RS58366B1 - Derivati piperidinona kao inhibitori mdm2 za lečenje kancera - Google Patents

Derivati piperidinona kao inhibitori mdm2 za lečenje kancera

Info

Publication number
RS58366B1
RS58366B1 RS20190184A RSP20190184A RS58366B1 RS 58366 B1 RS58366 B1 RS 58366B1 RS 20190184 A RS20190184 A RS 20190184A RS P20190184 A RSP20190184 A RS P20190184A RS 58366 B1 RS58366 B1 RS 58366B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
chlorophenyl
cancer
mmol
solution
compound
Prior art date
Application number
RS20190184A
Other languages
English (en)
Inventor
Michael David Bartberger
Buenrostro Ana Gonzalez
Hilary Plake Beck
Xiaoqi Chen
Richard Victor Connors
Jeffery Deignan
Jason Duquette
John Eksterowicz
Benjamin Fisher
Brian Matthew Fox
Jiasheng Fu
Zice Fu
Lopez De Turiso Felix Gonzalez
Jr Michael William Gribble
Darin James Gustin
Julie Anne Heath
Xin Huang
Xianjun Jiao
Michael Johnson
Frank Kayser
David John Kopecky
Sujen Lai
Yihong Li
Zhihong Li
Jiwen Liu
Jonathan Dante Low
Brian Stuart Lucas
Zhihua Ma
Lawrence Mcgee
Joel Mcintosh
Dustin Mcminn
Julio Cesar Medina
Jeffrey Thomas Mihalic
Steven Howard Olson
Yosup Rew
Philip Marley Roveto
Daqing Sun
Xiaodong Wang
Yingcai Wang
Xuelei Yan
Ming Yu
Jiang Zhu
Original Assignee
Amgen Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=44504412&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS58366(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Amgen Inc filed Critical Amgen Inc
Publication of RS58366B1 publication Critical patent/RS58366B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/68—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D211/72—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/74—Oxygen atoms
    • C07D211/76—Oxygen atoms attached in position 2 or 6
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/40—Oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/45—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cycloheximide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/451—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. glutethimide, meperidine, loperamide, phencyclidine, piminodine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4535—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a heterocyclic ring having sulfur as a ring hetero atom, e.g. pizotifen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D221/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00
    • C07D221/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom, not provided for by groups C07D211/00 - C07D219/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D221/20—Spiro-condensed ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D279/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
    • C07D279/02—1,2-Thiazines; Hydrogenated 1,2-thiazines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D491/14—Ortho-condensed systems
    • C07D491/153—Ortho-condensed systems the condensed system containing two rings with oxygen as ring hetero atom and one ring with nitrogen as ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/20—Spiro-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

