RU2008123398A - Композиции и способы модулирования гемостаза - Google Patents

Abstract

1. Вариант фактора X/фактора Xa зимогена/протеазы, который модулирует гемостаз. ! 2. Вариант зимогена/протеазы по п.1, который является вариантом фактора X/фактора Xa, кодируемым последовательностью SEQ ID NO:2, в которой нуклеотиды 1684-1695 могут кодировать какую-либо аминокислоту при условии, что нуклеотиды 1684-1686 не кодируют Val или Ala. ! 3. Вариант зимогена/протеазы по п.1, который содержит по меньшей мере одну модификацию последовательности SEQ ID NO:1, выбранную из группы, состоящей из: ! а) IIе в положении 16 является Leu, Phe, Asp или Gly, ! б) Val в положении 17 является Leu, Ala или Gly и ! в) Asp в положении 194 является Asn или Glu. ! 4. Нуклеиновая кислота, кодирующая вариант зимогена/протеазы по п.3, которая необязательно кодирует внутриклеточный сайт расщепления РАСЕ/фурина. ! 5. Нуклеиновая кислота по п.3, имеющая последовательность SEQ ID NO:2, в которой нуклеотиды в положениях 1684-1695 кодируют аминокислоты, выбранные из группы, состоящей из Leu-Val-Gly, Gly-Val-Gly, Ile-Ala-Gly, Phe-Val-Gly и Ile-Gly-Gly, причем указанная нуклеиновая кислота необязательно включает нуклеотиды по положениям 2233-2235, которые кодируют аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Asn и Glu. ! 6. Вариант зимогена/протеазы, кодируемый нуклеиновой кислотой по п.5. ! 7. Фармацевтическая композиция, включающая вариант фактора Xa по п.3 в биологически совместимом носителе. ! 8. Нуклеиновая кислота по п.4, клонированная в экспрессирующем векторе. ! 9. Вектор по п.8, выбранный из группы, состоящей из аденовирусного вектора, аденовирус-ассоциированного вектора, ретровирусного вектора, плазмиды и лентивирусного вектора. ! 10. Способ лечения расстройства, связанного с гемостазом, у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение тер

Claims (21)

1. Вариант фактора X/фактора Xa зимогена/протеазы, который модулирует гемостаз.

2. Вариант зимогена/протеазы по п.1, который является вариантом фактора X/фактора Xa, кодируемым последовательностью SEQ ID NO:2, в которой нуклеотиды 1684-1695 могут кодировать какую-либо аминокислоту при условии, что нуклеотиды 1684-1686 не кодируют Val или Ala.

3. Вариант зимогена/протеазы по п.1, который содержит по меньшей мере одну модификацию последовательности SEQ ID NO:1, выбранную из группы, состоящей из:

а) IIе в положении 16 является Leu, Phe, Asp или Gly,

б) Val в положении 17 является Leu, Ala или Gly и

в) Asp в положении 194 является Asn или Glu.

4. Нуклеиновая кислота, кодирующая вариант зимогена/протеазы по п.3, которая необязательно кодирует внутриклеточный сайт расщепления РАСЕ/фурина.

5. Нуклеиновая кислота по п.3, имеющая последовательность SEQ ID NO:2, в которой нуклеотиды в положениях 1684-1695 кодируют аминокислоты, выбранные из группы, состоящей из Leu-Val-Gly, Gly-Val-Gly, Ile-Ala-Gly, Phe-Val-Gly и Ile-Gly-Gly, причем указанная нуклеиновая кислота необязательно включает нуклеотиды по положениям 2233-2235, которые кодируют аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Asn и Glu.

6. Вариант зимогена/протеазы, кодируемый нуклеиновой кислотой по п.5.

7. Фармацевтическая композиция, включающая вариант фактора Xa по п.3 в биологически совместимом носителе.

8. Нуклеиновая кислота по п.4, клонированная в экспрессирующем векторе.

9. Вектор по п.8, выбранный из группы, состоящей из аденовирусного вектора, аденовирус-ассоциированного вектора, ретровирусного вектора, плазмиды и лентивирусного вектора.

10. Способ лечения расстройства, связанного с гемостазом, у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение терапевтически эффективного количества зимогена/протеазы по п.3 в биологически приемлемом носителе.

11. Способ по п.10, в котором указанный вариант является прокоагулянтом, а указанное расстройство выбрано из группы, состоящей из гемофилии А, гемофилии В, гемофилии А и гемофилии В, ассоциированных с ингибирующими антителами, недостаточности фактора коагуляции, недостаточности витамин К-эпоксидредуктазы C1, недостаточности гамма-карбоксилазы, кровотечения, связанного с травмой, повреждением, тромбозом, тромбоцитопенией, инсультом, коагулопатией, диссеминированной внутрисосудистой коагуляцией, расстройств, связанных с избыточным антикоагуляционным лечением, синдрома Бернара-Сулье, тромбоцитастении Гланцманна и недостаточности кровяного депо.

12. Способ по п.11, в котором указанный фактор коагуляции выбран из группы, состоящей по меньшей мере из одного из следующих факторов: фактора VII, фактора IX, фактора X, фактора XI, фактора V, фактора XII, фактора II и фактора Виллебрандта.

13. Способ по п.11, в котором указанное расстройство, связанное с избыточным антикоагуляционным лечением, возникает в результате введения гепарина, низкомолекулярного гепарина, пентасахарида, варфарина, низкомолекулярных антитромботических средств и ингибиторов FXa.

14. Способ по п.10, в котором указанный вариант является антикоагулянтом, а указанное расстройство выбрано из группы, включающей тромбоз, тромбоцитопению, инсульт и коагулопатию.

15. Способ по п.10, в котором указанные аминокислоты в положениях 16, 17 и 18 в последовательности SEQ ID NO:2 выбраны из группы, состоящей из Leu-Val-Gly, Gly-Val-Gly, Ile-Ala-Gly, Phe-Val-Gly и Ile-Gly-Gly, а аминокислота в положении 194 выбрана из группы, состоящей из Asn и Glu.

16. Способ по п.15, в котором указанный вариант вводят внутривенно по меньшей мере один раз в сутки в дозе примерно 10-500 мкг/кг.

17. Способ по п.15, в котором указанный вариант вводят внутривенно по меньшей мере один раз в сутки в дозе примерно 10-250 мкг/кг.

18. Способ по п.15, в котором указанный вариант заключен в липосомы или перемешан с фосфолипидами или мицеллами.

19. Клетка-хозяин, экспрессирующая вариант зимогена/протеазы по п.3.

20. Вариант зимогена/протеазы по п.3, проявляющий пониженное связывающее сродство с активным сайтом, который может быть восстановлен при связывании с соответствующим кофактором.

21. Вариант по п.20, в котором указанный кофактор является фактором Va.