RS59904B1

RS59904B1 - Novi derivati hidroksiestara, postupak za njihovo dobijanje i farmaceutske kompozicije koje ih sadrže

Info

Publication number: RS59904B1
Application number: RS20200136A
Authority: RS
Inventors: Zoltán Szlávik; András Kotschy; Maïa Chanrion; Didier Demarles; Olivier Geneste; James Edward Paul Davidson; James Brooke Murray; Szabolcs Sipos; Attila Paczal; Balázs Bálint
Original assignee: Servier Lab; Vernalis R&D Ltd
Priority date: 2015-06-23
Filing date: 2016-06-22
Publication date: 2020-03-31
Also published as: PH12017502246B1; CA2990088A1; ES2759480T3; RU2018102365A; BR112017027414A2; MX372716B; CR20170564A; CN107709333A; KR20180019223A; EA201890125A1; PL3313851T3; DK3313851T3; HRP20200107T1; TN2017000511A1; UA122228C2; EP3313851A1; HK1254657A1; RU2018102365A3; JP6741697B2; US10711010B2

Description

Opis

Ovaj pronalazak se odnosi na nove hidroksiestarske derivate, na postupak za njihovo dobijanje i na farmaceutske kompozicije koje ih sadrže.

Jedinjenja ovog pronalaska su nova i imaju izuzetno vredna farmakološka svojstva u oblasti apoptoze i onkologije.

Apoptoza, ili programirana smrt ćelije, je fiziološki proces koji je od ključnog značaja za embrioni razvoj, kao i održavanje homeostaze tkiva.

Apoptotski-tip ćelijske smrti obuhvata morfološke promene, kao što su kondenzacija jedra, DNA fragmentacija i, takođe, biohemijski fenomen, kao š to je aktivacija kaspaza koje prouzrokuju oštećenja ključnih strukturnih komponenti ć elije, čime dovode do njenog raspadanja i smrti. Regulacija procesa apoptoze je kompleksna i obuhvata aktivaciju ili represiju nekoliko intracelularnih puteva signaliziranja (Cory S. et al., Nature Review Cancer 2002, 2, 647-656).

Deregulacija apoptoze se povezuje sa izvesnim patologijama. Pojačana apoptoza je povezana sa neurodegenerativnim bolestima, kao što je Parkinsonova bolest, Alzheimerova bolest i ishemija. Suprotno, manjak izvršavanja apoptoze ima značajnu ulogu u razvoju kancera i njihove hemorezistencije, kod autoimunih bolesti, inflamatornih bolesti i virusnih infekcija. Prema tome, izostanak apoptoze je jedna od fenotipskih karakteristika kancera (Hanahan D. et al., Cell 2000, 100, 57-70).

Anti-apoptotski proteini Bcl-2 familije se povezuju sa brojnim patologijama. Uključenost proteina Bcl-2 familije se opisuje kod brojnih vrsta kancera, kao š to su kancer kolona, kancer dojke, mikrocelularni kancer pluća, nemikrocelularni kancer pluća, kancer bešike, ovarijalni kancer, kancer prostate, hronična imfoidna leukemija, limfom, mijelom, akutna mijeloidna leukemija, pankreasni kancer, itd. Prekomerna ekspresija anti-apoptotskih proteina Bcl-2 familije je povezana sa tumorigenezom, rezistencijom na hemoterapiju i kliničkim prognozama za pacijenta koji bouje od kancera. Značajno, Mcl-1, čan anti-apoptotske Bcl-2 familije, prekomerno se ekspresuje u brojnim tipovima kancera (Beroukhim R. et al., Nature 2010, 899-905). Postoji, zbog toga, terapeutska potreba za jedinjenjima koja inhibiraju antiapoptotsku aktivnost proteina Bcl-2 familije.

Nedavno, opisani su tienopirimidinski derivati kao inhibitori kalijumskog kanala (WO 2013/072694), kao c-Met inhibitori (CN 102464667), kao induktori apoptoze (Kemnitzer et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19, 3536-40), ili kao inhibitori Mcl-1 (EP 2 886 545), korisni za lečenje kancera.

Osim što su nova, jedinjenja ovog pronalaska imaju pro-apoptotska svojstva, koja č ine mogućim njihovo korišćenje u patologijama koje se karakterišu defektom u apoptozi, kao š to je, na primer, u lečenju kancera i imunih i autoimunih bolesti. Ovaj pronalazak se, preciznije, odnosi na jedinjenja formule (I):

u kojoj:

♦ A predstavlja grupu

u kojoj je 1 povezan sa atomom kiseonika i 2 je povezan sa fenilnim prstenom,♦ R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, -NR11R11’, -Cy6, ili atom halogena,

♦ R2, R3, R4i R5predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -Oalkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6),

ili supstituenti jednog od parova (R2, R3), (R3, R4), (R4, R5), kada su postavljeni na dva susedna atoma ugljenika, formiraju zajedno sa atomima ugljenika koji ih nose aromatični ili nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, uz razumevanje da nastali prsten može biti supstituisan grupom, koja je odabrana od linearne ili razgranate (C1-C6)alkil grupe, -NR11R11’, -alkil(C0-C6)-Cy1, ili okso, ♦ R6i R7predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu ((C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -O-Cy1, -alkil(C0-C6)-Cy1, -alkenil(C2-C6)-Cy1, -alkinil(C2-C6)-Cy1, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NP9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6),

ili supstituenti para (R6, R7), kada su postavljeni na dva susedna atoma ugljenika, formiraju zajedno sa atomima ugljenika koji ih nose aromatičnin ili nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, uz razumevanje da nastali prsten može biti supstituisan grupom, koja je odabrana od linearne ili razgranate (C1-C6)alkil grupe, -NR11R11’, -alkil(C0-C6)-Cy1, ili okso,

♦ R8predstvalja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, -Cy3, -alkil(C1-C6)-Cy3, -alkenil(C2-C6)-Cy3, -alkinil(C2-C6)-Cy3, -Cy3-Cy4, -alkinil(C2-C6)-O-Cy3, -Cy3-alkil(C10-C6)-O-alkil(C0-C6)-Cy4, halogeni atom, cijano grupu, -C(O)-R12, ili -C(O)-NR12R12’,

♦ R9i R9’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, -alkil(C0-C6)-Cy1,

ili supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi aromatični ili nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može osim atoma azota imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, uz razumevanje da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom, predstavljenom atomom vodonika, ili linearnom ili razgranatom (C1-C6)alkil grupom i, uz razumevanje da jedan ili više atoma ugljenika mogućih supstituenata, mogu biti deuterizovani,

♦ R10predstavlja -Cy1, -Cy1-alkil(C0-C6)-Cy2, -Cy1-alkil(C0-C6)-O-alkil(C0-C6)-Cy2, -Cy1-alkil(C0-C6)-NR9-alkil(C0-C6)-Cy2, -Cy1-Cy2-O-alkil(C0-C6)-Cy5, -C(O)-NR9R9’, -NR9R9’, -OR9, -NR9-C(O)-R9’, -O-alkil(C1-C6)-OR9, -SO2-R9, -C(O)-OR9, ili -NH-C(O)-NH-R9,

♦ R11, R11’, R12i R12’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika ili eventualno supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,

♦ R13predstavlja atom vodonika, hidroksi grupu, ili hidroksi(C1-C6)alkil grupu, ♦ Rapredstavlja atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,

♦ Rbpredstavlja -O-C(O)-O-Rcgrupu, -O-C(O)-NRcRc’ grupu, ili -O-P(O)(ORc)2grupu,

♦ Rci Rc’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, cikloalkil grupu, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, (C1-C6)alkoksikarbonil(C1-C6)alkil grupu,

ili supstituenti para (Rc, Rc’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može osim atoma azota imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika i azota, uz razumevanje da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom, predstavljenom linearnom ili razgranatom (C1-C6)alkil grupom,

♦ Cy1, Cy2, Cy3, Cy4, Cy5i Cy6predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, cikloalkil grupu, heterocikloalkil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu,

♦ n je ceo broj jednak 0 ili 1,

razume se da:

- "aril" označava fenil, naftil, bifenil, indanil ili indenil grupu,

- "heteroaril" označava svaku mono- ili bi-cikličnu grupu, sastavljenu od 5 do 10 članova prstena, koja ima najmanje jedan aromatičan deo i sadrži od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota,

- "cikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena,

- "heterocikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena i, sadrži od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, koja može obuhvatiti spojene, premošćene ili spiro sisteme prstenova,

moguće je za aril, heteroaril, cikloalkil i heterocikloalkil grupe ovako definisane i alkil, alkenil, alkinil, alkoksi grupe, da budu supstituisane sa 1 do 4 grupe, odabrane od eventualno supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1<-C>6<)alkila,>eventualno supstituisane linearne ili razgranate (C2-C6)alkenil grupe, eventualno supstituisane linearne ili razgranate (C2-C6)alkinil grupe, eventualno supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkoksi, eventualno supstituisanog (C1-C6)alkil-S-, hidroksi, okso (ili N-oksida gde odgovara), nitro, cijano, -C(O)-OR’, -O-C(O)-R’, -C(O)-NR’R", -NR’R", -(C=NR’)-OR", linearnog ili razgranatog (C1-C6)polihaloalkila, trifluorometoksi, ili halogena, razume se da R’ i R" predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika ili eventualno supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu i, razume se da jedan ili više atoma ugljenika u prethodno pobrojanim mogućim supstituentima, mogu biti deuterizovani,

njihovi enantiomeri, dijastereoizomeri i atropizomeri, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.

Od farmaceutski prihvatljivih kiselina, mogu se pomenuti ali bez uplitanja ograničavanja na ove, hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, fosforasta kiselina, sirćetna kiselina, trifluorosirćetna kiselina, mlečna kiselina, piruvatna kiselina, malonska kiselina, ćilibarna kiselina, glutarna kiselina, fumarna kiselina, vinska kiselina, maleinska kiselina, limunska kiselina, askorbinska kiselina, oksalna kiselina, metansulfonska kiselina, kamforna kiselina itd.

Od farmaceutski prihvatljivih baza, mogu se pomenuti ali bez uplitanja ograničavanja na ove, natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, trietilamin, terc-butilamin itd.

Korisno, bar jedna od grupa odabranih od R2, R3, R4i R5ne predstavlja atom vodonika.

Preciznije, jedinjenja formule (I) kojima se daje prednost su jedinjenja u kojima je n ceo broj jednak 1.

U drugom ostvarenju pronalaska, korisne mogućnosti se vezuju za jedinjenja formule (I-a):

u kojoj su R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, Ra, Rb, R13i A, kao što su definisani za formulu (I).

U poželjnim jedinjenjima pronalaska, R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili halogeni atom. Poželjnije, R1predstavlja metil grupu, etil grupu, atom broma ili atom hlora.

Atropizomeri su stereoizomeri se javljaju zbog ometane rotacije oko jednostruke veze, gde energetske razlike, koje su posledica sternog naprezanja ili drugih doprinosa, stavraju barijeru rotaciji koja je dovoljno velika da omogući izolaciju pojedinačnih konformera. Za jedinjenja prema pronalasku, atropizomeri su sledeći:

Poželjni atropizomer je (5Sa).

Poželjno, R13predstavlja atom vodonika.

Korisno, R2predstavlja atom halogena, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu. Još poželjnije, R2predstavlja metoksi grupu, hidroksi grupu, atom fluora, atom broma ili atom hlora. Čak još bolje, R2predstavlja atom hlora.

R3korisno predstavlja atom vodonika, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu ili -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’. Korisno, R3predstavlja -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’.

U jednom poželjnom ostvarenju pronalaska,

predstavlja

gde su R1, R9i R9’ kako su definisani za formulu (I).

U poželjnim jedinjenjima pronalaska,

predstavlja

gde su R9i R9’ kako su definisani za formulu (I).

R4i R5poželjno predstavljaju atom vodonika.

U korisnom ostvarenju, supstituenti para (R1, R5) su identični i supstituenti para (R2, R4) su identični. In the preferred compounds of the invention, supstituenti para (Ri, R5) su identični i predstavljaju (C1-C6)alkil grupu, poželjno metil grupu, dok su supstituenti para (R2, R4) identični i predstavljaju halogeni atom, poželjno atom hlora, ili atom vodonika.

U drugom ostvarenju pronalaska, R6predstavlja eventualno supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu ili -O-alkil(C1-C6)-R10grupu. Korisno, R6predstavlja 2,2,2-trifluoroetoksi grupu, metoksi grupu, 2-metoksietoksi grupu ili -O-alkil(C1-C6)-R10grupu.

