RU2009140397A - Мультизимы и их использование в получении полиненасыщенных жирных кислот - Google Patents
Мультизимы и их использование в получении полиненасыщенных жирных кислот Download PDFInfo
- Publication number
- RU2009140397A RU2009140397A RU2009140397/10A RU2009140397A RU2009140397A RU 2009140397 A RU2009140397 A RU 2009140397A RU 2009140397/10 A RU2009140397/10 A RU 2009140397/10A RU 2009140397 A RU2009140397 A RU 2009140397A RU 2009140397 A RU2009140397 A RU 2009140397A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- elongase
- delta
- desaturase
- polypeptide
- Prior art date
Links
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 title claims 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract 50
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract 50
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract 47
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract 40
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract 40
- 101000912235 Rebecca salina Acyl-lipid (7-3)-desaturase Proteins 0.000 claims abstract 21
- 101000877236 Siganus canaliculatus Acyl-CoA Delta-4 desaturase Proteins 0.000 claims abstract 21
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims abstract 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract 17
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract 15
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract 15
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract 15
- 108010087894 Fatty acid desaturases Proteins 0.000 claims abstract 13
- 108010022240 delta-8 fatty acid desaturase Proteins 0.000 claims abstract 10
- 102000036181 Fatty Acid Elongases Human genes 0.000 claims abstract 9
- 108010058732 Fatty Acid Elongases Proteins 0.000 claims abstract 9
- 102000009114 Fatty acid desaturases Human genes 0.000 claims abstract 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract 7
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 claims abstract 7
- 102100034542 Acyl-CoA (8-3)-desaturase Human genes 0.000 claims abstract 4
- 108010073542 Delta-5 Fatty Acid Desaturase Proteins 0.000 claims abstract 4
- 102100034543 Fatty acid desaturase 3 Human genes 0.000 claims abstract 4
- 102000057234 Acyl transferases Human genes 0.000 claims abstract 3
- 108700016155 Acyl transferases Proteins 0.000 claims abstract 3
- 102100034544 Acyl-CoA 6-desaturase Human genes 0.000 claims abstract 3
- 108010037138 Linoleoyl-CoA Desaturase Proteins 0.000 claims abstract 3
- 102000005488 Thioesterase Human genes 0.000 claims abstract 3
- 108700014220 acyltransferase activity proteins Proteins 0.000 claims abstract 3
- -1 delta-12-desaturase Proteins 0.000 claims abstract 3
- 108010011713 delta-15 desaturase Proteins 0.000 claims abstract 3
- 108020002982 thioesterase Proteins 0.000 claims abstract 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 26
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 21
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 19
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims 12
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N docosahexaenoic acid Natural products CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 claims 12
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 11
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 claims 10
- HOBAELRKJCKHQD-UHFFFAOYSA-N (8Z,11Z,14Z)-8,11,14-eicosatrienoic acid Natural products CCCCCC=CCC=CCC=CCCCCCCC(O)=O HOBAELRKJCKHQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 8
- HOBAELRKJCKHQD-QNEBEIHSSA-N dihomo-γ-linolenic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCC(O)=O HOBAELRKJCKHQD-QNEBEIHSSA-N 0.000 claims 8
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims 8
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims 4
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 claims 4
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 claims 4
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims 4
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims 3
- 241000235013 Yarrowia Species 0.000 claims 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 3
- YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N (7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCC(O)=O YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N 0.000 claims 2
- 235000021298 Dihomo-γ-linolenic acid Nutrition 0.000 claims 2
- 235000021294 Docosapentaenoic acid Nutrition 0.000 claims 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims 2
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 claims 2
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 claims 2
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 claims 2
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 claims 2
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 claims 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims 2
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 claims 2
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 claims 2
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 claims 2
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims 2
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 claims 2
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 claims 2
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims 2
- BBWMTEYXFFWPIF-CJBMEHDJSA-N (2e,4e,6e)-icosa-2,4,6-trienoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\C=C\C=C\C(O)=O BBWMTEYXFFWPIF-CJBMEHDJSA-N 0.000 claims 1
- 241000195620 Euglena Species 0.000 claims 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims 1
- 241000490645 Yarrowia sp. Species 0.000 claims 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims 1
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 claims 1
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 claims 1
- 229940012843 omega-3 fatty acid Drugs 0.000 claims 1
- 235000020665 omega-6 fatty acid Nutrition 0.000 claims 1
- 229940033080 omega-6 fatty acid Drugs 0.000 claims 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
- C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
- C12N15/8247—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine involving modified lipid metabolism, e.g. seed oil composition
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0071—Oxidoreductases (1.) acting on paired donors with incorporation of molecular oxygen (1.14)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/93—Ligases (6)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
- C12P7/6434—Docosahexenoic acids [DHA]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y114/00—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14)
- C12Y114/19—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14) with oxidation of a pair of donors resulting in the reduction of molecular oxygen to two molecules of water (1.14.19)
- C12Y114/19001—Stearoyl-CoA 9-desaturase (1.14.19.1), i.e. DELTA9-desaturase
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Edible Oils And Fats (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
1. Мультизим, который включает отдельный полипептид, обладающий по меньшей мере двумя независимыми и раздельными ферментативными активностями. ! 2. Мультизим по п.1, отличающийся тем, что ферментативные активности выбирают из группы, состоящей из элонгазы жирных кислот, десатуразы жирных кислот, ацилтрансфераз, ацил-CoA-синтаз и тиоэстераз. ! 3. Мультизим по п.1, отличающийся тем, что ферментативные активности включают по меньшей мере одну элонгазу жирных кислот, связанную по меньшей мере с одной десатуразой жирных кислот. ! 4. Мультизим по п.2 или 3, отличающийся тем, что десатураза жирных кислот выбирается из группы, состоящей из дельта-4-десатуразы, дельта-5-десатуразы, дельта-6-десатуразы, дельта-8-десатуразы, дельта-9-десатуразы, дельта-12-десатуразы, дельта-15-десатуразы или дельта-17-десатуразы. ! 5. Мультизим по п.2 или 3, отличающийся тем, что элонгазу жирных кислот выбирают из группы, состоящей из дельта-9-элонгазы, C14/16-элонгазы, C16/18-элонгазы, C18/20-элонгазы или C20/22-элонгазы. ! 6. Мультизим по п.1, 2 или 3, отличающийся тем, что первая ферментативная активность связана со второй ферментативной активностью, и указанную связь выбирают из группы, состоящей из полипептидной связи, SEQ ID NO:198 (EgDHAsyn1 линкер), SEQ ID NO:200 (EgDHAsyn2 линкер) и SEQ ID NO:235 (EaDHAsyn1 линкер), SEQ ID NO:438, SEQ ID NO:472, SEQ ID NO:445 и SEQ ID NO:504. ! 7. Выделенный полинуклеотид, кодирующий ДГК-синтазу, включающий: ! (a) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает ДГК-синтазной активностью, где данный полипептид имеет по меньшей мере 80% аминокислотную идентичность, основываясь на сравнительном анализе первичной структуры согласно программе Clustal V, при сравнении с аминокис�
Claims (65)
1. Мультизим, который включает отдельный полипептид, обладающий по меньшей мере двумя независимыми и раздельными ферментативными активностями.
