KR19980701337A - 라이소자임 이량체의 신규 용도(new applications of lysozyme dimer) - Google Patents

라이소자임 이량체의 신규 용도(new applications of lysozyme dimer) Download PDF

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Abstract

본 발명은 고순도, 예로써 원치않은 산물이 10wt% 이하인 라이소자임 이량체를 포함하는 제약학적 조성물, 이의 신규용도에 관계한다. 이와같은 용도에는 암, 모발성장 질환, 물고기 질병과 벌질병을 포함하는 사람과 동물의 질병의 예방과 치료와 같은 일반적인 면역자극을 위한 조성물의 국소, 경구과 비경구 투여를 포함한다. 라이소자임 이량체 조성물, 적절하게는 5-500㎍/㎏ 농도로 1회 또는 반복 투여하면 면역계의 일반적인 자극이 유도된다.

Description

라이소자임 이량체의 신규 용도
지난 80년대에 특정 효소가 동일 단량체의 유익한 성질을 유지하면서 단량체보다는 독성이 덜 한 이량체 형으로 되어있고 어떤경우에는 치료 약량으로 사용되었을 때 전혀 부작용을 나타내지 않는다는 것을 발견하였다.
활성성분 라이소자임 이량체 또는 다른 이량체 효소로 구성된 항바이러스성 그리고 항박테리아성 조성물은 WO89/11294 에 상술되어 있다. 라이소자임 이량체는 1.25∼20㎎/㎖ 배양물 농도로 사용되었을 때 환자에서 취한 샘플에서 배양된 다수의 박테리아 균주의 증식을 저해하는 것으로 보고하고 있다. 또한 이량체는 1일에 2회 1∼2㎎/㎏으로 경구 투여할 때 개의 파르보바이러스 감염을 치료하는데 효과가 있는 것으로 보고되고 있다. 뒤에 추가로 라이소자임 이량체의 특징을 발견하였는데, 예로써 WO94/01127에 상술된 것과 같이 박테리아성 그리고 바이러스성 감염의 치료에 특히 추가 약물의 치료요법적 용도가 개발되었다.
WO94/01127에서는 라이소자임 이량체에서 관찰된 여러효과를 이해하는데 도움이 될 수 있는 모델이론을 제시하였다. 라이소자임의 전체 작용방식은 아직 완전하게 이해되지는 않고 있지만 상응하는 단량체의 용균 활성에 의해 설명될 수 없는 추가 치료 활성이 있다. 발명자들은 이량체 라이소자임 특히 사이토킨 레벨의 수준을 조절하는 것과 연관된 이량체 라이소자임의 특정 면역 자극 효과를 발견하였다. 또한, 이들의 실험으로 부터, 라이소자임 이량체는 바이러스 수용성 단백질로 구성된 것으로 보이는 외측 세포표면 특정 부분을 차단함으로써 바이러스에 의한 박테리아 세포의 침투를 저해한다는 결론을 내렸다.
기존 문헌에서는 시험관내에서 라이소자임 이량체에서 수득된 결과에 대해 상술하고 있다. 특히 Bartholeyns and Zenebergh (Europ. J. Cancer, Vol. 15, 1979, 85-91)는 시험관에서 간 암세포에 대한 세포정균 활성에 대해 이량체 라이소자임을 테스트하였다. 또한 세포 배양물에서 암 세포 증식이 73%±15% 정도 저해되는 것을 관측하였다(ibid., p. 89, Table 2).
놀라운 것은, WO94/01127을 제외하고는 라이소자임 이량체에 대한 생체내 실험에 대해서는 보고된 바가 없다. 놀라운 것은 Bartholeyns 와 Zenebergh 또는 다른 연구자들이 암에 대해 싸울 수 있는 발견을 촉진시키지는 못했다. Sorrentino et al., Eur. J. Biochem, 124, 183-189(1982) 의 방법에 따라 생성된 라이소자임 이량체의 순도와 본 발명에 적절하게 이용된 라이소자임 이량체의 순도를 비교하는 실험(도 1)에서 적어도 한가지 가능한 이유를 볼 수 있다;
라이소자임 단량체, 삼량체, 사량체 같은 부산물이 Sorrentino 에 따라 만든 제제에서 고농도가 발견되는 반면, 본 발명에서의 생산물은 매우 순도가 높고 즉, 제재의 총 라이소자임 부분에 대해 최고 90% 까지 소요의 라이소자임 이량체를 포함하고 있다. 이와같은 고순도 라이소자임 이량체의 제조공정은 WO 91/10731에 상술되어 있다.
이는 기존 기술 라이소자임 이량체의 순도는 생체 실험과 용도에 적합한 것이 아니라는 것을 뒷받침하는데 이는 이미 15년전 라이소자임의 유익한 항박테리아 활성에도 불구하고 라이소자임 단량체는 다소 독성이 있어 염증과 심각한 알레르기 및 독성 쇼크 증상을 일으킬 수 있다.
이와같은 상황에서, Bartholeyns 와 Zenebergh 를 포함한 다른 연구자들이 생체내에 이용할 수 있는 라이소자임 이량체를 개발하기 위해 비록 라이소자임 이량체를 추가 연구해야 한다고 하기는 했지만 지난 10년 내지 15년동안 추가실험을 실행하지 않은 이유를 더 잘 이해할 수 있다.
생체내에서 라이소자임 이량체의 사용에 대해 기존 기술의 편견으로 인해 과학 연구활동이 부족함에도 불구하고 본 발명자들은 라이소자임 이량체의 생산과 정제를 개선하고 WO94/01127 에 상술된 항바이러스성 및 항박테리아성 적용을 유도할 수 있는 상품으로 생체내 사람과 동물에 적용할 수 있는 방법을 찾기 위해 연구개발 업무를 실행하였다.
단량체에 비해 이량체 라이소자임의 낮은 독성과 신규 고순도 라이소자임 이량체 준비의 이용성에 기초하여 본 발명자들은 비록 기존 기술이 바이러스 또는 박테리아 감염이외 질병 치료에 이의 사용을 제시하지는 못했으나 생체내에서 라이소자임 이량체 제제로 항암치료를 시도하였다. 본 발명의 가장 큰 장점중 하나는 통상의 화학요법에 이용되는 매우 독성이 큰 항암제를 제약학적 조성물로 제조된 고순도 라이소자임으로 대체하는 용도에 제시한다는 것이다.
