RS59412B1 - Lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva - Google Patents

Lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva

Info

Publication number
RS59412B1
RS59412B1 RSP20191331A RS59412B1 RS 59412 B1 RS59412 B1 RS 59412B1 RS P20191331 A RSP20191331 A RS P20191331A RS 59412 B1 RS59412 B1 RS 59412B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
antibody
acvr1
activin
acvr2a
acvr2b
Prior art date
Application number
Other languages
English (en)
Inventor
Sarah J Hatsell
Aris N Economides
Vincent J Idone
Original Assignee
Regeneron Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Regeneron Pharma filed Critical Regeneron Pharma
Publication of RS59412B1 publication Critical patent/RS59412B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/138—Aryloxyalkylamines, e.g. propranolol, tamoxifen, phenoxybenzamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/179—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for growth factors; for growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Chemical Or Physical Treatment Of Fibers (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Diaphragms For Electromechanical Transducers (AREA)

Description

Opis
STANJE TEHNIKE
[0001] Fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP) je autozomni dominantni poremećaj koji karakteriše rana pojava, epizodna i progresivno okoštavanje mišića skeleta i povezanog vezivnog tkiva. Fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP) pokreću mutacije u unutarćelijskom domenu ACVR1 (ALK2), pri čemu velika većina menja arginin 206 u histidin (R206H) (Pignolo, R.J. et al.
2011, Orphanet J. Rare Dis.6:80). ACVR1 je tip I receptora za morfogenske proteine kosti (BMP). Veruje se da, R206H mutacija, između ostalog, povećava osetljivost receptora na aktivaciju i čini ga otpornijim na utišavanje. Nije poznato da postoji delotvorna medicinska terapija za fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP).
[0002] WO 2009/114180 A1 I Mohedas et al. (ACS Chem. Biol. 8(6): 1291-1302 (2013)) razmatraju upotrebu inhibitora malih molekula BMP signaliziranja za lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP). US 2013/041017 A1 se odnosi na supstance i postupke za regulaciji mutirane ACVR1 ekspresije na bazi male interferirajuće ribonukleinske kiseline (siRNK) za lečenje stanja koja uključuju fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP). WO 2013/063536 A1 se odnosi na neutrališuća antitela i njihove delove koji se vezuju na ActRIIB i upotrebe za lečenje stanja koja uključuju fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP). WO 2008/097541 A2 razmatra upotrebu agonista ActRIIB za lečenje stanja uključujući fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP). Kaplan et al. (Exp. Opin. Orphan Drugs 1(8): 637-649 (2013)) razmatra blokiranje aktivnosti mutiranog ACVR/ALK2 receptora za lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP).
KRATAK OPIS PRONALASKA ZA KOJI SE TRAŽI ZAŠTITA
[0003] Ovaj pronalazak obezbeđuje dobijanje antitela protiv aktivina A za upotrebu u postupku za lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP), postupak koji obuhvata isporuku subjektu koji ima fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP) delotvornog režima antitela proitv aktivina A. Opciono, to antitelo se takmiči za vezivanje sa antitelom koje obuhvata promenljive regione teškog i lakog lanca antitela označenog H4H10446P, H4H10430P ili A1. Opciono, antitelo obuhvata promenljive regione teškog i lakog lanca antitela naznačenog H4H10446P, H4H10430P ili A1. Opciono, antitelo je himerno, venirano, humanizovano ili humano antitelo. Opciono, antitelo je nedirnuto antitelo. Opciono, antitelo je humano kapa IgG1 antitelo.
KRATAK OPIS SLIKA NACRTA
[0004]
SL. 1 pokazuje podatke mikrokompjuterizovane tomografije (microCT) iz miševa koji pokazuju ektopičnu koštanu formaciju 6 nedelja posle početka isporuke tamoksifena sa i bez ACVR2A-Fc/ACVR2B-Fc lečenja. Devet od deset mFc lečenih miševa (brojevi 1 do 9) je pokazalo ektopičnu koštanu formaciju 6 nedelja posle isporuke tamoksifena pacijentu. Najčešće lokacije su zadnje noge, region vrata i grudna kost. Dva od jedanaest ACVR2A-Fc/ACVR2B-Fc lečenih miševa (brojevi 12 i 14) je pokazalo ektopičnu koštanu formaciju 6 nedelja posle isporuke tamoksifena. Ektopične koštane lezije kod ova dva miša su bile male veličine u poređenju sa onima u grupi lečenoj sa mFc i oba su se nalazila na grudnoj kosti.
SL. 2 pokazuje podatke mikrokompjuterizovane tomografije (microCT) od miševa koji pokazuju ektopičnu koštanu formaciju 4 nedelje posle početka isporuke tamoksifena sa ili bez upotrebe LDN212854 za lečenje. Brojevi 1 do 8 odgovaraju miševima lečenim tamoksifenom pomoćnim farmaceutskim sredstvom. Velike ektopične koštane kvržice su formirane kod miševa pod brojevima 1, 2, 3, 4, 5 i 7, i male ekotpične koštane kvržice su formirane kod miševa sa brojevima 6 i 8. Brojevi 9-16 odgovaraju miševima lečenim korišćenjem tamoksifena LDN212854. Male ektopične koštane kvržice su formirane kod miševa pod brojevima 9, 12 i 13. Nije bilo moguće detektovati nekakve ektopične koštane kvržice kod miševa pod brojevima 10, 11, 14, 15 ili 16.
SL. 3 pokrazuje podatke mikrokompjuterizovane tomografije (microCT) za miševe izložene ektopičnoj koštanoj formaciji lečene antitelom protiv aktivina A, izotipom poklapajučim irelevantnim kontrolnim antitelom, i ACVR2A-Fc. Antitelo protiv aktivina A je najefikasnije inhibiralo formiranje ektopičnih koštanih kvržica.
Sl. 4 pokrazuje podatke mikrokompjuterizovane tomografije (microCT) za miševe izložene ektopičnoj koštanoj formaciji lečene sa antitelom protiv aktivina A, sa izotipom poklapajučim irelevantnim kontrolnim antitelom, i antitelom protiv Acvr2a/Acvr2b. Antitelo protiv aktivina A i antitelo protiv Acvr2a/Acvr2b su inhibirali formiranje ektopičnih koštanih kvržica.
Sl. 5 pokazuje podatke mikrokompjuterizovane tomografije (microCT) za miševe izložene ektopičnoj koštanoj formaciji lečene različitim dozama antitela protiv aktivina A u poređenju sa izotipom poklapajućeg irelevantnog kontrolnog antitela. Doze između 1 mg/kg i 25 mg/kg su pokazale da su delotvorne sa 10 mg/kg kao najdelotvornijom testiranom dozom.
DEFINICIJE
[0005] Antagonisti su najčešće dati u izolovanom obliku. Ovo znači da je antagonist obično barem 50% w/w čist od ometajućih proteina i drugih kontaminanata koji nastaju od njegove proizvodnje ili prečišćavanja, ali ne isključuju mogućnost da je antagonist kombinovan sa viškom farmaceutski prihvatljivih nosača ili drugih pomoćnih sredstava predviđenih da olakšaju njegovu upotrebu. Ponekad su antagonisti barem 60, 70, 80, 90, 95 ili 99% w/w čistoće ometajućih proteina i kontaminanata od proizvodnje ili prečišćavanja.
[0006] Za potrebe klasifikovanja supstitucija amino kiselina kao konzervativnih ili nekonzervativnih, amino kiseline su grupisane kao u nastavku: Grupa I (hidrofobni bočni lanci): met, ala, val, leu, ile; Grupa II (neutralni hidrofilni bočni lanci): cys, ser, thr; Grupa III (kiseli bočni lanci): asp, glu; Grupa IV (bazni bočni lanci): asn, gln, his, lys, arg; Grupa V (ostaci koji utiču na orijentaciju lanca): gly, pro; i Grupa VI (aromatični bočni lanci): trp, tyr, phe. Konzervativne supstitucije obuhvataju supstitucije između amino kiselina u istoj klasi. Nekonzervativne supstitucije obuhvataju izmenu člana jedne od ovih klasa za član druge.
[0007] Procenat identičnosti sekvence se određuje sekvencama antitela maksimalno poravnatim prema konvenciji Kabat numerisanja za promenljivi region ili EU numerisanja za konstantni region. Za druge proteine, identičnost sekvence je moguće odrediti poravnavanjem sekvenci korišćenjem algoritama, kao što je BESTFIT, FASTA, i TFASTA u Wisconsin Genetics Software Package Release 7.0 (softverskom paketu Viskonskin genetike, izdanje 7.0), Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, WI), korišćenjem zadatih parametara praznine, ili inspekcijom, i najboljim poravnavanjem. Posle poravnavanja, ako se region antitela subjekta (npr., ceo zreli promenljivi region teškog ili lakog lanca) uporedi sa istim regionom referentnog antitela, procenat identičnosti sekvence između subjekta i referentnih regiona antitela je broj pozicija zauzetih istom amino kiselinom kod oba subjekta i referentni region antitela podeljen ukupnim brojem poravnatih položaja dva regiona, bez uračunavanja praznina, pomnožen sa 100 da bi se pretvorio u procenat.
[0008] Supstance ili postupci koje "obuhvataju" jedan ili više navedenih elemenata mogu da obuhvate druge elemente koji nisu specifično navedeni. Na primer, supstanca koja obuhvata antitelo može da obuhvata to antitelo samo, ili to antitelo u kombinaciji sa drugim sastojcima.
[0009] Humanizovano antitelo je genetički projektovano antitelo u kom CDR iz nehumanog "donorskog" antitela se kalemi na humane "akceptorske" sekvence antitela (videti, npr., Queen, US 5,530,101 i 5,585,089; Winter, US 5,225,539; Carter, US 6,407,213; Adair, US 5,859,205 i 6,881,557; Foote, US 6,881,557). Akceptorske sekvence antitela mogu da budu, na primer, zrele humane sekvence antitela, kompozit takvih sekvenci, konsenzus sekvence humanih sekvenci antitela, ili sekvence regiona klicine linije. Dakle, humanizovano antitelo je antitelo koje ima neki ili sve CDR u celini ili pretežno od antitela donatora i okvirnih sekvenci promenljivog regiona i konstantne regione, ako je prisutan, u potpunosti ili pretežno iz humanih sekvenci antitela. Slično, humanizovani teški lanac ima barem jedan, dva i obično sva tri CDR potpuno ili pretežno iz teškog lanca donorskog antitela, i okvirnu sekvencu promenljivog regiona teškog lanca i konstantnog regiona teškog lanca, ako postoji, pretežno iz humanih okvirnih sekvenci promenljivog regiona i sekvenci konstantnog regiona teškog lanca. Slično, humanizovani laki lanac ima barem jedan, dva i obično sve tri CDR potpuno ili pretežno iz lakog lanca donorskog antitela, i okvirne sekvence promenljivog regiona lakog lanca i konstantnog regiona lakog lanca, ako postoji, pretežno iz humanih okvirnih sekvenci promenljivog regiona lakog lanca i sekvenci konstantnog regiona lakog lanca. Pored nanotela i dAbs, humanizovano antitelo obuhvata humanizovani teški lanac i humanizovani laki lanac. CDR u humanizovanom antitelu je pretežno iz odgovarajućih CDR u nehumanom antitelu kada barem 85%, 90%, 95% ili 100% odgovarajućih ostataka (kao što je definisano pomoću Kabat) su identične između odgovarajućih CDR. Okvirne sekvence promenljivog regiona lanca antitela ili konstantnog regiona lanca antiela su pretežno iz humane okvirne sekvence promenljivog regiona ili humanog konstantnog regiona, prema opisanom redosledu, kada je barem 85, 90, 95 ili 100% odgovarajućih ostataka definisanih pomoću Kabata identično.
[0010] Iako humanizovana antitela često obuhvataju svih šest CDR (preporučljivo kako je definisano u Kabat) iz mišjeg antitela, ona mogu takođe da budu napravljena sa manje od svih CDR (npr., barem 3, 4, ili 5 CDR iz mišjeg antitela) (npr., Pascalis et al., J. Immunol.169:3076, 2002; Vajdos et al., Journal of Molecular Biology, 320: 415-428, 2002; Iwahashi et al., Mol. Immunol.36:1079-1091, 1999; Tamura et al., Journal of Immunology, 164:1432-1441, 2000).
[0011] Himerno antitelo je antitelo u kom zreli promenljivi regioni lakih i teških lanaca hehumanog antitela (npr., miš) se kombinuju sa mišjim konstantnim regionima lakog i teškog lanca. Takva antiela pretežno ili potpuno zadržavaju specifičnost vezivanja mišjeg antitela, i čine oko dve trežine humane sekvence.
[0012] Venirano antitelo je tip humanizovanog antitela koji zadržava neke i obično sve CDR i neke od nehumanih ostataka okvirnog promeljivog regiona od nekog nehumanog antitela, već zamenjuje druge okvirne ostatke promenljivog regiona koji mogu da doprinesu epitopima B- ili T-ćelije, na primer izloženi ostaci (Padlan, Mol. Immunol.28:489, 1991) sa ostacima iz odgovarajućih pozicija sekvence humanog antitela. Rezultat je antitelo u kom su CDR potpuno ili pretežno iz nehumanog antitela i promenljivih okvirnih regiona nehumanog antitela su napravljeni da budu sličniji humanim pomoću supstitucija.
[0013] Humano antitelo je moguće izolovati iz humanog, ili drugačijeg nastalog iz ekspresije gena humanog imunoglobulina (npr., kod transgenskog miša, in vitro ili prikazom faga). Postupci za proizvodnju humanih antitela obuhvataju trioma postupak (Oestberg et al., Cys muoma 2:361-367 (1983); Oestberg, U.S. Patent br. 4,634,664; i Engleman et al., US Patent 4,634,666). Monoklonalna antitela je moguće proizvesti transgenskim miševima koji nose gene humanog imunog sistema, kao što je Veloclmmune® miš laboratorije Regeneron Pharmaceuticals, Inc.
(Murphy, PNAS 111 no. 14, 5153-5158 (2014), Xenomouse, Jakobovits, Nature Biotechnology 25, 1134-1143 (2007) ili HuMAb miš iz laboratorije Medarex, Inc. (Lonberg, Handbook Exp. Pharmacol.181, 69-97 (2008); Lonberg et al., WO93/12227 (1993); US 5,877,397, US 5,874,299, US 5,814,318, US 5,789,650, US 5,770,429, US 5,661,016, US 5,633,425, US 5,625,126, US 5,569,825, US 5,545,806, Nature 148, 1547-1553 (1994), Nature Biotechnology 14, 826 (1996), Kucherlapati, WO 91/10741 (1991). Humana antitela je takođe moguće proizvesti postupcima prikaza faga (videti, npr., Dower et al., WO 91/17271 i McCafferty et al., WO 92/01047, US 5,877,218, US 5,871,907, US 5,858,657, US 5,837,242, US 5,733,743 i US 5,565,332).
