RU2145875C1 - Применение димера лизоцима в качестве лекарственного средства и содержащие его композиции - Google Patents
Применение димера лизоцима в качестве лекарственного средства и содержащие его композиции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2145875C1 RU2145875C1 RU95105517A RU95105517A RU2145875C1 RU 2145875 C1 RU2145875 C1 RU 2145875C1 RU 95105517 A RU95105517 A RU 95105517A RU 95105517 A RU95105517 A RU 95105517A RU 2145875 C1 RU2145875 C1 RU 2145875C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tnf
- lysozyme
- use according
- antibiotic
- release
- Prior art date
Links
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 title claims abstract description 86
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 title claims abstract description 86
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 title claims abstract description 86
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 title claims abstract description 86
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 title claims abstract description 86
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 title claims abstract description 86
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 14
- 239000000539 dimer Substances 0.000 title abstract description 79
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims abstract description 79
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 17
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 claims abstract description 8
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 claims abstract description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 32
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 26
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 23
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 claims description 21
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 claims description 15
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 15
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 claims description 15
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 claims description 13
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims description 10
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 claims description 7
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 claims description 7
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 5
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 claims description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 5
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 5
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 4
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 3
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 claims description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims 2
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 claims 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims 1
- 229940042129 topical gel Drugs 0.000 claims 1
- 229940100615 topical ointment Drugs 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 29
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 abstract description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 abstract description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 70
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 26
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 26
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 25
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 22
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 20
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 20
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 19
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 12
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 12
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 11
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 11
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 11
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 11
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 10
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 10
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 10
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 9
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 9
- 108010005627 KLP602 Proteins 0.000 description 9
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 8
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 7
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 7
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 7
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 description 7
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 description 7
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 5
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 5
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 5
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 5
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 5
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 5
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 239000003532 endogenous pyrogen Substances 0.000 description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 4
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 4
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 4
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 3
- 201000004813 Bronchopneumonia Diseases 0.000 description 3
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 3
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 3
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 3
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 3
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 3
- 101710101607 Toxic shock syndrome toxin-1 Proteins 0.000 description 3
- BMQYVXCPAOLZOK-UHFFFAOYSA-N Trihydroxypropylpterisin Natural products OCC(O)C(O)C1=CN=C2NC(N)=NC(=O)C2=N1 BMQYVXCPAOLZOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 3
- 230000003305 autocrine Effects 0.000 description 3
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 244000309466 calf Species 0.000 description 3
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 3
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 3
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 3
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 3
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 3
- 208000012124 AIDS-related disease Diseases 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 description 2
- 208000037487 Endotoxemia Diseases 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 2
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 2
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 2
- 241000194054 Streptococcus uberis Species 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical class CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 2
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 2
- RDLPVSKMFDYCOR-UEKVPHQBSA-N cephradine Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@@H]3N(C2=O)C(=C(CS3)C)C(O)=O)=CCC=CC1 RDLPVSKMFDYCOR-UEKVPHQBSA-N 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 2
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 2
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BMQYVXCPAOLZOK-XINAWCOVSA-N neopterin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)C1=CN=C2NC(N)=NC(=O)C2=N1 BMQYVXCPAOLZOK-XINAWCOVSA-N 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- 230000009979 protective mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 2
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 229940115922 streptococcus uberis Drugs 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010003011 Appendicitis Diseases 0.000 description 1
- 206010053555 Arthritis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 102100027314 Beta-2-microglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 206010012455 Dermatitis exfoliative Diseases 0.000 description 1
- 206010014824 Endotoxic shock Diseases 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 206010016936 Folliculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000005577 Gastroenteritis Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 208000031957 HIV carrier Diseases 0.000 description 1
- 102100028967 HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain G Human genes 0.000 description 1
- 101710197836 HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain G Proteins 0.000 description 1
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 1
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 208000003623 Hypoalbuminemia Diseases 0.000 description 1
- 208000013038 Hypocalcemia Diseases 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 208000032420 Latent Infection Diseases 0.000 description 1
- 206010024774 Localised infection Diseases 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000008071 Parvoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010057343 Parvovirus infection Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010037651 Pyometra Diseases 0.000 description 1
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010053879 Sepsis syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010040844 Skin exfoliation Diseases 0.000 description 1
- 241000589970 Spirochaetales Species 0.000 description 1
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 1
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 206010051379 Systemic Inflammatory Response Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000000389 T-cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000028530 T-cell lymphoblastic leukemia/lymphoma Diseases 0.000 description 1
- GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N Terfenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000607598 Vibrio Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 201000009840 acute diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 208000011341 adult acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000037006 agalactosis Effects 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 208000037771 disease arising from reactivation of latent virus Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 150000002066 eicosanoids Chemical class 0.000 description 1
- 206010014665 endocarditis Diseases 0.000 description 1
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 230000010429 evolutionary process Effects 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 230000003631 expected effect Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 208000021760 high fever Diseases 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000000705 hypocalcaemia Effects 0.000 description 1
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000007233 immunological mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 108010052620 leukocyte endogenous mediator Proteins 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 208000030500 lower respiratory tract disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002864 mononuclear phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 208000027531 mycobacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 1
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 239000012451 post-reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 208000030279 prolonged fever Diseases 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 201000002765 pyometritis Diseases 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 238000011268 retreatment Methods 0.000 description 1
- 238000002435 rhinoplasty Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 231100000046 skin rash Toxicity 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003390 teratogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
- A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
- A61L15/22—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing macromolecular materials
- A61L15/32—Proteins, polypeptides; Degradation products or derivatives thereof, e.g. albumin, collagen, fibrin, gelatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2462—Lysozyme (3.2.1.17)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине. Предложено применение димера лизоцима для модуляции естественных защитных механизмов у животных или человека. Вещество ингибирует высвобождение фактора некроза опухоли, усиливает фагоцитоз, увеличивает высвобождение интерферона и интерлейкина-6. 2 с. и 14 з.п.ф-лы, 4 табл., 3 ил.
Description
Настоящее изобретение касается применения димера лизоцима по новому назначению и составов, содержащих такой димер, а именно для лечения определенных дисфункций естественных защитных механизмов.
Терапевтическая эффективность мономерных форм ферментов при лечении различных болезней известна уже в течение длительного времени. Лизоцим обнаружен Флемингом в 1922 году, но до 1950 года его ферментативные функции не были выявлены. Начиная с этого времени, появляются сообщения о его различных терапевтических эффектах. Известны противовирусные, противобактериальные, противовоспалительные и противогистаминные свойства лизоцима. Однако терапевтическое применение лизоцима ограничено из-за отрицательных побочных эффектов мономерной формы.
Известно, что изолированные димеризованные формы ферментов при сохранении всех благоприятных свойств известных мономерных форм не обладают никакими отрицательными побочными эффектами при использовании в терапевтических дозах. Противовирусные и противобактериальные составы, включающие в качестве активного ингредиента димер лизоцима или другие димеризованные ферменты, описаны в международной патентной заявке WO 89/11294. В ней сообщается, что при тестах in vitro димер лизоцима ингибирует пролиферацию ряда бактериальных штаммов, культивируемых на образцах культур, взятых у пациентов, в концентрациях 5 - 20 мг/мл. Известно об эффективности димера при лечении инфекции парвовируса бешенства (CPV) при оральном введении его дважды в день в дозе 1-2 мг/кг веса тела.
При клинических испытаниях, направленных на подтверждение противобактериальной и противовирусной эффективности димера лизоцима, обнаружено, что димер оказывает неожиданно сильное действие при лечении острых форм заболеваний пищеварительного и дыхательного трактов.
Известно, что бактериальные токсины составляют одну группу большого количества факторов вирулентности, которыми бактерии вызывают болезни. Некоторые последние открытия в области бактериальных токсинов касаются их взаимодействия с иммунной системой хозяина. Это взаимодействие вначале приводит к иммуномодуляции, а затем - к высвобождению цитокинов и других посредников, которые являются причиной большого количества физиологических нарушений, вызванных токсинами. Последний эффект специально изучали в отношении действий эндотоксина, который играет важную роль в патогенезе грамотрицательного сепсиса (см. Bayston, D.F., Cohen, J.: Bacterial endotoxins and current concepts in the diagnosis and retreatment of endotoxaemia; J. Med. Microbiol. 1990, 31: 73 - 83). Известна роль экзотоксинов в инфекциях, вызываемых Staphilococcus aureus и Streptococcus pyogenes, признание токсического шокового синдрома стафилококка вызывает повышенный интерес к экзотоксинам, вырабатываемым этими организмами.