본 발명은 라이소자임 이량체의 신규용도와 아와같은 이량체를 포함하는 조성물에 관계한다. 신규용도는 면역시스템의 일반적인 자극원리에 기초하여 특히 사람과 동물신체에서 천연 방어과 재생 시스템의 기능이 손상된 증상 또는 질병의 예방 또는 치료에 유용하다.
도 1 은 두가지 상이한 기종 기술을 이용하여 만든 라이소자임 이량체의 순도를 비교한 것이다.
고순도 라이소자임 이량체는 독성이 단량체보다 낮기 때문에 사람과 동물의 치료에 바로 이용될 수 있는 제약학적 소성물의 제조에 이용될 수 있다.
전술한 것과같이, 이와같은 고순도의 라이소자임 이량체는 부산물이 10%wt 이하를 포함하고 있고, 사람, 동물, 란, 식물, 미생물등으로 부터 유도된 단량체의 이량체형성 과정을 통하여 수득될 수 있으며, 단량체는 천연형으로 분리되거나 동일한 라이소자임 자연발생적인 라이소자임과 동일한 생물학적 또는 화학적 특성을 가지는 단량체를 분리하기 위해 화학적 또는 유전공학적 방법을 통하여 제조된다.
시험관내 세포배양과 생체 테스트 모델, 적절하게는 쥐 테스트 모델의 테스트에서, 본 발명의 발명자들은 이용된 라이소자임 이량체 조성물은 시험관과 생체내에 암조직의 세포증식의 저해에 강한 능력을 가진다는 것을 성공적으로 설명할 수 있었다. 이와같은 치료작용은 바이러스에 의해 또는 영향을 받은 공지의 다양한 암형태에서 확인될 수 있었다. 이들 바이러스는 특히, 사람 파필로마 바이러스, 입스타인-바 바이러스, 헤파타이타스 B 바이러스, 서브타입을 포함하는 HTLV-(성인 T-세포 백혈병 바이러스), HTLV-II(임파종 바이러스)와 HIV-(사람 면역결핍 바이러스)와 같은 레트로바이러스로 구성된다.
이들 바이러스의 작용에 의해 유도된 또는 영향을 받은 암의 형태는 경부 육종, 비뇨기 육종, 카포시 육종, 주요 간세포 육종, 백혈병, T-세포 임파종, AIDS 또는 이의 아류로 구성된다. 본 발명의 목적은 사람과 동물에서 암을 예방하고 치료하기 위한 제약학적 조성물과 그 방법을 제공하는 것이다.
고순도 라이소자임 이량체의 또다른 유익한 응용부분은 하부 절단 수술과 같은 수술후에 감염 상처가 있는 환자에 라이소자임 이량체 조성물을 투여하였을 때 이다. 이는 이량체의 국소투여는 상처 감염을 성공적으로 처리하고 처리된 부분내에 모성장을 촉진시키고 재생시키는 것을 볼 수 있다.
이와같은 놀라운 발견은 추가 조사로 이어지고 마침내 모발 성장 질환 특히, 원형 탈모증과 같은 면역학적 기능이상 또는 기능장애에 기초한 모발 성장 질환에 이용될 수 있는 제약학적 조성물을 제조하였다.
이와같은 조성물은 모발 성장 자극제로 사용할 수 있는 오랜 열망의 조성물을 어느정도 실행할 수 있다. 이와같은 전혀 기대하지 않은 효과의 기본 원리는 면역방어 기작의 자극과 개선, 상피 조직층과 피부의 혈액 순환개선 그리고 면역학적 기능의 일반적인 개선 및 일부 확인안된 효과로 인한 것으로 보인다.
라이소자임 이량체를 포함하는 제약학적 조성물의 또다른 놀라운 그리고 상업적으로 관심이 있는 부분은 양어장과 양봉장에서 찾아볼 수 있는데 통상적인 항생제 실험에서 라이소자임 이량체를 포함하는 상이한 비-특이적 면역자극제로 대체될 수 있다.
물고기 질병 예방과 치료를 위해 물고기 배양물에서 면역 자극물질의 이용은 신규 개발을 보장한다(Siwicki and Anderson 1990; Siwicki et al. 1994). 현재, 물고기 질병을 치료하기 위한 물질에는 양어조를 멸균하기 위해 사용되는 항생제, 약물과 화학물질을 포함한다(Stoskopf, 1993). 이와같은 치료법은 특정질병의 치료에는 적어도 부분적으로 효과가 있을 수 있으나, 환경에 그리고 생선에 이와같은 물질의 축적과 다양한 항생제에 저항성이 있는 병원성 미생물 균주가 출현되는 문제점이 발생된다.
양봉의 경우에, 박테리아성 그리고/또는 바이러스 감염과 같은 미생물에 의해 감염된 경우에 벌을 죽이는 것은 흔한 일이다. 이와같은 처리는 다른 콜로니들 간에 감염이 퍼지는 것을 막고 손실을 최소화하게 된다. 따라서, 벌과 항생제의 면역 시스템을 추가로 강화시킬 수 있는 항생제의 장점을 복합시킨 벌꿀의 예방적 그리고/또는 치료요법적 처리에 대한 또다른 신뢰성 있는 방법이 필요하다. 이와같은 것은 항생제-저항성 미생물 균주를 만들지는 않는다. 본 발명은 이와같은 요구를 총족시키는 방법을 제공한다. 또한, 이량체 라이소자임이 감지가능한 농도로 최종 벌꿀에 있다하더라도 라이소자임 이량체의 일반적인 면역자극 때문에 더 나빠지기 보다는 품질의 개선으로 볼 수 있다.
일반적으로, 면역자극제는 사람과 동물에서 불특정 세포와 사람의 방어기작을 강화할 수 있는 생물학적 그리고 합성 화합물로 구성된다. 베타-글루칸, 치토산, 레바미졸, 잔류 미네랄과 미네랄 복합물질 그리고 많은 식물과 동물에서 유도된 다양한 물질이 질병을 예방하는데 효과적이다. 몇가지 형태의 베타글루칸은 물고기의 세포의 체액의 불특정 면역반응을 자극하는데 특이적이다.
