительно, смешиванием полинуклеотидных плазмид, обеспечивающих экспрессию одного или нескольких антигенов каждой валентности, но также можно осуществить экспрессию антигенов нескольких валентностей через одну и ту же плазмиду.
Также объектом настоящего изобретения является методика вакцинации собак, включающая введение эффективной дозы формулы вакцины, как она описана выше. Эта методика вакцинации включает введение одной или нескольких формул вакцины, причем эти дозы могут быть введены последовательно через короткие промежутки времени и/или последовательно через большие промежутки времени.
Формулы вакцины по изобретению могут быть введены, в рамках этой методики вакцинации, различными путями введения, используемыми в практике при полинуклеотидной вакцинации, и с использованием известной техники введения, при этом предпочтение отдают внутримышечному введению.
Эффективность взаимодействия антигенов с иммунной системой находится в зависимости от тканей. В частности, слизистые оболочки дыхательных путей служат барьером на пути патогенов и связаны с лимфоидными тканями, обеспечивающими местный иммунитет. Введение вакцины через контакт со слизистыми, в частности слизистыми ротовой полости, глотки и бронхиальной области, представляет большой интерес для вакцинации против респираторных патологий и патологий пищеварения.
Таким образом, путь введения через слизистые составляет часть способа введения по изобретению, причем используют, в частности, распыление, или спрэй, или воду для питья.
При этом могут применяться формулы вакцины и методики вакцинации по изобретению.
Еще одним объектом изобретения являются формулы одновалентной вакцины, включающие одну или несколько плазмид, кодирующих один или несколько генов одного из вышеназванных вирусов, причем эти гены соответствуют перечисленным выше. За исключением их одновалентного характера, эти формулы могут обладать вышеуказанными характеристиками в отношении выбора генов, их комбинаций, состава плазмид, объемов доз, доз и т.п.
Формулы одновалентной вакцины могут быть использованы (i) для получения формулы поливалентной вакцины, как она описана выше, (ii) в индивидуальном порядке против конкретной патологии, (iii) в сочетании с вакциной другого типа (цельной живой или инактивированной, рекомбинантной, субъединичной) против другой патологии или (iv) в качестве вторичной вакцины для введения после вакцины, описанной ниже.
Действительно, еще одним объектом настоящего изобретения является использование одной или нескольких плазмид по изобретению для получения собачьей вакцины, предназначенной для вакцинации животных, первично вакцинированных при помощи первой, обычной, вакцины (одновалентной или поливалентной), из таких, которые использовались в практике прошлого, выбранной, в частности, из группы, представленной цельной живой вакциной, цельной инактивированной вакциной, субъединичной вакциной, рекомбинантной вакциной, причем эта первая вакцина несет (т.е. содержит или обеспечивает их экспрессию) один или несколько антигенов, кодируемых одной или несколькими используемыми плазмидами, или антигенов, обеспечивающих перекрестную защиту.
Представляет интерес тот факт, что полинуклеотидная вакцина оказывает сильное действие в качестве вторичной вакцины, проявляющееся в усилении иммунного ответа и в установлении длительного иммунитета.
В целом, вакцины для первичной вакцинации могут быть выбраны из числа вакцин, предлагаемых к продаже различными производителями ветеринарных вакцин.
Еще одним объектом изобретения является методика вакцинации, заключающаяся в том, что проводят первичную вакцинацию, как она описана выше, и вторичную вакцинацию формулой вакцины по изобретению.
Согласно предпочтительной форме осуществления способа по изобретению сначала животному вводят эффективную дозу вакцины классического типа, в частности инактивированной, живой, ослабленной или рекомбинантной, или субъеденичной вакцины, таким образом, чтобы обеспечить первичную вакцинацию и через 2-6 недель вводят поливалентную или одновалентную вакцину по изобретению.
Объектом настоящего изобретения является также набор для вакцинации, в который входят вакцина для первичной вакцинации, как она описана выше, и, в качестве вторичной вакцины, формула вакцины по изобретению. Изобретение также относится к формуле вакцины по изобретению с приложенной к ней инструкцией, в которой указывается на использование этой формулы в качестве вторичной вакцины после первичной вакцинации, как она описана выше.
Изобретение также относится к методике получения формул вакцин, а именно получения валентностей и их смесей, как следует из данного описания.
Далее следует детальное описание изобретения с помощью способов осуществления изобретения с опорой на рисунки приложения.
Список фигур.
Фигура № 1: Плазмида pVR1012
Фигура № 2: Плазмида рАВ044
Фигура № 3: Плазмида рАВ036
Фигура № 4: Плазмида рАВ024
Фигура № 5: Плазмида рАВ021
Фигура № 6: Плазмида рАВ022
Фигура № 7: Плазмида рАВ037
Фигура № 8: Плазмида рАВ038
Фигура № 9: Плазмида рАВ017
Фигура № 10: Плазмида рАВ041
Список последовательностей SEQ ID №.