[0014] Kada se kaže da neki antagonist zadržava svojstvo roditeljskog antitela iz kog je izvedeno, zadržavanje može da bude potpuno ili delimično. Potpuno zadržavanje aktivnosti znači aktivnost antagonista je ista unutar eksperimentalne greške ili veća nego aktivnost molekula iz kog je izvedena. Delimično zadržavanje aktivnosti znači značajno iznad prisutnog nivoa negativne kontrole (t.j., preko eksperimentalne greške) i poželjno barem 50% odgovarajuće aktivnosti molekula iz kog je izvedeno.
[0015] Dva antitela imaju isti epitop ako su u suštini sve mutacije amino kiseline u tom antigenu koje smanjuju ili eliminišu vezivanje jednog antitela smanjuju ili eliminišu vezivanje drugog. Dva antitela imaju epitope koji se preklapaju ako neke mutacije amino kiseline koje smanjuju ili eliminišu vezivanje jednog antitela smanjuju ili eliminišu vezivanje drugog.
[0016] Takmičenje između antitela je određeno ogledom u kom antitelo pod specifičnim testom ispoljava specifično vezivanje referentnog antitela na zajednički antigen (videti, npr., Junghans et al., Cancer Res. 50:1495, 1990). Antitelo koje se testira se takmiči sa referentnim antitelom ako višak antitela koje se testira (npr., barem 2x, 5x, 10x, 20x ili 100x) inhibira vezivanje referentnog antitela za barem 50%, ali poželjno 75%, 90% ili 99%, mereno u ogledu konkurentnog vezivanja. Antitela identifikovana ogledom konkurentnog vezivanja (takmičenje antitela) obuhvataju vezivanje antitela na isti epitop kao referentno antitelo i vezivanje antitela na susedni epitop dovoljno blizu vezanom epitopu pomoću referentnog antitela da dođe do sternog ometanja.
DETALJAN OPIS
I. Pregled
[0017] Ovde se daju antitela protiv aktivina A za upotrebu u postupku za lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP). Takvi postupci obuhvataju isporučivanje subjektu koji ima fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP) delotvorni režim antitela aktivin A. Ovde su opisani antagonisti antitela aktivina A.
II. ACVR1, ACVR2A, ACVR2B i aktivin A
[0018] Transformacioni faktor rasta β (TGF β) superfamilija liganda obuhvata, na primer koštane morfogenetske proteine (BMPs) i faktore rasta i diferencijacije (GDFs). Receptori za ove ligande su heteromerni kompleksi receptora napravljeni od tipa I i tipa II transmembranskih receptora serin/treonin kinaze. Primeri tipa I receptora obuhvataju aktivin receptor tipa IA (ACTRIA, ACVR1, ili ALK2), BMP receptor tipa IA i BMP receptor tipa IB. Primeri tipa II receptora obuhvataju receptore aktivina tipa IIA i IIB (ACTRIIA ili ACVR2A i ACTRIIB ili ACVR2B) i BMP receptor tipa II. Ligandi TGF β superfamilije svaki ima različite afinitete za različite recreptore tipa I i tipa II.
[0019] Oba tipa I i tip II receptora imaju vanćelijski domen vezivanja liganda (ECD) i unutarćelijski domen serin/treonin kinaze. Pored toga, receptori tipa I imaju region bogat glicinom/serinom (GS-kutija) koji prethodi domenu kinaze i L45 petlju unutar domena kinaze. Oba receptora rade zajedno za ligande da bi aktivirali nizvodne signalne putanje, kao što so signalne putanje Smad i ne-Smad. Aktivacija obuhvata vezivanje liganda, oligomerizaciju liganda- receptora i transfosforilaciju GS kutije receptora tipa I pomoću kinaze receptora tipa II. Kinaza receptora tipa II je konstitutivno aktivna i ima ulogu u vezivanju liganda i aktivaciji receptora tipa I.
[0020] ACVR1, takođe poznat kao aktivin tipa I receptora, ACVR1A, ACVRLK2, ili ALK2, je receptor tipa I za TGF β superfamiliju liganda. ACVR1 ima aktivnost serin/treonin kinaze i fosforilate Smad proteina i aktivira nizvodne signalne putanje. ACVR1 se nalazi u brojnim tkivima tela uključujući mišiće skeleta i hrskavicu i pomaže da se kontroliše rast i razvoj kostiju i mišića. Kao što je ovde opisano na drugom mestu, izvesne mutacije na ACVR1 genu prouzrokuju FOP. Primeri ACVR1 aktivitnosti obuhvataju sposobnost da se veže na ligande, sposobnost da se formira kompleks sa receptorom tipa II, ili sposobnost da se aktiviraju nizvodne signalne putanje, kao što je Smad putanja.
[0021] ACVR2, je takođe poznat kao tip II receptora atkivina, je receptor tipa II za TGF β superfamiliju liganda. Postoje barem dva ACVR2 receptora, na primer, aktivin receptor tipa IIA (ACVR2A ili ACTRIIA) aktivin receptora tipa IIB (ACVR2B ili ACTRIIB). Upućivanje na ACVR2 obuhvata bilo koji ili oba, i ACVR2A i ACVR2B. ACVR2A i ACVR2B može da bude izražen u više tkiva, uključujući mišić skeleta, želudac, srce, endometrijum, testise, prostatu, jajnik, i neutralna tkiva.
[0022] Kod vezivanja liganda, ACVR2 receptor formira kompleks sa receptorom tipa I, kao što je ACVR1, i fosforilati GS kutija tipa I receptora, čime se povećava aktivnost kinaze receptora tipa I. Primeri za ACVR2A i ACVR2B aktivnost obuhvataju sposobnost da se veže na ligande, sposobnost da se formira kompleks sa receptorom tipa I, ili sposobnost da se fosforilizuje receptor tipa I.
[0023] Primer oblika humanog ACVR2A ima u bazi podataka Swiss Prot pristupni broj P27037. Ostaci 1-19 su signalni peptid, ostaci 20-135 su vanćelijski domen, ostaci 59-116 su tipovi I i II domena receptora aktivina, ostaci 136-161 su transmembranski domen i ostaci 162-513 su citoplazmni domen. Primer oblika humanog ACVR2B ima dodeljen u bazi podataka Swiss Prot pristupni broj Q13705. Ostaci 1-18 su signalna sekvenca, ostaci 19-137 su vanćelijski domen, ostaci 27-117 su tipovi I i II domena receptora aktivina, ostaci 138-158 su transmembranski domen i ostaci 159-512 su citoplazmni domen. Primer oblika humanog ACVR1 ima u bazi podataka Swiss Prot pristupni broj Q04771. Ostaci 1-20 su signalna sekvenca, ostaci 21-123 su vanćelijski domen, ostaci 33-104 su tipovi I i II domena receptora aktivina, ostaci 124-146 su transmembranski domen i ostaci 147-509 su citoplazmni domen. Upućivanje na bilo koji od ACVR1, ACVR2A i ACVR2B obuhvata ove oblike za primer, poznate izoforme i njihove polimorfizme, kao što su oni koji su navedeni u bazi podataka Swiss Prot, poznate oblike iz drugih vrsta, i druge varijatne koje imaju barem 90, 95, 96, 97, 98 ili 99% identičnost sekvence sa oblikom datim kao primer.
[0024] Ostaci oblika ACVR2A, ACVR2B i ACVR1 druge sekvence koje nisu navedene kao primer definisani gore su numerisani prema maksimalnom poravnanju sa odgovarajućim sekvencama datim kao primer tako da se poravnatim ostacima dodeljuje isti broj. Supstitucije iz sekvenci datih kao primer mogu biti konzervativne ili nekonzervativne supstitucije. Upućivanje na ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B takođe obuhvata nedirnute vanćelijske domene (npr., ostatke 20-135, 19-137 ili 21-123 od ACVR2A, ACVR2B i ACVR1, prema opisanom redosledu) ili njihov deo bez ili pretežno bez transmembrane i citoplazmni deo. Delovi vanćelijskog domena zadržavaju dovoljno ostataka nedirnutog vanćelijskog domena da bi se vezao barem jedan ligand ili kontra receptor koji se veže na nedirnuti vanćelijski domen i time antagonizuje relevantni receptor (npr., ostaci 59-116, 27-117 ili 33-104 od ACVR2A, ACVR2B i ACVR1, prema opisanom redosledu).
[0025] Aktivin A kod ljudi može da postoji kao homo ili heterodimerni protein. Homodimerni protein sadrži homodimerni beta A par podjedinice. Heterodimernni protein sadrži beta podjedinicu i beta B, beta C ili beta E podjedinicu (t.j., beta A beta B, beta A beta C, ili beta A beta E. Te podjedinice su svaka izražena kao prekursorski polipeptidi uključujući signalni peptid, propeptid i zreli polipeptid. Primer oblika humanog beta A prekursora podjedinice je polipeptid dužine 426 amino kiselina naznačen u bazi podataka Swiss Prot pod brojem P08476 čiji su ostaci 1-20 signalni peptid, ostaci 21-310 su propeptid i ostaci 311-426 su zreli polipeptid. Primer oblika beta B podjedinice prekursorskog polipeptida je naznačen brojem iz baze podataka Swiss Prot P09529 čiji su ostaci 1-28 signalni peptid, ostaci 29-292 propeptid i ostaci 293-407 zreli polipeptid. Primer oblika beta C podjedinice je naznačen brojem u bazi podataka Swiss Prot P55103, čiji su ostaci 1-18 signalni peptid, ostaci 19-236 su propeptid i ostaci 237-352 su zreli polipeptid. Primer oblika beta E podjedinice prekursora je naznačen brojem u bazi podataka Swiss Prot P58166, čiji su ostaci 1-19 signalni peptid, ostaci 20-236 su propeptid i ostaci 237-350 su zreli polipeptid. Nekoliko varijanata ovih sekvenci je poznato kao što je opisano u bazi podataka Swiss Prot. Upućivanje na aktivin A obuhvata bilo koji od beta A homodimera, beta A beta B, beta A beta C i beta A beta E oblika heterodimera, kao i ove podjedinice, kao i njihove prekursore u kojima su podjedinice spojene na propeptid i/ili signalni peptid definisan primerom Swiss Prot sekvenci koje su date ili drugim humanim oblicima koji se javljaju u prirodi ovih sekvenci. Aktivin A signalizira kroz vezivanje na ACVR2A ili ACVR2B, ali nije poznato da bude ligand za ACVR1.
III. Antagonisti od ACVR1, ACVR2A, ACVR2B
[0026] Antagonisti od tipa I receptora ACVR1 i od tipa II receptora ACVR2 proteina (npr., ACVR2A i/ili ACVR2B) su ovde opisani za lečenje FOP. Takvi antagonisti mogu da antagonizuju receptore direktno vezivanjem na receptor (kao za antitelo na ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B) ili indirektno vezivanjem na ligand ili kontra receptor i inhibiranje liganda ili kontra receptora od vezivanja na ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B (kao protein fuzije od ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B) između ostalih mehanizama. Antagonisti od ACVR2A i ACVR2B mogu takođe da se vežu na aktivin A.
[0027] Antagonist ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B opisan ovde može inhibirati ili smanjiti aktivnost ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B za barem 1%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% ili više u odnosu na kontrolnu ćeliju ili model životinje koji nije primio antagonist.
[0028] Antagonist može obuhvatiti, na primer, ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B polipeptid, kao što je vanćelijski domen, antitelo antagonist, ili inhibitor malog molekula.
A. Vanćelijski domeni ACVR1, ACVR2A i ACVR2B polipeptidi
[0029] Antagonisti obuhvataju ACVR1, ACVR2A i ACVR2B proteine i njihove fragmente delotvorne da inhibiraju barem jednu aktivnost od ACVR1, ACVR2A i ACVR2B, prema opisanom redosledu. Takvi antagonisti obično obuhvataju vanćelijski domen ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B ili njihov deo. Poželjno, takvi vanćelijski domeni su potpuno ili pretežno bez transmembranskog i citoplazmnog regiona (tj., bilo koji preostali ostaci iz ovih regiona nemaju značajno dejstvo na funkciju vanćelijskog domena). Drugim rečima, ACVR2A, ACVR2B ili ACVR1 komponenta takvih antagonista se sastoji od ili se pretežno sastoji od celog vanćelijskog domena od ACVR2A, ACVR2B ili ACVR1 ili njegovog dela kako je definisano gore. Takvi antagonisti mogu ili ne moraju da obuhvate druge komponent(e) distinktivne od ACVR2A, ACVR2B ili ACVR1 kako je detaljno opisano dole u tekstu. Takvi vanćelijski domeni bez ili pretežno bez transmembranskog i citoplazmnog domena su rastvorljivi. Takvi vanćelijski domeni mogu da funkcionišu kao antagonist vezivanjem na rastvorljivi ligand ili kontra receptor, delotvorno takmičeći se sa vezivanjem liganda ili kontrareceptora na ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B receptorom na površini ćelije, čime se moduliše (redukuje) dostupnost liganda ili kontrareceptora in vivo.
[0030] Rastvorljivi vanćelijski domeni mogu početno da budu izraženi sa signalnom sekvencom, koja se cepa u toku ekspresije. Signalna sekvenca može da bude prirodna signalna sekvenca ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B, kao što je ona opisana u U.S. patentu br.7,709,605, ili može da bude signalna sekvenca iz različtog proteina kao što je pčelinji melitin (HBM) ili tkivni aktivator plazminogena (TPA). Alternativno, rastvorljive vanćelijske ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B polipeptide je moguće sintetisati ili izraziti bez signalne sekvence.
[0031] ECD ili domeni vezivanja liganda od ACVR1, ACVR2A i ACVR2B su visoko očuvani među vrstama uključujući miša i čoveka. ECD domeni sadrže cisteinom bogat region i C-terminalni repni region. ECD od ACVR1, ACVR2A i ACVR2B se vezuju na različitu grupu TGF β familije liganda, uključujući, na primer, aktivin A, miostatin (GDF- 8), GDF-11 i BMP. Videti, npr., Souza et al. (2008) Molecular Endocrinology 22(12):2689-2702.
[0032] Primeri ACVR2A i ACVR2B polipeptida i rastvorljivih ACVR2A i ACVR2B polipeptida obuhvataju one koji su opisani u U.S. patentu br. 7,842,633; U.S. patentu br. 7,960,343; i U.S. patentu br.7,709,605.
[0033] ECD od ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B polipeptida može da bude mutiran tako da varijantni polipeptid ima izmenjena svojstva vezivanja liganda (npr., specifičnost ili afinitet vezivanja). Neki varijantni ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B polipeptidi imaju izmenjen afinitet vezivanja (npr., povišen ili smanjen) za specifični ligand. Varijante imaju barem 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% identičnost sekvence prema sekvencama koje se prirodno javljaju ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B, i zadržavaju biološku aktivnost i otuda imaju ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B aktivnost kako je ovde opisano na drugom mestu. Aktivne varijante i fragmenti od ACVR2A i ACVR2B su opisane, na primer, u U.S. patentu br.7,842,633; U.S. patentu br.7,960,343; i U.S. patentu br.7,709,605.