식작용과 산화성 라디칼의 생산을 포함하는 불특정 방어기작은 면역자극 물질에 의해 신속하게 활성화되고 기생충 또는 다른 병인성에 대한 바이러스, 박테리아, 미코플라즘 및 곰팡이와 같은 병인성 미생물에 대해 물고기를 보호하기 위해 신속하게 준비하였다. 따라서, 이와같은 작용은 항체구성 및 특정세포 활성화를 포함하는 특정 채택된 면역반응을 만드는데 상당기간을 요구하는 특정 면역 반응보다 우위에 있다.
면역학적 방어기작의 상당한 개선을 나타내는 일차 생체내 시도에서 수득된 결과는 물고기 특히, 송어, 연어의 불특정 그리고 특정 세포 및 체액 방어기작과 꿀벌의 방어기작에 대해 라이소자임 이량체의 효과에 대한 세부적인 조사 프로그램을 착수하게 되었다.
따라서, 물고기와 벌꿀에서 불특정 그리고 체액 면역반응을 자극하기 위한 제약학적 조성물의 제조에 이용할 수 있는 라이소자임 이량체의 신규용도에 관한 것이다.
본 발명의 또다른 목적은 물고기와 벌에서 자연적으로 발생할 수 있는 질병의 예방과 치료에 대해 조성물의 1회 또는 반복 사용에 의해 면역 시스템의 불특정 자극을 유도할 수 있는 라이소자임 이량체를 포함하는 제약학적 조성물을 이용하는 방법을 제공한다.
생체실험에서 물고기에 투여된 제약물의 부산물과 같은 특정 화합물질 또는 다른 생활성 물질에 의해 손상을 받은 경우에 물고기는 라이소자임 단량체가 없는 그리고 원치않은 부산물이 10%wt 이하를 포함하는 고순도 라이소자임 이량체(WO 91/10731)로 처리하는 것이 적절한 것으로 보인다. 양어장 또는 양봉장에서 사육비용을 감소시키기 위해서, 부산물 특히 라이소자임 단량체의 독성 때문에 부작용을 일으키지 않는 약량으로 적용되는 가능한 낮은 순도의 라이소자임 이량체를 투여할 수도 있다.
여기에서 언급되는 라이소자임 이량체는 이를 필요로하는 환자에게 직접 투여되거나, 통상 갈렌 형으로되는 제약학적 조성물의 제조로 이용될 수 있다. 겔, 연고 또는 액상 조성물은 0.01-10㎎/㎖ 농도의 라이소자임 이량체로 구성되고 가끔은 0.1-1.0㎎/㎖을 포함할 수도 있다. 이것들은 멸균; 무발열성 조성물로 만들고 선택적으로는 적어도 하나의 생리학적 수용가능한 용매 그리고/또는 수용체 그리고/또는 적어도 하나의 적절한 방부제를 포함할 수 있다.
라이소자임 이량체를 포함하는 제약학적 조성물은 고형 종양주변에 국소 주사 또는 피하주사를 포함하는 체표면에 외부적인 사용으로 구성된 국소 또는 비경구 사용을 위함이다. 정맥주사는 치료요법적 과정에서 대체되거나 또는 추가 국소적인 국소처리로 대체될 수 있다.
그러나, 라이소자임 이량체 조성물은 액체 조성물의 흡입(비강, 구강, 인두점막) 또는 액체 또는 크림 조성물의 국소사용(질, 경부점막) 또는 라이소자임 이량체 물질이 포함된 탐폰을 통하여 점막에 충분히 투여된다는 것이 증명되었다.
일부 경우에, 라이소자임 이량체는 순간 정제, 캡슐 또는 당의정과 같은 통상 약초형으로 경구 투여하거나 또는 펠렛, 입자, 플록스 또는 분말형으로 제공된다. 이와같은 고형 조성물은 흔히 0.01-10㎎ 활성약물, 적절하게는 총 조성물의 g당 0.01-1.0㎎을 포함한다. 또한 적절하게는 적어도 하나의 첨가제 또는 향료 또는 발색제와 같은 통상적인 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 물고기를 처리하는 경우에 고형 조성물에는 양분이 추가로 포함될 수 있다. 또는 추가로, 라이소자임 이량체는 양어조물에 용해될 수 있는데, 활성약물을 물고기 아가미를 통하여 재흡수 될 수 있다. 양봉의 경우에, 라이소자임 이량체 조성물은 꿀을 만드는데 공급 치환물로 준비되는 물, 차, 당액 도는 다른 통상 액체로 고체 조성물을 용해하여 사용할 수 있다. 그러나, 벌꿀이 약물을 취할 수 있도록 하기 위해 적절하게 농축된-수용액으로 벌꿀과 혼합하는 것이 좋다.
그러나, 경구용 조성물은 삼투 시스템으로 이용될 수도 있다. 특정 경우에 있어서, 요도관의 암을 예방하거나 치료하기 위해 고순도 라이소자임 이량체 효과량이 함유된 멸균 드레싱 또는 탐폰의 국소사용이 유익할 수 있다.
전술한 라이소자임 이량체 조성물의 다양한 형태로 체중단 0.005 내지 0.5㎎/㎏으로 일회 또는 반복된 약량으로 투여되고 특히 0.01 내지 0.1㎎/㎏의 약량으로 투여된다. 최종 제약학적 조성물에서 활성 라이소자임 이량체의 요구 농도는 관련환자에 맞추어진 치료 또는 예방형태와 환자 또는 동물의 체격에 맞추어야 함은 물론이다. 그러나, 대부분의 경우에 전술한 농도범위는 적절한 치료에 충분하다. 그럼에도 불구하고, 수의약에서는 조성물에서 활성 라이소자임 이량체의 농도는 관련 용매에서 이량체의 용해도 이상 그리고 이하로 10㎎/㎖ 즉 20㎎ 용액 ㎖ 또는 연고로 농도를 증가시키게 될 수 있다.
가능하다면, 전술한 조성물의 복합 투여 과정은 경구, 직장 또는 국소이용등이 적절하다.
고순도 라이소자임 이량체의 필수적인 비독성 때문에 이와같은 이량체를 포함하는 조성물은 위험한 부작용없이 몇 개월 또는 수년간 장시간 사용될 수 있다. 약물의 예방적 또는 치료요법적 투여간격은 일일 한두번 또는 조간 또는 월간 약량범위가 있고 각 환자의 상태와 응급처리 뿐만아니라 라이소자임 이량체에 의한 면역자극 효과에 따라 더 길어질 수도 있다.
