CZ286725B6 - Medicinal preparation for modulating natural protective mechanisms and pharmaceutical preparation for this purpose - Google Patents
Medicinal preparation for modulating natural protective mechanisms and pharmaceutical preparation for this purpose Download PDFInfo
- Publication number
- CZ286725B6 CZ286725B6 CZ199585A CZ8595A CZ286725B6 CZ 286725 B6 CZ286725 B6 CZ 286725B6 CZ 199585 A CZ199585 A CZ 199585A CZ 8595 A CZ8595 A CZ 8595A CZ 286725 B6 CZ286725 B6 CZ 286725B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- lysozyme
- tnf
- dimer
- manufacture
- medicament
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 11
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title abstract description 10
- 230000009979 protective mechanism Effects 0.000 title abstract 2
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 claims abstract description 99
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 claims abstract description 99
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 claims abstract description 99
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 claims abstract description 99
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 claims abstract description 99
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 claims abstract description 99
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims abstract description 26
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 12
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 claims abstract description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims abstract description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 69
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 claims description 49
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 32
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 28
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 claims description 26
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 22
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 claims description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 19
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 16
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 15
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 claims description 14
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 claims description 14
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 claims description 12
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims description 10
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 7
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 claims description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 3
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 claims description 3
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 36
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 3
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 abstract 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 103
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 32
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 29
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 24
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 20
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 20
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 20
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 20
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 20
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 18
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 17
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 11
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 11
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 11
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 11
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 10
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 10
- 108010005627 KLP602 Proteins 0.000 description 9
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 9
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 8
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 8
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 230000004044 response Effects 0.000 description 8
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 7
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 7
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 7
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 7
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 6
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 6
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 6
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 6
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 6
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 5
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 5
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 5
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 5
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 5
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000003532 endogenous pyrogen Substances 0.000 description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 5
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 4
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 4
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 4
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 4
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 4
- 244000309466 calf Species 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 4
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 4
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 4
- 206010001513 AIDS related complex Diseases 0.000 description 3
- 201000004813 Bronchopneumonia Diseases 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 3
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 3
- BMQYVXCPAOLZOK-UHFFFAOYSA-N Trihydroxypropylpterisin Natural products OCC(O)C(O)C1=CN=C2NC(N)=NC(=O)C2=N1 BMQYVXCPAOLZOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000003305 autocrine Effects 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 3
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 210000005104 human peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 3
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 3
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 description 2
- 241000701931 Canine parvovirus Species 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 2
- 208000037487 Endotoxemia Diseases 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 2
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 2
- 101000794214 Staphylococcus aureus Toxic shock syndrome toxin-1 Proteins 0.000 description 2
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 2
- 241000194054 Streptococcus uberis Species 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000037006 agalactosis Effects 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 2
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 2
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 2
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 2
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 208000001780 epistaxis Diseases 0.000 description 2
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 2
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 2
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 208000021760 high fever Diseases 0.000 description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- BMQYVXCPAOLZOK-XINAWCOVSA-N neopterin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)C1=CN=C2NC(N)=NC(=O)C2=N1 BMQYVXCPAOLZOK-XINAWCOVSA-N 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 2
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229940115922 streptococcus uberis Drugs 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000018680 Abdominal injury Diseases 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 101001023095 Anemonia sulcata Delta-actitoxin-Avd1a Proteins 0.000 description 1
- 101000641989 Araneus ventricosus Kunitz-type U1-aranetoxin-Av1a Proteins 0.000 description 1
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 101001028691 Carybdea rastonii Toxin CrTX-A Proteins 0.000 description 1
- 101000685083 Centruroides infamatus Beta-toxin Cii1 Proteins 0.000 description 1
- 101000685085 Centruroides noxius Toxin Cn1 Proteins 0.000 description 1
- 101001028688 Chironex fleckeri Toxin CfTX-1 Proteins 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000644407 Cyriopagopus schmidti U6-theraphotoxin-Hs1a Proteins 0.000 description 1
- 206010014824 Endotoxic shock Diseases 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 1
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 1
- 241000714260 Human T-lymphotropic virus 1 Species 0.000 description 1
- 208000003623 Hypoalbuminemia Diseases 0.000 description 1
- 208000013038 Hypocalcemia Diseases 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 206010024774 Localised infection Diseases 0.000 description 1
- 206010024971 Lower respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 208000034486 Multi-organ failure Diseases 0.000 description 1
- 208000010718 Multiple Organ Failure Diseases 0.000 description 1
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N Pentoxifylline Chemical compound O=C1N(CCCCC(=O)C)C(=O)N(C)C2=C1N(C)C=N2 BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000679608 Phaeosphaeria nodorum (strain SN15 / ATCC MYA-4574 / FGSC 10173) Cysteine rich necrotrophic effector Tox1 Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010062237 Renal impairment Diseases 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000018569 Respiratory Tract disease Diseases 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 206010040844 Skin exfoliation Diseases 0.000 description 1
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 206010044250 Toxic shock syndrome staphylococcal Diseases 0.000 description 1
- 206010046306 Upper respiratory tract infection Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 201000009840 acute diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 208000011341 adult acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- RDLPVSKMFDYCOR-UEKVPHQBSA-N cephradine Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@@H]3N(C2=O)C(=C(CS3)C)C(O)=O)=CCC=CC1 RDLPVSKMFDYCOR-UEKVPHQBSA-N 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 150000002066 eicosanoids Chemical class 0.000 description 1
- 206010014665 endocarditis Diseases 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000010429 evolutionary process Effects 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000000705 hypocalcaemia Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000007233 immunological mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- -1 inteferon Proteins 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 108010052620 leukocyte endogenous mediator Proteins 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000002794 lymphocyte assay Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 208000029744 multiple organ dysfunction syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 208000027531 mycobacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229960001476 pentoxifylline Drugs 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 208000030279 prolonged fever Diseases 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 201000002765 pyometritis Diseases 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000020029 respiratory tract infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011268 retreatment Methods 0.000 description 1
- 238000002435 rhinoplasty Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 231100000046 skin rash Toxicity 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000017756 staphylococcal toxic-shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- NVBFHJWHLNUMCV-UHFFFAOYSA-N sulfamide Chemical compound NS(N)(=O)=O NVBFHJWHLNUMCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000003390 teratogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- QXJQHYBHAIHNGG-UHFFFAOYSA-N trimethylolethane Chemical compound OCC(C)(CO)CO QXJQHYBHAIHNGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
- A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
- A61L15/22—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing macromolecular materials
- A61L15/32—Proteins, polypeptides; Degradation products or derivatives thereof, e.g. albumin, collagen, fibrin, gelatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2462—Lysozyme (3.2.1.17)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Léčivo pro modulaci přirozených obranných mechanismů a farmaceutický prostředek pro tento účel
Oblast techniky
Vynález se týká léčiva pro modulaci přirozených obranných mechanismů a farmaceutického prostředku pro tento účel.
Dosavadní stav techniky
Již dlouhou dobu je známo, že enzymy v monomemí formě jsou terapeuticky účinné při léčbě různých chorob.
Lysozym byl objeven Flemingem roku 1922, ale teprve roku 1950 byly objasněny jeho enzymatické funkce. Od té doby je tato sloučenina předmětem intenzivního výzkumu a byly oznámeny její různé terapeutické účinky. Těmito účinky jsou mimo jiné protivirové, antibakteriální, antiinflamatomí a antihistaminické účinky. Terapeutické využití lysozymu bylo však dosti omezeno v důsledku negativních vedlejších účinků, které monomemí forma vykazuje.
Toto omezení praktického použití lysozymu a jiných terapeuticky účinných enzymů bylo překonáno v pozdních 80. letech, kdy bylo objeveno, že izolované dimerované formy enzymů nevykazují žádné negativní vedlejší účinky při použití v terapeuticky účinných dávkách, přestože si zachovávají všechny prospěšné vlastnosti známých monomemích forem. Protivirové a antibakteriální prostředky obsahující jako účinnou přísadu dimer lysozymu nebo jiné dimenzované enzymy, jsou popsány v přihlášce PCT WO 89/111294. V této přihlášce bylo oznámeno, že při testech in vitro dimer lysozymu inhibuje proliferaci řady bakteriálních kmenů, kultivovaných ze vzorků odebraných pacientům, v koncentraci v rozmezí od 5 do 20 mg/ml, vztaženo na kulturu. Také bylo oznámeno, že tento dimer je účinný při léčbě infekcí způsobených psím parvovirem (CPV) při orálním podání dávky 1 až 2 mg/kg tělesné hmotnosti dvakrát denně.
Z dosavadního stavu techniky již bylo známo, že dimenzovaného lysozymu lze s úspěchem používat jako antibiotika proti bakteriálním a virovým infekcím (srovnej WO 89/11294) a že přírodní lysozymový monomer je schopen rozkládat stěny bakteriálních buněk. Co však známo nebylo, je, že dimer je kromě toho schopen modulovat aktivitu přirozených obranných mechanismů imunitního systému zvířecího nebo lidského těla.
V dosavadním stavu techniky také nejsou nikde popsány farmaceutické prostředky obsahující lysozymový dimer v kombinaci s AZT nebo antibiotikem a také z něho nikterak nevyplývá zřejmost takových kombinací pro odborníka v tomto oboru.