SEQ ID № 1: Олигонуклеотид AB017
SEQ ID № 2: Олигонуклеотид АВ018
SEQ ID № 3: Олигонуклеотид АВ085
SEQ ID № 4: Олигонуклеотид АВ086
SEQ ID № 5: Олигонуклеотид АВ053
SEQ ID № 6: Олигонуклеотид AB054
SEQ ID № 7: Олигонуклеотид АВ045
SEQ ID № 8: Олигонуклеотид AB048
SEQ ID № 9: Олигонуклеотид АВ049
SEQ ID № 10: Олигонуклеотид АВ050
SEQ ID № 11: Олигонуклеотид АВ087
SEQ ID № 12: Олигонуклеотид АВ088
SEQ ID № 13: Олигонуклеотид АВ089
SEQ ID № 14: Олигонуклеотид АВ090
SEQ ID № 15: Олигонуклеотид АВ038
SEQ ID № 16: Олигонуклеотид АВ039
SEQ ID № 17: Олигонуклеотид АВ011
SEQ ID № 18: Олигонуклеотид АВ012
ПРИМЕРЫ
Пример 1. Культура вирусов
Вирусы культивируют на соответствующей системе клеток до проявления цитопатического эффекта. Системы клеток, используемые для каждого вируса, хорошо известны специалистам. В общих словах, клетки, чувствительные к используемому вирусу, культивируемые в минимальной необходимой среде Игла (среда MEM) или в другой подходящей среде, заражают штаммом исследуемого вируса, используя множественность заражения 1. Инфицированные клетки инкубируют при 37°С в течение времени, необходимого для проявления полного цитопатического эффекта (в среднем, 36 часов).
Пример 2. Культура бактерий
Штаммы Borrelia burgdorferi культивируют в соответствующих средах в известных условиях. Эти условия и среды описаны, в частности, A.Barbour (J. Biol. Med. 1984. 57. 71-75). Экстракцию бактериальной ДНК проводили в условиях, описанных W.Simpson и др. (Infect. Immun. 1990. 58. 847-853). Технологии, описанные J.Sambrook и др. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2-е Изд. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor. New York. 1989), также могут быть использованы при этом.
Пример 3. Экстракция геномных вирусных ДНК
После культивирования собирают разрушенные клетки и их плавающие на поверхности обломки, а вирусную суспензию центрифугируют при 1000 g и при +4°С в течение 10 минут, чтобы удалить обломки клеток. Затем осаждают вирионы ультрацентрифугированием при 400000 g и при +4°С в течение 1 часа. Осадок собирают в минимальном объеме буфера (Tris 10 мМ, EDTA 1 мМ). Эту концентрированную вирусную суспензию обрабатывают протеиназой К (100 мкг/мл конечн.) в присутствии натрийдодецилсульфата (SDS) (0,5% конечн.) в течение 2 часов при 37°С. Затем вирусную ДНК экстрагируют при помощи смеси фенол/хлороформ, потом преципитируют 2 объемами абсолютного этанола. По прошествии ночи при -20°С ДНК центрифугируют при 10000 g и при +4°С в течение 15 минут. Осадок ДНК высушивают, затем собирают в минимальном объеме стерильной ультрачистой воды. После этого она может быть расщеплена ферментами рестрикции.
Пример 4. Изолирование геномных вирусных РНК
РНК-содержащие вирусы очищали по известным специалистам технологиям. РНК генома каждого вируса изолировали, используя технологию экстракции "тиоцианат гуанидия/фенолхлороформ", описанную Р.Chomczynski и N.Sacchi (Anal. Biochem. 1987. 162. 156-159).
Пример 5. Технологии молекулярной биологии
Все плазмидные конструкции были получены с использованием стандартных технологий молекулярной биологии, описанных Sambrook J. И др. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2-е Изд. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor. New York. 1989). Все рестрикционные фрагменты, используемые в настоящем изобретении, были изолированы с использованием набора "Geneclean" (BIO 101 INC. La Jolla, CA).
Пример 6. Технология RT-PCR
Специфические олигонуклеотиды (несущие на 5'-концах сайты рестрикции для облегчения клонирования расширенных фрагментов) были синтезированы таким образом, что они полностью закрывают кодирующие участки генов, которые должны быть расширены (см. Специфические примеры). Реакция обратной транскрипции (RT) и расширение в цепи полимеразой (PCR) были осуществлены по стандартным технологиям (Sambrook и др. 1989). Каждая реакция RT-PCR была проведена с парой специфических амплимеров с использованием в качестве матрицы экстрагированной геномной вирусной РНК. Расширенную комплементарную ДНК экстрагировали фенолом/хлороформом/изоамиловым спиртом (25:24:1) перед расщеплением рестрикционными ферментами.
Пример 7. Плазмида pVR1012
Плазмида pVR1012 (фигура №1) была получена при Vical Ink., San Diego, CA, USA. Ее конструкция была описана J.Hartikka и др. (Human Gene Therapy. 1996. 7. 1205-1217).
Пример 8. Конструирование плазмиды рАВ044 (ген CDV НА)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса болезни Каре (CDV) (штамм Onderstepoort) (М.Sidhu и др. Virology. 1993. 193. 66-72), полученной по технологии из примера 4, и следующими олигонуклеотидами:
АВ017 (35 mer) (SEQ ID №1)
5'AAAACTGCAGAATGCTCCCCTACCAAGACAAGGTG3'
AB018 (37 mer) (SEQ ID №2)
5'CGCGGATCCTTAACGGTTACATGAGAATCTTATACGG3'
чтобы изолировать ген, кодирующий гликопротеин НА вируса CDV, в форме фрагмента Pstl-BamHI. После очистки продукт RT-PCR (1835 pb) расщепили с помощью PstI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент Pstl-BamHI (1817 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и BamHI, и получили плазмиду рАВ044 (6676 pb) (Фигура №2).