2. Мультизим по п.1, отличающийся тем, что ферментативные активности выбирают из группы, состоящей из элонгазы жирных кислот, десатуразы жирных кислот, ацилтрансфераз, ацил-CoA-синтаз и тиоэстераз.
3. Мультизим по п.1, отличающийся тем, что ферментативные активности включают по меньшей мере одну элонгазу жирных кислот, связанную по меньшей мере с одной десатуразой жирных кислот.
4. Мультизим по п.2 или 3, отличающийся тем, что десатураза жирных кислот выбирается из группы, состоящей из дельта-4-десатуразы, дельта-5-десатуразы, дельта-6-десатуразы, дельта-8-десатуразы, дельта-9-десатуразы, дельта-12-десатуразы, дельта-15-десатуразы или дельта-17-десатуразы.
5. Мультизим по п.2 или 3, отличающийся тем, что элонгазу жирных кислот выбирают из группы, состоящей из дельта-9-элонгазы, C14/16-элонгазы, C16/18-элонгазы, C18/20-элонгазы или C20/22-элонгазы.
6. Мультизим по п.1, 2 или 3, отличающийся тем, что первая ферментативная активность связана со второй ферментативной активностью, и указанную связь выбирают из группы, состоящей из полипептидной связи, SEQ ID NO:198 (EgDHAsyn1 линкер), SEQ ID NO:200 (EgDHAsyn2 линкер) и SEQ ID NO:235 (EaDHAsyn1 линкер), SEQ ID NO:438, SEQ ID NO:472, SEQ ID NO:445 и SEQ ID NO:504.
7. Выделенный полинуклеотид, кодирующий ДГК-синтазу, включающий:
(a) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает ДГК-синтазной активностью, где данный полипептид имеет по меньшей мере 80% аминокислотную идентичность, основываясь на сравнительном анализе первичной структуры согласно программе Clustal V, при сравнении с аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:96 или SEQ ID NO:97;
(b) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает ДГК-синтазной активностью, где данная нуклеотидная последовательность имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности, основываясь на сравнительном анализе первичной структуры согласно программе BLASTN, при сравнении с нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93 или SEQ ID NO:410;
(c) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает ДГК-синтазной активностью, где данная нуклеотидная последовательность гибридизуется в жестких условиях с нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93 или SEQ ID NO:410; или
(d) комплемент нуклеотидной последовательности (а), (b) или (с), где данные комплемент и нуклеотидная последовательность состоят из одинакового количества нуклеотидов и являются на 100% комплементарными.
8. Полинуклеотид по п.7, отличающийся тем, что данная нуклеотидная последовательность включает SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93 или SEQ ID NO: 410.
9. Полипептид по п.7, отличающийся тем, что аминокислотная последовательность данного полипептида включает SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:96 или SEQ ID NO:97.
10. Выделенный полинуклеотид, кодирующий C20-элонгазу, включающий:
(a) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает активностью C20-элонгазы, где данный полипептид имеет по меньшей мере 80% аминокислотную идентичность, основываясь на сравнительном анализе первичной структуры согласно программе Clustal V, при сравнении с аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:96, SEQ ID NO:97, SEQ ID NO:202 (EgDHAsyn1 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:204 (EgDHAsyn2 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:231 (EaDHAsyn1 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:232 (EaDHAsyn2 домен C20-элонгазы) или SEQ ID NO:233 (EaDHAsyn3 домен C20-элонгазы);
(b) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает активностью C20-элонгазы, где данная нуклеотидная последовательность имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности, основываясь на сравнительном анализе первичной структуры согласно программе BLASTN, при сравнении с нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93, SEQ ID NO:183, SEQ ID NO:188, SEQ ID NO:201 (EgDHAsyn1 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:206 (EgDHAsyn1* домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:203 (EgDHAsyn2 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:227 (EaDHAsyn1 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:228 (EaDHAsyn2 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:229 (EaDHAsyn3 домен C20-элонгазы) или SEQ ID NO:230 (EaDHAsyn4 домен C20-элонгазы);
(с) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает активностью C20-элонгазы, где данная нуклеотидная последовательность гибридизуется в жестких условиях с нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93, SEQ ID NO:183, SEQ ID NO:188, SEQ ID NO:201 (EgDHAsyn1 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:206 (EgDHAsyn1* домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:203 (EgDHAsyn2 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:227 (EaDHAsyn1 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:228 (EaDHAsyn2 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:229 (EaDHAsyn3 домен C20-элонгазы) или SEQ ID NO:230 (EaDHAsyn4 домен C20-элонгазы); или
(d) комплемент нуклеотидной последовательности (a), (b) или (c), где данные комплемент и нуклеотидная последовательность состоят из одинакового количества нуклеотидов и являются на 100% комплементарными.