전술한 것과 같이, 본 발명은 고급, 라이소자임 이량체를 이용하여 적어도 부분적으로 가능하다. 상품의 질, 특히, 바람직하지 못한 라이소자임 단량체의 공유에 따른 놀라운 차이는 도 1 에서 설명하고 있다; 라인 1 은 LMW 선착색된 단백질 표준을 나타낸다. 포스포릴라제 B142,000 달톤, BSA 97,000 , 오브알부민 50,000, 카르본 안하이드라제 35,100, 소이빈 트립신 인히비터 29,700, 라이소자임 21,900 (Biorad, USA); 라인 2와 3에서는 정제된 라이소자임 이량체 LYOIUM KLPⓡ602(KLP-602), Lot 506449, 실험실 컨트롤; 라인 2 는 6.6㎍, 라인 3 은 19.8㎍; 라인 4와 5에서는 또다른 KLP-602 배취를 나타내는데 라인 4에서는 6.6㎍, 라인 5 에서는 19.8㎍; 라인 6과 7에서는 Sorrentino et al., Eur. J. Bioch. 124, 183- 189(1982)에 따라 제조된 라이소자임 이량체 제제(KIW-607)를 나타내는데 라인 6에서는 6.6㎍, 라인 7에서는 19.8㎍.
순수 라이소자임 이량체 제제 KLP-602 에서는 비교 상품 KIW-607 보다 4배이상의 이량체를 포함하고 있는데 이에 비해 비교상품 KIW-607 에서는 KLP-602 보다 6배 이상의 단량체를 포함하고 있다.
여기에서 상술된 본 발명을 충분히 이해할 수 있도록, 다음의 실시예를 제시한다. 이와같은 실시예는 설명을 위함이고, 본 발명을 이에 한정시키고자 함이 아니다.
실시예 1
AKR 쥐에서 임파성 백혈병의 치료에 라이소자임 이량체(KLP-602).
재료와 방법
본 연구에서는 Inbreeding Animal Center, Institute of Immunology and Experimental Therapy, Polish Academy of Sciences, Wroclaw 로 부터 구한 Graffi 바이러스로 접종시킨 루키미아 균주 AKR(암.수) 7개월 짜리 쥐를 이용하였다. AKR 쥐에서, 초기에 내생 백혈병 바이러스가 활성화되고, 이는 7 내지 9개월째에 임파성 백혈병이 임상적으로 분명해진다. 쥐는 각 30마리 3집단으로 분류하는데;
1 집단 (실험군)
- 동물에 20㎍/㎏ 0.3㎤ PBS 약량으로 1회 KLP-602를 피하투여한다.
2 집단 (실험군)
- 동물에 상기 1군의 약량과 동일하게 2회 KLP-602를 투여한다.
3 집단 (컨트롤)
- 동물에 0.3㎤ PBS를 2회 투여한다.
쥐는 최종 KLP-602 주사(각 집단에 10마리쥐)후 3 내지 6주간 출혈에 의해 죽인다. 각 집단에서 10마리 쥐는 살아남는다.
다음의 검사를 실시한다.
1. 전체 체중과 간, 지라, 흉선과 같은 내부기관과 외부경부 임파노드의 양을 측정하여 기관과 총 신체 체중의 비율을 결정한다. 치료요법적 활성 비율은 L/K×100%를 사용하여 평가하고 이때 L은 KLP-602 처리된 주의 생존시간을 의미하고 K는 컨트롤의 평균 생존시간을 의미한다.
2. 간, 지라, 흉선 그리고 임파구의 생검으로 조직 병리학적 검사를 실시한다. 부분은 망상섬유 게모리법의 H+E 로 착색한다.
3. 혈청에서 자유 라디칼의 수준은 혈청의 매우 약한 광자 발광을 감지할 수 있는 화학발광(Chl)방법을 이용하여 평가한다.
4. 다중핵의 식작용(PMN)은 NBT 와 화학발광(Chl) 테스트를 이용하여 평가한다.
결과:
20㎍/㎏의 약량으로 백혈병 AKR 쥐균주에 1회(집단 1)와 2회(집단 2) 피하 투여는 연구 3주 뒤에 측정한 컨트롤 집단(집단 3)과 비교하였을 때 통계학적으로 체중을 상당히 증가시키고, 지라, 흉선, 임파구와 같은 내부기관의 양이 상당히 증가되었다.
연구 6주뒤에 컨트롤과 비교하였을 때 (표 1) 집단 1에서 지라, 흉선, 임파구의 양은 감소되었고, 집단 2에서 간과 흉선을 증가되었다.
표 2 에서는 내부기관 무게와 전체 체중의 비율을 나타내고 있다. 두 실험군(집단 1과 2)과 비교하였을 때 3주뒤에 흉선의 양의 증가는 집단 3(대조군)에서 볼 수 있었다. 6주 뒤에 집단 1과 비교하였을 때 집단 2와 3에서 지라, 흉선, 임피구의 양이 증가되었다.
3주와 6주뒤에 실시한 병리학적 조직 검사에서는 경부 임파구, 흉선 그리고 지라에 임파세포의 약한 콜로니화(실험군)와 과도한 콜로니화(대조군)가 나타났다. 그러나, 간에서 백혈병 침윤은 대조군에서만 발견되었다. 임파세포는 다수의 이형성 유사특징을 가지는 타원형 또는 원형 다염색체 핵을 가진다. 이와같은 세포는 지라에서 약한 분화가 낮은 중심아세포, 세망세포와 증식중인 거핵세포성이 수반된다. 지라, 임파구와 흉선과 같은 임파기관의 기질에는 약한 얇은 세망섬유를 포함한다.
화학형광 검사;
연구 3주 뒤에 대조군 쥐의 혈청에서 자유 라디칼의 활성은 K=18×10-3이다. 집단 2 에서 자유 라디칼의 활성이 낮았다(K=10×10-3). 6주 뒤에 자유 라디칼은 대조군 동물에서 K=10×10-3으로 집단 2(K=16×10-3) 보다 낮았고 집단 1(K=1.5×10-3) 보다는 약간 높았다. PMN 의 식작용 활성은 3주뒤에 대조군과 비교하였을 때 모든 실험군에서 상당히 증가된 것을 볼 수 있고; 즉 4688 Chl (집단 1), 3485 Chl (집단 2). 대조군에서는 2052 Chl. 6주뒤에 집단 2 에서 식작용 활성이 동일하게 높고 (3264 Chl) 집단 1 에서는 더 낮았다(2477 Chl). 처리군에서 3주뒤에 NBT 테스트에 의해 측정된 식작용 활성의 상당한 증가가 있었고 각 집단 1과 2에서 0.27 과 0.26 이었다. 6주뒤에 식작용의 활성이 낮았고 집단 2에서만 나타났다. 대조군에서 식작용 활성은 0.22이다. 집단 1과 2에서 KLP-602 의 치료요법적 효과지수는 각각 최저수준 128%와 150%이다. 이는 추가연구에서 KLP-602의 두드러진 면역자극 성질을 나타낸다.