Při výzkumu, ve kterém pokračoval původce tohoto vynálezu, byly zjištěny další atraktivní charakteristické vlastnosti dimerů lysozymu a byla vyvinuta nová terapeutická použití tohoto léčiva.
Při klinických testech, které byly prováděny, aby se potvrdila antibakteriální a protivirová účinnost dimeru lysozymu, bylo s překvapením zjištěno, že dimer je neočekávaně účinný při léčbě akutních forem chorob zažívacího a dýchacího traktu. Z tohoto důvodu byly provedeny další výzkumy za účelem zjištění účinku dimeru lysozymu v těch stádiích různých chorob, při nichž přirozený obranný mechanismus selhává.
Je známo, že bakteriální toxiny tvoří jednu skupinu z mnoha virulentních faktorů, prostřednictvím kterých bakterie způsobují choroby. Nedávný pokrok v poznání bakteriálních toxinů
-1 CZ 286725 B6 zahrnuje aspekty, podle nichž dochází k interakci bakteriálních toxinů s imunitním systémem hostitele. Tato interakce má nejprve za následek imunomodulaci a druhotně pak uvolňování cytokinů a jiných mediátorů, které jsou zodpovědné za mnohé fyziologické poruchy způsobované těmito toxiny. Posledně uvedený účinek byl studován zejména na účincích endotoxinu, který hraje důležitou úlohu při patogenesi gram-negativní sepse (viz. Bayston, D. F., Cohen, J.: Bacterial Endotoxins nad Current Concepts in the Diagnosis and Retreatment of Endotoxaemia; J. Med. Microbiol., 1990, 31: 73 až 83). Ačkoliv je již dlouhou dobu známa úloha exotoxinů při infekcích způsobených Staphylococcus aureus a Streptococcus pyogenes, bylo to zjištění syndromu stafylokokového toxického šoku, které vedlo ke zvýšenému zájmu o exotoxiny produkované těmito organismy.
Toxický šok je prudké onemocnění, které je charakterizováno vysokou horečkou, sníženým krevním tlakem, kapilárním krvácením, difusním erythrodermatem, mukosálním erythemem, zhoršením funkce ledvin, hypokalcemií, hypoalbuminemií a odlupováním kůže při červených kožních vyrážkách. Mnoho případů syndromu toxického šokuje spojeno s použitím vaginálních tamponů při menstruaci, ale stále se množí případy, kdy byl tento syndrom konstatován mimo menstruaci u obou pohlaví, často po chirurgických zásazích, kdy byl na operovaném místa ponechán drenážní materiál, například při tamponáži nosu po rhinoplastice nebo prudké epistaxi (krvácení z nosu). Kmeny Staphylococcus izolované z vagíny pacientek trpících syndromem toxického šoku (TSS) produkují toxin 1 syndromy toxického šoku (TSST-1), ale zdrojem mikroorganismu produkujícího TSST-1 může být též nezjevná infekce. Počáteční bakteremie nemusí být zjevná, nicméně po týdnech nebo měsících může vést k vývoji lokalisovaných infekcí. Současně s výskytem takových infekcí mohou být zjištěny důkazy syndromu sepse nebo septického šoku. Řidší, ale dramatičtější bakteremie mohou vznikat bez jakéhokoliv vstupu nebo bez spojení s lokálními infekcemi a v těchto situacích může být hlavním projevem šok, endokarditis, disseminovaná intravaskulámí koagulopatie a mnohačetné selhání orgánů (viz Stevens, D.L., Et al.: Gram-positive Shock; Current Opinions in Infectious Diseases, 1992, 5: 355 až 363). Podobná pozorování byla také učiněna u jiných gram-pozitivních bakterií. Tak například infekce Streptococcus pyogenes je spojena s šokem a její mortalita je 30%. Streptococcus pneumoniae je příčinou zánětu plic, u něhož byla zjištěna vysoká úroveň resistence vůči penicilinu a sklon k vývoji šokového syndromu. Kromě toho, u pacientů trpících AIDS je vyšší výskyt pneumokokových infekcí, než u populace jako celku.
Infekce gram-negativními bakteriemi mohou mít také za následek sepsi a septický šok. Zdrojem většiny důležitých enterotoxinů jsou gram-negativní bacily a vibriony. Enterotoxin je lipopolysacharidovou (LPS) složkou vnější membrány buněčných stěn gram-negativních bakterií. Enterotoxiny napadají především střevní trakt a obvykle způsobují diarrhoeu. Nejčastějšími infekcemi gram-negativními bakteriemi u zvířat a lidí jsou infekce způsobené Escherichia coli. Značná dehydrace, která tyto infekce doprovází, může mít za následek smrt infikovaného jedince. Podle údajů světové zdravotnické organizace WHO akutní diarhoea zabíjí každý rok v rozvojových zemích přibližně 3,2 milionu dětí. Přibližně 30 % všech případů sepse je vyvoláno gram-negativními bakteriemi.
Sepse vznikající na základě infekce gram-pozitivními a gram-negativními bakteriemi je vždy vážné onemocnění, které se vyskytuje ve všech zemích. Ve Spojených státech amerických dochází každoročně přibližně ke 400 000 případů sepse s mortalitou přibližně 50 %.
Sepse a septický šok jsou předmětem mnoha publikací vydaných v nedávných letech. Bylo pozorováno, že při patofyziologii septického šoku, endotoxemie a jiných bakteriálních intoxikací hrají důležitou úlohu mediátory. Tyto mediátory zahrnují faktor nekrózy nádorů (TNF), interleukin-1 (IL-1), interferon (IFN), faktor aktivity krevních destiček a eikosanoidy (deriváty kyseliny arachinodové). Z těchto látek je nejdůležitější TNF, který ovlivňuje metabolismus a imunitní a fagocytický systém (viz Berkowitz, F. E.: Bacterial Toxins in Pathogenesis of Infections; Current Opinions in Infectious Diseases, 1991 4: 332 až 337. Zjistilo se, že pacienti,
-2CZ 286725 B6 kteří nepřežili septický šok, vykazovali vyšší koncentraci TNF a interleukinu-1. Mnozí autoři oznámili, že v plasmě a krvi pacientů trpících septickým šokem je zvýšena hladina TNF-a. Rovněž je zdůrazňováno, že toxický účinek TNF-α nezávisí tolik na koncentraci TNF, jako na jeho persistenci v těle.
Mnozí autoři zkoumali možnost modulace cytokinové kaskády při sepsi a septickém šoku. Oznámené úspěšné pokusy zahrnují použití monoklonálních anti-TNF protilátek a neutralizaci lipopolysacharidu antilipopolysacharidem. Protilátky však nezvyšují potlačení bakterií. Obzvláště užitečné efekty byly též pozorovány za použití činidel, jako je dexamethason a pentoxifyllin, které blokují produkci TNF makrofágy.
Je také známo, že k septickému šoku přispívají i jiné cytokiny. Za této situace má léčba modulující cytokinovou kaskádu při septickém šoku schopnost interferovat s postupem infekce, poněvadž obrana hostitele je závislá na těchto samých ínflamatomích cytokinech. Nalezení prostředku pro prevenci septického šoku má vysokou prioritu, díky potenciálnímu užitku pro velký počet pacientů, pro tyto účely se zdá být podstatná regulace hladiny TNF.
Podobně kritická je role TNF při jiném obranném mechanismu, kteiým je horečka, což je fyziologická odpověď na infekci, která je typická pro prakticky všechny vyšší zvířata a lidi. V současné době je známo pět pyrogenních cytokinů (interleukin-1, TNF, inteferon, interleukin2 a interleukin-6), které jsou považovány za hlavní endogenní mediátory febrilní odpovědi inhibující preoptické neurony citlivé k teplu, které za normálních okolností usnadňují tepelné ztráty a potlačují tvorbu tepla v lidském organismu. Horečka a její mediátory mají schopnost škodit jak invazivnímu organismu, tak hostiteli. V poslední době bylo nashromážděno dostatečné množství dat, která ukazují, že interleukin-1, TNF a interleukin-6 působí jako mediátory patofyziologických abnormalit infekcí. Jelikož endogenní pyrogeny přispívají k patologickému procesu různých infekcí, jsou jak tyto mediátory, tak febrilní odpověď pro hostitele potenciálně škodlivé. Nejpřesvědčivější důkaz v tomto ohledu pochází ze studií gram-negativní sepse. Také existuje důkaz, že endogenní pyrogeny zprostředkovávají systemické a lokální manifestace sepse způsobené gram-pozitivními bakteriemi, AIDS, infekcí vyvolaných spirochemitami, meningitis, syndromu respíračních obtíží u dospělých, supprativní artritis a mycobacteriosis. Přestože jsou citovaná data v kontrastu k pozorování, že samotná febrilní odpověď zvyšuje resistenci vůči infekci u experimentálních zvířat, je třeba chápat, že hlavním cílem evolučního procesu je zachování druhu a nikoliv přežití jednotlivce. Předpokládá se, že škodlivé systemické účinky pyrogenních cytokinů na výsledek infekcí zachvacujících celý organismus (například gramnegativní sepse) se mění u méně fulminantních infekcí na příznivé lokální účinky horečky. Urychlením smrti beznadějně infikovaných jedinců se příroda zbavuje jedinců, kteří by mohli být nebezpečni pro celý druh. Tímto mechanismem může být druh jako celek chráněn před epidemickými chorobami (viz Mackowiak, P. A.: Mechanism of Fever; Current Opinions in Infectious Diseases, 1992, 5: 348 až 354).
Hlavním rysem patogenů horečky je, že exogenní pyrogeny, bez ohledu na svůj původ nebo strukturu, způsobují horečku tím, že indukují v hostitelských buňkách (hlavně makrofázích) produkci endogenních pyrogenů. V důsledku toho by mohly být účinné terapeutické metody založené na použití protilátek proti endogenním pyrogenům a antagonistů receptorů endogenních pyrogenů. Jednou z množství je blokování biosyntézy TNF. Studie na zvířatech ukazují, že TNF se zřejmě produkuje před IL-1 a jinými cytokiny v kaskádě odpovědí na infekci. Podle mnoha vědců inhibice biosyntézy TNF rovněž znamená zastavení biosyntézy IL-1. Ale inhibice biosyntézy TNF také znamená zastavení škodlivých účinků některých fulminálních a beznadějných infekcí.
Je také známo, že TNF je jedním z mediátorů zánětlivých procesů. V mnoha případech je zánět prvním stadiem choroby, v jejímž přirozeném průběhu se vyvíjí septický šok. Za situace, kdy je
-3 CZ 286725 B6 rozbita celistvost tkání, jako je tomu u poranění, která jsou suspeptibilní vůči infekci, u poranění typu válečných poranění, zejména u poranění břicha (peritonitis), chorob gastrointestinálního traktu, jako jsou akutní infekce doprovázející appandicitis, akutních bakteriálních a virových infekcí, jako jsou pochřipkové pneumonie, neoplasmických chorob, zejména ve fázi rozkladu národů apod., je zánět prvním symptomem zvýšené tvorby TNF. Regulace hladiny TNF by proto představovala žádoucí léčbu těchto infekcí.
Ještě nespornější je úloha TNF u samotného AIDS. Pro AIDS je charakteristická hluboká imunodeficience. Charakteristickým rysem AIDS je snížený počet lymfocytů CD4+. Počet buněk infikovaných HIV, etiologickým činidlem AIDS, je u pacientů trpících AIDA relativně malý (méně nezjedná buňka na 100 až 1 000 buněk), dokonce i u jednojademých buněk periferní krve (PBMC). Přednostně se sice infikují lymfocyty CD4+, ale tyto buňky nejsou výlučným cílem infekce HIV. Nedávné důkazy ukázaly, že spektrum cílových buněk, na něž je HTV zaměřeno, může být dosti široké. Byly pozorovány jasné rozdíly ve výsledku infekce HIV u monocytů/makrofágů ve srovnání s T-lymfocyty. Zatímco T-lymfocyty mají tendenci ke svému zničení, monocyty/makrofágy umožňují infekci. HIV tedy může být usazen v monocytech/makrofázích, stejně tak jako v jiných buňkách těla, které pro HIV působí jako rezervoáry. Monocytový/makrofágový typ odpovědi na infekci HIV by mohl být zodpovědný zajištěnou latenci u hostitele. Tato odpověď může také způsobovat patogenní následky, k nimž dochází díky rozpustným faktorům produkovaným infikovanými buňkami (vou Toshifiími Matsuyama et al.: Cytokines and HIV Infection: ls AIDS a Tumor Nectosis Factor Disease; AIDS 1991, 5: 1405 až 1417). Mnoha vědci bylo oznámeno, že linie humánních T-buněk infikované HTLV-1 jsou vysoce suscentibilní vůči infekci HIV a vykazují dramatický cytopatický účinek ve spojení se zvýšeno replikací HIV. Kromě toho jsou buňky infikované HIV susceptibilní k poškození supematantem těchto buněk. Při měření titru viru po ošetření tímto supematantem se ukázalo, že faktor produkovaný T-buňkami (MT-2) zvýšil replikaci HIV. Tento faktor byl označen jako TNF-β, a toto zjištění je konsistentní se zprávami, že T-buňky (MT-2) produkují TNF-β. Stejný účinek byl pozorován za použití TNF-α. TNF-a a TNF-β selektivně usmrcují buňky infikované HIV a zvyšují replikaci HIV. Také bylo oznámeno, že linie T-buněk infikovaných HIV a čerstvě izolované PBMC od pacientů nakažených HIV respondují na TNF zvýšením hladiny HIV. Na základě těchto výsledků se předpokládá, že ke stejnému povzbuzení exprese HIV pravděpodobně dochází také in vivo. Tato povzbuzující aktivita TNF by mohla být neutralizována protilátkami proti TNF. Povzbuzení replikace HIV po léčbě TNF-α a TNF-β je až asi 10-ti násobné (viz. Yakarnam, A. et al.: Tumor Necrosis Factors (α, β) Induced by HIV-1 in Peripheral Blood Monocellular Cells Potenctiate Virus Replication; AIDS 1990, 421 až 427).
Nyní bylo potvrzeno, že různé cytokiny mohou ovlivňovat produkci HIV. Za použití purifikovaných monokleámích fagocytů z normální periferní krve byla pozorována jak indukce IL-6, tak TNF-α během několika hodin po expozici viru HIV. Tato indukce cytokinu byla též pozorována za použití teplem inaktivovaného HIV. Na základě mnoha pozorování jsou Toshifumi a Matsuyama et al. (výše citované práce) přesvědčeni, že AIDS je choroba spojená s cytokiny nebo TNF. V cytokinovém pojení AIDS představují TNF-α a TNF-β molekuly rozhodující důležitosti, které povzbuzují replikaci HIV a indukují svou vlastní expresi a expresi jiných cytokinů. Bylo demonstrováno, že TNF-α stimuluje uvolňování jiných cytokinů v buňkách různých typů, a proto je klíčovým cytokinem cytokinové kaskády prvního obranného mechanismu.
Bylo již také navrženo vysvětlení mnoha symptomů spojených s AIDS uvolňováním cytokinů s různými biologickými funkcemi. Zvýšená produkce IL-1 a TNF-α, dvou dobře známých pyrogenů, by mohla vysvětlit horečku, která bývá u pacientů s AIDS pozorována. TNF-α se může podílet na kachexii spojené s AIDS. Jak TNF-α, tak TNF-β působí jako imunomodulátorové a efektorové molekuly při cytotoxitě zprostředkované monocyty. Kromě toho je TNF zodpovědný za aktivaci imunitní odpovědi a může přímo zabíjet buňky infikované HIV, čímž
-4CZ 286725 B6 povzbuzuje replikaci HIV. Také byl navržen imunologický mechanismus pro vysvětlení úbytku buněk CD4-T u pacientů s AIDS (Matsuyama et al., op. cit.). Také bylo oznámeno, že Kaposiho sarkom spojený s AIDS je rovněž vyvolán TNF-a. TNF-α může být přitom produkován fyziologicky (například pomocí UV světla) stimulovanými keratonocyty, což může přispět k indukci IL-6 v kůži a vývoji Kaposiho sarkomu při AIDS. Při zkouškách in vitro může TNF-a poškozovat myelin a oligodendrocyty. Také některé buněčné linie získané z gliomu jsou suceptibilní na antiproliferativní účinek TNF-α. To může vést k závěru, že dysfunkce centrálního nervového systému u pacientů s AIDS je důsledkem činnost TNF-α. Několik zpráv ukazuje, že hladina TNF-α a IL-1 v séru je podstatně zvýšena při vývoji AIDS nebo ARC (komplex spojený s AIDS), zatímco klesá do rozmezí kontrolních hodnot charakteristického pro zdravé jedince při testech se sérem asymptomatických nosičů HTV. Pro Matsuyama et al. (op. cit.) je AIDS stejně tak chorobou spojenou s TNF, jako chorobou spojenou s HIV. Zdá se, že získání kontroly nad indukcí TNF, by mohlo vést k účinné terapii pacientů s AIDS.
Podstata vynálezu
Dále uvedená základní zjištění umožnila vyřešit výše popsané problémy a nalézt nová terapeutická použití pro dimer lysozymu při výše popsaných patologických stavech:
1. dimer lysozymu inhibuje syntézu TNF;
2. dimer lysozymu stimuluje syntézu IFN-a;
3. dimer lysozymu zvyšuje aktivitu fagocytů.
Úkolem tohoto vynálezu bylo vyvinout farmaceutické přípravky, které by byly terapeuticky užitečné při léčbě chorob spojených s nadměrně vysokou hladinou TNF (faktoru nekrózy nádorů), jak je to popsáno výše.
Dalším úkolem tohoto vynálezu bylo vyvinout farmaceutické přípravky, které by byly užitečné pro profylaxi chorob spojených s nadměrnou hladinou TNF, jak je to popsáno výše.
Ještě dalším úkolem tohoto vynálezu bylo vyvinout farmaceutické přípravky a hygienické výrobky, které by byly užitečné při léčbě a prevenci chorob spojených se zvyšováním hladiny a se zvýšenou hladinou TNF.