Пример 9. Конструирование плазмиды рАВ036 (ген CDV F)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса болезни Каре (CDV) (штамм Onderstepoort) (R.Driellen № доступа последовательности в Genebank=X65509), полученной по технологии из примера 4, и следующими олигонуклеотидами:
АВ085 (40 mer) (SEQ ID №3)
5'ATAAGAAGCGGCCGCACATGCACAAGGGAATCCCCAAAAG3'
AB086 (32 mer) (SEQ ID №4)
5'CGCGGATCCACTTCAGTGTGATCTCACATAGG3'
чтобы изолировать ген, кодирующий гликопротеин F вируса CDV, в форме фрагмента NotI-BamHI. После очистки продукт RT-PCR (2018 pb) расщепили с помощью NotI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент NotI-BamHI (2000 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью NotI и BamHI, и получили плазмиду рАВ036 (6893 pb) (Фигура № 3).
Пример 10. Конструирование плазмиды рАВ024 (ген собачьего парвовируса VP2)
Провели реакцию PCR с ДНК генома собачьего парвовируса (CPV) (штамм CPV-b) (С.Parrish № доступа последовательности в Genebank=M19296), полученной по технологии из примера 3, и следующими олигонуклеотидами:
АВ053 (33 mer) (SEQ ID №5)
5'ACGCGTCGACATGAGTGATGGAGCAGTTCAACC3'
AB054 (33 mer) (SEQ ID №6)
5'CGCGGATCCTTAATATAATTTTCTAGGTGCTAG3'
чтобы изолировать ген, кодирующий протеин капсида VP2 (CPV VP2), в форме фрагмента SalI-BamHI. После очистки продукт RT-PCR (1773 pb) расщепили с помощью Sail и BamHI, чтобы изолировать фрагмент SaII-BamHI (1760 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и BamHI, и получили плазмиду рАВ024 (6629 pb) (Фигура № 4).
Пример 11. Конструирование плазмиды рАВ021 (ген CCV S)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома собачьего коронавируса (CCV) (В.Horshburgh и др. J. Gen. Virol. 1992.73. 2849-2862), полученной по технологии из примера 4, и следующими олигонуклеотидами:
АВ045 (32 mer) (SEQ ID №7)
5'ACGCGTCGACATGATTGTGCTTACATTGTGCC3'
AB048 (35 mer) (SEQ ID №8)
5'CGCGGATCCTCAGTGAACATGAACТТТТТCAATAG3'
чтобы расширить фрагмент (4374 pb), содержащий ген, кодирующий гликопротеин S вируса CCV, в форме фрагмента SalI-BamHI. После очистки продукт RT-PCR расщепили с помощью SalI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент SalI-BamHI (4361 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и BamHI, и получили плазмиду рАВ021 (9230 pb) (Фигура № 5).
Пример 12. Конструирование плазмиды рАВ022 (ген CCV М)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома собачьего коронавируса CCV (В.Horshburgh и др. J. Gen. Virol. 1992. 73. 2849-2862), полученной по технологии из примера 4, и следующими олигонуклеотидами:
АВ049 (34 mer) (SEQ ID №9)
5'AAAACTGCAGAAATGAAGAAAATTTTGTTTTTAC3'
AB050 (33 mer) (SEQ ID №10)
5'CGCGGATCCTTATACCATATGTAATAATTTTTC3'
чтобы изолировать ген, кодирующий гликопротеин М (CCV М), в форме фрагмента PstI-BamHI. После очистки продукт RT-PCR (809 pb) расщепили с помощью PstI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент PstI-BamHI (792 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и BamHI, и получили плазмиду рАВ022 (5651 pb) (Фигура № 6).
Пример 13. Конструирование плазмиды рАВ037 (ген CHV gB)
Провели реакцию PCR с ДНК генома собачьего герпесвируса (CHV0 (штамм Carmichael) (K.Limbach и др. J. Gen. Virol 1994. 75. 2029-2039), полученной по технологии из примера 3, и следующими олигонуклеотидами:
АВ087 (34 mer) (SEQ ID № 11)
5'AAAACTGCAGAAGTATGTTTTCATTGTATCTATA3'
AB088 (34 mer) (SEQ ID № 12)
5'CTAGTCTAGATTATTAAACTTTACTTTCATTTTC3'
чтобы изолировать ген, кодирующий гликопротеин gB вируса CHV, в форме фрагмента PstI-XbaI. После очистки продукт RT-PCR (2667 pb) расщепили с помощью PstI и XbaI, чтобы изолировать фрагмент PstI-XbaI (2648 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и Xbal, и получили плазмиду рАВ037 (7523 pb) (Фигура № 7).
Пример 14. Конструирование плазмиды рАВ036 (ген CHV gD)
Провели реакцию PCR с ДНК генома собачьего герпесвируса (CHV) (штамм Carmichael) (K.Limbach и др. J. Gen. Virol 1994. 75. 2029-2039), полученной по технологии из примера 3, и следующими олигонуклеотидами:
АВ089 (34 mer) (SEQ ID №13)
5'AAAACTGCAGAAAATGATTAAACTTCTATTTATC3'
АВ090 (35 mer) (SEQ ID №14)
5'ATAAGAATGCGGCCGCAAAGGCTAAACATTTGTTG3'
чтобы изолировать ген, кодирующий гликопротеин gB вируса CHV, в форме фрагмента PstI-NotI. После очистки продукт PCR (1072 pb) расщепили с помощью PstI и NotI, чтобы изолировать фрагмент PstI-NotI (1049 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и NotI, и получили плазмиду рАВ038 (5930 pb) (фигура №8).