[0034] Ogledi za merenje ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B aktivnosti su opisani u npr., U.S. patentu br. 7,842,633; U.S. patentu br. 7,960,343; i U.S. patentu br. 7,709,605. Na primer, varijanta polipeptida ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B može biti analizirana za sposobnost da veže ligand ili za sposobnost da spreči vezivanje liganda na ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B protein receptor.
B. Proteini fuzije
[0035] Gore opisani polipeptidi ACVR1, ACVR2A i ACVR2B mogu da budu izrađeni kao proteini fuzije koji imaju barem deo ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B polipeptid i jedan ili više domena fuzije.
[0036] Domeni fuzije obuhvataju konstantni region teškog lanca imunoglobulina (Fc), humani serumski albumin (HSA), glutation S transferaze (GST), protein A, protein G, ili bilo koji domen fuzije koji može biti koristan za stabilizovanje, rastvaranje ili multimerizovanje proteina fuzije.
[0037] Fc domen teškog lanca imunoglobulina je poželjni domen za proteine fuzije. Fuzije sa Fc delom imunoglobulina daju poželjna farmakokinetička svojstva na širokom opsegu proteina (npr., povećava stabilnost i/ili poluživot proteina). Dakle, ovde su opisani proteini fuzije obuhvataju barem jedan ECD od ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B spojeni na Fc domen imunoglobulina.
[0038] Fc domen može biti iz imunoglobulina. Bilo koja od različitih klasa imunoglobulina može
1
da se koristi, uključujući IgG, IgA, IgM, IgD i IgE. Unutar IgG klase postoje različite podklase ili izotipovi, uključujući, na primer, IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4. U jednom slučaju, Fc protein fuzije obuhvata Fc domen od IgG molekula. U još jednom slučaju, Fc domen je iz IgG1 molekula. Molekul imunoglobulina može biti od bilo kog tipa životinje, uključujući, na primer, sisara, glodara, ljudskog bića, miša, pacova, hrčka ili zeca. U jednom slučaju, imunoglobulin Fc domena je iz sisara. U drugom slučaju, Fc domen je iz ljudskog bića. U jednom drugom slučaju, Fc domen je iz glodara, kao što je miš ili pacov. U specifičnom slučaju, Fc domen proteina fuzije je iz humanog IgG1.
[0039] Ovde opisani proteini Fc fuzije mogu biti napravljeni bilo kojim poznatim postupkom u ovoj oblasti. Proteini Fc fuzije mogu obuhvatiti barem CH2 i CH3 regione, i obično barem deo zglobnog regiona. Iako CH1 region može biti prisutan, obično je izostavljen u proteinima fuzije.
[0040] Fuzija može da bude napravljena na bilo kom mestu unutar Fc dela konstantnog domena imunoglobulina. Fuzije je moguće izvesti na C terminusu od Fc dela konstantnog domena, ili neposrednom N terminalu do CH1 regiona teškog lanca. Moguće je izabrati specifična mesta da bi se optimizovale karakteristike biološke aktivnosti, izlučivanja ili vezivanja proteina Fc fuzije.
[0041] U nekim slučajevima, nukleinska kiselina koja kodira ECD od ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B se spaja C terminusom na nukleinsku kiselinu koja kodira N terminus imunoglobulinske sekvence konstantnog domena. U drugim slučajevima, N terminusne fuzije su takođe moguće. Takođe je moguće spojiti ECD od ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B na oba, i na N terminus i na C terminus imunoglobulinske sekvence konstantnog domena.
[0042] Za proizvodnju fuzija imunoglobulina, videti takođe U.S. patent br.5,428,130, U.S. patent br. 5,843,725, U.S. patent br.6,018,026 i WO2005/070966.
[0043] Protein fuzije moguće je proizvesti, na primer, rekombinantnom ekspresijom nukleinske kiseline koja kodira protein fuzije. Na primer, protein fuzije moguće je napraviti fuzijom nukleinske kiseline koja kodira ECD od ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B u nukleinsku kiselinu koja kodira Fc domen. ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B ECD nukleinska kiselina mogu biti fuzionisani na N terminus nukleinske kiseline koji kodira Fc domen ili mogu biti fuzionisani na C terminus gena koji kodira Fc domen. Alternativno, ECD može biti fuzionisan na bilo kom položaju Fc domena.
[0044] ECD proteini fuzije mogu takođe da obuhvate vezivač. U slučaju proteina Fc fuzije, vezivač može da bude pozicioniran između ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B ECD i Fc domena, opciono zamenjuje deo ili ceo zblobni region. Vezivač može da bude 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30, 50 ili više amino kiselina koje su relativno oslobođene sekundarne strukture. Vezivač može da bude bogat ostacima glicina i prolina i može, na primer, da sadrži ponavljanje sekvenci treonina/serina i glicina (npr., TG4ili SG4ponavljanja).
[0045] Dva ili više ECD Fc proteina fuzije moguće je spojiti zajedno vezivačem. U takvim slučajevima, vezivač može da bude pozicioniran između ECD ili vezivač može da bude pozicioniran između Fc domena da bi se spojili proteini fuzije. Na primer, 1, 2, 3, 4 ili više ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B Fc proteina fuzije moguće je spojiti.
[0046] Primeri ACVR2A i/ili ACVR2B ECD proteina fuzije su opisani, kao oni opisani u U.S. patentu br.7,842,633; U.S. patentu br.7,960,343; i U.S. patentu br.7,709,605.
[0047] Jedan primer ACVR2A antagonista je poznat kao Sotatercept (takođe se zove ACE-011). Sotatercept sadrži ECD od ACVR2A spojenog na humani IgG1 Fc domen i opisan je detaljno u radu koji su napisali Carrancio et al., (Karancio i saradnici ) (2014) British J Haematology.
165(6):870-872.
[0048] Jedan primer ACVR2B antagonista je poznat kao ACE-031. ACE-031 sadrži ECD od ACVR2B fuzionisanog na humani IgG1 Fc domen i opisan je detaljno u Sako et al., (2010) J. Biol. Chem.285(27):21037-21048.
[0049] Primeri ACVR1 ECD proteina fuzije su poznati, kao što su oni koje su opisali Berasi, et al., (2011) Growth Factors, 29(4):128-139.
C. Hibridni ECD proteini fuzije
[0050] Hibridni ili multispecifični antagonisti ECD proteina fuzije su takođe opisani ovde. Hibridni ECD proteini fuzije mogu obuhvatiti kombinaciju dva ili više ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B ECD. Na primer, proteini fuzije mogu obuhvatiti 1, 2, 3, 4 ili više molekula od ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B ECD. U jednom slučaju, antagonist obuhvata ACVR2A ECD vezan na ACVR2B ECD. U jednom drugom slučaju, antagonist još obuhvata Fc domen.
[0051] U jednom slučaju, protein fuzije može da obuhvati jedan ili više molekula ACVR2A ECD i jedan ili više molekula ACVR2B ECD. U drugom slučaju, protein fuzije može da obuhvati jedan ili više molekula ACVR1 ECD i jedan ili više molekula ACVR2A ECD. U drugom slučaju, protein fuzije može da obuhvati jedan ili više molekula ACVR1 ECD i jedan ili više molekula ACVR2B ECD.
[0052] U jednom slučaju, protein fuzije može da obuhvati jedan ili više ACVR2A ECD-Fc proteina fuzije i jedan ili više ACVR2B ECD-Fc proteina fuzije koji su kompleksirani zajedno. U jednom slučaju, protein fuzije obuhvata jedan ili više ACVR1 ECD-Fc proteina fuzije i jedan ili više ACVR2A ECD-Fc proteina fuzije koji su kompleksirani zajedno. U jednom slučaju, protein fuzije obuhvata jedan ili više ACVR1 ECD-Fc proteina fuzije i jedan ili više ACVR2B ECD-Fc proteina fuzije koji su kompleksirani zajedno. U takvim slučajevima, proteini fuzije mogu biti spojeni preko svojih Fc domena, na primer, putem barem jedne disulfidne veze ili sekvence vezivača. Alternativno, ECD delovi proteina fuzije mogu biti spojeni sekvencom vezivača.
[0053] U jednom slučaju, taj antagonist obuhvata ACVR2A ECD spojen na prvi Fc domen i ACVR2B ECD spojen na drugi Fc domen. U takvim slučajevima, Fc domeni mogu biti kompleksirani jedan sa drugim. U drugom slučaju, antagonist obuhvata vezivač između ACVR2A i ACVR2B ECD, svaki fuzionisan na Fc domen.
[0054] Proteine fuzije moguće je konstruisati da generišu ACVR1, ACVR2A, i/ili ACVR2B antagoniste u tandem formatu. U jednom slučaju, protein fuzije obuhvata dva ili više ECD iz ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B u tandemu posle čega sledi Fc domen. U nekim slučajevima ECD promenjeni u tandemu su odvojeni sekvencom vezivača. Takav tandem protein fuzije može obuhvatiti 1, 2, 3, 4 ili više ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B ECD.
D. Antagonisti antitela
[0055] ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B antagonist obuhvata antitela protiv (drugim rečima specifično se vezuje na) bilo koji od ovih receptora, poželjno antitela koja imaju epitop unutar vanćelijskog domena. Specifično vezivanje antitela ili proteina fuzije na njegov ciljni antigen znači afinitet od barem 10<6>, 10<7>, 10<8>, 10<9>, ili 10<10>M<-1>. Specifično vezivanje je detektibilno veće magnitude i razlikuje se od nespecifičnog vezivanja koje nastaje na manje od jednom nepovezanom cilju. Postupci za dobijanje antitela su poznati u ovoj oblasti. Videti, na primer, Kohler & Milstein (1975) Nature 256:495-497; i Harlow & Lane (1988) Antibodies: a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Lab., Cold Spring Harbor, NY.
[0056] Moguće je koristiti bilo koje antitelo koje inhibira ili smanjuje aktivnost ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B (npr., antitelo antagonist). Takva ACVR2A i ACVR2B antitela obuhvataju, na primer, ona antitela opisana u U.S. patentu br.8,486,403, U.S. patentu br.8,128,933, WO2009/137075, i Lach-Trifilieff, et al. (2014) Mol. Cell Biol. 34(4):606-618. Humanizovani, himerni i venirovani oblici bilo kog od ovih antitela su obuhvaćeni kao anttiela koja se takmiče za vezivanje sa njima.
[0057] U jednom slučaju, antielo je anti-ACVR2A antitelo. U drugom slučaju, antitelo je anti-ACVR2B antitelo. U drugom slučaju, antitelo može da bude bispecifično antitelo protiv i ACVR2A i ACVR2B. U drugom slučaju, antitelo je anti-ACVR1 antitelo. U drugom slučaju, antitelo može da bude bispecifično antitelo protiv oba, i ACVR1, i ACVR2A ili protiv oba, i ACVR1, i ACVR2B.
[0058] Pojam "antitelo" obuhvata nedirnuta antitela sa dva para teškog i lakog lanca, fragmente antitela koja mogu da vežu antigen (npr.,Fab,F(ab’)2, Fv, antitela pojedinačnog lanca, diatela, himere antitela, hibridna antitela, bispecifična antitela, humanizovana antitela, i slično), rekombinantne peptide koji obuhvataju gore navedeno.
[0059] "Fragmenti antitela" obuhvataju deo nedirnutog antitela, poželjno region koji se vezuje na antigen ili promenljivi region nedirnutog antitela. Primeri fragmenata antitela obuhvataju Fab, F(ab’)2, i Fv fragmente; diatela; linearna antitela (Zapata et al. (1995) Protein Eng.10:1057-1062); molekule antitela od samo jednog lanca; i višestruko specifična antitela formirana iz fragmenata antitela.
[0060] Antitelo može da bude monoklonsko ili poliklonsko. "Monoklonsko antitelo" je antitelo dobijeno iz populacije pretežno homogenih antitela, to znači, pojedinačna antitela koja obuhvataju populaciju koja su identične izuzev za moguće mutacije koje se prirodno javljaju i koje mogu biti prisutne u manjim količinama. Monoklonska antitela su često visoko specifična, pošto su
1
usmerena protiv pojedinačnog antigenskog mesta. Pored toga, nasuprot uobičajenim preparatima (poliklonskog)antitela koji obično obuhvataju različita antitela usmerena protiv različitih determinanata (epitopa), svako monoklonsko antitelo je obično usmereno protiv pojedinačnog determinanta na antigenu. Modifikator "monoklonski" označava karakter antitela kako je dobijeno od pretežno homogene populacije antitela, kao što su ona proizvedena klonalnom populacijom B ćelija, i ne zahteva proizvodnju antitela bilo kojim specifičnim postupkom.
[0061] Monoklonalna antitela za upotrebu kako je ovde dato moguće je napraviti pomoću hibridoma postupka koji su prvo opisali Kohler et al. (1975) Nature 256:495, ili neke njegove modifikacije. Obično, životinja, kao što je miš, je imunizovana sa rastvorom koji sadrži antigen (npr., ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B polipeptid, ili aktivin A posebno vanćelijski domen (u receptorima) ili njegovom delu).
[0062] Imunizaciju je moguće izvesti mešanjem ili emulzifikovanjem rastvora koji sadrži antigen u fiziološkom rastvoru, poželjno u adjuvansu kao što je Freundov kompletni adjuvans, i ubrizgavanjem mešavine ili emulzije parenteralno. Posle imunizacije životinje, slezina (i opciono, nekoliko velikih limfnih čvorova) su uklonjeni i razdruženi u pojedinačne ćelije. Ćelije slezine moguće je analizirati nanošenjem ćelijske suspenzije na ploču ili pregradu obloženu antigenom od interesa. B ćelije koje izražavaju imunoglobulin vezan na membranu specifične za taj antigen vezan na ploču i ne ispiraju se. B ćelije dobijene kao rezultat, ili sve razdružene ćelije slezine, su zatim uvedene da bi se spojile sa ćelijama mijeloma da bi se formirali hibridomi, i kultivisane su u selektivnoj podlozi. Ćelije dobijene kao rezultat su raspoređene na ploče serijskim razblaživanjem i analizirane za proizvodnju antitela koja specifično vezuju antigen od interesa (i koje se ne vezuju na nesrodne antigene). Izabrana monoklonska antitela (mAb) koja izlučuju hibridome se zatim kultivišu bilo in vitro (npr., u bočicama za kulturu tkiva ili šupljim reaktorima vlakana), ili in vivo (kao što su ascite kod miševa).
[0063] Alternativno, monoklonska antitela moguće je napraviti rekombinantnim DNK postupcima (videti, npr., U.S. patent br. 4,816,567). Monoklonska antitela moguće je takođe izolovati iz biblioteka antitela faga korišćenjem opisanih tehnika kod, na primer, Clackson et al. (Klakson i saradnici) (1991) Nature 352:624-628; Marks et al. (1991) J. Mol. Biol.222:581-597; i U.S. patent br. 5,514,548.
[0064] "Antitela" obuhvataju himerna, venirana, humanizovana i humana monoklonalna antitela protiv bilo kog od ACVR1, ACVR2A, ACVR2B i aktivina A kao što je definisano gore u tekstu.
[0065] Zavisno od sekvence amino kiseline konstantnog domena njihovih teških lanaca, imunoglobulini mogu biti dodeljeni različitim klasama. Postoji pet glavnih klasa imunoglobulina: IgA, IgD, IgE, IgG, i IgM, i neke od ovih je moguće dodatno podeliti u podklase (izotipove), npr., IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, i IgA2. Konstantni domeni teškog lanca koji odgovaraju različitim klasama imunoglobulina se zovu alfa, delta, epsilon, gama, i mu, prema opisanom redosledu. Strukture podjedinica i trodimenzionalne konfiguracije različitih klasa imunoglobulina su dobro poznate.
[0066] Postojeća monoklonska antitela ili Fc proteine fuzije mogu biti bilo koje od različitih klasa antitela. U jednom izvođenju, monoklonsko antitelo je IgG klasa antitela. U drugim izvođenjima, monoklonsko antitelo može biti IgM, IgE, IgD, ili IgA klase. U specifičnim izvođenjima, antitelo je izotip od IgG, kao što je, IgG1, IgG2, IgG3 ili IgG4, specifično humani IgG1, IgG2, IgG3 ili IgG4.
[0067] Jedna od nekoliko amino kiselina na amino ili karboksi terminusu lakog i/ili teškog lanca, kao što je lizin C terminusa od teškog lanca, može da nedostaje ili da bude izveden kao derivat u nekoj proporciji ili potpuno od tih molekula. Supstitucije je moguće napraviti u konstantnim regionima da bi se smanjila ili povećala funkcija efektora kao što je komplementom posredovana citotoksičnost ili ADCC (videti, npr., Winter et al., US patent br.5,624,821; Tso et al., US patent br. 5,834,597; i Lazar et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103:4005, 2006), ili da bi se produžio poluživot kod ljudi (videti, npr., Hinton et al., J. Biol. Chem.279:6213, 2004). Primeri supstitucija obuhvataju Gln na poziciji 250 i/ili Leu na poziciji 428 (EU numeracija) za povećanje poluživota nekog antitela. Supstitucija na bilo kojoj od pozicija 234, 235, 236 i/ili 237 smanjuje afinitet za Fc γ receptore, specifično Fc γRI receptor (videti, npr., US 6,624,821). Opciono, pozicije 234, 236 i/ili 237 za humani IgG2 jesu supstituisane sa alaninom i pozicija 235 sa glutaminom. (Videti, npr., US 5,624,821). Funkcije efektora moguće je takođe smanjiti supstitucijom EFLG na pozicijama 232-236 sa PVA (videti WO14/121087). Opciono, S na poziciji 428 je moguće zameniti sa P, posebno u humanom IgG4 da bi se smanjila razmena između endogenih i eksogenih imunoglobulina. Druge varijacije mogu da dodaju ili uklone mesta post-translacione modifikacije, kao što je na N vezana glikosliacija kod N-X-S/T motiva. Varijacije takođe mogu obuhvatiti uvođenje kvržica (t.j., zamenu jedne ili više amino kiselina sa većim amino kiselinama) ili šupljine (t.j., zamenu jedne ili više amino kiselina većim amino kiselinama) da bi se promovisalo formiranje heterodimera između teških lanaca za proizvodnju bispecifičnih antitela. Primeri supstitucija da bi se formirao par čvora (izbočine) i rupe su T336Y i Y407T, prema opisanom redosledu (Ridgeway et al., Protein Engineering vol.9 no.7 pp.617-621, 1996). Varijacije takođe mogu obuhvatiti mutacije koje smanjuju interakciju proteina A (npr., H435R i Y436F) u EU sistemu numeracije. Bispecifična antitela u kojima jedan teški lanac ima takvu varijaciju, a drugi nema, mogu biti izdvojeni iz svojih roditeljskih antitela putem proteina-A afinitetne hromatografije.
[0068] Antitela koja se specifično vezuju na aktivin A su opisana ovde. Takva antitela mogu specifično da se vežu na bilo koje ili sve oblike beta A beta A, beta A beta B, beta A beta C and beta A beta E oblike od aktivina A. Neka antitela se specifično vezuju na samo jedan od ovih oblika (t.j., beta A beta A, beta A beta B, beta A beta C ili beta A beta E). Specifičnost za beta A beta B, beta A beta C i beta A beta E oblike moguće je dati putem epitopa unutar beta B, beta C ili beta E podjedinice, prema opisanom redosledu, ili za epitop za koji doprinose obe komponente heterodimera. Specifičnost za beta A beta može da bude dato putem epitopa koji doprinosi sa oba molekula unutar homodimera (npr., na prednjoj strani podjedinica). Neka antitela se
1
specifično vezuju na sve ove oblike aktivina A, u kom slučaju epitop je obično na beta A podjedinici. Antitela obično imaju epitope unutar zrele komponente polipeptida proteina prekursora. Neka antitela se specifično vezuju na bilo koji ili sve oblike aktivina A bez vezivanja na humani inhibin, koji postoji u obliku alfa (Swiss Prot P05111) beta A ili alfa beta B heterodimera. Neka antitela se specifično vezuju na bilo koji ili sve oblike aktivina A i vezuju se na bilo koji ili oba oblika humanog inhibina. Iako se veruje da takva antitela inhibiraju prenos signala aktivina A kroz jedan ili više njegovih kontrareceptora, ACVR2A i/ili ACVR2B i/ili BMPR2, razumevanje mehanizma nije neophodno za upotrebu takvih antitela u postupcima lečenja fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP).
[0069] Prijavljen je znatan broj antitela protiv aktivina A. Na primer, US2015/00373339 opisuje humana antitela naznačena H4H10423P, H4H10424P, H4H10426P, H4H10429P, H4H10430P, H4H10432P2, H4H10433P2, H4H10436P2, H4H10437P2, H4H10438P2, H4H10440P2, H4H10442P2, H4H10445P2, H4H10446P2, H4H10447P2, H4H10447P2, H4H10448P2, H4H10452P2. US 8,309,082 opisuje humana antitela A1-A14. Mišja antitela protiv aktivina A su dostupna od nekoliko komercijalnih dobavljača, kao što je MAB3381 od R&D Systems ili 9H16 od Novus Biologicals ili MM0074-7L18 (ab89307) AbCam.
[0070] Preporučena antitela imaju afinitet za aktivin A (izmereno na 25°C kao u Primeru 3 iz US2015/00373339) barem 10<8>M<-1>, 10<9>M<-1>, 10<10>M<-1>, 10<11>M<-1>, 10<12>M<-1>, ili 10<13>M<-1>. Neka antitela imaju afinitet unutar opsega od 10<9>-10<12>M<-1>. Preporučena antitela inhibiraju prenos signala aktivina A sa IC50 manjim od 4 nM, i poželjno manjim od 400 pM ili 40 pM. Neka antitela inhibiraju prenos signala sa i IC50 u opsegu od 4 nM do 10 pM ili 3,5 nM do 35 pM.
[0071] Inhibiciju prenosa signala je moguće izmeriti kao u Primeru 6 u US20150037339, koji je sažet kao u nastavku. Humana A204 linija ćelije rabdomiosarkoma je preneta sa plazmidom reporterom Smad 2/3-luciferaze da bi se proizvela linija ćelije A204/CAGAx12-Luc. A204/CAGAx12-Luc ćelije su zadržane u McCoy (MekKojevim) 5A suplementirane sa 10% serumom goveđeg fetusa, penicilinom/streptomicinom/glutaminom i 250 µg/mL od G418. Za bioogled, A204/CAGAx12-Luc ćelije su zasejane na ogledne ploče sa 96 pregrada sa 10.000 ćelija/pregadi u podlozi sa malo seruma, 0,5% FBS i OPTIMEM, i inkubirane na 37°C i 5% CO2 tokom noći. Aktivin A je generalno razblažen u odnosu 1:3 od 100 do 0,002 nM i dodat u ćelije na početku istovremeno kad i kontrola koja ne sadrži aktivin. Antitela su serijski razblažena na 1:3 počevši od 100 do 0,002 nM, 1000 do 0,02 nM, ili 300 do 0,005 nM uključujući kontrolne uzorke koji sadrže bilo odgovarajuće izotipno kontrolno antitelo ili ne sadrže antitelo i dodate su u ćelije sa konstantnom koncentracijom od 100 pM aktivina A.
[0072] Neka antitela inhibiraju vezivanje aktivina A na ACVR2A i/ili ACVR2B i/ili BMPR2 za barem 1%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99%, kako je izmereno kada je receptor izražen iz ćelije ili je vanćelijski domen spojen fuziono sa Fc domenom kao protein fuzije, i protein fuzije je imobilisan na nosač (npr., Biacore senzorski čip). Kod takvih merenja,
1
antitelo i aktivin A treba da budu prisutni u jednakim molarnim količinama i receptor ili vanćelijski domen u višku.
[0073] Neka antitela se vežu na epitop unutar ostatka 321-343 ili 391-421 od aktivina A pune dužine, koji odgovaraju C11-S33 i C81-E111 zrelog proteina.
[0074] Primer antitela korišćenog u ovim primerima je naznačen H4H10446P u US2015037339. Njegov promenljivi region teškog lanca i teški lanac CDR1, CDR2 i CDR3 imaju sekvence amino kiseline od SEK ID BR:162, 164, 166 i 168, prema opisanom redosledu, od US2015/00373339 (prisutan, SEK ID BR:1-4, prema opisanom redosledu). Njegov promenljivi region lakog lanca i CDR lakog lanca CDRL1, CDRL2 i CDRL3 imaju sekvence amino kiseline od SEK ID BR:146, 148, 150 i 152, prema opisanom redosledu, od US2015/0037339 (prisutan, SEK ID BR:5-8, prema opisanom redosledu). H4H10446P inhibira aktivinom A posredovano signaliziranje kroz ACVR2A i/ili ACVR2B, ali ne inhibira jako, ako uopšte, vezivanje aktivina A na ACVR2A ili ACVR2B. Druga antitela koja se takmiče sa H4H10446P za vezivanje na humani aktivin A ili vezivanje na isti epitop na humani aktivin A kao H4H10446P su uključeni i zajednička inihibicija signaliziranja su takođe obuhvaćeni.
[0075] Još jedan primer antitela označen je H4H10430P u US2015037339. Njegov promenljivi region teškog lanca i CDR teškog lanca CDRH1, CDRH2 i CDRH3 imaju sekvence amino kiseline od SEK ID BR:66, 68, 70 i 72, prema opisanom redosledu, u US2015/00373339 (prisutane SEK ID BR:9-12, prema opisanom redosledu). Njegov promenljivi region lakog lanca i CDR lakog lanca CDRL1, CDRL2 i CDRL3 imaju sekvence amino kiseline od SEK ID BR:74, 76, 78 i 80, prema opisanom redosledu, u US2015/0037339 (prisutane su SEK ID BR:13-16, prema opisanom redosledu). Ovo antitelo inhibira vezivanje aktivina A na ACVR2A i/ili ACVR2B i inhibira prenos signala kroz jedan ili oba od ovih receptora. Druga antitela koja se takmiče sa H4H10430P za vezivanje na aktivin A ili vezivanje na isti epitop na aktivin A kao H4H10430P i zajedničko im je svojstvo inhibiranja vezivanja aktivina A na prenos signala kroz ACVR2A i ACVR2B su takođe obuhvaćena.
[0076] Još jedan primer antitela jesu antitela označena A1 u US 8,309,082, koje karakterišu promenljivi regioni lakog i teškog lanca sa sekvencama SEK ID BR: 9 i 10 u US 8,309,082 (prisutna SEK ID BR:17 i 18, prema opisanom redosledu). Njegovi CDR lakog lanca, CDRL1, CDRL2 i CDRL3 sa sekvencama SEK ID BR:11, 12, i 13, prema opisanom redosledu, u US8,309,082 (prisutna SEK ID BR:19-21, prema opisanom redosledu), i njegovi CDR teškog lanca, CDRH1, CDRH2 i CDRH3 imaju sekvence SEK ID BR: 62, 63 i 64, prema opisanom redosledu, u US8,309,082 (prisutne SEK ID BR:22-24, prema opisanom redosledu). Druga antitela koja se takmiče sa H4H10430P za vezivanje na aktivin A ili vezivanje na isti epitop na aktivin A kao H4H10430P i zajedničko im je svojstvo inhibiranja vezivanja aktivina A na prenošenje signala kroz ACVR2A i/ili ACVR2B su takođe obuhvaćena.
[0077] Druga antitela moguće je dobiti mutagenezom cDNK koja kodira teške i lake lance bilo kog od gore pomenutih antitela. Monoklonalna antitela koja su barem 90%, 95% ili 99% identična
1
bilo kojim gore pomenutim antitelima u sekvenci amino kiseline zrelih promenjivih regiona teškog i/ili lakog lanca i zadražavaju svoja funkcionalna svojstva, i/ili koji se razlikuju od odgovarajućeg antitela u malom broju funkcionalno nekonsekventnih supstitucija amino kiseline (npr., konzervativnih supstitucija), delecija, ili umetaka su takođe obuhvaćene u ovom pronalasku. Monoklonalna antitela koja imaju barem 1, 2, 3, 4, 5 i poželjno svih šest CDR koji su 90%, 95%, 99% ili 100% identični sa odgovarajućim CDR bilo kog od za primer datih antitela su takođe obuhvaćena. CDR su poželjno kao u Kabat definiciji, ali može biti definisano bilo kojom uobičajenom alternativnom definicijom, kao što je Hotija, kompozitna Kabat-Hotija, kontaktna definicija ili AbM definicija (videti internet stranicu bioinf.org.uk/abs).
E. Antagonisti malog molekula
[0078] Antagonisti ACVR1, ACVR2A i ACVR2B mogu takođe da budu antagonisti malog molekula. Takvi antagonisti malog molekula mogu da inhibiraju aktivnost ACVR1, ACVR2A, ACVR2B ili aktivina A. Antagonisti malog molekula od ACVR1 obuhvataju, na primer, LDN-212854 opisane u Mohedas et al., (2013) ACS Chem. Biol.8:1291-1302.
IV. Ogledi analiziranja
[0079] Aktivnost različitih ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B antagonista i njegovih varijanti ili fragmenata opisanih ovde moguće je ovde analizirati u različitim ogledima. Na primer, ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B antagonisti i njegove varijante mogu biti analizirani za njihovu sposobnost da vežu ligande ili se vežu na ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B receptore, za njihovu sposobnost da inhibiraju vezivanje liganda na ACVR1 i/ili ACVR2 polipeptid, i/ili na njihovu sposobnost da inhibiraju aktivnost ACVR1 ili ACVR2 receptora.
[0080] Aktivnost ACVR1 ili ACVR2 antagonista ili njihovih varijanata ili fragmenata moguće je testirati in vitro ili u ogledima na bazi ćelije. Kod in vitro ogleda vezivanja i ogleda da se meri inhibicija aktivnosti receptora su dobro poznati. Različiti ogledi da se izmeri aktivnost ACVR1, ACVR2A ili ACVR2B antagonista su detaljno opisani, na primer u U.S. patentu br.7,842,663.