Výše uvedené úkoly mohou být podle vynálezu vyřešeny následujícími novými použitími dimenzované formy lysozymu a následujícími novými farmaceutickými přípravky obsahujícími jako účinnou přísadu dimer lysozymu:
- použití dimeru lysozymu při výrobě léčiva inhibujícího biosyntézu faktoru nekrózy nádorů u zvířat a lidí;
- použití dimeru lysozymu při výrobě farmaceutického přípravu pro léčbu chorob spojených s nadměrně vysokou hladinou faktoru nekrózy nádorů;
- použití dimeru lysozymu při výrobě farmaceutického přípravu pro profylaxi chorob spojených s nadměrně vysokou hladinou faktoru nekrózy nádorů;
- použití dimeru lysozymu při výrobě léčiv potlačujících uvolňování faktoru nekrózy nádorů indukované HTV u asymptomatických nosičů a pacientů s ARC;
- použití dimeru lysozymu při výrobě farmaceutických přípravků pro léčbu AIDS;
-5CZ 286725 B6
- použití dimeru lysozymu při výrobě farmaceutických přípravků pro prevenci a/nebo léčbu sepse a septického šoku;
- použití dimeru lysozymu při výrobě farmaceutických přípravků pro prevenci a/nebo léčbu kachexie;
- použití dimeru lysozymu při výrobě farmaceutických přípravků pro prevenci a/nebo léčbu horečky;
- injekce obsahující dimer lysozymu v množství 0,01 až 10 mg/ml, přednostně 0,1 až 1,0 mg/ml apyrogenního sterilního prostředku obsahujícího fyziologicky vhodné rozpouštědlo a farmaceuticky schválené konzervační činidlo;
- injekce uvedené výše pro intravenosní podávání v jediné nebo opakované dávce 0,02 mg/kg tělesné hmotnosti;
- tampony a antiseptické obvazové materiály napuštěné účinnou dávkou dimeru lysozymu a masti nebo gely obsahující účinnou dávku dimeru lysozymu, za účelem prevence sepse a septického šoku a pro léčbu infikovaných ran;
- vaginální tampony napuštěné účinnou dávkou dimeru lysozymu pro použití při menstruaci.
Předmětem vynálezu je tedy použití dimerizované formy lysozymu pro výrobu léčiva pro modulaci přirozených obranných mechanismů, přičemž tato modulace zahrnuje alespoň jeden z následujících účinků: inhibici uvolňování faktoru nekrózy nádorů, TNF, snižování hladiny TNF, zvyšování fagocytózy a zvyšování uvolňování interferonu u zvířat a lidí.
Předmětem vynálezu je dále také farmaceutický prostředek, který obsahuje dimerzovanou formu lysozymu v množství 0,01 až 10 mg/ml v kombinaci s antibiotikem a/nebo azidothymidinem (AZT) a přednostně 0,1 až 1,0 mg/ml apyrogenní sterilní kompozice obsahující alespoň jedno fyziologicky vhodné rozpouštědlo a/nebo alespoň jedno farmaceuticky schválené konzervační činidlo.
Jako dimerované formy lysozymu se přednostně používá izolovaného purifikovaného dimeru lysozymu. Při některých aplikacích je možno používat přípravků, které kromě dimeru lysozymu obsahují také malé podíly trimetu a vyšších oligomerů tohoto enzymu.
Injekce podle tohoto vynálezu je také možno podávat intramuskulámě a hypodermálně. Při některých aplikacích může být také vhodné podávat stejný kapalný přípravek (současně nebo nezávisle) intrauterinálně a intraudderálně (do vemene) nebo lokálně spolu s jinými topickými přípravky.
Přednostní apyrogenní sterilní přípravky zahrnující alespoň jedno fyziologicky vhodné rozpouštědlo a/nebo alespoň jedno farmaceuticky schválené konzervační činidlo se skládají z apyrogenní sterilizované vody nebo vodné roztoku PBS, jako rozpouštědlo, a thiomersalu, jako schváleného konzervačního činidla pro farmaceutické přípravky obsahující proteiny.
Dimerovanou formu lysozymu je možno získat způsobem regulované polymerace monomemího enzymu, po němž se provede pečlivá purifikace a z reakční směsi se odstraní zejména monomemí forma, která má výše uvedené toxické vedlejší účinky, a trimery a vyšší oligomemí frakce. Pro získání dimemí formy enzymu je možno použít jakýchkoliv známých polymeračních metod. Jeden z těchto výrobních postupů, který také zahrnuje purifikační stupně, je popsán v publikované přihlášce WO 91/10731.
-6CZ 286725 B6
Nedávno provedené předklinické testy dimeru lysozymu neukázaly žádné mutagenní ani teratogenní účinky a neprojevily se při nich problémy s tolerancí, nebo byly tyto problémy nepatrné. Toxicita při jediné dávce podané orálně nebo dermálně LD50 byla naměřitelná (nad 2000 mg/kg) a při intravenosní aplikaci byla dávka LD50 vyšší než 1000 mg/kg.
Nová aplikace dimeru lysozymu podle tohoto vynálezu se opírá o dobré základy, jak ukazují výsledky zkoušek in vitru a klinických aplikací in vivo. Také byly provedeny některé srovnávací studie.
Předpokládá se, že inhibiční účinky na uvolňování TNF je tak velký, díky širokému spektru účinnosti dimeru lysozymu, totiž jeho schopnosti indukovat uvolňování IFN a zvyšovat fagocytózu. Tyto dvě vlastnosti jsou důležitými faktory přirozených obranných mechanismů. Terapeutické a profylaktické účinky, které se dostavují při nových použitích dimeru lysozymu podle vynálezu se opírají o posilující účinek dimeru lysozymu na přirozené obranné mechanismy.
Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení, v nichž se používá odkazů na přiložený výkres, který graficky ilustruje výsledky provedených zkoušek. Příklady mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují.
Přehled obrázku na výkresu
Na obr. 1 je ilustrováno potlačování uvolňování TNF in vitro v kultuře lymfocytů, která je suboptimálně stimulována ConA za přítomnosti dimeru lysozymu v různém zředění.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Za účelem stanovení imunoaktivity dimeru lysozymu byla provedena zkouška na lymfocytech humánní periferní krve za použití analýzy FACS.
Mitogenní stimulace v humánních periferních lymfocytech je dobře zavedená metoda zkoušení reaktivity většiny důležitých buněk imunitního systému. Při zkoušení vlivu terapeutických látek na aktivaci a proliferaci lymfocytů od zdravých dárců krve byl mitogen přidán v suboptimální dávce a nakonec byly kvantitavitně změřeny imunorelevantní parametry odpovědi lymfocytů. Naměřené výsledky byly porovnány s kontrolními hodnotami naměřenými bez podání léčiva.
Pro stimulaci lymfocytů bylo použito ConA v koncentraci 20 pg/ml média. Počáteční koncentrace buněk byla 106 buněk/ml. Byly připraveny krátkodobé kultury v inkubátoru CO2 (jednodenní v případě receptorů IL-2 na lymfocytech a HLA-Dr a dvoudenní při všech ostatních zkouškách). Jako kriteria aktivace buněk byly měřeny následující parametry:
- neopterin (markér imunitní aktivace)
- β-2-mikroglobulin (také aktivační markér)
- nterleukin-2 [autokrinní a parakrinní látka odvozená od T-pomocného lymfocytů (Thelper)]
- interleukin-6 (hormon diferenciace buněk)
- faktor nekrózy nádorů - TNF (vasoaktivní interleukin s četnými účinnostmi)
- interferon-α (faktor diferenciace, zejména pro B-lymfocyty)
- thymidin kináza (enzym, jehož obsah je zvýšen v proliferujících buňkách)
-7CZ 286725 B6
- lymfocytový receptor interleukinu-2 (akceptomí molekula pro autokrinní a parakrinní IL-2)
- Ki-67 v lymfocytech (antigen exprimovaný v aktivovaných a proliferujících buňkách)
- HLA-Dr v lymfocytech (antigen histokompatibility z třídy II, jehož množství je při imunní reakci zvýšené.
V supematantu kultury byly zjištěny následující skutečnosti, pokud se týče buněčných produktů:
Hladina neopterinu produkovaného T-lymfocyty v průběhu imunitní odpovědi a ve stimulovaných kulturách není při těchto experimentech výrazně zvýšena dimerem lysozymu nad kontrolní 10 hodnotu v buňkách stimulovaných ConA bez zkoušeného dimeru. Se zvyšující se koncentrací zkoušeného dimeru se hodnoty neopterinu mírně zvyšují.
Podobně i hladina β-2-mikroglobuIinu kolísá při všech koncentracích dimeru lysozymu okolo kontrolní hodnoty.
Receptory IL-2, které jsou během kultivace odstraněny z povrchu lymfocytů a které poskytují informaci o celkovém obratu receptorů IL-2, jsou na srovnatelné úrovni jako receptory IL-2 po povrchu lymfocytů (viz dále) a vykazují jasné potlačení nejvyšší koncentrace zkoušeného dimeru.
Hladina interleukinu-6 vykazuje jasnou tendenci závislosti na dávce - její hodnoty stoupají se zvyšující se koncentrací. Tato molekula je velmi důležitá při hematopoiesi, diferenciaci buněk a imunitní reakci. Při zkoušce bylo nutno první tři hodnoty extrapolovat, poněvadž nejvyšší standard měl hodnotu pouze 2000 pg/ml.