11. Выделенный полинуклеотид, кодирующий дельта-4-десатуразу, включающий:
(a) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает активностью дельта-4-десатуразы, где данный полипептид имеет по меньшей мере 80% аминокислотную идентичность, основываясь на сравнительном анализе первичной структуры согласно программе Clustal V, при сравнении с аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:96, SEQ ID NO:97, SEQ ID NO:193, SEQ ID NO:215, SEQ ID NO:217, SEQ ID NO:221, SEQ ID NO:239, SEQ ID NO:240, SEQ ID NO:241, SEQ ID NO:246, SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:382, SEQ ID NO:384, SEQ ID NO:386, SEQ ID NO:388, SEQ ID NO:404, SEQ ID NO:406 или SEQ ID NO:408;
(b) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает активностью дельта-4-десатуразы, где данный полипептид имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности, основываясь на сравнительном анализе первичной структуры согласно программе BLASTN, при сравнении с нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93, SEQ ID NO:192, SEQ ID NO:214, SEQ ID No:216, SEQ ID NO:220, SEQ ID NO:236, SEQ ID NO:237, SEQ ID NO:238, SEQ ID NO:242, SEQ ID NO:243, SEQ ID NO:244, SEQ ID NO:245, SEQ ID NO:381, SEQ ID NO:383, SEQ ID NO:385, SEQ ID NO:387, SEQ ID NO:403, SEQ ID NO:405 или SEQ ID NO:407;
(c) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает активностью дельта-4-десатуразы, где данная нуклеотидная последовательность гибридизуется в жестких условиях с нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93, SEQ ID NO:214, SEQ ID NO:216, SEQ ID NO:220, SEQ ID NO:236, SEQ ID NO:237, SEQ ID NO:238, SEQ ID NO:242, SEQ ID NO:243, SEQ ID NO:244, SEQ ID NO:245, SEQ ID NO: 381, SEQ ID NO:383, SEQ ID NO:385, SEQ ID NO:387, SEQ ID NO:403, SEQ ID NO:405 или SEQ ID NO:407; или
(d) комплемент нуклеотидной последовательности (a), (b) или (c), где данные комплемент и нуклеотидная последовательность состоят из одинакового количества нуклеотидов и являются на 100% комплементарными.
12. Выделенный полинуклеотид, кодирующий ДГК-синтазу, при этом указанный полинуклеотид включает последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:205, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:93 или SEQ ID NO:410.
13. Выделенный полинуклеотид, кодирующий C20-элонгазу, при этом указанный полинуклеотид включает последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO:183, SEQ ID NO:188, SEQ ID NO:201 (EgDHAsyn1 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:206 (EgDHAsyn1* домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:203 (EgDHAsyn2 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:227 (EaDHAsyn1 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:228 (EaDHAsyn2 домен C20-элонгазы), SEQ ID NO:229 (EaDHAsyn3 домен C20-элонгазы) или SEQ ID NO:230 (EaDHAsyn4 домен C20-элонгазы).
14. Выделенный полинуклеотид, кодирующий дельта-4-десатуразу, при этом указанный полинуклеотид включает последовательность, представленную в SEQ ID NO:192, SEQ ID NO:214, SEQ ID NO:220, SEQ ID NO:236, SEQ ID NO:237, SEQ ID NO:238, SEQ ID NO:242, SEQ ID NO:243, SEQ ID NO:244, SEQ ID NO:245, SEQ ID NO:381, SEQ ID NO:383, SEQ ID NO:385, SEQ ID NO:387, SEQ ID NO:403, SEQ ID NO:405 или SEQ ID NO:407.
15. Рекомбинантная конструкция, включающая любой из выделенных полинуклеотидов по пп.7-14, функционально связанный по меньшей мере с одной регуляторной последовательностью.
16. Клетка-хозяин, содержащая в своем геноме рекомбинантную конструкцию по п.15.
17. Клетка-хозяин по п.16, отличающаяся тем, что она выбирается из группы, состоящей из растений и дрожжей.
18. Трансформированный вид Yarrowia, включающий рекомбинантную конструкцию по п.15.
19. Способ трансформирования клетки, включающий трансформацию клетки рекомбинантной конструкции по данному изобретению и селекцию этих клеток, трансформированных указанной рекомбинантной конструкцией.
20. Способ получения трансформированного растения, включающий трансформацию растительной клетки любым из полинуклеотидов по пп.7-14 и регенерацию растения из трансформированной растительной клетки.
21. Способ по п.20, отличающийся тем, что данное растение является соевым растением.
22. Способ получения дрожжей, включающий трансформацию дрожжевой клетки любым из полинуклеотидов по пп.7-14 и выращивание дрожжей из трансформированной дрожжевой клетки.
23. Растение, содержащее в своем геноме рекомбинантную конструкцию по п.15.
24. Растение по п.23, отличающееся тем, что оно является масличным растением.
25. Растение по п.23 или 24, отличающееся тем, что оно является соей.
26. Семя, полученное из растения по п.23 или 24.
27. Семя, полученное из растения по п.25.
28. Масло, полученное из семени по п.26.
29. Масло, полученное из семени по п.27.
30. Пища или корм, включающие масло по п.26.
31. Пища или корм, включающие масло по п.27.
32. Напиток, включающий масло по п.26.
33. Напиток, включающий масло по п.27.
34. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая C20-элонгазу, как представлено в SEQ ID NO:183, где по меньшей мере 147 кодонов оптимизировано для экспрессии в Yarrowia.
35. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая C20-элонгазу, как представлено в SEQ ID NO:188, где по меньшей мере 134 кодона оптимизированы для экспрессии в Yarrowia.
36. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая фермент дельта-4-десатуразу, как представлено в SEQ ID NO:192, где по меньшей мере 285 кодонов оптимизированы для экспрессии в мультизиме Yarrowia sp., включающем элонгазу, присоединенную к десатуразе.
37. Способ получения мультизима, включающий:
(а) связывание первого полипетида по меньшей мере со вторым полипептидом, где каждый полипептид обладает независимой и раздельной ферментативной активностью; и
(b) оценку продукта стадии (а) в отношении независимой и раздельной ферментативных активностей.
38. Способ по п.37, отличающийся тем, что ферментативные активности выбирают из группы, состоящей из элонгазы жирных кислот, десатуразы жирных кислот, ацилтрансфераз, ацил-CoA-синтаз и тиоэстераз.
39. Способ по п.37, отличающийся тем, что ферментативные активности включают по меньшей мере одну элонгазу жирных кислот, связанную по меньшей мере с одной десатуразой жирных кислот.
40. Способ по п.38 или 39, отличающийся тем, что десатураза жирных кислот выбирают из группы, состоящей из дельта-4-десатуразы, дельта-5-десатуразы, дельта-6-десатуразы, дельта-8-десатуразы, дельта-9-десатуразы, дельта-12-десатуразы, дельта-15-десатуразы или дельта-17-десатуразы.
41. Способ по п.38 или 39, отличающийся тем, что элонгаза жирных кислот выбирают из группы, состоящей из дельта-9-элонгазы, C14/16-элонгазы, C16/18-элонгазы, C18/20-элонгазы или C20/22-элонгазы.
42. Способ по п.37, 38 или 39, отличающийся тем, что данную связь выбирают из группы, состоящей из полипептидной связи, SEQ ID NO:198 (линкерная аминокислотная последовательность EgDHAsyn1), SEQ ID NO:200 (линкер EgDHAsyn2), SEQ ID NO:235 (линкер EaDHAsyn1), SEQ ID NO:435, SEQ ID NO:438, SEQ ID NO:472 и SEQ ID NO:504.
43. Способ изменения жирнокислотного профиля масличного растения, включающий:
(а) трансформацию клетки масличного растения рекомбинантной конструкцией по п.15; и
(b) регенерацию растения из трансформированной клетки масличного растения со стадии (a), где данное растение имеет измененный жирнокислотный профиль.
44. Способ по п.43, отличающийся тем, что данное масличное растение является соей.
45. Потомство растения по п.23.
46. Рекомбинантная микробная клетка-хозяин, включающая мультизим по п.6, где первой ферментативной активностью является дельта-9-элонгаза, и второй ферментативной активностью является дельта-8-десатураза.
47. Рекомбинантная микробная клетка-хозяин, включающая мультизим по п.6, где первая ферментативная активность является C20-элонгазой, и вторая ферментативная активность является дельта-4-десатуразой.
48. Рекомбинантная клетка-хозяин по любому из пп.46 или 47, отличающаяся тем, что представляет собой жировые дрожжи.
49. Способ превращения линолевой кислоты в дигомо-гамма-линоленовую кислоту, который включает:
а) получение рекомбинантной микробной клетки-хозяина, которая включает:
i) ДГЛК-синтазу, содержащую:
1) по меньшей мере один полипептид, кодирующий дельта-9-элонгазу;
2) по меньшей мере один полипептид, кодирующий дельта-8-десатуразу; и
3) полипептидный линкер;
где данный линкер находится между дельта-9-элонгазой и дельта-8-десатуразой; и
ii) источник линолевой кислоты; и
b) выращивание клетки-хозяина (а) в условиях, в которых образуется дигомо-гамма-линоленовая кислота.
50. Способ превращения α-линоленовой кислоты в эйкозатриеновую кислоту, включающий:
a) получение рекомбинантной микробной клетки-хозяина, которая включает:
i) ДГЛК-синтазу, содержащую:
1) по меньшей мере один полипептид, кодирующий дельта-9-элонгазу;
2) по меньшей мере один полипептид, кодирующий дельта-8-десатуразу; и
3) полипептидный линкер;
где данный линкер находится между дельта-9-элонгазой и дельта-8-десатуразой; и
ii) источник α-линоленовой кислоты; и
б) выращивание клетки-хозяина (a) в условиях, в которых образуется эйкозатриеновая кислота.
51. Способ превращения эйкозапентаеновой кислоты в докозагексаеновую кислоту, включающий:
a) получение рекомбинантной микробной клетки-хозяина, которая включает:
i) ДГК-синтазу, содержащую:
1) по меньшей мере один полипептид, кодирующий C20-элонгазу;
2) по меньшей мере один полипептид, кодирующий дельта-4-десатуразу; и
3) полипептидный линкер;
где данный линкер находится между C20-элонгазой и дельта-4-десатуразой; и
ii) источник эйкозапентаеновой кислоты; и
b) выращивание клетки-хозяина (a) в условиях, в которых образуется докозагексаеновая кислота.
52. Способ превращения арахидоновой кислоты в докозапентаеновую кислоту, включающий:
a) получение рекомбинантной микробной клетки-хозяина, которая включает:
i) ДГК-синтазу, содержащую:
1) по меньшей мере один полипептид, кодирующий C20-элонгазу;
2) по меньшей мере один полипептид, кодирующий дельта-4-десатуразу; и
3) полипептидный линкер;
где данный линкер находится между C20-элонгазой и дельта-4-десатуразой; и
ii) источник арахидоновой кислоты; и
b) выращивание клетки-хозяина (a) в условиях, в которых образуется докозапентаеновая кислота.
53. Способ по п.49 или 50, отличающийся тем, что ДГЛК-синтаза имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO:441, SEQ ID NO:447, SEQ ID NO:454, SEQ ID NO:461, SEQ ID NO:464, SEQ ID NO:471, SEQ ID NO:515, SEQ ID NO:516, SEQ ID NO:517, SEQ ID NO:518 и SEQ ID NO:519.
54. Способ по п.51 или 52, отличающийся тем, что ДГК-синтаза имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:96, SEQ ID NO:97 и SEQ ID NO:411.
55. Способ по любому из пп.49-52, отличающийся тем, что полипептидный линкер имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO:198, SEQ ID NO:200, SEQ ID NO:235, SEQ ID NO:438, SEQ ID NO:445, SEQ ID NO:472 и SEQ ID NO:504.
56. Способ по п.49 или 50, отличающийся тем, что дельта-9-элонгаза имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO:254, SEQ ID NO:255, SEQ ID NO:319, SEQ ID NO:359, SEQ ID NO:420, SEQ ID NO:422 и SEQ ID NO:513.
57. Способ по п.49 или 50, отличающийся тем, что дельта-8-десатураза имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO:328, SEQ ID NO:424, SEQ ID NO:426, SEQ ID NO:428, SEQ ID NO:430 и SEQ ID NO:514.
58. Способ по п.51 или 52, отличающийся тем, что C20-элонгаза имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:96, SEQ ID NO:97, SEQ ID NO:202, SEQ ID NO:204, SEQ ID NO:231, SEQ ID NO:232, SEQ ID NO:233, SEQ ID NO:184 и SEQ ID NO:189.