Opis
OBLAST PRONALASKA
[0001] Predmetni pronalazak odnosi se na farmaceutsku kombinaciju koja sadrži jedinjenje 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetnu kiselinu ili njenu farmaceutski prihvatljivu so, estar ili amid kao što je definisano u patentnom zahtevu 1, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom, razblaživačem ili nosačem, koja farmaceutska kombinacija je čvrsti dozni oblik, je kombinacija pogodna za parenteralnu injekciju, ili je tečni dozni oblik za oralno davanje. Jedinjenje je MDM2 inhibitor koji je koristan kao terapeutsko sredstvo, posebno za lečenje kancera. Predmetni pronalazak se dalje odnosi na jedinjenje 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetnu kiselinu ili njenu farmacetuski prihvatljivu so, estar ili amid za upotrebu u postupku lečenja različitih vrsta kancera, kao što je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 5 do 13. Ovaj pronalazak dalje se odnosi na lek kao što je definisano u patentnim zahtevima 14 do 16, kao i na estre, amide i prolekove jedinjenja, kao što je definisano u patentnom zahtevu 17, i na farmaceutsku kombinaciju koja obuhvata estar, amid ili prolek, kao što je definisano u patentnom zahtevu 18.
POZADINA PRONALASKA
[0002] p53 je supresor tumora i transkripcioni faktor koji odgovara na ćelijski stres aktivirajući transkripciju brojnih gena koji su uključeni u zaustavljanje ćelijskog ciklusa, apoptozu, senescenciju i popravku DNK oštećenja. Nasuprot normalnim ćelijama, koje nemaju često potrebe da aktiviraju p53, ćelije tumora su pod stalnim ćelijskim stresom iz različitih izvora, uključujući hipoksiju i aktivaciju proapoptotskih onkogena. Stoga postoji snažna selektivna prednost aktivacije p53 puta u tumorima, te je predloženo da bi eliminacija funkcije p53 mogla biti preduslov za preživljavanje tumora. U prilog ovoj ideji, tri grupe istraživača primenile su modele na miševima da pokažu da je odsustvo p53 funkcije stalan uslov za održavanje već nastalih tumora. Kada su istraživači vratili funkciju p53 tumorima u kojima je p53 bio inaktiviran, tumori su ušli u regresiju.
[0003] p53 se deaktivira mutacijom i/ili gubitkom u 50% čvrstih tumora i 10% tečnih tumora. Drugi ključni delovi p53 puta takođe se genetski ili epigenetski menjaju u prisustvu kancera. Onkoprotein MDM2 inhibira funkciju p53, a njega aktivira amplifikacija gena sa stopama incidencije za koje je objavljeno da idu čak i do 10%. MDM2, s druge strane, inhibira drugi tumor supresor, p14ARF. Iznesena je hipoteza da promene nishodno od p53 mogu da budu odgovorne za makar delimičnu inaktivaciju p53 puta u p53<WT>tumorima (p53 divljeg tipa). U prilog ovom konceptu, čini se da neki p53<WT>tumori pokazuju smanjenji kapacitet za apoptozu, iako njihov kapacitet za zaustavljanje ćelijskog ciklusa ostaje netaknut. Jedna strategija za lečenje kancera podrazumeva upotrebu malih molekula koji vezuju MDM2 i neutrališu njegovu interakciju sa p53. MDM2 inhibira aktivnost p53 pomoću tri mehanizma: 1) ponašajući se kao E3 ubikvitinska ligaza u promociji degradacije p53; 2) vezujući se za i blokirajući transkripciono-aktivacioni domen p53; i 3) prenoseći p53 iz jedra u citiplazmu. Sva ova tri mehanizma bila bi blokirana neutralizacijom interakcije MDM2-p53. Konkretnije, ova terapeutska strategija mogla bi se primeniti na tumore koji su p53<WT>, a studije sa niskomolekulskim inhibitorima MDM2 donele su rezultate koji obećavaju u pogledu smanjenja rasta tumora i in vitro i in vivo. Dalje, kod pacijenata sa tumorima sa deaktiviranim p53, stabilizacija p53 divljeg tipa u normalnim tkivima pomoću inhibicije MDM2 mogla bi da dozvoli selektivnu zaštitu normalnih tkiva od mitotičkih otrova.
[0004] Predmetni pronalazak odnosi se na jedinjenja koja su u stanju da inhibiraju interakciju između p53 i MDM2 i aktiviraju p53 nishodne efektorske gene. Kao takva, jedinjenja prema predmetnom pronalasku bila bi korisna u lečenju kancera, bakterijskih infekcija, virusnih infekcija, čireva i zapaljenja. Konkretnije, jedinjenja prema predmetnom pronalasku korisna su za lečenje čvrstih tumora kao što su: tumori dojki, debelog creva, pluća i prostate; i tečnih tumora kao što su limfomi i leukemije. Kada se koristi u predmetnoj prijavi, MDM2 označava humani protein MDM2, a p53 označava humani protein p53. Treba uzeti u obzir da humani MDM2 takođe može da bude označen kao HDM2 ili hMDM2.
KRATAK OPIS PRONALASKA
[0005] Predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutsku kombinaciju koja sadrži jedinjenje 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetnu kiselinu ili njenu farmaceutski prihvatljivu so, estra ili amid, kao što je definisano u patentnom zahtevu 1, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom, razblaživačem ili nosačem, koja farmaceutska kombinacija je čvrsti dozni oblik, je kombinacija pogodna za parenteralnu injekciju, ili je tečni dozni oblik za oralno davanje. Farmaceutska kombinacija ovog pronalaska definisana je u patentnom zahtevu 1, a posebni primeri izvođenja čvrstog doznog oblika definisani su u patentnim zahtevima 2 do 4.
[0006] Predmetni pronalazak se dalje odnosi na jedinjenje 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetnu kiselinu ili njenu farmaceutski prihvatljivu so, estar ili amid za upotrebu u postupku lečenja različitih vrsta kancera, kao što je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 5 do 13. Ovaj pronalazak dalje se odnosi na lek kao što je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 14 do 16, kao i na estre, amide i prolekove jedinjenja, kao što je definisano u patentnom zahtevu 17, i na farmaceutsku kombinaciju koja obuhvata estar, amid ili prolek, kao što je definisano u patentnom zahtevu 18.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0007] Gde se koristi izraz "alkil", ili sam ili u okviru ostalih izraza kao što su "haloalkil" ili "alkilamino", obuhvata linearne ili razgranate radikale koji imaju naznačen broj atoma ugljenika. Primeri tih radikala uključuju metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sec-butil, tert-butil, pentil, izoamil, heksil i slično.
[0008] Izraz "alkoksi" obuhvata linearne ili razgranate oksi-sadržavajuće radikale, pri čemu svaki ima alkilne delove sa naznačenim brojem atoma ugljenika. Primeri tih radikala uključuju metoksi, etoksi, propoksi, butoksi i tert-butoksi.
[0009] Izraz "aril", sam ili u kombinaciji, znači karbociklični aromatični sistem koji sadrži jedan ili dva prstena, pri čemu ti prstenovi mogu da budu međusobno spojeni na fuzioniran način. Izraz "aril" obuhvata aromatične radikale kao što su fenil, naftil, indenil, tetrahidronaftil, i indanil. Poželjniji aril je fenil.
[0010] Izraz "karbonil," bilo da se koristi sam ili sa ostalim izrazima, kao što je "aminokarbonil," označava -(C=O)-.
[0011] Izraz "N,N-dialkilamino" obuhvata grupu gde je amino grupa nezavisno supstituisana sa dva alkil radikala koji imaju naznačen broj atoma ugljenika. Pogodni N,N-dialkilamino radikali mogu biti N,N-dimetilamino i N,N-dietilamino.
[0012] Izraz "cikloalkil" uključuje zasićene karbociklične grupe. Poželjne cikloalkil grupe uključuju ciklopentil i cikloheksil.
[0013] Izraz "sadrži" namenjen je da bude otvorenog tipa, uključujući navedenu komponentu ali ne da isključi druge elemente.
[0014] Izraz "terapeutski delotvorna količina" označava količinu jedinjenja koja poboljšava, umiruje ili eliminiše jedan ili veći broj simptoma konkretne bolesti ili stanja, ili sprečava ili odlaže pojavu jednog ili većeg broja simptoma konkretne bolesti ili stanja.
[0015] Izraz "pacijent" i "subjekat" mogu da se koriste kao sinonimi a označavaju životinje, kao što su psi, mačke, krave, konji, ovce i ljudi. Posebno interesantni pacijenti su sisari. Izraz pacijent obuhvata i muške i ženske jedinke.
[0016] Izraz "farmaceutski prihvatljiv" znači da su označena supstanca, tj.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina ili njena so, estar ili amid, ili formulacija koja sadrži 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetnu kiselinu ili njenu so, estar ili amid, ili neki konkretan ekscipijens, pogodni za primenu kod pacijenta.
[0017] Izrazi "lečenje", "lečiti", "tretman" i slični obuhvataju kako preventivni (npr. profilaktičke) tako i palijativni tretman.
[0018] Izraz "ekscipijens" označava bilo koji farmaceutski prihvatljiv aditiv, nosač, razblaživač, adjuvans ili drugi sastojak, osim aktivnog farmaceutskog sastojka (API), koji se obično dodaje u preparat i/ili dodaje tokom primene kod pacijenta.
[0019] Jedinjenje prema predmetnom pronalasku ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, estar, amid ili prolek daje se pacijentu u terapeutski delotvornoj količini. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, estar ili amid za upotrebu u postupku lečenja različitih vrsta kancera kod subjekta kom je to potrebno, kao što je definisano u patentnom zahtevu 5, ili lek koji sadrži jedinjenje opisano u patentnom zahtevu 1 za upotrebu u postupku lečenja kancera, može da se daje samo, ili kao deo farmaceutski prihvatljive kombinacije ili formulacije. Uz to, ta jedinjenja ili kombinacije mogu da se daju svi u isto vreme, kao na primer, putem bolus injekcije, više puta, kao putem serija tableta, ili da se dopremaju suštinski ravnomerno kroz duži vremenski period, kao na primer primenom transdermalnog dopremanja. Takođe treba imati u vidu da doza jedinjenja može da se menja u toku vremena.
[0020] Uz to, jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, estar, amid ili prolek mogu da se daju pojedinačno, ili sa drugim farmaceutski aktivnim jedinjenjima. Druga farmaceutski aktivna jedinjenja mogu da budu namenjena za lečenje iste bolesti ili stanja kao i jedinjenje prema predmetnom pronalasku, ili njegova so, estar, amid ili prolek, ili različite bolesti ili stanja. Ukoliko pacijent treba da primi, ili već prima, više farmaceutski aktivnih jedinjenja, ta jedinjenja mogu da se daju istovremeno ili jedna za drugim. Na primer, u slučaju tableta, aktivna jedinjenja mogu da se nađu u jednoj tableti ili u odvojenim tabletama, koje mogu da se daju istovremeno ili jedne za drugima, bilo kojim redosledom. Uz to, trebalo bi imati u vidu da kombinacije mogu da budu različiti oblici. Na primer, jedno ili više jedinjenja mogu da se dopremaju tabletom, dok se drugo daje injekcijom ili oralno, kao sirup. Sve kombinacije, postupci dopremanja i redosledi davanja su obuhvaćeni.
[0021] Izraz "kancer" označava fiziološko stanje kod sisara koje se odlikuje neregulisanim ćelijskim rastom. Opšte klase kancera uključuju karcinome, limfome, sarkome i blastome.
[0022] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da se koriste za lečenje kancera. Postupci za lečenje kancera obuhvataju davanje pacijentu kom je to potrebno, terapeutski delotvorne količine 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetne kiseline ili njene farmaceutski prihvatljive soli, estra ili amida.
[0023] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da se koriste za lečenje tumora. Postupci za lečenje tumora obuhvataju davanje pacijentu kom je to potrebno, terapeutski delotvorne količine 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetne kiseline ili njene farmaceutski prihvatljive soli, estra ili amida.
[0024] Kanceri koje mogu da se leče prema predmetnom pronalasku obuhvataju, bez ograničenja, karcinome, kao što su kancer bešike, dojke, debelog creva, rektuma, bubrega, jetre, pluća (sitnoćelijski rak pluća i nesitnoćelijski rak pluća), jednjaka, žučne kese, jajnika, pankreasa, želuca, grlića materice, štitne žlezde, prostate i kože (uključujući skvamocelularni kancer); hematopojetske tumore limfoidnih linija (uključujući leukemiju, akutnu limfocitičnu leukemiju, hroničnu mijelogenu leukemiju, akutnu limfoblastičnu leukemiju, limfom B ćelija, limfom T ćelija, Hodžkinov limfom, ne-Hodžkinov limfom, limfom vlasastih ćelija i Burketov limfom); hematopojetske tumore mijeloidne linije (uključujući akutne i hronične mijelogene leukemije, mijelodisplastični sindrom i promijelocitičnu leukemiju); tumore mezenhimskog porekla (uključujući fibrosarkom i rabdomiosarkom, i ostale sarkome, npr. mekih tkiva i kostiju); tumore centralnog i perifernog nervnog sistema (uključujući astrocitom, neuroblastom, gliom i švanome); i ostale tumore (uključujući melanom, seminom, teratokarcinom, osteosarkom, xenoderoma pigmentosum, keratoakantom, kancer tiroidnih folikularnih ćelija i Kapošijev sarkom). Ostali kanceri koji mogu da se leče jedinjenjem prema predmetnom pronalasku obuhvataju kancer endometrija, kancer glave i vrata, glioblastom, maligne ascite i hematopojetske kancere.
[0025] Konkretni kanceri koji mogu da se leče jedinjenjima prema predmetnom pronalasku obuhvataju sarkome mekih tkiva, kancere kostiju kao što su osteosarkom, tumori dojke, kancer bešike, Li-Fraumeni sindrom, tumore mozga, rabdomiosarkom, adrenokortikalni karcinom, kolorektalni kancer, nesitnoćelijski rak pluća i akutnu mijelogenu leukemiju (AML).
[0026] U konkretnom primeru izvođenja ovog pronalaska koji se odnosi na lečenje kancera, gde je kancer identifikovan kao divlji tip p53 (p53<WT>). U drugom konkretnom primeru izvođenja, kancer je identifikovan kao p53<WT>i CDKN2A mutant. Na primer, može da se uzme uzorak ćelija kancera nekog pacijenta i analizira, kako bi se utvrdio status ćelija tog kancera u pogledu p53 i/ili CDKN2A. U jednom aspektu, pacijent koji ima kancer koji jeste p53<WT>biće odabran za tretman, za razliku od pacijenata koji pate od kancera koji je mutirao u odnosu na p53. U još jednom aspektu, pacijent koji ima kancer koji je istovremeno i p53<WT>i ima mutiran CDNK2A protein biće odabran pre pacijenta koji nema ove odlike. Uzimanje ćelija kancera na analizu dobro je poznato stručnjacima u ovoj oblasti. Izraz "p53<WT>" označava protein kodiran genomskom DNK sekvencom br. NC_000017 verzija 9 (7512445..7531642)(GenBank); protein kodiran cDNK sekvencom br. NM_000546 (GenBank); ili protein koji ima GenBank sekvencu br. NP_000537.3. Izraz "mutant za CDNK2A" označava CDNK2A protein koji nije divljeg tipa. Izraz "CDKN2A divlji tip" označava protein kodiran genomskom DNK sekvencom br.9:21957751-21984490 (Ensembl ID); protein kodiran cDNK sekvencom br. NM_000077 (GenBank) ili NM_058195 GenBank) ili; ili protein koji ima GenBank sekvencu br. NP_000068 ili NP_478102.
[0027] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu da se koriste za lečenje hiperproliferativnih poremećaja kao što je hiperplazija štitne žlezde (posebno Grejvova bolest) i cista (kao što su hipervaskularnost strome jajnika, karakteristika sindroma policističnih jajnika (Stejn-Levental sindrom)).
[0028] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu da se koriste za lečenje sledećih bolesti ili stanja: astme, hronične opstruktivne bolesti pluća (COPD), emfizema, psorijaze, kontaktnog dermatitisa, konjuktivitisa, alergijskog rinitisa, sistemskog lupusa eritematozusa (SLE), ulcerativnog kolitisa, Kronove bolesti, multiple skleroze, reumatoidnog artritisa, zapaljenske bolesti creva, Alchajmerove bolesti, arteroskleroze i Hantingtonove bolesti.
[0029] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu da se koriste za lečenje zapaljenskih bolesti, hipoksije, čireva, virusnih infekcija, bakterijskih infekcija i bakterijske sepse.
[0030] Jedinjenje 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina ili njena farmaceutski prihvatljiva so, estar, amid ili prolek, kao što su definisani u patentnim zahtevima, takođe mogu da se daju u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski aktivnih jedinjenja/sredstava. U jednom konkretnom primeru izvođenja, dodatno farmaceutski aktivno sredstvo je sredstvo koje može da se koristi za lečenje kancera. Na primer, dodatno farmaceutski aktivno sredstvo može da bude odabrano od antineoplastičnih sredstava, antiangiogeničnih sredstava, hemoterapeutskih sredstava i sredstava za peptidalnu terapiju kancera. U još jednom primeru izvođenja, navedena antineoplastična sredstva odabrana su od sredstava nalik antibioticima, alkilujućih sredstava, antimetaboličkih sredstava, hormonskih sredstava, imunoloških sredstava, sredstava nalik interferonu, inhibitora kinaza, različitih sredstava i njihovih kombinacija. Treba imati u vidu da dodatna farmaceutski aktivna jedinjenja/sredstva mogu da budu tradicionalni mali organski hemijski molekuli, ili mogu da budu makromolekuli kao što su proteini, antitela, peptitela, DNK, RNK ili fragmenti takvih makromolekula.
[0031] Primeri specifičnih farmaceutski aktivnih sredstava koja mogu da se koriste u lečenju kancera i koja mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili većim brojem jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju: metotreksat; tamoksifen; fluoruracil; 5-fluoruracil; hidroksiureu; merkaptopurin; cisplatin; karboplatin; daunorubicin; doksorubicin; etopozid; vinblastin; vinkristin; pacitaksel; tioguanin; idarubicin; daktinomicin; imatinib; gemcitabin; altretamin; asparaginazu; bleomicin; kapecitabin; karmustin; kladisat. u vodenom rastvoru NaCl; ciklofosfamin; citarabin; dekarazin; docetaksel; idarubicin; ifosfamid; irinotekan; fludarabin; mitosmicin; mitoksan; mitoksantron; topotekan; vinorelbin; adriamicin; mitram; imikvimod; alemtuzmab; eksemestan; bevacizumab; cetuksimab; azacitidin; klofarabin; decitabin; desatinib; deksrazoksan; docetaksel; epirubicin; oksaliplatin; erlotinib; raloksifen; fulvestrant; letrozol; gefitinib; gemtuzumab; trastuzumab; gefitinib; iksabepilon; lapatinib; lenalidomid; aminolevulinsku kiselinu; temozolomid; nelarabine; sorafenib; nilotinib; pegaspargazu; pemetreksed; rituksimab; dasatinib; talidomid; beksaroten; temsirolimus; bortezomib; vorinostat; kapecitabin; zoledronsku kiselinu; anastrozol; sunitinib; aprepitant i nelarabin, ili neku njihovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0032] Dodatna farmaceutski aktivna sredstva koja mogu da se koriste u lečenju kancera i koja mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili većim brojem jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju: inhibitore faktora rasta vaskularnog endotela (VEGF), inhibitore faktora rasta hepatocita/faktora rasipanja (HGF/SF), inhibitore angiopojetina 1 i/ili 2, agoniste liganda koji indukuje apoptozu koji se dovodi u vezu sa faktorom nekroze tumora (TRAIL), rekombinantni ligand humanog apo2 (TRAIL), inhibitore receptora za faktor rasta nalik insulinu 1 (IGFR-1), cFMS inhibitore, HER 2 inhibitore, c-met inhibitore, inhibitore aurora kinaze, inhibitore CDK 4 i/ili 6 i inhibitore B-raf.
[0033] Dalja dodatna farmaceutski aktivna sredstva koja mogu da se koriste u lečenju kancera i koja mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili većim brojem jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju konjugate lekova i antitela (ADC), u kojima je antitelo koje se vezuje za neki proten, poželjno je da to bude na ćeliji kancera, konjugovano preko veznika za hemijsko jedinjenje koje je za tu ćeliju kancera štetno. Primeri hemijskih jedinjenja koja su štetna za ćelije kancera obuhvataju derivate majtanzinoida i derivate auristatina.
[0034] Dodatna farmaceutski aktivna sredstva koja mogu da se koriste u lečenju kancera i koja mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili većim brojem jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju: epojetin alfa; darbepojetin alfa; panitumumab; pegfilgrastim; palifermin; filgrastim; denosumab; ancestim; AMG 102; AMG 319; AMG 386; AMG 479 (Ganitumab); AMG 511, AMG 900, AMG 655 (Konatumumab); AMG 745; AMG 951; i AMG 706 (Motezanib) ili neku njihovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0035] U još jednom aspektu, predmetni pronalazak odnosi se na upotrebu jedinjenja prema predmetnom pronalasku u kombinaciji sa jednim ili većim brojem farmaceutskih sredstava koja su inhinitori proteina u putu fosfatidilinozitol 3-kinaze (PI3K). Kombinacije jedinjenja prema predmetnom pronalasku zajedno sa inhibitorima proteina u PI3K putu pokazale su sinergiju u testovima rasta ćelija kancera, uključujući pojačanu apoptozu i ubijanje ćelija. Primeri proteina u PI3K putu obuhvataju PI3K, mTOR i PKB (poznat i kao Akt). PI3K protein postoji u nekoliko izoformi, uključujući α, β, δ, ili γ.
Postavljena je hipoteza da PI3K inhibitor koji može da se koristi u kombinaciji sa jedinjenjem prema predmetnom pronalasku može da bude selektivan za jednu ili veći broj izoformi. Pod izrazom selektivan podrazumeva se da jedinjenja ihibiraju jednu ili veći broj izoformi više nego ostale izoforme. Selektivnost je koncept koji je dobro poznat stručnjacima u ovoj oblasti i može se meriti dobro poznatom aktivnošću u in vitro ili ćelijskim testovima. Poželjna selektivnost podrazumeva selektivnost veću od 2-puta, poželjnije veću od 10-puta, a još poželjnija je 100-puta veća selektivnost za jednu ili veći broj izoformi u odnosu na druge izoforme. U jednom aspektu, inhibitori PI3K koji mogu da se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima prema predmetnom pronalasku je PI3K inhibitor selektivan za α izoformu. U još jednom aspektu, to jedinjenje je PI3K inhibitor selektivan za δ izoformu.
[0036] Primeri PI3K inhibitora koji mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili većim brojem jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju one koji su opisani u sledećim dokumentima: PCT objavljena prijava br. WO2010/151791; PCT objavljena prijava br. WO2010/151737; PCT objavljena prijava br. WO2010/151735; PCT objavljena prijava br. WO2010151740; PCT objavljena prijava br. WO2008/118455; PCT objavljena prijava br. WO2008/118454; PCT objavljena prijava br.
WO2008/118468; objavljena prijava SAD br. US20100331293; objavljena prijava SAD br.
US20100331306; objavljena prijava SAD br. US20090023761; objavljena prijava SAD br.
US20090030002; objavljena prijava SAD br. US20090137581; objavljena prijava SAD br.
US2009/0054405; objavljena prijava SAD br. U.S.2009/0163489; objavljena prijava SAD br. US 2010/0273764; objavljena prijava SAD br. U.S.2011/0092504; ili PCT objavljena prijava br.
WO2010/108074.
[0037] Poželjni inhibitori PI3K za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjima prema predmetnom pronalasku obuhvataju:
ili
ili neku njihovu farmaceutski prihvatljivu so.
1
[0038] Takođe je poželjno jedinjenje sa formulom IIa koja sledi, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so,
gde je X<1>fluor ili vodonik; Y<1>je vodonik ili metil grupa; a Z<1>je vodonik ili metil.
[0039] Poznata su jedinjenja koja inhibiraju i PI3K i mTOR (dvostruki inhibitori). U još jednom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje upotrebu dvostrukih PI3K i mTOR inhibitora za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjem prema predmetnom pronalasku.
[0040] mTOR je protein u PI3K putu. Još jedan aspekt prema predmetnom pronalasku podrazumeva upotrebu inhibitora mTOR u kombinaciji sa jednim ili većim brojem jedinjenja prema predmetnom pronalasku. Inhibitori mTOR koji mogu da se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima prema predmetnom pronalasku obuhvataju one koji su opisani u sledećim dokumentima: PCT objavljena prijava br.
WO2010/132598 ili PCT objavljena prijava br. WO2010/096314.
[0041] PKB (Akt) je takođe protein u PI3K putu. Još jedan aspekt predmetnog pronalaska podrazumeva upotrebu inhibitora mTOR u kombinaciji sa jednim ili većim brojem jedinjenja prema predmetnom pronalasku. Inhibitori PKB koji mogu da se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima prema predmetnom pronalasku obuhvataju one koji su opisani u sledećim dokumentima: Patent SAD br.7,354,944; Patent SAD br.7,700,636; Patent SAD br.7,919,514; Patent SAD br.7,514,566; Publikacija patentne prijave SAD br. US 2009/0270445 A1; Patent SAD br.7,919,504; Patent SAD br.7,897,619; ili PCT objavljena prijava br. WO 2010/083246 A1.
[0042] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da se koriste u kombinaciji sa inhibitorima CDK4 i/ili 6. Inhibitori CDK 4 i/ili 6 koji mogu da se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima prema predmetnom pronalasku obuhvataju one koji su opisani u sledećim dokumentima: PCT objavljena prijava br. WO 2009/085185 ili Publikacija patentne prijave SAD br. US2011/0097305.
[0043] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu da se koriste u kombinaciji sa farmaceutski aktivnim sredstvima kojima se leči mučnina. Primeri sredstava koja mogu da se koriste za lečenje mučnine obuhvataju: dronabinol; granisetron; metoklopramid; ondansetron; i prohlorperazin; ili neku njihovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0044] Uz to, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da se koriste u kombinaciji sa drugim sredstvima koja mogu da se koriste za lečenje kancera, kao što su acemanan; aklarubicin; aldesleukin; alitretinoin; amifostin; amrubicin; amsakrin; anagrelid; arglabin; arsen trioksid; BAM 002 (Novelos); bikalutamid; broksuridin; celmoleukin; cetroreliks; kladribin; klotrimazol; DA 3030 (Dong-A); daklizumab; denileukin diftitoks; deslorelin; dilazep; dokozanol; dokserkalciferol; doksifluridin; bromokriptin; citarabin; HIT diklofenak; interferon alfa; tretinoin; edelfosin; edrekolomab; eflornitin; emitefur; epirubicin; epoetin beta; etopozid fosfat; eksisulind; fadrozol; finasterid; fludarabin fosfat; formestan; fotemustin; galijum nitrat; gemtuzumab zogamicin; kombinacija gimeracil/oteracil/tegafur; glikopin; goserelin; heptaplatin; humani horionski gonadotropin; humani fetalni alfa fetoprotein; ibandronska kiselina; interferon alfa; interferon alfa prirodni; interferon alfa-2; interferon alfa-2a; interferon alfa-2b; interferon alfa-Nl; interferon alfa-n3; interferon alfakon-1; interferon alfa prirodni; interferon beta; interferon beta-1a; interferon beta-lb; interferon gamma prirodni; interferon gammala; interferon gamma-lb; interleukin-1 beta; jobenguan; irzogladin; lanreotid; LC 9018 (Iakult); leflunomid; lenograstim; lentinan sulfat; letrozol; leukocitni alfa interferon; leuprorelin; levamizol fluoruracil; liarozol; lobaplatin; lonidamin; lovastatin; mazoprokol; melarsoprol; metoklopramid; mifepriston; miltefosin; mirimostim; nespareni dvolančani RNK; mitoguazon; mitolaktol; mitoksantron; molgramostim; nafarelin; nalokson pentazocin; nartograstim; nedaplatin; nilutamid; noskapin; novi protein koji stimuliše eritropojezu; NSC 631570 oktreotid; oprelvekin; osateron; paklitaksel; pamidronska kiselina; peginterferon alfa-2b; pentosan polisulfat natrijum; pentostatin; picibanil; pirarubicin; zečije antitimocitno poliklonsko antitelo; polietilen glikol interferon alfa-2a; porfimer natrijum; raltitreksed; razburikaza; renijum Re 186 etidronat; RII retinamid; romurtid; samarium (153 Sm) leksidronam; sargramostim; sizofiran; sobuzoksan; sonermin; stroncijum-89 hlorid; suramin; tazonermin; tazaroten; tegafur; temoporfin; tenipozid; tetrahlordekaoksid; timalfasin; tirotropin alfa; toremifen; tozitumomab-jod 131; treosulfan; tretinoin; trilostan; trimetreksat; triptorelin; faktor nekroze tumora alfa prirodni; ubenimeks; vakcina protiv kancera bešike; Marujama vakcina; vakcina lizata melanoma; valrubicin; verteporfin; virulizin; zinostatin stimalamer; abareliks; AE 941 (Aeterna); ambamustin; antisens oligonukleotid; bcl-2 (Genta); APC 8015 (Dendreon); deksaminoglutetimid; diazikvone; EL 532 (Elan); EM 800 (Endorecherche); eniluracil; etanidazol; fenretinid; filgrastim SD01 (Amgen); galocitabine; gastrin 17 imunogen; HLA-B7 genska terapija (Vical); faktor stimulacije rasta kolonija granulocitnih makrofaga; histamin dihidrohlorid; ibritumomab tiuksetan; ilomastat; IM 862 (Citran); interleukin-2; iproksifen; LDI 200 (Milkhaus); leridistim; lintuzumab; CA 125 monoklonsko antitelo (MAb) (Biomira); MAb za kancer (Japan Farmaceutical Development); HER-2 i Fc MAb (Medareks); idiotipsko MAb 105AD7 (CRC Technology); idiotipsko CEA MAb (Trileks); LIM-1-jod 131 MAb (Techniclone); polimorfni epitelijalni mucin-itrijum 90 MAb (Antisoma); marimastat; menogaril; mitumomab; moteksafin gadolinium; MX 6 (Galderma); nolatreksed; P 30 protein; pegvisomant; porfiromicin; prinomastat; RL 0903 (Shire); rubitekan; satraplatin; natrijum fenilacetat; sparfosična kiselina; SRL 172 (SR Farma); SU 5416 (Pfizer); TA 077 (Tanabe); tetratiomolibdat; taliblastin; trombopojetin; kalaj etil etiopurpurin; tirapazamin; vakcina protiv kancera (Biomira); vakcina protiv melanoma (New York University); vakcina protiv melanoma (Sloan Kettering Institute); vakcina onkolizata melanoma (New York Medical College); vakcina virusnih lizata ćelija melanoma (Royal Newcastle Hospital); ili valspodar. Treba imati u vidu da sredstva koja su prethodno nabrojana mogu da se primene kao farmaceutski prihvatljive soli, tamo gde je to pogodno.
[0045] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu da se koriste u kombinaciji sa radioterapijom, hormonskom terapijom, hirurškim intervencijama i imunoterapijom, pri čemu su sve ove terapije dobro poznate stručnjacima u ovoj oblasti.
[0046] Kako jedno rešenje prema predmetnom pronalasku razmatra lečenje bolesti/stanja kombinacijom farmaceutski aktivnih jedinjenja koja mogu da se daju odvojeno, predmetni pronalazak se dalje odnosi na kombinaciju odvojenih farmaceutskih kombinacija u obliku kompleta. Komplet sadrži dve odvojene farmaceutske kombinacije: jedinjenje prema predmetnom pronalasku i drugo farmaceutsko jedinjenje. Komplet sadrži posudu u kojoj se čuvaju odvojene kombinacije, kao što je podeljena bočica ili podeljena vrećica od folije. Dodatni primeri ambalaže obuhvataju špriceve, kutije i kese. Uobičajeno je da komplet sadrži uputstvo za upotrebu odvojenih komponenanta. Komplet je posebno koristan kada je poželjno da se odvojene komponente daju u različitim doznim oblicima (npr. oralnim i parenteralnim), kada se daju u različitim doznim intervalima, ili kada je poželjno da precizno određivanje pojedinačnih komponenata u kombinaciji sprovodi lekar ili veterinar koji kombinaciju pripisuje.
[0047] Primer ovakvog kompleta je takozvano džep pakovanje. Džep pakovanja su dobro poznata u industriji ambalaže i široko rasprostranjena u upotrebi za pakovanje farmaceutskih pojedinačnih doznih oblika (tablete, kapsule i slično). Džep pakovanja se obično sastoje od table od relativno čvrstog materijala prekrivene folijom od plastike, za koju je poželjno da bude providna. U toku procesa pakovanja, u plastičnoj foliji formiraju se džepovi. Ovi džepovi veličinom i oblikom odgovaraju tabletama
1
ili kapsulama koje se pakuju. Zatim se tablete ili kapsule postavljaju u džepove, a ploča od relativno krutog materijala se lepi na plastičnu foliju, na onu stranu folije koja je suprotna od smera formiranja džepova. Time se tablete ili kapsule hermetički zatvaraju u džepove između plastične folije i table. Poželjno je da je izdržljivost navedene table takva da tablete ili kapsule mogu da se izvade iz džep pakovanja pritiskom na sam džep, čime nastaje otvor u tabli na mestu tog džepa. Tabletu ili kapsulu zatim je moguće izvaditi kroz navedeni otvor.
[0048] Može biti poželjno da se obezbedi mnemonik na kompletu, npr. u obliku brojeva neposredno uz tablete ili kapsule, gde navedeni brojevi odgovaraju danima režima terapije u kojima tako naznačene tablete ili kapsule treba da se uzimaju. Još jedan primer takvog mnemonika je kalendar odštampan na ploči, npr. "prva nedelja, ponedeljak, utorak,... itd... druga nedelja, ponedeljak, utorak, ..." itd. Druge varijacije mnemonika biće očigledne. "Dnevna doza" može da označava pojedinačnu tabletu ili kapsulu ili nekoliko pilula ili kapsula koje treba uzeti na određeni dan. Takođe, dnevna doza jedinjenja prema predmetnom pronalasku može da se sastoji od jedne tablete ili kapsule, dok dnevna doza drugog jedinjenja može da se sastoji od nekoliko tableta ili kapsula, ili obratno. Na mnemoniku bi to trebalo da bude označeno, tako da on pomaže u pravilnoj primeni aktivnih sredstava.
[0049] U još jednom specifičnom primeru izvođenja prema predmetnom pronalasku, obezbeđena je ambalaža dizajnirana tako da obezbeđuje dnevne doze jednu po jednu, onim redosledom kojim treba da se koriste. Poželjno je da takav dozator ima mnemonik, kako bi se dalje olakšalo pridržavanje režimu. Primer takvog mnemonika je mehanički brojač koji pokazuje broj dnevnih doza koje su izdate. Još jedan primer takvog mnemonika je memorija sa mikročipom koja se napaja baterijom, spojena sa ekranom od tečnog kristala ili zvučnim signalom koji, na primer, očitava datum kada je uzeta poslednja dnevna doza i/ili podseća pacijenta kada treba da uzme narednu dozu.
[0050] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku i druga farmaceutski aktivna jedinjenja, ukoliko je poželjno, mogu da se daju pacijentu bilo oralno, rektalno, parenteralno (na primer, intravenski, intramuskularno ili potkožno), intracisternalno, intravaginalno, intraperitonealno, intravezikalno, lokalno (na primer, praškovi, melemi ili kapi) ili u obliku bukalnog ili nazalnog spreja. Svi postupci koje stručnjaci u ovoj oblasti koriste za primenu farmaceutskog aktivnog sredstva obuhvaćeni su obimom zaštite predmetnog pronalaska. Specifičan aspekt je farmaceutska kombinacija kao što je definisana u patentnom zahtevu 1 do 4, koja je čvrsti dozni oblik, je kombinacija pogodna za parenteralnu injekciju, ili je tečni dozni oblik za oralno davanje. Lek za upotrebu u lečenju kancera kao što je definisan u patentnim zahtevima 14 do 16 ili jedinjenje za upotrebu u lečenju određenih kancera kao što je definisano u patentnim zahtevima 5 do 13, kao i estar, amid ili prolek kao što je definisano u patentnom zahtevu 17 i sadržanim u farmaceutskoj kombinaciji kao što je definisana u patentnom zahtevu 18, nije ograničeno u odnosu na oblik davanja.