Пример 15. Конструирование плазмиды рАВ017 (ген Borrelia burgdorferi ospA)
Провели реакцию PCR с ДНК генома Borrelia burgdorferi (штамм В31) (S.Bergstrom и др. Mol. Microbiol. 1989. 3. 479-486), полученной по технологии из примера 2, и следующими олигонуклеотидами:
АВ038 (37 mer) (SEQ ID №15)
5'ACGCGTCGACTATGAAAAAATATTTATTGGGAATAGG3'
AB039 (34 mer) (SEQ ID №16)
5'CGCGGATCCCTTATTTTAAAGCGTTTTTAATTTC3'
чтобы изолировать ген, кодирующий мембранный протеин OspA, в форме фрагмента SalI-BamHI. После очистки продукт PCR (842 pb) расщепили с помощью SalI и BamHI, чтобы изолировать фрагмент SalI-BamHI. Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью SalI и BamHI, и получили плазмиду рАВ017 (5698 pb) (Фигура № 9).
Пример 16. Конструирование плазмиды рАВ041 (ген G вируса бешенства)
По технологии из примера 6 провели реакцию RT-PCR с РНК генома вируса бешенства (штамм ERA) (A.Anilionis и др. Nature. 1981. 294. 275-278), полученной по технологии из примера 4, и следующими олигонуклеотидами:
АВ011 (33 mer) (SEQ ID № 17)
5'AAAACTGCAGAGATGGTTCCTCAGGCTCTCCTG3'
AB012 (34 mer) (SEQ ID №18)
5'CGCGGATCCTCACAGTCTGGTCTCACCCCCACTC3'
чтобы расширить фрагмент (1589 pb), содержащий ген, кодирующий гликопротеин G вируса бешенства. После очистки продукт RT-PCR расщепили с помощью PstI и BamHI, чтобы получить фрагмент PstI-BamHI (1578 pb). Этот фрагмент сшили с вектором pVR1012 (пример 7), предварительно расщепленным с помощью PstI и BamHI, и получили плазмиду рАВ041 (6437 pb) (Фигура № 10).
Пример 17. Получение и очистка плазмид
Для получения плазмид, предназначенных для вакцинации животных, можно использовать любую технологию, позволяющую получить суспензию очищенных плазмид, по большей части в сверхскрученной форме. Такие технологии хорошо известны специалистам. Можно назвать, в частности, технику щелочного лизиса с последующим двукратным ультрацентрифугированием в градиенте хлорида цезия и в присутствии бромида этидия, как описано J.Sambrook и др. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 2-е изд. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor. New York. 1989). Можно также обратиться к материалам заявок РСТ WO 95/21250 и РСТ WO 96/02658, в которых описаны методики получения в промышленном масштабе плазмид для вакцинации. Для получения вакцин (см. Пример 17), готовят суспензию очищенных плазмид таким образом, чтобы получить высококонцентрированные растворы (>2 мг/мл), пригодные для хранения. Для этого готовят суспензию плазмид или в ультрачистой воде, или в буфере ТЕ (Tris-HCl 10 мМ; EDTA 1 мМ, рН 8,0).
Пример 18. Получение ассоциированных вакцин
Различные плазмиды, необходимые для получения ассоциированной вакцины, смешивают в их концентрированных растворах (пример 16). Смеси готовят таким образом, чтобы конечная концентрация каждой плазмиды соответствовала эффективной дозе каждой плазмиды. В качестве растворов для доводки конечной концентрации вакцины можно использовать раствор 0,9% NaCl или буфер PBS.
Особые составы, такие как липосомы, катионные липиды, могут также быть использованы для получения вакцин.
Пример 19. Вакцинация собак
Собак вакцинируют дозами 10 мкг, 50 мкг или 250 мкг на каждый тип плазмиды.
Инъекции можно проводить с помощью иглы внутримышечно. В этом случае вакцинные дозы вводят в объемах 1 или 2 мл. Инъекции можно проводить с помощью иглы внутрикожно. В этом случае вакцинные дозы вводят в общем объеме 1 мл, вводимом в 10 точках по 0,1 мл или в 20 точках по 0,05 мл. Перед внутрикожным введением выбривают кожу (обычно бок грудной клетки) или их проводят на уровне относительно безволосых анатомических областей, таких как, например, внутренняя поверхность бедра. Также можно использовать жидкоструйный инъекционный аппарат для внутрикожных инъекций.

Claims (24)

1. Вакцина собак, содержащая эффективное для индукции защитного иммунного ответа против бешенства у Canidae количество плазмиды, которая содержит и экспрессирует в клетке-хозяине Canidae молекулу нуклеиновой кислоты, имеющую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок G вируса бешенства, и фармацевтически приемлемый носитель.
2. Вакцина по п.1, где экспрессия этой последовательности нуклеиновой кислоты находится под контролем промотора, выбранного из группы, состоящей из промотора CMV-IE, раннего промотора вируса SV40, позднего промотора вируса SV40, промотора LTR вируса саркомы Рауса и промотора гена цитоскелета.