59. Способ по п.51 или 52, отличающийся тем, что дельта-4-десатураза имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:95, SEQ ID NO:96, SEQ ID NO:97, SEQ ID NO:215, SEQ ID NO:221, SEQ ID NO:239, SEQ ID NO:240, SEQ ID NO:241, SEQ ID NO:246, SEQ ID NO:247, SEQ ID NO:248, SEQ ID NO:249, SEQ ID NO:382, SEQ ID NO:384, SEQ ID NO:386, SEQ ID NO:388, SEQ ID NO:404, SEQ ID NO:406, SEQ ID NO:408 и SEQ ID NO:193.
60. Способ идентификации полипептида, обладающего улучшенной дельта-4-десатуразной активностью, включающий:
a) получение дельта-4-десатуразного полипептида дикого типа, выделенного из Euglena anabena, обладающего базисной дельта-4-десатуразной активностью; и
b) усечение полипептида (a) дикого типа на приблизительно от 1 до приблизительно 200 аминокислот для создания усеченного мутантного полипептида, обладающего дельта-4-десатуразной активностью, которая повышена по сравнению с базисной дельта-4-десатуразной активностью.
61. Способ по п.60, отличающийся тем, что полипептид дикого типа усечен в N-концевой части данного полипетида.
62. Способ по п.60, отличающийся тем, что полипетид дикого типа усечен на приблизительно от 1 до приблизительно 70 аминокислот.
63. Микробная клетка-хозяин, которая продуцирует полиненасыщенную жирную кислоту и экспрессирует полипептиды, кодирующие ферменты, в следующей последовательности:
1) дельта-9-десатураза,
2) дельта-12-десатураза,
3) дельта-9-элонгаза,
4) дельта-8-десатураза,
5) дельта-5-десатураза,
6) дельта-17-десатураза,
7) C20/22-элонгаза, и
8) дельта-4-десатураза;
где данные полипептиды содержат по меньшей мере один мультизим, причем слияние включает слияние между по меньшей мере одной смежной ферментной парой.
64. Микробный хозяин по п.63, отличающийся тем, что полиненасыщенную жирную кислоту выбирается из группы, состоящей из ω-3 жирной кислоты и ω-6 жирной кислоты.
65. Фермент полинуклеотид, кодирующий ДГЛК-синтазу, включающий:
(a) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает ДГЛК-синтазной активностью, где данный полипептид представлен в SEQ ID NO:441, SEQ ID NO:447, SEQ ID NO:454, SEQ ID NO:461, SEQ ID NO:464, SEQ ID NO:471, SEQ ID NO:515, SEQ ID NO:516, SEQ ID NO:517, SEQ ID NO:518 или SEQ ID NO:519;
(b) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает ДГЛК-синтазной активностью, где данная нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID NO:440, SEQ ID NO:446, SEQ ID NO:453, SEQ ID NO:460, SEQ ID NO:463, SEQ ID NO:470, SEQ ID NO:492, SEQ ID No:493, SEQ ID NO:494, SEQ ID NO:495 или SEQ ID NO:496;
(c) нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который обладает ДГЛК-синтазной активностью, где данная нуклеотидная последовательность гибридизуется в жестких условиях с нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:440, SEQ ID NO:446, SEQ ID NO:453, SEQ ID NO:460, SEQ ID NO:493, SEQ ID NO:470, SEQ ID NO:492, SEQ ID NO:493, SEQ ID NO:494, SEQ ID NO:495 или SEQ ID NO:496; или
(г) комплемент нуклеотидной последовательности (а), (b) или (c), где данные комплемент и нуклеотидная последовательность состоят из одинакового количества нуклеотидов и являются на 100% комплементарными.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US90979007P | 2007-04-03 | 2007-04-03 | |
| US60/909,790 | 2007-04-03 | ||
| US2789808P | 2008-02-12 | 2008-02-12 | |
| US61/027,898 | 2008-02-12 | ||
| PCT/US2008/004377 WO2008124048A2 (en) | 2007-04-03 | 2008-04-03 | Multizymes and their use in making polyunsaturated fatty acids |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014102130/10A Division RU2014102130A (ru) | 2007-04-03 | 2014-01-23 | Мультизимы и их использование в получении полиненасыщенных жирных кислот |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009140397A true RU2009140397A (ru) | 2011-05-10 |
| RU2517608C2 RU2517608C2 (ru) | 2014-05-27 |
Family
ID=39650608
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009140397/10A RU2517608C2 (ru) | 2007-04-03 | 2008-04-03 | Мультизимы и их использование в получении полиненасыщенных жирных кислот |
| RU2014102130/10A RU2014102130A (ru) | 2007-04-03 | 2014-01-23 | Мультизимы и их использование в получении полиненасыщенных жирных кислот |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014102130/10A RU2014102130A (ru) | 2007-04-03 | 2014-01-23 | Мультизимы и их использование в получении полиненасыщенных жирных кислот |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8828690B2 (ru) |
| EP (1) | EP2129777B1 (ru) |
| JP (1) | JP2010523113A (ru) |
| CN (2) | CN101765658B (ru) |
| BR (1) | BRPI0808577A2 (ru) |
| CA (1) | CA2679988A1 (ru) |
| DK (1) | DK2129777T3 (ru) |
| ES (1) | ES2559312T3 (ru) |
| HU (1) | HUE028692T2 (ru) |
| MX (1) | MX2009010574A (ru) |
| RS (1) | RS20090413A (ru) |
| RU (2) | RU2517608C2 (ru) |
| UA (1) | UA103595C2 (ru) |
| WO (1) | WO2008124048A2 (ru) |
Families Citing this family (47)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103451246B (zh) | 2004-04-22 | 2018-02-16 | 联邦科学技术研究组织 | 用重组细胞合成长链多不饱和脂肪酸 |
| CA3056110C (en) | 2004-04-22 | 2020-07-14 | Surinder Pal Singh | Synthesis of long-chain polyunsaturated fatty acids by recombinant cells |
| BRPI0716075A2 (pt) | 2006-08-29 | 2013-08-06 | Commw Scient Ind Res Org | sÍntese de Ácidos graxos |
| US7794701B2 (en) * | 2007-04-16 | 2010-09-14 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Δ-9 elongases and their use in making polyunsaturated fatty acids |