백혈병의 침윤은 대조군에서 보다 실험군에서 상당히 작은데 일부 쥐에서는 없는 경우도 있다. 백혈병 침윤은 흉선, 지라와 임파구에 있다. 또한, 대조군 동물의 간에도 있다. 연구 결과에서 KLP-602는 AKR 쥐의 백혈병을 저해 또는 지연시킬수 있음을 나타낸다. 대조적으로, 분화된 임파성 백혈병인 형태상 변화와 함께 임파성 기관의 신속한 성장이 위약으로 처리된 동물에서 발생하였다.
또한, KLP-602는 쥐 혈장에 자유 라디칼의 성장을 저해한다. 비타민 E, C,또는 셀레늄과 같은 항상화제 활성과 유사한 자유라디칼 공정을 저해한다. KLP-602로 처리된 AKR 쥐에서 백혈병 세포 증식 저해는 자유라디칼 유도된 공정의 저해에 따라 달라질 수 있다. 대조군 쥐에서, (KLP-602 없이), 자유라디칼 수준이 더 높고 이는 질병의 정도와 연관있는 것으로 보인다.
KLP-602는 또한 두 개 독립된 방법, NBT와 Chl에 의해 측정된 단핵 식작용 시스템(MPS)의 식작용 활성을 자극시켜 세포-중개된 면역성을 자극한다. 또한 TNF합성도 조절한다. 또한, 백혈구 세포 표면에 있는 종양 거부 항원은 MPS와 연합하는 T-세포에 의해 인지할 수 있다. 이들 T세포 가운데에는 임파카인-활성화된 킬러(LNK)보다 50-100%, 더 효과적인 종양 항-침윤성 임파세포(TIL)가 있다. 이들은 CD4또는 CD8또는 혼합 표현형을 가지고 이들은 표면에 IL-2 수용체를 발현시킨다. 이들이 신조직 형성 세포에 의해 왜 마비되는지는 아직 알려지지 않았다.
MPS 세포 자극과 세망-내피 시스템은 필수적인 면역학적 그리고 항바이러스 기작이다. 이와 같은 세포의 자극은 인테페롤을 생산시키고 특정 또는 비특정 면역학적 과정, B-세포, T-세포 또는 NK의존성을 간접적으로 활성화시킨다.
MPS 세포는 Fc 수용체, C3수용체 또는 HLA 수용체-II 그리고 렉틴, 트란스페린, 뉴로키나제, 인슐린 그리고 50개 다른 덜 알려진 수용체를 통하여 면역학적 공정에 참가한다. 이들의 발현과 친화성에 임의 변화는 세포 활성을 나타낸다. MPS 세포는 이들이 이와 같은 기질을 합성하기 때문에 NO-민감성 세포를 식작용할 수 있다. 활성화된 식세포는 염증수반 식작용 또는 혈액 건조 세포라 불린다. MPS 세포는 이들의 세포독성 및 세포용균성, 방어성 비리온 생산과 인터페롤 합성을 통하여 바이러스를 파괴할 수 있다.
AKR 쥐에서 예비연구 결과를 보면 KLP-602는 AKR 쥐의 백혈병을 치료하는데 성공적으로 이용될 수 있음을 나타낸다.
대조군과 실험군 쥐에서 내부 기관의 중량(mg)과 체중(g) (X ±S: 상위값은 S, 하위 값은 X를 나타낸다)
3주 6주
집단 I II III I II III
총체중 25.272.22 26.201.67 23.961.23 26.771.10 27.302.34 25.571.68
지라 0.070.00 0.080.02 0.090.01 0.070.00 0.230.01 0.220.00
흉선 0.060.01 0.070.02 0.080.02 0.080.01 0.210.03 0.150.07
임파구 0.040.00 0.040.00 0.050.01 0.040.00 0.070.04 0.080.04
간 1.380.15 1.360.38 1.430.05 1.610.18 1.890.42 1.670.15
실험군과 대조군에서 전체 체중에 대한 내부기관의 중량 (%)
3주 6주
집단 I II III I II III
지라 0.30 0.31 0.37 0.29 0.84 0.87
흉선 0.23 0.26 0.33 0.33 1.06 0.61
임파구 0.18 0.18 0.21 0.15 0.26 0.26
간 5.49 5.25 5.81 6.02 6.35 6.40
실시예 2
원형 탈모증에서 모발성장에 대한 고순도 라이소자임 이량체 제제(KLP-602)의 효과
본 연구는 KLP-602 를 포함하는 함유가 원형 탈모증에서 모발성장에 대해 활성이 있는지를 결정하기 위해 실행된 것이다.
재료와 방법;
본 연구는 관리된 비교 임상 연구이다.
본 연구는 일반적으로 양호한 건강상태에서 말기 원형 탈모증이 있는 12명 환자(2명은 남성 10명은 여성환자)가 연관된다. 나이분포는 19세 부터 50세 까지이다. MONOXIDILⓡ로 처리된 원형 탈모증이 있는 12명 환자(3명 남성과 5명 여성환자)를 대조군으로 한다. 이들 나이는 19세 부터 49세까지이다. 2개 처리군내에 나이와 성별등 개체분포는 2집단에서 유사하다.
환자 선택 기준
포함 기준
1. 말기 단계에 원형 탈모증
2. 18-50세
제외 기준
1. 이영양증의 원형 탈모증
2. 다른 형태의 원형 탈모증
3. 다른 피부 질환
수반약물;
일반적인 건강 상태를 치료하기 위해 요구되지 않는한 약물은 허용하지 않는다.
처리번호 할당;
연구하는 동안에 순서대로 처리군에서 선택기준에 맞는 환자에게 번호를 부여한다. 각 케이스 보고형식 (CRF)에 적정위치에 해당번호를 기입한다.