Токсический шок - это серьезная болезнь, характеризующаяся высокой температурой, гипотензией, капиллярными кровотечениями, диффузной эритродермией, слизистой эритемой, почечной недостаточностью, гипокальцемией, гипоальбуминемией и шелушением при красной сыпи кожи. Многие случаи синдрома токсического шока связаны с применением вагинальных тампонов в течение менструации, однако чаще всего синдром описывают у обоих полов в несвязанных с менструацией условиях, зачастую после хирургических процедур, когда оставляют на месте перевязочный материал (например, носовые салфетки после ринопластики или сильного кровотечения). Обнаружено, что штаммы стафилококка, взятые из вагины пациентов, перенесших синдром токсического шока (TSS), продуцируют токсин 1 синдрома токсического шока (TSST-1), но источником микроорганизма, вырабатывающего TSST-1, также может быть скрытая инфекция. Начальная бактеремия может иметь скрытую форму, но по прошествии недель и даже месяцев это может привести к развитию локализованных инфекций. Таким инфекциям могут сопутствовать случаи синдрома сепсиса или септического шока. Реже встречающаяся, но более тяжелая форма бактеремии может встречаться при отсутствии доступа микроорганизмов в орган или при местной инфекции, и в таких ситуациях могут наблюдаться шок, эндокардит, распространенная внутрисосудистая коагулопатия и прекращение функционирования многих органов (см. Stevens, D. L. et al. : Gram-positive shock; Current Opinions in Infections Diseases, 1992, 5: 355 - 363).
Известно также, что подобные наблюдения относятся и к другой грамположительной бактерии. Например, инфекция Streptococcus pyogenes вызывает шок и в 30% случаев приводит к смерти. Streptococcus pneumonial вызывает пневмонию, которую зарегистрируют как имеющую высокий уровень устойчивости к пенициллину и тенденцию к развитию синдрома шока. Кроме того, пациенты, больные СПИДом, имеют более частые случаи пневмококковых инфекций, чем все население в целом.
Инфекция, вызванная грамотрицательной бактерией, может также приводить к сепсису и септическому шоку. Грамотрицательная бацилла и вибрион являются источником наиболее важных энтеротоксинов. Энтеротоксин представляет собой липополисахаридный (LPS) компонент внешней мембраны клеточных стенок грамотрицательных бактерий. Энтеротоксины прежде всего оказывают влияние на кишечный тракт и обычно вызывают понос. Наиболее частыми инфекциями, вызываемыми грамотрицательными бактериями у животных и людей, являются инфекции, вызываемые кишечной палочкой. Сопровождающее такие инфекции сильное обезвоживание может привести к смерти инфицированного индивидуума. Согласно статистике в развивающихся странах от острого поноса каждый год погибает приблизительно 3,2 миллиона детей. Приблизительно 30% всех случаев сепсиса вызваны грамотрицательной бактерией.
Из-за сепсиса инфекции, вызываемые грамположительными и грамотрицательными бактериями, представляют собой всегда серьезное заболевание во всех странах.
В Соединенных Штатах ежегодно регистрируют около 400000 случаев заболеваний приблизительно с 50%-ной смертностью.
Сепсис и септический шок являются предметом большого количества публикаций. Известно, что в патофизиологии септического шока, эндотоксимии и в других бактериальных интоксикациях главную роль играют посредники. К ним относятся фактор некроза опухоли (TNF), интерлейкин-1 (IL-1), интерферон (IFN), фактор деятельности тромбоцитов и eicosanoid (производные арахидоновой кислоты); причем наиболее важный из них - TNF, который оказывает влияние на метаболизм, а также на иммунную и фагоцитарную системы (см. Berkowitz, F. E.: Bacterial toxins in pathogenesis of infections; Current Opinions in Infections Diseases, 1991, 4: 332 - 337). Показано, что погибшие от септического шока пациенты имеют более высокие концентрации TNF и интерлейкина-1. Известно о повышенных уровнях TNF - α в плазме и в крови пациентов после септического шока. А также, что токсический эффект TNF - α может в большой степени не зависеть ни от концентраций TNF, ни от их присутствия в организме.
Исследована возможность модуляции каскада цитокинов в сепсисе и септическом шоке. Известно применение моноклональных антител против TNF и нейтрализация липополисахарида с помощью антилипополисахаридных средств. Однако антитела не повышают гибель бактерий. Частично благоприятные эффекты также наблюдаются при применении таких агентов, как дексаметазон и пентоксифилин, которые блокируют продукцию TNF макрофагами.
Известно, что другие цитокины также способствуют септическому шоку. В этой ситуации вводят препараты, которые модулируют каскад цитокинов при септическом шоке и обладают способностью воздействовать на возбудителя инфекции, так как защита хозяина зависит от тех же самых цитокинов, вызванных воспалением. Поиск средств для предотвращения септического шока является главной задачей, цель которой заключается в оказании помощи большому количеству пациентов. Для этих целей существенным является управление уровнем TNF.
Такой же критической является роль TNF и в другом защитном механизме - лихорадке, которая является типичной физиологической реакцией на инфекцию фактически для всех высших животных и человека. Пять пирогенных цитокинов (интерлейкин-1, TNF, интерферон, интерлейкин-2 и интерлейкин-6) в настоящее время считаются основными эндогенными посредниками лихорадочной реакции, ингибирующей преоптические термочувствительные нейроны, которые обычно облегчают снижение высокой температуры и подавляют резкое повышение температуры в организме человека. Лихорадка и ее медиаторы могут причинять вред как органу, в который они вторгаются, так и хозяину. За последние годы накоплено значительное количество данных, подтверждающих, что интерлейкин-1, TNF и интерлейкин-6 являются медиаторами патофизиологических нарушений при инфекциях. Поскольку эндогенные пирогены способствуют патологическому процессу при различных инфекциях, то потенциальный вред хозяину причиняют как медиаторы, так и лихорадочная реакция. Наиболее убедительное свидетельство этого получено при изучении грамотрицательного сепсиса. Имеется доказательство, что эндогенные пирогены являются промежуточным звеном для системных и локальных проявлений сепсиса, вызванных инфекциями грамположительных бактерий, СПИДом, инфекциями спирохет, менингитом, респираторным дистресс-синдромом у взрослых, гнойным артритом и микобактериозом. Хотя приведенные данные противоречат наблюдению, что лихорадочная реакция непосредственно повышает сопротивление инфекции у экспериментальных животных, тем не менее сущность процесса эволюции заключается больше в сохранении видов, чем в выживании индивидуума. Очевидно, вредные системные воздействия пирогенных цитокинов на последствия подавления инфекций (например, грамотрицательного сепсиса) адаптируются как благоприятные локальные воздействия лихорадки при менее внезапных и быстро развивающихся инфекциях. Поэтому, ускоряя гибель безнадежно инфицированных индивидуумов, природа убивает индивидуумов, которые являются опасными для видов. Таким путем виды в целом могут быть защищены от эпидемических болезней (см. Mackowiak, P.A.: Mechanism of Fever; Current Opinions in Infectious Diseases, 1992, 5 :348-354).
Фундаментальная концепция лихорадки, вызванной патогенными микроорганизмами, заключается в том, что экзогенные пирогены, независимо от их происхождения или структуры, вызывают лихорадку, индуцируя клетки хозяина (прежде всего макрофаги) вырабатывать эндогенные пирогены. Соответственно могут быть эффективны терапевтические методы, основанные на применении антиэндогенных антител пирогена и антагонистов эндогенных рецепторов пирогена. Одна из возможностей заключается в блокировании биосинтеза TNF. Исследования на животных показывают, что в каскаде реакции на инфекционную болезнь TNF может быть синтезирован прежде IL-1 и других цитокинов. Известно, что ингибирование биосинтеза TNF также означает и прекращение биосинтеза IL-1. Но ингибирование биосинтеза TNF также означает, что прекращаются вредные воздействия некоторых внезапных и безнадежных инфекционных болезней.
TNF также известен как один из посредников воспалительных процессов. Во многих случаях воспаление - это первая стадия болезни с естественным течением, сопровождающаяся развитием септического шока. В случаях, когда нарушена целостность тканей, например, при ранах, восприимчивых к инфекции, ранениях, в особенности брюшных ранах (перитоните), болезнях желудочно-кишечного тракта, таких как острые инфекции, сопровождающие аппендицит, острых бактериальных и вирусных инфекциях, наблюдаемых при послегриппозной пневмонии, опухолевых болезнях, особенно в фазе разложения опухолей, и т.п., воспаление является первым симптомом увеличения синтеза TNF. Таким образом управление уровнем TNF является желательным при лечении таких инфекционных болезней.
