RU2184733C2 - Замещенные пиперидин-2,6-дионы и способы их получения - Google Patents
Замещенные пиперидин-2,6-дионы и способы их получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2184733C2 RU2184733C2 RU98103164/04A RU98103164A RU2184733C2 RU 2184733 C2 RU2184733 C2 RU 2184733C2 RU 98103164/04 A RU98103164/04 A RU 98103164/04A RU 98103164 A RU98103164 A RU 98103164A RU 2184733 C2 RU2184733 C2 RU 2184733C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- substituted
- formula
- synthesis
- diones
- group
- Prior art date
Links
- 0 CC(C(*)(*)C(C1)=O)C1=O Chemical compound CC(C(*)(*)C(C1)=O)C1=O 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Abstract
Изобретение относится к новым замещенным пиперидин-2,6-дионам формулы (I)
где Z - -C(R1R2)-CH2 или -C(R1)=CH-; R1 - фталимид, когда Z - -C(R1R2)-CH2-, или одно- либо двукратно замещенный гидрокси-, метокси- или аминогруппами фталимидный радикал, когда Z обозначает -C(R1)=CH-, R2 - водород или C1-6 алкильная группа; R3 - водород, С1-6 алкильная группа или ароматическая кольцевая система; R4 - C1-6 алкил или ароматическое кольцо. Соединения формулы (I) обладают ингибирующим действием на высвобождение TNF-α, а также на индуцированный антигеном синтез интерлейкина 2. Соединения формулы (I) могут быть получены конденсацией фталевого ангидрида с замещенной глутаминовой кислотой с последующей циклизацией полученного продукта и переводом его в имид. Другой способ получения соединений формулы (I) заключается в конденсации фталевого ангидрида с замещенным 3-аминоглутаконимидом или 5-замещенным 3-аминоглутаримидом. 3 с. и 2 з.п. ф-лы, 1 табл.
Description
Изобретение относится к аналогам талидомида из класса пиперидин-2,6-дионов, способу их получения и их применению в лекарственных средствах.
При патогенезе синдрома реакции "трансплантат против хозяина", рассеянного склероза, отторжения трансплантата, афтозного стоматита, эритемы нодозной лепроматозной, болезни Бека, ревматоидного артрита и целого ряда других заболеваний, сопровождаемых воспалительными явлениями, чрезмерное образование являющегося цитокином фактора-α некроза опухоли (TNF-α, Tumor-Necrosis-Factor-α) играет главную роль. Один из подходов в терапии этих болезней состоит в целенаправленном подавлении высвобождения ΤΝF-α введением в качестве активных веществ иммунодепрессантов или модуляторов, например дексаметазона, пентоксифиллина или талидомида.
Однако среди показаний к применению следует проводить различия между такими, которые требуют общей иммуносупрессии, и такими, при которых требуется в полной мере учитывать все достоинства и недостатки иммуносупрессии. Было установлено, что при лечении афтозного стоматита талидомид превосходит классические иммунодепрессанты. Другими примерами заболеваний, в которых талидомид показал хорошую эффективность, не приводя к общей иммуносупрессии, являются кожная красная волчанка, (H+G 69, 816-822 (1994)), гангренозная пиодермия и орогенитальные язвы при болезни Бехчета (The Lancet, 20.05.89, 1093-1095). Патогенными факторами этих ограниченных кожей и слизистыми оболочками поражений являются эндогенные медиаторы с действием на эндотелий и циркулирующие лейкоциты. Под влиянием ΤΝF-α и других цитокинов адгезивность эндотелия по отношению к лейкоцитам фокально возрастает, что решающим образом способствует образованию васкулитидов. При системных картинах болезни действие самого талидомида на кожу и слизистые оболочки ограничено, что (дополнительно) требует иммуносупрессии. Примерами этого является системная красная волчанка, которая наряду с кожными явлениями вызывает также опасные для жизни изменения внутренних сосудов, в частности почек, лепрареакция типа II с поражением глаз и/или суставов, а также болезнь Бехчета с поражением глаз и/или суставов.
Вещества, которые аналогично талидомиду подавляют это изменение эндотелия, но одновременно полностью или частично блокируют реакции специфической клеточной иммунной защиты, могут способствовать значительному прогрессу в терапии названных системных картин болезни. Ключевым информационным веществом клеточного иммунного ответа является интерлейкин 2, от которого зависит пролиферация антигенспецифичных лимфоцитов.
Поэтому при разработке новых лекарственных средств ставится цель в полной мере использовать противовоспалительные свойства талидомида совместно с иммуносупрессивными активными компонентами, которыми талидомид при его индивидуальном клиническом применении не обладает.
