RU2237486C1 - Способ получения биологически активных липофильной и гидрофильной фракций плаценты свиной - Google Patents
Способ получения биологически активных липофильной и гидрофильной фракций плаценты свиной Download PDFInfo
- Publication number
- RU2237486C1 RU2237486C1 RU2003124738A RU2003124738A RU2237486C1 RU 2237486 C1 RU2237486 C1 RU 2237486C1 RU 2003124738 A RU2003124738 A RU 2003124738A RU 2003124738 A RU2003124738 A RU 2003124738A RU 2237486 C1 RU2237486 C1 RU 2237486C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- placenta
- temperature
- fraction
- extraction
- lipophilic
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, ветеринарии и косметологии. Способ заключается в том, плаценту отмывают, фрагментируют, подвергают замораживанию парами жидкого азота до температуры (-80)-(-120)°С, проводят измельчение в криомельнице при охлаждении парами жидкого азота до температуры (-80)-(-120)°С до размера частиц 20-30 мкм, полученный порошок лиофилизируют при температуре (-10)-(-20)°С до размера частиц 20-30 мкм и при давлении не выше 0,1 мм рт.ст. липофильную фракцию экстрагируют с помощью хладоновых растворителей под давлением 6-8 атм и температуре 30-35°С, а гидрофильную фракцию получают экстрагированием с помощью изотонического водного раствора хлорида натрия при температуре 25-30°С в течение 3-4 часов. Технический результат: способ обеспечивает разделение фракций плаценты свиной с сохранением их нативной структуры и уменьшением посторонних примесей, а также максимальный выход биологически активных веществ и усиление их специфической биологической активности. 5 табл.
Description
Изобретение относится к области ветеринарии, медицины, косметологии.
Прототипом изобретения является способ переработки плаценты, включающий измельчение, экстракцию с помощью органических реагентов и разделение экстракта на фракции с применением раствора хлорида натрия, отличающийся тем, что экстракцию проводят 10-18-кратным объемом хлороформа и этанола в соотношении 1:2, а разделение экстракта на фракции проводят путем введения 0,1-0,2-кратного объема 0,1-0,15 раствора хлорида натрия, после чего из хлороформной фракции упариванием получают липидный комплекс, а из водно-этанольной фракции после упаривания и сушки получают концентрат аминокислот и пептидов. /Патент UA 15241, МПК 6 А 61 К 35/50, дата публикации формулы изобретения 15.09.2000. Бюл. №4, 2000 г./.
Недостатками данного способа являются:
- невозможность полного разделения липофильной и гидрофильной фракций;
- экстракция органическими растворителями ведет к химическому взаимодействию с биологически активными компонентами плаценты вызывая их деструктивные изменения и снижая биологическую активность;
- невозможность полного удаления органических растворителей ведет к побочным токсическим воздействиям на организм.
Технический результат изобретения - разделение фракций плаценты свиной, с сохранением их нативной структуры и уменьшением посторонних примесей.
Технический результат достигается использованием современной технологии переработки тканей плаценты свиной по следующей методике.
1. Криоконсервирование тканей плаценты свиной.
Свиную плаценту промывают проточной водой, фрагментируют и подвергают быстрому замораживанию в парах жидкого азота до температуры (-80)-(-120)°С со скоростью 30 градусов в минуту.
2. Криоизмельчение и криосублимирование тканей плаценты свиной.
Криоизмельчение плаценты свиной ведут на криомельнице при охлаждении парами жидкого азота до температур (-80)-(-120)°С. Степень измельчения ткани составляет 20-30 мкм. Полученный порошок из тканей плаценты подвергают лиофилизации при температурах в диапазоне (-10)-(-20)°С и давлении в камере не выше 0,1 мм рт. ст. в течение 16-20 часов. В результате получают порошок с влажностью 3-5%.
3. Извлечение липофильной фракции из модифицированного порошка плаценты свиной.