3. Вакцина по п.2, где промотором является промотор CMV-IE.
4. Вакцина по п.1 в объеме дозы 0,1-5 мл.
5. Вакцина по п.4 в объеме дозы 0,5-2 мл.
6. Вакцина по п.1, которая содержит 10 нг - 1 мг плазмиды.
7. Вакцина по п.6, которая содержит 100 нг - 500 мкг плазмиды.
8. Вакцина по п.6, которая содержит 1 мкг - 250 мкг плазмиды.
9. Вакцина по любому из пп.1-4, где эта вакцина обеспечивает полную защиту против бешенства в течение по меньшей мере одного года после единственного введения этой вакцины.
10. Вакцина по любому из пп.1-4, для применения в качестве бустер-иммунизации для первой вакцины против бешенства, предназначенной для собак, выбранной из группы, состоящей из живой цельной вакцины, инактивированной цельной вакцины, субъединичной вакцины, рекомбинантной вакцины, причем эта первая вакцина имеет антиген G.
11. Вакцина собак, содержащая эффективное для индукции защитного иммунного ответа против бешенства у собак количество плазмиды, которая содержит и экспрессирует в клетке-хозяине собак молекулу нуклеиновой кислоты, имеющую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок G вируса бешенства, и фармацевтически приемлемый носитель, где эта плазмида дополнительно содержит и экспрессирует in vivo в клетке-хозяине собак молекулу нуклеиновой кислоты, имеющую последовательность нуклеиновой кислоты другого патогена собак.
12. Способ вакцинации собак, включающий введение указанной собаке эффективного для придания защитного иммунитета у собак количества вакцины собак, содержащей эффективное для индукции защитного иммунного ответа у собак количество плазмиды, которая содержит и экспрессирует в клетке-хозяине собак молекулу нуклеиновой кислоты, имеющую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок G вируса бешенства, и фармацевтически приемлемый носитель.
13. Способ вакцинации собак по п.12, где экспрессия плазмидой этой последовательности нуклеиновой кислоты находится под контролем промотора, выбранного из группы, состоящей из промотора CMV-IE, раннего промотора вируса SV40, позднего промотора вируса SV40, промотора LTR вируса саркомы Рауса и промотора гена цитоскелета.
14. Способ вакцинации собак по п.13, где промотором является промотор CMV-IE.
15. Способ вакцинации собак по п.13, где вакцина находится в объеме дозы 0,1-5 мл.
16. Способ вакцинации собак по п.15, где вакцина находится в объеме дозы 0,5-2 мл.
17. Способ вакцинации собак по п.16, где вакцина содержит 10 нг - 1 мг плазмиды.
18. Способ вакцинации собак по п.17, где вакцина содержит 100 нг - 500 мкг плазмиды.
19. Способ вакцинации собак по п.17, где вакцина содержит 1 - 250 мкг плазмиды.
20. Способ вакцинации собак по любому из пп.12-14, где способ обеспечивает полную защиту против бешенства в течение по меньшей мере одного года после единственного введения этой вакцины.
21. Способ вакцинации собак по п.12, где эта плазмида дополнительно содержит и экспрессирует in vivo в клетке-хозяине собак молекулу нуклеиновой кислоты, имеющую последовательность нуклеиновой кислоты другого патогенна собак.
22. Способ вакцинации хозяина, представляющего собой собаку, против бешенства, включающий введение указанной собаке вакцины, выбранной из группы, состоящей из живой цельной вакцины, инактивированной цельной вакцины, субъединичной вакцины, рекомбинантной вакцины и после этого введение вакцины собак, содержащей эффективное для индукции защитного иммунного ответа у собак количество плазмиды, которая содержит и экспрессирует в клетке-хозяине собак молекулу нуклеиновой кислоты, имеющую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок G вируса бешенства, и фармацевтически приемлемый носитель.
23. Набор, содержащий (i) вакцину собак, содержащую эффективное для индукции защитного иммунного ответа против бешенства у собак количество плазмиды, которая содержит и экспрессирует в клетке-хозяине собак молекулу нуклеиновой кислоты, имеющую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок G вируса бешенства, и фармацевтически приемлемый носитель, и (ii) вакцину собак, выбранную из группы, состоящей из живой цельной вакцины, инактивированной цельной вакцины, субъединичной вакцины и рекомбинантной вакцины.
24. Набор для вакцинации против бешенства, содержащий в качестве первой вакцины вакцину, предназначенную для собак, выбранную из группы, состоящей из живой цельной вакцины, инактивированной цельной вакцины, субъединичной вакцины и рекомбинантной вакцины, и в качестве второй вакцины плазмидную вакцину по любому из пп.1-4, где эта первая вакцина содержит или экспрессирует антиген G, для введения в первичной вакцинации, а плазмидная вакцина предназначена для введения во вторичной (бустер) - вакцинации.