| US7943365B2 (en) * | 2007-05-03 | 2011-05-17 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Δ-5 desaturases and their use in making polyunsaturated fatty acids |
| WO2009016208A2 (de) * | 2007-07-31 | 2009-02-05 | Basf Plant Science Gmbh | Elongasen und verfahren zur herstellung mehrfach ungesättigter fettsäuren in transgenen organismen |
| CN101970638B (zh) * | 2007-10-03 | 2015-02-11 | 纳幕尔杜邦公司 | 用于高水平生产二十碳五烯酸的优化解脂耶氏酵母菌株 |
| BRPI0906321A2 (pt) | 2008-04-03 | 2015-07-07 | Du Pont | "multienzima" |
| US8168858B2 (en) | 2008-06-20 | 2012-05-01 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Delta-9 fatty acid elongase genes and their use in making polyunsaturated fatty acids |
| BR122021003836B1 (pt) | 2008-11-18 | 2022-02-01 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Polinucleotídeo isolado e/ou exógeno que não ocorre de forma natural, vetor e método para produzir óleo contendo ácidos graxos insaturados |
| EP2358862B1 (en) | 2008-12-18 | 2017-08-02 | E. I. du Pont de Nemours and Company | Reducing byproduction of malonates in a fermentation process |
| AU2010260227B2 (en) | 2009-06-16 | 2015-01-29 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Improvement of long chain omega-3 and omega-6 polyunsaturated fatty acid biosynthesis by expression of acyl-CoA lysophospholipid acyltransferases |
| DK2442666T3 (da) * | 2009-06-16 | 2015-07-13 | Du Pont | Olier med højt indhold af eicosapentaensyre fra forbedrede og optimerede stammer af yarrowia lipolytica |
| JP5893555B2 (ja) * | 2009-06-16 | 2016-03-23 | イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニーＥ．Ｉ．Ｄｕ Ｐｏｎｔ Ｄｅ Ｎｅｍｏｕｒｓ Ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ | エイコサペンタエン酸を高産生するよう改良されたヤロウイア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）最適化株 |
| US8399226B2 (en) * | 2009-06-16 | 2013-03-19 | E I Du Pont De Nemours And Company | High eicosapentaenoic acid oils from improved optimized strains of Yarrowia lipolytica |
| US20120174261A1 (en) | 2009-06-30 | 2012-07-05 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Plant seeds with alterred storage compound levels, related constructs and methods involving genes encoding cytosolic pyrophosphatase |
| US8188335B2 (en) * | 2009-07-17 | 2012-05-29 | Abbott Laboratories | Δ9-elongase for production of polyunsaturated fatty acid-enriched oils |
| CA2768082C (en) * | 2009-07-17 | 2020-07-21 | Basf Plant Science Company Gmbh | Novel fatty acid desaturases and uses thereof |
| AR078829A1 (es) | 2009-10-30 | 2011-12-07 | Du Pont | Plantas y semillas con niveles alterados de compuesto de almacenamiento, construcciones relacionadas y metodos relacionados con genes que codifican proteinas similares a las aldolasas bacterianas de la clase ii del acido 2,4- dihidroxi-hept-2-eno-1,7-dioico |
| US20130101723A1 (en) | 2009-11-03 | 2013-04-25 | Daniel Verkoeijen | Vegetable oil comprising a polyunsaturated fatty acid having at least 20 carbon atoms |
| JP6476436B2 (ja) | 2009-11-03 | 2019-03-06 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ．Ｄｓｍ Ｉｐ Ａｓｓｅｔｓ Ｂ．Ｖ． | 細胞および少なくとも２０個の炭素原子を有する多価不飽和脂肪酸（ｌｃ−ｐｕｆａ）を含んでなる組成物 |
| WO2011062748A1 (en) | 2009-11-23 | 2011-05-26 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Sucrose transporter genes for increasing plant seed lipids |
| EP2516638A1 (en) | 2009-12-24 | 2012-10-31 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Plant membrane bound o-acyl transferase (mboat) family protein sequences and their uses for altering fatty acid compositions |
| US20110178105A1 (en) | 2010-01-15 | 2011-07-21 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Clinical benefits of eicosapentaenoic acid in humans |
| EP2542671A2 (en) * | 2010-03-02 | 2013-01-09 | Massachusetts Institute Of Technology | Microbial engineering for the production of fatty acids and fatty acid derivatives |
| BR112012022045A8 (pt) | 2010-03-03 | 2018-06-19 | Du Pont | ''planta transgênica,semente transgênica,método para produzir uma planta transgênica,método para produzir sementes transgênicas,produto e/ou subproduto,polinucleotídeo isolado e planta ou semente''. |
| CN103282474A (zh) | 2010-04-22 | 2013-09-04 | 纳幕尔杜邦公司 | 从微生物生物质中获得包含多不饱和脂肪酸的组合物的方法 |
| CN103080320A (zh) | 2010-07-01 | 2013-05-01 | 纳幕尔杜邦公司 | 涉及编码pae以及pae样多肽的基因并具有改变的贮藏化合物水平的植物种子、相关的构建体和的方法 |
| WO2012027676A1 (en) | 2010-08-26 | 2012-03-01 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Mutant delta-9 elongases and their use in making polyunsaturated fatty acids |
| BR112013004355A2 (pt) | 2010-08-26 | 2021-05-04 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | polipeptídeo mutante possuindo atividade delta-5 dessaturase, molécula de ácido nucleico isolada e célula transformada. |
| JP2013535987A (ja) * | 2010-08-26 | 2013-09-19 | イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー | 高レベルのエイコサペンタエン酸生産のための組換え微生物宿主細胞 |
| WO2012091812A1 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Use of saccharomyces cerevisiae suc2 gene in yarrowia lipolytica for sucrose utilization |
| US20130040340A1 (en) | 2011-02-07 | 2013-02-14 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Production of alcohol esters in situ using alcohols and fatty acids produced by microorganisms |
| WO2012109545A2 (en) | 2011-02-11 | 2012-08-16 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Method for obtaining a lipid-containing composition from microbial biomass |
| US20120247066A1 (en) | 2011-04-01 | 2012-10-04 | Ice House America, Llc | Ice bagging apparatus and methods |