R7poželjno predstavlja atom vodonika.

U poželjnim jedinjenjima pronalaska,

predstavlja

gde je R10kao što je definisan za formulu (I).

U drugom ostvarenju pronalaska, korisne mogućnosti su u sklopu jedinjenja formule (I-b):

gde su R1, R6, R9, R9’, Ra, Rb, R13i A, kao što su definisani za formulu (I).

U poželjnim jedinjenjima pronalaska, R8predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu. Korisno, R8predstavlja linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu. Poželjnije, R8predstavlja prop-1-in-1-il grupu, but-1-in-1-il grupu, fenil grupu ili furan-2-il grupu. U poželjnijem ostvarenju, R8predstavlja 4-(benziloksi)fenil grupu, 4-(piridin-4-ilmetoksi)fenil grupu, 4fenilbut-1-in-1-il grupu, 4-fluorofenil grupu ili 5-fluorofuran-2-il grupu. Čak još poželjnije, R8predstavlja 4-fluorofenil grupu.

U poželjnim jedinjenjima pronalaska, R9i R9’, nezavisno jedan od drugog, predstavljaju linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ili supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova prstena, koji pored atoma azota može imati 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, uz to da azot koji je u pitanju može biti supstituisan sa grupom predstavljenom atomom vodonika ili linearnom ili razgranatom (C1-C6)alkil grupom. Poželjnije, R9i R9’ predstavljaju metil grupu, ili supstituenti para (R9,R9’) formiraju zajedno 4-metil-piperazinil grupu ili 4-etil-piperazinil grupu. U poželjnijem ostvarenju, supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno 4-metil-piperazinil grupu. U drugom poželjnom ostvarenju, R9i R9’ predstavljaju metil grupu.

Korisno, R10predstavlja -Cy1, -Cy1-alkil(C0-C6)-O-alkil(C0-C6)-Cy2ili -Cy1-alkil(C0-C6)-Cy2. Preciznije, R10predstavlja -Cy1, -Cy1-O-CH2-Cy2, ili -Cy1-Cy2.

Cy1poželjno predstavlja heteroaril grupu, posebno, pirimidinil grupu, pirazolil grupu, triazolil grupu, pirazinil grupu ili piridinil grupu. Poželjnije, Cy1predstavlja pirimidin-4-il grupu, pirazol-5-il grupu, triazol-5-il grupu, pirazin-2-il grupu ili piridin-4-il grupu. U poželjnim jedinjenjima pronalaska, Cy1predstavlja pirimidin-4-il grupu.

U drugom ostvarenju pronalaska, Cy1predstavlja heteroaril grupu koja je supstituisana eventualno supstituisanom linearnom ili razgranatom (C1-C6)alkil grupom, eventualno supstituisanom linearnom ili razgranatom (C1-C6)alkoksi grupom, -NR’R" grupom, ili linearnom ili razgranatom (C1-C6)polihaloalkil grupom, uz to da R’ i R", nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika ili eventualno supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu.

Cy2poželjno predstavlja fenil grupu, piridinil grupu, pirazolil grupu, morfolinil grupu, furanil grupu ili ciklopropil grupu. Poželjnije, Cy2predstavlja fenil grupu, piridin-2-il grupu, piridin-3-il grupu, piridin-4-il grupu, pirazol-1-il grupu, morfolin-4-il grupu, furan-2-il grupu ili ciklopropil grupu. U poželjnim jedinjenjima pronalaska, Cy2predstavlja fenil grupu.

Druga jedinjenja pronalaska kojima se daje prednost su ona u kojima R10predstavlja -Cy1-Cy2pri čemu Cy1predstavlja pirimidinil grupu i Cy2predstavlja fenil grupu, piridinil grupu, pirazolil grupu, morfolinil grupu, furanil grupu, ili ciklopropil grupu. Čak poželjnije, R10predstavlja

gde R14i R15, nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, eventualno supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, eventualno supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, ili halogeni atom. Poželjno R14i R15grupe su sledeće: vodonik; metil; etil; metoksi; etoksi; izopropoksi; metoksietoksi; fluoro; hidroksi; trifluorometil. Korisno, R15predstavlja atom vodonika i R14je u ortho položaju na fenil grupi.

Preciznije, jedinjenja formule (I) kojima se daje prednost su jedinjenja u kojima Rapredstavlja atom vodonika ili metil grupu.

Korisno, Rbpredstavlja -O-C(O)-O-(C1-C8)alkil grupu; -O-C(O)-O-cikloalkil grupu; -OC(O)-NRcRc’ grupu, gde Rci Rc’, nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, (C1-C6)alkoksikarbonil(C1-C6)alkil grupu, ili supstituenti para (Rc, Rc’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova prstena, koji pored atoma azota može imati 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika i azota; ili -O-P(O)(OH)2grupu.

Poželjno, Rapredstavlja metil grupu i Rbpredstavlja grupu, odabranu od: -O-C(O)-O-CH3; -O-C(O)-OCH2CH3; -O-C(O)-O-CH(CH3)2; -O-C(O)-O-C(CH3)3; -O-C(O)-O-ciklopentila; -O-C(O)-O-C8H17; -O-C(O)-N(CH3)2; -OC(O)-N(CH2CH3)2; -O-C(O)-N-morfolina; -O-C(O)-NH-(CH2)2-OCH3; -O-C(O)-N[(CH2)2-OCH3]2; ili -OC(O)-N(CH3)(CH2-C(O)-OCH3). Poželjnije, Rapredstavlja metil grupu i Rbpredstavlja grupu, odabranu od -O-C(O)-O-CH2CH3ili -O-C(O)-N(CH3)2.

Od poželjnih jedinjenja pronalaska mogu se navesti:

- 1-[(metoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-{[(propan-2-iloksi)karbonil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-[(terc-butoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-{[(ciklopentiloksi)karbonil]oksi}etil(2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-{[(oktiloksi)karbonil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-[(dimetilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-{[(2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)propanoil]oksi}etil morpholine-4-karboksilat;

- 1-{[(2-metoksietil)karbamoil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-{[bis(2-metoksietil)karbamoil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-{[(2-metoksi-2-oksoetil)(metil)karbamoil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- (fosfonooksi)metil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il) etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[5-{3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-[(dimetilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il) etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat;

- 1-[(dimetilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[5-(3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat.

Pronalazak se, isto tako, odnosi na postupak za izradu jedinjenja formule (I), pri čemu je postupak naznačet time što se kao polazni materijal koristi jedinjenje formule (II):

u kome je A kao što je definisano za formulu (I), gde je 1 vezano sa atomom hlora i 2 je vezano sa atomom broma,

pri čemu se jedinjenje formule (II) podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (III):

gde su R6, R7, R13i n, kao što su definisani za formulu (I), a Alk predstavlja eventualno supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,

kako se dobija jedinjenje formule (IV):

gde su R6, R7, R13, A i n, kao što su definisani za formulu (I), a Alk je, kao što je definisan prethodno,

jedinjenje formule (IV) se dalje podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (V):

gde su R1, R2, R3, R4i R5kao što su definisani za formulu (I), dok RB1i RB2predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu, ili RB1i RB2formiraju sa kiseonikom koji ih nosi eventualno metilovani prsten,

kako se dobija jedinjenje formule (VI):

gde su R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R13, A i n, kao što su definisani za formulu (I) i Alk je, kao što je prethodno definisan,

Alk-O-C(O)- estarska funkcija koja se u jedinjenju formule (VI) hidrolizuje kako se dobija karboksilna kiselina (VII):

gde su R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R13, A i n, kao što su definisani za formulu (I),

koja se podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (VIII):

gde su Rai Rbkao što su definisani za formulu (I),

kako se dobija jedinjenje formule (I), koje se može prečistiti prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, koje se prevodi, ukoliko se želi, u adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom i, koje se eventualno razdvaja u svoje izomere prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja,

uz razumevanje da u svakom momentu koji se smatra odgovarajućim tokom gore opisanog postupka, neke grupe (hidroksi, amino...) u polaznim reagensima ili u sintetskim intermedijerima mogu biti zaštićene, zatim im se zaštita ukloniti i funkcionalizovati, već prema zahtevima tokom sinteze.

Jedinjenja formula (II), (III), (V) i (VIII) se ili kupuju ili ih stručna lica dobijaju primenom konvencionalnih hemijskih reakcija, opisanih u literaturi.

Pronalazak se odnosi na jedinjenje formule (VIA), poseban slučaj jedinjenja formule (VI):

gde:

♦ R2’, R3’, R4’ i R5’ nezavisno jedan od drugog predstavljaju halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -Oalkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6),

♦ T predstavlja (C1-C6)alkil grupu, (C1-C6)karboniloksi(C1-C6)alkil grupu ili di(C1-C6)alkilaminokarbonil(C1-C6)alkil grupu

♦ R1, R6, R7, R13, A i n su, kao što su definisani za formulu (I),

njegovi enantiomeri, dijastereoizomeri i atropizomeri i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom,

kao sintetski intermedijer, ali isto tako i kao jedinjenje za primenu kao pro-apoptotski agens.

Pronalazak se odnosi na jedinjenje formule (VIIA), poseban slučaj jedinjenja formule (VII):

gde:

♦ R1, R6, R7, R13, A i n su, kao što su definisani za formulu (I),

Korisno, za jedinjenja formula (VIA) i (VIIA), supstituenti para (Ri, R5’) su identični i supstituenti para (R2’, R4’) su identični.

Poželjno jedinjenje formule (VIIA) je (2R)-2-{[5-{3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanska kiselina.

Pronalazak se odnosi na jedinjenje formule (VIB), poseban slučaj jedinjenja formule

gde:

♦ R5’ predstavlja halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6),

♦ T predstavlja (C1-C6)alkil grupu, (C1-C6)karboniloksi(C1-C6)alkil grupu ili di(C1-C6)alkilaminokarbonil(C1-C6)alkil grupu,

♦ R1, R3, R6, R7, R13, A i n su, kao što su definisani za formulu (I),

i gde su supstituenti para (R1, R5’) identični,

Pronalazak se odnosi na jedinjenje formule (VIIB), poseban slučaj jedinjenja formule (VII):

gde:

♦ R1, R3, R6, R7, R13, A i n su, kao što su definisani za formulu (I),

i gde su supstituenti para (R1, R5’) identični,

Poželjno jedinjenje formule (VIIB) je (2R)-2-{[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanska kiselina.

Farmakološko ispitivanje jedinjenja pronalaska je pokazalo da ona imaju proapoptotska svojstva. Mogućnost reaktivacije procesa apoptoze u ćelijama kancera je od najvećeg terapeutskog značaja u tretmanu kancera i imunih i autoimunih bolesti.

Preciznije, jedinjenja prema pronalasku će biti korisna u tretmanu kancera koji su hemo- ili radio-rezistentni.

Od razmatranih tretmana kancera se mogu navesti, bez namere bilo kakvog ograničavanja, tretman kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera kolona, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.

Ovaj pronalazak se, takođe, odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže najmanje jedno od jedinjenja formule (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) zajedno sa jednom ili više farmaceutski prihvatljivih podloga.

Među farmaceutskim kompozicijama prema pronalasku, mogu se izdvojiti posebno one koje su pogodne za oralno, parenteralno, nazalno, per- ili trans-kutano, rektalno, perlingvalno, okularno ili respiratorno primenjivanje, naročito tablete ili dražeje, sublingvalne tablete, kesice, paketi, kapsule, glosete, lozenge, supozitorije, kremovi, masti, gelovi za kožu i ampule za oralnu ili injektabilnu primenu.

Doza varira prema polu, starosti i težini pacijenta, načinu primene, prirodi terapijske indikacije, ili ma kom od pridruženih tretmana i, kreće se od 0.01 mg do 1 g na 24 sata u jednom ili više primenjivanja.

Sem toga, ovaj pronalazak se, isto tako, odnosi na kombinaciju jedinjenjaformula (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa antikancerskim sredstvom, odabranim od genotoksičnih agenasa, mitotičkih otrova, antimetabolita, inhibitora proteazoma, inhibitora kinaze i antitela i, takođe, na farmaceutske kompozicije koje sadrže tu vrstu kombinacije i njihovo korišćenje u proizvodnji lekova za primenu u tretmanu kancera.

Korisno, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formula (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa EGFR inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U drugom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formula (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa mTOR/PI3K inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formula (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa MEK inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

Poželjno, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formula (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa HER2 inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

Korisno, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formula (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa RAF inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U drugom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formula (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa EGFR/HER2 inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formula (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa taksanom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U drugom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formula (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa inhibitorom proteazoma, imunomodulatorom ili alkilirajućim agensom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ove vrste kombinacija.

Kombinacija jedinjenja formulae (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) sa antikancerskim agensom se može primenjivati istovremeno ili uzastopno. Način primenjivanja, poželjno je oralni put i, odgovarajuće farmaceutske kompozicije mogu omogućiti trenutno ili odloženo oslobađanje aktivnih sastojaka. Jedinjenja kombinacije, sem toga, mogu da se primene u vidu dve zasebne farmaceutske kompozicije, od kojih svaka sadrži jedan aktivan sastojak, ili u vidu jedne farmaceutske kompozicije, u kojoj su aktivni sastojci pomešani.

Jedinjenja pronalaska, takođe, mogu da se za tretman kancera koriste u kombinaciji sa radioterapijom.

Konačno, jedinjenja pronalaska mogu biti vezana na monoklonska antitela ili njihove fragmente ili, vezana na proteinske nosače, koji se mogu ili ne moraju odnositi na monoklonska antitela.

Fragmenti antitela se moraju shvatiti kao fragmenti tipa Fv, scFv, Fab, F(ab’)2, F(ab’), scFv-Fc ili diatela, koji generalno imaju istu spesifičnost vezivanja kao antitelo od kog potiču. Prema ovom pronalasku, fragmenti antitela pronalaska se mogu dobiti polazeći od antitela, postupcima kao što su digestija enzimima, kao što su pepsin ili papain, i/ili cepanjem disulfidnih mostova hemijskom redukcijom. Na drugi način, fragmenti antitela obuhvaćeni ovim pronalaskom, mogu se dobiti tehnikama genetskog rekombinovanja, isto tako dobro poznatim stručnjacima iz ove oblasti ili još, peptidnom sintezom pomoću, na primer, automatskih sintetizera peptida, kao š to su oni koji se mogu nabaviti od kompanije Applied Biosystems, itd.

Proteinski nosači koji se mogu ili ne moraju odnositi na monoklonska antitela, se podrazumeva da označavaju protein koji sadrži ili ne sadrži imunoglobulinski domen i to daje kapacitet vezivanja sličan monoklonskom antitelu. Stručno lice u ovoj oblasti zna kako da odabere proteinski nosač. Preciznije, u ovoj oblasti je poznato, da bi se odabrao, takav nosač mora ispoljavati nekoliko karakteristika, kao što su (Skerra, J. Mol. Recogn. 2000, 13, 167-187): filogenetski dobra očuvanost, robustna konstrukcija sa dobro poznatom tro-dimenzionalnom organizacijom molekula (kao, na primer, kristalografija ili NMR), mala veličina, ne postojanje ili samo nizak stepen posttranslacionih modifikacija, jednostavnost proizvodnje, ekspresije i prečišćavanja. Takav proteinski nosač može biti, ali bez ograničavanja, struktura odabrana iz grupe koja se sastoji od fibronektina i, pre svega desetog fibronektinskog tipa III domena (FNfn10), lipokalina, antikalina (Skerra, J. Biotechnol. 2001, 74, 257-75), derivata protein Z iz domena B stafilokoknog proteina A, tioredoksina A ili svakog proteina sa ponovljenim domenom, kao što je "ankirinski ponovak" (Kohl et al. PNAS 2003, 100, 1700-1705), "armadillo ponovak", "ponovak bogat leucinom" ili "tetratrikopeptidni ponovak". Takođe se mogu pomenuti derivati nosača iz toksina (kao š to su, na primer, š korpijin, iz insekata, biljni ili toksini iz mekušaca) ili proteinski inhibitori neuronske azot oksid sintaze (PIN).

Sledeće Izrade i Primeri ilustruju pronalazak ali ga ne ograničavaju ni na kakav način.

Opšte procedure

Svi reagensi, koji su nabavljeni iz komercijalnih izvora, korišćeni su bez prethodnog prečišćavanja. Anhidrovani rastvarači su dobijeni iz komercijalnih izvora i, korišćeni su bez prethodnog sušenja.

Flash hromatografija je izvođena na instrumentu: ISCO CombiFlash Rf 200i sa prethodno napakovanim kertridžima silika gela (RediSep® Rf<Gold High>Performance).

Tankoslojna hromatografija je izvedena na pločama dimenzija 5 x 10 cm, obloženim sa silika gelom Merck Type 60 F254.

Mikrotalasno zagrevanje je izvođeno u aparatu: Anton Parr MonoWave ili CEM Discover® instrumentu.

Prečišćavanja preparativnom HPLC su izvođena na Armen Spot Liquid hromatografskom sistemu sa Gemini-NX® 10 µM C18, 250 mm x 50 mm i.d. kolonom, puštanjem pri brzini protoka od 118 mL min<-1>sa detekcijom UV diodnim nizom (210 400 nm), primenom 25 mM vodenog NH4HCO3rastvora i MeCN kao eluenata, sem ukoliko nije drugačije precizirano.

Analitička LC-MS: jedinjenja ovog pronalaska su opisana korišćenjem tečne hromatografije visokih performansi-masene spektroskopije (HPLC-MS) na: Agilent HP1200 sa Agilent 6140 quadrupole LC/MS, postupkom u pozitivnom ili negativnom jon elektrosprej jonizacionom modu. Pretraženi opseg molekulskih težina je 100 do 1350. Paralelna UV detekcija je izvedena na 210 nm i 254 nm. Uzorci su unošeni kao 1 mM rastvor u ACN, ili u smeši THF/H2O (1:1) pomoću 5 µL-ske omčaste injekcije. LCMS analize su izvedene na dva instrumenta, jednom koji je funkcionisao sa baznim i drugom, koji je funkcionisao sa kiselim eluentima. Bazna LCMS: Gemini-NX, 3 µm, C18, 50 mm x 3.00 mm i.d. kolona na 23°C, pri brzini protoka od 1 mL min<-1>korišćenjem 5 mM amonijum bikarbonata (rastvarač A) i acetonitrila (rastvarač B) uz gradijent koji je polazio od 100 % rastvarača A i završavao sa 100 % rastvarača B tokom raznih/određenih perioda vremena.

Kisela LCMS: ZORBAX Eclipse XDB-C18, 1.8 µm, 50 mm x 4.6 mm i.d. kolona na 40°C, pri brzini protoka od 1 mL.min<-1>korišćenjem 0.02 % v/v vodene mravlje kiseline (rastvarač A) i 0.02 % v/v mravlje kiseline u acetonitrilu (rastvarač B) uz gradijent koji je polazio od 100 % rastvarača A i završavao sa 100 % rastvarača B tokom raznih/određenih perioda vremena.

<1>H-NMR merenja su izvođena na Bruker Avance III 500 MHz spektrometru i Bruker Avance III 400 MHz spektrometru, korišćenjem DMSO-d6ili CDCl3kao rastvarača.<1>H NMR podaci su u vidu delta vrednosti, izraženi kao deo na milion (ppm), korišćenjem rezidualnih pikova rastvarača (2.50 ppm za DMSO-d6i 7.26 ppm za CDCl3) kao internog standarda. Profili cepanja su označeni kao: s (singlet), d (dublet), t (triplet), q (qvartet), quint (qvintet), m (multiplet), br s (široki singlet), dd (dublet dubleta), td (triplet dubleta), dt (dublet tripleta), ddd (dublet dubleta dubleta).

Kombinovana gasna hromatografija i masena spektrometrija niske rezolucije su izvedene na instrumentima: Agilent 6850 gasni hromatograf i Agilent 5975C maseni spektrometar, korišćenjem 15 m x 0.25 mm kolone sa 0.25 µm HP-5MS sloja i helijumom kao gasom nosačem. Jonski izvor: EI<+>, 70 eV, 230°C, kvadripol: 150°C, interfejs: 300°C.

HRMS su određene na instrumentu: Shimadzu IT-TOF, temperatura jonskog izvora 200°C, ESI /-, voltaža jonizacije: (+/-)4.5 kV. Masena rezolucija min.10000.

Analiza elemenata je izvedena na analizatoru: Thermo Flash EA 1112 Elemental Analyzer.

Lista skraćenica

Skraćenica Naziv

Ac acetil

AIBN 2-[(1-cijano-1-metil-etil)azo]-2-metil-propannitril

AtaPhos bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin) dihloropaladijum(II) DCM dihlorometan

DIPA diizopropilamin

DMF dimetilformamid

DMSO dimetilsulfoksid

eq. ekvivalent

Et etil

HMDS heksametildisilazan

<i>Pr izopropil

Me metil

MeCN, CAN acetonitril

NBS N-bromosukcinimid

NCS N-hlorosukcinimid

<n>Bu n-butil

Ph fenil

r.t. sobna temperatura

<t>Bu terc-butil

tBuXPhos 2-di(terc-butilfosfino)-2’,4’,6’-triizopropilbifenil

TFA trifluorosirćetna kiselina

THF tetrahidrofuran

Opšta procedura I:

Korak A

1 eq. odgovarajućeg alkohola i 1.2 eq. piridina se rastvore u DCM (1.2 mL/mmol). Polako se doda 1.05 eq. 1-hloroetil hloroformijata na -78°C pod azotom i, reakciona smeša se meša na -78°C tokom 3 sata. Hladna smeša se filtrira i filtrat ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je korišćen bez prethodnog prečišćavanja.

Korak B

1 eq. Preparata 12, Preparata 13 ili Preparat 14 se rastvori u DMF-u (20 ml/mmol) pod azotom. Doda se 6.7 eq. Cs2CO3i 8 eq.1-hloroetil karbonatnog reagensa. Reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok ne prestane konverzija. Smeša se razblaži sa slanim rastvorom i ekstrahuje sa DCM, osuši sa Na2SO4, filtrira i ukoncentrisane pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne reverzno fazne hromatografije, korišćenjem 5 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata, kako se dobija odgovarajući karbonatni derivat u vidu smeše stereoizomera.

Opšta procedura II:

Korak A

1.05 eq. aminskog reagensa i 1.15 eq. piridina se rastvori u 1.3 mL/mmol DCM, zatim se doda 1 eq. 1-hloroetil hloroformijata na -78°C pod azotom. Reakciona smeša se meša na -78°C sve dok se zapaža konverzija. Hladna smeša se filtrira; filtrat ukoncentriše pod sniženim pritiskom (30 mbar), uz korišćenje kupatila na 30°C. Sirovi proizvod se koristi u roku od 3 sata, bez prethodnog prečišćavanja.

Korak B

1 eq. Preparata 12, Preparata 13 ili Preparat 14 se rastvori u 20 ml/mmol DMF-a pod azotom. Doda se 10 eq. Cs2CO3, zatim 8 eq karbamatnog reagensa (0.8M rastvor sirovog proizvoda iz Koraka A u DMF-u). Reakciona smeša se meša na r.t. sve dok ne prestane konverzija. Smeša se razblaži sa slanim rastvorom i ekstrahuje se nekoliko puta sa etilacetatom. Spojeni organski slojevi se osuše preko MgSO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom i, prečiste putem preparativne reverzno fazne hromatografije, korišćenjem 5 mM vodenog NH4HCO3rastvora i acetonitrila kao eluenata, kako se dobija karbamatni derivat.