Еще более значительной является роль TNF непосредственно при заболевании СПИДом. СПИД характеризуется сильно выраженным иммунодефицитом. Главный показатель СПИДа - это уменьшение числа лимфоцитов CD4+. Число клеток, инфицированных ВИЧ, этиологическим возбудителем СПИДа, относительно невелико (≤1 из 100 - 1000) даже в моноядерных клетках периферической крови (PBMC) пациентов, больных СПИДом. В то время, как инфицированы в основном лимфоциты CD4+, эти клетки не являются исключительными мишенями для поражения ВИЧ. Недавно получены доказательства того, что спектр клеток - мишеней для ВИЧ может быть весьма широк. Явные различия наблюдаются в последствиях действия инфекционной болезни ВИЧ на моноциты (макрофаги) по сравнению с Т-лимфоцитами. В то время, как Т-лимфоциты имеют тенденцию разрушаться, моноциты (макрофаги) устойчивы к длительному заболеванию. Поэтому моноциты (макрофаги) могут сохранять ВИЧ внутри себя подобно другим клеткам организма. Тип реакции моноцита (макрофага) на инфекцию ВИЧ может влиять на установление скрытого состояния инфекции в хозяине; причем эта реакция может также приводить к патогенным нарушениям, вызываемым растворимыми факторами, синтезируемыми инфицированными клетками (см. Tashifumi Natsuyama et al.: Cytokines and HIV infection: Is AIDS а Tumor Necrosis Factor disease?; AIDS 1991, 5: 1405-1417). Многие ученые сообщают, что линии Т-клеток человека, инфицированные вирусом человеческого Т-клеточного лейкоза (HTLV-1) высоко чувствительны к инфекции ВИЧ и вызывают сильное действие, относящееся к заболеванию клетки, вместе с повышенной репликацией ВИЧ. Кроме того, инфицированные ВИЧ клетки чувствительны к повреждениям этих клеток супернатантом. Анализ титра вируса после лечения этим супернатантом показывает, что фактор, синтезируемый Т-клетками (MT-2), повышает репликацию ВИЧ. Фактор идентифицирован и обозначен как TNF - α и это открытие совпадает с сообщениями о том, что Т-клетки (MT-2) синтезируют TNF - β. То же самое действие наблюдается при использовании TNF - α. TNF - β и TNF - α выборочно уничтожают инфицированные ВИЧ клетки и повышают репликацию ВИЧ. Известно, что линии Т-клеток, инфицированных ВИЧ, а также свежие изолированные клетки линии PBMC от инфицированных ВИЧ индивидуумов дают на TNF реакцию, приводящую к повышенным уровням TNF. Можно предположить, что такое же самое повышение экспрессии ВИЧ должно происходить in vivo. Фактически, повышающее действие TNF может быть нейтрализовано антителами против TNF. Повышение репликации ВИЧ после лечения TNF - α и TNF - β доходит до величины около 10 (см. Yakarnam, A. et al.: Tumor necrosis factors (α,β) induced by HIV-1 in peripheral blood monocellular cells potentate virus replication; AIDS 1990, 421 - 427).
Имеются также подтверждения, что различные цитокины могут воздействовать на репликацию ВИЧ. При применении очищенных моноядерных фагоцитов из нормальной периферийной крови в течение нескольких часов после экспозиции вируса ВИЧ наблюдают индукцию как IL-6, так и TNF - α. Такую индукцию цитокина также наблюдают при использовании ВИЧ, инактивированного высокой температурой. На основании многих наблюдений, а также сообщений Toshifumi Matsuyama et al. (op. cit.) сделан вывод, что СПИД представляет собой болезнь, вызываемую цитокином или TNF. При СПИДе среди множества цитокинов основными молекулами, повышающими репликацию ВИЧ, и индуцирующими их собственную экспрессию, а также экспрессию других цитокинов, являются TNF - β и TNF - α. Доказано, что TNF - α стимулирует высвобождение других цитокинов в клетках различных типов и поэтому является ключевым цитокином каскада цитокинов в первом защитном механизме.
Предположено, что многие симптомы, связанные со СПИДом, можно объяснить высвобождением цитокинов, имеющих различные биологические функции. Повышение синтеза двух хорошо известных пирогенов, таких как IL-1 и TNF - α, может объяснить наличие лихорадки, наблюдаемой у пациентов, больных СПИДом. TNF может участвовать в кахексии, связанной со СПИДом. Как TNF - α, так и TNF - β работают как иммуномодуляторы и молекулы-эффекторы при цитотоксичности, вызываемой моноцитом-медиатором. Кроме того, TNF отвечает за активацию иммунного ответа и может непосредственно уничтожать инфицированные ВИЧ клетки, повышая таким образом репликацию ВИЧ. Предложен также иммунологический механизм для объяснения истощения клеток CD4-T при СПИДе (Hatsuyama et al., op. cit.). Известно, что саркома Kaposi, относящаяся к СПИДу, также вызвана TNF - α. TNF может быть получен из кератиноцитов с помощью физиологических стимулов типа ультрафиолетового света, который способствует индукции IL-6 в коже и развитию саркомы Kaposi при СПИДе. В испытаниях in vitro TNF - α может повреждать миелин и олигодендроциты; к тому же обнаружено, что некоторые линии клеток, полученные из глиомы, чувствительны к антипролиферативному действию TNF - α. Можно сделать вывод, что дисфункция центральной нервной системы у больных СПИДом является результатом действия TNF - α. Некоторые сообщения указывают, что уровни TNF - α и IL-1 в сыворотках существенно повышаются с развитием СПИДа и ARC (комплекс болезней, связанных со СПИДом), причем они попадают в диапазон нормальных контрольных значений при испытаниях сыворотки бессимптомных носителей ВИЧ. Согласно Matsuyama et al. (op. cit.) СПИД - это болезнь, вызываемая как TNF, так и ВИЧ. Это показывает, что установление контроля над индукцией TNF может привести к осуществлению эффективной терапии для пациентов, больных СПИДом.
Следующие основные открытия позволяют решить вышеописанные проблемы и найти новые терапевтические применения димера лизоцима при вышеупомянутых патологических состояниях:
1. Димер лизоцима ингибирует синтез TNF.
1. Димер лизоцима ингибирует синтез TNF.
2. Димер лизоцима стимулирует синтез IFN- α.
3. Димер лизоцима повышает фагоцитарную активность.
Соответственно целью настоящего изобретения является создание фармацевтических составов, терапевтически пригодных для лечения болезней, связанных с чрезмерно высокими уровнями описанного выше TNF (фактора некроза опухоли).
Другой целью настоящего изобретения является создание фармацевтических составов, пригодных для профилактики болезней, связанных с чрезмерно высокими уровнями описанного выше TNF.
Еще одной целью настоящего изобретения является создание фармацевтических составов и гигиенических изделий, пригодных для терапии и предотвращения болезней, связанных с увеличением и чрезмерно высокими уровнями TNF.
Согласно изобретению указанные цели могут быть достигнуты новым использованием димеризованной формы лизоцима и новыми фармацевтическими составами, содержащими димер лизоцима в качестве активного компонента, а именно:
- применением димера лизоцима для изготовления лекарственного средства для ингибирования биосинтеза фактора некроза опухоли у животных и человека;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для лечения болезней, связанных с чрезмерно высокими уровнями фактора некроза опухоли;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для профилактики болезней, связанных с чрезмерно высокими уровнями фактора некроза опухоли;
- применением димера лизоцима для изготовления лекарственного средства для управления высвобождением индуцируемым ВИЧ фактора некроза опухоли у бессимптомных носителей и у пациентов, имеющих комплекс болезней, связанных со СПИДом;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтических составов для лечения СПИДа;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для предотвращения и/или лечения сепсиса и септического шока;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для предотвращения и/или лечения кахексии;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для предотвращения и/или лечения лихорадки;
- введением инъекций, содержащих димер лизоцима в количестве 0,01 - 10 мг/мл, предпочтительно 0,1 - 1,0 мг/мл, апирогенного стерильного состава, включающего физиологически приемлемый растворитель и фармацевтически приемлемый консервант;
- введением внутривенно вышеуказанных инъекций в однократной или многократной дозе 0,02 мг/кг веса тела;
- пропитанные тампоны и антисептическая одежда, а также мази или гели, содержащие эффективные дозы димера лизоцима для предотвращения сепсиса и септического шока и для лечения инфицированных ран;
- вагинальные тампоны, пропитанные эффективной дозой димера лизоцима для применения во время менструации.