[0081] Sposobnost antagonista da moduišu formiranje kompleksa između ACVR1 ili ACVR2 polipeptida i njihov protein vezivanja moguće je detektovati različitim tehnikama. Na primer, modulacija formiranja kompleksa može biti kvantifikovana korišćenjem, na primer, detektibilno označenih proteina kao što je radioaktivno označena (npr.,<32>P,<35>S,<14>C ili<3>H), fluorescentno označen (npr., FITC), ili enzimski označen ACVR1 ili ACVR2 polipeptid ili njegov protein vezivanja, pomoću imunoogleda, ili hromatografskom detekcijom.
[0082] Moguće je nadgledati sposobnost ACVR1 ili ACVR2 antagonista da inhibiraju ACVR1 ili ACVR2 receptorom posredovano signaliziranje. Na primer, dejstva nizvodnog signaliziranja kao
1
što je Smad aktivacija moguće je nadgledati korišćenjem gena reportera sa odgovorom na Smad.
[0083] ACVR1 i/ili ACVR2 antagonisti i njihove varijante ili fragmenti mogu takođe da budu analizirani za aktivnost u in vivo ogledu. Na primer, ACVR1 ili ACVR2 antagonistili ili njihove varijante moguće je analizirati za njihovu sposobnost da leče fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) na modelu miša sa fibrodisplazijom ossificans progressiva (FOP) (npr., sposobnošću da se smanji ektopična koštana formacija). Razvijeni su transgenski laboratorijski miševi koji nose uslovno kodiranje alela Acvr1[R206H]. Ovi Acvr1<[R206H]COIN/+>miševi su opisani u US 14/207,320 i PCT/US2014/026582. Ovaj alel izražava R206H varijantu samo posle aktivacije Cre rekombinaze. Ovo omogućava od Cre zavisnu aktivaciju Acvr1[R206H] ispoljavanja na specifičnim tkivima i u specifično vreme korišćenjem različitih tipova Cre linije pokretača. Na ovaj način miševi dobijeni kao rezultat takođe obilaze perinatalnu smrtnost koja je primećena kod neregulisanog laboratorijskog alela Acvr1[R206H]. Aktivacija Acvr1[R206H] ekspresije kod mladih ili odraslih miševa daje kao rezultat ektopičnu koštanu formaciju. Na primer, Acvr1<[R206H]COIN/+>;Gt(ROsA26)sor<CreERt2/+>miševi (pri čemu CreERt2 je rekombinaza koju je tamoksifenom moguće regulisati (videti Feil et al. (1997) Biochem Biophys Res
[0084] Commun.237(3):752-7) koji je uveden u Gt(ROSA26)Sor lokus, i otuda je konstitutivno i globalno izražen) razvija fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) posle izlaganja tamoksifenu. Ukratko, u odsustvu tamoksifena, CreERt2 je neaktivan. Tamoksifen aktivira izražavanje Cre što zatim deluje na Acvr1<[R206H]COIN/+>da bi ga pretvorio u Acvr1<[R206H]/+>, čime pretvara genotip miševa da oponaša genotip pacijenata obolelih od fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) koji su ACVR1[R206H]. Acvr1<[R206H]>alel izražava Acvr1[R206H], i pogodan je da pogoni razvoj fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) u Acvr1<[R206H]/+>;Gt(ROSA26)Sor<CreERt2/+>miševa. Ovo zaobilazi smrtnost embriona koja je prisutna kod uobičajenih Acvr1<[R206H]>laboratorijskih miševa, Acvr1<tm1Emsh>(http://www.informatics.jax.org/allele/key/828153). Posle lečenja tamoksifenom, ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B antagonisti ili kontrola mogu biti isporučeni na Acvr1<[R206H]COIN/+>;Gt(ROSA26)sor<CreERt2/+>miševe i životinje koje se nadgledaju za ektopičnu koštanu formaciju. Videti Chakkalakal SA, et al. (20120 An Acvr1 R206H laboratorijski miš ima fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP). J Bone Miner Res. 27(8):1746-56. Ovaj ogled je opisan detaljno u Primerima dole u tekstu.
V. Fibrodisplazija Ossificans Progressiva (FOP)
[0085] Fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP) je redak nasledni poremećaj kod kog heterotopno okoštavanje formira histološki i biomehanički ’normalne’ kosti na mestima van skeleta, kao što je vezivno tkivo. Ovaj poremećaj, iako je epizodni, je kumulativan, i daje kao rezultat stalnu nesposobnost čija se ozbiljnost povećava.
[0086] Fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP) prisutna u celom svetu ima približno
1
1/2.000.000. Ne postoji etnička, rasna, polna, ili geografska sklonost prema oboljevanju od fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP). Nije to samo bolest usled koje nastupa izuzetna invalidnost već takođe stanje značajno skraćenog životnog veka.
[0087] Karakteristike fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) obuhvataju, na primer, urođene anomalije velikog prsta na nozi, upale koje karakterišu bolna oticanja mekog tkiva na glavi, vratu, i/ili leđima sa upalom i progresivnm formacijom heterotopne kosti preko endohondralnog okoštavanja.
[0088] Fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP) može da se smatra klinički zasnovanom na prisustvu anomalija velikog prsta na nozi. Dijagnostički testovi, kao što su snimanje rendgenski zracima i snimak kosti magnetnom rezonancom (MRI) mogu da potvrde anomalije velikog prsta na nozi i potvrde prisustvo heterotopnog okoštavanja. Dijagnoza fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) može da se potvrdi i genetičkim testiranjem, na primer, detektovanjem 617 G-do-A (R206H) mutacije u ACVR1 genu.
[0089] Često se dešava da se fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP) dijagnostikuje pogrešno kao nekoliko drugih poremećaja, uključujući druga stanja heterotopnog okoštavanja. Fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP) treba razlikovati od diferencijalne dijagnoze od poremećaja koji obuhvataju, na primer, izolovane urođene anomalije, limfedem, sarkom mekog tkiva, desmoidne tumore, agresivnu mladalačku, fibromatozu, mladalačke otoke (žuljeve), izolovanu brahidaktiliju, progesivnu okoštavajuću heteroplaziju i heterotopno okoštavanje. Postojanje urođenih anomalija velikog prsta na nozi i bolne upale mekog tikva moguće je koristiti da bi se razlikovala fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP) od drugih poremećaja.
[0090] Pacijenti sa fibrodisplazijom ossificans progressiva (FOP) imaju urođene anomalije velikog prsta na nozi ali inače izgledaju normalni pri rođenju. Upale povezane sa fibrodisplazijom ossificans progressiva (FOP) počnu tokom prve decenije života. Upale može pokrenuti, na primer, povreda mekog tkiva, padovi, umor, virusne infekcije ili unutarmišićne injekcije. Rezultat upala je transformacija mekog tkiva, kao što su ligamenti, mišići skeleta ili tetive u heterotopnoj kosti.
[0091] Ranije nije postala medicinska terapija za fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP). Fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP) je rešavana preventivnim merama, kao što je poboljšana bezbednost i strategije da se povreda svede na minimum, izbegavanje injekcija u mišić i pažljivost prilikom stomatološke nege. Visoka doza terapija kortikosteroida započeta unutar prva 24 sata od upale može smanjiti upalu i edem povezan sa upalama. Hirurške strategije da se ukloni heterotopna kost nisu preporučene jer je kontraproduktivno i prouzrokuje novo heterotopno okoštavanje indukovano traumom.
[0092] Fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP) je prouzrokovana mutacijama u ACVR1 (takođe je poznata kao ALK2) koja, kako se čini, destabilizuje interakciju GS domena sa inhibitornim molekulom, FKBP12 (Groppe, J., et al. 2011, Cells Tissues Organs, 194:291-295). FKBP12 je negativni modulator ACVR1 i funkcioniše da stabilizuje receptor u neaktivnoj
2
konformaciji (Huse, M., et al.1999, Cell, 96:425-436). Videti, Kaplan, F.S., et al.2012, Disease Models & Mechanisms, 5:756-762).
[0093] Primer mutacije u ACVR1 koja se povezuje sa fibrodisplazijom ossificans progressiva (FOP) je arginin 206 u histidin (R206H) mutacija u unutarćelijskom domenu.
[0094] Subjekat koji je pod rizikom od razvoja fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) obuhvata bilo kog subjekta sa ACVR1 R206H mutacijom ili drugom mutacijom sa fibrodisplazijom ossificans progressiva (FOP), subjekat rođen sa anomalijama velikog prsta, ili subjekat koji ima porodičnu istoriju fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP), koji još nije razvio simptome fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) dovoljne za postavljanje dijagnoze fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) na osnovu kriterijuma priznatih u toj oblasti.
VI. Postupci lečenja
[0095] Antitelo protiv aktivina A za upotrebu u postupku lečenja fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP), obuhvata isporuku subjektu koji ima fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP) delotvornog režima antitela protiv aktivina A su dati ovde.
[0096] "Lečenje" subjekta sa fibrodisplazijom ossificans progressiva (FOP) znači isporuku delotvornog režima antitela protiv aktivina A, subjektu koji ima fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP) pri čemu je svrha da se popravi, izleči, ublaži, olakša, promeni, isceli, obradi, poboljša, ili utiče na stanje jednog ili više simptoma fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP).
[0097] "Subjekat" je bilo koja životinja (t.j., sisar) kao što je, čovek, primat, glodar, kao što su miševi i pacovi, poljoprivredne i pripitomljene životinje kao što su, psi, mačke, stoka, konji, svinje, ovca, i slično, kod kojih postoji želja da se leči fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP). U bilo kom od ovih postupaka, subjekat može da bude sisar i poželjno ljudsko biće.
[0098] Delotvoran režim antitela protiv aktivina A znači kombinaciju doze, učestalost i rutinu isporuke antagonista koji nosi pozitivan odgovor u barem jednom znaku ili simptomu fibrodisplazija ossificans progressiva (FOP). Pozitivan odgovor može da obuhvati smanjenje, eliminaciju, poboljšanje, inhibiciju pogoršanja, ili odlaganje barem jednog znaka ili simptoma fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP). Znaci ili simptomi fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) koji mogu biti predmet pozitivnog odgovora obuhvataju na primer, ektopičnu ili heterotopičnu koštanu formaciju, upale fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP), ili bol i oticanje povezano sa upalama. Režim je moguće proceniti kod jednog pacijenta upoređivanjem znaka i simptoma pre i posle lečenja. Režim se smatra delotvornim ako barem jedan znak ili simptom daje pozitivan odgovor posle lečenja. Režim može alternativno ili dodatno da bude procenjen upoređivanjem znaka i simptoma populacije subjekata lečenih ovde opisanim antagonistom ili antagonistima sa kontrolnom populacijom subjekata koji ne primaju lečenje. Subjekti za takvo poređenje mogu da budu model životinje, ili humani subjekti u kliničkom ispitivanju (npr., faza I, faza II, IIa, IIb, ili III). Režim se smatra delotvornim ako postoji statistički značajan pozitivan odgovor između populacija u barem jednom znaku ili simptomu.
[0099] Kod nekih postupaka za lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP), subjekat nema i nije u riziku od drugih stanja koja je moguće lečiti sa antagonistima protiv ACVR1, ACVR2A, i/ili ACVR2B, ili antielo protiv aktivina A. Na primer, subjekat može da bude bez bilo kog ili svih od tipa II dijabetesa, mišićne distrofije, amiotofne lateralne skleroze (ALS) i okoštavanja.
A. Načini isporuke subjektu
[0100] Antitelo protiv aktivina A se obično isporučuje direktno, ali može takođe da se isporuči kao nukleinska kiselina koja kodira takvo antitelo. Takva antitela moguće je isporučiti različitim postupcima, kao što je ćelijska transfekcija, genska terapija, direktna isporuka sa isporukom pomoćnog farmaceutskog sredstva ili farmaceutski prihvatljivog nosača, indirektna isporuka obezbeđivanjem rekombinantnih ćelija koja obuhvata nukleinsku kiselinu koja kodira antitelo protiv aktivina A za upotrebu kako je ovde dato.
[0101] Različite sisteme isporuke je moguće korisititi da bi se isporučilo antitelo protiv aktivina A za upotrebu kako je ovde dato, npr., inkapsulacija u lipozome, mikročestice, mikrokapsule, rekombinantne ćelije koje su sposobne da izražavaju jedinjenje, receptorom posredovanu endocitozu (videti, npr., Wu and Wu, 1987, J. Biol. Chem. 262:4429-4432), konstrukciju nukleinske kiseline kao dela retrovirusa ili drugog vektora, itd.
[0102] Postupci isporuke mogu biti enteralni ili parenteralni i obuhvataju unutardermalne, unutarmišićne, unutarperitonealne, intravenozne, potkožne, plućne, intanazalne, intraokularne, epiduralne, i oralne rute. Jedinjenja je moguće isporučiti bilo kojom prikladnom rutom, na primer infuzijom ili bolusnom injekcijom, apsorpcijom kroz obloge epitela ili sluzokože (npr., oralna sluzokoža, sluzokoža rektuma i sluzokoža creva, itd.) i moguće ih je isporučiti zajedno sa drugim biološki aktivnim agensima. Isporuka može biti sistemska ili lokalna. Pored toga, može biti poželjno da se uvedu farmaceutske supstance u centralni nervni sistem bilo kojom pogodnom rutom, uključujući intraventrikularnu i intratekalnu injekciju; intraventrikualrno ubrizgavanje može da bude pojednostavljeno intraventrikularnim kateterom, na primer, spojena na rezervoar, kao što je Omkana (Omcana) reservoar. Takođe je moguće koristiti isporuku u pluća, npr., upotrebom inhalatora ili nebulizera, i formulacijom sa agensom za raspršivanje.
[0103] Farmaceutske supstance mogu biti isporučene lokalno na područje kom je potrebno lečenje; ovo je moguće postići, na primer, lokalnom infuzijom tokom hirurške operacije, topikalnom primenom, npr., injekcijom, pomoću katetera, ili pomoću implanta, pomenuti implant je porozan, neporozan, ili želatinasti materijal, uključujući membrane, kao što su silikonske membrane Sialastic, vlakna, ili komercijalne zamene za kožu.
[0104] U još jednom izvođenju, aktivni sastojak moguće je isporučiti u vezikuli, posebno lipozomu (videti Langer (1990) Science 249:1527-1533). U jednom drugom izvođenju, aktivni sastojak je moguće isporučiti u sistemu sa kontrolisanim otpuštanjem. U jednom izvođenju, moguće je koristiti pumpu (videt Langer (1990) supra). U drugom izvođenju, polimerne materijale je moguće koristiti (videti Howard et al. (1989) J. Neurosurg. 71:105). U drugom izvođenju gde aktivni sastojak nukleinska kiselina kodira protein, nukleinska kiselina može da bude isporučena in vivo da bi se pospešilo izražavanje njegovog kodiranog proteina, njegovim konstruisanjem kao dela odgovarajućeg vektora ekspresije nukleinske kisleine i isporučivanje tako da postaje unutarćelijski, npr., upotrebom retrovirusnog vektora (videti, na primer, U.S. patent br.4,980,286), ili direktnim ubrizgavanjem ili upotrebom bombardovanja mikročestica, ili oblaganjem sa lipidima ili receptorima ili agensima prenosa na površini ćelije, ili isporučivanjem u vezu na peptid sličan homeoboksu za koji je poznato da ulazi u nukleus (videti npr., Joliot et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:1864-1868), itd. Alternativno, nukleinsku kiselinu je moguće uvesti unutarćelijski i inkorporirati unutar DNK ćelije domaćina za ekspresiju, homolognom rekombinacijom.
B. Kombinovane terapije
[0105] Antitelo protiv aktivina A za upotrebu kako je ovde dato moguće je isporučiti u kombinaciji sa drugim terapijama, uključujući ACVR1, ACVR2A i ACVR2B antagonistima opisanim ovde. Antagonisti ACVR1, ACVR2A i/ili ACVR2B, ili antitelo protiv aktivina A, bilo samo ili u kombinaciji, moguće je isporuiti u vezi sa jednim ili više dodatnih terapijskih jedinjenja. Terapija kombinacije može da obuhvati istovremenu ili naizmeničnu isporuku. Pored toga, kombinacija može da obuhvati akutnu ili hroničnu isporuku leka pacijentu.
C. Farmaceutske supstance
[0106] Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutske supstance za upotrebu u postupku lečenja fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP), pri čemu ta farmaceutska supstanca obuhvata antitelo protiv aktivina A i farmaceutski prihvatljiv nosač. Pojam "farmaceutski prihvatljivo" znači odobreno od strane regulatorne agencije Savezne ili državne vlade ili na spisku u SAD Farmakopeji (U.S. Pharmacopeia) ili drugim generalno priznatim farmakopejama za upotrebu na životinjama, i preciznije na ljudima. Pojam "nosač" se odnosi na razblaživač, adjuvans, ekscipijens, ili pomoćno farmaceutsko sredstvo sa kojim se lek isporučuje pacijentu. Takvi farmaceutski nosači mogu biti sterilne tečnosti, kao što je voda i ulja, uključujući petrolej, životinjskog, biljnog ili sintetičkog porekla, kao što je kikiriki ulje, sojino ulje, mineralno ulje, susamovo ulje i druga. Pogodni farmaceutski ekscipijensi obuhvataju skrob, glukozu, laktozu, saharozu, želatin, slad, pirinač, brašno, kredu, silika gel, natrijum stearat, glicerol monostearat, talk, natrijum hlorid, osušeno
2
obrano mleko, glicerol, propilen, glikol, vodu, etanol i slično. Supstanca, po želji, može takođe da sadrži manje količine agensa za ovlaživanje ili emulzifikovanje, ili pH puferske agense.
[0107] Ove supstance mogu imati oblik rastvora, suspenzija, emulzija, tableta, pilula, kapsula, prahova, formulacija sa zadržanim otpuštanjem i sličnog. Supstancu je moguće formulisati kao supozitoriju, sa tradicionalnim vezivačima i nosačima kao što su trigliceridi. Orana formulacija može da obuhvati standardne nosače kao što su farmaceutske klase manitola, laktoze, skroba, magnezijum stearata, natrijum saharina, celuloze, magnezijum karbonata, itd. Primeri pogodnih farmaceutskih nosača su opisani u priručniku "Remingtonove farmaceutske nauke (Remington’s Pharmaceutical Sciences)" by E.W. Martin.
[0108] U jednom izvođenju, supstanca je formulisana u skladu sa rutinskim procedurama kao što je farmaceutska supstanca prilagođena za intravenoznu isporuku ljudskim bićima. Kada je neophodno, supstanca može da obuhvati i agens rastvaranja i lokalni anestetik kao što je lidokain da bi se olakšao bol na mestu injekcije. Kada tu supstancu treba isporučiti infuzijom, moguće ju je raspršiti u bočici za infuziju koja sadrži vodu farmaceutski sterilne klase ili fiziološki rastvor. Kada se ta supstanca isporučuje ubrizgavanjem, ampula sterilne vode za ubrizavanje ili fiziološkog rastvora može biti data tako da je sastojke moguće pomešati pre isporuke pacijentu.
[0109] Antitelo protiv aktivina A za upotrebu kako je ovde dato može da bude formulisano kao neutralni ili slani oblici. Farmaceutski prihvatljive soli obuhvataju one formirane sa slobodnim amino grupama kao što su one izvedene iz hlorovodoničnih, fosfornih, sirćetnih, oksalnih, tartarnih kiselina, ili slične, i one formirane sa slobodnim karboksilnim grupama kao što su one koje su izvedene iz natrijuma, kalijuma, amonijaka, kalcijuma, gvožđe hidroskida, izopropilamina, trietilamina, 2-etilamino etanola, histidina, prokaina, i slične.
[0110] Količina i učestalost antitela protiv aktivina A, se isporučuje specifičnom rutom delotvornom za lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) (npr., delotorni režim) može da bude određena standardnim kliničkim tehnikama na osnovu ovog opisa. Pored toga, in vitro oglede je moguće koristiti da bi se identifikovali optimalni dozni opsezi. Precizna doza koju treba koristiti u formulaciji takođe zavisi od rute isporuke leka, i ozbiljnosti stanja, i odluka treba da bude doneta na osnovu mišljenja profesionalnog rada i okolnosti u kojima se nalazi svaki subjekat. Međutim, pogodni opsezi doze za parentelanu isporuku, poželjno intravenoznu ili potkožnu, su generalno oko 20-50000 mikrograma aktivnog jedinjenja po kilogramu telesne težine. Za antitela na aktivinu A pogodni opsezi doze obuhvataju 1-25 mg/kg, 2-20 mg/kg 5-15 mg/kg, 8-12 mg/kg i 10 mg/kg.
[0111] Pogodni opsezi doze za intranazalnu isporuku su generalno oko 0,01 pg/kg telesne težine do 1 mg/kg telesne težine. Delotvorne doze moguće je proceniti iz krivilja odgovora na dozu izvedenih iz in vitro ili iz sistema za testiranje modela životinje.
[0112] Učestalosti isporuke takođe variraju zavisno od ozbiljnosti stanja i poluveka agensa između ostalih činilaca, ali su obično između dnevne i tromesečne, uključujući na primer, dva puta nedeljno, nedeljno, dvonedeljno, mesečno, dvomesečno. Agense je takođe moguće isporučiti u redovnim intervalima koji odgovaraju stanju pacijenta ili smanjenju nivoa seruma agensa ispod granične vrednosti između drugih činilaca.
[0113] Ako su različite verzije sekvence povezane sa pristunim brojem u različitim vremenskim periodima, misli se na verziju povezanu sa pristupnim brojem delotvornog datuma podnošenja ove prijave. Delotvorni datum podnošenja znači raniji stvarni datum podnošenja ili datum podnošenja iz prioritetne prijave pri čemu se navodi pristupni broj ako je primenljivo. Slično tome, ako se različite verzije koje su objavljene, vebsajt ili drugog objave u različitim vremenskim periodima, misli se na verziju koja je najskorije objavljena na važeći dan podnošenja prijave osim ako nije drugačije navedeno. Bilo koje svojstvo, korak, element, izvođenje, ili varijantno rešenje ovog pronalaska moguće je koristiti u kombinaciji sa bilo kojim drugim osim ako nije specifično drugačije navedeno.
PRIMERI
Referentni primer 1: Upotreba ACVR2A-Fc/ACVR2B-Fc za suzbijanje ektopične koštane formacije na modelu miša koji boluje od fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP).
[0114] Acvr1<[R206H]COIN/+>; Gt(ROSA26)Sor<CreERt2/+>su zaštićeni od ekoptične koštane formacije posle lečenja tamoksifenom putem ACVR2A-Fc/ACVR2B-Fc tretiranja.
Mišji model fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP), se pominje kao Acvr1<[R206H]COIN/+>; Gt(ROSA26)Sor<CreERt2/+>su dobili tamoksifen u dozi od 1 mg/mišu i.p. tokom osam dana. Jedanaest miševa je tretirano sa 10 mg/kg od ACVR2A-Fc i 10 mg/kg od ACVR2B-Fc dvaput nedeljno i deset miševa je tretirano sa 10 mg/kg kontrolom mFc dvaput nedeljno tokom 6 nedelja. Miševi su nadgledani korišćenjem in vivo mikrokompjuterizovane tomatogarfije (µCT) na početku, 2, 4 i 6 nedelja posle početka isporuke tamoksifena. Posle 6 nedelja, 9 od 10 miševa u mFc grupi je imalo razvijenu ektopičnu kost na barem jednoj lokaciji, nasuprot samo 2 od 11 miševa u ACVR2A-Fc i ACVR2B- Fc grupa je pokazala razvoj ektopične kosti i ova kost je bila male veličine. Ovi rezultati su pokazani na Slici 1.
Referentni primer 2: Upotreba ACVR1 malog molekula inhibitora kinaze da se suzbije ektopična koštana formacija na modelu miša za fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP).
[0115] Acvr1<[R206H]COIN/+>; Gt(ROSA26)Sor<CreERt2/+>su zaštićeni od ekoptične koštane formacije posle lečenja tamoksifenom putem lečenja ACVR1 LDN-212854 inhibotorom kinaze.
[0116] 16 Acvr1<[R206H]COIN/+>; Gt(ROsA26)sor<CreERt2/+>miševi su dobili tamoksifen u dozi od 1 mg/mišu i.p. tokom osam dana. Osam miševa je lečeno sa 3 mg/kg ACVR1 LDN-212854 inhibitor kinaze
2
(Mohedas et al. (2013) ACS Chem. Biol.8:1291-1302) dva puta dnevno tokom 4 nedelje. Osam miševa je lečeno sa kontrolnim pomoćnim farmaceutskim sredstvom dva puta dnevno tokom 4 nedelje. Miševi su nadgledani korišćenjem in vivo mikrokompjutrizovane tomatografije (µCT) na početku, 2 i 4 nedelje posle početka isporuke tamoksifena pacijentu. Posle 4 nedelje 8 od 8 miševa u kontrolnoj grupi koja je primala pomoćno farmaceutsko sredstvo je pokazalo ektopičnu koštanu formaciju, kod 6 od ovih miševa ektopične koštane lezije su bile velikih dimenzija. Nasuprto tome, grupa lečena sa LDN-212854, 3 od 8 miševa je pokazalo ektopičnu koštanu formaciju, veličina ektopične koštanih lezija je formirana kod 3 miša su bile male u poređenju sa kontrolnom grupom koja je primala pomoćno farmaceutsko sredstvo. Ovi rezultati su pokazani na Slici 2.
Primer 1: Upotreba antitela protiv aktivina A da bi se suzbila ektopična koštana formacija na modelu miša koji ima fibrodisplaziju ossificans progressiva (FOP).
[0117] 23 Acvr1<[R206H]COIN/+>; Gt(ROSA26)<SorCreERt2/+>miševa je lečeno sa tamoksifenom sa dozom od 1 mg/mišu i.p. tokom osam dana. Sedam miševa je lečeno sa 25 mg/kg izotipnim kontrolnim antitelom dva puta nedeljno, osam miševa je lečeno sa 25 mg/kg antitela aktivina A (H4H10446P) dva puta nedeljno, i osam miševa je lečeno sa 10 mg/kg od ACVR2a-Fc dva puta nedeljno tokom 3 nedelje. Lečenja sa ovim agensima su početa istovremeno sa početkom lečenja tamoksifenom. Miševi su nadgledani korišćenjem in vivo mikrokompjutrizovane tomatografije (µCT) na početku, 2 i 3 nedelje posle početka isporuke tamoksifena pacijentu. Sl.3 je pokazala da su posle 3 nedelje, svi miševi u grupi izotipnog kontrolnog antitela razvili ektopičnu kost na barem jednoj lokaciji, nasuprot nijednom od miševa u grupi lečenoj antitelom aktivin A koliko je pokazalo razvoj ektopične kosti u ovom trenutku. Dva miša u ACVR2a-Fc grupi su razvila ektočinu kost 3. nedelje.
Primer 2:
[0118] Acvr1[R206H]COIN/+; Gt(ROSA26)SorCreERt2/+ su bili zaštićeni od ektopične koštane formacije posle lečenja tamoksifenom poomoću i aktivina A i Acvr2a i ’b’ blokirajućeg antitela.
[0119] 26 Acvr1[R206H]COIN/+; Gt(ROSA26)SorCreERt2/+ miševi su dobili tamoksifen u dozi od 40 mg/kg i.p. tokom osam dana. Osam miševa je lečeno sa 10 mg/kg izotipnog kontrolnog antitela (REGN1945), devet miševa je lečeno sa 10 mg/kg aktivin A antitela (H4H10446P) (REGN2477) i devet miševa je lečeno sa 10 mg/kg Acvr2a/Acvr2b antitela dva puta nedeljno tokom 6 nedelja. Miševi su nadgledani korišćenjem in vivo mikrokompjuterizovane tomatogarfije (µCT) na početku, 2, 3 i 4. nedelje posle početka isporuke tamoksifena. Sl.4 pokazuje da je posle 4 nedelje, 7 od 8 miševa u grupi sa izotipnim kontrolnim antitelom razvilo ektopičnu kost na barem jednoj lokaciji, nasuprot samo jednom mišu u grupi lečenoj aktivin A antitelom i tri od miševa u grupi lečenoj Acvr2a/Acvr2b antitelom je razvilo ektopičnu kost 4. nedelje. Veličina ektopične
2
kosti koja je formirana u grupi lečenoj antitelom je bila manja nego u grupi lečenoj izotipnom kontrolom.
Primer 3:
[0120] Acvr1[R206H]COIN/+; Gt(ROSA26)SorCreERt2/+ su zaštićeni od ektopične koštane formacije posle lečenja tamoksifenom pomoću aktivin A blokirajućeg antitela.
[0121] 35 Acvr1[R206H]COIN/+; Gt(ROSA26)SorCreERt2/+ miševa je dobilo tamoksifen u 40 mg/kg i.p. tokom osam dana. Osam miševa je lečeno sa 25 mg/kg izotipnim kontrolnim antitelom (REGN1945), devet miševa je lečeno sa 25 mg/kg aktivin A antitela (H4H10446P) (REGN2477), devet miševa je lečeno sa 10 mg/kg aktivin A antitela (REGN2477) i devet miševa je lečeno sa 1 mg/kg od aktivin A antitela (REGN2477) nedeljno tokom 6 nedelja. Miševi su nadgledani korišćenjem in vivo mikrokompjuterizovane tomatogarfije (µCT) na početku, 2, 3, 4. i 6,5. nedelja posle početka isporuke tamoksifena. Količina ektopične kosti kod svakog miša je izračunata iz mikrokompjuterizovanih tomografskih (µCT) slika. Sl. 5 pokazuje posle 4 nedelje, svi miševi u grupi sa izotipnim kontrolnim antitelom su razvili ektopičnu kost na barem jednoj lokaciji, pri čemu samo 2 miša svake od grupa lečenih aktivin A antitelom. U 6,5 nedelja prosečna ukupna zapremina ektopične kosti u izotipom lečenoj grupi je bila 65,4 mm3 u poređenju sa grupama lečenim 1,87 mm<3>u 25 mg/kg, 0,3 mm<3>u 10 mg/kg i 7,3 mm<3>u 1 mg/kg aktivin antitela.
2
2
2
1
2
4

Claims (10)

Patentni zahtevi
1. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu u postupku lečenja fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP), taj postupak obuhvata isporuku pacijentu koji boluje od fibrodisplazije ossificans progressiva (FOP) delotvornog režima antitela protiv aktivina A.
2. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu se antiitelo takmiči za vezivanje sa antitelom koje obuhvata promenljive regione teškog i lakog lanca SEK ID BR: 1 i 5.
3. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu se to antitelo takmiči za vezivanje sa antitelom koje obuhvata promenljive regione teškog i lakog lanca SEK ID BR: 9 i 13.
4. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu se to antitelo takmiči za vezivanje sa antitelom koje obuhvata promenljive regione teškog i lakog lanca SEK ID BR: 18 i 17.
5. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu to antitelo obuhvata promenljive regione teškog i lakog lanca SEK ID BR: 1 i 5.
6. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu to antitelo obuhvata promenljive regione teškog i lakog lanca SEK ID BR: 9 i 13.
7. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu to antitelo obuhvata promenljive regione teškog i lakog lanca SEK ID BR: 18 i 17.
8. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je to antitelo himerno, venirano, humanizovano ili humano antitelo.
9. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je to antitelo nedirnuto antitelo.
10. Antitelo protiv aktivina A za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 5, pri čemu je to antitelo humano kapa IgG1 antitelo.
RSP20191331 2014-09-12 2015-09-14 Lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva RS59412B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462049869P 2014-09-12 2014-09-12
US201562141775P 2015-04-01 2015-04-01
EP15775835.0A EP3191512B1 (en) 2014-09-12 2015-09-14 Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva
PCT/US2015/000100 WO2016039796A2 (en) 2014-09-12 2015-09-14 Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59412B1 true RS59412B1 (sr) 2019-11-29