Preparat 1: 5-bromo-4-hloro-6-jodo-tieno [2,3-d]pirimidin

Korak A: 6-jodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on

2 L-ski balon zaobljenog dna, opremljen mehaničkom mešalicom, termometrom i refluksnim kondenzatorom se napuni rastvorom od 433 mL sirćetne kiseline, 13 mL sumporne kiseline i 87 mL vode. Doda se 69.3 g 3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (0.46 mol), 51.9 g perjodne kiseline (0.23 mol) i 104 g joda (0.41 mol) u rastvor koji se meša i greje na 60°C u toku 1 sata. Dobijena suspenzija se ohladi do r.t., odfiltrira, ispere smešom sirćetne kiseline i vode (5:1) i zatim, dietil etrom. Nastala kristalna čvrsta materija bež boje se osuši na vazduhu.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 12.57 (br s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.65 (s, 1H)

Korak B: 4-hloro-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin

1L-ski sud zaobljenog dna, opremljen mehaničkom mešalicom, termometrom, refluksnim kondenzatorom i CaCl2-epruvetom, napuni se sa 113 mL fosfor oksihlorida i 35 mL N,N-dimetilanilina (0.29 mol). U smešu se doda 75.54 g 6-jodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (0.27 mol), deo po deo tokom 5 minuta. Reakciona smeša se meša na 105°C tokom 1 sata. Dobijena suspenzija se ohladi na 10°C, filtrira i ispere sa heksanom. Sirovi proizvod se doda u ledenu vodu i meša se 10 minuta, odfiltrira se, ispere sa hladnom vodom, dietil etrom i osuši na vazduhu. Dobija se kristalna čvrsta materija žućkaste boje.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.89 (s, 1H), 7.98 (s, 1H)

Korak C: Preparat 1

2 L-ski balon zaobljenog dna, opremljen mehaničkom mešalicom, termometrom i dovodom gasa se napuni sa 600 mL acetonitrila. Dodaju se 84.9 g 4-hloro-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina (0.29 mol), 50.9 g NBS (0.29 mol) i 8.5 mL kompleksa tetrafluoroborne kiseline i dietil etra. Reakciona smeša se meša na r.t. u toku 16 sati. U smešu se doda još 22.9 g (0.12 mol) NBS, iz tri dela. Posle hlađenja suspenzije na 0°C i mešanja tokom još jednog sata, odfiltrira se talog, ispere sa acetonitrilom i osuši na vazduhu. Preparat 1 se dobija u vidu kristalne čvrste materije žućkaste boje.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 8.88 (s, 1H)

Preparat 2: 5-bromo-4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin

75.08 g Preparata 1 (200 mmol), 53.63 g 2-(4-fluorofenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (240 mmol), 130 g cezijum karbonata (400 mmol), 2.245 g Pd(OAc)2(10 mmol) i 8.50 g<t>BuX-Phos (20 mmol) se stave u 2 L-ski sud. Doda se 600 mL THF-a i 200 mL vode i zatim, meša se preko noći na 70 °C u atmosferi argona. THF se upari i zatim, proizvod se sakupi filtracijom. Sirovi proizvod se ozvuči u 250 mL acetonitrila i ponovo filtrira. Zatim Preparat 2 kristališe iz smeše EtOH / THF (2:1).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.02 (s, 1H), 7.80-7.77 (m, 2H), 7.47-7.43 (m, 2H)

Preparat 3: etil (2R)-2-acetoksi-3-(2-hidroksifenil)propanoat

Korak A: [2-(bromometil)fenil]acetat

60.07 g 2-metilfenil acetata (400 mmol) i 106.8 g NBS (600 mmol) se stave u 1 L-ski sud. Doda se 500 mL cikloheksana i zatim, u toku 30 minuta uz intenzivno mešanje se doda 3.284 g AIBN (20 mmol). Smeša se meša na 80°C sve dok se zapaža konverzija, onda se ohladi na r.t. Talog se odfiltrira i ispere sa cikloheksanom. Matična tečnost se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i, sirovi proizvod koristi u Koraku B bez prethodnog prečišćavanja.

Korak B: Preparat 3

23.10 g anhidrovanog LiCl (545 mmol) i 65.36 g anhidrovanog ZnCl2(479.6 mmol) se stave u 2 L-ski sud zatim, osuše na 160°C pri 0.1 mmHg, u toku 1 sata. Posle hlađenja na r.t. u atmosferi argona, dodaju se 26.49 g magnezijum opiljaka (1090 mmol) i 1 L suvog, prethodno ohlađenog (0°C) THF-a. Dobijena smeša se potopi u ledenom kupatilu i, meša se u toku 30 minuta.

100 g [2-(bromometil)fenil]acetata –sirovog proizvoda iz Koraka A- (~ 436 mmol) se rastvori u 120 mL suvog THF-a i, tokom 15 minuta se doda u prethodno ohlađene neorganske sastojke. Posle dodavanja reagenasa, nastala smeša se meša 45 minuta uz održavanje temperature između 0-5°C. U smešu se dodaje 64.82 mL etil 2-oksoacetata (654 mmol, 50 % u toluenu) tokom 5 minuta i, dobijena smeša se meša još 15 minuta.

Zaostali neorganski sastojci se iz smeše uklone filtriranjem i, u filtrat se onda doda 500 mL MeOH. Ova smeša se meša dok se ne završi intramolekulska migracija acetil grupe sa fenolnog kiseonika na alkilni kiseonik. U smešu se doda 30 mL sirćetne kiseline i zatim se isparljive materije upare pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda 350 mL vode i, ekstrahuje se sa EtOAc. Spojeni organski slojevi se isperu sa zasićenimNaHCO3i sa slanim rastvorom i, osuše se preko MgSO4, filtriraju i upare pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda 100 mL heksana i meša se 30 minuta na 0°C. Formirani beli kristali se sakupe filtriranjem i isperu se sa heksanom, kako se dobijaju enantiomeri, koji se razdvajaju pomoću hiralne hromatografije.

Kolona: OD; Eluenti: heptan / EtOH; (S)-enantiomer se eluira ranije i sakuplja se sa 99.8 % ee, dok se (R)-enantiomer eluira kasnije i sakuplja se kao Preparat 3 sa 99.9 % ee.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.53 (s, 1H), 7.06 (t, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.79 (d, 1H), 6.71 (t, 1H), 5.10 (dd, 1H), 4.05 (q, 2H), 3.06 (dd, 1H), 2.94 (dd, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.09 (t, 3H)

Preparat 4: etil (2R)-2-hidroksi-3-(2-tetrahidropiran-2-iloksifenil)propanoat

Korak A: etil (2R)-2-acetoksi-3-(2-tetrahidropiran-2-iloksifenil)propanoat

103.3 g Preparata 3 (409 mmol) se rastvori u 280 mL 3,4-dihidro-2H-pirana. Doda se 300 mg para-toluensulfonske kiseline monohidrata i, smeša se meša sve dok ne prestane konverzija. Onda se izvrši razblaživanje sa 1 L etil acetata, ispiranje sa 200 mL zasićenog NaHCO3rastvora zatim, ispiranje sa 200 mL vode. Spojeni organski slojevi se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu. Potom se izvrši prečišćavanje putem flash hromatografije, korišćenjem heptan / EtOAc.

Korak B: Preparat 4

137.57 g etil (2R)-2-acetoksi-3-(2-tetrahidropiran-2-iloksifenil)propanoata (409 mmol) se rastvori u 600 mL etanola, onda se doda 20 mL rastvora natrijum etoksida (1M u etanolu) i meša se, sve dok ne prestane konverzija. Smeša se ukoncentriše do polovine svoje zapremine, onda se doda 300 mL vode i 300 mL slanog rastvora i, izvede se ekstrakcija sa etil acetatom. Spojene organske faze se osuše preko natrijum sulfata, filtriraju se i ukoncentrišu. Enantio-čistoća polaznog materijala je očuvana.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6, 1:1 smeša dijastereomera) δ 7.16 (t, 1H), 7.13 (d, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.87 (t, 1H), 5.51-5.47 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.04-4.02 (q, 2H), 3.73-3.56 (m, 2H), 3.06-3.04-2.74-2.71 (dd, 2H), 1.95-1.64 (m, 2H), 1.79 (m, 2H), 1.65-1.50 (m, 2H), 1.12-1.10 (t, 3H)

Preparat 5: etil (2R)-2-[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi-3-(2-tetra-hidropiran-2-iloksifenil)propanoat

48.45 g Preparata 2 (141 mmol), 45.63 g Preparata 4 (155 mmol) i 137.8 g Cs2CO3(423 mmol) se stavi u 2 L-ski sud. Doda se 1.4 L terc-butanola i, smeša se meša na 70°C pod N2sve dok se zapaža konverzija. Upari se otprilike 1 L rastvarača pod sniženim pritiskom zatim, izvede se razblaživanje sa vodom, pH se podesi na 8 sa 2M HCl i, izvede se ekstrakcija sa DCM. Spojeni organski slojevi se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija Preparat 5 u vidu smeše dijastereoizomera.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 8.67-8.66 (s, 1H), 7.75 (m, 2H), 7.43 (dm, 1H), 7.41 (m, 2H), 7.19 (m, 1H), 7.08-7.06 (dm, 1H), 6.89 (m, 1H), 5.87-5.70 (dd, 1H), 5.60-5.55 (m, 1H), 4.23-4.08 (m, 2H), 3.80-3.48 (m, 2H), 3.52-3.49 (dd, 1H), 3.19-3.17 (dd, 1H), 2.09-1.49 (m, 6H), 1.15-1.10 (t, 3H)

HRMS izračunato za C28H26BrFN2O5S: 600.0730, nađeno: 601.0809/601.0798 (M+H)

Preparat 6: 2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenol

Korak A: (4-bromo-2-hloro-fenoksi)-trimetil-silan

20.8 g 4-bromo-2-hloro-fenola (100 mmol) se rastvori u 150 mL suvog THF-a zatim, doda se 24.2 g HMDS (150 mmol). Reakciona smeša se meša na 85°C u atmosferi argona u toku 1.5 sata, onda se ukoncentriše pod sniženim pritiskom, kako se dobija proizvod, koji se koristi bez prethodnog prečišćavanja.

<1>H NMR (200 MHz, CDCl3): 7.49 (d, 1H), 7.23 (dd, 1H), 6.75 (d, 1H), 0.26 (s, 9H)

Korak B: 4-bromo-2-hloro-3-metil-fenol

48 mL rastvora<n>BuLi u heksanima (2.5 M, 120 mmol) se, kap po kap, doda u rastvor od 12.1 g suvog DIPA (120 mmol) u 250 mL suvog THF-a na -78°C u atmosferi argona. Smeša se meša 30 minuta na istoj temperaturi zatim, u vidu kapi se doda 28.0 g (4-bromo-2-hloro-fenoksi)-trimetil-silana (100 mmol). Nakon 2.5 sata, u vidu kapi se doda 21.3 g MeJ (150 mmol) i zatim se uklanja kupatilo za hlađenje i, smeša se meša preko noći. Reakcija se ugasi sa 100 mL rastvora NH4OH i 200 mL NH4Cl rastvora i, izvrši se ekstrakcija sa EtOAc, osuši se preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Dobijena tamna masa se podvrgne refluksu sa č istim heksanom nekoliko puta (alikvoti 150-150 mL) i, izvede se dekantovanje koje za sobom ostavlja crni katran. Spojene organske faze se ukoncentrišu pod sniženim pritiskom dajući 19.0 g sirovog proizvoda, koji se koristi bez prethodnog prečišćavanja.

<1>H NMR (200 MHz, CDCl3): 7.32 (d, 1H), 6.76 (d, 1H), 5.62 (s, 1H), 2.49 (s, 3H)

Korak C: (4-bromo-2-hloro-3-metil-fenoksi)-trimetil-silan

20.8 g HMDS (129 mmol) se doda rastvoru od 19.0 g 4-bromo-2-hloro-3-metilfenola (86.0 mmol) u 150 mL suvog THF-a. Smeša se meša na 85°C pod argonskim balonom u toku 1.5 sata i zatim, ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Dobijeni proizvod se dalje koristi bez prethodnog prečišćavanja.