- применением димера лизоцима для изготовления лекарственного средства для ингибирования биосинтеза фактора некроза опухоли у животных и человека;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для лечения болезней, связанных с чрезмерно высокими уровнями фактора некроза опухоли;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для профилактики болезней, связанных с чрезмерно высокими уровнями фактора некроза опухоли;
- применением димера лизоцима для изготовления лекарственного средства для управления высвобождением индуцируемым ВИЧ фактора некроза опухоли у бессимптомных носителей и у пациентов, имеющих комплекс болезней, связанных со СПИДом;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтических составов для лечения СПИДа;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для предотвращения и/или лечения сепсиса и септического шока;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для предотвращения и/или лечения кахексии;
- применением димера лизоцима для изготовления фармацевтического препарата для предотвращения и/или лечения лихорадки;
- введением инъекций, содержащих димер лизоцима в количестве 0,01 - 10 мг/мл, предпочтительно 0,1 - 1,0 мг/мл, апирогенного стерильного состава, включающего физиологически приемлемый растворитель и фармацевтически приемлемый консервант;
- введением внутривенно вышеуказанных инъекций в однократной или многократной дозе 0,02 мг/кг веса тела;
- пропитанные тампоны и антисептическая одежда, а также мази или гели, содержащие эффективные дозы димера лизоцима для предотвращения сепсиса и септического шока и для лечения инфицированных ран;
- вагинальные тампоны, пропитанные эффективной дозой димера лизоцима для применения во время менструации.
В качестве димеризованной формы лизоцима предпочтительно используют изолированный очищенный димер лизоцима. В некоторых случаях возможно применение составов, которые помимо димера лизоцима также содержат небольшие фракции тримера и высших олигомеров фермента.
Инъекции согласно настоящему изобретению могут также применять внутримышечно и подкожно. В некоторых случаях можно также соответствующим образом применять тот же самый жидкий состав (одновременно или независимо) при внутриматочном и интрауддеральном (введении внутрь вымени) или локальном введении - в конечном счете вместе с другими местными препаратами.
Предпочтительные апирогенные стерильные составы, включающие, по крайней мере, один физиологически приемлемый растворитель и/или, по крайней мере, один фармацевтически утвержденный консервант, состоят из апирогенной стерилизованной воды или водного фосфатного буферного раствора (PBS) в качестве растворителя, а также тиомерсала в качестве утвержденного консерванта для протеиновых фармацевтических препаратов.
Димеризованную форму лизоцима получают в процессе контролируемой полимеризации мономера фермента, сопровождаемой аккуратной очисткой, в частности при удалении мономерной формы, имеющей упомянутые токсические побочные эффекты, а также тримеров и высших фракций олигомера постреакционной смеси. Для получения димерной формы фермента можно использовать любой известный способ полимеризации. Способ его получения, включающий стадии очистки, описан в международном патенте WO 91/10731.
Предыдущие предварительные клинические испытания димера лизоцима не обнаруживают никаких мутагенных или тератогенных эффектов, либо они очень слабо выражены. Единственная токсичная доза при оральном/кожном введении (LD50) не поддается измерению (> 2000 мг/кг), а при внутривенном введении LD50 составляет > 1000 мг/кг.
Новое применение димера лизоцима согласно изобретению подтверждено при испытаниях in vivo, а также доказана его эффективность in vivo при клиническом применении. Проведены также некоторые сравнительные испытания.
Ингибирующее действие на высвобождение TNF эффективно выявляют благодаря более широкому спектру действия димера лизоцима, а именно его способности индуцировать высвобождение IFN, а также вызываемое им повышение фагоцитоза. Эти два упомянутых свойства являются важными факторами в естественных защитных механизмах. Соответственно терапевтическое и профилактическое действие вышеупомянутых новых применений димера лизоцима поддерживается естественными защитными механизмами, а также одновременно усиливается ими.
Далее настоящее изобретение иллюстрируется примерами, в которых приводятся ссылки на прилагаемые чертежи, графически иллюстрирующие результаты наиболее важных испытаний:
Фиг. 1 иллюстрирует подавление высвобождения IFN in vitro в культуре лимфоцитов, оптимально стимулируемой ConA в присутствии димера лизоцима при различных разбавлениях.
Фиг. 1 иллюстрирует подавление высвобождения IFN in vitro в культуре лимфоцитов, оптимально стимулируемой ConA в присутствии димера лизоцима при различных разбавлениях.
Фиг. 2 иллюстрирует уровень IFN в крови новорожденных (определенный экспериментально).
Фиг. 3 иллюстрирует уровень IFN в крови новорожденных (определенный экспериментально) при сравнительном испытании терапевтической эффективности лекарственных средств согласно изобретению.
Пример 1.
Для определения иммуноактивности димера лизоцима исследуют человеческие периферийные димоциты крови с анализом при помощи активируемого флюоресценцией анализатора клеток (FACS).
Митогенная стимуляция периферийных лимфоцитов человека - это хорошо отработанный метод проверки реактивности наиболее важных клеток иммунной системы. Для того чтобы проверить влияния терапевтических веществ на активацию и пролиферацию лимфоцитов от здоровых доноров крови, в оптимальную дозу добавляют митоген, затем окончательно измеряют количественный ответ лимфоцитов, имеющих иммунорелевантные параметры. Результаты сравнивают с контрольным значением, полученным при отсутствии медикаментозного лечения.
Для стимуляции лимфоцитов используют ConA при концентрации 20 мг/мл в среде. Начальная концентрация клеток составляет 106 клеток/мл. Краткоживущие культуры содержат в инкубаторе с CO2 в течение одного (рецепторы IL-2 на лимфоцитах и HLA-Dr) или двух дней (для всех других испытаний). Следующие параметры измерений получены в качестве критериев клеточной активации:
- неоптерин (маркер для иммунной активации),
- b-2-микроглобулин (также маркер активации),
- интерлейкин-2 (лимфоцит-T-хелпер, полученный из аутокринного и паракринного вещества),
- интерлейкин-6 (гормон клеточной дифференцировки),
- фактор некроза опухоли - TNF (вазоактивный, множественно сильнодействующий интерлейкин),
- интерферон-a (фактор дифференцировки, в частности для B-лимфоцитов),
- тимидинкинза (фермент, регулируемый в пролиферативных клетках),
- рецептор лимфоцита интерлейкин-2 (акцепторная молекула для аутокринного и паракринного действия IL-2),
- лимфоцит Ki-67 (экспрессия антигена в активированных и пролиферативных клетках),
- лимфоцит HLA-Dr (антиген гистосовместимости класса II, регулируемый в течение иммунной реакции).
- неоптерин (маркер для иммунной активации),
- b-2-микроглобулин (также маркер активации),
- интерлейкин-2 (лимфоцит-T-хелпер, полученный из аутокринного и паракринного вещества),
- интерлейкин-6 (гормон клеточной дифференцировки),
- фактор некроза опухоли - TNF (вазоактивный, множественно сильнодействующий интерлейкин),
- интерферон-a (фактор дифференцировки, в частности для B-лимфоцитов),
- тимидинкинза (фермент, регулируемый в пролиферативных клетках),
- рецептор лимфоцита интерлейкин-2 (акцепторная молекула для аутокринного и паракринного действия IL-2),
- лимфоцит Ki-67 (экспрессия антигена в активированных и пролиферативных клетках),
- лимфоцит HLA-Dr (антиген гистосовместимости класса II, регулируемый в течение иммунной реакции).
Следующие наблюдения получены в культуре супернатанта в отношении продуктов клетки.
Концентрация неоптерина, синтезируемого T-лимфоцитами в течение иммунного ответа в стимулируемых культурах, в настоящих экспериментах не заметно повышена выше контрольных значений при применении димера лизоцима в стимулируемых ConA клетках без использования тестируемого димера. При применении повышенной концентрации тестируемого димера значения неоптерина были немного выше.
Аналогично, значения β -2-микроглобулина при всех концентрациях димеров лизоцима колеблются вокруг контрольного значения.
Рецепторы IL-2, взятые с поверхности лимфоцита в течение развития культуры и предоставляющие информацию относительно общего оборота рецептора IL-2, находятся на сопоставимом уровне с рецепторами IL-2 на поверхности лимфоцита (см. ниже) и оказывают хорошее подавление при самой высокой концентрации тестируемого димера.