| WO2012162368A1 (en) | 2011-05-26 | 2012-11-29 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Expression of caleosin in recombinant oleaginous microorganisms to increase oil content therein |
| ES2635115T3 (es) * | 2012-01-23 | 2017-10-02 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Regulación por disminución de expresión génica utilizando micro ARN artificiales para silenciar genes biosintéticos de ácidos grasos |
| HUE033766T2 (en) | 2012-06-15 | 2018-01-29 | Commw Scient Ind Res Org | Preparation of long chain polyunsaturated fatty acids in plant cells |
| EP2861728B1 (en) | 2012-06-19 | 2017-12-27 | E. I. du Pont de Nemours and Company | Improved production of polyunsaturated fatty acids by coexpression of acyl-coa: lysophosphatidylcholine acyltransferases and phospholipid: diacylglycerol acyltransferases |
| US9005940B2 (en) | 2012-12-21 | 2015-04-14 | E I Du Pont De Nemours And Company | Down-regulation of a polynucleotide encoding a Sou2 sorbitol utilization protein to modify lipid production in microbial cells |
| CA3241340A1 (en) | 2013-12-18 | 2015-06-25 | Grains Research And Development Corporation | Lipid comprising long chain polyunsaturated fatty acids |
| SG11201610596PA (en) * | 2014-06-27 | 2017-01-27 | Commw Scient Ind Res Org | Lipid comprising docosapentaenoic acid |
| CN107406838A (zh) | 2014-11-06 | 2017-11-28 | 纳幕尔杜邦公司 | Rna引导的内切核酸酶向细胞中的肽介导的递送 |
| US10393225B2 (en) * | 2015-01-05 | 2019-08-27 | Goodrich Corporation | Integrated multi-function propulsion belt for air cushion supported aircraft cargo loading robot |
| US20200015500A1 (en) | 2016-12-15 | 2020-01-16 | Dsm Ip Assets B.V. | Blend formulation comprising silicate and microbial and / or plant cells comprising a polyunsaturated fatty acid having at least 20 carbon atoms (lc-pufa) |
| WO2018129440A1 (en) | 2017-01-09 | 2018-07-12 | University Of Massachusetts | Complexes for gene deletion and editing |
| CN115820586A (zh) * | 2022-09-06 | 2023-03-21 | 中国农业科学院油料作物研究所 | 一种溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶、核酸分子及其应用 |
Family Cites Families (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU675923B2 (en) * | 1991-12-04 | 1997-02-27 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Fatty acid desaturase genes from plants |
| US5547868A (en) * | 1993-06-09 | 1996-08-20 | Regents Of The University Of California | Cholesterol disposal fusion enzymes |
| US5968809A (en) * | 1997-04-11 | 1999-10-19 | Abbot Laboratories | Methods and compositions for synthesis of long chain poly-unsaturated fatty acids |
| US6075183A (en) * | 1997-04-11 | 2000-06-13 | Abbott Laboratories | Methods and compositions for synthesis of long chain poly-unsaturated fatty acids in plants |
| US6677145B2 (en) * | 1998-09-02 | 2004-01-13 | Abbott Laboratories | Elongase genes and uses thereof |
| US6403349B1 (en) | 1998-09-02 | 2002-06-11 | Abbott Laboratories | Elongase gene and uses thereof |
| US6825017B1 (en) * | 1998-12-07 | 2004-11-30 | Washington State University Research Foundation | Desaturases and methods of using them for synthesis of polyunsaturated fatty acids |
| DE69935162T2 (de) | 1998-12-07 | 2007-11-22 | Washington State University Research Foundation, Pullman | Desaturasen und verfahren ihrer anwendung zur synthese von mehrfach ungesättigten fettsäuren |
| EP2295594B1 (en) * | 2000-01-19 | 2018-04-04 | DSM IP Assets B.V. | Solventless extraction process |
| ATE510908T1 (de) * | 2000-09-28 | 2011-06-15 | Bioriginal Food & Science Corp | Fad5-2, mitglied der desaturase-familie und verwendungen davon |
| DE10102338A1 (de) * | 2001-01-19 | 2002-07-25 | Basf Plant Science Gmbh | Verfahren zur Expression von Biosynthesegenen in pflanzlichen Samen unter Verwendung von neuen multiplen Expressionskonstrukten |
| DE10102337A1 (de) * | 2001-01-19 | 2002-07-25 | Basf Plant Science Gmbh | Verfahren zur Herstellung mehrfach ungesättigter Fettsäuren, neue Biosynthesegene sowie neue pflanzliche Expressionskonstrukte |
| EP1392823B1 (en) | 2001-01-25 | 2011-11-30 | Abbott Laboratories | Desaturase genes and uses thereof |
| GB0107510D0 (en) | 2001-03-26 | 2001-05-16 | Univ Bristol | New elongase gene and a process for the production of -9-polyunsaturated fatty acids |
| US7045683B2 (en) * | 2001-05-04 | 2006-05-16 | Abbott Laboratories | Δ4-desaturase genes and uses thereof |
| ES2525212T3 (es) * | 2002-12-19 | 2014-12-19 | University Of Bristol | Procedimiento novedoso de producción de ácidos grasos poliinsaturados |
| US20040172682A1 (en) | 2003-02-12 | 2004-09-02 | Kinney Anthony J. | Production of very long chain polyunsaturated fatty acids in oilseed plants |
| MXPA05010571A (es) * | 2003-04-08 | 2005-11-23 | Basf Plant Science Gmbh | Delta-4-desaturasas a partir de euglena gracilis, que expresan plantas y aceites que comprenden pufa |
| US7238482B2 (en) * | 2003-05-07 | 2007-07-03 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Production of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts |
| US7125672B2 (en) * | 2003-05-07 | 2006-10-24 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Codon-optimized genes for the production of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts |
| US7214491B2 (en) * | 2003-05-07 | 2007-05-08 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Δ-12 desaturase gene suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts |
| CA3037924A1 (en) * | 2003-08-01 | 2005-02-10 | Basf Plant Science Gmbh | Method for the production of polyunsaturated fatty acids in transgenic organisms |