<1>H NMR (200 MHz, CDCl3): 7.30 (d, 1H), 6.63 (d, 1H), 2.50 (s, 3H), 0.28 (s, 9H)

Korak D: Preparat 6

Rastvor od 25.2 g (4-bromo-2-hloro-3-metil-fenoksi)-trimetil-silana (86.0 mmol) u 250 mL suvog THF-a se ohladi na -78°C pod argonom i, u vidu kapi se onda doda 38 mL<n>BuLi u heksanima (2.5M, 94.6 mmol). Posle 5 minuta, doda se 19.2 g 2izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (103 mmol) kap po kap. Kupatilo za hlađenje se ukloni i smeša se ostavlja da se postepeno zagreje do r.t. Zatim se smeša doda u 200 mL rastvora NH4Cl i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni organski slojevi se ukoncentrišu pod sniženim pritiskom i propuste kroz sloj silika gela, korišćenjem heksana i EtOAc kao eluenata. Sirovi proizvod je rekristalisan iz smeše EtOAc i heksana kako se dobija Preparat 6.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 10.40 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 2.49 (s, 3H), 1.27 (s, 12H)

Preparat 7: etil (2R)-2-[(5Sa)-5-(3-hloro-4-hidroksi-2-metil-fenil)-6-(4-fluorofenil) tieno [2,3-d] pirimidin-4-il] oksi-3-(2-tetrahidropiran-2-iloksifenil) propanoat

186.6 g Preparata 5 (310.3 mmol) i 99.99 g Preparata 6 (372.3 mmol) se rastvori u 1.2 L THF-a zatim, doda se 202.2 g Cs2CO3(620.6 mmol) rastvorenih u 300 mL vode. Onda se doda 11.0 g AtaPhos (15.51 mmol) i, smeša se pod azotom meša na temperaturi refluksa sve dok se zapaža konverzija. Većina isparljivih materija se upari pod sniženim pritiskom zatim, izvede se razblaživanje sa DCM i sa slanim rastvorom. Nakon mućkanja, pH vodene faze se podesi na 8 sa 2M HCl. Posle razdvajanja faza, vodena faza se ekstrahuje sa DCM. Organski slojevi se spoje i osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Dijastereoizomeri se razdvajaju putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata. Dijastereoizomerski par, koji se kasnije eluira je sakupljen kao Preparat 7.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6, 1:1 smeša dijastereomera): 10.27 (br s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.30 (m, 2H), 7.22 (m, 2H), 7.16-7.14 (d, 1H), 7.12 (m ,1H), 7.00 (d, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.74-6.73 (t, 1H), 6.34-6.36 (d, 1H), 5.55-5.52 (m, 1H), 5.54-5.41 (dd, 1H), 4.06 (q, 2H), 3.68-3.54 (m, 2H), 3.10-3.07 (dd, 1H), 2.44 (dd, 1H), 1.98-1.90 (br s, 1H), 1.85-1.83 (s, 3H), 1.79 (br s, 2H), 1.64 (br s, 1H), 1.59 (br s, 1H), 1.54 (br s, 1H), 1.09-1.08 (t, 3H) HRMS: (M+H) = 663.1728 i 663.1717

Preparat 8: etil (2R)-2-[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi-3-(2-tetrahidropiran-2-iloksifenil) propanoat

132.3 g Preparata 7 (199.5 mmol), 43.17 g 2-(4-metilpiperazin-1-il) etanola (299.3 mmol) i 94.20 g PPh3(359.1 mmol) se rastvore u 1 L suvog toluena zatim, doda se 78.09 g di-terc-butil azodikarboksilata (339.2 mmol). Smeša se meša na 50°C pod N2sve dok se zapaža konverzija. Upari se 980 mL toluena zatim, doda se 500 mL Et2O i, smeša se meša i ozvuči. Istaloženi beli kristali se filtriraju, isperu sa Et2O kako se dobija 65.9 g čistog trifenilfosfinoksida. Filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem EtOAc i MeOH kao eluenata, kako se dobija Preparat 8.

MS: (M+H)<+>= 789.2

Preparat 9: etil (2R)-2-[(5Sa)-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi-3-(2-hidroksifenil)propanoat

199.5 mmol Preparata 8 se rastvori u 1 L EtOH, onda se doda 1 L 1.25M HCl u EtOH i, smeša se meša na r.t. sve dok ne prestane konverzija. Glavnina EtOH se upari zatim, doda se Et2O i istaložena HCl so (bela čvrsta materija) se filtrira, ispere sa Et2O. HCl so se pažljivo obradi sa zasićenim NaHCO3rastvorom, ekstrahuje sa DCM, spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom kako se dobija Preparat 9.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.53 (br s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.30 (m, 2H), 7.28 (d, 1H), 7.21 (m, 2H), 7.16 (d, 1H), 6.97 (t, 1H), 6.72 (d, 1H), 6.53 (t, 1H), 6.20 (d, 1H), 5.46 (dd, 1H), 4.22 (m, 2H), 4.04 (m, 2H), 2.92 (dd, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.53 (br s, 4H), 2.44 (dd, 1H), 2.36 (br s, 4H), 2.17 (s, 3H), 1.88 (s, 3H), 1.06 (t, 3H)

HRMS izračunato za C37H38ClFN4O5S: 704.2235, nađeno: 705.2288 (M+H)

Preparat 10: (E)-4-(dimetilamino)-1,1-dimetoksi-but-3-en-2-on

502.1 g 1,1-dimetoksipropan-2-ona (4.25 mol) i 506.4 g 1,1-dimetoksi-N,N-dimetil-metanamina (4.25 mol) se pomešaju u 2 L-skom sudu i mešaju na 105°C u toku 3 sata. MeOH, koji se formira se kontinuirano uklanja putem destilisanja. Kada formiranje MeOH prestane (na 65°C vodećoj temperaturi), reakciona smeša se vakuumski destiliše (sporim smanjivanjim pritiska do 30 mbar) da bi se uklonili nuzprodukti i neizreagovani polazni materijali. Sirovi proizvod se destiliše na 0.1 mbar.

Frakcije se sakupe između 107-118°C vodeće temperature (temperatura kupatila 160-165°C) kako se dobija ulje žute boje.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 7.59 (d, 1H), 5.17 (d, 1H), 4.42 (s, 1H), 3.25 (s, 6H), 3.09 (s, 3H), 2.78 (s, 3H)

Preparat 11: [2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metanol

Korak A: 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidin

U smešu od 2-metoksibenzamidin hidrohlorida (1.2 eq.) i Preparata 10 (1 eq.) u suvom metanolu (0.5 mL/mmol), iz delova se doda natrijum metoksid (1.2 eq.) i, smeša se meša na 75°C u toku 2 sata. Reakciona smeša se ohladi i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda voda i onda se izvrši ekstrakcija sa DCM. Spojeni organski slojevi se osuše preko MgSO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.93 (d, 1H), 7.55-7.44 (m, 3H), 7.16 (d, 1H), 7.06 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.37 (s, 6H)

Korak B: Preparat 11

261 mg 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidina (1.0 mmol) se rastvori u 2 mL HCl u dioksanu (4M rastvor), onda se doda 2 mL vode i ova smeša se meša na 50°C tokom 16 sati. Reakciona smeša se ohladi na 0°C zatim, deo po deo se doda 320 mg NaOH (8.0 mmol). pH se podesi na 8 korišćenjem 10 % K2CO3rastvora, potom se doda 76 mg natrijum borohidrida (2.0 mmol) i, smeša se meša u toku 30 minuta na 0°C. Reakciona smeša se razblaži sa 5 mL vode i ekstrahuje se sa EtOAc. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija Preparat 11.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.84 (d, 1H), 7.50-7.42 (m, 3H), 7.14 (d, 1H), 7.03 (m, 1H), 5.66 (t, 1H), 4.58 (d, 2H), 3.75 (s, 3H)

Preparat 12: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)propanska kiselina

Korak A

1 eq. Preparata 9, 2 eq. Preparata 11 i 2 eq. trifenil fosfina se rastvore u apsolutnom toluenu (0.2M za fenol) zatim, doda se 2 eq. di-terc-butil azodikarboksilata. Smeša se meša na 50°C pod azotom sve dok se zapaža konverzija. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom i sirovi intermedijer prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem etil acetata i metanola kao eluenata.

Korak B

Dobijeni intermedijer se rastvori u dioksan-voda smeši 1:1 (10 mL/mmol) i, doda se 10 eq. LiOH x H2O. Smeša se meša na r.t. sve dok se zapaža konverzija. Onda se razblaži sa slanim rastvorom, neutrališe sa 2M HCl, ekstrahuje sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom i prečiste putem preparativne reverzno fazne hromatografije, korišćenjem 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i MeCN kao eluenata.

HRMS izračunato za C47H44ClFN6O6S: 874.2716; nađeno 438.1415 (M+2H)

Preparat 13: (2R)-2-{[5-{3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)propanska kiselina

Korak A: 4-bromo-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenol

30.16 g 4-bromo-3,5-dimetil-fenola (150 mmol) se rastvori u smeši od 75 mL 1,2-dihloroetana i 75 mL acetonitrila, onda se, deo po deo, doda 40.06 g NCS (300 mmol) i, smeša se meša na r.t. sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom, ostatak se rastvori u DCM, ispere sa vodom i sa slanim rastvorom. Organski sloj se osuši preko Na2SO4i ukoncentriše pod sniženim pritiskom i, koristi u sledećem koraku bez prethodnog prečišćavanja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.10 (s, 1H), 2.46 (s, 6H)

Korak B: 1-bromo-3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-benzen

U rastvor od 26.0 g 4-bromo-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenola (96.3 mmol) i 26.60 g K2CO3(192.6 mmol) u 300 mL MeCN doda se 6.6 mL MeJ (105.9 mmol) i, smeša se meša na r.t. sve dok se zapaža konverzija. Čvrsta materija se odfiltrira i filtrat ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se rastvori u DCM, ispere sa vodom i sa slanim rastvorom. Organski sloj se osuši preko Na2SO4i ukoncentriše pod sniženim pritiskom i, koristi u sledećem koraku bez prethodnog prečišćavanja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.78 (s, 3H), 2.49 (s, 6H)

Korak C: 2-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

10.0 g 1-bromo-3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-benzena (35.2 mmol) se rastvori u 360 mL suvog THF-a pod azotom i ohladi se na -78°C sa suvim led-acetonom. Doda se 23.2 mL<n>BuLi (1.6 M u heksanima) (37.0 mmol) i, smeša se meša u toku 15 minuta zatim, doda se 8.6 mL 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (42.24 mmol) i smeša se ostavlja da se zagreje do r.t. Ugasi se sa slanim rastvorom, ekstrahuje sa DCM, osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija 2-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.81 (s, 3H), 2.33 (s, 6H), 1.34 (s, 12H)

Korak D: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)tiofen-3-karboksilat

3.92 g etil 4-bromotiofen-3-karboksilata (16.68 mmol) i 9.9 g 2-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (30.0 mmol) se rastvori u 140 mL dioksana zatim, doda se rastvorenih 10.87 g Cs2CO3(33.36 mmol) u 40 mL vode. Potom se doda 590 mg AtaPhos (0.83 mmol) i, smeša se meša pod azotom na temperaturi refluksa sve dok se zapaža konverzija. Zatim se razblaži sa DCM i sa slanim rastvorom. Kada se faze razdvoje, vodena faza se ekstrahuje sa DCM. Organski slojevi se spoje i osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.53 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 4.02 (q, 2H), 3.83 (s, 3H), 1.95 (s, 6H), 1.00 (t, 3H)

HRMS (M+NH4)<+>= 376.0538

Korak E: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-2,5-dijodo-tiofen-3-karboksilat

2.65 g 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)tiofen-3-karboksilata (7.38 mmol) se rastvori u 75 mL acetonitrila zatim, se doda 2.2 mL kompleksa fluoroborne kiseline sa dietil etrom (16.23 mmol) i 3.65 g N-jodosukcinimida (16.23 mmol) i, smeša se meša na r.t. sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i, sirovi proizvod prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)-2,5-dijodo-tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.98 (q, 2H), 3.84 (s, 3H), 1.92 (s, 6H), 0.84 (t, 3H)

Korak F: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-jodo-tiofen-3-karboksilat

5.29 g 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-2,5-dijodo-tiofen-3-karboksilata (8.66 mmol) se rastvori u 90 mL suvog THF-a, onda se ohladi na -78°C u atmosferi argona. Dodaju se 6.7 mL izopropil magnezijum hlorida, litijum hloridni kompleks (1.3 M u THF-u) (8.66 mmol) i, smeša se meša na -78°C u toku 30 minuta. Zatim se doda zasićeni vodeni NH4Cl i smeša ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se osuši preko Na2SO4i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-jodo-tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.71 (s, 1H), 4.01 (q, 2H), 3.86 (s, 3H), 1.89 (s, 6H), 0.99 (t, 3H)

Korak G: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilat

4.20 g etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-jodo-tiofen-3-karboksilata (8.66 mmol) i 1.82 g 4-fluorofenilborne kiseline (13.0 mmol) se rastvori u 80 mL dioksana zatim, doda se 5.64 g Cs2CO3(17.32 mmol) rastvorenih u 20 mL vode. Potom, doda se 500 mg Pd(PPh3)4(0.43 mmol) i, smeša se pod azotom meša na 80°C sve dok se zapaža konverzija. Onda se izvrši razblaživanje sa DCM i sa slanim rastvorom. Kada se faze razdvoje, vodena faza se ekstrahuje sa DCM. Organski slojevi se spoje i osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil) tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.58 (s, 1H), 7.22-7.10 (m, 4H), 4.03 (q, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.92 (s, 6H), 1.00 (t, 3H)

HRMS (M+H)<+>= 453.0498

Korak H: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitrotiofen-3-karboksilat