Интерлейкин-6 проявляет четкую тенденцию зависимости дозы от высших значений при более высоких концентрациях. Эта молекула имеет очень важное значение в кроветворении, клеточной дифференцировке и иммунной реакции. При тестировании первые три значения должны быть экстраполированы, так как самый высокий стандарт составляет только 2000 пг/мл.
Результаты, касающиеся остальных молекул, приведены ниже в таблице 1. В отличие от интерлейкина-6 TNF - α неожиданно обнаружен в супернатантах культуры в значительно меньших концентрациях за исключением двух последних шагов разбавления, которые оказываются неэффективными для подавления концентрации TNF.
Концентрацию тимидинкиназы измеряют в цитоплазме лимфоцитов после замораживания и оттаивания клеточных гранул. Тимидинкиназа отрегулирована в разделяющихся клетках и является хорошим маркером для клеточной пролиферации. Данные из таблицы 1 показывают снижение самых высоких тестируемых концентраций димера лизоцима; в других разбавлениях не обнаружено какой-либо четкой тенденции. Интерферон-a, в свою очередь, при тех же самых условиях обнаруживает значения, превышающие контрольные значения одного CanA при более высоких концентрациях. Видимое увеличение происходит со второго значения до третьего разбавления.
Маркеры лимфоцитов: HLA-Dr/CD3, маркер тканевой совместимости, выражен на активированных T-лимфоцитах в течение иммунной реакции. Полученные результаты показывают определенный процент активированных T-клеток в контрольной культуре; причем при различных концентрациях димера лизоцима в культурах значения колеблются вокруг контрольных значений.
Рецепторы IL-2 лимфоцитов: интерлейкин-2 является цитокином, синтезируемым лимфоцитами-T-хелперами после активации при помощи IL-1. IL-2 обладает аутокринным и паракринным действием. Лимфоциты-T-хелперы не только синтезируют IL-2, но также стимулируются этой молекулой для пролиферации. Рецепторы для IL-2 на поверхности лимфоцитов-T-хелперов отрегулированы после активации. Таблица 1 показывает, что при самой высокой концентрации димера лизоцима имеется заметное подавление рецепторов IL-2 на лимфоцитах, в то время как остальные значения не отличаются больше, чем в пределах ширины биологического спектра. Таблица 1 также содержит данные, относящиеся к Ki-67/CD8 и Ki-67/CD4. Ki-67 - это молекула пролиферации, появляющаяся в клетках, подвергнутых митозу. Ki-67 является важным параметром для оценки стимулируемых клеток и для диагноза опухоли. В полученных результатах наблюдается небольшое ингибирование клеточной пролиферации в супрессоре Ki-67 клеток (CD8) при двух самых высоких дозах димера лизоцима. В лимфоцитах-хелперах (CD4) при самой высокой дозе появляется существенное увеличение процента положительных клеток. При более низких дозах процент клеток с экспрессией Ki-67/CD4 слегка превышает контрольное значение.
Маркировка подавления TNF показана на фиг. 1.
Перечисленные выше иммунологические параметры, выбранные в зависимости от их потенциальной важности для иммунного ответа, анализируют методом, основанным на измерении влияния тестируемого вещества на оптимально стимулируемые ConA периферические лимфоциты человека, который является устойчивым, чувствительным и дает возможность оценить большое количество различных параметров. При некоторых концентрациях димеров лизоцима имеются заметные различия в результатах испытаний по сравнению со значениями испытаний лимфоцитов, стимулируемых только одним ConA, в то время как в примере с TNF и IFN- α наблюдаемые эффекты находятся четко в пределах диапазона всех тестируемых разбавлений.
Пример 2.
Лабораторные испытания выполняют для определения действия димера лизоцима на фагоцитарную функцию in vitro клеток молока и крови. Ранее было установлено, что при стандартном тестировании in vitro димер лизоцима не ингибирует пролиферацию микроорганизмов, выделенных из инфицированных молочных желез коров. Поскольку при клиническом применении введение димера лизоцима интрауддерально и одновременно внутривенно эффективно устраняет инфекционные заболевания молочных желез у коров, очевидно, что главным противобактериальным механизмом в молочных железах коров является фагоцитоз. Соответственно для определения действия димера лизоцима на фагоцитоз при испытаниях in vitro используют кровь и молоко как здоровых, так и инфицированных коров. Для сравнения эксперименты проводят при той же самой концентрации тестируемого вещества и том же самом времени инкубации, используя клетки, полученные от здоровых и инфицированных коров или даже от инфицированной и здоровой частей молочной железы той же самой коровы, чтобы устранить различия индивидуального ответа.
При тестировании крови или молока здоровых и инфицированных коров добавляют как очищенную димерную форму, так и смесь димера и малых фракций тримеров и высших олигомеров лизоцима в концентрациях 25 - 0,25 мг/мл, затем смесь инкубируют при 37oC в течение 0,5 - 24 часов. Для каждого образца определяют процент фагоцитирующих клеток (индекс фагоцитоза по методу Wisniewski et al) и процент NBT-положительных гранулоцитов (согласно Park).
Димер лизоцима усиливает фагоцитарную активность лейкоцитов при испытаниях in vitro. Это воздействие зависит от дозы и времени инкубации. Для активации лейкоцитов молока необходимы более высокие концентрации димера лизоцима, чем для активации лейкоцитов крови. Чрезмерно высокие концентрации димера несколько снижают in vitro фагоцитарную активность. Выбранные результаты приведены в таблицах 2 и 3, в которых термин "димер лизоцима +" используется для обозначения состава, содержащего малую фракцию тримеров и высших олигомеров лизоцима, как указано выше в описании. Результаты главным образом показывают, что как только реакционная смесь после полимеризации не содержит никаких цитотоксических мономерных форм димера, сопоставимые результаты получают для высокоочищенного и менее чистого димеризованного лизоцима.
Ясно, что степень очистки димера лизоцима не оказывает никакого заметного влияния на наблюдаемую фагоцитарную активность лейкоцитов молока. Впоследствии может оказаться, что клетки эффектора могут быть гранулоцитами.
В дальнейших примерах излагаются результаты исследований in vitro. Для клинических испытаний используют состав 2 мг димера лизоцима в 10 мл раствора PBS. Этот препарат обозначен как KLP-602.
Пример 3.
При внутривенном введении KLP-602 стимулируют фагоцитарную активность гранулоцитов крови у здоровых и больных и у здоровых новорожденных жеребят, а также у молочных коров после интрауддерального введения. Это влияние проявляется в увеличении числа нейтрофилов и повышении способности поглощать стафилококки и снижать NBT. Это явление происходит прежде всего в течение первых 12-24 часов после инъекции препарата. Эффект KLP-602 на фагоцитарную активность в вымени зависит от дозы и лекарственной формы и реакции отдельного животного.
Димер лизоцима используют для терапии инфекционных болезней рогатого скота, свиней, лошадей и собак. В различных дозах и в различных интервалах времени препарат вводят внутривенно, внутримышечно, подкожно, интрауддерально и внутриматочно. Медикаментозному лечению подвергают 346 коров, 274 новорожденных, 110 свиноматок и кабанов, 294 поросят, 709 молочных поросят, 35 жеребят и 107 собак. Альтернативное лечение применяют как контрольное. Благодаря природе подопытных животных, ни одно не было оставлено без терапевтического лечения по этическим причинам. Однако выводы можно было сделать при сравнении с клинической картиной лечения болезней, известной из ветеринарной литературы.
Пример 4.
При проведении испытаний на детенышах уровень в крови INF и TNF определяют для группы здоровых и инфицированных животных, причем последних не подвергают лечению в первые 12 часов инфекционного заболевания, затем дают антибиотики и проводят лечение димером лизоцима в высокоочищенной форме. Полученные результаты графически иллюстрируются на фиг. 2 и 3, показывая соответственно уровни TNF и IFN. На фиг. 2 и 3 представлены истинные результаты, наблюдаемые на образцах крови четырех отдельно идентифицированных новорожденных. На фиг. 2 и 3 линия 1 представляет собой результаты в крови здорового жеребенка, а линия 2 - результаты инфицированного, но не подвергнутого лечению жеребенка (уровень IFN на 12-ый час, равный 45 U/мл, не показан, но диаграмма указывает значение направлением линии 2). Затем животное было подвергнуто известному лечению на 12-ый час и линия 3 показывает результаты у жеребенка после лечения антибиотиками, линия 4 - результаты у жеребенка после лечения KLP-602.
В группе, которой вводят димер лизоцима, после одной или двух инъекций KLP-602 выздоравливают более 90% детенышей, страдающих от гастроэнтерита, и более чем 85% детенышей, больных острой бронхопневмонией. Очень характерным является быстрое исчезновение таких симптомов, как лихорадка и понос. Лечение этим лекарственным препаратом не требует обеспечения животных дополнительными жидкостями. Время и скорость выздоровления превосходят таковые значения у контрольной группы, подвергнутой лечению антибиотиками.
Пример 5.
KLP-602 наиболее эффективен при лечении болезней, поражающих свиней. 100% или почти 100% животных выздоравливают от следующих болезней: послеродовая агалактия (синдром ММА), дизентерия, пиометра, грипп и коли-бактериоз. Применение лекарственного средства в случаях отека и бронхопневмонии дает менее очевидные, но все же значительно лучшие результаты, чем получаемые при альтернативных способах лечения. Наблюдаемое незамедлительное снижение поноса (обычно в течение первых 24 часов) и лихорадки, а также возобновление секреции молока особенно важно в случаях послеродового воспаления вымени и матки, что спасает жизнь поросят. В таблице 4 показана эффективность терапии KLP-602 по сравнению с альтернативными методами лечения.
Пример 6.
100% жеребят, страдающих от энтерита, и 83,3% жеребят, больных бронхопневмонией, при лечении KLP-602 выздоравливают быстрее, чем контрольная группа, которой вводят известные препараты.
Пример 7.
KLP-602 тестируют при лечении некоторых болезней у собак, например, типа фолликулита (эффективность составляла 100%), инфекционных заболеваний верхних и нижних дыхательных путей и инфекционных заболеваний желудочно-кишечного тракта, характерными симптомами которых является понос. В этой группе более всего распространен парвовирус, который, как известно, является практически неизлечимой болезнью. Однако и при заболеваниях парвовирусом наблюдают около 75% случаев выздоровления.
При испытаниях на животных, пораженных естественно возникающими болезнями, сделано несколько важных наблюдений.
1. Терапия является эффективной и очень простой при лечении болезней, имеющих многофакторные этиологию и патогенез (такие болезни распространены в популяциях животных и с ними тяжело справляться особенно в питомниках, где очень легко происходит распространение эпидемических болезней). Такие открытия доказывают модулирующий эффект димера лизоцима на естественные защитные механизмы.
2. Терапия является эффективной для болезней, которые при их естественном течении вызывают эндотоксический шок или другие нарушения типа длительной лихорадки, сопровождающейся высокой температурой, и оказывают воздействие на состояние животного в течение длительного периода времени после выздоровления, причиняя таким образом большой вред животным, таким как лошади (жеребята), которых разводят для гонок и других спортивных состязаний, а также, главным образом, для пищевой промышленности, когда издержки производства имеют критическое значение. Быстрое выздоровление позволит существенно сократить затраты на лечение таких болезней.
3. Результаты, наблюдаемые in vivo, подтверждают подавление уровней TNF при лечении димерами лизоцима различных возникающих естественным путем инфекционных болезней и таким образом подтверждают заявляемое изобретение.
Пример 8.
Исследования действия димера лизоцима на активность антибиотиков против различных микроорганизмов проводят для выбора бактерии для дальнейших испытаний, определения доз антибиотиков, наиболее эффективных для отобранных микроорганизмов, и определения диапазона концентраций димера лизоцима, в пределах которого будут наблюдаться ожидаемые эффекты. В экспериментах используют две серии лиофилизированного очищенного димера лизоцима - одну, полученную в 1991 г. и другую - в 1992 г. В экспериментах применяют антибиотики, доступные на польском рынке, поставляемые польским изготовителем лекарств Polfa, такие как пенициллин, неомицин, эритромицин, цефалоспорин (SEFRIL).
Тестируемые антибиотики суспендируют в буферном растворе NaCl (PBS-Biomed) или в бычьей сыворотке. К суспензии добавляют димер лизоцима таким образом, чтобы в тестируемых образцах концентрации димера всегда составляли 5 мг/мл. В каждом испытании концентрации тестируемых антибиотиков различные в зависимости от варьирующей чувствительности используемых микроорганизмов.
Эффективность одного антибиотика или в комбинации с димером лизоцима тестируют в PBS или в суспензии бычьей сыворотки in vitro на Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Staphylococcus aurens и Streptococcus uberis, полученных от больных животных. В экспериментах также используют лабораторные штаммы Sarcina lutea 9341 ATCC и Staphylococcus aurens 209 P.
Поскольку испытания носят предварительный характер, каждый антибиотик проверяют в отношении 1, 2 или 3 различных видов бактерии следующим образом.
1. Подготовка чашек Петри
В 0,05 мл 18-часового бульона культуры тестируемой бактерии добавляют 14 мл образца обогащенного агара (Biomed). Смесь перемешивают и выливают на чашку Петри диаметром 10 мм. После охлаждения и отверждения агара помещают стерильные цилиндры, которые заполняют растворами тестируемых антибиотиков.
В 0,05 мл 18-часового бульона культуры тестируемой бактерии добавляют 14 мл образца обогащенного агара (Biomed). Смесь перемешивают и выливают на чашку Петри диаметром 10 мм. После охлаждения и отверждения агара помещают стерильные цилиндры, которые заполняют растворами тестируемых антибиотиков.
2. Подготовка растворов антибиотиков
10 мг образца тестируемого антибиотика предварительно растворяют в PBS; затем требуемый объем этого раствора добавляют к определенному объему PBS или бычьей сыворотки для получения концентрации антибиотика, наиболее близкой к MIC (минимальная ингибирующая концентрация); каждый раз готовят растворы 3 различных концентраций.
10 мг образца тестируемого антибиотика предварительно растворяют в PBS; затем требуемый объем этого раствора добавляют к определенному объему PBS или бычьей сыворотки для получения концентрации антибиотика, наиболее близкой к MIC (минимальная ингибирующая концентрация); каждый раз готовят растворы 3 различных концентраций.
3. Приготовление раствора димера лизоцима
10 мг лиофилизованного димера лизоцима предварительно растворяют в 10 мл PBS. Дальнейшие разбавления готовят либо с PBS или с бычьей сывороткой и добавляют к растворам антибиотиков, приготовленным ранее как описано выше. Тестируют следующие комбинации:
- антибиотик/PBS,
- антибиотик/PBS + димер лизоцима,
- антибиотик/сыворотка,
- антибиотик/сыворотка + димер лизоцима.
10 мг лиофилизованного димера лизоцима предварительно растворяют в 10 мл PBS. Дальнейшие разбавления готовят либо с PBS или с бычьей сывороткой и добавляют к растворам антибиотиков, приготовленным ранее как описано выше. Тестируют следующие комбинации:
- антибиотик/PBS,
- антибиотик/PBS + димер лизоцима,
- антибиотик/сыворотка,
- антибиотик/сыворотка + димер лизоцима.
В каждом цилиндре концентрация антибиотика была той же самой; концентрация димера лизоцима составляет 5 мг/мл. После заполнения цилиндров растворами чашки Петри сохраняют при комнатной температуре в течение 2 часов, затем культуры инкубируют при 37oC.
4. Получение результатов и оценка активности
Чашки Петри удаляют из нагревателя после 18-часовой инкубации и измеряют диаметр зоны ингибирования роста бактерий (отсутствие колоний) вокруг цилиндров.
Чашки Петри удаляют из нагревателя после 18-часовой инкубации и измеряют диаметр зоны ингибирования роста бактерий (отсутствие колоний) вокруг цилиндров.
Не обнаружено никакого различия в размерах зон ингибирования роста бактерий вокруг цилиндров, заполненных суспензиями антибиотика в PBS без и с добавкой димера лизоцима концентрацией 5 мг/мл. Размер зоны ингибирования был меньше вокруг цилиндров, заполненных суспензией антибиотика в бычьей сыворотке, однако больше вокруг цилиндров, заполненных антибиотиком + суспензией димера лизоцима в бычьей сыворотке. Зоны были больше, чем наблюдаемые вокруг цилиндров, заполненных суспензиями PBS, а также больше, чем вокруг цилиндров, заполненных суспензиями сывороток только антибиотиков, без добавки димера лизоцима.
Обнаружен феномен при испытаниях с пенициллином, используемым против Sarcina lutea. Ампицилин проявляет синергизм в комбинации с димером лизоцима при ингибировании in vitro роста Escherichia coli, Salmonella enteritidis и Staphylococcus epidermidis. Отмечено увеличение активности эритромицина в присутствии димера лизоцима против Staphylococcus aurens 209 P и Streptococcus uberis, а также в присутствии SEFRIL - против Staphylococcus aureus 209 P, Escherichia coli и Salmonella enteritidis и устойчивы к этому антибиотику.
Увеличение противобактериальной активности тестируемых антибиотиков наблюдается только при использовании бычьей сыворотки в качестве растворителя. Как правило, увеличение составляет в среднем 50%, но в некоторых случаях присутствие димера лизоцима приводит к увеличению активности антибиотиков на 100%.
Выводы
Димер лизоцима (без любого консерванта) в концентрациях 5 мг/мл обнаруживает in vitro синергизм с некоторыми антибиотиками, используемыми в MIC (минимальных ингибирующих концентрациях) в присутствии бычьей сыворотки при ингибировании роста бактерий. Результаты, полученные в настоящее время, несомненно свидетельствуют о необходимости дальнейших исследований.
Димер лизоцима (без любого консерванта) в концентрациях 5 мг/мл обнаруживает in vitro синергизм с некоторыми антибиотиками, используемыми в MIC (минимальных ингибирующих концентрациях) в присутствии бычьей сыворотки при ингибировании роста бактерий. Результаты, полученные в настоящее время, несомненно свидетельствуют о необходимости дальнейших исследований.
Пример 9.
Синергизм с AZT при лечении пациентов, больных СПИДом:
Ito, M. et al. недавно сообщили, что TNF-a может быть антагонистом активности AZT против ВИЧ (Ito. M. et al.: "Tumor necrosis factor antagonizes inhibitory effect of azidothymidine on human immunodeficiency virus (HIV) replication Vitro; Biochem. Biophys. Res. Commun. 1990, 166; 1095-1101). Пациенты, больные СПИДом в прогрессирующей стадии, страдают от большого количества случайных инфекционных болезней. Некоторые инфекционные агенты могут стимулировать увеличение TNF, IL-6 и других цитокинов, которые могут либо подавлять иммунитет, либо усиливать репликацию ВИЧ.
Ito, M. et al. недавно сообщили, что TNF-a может быть антагонистом активности AZT против ВИЧ (Ito. M. et al.: "Tumor necrosis factor antagonizes inhibitory effect of azidothymidine on human immunodeficiency virus (HIV) replication Vitro; Biochem. Biophys. Res. Commun. 1990, 166; 1095-1101). Пациенты, больные СПИДом в прогрессирующей стадии, страдают от большого количества случайных инфекционных болезней. Некоторые инфекционные агенты могут стимулировать увеличение TNF, IL-6 и других цитокинов, которые могут либо подавлять иммунитет, либо усиливать репликацию ВИЧ.
Соответственно лечение только AZT недостаточно эффективно. Для увеличения активности AZT против ВИЧ предложено объединить лечение AZT с введением димера лизоцима в целях ингибирования синтеза TNF - фактора - антагониста активности AZT против ВИЧ.
Claims (16)
1. Применение димеризованной формы лизоцима в качестве активного ингредиента лекарственного средства для модуляции естественных защитных механизмов у животных или человека, включающий, по крайней мере, одно из следующих действий: ингибирование высвобождения фактора некроза опухоли (TNF), уменьшение уровня TNF, усиление фагоцитоза, увеличение высвобождения интерферона, увеличение высвобождения интерлейкина-6.
2. Применение по п.1 для усиления защитных механизмов.
3. Применение по п.1 или 2 для понижения уровня TNF, превышающего 13,75 пг/мл.
4. Применение по любому из пп.1 - 3 для введения указанного лизоцима в единичной или повторяющейся дозе в количестве от 0,3 мкг до 1 мг на 106 лимфоцитов периферической крови (PBL).
5. Применение по любому из пп.1 - 4 для профилактического или терапевтического применения.
6. Применение по п.5 для профилактики, по крайней мере, одного из следующих состояний: воспаления, лихорадки, сепсиса, септического шока, кахексии.
7. Применение по п.5 для терапевтического лечения, по крайней мере, одного из следующих заболеваний: сепсиса, септического шока, кахексии.
8. Применение по любому из пп. 1 - 5, где указанное лекарственное средство включает димеризованный лизоцим в комбинации с антибиотиком и/или AZT.
9. Применение по п. 8, где указанное лекарственное средство включает димеризованный лизоцим в комбинации с антибиотиком для увеличения антибактериальной активности антибиотика, по крайней мере, до 50%.
10. Применение по любому из пп. 1 - 9, где лекарственное средство представляет собой раствор для инъекций, включающий димеризованный лизоцим в количестве от 0,01 до 10 мг/мл, предпочтительно 0,1 - 1,0 мг/мл, апирогенной стерильной композиции, включающей, по крайней мере, физиологически приемлемый консервант.
11. Применение по любому из пп. 1 - 10 для введения в единичной или повторяющейся дозе 0,02 мг/кг веса тела.
12. Применение по любому из пп.1 - 7, где указанное лекарственное средство представляет собой гель или мазь для местного применения.
13. Применение по любому из пп.1 - 12 для пропитывания антисептической одежды или тампона эффективной дозой димеризованной формы лизоцима.
14. Фармацевтическая композиция для модуляции естественных защитных механизмов у животных или человека, включающих, по крайней мере, одно из следующих действий: ингибирование высвобождения фактора некроза опухоли (TNF), уменьшение уровня TNF, усиление фагоцитоза, увеличение высвобождения интерферона, увеличение высвобождения интерлейкина-6, включающая активный ингредиент и апирогенную стерильную композицию, включающую, по крайней мере, один физиологически приемлемый растворитель и/или, по крайней мере, один фармацевтически приемлемый консервант, отличающаяся тем, что в качестве активного ингредиента используют димеризованную форму лизоцима в количестве от 0,01 - 10 мг/мл, предпочтительно 0,1 - 1,0 мг/мл.
15. Фармацевтическая композиция по п. 14, отличающаяся тем, что она представляет собой комбинацию с антибиотиком и/или AZT.
16. Фармацевтическая композиция по п.15, в которой димеризованный лизоцим представлен в комбинации с антибиотиком для увеличения антибактериальной активности антибиотика, по крайней мере, до 50%.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PL92295273A PL173978B1 (pl) | 1992-07-13 | 1992-07-13 | Sposób oddziaływania na wydzielanie cytokin w hodowli limfocytów krwi obwodowej |
PLP-295273 | 1992-07-13 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU95105517A RU95105517A (ru) | 1997-11-27 |
RU2145875C1 true RU2145875C1 (ru) | 2000-02-27 |
Family
ID=20058087
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU95105517A RU2145875C1 (ru) | 1992-07-13 | 1993-07-13 | Применение димера лизоцима в качестве лекарственного средства и содержащие его композиции |
Country Status (31)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6132715A (ru) |
EP (1) | EP0651654B1 (ru) |
JP (1) | JPH07508744A (ru) |
KR (1) | KR100289841B1 (ru) |
CN (1) | CN1057937C (ru) |
AT (1) | ATE252392T1 (ru) |
AU (1) | AU677786B2 (ru) |
BG (1) | BG63331B1 (ru) |
BR (1) | BR9306722A (ru) |
CA (1) | CA2140140A1 (ru) |
CZ (1) | CZ286725B6 (ru) |
DE (2) | DE651654T1 (ru) |
DK (1) | DK0651654T3 (ru) |
ES (1) | ES2074037T3 (ru) |
FI (1) | FI950144A (ru) |
GE (1) | GEP20012466B (ru) |
GR (1) | GR950300039T1 (ru) |
HU (1) | HU218151B (ru) |
MX (1) | MX9304197A (ru) |
NZ (2) | NZ254135A (ru) |
OA (1) | OA10125A (ru) |
PL (1) | PL173978B1 (ru) |
PT (1) | PT651654E (ru) |
RO (1) | RO112580B1 (ru) |
RU (1) | RU2145875C1 (ru) |
SG (1) | SG52727A1 (ru) |
SK (1) | SK282377B6 (ru) |
TW (1) | TW259710B (ru) |
UA (1) | UA49789C2 (ru) |
WO (1) | WO1994001127A1 (ru) |
ZA (1) | ZA935046B (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2472467C2 (ru) * | 2011-04-13 | 2013-01-20 | Государственное научное учреждение Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт (ГНУ КНИВИ) | Способ профилактики и лечения гастроэнтеритов, обусловленных бактериозами, у телят |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6183742B1 (en) | 1992-07-13 | 2001-02-06 | Nika Health Products, Limited | Applications of lysozyme dimer |
DZ1964A1 (fr) * | 1995-01-13 | 2002-10-15 | Nika Health Products Ltd | Nouvelle applications d'un dimère de lysozyme. |
WO1996038115A1 (en) * | 1995-05-30 | 1996-12-05 | Lectin Biopharma, Inc. | Method of using lectins for agglutination and collection of menstrual flow |
US6123937A (en) * | 1997-03-14 | 2000-09-26 | Nika Health Products, Limited | Applications of lysozyme dimer |
ITMI981148A1 (it) | 1998-05-22 | 1999-11-22 | Therapicon Srl | Utilizzo di lisozima c modificato per preparare composizioni medicinali per il trattamento di alcune gravi malattie |
EP1174147A1 (en) * | 2000-06-27 | 2002-01-23 | Nika Health Products Limited | Reversal of antibiotic resistance with lysozyme dimer |
US20050244402A1 (en) * | 2004-04-30 | 2005-11-03 | Villanueva Julie M | Absorption of pain-causing agents |
RU2546911C2 (ru) * | 2013-04-11 | 2015-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Донской государственный аграрный университет" | Способ хранения свинины в охлажденном состоянии |
CN105106626A (zh) * | 2015-09-30 | 2015-12-02 | 成都倍加特生物科技有限公司 | 一种治疗月经期感染的汤剂药物及其制备方法 |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR4020M (ru) * | 1965-01-29 | 1966-03-21 | ||
FR2215201A1 (en) * | 1973-01-24 | 1974-08-23 | Theranol Lab | Broad-spectrum antibiotic compsns. - contg. antibiotic resistant lactic bacilli and enzyme diffusing-agent |
JPS5533409A (en) * | 1978-08-30 | 1980-03-08 | Eisai Co Ltd | Carcinostatic agent |
JPS5533408A (en) * | 1978-08-30 | 1980-03-08 | Eisai Co Ltd | Immunity-increasing agent |
JPS5543040A (en) * | 1978-09-25 | 1980-03-26 | Eisai Co Ltd | Immunity raising agent |
US4221794A (en) * | 1979-06-21 | 1980-09-09 | Newport Pharmaceuticals International, Inc. | Method of imparting immunomodulating and antiviral activity |
US4457919A (en) * | 1980-03-14 | 1984-07-03 | Newport Pharmaceutical International, Inc. | Method of imparting immunomodulating, antiviral or antitumor activity |
US4510144A (en) * | 1981-08-26 | 1985-04-09 | Newport Pharmaceuticals International | Methods of imparting immunomodulating activity with dihydrothiazolo purine derivatives |
US4739046A (en) * | 1985-08-19 | 1988-04-19 | Luzio Nicholas R Di | Soluble phosphorylated glucan |
US4744984A (en) * | 1985-10-08 | 1988-05-17 | Vetrepharm Research, Inc. | Antiviral immunotherapeutic agent and preparation thereof |
EP0238851B1 (en) * | 1986-02-19 | 1992-12-09 | Imreg, Inc. | A method and means of assaying an immune system |
AU624331B2 (en) * | 1988-05-26 | 1992-06-11 | Nika Health Products Ltd. | A composition having as its active ingredient lysozyme or ribonuclease dimer in a pharmaceutically acceptable carrier |
DE3817955A1 (de) * | 1988-05-27 | 1989-11-30 | Hoechst Ag | Tnf-inhibitor enthaltendes arzneimittel |
JP2568447B2 (ja) * | 1988-05-31 | 1997-01-08 | ナップ・システムズ・(ユーエスエイ)・インコーポレーテッド | 印刷原板を処理するための装置及び方法 |
KR920702621A (ko) * | 1989-06-13 | 1992-10-06 | 스튜어트 알. 슈터 | 단핵세포 및/또는 마크로파지에 의한 인터루킨-1 또는 종양회사인자 생성의 억제 |
US5314816A (en) * | 1990-01-08 | 1994-05-24 | Nika Health Products Ltd. | Method of preparing lysozyme dimers |
MC2242A1 (fr) * | 1990-01-08 | 1993-02-23 | Nika Health Products Ltd | Procede de preparation de dimeres du lysozyme |
WO1992002220A1 (en) * | 1990-08-03 | 1992-02-20 | Smithkline Beecham Corporation | Tnf inhibitors |
-
1992
- 1992-07-13 PL PL92295273A patent/PL173978B1/pl not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-07-13 GE GEAP19932466A patent/GEP20012466B/en unknown
- 1993-07-13 DK DK93915903T patent/DK0651654T3/da active
- 1993-07-13 PT PT93915903T patent/PT651654E/pt unknown
- 1993-07-13 BR BR9306722A patent/BR9306722A/pt not_active Application Discontinuation
- 1993-07-13 AT AT93915903T patent/ATE252392T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 DE DE0651654T patent/DE651654T1/de active Pending
- 1993-07-13 EP EP93915903A patent/EP0651654B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 DE DE69333258T patent/DE69333258T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 NZ NZ254135A patent/NZ254135A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 JP JP6502985A patent/JPH07508744A/ja active Pending
- 1993-07-13 RU RU95105517A patent/RU2145875C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 ES ES93915903T patent/ES2074037T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 SG SG1996008336A patent/SG52727A1/en unknown
- 1993-07-13 MX MX9304197A patent/MX9304197A/es not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 ZA ZA935046A patent/ZA935046B/xx unknown
- 1993-07-13 CZ CZ199585A patent/CZ286725B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 KR KR1019940704649A patent/KR100289841B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 UA UA95018021A patent/UA49789C2/ru unknown
- 1993-07-13 CA CA002140140A patent/CA2140140A1/en not_active Abandoned
- 1993-07-13 HU HU9500098A patent/HU218151B/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 AU AU45686/93A patent/AU677786B2/en not_active Ceased
- 1993-07-13 SK SK40-95A patent/SK282377B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 RO RO95-00041A patent/RO112580B1/ro unknown
- 1993-07-13 CN CN93116771A patent/CN1057937C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1993-07-13 WO PCT/EP1993/001841 patent/WO1994001127A1/en active IP Right Grant
- 1993-08-03 TW TW082106180A patent/TW259710B/zh active
-
1994
- 1994-12-22 BG BG99287A patent/BG63331B1/bg unknown
-
1995
- 1995-01-12 FI FI950144A patent/FI950144A/fi unknown
- 1995-01-13 OA OA60604A patent/OA10125A/en unknown
- 1995-06-07 US US08/476,561 patent/US6132715A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-31 GR GR950300039T patent/GR950300039T1/el unknown
-
1996
- 1996-09-13 NZ NZ299377A patent/NZ299377A/en not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2472467C2 (ru) * | 2011-04-13 | 2013-01-20 | Государственное научное учреждение Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт (ГНУ КНИВИ) | Способ профилактики и лечения гастроэнтеритов, обусловленных бактериозами, у телят |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DK173078B1 (da) | Anvendelse af en lysozym-dimer og/eller en ribonuclease-dimer til fremstilling af et lægemiddel til behandling af virus- el | |
Malaviya et al. | Role of mast cell leukotrienes in neutrophil recruitment and bacterial clearance in infectious peritonitis | |
Liu et al. | Staphylococcal peptidoglycans induce arthritis | |
Myhre et al. | Peptidoglycan-an endotoxin in its own right? | |
EP0520021A1 (en) | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS. | |
RU2145875C1 (ru) | Применение димера лизоцима в качестве лекарственного средства и содержащие его композиции | |
SHERWOOD et al. | Glucan phosphate potentiates endotoxin-induced interferon-γ expression in immunocompetent mice, but attenuates induction of endotoxin tolerance | |
KR19980701337A (ko) | 라이소자임 이량체의 신규 용도(new applications of lysozyme dimer) | |
EP0548558A2 (en) | Compositions containing surfactants as potentiating agents for the treatment of mammalian diseases | |
PL176407B1 (pl) | Kompozycja farmaceutyczna zawierająca dimer lizozymu | |
US20210275594A1 (en) | Method of treating a bacterial infection using colostrum | |
RU2681523C2 (ru) | Состав для лечения диарейного синдрома при кишечных инфекциях телят в молочный период выращивания | |
KR19990034654A (ko) | 프로폴리스의 추출방법과 면역증강제로서의 용도 | |
Ioannovich et al. | Rationale, design and performance of a clinical trial to investigate interferon-gamma (Imukin) in the prophylactic treatment of severe burns-related infections | |
MXPA97005246A (en) | New applications of dimero de lisoz |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20100930 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110714 |