RU2002132833/13A 1996-07-19 1997-07-15 Вакцина собак против бешенства (варианты), способ вакцинации (варианты), набор для вакцинации (варианты) RU2319504C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9609401A FR2751227B1 (fr) 1996-07-19 1996-07-19 Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies canines, notamment les pathologies respiratoires et digestives
FR9609401 1996-07-19

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU99103298/13A Division RU99103298A (ru) 1996-07-19 1997-07-15 Формула полинуклеотидной вакцины против патологий собак, в частности, респираторных патологий и патологий пищеварения

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2002132833A RU2002132833A (ru) 2005-01-20
RU2319504C2 true RU2319504C2 (ru) 2008-03-20

Family

ID=9494495

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2002132833/13A RU2319504C2 (ru) 1996-07-19 1997-07-15 Вакцина собак против бешенства (варианты), способ вакцинации (варианты), набор для вакцинации (варианты)

Country Status (17)

Country Link
US (2) US6228846B1 (ru)
EP (1) EP0954332B2 (ru)
JP (1) JP2000515521A (ru)
KR (3) KR100620302B1 (ru)
AR (1) AR034997A1 (ru)
AU (1) AU733563B2 (ru)
BR (1) BR9710509A (ru)
CA (1) CA2260273C (ru)
CZ (1) CZ300385B6 (ru)
DE (1) DE69731309T3 (ru)
FR (1) FR2751227B1 (ru)
NZ (1) NZ333780A (ru)
PL (1) PL190150B1 (ru)
RU (1) RU2319504C2 (ru)
TW (1) TW587942B (ru)
WO (1) WO1998003199A1 (ru)
ZA (1) ZA976284B (ru)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2626605C2 (ru) * 2015-11-25 2017-07-28 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) Генетическая (рекомбинантная) ДНК-конструкция, содержащая кодон-оптимизированный ген гликопротеина (белка G) вируса бешенства с консенсусной аминокислотной последовательностью, которая составлена с учетом аминокислотных последовательностей белка G, выделяемого из штаммов вируса бешенства, циркулирующих на территории Российской Федерации
RU2707544C1 (ru) * 2018-12-28 2019-11-27 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) Генетическая конструкция на основе оптимизированного гена консенсусного гликопротеина вируса бешенства для профилактики бешенства
RU2712743C2 (ru) * 2013-08-21 2020-01-30 Куревак Аг Вакцина против бешенства

Families Citing this family (68)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2751227B1 (fr) * 1996-07-19 1998-11-27 Rhone Merieux Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies canines, notamment les pathologies respiratoires et digestives
US7294338B2 (en) * 1996-07-19 2007-11-13 Merial Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies
EP0863151A1 (en) * 1997-02-12 1998-09-09 Akzo Nobel N.V. "Canine parvovirus dna vaccines"
CA2223029A1 (en) * 1997-02-12 1998-08-12 Akzo Nobel Nv Canine parvovirus dna vaccines
US6368603B1 (en) * 1997-03-05 2002-04-09 Merial Limited Lyme combination compositions and uses
KR100768114B1 (ko) * 1999-06-10 2007-10-17 메리알 애완 동물 및 스포츠용 동물을 위한 ｄｎａ 백신
FR2794648B1 (fr) * 1999-06-10 2003-03-07 Merial Sas Vaccins adn pour animaux de compagnie et de sport
ATE303821T1 (de) * 2001-02-15 2005-09-15 Indian Inst Scient Neue vakzinformulierung aus dna-vakzine- inaktiviertem virus
FR2823222B1 (fr) 2001-04-06 2004-02-06 Merial Sas Vaccin contre le virus de la fievre du nil
US7906311B2 (en) 2002-03-20 2011-03-15 Merial Limited Cotton rat lung cells for virus culture
US7790178B2 (en) * 2002-12-19 2010-09-07 Intervet International B.V. Trivalent vaccine with maternal anitbody transfer via the milk
EP2390352A1 (en) 2003-03-18 2011-11-30 Quantum Genetics Ireland Limited Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds
US7468273B2 (en) 2003-05-01 2008-12-23 Meial Limited Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use
US8541003B2 (en) 2003-06-20 2013-09-24 Protein Sciences Corporation Vectors expressing SARS immunogens, compositions containing such vectors or expression products thereof, methods and assays for making and using
EP1689858B1 (en) 2003-11-13 2013-05-15 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods of characterizing infectious bursal disease virus
US20050202484A1 (en) 2004-02-19 2005-09-15 The Governors Of The University Of Alberta Leptin promoter polymorphisms and uses thereof
CN101208104B (zh) 2005-04-25 2012-10-31 梅瑞尔有限公司 Nipah病毒疫苗
US20080241184A1 (en) 2005-08-25 2008-10-02 Jules Maarten Minke Canine influenza vaccines
US7771995B2 (en) 2005-11-14 2010-08-10 Merial Limited Plasmid encoding human BMP-7
WO2007056614A1 (en) 2005-11-14 2007-05-18 Merial Limited Gene therapy for renal failure
US7767686B2 (en) * 2006-03-03 2010-08-03 Covidien Ag Method of using adenosine receptor blockers during tissue ablation
US7455844B2 (en) 2006-03-29 2008-11-25 Merial Limited Vaccine against streptococci
US7862821B2 (en) 2006-06-01 2011-01-04 Merial Limited Recombinant vaccine against bluetongue virus
US20080274137A1 (en) * 2007-05-02 2008-11-06 Jean Christophe Francis Audonnet DNA plasmids having improved expression and stability
JP2010525812A (ja) 2007-05-02 2010-07-29 メリアル リミテッド 発現及び安定性が改善されたｄｎａプラスミド
WO2010063033A2 (en) 2008-11-28 2010-06-03 Merial Limited Recombinant avian influenza vaccine and uses thereof
EP2998315B2 (en) 2009-04-03 2021-11-03 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Newcastle disease virus vectored avian vaccines