| US7504259B2 (en) | 2003-11-12 | 2009-03-17 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Δ12 desaturases suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeast |
| AU2004290051A1 (en) | 2003-11-12 | 2005-05-26 | E.I. Dupont De Nemours And Company | Delta-15 desaturases suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oilseed plants and oleaginous yeast |
| JP4567047B2 (ja) * | 2004-02-27 | 2010-10-20 | ビーエーエスエフ プラント サイエンス ゲーエムベーハー | トランスジェニック植物における多価不飽和脂肪酸の製造方法 |
| CN103451246B (zh) * | 2004-04-22 | 2018-02-16 | 联邦科学技术研究组织 | 用重组细胞合成长链多不饱和脂肪酸 |
| CA3056110C (en) | 2004-04-22 | 2020-07-14 | Surinder Pal Singh | Synthesis of long-chain polyunsaturated fatty acids by recombinant cells |
| WO2006012325A1 (en) | 2004-06-25 | 2006-02-02 | E.I. Dupont De Nemours And Company | Delta-8 desaturase and its use in making polyunsaturated fatty acids |
| US7189559B2 (en) * | 2004-11-04 | 2007-03-13 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Mortierella alpina lysophosphatidic acid acyltransferase homolog for alteration of polyunsaturated fatty acids and oil content in oleaginous organisms |
| US7470532B2 (en) | 2005-10-19 | 2008-12-30 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Mortierella alpina C16/18 fatty acid elongase |
| KR20080071190A (ko) | 2005-11-23 | 2008-08-01 | 이 아이 듀폰 디 네모아 앤드 캄파니 | 델타-９ 일롱가제, 및 다중불포화 지방산 생성에 있어서의이들의 용도 |
-
2008
- 2008-04-03 RS RSP-2009/0413A patent/RS20090413A/sr unknown
- 2008-04-03 UA UAA200910197A patent/UA103595C2/ru unknown
- 2008-04-03 RU RU2009140397/10A patent/RU2517608C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-04-03 WO PCT/US2008/004377 patent/WO2008124048A2/en active Application Filing
- 2008-04-03 CN CN200880018608XA patent/CN101765658B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2008-04-03 EP EP08727277.9A patent/EP2129777B1/en active Active
- 2008-04-03 CN CN201310495325.7A patent/CN104152423A/zh active Pending
- 2008-04-03 JP JP2010502136A patent/JP2010523113A/ja active Pending
- 2008-04-03 US US12/061,738 patent/US8828690B2/en active Active
- 2008-04-03 ES ES08727277.9T patent/ES2559312T3/es active Active
- 2008-04-03 DK DK08727277.9T patent/DK2129777T3/en active
- 2008-04-03 BR BRPI0808577A patent/BRPI0808577A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2008-04-03 MX MX2009010574A patent/MX2009010574A/es active IP Right Grant
- 2008-04-03 HU HUE08727277A patent/HUE028692T2/en unknown
- 2008-04-03 CA CA002679988A patent/CA2679988A1/en not_active Abandoned
-
2014
- 2014-01-23 RU RU2014102130/10A patent/RU2014102130A/ru not_active Application Discontinuation
- 2014-07-22 US US14/337,569 patent/US20150031096A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20080254191A1 (en) | 2008-10-16 |
| AU2008236723A1 (en) | 2008-10-16 |
| RU2014102130A (ru) | 2015-08-27 |
| CN104152423A (zh) | 2014-11-19 |
| WO2008124048A2 (en) | 2008-10-16 |
| ES2559312T3 (es) | 2016-02-11 |
| US20150031096A1 (en) | 2015-01-29 |
| HUE028692T2 (en) | 2016-12-28 |
| RU2517608C2 (ru) | 2014-05-27 |
| UA103595C2 (ru) | 2013-11-11 |
| DK2129777T3 (en) | 2016-01-25 |
| JP2010523113A (ja) | 2010-07-15 |
| CN101765658A (zh) | 2010-06-30 |
| CA2679988A1 (en) | 2008-10-16 |
| CN101765658B (zh) | 2013-11-20 |
| WO2008124048A8 (en) | 2011-11-03 |
| EP2129777B1 (en) | 2015-10-28 |
| BRPI0808577A2 (pt) | 2019-09-24 |
| WO2008124048A3 (en) | 2009-02-05 |
| MX2009010574A (es) | 2009-10-22 |
| EP2129777A2 (en) | 2009-12-09 |
| RS20090413A (en) | 2010-06-30 |
| US8828690B2 (en) | 2014-09-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2009140397A (ru) | Мультизимы и их использование в получении полиненасыщенных жирных кислот | |
| US12006504B2 (en) | Production of DHA and other LC PUFAs in plants | |
| US10174297B2 (en) | Fatty acid desaturases from primula | |
| WO2005047479A3 (en) | Delta-15 desaturases suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oilseed plants and oleaginous yeast | |
| Ruiz-López et al. | Metabolic engineering of the omega-3 long chain polyunsaturated fatty acid biosynthetic pathway into transgenic plants | |
| US7465564B2 (en) | Production of γ-linolenic acid in oleaginous yeast | |
| WO2005047485A3 (en) | Delta12 desaturases suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeast | |
| WO2004104167A3 (en) | A δ-12 desaturase gene suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts | |
| RU2007127798A (ru) | Способ получения полиненасыщенных жирных кислот в трансгенных организмах | |
| IL144269A (en) | Schizochytrium pks genes | |
| WO2004101753A3 (en) | Codon-optimized genes for the production of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts | |
| US8440805B2 (en) | Algal desaturases | |
| JP2016500514A (ja) | 組換え有機体 | |
| RU2011114558A (ru) | Гены δ-8-десатуразы, ферменты, кодируемые ими, и их применение | |
| TWI359869B (en) | Process for producing poly-unsaturated fatty acids | |
| US9315837B2 (en) | Desaturases of a green microalga and uses thereof | |
| KR101549147B1 (ko) | 고도불포화지방산 생합성을 위한 재조합 벡터 및 이를 이용하여 제작된 형질전환 효모 | |
| US20090325264A1 (en) | Engineered Delta-15-Fatty Acid Desaturases | |
| Arora | The Role of Metabolic Engineering for Enhancing PUFA Production in Microalgae | |
| US20130160169A1 (en) | Fungal desaturase and elongase genes | |
| CN106029877A (zh) | 转变去饱和酶的底物专一性的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160404 |