RU2011121684A

RU2011121684A - Белково-полипептидный комплекс (бпл), обладающий тканеспецифическим регенеративно-репаративным и омолаживающим действием на кожную ткань, способ получения белково-полипептидного комплекса, обладающего тканеспецифическим регенеративно-репаративным и омолаживающим действием на кожную ткань, и фармацевтическая композиция, обладающая тканеспецифическим регенеративно-репаративным действием на кожную ткань, для лекарственных средств, предназначенных для лечения аутоиммунных, сосудистых, травматических, токсических заболеваний кожи, а также в эстетической медицине и косметологии

Info

Publication number: RU2011121684A
Application number: RU2011121684/10A
Authority: RU
Inventors: Анна Борисовна Назаренко; Михаил Анатольевич Соколов
Original assignee: Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез"
Priority date: 2011-05-30
Filing date: 2011-05-30
Publication date: 2012-12-10
Also published as: WO2012166006A9; WO2012166006A1; EP2730585B1; EP2730585A4; RU2485133C2; EP2730585A1

Abstract

1. Белково-полипептидный комплекс, обладающий тканеспецифическим регенеративно-репаративным и омолаживающим действием на кожную ткань, получаемый из эмбриональной нервной и кожной ткани сельскохозяйственных копытных животных сроком гестации от середины первой до середины последней трети беременности, включающий тканеспецифические отрицательно заряженные слабокислые, нейтральные белки и полипептиды, относящиеся к факторам роста, дифференцировки, сигнальным молекулам, определяющим его биологическую и фармакологическую активность, с молекулярными массами от 0,5 до 200 кДа, причем не менее 70% от общей массы белка имеет молекулярную массу в диапазоне от 20 до 180 кДа, имеющих характерный специфический набор полос при денатурирующем гель-электрофорезе («SDS-Page») в 5%-ном полиакриламидном геле по сравнению со стандартным набором маркерных белков с диапазоном молекулярных масс от 1 кДа до 250 кДа и максимумом поглощения при длине волны 215±5 нм при снятии ультрафиолетового спектра в области длин волн от 200 до 500 нм.2. Способ получения белково-полипептидного комплекса, обладающего тканеспецифическим регенеративно-репаративным и омолаживающим действием на кожную ткань, заключающийся в том, что нервную и кожную ткань эмбрионов копытных сельскохозяйственных животных сроком гестации от середины первой трети до середины последней трети беременности поэтапно:- гомогенизируют в буферном растворе с одновременной экстракцией в присутствии обратимых ингибиторов протеолиза, неионных детергентов и солюбилизаторов при рН не менее 5,2 и не выше 8,5, с последующим центрифугированием при значении g в интервале 10000-28000 в течение 90-30 ми�

Claims

1. Белково-полипептидный комплекс, обладающий тканеспецифическим регенеративно-репаративным и омолаживающим действием на кожную ткань, получаемый из эмбриональной нервной и кожной ткани сельскохозяйственных копытных животных сроком гестации от середины первой до середины последней трети беременности, включающий тканеспецифические отрицательно заряженные слабокислые, нейтральные белки и полипептиды, относящиеся к факторам роста, дифференцировки, сигнальным молекулам, определяющим его биологическую и фармакологическую активность, с молекулярными массами от 0,5 до 200 кДа, причем не менее 70% от общей массы белка имеет молекулярную массу в диапазоне от 20 до 180 кДа, имеющих характерный специфический набор полос при денатурирующем гель-электрофорезе («SDS-Page») в 5%-ном полиакриламидном геле по сравнению со стандартным набором маркерных белков с диапазоном молекулярных масс от 1 кДа до 250 кДа и максимумом поглощения при длине волны 215±5 нм при снятии ультрафиолетового спектра в области длин волн от 200 до 500 нм.

2. Способ получения белково-полипептидного комплекса, обладающего тканеспецифическим регенеративно-репаративным и омолаживающим действием на кожную ткань, заключающийся в том, что нервную и кожную ткань эмбрионов копытных сельскохозяйственных животных сроком гестации от середины первой трети до середины последней трети беременности поэтапно:

- гомогенизируют в буферном растворе с одновременной экстракцией в присутствии обратимых ингибиторов протеолиза, неионных детергентов и солюбилизаторов при рН не менее 5,2 и не выше 8,5, с последующим центрифугированием при значении g в интервале 10000-28000 в течение 90-30 мин.;

- полученный супернатант фильтруют;

- фильтрат подвергают анионообменной хроматографией с разделением связавшихся белков с использованием элюента, имеющего ионную силу в интервале от 0,14 до 0,21 ммоль/л при рН в интервале от 5,2 до 8,5, начиная сбор целевых фракций подвижной фазой при значении ионной силы 0,175 ммоль/л, увеличивая ее постепенно или ступенчато с шагом 0,035 ммоль/л до значения ионной силы 0,21 ммоль/л, полученные фракции объединяют и подвергают стерилизующей фильтрации.

3. Фармацевтическая композиция, обладающая тканеспецифическим регенеративно-репаративным действием на кожную ткань, для лекарственных средств, предназначенных для лечения аутоиммунных, сосудистых, травматических, токсических заболеваний кожи, а также в эстетической медицине и косметологии, выполненная в виде раствора и содержащая в качестве активного инградиента - белково-полипептидный комплекс по п.1 в концентрации 0,01-2,0 мг/мл, полученный способом по п.2, полинуклеотиды в виде натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты, проявляющие комплексную с белково-полипептидным специфическую иммунорегулирующую активность в, по меньшей мере, равноценной концентрации, и фармацевтически приемлемый разбавитель.

4. Фармацевтическая композиция по п.3, отличающаяся тем, что предназначена для наружного, парентерального - внутрикожного, подкожного применения, а также апликационно на кожу и слизистые оболочки.

5. Фармацевтическая композиция по пп.3-4, отличающаяся тем, что она содержит в качестве носителя разбавитель в виде буферного раствора и, возможно, вспомогательные вещества, такие как высокомолекулярные соединения (полимеры), стабилизаторы, детергенты, консерванты и солюбилизаторы.

6. Фармацевтическая композиция по п.3, отличающаяся тем, что в качестве полинуклеотидных компонентов она содержит полинуклеотиды в виде средне- и низкомолекулярнои фракции натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты.