RU2250779C2

RU2250779C2 - Эндопаразитицидное средство

Info

Publication number: RU2250779C2
Application number: RU2001133380/15A
Authority: RU
Inventors: Ахим ХАРДЕР (DE); Ахим ХАРДЕР; ЗАМСОН-ХИММЕЛЬСТЬЕРНА Георг ФОН (DE); ЗАМСОН-ХИММЕЛЬСТЬЕРНА Георг ФОН
Original assignee: Байер Акциенгезельшафт
Priority date: 1999-05-12
Filing date: 2000-05-04
Publication date: 2005-04-27
Also published as: ZA200108238B; TR200103240T2; PL200951B1; EP1189615A2; JP2002544224A; CZ20014060A3; HUP0201201A3; BR0010499A; WO2000069425A3; YU80501A; WO2000069425A2; DE19921887A1; KR20010109527A; ATE258795T1; HK1047228B; HK1047228A1; CA2373827A1; HUP0201201A2; NO20015398L; EP1189615B1

Abstract

Изобретение относится к области медицины и касается эндопаразитицидного средства, содержащего циклический депсипептид общей формулы (1) и пиперазин формулы (2). Средство обладает повышенной эффективностью по сравнению с каждым из этих веществ, взятым в отдельности. 5 з.п. ф-лы, 7 табл.

Description

Настоящее изобретение относится к применению пиперазинов для усиления эндопаразитицидного действия циклических депсипептидов в эндопаразитицидных средствах.

Пиперазины и их эффективность против эндопаразитов общеизвестны. (Mehlhom et al., Diagnostik und Therapie der Parasitosen des Menschen, 2. Auflage, Gustav Fischer Verlag, (1995), Mehlhom et al., Diagnostik und Therapie der Parasitosen von Haus, Nutz-und Heimtieren, 2. Auflage, Gustav Fischer Verlag, (1993).

Циклический депсипептид PF 1022 и его эффективность против эндопаразитов известны из EP-OS 382173.

Далее циклические депсипептиды и их эндопаразитицидное действие являлись предметом EP-OS 0626375, EP-OS 0626376 и WO 93/25543.

Предметом настоящего изобретения является применение пиперазинов для усиления эндопаразитицидного действия циклических депсипептидов, состоящих из аминокислот и гидроксикарбоновых кислот в качестве кольцевых структурных элементов и 24 кольцевых атомов.

Предметом настоящего изобретения является, кроме того, эндопаразитицидное средство, которое содержит пиперазин совместно с циклическими депсипептидами, состоящими из аминокислот и гидроксикарбоновых кислот в качестве кольцевых структурных элементов и 24 кольцевых атомов.

Предметом настоящего изобретения является, кроме того, применение пиперазинов совместно с циклическими депсипептидами, состоящими из аминокислот и гидроксикарбоновых кислот в качестве кольцевых структурных звеньев и 24 кольцевых атомов, для приготовления эндопаразитицидных средств.

К циклическим депсипептидам с 24 кольцевыми атомами относят соединения общей формулы (I),

в которой

R¹, R², R¹¹ и R¹² независимо друг от друга означают C₁-C₈-алкил, C₁-C₈-галогеналкил, С₃-С₆-циклоалкил, аралкил, арил,

R³, R⁵, R⁷ и R⁹ независимо друг от друга означают водород или неразветвленный или разветвленный C₁-C₈-алкил, незамещенный или замещенный гидроксилом, С₁-С₄-алкоксилом, карбоксилом,

, карбоксиамидом,

, имидазолилом, индолилом, гуанидино, -SH, или C₁-C₄-алкилтио, а также арил или аралкил, которые могут быть замещены галогеном, гидроксилом, C₁-C₄-алкилом, C₁-C₄-алкоксилом,

R⁴, R⁶, R⁸ и R¹⁰ независимо друг от друга означают водород, неразветвленный C₁-C₅-алкил, C₂-C₆-алкенил, C₃-C₇-циклоалкил, которые могут быть замещены гидроксилом, C₁-C₄-алкокси, карбоксилом, карбоксиамидом, имидазолилом, индолилом, гуанидино, SH, или C₁-C₄-алкилтио, а также арил или аралкил, которые могут быть замещены галогеном, гидроксилом, C₁-C₄-алкил, C₁-C₄-алкокси,

а также их оптические изомеры и рацематы.

Предпочтительно применять соединения формулы (I), в которых

R¹, R², R¹¹ и R¹² независимо друг от друга означают метил, этил, пропил, изопропил, н-, втор.-, трет.-бутил или фенил, незамещенный или замещенный галогеном, C₁-C₄-алкилом, гидроксилом, C₁-C₄-алкокси, а также бензил или фенилэтил, которые могут быть замещены указанными для фенила заместителями и

R³-R¹⁰ имеют вышеуказанные значения.

Особенно предпочтительны соединения формулы (I), в которых

R¹, R², R¹¹ и R¹² независимо друг от друга означают метил, этил, пропил, изопропил, н-, втор.-, трет.-бутил,

R³, R⁵, R⁷ и R⁹ означают водород, неразветвленный или разветвленный C₁-C₈-алкил, в частности метил, этил, пропил, изопропил, н-, втор.-, трет.-бутил, которые могут быть замещены C₁-C₄-алкокси, в частности метокси, этокси, имидазолилом, индолилом или C₁-C₄-алкилтио, в частности метилтио, этилтио, а также фенил, бензил или фенилэтил, которые могут быть замещены галогеном, в частности хлором и

R⁴, R⁶, R⁸ и R¹⁰ независимо друг от друга означают водород, метил, этил, н-пропил, н-бутил, винил, циклогексил, которые могут быть замещены метокси, этокси, имидазолилом, индолилом, метилтио, этилтио, а также изопропил, втор.-бутил, а также фенил, бензил или фенилэтил, которые могут быть замещены галогеном.

Далее в качестве депсипептида с 24 кольцевыми структурными элементами следует упомянуть депсипептид из EP-OS 382173, известный как соединение PF 1022, следующей формулы:

Кроме того, в качестве депсипептида следует упомянуть соединение из РСТ-заявки WО 93/19053.

В частности, следует упомянуть соединение из РСТ-заявки WO 93/19053, которое имеет следующую формулу:

в которой

Z означает морфолинил, нитро, амино, моно- или диметиламино, особенно предпочтителен морфонилил.

Кроме того, следует упомянуть соединение следующей формулы:

в которой

R^1a, R^2a, R^3a, R^4a независимо друг от друга означают водород, C₁-C₁₀-алкил или арил, в частности фенил, которые могут быть замещены гидроксилом, C₁-C₁₀-алкоксилом или галогеном.

Соединения формулы (I) могут быть получены циклизацией незамкнутых октадепсипептидов формулы (II):

в которой

R¹-R¹² имеют вышеуказанные значения, в присутствии разбавителей и в присутствии реагентов, приводящих к циклизации.

В качестве реагентов, приводящих к циклизации, пригодны все соединения, которые предназначены для образования амидных связей (смотри, например Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Band 15/2; Bodanszky et al., Peptide Synthesis 2 and.(Wiley/Sons, New York 1976).

Предпочтение отдается следующим реагентам и методам: метод для получения эфиров с пентафторфенолом (Pfp), N-гидроксисукцинимидом, 1-гидроксибензотриазолом, соединение с карбодиимидами, такими как дициклогексилкарбидиимид или N’-(3-диметиламинопропил)-N-этил-карбидиимид (Ebc), a также метод для получения ангидридов или соединение с реагентами, содержащими фосфоний, такими как бензотриазол-1-ил-окси-трис(диметиламинофосфоний)-гексафторфосфат (ВОР), хлорид бис(2-оксо-3-оксазолидинил)-фосфония (ВОР-Сl), или с регентами, содержащими эфиры фосфоновой кислоты, такими как диэтиловый эфир цианфосфосфоновой кислоты (DEPC) и дифенилфосфарилазид (DPPA).

Особенно предпочтительно соединение с хлоридом бис(2-оксо-3-оксазолидинил)-фосфония (ВОР-Сl) и N’-(3-диметиламинопропил)-N-этил-карбидиимидом (EDC) в присутствии 1-гидроксибензотриазола (HOBt).

Реакция происходит при температуре 0 -150°С, предпочтительно при 20-100°С, особенно предпочтительно при комнатной температуре.

В качестве разбавителя пригодны все инертные органические растворители. К ним относятся, в частности, алифатические и ароматические, в случае необходимости, галогенированные углеводороды, такие как пентан, гексан, гептан, циклогексан, петролейный эфир, бензин, лигроин, бензол, толуол, метилен-хлорид, этиленхлорид, хлороформ, четыреххлористый углерод, хлорбензол и о-дихлорбензол, кроме того, эфиры, такие как диэтиловый и дибутиловый эфир, диметиловый эфир этиленгликоля и диметиловый эфир диэтиленгликоля, тетрагидрофуран и диоксан, а так же кетоны, такие как ацетон, метилэтилкетон, метилизопропилкетон и метилизобутилкетон, кроме того, сложные эфиры, такие как метиловый эфир уксусной кислоты и этиловый эфир уксусной кислоты, кроме того, нитрилы, такие как, например, ацетонитрил и пропионитрил, бензонитрил, динитрил глутаровой кислоты, сверх этого амиды, такие как, например, диметилформамид, диметилацетамид и N-метилпирролидон, а также диметилсульфоксид, тетраметиленсульфон и триамид гексаметилфосфорной кислоты.

Соединения формулы (II) и реагенты, приводящие к циклизации, применяются в соотношении 1:1-1:1,5 по отношению друг к другу. Предпочтительным является примерно эвкимолярное соотношение.

После завершения реакции разбавитель отгоняют, а соединение формулы (I) очищают обычным методом, например, хроматографически.

Незамкнутые октадепсипептиды формулы (II)

в которой заместители имеют вышеуказанные значения, могут быть получены гидрогенолизом соединения формулы (III),

в которой

А бензил, а

R¹-R¹² имеют вышеуказанные значения.

в присутствии разбавителей и катализаторов.

Соединения формулы (III)

в которой заместители имеют вышеуказанные значения, могут быть получены гидролизом соединения формулы (IV)

в которой заместители А, и R¹-R¹² имеют вышеуказанные значения, а В означает трет.-бутокси.

Соединения формулы (IV), а также их стереоизомеры могут быть получены конденсацией тетрадепсипептидов формулы (V)

в которой

А бензил,

Z гидроксил, а

R¹, R², R³, R⁴, R⁵ и R¹⁰ имеют вышеуказанные значения

и тетрадепсипептидов формулы (VI)

в которой

D водород,

В трет.-бутокси, а

R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹¹ и R¹² имеют вышеуказанные значения в присутствии разбавителей и реагентов, приводящих к циклизации.

Тетрадепсипептиды формулы (V) получают путем омыления депсипептидов формулы (VII)

в которой

А бензил,

В трет.-бутокси, а

R¹, R², R³, R⁴, R⁵ и R¹⁰ имеют вышеуказанные значения в присутствии одного из разбавителей и одной из протонодонорной кислоты.

Тетрадепсипептиды формулы (VI)

в которой

D водород,

В трет.-бутокси, а все остальные заместители имеют вышеуказанные значения

получают гидрогенолизом тетрадепсипептидов формулы (VII)

в которой

А бензил,

В трет.-бутокси, а

Тетрадепсипептиды формулы (VII) могут быть получены конденсацией депсипептидов формулы (VIII)

в которой

А бензил

Z гидроксил, а

R¹, R³ и R¹⁰ имеют вышеуказанные значения

и депсипептидов формулы (IX)

в которой

D водород,

В трет.-бутокси, а

R², R⁴ и R⁵ имеют вышеуказанные значения

в присутствии разбавителей и реагентов, приводящих к циклизации.

Известные из WO 93/19053 соответственно из EP-OS 382173 депсипептиды могут быть получены по описанным там методикам.

К пиперазинам относятся все соединения формулы (X)

в которой

R¹³ и R¹⁴ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные алкил, циклоалкил, арил, гетероарил, а также -CONR¹⁵R¹⁶ или -CSNR¹⁵R¹⁶, где

R¹⁵ и R¹⁶ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные алкил или циклоалкил.

Предпочтительны соединения формулы (X), в которой

R¹³ и R¹⁴ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные C₁-C₆-алкил, C₃-C₈-циклоалкил, а также -CONR¹⁵R¹⁶ или -CSNR¹⁵R¹⁶, где

R¹⁵ и R¹⁶ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные C₁-C₆-алкил, C₃-C₈-циклоалкил.

Особенно предпочтительны соединения формулы (X), в которой

R¹³ и R¹⁴ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные C₁-C₄-алкил, C₆-циклоалкил, а также -CONR¹⁵R¹⁶ или -CSNR¹⁵R¹⁶, где

R¹⁵ и R¹⁶ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные C₁-C₄-алкил, C₆-циклоалкил.

Наиболее предпочтительны соединения формулы (X), в которой

R¹³ и R¹⁴ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, C₁-C₄-алкил, C₁-C₄-галоалкил с 1-9 одинаковыми или различными атомами галогена из группы фтор, хлор или бром, а также C₆-циклоалкил, -CONR¹⁵R¹⁶ или -CSNR¹⁵R¹⁶, где

R¹⁵ и R¹⁶ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные C₁-C₄-алкил или С₆-циклоалкил.

Для примера, но не для ограничения можно назвать следующие соединения:

пиперазин, диэтилкарбамазин, N,N’-диметилпиперазин, N-метилпиперазин, N,N’-диэтилпиперазин, N-этилпиперазин, N-этил-N’-метилпиперазин, N,N’-дипропилпиперазин, N-пропилпиперазин, N-этил-N’-пропилпиперазин, N-метил-N’-пропилпиперазин, N-циклогексилпиперазин, N,N’-дициклогексилпиперазин,

специально следовало бы отметить пиперазин и диэтилкарбамазин.

Пиперазины это общеизвестные органические соединения, коммерчески доступные или которые можно получить известными методами (Mehlhom et al. Diagnostik und Therapie der Parasitosen des Menschen 2. Auflage, Gustav Ficsher (1995), Mehlhom et al. Diagnostik und Therapie der Parasitosen von Haus-, Nutz-und Heimtieren, 2. Auflage, Gustav Ficsher (1993)).

Средство по изобретению при незначительной токсичности для теплокровных пригодно для подавления патогенных эндопаразитов, которые встречаются у людей при содержании животных, в животноводстве при практическом использовании скота, разведении животных, в зоопарках, экспериментальном и исследовательском использовании животных и у домашних животных. Они проявляют активность против вредителей на всех или на отдельных стадиях развития, а также против видов с устойчивой и нормальной чувствительностью.

При подавлении патогенных эндопаразитов должны быть снижены заболеваемость, смертность и падение производства (например, при производстве мяса, молока, шерсти, шкуры, яиц, меда и т.д.), так что благодаря использованию биологически активных веществ становится возможным экономное и простое содержание животных. К патогенным эндопаразитам относят цестоды, трематоды, нематоды, в частности, акантоцефалы:

Из отряда Pseudophyllidea, например: Diphyllobothrium spp., Spirometra spp., Schistocephalus spp., Ligula spp., Bothridium spp., Diphlogonoporus spp.

Из отряда Cyclophyllidea, например: Mesocestoides spp., Anoplocephala spp., Paranoplocephala spp., Moniezia spp., Thysanosomsa spp., Thysaniezia spp., Avitellina spp., Stilesia spp., Cittotaenia spp., Andyra spp., Bertiella spp., Taenia spp., Echinococcus spp., Hydatigera spp., Davainea spp., Raillietina spp., Hymenolepis spp., Echinolepis spp., Echinocotyle spp., Diorchis spp., Dipylidium spp., Joyeuxiella spp., Diplopylidium spp.

Из подкласса Monogenea например: Gyrodactylus spp., Dactylogyrus spp., Polystoma spp.

Из подкласса Digenea например: Diplostomum spp., Posthodiplostomum spp., Schistosoma spp., Trichobilharzia spp., Omithobilharzia spp., Austrobilharzia spp., Gigantobiharzia spp., Leucochloridium spp., Brachylaima spp., Echinostoma spp., Echinoparyphium spp., Echinochasmus spp., Hypoderaeum spp., Fasciola spp., Fasciolides spp., Fasciolopsis spp., Cyclocoelum spp., Typhocoelum spp., Paramphistomum spp., Calicophoron spp., Cotylophoron spp., Gigantocotyle spp., Fischoederius spp., Gastrothylacus spp., Notocotylus spp., Catatropis spp., Plagiorchis spp., Prosthogonimus spp., Dicrocoelium spp., Eurytrema spp., Troglotrema spp., Paragonimus spp., Collyriclum spp., Nanophyetus spp., Opisthorchis spp., Clonorchis spp., Metorchis spp., Heterophyes spp., Metagonimus spp.

Из отряда Enoplida, например: Trichuris spp., Capillaria spp., Trichomosoides spp., Trichinella spp.

Из отряда Rhabditia, например: Micronema spp., Strongyloides spp.

Из отряда Strongylida, например: Stronylus spp., Triodontophorus spp., Oe-sophagodontus spp., Trichonema spp., Gyalocephalus spp., Cylindropharynx spp., Poteriostomum spp., Cyclococercus spp., Cylicostephanus spp., Oesophagostomum spp., Chabertia spp., Stephanurus spp., Ancylostoma spp., Uncinaria spp., Bunostomum spp.., Globocephalus spp., Syngamus spp., Cyathostomum spp., Metastrongylus spp., Dictyocaulus spp., Muellerius spp., Protostrongylus spp., Neostrongylus spp., Cystocaulus spp., Pneumostrongylus spp., Spicocaulus spp., Elaphostrongylus spp., Parelaphostrongylus spp., Crenosoma spp., Paracrenosoma spp., Angiostrongylus spp., Aelurostrongylus spp., Filaroides spp., Parafilaroides spp., Trichostrongylus spp., Haemonchus spp., Ostertagia spp., Marshallagia spp., Cooperia spp., Nematodirus spp., Hyostrongylus spp., Obeliscoides spp., Amidostomum spp., Ollulanus spp., Cylicocyclus spp., Crateostonum spp., Cylicodontophorus spp.

Из отряда Oxyurida, например: Oxyuris spp., Enterobius spp., Passalurus spp., Syphacia spp., Aspiculwis spp., Heterakis spp.

Из отряда Ascaridia, например: Ascaris spp., Toxascaris spp., Toxocara spp., Parascaris spp., Anisakis spp., Ascaridia spp.

Из отряда Spirurida, например: Gnathostoma spp., Physaloptera spp., Thelazia spp., Gondylonema spp., Habronema spp., Parabronema spp., Draschia spp., Dracunculus spp.

Из отряда Filariida, например: Stephanofilaria spp., Parafilaria spp., Setaria spp., Loa spp., Dirofilaria spp., Litomosoides spp., Brogia spp., Wuchereria spp., On-chocerca spp.

Из отряда Gigantorhynchida, например: Filicollis spp., Moniliformis spp., Macracanthorhynchus spp., Prosthenorchis spp.

К полезным и племенным животным относятся такие млекопитающие, как, например, крупный рогатый скот, лошади, овцы, свиньи, козы, верблюды, бегемоты, ослы, кролики, лани, северные олени, пушные животные, такие как, например, норки, шиншиллы, еноты, птицы, такие как, например, курицы, гуси, индюшки, утки, страусы, пресноводные и морские рыбы, такие как, например, форели, карпы, угри, рептилии, насекомые, такие как, например, медоносные пчелы и гусеницы шелкопряда.

К лабораторным и опытным животным относятся мыши, крысы, морские свинки, хомяки, собаки и коты.

К домашним животным относятся собаки и кошки.

Применение может быть, как профилактическое, так и терапевтическое.

Применение смесей биологически активных веществ осуществляют непосредственно, как таковых, или в виде пригодных препаратов энтерально, парентерально, дермально, через нос, путем обработки окружающей среды или с помощью формованных изделий, содержащих биологически активное вещество, таких как, например, полосы, пластинки, ленты, ошейники, ушные метки, ленты для конечностей, приспособление для маркирования.

Энтеральное применение смесей биологически активных веществ осуществляют, например, орально в виде порошка, таблеток, капсул, паст, сиропа (жидкости), гранулированного продукта, оральных растворов, пригодных к употреблению, суспензий и эмульсий, пилюль, медикаментозных добавок к пище или питьевой воде. Дермальное применение осуществляют, например, путем погружения (макания), набрызгивания (распыления) или наливания (разливания и полива участка). Парентеральное применение осуществляют, например, в виде инъекции (внутримышечно, подкожно, внутривенно, внутрибрюшинно) или при помощи имплантатов.