1.97 g etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilata (4.34 mmol) se rastvori u 40 mL suvog acetonitrila zatim, doda se 576 mg nitronijum tetrafluoroborata (4.34 mmol) i, smeša se meša na r.t. sve dok se zapaža konverzija. Onda se izvrši razblaživanje sa DCM i sa slanim rastvorom. Kada se faze razdvoje, vodena faza se ekstrahuje sa DCM. Organski slojevi se spoje i osuše prekoNa2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitrotiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.37-7.33 (m, 2H), 7.32-7.26 (m, 2H), 4.14 (q, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.06 (s, 6H), 0.88 (t, 3H)

Korak I: etil 2-amino-4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilat

1.85 g etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitrotiofen-3-karboksilata (3.71 mmol) se rastvori u smeši od 90 mL sirćetne kiseline i 18 mL vode zatim, deo po deo, doda se 2.43 g cinka u prahu (37.1 mmol) i, smeša se meša na r.t. sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i sirovi proizvod prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija etil 2-amino-4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.73 (s, 2H), 7.12-7.06 (m, 2H), 7.02-6.97 (m, 2H), 3.86-3.80 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.01 (s, 6H), 0.72 (t, 3H)

HRMS (M+H)<+>= 456.0598

Korak J: 5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno[2,3-d] pirimidin-4-on

1.10 g etil 2-amino-4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil) tiofen-3-karboksilata (2.35 mmol) se rastvori u 20 mL formamida i, meša se na 150°C sve dok se zapaža konverzija. Onda se izruči u vodu i, istaloženi proizvod sakupi filtriranjem, kako se dobija 5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.53 (br s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.23-7.16 (m, 4H), 3.84 (s, 3H), 1.96 (s, 6H)

HRMS (M+H)<+>= 449.0289

Korak K: 4-hloro-5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin

700 mg 5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno [2,3-d]pirimidin-4-ona (1.56 mmol) se rastvori u 6 mL fosfor oksihlorida i, meša se na 90°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom zatim, u sirovi proizvod se doda ledena voda i ozvuči se tokom 10 minuta. Istaloženi proizvod se sakupi filtriranjem, kako se dobija 4-hloro-5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.02 (s, 1H), 7.38-7.26 (m, 4H), 3.86 (s, 3H), 1.99 (s, 6H) HRMS (M+H)<+>= 466.9954

Korak L: 2,6-dihloro-4-[4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenol i 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenol U mešani rastvor od 700 mg 4-hloro-5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina (1.50 mmol) u 15 mL DCM, doda se 3.0 mL bor tribromida (1 M u DCM) (3.0 mmol) na 0°C i, smeša se ostavlja da se zagreje do r.t. i, meša se sve dok se zapaža konverzija. Smeša se ugasi sa zasićenim vodenim NH4Cl i, ekstrahuje sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija 2,6-dihloro-4-[4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenol i 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenol u vidu smeše proizvoda u odnosu 37:63.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.14 (br s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.40-7.23 (m, 4H), 1.95 (s, 6H) and 10.14 (br s, 1H), 8.93 (s, 1H), 7.40-7.23 (m, 4H), 1.93 (s, 6H)

HRMS (M+H)<+>= 452.9800 i 496.9287

Korak M: 4-hloro-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin i 4-bromo-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin

300 mg smeše 2,6-dihloro-4-[4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenola i 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenola (0.62 mmol), 286 mg 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola (1.98 mmol) i 520 mg trifenil fosfina (1.98 mmol) se rastvore u 10 mL suvog toluena, a zatim se doda 460 mg diterc-butil azodikarboksilata (1.98 mmol). Smeša se meša na 50°C pod azotom sve dok se zapaža konverzija. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom i, sirovi intermedijer se prečisti putem flash hromatografije uz korišćenje EtOAc i metanola kao eluenata, kako se dobija 4-hloro-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin i 4-bromo-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin kao smeša proizvoda u odnosu 35:65.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.02 (S, 1H), 7.40-7.22 (m, 4H), 4.11 (t, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.63-2.20 (m, 8H), 2.17 (br s, 3H), 1.98 (s, 6H) and 8.94 (S, 1H), 7.40-7.22 (m, 4H), 4.11 (t, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.63-2.20 (m, 8H), 2.15 (br s, 3H), 1.98 (s, 6H)

HRMS (M+H)<+>= 579.0968 i 623.0455

Korak N: (E)-4-(dimetilamino)-1,1-dimetoksi-but-3-en-2-on

502.1 g 1,1-dimetoksipropan-2-ona (4.25 mol) i 506.4 g 1,1-dimetoksi-N,N-dimetil-metanamina (4.25 mol) se pomešaju u 2 L-skom sudu i, meša se na 105°C tokom 3 sata. MeOH, koji se formira, kontinuirano se uklanja destilacijom. Kada prestane formiranje MeOH (na 65°C vodećoj temperaturi), reakciona smeša se destiliše pod vakuumom (smanjujući postepeno pritisak do 30 mbar) kako se uklanjaju nuzproizvodi i neizreagovani polazni materijali. Sirovi proizvod se destiliše na 0.1 mbar. Frakcije se sakupljaju na između 107-118°C vodećoj temperaturi (temperatura kupatila 160-165°C), kako se dobija ulje žute boje.

Korak O: 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidin

U mešavinu od 2-metoksibenzamidinske soli sirćetne kiseline (1.2 eq.) i (E)-4-(dimetilamino)-1,1-dimetoksibut-3-en-2-ona (1.0 eq.) u suvom metanolu (0.5 mL/mmol), deo po deo se doda natrijum metoksid (1.2 eq.) i, smeša se meša na 75°C u toku 2 sata. Reakciona smeša se ohladi i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda voda i, izvrši se ekstrakcija sa DCM. Spojeni organski slojevi se osuše preko MgSO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod ss prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidin.

Korak P: [2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metanol

261 mg 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidina (1.00 mmol) se rastvori u 2 mL HCl u dioksanu (4 M rastvor), zatim se doda 2 mL vode i ova smeša se meša na 50°C u toku 16 sati. Reakciona smeša se ohladi na 0°C, zatim se deo po deo, doda 320 mg NaOH (8.0 mmol). pH se podesi na 8, korišćenjem 10 % rastvora K2CO3, onda se doda 76 mg natrijum borohidrida (2.0 mmol) i, smeša se meša tokom 30 minuta na 0°C. Reakciona smeša se razblaži sa 5 mL vode i ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija proizvod iz naslova.

Korak Q: (2R)-2-hidroksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanska kiselina

37.84 g (150 mmol) Preparata 3, 48.65 g (225 mmol) [2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metanola i 59.01 g (225 mmol) trifenil fosfina se rastvori u 160 mL apsolutnog toluena, onda se doda 102.47 mL (225 mmol) dietilazodikarboksilata. Smeša se meša na 50°C pod azotom sve dok se zapaža konverzija. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom. Potom se doda 400 mL Et2O, smeša ozvuči i filtrira (da bi se uklonio PPh3). Et2O se uklanja in vacuo. Ostatak se rastvori u 130 mL THF-a, a onda se doda 30 g NaOH u 130 mL H2O. Smeša se meša na r.t. sve dok ne prestane konverzija. Potom se izvrši zakiseljavanje sa 2 M HCl, ukloni se THF pod vakuumom. Doda se 300 mL DCM i, filtrira se talog, ispere sa hladnom H2O i DCM, osuši pod vakuumom i, dobija se (2R)-2-hidroksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil] propanska kiselina.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.88 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.55 (dd, 1H), 7.49-7-44 (m, 1H), 7.26 (dd, 1H), 7.17-7.11 (m, 2H), 7.06 (t, 1H), 6.98 (d, 1H), 6.88 (t, 1H), 5.22 (s, 2H), 3.81 (dd, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.73 (dd, 1H), 2.44 (dd, 1H)

Korak R: etil (2R)-2-hidroksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil] propanoat

51.7 g (136 mmol) (2R)-2-hidroksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi]fenil]propanske kiseline se rastvori u 520 mL EtOH, zatim se doda 20 mL koncentrovane H2SO4. Smeša se meša na 60°C sve dok se zapaža konverzija. Onda se razblaži sa vodom, neutrališe sa koncentrovanim rastvorom NaHCO3i ekstrahuje sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom i prečiste putem flash hromatografije, korišćenjem EtOAc i MeOH kao eluenata da bi se dobio etil (2R)-2-hidroksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi]fenil]propanoat.

HRMS izračunato za C23H24N2O5: 408.1685, nađeno: 409.1757 (M+H)

Korak S: Preparat 13

200 mg smeše 4-hloro-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina i 4-bromo-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina (0.33 mmol), 211 mg etil (2R)-2-hidroksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi]fenil] propanoata (0.52 mmol) i 202 mg CS2CO3(0.62 mmol) se rastvori u 5 mL terc-butanola i, smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Razblaži se sa etil acetatom i zatim, ispere sa slanim rastvorom. Organski sloj se osušeni preko Na2SO4, filtrira i ukoncentrisane pod sniženim pritiskom i, prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem EtOAc i metanola kao eluenata, kako se dobija etil (2R)-2-[5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] oksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoat.

Dobijeni intermedijer se rastvori u 5 mL dioksan-vode 1:1 (10 mL/mmol) i, doda se 145 mg LiOH x H2O (3.45 mmol). Smeša se meša na r.t. sve dok konverzija ne prestane. Onda se razblaži sa slanim rastvorom, neutrališe sa 2 M HCl, ekstrahuje sa DCM, osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti putem preparativne reverzno fazne hromatografije, korišćenjem 5 mM vodenog NH4HCO3rastvora i MeCN kao eluenata, kako se dobija Preparat 13.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.89 (d, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.53 (dd, 1H), 7.45 (td, 1H), 7.29-7.21 (m, 4H), 7.17-7.13 (m, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.04 (td, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.76 (t, 1H), 6.20 (d, 1H), 5.45 (dd, 1H), 5.26 (d, 1H), 5.20 (d, 1H), 4.06-4.01 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.46 (dd, 1H), 2.79-2.74 (m, 2H), 2.67-2.38 (m, 8H), 2.33 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.22 (dd, 1H), 1.73 (s, 3H)

HRMS (M+2H)<2+>= 462.1310

Preparat 14: (2R)-2-{[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluoro-fenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksil-3-(2-1[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi} fenil)propanska kiselina

Korišćenjem procedure kakva je opisana za Preparat 13 i, polazeći direktno od Koraka B sa 4-bromo-3,5-dimetilfenolom umesto 4-bromo-2,6-dihloro-3,5-dimetilfenola, dobija se Preparat 14.

Primer 1: 1-[(metoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Primenom Opšte procedure I za Preparat 12 i metanol, kao odgovarajući alkohol, dobija se Primer 1.

HRMS izračunato za C51H50ClFN6O9S: 976.3033; nađeno 489.1604 i 489.1572 (M+2H)

Primer 2: 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Primenom Opšte procedure I za Preparat 12 i etanol, kao odgovarajući alkohol, dobija se Primer 2.

HRMS izračunato za C52H52ClFN6O9S: 990.3189; nađeno 496.1649 i 496.1685 (M+2H)

Primer 3: 1-{[(propan-2-iloksi)karbonil]oksi}etil (2R)-2-1[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Primenom Opšte procedure I za Preparat 12 i 2-propanol, kao odgovarajući alkohol, dobija se Primer 3.

HRMS izračunato za C53H54ClFN6O9S: 1004.3345; nađeno 503.1766 (M+2H)

Primer 4: 1-[(terc-butoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Primenom Opšte procedure I za Preparat 12 i 2-metil-2-propanol, kao odgovarajući alkohol, dobija se Primer 4.

HRMS izračunato za C54H56ClFN6O9S: 1018.3502; nađeno 510.1837 (M+2H)

Primer 5: 1-{[(ciklopentiloksi)karbonil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Primenom Opšte procedure I za Preparat 12 i ciklopentanol, kao odgovarajući alkohol, dobija se Primer 5.

HRMS izračunato za C55H56ClFN6O9S: 1030.3502; nađeno 516.1817 (M+2H)

Primer 6: 1-{[(oktiloksi)karbonil]oksi}etil (2R)-2-1[(5Sa)-5-13-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Primenom Opšte procedure I za Preparat 12 i 1-oktanol, kao odgovarajući alkohol, dobija se Primer 6.