시도약물
고유 형태에 따라 NIKA 에서 제조한 모발 향료를 눈금이 있는 작은 팁 드로퍼가 있는 100㎖ 동일한 플라스틱 병에 넣는다. 피부과의상의 지시에 따라 1일 3회 머리띠에 0.05% KLP-602 로션을 바른다. 처리는 피부의사에 의해 원형 탈모증이라가 인정된 후 바로 시작한다.
2% MINOXIDILⓡ용액은 해당부위에 1일 2회 바른다.
처리기간은 16주이다. 처리후에 그다음 2개월간은 환자를 관찰한다.
안정성 평가.
테스트 집단 모든 환자에서 연구의 시작과 끝에 전반적인 병력과 의학적 검사에 의해 스크린한다. 처리전후에 일상적인 실험실 테스트로 혈액과 소변 검사를 실시한다. 실험실 연구에는 다음을 포함한다.
혈핵학:
헤모글로빈, 헤마토크릿, 총 그리고 분화된 백혈구 세포수
혈청 생화학.
ALT(GPT), AST(GOT), 알칼리 포스포타제,
비리루빈
뇨;
단백질, 혈액과 포도당에 대한 딥스틱 소변검사.
환자들은 치료받는 4개월 동안 그리고 그다음 2개월 동안 1달에 한 번씩 관찰한다. 각 방문시 환자는 일반적인 또는 국소반응에로 자극, 화상, 가려움 등에 대해 질문을 받게되고; 홍반 또는 다른 국소 부작용에 대해 검사를 받게 된다.
효과평가.
평가 변수
1. 모발성장이 1차적인 효과인자이다.
2. 머리가죽의 치유시기가 2차적인 효과인자이다.
3. 연구에서 다음에 각시기에 사진검사.
- KLP-502 머리항료의 사용전.
- 모발성장시기
- KLP-602 머리향료 사용 종료시
현미경 검사(트리코그람)를 실시한다. 광범위한 원형탈모 부분에서 취한 모발의 표준 트리코그람은 가장 유용한 정보를 나타내고, 질병의 심각성과 치료요법적인 효과를 측정한다.
각 방문시에, 다음의 기준으로 모발 성장 징후를 평가한다.
- 없음
- 약간 - 모발성장(연모 또는 몇 개 흩어져 있는 모발).
- 중간 - 불완전(부분적)
- 완전
외관상 수용가능한 모발 성장이란 두피를 충분히 덮을 수 있고 나머지 두발손상 부분을 숨길 수 있음을 의미한다.
결과:
연구에 등록한(12명은 0.05%, KLP-602로 처리하고, 대조군의 12명은 2% Minoxidil 용액으로 처리하여)
4개월 치료 기간동안과 그 다음 2개월 동안 완료하였다.
효과.
가장 유용한 효과 측정은 연구종료시에 조사자의 추정이다. 전반적으로, KLP-602 기에서 12명중 8명(66%) 그리고 미녹시딜기에서 12명중 6명(50%)은 연구동안에 상당한 모발증가를 나타내었다. 이들중 KLP602기(33%)에서 4명과 미녹시딜기에서 3명(25%)은 완전한 미용상 수용가능한 모발성장을 한 것으로 보인다. 부분적으로 모발성장을 KLP-602기에서 (2명중 3명(25%) 그리고 미녹시딜기에서 3명(25%)에서 볼 수 있었다. KLP-602 집단중 한 환자에서(9%) 최소한 모발성장이 나타났다. KLP-602 집단에서 12명중 4명 (33%) 그리고 미녹시딜기에서 12명중 6명 (50%)에서 모발성장이 없었다.
25% 두피가 손실된 원형 탈모증이 있는 집단의 KLP-602 에서 8개 체중 8개체 모두에서 모발성장이 있었고, 미녹시딜 집단에서는 7개체중 6개체에 있었다. 두 처리집단에서 25% 이상 두피가 손실된 원형 탈모증 개체에서는 재생이 없었다.
모발성장의 평균 시간은 두 집단에서 1개월 내지 3개월 범위의 치료기간과 상관관계가 있다. KLP-602 집단에서 이들 개체들은 치료 1개월 뒤에 반응이 있었다. 한 여성 개체에서 1개월 뒤에 모발성장은 모발 끝 5mm 길이가 되었고 대머리 부분은 조밀하게 재생 모발로 덮히게 되었다.
2개월째 대조군 방문시에 한 여성에게서 전체 탈모증(감정적 스트레스-이혼)이 나타났고 더 이상의 치료에 대해 반응이 없었다. 네가티브 결과가 나타났다. 미녹시딜군의 한 개체에서 치료 한달뒤에 모발재생이 나타났다. KLP-602 군의 4명 환자가 치료 2개월 뒤에 모발 재생이 있었다. 연구 3개월 뒤에는 KLP-602 집단에서 2명, 미녹시딜 집단에서 각 3명이 모발재생이 있었다.
안정성.
치료동안 그리고 그다음 기간동안에도 일반적인 부작용이 없었다. 처리된 두 집단에서 연구 종료시에 기저부에서 실험실 혈액과 소변검사에서 비정상적인 것은 없었다.
연구동안에 국소적인 부작용이 있었다: KLP-602 집단의 한여성은 처리 2개월째에 두피의 화끈거림과 가려움을 호소하였다. 그녀는 이와같은 증세로 새로운 가발을 착용하였다., 이와같은 문제는 추가 치료없이 2주내에 사라졌고, 그녀는 치료를 중단하였고 결과는 좋았다. 2% 미녹시딜 용액을 사용한 한 개체는 머리 끈적한 것에 대해 불만을 나타내었으나 두피검사에서 상당한 임상적인 징후는 없었다. 환자는 이와같은 시도와 연관이 있으나 치료를 지속하였다.
환자나이, 대머리 부분 그리고 두집단에서 짧지만 유사하게 나타나는 1주 내지 최대 1년까지의 반응기관과 모발재생과는 어떤 중요한 상관관계는 발견할 수 없었다. 두 처리 집단 모두에서 모든 무반응자들은 적어도 5년간(5-15년) 원형 탈모증 기왕증을 가진다.
논의.