Пригодными препаративными формами являются:

Растворы, как, например, растворы для инъекций, растворы для орального введения, концентраты для орального введения после разбавления, растворы для нанесения на кожу или введения в полости тела, препараты в виде настоев, гели;

эмульсии и суспензии для орального или дермального применения, а также для инъекции; полутвердые препараты;

препараты, в которых смеси биологически активных веществ переработаны в мази или в эмульсии типа масло-в-воде или вода-в-масле;

твердые препараты, такие как, например, порошки, предварительно приготовленные смеси или концентраты, гранулированные вещества, шарики, таблетки, пилюли, капсулы;

аэрозоли и ингаляторы, формованные изделия, содержащие смеси биологически активных веществ.

Растворы для инъекций вводят внутривенно, внутримышечно и подкожно.

Растворы для инъекций получают путем растворения смеси биологически активных веществ в пригодном растворителе и добавления возможных добавок, таких как способствующие растворению агенты, кислоты, основания, буферные соли, антиоксиданты, консерванты. Растворы фильтруют в стерильных условиях и расфасовывают.

В качестве растворителей следует упомянуть физиологически переносимые растворители, такие как вода, спирты, такие как, этанол, бутанол, бензиловый спирт, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, N-метил-пирролидон, а также их смеси.

Смеси биологически активных веществ также могут, в случае необходимости, растворяться в физиологически переносимых растительных или синтетических маслах, пригодных для инъекции.

В качестве способствующих растворению агентов следует упомянуть: растворители, содействующие растворению смеси биологически активных веществ в основном растворителе или предотвращающие их осаждение. Примерами являются поливинилпирролидон, полиоксиэтилированное касторовое масло, полиоксиэтилированный сложный эфир сорбиновой кислоты.

В качестве консервантов следует упомянуть: бензиловый спирт, трихлорбутанол, эфиры n-гидроксибензойной кислоты, н-бутанол.

Оральные растворы применяются непосредственно. Концентраты применяются орально после предварительного разбавления до требуемой концентрации. Оральные растворы и концентраты получают так же, как описано для инъекционных растворов, но при этом можно отказаться от условия стерильности.

Растворы для дермального применения накапывают, намазывают, втирают, набрызгивают или напыляют. Эти растворы изготовляют так же, как описано для инъекционных растворов.

При изготовлении может быть выгодным прибавление загустителя. К загустителям относятся: неорганические загустители, такие как бентонит, коллоидная кремневая кислота, моностеарат алюминия, органические загустители, такие как производные целлюлозы, поливиниловый спирт и его сополимеры, акрилаты и метакрилаты.

Гели наносят или намазывают на кожу или вносят в полости тела. Гели изготовляют путем смешивания растворов, которые приготовляют, как было описано для инъекционных растворов, с таким количеством соответствующего загустителя так, чтобы образовалась прозрачная масса с консистенцией, пригодной для намазывания. В качестве загустителей используются уже описанные выше загустители.

Жидкие препаративные формы наливают или набрызгивают на ограниченную область кожи, при этом биологически активные вещества проникают в кожу и проявляет системную активность.

Жидкие препаративные формы изготавливают путем растворения, суспендирования или эмульгирования биологически активных веществ в подходящих переносимых кожей растворителях или смесях растворителей. В случае необходимости добавляют дополнительные вспомогательные вещества, такие как, например, красители, способствующие всасыванию вещества, антиокислители, светостабилизаторы, адгезивы.

В качестве растворителей следует упомянуть: воду, алкиловые спирты, гликоли, полиэтиленгликоли, полипропиленгликоли, глицерин, ароматические спирты, такие как, например, бензиловый спирт фенилэтанол, феноксиэтанол, сложные эфиры, такие как, например, уксусный эфир, бутилацетат, бензилбензоат, простые эфиры, такие как, например, алкиленгликольалкиловые эфиры, как дипропиленгликольмонометиловый эфир, диэтиленгликольмонобутиловый эфир, кетоны, такие как, например, ацетон, метилэтилкетон, ароматические и/или алифатические углеводороды, растительные или синтетические масла, диметилформамид (ДМФА), диметилацетамид, N-метилпирролидон, 2,2-диметил-4-окси-метилен-1,3-диоксолан.

В качестве красителей могут быть использованы любые разрешенные для применения для животных красители в виде раствора или суспензии.

Вещества, способствующие всасыванию, представляют собой, например, диметилсульфоксид (ДМСО), различные масла, такие как изопропилмиристат, дипропиленгликольпеларгонат, силиконовое масло, сложные эфиры жирных кислот, триглицериды, спирты жирного ряда.

В качестве антиокислителей можно использовать сульфиты или метабисульфиты, такие как, например, метабисульфит калия, аскорбиновая кислота, бутилгидрокситолуол, бутилгидроксианизол, токоферол.

Светостабилизатором является, например, новантисоловая кислота.

В качестве адгезивов можно использовать производные целлюлозы, производные крахмала, полиакрилаты, натуральные полимеры, такие как альгинаты, желатин.

Эмульсии можно применять орально, наносить на кожу или в виде инъекций.

Эмульсии используют в виде либо вода-в-масле, либо масло-в-воде.

Эмульсии приготавливают путем растворения смеси, содержащей биологически активное вещество, в гидрофобной или гидрофильной фазе, после чего фазу гомогенизируют с растворителем другой фазы при помощи подходящих эмульгаторов и, в случае необходимости, дополнительных вспомогательных веществ, таких как красители, вещества, способствующие всасыванию, консерванты, антиокислители, светостабилизаторы, загустители.