[0051] Kombinacije primerene za parenteralnu injekciju mogu da sadrže fiziološki prihvatljive sterilne vodene ili nevodene rastvore, disperzije, suspenzije ili emulzije, kao i sterilne praškove za rekonstituciju u sterilne rastvore ili disperzije za injekcije. Primeri odgovarajućih vodenih i nevodenih nosača, razblaživača, rastvarača ili vozila obuhvataju vodu, etanol, poliole (propilen glikol, polietilen glikol, glicerol i slične), njihove odgovarajuće smeše, biljna ulja (kao što je maslinovo ulje) i organske estre pogodne za injekcije, kao što je etil oleat. Odgovarajuća fluidnost može da se održi, na primer, upotrebom obloge kao što je lecitin, održavanjem potrebnih dimenzija čestica u slučaju disperzija, i upotrebom površinski aktivnih supstanci.
[0052] Ove kombinacije mogu takođe da sadrže adjuvanse kao što su konzervansi, sredstva za vlaženje, emulgatori i sredstva za dispergovanje. Kontaminacija mikroorganizmima može da se spreči dodatkom različitih antibakterijskih i antifungalnih sredstava, na primer, parabena, hlorbutanola, fenola, sorbinske kiseline i sličnih. Takođe može da bude poželjno da se u sastav uvrste izotonična sredstva, na primer, šećeri, natrijum hlorid i slična. Produžena apsorpcija ubrizganih farmaceutskih kombinacija može da se postigne primenom sredstava koja odlažu apsorpciju, na primer, aluminijum monostearat i želatin.
[0053] Čvrsti dozni oblici za oralnu primenu obuhvataju kapsule, tablete, praškove i granule. U takvim čvrstim doznim oblicima, aktivno jedinjenje se meša sa najmanje jednim inertnim odabranim ekscipijensom (ili nosačem) kao što su dinatrijum citrat ili dikalcijum fosfat ili (a) punioci ili ekstenderi, kao što su, na primer, skrobovi, laktoza, saharoza, manitol i silicijumova kiselina; (b) vezivna sredstva, kao što su, na primer, karboksimetilceluloza, alginati, želatin, polivinilpirolidon, saharoza i akacija; (c) humektanti, kao što je, na primer, glicerol; (d) sredstva za dezintegraciju, kao što su, na primer, agaragar, kalcijum karbonat, krompirov skrob i skrob tapioke, alginska kiselina, neki kompleksni silikati i natrijum karbonat; (a) sredstva za odlaganje rastvaranja, kao što je, na primer, parafin; (f) sredstva za ubrzavanje apsorpcije, kao što su, na primer, kvarternerna amonijumova jedinjenja; (g) sredstva za vlaženje, kao što su, na primer, cetil alkohol i glicerol monostearat; (h) adsorbensi, kao što su, na primer, kaolin i bentonit; i (i) lubrikansi, kao što su, na primer, talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat ili njihove smeše. U slučaju kapsula i tableta, dozni oblici takođe mogu da sadrže pufere.
[0054] Čvrste kombinacije sličnog tipa mogu da se koriste kao punioci u punjenim kapsulama od mekog i tvrdog želatina, uz upotrebu ekscipijenasa kao što su laktoza ili mlečni šećer, kao i visokomolekulski polietilen glikoli i slična.
1
[0055] Čvrsti dozni oblici kao što su tablete, dražeje, kapsule, pilule i granule mogu da se pripreme sa oblogama i omotačima, kao što su enterične obloge i druge, u struci dobro poznate. Oni takođe mogu da sadrže sredstva za zamućivanje, te mogu da budu takvog sastava da otpuštaju aktivno jedinjenje ili jedinjenja u određenom delu intestinalnog trakta na odložen način. Primeri kombinacija koje se koriste kao nosioci u takvim slučajevima su polimerne supstance i voskovi. Aktivna jedinjenja takođe mogu da budu u mikroenkapsuliranom obliku, ukoliko je potrebno, sa jednim ili većim brojem prethodno pomenutih ekscipijenasa.
[0056] Tečni dozni oblici za oralnu primenu obuhvataju farmaceutski prihvatljive emulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i eliksire. Uz aktivna jedinjenja, tečni dozni oblici mogu da sadrže inertne razblaživače koji se u struci često koriste, kao što su voda ili drugi rastvarači, sredstva za poboljšavanje rastvorljivosti i emulgatori, kao što su, na primer, etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, dimetilformamid, ulja, konkretnije ulje pamukovog semena, ulje kikirikija, ulje kukuruznih klica, maslinovo ulje, ricinusovo ulje i ulje susama, glicerol, tetrahidrofurfuril alkohol, polietilen glikoli i estri masnih kiselina i sorbitana, ili smeše ovakvih supstanci, i slično.
[0057] Pored ovakvih inertnih razblaživača, preparati takođe mogu da uključuju adjuvanse, kao što su sredstva za kvašenje, emulgatore i sredstva za suspendovanje, zaslađivače, arome i mirisne supstance. Suspenzije, uz aktivno jedinjenje, mogu da sadrže sredstva za suspendovanje, kao što su, na primer, etoksilovani izostearil alkoholi, estri polioksietilena i sorbitola i sorbitana, mikrokristalna celuloza, aluminijum metahidroksid, bentonit, agar-agar i tragakant guma, ili smeše ovakvih supstanci, i slično.
[0058] Kombinacije za rektalnu primenu poželjno su u obliku supozitorija, koje mogu da se pripreme mešanjem jedinjenja prema predmetnom pronalasku sa odgovarajućim neiritirajućim ekscipijensima ili nosačima, kao što su kakao buter, polietilen glikol ili vosak za supozitorije, koji su čvrsti na uobičajenoj sobnoj temperaturi, ali tečni na temperaturi tela, te se stoga u rektumu ili vaginalnoj šupljini tope i otpuštaju aktivni sastojak.
[0059] Dozni oblici za topijsku primenu jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju masti, praškove, sprejeve i inhalante. Aktivno jedinjenje ili pogodna jedinjenja mešaju se pod sterilnim uslovima sa fiziološki prihvatljivim nosačem, i bilo kojim konzervansima, puferima ili propelentima koji bi mogli biti potrebni. Oftalmološke formulacije, masti za oči, praškovi i rastvori takođe su obuhvaćeni obimom zaštite predmetnog pronalaska.
1
[0060] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da se primene kod pacijenta u dozama koje se kreću u opsegu od oko 0,1 do oko 3000 mg na dan. Za normalnog odraslog čoveka sa telesnom masom od oko 70 kg, doza u opsegu od 0,01 do oko 100 mg po kilogramu telesne mase obično je dovoljna. Specifična doza i dozni opseg koji može da se koristi zavisi od brojnih faktora, uključujući potrebe pacijenta, ozbiljnost stanja ili bolesti koja se leči, i farmakološku aktivnost jedinjenja koje se daje.
Određivanje doznih opsega i optimalnih doza za konkretnog pacijenta spada u uobičajene veštine u struci.
[0061] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da se daju u obliku farmaceutski prihvatljivih soli, estara, amida ili prolekova. Izraz "soli" se odnosi na neorganske i organske soli jedinjenja prema predmetnom pronalasku. Navedene soli mogu da se pripremaju in situ u toku konačne izolacije i prečišćavanja jedinjenja, ili odvojenom reakcijom prečišćenog jedinjenja u obliku slobodne baze ili kiseline sa pogodnom organskom ili neorganskom bazom ili kiselinom, i izolovanjem soli koja nastaje u toj reakciji. Reprezentativni primeri soli obuhvataju hidrobromide, hidrohloride, sulfate, bisulfate, nitrate, acetate, oksalate, palmitate, stearate, laurate, borate, benzoate, laktate, fosfate, tozilate, citrate, maleate, fumarate, sukcinate, tartarate, naftilate, mezilate, glukoheptonate, laktobionate i laurilsulfonate, i slične. Soli mogu da obuhvataju katjone na bazi alkalnih i zemnoalkalnih metala, kao što su natrijum, litijum, kalijum, kalcijum, magnezijum i slični, kao i netoksične amonijumove, kvarternerne amonijumove i aminske katjone koji obuhvataju, ali nisu ograničeni na, amonijum, tetrametilamonijum, tetraetilamonijum, metilamin, dimetilamin, trimetilamin, trietilamin, etilamin i slične. Videti, na primer, S. M. Berge et al., "Pharmaceutical Salts," J Pharm Sci, 66: 1-19 (1977).
[0062] Farmaceutski prihvatljivi estri jedinjenja ovog pronalaska obuhvataju C1-C8alkil estre. Prihvatljivi estri takođe obuhvataju C5-C7cikloalkil estre, kao i arilalkil estre kao što je benzil. C1-C4alkil estri obično se koriste. Estri jedinjenja ovog pronalaska mogu da se pripreme prema postupcima koji su dobro poznati u oblasti.
[0063] Farmaceutski prihvatljivi amidi jedinjenja ovog pronalaska obuhvataju amide dobijene od amonijaka, primarnih C1-C8alkil amina, i sekundarnih C1-C8dialkil amina. U slučaju sekundarnih amina, amin može takođe da bude u obliku neke 5- ili 6-člane heterocikloalkil grupe koja sadrži najmanje jedan atom azota. Amidi dobijeni od amonijaka, C1-C3primarnih alkil amina i C1-C2dialkil sekundarnih amina se obično koriste. Amidi jedinjenja ovog pronalaska mogu da se pripreme prema postupcima koji su dobro poznati stručnjacima u oblasti.
[0064] Izraz "prolek" pedstavlja jedinjenja koja se transformišu in vivo da bi se dobilo jedinjenje ovog pronalaska. Transformacija može da se javi putem raznih mehanizama, kao što je hidrolizom u krvi.
1
Diskusija od upotrebi prolekova obezbeđena je od strane T. Higuchi i W. Stella, "Prodrugs as Novel Delivery Systems," Vol.14 of the A.C.S. Symposium Series, i u Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.
[0065] Jedinjenje ovog pronalaska sadrži funkcionalnu grupu karboksilne kiseline, a prolek je odabran od estra obrazovanog zamenom atoma vodonika kisele grupe grupom odabranom od (C2-C12)alkanoiloksimetila, 1-(alkanoiloksi)etila koji ima od 4 do 9 atoma ugljenika, 1-metil-1-(alkanoiloksi)etila koji ima od 5 do 10 atoma ugljenika, alkoksikarboniloksimetila koji ima od 3 do 6 atoma ugljenika, 1-(alkoksikarboniloksi)etila koji ima od 4 do 7 atoma ugljenika, 1-metil-1-(alkoksikarboniloksi)etila koji ima od 5 do 8 atoma ugljenika, N-(alkoksikarbonil)aminometila koji ima od 3 do 9 atoma ugljenika, 1-(N-(alkoksikarbonil)aminometila koji ima od 4 do 10 atoma ugljenika, 3-ftalidila, 4-krotonolaktonila, gama-butirolakton-4-ila, di-N,N-(C1-C2)alkilamino(C2-C3)alkila (kao što je βdimetilaminoetil), karbamoil-(C1-C2)alkila, N,N-di(C1-C2)alkilkarbamoil-(C1-C2)alkila i piperidino-, pirolidino- ili morfolino(C2-3)alkila.
[0066] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu da postoje u nesolvatisanom i solvatisanom obliku sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračima kao što su voda (hidrat), etanol i slični. Predmetni pronalazak svojim obimom zaštite obuhvata i solvatisane i nesolvatisane oblike.
[0067] Takođe je predviđeno da predmetni pronalazak obuhvati jedinjenja koja su sintetisana in vitro upotrebom laboratorijskih tehnika, kao što su one koje su dobro poznate hemičarima koji se bave sintezom; ili sintetisana pomoću in vivo tehnika, kao na primer, putem metabolizma, fermentacije, varenja i sl. Obimom zaštite predmetnog pronalaska takođe je obuhvaćeno da jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da budu sintetisana kombinacijom in vitro i in vivo tehnika.
[0068] Predmetni pronalazak takođe obuhvata izotopski obeležena jedinjenja, koja su identična onima koja su ovde navedena, osim što je u njima jedan ili veći broj atoma supstituisan atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit ot atomske mase ili masenog broja koji se obično sreće u prirodi. Primeri izotopa koji mogu da se ugrade u jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, kao što su<2>H,<3>H,<13>C,<14>C,<15>N,<16>O,<17>O,<18>O,<31>P,<32>P,<35>S,<18>F i<36>Cl. U jednom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja u kojima je jedan ili veći broj atoma vodonika supstituisan atomima deuterijuma (<2>H).
[0069] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku koja sadrže prethodno navedene izotope i/ili druge izotope drugih atoma obuhvaćena su obimom zaštite predmetnog pronalaska. Određena izotopski obeležena jedinjenja prema predmetnom pronalasku, na primer ona u koja su ugrađeni radioaktivni
1
izotopi kao što su<3>H i<14>C korisna su u testovima tkivne preraspodele lekova i/ili supstrata. Tricijumski, tj.
<3>H i 14-ugljenični, tj.<14>C izotopi su posebno poželjni zbog lakoće pripreme i detekcije. Dalje, supstitucija težim izotopima kao što je deuterijum, tj.<2>H može da dovede do određenih terapeutskih prednosti koje su posledica veće metaboličke stabilnosti, na primer, produženog poluživota in vivo ili smanjenja potrebne doze, te stoga u nekim okolnostima može da bude poželjna. Izotopski obeležena jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu, uopšteno posmatrano, da se dobiju supstitucijom lako dostupnog izotopski obeleženog reagensa reagenasom koji nije izotopski obeležen.
[0070] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da postoje u različitim čvrstim stanjima, uključujući kristalna stanja i amorfna stanja. Različita kristalna stanja, takođe poznata pod imenom polimorfna, i amorfna stanja jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvaćena su obimom zaštite predmetnog pronalaska.
[0071] Prilikom sinteze jedinjenja prema predmetnom pronalasku, moguće je da će biti poželjna upotreba određenih odlazećih grupa. Izraz "odlazeća grupa" ("LG") generalno se odnosi na grupe koje je moguće supstituisati nukleofilom. Takve odlazeće grupe su poznate u struci. Primeri odlazećih grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, halide (npr. I, Br, F, Cl), sulfonate (npr. mezilat, tozilat), sulfide (npr. SCH3), N-hidroksisukcinimid, N-hidroksibenzotriazol i slične. Primeri nukleofila obuhvataju, ali nisu ograničeni na, amine, tiole, alkohole, Grinjarove reagense, anjonske vrste (npr. alkokside, amide, karbanjone) i slične.
[0072] Primeri koji će biti predstavljeni u tekstu koji sledi ilustruju konkretna rešenja predmetnog pronalaska. Ovi primeri su namenjeni kao reprezentativni, te nije namera da na bilo koji način ograničavaju obim zaštite predmetnih patentnih zahteva. Osim ukoliko je naznačeno drugačije, kada se u predmetnoj prijavi koristi procenat u smislu neke čvrste supstance, taj procenat označava maseni procenat u odnosu na navedenu čvrstu kombinaciju. Kada se koristi procenat u smislu neke tečnosti, navedeni procenat je zapreminski procenat u odnosu na posmatrani rastvor.
[0073]<1>H-NMR spektri su obično snimani na spektometru Bruker Avance III 500 (Bruker, Bilerica, MA), pri radu na<1>H frekvenciji od 500,13 MHz, opremljenom sondom Bruker PABBI 5 mm sa gradijentom po z osi; ili na Bruker Avance II 400 spektrometru pri programu rada na frekvenciji<1>H od 400,23 MHz, opremljenom sondom Bruker PABBO 5 mm sa gradijentom po z osi. Uzorci su obično rastvarani u 500 ml DMSO-d6ili CD3OD za potrebe NMR analize. Hemijska pomeranja<1>H su navedena u odnosu na rezidualne signale rastvarača DMSO-d6na δ 2,50 i CD3OD na δ 3,30.
1
[0074] Značajni maksimumi su predstavljeni u tabulisanom obliku i obično obuhvataju: broj protona, multiplicitet (s, singlet; d, dublet; dd, dublet dubleta; t, triplet; q, kvartet; m, multiplet, br s, široki singlet) i konstantu(e) kuplovanja u hercima.
[0075] Elektron-jonizacioni (EI) maseni spektri obično su snimani na masenom spektrometru Agilent Technologies 6140 Quadrupole LC/MS. Rezultati masene spektrometrije navedeni su kao odnos mase nad naelektrisanjem, nakon čega ponekad sledi relativna zastupljenost svakog jona (u zagradi). Polazni materijali u primerima koji slede obično su ili dostupni iz komercijalnih izvora, kao što su Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ili putem procedura poznatih iz literature.
Ovde mogu da se koriste sledeće skraćenice:
2
PRIMERI
[0076] U tekstu koji sledi, biće predstavljeni referentni primeri i primer kako jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da se dobiju. Referentni primeri nisu obuhvaćeni obimom zaštite predmetnog pronalaska.
REFERENTNI PRIMER 1
[0077]
2-((3R,5R,6S)-1-((S)-1-terc-butoksi-1-oksobutan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
Korak A.2-(3-Hlorfenil)-1-(4-hlorfenil)etanon
[0078]
[0079] U rastvor 2-(3-hlorfenil)sirćetne kiseline (10 g, 58,6 mmol) u THFu (58 ml) polako je dodato 117 ml 1 M rastvora natrijum bis-(trimetilsilil)amida u THF-u u toku 1 h na -78<o>C. Nakon što je smeša mešana na -78<o>C 40 minuta, dodat joj je rastvor metil 4-hlorbenzoata (10 g, 58,6 mmol) u THF-u (35 ml)
2
u periodu od 10 min. Reakciona smeša je mešana na -78<o>C tokom 3 h, nakon čega je ostavljena da se ohladi na 25<o>C te je mešana dodatnih 2 h do završetka reakcije. Reakcija je zaustavljena dodatkom zasićenog vodenog rastvora NH4Cl, te je većina THF-a uklonjena pod sniženim pritiskom. Ostatak je estrahovan etilacetatom (2 x 100 ml). Spojeni organski slojevi isprani su zasićenim rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan. Proizvod je prekristalisan iz smeše etar/propan kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste supstance.
Korak B. Metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-oksopentanoat
[0080]
[0081] U rastvor 52,1 g (197 mmol) 2-(3-hlorfenil)-1-(4-hlorfenil)etanona (referentni primer 1, korak A) i metil akrilata (19,5 ml, 216 mmol) u 360 ml THF-a polako je dodato 20 ml 1 M rastvora kalijum tercbutoksida u THF-u na 0<o>C u toku 20 minuta (reakciona temperatura održavana je < 10 °C). Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Nakon što je mešana na st 1 h, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, razblažena vodom i estrahovana etilacetatom. Spojeni organski slojevi isprani su zasićenim rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom pod pritiskom gasa na silika gelu (eluent: 15% EtOAc/heksani) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bezbojne tečnosti. R je CH3.
Korak C. (4S,5S)-metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksipentanoat i (4R,5R)-metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi pentanoat
[0082]
[0083] U rastvor 75,1 g (213 mmol) metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-oksopentanoata (referentni primer 1, korak B) u MeOH (0,71 L, c = 0,3 M) na 0<o>C dodat je natrijum borhidrid (8058 mg, 213 mmol) u nekoliko manjih porcija. Nakon što je reakciona smeša mešana na 0<o>C 30 min, reakcija je zaustavljena ledeno hladnom H2O, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i estrahovana EtOAcom. Spojeni organski slojevi su isprani (zasićenim vodenim rastvorom NaCl), osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom pod pritiskom gasa na silika gelu (eluent: 20 do 30% EtOAc/heksani, gradijentna elucija) dobijena je smeša naslovnih jedinjenja u obliku bezbojne tečnosti.
Korak D. (4S,5R)-Metil 5-azido-4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)pentanoat i (4R,5S)-metil 5-azido-4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)pentanoat
[0084]
[0085] U rastvor 63,1 g (179 mmol) (4S,5S)-metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksipentanoata i (4R,5R)-metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksipentanoata (referentni primer 1, korak C) i trietilamina (49,8 ml, 357 mmol) u DCM-u (600 ml, 0,3 M) dodat je metansulfonilhlorid (18 ml, 232 mmol) na 0<o>C u kapima u toku 10 minuta. Reakciona smeša je mešana na 0<o>C 40 minuta, dok je za praćenje završetka reakcije korišćena TLC. Reakcija je potom zaustavljena ledeno hladnom vodom, estrahovana (3 x DCM) i isprana zas. vod. rastvorom NaCl. Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom.
[0086] Sirovi mezilat koji je sintetisan na ovaj način rastvoren je u DMF-u (350 ml, 0,5 M) te mu je dodat natrijum azid (58 g, 893 mmol) u nekoliko porcija. Smeša je zagrejana do 100<o>C, te je, nakon što je mešana na 100<o>C 30 minuta, ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i estrahovana pomoću EtOAc. Spojeni organski slojevi isprani (zasićenim vodenim rastvorom NaCl), osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom pod pritiskom gasa na silika gelu (eluent: 5 do 20% EtOAc/heksani, gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bezbojne tečnosti.
Korak E. (5R,6S)-5-(3-Hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)piperidin-2-on
2
[0088] U rastvor 45,9 g (121 mmol) metil 5-azido-4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)pentanoata (referentni primer 1, korak D) u smeši THF/H2O (4:1, 375 ml) dodato je 152 ml 1 M rastvora trimetilfosfina u THF-u (152 mmol). Nakon 1 h mešanja na 25<o>C, većina THF-a udaljena je pod sniženim pritiskom. Ostatak je zaalkalisan (ledeno hladan 2 M LiOH) te je proizvod estrahovan metilen hloridom. Spojeni organski slojevi isprani su zasićenim rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobila bela čvrsta supstanca.
[0089] Ova čvrsta supstanca je rastvorena u smeši MeOH/zasićeni vodeni NaHCO3(4:1, 2,4 L, c = 0,05 M) te je reakcija zagrevana uz refleks tokom 3 h. Višak organskog rastvarača uklonjen je pod sniženim pritiskom, ostatak je razblažen vodom i estrahovan (2 x 10% MeOH/DCM). Spojeni organski slojevi isprani su zasićenim rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobio trans-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)piperidin-2-on u obliku smeše stereoizomera. Pojedinačni stereoizomeri su razdvojeni hiralnom HPLC (brzina protoka: 18 ml/min na Chiralcel® OD-H 20 mm, I.D. x 250 mm, 5 mic kolona (Daicel Inc., Fort Lee, NJ) uz primenu 40% izopropil alkohola/heksena kao eluenta) kako bi se dobilo naslovno jedinjenje (tR= 8,2 min) u obliku bele čvrste supstance.
[α]D= 158 (T = 23,4 °C, c = 1,12, MeOH);<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,21 (2 H, d, J = 8,2 Hz), 7,09-7,19 (3 H, m), 7,04-7,01 (1 H, m), 6,97 (2 H, d, J = 8,2 Hz), 6,80-6,77 (1 H, m), 5,83 (1 H, s, br), 4,51 (1 H, d, J = 9,8 Hz), 2,94-2,77 (1 H, m), 2,74-2,60 (2 H, m), 2,34-2,20 (1 H, m), 2,17-2,08 (1 H, m); MS (ESI) 320,0 [M H]<+>.
[0090] Prethodno opisanim postupkom takođe je dobijen enantiomer naslovnog jedinjenja, (5S,6R)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)piperidin-2-on: tR= 12,4 min; [α]D= -156 (T = 23,4 °C, c = 1,13, MeOH).
Korak F. Terc-butil (2S)-2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-okso-1-piperidinil)butanoat i terc-butil (2R)-2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-okso-1-piperidinil)butanoat
2
[0092] U rastvor 13,5 g (42,2 mmol) (5R,6S)-5,6-bis(4-hlorfenil)piperidin-2-ona (referentni primer 1, korak E) u 140 ml DMF-a dodato je 4,22 g (105 mmol) disperzije 60% natrijum hidrida u mineralnom ulju na 0<o>C. Nakon 20 minuta mešanja dodat je terc-butil 2-brombutanoat (28,2 g, 126 mmol) na 0<o>C, te je dobijeni rastvor mešan na 25<o>C 1,5 h do završetka reakcije. Potom je dodat zas. vod. rastvor NH4Cl nakon čega je smeša estrahovana etilacetatom. Spojeni organski slojevi isprani su vodom i zasićenim rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom pod pritiskom gasa na silika gelu (eluent: 20 do 50% EtOAc/heksani, gradijentna elucija) dobijen je terc-butil (2S)-2-((2S,3R)- 3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-okso-1-piperidinil)butanoat kao manje zastupljeni izomer sa bržom elucijom:<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,22 (2 H, d, J= 8,2 Hz), 7,20-7,10 (2 H, m), 7,08 (2 H, t, J= 8,2 Hz) 6,99-6,96 (1 H, m), 6,77-6,73 (1 H, m), 4,48 (1 H, d, J= 9,4 Hz), 3,24 (1 H, t, J= 7,0 Hz), 3,04-2,94 (1 H, m), 2,72-2,58 (2 H, m), 2,25-2,00 (3 H, m), 1,93-1,82 (1 H, m), 1,45 (9 H, s), 0,98 (3 H, t, J= 7,4 Hz); MS (ESI) 462,1 [M H]<+>.
[0093] Daljim eluiranjem dobijen je terc-butil (2R)-2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-okso-1-piperidinil)butanoat kao sporiji, zastupljeniji izomer.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,24 (2 H, d, J= 8,2 Hz), 7,18-7,10 (2 H, m), 7,01 (2 H , d, J= 8,2 Hz), 7,02-6,98 (1 H, m), 6,82-6,78 (1 H, m), 5,83 (1 H, s), 4,54 (1 H, d, J = 9,8 Hz), 3,09 (1 H, dd, J= 8,2, 4,3 Hz), 3,05-2,99 (1 H, m), 2,70-2,64 (2 H, m), 2,28-2,18 (2 H, m), 2,08-2,02 (1 H, m), 1,48 (9 H, s), 0,57 (3 H, t, J= 7,4 Hz); MS (ESI) 462,1 [M H]<+>.
Korak G. Terc-butil (2S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-1-il)butanoat i . terc-butil (2S)-2-((3R,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-1-il)butanoat [0094]
2
[0095] U rastvor 1,45 g (3,14 mmol) terc-butil (2S)-2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-okso-1-piperidinil)butanoata (referentni primer 1, korak F) i alil bromida (0,326 mL, 3,76 mmol) u 12,5 ml THF-a dodato je 3,3 ml 1 M rastvora litijum bis(trimetilsilil)amida u THF-u (3,3 mmol), u kapima, na -78<o>C. Nakon mešanja na -78<o>C 3 h, reakcija je zaustavljena zasićenim vod. rastvorom NH4Cl te estrahovana etilacetatom. Spojeni organski slojevi isprani su zasićenim rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom pod pritiskom gasa na silika gelu (50 g SiO2, eluent: 5 do 20% EtOAc/heksani, gradijentna elucija) dobijen je terc-butil (2S)-2-((3R,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-1-il)butanoat kao zastupljeniji izomer sa bržom elucijom.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,27-7,24 (2 H, m), 7,21-7,12 (2 H, m), 7,11-7,00 (3 H, m), 6,93-6,87 (1 H, m), 5,90-5,77 (1 H, m), 5,19-5,09 (2 H, m), 4,64 (1 H, d, J = 8,6 Hz), 3,21-3,10 (2 H, m), 2,80-2,71 (1 H, m), 2,70-2,63 (1 H, m), 2,56-2,48 (1 H, m), 2,30-2,15 (2 H, m), 2,07-1,99 (1 H, m), 1,60-1,48 (1 H, m), 1,47 (9 H, s), 0,61 (3 H, t, J = 7,6 Hz); MS (ESI) 446,0 [M H]<+>.
Daljom elucijom dobijen je terc-butil (2S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-1-il)butanoat kao manje zastupljen izomer sa sporijom elucijom.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,23 (2 H, d, J = 8,2 Hz), 7,19-7,07 (2 H, m), 7,01-6,95 (3 H, m), 6,77-6,72 (1 H, m), 5,95-5,77 (1 H, m), 5,16-4,99 (2 H, m), 4,51 (1 H, d, J = 10,6 Hz), 3,13-3,04 (1 H, m), 2,94 (1 H, dd, J=7,8, 4,3 Hz), 2,87-2,77 (1 H, m), 2,68-2,58 (1 H, m), 2,39-2,27 (2 H, m), 2,16-1,95 (2 H, m), 1,54-1,50 (1 H, m), 1,51 (9 H, s), 0,55 (3 H, t, J= 7,4 Hz); MS (ESI) 446,0 [M H]<+>.
Korak H.2-((3R,5R,6S)-1-((S)-1-terc-butoksi-1-oksobutan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0096]
2
[0097] U brzo mešani rastvor 842 mg (1,67 mmol) terc-butil (2S)-2-((3S, 5R, 6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-1-il)butanoata (referentni primer 1, korak G) u smeši 7 ml vode, 5 ml acetonitrila i 5 ml CCl4dodat je natrijum perjodat (1,43 g, 6,70 mmol), a potom i rutenijum(III) hlorid hidrat (37,8 mg, 0,168 mmol). Nakon žustrog mešanja u toku 18 h, reakciona smeša je zakiseljena (10% limunska kiselina) i razblažena EtOAc. Reakciona smeša je proceđena kroz celit a filtrat estrahovan pomoću EtOAc. Spojeni organski slojevi isprani su zasićenim rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen reverzno-faznom preparatornom HPLC (GeminiTM Prep C185 µm kolona, Phenomenex, Torrance, CA; eluent: 60 do 80% acetonitril 0,1% TFA u vodi 0,1% TFA, gradijentna elucija) kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste supstance.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,35 (2 H, d, J= 8,6 Hz), 7,27-7,24 (3 H, m), 7,22-7,16 (1 H, m), 7,18 (2 H, d, J = 8,6 Hz), 4,85 (1 H, d, J = 5,1 Hz), 3,36 (1 H, dd, J= 8,6, 3,5 Hz), 3,18-3,14 (1 H, m), 2,92-2,80 (2 H, m), 2,79-2,72 (1 H, m), 2,32-2,18 (2 H, m), 2,15-2,06 (1 H, m), 1,63-1,50 (1 H, m), 1,44 (9 H, s), 0,67 (3 H, t, J= 7,4 Hz); MS (ESI) 520,2 [M H]<+>, 518,0 [M - H]-.
[0098] Sledeći referentni primer 2 pripremljen je kao što je opisano u referentnom primeru 1, uz supstituciju terc-butil 2-brompentanoata u koraku F odgovarajućom količinom etil 2-brombutanoata, etil 2-brom-3-metilpentanoata, etil 2-brompentanoata i etil 2-brom-2-ciklopropilacetata, redom.
REFERENTNI PRIMER 2
[0099]
2
2-((3R,5R,6S)-5-(3-Hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-etoksi-1-oksobutan-2-il)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0100]<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,42-7,33 (3 H, m), 7,32-7,28 (3 H, m), 7,27-7,24 (2 H, m), 4,91 (1 H, d, J= 3,5 Hz), 4,23-4,10 (2 H, m), 3,54 (1 H, dd, J = 8,6, 3,5 Hz), 3,22-3,16 (1 H, m), 2,84-2,73 (3 H, m), 2,38-2,30 (2 H, m), 2,05-1,97 (1 H, m), 1,60-1,50 (1 H, m), 1,27 (3 H, t, J= 7,4 Hz), 0,70 (3 H, t, J= 7,4 Hz); MS (ESI) 491,8 [M H]<+>, 489,9 [M - H]-.
REFERENTNI PRIMER 3
[0101]
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-okso-1-(pentan-3-il)piperidin-3-il)sirćetna kiselina
Korak A. (5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-(2,4-dimetoksibenzil)piperidin-2-on.
[0102]
[0103] U mutni rastvor (2,4-dimetoksifenil)metanola (97,00 g, 577 mmol) i piridina (93 ml, 1153 mmol) u anhidrovanom Et2O (1153 ml) dodat je tionil hlorid (116 ml, 1586 mmol) u kapima u toku 1 časa, na 0<o>C u atmosferi azota uz mehaničko mešanje. Nakon 1 časa, reakciona smeša je izlivena u 2 l ledene vode, te su se slojevi razdvojili. Vodeni sloj je estrahovan pomoću Et2O (2 x 1 l) pa su organski slojevi sakupljeni, isprani ledenom vodom (1,2 l), hladnom smešom zas. vod. rastvora NaCl/zas. vod. NaHCO3(5:1) (1,2 l), osušeni (MgSO4), proceđeni, te je većina etra uklonjena u vakuumu na 12<o>C. Dodat je benzen (300 ml) te je smeša koncentrovana na 12<o>C dok nije ostalo 100 ml benzena, kako bi se dobio rastvor 1-(hlormetil)-2,4-dimetoksibenzena.80g (250 mmol) (5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)piperidin-2-ona (referentni primer 1, korak E) dodato je u porcijama, u toku 20 minuta, u smešu NaH (19,98 g, 500 mmol) u anhidrovanom DMF-u (400 ml) na 0<o>C u atmosferi azota. Nakon ovog dodavanja, ledeno kupatilo je uklonjeno i smeša je mešana na st 1 čas pre hlađenja rastvora na 0<o>C. U ohlađeni rastvor dodat je rastvor 1-(hlormetil)-2,4-dimetoksibenzena (107 g, 575 mmol) u benzenu, te je reakciona smeša ostavljena da se ohladi do st. Nakon 16 časova, reakciona smeša je izlivena u ledenu vodu (2 l) i estrahovana pomoću EtOAc (3 x 1 l). Organski slojevi su spojeni, isprani vodom (3 x 1 l), zas. vod. rastvorom NaCl (1 l), osušeni (MgSO4), proceđeni i koncentrovani u vakuumu dajući gusto žuto ulje. Prečišćavanje na Combiflash XL (hromatografija u koloni pod pritiskom gasa, Teledyne Isco, Lincoln, NE) uz četiri serijski povezane kolone od 330 g i jednu kolonu od 1,5 kg i uz eluciju sa 35-40-45-50-55% EtOAc/heksani, dalo je veoma bledo žuto ulje. Ulje je rastvoreno u benzenu te je rastvarač uklonjen u vakuumu a ostatak osušen u vakuumu u toku 2 dana, kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku bele pene (105,8 g, 90%).
Korak B. (5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-(2,4-dimetoksibenzil)-3-metilpiperidin-2-on.
[0104]
1
[0105] Iz rastvora (5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-(2,4-dimetoksibenzil)piperidin-2-ona (referentni primer 3, korak A) (140,34 g, 298 mmol) u anhidrovanom THF-u (994 ml) evakuisan je gas barbotiranjem argona kroz rastvor u toku 20 minuta, dok je rastvor hlađen do -78<o>C. Dodat je jodmetan (23,32 ml, 373 mmol), a potom i LHMDS (328 ml, 328 mmol) u toku 15 minuta. Reakciona smeša je mešana 15 minuta na -78<o>C nakon čega je uklonjeno ledeno kupatilo te je smeša mešana na st 12 časova. Reakcija je zaustavljena dodatkom zas. vod. NH4Cl te su se slojevi razdvojili. Vodeni sloj je estrahovan pomoću Et2O (2 x 500 ml) pa su organski slojevi sakupljeni, isprani zas. vod. rastvorom NaCl, osušeni (MgSO4), proceđeni i koncentrovani u vakuumu dajući narandžasto ulje. Prečišćavanjem (nanošenjem u navlaženom stanju sa malom količinom DCM-a) na Combiflash Companion XL (hromatografija u koloni pod pritiskom gasa, Teledyne Isco, Lincoln, NE) sa SiO2kolonom od 1,5 kg i uz eluciju sa 4 l od svake od sledećih smeša: 15-20-25-30-35% EtOAc/heksani dobijeno je naslovno jedinjenje kao veoma gusto žuto ulje i u obliku smeše C-3 dijastereomera u odnosu 3,7:1.
Korak C. (5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-(2,4-dimetoksibenzil)-3-metilpiperidin-2-on.
[0106]
[0107] Iz rastvora (5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-(2,4-dimetoksibenzil)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 3, korak B, smeša C-3 dijastereomera) (117,0 g, 242 mmol) u anhidrovanom THF-u (966 ml) udaljen je gas barbotiranjem argona kroz rastvor u toku 20 minuta. Dodat je alil bromid (105 ml, 1208 mmol), a potom i LHMDS (725 ml, 725 mmol) u toku 20 minuta. Reakciona smeša je zagrevana na 40<o>C u atmosferi argona 5 časova. Reakciona smeša je ohlađena do st, te je reakcija zaustavljena dodatkom zas. vod. NH4Cl (500 ml), nakon čega su se slojevi razdvojili. Vodeni sloj je estrahovan pomoću EtOAc (2 x 1 l) pa su organski slojevi sakupljeni, isprani zas. vod. rastvorom NaCl (1 l), osušeni (MgSO4), proceđeni i koncentrovani u vakuumu dajući crveno ulje (180 g). Prečišćavanjem na Biotage sistemu
2
(Charlotte, NC) sa SiO2kolonom od 1,5 kg i uz eluciju smešom 10-30% EtOAc/heksani dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku veoma bledo-žutog ulja, u smeši (3S):(3R) dijastereomera u odnosu 3,7:1.
Korak D. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-on
[0108]
[0109] Rastvor (5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-(2,4-dimetoksibenzil)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 3, korak C, smeša dijastereomera) (105,87 g, 202 mmol) u TFA (778 ml, 1.01E+04 mmol) je zagrejan na 50<o>C u toku 2 časa pre koncentrovanja reakcione smeše u vakuumu. Ostatak je azeotropisan heksanima kako bi se uklonila sva TFA. Ulje duboko ljubičaste boje, koje je sadržalo neke ostatke, sakupljeno je minimalnom količinom DCM-a, proceđeno i dobro ispano DCM-om. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo tamno ljubičasto ulje. Prečišćavanje (vlažno nanošenje sa minimalnom količinom DCM-a) na Biotage Isolera (Biotage, Charlotte, NC) sistemu sa kolonom od 1,5 kg i uz eluciju smešom 25-40% EtOAc/heksani dalo je naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste supstance.
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 1,30 (s, 3H), 2,06 (m, 2H), 2,52 (dd, J= 13,7 i 7,1 Hz, 1H), 2,60 (dd, J= 13,7 i 7,8 Hz, 1H), 3,06 (m, 1H), 4,50 (d, J= 10,7 Hz, 1H), 5,17 (m, 2H), 5,81 (br s, 1H), 5,86 (m, 1H), 6,77 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,00 (s, 1H), 7,12 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,17 (m, 1H), 7,20 (d, J = 8,3 Hz, 2H), [□]<22>