HRMS izračunato za C58H64ClFN6O9S: 1030.3502; nađeno 538.2133 i 538.2149 (M+2H)

Primer 7: 1-[(dimetilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-1[(5Sa)-5-13-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Primenom Opšte procedure II za Preparat 12 i dimetilamin hidrohlorid kao aminski reagens, primenjivanjem 2.15 eq. piridina u Koraku A, dobija se Primer 7.

HRMS izračunato za C52H53ClFN7O8S: 989.3349; nađeno 495.6740 i 495.6738 (M+2H)

Primer 8: 1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Korišćenjem Opšte procedure II za Preparat 12 i dietilamin kao aminski reagens, dobija se Primer 8.

HRMS izračunato za C54H57ClFN7O8S: 1017.3662; nađeno 509.6902 (M+2H) Primer 9: 1-{[(2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoil]oksi}etilmorfolin-4-karboksilat

Korišćenjem Opšte procedure II za Preparat 12 i morfolin kao aminski reagens, dobija se Primer 9.

HRMS izračunato za C54H55ClFN7O9S: 1031.3455; nađeno 516.6826 i 516.6821 (M+2H)

Primer 10: 1-{[(2-metoksietil)karbamoil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-13-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil) propanoat

Korišćenjem Opšte procedure II za Preparat 12 i 2-metoksietanamin kao aminski reagens, dobija se Primer 10.

HRMS izračunato za C53H55ClFN7O9S: 1019.3455; nađeno 510.6809 i 510.6813 (M+2H)

Primer 11: 1-{[bis(2-metoksietil)karbamoil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-13-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil) propanoat

Korišćenjem Opšte procedure II za Preparat 12 i 2-metoksi-N-(2-metoksietil)etanamin kao aminski reagens, dobija se Primer 11.

HRMS izračunato za C56H61ClFN7O10S: 1077.3873; nađeno 539.7029 i 539.7017 (M+2H)

Primer 12: 1-{[(2-metoksi-2-oksoetil)(metil)karbamoil]oksi}etil (2R)-2-1[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)propanoat

Korišćenjem Opšte procedure II za Preparat 12 i metil 2-(metilamino)acetat hidrohlorid kao aminski reagens, primenjivanjem 2.15 eq. piridina u Koraku A, dobija se Primer 12.

HRMS izračunato za C54H55ClFN7O10S: 1047.3403; nađeno 524.6782 i 524.6781 (M+2H)

Primer 13: (fosfonooksi)metil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

700 mg Preparata 12 (0.8 mmol), 233 mg di-terc-butil hlorometil fosfata (0.9 mmol), 240 mg natrijum jodida (1.6 mmol) i 521 mg Cs2CO3(1.6 mmol) se rastvore u 8 mL DMF-a i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi u atmosferi azota sve dok se zapaža konverzija. Mešavina se razblaži sa vodom i ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa vodom, osuši preko Na2SO4i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije na silika gelu, korišćenjem DCM i MeOH eluenata, kako se dobija di-terc-butil estarski intermedijer.

160 mg di-terc-butil estra (0.15 mmol) se rastvori u 8 mL DCM i ohladi u ledenom kupatilu. U smešu se polako doda 4 mL TFA. Posle dodavanja TFA, smeša se meša još 15 minuta i zatim, ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija sirovi proizvod u obliku soli. Preparativnom HPLC, uz korišćenje rastvora mravlje kiseline i ACN, zatim liofilizacijom, dobija se Primer 13 u vidu bele čvrste materije.

HRMS izračunato za C48H47ClFN6O10PS: 984.2485; nađeno 493.1338 (M+2H)

Primer 14: 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi1-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Primenom Opšte procedure I za Preparat 14 i etanol, kao odgovarajući alkohol, dobija se Primer 14.

Primer 15: 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[5-{3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Primenom Opšte procedure I za Preparat 13 i etanol, kao odgovarajući alkohol, dobija se Primer 15.

HRMS izračunato za C53H53Cl2FN6O9S: 1038.2955; nađeno 520.1543 i 520.1549 (M+2H)<2+>

Primer 16: 1-[(dimetilkarbamoil)oksi] etil (2R)-2-{[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat

Korišćenjem Opšte procedure II za Preparat 14 i dimetilamin hidrohlorid kao aminski reagens, primenjivanjem 2.15 eq. piridina u Koraku A, dobija se Primer 16.

Primer 17: 1-[(dimetilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[5-{3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil) propanoat

Korišćenjem Opšte procedure II za Preparat 13 i dimetilamin hidrohlorid kao aminski reagens, primenjivanjem 2.15 eq. piridina u Koraku A, dobija se Primer 17.HRMS izračunato za C53H54Cl2FN7O8S: 1037.3115; nađeno 519.6616 i 519.6632 (M+2H)<2+>

FARMAKOLOŠKO ISPITIVANJE

PRIMER A: Inhibicija Mcl-1 tehnikom polarizacije fluorescencije

Potencija relativnog vezivanja svakog jedinjenja je određena putem polarizacije fluorescencije (FP). Postupak koristi ligand obeležen fluoresceinom (Fluorescein-βAla-Ahx-A-REIGAQLRRMADDLNAQY-OH; mw 2,765) koji se vezuje za Mcl-1 protein (tako da Mcl-1 odgovara UniProtKB® primarnom pristupnom broju: Q07820) dovodeći do porasta anizotropije, merene u jedinicama mili-polarizacije (mP), što se određuje na č itaču. Dodatkom jedinjenja, koje se kompetitivno vezuje za isti položaj kao i ligand, dovešće do veće proporcije nevezanog liganda u sistemu što je indikovano smanjenjem mP jedinica.

Pripremljeno je serijsko razblaženje u 11 tačaka za svako jedinjenje u DMSO i, prenese se po 2 µl u ploče niskog vezivanja sa 384 pozicije sa ravnim dnom (konačna koncentracija DMSO je 5%). Onda se doda 38 µl pufera (10 mM 4-(2-hidroksietil)-1-piperazinetansulfonska kiselina [HEPES], 150 mM NaCl, 0.05 % Tween 20, pH 7.4), koji sadrži igand obeležen fluoresceinom (konačna koncentracija 1 nM) i Mcl-1 protein (konačna koncentracija 5 nM).

Test ploče su inkubirane ~2 sata na sobnoj temperaturi pre nego što se izvede merenje FP na čitaču Biomek Synergy2 (Ex. 528 nm, Em. 640 nm, Cut off 510 nm) i računanje mP. Vezivanje rastućih doza test jedinjenja je izraženo kao procenat smanjivanja mP u poređenju sa prozorom utvrđenim između ’samo 5 % DMSO’ i ’100 % inhibicija’ kontrola. Krive doznog odgovora u 11 tačaka su iscrtane pomoću XL-Fit softwara, korišćenjem 4-parametarskog logističkog modela (model sigmoidnog doznog odgovora) i, određene su inhibitorne koncentracije koje daju 50 % smanjenje u mP(IC50). Rezultati su predstavljeni u Tabeli 1, u nastavku.

Rezultati pokazuju da jedinjenja pronalaska inhibiraju interakciju između Mcl-1 proteina i fluorescentnog peptida, koji je ovde prethodno opisan.

PRIMER B: In vitro citotoksičnost

Ispitivanja citotoksičnosti su izvedena na tumorskoj iniji H929 multiplog mijeloma.

Ćelije se raspodele po mikropločama i izlože dejstvu ispitivanih jedinjenja u toku 48 sati. Vijabilnost ćelija se zatim kvantitativno određuje kolorimetrijskim testom Microculture Tetrazolium Assay (Cancer Res., 1987, 47, 939-942).

Rezultati su izraženi kao IC50(koncentracija jedinjenja koja inhibira preživljavanje ćelija za 50 %) i prikazani u Tabeli 1, u nastavku.

Rezultati pokazuju da su jedinjenja pronalaska citotoksična.

Tabela 1: IC50inhibicije Mcl-1 (test polarizacije fluorescencije) i citotoksičnost za H929 ćelije

PRIMER C: Kvantitativno određivanje otcepljenog oblika PARP in vivo

Sposobnost jedinjenja pronalaska da indukuju apoptozu je ispitana u ksenograft modelu AMO-1 ćelija multiplog mijeloma, merenjem nivoa otcepljene PARP.

1.10<7>AMO-1 ćelija se sub-kutano nakaleme imunosupresovanim miševima (SCID soj). 12 do 14 dana posle kalemljenja, životinje su raznim jedinjenjima tretirane intravenski ili oralnim putem. Posle tretmana, tumorske mase se sakupe i liziraju i, kvantitativno se odredi otcepljeni oblik PARP u lizatima tumora.

Kvantitativno određivanje se izvodi korišćenjem testa "Meso Scale Discovery (MSD) ELISA platform", koji specifično testira otcepljeni oblik PARP. Izražava se u vidu faktora aktivnosti, koji odgovara odnosu između količine otcepljene PARP kod tretiranih miševa podeljene sa količinom otcepljene PARP kod kontrolnih miševa.

Rezultati pokazuju da su jedinjenja pronalaska sposobna da indukuju apoptozu u AMO-1 tumorskim ćelijama in vivo.

PRIMER D: Anti-tumorska aktivnost in vivo

Ispitana je anti-tumorska aktivnost jedinjenja pronalaska u ksenograft modelu AMO-1 ćelija multiplog mijeloma.

1x10<7>AMO-1 ćelija se subkutano nakaleme imunosupresovanim miševima (SCID soj).

6 do 8 dana posle kalemljenja, kada masa tumora dostigne otprilike 150 mm<3>, miševi se tretiraju različitim jedinjenjima po dnevnoj šemi (5-dnevni tretman). Tumorska masa se meri dva puta nedeljno od početka lečenja.

Rezultati dobijeni korišćenjem ΔT/C odnosa (tj. kvalifikacioni parametar aktivnosti proizvoda, koji je definisan kao odnos zapremine tumora tretirane grupe / zapreminom tumora netretirane kontrolne grupe) pokazuju da jedinjenja pronalaska dovode do značajne regresije tumora tokom perioda tretmana.

PRIMER E: Farmaceutska kompozicija: Tablete

1000 tableta koje sadrže dozu od 5 mg jedinjenja odabranog od Primera 1 5 g do 17 i Izrada 13 i 14

Pšenični skrob 20 g Kukuruzni skrob 20 g Laktoza 30 g Magnezijum stearat 2 g Silika 1 g Hidroksipropilceluloza 2 g

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenja formule (I):