PE20121685A1 (es) 2009-12-28 2012-12-28 Merial Ltd Antigeno ndv recombinante y usos del mismo
US20130197612A1 (en) 2010-02-26 2013-08-01 Jack W. Lasersohn Electromagnetic Radiation Therapy
EP2944322B1 (en) 2010-03-12 2018-01-17 Merial, Inc Bluetongue virus recombinant vaccines and uses thereof
PL2611460T3 (pl) 2010-08-31 2017-02-28 Merial, Inc. Szczepionki przeciw herpeswirusom przenoszone z pomocą wirusa choroby newcastle
WO2012090073A2 (en) 2010-12-30 2012-07-05 The Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity
AU2012240240A1 (en) 2011-04-04 2013-05-09 Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors
US20140287931A1 (en) 2011-04-04 2014-09-25 Stichting Het Nederlands Kanker Instituut - Antoni Van Leeuwenhoek Ziekenhuis Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment
US9216213B2 (en) 2011-04-20 2015-12-22 Merial, Inc. Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile
CA2834288A1 (en) 2011-04-25 2012-11-01 Advanced Bioscience Laboratories, Inc. Truncated hiv envelope proteins (env), methods and compositions related thereto
CA2837582C (en) 2011-05-27 2021-03-02 Merial Limited Genetic vaccines against hendra virus and nipah virus
ES2674439T3 (es) 2011-06-01 2018-06-29 Merial, Inc. Administración sin aguja de vacunas contra el VSRRP
DK2741740T3 (en) 2011-08-12 2017-06-06 Merial Inc VACUUM-SUPPORTED CONSERVATION OF BIOLOGICAL PRODUCTS, IN PARTICULAR OF VACCINES
US9402894B2 (en) 2011-10-27 2016-08-02 International Aids Vaccine Initiative Viral particles derived from an enveloped virus
WO2013093629A2 (en) 2011-12-20 2013-06-27 Netherlands Cancer Institute Modular vaccines, methods and compositions related thereto
WO2013123242A1 (en) 2012-02-14 2013-08-22 Merial Limited Recombinant poxviral vectors expressing both rabies and ox40 proteins, and vaccines made therefrom
HUE033858T2 (en) 2012-02-14 2018-01-29 Merial Inc Rotavirus unit vaccines and method for their preparation and use
WO2013138776A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g
US9347065B2 (en) 2012-03-29 2016-05-24 International Aids Vaccine Initiative Methods to improve vector expression and genetic stability
MX364875B (es) 2012-06-13 2019-05-09 Univ Glasgow Court Vacunas para btv y ashv reclasificantes.
US20140170180A1 (en) 2012-12-17 2014-06-19 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Porcine parvovirus 5a, methods of use and vaccine
US20140234354A1 (en) 2013-02-15 2014-08-21 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Porcine parvovirus 5b, methods of use and vaccine
EP2968514A1 (en) 2013-03-12 2016-01-20 Merial, Inc. Reverse genetics schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof
US10801070B2 (en) 2013-11-25 2020-10-13 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for diagnosing, evaluating and treating cancer
US11725237B2 (en) 2013-12-05 2023-08-15 The Broad Institute Inc. Polymorphic gene typing and somatic change detection using sequencing data
CN106456724A (zh) 2013-12-20 2017-02-22 博德研究所 使用新抗原疫苗的联合疗法
US10010499B2 (en) 2014-11-03 2018-07-03 Merial Inc. Methods of using microneedle vaccine formulations to elicit in animals protective immunity against rabies virus
EP3234193B1 (en) 2014-12-19 2020-07-15 Massachusetts Institute of Technology Molecular biomarkers for cancer immunotherapy
EP3234130B1 (en) 2014-12-19 2020-11-25 The Broad Institute, Inc. Methods for profiling the t-cell- receptor repertoire
TWI806815B (zh) 2015-05-20 2023-07-01 美商博德研究所有限公司 共有之ｇａｔａ３相關之腫瘤特異性新抗原
TW202241500A (zh) 2015-06-09 2022-11-01 美商博德研究所有限公司 用於贅瘤疫苗之調配物及其製備方法
CA2990643C (en) 2015-06-23 2023-10-17 Merial, Inc. Prrsv minor protein-containing recombinant viral vectors and methods of making and use thereof
CN108135997A (zh) 2015-08-20 2018-06-08 梅里亚股份有限公司 Fcv重组疫苗及其用途
FI3355915T3 (fi) 2015-09-29 2024-01-12 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Koirien parvoviruksen (CPV) viruksen kaltaisten hiukkasten (VLP) rokotteet ja niiden käytöt
AU2016361305B2 (en) 2015-11-23 2020-02-06 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. FMDV and E2 fusion proteins and uses thereof
TWI760322B (zh) 2016-01-29 2022-04-11 美商百靈佳殷格翰動物保健美國有限公司 重組腺病毒載體裝載之fmdv疫苗及其用途
WO2017184590A1 (en) 2016-04-18 2017-10-26 The Broad Institute Inc. Improved hla epitope prediction
US11549149B2 (en) 2017-01-24 2023-01-10 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for detecting a mutant variant of a polynucleotide
CN108704128B (zh) * 2018-05-15 2022-06-21 青岛农业大学 一种犬瘟热细小病毒二联亚单位疫苗
US20210382068A1 (en) 2018-10-02 2021-12-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hla single allele lines
US20220062394A1 (en) 2018-12-17 2022-03-03 The Broad Institute, Inc. Methods for identifying neoantigens
CN116735873B (zh) * 2023-08-09 2023-10-31 北京纳百生物科技有限公司 特异性结合犬细小病毒vp2蛋白的单克隆抗体在检测试剂中的应用

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
LU56248A1 (ru) * 1968-06-11 1970-01-15
WO1992015672A1 (en) * 1991-03-07 1992-09-17 Virogenetics Corporation Genetically engineered vaccine strain
DE69536091D1 (de) * 1994-01-27 2010-09-09 Univ Massachusetts Medical Immunisierung durch Impfung von DNS Transkriptionseinheit
ES2283015T3 (es) 1996-04-19 2007-10-16 Merial Ltd. Vacunacion con acidos nucleicos para infecciones parvoviricas.