본 연구는 원형 탈모증이 있는 환자에게 국소적으로 0.05% KLP-602 로션을 적용하여 모발성장에 대한 안정성과 효과를 평가하고 이를 4개월 동안 2% 미녹시딜 용액으로 처리하는 것과 비교하였다.
KLP-602를 포함하는 모발향료는 환자에게 잘 적응되었다. 0.05% KLP-602 로션으로 처리한 환자 66%가 모발성장이 증가되었는데 이는 미녹시딜 집단에 환자에서 50%가 증가된 것과 비교할 수 있다.
미용상 수용가능한 모발성장은 KLP-602 집단에서는 33%, 미녹시딜 집단에서는 25%가 나타났다. 25% 이하의 변형 두피를 가지는 원형 탈모증의 경우에는 더 낳은 처리 결과가 나타났다.
0.05% KLP-602 로션은 국소적으로 바르기가 용이하고, 국소 또는 일반적인 부작용을 일으키지 않는다. 단기간 연구(16주)를 감안한다면 얻어진 결과는 매우 고무적인 것이다.
결론.
1. KLP-602 를 포함하는 모발 항유는 매우 부드럽고, 임의 부작용을 유발하지 않는다.
2. 0.05%, KLP-602 의 국소처리는 안전하고 용이하다.
3. 연구동안에 실험실 수준에서 국소 또는 일반적인 부작용이 나타나지 않았다.
4. 단기간 요법(4개월)과 그 다음 2개월의 단시간으로 인해, 비록 이기간이 처리의 효과를 평가하는 데에는 충분할 수 있으나 처리결과의 완벽한 평가와 처리의 실행은 불가능하다.
5. 본 시도에서 수득된 결과에서 0.05% KLP 602 로션은 2% 미녹시딜 용액과 비교할만하고 원형탈모 처리에도 상당히 효과적이다.
6. 연구에서 수득된 결과와 임상적인 조사에서, 국소처리된 KLP-602는 원형 탈모증으로 고생하는 환자에게서 모발 성장을 유도하였다.
요약.
본 연구는 원형 탈모증에서 KLP-602 를 포함하는 모발 향유의 효과와 인내성을 평가하기 위해 실행하였다. 0.05% KLP-602 로션을 1일 3회 바르면 일반적으로 4개월간 처리기간 동안에 잘 적응하는 것으로 보인다. 국소 또는 전신적인 부작용은 없었다. 미녹시딜 집단보다는 KLP-602 집단에서 더 나은 모발생장 반응이 있었다. 모발생장 반응은 0.05% KLP-602 로션을 바른 환자의 66%에서 나타났다. 보통의 또는 조밀한 모발성장 반응을 가지는 환자비율은 25% 이하 두피손실이 있는 대머리 환자에서 더 크다. 0.05% KLP-602 는 원형탈모증에서 우수한 제재임을 알 수 있다.
실시예 3
물고기의 면역 시스템의 일반적인 자극을 유도하기 위해 라이소자임 이량체의 예방적 적용.
테스트 방법.
각 90-100g 의 무게가 나가는 300마리 건강한 무지개 송어(Oncorhynchus mykiss, family of salmonidae)를 대상으로 한다. WO91/10731(여기에서는 KLP-602)에 따라 원치않은 단량체 라이소자임이 10% 정도 포함되고 기본적으로는 단량체 라이소자임이 없도록 제조된 라이소자임 이량체는 물고기에 복막내 주사하기에 적합하도록 체중당 10∼100㎍ 라이소자임을 투여하기 위해 주사액을 만들도록 PBS 에 용해한다. 약물은 하루에 한 번씩 투여한다. 치료요법적인 과정은 하루, 1일과 3일 또는 1,3,5 일에 약물을 처리하는 상이한 군으로 구성된다. 대조군 물고기는 라이소자임 이량체 투여를 하지 않는다.
마지막 주사후 1,2,3,4 주뒤에 각 처리군과 대조군에서 각 10마리 물고기를 취한다. 물고기를 고정시키고 헤파린 처리된 베규트(Greiner)를 사용하여 미측 정맥에서 100㎖ 혈액을 취하여 모은다. PMN 과 MN 세포의 식작용 능력, PMN과 MN 세포의 호흡 파열능력과 잠재적인 치사능력, PMN 식세포에서 MPO 활성과 혈청에서 라이소자임과 감마-글로블린 수준을 결정한다.
또한, 각 집단의 20마리는 질병(절창증) 도전 테스트를 받게된다. 물고기에서 48시간동안 영양배지에서 생장한 에러로모나스 살모니키다(Aeromonas salmonicida) 박테리아 현탁액을 1회 복막 주사한다. 동물의 치사율을 결정하고 죽은 동물의 신장에서 병원균을 분리하여 적용된 박테리아 감염과의 상관관계를 결정한다.
결과.
KLP-602 처리 집단에서는 전술한 모든 면역학적인 변수가 이에 상응하는 대조군에 비해 상당히 증가되었다(p0.05). 이와같은 놀라운 결과는 모든 집단 예로써, KLP-602 의 1-, 2-, 3배 적용후 그리고 최종 주사후 4주까지 관찰된 모든 집단에서 나타났다.
KLP-602 처리집단에서 물고기의 치사율은 대조군에 비해 상당히 낮다. 호흡기 파열 활성은 상대적으로 높고, 이는 KLP-602의 2배 또는 3배 적용에 의해 처리된 집단의 식장용 지수와 호중구 미엘로퍼옥시다제(MPO)수준이 된다.
A. 살모니키다의 용균성 박테리아 도전에 대한 공지의 무지개 송어의 감성과 라이소자임 이량체 조성물로 예방 처리한 집단에서 관찰된 결과는 약물이 이와같은 미생물의 도전에 대해 단기간 보호를 유도한다는 것이다. 또한, 보호는 1회 처리된 집단에서 보다는 KLP-602를 2 또는 3회 제공받은 집단에서 더 높았다.
결론.
물고이에서 고순도 라이소자임 이량체를 적용하면, 살모넬라(절창증의 원인군)에 의한 미생물 도전에 대해 상당한 보호와 일반적인 방어기작을 유도하였다. 이와같은 관찰은 특히 봄철과 같이 빈번히 발생하는 물고기 질병으로 인해 물고기의 손실을 최소화하기 위해 양어업계 예방적인 치료요법으로 상당히 중요하다.
실시예 4
라이소자임 이량체의 치료요법적 적용은 물고기의 면역 시스템의 일반적인 자극을 유도하였다.
테스트 과정
200마리 무지개 송이에 IPNV(감염성 췌장 리사 바이러스)의 자연 발생적인 감염과정에서 일반적인 방어기작의 비교연구와 이량체 라이소자임을 포함하는 조성물(KLP-602)을 적용시키는데 이용된다. IPNV 감염의 확인후에, 물고기의 일부분에 KLP-602를 처리하였고, 대조군은 처리하지 않고 남겨둔다. 일반적인 세포와 체액 방어기작을 특징으로 하는 주요변수는 면역학적 그리고 혈액학적 방법에 의해 분석하였다. 이와같은 방법은 관찰 2개월 동안에 총 백혈구 세포수, 상대적인 백혈구수, PMN과 NM세포의 식작용, 호흡기 파열 활성과 잠재적인 치사능력, 호중구에서 MPO 활성, 혈장에서 라이소자임와 세룰로플라즈민 활성과 총 단백질과 감마-글로블린 수준을 주간단위로 결정한다.
그중 무지개 송어 집단은 체중 ㎏당 20㎍의 양으로 일반 면역자극 KLP-602를 포함하는 음식물을 공급하였다. 냉동건조된 KLP602와 영양분자 함께 고형으로 적용하거나(펠렛) 또는 7일동안 수용액으로 물고기의 연못 물에 용해시킨다. 약물은 물고기 아가미를 통하여 흡수될 수 있다.
그다음, 주간간격으로 일반 세포와 체액 방어기작에 변화를 검사한다. 각 시간에, 면역학적 검사에 무작위로 10마리 물고기를 선택하여 IPNV 확인을 한다. 또한, 모든 물고기는 이상행동, 형태상 변화와 치사율에 대해 매일 관찰한다.
결과.
IPNV에 자연 발생적으로 감염된 물고기에서 면역억제 효과가 관찰되었다. 전반적인 관찰시간 동안에, 일반 세포와 체액 방어기작을 나타내는 변수는 상당히 감소한 반면, 라이소자임 이량체를 공급한 1주후에 대조군과 비교하였을 때 일부 변수 예로써 셀룰로플라즈민 수준, 호흡기 파열 활성, 이뮤노즐로블린 수준과 라이소자임 활성을 포함한 변수가 상당히 증가하였다(예로써, 세룰로플라즈민 수준, 31% 증가; 호흡기 파열 활성 33% 증가). KLP-602의 적용후에, 일반 방어 기작에 면역자극 효과가 확인되었다. 또한, 음식물에 KLP-602를 포함한 것을 공급받은 집단에서는 치사율이 낮았다.
결론.
라이소자임 이량체(KLP-602)를 포함하는 음식물로 처리한 물고기에서 일반 면역학적 방어기작의 유익한 변화를 나타내었다. 감소된 치사 예로써, IPNV에 의해 자연발생 감염에 대한 보호를 나타내는 것과 연관되는데 이는 여기에서 언급한 라이소자임 이량체의 투여에 의한 물고기 질병의 예방과 치료를 개발하고 최적화시키는데 강력히 추천된다.

Claims (11)

  1. 원치않은 부산물 함량은 10% 이하, 라이소자임 단량체는 실제없는 라이소자임 이량체는 암, 모발성장, 물고기 질병과 벌 질병등과 같은 질병의 예방과 치료를 위한 제약학적 조성물의 제조에 사용되는 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  2. 제 1 항에 있어서, 예방 또는 치료요법적 처리에는 사람 또는 동물의 재생 기작과 면역 시스템의 일반적인 자극으로 구성된 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  3. 제 1 항 또는 2 항에 있어서, 암은 사람 파필로마 바이러스, 입스타인-바 바이러스, 헤파타이티스 B바이러스와 레트로바이러스 적절하게는 성인 T-세포 루키미아 바이러스(HTLV-1), HTLV-II, HIV 의 서브타입을 포함하는 HIV-1 에서 선택된 바이러스에 의해 영향을 받은 또는 유도된 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  4. 제 1 항 또는 2 항에 있어서, 면역학적인 기능이상, 적절하게는 원형 탈모증으로 인한 모발 성장 질환의 경우에 모발 성장을 자극시키는 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  5. 제 1 항 또는 2 항에 있어서, 물고기 질병은 절창증과 IPNV 감염으로 구성된 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  6. 제 1, 2 와 5 항중 어느 한항에 있어서, 물고기는 연어족 특히 물고기 송어족으로 구성된 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  7. 전술한 어느 한항에 있어서, 라이소자임 이량체는 사람, 동물, 알, 식물, 미생물로 구성된 천연 소스에서 유도된 라이소자임 단량체의 이량체 형성 산물 또는 화학적 그리고/또는 유전학적 조작방법에 의해 합성된 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  8. 전술한 어느 한항에 있어서, 라이소자임 이량체 조성물은 체중 ㎏당 0.05- 0.5㎎/㎏ 적절하게는 약 0.10-0.1㎎/㎏을 1회 또는 반복 투여하는 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  9. 전술한 어느 한항에 있어서, 라이소자임 이량체 조성물은 겔, 연고 또는 액체 조성물로 적절하게는 0.01-10㎎/㎖, 더욱 적절하게는 0.01-1.0㎎/㎖ 양으로 구성되고, 조성물에는 국소, 경구 또는 비경구 투여용 적어도 하나의 제약학적 수용가능한 용매, 담체, 적절한 방부제가 추가로 포함된 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  10. 제 1 항 내지 8 항중 어느 한항에 있어서, 라이소자임 이량체 조성물은 고형 특히 정제, 캡슐, 당의정, 분말, 펠렛, 입자, 플록형이 되고, 적절하게는 0.01-10㎎/㎖, 더욱 적절하게는 0.01-1.0㎎/㎖ 양으로 구성되고, 조성물에는 국소, 경구 또는 비경구 투여용 적어도 하나의 제약학적 수용가능한 용매, 담체, 적절한 방부제가 추가로 포함된 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
  11. 제 1,2,7 내지 9 항중 어느 한항에 있어서, 선택적으로 바이러스 유도된-뇨도관 암의 치료와 예방에 이용되고 라이소자임 이량체의 효과량은 멸균 드레상 또는 탐폰으로 국소 제공되는 것을 특징으로 하는 라이소자임 이량체의 용도.
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