u kojoj: ♦ A predstavlja grupu

u kojoj je 1 povezan sa atomom kiseonika i 2 je povezan sa fenilnim prstenom, ♦ R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, -NR11R11’, -Cy6ili atom halogena, ♦ R2, R3, R4i R5predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -Oalkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6) ili supstituenti jednog od parova (R2, R3), (R3, R4), (R4, R5), kada su postavljeni na dva susedna atoma ugljenika, formiraju zajedno sa atomima ugljenika koji ih nose aromatični ili neromatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, pri čemu se podrazumeva da nastali prsten može biti supstituisan grupom, koja je odabrana od linearne ili razgranate (C1-C6)alkil grupe, -NR11R11’, -alkil(C0-C6)-Cy1ili okso, ♦ R6i R7predstavljaju, nezavisno jedan od drugog atom vodonika, halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu ((C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -O-Cy1, -alkil(C0-C6)-Cy1, -alkenil(C2-C6)-Cy1, -alkinil(C2-C6)-Cy1, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6) ili supstituenti para (R6, R7), kada su postavljeni na dva susedna atoma ugljenika, formiraju zajedno sa atomima ugljenika koji ih nose aromatični ili nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, pri čemu se podrazumeva da nastali prsten može biti supstituisan grupom, koja je odabrana od linearne ili razgranate (C1-C6)alkil grupe, -NR11R11’, -alkil(C0-C6)-Cy1ili okso, ♦ R8predstvalja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, -Cy3, -alkil(C1-C6)-Cy3, -alkenil(C2-C6)-Cy3, -alkinil(C2-C6)-Cy3, -Cy3-Cy4, -alkinil(C2-C6)-O-Cy3, -Cy3-alkil(C0-C6)-O-alkil(C0-C6)-Cy4, halogeni atom, cijano grupu, -C(O)-R12ili -C(O)-NR12R12’, ♦ R9i R9’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, -alkil(C0-C6)-Cy1, ili supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi aromatičnin ili nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može osim atoma azota imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom koja predstavlja atom vodonika ili, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu i, pri čemu se podrazumeva da jedan ili više atoma ugljenika mogućih supstituenata, mogu biti deuterizovani, ♦ R10predstavlja -Cy1, -Cy1-alkil(C0-C6)-Cy2, -Cy1-alkil(C0-C6)-O-alkil(C0-C6)-Cy2, -Cy1-alkil(C0-C6)-NR9-alkil(C0-C6)-Cy2, -Cy1-Cy2-O-alkil(C0-C6)-Cy5, -C(O)-NR9R9’, -NR9R9’, -OR9, -NR9-C(O)-R9’, -O-alkil(C1-C6)-OR9, -SO2-R9, -C(O)-OR9, ili -NH-C(O)-NH-R7, ♦ R11, R11’, R12i R12’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika ili eventualno supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ R13predstavlja atom vodonika, hidroksi grupu ili hidroksi(C1-C6)alkil grupu, ♦ Rapredstavlja atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ Rbpredstavlja -O-C(O)-O-Rcgrupu, -O-C(O)-NRcRc’ grupu ili -O-P(O)(ORc)2grupu, ♦ Rci Rc’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, cikloalkil grupu, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu ili (C1-C6)alkoksikarbonil(C1-C6)alkil grupu, ili supstituenti para (Rc, Rc’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može osim atoma azota imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom koja predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ Cy1, Cy2, Cy3, Cy4, Cy5i Cy6predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, cikloalkil grupu, heterocikloalkil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu, ♦ n je ceo broj jednak 0 ili 1, pri čemu se podrazumeva da: - "aril" označava fenil, naftil, bifenil, indanil ili indenil grupu, - "heteroaril" označava svaku mono- ili bi-cikličnu grupu, sastavljenu od 5 do 10 članova prstena, koja ima najmanje jedan aromatičan deo i sadrži od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, - "cikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena, - "heterocikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena i, sadrži od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, koja može obuhvatiti spojene, premošćene ili spiro sisteme prstenova, moguće je za aril, heteroaril, cikloalkil i heterocikloalkil grupe ovako definisane i alkil, alkenil, alkinil, alkoksi grupe, da budu supstituisane sa 1 do 4 grupe, odabrane od opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, opciono supstituisane linearne ili razgranate (C2-C6)alkenil grupe, opciono supstituisane linearne ili razgranate (C2-C6)alkinil grupe, opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkoksi, opciono supstituisanog (C1-C6)alkil-S-, hidroksi, okso (ili N-oksida gde odgovara), nitro, cijano, -C(O)-OR’, -O-C(O)-R’, -C(O)-NR’R", -NR’R", -(C=NR’)-OR", linearnog ili razgranatog (C1-C6)polihaloalkila, trifluorometoksi ili halogena, pri čemu se podrazumeva da R’ i R" predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika ili opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu i, pri čemu se podrazumeva da jedan ili više atoma ugljenika u prethodno pobrojanim mogućim supstituentima, mogu biti deuterizovani (umesto vodonika, sadrže deuterijum, prim. prev.), njihovi enantiomeri, dijastereoizomeri i atropizomeri i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.
2. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu najmanje jedna grupa odabranih od R2, R3, R4i R5ne predstavlja atom vodonika.
3. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu je n ceo broj jednak 1.
4. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili atom halogena.
5. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu R13predstavlja atom vodonika.
6. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde R4i R5predstavljaju atom vodonika.
7. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde

predstavlja su R1, R9i R9’ kao što su definisani u zahtevu 1.
8. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde

predstavlja su R9i R9’ kao što su definisani u zahtevu 1.
9. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde su supstituenti para (R1, R5) identični i supstituenti para (R2, R4) su identični.
10. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde R6predstavlja opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu ili -O-alkil(C1-C6)-R10grupu.
11. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde R7predstavlja atom vodonika.
12. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde

pre s av a je R10kao što je definisano u zahtevu 1.
13. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde R8predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu.
14. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde R9i R9’, nezavisno jedan od drugog, predstavljaju linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili, supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova prstena, koji osim atoma azota može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika, sumpora i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan sa grupom koju predstavlja atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu.
15. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde R10predstavlja -Cy1, -Cy1-alkil(C0-C6)-O-alkil(C0-C6)-Cy2ili -Cy1-alkil(C0-C6)-Cy2.
16. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde Cy1predstavlja heteroaril grupu.
17. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde Cy2predstavlja fenil grupu, piridinil grupu, pirazolil grupu, morfolinil grupu, furanil grupu ili ciklopropil grupu.
18. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde R10predstavlja -Cy1-Cy2u kojoj Cy1predstavlja pirimidinil grupu i Cy2predstavlja fenil grupu, piridinil grupu, pirazolil grupu, morfolinil grupu, furanil grupu ili ciklopropil grupu.
19. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde Rapredstavlja atom vodonika ili metil grupu.
20. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde Rbpredstavlja -O-C(O)-O-(C1-C8)alkil grupu; -O-C(O)-Ocikloalkil grupu; -O-C(O)-NRcRc’ grupu, u kojoj Rci Rc’, nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, (C1-C6)alkoksikarbonil(C1-C6)alkil grupu ili, supstituenti para (Rc, Rc’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten, sastavljen od 5 do 7 članova prstena, koji osim atoma azota može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika i azota; ili -O-P(O)(OH)2grupu.
21. Jedinjenja prema zahtevu 1, su: - 1-[(metoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-{[(propan-2-iloksi)karbonil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-[(terc-butoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-{[(ciklopentiloksi)karbonil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-{[(oktiloksi)karbonil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-[(dimetilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-(3-hloro-2-mctil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-{[(2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)propanoil]oksi}etil-morfolin-4-karboksilat; - 1-{[(2-metoksietil)karbamoil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-{[bis(2-metoksietil)karbamoil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-{[(2-metoksi-2-oksoetil)(metil)karbamoil]oksi}etil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - (fosfonooksi)metil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il) etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil (2R)-2-{[5-(3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-[(dimetilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il) etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat; - 1-[(dimetilkarbamoil)oksi]etil (2R)-2-{[5-(3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat.
22. Postupak izrade jedinjenja formule (I) prema zahtevu 1, naznačen time što se kao polazni materijal koristi jedinjenje formule (II):

u kome je A kao što je definisano za formulu (I), gde je 1 vezano sa atomom hlora i 2 je vezano sa atomom broma, pri čemu se jedinjenje formule (II) podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (III):

gde su R6, R7, R13i n, kao što su definisani za formulu (I), a Alk predstavlja opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, da se dobije jedinjenje formule (IV):

gde su R6, R7, R13, A i n, kao š to su definisani za formulu (I), a Alk je, kao što je definisan prethodno, jedinjenje formule (IV) se dalje podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (V):

gde su R1, R2, R3, R4i R5kao š to su definisani za formulu (I), a RB1i RB2predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu ili, RB1i RB2formiraju sa kiseonikom koji ih nosi opciono metilovani prsten, da se dobije jedinjenje formule (VI):

gde su R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R13, A i n, kao što su definisani za formulu (I) i Alk je, kao što je prethodno definisan, Alk-O-C(O)- estarska funkcija koja se u jedinjenju formule (VI) hidrolizuje da se dobije karboksilna kiselina formule (VII):

gde su R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R13, A i n, kao što su definisani za formulu (I), koja se podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (VIII):

gde su Rai Rbkao što su definisani za formulu (I), da se dobije jedinjenje formule (I), koje se može prečistiti prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, koje se prevodi, ukoliko se želi, u njegove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom i, koje se opciono razdvaja u njegove izomere prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, pri čemu se podrazumeva da u svakom momentu koji se smatra odgovarajućim tokom gore opisanog postupka, neke grupe (hidroksi, amino...) polaznih reagenasa ili sintetskih intermedijera mogu biti zaštićene, naknadno sa uklonjenom zaštitom i funkcionalizovane, kako zahteva sinteza.
23. Jedinjenje formule (VIA), poseban slučaj jedinjenja formule (VI) prema zahtevu 22:

gde: ♦ R2’, R3’, R4’ i R5’ nezavisno jedan od drugog predstavljaju halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -Oalkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6), ♦ T predstavlja (C1-C6)alkil grupu, (C1-C6)karboniloksi(C1-C6)alkil grupu ili di(C1-C6)alkilaminokarbonil(C1-C6)alkil grupu, ♦ R1, R6, R7, R13, A i n su, kao što su definisani za formulu (I), njegovi enantiomeri, dijastereoizomeri i atropizomeri i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.
24. Jedinjenje formule (VIA) prema zahtevu 23, u kojoj su supstituenti para (R1, R5’) identični i supstituenti para (R2’, R4’) su identični.
25. Jedinjenje formule (VIIA), poseban slučaj jedinjenja formule (VII) prema zahtevu 22:

gde: ♦ R2’, R3’, R4’ i R5’ nezavisno jedan od drugog predstavljaju halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -Oalkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6), ♦ R1, R6, R7, R13, A i n su, kao što su definisani za formulu (I), njegovi enantiomeri, dijastereoizomeri i atropizomeri i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.
26. Jedinjenje formule (VIIA) prema zahtevu 25, gde su supstituenti para (R1, R5’) identični i supstituenti para (R2’, R4’) su identični.
27. Jedinjenje formule (VIIA) prema zahtevu 26, koje je (2R)-2-{[5-{3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanska kiselina.
28. Jedinjenje formule (VIB), poseban slučaj jedinjenja formule (VI) prema zahtevu 22:

gde: ♦ R5’ predstavlja halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6), ♦ T predstavlja (C1-C6)alkil grupu, (C1-C6)karboniloksi(C1-C6)alkil grupu ili di(C1-C6)alkilaminokarbonil(C1-C6)alkil grupu, ♦ R1, R3, R6, R7, R13, A i n su, kao što su definisani za formulu (I), i gde su supstituenti para (R1, R5’) identični, njegovi enantiomeri, dijastereoizomeri i atropizomeri i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.
29. Jedinjenje formule (VIIB), poseban slučaj jedinjenja formule (VII) prema zahtevu 22:

gde: ♦ R5’ predstavlja halogeni atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6), ♦ R1, R3, R6, R7, R13, A i n su, kao što su definisani za formulu (I), i gde su supstituenti para (R1, R5’) identični, njegovi enantiomeri, dijastereoizomeri i atropizomeri i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.
30. Jedinjenje formule (VIIB) prema zahtevu 29, koje je (2R)-2-{[5-(2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanska kiselina.
31. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB), prema bilo kom od zahteva 1 do 21 ili zahteva 23 do 30, ili njegovu adicionu so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
32. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 31, za upotrebu kao pro-apoptotička sredstva.
33. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 32, za upotrebu u lečenju kancera i autoimunih bolesti i bolesti imunog sistema.
34. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 33, za upotrebu u lečenju kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera kolona, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
35. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 31 u proizvodnji lekova za upotrebu kao pro-apoptotička sredstva.
36. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 31 u proizvodnji lekova za upotrebu u lečenju kancera i autoimunih bolesti i bolesti imunog sistema.
37. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 31 u proizvodnji lekova za upotrebu u lečenju kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera kolona, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
38. Jedinjenje formule (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB), prema bilo kom od zahteva 1 do 21 ili zahteva 23 do 30, ili njegova adiciona so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom, za upotrebu kao pro-apoptotička sredstva.
39. Jedinjenje formule (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB), prema bilo kom od zahteva 1 do 21 ili zahteva 23 do 30, ili njegova adiciona so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom, za upotrebu u lečenju kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera kolona, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
40. Upotreba jedinjenja formule (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB), prema bilo kom od zahteva 1 do 21 ili zahteva 23 do 30, ili njegove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom, u proizvodnji lekova za upotrebu u lečenju kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera kolona, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
41. Kombinacija jedinjenja formule (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB) prema bilo kom od zahteva 1 do 21 ili zahteva 23 do 30, sa anti-kancerskim sredstvom, odabranim od genotoksičnih agenasa, mitotičkih otrova, antimetabolita, inhibitora proteazoma, inhibitora kinaze i antitela.
42. Farmaceutska kompozicija koja sadrži kombinaciju prema zahtevu 41, u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
43. Kombinacija prema zahtevu 41 za upotrebu u lečenju kancera.
44. Upotreba kombinacije prema zahtevu 41, u proizvodnji lekova za upotrebu u lečenju kancera.
45. Jedinjenje formule (I), (VIA), (VIB), (VIIA) ili (VIIB), prema bilo kom od zahteva 1 do 21 ili zahteva 23 do 30, za upotrebu u lečenju kancera koji zahtevaju radioterapiju. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5