Экстрагирование лиофилизированного порошка плаценты свиной производят на установке низкотемпературной экстракции с помощью хладона, который абсолютно инертен к извлекаемой фракции. (Использование хладонов в качестве экстрагентов обусловлено выдерживанием приемлемых технологических параметров - температур, давлений. Выполнение тех же технологических операций с иными экстрагентами, например углекислотой, связаны с рядом технических трудностей. Так, использование углекислоты в качестве экстрагента позволяет проводить процесс экстракции в зоне температур от -40°С до +31°С и давлении 70-75 атм, что технически крайне сложно. Кроме того, при взаимодействии с водой двуокись углерода образует угольную кислоту, которая повышает кислотное число липофильной фракции /Молчанов Г.И. Интенсивная обработка лекарственного сырья. - М.: Медицина, 1981. - 208 с./ Хладоны инертны к большинству химических реагентов так как представляют собой фтор, хлор, предельные углеводороды и устойчивы к большинству факторов внешней среды и изменениям температуры (Полинг А. Общая химия. - М.: Мир, 1974. - С.209). Жидкий хладон подается из напорных емкостей под давлением 6-8 атм и температуре 30-35°С в экстратор №1, где находится предварительно высушенный порошок. Растворитель проходит через слой сублимированного порошка плаценты свиной и извлекает из нее жирорастворимые вещества, затем через фильтр тонкой очистки сливается в испаритель. В испарителе за счет уменьшения давления до атмосферного, учитывая низкую температуру кипения хладонов (-20)–(-40°)С и их летучесть, удается полностью удалить растворитель (он направляется на регенерацию и повторное использование). В результате данной стадии удается получить чистый липофильный комплекс, сохраняя стабильность извлекаемых веществ и их нативный комплекс. Выход липофильной фракции составляет 2-3% от загружаемого лиофилизированного порошка. Липофильная фракция представляет собой коричнево-бурую массу, размягчающуюся при комнатной температуре. Хранят ее в морозильной камере при температуре -18°С.
4. Извлечение гидрофильной фракции.
Выделение гидрофильного комплекса плаценты свиной осуществляют экстрагированием обезжиренного порошка остатка после липофильной экстракции в изотоническом растворе натрия хлорида при температуре 25-30°С в течение 3-4-х часов при постоянном перемешивании. Экстрагирование повторяют дважды. Полученный экстракт фильтруют и получают гидрофильную фракцию плаценты свиной. Раствор хранят в морозильной камере при температуре -18°С. Обращает на себя внимание эффективность и быстрота процесса получения гидрофильной фракции методом водно-солевой экстракции. В отличие от аналогов, где применяются способы экстрагирования водно-солевым раствором, выделение гидрофильного комплекса осуществляется после получения однородного диспергирования, лиофилизации и полного удаления жирорастворимых веществ, а также ведется при низких температурах, позволяющих сохранить все действующие вещества. Полученная фракция плаценты свиной содержит в своем составе ряд природных аминокислот и микроэлементов, адаптированных к организму животных, что выгодно отличает ее от препарата-аналога.
Сущность способа поясняется примерами.
Пример 1.
С целью определения оптимального режима экстракции липофильной фракции проводились опыты по изменению параметров. Установка для экстракции и сам процесс являются низкотемпературными, так как в качестве экстрагента используются хладоны, в частности хладон-12, представляющий собой дифтордихлорметан, температура кипения которого равна -29,8°C. Низкая температура кипения хладонов и высокая их летучесть позволяет проводить экстракцию в интервале низких температур, как например у хладона-12 +30-35°С. В связи с этим процесс носит название низкотемпературного.
Результаты опыта представлены в таблице 1.
Из данных, представленных в таблице 1, видно, что оптимальным временем экстракции липофильной фракции плаценты свиной является 4 часа (опыт 4). Дальнейшее увеличение времени ведения экстрагирования не приводит к повышению процента выхода по отношению к загружаемому сублимированному сырью.
Пример 2.
Оставшийся после выделения липофильной фракции порошок переносится в экстрактор №2. После этого добавляют 30 л 0,85% изотонического раствора натрия хлорида, приготовленного на воде дистиллированной, перемешивают в течение 3-4 часов при температуре 25-30°С (таблица 2, опыты 1-10). Параллельно проводят опыт по извлечению гидрофильной фракции из тканей плаценты свиной, после криоизмельчения не подвергавшейся липофильной экстракции (таблица 2, опыт 11).
В качестве критерия проведения полноты экстрагирования гидрофильных веществ, содержащихся в плаценте, взято содержание ионов Fe3+. Все опыты проводились в одном температурном режиме 25-30°С
На основании данных, представленных в таблице 2, выбран оптимальный режим водно-солевого экстрагирования с целью получения гидрофильной фракции и показано в опыте №11, что проведение экстрагирования гидрофильной фракции без первоначального выделения жирорастворимых компонентов в 5,9 раз снижает эффективность водно-солевой экстракции.
Пример 3.
С целью определения состава липофильной фракции был проведен биохимический анализ фракции, который показал:
Содержание общих липидов, г/л 462
Содержание триглицеридов, ммоль/л 31
Холестерин, ммоль/л 11,5
Цинк, мкМ/л 24,95
Медь, мкМ/л 19,2
Марганец, мкМ/л 0,36
Пример 4.
С целью определения содержания аминокислот и микроэлементов в гидрофильной фракции, был проведен анализ, результаты которого представлены в таблице 3.
Данные, представленные в таблице 3, позволяют сделать следующие выводы. Наличие в составе фракций плаценты свиной полипептидов, аминокислот, микро- и макроэлементов, оксикислот и др. биологически активных веществ вызывает нормализацию метаболических процессов в организме, оказывает иммуномоделирующее и адаптогенное влияние.
Пример 5.
При испытаниях фракций, полученных по заявляемому способу, в производственных условиях был установлен их широкий спектр действия и высокая эффективность для профилактики и лечения различных заболеваний у коров, свиней и молодняка сельскохозяйственных животных.
В результате проведенных испытаний в хозяйствах Воронежской области и отдельных хозяйствах Харьковской области получен высокий эффект лечебного и профилактического действия, превышающий по эффективности прототип. Данные представлены в таблицах 4, 5.
Заявляемый способ позволяет реализовать последовательное качественное разделение липофильной и гидрофильной фракций плаценты свиной с максимальным выходом биологически активных веществ. Это усиливает их специфическую биологическую активность. Полученные фракции являются ценной основой для создания лекарственных форм.
Claims (1)
- Способ получения биологически активных липофильной и гидрофильной фракций плаценты свиной, включающий измельчение, поэтапную экстракцию фракций органическим растворителем и водным раствором хлорида натрия, фильтрование и сушку, отличающийся тем, что плаценту отмывают, фрагментируют, подвергают замораживанию парами жидкого азота до температуры (-80) - (-120)°С, измельчение проводят в крио-мельнице при охлаждении парами жидкого азота до температуры (-80) - (-120)°С до размера частиц 20-30 мкм, полученный порошок лиофилизируют при температуре (-10) - (-20)°С до размера частиц 20-30 мкм и при давлении не выше 0,1 мм рт.ст., липофильную фракцию экстрагируют с помощью хладоновых растворителей под давлением 6-8 атм и температуре 30-35°С, а гидрофильную фракцию получают экстрагированием с помощью изотонического водного раствора хлорида натрия при температуре 25-30°С в течение 3-4 ч.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003124738A RU2237486C1 (ru) | 2003-08-07 | 2003-08-07 | Способ получения биологически активных липофильной и гидрофильной фракций плаценты свиной |
| UA20040806562A UA77486C2 (en) | 2003-08-07 | 2004-08-05 | Method for preparing biologically active lipophilic and hydrophilic fractions of porcine placenta |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003124738A RU2237486C1 (ru) | 2003-08-07 | 2003-08-07 | Способ получения биологически активных липофильной и гидрофильной фракций плаценты свиной |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2237486C1 true RU2237486C1 (ru) | 2004-10-10 |