В основу изобретения была положена задача создать аналоги талидомида из класса пиперидин-2,6-дионов, подавляющих обусловленное воспалением высвобождение ΤΝF-α, а также индуцированный антигеном синтез интерлейкина 2.
Было установлено, что указанным требованиям удовлетворяют предлагаемые согласно изобретению соединения.
Таким образом, объектом настоящего изобретения являются замещенные в положении 3 и 5 пиперидин-2,6-дионы общей формулы (I)
где Z обозначает одну из групп:
причем атом углерода с заместителем R1 связан по карбонильной группе, и
где R1 обозначает фталимидный радикал (когда Z обозначает -C(R1R2)-CH2-) или одно- либо двукратно замещенный гидрокси-, метокси- или аминогруппами фталимидный радикал (когда Z обозначает -C(R1)=СН-),
R2 обозначает водород или С1-6 алкил (линейный или разветвленный),
R3 обозначает водород, С1-6 алкильную группу (линейную или разветвленную) или ароматическую либо гетероароматическую кольцевую систему и
R4 обозначает С1-6 алкильную группу (линейную или разветвленную) или ароматическую либо гетероароматическую кольцевую систему.
где Z обозначает одну из групп:
причем атом углерода с заместителем R1 связан по карбонильной группе, и
где R1 обозначает фталимидный радикал (когда Z обозначает -C(R1R2)-CH2-) или одно- либо двукратно замещенный гидрокси-, метокси- или аминогруппами фталимидный радикал (когда Z обозначает -C(R1)=СН-),
R2 обозначает водород или С1-6 алкил (линейный или разветвленный),
R3 обозначает водород, С1-6 алкильную группу (линейную или разветвленную) или ароматическую либо гетероароматическую кольцевую систему и
R4 обозначает С1-6 алкильную группу (линейную или разветвленную) или ароматическую либо гетероароматическую кольцевую систему.
Из пиперидин-2,6-дионов формулы (I), в которой Z обозначает -C(R1R2)-CH2-, R1 обозначает фталимид и R2 и R3 обозначают водород, наиболее предпочтительно соединение, в котором R4 является фенилом.
Из пиперидин-2,6-дионов формулы (I), в которой Z обозначает -C(R1)=CH-, R3 обозначает этил и R4 обозначает фенил, наиболее предпочтительно соединение, в котором R1 является 3,4-диметоксифталимидом.
Изобретение далее относится к способу получения аналогов талидомида из класса пиперидин-2,6-дионов общей формулы (I).
Соединения общей формулы (I), в которой Z обозначает -C(R1R2)-СН2-, могут быть получены конденсацией фталевого ангидрида с помощью замещенной глутаминовой кислоты, например 4-фенилглутаминовой кислоты или 4-метилглутаминовой кислоты, в органическом растворителе, предпочтительно пиридине, циклизацией продукта в ацетангидриде и последующим переводом в имид. Превращение ангидрида в имид при этом осуществляется плавлением в присутствии мочевины.
Эти целевые соединения формулы (I) могут быть получены также взаимодействием фталевого ангидрида с 5-замещенным 3-аминоглутаримидом, предпочтительно путем нагревания в уксусной кислоте.
Соединения общей формулы (I), в которой Z обозначает -C(R1)=СН-, могут быть получены конденсацией замещенного фталевого ангидрида, например 3,4-диметоксифталевого ангидрида, с помощью 5-замещенных 3-амино-3,4-дегидропиперидин-2,6-дионов, таких как, например 3-амино-5-этил-5-фенилглутаконимид, в органическом растворителе, например, в уксусной кислоте.
Пример 1. 2-(5-Метил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-дион (1)
2,00 г (11 ммоль) 4-Метилглутаминовой кислоты и 1,95 г (13 ммоль) фталевого ангидрида нагревают с обратным холодильником в 15 мл сухого пиридина в течение 6 ч. После отгонки растворителя остаток нагревают в течение 1 ч в 10 мл ацетангидрида до кипения. Выпавшее в осадок при охлаждении твердое вещество подвергают вакуум-фильтрации и фильтрат концентрируют. После смешения фильтрата с простым эфиром образовавшийся осадок подвергают вакуум-фильтрации и объединенные осадки перекристаллизовывают из абсолютного толуола. 2,00 г (7 ммоль) кристаллизата и 0,23 г (3,8 ммоль) мочевины тщательно перемешивают и расплавляют в масляной бане при приблизительно 200oС в течение 30 мин. Застывший расплав быстро нагревают до кипения последовательно с 4 мл ацетангидрида и 6 мл этанола. Выпавшее в осадок твердое вещество подвергают вакуум-фильтрации и перекристаллизовывают из смеси ДМФ/вода. Таким путем получают 1,35 г (67% от теории) 2-(5-метил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-диона (1) с температурой плавления 270-272oС.
2,00 г (11 ммоль) 4-Метилглутаминовой кислоты и 1,95 г (13 ммоль) фталевого ангидрида нагревают с обратным холодильником в 15 мл сухого пиридина в течение 6 ч. После отгонки растворителя остаток нагревают в течение 1 ч в 10 мл ацетангидрида до кипения. Выпавшее в осадок при охлаждении твердое вещество подвергают вакуум-фильтрации и фильтрат концентрируют. После смешения фильтрата с простым эфиром образовавшийся осадок подвергают вакуум-фильтрации и объединенные осадки перекристаллизовывают из абсолютного толуола. 2,00 г (7 ммоль) кристаллизата и 0,23 г (3,8 ммоль) мочевины тщательно перемешивают и расплавляют в масляной бане при приблизительно 200oС в течение 30 мин. Застывший расплав быстро нагревают до кипения последовательно с 4 мл ацетангидрида и 6 мл этанола. Выпавшее в осадок твердое вещество подвергают вакуум-фильтрации и перекристаллизовывают из смеси ДМФ/вода. Таким путем получают 1,35 г (67% от теории) 2-(5-метил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-диона (1) с температурой плавления 270-272oС.
Пример 2. 2-(5-Фенил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-дион (2)
3,00 г (12 ммоль) 4-Фенилглутаминовой кислоты и 2,12 г (14 ммоль) фталевого ангидрида нагревают с обратным холодильником в 40 мл сухого пиридина в течение 6 ч. После отгонки растворителя остаток растворяют в 50 мл 5%-ной НС1 и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой, обесцвечивают активированным углем и сушат над сульфатом натрия. После отгонки растворителя остаток нагревают с обратным холодильником в течение 1 ч в 40 мл ацетангидрида. Затем раствор концентрируют и смешивают с простым эфиром. Выпавший осадок подвергают вакуум-фильтрации и перекристаллизовывают из сухого толуола. 2,00 г (6 ммоль) кристаллизата и 0,19 г (3 ммоль) мочевины расплавляют в масляной бане при приблизительно 200oС в течение 30 мин. Застывший расплав быстро нагревают до кипения последовательно с 4 мл ацетангидрида и 8 мл этанола. Выпавшее в осадок твердое вещество перекристаллизовывают из смеси ДМФ/вода. Таким путем получают 0,80 г (40% от теории) 2-(5-фенил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-диона (2) с температурой плавления 228-231oС.
3,00 г (12 ммоль) 4-Фенилглутаминовой кислоты и 2,12 г (14 ммоль) фталевого ангидрида нагревают с обратным холодильником в 40 мл сухого пиридина в течение 6 ч. После отгонки растворителя остаток растворяют в 50 мл 5%-ной НС1 и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой, обесцвечивают активированным углем и сушат над сульфатом натрия. После отгонки растворителя остаток нагревают с обратным холодильником в течение 1 ч в 40 мл ацетангидрида. Затем раствор концентрируют и смешивают с простым эфиром. Выпавший осадок подвергают вакуум-фильтрации и перекристаллизовывают из сухого толуола. 2,00 г (6 ммоль) кристаллизата и 0,19 г (3 ммоль) мочевины расплавляют в масляной бане при приблизительно 200oС в течение 30 мин. Застывший расплав быстро нагревают до кипения последовательно с 4 мл ацетангидрида и 8 мл этанола. Выпавшее в осадок твердое вещество перекристаллизовывают из смеси ДМФ/вода. Таким путем получают 0,80 г (40% от теории) 2-(5-фенил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-диона (2) с температурой плавления 228-231oС.
Пример 3. 2-(5-Этил-5-фенил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-дион (3)
1,00 г (4 ммоль) 3-Амино-5-этил-5-фенилглутаконимида растворяют в 40 мл безводного этанола, раствор смешивают с 0,1 г палладия на угле (10% Pd/C) и перемешивают в атмосфере водорода в течение 8,5 ч. Затем катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют досуха. Остаток нагревают с обратным холодильником с 0,70 г (5 ммоль) фталевого ангидрида в 40 мл ледяного уксуса в течение 4 ч. После отгонки растворителя остаток перекристаллизовывают из этанола. Таким путем получают 0,99 г (63% от теории) 2-(5-этил-5-фенил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-диона (3) с точкой плавления 174-177oС.
1,00 г (4 ммоль) 3-Амино-5-этил-5-фенилглутаконимида растворяют в 40 мл безводного этанола, раствор смешивают с 0,1 г палладия на угле (10% Pd/C) и перемешивают в атмосфере водорода в течение 8,5 ч. Затем катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют досуха. Остаток нагревают с обратным холодильником с 0,70 г (5 ммоль) фталевого ангидрида в 40 мл ледяного уксуса в течение 4 ч. После отгонки растворителя остаток перекристаллизовывают из этанола. Таким путем получают 0,99 г (63% от теории) 2-(5-этил-5-фенил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-диона (3) с точкой плавления 174-177oС.
Пример 4. 2-(5-Этил-5-фенил-2,6-диоксо-1,2,5,6-тетрагидропиридин-3-ил)-4,5-диметокси-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-дион (4)
0,45 г (2 ммоль) 3-амино-5-этил-5-фенилглутаконимида и 0,45 г (2 ммоль) 4,5-диметоксифталевого ангидрида нагревают с обратным холодильником в 15 мл ледяного уксуса в течение 5 ч. Затем концентрируют досуха и остаток перекристаллизовывают из этанола. Таким путем получают 0,55 г (67% от теории) 2-(5-этил-5-фенил-2,6-диоксо-1,2,5,6-тетрагидропиперидин-3-ил)-4,5-диметокси-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-диона (4) с температурой плавления 203-205oС.
0,45 г (2 ммоль) 3-амино-5-этил-5-фенилглутаконимида и 0,45 г (2 ммоль) 4,5-диметоксифталевого ангидрида нагревают с обратным холодильником в 15 мл ледяного уксуса в течение 5 ч. Затем концентрируют досуха и остаток перекристаллизовывают из этанола. Таким путем получают 0,55 г (67% от теории) 2-(5-этил-5-фенил-2,6-диоксо-1,2,5,6-тетрагидропиперидин-3-ил)-4,5-диметокси-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-1,3-диона (4) с температурой плавления 203-205oС.
Соединения по изобретению безопасны с токсикологической точки зрения и поэтому пригодны для использования в качестве фармацевтически активных веществ. Соответственно этому изобретение также относится к применению аналогов талидомида из класса пиперидин-2,6-дионов формулы (I) в качестве активных веществ в лекарственных средствах, предпочтительно в качестве супрессантов для обусловленного воспалением высвобождения ΤΝF-α, a также индуцированного антигеном синтеза интерлейкина 2.
Лекарственные средства по изобретению наряду по меньшей мере с одним соединением общей формулы (I) содержат носители, наполнители, растворители, разбавители, красители и/или связующие. Выбор вспомогательных веществ, а также применяемые количества зависят от метода введения, а именно, должно ли лекарство применяться орально, внутривенно, внутрибрюшинно, внутрикожно, внутримышечно, назально, буккально или локально. Для орального применения пригодны препараты в форме таблеток, жевательных таблеток, драже, капсул, гранул, капель, микстур или сиропов, для парентерального, местного и ингаляционного применения пригодны растворы, суспензии, легко реконституируемые сухие препараты, а также аэрозоли. Примерами пригодных форм для чрескожного применения являются предлагаемые соединения в депо в растворенной форме, в пленке-носителе или в пластыре, при необходимости с добавкой средств, способствующих проникновению через кожу. Высвобождение предлагаемых соединений в организме из препаративных форм, применяемых орально или чрескожно, может происходить пролонгированно.
Назначаемая пациенту доза активных веществ зависит от веса пациента, метода введения, показания и степени тяжести заболевания. Обычно применяемая доза составляет от 1 до 150 мг/кг по меньшей мере одного аналога талидомида формулы (I).
Фармакологические исследования
Высвобождение ΤΝF-α может быть исследовано in vitro на мононуклеарных клетках периферической крови человека (Т-лимфоциты, В-лимфоциты и моноциты) после стимуляции липополисахаридом (ЛПС). ЛПС является составной частью стенки бактериальной клетки и стимулирует моноциты и макрофаги.
Высвобождение ΤΝF-α может быть исследовано in vitro на мононуклеарных клетках периферической крови человека (Т-лимфоциты, В-лимфоциты и моноциты) после стимуляции липополисахаридом (ЛПС). ЛПС является составной частью стенки бактериальной клетки и стимулирует моноциты и макрофаги.
Наряду со стимуляцией с помощью ЛПС высвобождение ΤΝF-α может также провоцироваться стимуляцией мононуклеарных клеток периферической крови человека специфическими в отношении Т-лимфоцитов моноклональными антителами к активирующим антигенам (антиСD2-антиСD28) или бактериальным суперантигеном токсином-1, вырабатываемым при токсическом шоке (Toxic Shock Syndrome Toxin-1 или TSST-1). Помимо высвобождения ΤΝF-α эти стимуляторы приводят, в частности, к образованию интерлейкина-2 (IL-2).
Стимуляция ЛПС мононуклеарных клеток: действие на ΤΝF-α
Высвобождение ΤΝF-α может быть исследовано in vitro на мононуклеарных клетках периферической крови человека, т.е. Т-лимфоцитах, В-лимфоцитах и моноцитах, после стимуляции липополисахаридом (ЛПС). ЛПС является составной частью стенки бактериальной клетки и стимулирует моноциты и макрофаги.
Высвобождение ΤΝF-α может быть исследовано in vitro на мононуклеарных клетках периферической крови человека, т.е. Т-лимфоцитах, В-лимфоцитах и моноцитах, после стимуляции липополисахаридом (ЛПС). ЛПС является составной частью стенки бактериальной клетки и стимулирует моноциты и макрофаги.
Мононуклеарные клетки получали из гепаринизированной крови по крайней мере трех добровольных доноров. С этой целью по 20 мл крови фракционировали по известной методике в градиентах плотности с использованием фиколл-пак (Ficoll-Paque). Затем клетки собирали и трижды промывали клеточной культуральный средой. Используемая клеточная культуральная среда состояла из среды RPMI 1640, дополненной 2 мМ глутамином (фирма Life Technologies, Эггенштейн), 10%-ной фетальной телячьей сывороткой (фирма Life Technologies), 50 мкг/мл стрептомицина (фирма Sigma, Дейзенхофен), 50 МЕ/мл пенициллина (фирма Sigma) и 100 мкМ β-меркаптоэтанолом (фирма Merck, Дармштадт). Затем мононуклеарные клетки вносили в 15 мл клеточной культуральной среды и полученную смесь распределяли порциями по 1 мл по стерильным инкубационным 24-луночным планшетам (фирма Sigma). К 1-миллилитровым порциям смеси добавляли соответственно по 1 мкл диметилсульфоксида (ДМСО, фирма Merck) или по 1 мкл раствора тестируемого вещества (в ДМСО; конечные концентрации в тесте: 0,5; 5; 12,5 и 50 мкг/мл) и смеси инкубировали в течение одного часа в инкубаторном шкафу в атмосфере СО2 (5% СО2, 90%-ная влажность воздуха). Затем добавляли, за исключением контроля, соответственно по 2,5 мкг ЛПС (Е. coli 0127: В8; фирма Sigma, Дейзенхофен). Инкубацию культур продолжали еще в течение 20 ч. Концентрацию ΤΝF-α в над осадочной жидкости культуры клеток определяли после окончания инкубации с помощью коммерческого набора для твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA-анализ; фирма Boehringer-Mannheim). На основе данных, полученных для не обработанных активным веществом контрольных смесей и инкубированных тестируемыми соединениями смесей, рассчитывали степень ингибирования ΤΝF-α. С помощью прямой регрессии определяли концентрации, обеспечивающие 50%-ное ингибирование высвобождения ΤΝF-α (значения IC50).
В таблице представлено ингибирующее влияние соединений согласно изобретению на индуцированное липополисахаридом высвобождение ΤΝF-α.
Стимуляция Т-лимфоцитов: ингибирование IL-2
Высвобождение интерлейкина-2 может быть исследовано путем стимуляции in vitro мононуклеарных клеток периферической крови человека, содержащей наряду с Т-лимфоцитами также В-лимфоциты и моноциты. Благодаря стимуляции поликлонов через постоянные эпитопы рецептора Т-лимфоцитов или так называемые добавочные сигнальные молекулы клеточной поверхности получают более показательные данные измерений по сравнению со стимуляцией антигенами отдельных малых популяций Т-лимфоцитов. Применяют комбинацию двух таких добавочных сигналов, а именно тех, воздействия которых опосредованы поверхностными молекулами CD2 и CD28.
Стимуляция Т-лимфоцитов: ингибирование IL-2
Высвобождение интерлейкина-2 может быть исследовано путем стимуляции in vitro мононуклеарных клеток периферической крови человека, содержащей наряду с Т-лимфоцитами также В-лимфоциты и моноциты. Благодаря стимуляции поликлонов через постоянные эпитопы рецептора Т-лимфоцитов или так называемые добавочные сигнальные молекулы клеточной поверхности получают более показательные данные измерений по сравнению со стимуляцией антигенами отдельных малых популяций Т-лимфоцитов. Применяют комбинацию двух таких добавочных сигналов, а именно тех, воздействия которых опосредованы поверхностными молекулами CD2 и CD28.
Мононуклеарные клетки получали из гепаринизированной крови по крайней мере трех добровольных доноров. С этой целью по 20 мл крови фракционировали по известной методике в градиентах плотности с использованием фиколл-пак (Ficoll-Paque). Затем клетки собирали и трижды промывали клеточной культуральный средой. Используемая клеточная культуральная среда состояла из среды RPMI 1640, дополненной 2 мМ глутамином (фирма Life Technologies, Эггенштейн), 10%-ной фетальной телячьей сывороткой (фирма Life Technologies), 50 мкг/мл стрептомицина (фирма Sigma, Дейзенхофен), 50 МЕ/мл пенициллина (фирма Sigma) и 100 мкМ β-меркаптоэтанолом (фирма Merck, Дармштадт). Затем мононуклеарные клетки вносили в 15 мл клеточной культуральной среды и полученную смесь распределяли порциями по 1 мл по стерильным инкубационным 24-луночным планшетам (фирма Sigma). К 1-миллилитровым порциям смеси добавляли соответственно по 1 мкл диметилсульфоксида (ДМСО, фирма Merck) или по 1 мкл раствора тестируемого вещества (в ДМСО; конечные концентрации в тесте: 0,5; 5; 12,5 и 50 мкг/мл) и смеси инкубировали в течение одного часа в инкубаторном шкафу в атмосфере СО2 (5% СО2, 90%-ная влажность воздуха). Затем добавляли, за исключением контроля, соответственно по 0,1 мкг/мл моноклинальных антител (Клон AICD2.M1, предоставлен проф. д-ром Мойером; анти-СD28, получен от CLB, Амстердам). Инкубацию культур продолжали еще в течение 20 ч. Концентрацию IL-2 в надосадочной жидкости культуры клеток определяли после окончания инкубации с помощью набора для ELISA-анализа (фирма Boehringer-Mannheim). На основе данных, полученных для не обработанных активным веществом контрольных смесей и инкубированных тестируемыми соединениями смесей, рассчитывали степень ингибирования IL-2.
Вещество из примера 4 в этих условиях при концентрации 50 мкг/мл ингибирует стимулированный CD2/CD28 синтез IL-2 на 86±6%. При применении стафилоккового суперантигена (Е. coli 0127: В8; Sigma, Дайзенгофен) TSST-1 (0,1 мкг/мл) в качестве стимулятора Т-лимфоцитов синтез IL-2 подавляется на 77±20%.
Вышеприведенные исследования показывают, что аналоги талидомида из класса пиперидин-2,6-дионов формулы (I) ингибируют как обусловленное воспалением высвобождение ΤΝF-α, так и индуцированный антигенами синтез интерлейкина-2.
Claims (5)
1. Замещенные пиперидин-2,6-дионы формулы (I)
в которой Z - -C(R1R2)-CH2- или -C(R1)= CH-;
R1 - фталимид, когда Z - -С(R1R2)-CH2-, или одно- либо двукратно замещенный гидрокси-, метокси- или аминогруппами фталимидный радикал, когда Z - -C(R1)= CH-;
R2 - водород или С1-6 алкильная группа;
R3 - водород, C1-6 алкильная группа или ароматическая кольцевая система;
R4 - C1-6 алкил или ароматическое кольцо.
в которой Z - -C(R1R2)-CH2- или -C(R1)= CH-;
R1 - фталимид, когда Z - -С(R1R2)-CH2-, или одно- либо двукратно замещенный гидрокси-, метокси- или аминогруппами фталимидный радикал, когда Z - -C(R1)= CH-;
R2 - водород или С1-6 алкильная группа;
R3 - водород, C1-6 алкильная группа или ароматическая кольцевая система;
R4 - C1-6 алкил или ароматическое кольцо.
2. Замещенные пиперидин-2,6-дионы формулы (I) по п. 1, отличающиеся тем, что Z - -С(R1R2)-CH2-; R1 - фталимид; R2 - водород; R3 - водород или этил и R4 - метил или фенил.
3. Замещенные пиперидин-2,6-дионы формулы (I) по п. 1, отличающиеся тем, что Z - -С(R1)= СН2-; R1 - 3,4-диметоксифталимид; R3 - этил и R4 - фенил.
4. Способ получения замещенных пиперидин-2,6-дионов формулы (I) по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что фталевый ангидрид конденсируют с замещенной глутаминовой кислотой, продукт циклизуют до ангидрида и последний переводят в имид.
5. Способ получения замещенных пиперидин-2,6-дионов формулы (I) по пп. 1-3, отличающийся тем, что фталевый ангидрид конденсируют с замещенным 3-аминоглутаконимидом или 5-замещенным 3-аминоглутаримидом.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19703763A DE19703763C1 (de) | 1997-02-01 | 1997-02-01 | Thalidomidanaloge Verbindungen aus der Klasse der Piperidin-2,6-Dione |
| DE19703763.1 | 1997-02-01 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU98103164A RU98103164A (ru) | 1999-11-10 |
| RU2184733C2 true RU2184733C2 (ru) | 2002-07-10 |
Family
ID=7819009
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU98103164/04A RU2184733C2 (ru) | 1997-02-01 | 1998-01-30 | Замещенные пиперидин-2,6-дионы и способы их получения |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6110941A (ru) |
| EP (1) | EP0856513B1 (ru) |
| JP (1) | JPH10316675A (ru) |
| KR (1) | KR19980070959A (ru) |
| CN (1) | CN1109032C (ru) |
| AR (1) | AR010107A1 (ru) |
| AT (1) | ATE311381T1 (ru) |
| AU (1) | AU729733B2 (ru) |
| BR (1) | BR9800253A (ru) |
| CA (1) | CA2228385A1 (ru) |
| CO (1) | CO4940441A1 (ru) |
| CZ (1) | CZ27598A3 (ru) |
| DE (2) | DE19703763C1 (ru) |
| DK (1) | DK0856513T3 (ru) |
| ES (1) | ES2253790T3 (ru) |
| HK (1) | HK1015363A1 (ru) |
| HU (1) | HUP9800146A3 (ru) |
| IL (1) | IL122372A (ru) |
| NO (1) | NO313007B1 (ru) |
| NZ (1) | NZ329325A (ru) |
| PE (1) | PE57499A1 (ru) |
| PL (1) | PL188700B1 (ru) |
| RU (1) | RU2184733C2 (ru) |
| SI (1) | SI0856513T1 (ru) |
| SK (1) | SK12498A3 (ru) |
| UA (1) | UA45408C2 (ru) |
| UY (1) | UY24870A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA98749B (ru) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10013499A1 (de) * | 1998-09-24 | 2001-09-27 | Gruenenthal Gmbh | Substituierte Benzamide |
| DE10002509A1 (de) | 2000-01-21 | 2001-07-26 | Gruenenthal Gmbh | Substituierte Glutarimide |
| AU2002306596B2 (en) * | 2001-02-27 | 2008-01-17 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Analogs of thalidomide as potential angiogenesis inhibitors |
| CN100398534C (zh) * | 2003-09-15 | 2008-07-02 | 天津和美生物技术有限公司 | 合成酞胺哌啶酮及其衍生物的方法 |
| CA2538864C (en) * | 2003-09-17 | 2013-05-07 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Thalidomide analogs as tnf-alpha modulators |
| US8952895B2 (en) | 2011-06-03 | 2015-02-10 | Apple Inc. | Motion-based device operations |
| EP2004614B1 (en) * | 2006-04-13 | 2016-10-19 | The Government of the United States of America as represented by the Secretary of the Department of Health and Human Services | Tetrahalogenated compounds useful as inhibitors of angiogenesis |
| CN103221039A (zh) | 2010-09-09 | 2013-07-24 | 三叶草私人有限公司 | 血管生成抑制剂的气道给药 |
| US8927725B2 (en) | 2011-12-02 | 2015-01-06 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Thio compounds |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5356906A (en) * | 1989-10-27 | 1994-10-18 | The Du Pont Merck Pharmaceutical Company | (N-phthalimidoalkyl) piperidines useful as treatments for psychosis |
| WO1992014455A1 (en) * | 1991-02-14 | 1992-09-03 | The Rockefeller University | METHOD FOR CONTROLLING ABNORMAL CONCENTRATION TNF α IN HUMAN TISSUES |
| EP0580641B1 (de) * | 1991-04-17 | 1996-12-27 | Grünenthal GmbH | Neue thalidomidderivate, ein verfahren zu deren herstellung sowie die verwendung derselben in arzneimitteln |
| US5356406A (en) * | 1993-01-08 | 1994-10-18 | Steven Schraga | Adaptor to facilitate interconnection of medicine bottle and syringe |
| US5463063A (en) * | 1993-07-02 | 1995-10-31 | Celgene Corporation | Ring closure of N-phthaloylglutamines |
| US5698579A (en) * | 1993-07-02 | 1997-12-16 | Celgene Corporation | Cyclic amides |
| UA60308C2 (ru) * | 1996-07-24 | 2003-10-15 | Селджін Корпорейшн | ЗАМЕЩЕННЫЕ 2-(2,6-ДИОКСОПИПЕРИДИН-3-ИЛ)-ФТАЛИМИДЫ И -1-ОКСОИЗОИНДОЛИНЫ И СПОСОБ УМЕНЬШЕНИЯ УРОВНЯ ТNF-a |
-
1997
- 1997-02-01 DE DE19703763A patent/DE19703763C1/de not_active Expired - Fee Related
- 1997-12-01 IL IL12237297A patent/IL122372A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-12-04 NZ NZ329325A patent/NZ329325A/en unknown
-
1998
- 1998-01-09 EP EP98100259A patent/EP0856513B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-01-09 AT AT98100259T patent/ATE311381T1/de not_active IP Right Cessation
- 1998-01-09 SI SI9830810T patent/SI0856513T1/sl unknown
- 1998-01-09 DK DK98100259T patent/DK0856513T3/da active
- 1998-01-09 DE DE59813233T patent/DE59813233D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-01-09 ES ES98100259T patent/ES2253790T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-01-16 BR BR9800253A patent/BR9800253A/pt not_active IP Right Cessation
- 1998-01-19 PE PE1998000038A patent/PE57499A1/es not_active Application Discontinuation
- 1998-01-23 AR ARP980100306A patent/AR010107A1/es unknown
- 1998-01-28 HU HU9800146A patent/HUP9800146A3/hu unknown
- 1998-01-29 CZ CZ98275A patent/CZ27598A3/cs unknown
- 1998-01-29 ZA ZA98749A patent/ZA98749B/xx unknown
- 1998-01-29 CO CO98004231A patent/CO4940441A1/es unknown
- 1998-01-29 US US09/015,624 patent/US6110941A/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-01-29 UA UA98010495A patent/UA45408C2/uk unknown
- 1998-01-29 SK SK124-98A patent/SK12498A3/sk unknown
- 1998-01-30 NO NO19980416A patent/NO313007B1/no unknown
- 1998-01-30 AU AU52840/98A patent/AU729733B2/en not_active Ceased
- 1998-01-30 CA CA002228385A patent/CA2228385A1/en not_active Abandoned
- 1998-01-30 UY UY24870A patent/UY24870A1/es unknown
- 1998-01-30 RU RU98103164/04A patent/RU2184733C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1998-01-30 PL PL98324588A patent/PL188700B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1998-01-30 JP JP10019744A patent/JPH10316675A/ja not_active Withdrawn
- 1998-01-31 KR KR1019980002615A patent/KR19980070959A/ko not_active Application Discontinuation
- 1998-02-04 CN CN98104080A patent/CN1109032C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1999
- 1999-01-20 HK HK99100272A patent/HK1015363A1/xx not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| GEORGE W. MULLER. Structural Modifications of Thalidomide Produce Analogs with Enhanced Tumor Necrosis Factor Inhibitory Activity. J. Med. Chem. - 1966, 39, № 17, р.3238-3240. * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2163603C2 (ru) | Замещенные имидазолидин-2,4-дионовые соединения в качестве фармацевтических действующих веществ | |
| JPH09505055A (ja) | サイトカイン媒介疾患治療用オキサゾール | |
| MXPA96005023A (en) | Substitute compounds of imidazolidin-2,4-dionacomo substances pharmaceutically acti | |
| RU2184733C2 (ru) | Замещенные пиперидин-2,6-дионы и способы их получения | |
| US6500845B1 (en) | Lactam derivatives as immunomodulating agents | |
| KR20020009570A (ko) | 니코틴성 아세틸콜린 α4β2 수용체의 활성화 작용을 가진헤테로시클릭 화합물 | |
| US5565463A (en) | 9-subtituted-8-unsubstituted-9-deazaguanines | |
| FR2536398A1 (fr) | Nouveaux composes heterocycliques | |
| KR20010114267A (ko) | 치환된 3-피리딜-4-아릴피롤과 관련 치료방법 및 예방방법 | |
| AU2017209023A1 (en) | 2-oxindole compounds | |
| MXPA98000014A (en) | Analogue compounds of thalidomide from the class of piperidin-2,6-dio | |
| JPH0395166A (ja) | イソキサゾロン誘導体含有脳機能改善剤 | |
| CN114746087A (zh) | 新的经取代的亚砜亚胺衍生物 | |
| JP2000256327A (ja) | 新規イソキノリン誘導体 | |
| EP0251858A1 (fr) | N-imidazolylméthyl-diphénylazo-méthines, leur préparation et leur application en thérapeutique | |
| JPH0733660A (ja) | 脂質代謝改善剤 | |
| JPH01149784A (ja) | ４ｈ−キノリジン−４−オン誘導体 | |
| JPH085884B2 (ja) | ５Ｈ−ピラゾロ〔４，３−ａ〕キノリジン−５−オン誘導体 | |
| JPH05331187A (ja) | トリペプチド、その製造方法及びエンドセリン拮抗剤 | |
| JPS63198682A (ja) | ４ｈ−キノリジン−４−オン誘導体 | |
| JPH10316673A (ja) | 新規抗炎症薬 | |
| JPH085883B2 (ja) | ５Ｈ−ピラゾロ〔４，３−ａ〕キノリジン−５−オン誘導体 | |
| MXPA98007998A (en) | Acrylic prodrogas of n-hydroxymethyl talidomide with immunomodula activity |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20060131 |