Výsledky vztahující se ke zbývajícím molekulám jsou uvedeny v tabulce I.
Tabulka 1
Vliv dimeru lysozymu na lymfocyty humánní periferní krve
| č. | vzorek | HLA-Dr/CD3 | IL-2 Rec | KÍ-67/CD8 | KÍ-67/CD4 |
| kontrolní | 3,3 | 8,9 | 6,0 | 2,7 | |
| 1. | 1 mg/ml | 2,2 | 2,6 | 4,8 | 5,3 |
| 2. | 0,3 mg/ml | 1,9 | 6,3 | 4,1 | 3,0 |
| 3. | 0,1 mg/ml | 3,0 | 6,1 | 6,5 | (6,9) |
| 4. | 33 pg/ml | 3,0 | 5,9 | 6,3 | 3,0 |
| 5. | 10 pg/ml | 3,4 | 6,0 | 7,7 | 3,7 |
| 6. | 3,3 pg/ml | 2,4 | 5,0 | 7,5 | 3,7 |
| 7. | 1 pg/ml | 2,5 | 4,9 | 7,0 | 4,1 |
| 8. | 0,3 pg/ml | 3,3 | 5,8 | 7,5 | 3,9 |
| 9. | 0,1 pg/ml | 2,8 | 4,0 | 7,9 | 3,8 |
| 10. | 33 pg/ml | 3,1 | 4,6 | 8,0 | 4,1 |
-8CZ 286725 B6
Vliv dimeru lysozymu na lymfocyty humánní periferní krve
| č. | vzorek | TNF | Thym. kináza | IFN-a |
| kontrolní | 205,11 | 9242 | 4,97 | |
| 1. | 1 mg/ml | 38,07 | 923 | 8,81 |
| 2. | 0,3 mg/ml | 17,19 | 10914 | 9,44 |
| 3. | 0,1 mg/ml | 13,75 | 7254 | 17,94 |
| 4. | 33 pg/ml | 36,11 | 9525 | 3,67 |
| 5. | 10 pg/ml | 22,22 | 5492 | 7,54 |
| 6. | 3,3 pg/ml | 54,91 | 5198 | 6,26 |
| 7. | 1 pg/ml | 18,47 | 5840 | 33,91 |
| 8. | 0,3 pg/ml | 14,47 | 6839 | 10,07 |
| 9. | 0,1 pg/ml | 94,16 | 3672 | 4,97 |
| 10. | 33 ng/ml | 172,46 | 7312 | 10,07 |
Na rozdíl od interleukinu-6, TNF-α je neočekávaně přítomen v supematantech kultury v dramaticky snížených koncentracích, s výjimkou stupňů s posledními dvěma zředěními, kde již byla koncentrace dimeru lysozymu tak nízká, že nedošlo ke snížení koncentrace TNF.
Obsah thymidinkinázy byl měřen v lymfocytové cytoplasmě po zmrazení a roztáni buněčné pelety. Obsah thymidinkinázy se zvyšuje v dělících se buňkách, takže tato látka představuje dobrý markér proliferace buněk. Data uvedená v tabulce II vykazují pokles při nejvyšší zkoušené koncentraci dimeru lysozymu. Při jiných stupních za použití většího zředění nelze žádnou jasnou tendenci vystopovat. Naproti tomu interferon-α vykazuje při vyšších koncentracích za stejných podmínek hodnoty vyšší než je kontrolní hodnota se samotným ConA. Ke zjevnému zvýšení dochází při přechodu od druhého do třetího zředění.
Lymfocytové markéry:
HLA-Dr/CD3, což je markér histokompatibility, se exprimuje na aktivovaných T-lymfocytech v průběhu imunitní reakce. Získané výsledky ukazují určitý procentický obsah aktivovaných Tbuněk v kontrolní kultuře. Při různých koncentracích dimeru lysozymu v kulturách se zjištěné hodnoty pohybují okolo této kontrolní hodnoty.
Receptory IL-2 na lymfocytech: interleukin-2 je cytokin produkovaný T-pomocnými lymfocyty (T-helper) po aktivaci IL— 1. IL-2 je autokrinní a parakrinní. T-pomocné lymfocyty nejen produkují IL-2, nýbrž jsou také touto molekulou stimulovány k proliferaci. Receptory IL-2 na povrchu T-pomocných lymfocytů jsou po aktivaci vyregulovány na vyšší úroveň. Tabulka I ukazuje, že při nejvyšší koncentraci dimeru lysozymu dochází k výraznému potlačení receptorů IL-2 na lymfocytech, zatímco zbývající hodnoty se příliš neodlišují od normálních hodnot. Tabulka I také obsahuje data vztahující se kKi-67/CD8 a KÍ-67/CD4. Ki-67 je proliferační molekula, která je přítomna v buňkách, u nichž probíhá mitosa. Ki-67 je důležitým parametrem pro stanovení stimulovaných buněk a pro diagnózu nádorů. Uvedené výsledky ukazují, že při nejvyšších dvou dávkách dimeru lysozymu dochází k mírné inhibici proliferace u buněk Ki67+supressor (CD8). U lymfocytů typu helper (CD4) dochází při nejvyšší dávce dimeru lysozymu k podstatnému zvýšení procentického obsahu pozitivních buněk. Při nižších dávkách je procentický obsah buněk exprimujících KÍ-68/CD4 nepatrně vyšší než je kontrolní hodnota.
Z obrázku 1 je zřejmé výrazné potlačení TNF.
Imunologické parametry uvedené výše a zvolené podle své potenciální důležitosti při imunní odpovědi se analyzují metodou, která je založena na měření vlivu zkoušené látky na
-9CZ 286725 B6 suboptimálně ConA stimulované humánní periferní lymfocyty. Tato metoda je dobře zavedena, je citlivá a umožňuje vyhodnocovat mnoho různých parametrů. Při některých koncentracích dimeru lysozymu dochází k výrazným rozdílům výsledků zkoušek ve srovnání s hodnotami naměřenými u lymfocytů stimulovaných samotným ConA, zatímco v případě například hodnot TNF a IFN-a jsou pozorované účinky evidentně v určitém rozmezí při všech zkoušených zředěních.
Příklad 2
Provedou se laboratorní zkoušky za účelem stanovení účinku dimeru lysozymu na fagocytickou účinnost leukocytů v mléce a krvi in vitro. Již bylo dříve zjištěno, že při standardní zkoušce in vitro dimeru lysozymu neinhibuje proliferaci organismů izolovaných z infikovaných mléčných žláz krav. Jelikož klinické použití intraudderálně a simultánně intravenózně podaného dimeru lysozymu účinně eliminuje infekci v mléčných žlázách krav, je zřejmé, že hlavním antibakteriálním mechanismem v mléčných žlázách krav je fagocytóza. Pro stanovení účinku dimeru lysozymu na fagocytózu bylo proto při testech in vitro použito krve a mléka jednak zdravých a jednak infikovaných krav. Pro srovnání byly experimenty provedeny se stejnou koncentrací látky a při stejné inkubační době za použití buněk izolovaných ze zdravých a infikovaných krav nebo dokonce z infikovaných nebo zdravých částí mléčné žlázy stejné krávy, aby se vyloučily individuální rozdíly v odpovědi.
Při prováděných testech bylo použito jak purifikované dimemí formy, tak směsi dimeru s malým podílem trimerů a vyšších oligomerů lysozymu, přičemž tyto látky byly přidány do krve nebo mléka zdravých a infikovaných krav v koncentraci 25 až 0,25 pg/ml, a směs byl inkubována při 37 °C po dobu 0,5 až 24 hodin. V každém vzorku byl stanoven procentický obsah fagocytujících buněk (index fagocytózy podle metody popsané Wisniewski et al.) a procentický obsah NBTpozitivních granulocytů (metodou, kterou popsal Park).
Dimer lysozymu zvyšuje fagocytickou aktivitu leukocytů při zkouškách in vitro. Účinky jsou závislé na dávce a inkubační době. Pro aktivaci leukocytů v mléce je potřeba vyšší koncentrace dimeru lysozymu než pro aktivaci leukocytů v krvi. Příliš vysoké koncentrace dimeru mírně snižují fagocytickou účinnost in vitro. Z následujících tabulek II a III je zřejmé, že pokud reakční směs po polymeraci neobsahuje žádnou cytotoxickou monomemí formu lysozymu, dosáhne se srovnatelných výsledků, ať již přípravek obsahuje vysoce purifikovaný dimer, nebo méně čistý dimerizovaný lysozym. Pod označením „lysozym-dimer+“ se rozumí, že přípravek obsahuje malý podíl trimerů a vyšších oligomerů lysozymu, jak je to uvedeno výše.