| RU2003124738A RU2003124738A (ru) | 2005-02-20 |
Family
ID=33538249
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003124738A RU2237486C1 (ru) | 2003-08-07 | 2003-08-07 | Способ получения биологически активных липофильной и гидрофильной фракций плаценты свиной |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2237486C1 (ru) |
| UA (1) | UA77486C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012166006A1 (ru) | 2011-05-30 | 2012-12-06 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Белково-полипептидный комплекс специфического действия на кожную ткань, способ его получения и фармкомпозиция на его основе |
| WO2012166004A1 (ru) | 2011-05-30 | 2012-12-06 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Белково-полипептидный комплекс специфического действия на нервную систему, способ его получения и фармкомпозиция на его основе |
-
2003
- 2003-08-07 RU RU2003124738A patent/RU2237486C1/ru active IP Right Revival
-
2004
- 2004-08-05 UA UA20040806562A patent/UA77486C2/uk unknown
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012166006A1 (ru) | 2011-05-30 | 2012-12-06 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Белково-полипептидный комплекс специфического действия на кожную ткань, способ его получения и фармкомпозиция на его основе |
| WO2012166004A1 (ru) | 2011-05-30 | 2012-12-06 | Закрытое Акционерное Общество "Фарм-Синтез" | Белково-полипептидный комплекс специфического действия на нервную систему, способ его получения и фармкомпозиция на его основе |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2003124738A (ru) | 2005-02-20 |
| UA77486C2 (en) | 2006-12-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Jokić et al. | Modelling of the process of solid-liquid extraction of total polyphenols from soybeans | |
| Isidorov et al. | GC-MS investigation of the chemical composition of honeybee drone and queen larvae homogenate | |
| CN109010385B (zh) | 一种灵芝粉的制备方法 | |
| EP3031819A1 (en) | Method of extracting ceramide and/or pectin from whole apples or apple juice residue | |
| CN112451655A (zh) | 一种抗疲劳组合物及其应用 | |
| RU2237486C1 (ru) | Способ получения биологически активных липофильной и гидрофильной фракций плаценты свиной | |
| US4457917A (en) | Peptide, process for its preparation and pharmaceutical composition containing same | |
| CN105748524A (zh) | 以超临界流体技术分离与纯化胎盘中机能成分的方法 | |
| RU2372095C1 (ru) | Способ получения нативной формы дигидрокверцетина | |
| CN112156112A (zh) | 一种动物骨髓有效部位的制备方法及其应用 | |
| CN106928314A (zh) | 一种从蚯蚓中提取蚯蚓多肽的方法 | |
| WO2019084713A1 (en) | Urease purification from beans | |
| US20060254912A1 (en) | System and method for treating biological tissue usiing curret electrical field | |
| CN107778337B (zh) | 超临界二氧化碳萃取螺旋藻中糖脂的方法 | |
| JPS63502090A (ja) | 動植物由来物質の破砕と抽出法 | |
| KR20240009924A (ko) | 칸나비노이드의 추출 방법 및 시스템 | |
| RU2228759C1 (ru) | Способ получения низкомолекулярной фракции из тканей плаценты свиной | |
| TWI526215B (zh) | Methods for separating functional constituents from the placenta | |
| RU2005478C1 (ru) | Способ получения концентрата сапропеля | |
| Ran et al. | Combination of supercritical fluid extraction with ultrasonic extraction for obtaining sex hormones and IGF-1 from antler velvet | |
| JP7518221B2 (ja) | 生体原料の抽出残渣の製造方法 | |
| JP2010520378A (ja) | 臨界超過液を利用した羊毛から内部羊毛脂質を抽出する方法 | |
| CN102321592B (zh) | 从葱白中提取葱酶的方法 | |
| US1989993A (en) | Physiologically active extracts from placenta and process of preparing them | |
| US20220010263A1 (en) | Superfluids disruption of saccharomyces cerevisiae (yeast), cell wall disintegration into nanoparticles and fractionation into beta-glucans, chitin and mannans (mannoproteins) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110808 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20130127 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180314 |