В качестве гидрофобной фазы (масло) следует назвать: парафиновое масло, силиконовое масло, натуральные растительные масла, такие как, например, кунжутное, миндальное, касторовое, синтетические триглицериды, такие как, например, триглицерид каприловой/каприновой кислоты, смесь глиглицеридов растительных жирных кислот с длиной цепи C₈-C₁₂ или других специально отобранных природных жирных кислот, смеси неполных глицеридов ненасыщенных или насыщенных жирных кислот, которые могут содержать гидроксильные группы, моно- и диглицериды C₈/C₁₀ жирных кислот.

Сложные эфиры жирных кислот, такие как, например, этилстеарат, ди-н-бутириладипат, сложный гексиловый эфир лауриновой кислоты, дипропиленгликольпеларгонат, сложные эфиры разветвленных жирных кислот со средней длиной цепи с насыщенными спиртами жирного ряда с длиной цепи C₁₆-C₁₈, изопропилмиристат, изопропилпальмитат, сложные эфиры каприловой/каприновой кислоты с насыщенными спиртами жирного ряда с длиной цепи C₁₂-C₁₈, изопропилстеарат, сложные олеиновые эфиры масляной кислоты, сложные дециловые эфиры масляной кислоты, этилолеат, сложные этиловые эфиры молочной кислоты, воскоподобные эфиры жирных кислот, такие как, например, искусственный жир, выделенный из утиных желез, дибутилфталат, сложные диизопропиловые эфиры адипиновой кислоты, последние из двух применяются в виде смеси эфиров, и другие.

К спиртам жирного ряда относятся изо-тридециловый спирт, 2-октилдодеканол, цетилстериловый спирт, олеиловый спирт.

К жирным кислотам относятся, например, олеиновая кислота или ее смеси.

В качестве гидрофильной фазы следует назвать: воду, спирты, такие как, например, пропиленгликоль, глицерин, сорбитол или их смеси.

В качестве эмульгаторов следует назвать: неионогенные поверхностно-активные вещества (ПАВ), например полиоксиэтилорованное касторовое масло, полиоксиэтилированные сорбитанмоноолеат, сорбитанмоностеарат, глицеринмоностеарат, полиоксиэтилстеарат, алкилфенольный полигликолевый эфир;

амфолитические ПАВ, такие как, например, ди-натрий-N-лаурил-р-иминодипропионат или лецитин;

анионоактивные ПАВ, такие как, например, натрий лаурилсульфат, эфиросульфаты спиртов жирного ряда, моноэтаноламиновая соль полигликольэфирсодержащего моно-/диалкилового эфира ортофосфорной кислоты; катионоактивные ПАВ, такие как, например, цетилтриметиламмоний хлорид.

В качестве дополнительных вспомогательных веществ следует назвать: повышающие вязкость и стабилизирующие эмульсии вещества, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза и другие производные целлюлозы и крахмала, полиакрилаты, альгинаты, желатин, гуммиарабик, поливинилпиролидон, поливиниловый спирт, сополимеры метилвинилового эфира и ангидрида малеиновой кислоты, полиэтиленгликоли, воски, коллоидная кремниевая кислота или смеси названных веществ.

Суспензии можно применять орально, дермально или в виде инъекций. Их получают путем суспендирования биологически активного вещества в жидком носителе, в случае необходимости, с добавлением дополнительных вспомогательных веществ, таких как, например, смачиватели, красители, вещества, способствующие всасыванию консерванты, антиокислители и светостабилизаторы.

В качестве жидких носителей следует назвать любые гомогенные растворители и смеси таких растворителей.

В качестве смачивателей (диспергаторов) следует назвать приведенные выше поверхностно-активные вещества (ПАВ).

В качестве дополнительных вспомогательных веществ следует назвать приведенные выше дополнительные вещества.

Полутвердые препараты (пасты) можно применять орально или путем нанесения на кожу. Они отличаются от выше описанных суспензий и эмульсий только своей более высокой вязкостью.

Для приготовления твердых препаративных форм биологически активное вещество смешивают с подходящими носителями, в случае необходимости, с добавлением вспомогательных веществ и придают желаемую форму.

В качестве носителей следует назвать физиологически переносимые твердые инертные вещества. В качестве таковых служат органические и неорганические вещества. К неорганическим веществам относятся, например, поваренная соль, карбонаты, такие как, например, карбонат кальция, гидрокарбонаты, окись алюминия, кремниевая кислота, глинозем, осажденный или коллоидный диоксид кремния, фосфаты.

Органические вещества представляют собой сахар, целлюлозу, пищевые продукты и корма, такие как, например, порошкообразное молоко, мясокостная мука, мука из зерна и зерновая дерть, крахмал.

В качестве вспомогательных веществ можно использовать упомянутые выше консерванты, антиокислители, красители.

Пригодными дополнительными вспомогательными веществами являются смазки и смазывающие вещества, такие как, например, стеарат магния, стеариновая кислота, тальк, бентонит, дестуктурирующие вещества, такие как, например, крахмал или поперечносшитый поливинилпирролидон, связующие, такие как, например, крахмал, желатин или линейный поливинилпирролидон, а также сухие связующие, такие как, например, микрокристаллическая целлюлоза.

Биологически активные вещества могут быть представлены в препаративных формах также в смеси с другими веществами, проявляющими синергизм, или с другими биологически активными веществами, которые имеют эффективность против патогенных эндопаразитов. Такими биологически активными веществами являются L-2,3,5,6-тетрагидро-6-фенил-имидазотиазол, бензимидазолкарбамат, пирантел.

Готовые к применению препаративные формы содержат биологически активное вещество в концентрации от 10 ч./милл. до 20 вес.%, предпочтительно 0,1–10 вес.%.

Препаративные формы, которые разбавляют перед применением, содержат биологически активное вещество в концентрациях 0,5-90 вес.%, предпочтительно 5-50 вес.%.

В общем, оказалось выгодным применять средство по изобретению в количестве, примерно, 10-100 мг биологически активного вещества на кг массы тела в день для того, чтобы добиться эффективного результата. Предпочтительно применять 10-50 мг биологически активного вещества на кг массы тела.

В среднем, общее весовое содержание пиперазина к депсипептиду составляет 50:1-1000:1, предпочтительно 100:1-1000:1, более предпочтительно 250:1-1000:1, наиболее предпочтительно 250:1-1000:1.

В биологических примерах в качестве “депсипептида I” используется соединение формулы

известное из WO 93/19053.

Биологические тесты проводили согласно известному способу (Plant et. Al. Pesticide Science, 1996, 48, s.351ff).

Биологические примеры

Примеры получения

Примеры получения циклического депсипептида с 24 кольцевыми атомами.

1. Получение соединений формулы (I)

К раствору соединения формулы (II) (0,104 ммоль) и сильного основания (0,258 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляют при температуре 0°С ВОР-Сl (0,124 ммоль) и перемешивают в течение 24 часов при комнатной температуре. После этого добавляют то же самое количество ВОР-Сl и основания и перемешивают далее в течение 24 часов. Раствор дважды промывают раствором бикарбоната натрия, сушат над сульфатом натрия и выпаривают. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии с элюентом циклогексан: этилацетат = 2:1. Получают соединение формулы (I), в котором заместители имеют значения, приведенные в Таблице 3.

2. Получение соединений формулы (II)

Раствор незамкнутых октадепсипептидов формула (III) (1,222 ммоль) в этаноле гидрируют (примерно в течение 2 часов) в присутствии Pd(OH)₂/C (20%, 200 мг) до окончания поглощения водорода. После отделения катализатора выпадает чистое соединение формулы (II), которое далее применяется без дополнительной очистки. Согласно вышеописанному получают соединения формулы (II), в которых заместители имеют значения, приведенные в Таблице 4.

3. Получение соединений формулы (III)

Через раствор трет.-бутилового эфира формулы (IV) (1,609 ммоль) в дихлорметане (40 мл) пропускают при 0°С в течение 1 часа газообразный НСl. После этого реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 12 часов. Раствор помещают на роторный испаритель и высушивают при высоком вакууме. Остаток применяют без дальнейшей очистки.

Аналогично получают соединения формулы (III) в которых заместители имеют значения, приведенные в Таблице 5.

4. Получение соединений формулы (IV)

К раствору тетрадепсипептидов формул (VI) и (V) (каждый ни 2,52 ммоль) в дихлорметане (15 мл) добавляют при 0°С раствор этилдиизо-пропиламина (0,912 ммоль) и ВОР-Сl (0,438 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа при 0°С и в течение 1,5 часов при комнатной температуре, затем разбавляют 20 мл дихлорметана, дважды промывают небольшими порциями воды, высушивают над Na₂SO₄ и упаривают. Остаток очищают на кизельгеле с элюентом циклогексан: трет.-ВuОМе (метилтретбутиловый эфир) = 2:1.

5. Получение соединение формулы (V)

Через раствор тетрадепсипептида с формулой (VII) (2,848 ммоль) в дихлорметане (50 мл) пропускают в течение 2 часов при 0°С газообразный НСl. После этого перемешивают в течение 8 часов при комнатной температуре, упаривают и сушат при высоком вакууме. Остаток применяют без дальнейшей очистки.

6. Получение соединение формулы (VI)

Раствор тетрадепсипептида с формулой (VII) (9,53 ммоль) в этаноле (37 мл) смешивают с Pd(OH)₂/C (20%, 0,6 г) и гидрируют примерно в течение 3 часов при комнатной температуре и нормальном давлении. Реакционную смесь фильтруют, упаривают и остаток разделяют на кизельгеле с элюентом трет.-ВuОМе: циклогексан: этанол = 1:1:0,5.

7. Получение соединение формулы (VII)

Охлажденный до 0°С раствор дидепсипептида формулы (IX) (22,9 ммоль) и дидепсипептида формулы (VIIIa) (27,5 ммоль) в дихлорметане (80 мл) смешивают с диизопропилэтиламином (57,3 ммиль) и ВОР-Сl (29,8 ммоль) и перемешивают в течение 1 часа при 0°С и в течение 1 часа при комнатной температуре. После отделения осадка раствор разбавляют дихлорметаном, трижды промывают небольшими порциями воды, сушат сульфатом натрия и упаривают. Остаток разделяют на кизельгеле с элюентом циклогексан: этилацетат = 15:1.

Дополнительные опыты

Опыты проводились согласно известному способу (Plant et. Al. Pesticide Science, 1996, 48, S.251ff). Для оценки результатов опытатов применялась шкала от 0 до 100%, при этом 0% означает отсутствие действия активного вещества, а 100% означает уничтожение всех паразитов.

Таблица 6 Синергетический эффект пиперазина и депсипептида PF 1022-221 против Trichinella spiralis in vitro
			Концентрация (мкг/мл)			Действие (% уничтожения нематод)
Пиперазин			100 500			30 0
Депсипептид			0,01 0,001			40 0
Пиперазин/Депсипептид			1000/0,01			75
Пиперазин/Депсипептид			500/0,01			75
Таблица 7 Синергетический эффект пиперазина и депсипептида I против нематод у мышей
Heterakis spumosa	Доза, мг/кг	Действие (% уничтожения нематод)		Nematospiroid es dubius	Доза, мг/кг		Действие (% уничтожения нематод)
Пиперазин	4×100	5		Пиперазин	4×100		51
Депсипептид I	4×1	8		Депсипептид I	4×0,5		42
Пиперазин/ Депсипептид I	4×100/4×1	62		Пиперазин/ Депсипептид I	4×1000/4×1		99

Claims

1. Эндопаразитицидное средство, содержащее циклический депсипептид общей формулы (I)

в которой

R¹, R², R¹¹ и R¹² независимо друг от друга означают С₁-С₈-алкил, C₁-С₈-галогеналкил, С₃-С₆-циклоалкил, аралкил, арил,

карбоксиамидом,

имидазолилом, индолилом, гуанидино, -SH, или С₁-С₄-алкилтио, а также арил или аралкил, которые могут быть замещены галогеном, гидроксилом, С₁-С₄-алкилом, С₁-С₄-алкоксилом, морфолинилом,

R⁴, R⁶, R⁸ и R¹⁰ независимо друг от друга означают водород, неразветвленный C₁-C₅-алкил, С₂-С₆-алкенил, С₃-С₇-циклоалкил, которые могут быть замещены гидроксилом, С₁-С₄-алкокси, карбоксилом, карбоксиамидом, имидазолилом, индолилом, гуанидино, SH или С₁-С₄-алкилтио, а также арил или аралкил, которые могут быть замещены галогеном, гидроксилом, С₁-С₄-алкилом, С₁-С₄-алкоксилом,

их оптический изомер или рацемат, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит пиперазин формулы (X)

в которой R¹³ и R¹⁴ - независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водорода, соответственно незамещенные или замещенные алкил, циклоалкил, арил, гетероарил, а также –CONR¹⁵R¹⁶или -CSNR¹⁵R¹⁶, где R¹⁵ и R¹⁶, - независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные алкил или циклоалкил,

при этом циклический депсипептид и пиперазин взяты в синергетически эффективном количестве.

2. Эндопаразитицидное средство по п.1, отличающееся тем, что пиперазин и циклический депсипептид взяты в массовом соотношении 50:1÷1000:1.

3. Эндопаразитицидное средство по п.1, отличающееся тем, что в качестве циклического депсипептида содержит соединения формулы (I), в которой R¹, R², R¹¹ и R¹² независимо друг от друга означают метил, этил, пропил, изопропил, н-, втор- и трет-бутил или фенил, незамещенный или замещенный галогеном, C₁-С₄-алкилом, гидроксилом, С₁-С₄-алкоксилом, а также бензил или фенилэтил, которые могут быть замещены указанными для фенила заместителями, и R³-R¹⁰ имеют указанные в п.1 значения.

4. Эндопаразитицидное средство по п.1, отличающееся тем, что в качестве циклического депсипептида содержит соединения формулы (I), в которой R¹, R², R¹¹ и R¹² независимо друг от друга означают метил, этил, пропил, изопропил или н-, втор-, трет-бутил, R³, R⁵, R⁷ и R⁹ означают водород, неразветвленные или разветвленные C₁-С₈-алкил, в частности метил, пропил, изопропил, н-, втор-, трет-бутил, незамещенные или замещенные C₁-C₄-алкокси, в частности метокси, этокси, имидазолилом, индолилом или С₁-С₄-алкилтио, в частности метилтио, этилтио, а также фенил, бензил или фенэтил, которые могут быть замещены галогеном, в частности хлором, или морфолинилом, R⁴, R⁶, R⁸ и R¹⁰ независимо друг от друга означают водород, метил, этил, н-пропил, н-бутил, винил, циклогексил, которые могут быть замещены метокси, этокси, имидазолилом, индолилом, метилтио, этилтио, а также изопропил, вторичный бутил, а также фенил, бензил или фенил-этил, которые могут быть замещены галогеном.

5. Эндопаразитицидное средство по одному из пп.1-4, отличающееся тем, что содержит пиперазин формулы (X), в которой R¹³ и R¹⁴ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные C₁-C₆-алкил, С₃-С₈-циклоалкил, а также –CONR¹⁵R¹⁶ или -CSNR¹⁵R¹⁶, где R¹⁵ и R¹⁶ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные C₁-С₆-алкил или С₃-С₈-циклоалкил.

6. Эндопаразитицидное средство по п.5, отличающееся тем, что содержит пиперазин формулы (X), в которой R¹³ и R¹⁴ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные С₁-С₄-алкил, С₆-циклоалкил, а также –CONR¹⁵R¹⁶ или -CSNR¹⁵R¹⁶, где R¹⁵ и R¹⁶ независимо друг от друга одинаковые или различные заместители из группы водород, соответственно незамещенные или замещенные С₁-С₄-алкил, С₆-циклоалкил.