-10CZ 286725 B6
Tabulka II
Účinek dimeru lysozymu na fagocytickou aktivitu leukocytů v mléce od zdravých krav (koncentrace dimeru 20 pg/ml, inkubační doba 3 hodiny)
| Indikátor | Leukocyty v mléce zdravých krav | ||
| Přípravek Kráva č. 477 | Kráva č. 463 | ||
| fagocytóza (%) | kontrolní lysozym-dimer+ lysozym-dimer | 77,8 100 92,6 | 80,0 100 100 |
| index | kontrolní | 2,7 | 4,1 |
| fagocytózy | lysozym-dimer+ | 4,4 | 6,4 |
| lysozym-dimer | 4,8 | 8,4 | |
| kontrolní | 3,4 | 2,5 | |
| snížení NBT | lysozym-dimer+ | 5,7 | 3,8 |
| (%) | lysozym-dimer | 3,4 | 6,8 |
Tabulka III
Účinek dimeru lysozymu na fagocytickou aktivitu leukocytů v mléce od infikovaných krav (koncentrace dimeru 20 pg/ml, inkubační doba 30 minut)
| Leukocyty v mléce infikované krávy č. 490 | |||
| Indikátor | Přípravek | Infikovaná* část | Zdravá část |
| kontrolní | 98 | 58 | |
| fagocytóza | lysozym-dimer+ | 98 | 90 |
| (%) | lysozym-dimer | 100 | 100 |
| index | kontrolní | 10,9 | 2,7 |
| fagocytózy | lysozym-dimer+ | 8,7 | 14,9 |
| lysozym-dimer | 10,9 | 8,9 | |
| kontrolní | 4,2 | 4,2 | |
| snížení NBT | lysozym-dimer+ | 5,9 | 8,4 |
| (%) | lysozym-dimer | 5,9 | 7,0 |
* část mléčné žlázy postižená zánětem u neléčené krávy
Je zřejmé, že stupeň purifikace dimeru lysozymu nemá výrazný účinek na pozorovanou fagocytickou účinnost leukocytů v mléce. Může se dále ukázat, že efektorovými buňkami jsou granulocyty.
V následujících dvou příkladech jsou uvedeny výsledky studií in vivo. Při klinických zkouškách bylo použito přípravku obsahujícího 2 mg dimeru lysozymu v 10 ml roztoku PBS. Tento přípravek je označován zkratkou KLP-602.
Příklad 3
Při intravenosním podání KLP-602 dochází ke stimulaci fagocytické aktivity granulocytů v krvi zdravých a nemocných telat a zdravých hříbat, jakož i v mléce krav po intraudderální aplikaci. Účinek je manifestován zvýšením počtu neutrofilů a zvýšenou schopnosti absorbovat stafylokoky a snižovat hladinu NBT. K tomuto účinku dochází především v prvních 12 až 24 hodinách
-11CZ 286725 B6 po injekčním podání přípravku. Účinek KLP-602 na fagocytickou aktivitu ve vemeni je závislý na dávce, formě léčiva a odpovědi jednotlivého zvířete.
V následujících příkladech 4 až 7 bylo dimeru lysozymu použito též při léčbě infekčních chorob hovězího dobytka, vepřů, koní a psů. přípravek byl podáván v různé dávce a v různých časových intervalech intravenosně, intramuskulámě, subkutánně, intraudderálně a intrauterináině. Léčivo bylo podáno celkem 346 kravám, 274 telatům, 110 samcům a samicím vepře, 294 selatům, 709 podsvinčatům, 35 hříbatům a 107 psům. Alternativní léčba byla aplikována pro kontrolu. S přihlédnutím k použitým druhům zkušebních zvířat, nebylo žádné zvíře z morálních důvodů ponecháno bez léčby. Nicméně bylo možno učinit závěry, na základě porovnání s klinickým obrazem léčených chorob, který je znám z veterinární literatury.
Příklad 4
Při zkouškách prováděných na telatech byla měřena hladina INF a TNF u skupiny zdravých a infikovaných zvířat. Skupina infikovaných zvířat byla ponechána bez léčby po dobu prvních 12 hodin infekce, a potom byla ošetřena antibiotiky a léčena dimerem lysozymu ve vysoce purifikovaném stavu.
Ve skupině léčené dimerem lysozymu bylo jednou nebo dvěma injekcemi KLP-602 vyléčeno více než 90 % telat trpících gasroenteritis a více než 85 % případů akutní bronchopneumonie. Okamžité vymizení takových symptomů, jako je horečka diarrhoea bylo velmi charakteristické. Léčba tímto léčivem nevyžadovala podávání dodatečných tekutin zvířatům. Doba a účinnost léčby byla lepší než u kontrolní skupiny léčené antibiotiky.
Příklad 5
KLP-602 se ukázal jako nejúčinnější při léčbě chorob postihujících vepře. 100 % nebo téměř 100% zvířat bylo vyléčeno z následujících chorob: post-partum agalactia (syndrom MMA), dysenterie, pyometritis, chřipka a colibacillosis. Aplikace léčiva v případech edemové choroby a bronchopneumonie se projevila poněkud méně výraznými, ale stále ještě signifikantně lepšími výsledky, než jsou výsledky, kterých se dosahuje při alternativních terapiích. Bylo možno pozorovat rychlé vymizení diarrhoey (obvykle v průběhu 24 hodin) a horečky a znovu došlo k sekreci mléka, což je zvláště důležité v případech poporodních zánětů vemene a dělohy (poněvadž se tak zachrání život podsvinčat). Účinnost terapie KLP-602 ve srovnání s alternativními způsoby léčby je znázorněna v tabulce IV.
-12CZ 286725 B6
Tabulka 4
| Počet zvířat ošetřených KLP-602 | % | Zvířata ošetřovaná jinými přípravky | |||||||
| Počet případů | Doba (4nv) | Vyléčená počet | Nevyléčená | Počet případů | Použitý přípravek | Doba | Vyléčená % | ||
| počet | % | ||||||||
| I. Colibacillosis selat | |||||||||
| 434 | 1-2 | 421 | 97 | 13 | 3 | 400* | antibiotika glukóza, vit. B | 3-5 | 75-80* |
| II. Dysenterie vepřů | |||||||||
| 29 | 1-2 | 29 | 100 | 219 | antibiotika STOLMED, RIDOWET | 5-9 | 75 | ||
| III. Post-partum agalactia | |||||||||
| 30 | 1-2 | 30 | 100 | 40* | antibiotika kortison, sulfamid | 3-5 | 80* | ||
| IV. | |||||||||
| 38 | 1-5 | 38 | 100 | - | - | 200* | antibiotika | 3-9 | 60-80* |
| (latentní formula) | |||||||||
| V. Morbus oedematosus | |||||||||
| 82 | 1-3 | 78 | 95 | 4 | 5 | 120x | antibiotika | 3-6 | 60* |
penicillin, tetracyklin, Vit. B, tekutiny + glukóza + Přibližná data
Příklad 6
V případě léčby zvířat látkou KLP-602 došlo ve 100 % případů u enteritis a 83,3 % u bronchopneumonie k rychlejšímu uzdravení ve srovnání s kontrolní skupinou, které byly podávány známé přípravky.
Příklad 7
Látka KLP-602 byla také zkoušena při léčbě některých chorob psů, jako je follikulitis (100% účinnost), infekcí horního a spodního dýchacího traktu a infekcí gastrointestinálního traktu projevujících se diarrhoeou. Převažujícím onemocněním v této skupině byla parvovirosa, která je pokládána za prakticky nevyléčitelnou chorobu. Nicméně v případě parvovirosy bylo dosaženo v 75 % vyléčení.
Při zkouškách prováděných na zvířatech postižených přirozeně se vyskytujícími chorobami, jak je to popsáno výše, bylo učiněno několik důležitých pozorování.
1. Terapie se ukázala být velmi snadnou a účinnou při léčbě chorob s vícefaktorovou etiologií apatogenezí (takové choroby ve zvířecích populacích převládají a obtížně se zvládají zejména v chovných farmách, kde snadno dochází k epidemickému rozšíření chorob). Tato zjištění prokazují modulační účinek dimeru lysozymu na přirozené obranné mechanismy.
2. Terapie se ukázala být účinnou u chorob, při nichž se při přirozeném vývoji vyskytuje endotoxický šok nebo jiné poruchy, jako je vysoká a dlouhotrvající horečka, které dlouhodobě ovlivňují stav zvířete po léčení a jsou proto extrémně škodlivé pro taková zvířata, jako jsou závodní koně (hříbata) a jiná zvířata používaná při sportu nebo zvířata chovaná pro potravinářský
-13CZ 286725 B6 průmysl, kde jsou výrobní náklady rozhodující. Rychlé uzdravení umožňuje podstatně snížit náklady na léčbu takových chorob.
3. Výsledky pozorované in vivo potvrzují sníženou hladinu TNF v případě různých přirozeně se vyskytujících infekcí léčených dimerem lysozymu, a tak dokládají nárokovaný vynález.
Příklad 8
Byl studován účinek dimeru lysozymu na účinnosti antibiotik proti různým mikroorganismům, aby bylo možno vybrat bakterie pro další testy, stanovit nejúčinnější dávku antibiotik pro zvolené mikroorganismy a najít rozmezí koncentrace dimeru lysozymu, v němž by bylo možno pozorovat očekávané výsledky. Při pokusech bylo použito dvou látek lyofilizovaného pufirikovaného dimeru lysozymu, z nichž jedna byla vyrobena roku 1991 a druhá roku 1992. Při pokusech bylo použito antibiotik dostupných na polském trhu a dodávanou firmou Polfa, což je polský výrobce léčiv, jako je penicilín, neomycin, erythromycin, cefalosporin (Sefril) apod.