D+182,2° (c 1,55, CHCl3).
Korak E. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-(pentan-3-il)piperidin-2-on
[0110]
[0111] U suspenziju 1,81 g (4,8 mmol) (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 3, korak D) u 3-brompentanu (17,6 ml) dodato je 967 mg (60 mas.% u mineralnom ulju, 24,2 mmola) natrijum hidrida. Dobijena mlečno bela kaša zagrevana je na 120<o>C u toku 20 časova, a zatim je dodato još 3-brompentana (5,1 ml). Nakon još 24 h na 120<o>C, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i reakcija je zaustavljena zasićenim vodenim amonijum hloridom. Smeša je estrahovana etilacetatom (3 x) spojeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, zatim proceđeni, a filtrat je koncentrovan. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom pod pritiskom gasa na silika gelu (2 do 26% EtOAc/heksani, gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste suptance.
Korak F. Sinteza 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-okso-1-(pentan-3-il)piperidin-3-il)sirćetne kiseline
[0112] U rastvor 725 mg (1,63 mmol) (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-(pentan-3-il)piperidin-2-ona (referentni primer 2, korak A) u smeši acetonitrila (4 ml), ugljen tetrahlorida (4 ml) i vode (5,9 ml) dodato je 1,40 g (6,53 mmol) natrijum perjodata, a potom i 44 mg (0,20 mmol) rutenijum(III) hlorid hidrata. Tamno smeđa dvofazna smeša je žustro mešana na sobnoj temperaturi 21 čas, nakon čega je zakiseljena dodatkom 1 N HCl. Smeša je razblažena pomoću EtOAc i proceđena kroz sloj Celite® (J.T. Baker, Phillipsberg, NJ, dijatomejska zemlja). Nakon filtracije, slojevi su razdvojeni, te je vodeni sloj estrahovan EtOAc (1 x). Spojeni organski slojevi isprani su zasićenim vodenim natrijum hloridom (1 x), potom osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom pod pritiskom gasa na silika gelu (0 do 25% MeOH/DCM, gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste suptance.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,06-7,27 (5 H, m), 6,90-7,01 (2 H, m), 6,68 (d, 1 H, J = 7,8 Hz), 4,34 (1 H, d, J = 10,4 Hz), 3,00-3,15 (2 H, m), 2,63-2,79 (2 H, m), 2,15-2,27 (1 H, m), 1,85-2,03 (3 H, m), 1,51 (s, 3 H), 1,38-1,51 (2 H, m), 0,95 (3 H, t, J = 7,4 Hz), 0,50 (3 H, t, J= 7,4 Hz). Maseni spektar (ESI) m/z = 462 (M+1).
REFERENTNI PRIMER 4
2-((3R,5R,6S)-5-(3-Hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-1-morfolinobutan-2-il)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0113]
4
Korak A. (S)-Metil 2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butanoat
[0114]
[0115] U rastvor (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 3, korak D) (4,00 g, 10,7 mmol) u 45 ml DMF-a dodata je disperzija 60% natrijum hidrida u mineralnom ulju (1,71 g, 42,7 mmol) na 0<o>C. Nakon 20 minuta mešanja dodat je metil 2-brombutanoat (6,15 ml, 53,4 mmol) na 0<o>C, te je dobijeni rastvor mešan na 25<o>C 12 h do završetka reakcije. Potom je dodat zas. vod. rastvor NH4Cl nakon čega je smeša estrahovana etilacetatom. Spojeni organski slojevi isprani su vodom i zas. vod. rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu pod pritiskom gasa (eluent: 0 do 100% MTBE/heksani, gradijentna elucija), nakon čega je usledilo razdvajanje pojedinačnih stereoizomera hiralnom SFC (protok: 65 ml/min na koloni ChiralPak® AD-H (Diacel Inc., Fort Lee, NJ) uz primenu smeše 3:1 heptani:IPA (0,1 % DEA)/CO2kao eluenta) dobijeno je naslovno jedinjenje kao izomer sa bržom elucijom.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,23 (2 H, d, J = 8,4 Hz), 7,06 - 7,17 (2 H, m), 7,00 (3 H, t, J = 1,8 Hz), 6,77 (1 H, d, J = 7,6 Hz), 5,79 - 5,94 (1 H, m), 5,20 (1 H, d, J = 4,7 Hz), 5,17 (1 H, s), 4,56 (1 H, d, J = 10,8 Hz), 3,73 (3 H, s), 3,25 - 3,37 (1 H, m), 3,18 (1 H, dd, J = 7,6 Hz, 4,9 Hz), 2,61 (2 H, d, J = 7,4 Hz), 2,20 - 2,34 (1 H, m), 2,09 - 2,19 (1 H, m), 1,99 (1 H, d, J = 3,1 Hz), 1,57 - 1,72 (1 H, m), 1,24 (3 H, s), 0,61 (3 H, t, J = 7,5 Hz); Maseni spektar (ESI) m/z = 474,1 [M+H]<+>.
Daljom elucijom dobijen je:
(R)-metil 2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butanoat
kao izomer sa sporijom elucijom.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,22 (2 H, d, J= 8,0 Hz), 6,99 - 7,19 (4 H, m), 6,95 (1 H, t, J = 1,8 Hz), 6,71 (1 H, d, J = 7,6 Hz), 5,81 - 5,95 (1 H, m), 5,19 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 5,16 (1 H, d, J = 1,0 Hz), 4,48 (1 H, d, J = 10,6 Hz), 3,67 (3 H, s), 3,24 - 3,32 (1 H, m), 3,20 (1 H, dd, J = 7,8 Hz, 6,1 Hz), 2,61 - 2,72 (1 H, m), 2,49 - 2,60 (1 H, m), 1,91 - 2,21 (4 H, m), 1,27 (3 H, s), 1,00 (3 H, t, J= 7,5 Hz); MS (ESI) m/z = 474,1 [M+H]<+>.
Korak B. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((R)-1-hidroksibutan-2-il)-3-metilpiperidin-2-on
[0116]
[0117] U rastvor (S)-metil 2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butanoata i (R)-metil 2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butanoata (1,73 g, 3,64 mmol) (smeša stereoizomera iz referentnog primera 4, korak A) u 27 ml Et2O i 9 ml THF-a dodat je rastvor litijum tetrahidroborata u THF-u (0,238 ml, 7,28 mmol) na 0<o>C. Dobijeni rastvor je mešan na 25<o>C za 2 h. Reakcija je zaustavljena (10% limunska kiselina), estrahovana (2 x EtOAc) i isprana (1 x zas. vod. rastvor NaCl). Spojeni organski slojevi isprani su zas. vod. rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu pod pritiskom gasa (eluent: 0-60% EtOAc u heksanima) kako bi se dobilo naslovno jedinjenje kao izomer sa bržom elucijom.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 0,99 (t, J= 7,4 Hz, 3 H), 1,29 (s, 3 H), 1,79 - 2,03 (m, 4 H), 2,62 (d, J= 7,4 Hz, 2 H), 2,80 - 2,85 (m, 1 H), 3,05 - 3,16 (m, 1 H), 3,40 - 3,49 (m, 2 H), 4,33 (d, J = 10,4 Hz, 1 H), 5,13 - 5,22 (m, 2 H), 5,79 - 5,95 (m, 1 H), 6,7 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 6,85 - 6,97 (m, 3 H), 7,08 - 7,15 (m, 1 H), 7,17 - 7,19 (m, 1 H), 7,23 (d, J= 8,6 Hz, 2 H); Maseni spektar (ESI) m/z = 446 (M+1).
Daljom elucijom dobijen je:
(3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksibutan-2-il)-3-metilpiperidin-2-on
kao izomer sa sporijom elucijom.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 0,68 (t, J= 7,5 Hz, 3 H), 1,27 (s, 3 H), 1,38 - 1,52 (m, 1 H), 1,90 - 2,08 (m, 4 H), 2,61 (d, J= 7,4 Hz, 2 H), 3,10 - 3,25 (m, 2 H), 3,59 - 3,68 (m, 2 H), 4,46 (d, J= 10,2 Hz, 1 H), 5,18 (dd, J = 13,7, 1,8 Hz, 2 H), 5,79 - 5,93 (m, 1 H), 6,72 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 6,93 - 7,04 (m, 2 H), 7,09 -7,13 (m, 1 H), 7,15 - 7,20 (m, 1 H), 7,24 (d, J = 8,6 Hz, 2 H); Maseni spektar (ESI) m/z = 446 (M+1).
Korak C. (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butanal
[0118]
[0119] U rastvor 218 mg (0,49 mmol) (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksibutan-2-il)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 4, korak B) u smeši vode (13,20 µl, 0,733 mmol) i DCM-a (4883 µl) dodat je 1,1,1-tris(acetoksi)-1,1-dihidro-1,2-benziodoksol-3-(1H)on ("Des Martinov perjodinan") (311 mg, 0,733 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakcija je praćena putem LCMS, a dodato je nekoliko manjih porcija dodatnog perjodinana dok reakcija nije završena. Reakcija je zaustavljena (2 ml 1M Na2S2O3), estrahovana (2 x DCM), nakon čega su spojeni organski slojevi isprani zas. rastvorom NaHCO3(2 x), zas. rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom pod pritiskom gasa na silika gelu (20 do 35% EtOAc/heksani, gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje.
Korak D. (3S,5R,6S)-3alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-1-morfolinobutan-2-il)piperidin-2-on.
[0120]
[0121] U rastvor 100 mg (0,225 mol) (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butanala (referentni primer 4, korak C) u DCE-u (2420 ml) dodati su morfolin (200 ml, 2,297 mmol), sirćetna kiselina (1,288 µl, 0,023 mmol) i natrijum triacetoksiborhidrid (95 mg, 0,450 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 časova. Reakcija je zaustavljena zas. rastvorom natrijum bikarbonata i estrahovana DCM-om (2x10 ml). Spojeni organski slojevi su isprani zas. rastvorom NaCl, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo sirovo naslovno jedinjenje u obliku ulja.
Korak E.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-1-morfolinobutan-2-il)-2-oksopiperidin-3-il)acetaldehid
[0122]
[0123] U okrugli balon napunjen (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-1-morfolinobutan-2-il)piperidin-2-onom (referentni primer 4, korak D) (125 mg, 0,242 mmol) dodat je THF (2 ml). U kapima je dodato približno 1 ml vode dok rastvor nije postao i ostao zamućen uz blago mešanje. Dodat je t-BuOH (0,350 ml) u kapima, dok rastvor nije postao homogen. Dodat je NMO (42,6 mg, 0,364 mmol), apotom i osmijum tetroksid, 4 mas.% u vodi (1 kap iz staklene Pasterove pipete). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 časova. Dodata je još jedna kap osmijum tetroksida, 4 mas. % u vodi. Nakon 5 časova, dodate su još dve kapi osmijum tetroksida, 4 mas. % u vodi, te je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi dodatnih 16 časova. Dodat je natrijum perjodat (145 mg, 0,679 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Reakciona smeša je razblažena etilacetatom (10 ml) i vodom (10 ml) i proceđena. Vodeni sloj filtrata je estrahovan dodatnim etilacetatom (10 ml), nakon čega su spojeni organski slojevi isprani zas. vod. rastvorom NaCl, osušeni preko natrijum sulfata, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo naslovno jedinjenje.
Korak F.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-1-morfolinobutan-2-il)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0124]
[0125] U rastvor 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-1-morfolinobutan-2-il)-2-oksopiperidin-3-il)acetaldehida (referentni primer 4, korak E) (125 mg, 0,242 mmol) u acetonu (2 ml) dodato je 3 ml smeše CrO3u vodi (2 ml) i koncentrovane H2SO4(1 ml). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa a potom razblažena vodom (10 ml) i etilacetatom (10 ml), nakon čega su slojevi razdvojeni. Vodeni sloj je estrahovan dodatnim etilacetatom (10 ml). Spojeni organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen reverzno-faznom preparatornom HPLC (kolona: Gemini-NX C185um; Phenomonex, Torrance, CA; eluent: 0 do 100% MeCN 0,1% TFA u vodi 0,1% TFA) kako bi se dobilo naslovno jedinjenje.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 0,57 (t, J = 7,53 Hz, 1 H) 1,26 (s, 1 H) 1,39 (s, 3 H) 1,54 - 1,70 (m, 1 H) 1,72 - 1,89 (m, 1 H) 2,02 - 2,27 (m, 3 H) 2,49 (br. s.2 H) 2,69 (br. s, 2 H) 2,82 (m, 2 H) 3,02 (br. s, 2 H) 3,13 - 3,30 (m, 2 H) 3,74 - 3,93 (m, 4 H) 4,47 - 4,72 (m, 1 H) 6,75 (d, J = 7,82 Hz, 1 H) 6,96 (t, J = 1,86 Hz, 1 H) 7,01 (br.s, 1 H) 7,04 - 7,17 (m, 3 H) 7,22 (d, J = 8,41 Hz, 2 H); Maseni spektar (ESI) m/z = 533 [M H]<+>.
REFERENTNI PRIMER 5
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-1-(metilsulfonamido)-butan-2-il)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0126]
Korak A. (3R,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-((4-metoksibenzil)amino)butan-2-il)-3-metilpiperidin-2-on
[0127]
4
[0128] U rastvor (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butanala (300 mg, 0,675 mmol; referentni primer 4, korak C) i (4-metoksifenil)metanamina (131 µl, 1,01 mmol) u DCE-u (4,5 ml) dodat je natrijum triacetoksiborhidrid (429 mg, 2,03 mmol) na 0<o>C u nekoliko porcija. Nakon što je smeša mešana na 25<o>C 18 h, reakcija je zaustavljena dodatkom ledeno hladnog zasićenog vodenog NaHCO3i estrahovana (2 x DCM). Spojeni organski slojevi isprani (1 x zas. vod. rastvorom NaCl) i koncentrovani pod sniženim pritiskom kako bi se obezbedilo naslovno jedinjenje u obliku žutog filma. Proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak B. (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butan-1-amonijum 2,2,2-trifluoroacetat
[0129]
[0130] U rastvor (3R,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(4-metoksibenzilamino)butan-2-il)-3-metilpiperidin-2-ona (370 mg, 0,654 mmol; referentni primer 5, korak A) u acetonitrilu (8,0 ml) i vodi (1,6 ml) dodat je cerni amonijum nitrat (2,87 g, 5,23 mmol) na 25<o>C. Nakon mešanja na st 2 dana, reakcija je zaustavljena (zas. vod. rastvor NaCl), smeša estrahovana (3 x EtOAc) i isprana (1 x zas. vod. rastvor NaCl). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem pomoću RP-HPLC (35 do 70% MeCN/H2O (0,1% TFA), gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bledo žutog praha.
Korak C. N-((S)-2-((3S,5R,6S)-3-Alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butil)metansulfonamid
[0131]
[0132] (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butan-1-amonijum 2,2,2-trifluoroacetat (74 mg, 0,14 mmol; referentni primer 5, korak B) rastvoren je u DCM-u na 0<o>C te mu je dodat 2 N litijum hidroksid (0,34 ml, 0,68 mmol), nakon čega je dobijeni rastvor mešan 5 min na 0<o>C. Rastvor je estrahovan (2 x DCM), ispran (zas. vod. rastvor NaCl), osušen (Na2SO4) i koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobio slobodni amin. U rastvor ovog slobodnog amina u DMF-u (0,34 ml) dodati su metansulfonil hlorid (53 µl, 0,68 mmol) i piridin (66 µl, 0,820 mmol), redom, na 0<o>C. Nakon mešanja na 25<o>C preko noći, reakciona smeša je zakiseljena (10% limunska kiselina) i estrahovana (2 x EtOAc), zatim isprana (zas. vod. rastvor NaCl). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem pomoću RP-HPLC (45 do 80% MeCN/H2O (0,1% TFA), gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku belog praha.
Korak D.2-((3R,5R,6S)-5-(3-Hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-1-(metilsulfonamido)butan-2-il)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0133] U brzo mešani rastvor N-((S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butil)metansulfonamida (34 mg, 0,064 mmol, referentni primer 4, korak C) u smeši vode (0,55 ml), acetonitrila (0,37 ml) i CCl4(0,37 ml) dodati su natrijum perjodat (55 mg, 0,26 mmol) i rutenijum(III) hlorid hidrat (1,5 mg, 6,5 µmol). Nakon žustrog mešanja u toku 20 h, reakciona smeša je zakiseljena (10% limunska kiselina) i razblažena EtOAc. Nerastvorni materijal odvojen je filtracijom kroz kolač Celite® (J.T. Baker, Phillipsberg, NJ, dijatomejska zemlja). Filtrat je estrahovan (2 x EtOAc) i ispran (zas. vod. rastvor NaCl). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem pomoću RP-HPLC (40 do 70% MeCN/H2O (0,1% TFA), gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bele pene.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,25 (2 H, d, J= 8,2 Hz), 7,10 - 7,18 (2 H, m), 7,00 - 7,10 (2 H, m), 6,97 (1 H, s), 6,83 (1 H, d, J = 7,2 Hz), 4,99 - 5,20 (1 H, m), 4,87- 4,97 (1 H, m), 4,74 (1 H, d, J= 10,4 Hz), 3,44 - 3,65 (1 H, m), 3,10 - 3,33 (2 H, m), 3,02- 3,09 (1 H, m), 2,99 (3 H, s), 2,96 (1 H, s), 2,77 (1 H, s), 2,36 (1 H, s), 1,94 - 2,05 (1 H, m), 1,77 - 1,92 (1 H, m), 1,52 - 1,59 (1 H, m), 1,50 (3 H, s), 0,58 (3 H, t, J = 7,3 Hz); MS (ESI) 541,0 [M+H]<+>, 539,0 [M-H]-.
REFERENTNI PRIMER 6
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S,4R)-5-hidroksi-4,5-dimetilheksan-3-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina ili 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S,4S)-5-hidroksi-4,5-dimetilheksan-3-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0134]
Korak A. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-2-oksopentan-3-il)piperidin-2-on
[0135]
[0136] U rastvor oksalil dihlorida (78 µl, 0,87 mmol) u DCM-u (1,5 ml) na -60<o>C dodat je rastvor DMSO (93 µl, 1,30 mmol) u DCM-u (1,5 ml) u atmosferi N2. Nakon 2 minuta mešanja, dodat je rastvor (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S)-2-hidroksipentan-3-il)-3-metilpiperidin-2-ona pripremljen u referentnom primeru 7, korak C (200 mg, 0,434 mmol) u DCM-u (1,5 ml) pa je dobijeni
4
rastvor mešan 15 minuta na -60<o>C. Potom je u reakcionu smešu dodat trietilamin (305 µl, 2,17 mmol). Nakon mešanja na st 20 minuta, reakcija je zaustavljena (vodom), reakciona smeša je estrahovana (2 x EtOAc) i isprana (2 x zas. vod. rastvor NaCl). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem na kombinovanoj hromatografiji pod pritiskom gasa (SiO2, 24 g, 20% i 30% EtOAc/heksani) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bezbojne pene.
Korak B. ((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-metoksi-2-metilpent-1-en-3-il)-3-metilpiperidin-2-on
[0137]
[0138] (Metoksimetil)trifenilfosfonijum hlorid je osušen na 80<o>C u vakuumu u toku 2 h. U rastvor osušenog (metoksimetil)trifenilfosfonijum hlorida (673 mg, 1,96 mmol) u THF-u (3,5 ml) dodat je 0,5 M KHMDS u toluenu (3,49 ml, 1,75 mmol) na -78<o>C. Rastvaranje je dovelo do pojave krv crvene boje.
Nakon dodavanja, reakciona smeša je mešana na 0<o>C 30 min te joj je u kapima dodat rastvor (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-2-oksopentan-3-il)piperidin-2-ona dobijenog kao što je opisano iznad u koraku B (200 mg, 0,436 mmol) u THF-u (3,5 mL), na 0<o>C. Reakciona smeša je ostavljena da se ugreje do st i mešana 1,5 h. Potom je reakcija zaustavljena (zas. rastvor NH4Cl), estrahovana (2 x EtOAc) i isprana (vodeni rastvor soli). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem na kombinovanoj hromatografiji pod pritiskom gasa (SiO2, 24 g, 15% i 20% EtOAc/heksani) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bezbojnog filma.
Korak C. (2S,3S)-3-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-2-metilpentanal i (2R,3S)-3-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-2-metilpentanal
[0139]
[0140] U rastvor (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-metoksi-2-metilpent-1-en-3-il)-3-metilpiperidin-2-ona dobijenog iznad u koraku B (179 mg, 0,368 mmol) u acetonitrilu (3,7 ml) dodata je 3 N hlorovodonična kiselina (1,5 ml, 4,5 mmol) na st. Nakon mešanja na st 1,5 h, reakciona smeša je estrahovana (2 x EtOAc) i isprana (2 x vodeni rastvor soli). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom, kako bi se dobilo naslovno jedinjenje kao smeša izomera (dr = 7:3) u obliku bledo žutog filma.
Korak D. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((3S,4R)-4-metil-5-oksoheksan-3-il)piperidin-2-on i (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((3S,4S)-4-metil-5-oksoheksan-3-il)piperidin-2-on
[0141]
[0142] U rastvor (2S,3S)-3-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-2-metilpentanala i (2R,3S)-3-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-2-metilpentanala dobijenih kao što je prethodno opisano u koraku C (177 mg, 0,375 mmol) u THF-u (3,076 ml) dodat je 1,4 M metilmagnezijum bromid u toluenu i THF-u (75:25) (0,803 ml, 1,12 mmol) na 0<o>C. Reakciona smeša je ostavljena da se ugreje do st i mešana 2 h. Potom je reakcija zaustavljena (zas. rastvor NH4Cl), estrahovana (2 x EtOAc) i isprana (vodeni rastvor soli). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom kako bi se dobio sirovi sekundarni alkoholni proizvod.
4
[0143] U rastvor sirovog sekundarnog aloholnog proizvoda (183 mg, 0,375 mmol) u DCM-u (4,2 ml) dodata je voda (14 µl, 0,75 mmol) i Des-Martinov perjodinan (196 mg, 0,462 mmol), tim redosledom. Nakon mešanja na st preko noći, reakcija je zaustavljena (1 M vod. Na2S2O3), estrahovana (2 x DCM) i isprana (2 x zas. NaHCO3i 1 x vod. rastvor soli). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, 13%, 27% i 37% EtOAc/Hex) dobijeni su manje polarni i polarniji izomer, redom.
[0144] Manje polarni izomer:<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,25 (2 H, d, J= 8,0 Hz), 7,03 -7,17 (4 H, m), 6,94 - 6,99 (1 H, m), 6,81 - 6,87 (1 H, m), 5,12 - 5,23 (2 H, m), 4,58 (1 H, d, J = 10,8 Hz), 3,14 (1 H, s), 2,66 (1 H, s), 2,58 (2 H, d, J = 7,4 Hz), 2,22 (3 H, s), 1,81 (1 H, d, J= 4,3 Hz), 1,75 (1 H, d, J= 7,2 Hz), 1,51 - 1,65 (2 H, m), 1,19 (3 H, s), 1,00 (3 H, d, J = 7,2 Hz), 0,30 (3 H, t, J= 7,7 Hz); MS (ESI) 486,1 [M+H]<+>.
[0145] Polarniji izomer:<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,22 - 7,27 (2 H, m), 7,01 - 7,17 (4 H, m), 6,89 - 6,95 (1 H, m), 6,71 (1 H, dt, J = 7,5, 1,3 Hz), 5,81 - 5,93 (1 H, m), 5,17 - 5,25 (2 H, m), 4,32 (1 H, d, J= 10,8 Hz), 3,50 (1 H, br. s.), 3,23 - 3,32 (1 H, m), 3,06 (1 H, br. s.), 2,60 - 2,66 (2 H, m), 2,13 - 2,20 (3 H, m), 1,91 - 2,01 (2 H, m), 1,64 - 1,70 (2 H, m), 1,28 - 1,32 (3 H, m), 1,13 (3 H, d, J= 7,0 Hz), 0,34 (3 H, t, J = 7,5 Hz); MS (ESI) 486,1 [M+H]<+>.
Korak E. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S,4R)-5-hidroksi-4,5-dimetilheksan-3-il)-3-metilpiperidin-2-on ili (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S,4S)-5-hidroksi-4,5-dimetilheksan-3-il)-3-metilpiperidin-2-on
[0146]
[0147] U rastvor manje polarnog izomera dobijenog kao što je prethodno opisano u referentnom primeru 6, korak D (96 mg, 0,20 mmol) u THF-u (2,0 ml) dodat je 1,4 M metilmagnezijum bromid u toluenu i THF-u (75:25) (423 µl, 0,592 mmol) na 0<o>C. Potom je reakciona smeša ostavljena da se ugreje do st i mešana preko noći. Reakcija je zaustavljena (zas. rastvor NH4Cl), estrahovana (2 x EtOAc) i isprana (vod. rastvor soli). Spojeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom.
4
Prečišćavanjem kombinovanom hromatografijom pod pritiskom gasa (kombi-fleš hromatografijom) (12 g SiO2, 30% EtOAc/Hex) dobijeno je naslovno jedinjenje kao pojedinačan izomer.
Korak F.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S,4R)-5-hidroksi-4,5-dimetilheksan-3-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina ili 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S,4S)-5-hidroksi-4,5-dimetilheksan-3-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0148]
[0149] Naslovno jedinjenje dobijeno je iz (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S,4R)-5-hidroksi-4,5-dimetilheksan-3-il)-3-metilpiperidin-2-ona ili (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S,4S)-5-hidroksi-4,5-dimetilheksan-3-il)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 6, korak E) u proceduri koja je slična onoj opisanoj za referentni primer 5, korak D.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,01 - 7,27 (6 H, m), 6,96 (1 H, t, J= 1,7 Hz), 6,70 (3 H, d, J = 7,6 Hz), 4,59 (1 H, d, J = 9,8 Hz), 3,63 - 3,91 (1 H, m), 3,14 (1 H, s), 2,98 (1 H, d, J= 14,5 Hz), 2,72 (1 H, d, J = 14,5 Hz), 1,98 - 2,21 (2 H, m), 1,84 - 1,96 (1 H, m), 1,56 - 1,69 (2 H, m), 1,48 (3 H, s), 1,15 (3 H, s), 1,06 (3 H, s), 0,75 (3 H, br. s.), 0,28 (3 H, br. s.); MS (ESI) 520,2 [M+H]<+>, 518,2 [M-H]-.
REFERENTNI PRIMER 7
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-okso-1-((S)-2-oksopentan-3-il)piperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0150]
4
Korak A. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksibutan-2-il)-3-metilpiperidin-2-on
[0151]
[0152] U rastvor 1004 g (1,47 mol) (3S,5R,6S)-3-alil-1-((S)-1-((terc-butildifenilsilil)oksi)-butan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 9, korak E) u THF-u (3,0 ml) dodato je 2,50 l (2,50 mol) 1 M rastvora TBAF-a u THF-u, u periodu od 10 minuta. Narandžasti rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 4 h. Reakcija je zaustavljena 1N HCl (3 l) i estrahovana pomoću EtOAc (3 x). Spojeni organski slojevi su isprani smešom vode i zasićenog vodenog natrijum hlorida (3:1) (4 x) a potom zasićenim vodenim natrijum hloridom (1 x). Organski sloj je osušen preko Na2SO4, proceđen, te je filtrat koncentrovan. Prešišćavanjem ostatka hromatografijom (Biotage® Snap™ kolona; Biotage, LLC, Charlotte, NC), 10 do 50% EtOAc/heksani gde EtOAc sadrži 2% MeCN, gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bele pene.
Korak B. (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)butanal
[0153]
4
[0154] U rastvor 428 g (959 mmol) (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksibutan-2-il)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 7, korak A) u dihlormetanu (4,55 l) dodato je 2,59 ml (1,44 mol) vode. Rastvor 610 g (1,44 mol) Des-Martinovog perjodinana u dihlormetanu (4,55 l) dodat je polako, u periodu od 25 minuta, kako unutrašnja temperatura reakcione smeše ne bi prešla 25<o>C. Bela kaša je mešana 2,5 h a potom je reakcija zaustavljena pažljivim, sporim dodavanjem zasićenog vodenog natrijum tiosulfata (5,2 l) kako unutrašnja temperatura reakcione smeše ne bi prešla 30<o>C. Dodata je voda, te je smeša estrahovana dihlormetanom (3 x). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (4 x), a potom zasićenim vodenim natrijum hloridom (1 x), osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan kako bi se dobila žuta, uljasta čvrsta supstanca. Dodata je smeša etiletra i DCM-a, te je istaložena čvrsta supstanca odvojena filtracijom. Proces precipitacije/filtracije je ponovljen. Filtrat je koncentrovan kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste supstance. Sirovi proizvod korišćen je direktno u sledećem koraku.
Korak C. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S)-2-hidroksipentan-3-il)-3-metilpiperidin-2-on
[0155]
[0156] U rastvor 399 g (899 mmol) (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3- metil-2-oksopiperidin-1-il)butanala (referentni primer 7, korak B) u THF-u (9 l) na 0<o>C polako je dodato 1,93 l (2,70 mol) 1,4 M rastvora metimagnezijum bromida 75:25 u toluenu/tetrahidrofuranu, u toku 30 minuta, kako bi se unutrašnja temperatura reakcione smeše održala ispod 6<o>C. Žuti rastvor je zagrejan do sobne temperature i mešan 1,5 h. Nakon toga, reakciona smeša je ohlađena na 0<o>C a reakcija zaustavljena pažljivim, sporim dodatkom zasićenog vodenog amonijum hlorida (4,6 l) kako bi unutrašnja temperatura reakcione smeše ostala ispod 15<o>C. Smeša je zagrejana do sobne temperature, dodat je etil acetat, te su slojevi razdvojeni. Vodeni sloj je estrahovan pomoću EtOAc (2 x). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (1 x), a potom zasićenim vodenim natrijum hloridom (1 x), osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan kako bi se dobilo žuto ulje. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu (Biotage® Snap™ kolona; Biotage, LLC, Charlotte, NC), u gradijentnom
4
sistemu 5% aceton /5% EtOAc/90% heksani do 5% aceton/29% EtOAc/66% heksani) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste supstance.
Korak D.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-okso-1-((S)-2-oksopentan-3-il)piperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0157] U rastvor (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((3S)-2-hidroksipentan-3-il)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 7, korak C) (130,30 g, 283 mmol) i NaIO4(61,5 g) u EtOAc (630 ml), CH3CN (630 ml) i vode (935 ml) na 18<o>C dodat je rutenijum(III) hlorid hidrat (1.404 g, 6,23 mmol). Ostatak NaIO4(307,5 g) je dodat u pet porcija u toku 2,5 časa uz održavanje temperature ispod 26<o>C.15 minuta nakon konačnog dodatka NaIO4kupatilo za hlađenje je uklonjeno, te je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 50 minuta. Reakciona smeša boje peska je proceđena na Bihnerovom levku i isprana pomoću EtOAc (500 ml) i CH3CN (500 ml). Slojevi su razdvojeni, te je vodeni sloj estrahovan EtOAc dva puta. Organski slojevi su spojeni, isprani 10% vod. NaHSO3(3 x 1 l), vodenim rastvorom soli (1 l), osušeni (Na2SO4), tečnost je odlivena i smeša koncentrovana u vakuumu kako bi se dobilo zeleno ulje. Supstanca je rastvorena u minimalnoj količini DCM-a i prečišćena pomoću dve Biotage® Snap™ kolone od 1,5 kg (Biotage, LLC, Charlotte, NC) uz eluciju smešom 10-50% (15% MeOH/aceton)/heksani kako bi se dobila pena bledo ružičaste boje (109,67 g).
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δppm 7,25 (2 H, d, J = 8,2 Hz), 6,93 - 7,18 (5 H, m), 6,73 - 6,80 (1 H, m), 4,47 (1 H, d, J= 10,6 Hz), 3,28 (1 H, ddd, J = 13,4, 10,5, 3,0 Hz), 3,16 (1 H, dd, J= 7,0, 5,5 Hz), 2,73 -3,00 (2 H, m), 2,28 - 2,40 (1 H, m), 2,18 - 2,25 (1 H, m), 2,16 (3 H, s), 2,11 - 2,15 (1 H, m), 1,83 (1 H, ddd, J= 14,3, 7,8, 5,7 Hz), 1,47 (3 H, s), 0,64 (3 H, t, J= 7,5 Hz); MS (ESI) 476,2 [M+H]<+>.
REFERENTNI PRIMER 8
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((2S,3S)-2-hidroksipentan-3-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0158]
[0159] U rastvor 3,86 g (8,13 mmol) 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-okso-1-((S)-2-oksopentan-3-il)piperidin-3-il)sirćetne kiseline (referentni primer 7) u THF-u (102 ml) dodat je 1 M rastovor natrijum tri-sek-butilborhidrida (N-Selectride®, Aldrich, St. Louis, MO) u THF-u (16,26 ml, 16,26 mmol) na -78<o>C u kapima u periodu od 5 min. Nakon mešanja na -78<o>C u toku 30 minuta, reakciona smeša je ostavljena da se ugreje do st. Reakciona smeša je mešana na st 2 h, zatim je reakcija zaustavljena (zas. rastvor NH4Cl), smeša je estrahovana (3 x EtOAc) i isprana (3 x ledeno hladan 1 N vod. rastvor HCl i 3 x zasićeni vodeni natrijum hlorid). Spojeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na Biotage Isolera sistemu za prečišćavanje pod pritiskom gasa (Biotage, Charlotte, NC) (kolone 2 x 1500 g, uz upotrebu gradijenta od 10-30% (15% MeOH/aceton) u heksanima. Prečišćeni materijal koji je potom prekristalisan iz smeše 3:1 heksani/aceton (8 ml/g) kako bi se dobilo naslovno jedinjenje.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,30 (t, J = 7,6 Hz, 3 H), 1,00 (d, J= 6,3 Hz, 3 H), 1,26 (s, 3 H), 1,41-1,49 (m, 1 H), 1,55-1,64 (m, 1 H), 2,04-2,15 (m, 2 H), 2,29-2,33 (m, 1 H), 2,48 (d, J= 13,7 Hz, 1 H), 2,87 (d, J= 13,7 Hz, 1 H), 3,35-3,40 (m, 1 H), 4,01-4,06 (m, 1 H), 4,77 (d, J= 10,9 Hz, 1 H), 4,80 (br. s.1 H), 6,93-6,95 (m, 1 H), 7,08-7,10 (m, 1 H), 7,17-7,27 (m, 4 H), 7,33 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 12,42 (br s, 1 H); MS (ESI) 478,2 [M+H]<+>, 476,2 [M-H]-. [α]D= 110° (T = 23 °C, MeOH, c = 0,51).
[0160] Alternativno, naslovno jedinjenje može da se dobije iz (3S,5R,6R)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona koji je pripremljen prema referentnom primeru 15, korak F.
[0161] U okrugli balon od 10 ml dodati su (3S,5R,6R)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-on (750 mg, 1,998 mmol), (2S,3S)-3-aminopentan-2-ol hidrohlorid (837 mg, 6,00 mmol, referenca: J. Org Chem., 2003, 68 (26), 9948) i trietilamin (1966 µl, 13,99 mmol). Sud je opremljen refluksnim kondenzatorom i grejan na 85 do 95<o>C 2 dana. Reakciona smeša je ohlađena do ST i razblažena etilacetatom, pa isprana lN HCl (2 x 20 ml) i vodenim rastvorom soli. Organski sloj je osušen preko MgSO4, proceđen, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem hromatografijom u koloni uz upotrenu 40 do 50% etilacetata u heksanu dobijen je (S)-2-((2R,3R)-2-(3-hlorfenil)-3-(4-hlorfenil)-3-hidroksipropil)-N-((2S,3S)-2-hidroksipentan-3-il)-2-metilpent-4-enamid.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,17 (m, 2H), 7,16 (m, 1H), 7,14-7,08 (serije m, 2H), 6,97 (m, 2H), 6,88 (br d, J = 6,9 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,65 (ddt, J = 17,4, 10,2, 7,2 Hz, 1H), 5,07 (dd J = 10,3, 1,0 Hz, 1H), 5,02 (d, J = 17,6, 1H), 4,75 (t, J = 4,2 Hz, 1H), 3,79 (m, 1H), 3,66 (ddd, J = 8,8, 5,9, 4,2 Hz, 1H), 3,30 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 3,03 (dt, J = 6,9, 5,4 Hz, 1H), 2,37 (dd, J = 13,9, 7,3 Hz, 1H), 2,32 (dd, J = 14,7, 5,6 Hz, 1H), 2,12 (dd, J = 13,7, 7,1 Hz, 1H), 2,01 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 1,83 (dd, J = 14,7, 7,3 Hz, 1H), 1,58 (m,
1
1H), 1,42 (ddq, J = 14,9, 8,6, 7,3 Hz), 1,14 (s, 3H), 1,14 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 0,90 (t, J = 7,3 Hz, 3H) ppm. LC/MS (M+H) = 478,2.
[0162] U rastvor (S)-2-((2R,3R)-2-(3-hlorfenil)-3-(4-hlorfenil)-3-hidroksipropil)-N-((2S,3S)-2-hidroksipentan-3-il)-2-metilpent-4-enamida (127 mg, 0,265 mmol) u toluenu (5309 µl) dodat je amonijum molibdat ((NH4)2MoO4) (5,20 mg, 0,027 mmol), te je smeša zagrevana uz refluks pod Din-Stark reakcionim uslovima preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena etilacetatom i isprana zas. NaHCO3i vodenim rastvorom soli. Organski sloj je osušen preko MgSO4, proceđen, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem hromatografijom u koloni uz upotrebu 20 do 40% etilacetata u heksanu dobijen je (1R,2R,4S)-2-(3-hlorfenil)-1-(4-hlorfenil)-4-((4S,5S)-4-etil-5-metil-4,5-dihidrooksazol-2-il)-4-metilhept-6-en-1-ol.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,25 (m, 2H), 7,12 (m, 2H), 7,07 (br s, 1H), 7,05 (m, 2H), 6,96 (br d, J = 6,8 Hz, 1H), 5,53 (ddt, J = 17,4, 10,3, 7,4 Hz, 1H), 5,42 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 4,95 (m, 2H), 4,66 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 3,56 (dq, J = 7,6, 6,1 Hz, 1H), 3,12 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 2,90 (ddd, (9,5, 5,1, 2,3 Hz, 1H), 2,20 (m, 2H), 1,93 (dd, J = 13,7, 7,8 Hz, 1H), 1,75 (dd, J = 14,3, 2,2 Hz, 1H), 1,11 (m, 1H), 1,10 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 0,98 (m, 1H), 0,97 (s, 3H), 0,75 (t, J = 7,6 Hz, 3H) ppm. LC/MS (M+H) = 460,2.