EP0954582A1 (en) 1996-04-29 1999-11-10 Andreas Prof. Zurbriggen Polynucleotide vaccine against canine distemper
US5846946A (en) 1996-06-14 1998-12-08 Pasteur Merieux Serums Et Vaccins Compositions and methods for administering Borrelia DNA
FR2751227B1 (fr) * 1996-07-19 1998-11-27 Rhone Merieux Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies canines, notamment les pathologies respiratoires et digestives
CA2223029A1 (en) 1997-02-12 1998-08-12 Akzo Nobel Nv Canine parvovirus dna vaccines
IT1292422B1 (it) * 1997-06-26 1999-02-08 Agip Petroli Reattore a bolle con draft tube e procedimento per la rigenerazione del catalizzatore in esso contenuto
US6063385A (en) * 1997-11-07 2000-05-16 Wisconsin Alumni Research Foundation DNA vaccine for parvovirus

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
XIANG Z.Q. et al. "Vaccination with a plasmid vector carrying the rabies virus glycoprotein gene induces protective immunity against rabies virus". Virology. 1994 Feb 15; 199(1):132-40. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2712743C2 (ru) * 2013-08-21 2020-01-30 Куревак Аг Вакцина против бешенства
RU2626605C2 (ru) * 2015-11-25 2017-07-28 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) Генетическая (рекомбинантная) ДНК-конструкция, содержащая кодон-оптимизированный ген гликопротеина (белка G) вируса бешенства с консенсусной аминокислотной последовательностью, которая составлена с учетом аминокислотных последовательностей белка G, выделяемого из штаммов вируса бешенства, циркулирующих на территории Российской Федерации
RU2707544C1 (ru) * 2018-12-28 2019-11-27 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) Генетическая конструкция на основе оптимизированного гена консенсусного гликопротеина вируса бешенства для профилактики бешенства

Also Published As

Publication number Publication date
WO1998003199A1 (fr) 1998-01-29
DE69731309D1 (de) 2004-11-25
PL331246A1 (en) 1999-07-05
JP2000515521A (ja) 2000-11-21
FR2751227A1 (fr) 1998-01-23
CA2260273C (en) 2010-12-21
BR9710509A (pt) 1999-08-17
TW587942B (en) 2004-05-21
EP0954332A1 (fr) 1999-11-10
ZA976284B (en) 1999-01-19
EP0954332B2 (fr) 2014-12-31
CA2260273A1 (en) 1998-01-29
CZ300385B6 (cs) 2009-05-06
RU2002132833A (ru) 2005-01-20
KR20000067866A (ko) 2000-11-25
DE69731309T3 (de) 2015-06-03
US20010009959A1 (en) 2001-07-26
FR2751227B1 (fr) 1998-11-27
DE69731309T2 (de) 2005-11-17
KR20060013432A (ko) 2006-02-09
AU733563B2 (en) 2001-05-17
AU3699397A (en) 1998-02-10
CZ15899A3 (cs) 1999-05-12
PL190150B1 (pl) 2005-11-30
NZ333780A (en) 2000-10-27
US6586412B2 (en) 2003-07-01
US6228846B1 (en) 2001-05-08
AR034997A1 (es) 2004-04-14
EP0954332B1 (fr) 2004-10-20
KR100620302B1 (ko) 2006-09-06
KR20050087885A (ko) 2005-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2319504C2 (ru) Вакцина собак против бешенства (варианты), способ вакцинации (варианты), набор для вакцинации (варианты)
RU2312676C2 (ru) Формула кошачьей вакцины
CA2660355C (en) Polynucleotide vaccine formulation against pathologies of the horse
US6376473B1 (en) Polynucleotide vaccine formula in particular against bovine respiratory pathology
RU2305559C2 (ru) Вакцина свиней против респираторных патологий и патологий репродукции свиней
AU2844899A (en) Adjuvant-containing vaccines
US7294338B2 (en) Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies
AU776827B2 (en) Polynucleotide vaccine formula, particularly for treating bovine respiratory disease
AU765539B2 (en) Polynucleotide vaccine formula for treating horse diseases
AU2004205140B2 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
AU773266B2 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
NZ506427A (en) A canidae vaccine comprising the rabies G gene under the control of the CMV-IE promoter
AU2007202367A1 (en) Avian polynucleotide vaccine formula