Zkoušená antibiotika byla suspendována v pufrovaném roztoku chloridu sodného (PBS-biomed) nebo v hovězím séru. Dimer lysozymu byl potom přidán k suspenzi takovým způsobem, že koncentrace dimeru byla ve všech zkoušených vzorcích vždy 5 pg/ml. Zkoušené koncentrace antibiotika byly při každé zkoušce různé v důsledku různé sensibility použitých mikroorganismů.
Účinek samotného antibiotika nebo jeho kombinace s dimerem lysozymu byl zkoušen za použití suspenze v PBS nebo hovězím séru in vitro na Escharichia coli, Salmonella enteritidis, Staphyloccocus aureus a Streptococcus uberis, které byly izolovány z nemocných zvířat. Při zkouškách bylo také použito laboratorních kmenů Sarcina lutea 9341 ATCC a Staphylococcus aureus 209 P.
S ohledem na předběžný charakter těchto zkoušek bylo každé antibiotikum zkoušeno proti jednomu, dvěma nebo třem různým druhům bakterií následujícím způsobem:
1. Příprava misek
0,05 ml 18hodinové kultury zkoušeného bakteriálního kmene se přidá do 14 ml vzorku obohaceného agaru (Biomed). Směs se promíchá a nalije na misku o průměru 10 mm. Po ochlazení a ztuhnutí agaru se na něj umístí sterilní válce, které se naplní roztokem zkoušeného antibiotika.
2. Příprava roztoků antibiotika mg zkušeného antibiotika se nejprve rozpustí v PBS, a potom se požadovaný objem vzniklého roztoku přidá k předem určenému objemu PBS nebo hovězího séra tak, aby se dosáhlo koncentrace antibiotika, která se co nejvíce blíží minimální inhibiční koncentraci (MIC). Vždy se připraví roztoky o třech různých koncentracích.
3. Příprava roztoku dimeru lisozymu
Nejprve se 10 ml lyofilizovaného dimeru lysozymu rozpustí v 10 ml PBS. Potom se vzniklý roztok dále zředí buď PBS, nebo hovězím sérem a vzniklé roztoky se přidají k roztokům antibiotik připravených podle odstavce 2.
-14CZ 286725 B6
Byly zkoušeny následující kombinace:
- antibiotikum/PBS
- antibiotikum/PBS + dimer lysozymu
- antibiotikum/sérum
- antibiotikum/sérum + dimer lysozymu
Koncentrace antibiotika byla v každém válci stejná, koncentrace dimeru lysozymu byla 5 pg/ml. Po naplnění válců roztoky se misky dvě hodiny udržují při teplotě místnosti, a potom se kultury inkubují při 30 °C.
4. Zjišťování výsledků a hodnocení účinnosti
Misky se vyjmou z topného zařízení po 18 hodinách inkubace a měří se průměr zóny inhibice růstu bakterií (nepřítomnost kolonií) okolo válců.
Nebyl zjištěn žádný rozdíl ve velikosti inhibiční zóny bakteriálního růstu okolo válců naplněných suspenzí antibiotika v PBS bez přídavku dimeru lysozymu nebo s přídavkem dimeru lysozymu v koncentraci 5 pg/ml. V případě válců naplněných suspenzí antibiotika v hovězím séru byla velikost inhibiční zóny okolo válců nižší, přičemž byla naopak vyšší v případě válců naplněných suspenzí antibiotika a dimeru lysozymu v hovězím séru. Tyto zóny byly větší než zóny pozorované okolo válců naplněných suspenzemi a PBS a válců naplněných suspenzemi samotného antibiotika (bez dimeru lysozymu) v séru.
Tento jev byl zjištěn při zkouškách za použití penicilinu proti Sarcina lutea. Ampicilin vykázal synergismus v kombinaci s dimerem lysozymu při in vitro inhibici růstu Escherichia coli, Samolella enteritidis a Staphylococcus epidermitis. Bylo zjištěno zvýšení účinnosti erythromycinu za přítomnosti dimeru lysozymu proti Staphylococcus aureus 209 P a Streptococcus uberis, jakož i zvýšení účinnosti cefalosporinu Sefril proti Staphylococcus aureus 209 P. Escherichia coli a Salmonella enteritidis byly proti tomuto antibiotiku resistentní.
Zvýšení antibakteriální účinnosti zkoušených antibiotik bylo pozorováno pouze v tom případě, že bylo jako rozpouštědla použito hovězího séra. Průměrné zvýšení účinnosti činilo zpravidla 50 %, ale v některých případech měla přítomnost dimeru lysozymu za následkem 100% zvýšení účinnosti antibiotika.
Závěry:
Dimer lysozymu (bez jakéhokoliv konzervačního činidla) v koncentraci 5 pg/ml vykazuje in vitro synergismus s některými antibiotiky, použitými v minimální inhibiční koncentraci (MIC) za přítomnosti hovězího séra při inhibici růstu bakterií. Z výsledků, které byly až dosud zjištěny, je zřejmé, že je důležité další stadium tohoto problému.
Příklad 9
Synergismus s AZT při léčbě pacientů s AIDS
Ito et al. nedávno oznámili, že TNF-α může antagonizovat anti-HTV účinnost AZT (Ito, M. et al.: „Tumor Necrosis Factor Antagonizes Inhibitory Effect of Azidothymidine on Human Immunodeficiency Virus (HIV) Replication in Vitro; Biochem. Biophys. Res. Commun. 1990, 166; 1095-1101). Pacienti sAIDS v pokročilém stadiu trpí mnoha náhodnými infekcemi.
-15CZ 286725 B6
Některá infekční činidla mohou způsobovat zvýšení hladiny TNF-α, IL-6 a jiných cytokinů, které mohou být buď imunosupresivní a nebo mohou podporovat replikaci HIV.
V důsledku toho léčba samotným AZT není dostatečně účinná. Pro zvýšení účinnosti AZT proti HIV se proto navrhuje kombinovat léčbu AZT s podáváním dimeru lysozymu za účelem inhibice syntézy TNF-faktoru antagonizujícího účinku AZT proti HIV.
Claims (10)
1. Použití dimerizované formy lysozymu pro výrobu léčiva pro modulaci přirozených obranných mechanismů, přičemž tato modulace zahrnuje alespoň jeden z následujících účinků: inhibici uvolňování faktoru nekrózy nádorů, snižování hladiny faktoru nekrózy nádorů, zvyšování fagocytózy a zvyšování uvolňování interferonu u zvířat a lidí.
2. Použití podle nároku 1, kde modulace představuje posilování obranných mechanismů.
3. Použití podle nároku 1 nebo 2, kde snížení hladiny faktoru nekrózy nádorů je vyšší než 13,75 pg/ml.
4. Použití podle některého z nároků 1 až 3 pro výrobu léčiva obsahujícího dimerizovanou formu lysozymu v koncentraci 0,3 pg až 1 mg na 106 leukocytů.
5. Použití podle některého z nároků 1 až 4 pro výrobu léčiva pro profylaktickou nebo terapeutickou aplikaci, přednostně pro prevenci nebo léčení alespoň jedné choroby ze souboru zahrnujícího sepsi, septický šok, kachexii, syndrom získané imunodeficience a infekce spojené se syndromem získané imunodeficience.
6. Použití podle některého z nároků 1 až 5 pro výrobu léčiva obsahujícího dimerizovanou formu lysozymu v kombinaci s antibiotikem.
7. Použití podle některého z nároků 1 až 6 pro výrobu léčiva v podobě injekčního roztoku, který obsahuje dimerizovanou formu lysozymu v množství 0,01 až 10 mg/ml, přednostně 0,1 až 1,0 mg/ml apyrogeního sterilního prostředku obsahujícího alespoň jedno fyziologicky vhodné rozpouštědlo a/nebo alespoň jedno farmaceuticky schválené konzervační činidlo.
8. Použití podle nároku 7 pro výrobu léčiva v podobě injekčního roztoku, který obsahuje dimerizovanou formu lysozymu v koncentraci 0,02 mg/kg tělesné hmotnosti.
9. Použití podle nároku 1 pro výrobu léčiva v podobě gelu nebo masti obsahující účinnou dávku dimerizované formy lysozymu nebo antiseptického obvazu nebo tamponu napuštěného účinnou dávkou dimerizované formy lysozymu.
10. Farmaceutický prostředek ve formě apyrogenní sterilní kompozice obsahující alespoň jedno fyziologicky vhodné rozpouštědlo a/nebo alespoň jedno farmaceuticky schválené konzervační činidlo, vyznačující se tím, že obsahuje dimerizovanou formu lysozymu v množství 0,01 až 10 mg/ml, přednostně 0,1 až 1,0 mg/ml v kombinaci s alespoň minimální inhibiční koncentrací antibiotika.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL92295273A PL173978B1 (pl) | 1992-07-13 | 1992-07-13 | Sposób oddziaływania na wydzielanie cytokin w hodowli limfocytów krwi obwodowej |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ8595A3 CZ8595A3 (en) | 1995-09-13 |
| CZ286725B6 true CZ286725B6 (en) | 2000-06-14 |
Family
ID=20058087
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ199585A CZ286725B6 (en) | 1992-07-13 | 1993-07-13 | Medicinal preparation for modulating natural protective mechanisms and pharmaceutical preparation for this purpose |
Country Status (31)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6132715A (cs) |
| EP (1) | EP0651654B1 (cs) |
| JP (1) | JPH07508744A (cs) |
| KR (1) | KR100289841B1 (cs) |
| CN (1) | CN1057937C (cs) |
| AT (1) | ATE252392T1 (cs) |
| AU (1) | AU677786B2 (cs) |
| BG (1) | BG63331B1 (cs) |
| BR (1) | BR9306722A (cs) |
| CA (1) | CA2140140A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ286725B6 (cs) |
| DE (2) | DE651654T1 (cs) |
| DK (1) | DK0651654T3 (cs) |
| ES (1) | ES2074037T3 (cs) |
| FI (1) | FI950144A (cs) |
| GE (1) | GEP20012466B (cs) |
| GR (1) | GR950300039T1 (cs) |
| HU (1) | HU218151B (cs) |
| MX (1) | MX9304197A (cs) |
| NZ (2) | NZ254135A (cs) |
| OA (1) | OA10125A (cs) |
| PL (1) | PL173978B1 (cs) |
| PT (1) | PT651654E (cs) |
| RO (1) | RO112580B1 (cs) |
| RU (1) | RU2145875C1 (cs) |
| SG (1) | SG52727A1 (cs) |
| SK (1) | SK282377B6 (cs) |
| TW (1) | TW259710B (cs) |
| UA (1) | UA49789C2 (cs) |
| WO (1) | WO1994001127A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA935046B (cs) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6183742B1 (en) | 1992-07-13 | 2001-02-06 | Nika Health Products, Limited | Applications of lysozyme dimer |
| DZ1964A1 (fr) * | 1995-01-13 | 2002-10-15 | Nika Health Products Ltd | Nouvelle applications d'un dimère de lysozyme. |
| WO1996038115A1 (en) * | 1995-05-30 | 1996-12-05 | Lectin Biopharma, Inc. | Method of using lectins for agglutination and collection of menstrual flow |
| US6123937A (en) * | 1997-03-14 | 2000-09-26 | Nika Health Products, Limited | Applications of lysozyme dimer |
| ITMI981148A1 (it) | 1998-05-22 | 1999-11-22 | Therapicon Srl | Utilizzo di lisozima c modificato per preparare composizioni medicinali per il trattamento di alcune gravi malattie |
| EP1174147A1 (en) * | 2000-06-27 | 2002-01-23 | Nika Health Products Limited | Reversal of antibiotic resistance with lysozyme dimer |
| US20050244402A1 (en) * | 2004-04-30 | 2005-11-03 | Villanueva Julie M | Absorption of pain-causing agents |
| RU2472467C2 (ru) * | 2011-04-13 | 2013-01-20 | Государственное научное учреждение Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт (ГНУ КНИВИ) | Способ профилактики и лечения гастроэнтеритов, обусловленных бактериозами, у телят |
| RU2546911C2 (ru) * | 2013-04-11 | 2015-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Донской государственный аграрный университет" | Способ хранения свинины в охлажденном состоянии |
| CN105106626A (zh) * | 2015-09-30 | 2015-12-02 | 成都倍加特生物科技有限公司 | 一种治疗月经期感染的汤剂药物及其制备方法 |
Family Cites Families (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR4020M (cs) * | 1965-01-29 | 1966-03-21 | ||
| FR2215201A1 (en) * | 1973-01-24 | 1974-08-23 | Theranol Lab | Broad-spectrum antibiotic compsns. - contg. antibiotic resistant lactic bacilli and enzyme diffusing-agent |
| JPS5533409A (en) * | 1978-08-30 | 1980-03-08 | Eisai Co Ltd | Carcinostatic agent |
| JPS5533408A (en) * | 1978-08-30 | 1980-03-08 | Eisai Co Ltd | Immunity-increasing agent |
| JPS5543040A (en) * | 1978-09-25 | 1980-03-26 | Eisai Co Ltd | Immunity raising agent |
| US4221794A (en) * | 1979-06-21 | 1980-09-09 | Newport Pharmaceuticals International, Inc. | Method of imparting immunomodulating and antiviral activity |
| US4457919A (en) * | 1980-03-14 | 1984-07-03 | Newport Pharmaceutical International, Inc. | Method of imparting immunomodulating, antiviral or antitumor activity |
| US4510144A (en) * | 1981-08-26 | 1985-04-09 | Newport Pharmaceuticals International | Methods of imparting immunomodulating activity with dihydrothiazolo purine derivatives |
| US4739046A (en) * | 1985-08-19 | 1988-04-19 | Luzio Nicholas R Di | Soluble phosphorylated glucan |
| US4744984A (en) * | 1985-10-08 | 1988-05-17 | Vetrepharm Research, Inc. | Antiviral immunotherapeutic agent and preparation thereof |
| DE3782958D1 (de) * | 1986-02-19 | 1993-01-21 | Imreg Inc | Verfahren und mittel zum pruefen eines immunsystems. |
| US5200182A (en) * | 1988-05-26 | 1993-04-06 | Nika Health Products, Ltd. | Antiviral or antibacterial composition and method of use |
| DE3817955A1 (de) * | 1988-05-27 | 1989-11-30 | Hoechst Ag | Tnf-inhibitor enthaltendes arzneimittel |
| DE68927733T2 (de) * | 1988-05-31 | 1997-06-12 | Napp Systems Inc | Vorrichtung und verfahren zur behandlung von druckplatten |
| KR920702621A (ko) * | 1989-06-13 | 1992-10-06 | 스튜어트 알. 슈터 | 단핵세포 및/또는 마크로파지에 의한 인터루킨-1 또는 종양회사인자 생성의 억제 |
| DK0509984T3 (da) * | 1990-01-08 | 1999-03-22 | Nika Health Products Ltd | Fremgangsmåde til fremstilling af lysozymdimer |
| US5314816A (en) * | 1990-01-08 | 1994-05-24 | Nika Health Products Ltd. | Method of preparing lysozyme dimers |
| ATE161720T1 (de) * | 1990-08-03 | 1998-01-15 | Smithkline Beecham Corp | Tnf-inhibitoren |
-
1992
- 1992-07-13 PL PL92295273A patent/PL173978B1/pl not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-07-13 KR KR1019940704649A patent/KR100289841B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 ZA ZA935046A patent/ZA935046B/xx unknown
- 1993-07-13 RU RU95105517A patent/RU2145875C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 AT AT93915903T patent/ATE252392T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 CA CA002140140A patent/CA2140140A1/en not_active Abandoned
- 1993-07-13 CZ CZ199585A patent/CZ286725B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 HU HU9500098A patent/HU218151B/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 DE DE0651654T patent/DE651654T1/de active Pending
- 1993-07-13 EP EP93915903A patent/EP0651654B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 GE GEAP19932466A patent/GEP20012466B/en unknown
- 1993-07-13 WO PCT/EP1993/001841 patent/WO1994001127A1/en active IP Right Grant
- 1993-07-13 DK DK93915903T patent/DK0651654T3/da active
- 1993-07-13 BR BR9306722A patent/BR9306722A/pt not_active Application Discontinuation
- 1993-07-13 DE DE69333258T patent/DE69333258T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 ES ES93915903T patent/ES2074037T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-07-13 CN CN93116771A patent/CN1057937C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1993-07-13 PT PT93915903T patent/PT651654E/pt unknown
- 1993-07-13 NZ NZ254135A patent/NZ254135A/en not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 JP JP6502985A patent/JPH07508744A/ja active Pending
- 1993-07-13 AU AU45686/93A patent/AU677786B2/en not_active Ceased
- 1993-07-13 SK SK40-95A patent/SK282377B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 SG SG1996008336A patent/SG52727A1/en unknown
- 1993-07-13 RO RO95-00041A patent/RO112580B1/ro unknown
- 1993-07-13 MX MX9304197A patent/MX9304197A/es not_active IP Right Cessation
- 1993-07-13 UA UA95018021A patent/UA49789C2/uk unknown
- 1993-08-03 TW TW082106180A patent/TW259710B/zh active
-
1994
- 1994-12-22 BG BG99287A patent/BG63331B1/bg unknown
-
1995
- 1995-01-12 FI FI950144A patent/FI950144A/fi unknown
- 1995-01-13 OA OA60604A patent/OA10125A/en unknown
- 1995-06-07 US US08/476,561 patent/US6132715A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-31 GR GR950300039T patent/GR950300039T1/el unknown
-
1996
- 1996-09-13 NZ NZ299377A patent/NZ299377A/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK173078B1 (da) | Anvendelse af en lysozym-dimer og/eller en ribonuclease-dimer til fremstilling af et lægemiddel til behandling af virus- el | |
| US6132715A (en) | Method of inhibiting biosynthesis of tumor necrosis factor | |
| AU709620B2 (en) | New applications of lysozyme dimer | |
| US6183742B1 (en) | Applications of lysozyme dimer | |
| EP0548558A2 (en) | Compositions containing surfactants as potentiating agents for the treatment of mammalian diseases | |
| PL176407B1 (pl) | Kompozycja farmaceutyczna zawierająca dimer lizozymu | |
| Das et al. | Management of a traumatic wound in a malnourished orphan Asian baby elephant (Elephas maximus). | |
| US20020098171A1 (en) | New application of lysozyme dimer |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20110713 |