[0163] U rastvor (1R,2R,4S)-2-(3-hlorfenil)-1-(4-hlorfenil)-4-((4S,5S)-4-etil-5-metil-4,5-dihidrooksazol-2-il)-4-metilhept-6-en-1-ola (80 mg, 0,174 mmol) u CH2Cl2(1737 µl) na -50 °C dodat je 2,6-lutidin (46,4 µl, 0,400 mmol) a zatim i rastvor anhidrida trifluormetansulfonske kiseline, 1 M u metilen hloridu (191 µl, 0,191 mmol). Reakciona smeša je mešana na -50<o>C tokom 30 minuta, a potom tretirana sa dodatnih 25 ul rastvora anhidrida trifluormetansulfonske kiseline, 1 M u metilen hloridu, zatim sa 2 ml zas. CuSO4. Reakciona smeša je zagrejana na st i estrahovana dihlormetanom. Organska faza je osušena preko MgSO4, proceđena, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem hromatografijom u koloni uz upotrebu 40 do 80% acetona u heksanima dobijen je (2S,3S,5S,6R,8S)-8-alil-6-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-3-etil-2,8-dimetil-2,3,5,6,7,8-heksahidrooksazolo[3,2-a]piridin-4-ijum triflat.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,55-7,05 (serije m, 8H), 5,88 (ddt, J = 17,3, 10,0, 7,8 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 17,1, 2,0 Hz, 1H), 5,31 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,28 (dd, J = 10,0, 2,0 Hz, 1H), 5,18 (kvintet, J = 6,1 Hz, 1H), 4,10 (td, J = 6,6, 2,7 Hz, 1H), 3,98 (ddd, J = 13, 7, 11,2, 3,4 Hz, 1H), 2,80 (ABX, JAB= 13,7 Hz, JAX= 7,3 Hz, 1H), 2,73 (ABX JAB= 13,7 Hz, JBX= 7,8 Hz, 1H), 2,49 (m, 1H), 2,41 (t, J = 13,7 Hz, 1H), 2,00 (dd, J = 13,9, 3,7 Hz, 1H), 1,55 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 1,31 (s, 3H), 0,95 (dqd, J = 14,2, 7,8, 3,0 Hz, 1H), 0,58 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 0,47 (ddq, J = 13,7, 6,3, 6,3 Hz, 1H) ppm. LC/MS (M+ = 442,2).
[0164] U rastvor (2S,3S,5S,6R,8S)-8-alil-6-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-3-etil-2,8-dimetil-2,3,5,6,7,8-heksahidrooksazolo[3,2-a]piridin-4-ijum triflata (60 mg, 0,101 mmol) u 1 ml dihlormetana na 0<o>C dodati su tetra-n-butilamonijum hlorid (2,81 mg, 10,13 µmol) i sirćetna kiselina (116 µl, 2,025 mmol). U to je
2
dodat KMnO4(32,0 mg, 0,203 mmol) u 1 ml vode, a potom ispran sa 1 ml vode. Dodato je još 10 ekv. sirćetne kiseline, a zatim i dodatnih 16 mg KMnO4u 1 ml vode. Ovo je ponovljeno još jednom. Ukupno je dodato 4 ekv. KMnO4i 40 ekv. sirćetne kiseline.
[0165] Reakcija je zaustavljena dodatkom 1 ml zas. rastvora Na2S2O3, te je reakciona smeša razblažena etilacetatom. Slojevi su odvojeni i organska faza je isprana jednom vodenim rastvorom soli, osušena preko MgSO4, proceđeni i koncentrovani kako bi se dobio sirovi (2S,3S,5S,6R,7aR)-6-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-3-etil-2,7a-dimetilheksahidrofuro[2,3-b]oksazolo[3,2-a]piridin-9(5H)-on. Ovaj sirovi ostatak je ponovo rastvoren u 2 ml izopropil acetata i tretiran sa 2 ml zas. NaHCO3, te zagrejan na 70°C. Nakon 2 h, reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i tretirana 10% sirćetnom kiselinom do pH od oko 3. Reakciona smeša je razblažena etilacetatom i isprana jednom 10% rastvorom sirćetne kiseline, osušena preko MgSO4, proceđena i koncentrovana. Prečišćavanjem hromatografijom u koloni uz upotrebu 10 do 50% smeše (15% MeOH/aceton) u heksanima dobijena je 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((2S,3S)-2-hidroksipentan-3-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina.
REFERENTNI PRIMER 9
2-((3R,5R,6S)-5-(3-Hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksibutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0166]
Korak A. (S)-Metil 2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-oksopiperidm-1-il)butanoat
[0167]
[0168] U rastvor 33,8 g (60% u mineralnom ulju, 845 mmol) natrijum hidrida u 2-metiltetrahidrofuranu (550 ml) na 50<o>C dodat je rastvor 240 g (750 mmol) (5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)piperidin-2-ona (referentni primer 1, korak E) u 2-metiltetrahidrofuranu (550 ml) u periodu od 45 min. Nakon dodatnih 1,25 h na 50<o>C, dodato je 105 ml (912 mmol) metil 2-brombutirata u periodu od 20 minuta. Dobijena kaša je mešana na 50<o>C 3,5 h, zatim ohlađena do sobne temperature, pa je reakcija zaustavljena zas. vod. rastvorom NH4Cl. Dodata je voda kako bi se rastvorio talog, te je dobijena smeša estrahovana etilacetatom (4x). Spojeni organski slojevi isprani su zas. vod. rastvorom NaCl (1x), osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu (Biotage® Snap™ kolona (Biotage, LLC, Charlotte, NC), 0 do 35% EtOAc/DCM, gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bele uljaste čvrste supstance.
Korak B. (5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksibutan-2-il)piperidin-2-on
[0169]
[0170] U ledeno hladan rastvor 48,5 g (115 mmol) (S)-metil 2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)- 6-oksopiperidin-1-il)butanoata (referentni primer 9, korak A) u etiletru (850 ml) dodato je 5,96 g (90%, 246 mmol) litijum borhidrida. Dobijeni bledo žuti rastvor je mešan na 0<o>C 3 h, a potom su dodati MeOH (2,5 ml) i još etil etra (100 ml). Nakon dodatka MeOH uočeno je izdvajanje gasa. Nakon 40 minuta, reakcija je zaustavljena pažljivim dodavanjem 1 N HCl dok izdvajanje gasa nije prestalo. Smeša je estrahovana pomoću EtOAc (2x), pa su spojeni organski slojevi isprani zasićenim vodenim natrijum hloridom (1x). Organski sloj je osušen preko Na2SO4, proceđen, te je filtrat koncentrovan kako bi se
4
dobilo naslovno jedinjenje u obliku bele pene. Sirovi proizvod je direktno korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak C. (5R,6S)-1-((S)-1-(terc-butildifenilsililoksi)butan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)piperidin-2-on
[0171]
[0172] U rastvor 44,7 g (114 mmol) (5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksibutan-2-il)piperidin-2-ona (referentni primer 9, korak B) i 19,4 g (285 mmol) imidazola u DMF-u (350 ml) dodato je 39,4 ml (154 mmol) terc-butildifenilsilil hlorida. Bezbojni rastvor mešan je na sobnoj temperturi 17 h. Reakciona smeša je preraspodeljena između vode i etil etra (3 x), pa su spojeni organski slojevi isprani zasićenim vodenim natrijum hloridom (1 x), osušeni preko Na2SO4, proceđeni i filtrat je koncentrovan. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu (Biotage® Snap™ kolona (Biotage, LLC, Charlotte, NC), 0 do 60% EtOAc/heksani, gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bele pene.
Korak D. (5R,6S)-1-((S)-1-(terc-butildifenilsililoksi)butan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-on
[0173]
[0174] U rastvor 98,2 g (156 mmol) (5R,6S)-1-((S)-1-(terc-butildifenilsililoksi)butan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)piperidin-2-ona (referentni primer 9, korak C) i 10,0 ml (160 mmol) metil jodida u suvom THF-u iz koga je evakuisan gas (400 ml) na -78°C polako je dodato 200 ml (200 mmol) 1M rastvora litijum bis(trimetilsilil)amida iz kojeg je evakuisan gas u THF-u, u toku 20 minuta. Narandžasti rastvor je mešan na -78<o>C 1,5 h a potom zagrejan na 0<o>C i mešan još 1,5 h. Reakcija je zaustavljena zasićenim vodenim amonijum hloridom i estrahovana pomoću EtOAc (3x). Spojeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu (Biotage® Snap™ kolona; Biotage, LLC, Charlotte, NC), 5-55% EtOAc/heksani, gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku svetlo žute pene.
Korak E. (3S,5R,6S)-3-alil-1-((S)-1-(terc-butildifenilsililoksi)butan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-on
[0175]
[0176] U rastvor 37,3 (266 mmol) diizopropilamina u suvom THF-u iz kojeg je evakuisan gas (150 ml) na -78<o>C polako, preko kanile, dodato je 100 ml (250 mmol) 2,5 M rastvora n-butillitijuma u heksanima iz kojeg je evakuisan gas. Bledožuti rastvor je mešan na -78<o>C 15 minuta, zatim ugrejan do 0<o>C i mešan dodatnih 5 min. U ledeno hladni rastvor LDA dodat je rastvor 85,7 g (133 mmol) (5R,6S)-1-((S)-1-(tercbutildifenilsililoksi)butan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 9, korak D) u suvom THF-u iz kojeg je evakuisan gas (210 ml), preko kanile, u toku 15 minuta.
Tamnonarandžasti rastvor je mešan na 0<o>C 30 minuta, te mu je dodato 34,5 ml (399 mmol) alilbromida, brzo, iz šprica. Nakon 20 sekundi, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona smeša je ostavljena u vodenom kupatilu sobne temperature i mešana dodatnih 15 min. Reakcija je zaustavljena zasićenim vod. amonijum hloridom i estrahovana pomoću EtOAc (3 x). Spojeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu (Biotage® Snap™ kolona; Biotage, LLC, Charlotte, NC), 6-14% EtOAc/heksani, gradijentna elucija) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bele pene.
Korak F.2-((3R,5R,6S)-1-((S)-1-(terc-butildifenilsililoksi)butan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0177]
[0178] Naslovno jedinjenje dobijeno je iz (3S,5R,6S)-3-alil-1-((S)-1-(terc-butildifenilsililoksi)butan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 9, korak E) procedurom sličnom onoj koja je opisana u referentnom primeru 3, korak F.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 0,30 (t, J=7,53 Hz, 3 H) 1,17 (s, 9 H) 1,34 - 1,48 (m, 1 H) 1,53 (s, 3 H) 1,74 - 1,88 (m, 1 H) 1,93 - 2,03 (m, 1 H) 2,29 (t, J=13,69 Hz, 1H) 2,69 (d, J=15,85 Hz, 1 H) 2,81 -2,93 (m, 1 H) 2,98 - 3,08 (m, 1 H) 3,12 (d, J=15,65 Hz, 1 H) 3,52 (dd, J=10,66, 4,21 Hz, 1 H) 4,32 (t, J=10,27 Hz, 1 H) 4,71 (d, J=10,76 Hz, 1 H) 6,56 - 6,66 (m, 1 H) 6,91 - 6,97 (m, 1 H) 7,02 - 7,09 (m, 1 H) 7,12 - 7,18 (m, 1 H) 7,20 - 7,30 (m, 4 H) 7,33 - 7,51 (m, 6 H) 7,64 (td, J=7,83, 1,57 Hz, 4 H).
Korak G.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksibutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0179] U ledeno hladni rastvor 370 g (0,53 mmol) 2-((3R,5R,6S)-1-((S)-1-(terc-butildifenilsililoksi)butan-2-il)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetne kiseline (referentni primer 9, korak F) u THF-u (15 ml) dodato je 2,60 ml (2,60 mmol) 1 M rastvora TBAF-a u THF-u. Žuti rastvor je ugrejan do st i mešan 5 h. Zatim je dodato 2,60 ml (2,60 mmol) 1 M rastvora TBAF-a u THF-u, te je reakciona smeša mešana dodatnih 20 h. Reakciona smeša je preraspodeljena između 1 N HCl i EtOAc (4 x). Spojeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan. Ostatak je prečišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (Sunfire™ Prep C18 OBD 10 µm kolona (Waters, Milford, MA), gradijentna elucija 40% MeCN u vodi do 80% MeCN u vodi u periodu od 30 min, gde oba rastvača sadrže 0,1%TFA), te je dobijeno naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste supstance.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,23-7,28 (2 H, m), 7,15-7,20 (1 H, m), 7,07-7,14 (1 H, m), 6,98-7,06 (3 H, m), 6,74 (1 H, d, J = 7,1 Hz), 4,55 (1 H, dd J = 9,8 Hz, 2,9 Hz), 3,71-3,79 (1 H, m), 3,58-3,66 (1 H, m), 3,19-3,28 (1 H, m), 3,07-3,16 (1 H, m), 2,96-3,03 (1 H, m), 2,75 (1 H, dd, J = 14,9 Hz, 2,9 Hz), 2,16-2,25 (1 H, m), 2,03-2,10 (1 H, m), 1,87-1,98 (1 H, m), 1,46 (3 H, s), 1,41-1,54 (m, 1 H), 0,63 (3 H, dd, J = 7,3 Hz, 3,3 Hz). Maseni spektar (ESI) m/z = 464,1 (M+1).
REFERENTNI PRIMER 10
2-((3R,5R,6S)-1-((S)-2-(terc-Butoksi)-1-ciklopropil-2-oksoetil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0180]
Korak A. Etil 2-brom-2-ciklopropilacetat.
[0181]
[0182] U rastvor 2-ciklopropilsirćetne kiseline (24,7 g, 247 mmol) u anhidrovanom DCE-u (250 ml) dodat je tionil hlorid (22 ml, 302 mmol) u kapima, u toku 5 minuta, na 25<o>C. Nakon 2 h refluktovanja, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, dodati su N-bromsukcinimid (53,6 g, 301 mmol) i hidrogen bromid (48% vodeni rastvor) (0,195 ml, 1,727 mmol) tim redosledom, na 25<o>C. Dobijena smeša je zagrevana uz refluks 96h. Nakon što se reakciona smeša ohladila na sobnu temperaturu, dodat je apsolutni EtOH (200 ml), te je dobijeni tamno smeđi rastvor mešan na sobnoj temperaturi jedan čas. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom (35 °C, 4,0 kilopaskala) te je ostatak suspendovan u ugljen tetrahloridu (300 ml) i propušten kroz stakleni filter. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom (35 °C, 4,0 kilopaskala). Prečišćavanjem sirovog proizvoda hromatografijom (silika gel, 330 g x 2,5% etilacetat/heksani) te koncentrovanjem željenih frakcija pod sniženim pritiskom (35 °C, 4,0 kilopaskala) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bledožute tečnosti.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 4,20 - 4,32 (2 H, m), 3,59 (1 H, d, J=10,4 Hz), 1,53 - 1,66 (1 H, m), 1,29 - 1,36 (3 H, m), 0,76 - 0,93 (2 H, m), 0,51 - 0,61 (1 H, m), 0,40 - 0,47 (1 H, m).
Korak B. (S)-etil 2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetat
[0184] U rastvor (3S,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-piperidin-2-ona (8,01 g, 25 mmol; referentni primer 1, korak E) u DMF-u (60 ml) dodat je 60% natrijum hidrid u mineralnom ulju (2,0 g, 50 mmol) na 0<o>C, te je tako dobijena smeša mešana na istoj temperaturi 30 min. U smešu je dodat etil 2-brom-2-ciklopropilacetat (12,18 g, 50 mmol) u DMF-u (10 ml) u kapima, te je smeša mešana na sobnoj temperaturi 2h, nakon čega je reakcija zaustavljena zas. rastvorom amonijum hlorida i reakciona smeša razblažena etilacetatom. Organski sloj je ispran 10% vod. limunskom kiselinom, 5% vod. rastvorom NaHCO3, vodom, zas. vod. rastvorom NaCl, a potom osušen preko MgSO4. Rastvarač je otparen pod sniženim pritiskom a ostatak prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju sa 20 do 50% etilacetatom u heksanu kako bi se dobilo naslovno jedinjenje kao dijastereomer koji se prvi eluira, u obliku bele čvrste supstance.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm -0,34 (m, 1H), 0,23 (m, 1H), 0,38 (m, 1H), 0,62 (m, 1H), 1,26 (t, J=8 Hz, 3H), 1,39 (m, 1H), 2,13 (m, 2H), 2,63 (m, 2H), 3,09 (m, 1H), 3,20 (d, J=12 Hz, 1H), 4,07 (m, 2H), 4,81 (d, J=8 Hz, 1H), 6,90 (dt, J=7,1, 1,7 Hz, 1H), 7,11-7,19 (m, 5H), 7,28 (m, 2H). Maseni spektar (ESI) m/z = 446,2 (M+1).
Korak C. (S)-terc-butil 2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetat
[0185]
[0186] U rastvor (S)-etil 2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-oksopiperidin-l-il)-2-ciklopropilacetata (500 mg, 1,12 mmol) (referentni primer 10, korak B) u smeši THF/MeOH/H2O (5/5/5, 15 ml) dodat je litijum hidroksid (1,68 ml, 3,36 mmol) na st, te je zatim smeša zagrejana do 60<o>C. Nakon mešanja na 60<o>C 1,5 h, reakcija je zaustavljena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl, te je smeša estrahovana (2 x DCM). Spojeni organski slojevi isprani (1 x zas. vod. rastvorom NaCl), osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom.
[0187] Sirova kiselina (450 mg, 1,076 mmol) koja je sintetisana kao što je prethodno opisano rastvorena je u DCM-u (10 mL), te je dodata sumporna kiselina (115 ul, 2,151 mmol) a zatim i 2-meti1prop-1-en (1,207 g, 21,51 mmol) na -78<o>C. Reakcioni sud je hermetički zatvoren te je smeša polako ugrejana do sobne temperature. Nakon žustrog mešanja u toku 4 dana, reakcija je zaustavljena zasićenim vod. rastvorom NH4Cl te estrahovana etilacetatom. Spojeni organski slojevi isprani su zas. vod. rastvorom NaCl, osušeni preko natrijum sulfata, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu pod pritiskom gasa (eluent: 40% EtOAc/heksani) dobijeno je naslovno jedinjenje.
Korak D. (S)-terc-butil 2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetat
[0188]
[0189] Rastvor litijum bis(trimetilsilil)amida (1 M u THF-u, 0,165 ml, 0,165 mmol) u kapima je dodat u rastvor (S)-terc-butil 2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetata (referentni primer 10, korak C, 71 mg, 0,15 mmol) i alil bromida (15,54 uL, 0,165 mmol) u 0,5 ml THF-a na -78<o>C. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Nakon 2 h mešanja, reakcija je zaustavljena zasićenim vod. rastvorom amonijum hlorida te estrahovana etilacetatom.
Spojeni organski slojevi isprani su zas. vod. rastvorom NaCl, osušeni preko natrijum sulfata, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu uz eluciju etilacetatom/heksanom dobijeno je naslovno jedinjenje.
Korak E.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(N-ciklopropilacetamido)butan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0190] Naslovno jedinjenje dobijeno je iz (S)-terc-butil 2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-2-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetata (referentni primer 10, korak D) procedurom iz referentnog primera 3, korak F.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 0,08 (m, 1 H), 0,49 (m, 1 H), 0,58 (m, 1 H), 0,66 (m, 1 H), 1,02 (m, 1 H), 1,44 (s, 9 H), 1,99 (m, 1 H), 2,19 (m, 1 H), 2,58 (dd, J= 16,0, 4,0 Hz,1 H), 2,66 (m, 1 H), 2,93 (dd, J= 12,0, 12,0 HZ, 1 H), 3,20 (s, 1 H), 3,34 (d, J = 12 HZ, 1 H), 5,37 (s, 1 H), 7,14 (m, 1 H), 7,25-7,33 (m, 3 H), 7,37-7,45 (m, 4 H). Maseni spektar (ESI) m/z = 532,2 (M+1).
REFERENTNI PRIMER 11
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0191]
Korak A. (5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil)piperidin-2-on
[0192]
1
[0193] Rastvor litijum borhidrida (2 M u THF-u, 15,46 ml, 30,9 mmol) dodat je u rastvor (S)-etil 2-((2S,3R)-3-(3-hlorfenil)-2-(4-hlorfenil)-6-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetata (referentni primer 10, korak B, 2,3 g, 5,15 mmol) u etru (40 ml) na 0 °C. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi 20 časova, reakcija je zaustavljena zas. vod. rastvorom NH4Cl, pa je reakciona smeša estrahovana pomoću EtOAc. Organski sloj je ispran zas. vod. rastvorom NaCl, osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku čvrste supstance, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 0,00 (m, 1H), 0,23 (m, 1H), 0,48-0,57 (m, 2H), 0,85 (m, 1H), 1,99 (m, 1H), 2,07 (m, 1H), 2,61 (m, 2H), 2,64 (m, 1H), 3,22 (dd, J=11,2, 9,8 Hz, 1H), 3,42 (td, J=10,1, 4,3 Hz, 1H), 3,60 (m, 1H), 4,93 (d, J=6,5 Hz, 1H), 6,89 (m, 1H), 7,09 (m, 4H), 7,18 (m, 2H), 7,27 (m, 1H). Maseni spektar (ESI) m/z = 404,0 (M+1).
Korak B. (SR,6S)-1-((S)-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)piperidin-2-on
[0194]
[0195] Proizvod iz referentnog primera 11 korak A preveden je u naslovno jedinjenje procedurom sličnom onoj opisanoj u referentnom primeru 9 korak C.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm -0,70 (m, 1H), -0,40 (m, 1H), 0,02 (m, 1H), 0,13 (m, 1H), 0,91 (s, 9H), 1,09 (m, 1H), 1,92-1,91 (m, 2H), 2,47-2,50 (m, 2H), 2,78 (s, br, 1H), 2,80 (m, 1H), 3,31 (m, 1H), 3,98 (m, 1H), 4,62 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,60 (m, 1H), 6,82-6,91 (m, 4H), 6,91-7,03 (m, 3H), 7,18-7,26 (6H), 7,37-7,45 (m, 4H). Maseni spektar (ESI) m/z = 642,3 (M+1).
Korak C. (SR,6S)-1-((S)-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-on
[0196]
2
[0197] (5R,6S)-1-((S)-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)piperidin-2-on (referentni primer 11, korak B, 7,9 g, 12,29 mmol) preveden je u naslovno jedinjenje, smešu dijastereomera, prema postupku iz referentnog primera 9, korak D.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm -0,15 (m, 1H), 0,00 (m,1H), 0,41-0,52 (m, 2H), 1,26 (s, 9H), 1,41 (m, 1H), 1,62 (d, J=7,2 Hz, 3H), 2,09 (m, 1H), 2,30 (m, 1H), 2,87 (m, 1H), 3,28 (m, 2H), 3,68 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 5,11 (d, J=6,1 Hz, 1H), 7,16-7,34 (m, 4H), 7,37-7,46 (m, 4H), 7,51-7,65 (m, 6H), 7,74-7,78 (m, 4H).
Korak D. (SR,6S)-3-alil-1-((S)-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-on
[0198]
[0199] (5R,6S)-1-((S)-2-(terc-butildifenilsililoksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-on (5,02 g, 7,64 mmol, referentni primer 11, korak C) preveden je u naslovno jedinjenje procedurom opisanom za referentni primer 9, korak E. Nakon obrade, neprečišćeni proizvod je dalje korišćen u dobijenom stanju.
Korak E.2-((3R,5R,6S)-1-((S)-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0200]
[0201] (5R,6S)-3-alil-1-((S)-2-((terc-butildifenilsilil)oksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-on (referentni primer 11, korak D, 106 mg, 0,15 mmol) tretiran je u skladu sa procedurom iz referentnog primera 9, korak F kako bi se dobila 2-((3R,SR,6S)-1-((S)-2-((tercbutildifenilsilil)oksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina. Maseni spektar (ESI) m/z = 714,3 (M+1).
Korak F.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0202] Rastvor tetrabutilamonijum fluorida (1,0 M u THF-u, 0,453 ml, 0,453 mmol) dodat je u rastvor 2-((3R,5R,6S)-1-((S)-2-(terc-butildifenilsililoksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetne kiseline (referentni primer 11, korak E, 108 mg, 0,151 mmol) u THF-u (4ml), te je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 20 časova. Analiza pomoću LC-MS je pokazala da reakcija nije završena, te je dodato dodatnih 0,225 ml rastvora tetrabutilamonijum fluorida, pa je reakciona smeša mešana još 26 časova. Smeša je razblažena etilacetatom a potom isprana vodom i zas. vod. rastvorom NaCl. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Prečišćavanjem pomoću RP-HPLC (Sunfire Prep C18OBD 10 µm kolona, gradijentna elucija 10% MeCN u vodi do 80% MeCN u vodi u toku 30 min, gde oba rastvarača sadrže 0,1 % TFA) dobijeno je naslovno jedinjenje kao čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δppm -0,30 (s, m, 1H), 0,00 (s, m, 1H), 0,37 (m, 2H), 0,79 (m, 1H), 1,22 (s, 3H), 2,00 (m, 2H), 2,52 (d, J=14,1 Hz, 1H), 2,70 (d, J=13,9 Hz, 1H), 3,00 (m, 2H), 3,20 (s, br, 3H), 3,29 (m, 1H), 4,65 (d, J=10,o Hz, 1H), 6,61 (m, 1H), 6,84 (s, br, 2H), 6,97 (m, 3H), 7,04 (m, 2H). Maseni spektar (ESI) m/z = 476,2 (M+1).
4
REFERENTNI PRIMER 12
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2S)-1-ciklopropil-2-hidroksibutil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina ili 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2R)-1-ciklopropil-2-hidroksibutil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0203]
Korak A. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-metilpiperidin-2-on
[0204]
[0205] Rastvor tetrabutilamonijum fluorida u THF-u (1M, 2,10 ml, 2,10 mmol) dodat je u rastvor dijastereomera (5R,6S)-3-alil-1-((S)-2-(terc-butildifenilsililoksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 11, korak D, 488mg, 0,700mmol) u THF-u (10 ml). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Smeša je razblažena etilacetatom a potom isprana vodom i zas. vod. rastvorom NaCl. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata.
Hromatografijom na silika gelu uz eluciju smešom etilacetat/heksan dobijeno je naslovno jedinjenje kao pojedinačni dijastereomer.
Maseni spektar (ESI) m/z = 458,0 (M+1)
Korak B. (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetaldehid
[0206]
[0207] (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-metilpiperidin-2-on (referentni primer 12, korak A, 80 mg, 0.17 mmol) je preveden u naslovno jedinjenje u obliku bele pene procedurom opisanom u referentnom primeru 4, korak C. Maseni spektar (ESI) m/z = 456,1 (M+1)
Korak C. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2S)-1-ciklopropil-2-hidroksibutil)-3-metilpiperidin-2-on ili (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2R)-1-ciklopropil-2-hidroksibutil)-3-metilpiperidin-2-on
[0208]
[0209] Prema proceduri iz referentnog primera 6, korak A, uz supstituciju metilmagnezijum bromida etilmagnezijum bromidom, (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetaldehid (referentni primer 12, korak B, 90 mg, 0,20 mmol) je preveden u naslovno jedinjenje koje je dobijeno kao dijastereomer koji se drugi eluira nakon hromatografije.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm -0,43 (m, 1H), -0,16 (m, 1H), 0,32 (m, 1H), 0,51 (m, 1H), 0,78 (t, J=.3 Hz, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,21-1,35 (m, 1H), 2,54 (m, 2H), 1,57 (s, br, 1H), 1,87-2,0 (m, 2H), 2,21 (s, br, 1H), 2,50-2,62 (m, 2H), 3,22 (ddd, J=12,8, 10,2, 4,0 Hz, 1H), 3,68 (s, br, 1H), 4,34 (d, J=10,0 Hz, 1H), 5,12 (s, 1H), 5,14 (d, J=8 Hz, 1H), 5,79 (m, 1H), 6,65 (dt, J=7,6, 1,6 Hz, 1H), 6,87-6,91 (m, 3H), 7,01-7,07 (m, 2H), 7,16-7,18 (m, 2H).
Maseni spektar (ESI) m/z = 486,3 (M+1)
Korak D.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2S)-1-ciklopropil-2-hidroksibutil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina ili 2-((3R,5R,6S)-5-(3-Hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2R)-1-ciklopropil-2-hidroksibutil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0210]
[0211] Naslovno jedinjenje je dobijeno tretiranjem jedinjenja iz referentnog primera 12, korak C postupkom koji je opisan u referentnom primeru 3, korak F.
<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ ppm -0,16 (s, br, 1H), 0,26 (s, br, 1H), 0,55 (s, br, 1H), 0,67 (s, br, 1H), 0,86 (m, 3H), 1,32 (m, 4H), 1,41 (s, 3H), 1,68 (m, 1H), 1,92 (m, 2H), 2,64 (d, J=12 Hz, 1H), 2,99 (d, J=12 Hz, 1H), 3,51 (m, 1H), 4,97 (m, 1H), 6,97 (m, 1H), 7,06 (m, 1H), 7,17 (m, 4H), 7,28 (m, 2H). Maseni spektar (ESI) m/z = 504,1 (M+1).
REFERENTNI PRIMER 13
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2R)-1-ciklopropil-2-hidroksipropil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0212]
Korak A. (3S,5R,6S)-3-alil-1-((S)-2-(terc-butildifenilsililoksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-on
[0213]
[0214] Smeša dijastereomera dobijena iz (5R,6S)-1-((S)-2-(terc-butildifenilsililoksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-ona (4,34 g, 6,61 mmol) postupkom iz referentnog primera 11, korak D, prečišćena je hromatografijom na silika gelu uz eluciju smešom etilacetat/heksani. Frakcije koje su sadržale željeni epimer su spojene i koncentrovane, dajući (3S,5R,6S)-3-alil-1-((S)-2-(tercbutildifenilsililoksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-on u obliku bele pene, mase 3,01 g (prinos 65%). MS (ESI) m/z =696 [M+H]<+>.
Korak B. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-metilpiperidin-2-on. (videti i referentni primer 12, korak A)
[0215]
[0216] Tretiranjem (3S,5R,6S)-3-alil-1-((S)-2-(terc-butildifenilsililoksi)-1-ciklopropiletil)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 13, korak A, 3,00 g, 4,31 mmol) u skladu sa procedurom iz referentnog primera 12, korak A, dobijen je (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-metilpiperidin-2-on u obliku bele pene (1,905 g , 97%).<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 0,00 - 0,15 (m, 1 H), 0,18 - 0,35 (m, 1 H), 0,44 - 0,69 (m, 2 H), 0,75 -0,87 (m, 1 H), 1,28 (s, 3 H), 1,87 - 2,03 (m, 2 H), 2,48 - 2,72 (m, 2 H), 3,01 - 3,22 (m, 2 H), 3,41 (td, J= 10,33, 4,52 Hz, 1H), 3,60 (dd, J= 11,00, 4,40 Hz, 1H), 4,86 (d, J = 10,03 Hz, 1 H), 5,06 - 5,24 (m, 2 H), 5,74 5,97 (m, 1 H), 6,74 (d, J = 7,58 Hz, 1H), 6,86 - 7,10 (m, 3 H), 7,10 - 7,26 (m, 4 H). MS (ESI) m/z =458 [M+H]<+>
Korak C. (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetaldehid. (videti i referentni primer 12, korak B)
[0217]
[0218] (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-hidroksietil)-3-metilpiperidin-2-on (referentni primer 13, korak B, 1,01 g, 2,2 mmol) je preveden u naslovno jedinjenje u obliku bele pene (866 mg, 86%) procedurom opisanom u referentnom primeru 4, korak C. MS (ESI) m/z = 456 [M+1]<+>.
Korak D. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2R)-1-ciklopropil-2-hidroksipropil)-3-metilpiperidin-2-on i (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2S)-1-ciklopropil-2-hidroksipropil)-3-metilpiperidin-2-on
[0219]
[0220] Prema proceduri iz referentnog primera 6, korak A, (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-2-ciklopropilacetaldehid (referentni primer 13, korak C, 866 mg, 1,897 mmol) je tretiran metilmagnezijum bromidom dajući dijastereomerne alkohole (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2R)-1-ciklopropil-2-hidroksipropil)-3-metilpiperidin-2-on i (3S,5R,6S)-3alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2S)-1-ciklopropil-2-hidroksipropil)-3-metilpiperidin-2-on u obliku bele pene. MS (ESI) m/z =472 [M+H]+.
Korak E.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-oksopropil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina.
[0221]
[0222] (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-hidroksipropil)-3-metilpiperidin-2-on (referentni primer 13, korak D, 809 mg, 1,71 mmol) je tretiran u skladu sa procedurom opisanom u referentnom primeru 3, korak F, kako bi se dobila, nakon prečišćavanja pomoću SFC, 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-oksopropil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina u obliku bele čvrste supstance.
<1>H NMR (500 MHz, metanol-D4) δ -0,70 - -0,47 (m, 1 H), 0,10 (dq, J= 9,78, 5,05 Hz, 1H), 0,31 - 0,48 (m, 1 H), 0,63 (tt, J = 8,59, 5,35 Hz, 1 H), 1,34 (s, 3 H), 1,47 - 1,58 (m, 1 H), 2,15 - 2,35 (m, 6 H), 2,65 (d, J= 13,69 Hz, 1H), 2,79 (d, J= 10,03 Hz, 1 H), 2,98 (d, J= 13,69 Hz, 1 H), 3,48 - 3,57 (m, 1 H), 4,65 (d, J= 10,51 Hz, 1 H), 6,94 - 7,01 (m, 1 H), 7,08 (s, 1 H), 7,11 - 7,54 (m, 6 H); MS (ESI) m/z = 488 [M+H]<+>.
Korak F.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2R)-1-ciklopropil-2-hidroksipropil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0223]
[0224] Redukcijom 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-oksopropil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetne kiseline u metanolu na 0<o>C natrijum borhidridom dobijena je smeša dijastereomernih alkohola u odnosu ~2:1. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu, uz eluciju gradijentom izopropanola u heksanima. Frakcije koje su sadržale najzastupljeniji izomer su koncentrovane a potom liofilizovane iz smeše acetonitril/voda kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku pahuljičaste bele supstance.
<1>H NMR (500 MHz, metanol-d4) δ ppm -0,29 (br s,1 H), 0,20 (br s, 1 H), 0,46 (br s,1 H), 0,60 (br s,1 H), 1,19 (br s, 3 H), 1,24 - 1,35 (m, 1 H), 1,39 (s, 3 H), 2,10 - 2,29 (m, 2 H), 2,63 (d, J= 13,69 Hz, 1 H), 2,82 (br s,1 H), 2,98 (d, J= 13,94 Hz, 1 H), 3,40 - 3,50 (m, 1 H), 3,57 (br s,1 H), 4,82 (d, J= 11,00 Hz, 1 H), 6,61 -7,64 (m, 8 H). MS (ESI) m/z = 490 [M+H]<+>.
REFERENTNI PRIMER 14
2-((3R,5R,6S)-5-(3-Hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((1S,2S)-1-ciklopropil-2-hidroksipropil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0225]
[0226] L-Selectride® (Aldrich, St. Louis, MO), (1M u THF-u, 5,0 ml, 5,00 mmol) dodat je u kapima u toku 5 minuta u rastvor 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-ciklopropil-2-oksopropil)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetne kiseline (referentni primer 13, korak E, 1,035g, 2,12 mmol) u THF-u (35 ml) na -78<o>C. Nakon 90 minuta, smeša je ostavljena da se ugreje do 0<o>C, pa je reakcija pažljivo zaustavljena dodatkom zasićenog amonijum hlorida. Vodena faza je estrahovana tri puta etilacetatom. Spojeni organski slojevi isprani su 1M HCl, vodom, zas. vod. rastvorom NaCl i osušeni preko natrijum sulfata. Nakon koncentrovanja u vakuumu, ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu, uz eluciju gradijentom izopropanola u heksanima. Frakcije koje su sadržale najzastupljeniji izomer su koncentrovane a potom liofilizovane iz smeše acetonitril/voda kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku belog praha. Stereohemija je određena analogijom sa referentnim primerom 8.
1
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ -0,69 (br s, 1 H), -0,35 (br s, 1 H), 0,17 (br s, 1 H), 0,36 (br s, 1 H), 1,07 (br s, 1 H), 1,27 (s, 4 H), 1,98 - 2,23 (m, 2 H), 2,53 - 2,58 (m, 1 H), 2,93 (d, J = 13,94 Hz, 1 H), 3,36 - 3,49 (m, 1 H), 3,74 - 4,44 (m, 1H), 4,46 - 5,11 (m, 2 H), 6,60 - 7,59 (m, 8 H). MS (ESI) m/z =490 [M+H]<+>.
REFERENTNI PRIMER 15
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((2S,3S)-2-hidroksi-4-metilpentan-3-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0227]
Korak A: Metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-2-metil-5-oksopentanoat
[0228]
[0229] Metil metakrilat (82 ml, 773 mmol) je dodat u rastvor 2-(3-hlorfenil)-1-(4-hlorfenil)etanona (195,2 g, 736 mmol; referentni primer 1, korak A) u anhidrovanom THF-u (1,5 l) u atmosferi azota. Potom je pripremljena suspenzija kalijum t-butoksida (8,26 g, 73,6 mmol) u anhidrovanom THF-u (340 ml) (propuštena kroz ultrazvučno kupatilo kako bi se čvrsta supstanca razbila), te je ova suspenzija dodata iz kanile u rastvor koji sadrži 2-(3-hlorfenil)-1-(4-hlorfenil)etanon. Rastvor je ohlađen do ∼16 °C, te je narandžasti rastvor ostavljen da se meša na sobnoj temperaturi 2,5 d. (Nakon 2 d, TLC je pokazala odsustvo polaznih supstanci). Smeša je koncentrovana u vakuumu. Preostalo crveno-smeđe ulje je razblaženo etilacetatom (900 ml) i isprano vodom (4 x 190 ml) a potom i zas. vod. rastvorom NaCl. Organski sloj je osušen preko magnezijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku racemske smeše dijastereomera.
2
<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7,88 (m, 4H), 7,39 (m, 2H), 7,27-7,12 (serije m, 4H), 4,62 (dd, J = 9,0, 5,6 Hz, 0,5H), 4,59 (dd, J = 9,3, 5,4 Hz, 0,5H), 3,69 (s, 1,5H), 3,60 (s, 1,5 H), 2,46 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 2,08 (ddd, J = 13,9, 9,3, 5,4 Hz, 0,5 H), 1,97 (ddd, J = 13,7, 9,0, 4,4 Hz, 0,5H), 1,23 (d, J = 6,9 Hz, 1,5 H), 1,16 (d, J = 7,1 Hz, 1,5H) ppm.
Korak B: Racemska smeša (4R,5R)-metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanoata i (4S,5S)-metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanoata
[0230]
[0231] U trogrli okrugli balon od 3l opremljen mehaničkom mešalicom i termometrom uliven je anhidrovani metanol (600 ml), u atmosferi N2, pa ohlađen na oko -20<o>C. Dodat je natrijum borhidrid (26,2 g, 693 mmol) u porcijama od po 5g. Kroz levak za dodavanje u reakcionu smešu je dodat rastvor metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-2-metil-5-oksopentanoata (253 g, 693 mmol; referentni primer 15, korak A) u metanolu (600 ml) u kapima, uz održavanje temperature između -27<o>C i -30<o>C. Crvenkasti rastvor je mešan na -30<o>C 30 minuta a zatim ostavljen da se ugreje do -15<o>C. Reakcija je praćena pomoću TLC do završetka. Reakcija je zaustavljena laganim dodatkom vode (68,6 ml, 3,8mol) kroz levak za dodavanje. Reakciona smeša je ostavljena da se ugreje do sobne temperature. Rastvarači su udaljeni u vakuumu. Preostalo žućkasto ulje je razblaženo etilacetatom (1,2 l) i isprano vodom (400 ml). Organski sloj je ispran zas. vod. rastvorom NaCl (2 x 300 ml), gradeći emulziju. Nakon što je emulzija ostavljena da se uglavnom razdvoji na slojeve, organski sloj je osušen preko magnezijum sulfata. Rastvor je proceđen kroz filter papir i koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila racemska smeša dijastereomera.
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,33 (m, 2H), 7,27-7,17 (serije m, 5H), 7,04 (m, 1H), 5,43 (d, J = 4,4 Hz, 0,5H), 5,37 (d, J = 4,6 Hz, 0,5H), 4,77 (t, J = 5,4 Hz, 0,5H), 4,71 (dd, J = 6,6, 4,9 Hz, 0,5H), 5,33 (s, 1,5H), 3,46 (s, 1,5 H), 2,87 (dt, J = 10,2, 4,7 Hz, 0,5H), 2,75 (ddd, J = 11,2, 6,6, 4,9 Hz, 0,5H), 2,04 (m, 1,5 H), 1,71 (m, 1H), 1,46 (m, 0,5H), 0,97 (d, J = 6,6 Hz, 1,5H), 0,94 (d, J = 7,1 Hz, 1,5H) ppm; TLC (20% EtOAc/heksan) Rf= 0,34.
Korak C. (4R,5R)-4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanska kiselina i (4S,5S)-4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanska kiselina
[0232]
[0233] Rastvor racemske smeše (4R,5R)-metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanoata i (4S,5S)-metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanoata (245,7 g, 669 mmol; referentni primer 15, korak B) u THF-u (1,17 l) pripremljen je zagrevanjem do 40<o>C. Sud je ohlađen dok unutrašnja temperatura nije dostigla ~14<o>C. U rastvor u THF-u pažljivo je dodat litijum hidroksid hidrat (42,1 g, 1,0 mol) u vodi (585 ml). Smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi i praćena pomoću LC/MS kako bi se uočilo odsustvo polaznih supstanci (∼2,5 h). Nakon završetka reakcije, rastvor je ponovo ohlađen do temperature od ~14<o>C. Polako je dodata 2 N HCl (526 ml). Slojevi su se razdvojili, te je vodeni sloj (pH ∼2) ispran etilacetatom (1 x 500 ml potom 1 x 250 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani kako bi se dobilo 264 g racemske smeše (4R,5R)-4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanske kiseline i (4S,5S)-4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanske kiseline. Sirovi materijal koji je sadržao nešto zaostalog rastvarača korišćen je u takvom obliku u sledećoj reakciji. Proizvod (procenjeno nakon korekcije za rastvarač na 227g) je, grubo govoreći, 1:1 smeša dijastereomera u položaju 2.
<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7,31 (m, 2H), 7,25 (m, 3H), 7,17 (m, 2H), 7,05 (m, 1H) 4,74 (m, 1H), 2,99 (ddd, J = 11,2, 1,7, 3,7 Hz, 0,5H), 2,90 (ddd, J = 11,5, 7,3, 4,6 Hz, 1H), 2,15 (m, 1,5 H), 1,85 (m, 0,5 H), 1,67 (ddd, J = 14,3, 11,5, 3,4 Hz, 0,5H), 1,52 (m, 0,5 H), 1,08 (d, J = 7,1 Hz, 1,5 H), 1,05 (d, J = 6,9 Hz, 1,5H) ppm.
[0234] Alternativno, (4R,5R)-4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanska kiselina, u obliku smeše metil dijastereomera, može da se dobije iz racemske smeše metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-2-metil-5-oksopentanoata.
[0235] U trogrli balon uliven je rastvor racemske smeše metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-2-metil-5-oksopentanoata (500 g, 1,37 mol, 1 ekv) u anhidrovanom 2-propanolu (2,5 l), kome je dodat KO<t>Bu (46,1 g, 0,41 mol, 0,3 ekv) te je smeša mešana 30 minuta dok nije nastao bistar žuti rastvor. Rastvor je zatim tretiran rastvorom dihlor{(S)-(-)-2,2’-bis[di(3,5-ksilil)fosfino]-1,1’-binaftil}[(2S)-(+)-1,1-bis(4-metoksifenil)-3-metil-1,2-butandiamin]rutenijuma(II) (5 g, 4,1 mmol, 0,003 ekv, Strem Chemicals inc., Newburyport, MA) u anhidrovanom toluenu (250 ml), te je smeša mešana na ST 2 časa (primedba: većina metilestra prevedena je u izopropil). Rastvor je prebačen u dve Parove mućkalice, koje su hermetički zatvorene i barbotirane vodonikom 3 puta. Reakciona smeša je mućkana na ST pod pritiskom vodonika od 414 kilopaskala. Nakon 18h, reakcija je zaustavljena dodatkom zas. NH4Cl, smeša je
4
koncentrovana i estrahovana pomoću EtOAc (2 l x 2). Spojeni organski slojevi su isprani vodenim rastvorom soli i koncentrovani do smeđeg ulja, koje je kao takvo korišćeno u narednom koraku.
[0236] Sirovi međuproizvod (542 g, 1,37 mol) je rastvoren u THF-u (3 l) i MeOH (1 l) te mu je dodat 2 M LiOH (1 l). Rastvor je rotiran na ST preko noći, koncentrovan kako bi se uklonila većina THF-a i MeOH-a, te je reakcija zaustavljena dodatkom 1 l 2 M HCl. Nakon razdvajanja faza, vodeni sloj je estrahovan pomoću EtOAc (1 l x 2). Spojeni organski slojevi su isprani vodenim rastvorom soli, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, proceđeni i koncentrovani u vakuumu. Ovaj proizvod, (4R,5R)-4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-5-hidroksi-2-metilpentanska kiselina, u obliku smeše metil dijastereomera, korišćen je sirov u narednom koraku.
Korak D. (5R,6R)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-on i (5S,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-on
[0237]
[0238] Smeša dijastereomera hidroksi kiselina (227 g, 643 mmol; referentni primer 15, korak C) laktonizovana je pod Din-Starkovim reakcionim uslovima u toluenu (1,07 l) sa piridin 4-metilbenzensulfonatom (PPTS, 4,84 g, 19,28 mmol) u atmosferi azota. Nakon 2 h žustrog refluksa, rastvor je ohlađen do sobne temperature i prenesen u levak za odvajanje. Ostatak u balonu ispran je etilacetatom. Spojene organske faze su isprane, redom, vodom (1 x 250ml), zas. rastvorom natrijum bikarbonata (1 x 250ml) i zas. vod. rastvorom NaCl (1 x 250 ml). Nakon sušenja preko magnezijum sulfata, koncentrovanjem pod sniženim pritiskom dobijena je smeša dijastereomernih laktona u obliku svetlosmeđe čvrste supstance.
<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7,24-6,95 (serije m, 6H), 6,91 (d, J = 7,6 Hz, 0,5H), 6,82 (m, 1,5H), 6,73 (d, J = 7,6 Hz, 0,5H), 5,77 (d, J = 3,9 Hz, 0,5H), 5,69 (d, J = 4,6 Hz, 0,5H), 3,67 (dt, J = 7,6, 4,2 Hz, 0,5H), 3,55 (td, J = 7,8, 4,6 Hz, 0,5H), 2,97 (m, 0,5 H), 2,81 (dublet kvinteta, J =14,4, 7,1 Hz, 0,5 H), 2,56 (dt, 16,1, 8,0 Hz, 0,5H), 2,32 (dt, J = 13,7, 6,9 Hz, 0,5H), 2,07 (ddd, J = 13,2, 8,6, 4,4 Hz, 0,5H), 1,85 (ddd, J = 14,2, 12,7, 7,6 hz, 0,5H), 1,41 (d, J = 7,1 Hz, 1,5H), 1,39 (d, J = 6,9 Hz, 1,5H) ppm.
Korak E: (3S,5R,6R)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-on i (3R,5S,6S)- 3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-on
[0239]
[0240] Rastvor racemskog laktona iz prethodnog koraka (referentni primer 15, korak D, 190,28 g, 568 mmol) u THF-u (946 ml) pripremljen je u okruglom balonu sa 1 grlom opremljenom Klajzenovim adapterom, levkom za dodavanje od 500 ml i unutrašnjim termometrom, u atmosferi azota. Rastvor je ohlađen do temperature od -35<o>C. Iz levka za dodavanje dodat je alil bromid (120 ml, 1,42 mol), uz održavanje temperature ispod -30<o>C u toku dodavanja reagensa. U reakcionu smešu je u kapima dodat rastvor LHMDS (1 M u THF-u, 738 ml, 738 mmol), uz održavanje temperature ispod -30<o>C. Reakcija je ostavljena da se polako ugreje do -5<o>C u periodu od 1 h. Rastvor je ponovo ohlađen na oko -20<o>C i kanilom dodat u rastvor amonijum hlorida u vodi na oko 5C. Nakon razdvajanja slojeva, vodeni slojevi su estrahovani dva puta etilacetatom. Spojeni organski slojevi isprani su zas. vod. rastvorom NaCl i osušeni preko natrijum sulfata. Koncentrovanjem u vakuumu dobijeno je 219 g svetložute čvrste supstance. Čvrste susptance su pomešane sa heksanom (2 l) na sobnoj temperaturi u toku 2 h. Čvrsta supstanca je zatim odvojena filtracijom, isprana heksanom (2 x 100 ml) i osušena kako bi se dobila naslovna jedinjenja u obliku racemske smeše.
<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7,24 (m, 1H), 7,20-7,15 (m, 3H), 6,91 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,59 (m, 2H), 5,84 (ddt, J = 17,6, 10,3, 7,6 Hz, 1H), 5,71 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 5,21-5,13 (m, 2H), 3,81 (dt, J = 12,0, 4,2 Hz, 1H), 2,62 (ABX JAB= 14,0, JAX= 7,8 Hz, 1H), 2,52 (ABX, JAB= 13,9, JAX= 7,3 Hz, 1H), 1,98 (dd, J = 14,0, 12,0 Hz, 1H), 1,91 (ddd, J = 14,0, 3,7, 1,2 Hz, 1H), 1,42 (s, 3H) ppm.
Korak F: Razdvajanje (3S,5R,6R)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona i (3R,5S,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona
[0242] Racemska smeša (3S,5R,6R)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona i (3R,5S,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona može da se razdvoji pomoću superkritično-tečne hromatografije (SFC), na sledeći način: upotrebom 250 x 30 mm Lux2® kolone (Phenomenex, Torrance, CA 90501, SAD) sa 20 g/min metanola (20 mM NH3) 60 g/min CO2na Thar 80 SFC. Izlazni pritisak = 100 bara; temperatura = 23C; talasna dužina = 220 nm. Korišćene su injekcije od 0,3 ml 5,0g/80 ml (62,5 mg/ml uzorka rastvora u metanolu/dihlormetanu (75:5), tj.18,75 mg/injekciji. Vreme trajanja = 8 min, vreme ciklusa = 3 min.
[0243] Prvi maksimum koji je sakupljen dodeljen je (3R,5S,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-onu. Utvrđeno je da je drugi maksimum koji je sakupljen zapravo (3S,5R,6R)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-on daljom hemijskom derivatizacijom sa (S)-2-amino-1-butanolom i prevođenjem u isto jedinjenje koje je dobijeno u referentnom primeru 4, korak B, u procesu opisanom za referentni primer 15, korake G i H. NMR odvojenih enantiomera poklapao se sa spektrima racemata koji su opisani u prethodnom tekstu.
[0244] Alternativno, (3S,5R,6R)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-on može da se dobije iz racemske smeše metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-2-metil-5-oksopentanoata.
[0245] U trogrli balon uliven je rastvor racemske smeše metil 4-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-2-metil-5-oksopentanoata (500 g, 1,37 mol, 1 ekv) u anhidrovanom 2-propanolu (2,5 l), kome je dodat KO<t>Bu (46,1 g, 0,41 mol, 0,3 ekv) te je smeša mešana 30 minuta dok nije nastao bistar žuti rastvor. Rastvor je zatim tretiran rastvorom dihlor{(S)-(-)-2,2’-bis[di(3,5-ksilil)fosfino]-1,1’-binaftil}[(2S)-(+)-1,1-bis(4-metoksifenil)-3-metil-1,2-butandiamin]rutenijuma(II) (5 g, 4,1 mmol, 0,003 ekv, /Strem Chemicals inc., Newburyport, MA) u anhidrovanom toluenu (250 ml), te je smeša mešana na ST 2 časa (primedba: većina metilestra prevedena je u izopropil). Rastvor je prebačen u dve Parove mućkalice, koje su hermetički zatvorene i barbotirane vodonikom 3 puta. Reakciona smeša je mućkana na ST pod pritiskom vodonika od 414 kilopaskala. Nakon 18 h, reakcija je zaustavljena dodatkom zas. NH4Cl, smeša je koncentrovana i estrahovana pomoću EtOAc (2 l x 2). Spojeni organski slojevi su isprani vodenim rastvorom soli i koncentrovani do smeđeg ulja, koje je kao takvo korišćeno u narednom koraku.
[0246] Sirovi međuproizvod (542 g, 1,37 mol) je rastvoren u THF-u (3 l) i MeOH (1 l) te mu je dodat 2M LiOH (1 l). Rastvor je rotiran na ST preko noći, koncentrovan kako bi se uklonila većina THF-a i MeOH-a, te je reakcija zaustavljena dodatkom 1 l 2M HCl. Nakon razdvajanja faza, vodeni sloj je estrahovan pomoću EtOAc (1 l x 2). Spojeni organski slojevi su isprani vodenim rastvorom soli, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, proceđeni i koncentrovani u vakuumu.
Korak G: (S)-2-((2R,3R)-2-(3-hlorfenil)-3-(4-hlorfenil)-3-hidroksipropil)-N-((S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)- 2-metilpent-4-enamid
[0247]
[0248] Smeša (S)-2-amino-3-metilbutan-1-ola (550 mg, 5,33 mmol) i (3S,5R,6R)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona (referentni primer 15, korak H, 2. jedinjenje, 500 mg, 1,332 mmol) zagrevana je na 100°C u toku 24 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, ostatak je rastvoren u etilacetatu i ispran 3 x 1 N HCl (5 ml) a zatim zas. vod. rastvorom NaCl (5 ml). Organska faza je osušena preko MgSO4, proceđena, te je filtrat koncentrovan kako bi se dobilo naslovno jedinjenje.
<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,21 (m, 2H), 7,10 (m, 2H), 7,06 (br s, 1H), 6,99 (m, 2H), 6,86 (br d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,84 (br d, J = 7,1 Hz, 1H), 5,53 (dddd, J = 16,9, 10,3, 8,1, 6,6 Hz, 1H), 5,46 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,90 (m, 2H), 4,78 (t, J = 4,2 Hz, 1H), 4,56 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,56 (m, 1H), 3,37 (m, 2H), 2,87 (dt, J = 7,8, 4,2 Hz, 1H), 2,29 (dd, J = 13,7, 6,4 Hz, 1H), 2,14 (dd, J = 14,4, 7,8 Hz, 1H), 1,97 (dd, J = 14,4, 3,9 Hz, 1H), 1,88 (dd, J = 13,9, 8,1 Hz, 1H), 1,76 (oktet, J = 6,4 Hz, 1H), 0,97 (s, 3H), 0,81 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,75 (d, J = 6,6 Hz, 3H) ppm.
Korak H. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-3-metilpiperidin-2-on
[0250] (S)-2-((2R,3R)-2-(3-hlorfenil)-3-(4-hlorfenil)-3-hidroksipropil)-N-((S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-2-metilpent-4-enamid (referentni primer 15, korak G) prebačen je, u obliku rastvora u anhidrovanom benzenu, u prethodno odmereni, presušeni okrugli balon od 50 ml i uparen do suva. Azeotropna destilacija benzena i vode sprovedena je još dva puta, te je ostatak osušen pod jakim vakuumom u toku 2 h, nakon čega je njegova masa iznosila 550 mg. U balon je postavljena presušena mehanička mešalica. Sud je hermetički zatvoren, te je iz njega isteran vazduh pomoću azota, nakon čega je dodat anhidrovani dihlormetan (23 ml) te i trietilamin (1,3 ml, 9,33 mmol). Dobijeni rastvor je, uz mešanje, ohlađen do 0<o>C. Pomoću mikrošprica, u smešu je dodat metansulfonil hlorid (0,270 ml, 3,49 mmol) u kapima. Nakon 1h reakcija je zaustavljena dodatkom HCl (1,2M, 12 ml) te je reakciona smeša razblažena etilacetatom. Organski sloj je ispran sa 1,2M HCl (30 ml), zasićenim natrijum bikarbonatom (2 x 25 ml) te zas. vod. rastvorom NaCl. Nakon sušenja preko magnezijum sulfata i koncentrovanja u vakuumu, dobijen je međuproizvod u obliku beličaste pene (0,64 g). Tom međuproizvodu su dodati 1,8-bis(dimetilamino)naftalen (314 mg, 1,465 mmol) i voda (0,104 ml, 5,75 mmol), a zatim i dioksan (23 ml). Smeša je zagrevana u atmosferi azota na 110<o>C preko noći. Nakon hlađenja, smeša je rastvorena u etilacetatu i isprana zasićenim rastvorom amonijum hlorida. Vodena faza je ponovo estrahovana etilacetatom. Spojeni organski slojevi isprani su zas. vod. rastvorom NaCl, osušeni preko natrijum sulfata, proceđeni i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju etilacetatom u heksanima. Frakcije sa hromatografije koje su sadržale najveći udeo željenog proizvoda su spojene. Proizvod je ponovo prečišćen hromatografijom u koloni 40g silika gela, uz eluciju gradijentom od 0 do 50% etilacetata u heksanima, kako bi se dobilo naslovno jedinjenje.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 0,73 (d, J= 6,46 Hz, 3 H), 0,83 (d, J= 6,65 Hz, 3 H), 1,28 (s, 3 H), 1,91 - 2,00 (m, 1 H), 2,00 - 2,10 (m, 1H), 2,26 - 2,45 (m, 1H), 2,56 - 2,74 (m, 2 H), 3,16 (br.s, 1H), 3,26 (ddd, J = 13,50, 10,47, 3,42 Hz, 1H), 3,43 (br.s, 1H), 3,76 (dd, J = 11,25, 3,42 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 10,56 Hz, 1H), 5,18 (s, 1 H), 5,21 (d, J = 6,46 Hz, 1 H), 5,87 (ddt, J = 16,95, 9,85, 7,53 Hz, 1 H), 6,72 (naizgled d, J= 7,63 Hz, 1 H), 6,95 (t, J= 1,66 Hz, 1 H), 6,97 - 7,17 (m, 4 H), 7,23 (d, J= 8,41 Hz, 2 H); MS (ESI) m/z = 460 [M+H]<+>.
Korak I. (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-3-metilbutanal
[0252] U rastvor (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-hidroksi-3-metilbutan-2-il)-3-metilpiperidin-2-ona (referentni primer 15, korak H, 365,4 mg, 0,794 mmol) u dihlormetanu (8 ml) i vodi (0,04 ml, 2,220 mmol) dodat je Des-Martinov perjodinan (938 mg, 2,212 mmol) u čvrstom stanju.
Dobijena suspenzija je žustro mešana na sobnoj temperaturi 1,5 h. Reakcija je zaustavljena rastvorom natrijum tiosulfata (1 M vod., 6 ml). Dodata je dodatna količina rastvora natrijum sulfata (1 M vod., 6 ml) te je smeša mešana sve dok krečasta suspenzija nije postala blago zamućena dvofazna smeša.
Vodena faza je odvojena i dodatno estrahovana dihlormetanom. Organski sloj je ispran rastvorom natrijum tiosulfata, zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i zas. vod. rastvorom NaCl. Nakon sušenja preko natrijum sulfata i koncentrovanja, ostatak je prečišćen na silika gelu, uz eluciju gradijentom od 0 do 30% etilacetata u heksanima. Frakcije koje su sadržale željeni proizvod su sastavljene, dajući naslovno jedinjenje u obliku bele pene. MS (ESI) m/z =458 [M+H]<+>.
Korak J. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-2-hidroksi-4-metilpentan-3-il)-3-metilpiperidin-2-on.
[0253]
[0254] U prethodno osušeni rastvor (S)-2-((3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-2-oksopiperidin-1-il)-3-metilbutanala (referentni primer 15, korak I, 286 mg, 0,624 mmol) u THF-u (6,5 ml) na 0<o>C i u atmosferi azota dodat je metilmagnezijum bromid (1,4 ml, 1,960 mmol, 1,4 M u smeši THF:toluen 1:3) iz šprica. Ledeno kupatilo je uklonjeno. Nakon 2 h, rastvor je ponovo ohlađen do 0<o>C, te je reakcija zaustavljena pažljivim dodatkom zasićenog rastvora amonijum hlorida. Dobijena smeša je estrahovana etilacetatom. Organski sloj je ispran zas. vod. rastvorom NaCl, osušen preko natrijum sulfata, proceđen i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju gradijentom etilacetata u heksanima od 0 do 40%. Frakcije koje su sadržale željeni proizvod su spojene i ponovo prečišćene, kako bi se dobilo naslovno jedinjenje kao smeša dijastereomernih alkohola, u obliku bele pene. MS (ESI) m/z =474 [M+H]<+>.
Korak K.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-2-metil-4-oksopentan-3-il)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0255]
[0256] Pomoću procedure slične one opisanoj u referentnom primeru 13, korak E, (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-2-hidroksi-4-metilpentan-3-il)-3-metilpiperidin-2-on (referentni primer 15, korak J, 244 mg, 0,51 mmol) je preveden u naslovno jedinjenje dobijeno nakon prečišćavanja hromatografijom na silika gelu uz eluciju etilacetatom u heksanima, u obliku bele čvrste supstance. MS (ESI) 490 [M+H]<+>.
Korak L.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((2S,3S)-2-hidroksi-4-metilpentan-3-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0257] Naslovno jedinjenje dobijeno je iz 2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metil-1-((S)-2-metil-4-oksopentan-3-il)-2-oksopiperidin-3-il)sirćetne kiseline (referentni primer 15, korak K, 79,9 mg, 0,16 mmol) procedurom sličnom onoj koja je opisana u referentnom primeru 13. Nakon obrade, supstanca je prečišćena hromatografijom u koloni silika gela od 24 g, uz eluciju gradijentom od 10 do 20% izopropanola u heksanima. Najčistije dobijene frakcije su spojene, koncentrovane, ponovo rastvorene u smeši MeCN/voda 1:1, propuštene kroz tekstilni mikrofilter, zamrznute i liofilizovane kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste supstance. Stereohimija je određena analogijom sa referentnim primerom 8.
1
<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 0,62 (d, J= 7,04 Hz, 3 H), 0,67 (d, J= 6,65 Hz, 3 H), 1,26 (d, J = 6,46 Hz, 3 H), 1,42 (s, 3 H), 2,13 - 2,29 (m, 3 H), 2,49 (t, J= 7,14 Hz, 1H), 2,62 (d, J= 13,69 Hz, 1H), 3,01 (d, J= 13,69 Hz, 1 H), 3,57 (td, J= 10,81, 6,16 Hz, 1H), 4,23 (t, J = 6,65 Hz, 1 H), 4,70 (d, J= 10,95 Hz, 1 H), 6,65 - 7,51 (m, 8 H). MS (ESI) m/z = 492 [M+H]<+>.
REFERENTNI PRIMER 16
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(etilsulfonil)butan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0258]
Korak A. (3S,5S,6R,8S)-8-alil-6-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-3-etil-8-metil-2,3,5,6,7,8-heksahidrooksazolo[3,2-a]piridin-4-ijum trifluorometansulfonat
[0259]
[0260] Naslovno jedinjenje dobijeno je postupkom iz referentnog primera 17, korak A, uz primenu (S)-2-aminobutanola umesto L-valinola, kao dijastereomer koji se prvi eluira.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,95 (1 H, br, s), 7,34 - 7,60 (2 H, m), 7,18 - 7,34 (4 H, m), 7,13 (1 H, dt, J=7,5, 1,3 Hz), 5,88 (1 H, m), 5,37 (1 H, dd, J=16,8, 1,6 Hz), 5,28 (1 H, dd, J=10,0, 2,0 Hz), 5,16 (1 H, d, J=10,8 Hz), 5,06 (1 H, t, J=9,8 Hz), 4,78 (1 H, dd, J=9,5, 7,1 Hz), 4,45 (1 H, m, J=2,7 Hz), 3,88 - 3,98 (1 H,
2
m), 2,66 - 2,85 (2 H, m), 2,33 (1 H, t, J=13,4 Hz), 1,99 (1 H, dd, J=13,7, 3,4 Hz), 1,32 (3 H, s), 0,94 (1 H, m), 0,59 (3 H, t, J=7,2 Hz), 0,41 - 0,53 (1 H, m); Maseni spektar (ESI) m/z = 428,2 (M<+>).
Korak B. (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(etiltio)butan-2-il)-3-metilpiperidin-2-on
[0261]
[0262] U rastvor (3S,5S,6R,8S)-8-alil-6-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-3-etil-8-metil-2,3,5,6,7,8-heksahidrooksazolo[3,2-a]piridin-4-ijum trifluormetansulfonata (86 mg, 0,15 mmol; referentni primer 16, korak A) u DMF-u (0,74 ml) dodat je natrijum etantiolat (38 mg, 0,45 mmol). Nakon mešanja na 25<o>C 1,5 h dana, reakcija je zaustavljena (zas. vod. NH4Cl), reakciona smeša je estrahovana (2 x EtOAc) i isprana (2 x vodeni rastvor soli). Spojeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 10% i 20% EtOAc/heksani) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bezbojne tečnosti.
Korak C.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(etilsulfonil)butan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0263] U rastvor (3S,5R,6S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(etiltio)butan-2-il)-3-metilpiperidin-2-ona (60 mg, 0,12 mmol; referentni primer 16, korak B) u smeši vode (0,66 ml), acetonitrila (0,44 ml) i CCl4(0,44 ml) koji je brzo mešan dodat je natrijum perjodat (157 mg, 0,734 mmol), a zatim i rutenijum(III) hlorid hidrat (2,8 mg, 0,012 mmol). Nakon 5 h žustrog mešanja, reakciona smeša je zakiseljena (10% limunska kiselina) i razblažena (EtOAc). Smeša je proceđena kroz sloj Celita® (J.T. Baker, Phillipsberg, NJ, dijatomejska zemlja), te je filtrat estrahovan (2 x EtOAc). Spojeni organski slojevi su isprani vodenim rastvorom soli, osušeni preko Na2SO4, proceđeni, te je filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka reverzno-faznom preparatornom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona, Phenomenex, Torrance, CA; gradijentna elucija sa 40% do 60% MeCN u vodi, gde oba rastvarača sadrže 0,1% TFA) dobijeno je naslovno jedinjenje u obliku bele pene.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7,24 - 7,26 (2 H, m), 7,01 - 7,20 (4 H, m), 6,93 - 6,98 (1 H, m), 6,85 (1 H, d, J=7,0 Hz), 4,94 (1 H, d, J=10,6 Hz), 4,15 (1 H, t, J=12,1 Hz), 3,24 - 3,37 (1 H, m), 2,92 - 3,18 (4 H, m), 2,71 - 2,82 (2 H, m), 2,38 (1 H, t, J=13,8 Hz), 2,06 - 2,21 (1 H, m), 1,92 (1 H, dd, J=13,7, 2,7 Hz), 1,48 (3 H, s), 1,42 - 1,46 (1 H, m) 1,44 (3 H, t, J=7,5 Hz), 0,41 (3 H, t, J=7,5 Hz); Maseni spektar (ESI) m/z = 540,1 [M+H.
REFERENTNI PRIMER 17
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(etilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0264]
Korak A. (3S,5S,6R,8S)-8-Alil-6-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-3-izopropil-8-metil-2,3,5,6,7,8-heksahidrooksazolo[3,2-a]piridin-4-ijum trifluormetanesulfonat
[0265]
[0266] L-valinol (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) (3,64 g), racemska smeša (3S/R,5R/S,6R/S)-3-alil-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona (3,17 g, referentni primer 15, korak E) i litijum t-butoksid (0,025 g) zagrejani su kao čvrsta smeša u toku 17 h, na uljanom kupatilu podešenom na 135<o>C. Nakon hlađenja, staklasta čvrsta supstanca rastvorena je u dihlormetanu. Organski sloj je ispran zas. rastvorom amonijum hlorida, a zatim lN rastvorom natrijum hidroksida, te potom vodenim rastvorom soli. Organski sloj je osušen preko magnezijum sulfata i koncentrovan kako bi se dobilo 3,88 g smeše dijastereomera. Porcija od 2,61 g (67% ukupne količine) od smeše koja je približno 1:1, a koja je dobijena kao što je prethodno opisano, rastvorena je u toluenu i uparena do suva tri puta kako bi se
4
uklonila zaostala vlaga. Dodati su dihlormetan (55ml) i 2,6-dimetilpiridin (3,3 ml, 28,5 mmol) te je nastali rastvor uz mešanje ohlađen do -50<o>C u kupatilu od suvog leda/acetonitrila. U toku 10 minuta dodat je anhidrid trifluormetansulfonske kiseline (2,4 ml, 14,27 mmol), tako da unutrašnja temperatura reakcione smeše nije prešla -45<o>C. Nakon 40 minuta, reakcija je zaustavljena dodavanjem 2 M HCl. Smeša je ugrejana do sobne temperature, razblažena dihlormetanom, isprana 2 N HCl, vodom i konačno vodenim rastvorom soli. Organski sloj je osušen preko magnezijum sulfata, proceđen i koncentrovan do žute pene čija je masa iznosila približno 2,6 g. Deo ove supstance (1,92 g, 74%) je prečišćen tečnom hromatografijom pod umerenim pritiskom sa kolonom od 120 g i uz eluciju gradijentom od 20 do 100% acetona u heksanima. Frakcije koje su sadržavale dijastereomer koji se brže eluirao (manje polaran) su koncentrovane, kako bi se dobilo naslovno jedinjenje u obliku bele pene.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,62 (d, J= 2,4 Hz, 3 H), 0,64 - 0,74 (m, 4 H), 1,51 (s, 3 H), 2,04 (dd, J = 14,1, 3,5 Hz, 1 H), 2,54 - 2,79 (m, 3 H), 3,58 (ddd, J= 13,7, 10,8, 3,5 Hz, 1H), 4,59 (dd, J= 10,2, 4,7 Hz, 1H), 4,67 (dd, J= 9,2, 4,9 Hz, 1H), 5,23 - 5,45 (m, 3 H), 5,71 (d, J = 11 Hz, 1 H), 5,83 (ddt, J = 17, 9,9, 7,4 Hz, 1 H), 7,06 (t, J = 1,8 Hz, 1 H), 7,11 - 7,16 (m, 1 H), 7,19 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,23 - 7,32 (m, 3 H), 7,39 (br s, 2 H); Maseni spektar (ESI) m/z = 442,2 (M<+>).
Korak B.2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(etilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0267] Naslovno jedinjenje je dobijeno iz (3S,5S,6R,8S)-8-alil-6-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-3-izopropil-8-metil-2,3,5,6,7,8-heksahidrooksazolo[3,2-a]piridin-4-ijum trifluormetansulfonata (referentni primer 17, korak A), procedurama sličnim onim koje su opisane u referentnom primeru 16, uz upotrebu ekvivalentne količine entandiola u koraku B.
<1>H NMR (500 MHz, metanol-d4) δ ppm 0,51 (d, J= 7,1 Hz, 3 H), 0,66 (d, J= 6,6 Hz, 3 H), 1,37 (s, 3 H), 1,41 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 2,05 (dd, J = 13,7, 2,9 Hz, 1H), 2,18 (dq, J= 14,2, 6,9 Hz, 1 H), 2,31 (t, J= 13,7 Hz, 1 H), 2,62 (d, J= 13,7 Hz, 1 H), 3,00 (d, J= 13,7 Hz, 1 H), 3,14 - 3,24 (m, 3 H), 3,25 - 3,30 (m, 1H), 3,57 (ddd, J= 13,8, 10,9, 2,9 Hz, 1 H), 4,02 (dd, J = 13,9, 10,5 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 11 Hz, 1 H), 7,00 (dt, J = 7,3, 1,5 Hz, 1 H), 7,04 - 8,17 (m, 7 H); Maseni spektar (ESI) m/z = 554,2 (M+1).
PRIMER 1
2-((3R,5R,6S)-5-(3-hlorfenil)-6-(4-hlorfenil)-1-((S)-1-(izopropilsulfonil)-3-metilbutan-2-il)-3-metil-2-oksopiperidin-3-il)sirćetna kiselina
[0268]
[0269] Naslovno jedinjenje je dobijeno iz (3S,5S,6R,8S)-8-alil-6-(3-hlorfenil)-5-(4-hlorfenil)-3-izopropil-8-metil-2,3,5,6,7,8-heksahidrooksazolo[3,2-a]piridin-4-ijum trifluormetansulfonata (referentni primer 17, korak A), procedurama sličnim onim koje su opisane u referentnom primeru 16, uz upotrebu ekvivalentne količine propan-2-tiola u koraku B.
<1>H NMR (500 MHz, metanol-d4) δ ppm 0,50 (d, J= 6,9 Hz, 3 H), 0,65 (d, J = 6,6 Hz, 3 H), 1,37 (s, 3 H), 1,41 (d, J= 6,9 Hz, 6 H), 2,05 (dd, J= 13,6, 2,8 Hz, 1 H), 2,18 (dq, J= 14, 6,9 Hz, 1 H), 2,31 (t, J = 13,7 Hz, 1 H), 2,61 (d, J = 13,5 Hz, 1 H), 2,99 (d, J = 13,7 Hz, 1 H), 3,11 (d, J = 13,7 Hz, 1 H), 3,25 - 3,29 (m, 1 H), 3,32 -3,37 (m, 1 H), 3,49 - 3,65 (m, 1H), 4,01 (dd, J = 13,7, 10,5 Hz, 1H), 5,13 (d, J = 11 Hz, 1H), 6,93 - 7,03 (m, 1 H), 7,03 - 8,23 (m, 7 H); Maseni spektar (ESI) m/z = 568,0 (M+1).
[0270] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku pokazuju inhibiciju interakcije između HDM2 i p53 u sledećim testovima.
Test homogene fluorescencije u funkciji vremena (HTRF1 test)
[0271] Standardni uslovi testiranja za in vitro HTRF test podrazumevali su ukupnu zapreminu reakcione smeše od 50 ul u crnoj Costar polipropilenskoj ploči od 384 polja u 1 x PBS puferu pH 7,4, 1 mM DTT, 0,1% BSA, 2,5 nM GST-hMDM2 (aa 1-188), 5 nM biotinilovanom-p53, 1,8 nM SA-XLent (Cisbio; Bedford, MA), 0,6 nM za anti-GST kriptat monoklonsko antitelo (Cisbio; Bedford, MA) i 200 mM KF.
Aminokiselinski ostaci 1-188 humanog MDM2 su eksprimirani kao aminiterminalni fuzioni protein glutation-S-transferaze (GST-hMDM2) u Escherichia coli. Ostaci 1-83 humanog p53 su eksprimirani kao aminoterminalni fuzioni protein AviTag™-TrxA-6xHis (biotinilovani p53) u E. coli. Svaki protein je prečišćen iz ćelijskog homogenata afinitetnom hromatografijom.
[0272] Specifično, 10 ul GST-hMDM2 inkubirano je sa 10 ul razblaženog jedinjenja (različite koncentracije, serijska razblaženja) u 10% DMSO u toku 20 min na sobnoj temperaturi.20 uL biotinilovanog p53 dodato je u smešu GST-hMDM2 jedinjenje, a potom inkubirano na sobnoj temperaturi 60 minuta. U reakcionu smešu GST-hMDM2, biotinilovanog p53 i jedinjenja dodato je 10 ul pufera za detekciju, koji se saastoji od SA-XLent, anti-GST kriptat antitela i KF, te je smeša ostavljena na sobnoj temperaturi za >4 h da bi se dostigla ravnoteža. Konačna koncentracija DMSO u reakcionoj smeši bila je 2%. Očitavanja fluorescencije u funkciji vremena vršena su na čitaču mikrotitar ploča. Procenat inhibicije računat je relativno u odnosu na nutlin-3.
[0273] Kako je snaga HDM2 inhibitora rasla, razvijen je poboljšan HTRF test (HTRF2 test). Svi uslovi ispitivanja ostali su isti kao što je prethodno opisano, uz izuzetak sledećih izmena u koncentracijama reagenasa: 0,2 nM GST-hMDM2 (1-188), 0,5 nM biotinilovani p53 (1-83), 0,18 nM SA-XLent, i 100 mM KF.
[0274] Rezultati su navedeni u tabeli koja sledi.
Tabela 1
[0275] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku pokazuju aktivaciju inhibitora kinaze zavisne od ciklina p21<WAF1/CIP1>.
p21 TaqMan® test
[0276] Inhibicija interakcije između hMDM2 i p53 dovodi do aktivacije p53 puta putem stabilizacije i akumulacije p53. p53 aktivira transkripciju mnogih gena, od kojih je jedan p21<WAF1/CIP1>. Kako bi se procenila snaga hMDM2 inhibitora, primenjena je kvantitativna reverzna transkrpicija lančanom reakcijom polimeraze (qRT-PCR ili TaqMan®) kako bi se izmerile koncentracije p21 transkripta u ćelijama tretiranim jedinjenjima u odnosu na kontrolne ćelije tretirane dimetilsulfoksidom (DMSO).
[0277] Dana 1, SJSA-1 ćelije su zasejane u ploče pri gustini od 3 x 10<4>ćelija/polju u pločama za gajenje kultura od 96 polja, u 100 ul podloge za gajenje (RPMI 1640; 10 mM HEPES; 1 mM natrijum piruvat; 1 x penicilin-streptomicin-glutamin (PSQ); i 10% fetalni goveđi serum (svi reagensi dobijeni od Invitrogen; Carlsbad, CA)). Ćelije su gajene preko noći na 37<o>C i uz 5% CO2.
[0278] Dana 2, hMDM2 inhibitori su serijski razblaženi u DMSO-u (Sigma-Aldrich; St. Louis, MO). Po 5 ul svakog od razblaženja jedinjenja dodavano je u 245 ul filtrirane podloge za test (RPMI 1640, 10 mM HEPES, 1 mM natrijum piruvat, i 1X PSQ), koja je sadržala 10% FBS. Alternativno, test je takođe sprovođen u prisustvu 10% humanog seruma ili 10% mišjeg seruma, ili u odsustvu bilo kakvog seruma. Podloga za gajenje je uklonjena iz SJSA-1 ćelija gajenih u poljima i zamenjena sa po 100 ul/polju podloge za test. Zatim je u svako polje dodato po 100 ul podloge koja sadrži razblaženi inhibitor, do krajnje zapremine od 200 ul. Titracija doze jedinjenja pokazala je konačne koncentracije koje se kreću u opsegu od 0,049 uM - 50 uM, plus DMSO kontrola. Ćelije su inkubirane u prisustvu inhibitora na 37°C i uz 5% CO2u toku 7 časova. Na kraju perioda inkubacije, podloga je razdvojena od ćelija, te su ploče čuvane na -80<o>C.
[0279] Dana 3, iz SJSA-1 ćelija tretiranih inhibitorom i DMSO-om prečišćena je ukupna RNK pomoću Qiagen BioRobot Universal radne stanice, prema RNeasy 96 BioRobot 8000 protokolu proizvođača (Qiagen; Valencia, CA), uz sledeće izuzetke: protokol je počeo dodatkom pufera za RLT lizu, preskočen je tretman DNazom, preskočen je dodatak Top Elute tečnosti a konačna eluciona zapremina promenjena je na 120 ul. Nakon što je BioRobot Universal završio proceduru ekstrakcije RNK, ploča za sakupljanje u kojoj se nalazila ukupna RNK iz svakog polja kratko je centrifugirana, kako bi se eluat skupio na dnu kiveta.
[0280] Za merenje koncentracija prisutnog p21 transkripta korišćena je qRT-PCR. Koncentracije kako p21 tako i kućepaziteljskog gena, gliceraldehid-3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH) merene su iz ukupne RNK za svako polje tretirano inhibitorom i DMSO-om u tehničkim duplikatima. Svako polje za qRT-PCR je sadržalo sledeće sastojke iz TaqMan® One-Step RT-PCR Master Mix Reagents Kit kompleta (Invitrogen): 10 ul 2X TaqMan® Universal PCR Master Mix, 0,5 ul 40X Multiscribe™ Reverse Transcriptase/RNase Inhibitor Mix, 1 ul ili p2120X TaqMan® Gene Expression Assay (Invitrogen) ili 1 ul GAPDH 20X TaqMan® Gene Expression Assay (Invitrogen), plus 5 ul ukupne RNK i 3,5 ul DEPC-H2O (EMD Chemicals;
Gibbstown, NJ). qRT-PCR reakcione smeše su ispitivane na instrumentu Applied Biosystems Prism 7900HT, pomoću postupka relativne kvantifikacije (delta delta Ct) sa sledećim uslovima ciklusa: 30 minuta na 48°C, zatim 10 minuta na 95°C, zatim 40 ciklusa po 15 sekundi na 95°C i 1 minut na 60°C. Podaci su analizirani pomoću softverskog paketa Applied Biosystems SDS2.2, uz upotrebu GAPDH kao endogene kontrole i uzoraka tretiranih DMSO-om kao kalibratora. SDS2.2 softver je izračunao relativnu kvantifikaciju (RQ) ili broj umnožaka koncentracije p21 u odnosu na DMSO kontrolu za svaki tretirani uzorak. Maksimalni (100%) umnožak indukcije p21 definisan je kao maksimum fitovane krive referentnog jedinjenja. Umnožak indukcije p21 za svaku dozu testiranog inhibitora preveden je u vrednost koja predstavlja procenat maksimuma. Krive zavisnosti odgovora od doze generisane su XLFit softverskim paketom (ID Business Solutions, Alameda, CA) kako bi se izračunale IC50tranzitne vrednosti za svaki ispitani inhibitor.

Claims (18)

  1. Patentni zahtevi 1. Farmaceutska kombinacija koja sadrži jedinjenje formule
    ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, estar ili amid, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom, razblaživačem ili nosačem, pri čemu farmaceutska kombinacija je čvrsti dozni oblik, je kombinacija povoljna za parenteralnu injekciju, ili je tečni dozni oblik za oralno davanje; i gde farmaceutski prihvatljiv estar je odabran od C1-C8alkil estara, C5-C7cikloalkil estara i arilalkil estara; a farmaceutski prihvatljiv amid je odabran od amida dobijenih od amonijaka, primarnih C1-C8alkil amina, sekundarnih C1-C8dialkil amina i sekundarnih amina u obliku neke 5- ili 6-člane heterocikloalkil grupe koja sadrži najmanje jedan atom azota.
  2. 2. Farmaceutska kombinacija prema zahtevu 1, pri čemu je čvrsti dozni oblik kapsula, tableta, prašak ili granula.
  3. 3. Farmaceutska kombinacija prema zahtevu 2, pri čemu je čvrsti dozni oblik tableta.
  4. 4. Farmaceutska kombinacija prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3, pri čemu je čvrsti dozni oblik za oralno davanje.
  5. 5. Jedinjenje formule
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, estar ili amid, pri čemu je farmaceutski prihvatljivi estar odabran od C1-C8alkil estara, C5-C7cikloalkil estara i arilalkil estara, a farmaceutski prihvatljiv amid je odabran od amida dobijenih od amonijaka, primarnih C1-C8alkil amina, sekundarnih C1-C8dialkil amina i sekundarnih amina u obliku neke 5- ili 6-člane heterocikloalkil grupe koja sadrži najmanje jedan atom azota, za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno, pri čemu postupak obuhvata davanje subjektu delotvorne dozne količine jedinjenja, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je kancer odabran od (a) karcinoma, koji obuhvataju kancer bešike, dojke, debelog creva, rektuma, bubrega, jetre, pluća, jednjaka, žučne kese, jajnika, pankreasa, želuca, grlića materice, štitne žlezde, prostate i kože; (b) hematopojetskih tumora limfoidne linije, koji obuhvataju leukemiju, akutnu limfocitičnu leukemiju, hroničnu mijelogenu leukemiju, akutnu limfoblastičnu leukemiju, limfom B ćelija, limfom T ćelija, Hodžkinov limfom, ne-Hodžkinov limfom, limfom vlasastih ćelija i Burketov limfom; (c) hematopojetskih tumora mijeloidne linije, koji obuhvataju akutne i hronične mijelogene leukemije, mijelodisplastični sindrom i promijelocitičnu leukemiju; (d) tumora mezenhimskog porekla, koji obuhvataju fibrosarkom i rabdomiosarkom, i ostale sarkome, koji obuhvataju sarkome mekih tkiva i sarkome kostiju; (e) tumora centralnog i perifernog nervnog sistema, koji obuhvataju astrocitom, neuroblastom, gliom i švanome; (f) melanom, seminom, teratokarcinom, osteosarkom, xenoderoma pigmentosum, keratoakantom, kancer tiroidnih folikularnih ćelija, Kapošijev sarkom, kancer endometrija, kancer glave i vrata, glioblastom, maligne ascite ili hematopojetske kancere.
  6. 6. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno prema zahtevu 5, pri čemu je kancer neki hematopojetski tumor limfoidne linije.
  7. 7. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno prema zahtevu 5, pri čemu je kancer sarkom mekog tkiva.
  8. 8. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno prema zahtevu 5, pri čemu kancer predstavlja kancer dojke.
  9. 9. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno prema zahtevu 5, pri čemu kancer predstavlja glioblastom.
  10. 10. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno prema zahtevu 5, pri čemu kancer predstavlja akutnu mijelogenu leukemiju (AML). 1
  11. 11. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno prema zahtevu 5, pri čemu je kancer melanom.
  12. 12. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno prema zahtevu 5, pri čemu je kancer mijelodisplastični sindrom.
  13. 13. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno prema bilo kom od patentnih zahteva 5-12, pri čemu je kancer identifikovan kao divlji tip p53 (p53WT).
  14. 14. Lek koji sadrži jedinjenje kao što je opisano u zahtevu 1, za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno.
  15. 15. Lek koji sadrži jedinjenje kao što je opisano u zahtevu 1 za upotrebu u postupku lečenja kancera kod subjekta kom je to potrebno prema zahtevu 14, pri čemu je kancer kao što je definisan u bilo kom od zahteva 5 - 13.
  16. 16. Lek za upotrebu prema zahtevu 14 ili 15, pri čemu se lek koristi u kombinaciji sa radioterapijom.
  17. 17. Farmaceutski prihvatljiv estar, amid ili prolek jedinjenja
    pri čemu farmaceutski prihvatljiv estar je odabran od C1-C8alkil estara, C5-C7cikloalkil estara i arilalkil estara, farmaceutski prihvatljiv amid je odabran od amida dobijenih od amonijaka, primarnih C1-C8alkil amina, sekundarnih C1-C8dialkil amina i sekundarnih amina u obliku neke 5- ili 6-člane heterocikloalkil grupe koja sadrži najmanje jedan atom azota; i prolek je odabran od estara obrazovanih zamenom atoma vodonika kisele grupe grupom odabranom od (C2-C12)alkanoiloksimetila, 1-(alkanoiloksi)etila koji ima od 4 do 9 atoma ugljenika, 1-metil-1-(alkanoiloksi)etila koji ima od 5 do 10 atoma ugljenika, alkoksikarboniloksimetila koji ima od 3 do 6 atoma ugljenika, 1-(alkoksikarboniloksi)etila koji ima od 4 do 7 atoma ugljenika, 1-metil-1-(alkoksikarboniloksi)etila koji ima od 5 do 8 atoma ugljenika, N-(alkoksikarbonil)aminometila koji ima od 3 do 9 atoma ugljenika, 1-(N-(alkoksikarbonil)aminometila koji ima od 4 do 10 atoma ugljenika, 3- 2 ftalidila, 4-krotonolaktonila, gama-butirolakton-4-ila, di-N,N-(C1-C2)alkilamino(C2-C3)alkila (kao što je βdimetilaminoetil), karbamoil-(C1-C2)alkila, N,N-di(C1-C2)alkilkarbamoil-(C1-C2)alkila i piperidino-, pirolidino- ili morfolino(C2-3)alkila.
  18. 18. Farmaceutska kombinacija koja sadrži estar, amid ili prolek jedinjenja prema zahtevu 17. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20190184A 2010-06-04 2011-06-03 Derivati piperidinona kao inhibitori mdm2 za lečenje kancera RS58366B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US35182710P 2010-06-04 2010-06-04
US35232210P 2010-06-07 2010-06-07
US201161452578P 2011-03-14 2011-03-14
EP15159363.9A EP2927213B1 (en) 2010-06-04 2011-06-03 Piperidinone derivatives as MDM2 inhibitors for the treatment of cancer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS58366B1 true RS58366B1 (sr) 2019-03-29

Family

ID=44504412

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20150364A RS54030B1 (sr) 2010-06-04 2011-06-03 Derivati piperidinona kao inhibitori mdm2 za lečenje kancera
RS20240056A RS65141B1 (sr) 2010-06-04 2011-06-03 Derivati piperidinona kao mdm2 inhibitori za lečenje kancera
RS20190184A RS58366B1 (sr) 2010-06-04 2011-06-03 Derivati piperidinona kao inhibitori mdm2 za lečenje kancera

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20150364A RS54030B1 (sr) 2010-06-04 2011-06-03 Derivati piperidinona kao inhibitori mdm2 za lečenje kancera
RS20240056A RS65141B1 (sr) 2010-06-04 2011-06-03 Derivati piperidinona kao mdm2 inhibitori za lečenje kancera

Country Status (41)

Country Link
US (9) US8569341B2 (sr)
EP (4) EP3483143B1 (sr)
JP (3) JP5420797B2 (sr)
KR (9) KR20210068144A (sr)
CN (2) CN103180296B (sr)
AR (1) AR082763A1 (sr)
AU (1) AU2011261263C1 (sr)
BR (2) BR112012030923B8 (sr)
CA (4) CA2799972C (sr)
CL (2) CL2012003415A1 (sr)
CO (1) CO6710897A2 (sr)
CR (1) CR20120659A (sr)
CY (1) CY1121265T1 (sr)
DK (3) DK2927213T3 (sr)
EA (1) EA023004B1 (sr)
ES (3) ES2971445T3 (sr)
FI (1) FI3483143T3 (sr)
HR (3) HRP20240055T1 (sr)
HU (2) HUE066050T2 (sr)
IL (7) IL317703A (sr)
JO (1) JO2998B1 (sr)
LT (2) LT3483143T (sr)
MA (1) MA34342B1 (sr)
ME (2) ME02150B (sr)
MX (2) MX343587B (sr)
MY (1) MY202394A (sr)
NZ (2) NZ627385A (sr)
PE (1) PE20130229A1 (sr)
PH (2) PH12012502410A1 (sr)
PL (3) PL2576510T3 (sr)
PT (3) PT2927213T (sr)
RS (3) RS54030B1 (sr)
SG (4) SG10201604817QA (sr)
SI (3) SI2927213T1 (sr)
SM (3) SMT201900099T1 (sr)
TN (1) TN2012000559A1 (sr)
TW (3) TWI519519B (sr)
UA (1) UA110481C2 (sr)
UY (2) UY33430A (sr)
WO (1) WO2011153509A1 (sr)
ZA (1) ZA201400948B (sr)

Families Citing this family (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0811643D0 (en) 2008-06-25 2008-07-30 Cancer Rec Tech Ltd New therapeutic agents
JO2998B1 (ar) * 2010-06-04 2016-09-05 Amgen Inc مشتقات بيبيريدينون كمثبطات mdm2 لعلاج السرطان
US20130267699A1 (en) 2011-06-24 2013-10-10 California Institute Of Technology Quaternary heteroatom containing compounds
US8822679B2 (en) * 2011-06-24 2014-09-02 California Institute Of Technology Quaternary heteroatom containing compounds
JP6093770B2 (ja) * 2011-09-27 2017-03-08 アムジエン・インコーポレーテツド 癌の治療のためのｍｄｍ２阻害剤としての複素環化合物
EP2771320B1 (en) 2011-10-24 2016-06-22 Endo Pharmaceuticals Inc. Cyclohexylamines
EP2847177B1 (en) 2012-05-09 2017-10-11 Boehringer Ingelheim International GmbH Methods for making oxetan-3-ylmethanamines
AR094116A1 (es) 2012-12-20 2015-07-08 Merck Sharp & Dohme Imidazopiridinas sustituidas como inhibidores de hdm2
US11407721B2 (en) 2013-02-19 2022-08-09 Amgen Inc. CIS-morpholinone and other compounds as MDM2 inhibitors for the treatment of cancer
CA2901696C (en) * 2013-02-19 2021-04-13 Amgen Inc. Cis-morpholinone and other compounds as mdm2 inhibitors for the treatment of cancer
AU2014223547B2 (en) * 2013-02-28 2017-11-16 Amgen Inc. A benzoic acid derivative MDM2 inhibitor for the treatment of cancer
JP6377123B2 (ja) * 2013-03-14 2018-08-22 アムジエン・インコーポレーテツド 癌の治療のためのｍｄｍ２阻害剤としてのヘテロアリール酸モルホリノン化合物
JOP20200296A1 (ar) 2013-06-10 2017-06-16 Amgen Inc عمليات صنع وأشكال بلورية من mdm2 مثبط
MX378969B (es) * 2013-11-11 2025-03-11 Amgen Inc Terapia de combinacion que incluye un inhibidor mdm2 y uno o mas agentes farmaceuticamente activos adicionales para el tratamiento de canceres.
WO2015082384A1 (en) * 2013-12-05 2015-06-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel combination treatment for acute myeloid leukemia (aml)
MX373045B (es) 2014-04-17 2020-05-26 Univ Michigan Regents Inhibidores de mdm2 y metodos terapeuticos que utilizan el mismo.
CN103992334A (zh) * 2014-05-29 2014-08-20 中国人民解放军第二军医大学 吲哚酮螺四氢硫代吡喃类抗肿瘤衍生物及其制备方法
US10576064B2 (en) 2014-07-03 2020-03-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Spiro[3H-indole-3,2′-pyrrolidin]-2(1H)-one compounds and derivatives as MDM2-P53 inhibitors
US20160052938A1 (en) 2014-08-21 2016-02-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Spiro[3h-indole-3,2'-pyrrolidin]-2(1h)-one compounds and derivatives as mdm2-p53 inhibitors
TW201702218A (zh) 2014-12-12 2017-01-16 美國杰克森實驗室 關於治療癌症、自體免疫疾病及神經退化性疾病之組合物及方法
US10421696B2 (en) 2014-12-18 2019-09-24 California Institute Of Technology Enantioselective synthesis of α-quaternary mannich adducts by palladium-catalyzed allylic alkylation
EP3274342B1 (en) 2015-03-27 2022-05-04 California Institute of Technology Asymmetric catalytic decarboxylative alkyl alkylation using low catalyst concentrations and a robust precatalyst
GB201517217D0 (en) 2015-09-29 2015-11-11 Astex Therapeutics Ltd And Cancer Res Technology Ltd Pharmaceutical compounds
GB201517216D0 (en) 2015-09-29 2015-11-11 Cancer Res Technology Ltd And Astex Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
HRP20210960T1 (hr) 2015-10-09 2021-09-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh Spojevi i derivati spiro[3h-indol-3,2’-pirolidin]-2(1h)-ona kao inhibitori mdm2-p53
EP3426391A4 (en) 2016-03-11 2019-08-28 California Institute of Technology COMPOSITIONS AND METHODS FOR ACYLATING LACTAMEN
KR102387316B1 (ko) * 2016-04-06 2022-04-15 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 미시간 Mdm2 단백질 분해제
RU2752677C2 (ru) * 2016-04-12 2021-07-29 Дзе Риджентс Оф Дзе Юниверсити Оф Мичиган Деструкторы белка вет
TWI808055B (zh) 2016-05-11 2023-07-11 美商滬亞生物國際有限公司 Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療
TWI794171B (zh) 2016-05-11 2023-03-01 美商滬亞生物國際有限公司 Ｈｄａｃ抑制劑與ｐｄ-ｌ１抑制劑之組合治療
PL3458101T3 (pl) 2016-05-20 2021-05-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Koniugaty PROTAC-przeciwciało i sposoby ich stosowania
GB201704966D0 (en) 2017-03-28 2017-05-10 Astex Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
GB201704965D0 (en) 2017-03-28 2017-05-10 Astex Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
US10358422B2 (en) 2017-11-01 2019-07-23 California Institute Of Technology Methods for enantioselective allylic alkylation of esters, lactones, and lactams with unactivated allylic alcohols
WO2019166629A1 (en) 2018-03-02 2019-09-06 Inflazome Limited Novel compounds
IL319432A (en) 2018-04-30 2025-05-01 Kartos Therapeutics Inc Methods of treating cancer
EA202190632A1 (ru) 2018-08-31 2021-06-16 Эмджен, Инк. Способы получения ингибитора mdm2
CN110963958B (zh) 2018-09-30 2025-10-10 上海长森药业有限公司 一种mdm2抑制剂，及其制备方法、药物组合物和应用
EP3699173A1 (en) 2018-10-18 2020-08-26 California Institute of Technology Gem-disubstituted pyrrolidines, piperazines, and diazepanes, and compositions and methods of making the same
EP3927344A4 (en) * 2018-12-11 2023-01-18 Kartos Therapeutics METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF AN EYE CONDITION
GB201919219D0 (en) 2019-12-23 2020-02-05 Otsuka Pharma Co Ltd Cancer biomarkers
WO2021147982A1 (en) * 2020-01-23 2021-07-29 Ascentage Pharma (Suzhou) Co., Ltd. Amorphous form or crystalline form of 2-indolinolinololylspironone compounds or their salts, solvent complexes
US20230143596A1 (en) 2020-02-27 2023-05-11 Syngenta Crop Protection Ag Pesticidally active diazine-bisamide compounds
CA3181715A1 (en) 2020-08-27 2022-03-03 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Biomarkers for cancer therapy using mdm2 antagonists
CN112213428A (zh) * 2020-10-13 2021-01-12 辽宁科技大学 一种超临界co2中进行非催化乙酰基化反应及其在线检测方法
GB202103080D0 (en) 2021-03-04 2021-04-21 Otsuka Pharma Co Ltd Cancer biomarkers
WO2023056069A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Angiex, Inc. Degrader-antibody conjugates and methods of using same
WO2023230059A1 (en) * 2022-05-24 2023-11-30 Newave Pharmaceutical Inc. Mdm2 degrader
US20250352535A1 (en) * 2022-06-06 2025-11-20 Kymera Therapeutics, Inc. Mdm2 degraders and uses thereof
CN115322126B (zh) * 2022-09-13 2023-04-28 九江学院 一种多芳烃类化合物及其制备方法和应用
WO2024240858A1 (en) 2023-05-23 2024-11-28 Valerio Therapeutics Protac molecules directed against dna damage repair system and uses thereof

Family Cites Families (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH436295A (de) 1961-11-13 1967-05-31 Mcneilab Inc Verfahren zur Herstellung neuer 3-Morpholinone
DE3246148A1 (de) 1982-12-14 1984-06-14 Troponwerke GmbH & Co KG, 5000 Köln Pyrazolo(4.3-b)(1.4)oxazine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
WO1995023135A1 (en) 1991-03-07 1995-08-31 Fisons Corporation Diphenyl-2-piperidinone and -2-pyrrolidinone derivatives having anti-convulsant and neuroprotective activity
US5334720A (en) 1991-03-07 1994-08-02 Fisons Corporation Diphenyl-1-(aminoalkyl)-2-piperidinone and -2-pyrrolidinone derivatives having anticonvulsant properties
DE69527072T2 (de) 1994-08-19 2003-02-13 Abbott Laboratories, Abbott Park Endothelin antagoniste
NZ330818A (en) 1996-02-13 2000-05-26 Abbott Lab Benzo-1, 3-dioxolyl- and benzofuranyl substituted pyrrolidine derivatives as endothelin antagonists
US6159990A (en) 1997-06-18 2000-12-12 Synaptic Pharmaceutical Corporation Oxazolidinones as α1A receptor antagonists
TR200101234T2 (tr) 1997-08-04 2002-06-21 Abbott Laboratories Endotelin antagonistleri.
WO1999031507A1 (en) 1997-12-18 1999-06-24 Eli Lilly And Company Peptidomimetic template-based combinatorial libraries
US6770658B2 (en) 1998-09-09 2004-08-03 Inflazyme Pharmaceuticals Ltd. Substituted γ-phenyl-Δ-lactams and uses related thereto
US7214540B2 (en) 1999-04-06 2007-05-08 Uab Research Foundation Method for screening crystallization conditions in solution crystal growth
US6630006B2 (en) 1999-06-18 2003-10-07 The Regents Of The University Of California Method for screening microcrystallizations for crystal formation
US7052545B2 (en) 2001-04-06 2006-05-30 California Institute Of Technology High throughput screening of crystallization of materials
US7195670B2 (en) 2000-06-27 2007-03-27 California Institute Of Technology High throughput screening of crystallization of materials
WO2002017912A1 (en) 2000-08-31 2002-03-07 Abbott Laboratories Endothelin antagonists
AU2002228598A1 (en) 2000-11-20 2002-06-03 Parallel Synthesis Technologies, Inc. Methods and devices for high throughput crystallization
JP2004518688A (ja) 2001-01-30 2004-06-24 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー ファクターＸａ阻害剤のスルホンアミドラクタムおよびその方法
EP1408986B1 (en) 2001-05-08 2008-09-24 Yale University Proteomimetic compounds and methods
EP1395560A1 (en) 2001-05-23 2004-03-10 Ucb, S.A. 2-oxo-piperidinyl- and 2-oxo-azepanyl alkanoic acid derivativ es for the treatment of epilepsy and other neurological disorders
DE60225719T2 (de) 2001-12-18 2009-04-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Cis-2,4,5- triphenyl-imidazoline und ihre verwendung bei der behandlung von tumoren
US6860940B2 (en) 2002-02-11 2005-03-01 The Regents Of The University Of California Automated macromolecular crystallization screening
US6916833B2 (en) * 2003-03-13 2005-07-12 Hoffmann-La Roche Inc. Substituted piperidines
US7425638B2 (en) 2003-06-17 2008-09-16 Hoffmann-La Roche Inc. Cis-imidazolines
KR20080027969A (ko) 2004-05-18 2008-03-28 에프. 호프만-라 로슈 아게 신규 ｃｉｓ-이미다졸린
US7893278B2 (en) 2004-06-17 2011-02-22 Hoffman-La Roche Inc. CIS-imidazolines
AU2005295441B2 (en) 2004-10-18 2009-04-23 Amgen, Inc. Thiadiazole compounds and methods of use
KR101139263B1 (ko) 2005-03-16 2012-05-16 에프. 호프만-라 로슈 아게 시스-２，４，５-트리아릴-이미다졸린 및 항암 약제로서의그의 용도
ME01224B (me) 2005-04-04 2013-06-20 Eisai R&D Man Co Ltd Jedinjenja dihidropiridina za liječenje neurodegenerativnih bolesti i demencije
RU2442779C2 (ru) 2005-12-01 2012-02-20 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Производные 2,4,5-трифенилимидазолина как ингибиторы взаимодействия между белками p53 и mdm2, предназначенные для применения в качестве противораковых средств
CA2637057A1 (en) * 2006-01-13 2007-07-26 Schering Corporation Diaryl piperidines as cb1 modulators
WO2007084391A2 (en) 2006-01-18 2007-07-26 Amgen Inc. Thiazole compounds as protein kinase b ( pkb) inhibitors
US20070213341A1 (en) 2006-03-13 2007-09-13 Li Chen Spiroindolinone derivatives
GB0606283D0 (en) 2006-03-29 2006-05-10 Cyclacel Ltd Process
WO2008005268A1 (en) * 2006-06-30 2008-01-10 Schering Corporation Substituted piperidines that increase p53 activity and the uses thereof
JP2009543865A (ja) 2006-07-19 2009-12-10 ユニバーシティ オブ ジョージア リサーチ ファウンデーション， インコーポレーテッド ピリジノンジケト酸：併用療法におけるｈｉｖ複製の阻害剤
WO2008021338A2 (en) 2006-08-15 2008-02-21 Wyeth Tricyclic oxazolidone derivatives useful as pr modulators
US20080045560A1 (en) 2006-08-15 2008-02-21 Wyeth Pyrrolidine and related derivatives useful as PR modulators
US8820639B2 (en) 2006-11-03 2014-09-02 Assa Abloy Ab Security feature RFID card
TW200831080A (en) 2006-12-15 2008-08-01 Irm Llc Compounds and compositions as inhibitors of cannabinoid receptor 1 activity
TW200909417A (en) * 2007-03-12 2009-03-01 Biolipox Ab Piperidinones useful in the treatment of inflammation
GB0722769D0 (en) 2007-11-21 2008-01-02 Biolipox Ab New compounds
US7705018B2 (en) 2007-03-23 2010-04-27 Amgen Inc. Substituted quinolines and their uses in treatment of inflammatory and related conditions
US7919498B2 (en) 2007-03-23 2011-04-05 Amgen Inc. Substituted pyrazolo[3,4-d]pyrimidines as PI3K inhibitors
AU2008231304B2 (en) 2007-03-23 2011-05-12 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
CA2682483A1 (en) * 2007-03-29 2008-10-09 Novartis Ag 3-imidazolyl-indoles for the treatment of proliferative diseases
US7625895B2 (en) 2007-04-12 2009-12-01 Hoffmann-Le Roche Inc. Diphenyl-dihydro-imidazopyridinones
WO2008130614A2 (en) 2007-04-20 2008-10-30 University Of Pittsburg-Of The Commonwealth System Of Higher Education Selective and dual-action p53/mdm2/mdm4 antagonists
US7834179B2 (en) * 2007-05-23 2010-11-16 Hoffmann-La Roche Inc. Spiroindolinone derivatives
WO2009004430A1 (en) 2007-06-29 2009-01-08 Pfizer Inc. N-benzyl oxazolidinones and related heterocycleic compounds as potentiators of glutamate receptors
CA2692720A1 (en) 2007-07-09 2009-01-15 Astrazeneca Ab Morpholino pyrimidine derivatives used in diseases linked to mtor kinase and/or pi3k
US7897619B2 (en) 2007-07-17 2011-03-01 Amgen Inc. Heterocyclic modulators of PKB
AU2008276512A1 (en) 2007-07-17 2009-01-22 Amgen Inc. Thiadiazole modulators of PKB
TW200911798A (en) 2007-08-02 2009-03-16 Amgen Inc PI3 kinase modulators and methods of use
EP2325180A1 (en) 2007-10-09 2011-05-25 F. Hoffmann-La Roche AG Chiral CIS-imidazolines
US7776875B2 (en) 2007-12-19 2010-08-17 Hoffman-La Roche Inc. Spiroindolinone derivatives
US8841312B2 (en) 2007-12-19 2014-09-23 Amgen Inc. Fused pyridine, pyrimidine and triazine compounds as cell cycle inhibitors
CA2710194C (en) 2007-12-19 2014-04-22 Amgen Inc. Inhibitors of p13 kinase
US20100256191A1 (en) 2007-12-26 2010-10-07 Eisai R&D Management Co., Ltd. Ampa receptor antagonists and zonisamide for epilepsy
AU2009225984A1 (en) 2008-03-21 2009-09-24 Chlorion Pharma, Inc. Substituted pyrrolidine and piperidine compounds, derivatives thereof, and methods for treating pain
JP5530422B2 (ja) 2008-04-07 2014-06-25 アムジエン・インコーポレーテツド 細胞周期阻害薬としてのｇｅｍ−二置換およびスピロ環式アミノピリジン／ピリミジン
US8415376B2 (en) 2008-05-30 2013-04-09 Amgen Inc. Inhibitors of PI3 kinase
GB0811643D0 (en) 2008-06-25 2008-07-30 Cancer Rec Tech Ltd New therapeutic agents
TW201011009A (en) * 2008-09-15 2010-03-16 Priaxon Ag Novel pyrrolidin-2-ones
KR101380013B1 (ko) 2008-09-18 2014-04-10 에프. 호프만-라 로슈 아게 치환 피롤리딘-2-카르복사미드
US20110263647A1 (en) 2009-01-15 2011-10-27 Amgen Inc. Fluoroisoquinoline substituted thiazole compounds and methods of use
WO2010096314A1 (en) 2009-02-18 2010-08-26 Amgen Inc. INDOLE/BENZIMIDAZOLE COMPOUNDS AS mTOR KINASE INHIBITORS
MX2011009796A (es) 2009-03-20 2011-12-14 Amgen Inc Inhibidores de la cinasa pi3.
US8076482B2 (en) 2009-04-23 2011-12-13 Hoffmann-La Roche Inc. 3,3′-spiroindolinone derivatives
UY32582A (es) 2009-04-28 2010-11-30 Amgen Inc Inhibidores de fosfoinositida 3 cinasa y/u objetivo mamífero
EP2430013B1 (en) 2009-05-13 2014-10-15 Amgen Inc. Heteroaryl compounds as pikk inhibitors
MX2011013667A (es) 2009-06-25 2012-03-06 Amgen Inc Compuestos heterociclicos y sus usos.
EA201270013A1 (ru) 2009-06-25 2012-06-29 Амген Инк. Гетероциклические соединения и их применение
WO2010151791A1 (en) 2009-06-25 2010-12-29 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
WO2010151735A2 (en) 2009-06-25 2010-12-29 Amgen Inc. Heterocyclic compounds and their uses
EA201200321A1 (ru) 2009-08-26 2012-09-28 Новартис Аг Тетразамещенные гетероарильные соединения и их применение в качестве модуляторов mdm2 и/или mdm4
US8088815B2 (en) 2009-12-02 2012-01-03 Hoffman-La Roche Inc. Spiroindolinone pyrrolidines
US8440693B2 (en) 2009-12-22 2013-05-14 Novartis Ag Substituted isoquinolinones and quinazolinones
JO2998B1 (ar) 2010-06-04 2016-09-05 Amgen Inc مشتقات بيبيريدينون كمثبطات mdm2 لعلاج السرطان
CN102153557B (zh) 2011-01-21 2013-03-20 中国科学院上海有机化学研究所 具有乙二胺骨架的多手性中心氮杂环卡宾前体盐、合成方法及用途
JP6093770B2 (ja) 2011-09-27 2017-03-08 アムジエン・インコーポレーテツド 癌の治療のためのｍｄｍ２阻害剤としての複素環化合物
CA2901696C (en) 2013-02-19 2021-04-13 Amgen Inc. Cis-morpholinone and other compounds as mdm2 inhibitors for the treatment of cancer
AU2014223547B2 (en) 2013-02-28 2017-11-16 Amgen Inc. A benzoic acid derivative MDM2 inhibitor for the treatment of cancer
JP6377123B2 (ja) 2013-03-14 2018-08-22 アムジエン・インコーポレーテツド 癌の治療のためのｍｄｍ２阻害剤としてのヘテロアリール酸モルホリノン化合物
JOP20200296A1 (ar) 2013-06-10 2017-06-16 Amgen Inc عمليات صنع وأشكال بلورية من mdm2 مثبط

Also Published As

Publication number Publication date
KR20180059574A (ko) 2018-06-04
TN2012000559A1 (en) 2014-04-01
LT3483143T (lt) 2024-02-12
ES2540992T3 (es) 2015-07-15
CA2799972A1 (en) 2011-12-08
JP2013530958A (ja) 2013-08-01
EP4092012A1 (en) 2022-11-23
HRP20190273T1 (hr) 2019-04-05
AU2011261263A1 (en) 2012-12-13
IL265278B (en) 2021-01-31
US20240300892A1 (en) 2024-09-12
US20210179560A1 (en) 2021-06-17
ZA201400948B (en) 2015-06-24
SMT202400024T1 (it) 2024-03-13
PL3483143T3 (pl) 2024-03-25
KR20200063255A (ko) 2020-06-04
US20140315895A1 (en) 2014-10-23
EA201291356A1 (ru) 2013-06-28
US20170144971A1 (en) 2017-05-25
DK2927213T3 (en) 2019-03-11
MY202394A (en) 2024-04-25
PT2576510E (pt) 2015-07-01
IL233411A0 (en) 2014-08-31
PL2576510T3 (pl) 2015-10-30
MX337178B (es) 2016-02-15
CR20120659A (es) 2013-03-11
CA3060703C (en) 2022-08-02
IL295076B1 (en) 2025-01-01
PT3483143T (pt) 2024-01-23
US20220169611A1 (en) 2022-06-02
TW201211020A (en) 2012-03-16
US9296736B2 (en) 2016-03-29
AU2011261263B2 (en) 2013-11-21
RS65141B1 (sr) 2024-02-29
JP2016147891A (ja) 2016-08-18
CN105153014B (zh) 2021-06-01
IL277579B (en) 2022-09-01
RS54030B1 (sr) 2015-10-30
SMT201900099T1 (it) 2019-02-28
SI2576510T1 (sl) 2015-06-30
MX2012014044A (es) 2013-05-22
TWI433844B (zh) 2014-04-11
UA110481C2 (en) 2016-01-12
EP2927213B1 (en) 2018-11-14
TW201434816A (zh) 2014-09-16
AR082763A1 (es) 2013-01-09
IL277579A (en) 2020-11-30
IL295076A (en) 2022-09-01
JO2998B1 (ar) 2016-09-05
ES2717306T3 (es) 2019-06-20
HRP20240055T1 (hr) 2024-03-29
US9593129B2 (en) 2017-03-14
EP3483143B1 (en) 2023-10-18
PL2927213T3 (pl) 2019-06-28
MA34342B1 (fr) 2013-06-01
KR101456801B1 (ko) 2014-10-31
EP3483143A8 (en) 2020-04-15
BR112012030923B1 (pt) 2021-12-28
HK1182711A1 (en) 2013-12-06
CN103180296A (zh) 2013-06-26
HK1215707A1 (en) 2016-09-09
UY33430A (es) 2011-12-30
SI3483143T1 (sl) 2024-03-29
EP2576510B1 (en) 2015-04-29
CA3060703A1 (en) 2011-12-08
SG10202006923RA (en) 2020-08-28
JP6077695B2 (ja) 2017-02-08
WO2011153509A1 (en) 2011-12-08
MX343587B (es) 2016-11-10
US20110319378A1 (en) 2011-12-29
UY39338A (es) 2021-08-31
ES2971445T3 (es) 2024-06-05
CL2016001733A1 (es) 2017-05-12
PH12012502410A1 (en) 2013-02-18
KR20250044461A (ko) 2025-03-31
TWI519519B (zh) 2016-02-01
KR20140032929A (ko) 2014-03-17
EP3483143A1 (en) 2019-05-15
EP2576510A1 (en) 2013-04-10
JP2014062093A (ja) 2014-04-10
BR112012030923A2 (pt) 2016-11-08
PT2927213T (pt) 2019-02-21
NZ627385A (en) 2016-02-26
AU2011261263C1 (en) 2014-05-29
HUE041488T2 (hu) 2019-05-28
IL317703A (en) 2025-02-01
KR20190058694A (ko) 2019-05-29
PE20130229A1 (es) 2013-03-22
CA3157177A1 (en) 2011-12-08
US20190062276A1 (en) 2019-02-28
CN105153014A (zh) 2015-12-16
IL233411A (en) 2017-08-31
US20160137667A1 (en) 2016-05-19
DK3483143T3 (da) 2024-01-15
NZ604074A (en) 2014-11-28
SG186147A1 (en) 2013-01-30
IL295076B2 (en) 2025-05-01
IL265278A (en) 2019-05-30
CO6710897A2 (es) 2013-07-15
IL246296A0 (en) 2016-07-31
CY1121265T1 (el) 2020-05-29
BR112012030923B8 (pt) 2022-01-25
KR101863407B1 (ko) 2018-06-29
DK2576510T3 (en) 2015-06-29
HRP20150704T1 (hr) 2015-08-14
JP5420797B2 (ja) 2014-02-19
SI2927213T1 (sl) 2019-04-30
US8569341B2 (en) 2013-10-29
SG10202112488SA (en) 2021-12-30
CA3157177C (en) 2023-11-07
CN103180296B (zh) 2015-05-27
EA023004B1 (ru) 2016-04-29
IL223201A0 (en) 2013-02-03
BR122020013151B1 (pt) 2022-02-22
CL2012003415A1 (es) 2013-08-09
FI3483143T3 (fi) 2024-01-15
IL223201A (en) 2015-05-31
SMT201500168B (it) 2015-09-07
TW201609649A (zh) 2016-03-16
KR20230156431A (ko) 2023-11-14
ME03322B (me) 2019-10-20
US20140011796A1 (en) 2014-01-09
CA3207676A1 (en) 2011-12-08
HUE066050T2 (hu) 2024-07-28
JP5908446B2 (ja) 2016-04-26
HK1186462A1 (en) 2014-03-14
KR20210068144A (ko) 2021-06-08
ME02150B (me) 2015-10-20
KR20140091009A (ko) 2014-07-18
KR20220083817A (ko) 2022-06-20
EP2927213A1 (en) 2015-10-07
LT2927213T (lt) 2019-04-25
SG10201604817QA (en) 2016-08-30
PH12016501048A1 (en) 2017-05-29
CA2799972C (en) 2020-08-25
TWI582076B (zh) 2017-05-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS58366B1 (sr) Derivati piperidinona kao inhibitori mdm2 za lečenje kancera
JP6266659B2 (ja) 癌の治療のための安息香酸誘導体ｍｄｍ２阻害剤
JP6502479B2 (ja) Ｍｃｌ−１タンパク質を阻害する化合物
JP6417338B2 (ja) 癌の治療のためのｍｄｍ２阻害剤としてのシス−モルホリノン及び他の化合物
HK1215707B (en) Piperidinone derivatives as mdm2 inhibitors for the treatment of cancer
HK1182711B (en) Piperidinone derivatives as mdm2 inhibitors for the treatment of cancer