Family

ID=54207748

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RSP20191331 RS59412B1 (sr) 2014-09-12 2015-09-14 Lečenje fibrodisplazije ossificans progressiva

Country Status (29)

Country Link
US (3) US20160075772A1 (sr)
EP (2) EP3191512B1 (sr)
JP (1) JP6560341B2 (sr)
KR (1) KR102564079B1 (sr)
CN (1) CN107106648B (sr)
AU (1) AU2015315829B2 (sr)
CA (1) CA2960950C (sr)
CL (2) CL2017000603A1 (sr)
CY (1) CY1122188T1 (sr)
DK (1) DK3191512T3 (sr)
ES (1) ES2739605T3 (sr)
HR (1) HRP20191929T1 (sr)
HU (1) HUE046558T2 (sr)
IL (1) IL251063B (sr)
LT (1) LT3191512T (sr)
MA (1) MA40621B1 (sr)
ME (1) ME03541B (sr)
MX (1) MX382026B (sr)
MY (1) MY179654A (sr)
NZ (1) NZ730773A (sr)
PL (1) PL3191512T3 (sr)
PT (1) PT3191512T (sr)
RS (1) RS59412B1 (sr)
SG (2) SG10201902175RA (sr)
SI (1) SI3191512T1 (sr)
SM (1) SMT201900584T1 (sr)
TW (1) TWI688402B (sr)
WO (1) WO2016039796A2 (sr)
ZA (1) ZA201702112B (sr)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS56796B1 (sr) 2011-11-14 2018-04-30 Regeneron Pharma Kompozicije i postupci za uvećanje mišićne mase i jačine mišića specifičnim antagonizovanjem gdf8 i/ili aktivina a
TW201920262A (zh) 2013-07-30 2019-06-01 美商再生元醫藥公司 抗活化素ａ之抗體及其用途
US20160075772A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of Fibrodysplasia Ossificans Progressiva
JP6877357B2 (ja) 2015-04-15 2021-05-26 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． Ｇｄｆ８阻害剤を用いて、強度及び機能を増加させる方法
DK3286206T3 (da) 2015-04-22 2021-05-03 Biogen Ma Inc Hidtil ukendte hybride actriib-ligand-trap-proteiner til behandling af muskelsvindsygdomme
JOP20190085A1 (ar) 2016-10-20 2019-04-17 Biogen Ma Inc طرق علاج الضمور العضلي ومرض العظام باستخدام بروتينات احتجاز مركب ترابطي actriib هجين حديثة
EP3415527B1 (de) 2017-06-14 2025-12-10 Kymab Ltd. Verwendung der extrazellulären domäne des transferrinrezeptor 2 zur diagnostik und behandlung von primär und sekundär sklerosierenden erkrankungen
US11248044B2 (en) 2018-03-01 2022-02-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for altering body composition by administering a GDF8 inhibitor and an Activin A inhibitor
CN111836643A (zh) * 2018-03-05 2020-10-27 学校法人埼玉医科大学 用于治疗或预防异位骨化的药物组合物
PT3773713T (pt) 2018-04-06 2025-07-29 Regeneron Pharma Anticorpo agonista do recetor de leptina para usar no aumento da massa óssea num sujeito que sofre de disfunção metabólica ou de hipoleptinemia
EP3806627A1 (en) 2018-06-13 2021-04-21 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. A rodent model of fibrodysplasia ossificans progressiva
CN112236166A (zh) 2018-06-13 2021-01-15 科马布有限公司 用于治疗骨疾病的转铁蛋白受体-2的拮抗剂和激动剂
AU2019316103B2 (en) 2018-08-02 2026-02-19 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating facioscapulohumeral muscular dystrophy
US20210322563A1 (en) * 2018-08-02 2021-10-21 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating fibrodysplasia ossificans progressiva
US12018087B2 (en) 2018-08-02 2024-06-25 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle-targeting complexes comprising an anti-transferrin receptor antibody linked to an oligonucleotide and methods of delivering oligonucleotide to a subject
AU2019364415A1 (en) * 2018-10-23 2021-05-20 Keros Therapeutics, Inc. ALK2 antibodies and methods of use thereof
EP3898672A1 (en) * 2018-12-18 2021-10-27 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for enhancing body weight and lean muscle mass using antagonists against leptin receptor, gdf8 and activin a
BR112022013589A2 (pt) 2020-01-08 2022-09-13 Regeneron Pharma Tratamento da fibrodisplasia ossificante progressiva
WO2021142260A1 (en) * 2020-01-10 2021-07-15 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for modulation of acvr1
WO2021222875A1 (en) 2020-04-30 2021-11-04 Keros Therapeutics, Inc. Methods of using alk2 inhibitors
BR112022025700A2 (pt) 2020-06-18 2023-02-28 Regeneron Pharma Formulações de anticorpo de activina a e métodos de uso das mesmas
WO2022098812A1 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Keros Therapeutics, Inc. Methods of treating iron overload
CA3197104A1 (en) * 2020-11-11 2022-05-19 Hq Han Bifunctional antagonists of activin/tgf-beta and rankl and uses thereof
US11638761B2 (en) 2021-07-09 2023-05-02 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating Facioscapulohumeral muscular dystrophy
CN119529092A (zh) * 2021-09-03 2025-02-28 来凯医药科技(上海)有限公司 抗acvr2a抗体及其用途
EP4713372A1 (en) * 2023-05-15 2026-03-25 Immunecare Biopharmaceuticals (Shanghai) Co., Ltd Recombinant fusion protein for treatment of pulmonary hypertension

Family Cites Families (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH652145A5 (de) 1982-01-22 1985-10-31 Sandoz Ag Verfahren zur in vitro-herstellung von hybridomen welche humane monoklonale antikoerper erzeugen.
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4634666A (en) 1984-01-06 1987-01-06 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Human-murine hybridoma fusion partner
US4980286A (en) 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
AU600575B2 (en) 1987-03-18 1990-08-16 Sb2, Inc. Altered antibodies
US5567584A (en) 1988-01-22 1996-10-22 Zymogenetics, Inc. Methods of using biologically active dimerized polypeptide fusions to detect PDGF
US6018026A (en) 1988-01-22 2000-01-25 Zymogenetics, Inc. Biologically active dimerized and multimerized polypeptide fusions
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5225538A (en) 1989-02-23 1993-07-06 Genentech, Inc. Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
ES2087997T3 (es) 1990-01-12 1996-08-01 Cell Genesys Inc Generacion de anticuerpos xenogenicos.
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5874299A (en) 1990-08-29 1999-02-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ES2108048T3 (es) 1990-08-29 1997-12-16 Genpharm Int Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5877397A (en) 1990-08-29 1999-03-02 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5858657A (en) 1992-05-15 1999-01-12 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
US5871907A (en) 1991-05-15 1999-02-16 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
EP0940468A1 (en) 1991-06-14 1999-09-08 Genentech, Inc. Humanized antibody variable domain
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
EP0746609A4 (en) 1991-12-17 1997-12-17 Genpharm Int NON-HUMAN TRANSGENIC ANIMALS CAPABLE OF PRODUCING HETEROLOGOUS ANTIBODIES
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
DK0672142T3 (da) 1992-12-04 2001-06-18 Medical Res Council Multivalente og multispecifikke bindingsproteiner samt fremstilling og anvendelse af disse
CA2115811A1 (en) 1993-02-17 1994-08-18 Claus Krebber A method for in vivo selection of ligand-binding proteins
US5914349A (en) 1994-01-10 1999-06-22 Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. Compositions containing and methods of using 1-aminoindan and derivatives thereof and process for preparing optically active 1-aminoindan derivatives
US5834597A (en) 1996-05-20 1998-11-10 Protein Design Labs, Inc. Mutated nonactivating IgG2 domains and anti CD3 antibodies incorporating the same
MXPA01007845A (es) 1999-02-05 2004-06-22 Samsung Electronics Co Ltd Metodo para la recuperacion de la textura de imagenes y aparato para el mismo.
IL166244A0 (en) 2001-07-12 2006-01-15 Jefferson Foote Super humanized antibodies
CA2550551C (en) 2004-01-16 2013-10-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fusion polypeptides capable of activating receptors
ES2561048T3 (es) 2004-07-23 2016-02-24 Acceleron Pharma Inc. Polipéptidos del receptor ActRII
US8128933B2 (en) 2005-11-23 2012-03-06 Acceleron Pharma, Inc. Method of promoting bone growth by an anti-activin B antibody
US8859752B2 (en) * 2006-04-18 2014-10-14 The Trustees Of The University Of Pennsylvania SIRNA-based therapy of Fibrodyplasia Ossificans Progressiva (FOP)
EA200970250A1 (ru) * 2006-09-05 2010-02-26 Медарекс, Инк. Антитела к костным морфогенетическим белкам и их рецепторам и способы их применения
CL2007002567A1 (es) * 2006-09-08 2008-02-01 Amgen Inc Proteinas aisladas de enlace a activina a humana.
TW201940502A (zh) 2007-02-02 2019-10-16 美商艾瑟勒朗法瑪公司 衍生自ＡｃｔＲＩＩＢ的變體與其用途
CN107412734A (zh) 2007-09-18 2017-12-01 阿塞勒隆制药公司 活化素‑actriia拮抗剂和减少或抑制fsh分泌的用途
JP5270913B2 (ja) 2007-12-26 2013-08-21 サンゴバン・ティーエム株式会社 高電気抵抗高ジルコニア鋳造耐火物
JP5638961B2 (ja) * 2008-03-13 2014-12-10 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション Ｂｍｐシグナル伝達経路のインヒビター
WO2009137075A1 (en) 2008-05-06 2009-11-12 Acceleron Pharma Inc. Anti-activin antibodies and uses for promoting bone growth
CN102946908B (zh) * 2010-06-18 2015-04-22 Lsip基金运营联合公司 显性等位基因表达抑制剂
WO2013063536A1 (en) * 2011-10-27 2013-05-02 Acceleron Pharma, Inc. Actriib binding agents and uses thereof
RS56796B1 (sr) * 2011-11-14 2018-04-30 Regeneron Pharma Kompozicije i postupci za uvećanje mišićne mase i jačine mišića specifičnim antagonizovanjem gdf8 i/ili aktivina a
WO2014051109A1 (ja) 2012-09-28 2014-04-03 協和発酵キリン株式会社 抗ヒトｂｍｐ９抗体および該抗体を有効成分とする異所性骨化疾患の治療剤
TWI635098B (zh) 2013-02-01 2018-09-11 再生元醫藥公司 含嵌合恆定區之抗體
TW201920262A (zh) * 2013-07-30 2019-06-01 美商再生元醫藥公司 抗活化素ａ之抗體及其用途
JP6601687B2 (ja) 2014-03-31 2019-11-06 大日本住友製薬株式会社 進行性骨化性線維異形成症の予防剤及び治療剤
US20160075772A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of Fibrodysplasia Ossificans Progressiva
CA2976446A1 (en) * 2015-02-13 2016-08-18 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody therapeutics that bind ctla4
AU2016255768B2 (en) 2015-04-29 2022-03-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva

Also Published As

Publication number Publication date
CL2017000603A1 (es) 2017-10-06
SI3191512T1 (sl) 2019-09-30
MA40621A (fr) 2017-07-19
US20200115440A1 (en) 2020-04-16
EP3191512B1 (en) 2019-07-24
HRP20191929T1 (hr) 2020-01-10
MA40621B1 (fr) 2019-11-29
CN107106648A (zh) 2017-08-29
CA2960950A1 (en) 2016-03-17
MX382026B (es) 2025-03-13
TWI688402B (zh) 2020-03-21
ZA201702112B (en) 2018-05-30
EP3191512A2 (en) 2017-07-19
CL2018002962A1 (es) 2018-12-28
JP6560341B2 (ja) 2019-08-14
SG10201902175RA (en) 2019-04-29
AU2015315829B2 (en) 2021-05-27
PT3191512T (pt) 2019-09-26
SMT201900584T1 (it) 2019-11-13
CA2960950C (en) 2023-03-14
CY1122188T1 (el) 2020-11-25
US11407822B2 (en) 2022-08-09
KR20170052666A (ko) 2017-05-12
US20160075772A1 (en) 2016-03-17
LT3191512T (lt) 2019-09-10
KR102564079B1 (ko) 2023-08-08
BR112017004812A2 (pt) 2017-12-12
JP2017528476A (ja) 2017-09-28
EP3604335A1 (en) 2020-02-05
MX2017003175A (es) 2017-06-06
IL251063B (en) 2022-08-01
NZ730773A (en) 2022-07-01
AU2015315829A1 (en) 2017-04-27
HUE046558T2 (hu) 2020-03-30
WO2016039796A2 (en) 2016-03-17
SG11201701913SA (en) 2017-04-27
ES2739605T3 (es) 2020-02-03
ME03541B (me) 2020-07-20
CN107106648B (zh) 2021-06-11
WO2016039796A3 (en) 2016-06-16
IL251063A0 (en) 2017-04-30
US20180111983A1 (en) 2018-04-26
TW201625302A (zh) 2016-07-16
MY179654A (en) 2020-11-11
DK3191512T3 (da) 2019-08-12
PL3191512T3 (pl) 2020-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11407822B2 (en) Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva
CA3166399A1 (en) Monoclonal antibodies to fibroblast growth factor receptor 2
US20210061898A1 (en) Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva
HK1238260B (en) Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva
HK1238260A1 (en) Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva
JP7802672B2 (ja) 進行性骨化性線維異形成症の治療
EA039118B1 (ru) Способ лечения прогрессирующей оссифицирующей фибродисплазии
BR112017004812B1 (pt) Uso de um anticorpo contra ativina a para preparação de um medicamento para tratamento de fibrodisplasia ossificante progressiva
HK1251898B (en) Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva