RO120603B1

RO120603B1 - Compoziţie conţinând microparticule de substanţe insolubile în apă şi procedeu de preparare

Info

Publication number: RO120603B1
Application number: RO99-00195A
Authority: RO
Inventors: Indu Parikh; Ulagaraj Selvaraj
Original assignee: Research Triangle Pharmaceuticals Ltd.
Priority date: 1996-08-22
Filing date: 1997-03-28
Publication date: 2006-05-30
Also published as: KR20000035808A; EP0925061A1; KR100542816B1; DE69734988D1; US6228399B1; AU2587197A; HU226608B1; ES2252780T3; PL331715A1; EP0925061B1; HUP9903537A2; CA2263102A1; CN1228021A; NO325197B1; US5922355A; IL128632A0; CZ59699A3; CA2263102C; AU719085B2; HK1021140A1

Abstract

Invenţia se referă la o compoziţie care conţine microparticule de compus insolubil în apă sau slab solubil, utilizabil industrial, având suprafeţe pe care sunt adsorbite sau aderate un fosfolipid şi un agent tensioactiv, obţinută prin utilizarea unui consum de energie la un amestec de particule de compus, fosfolipid şi agent tensioactiv, astfel încât mărimea medie ponderată volumic a microparticulelor este cu cel puţin 50% mai mică decât a particulelor compusului obţinut fără agent tensioactiv, utilizând acelaşi consum de energie, şi la un procedeu de preparare care cuprinde reducerea dimensiunii particulelor compusului prin sonicare, omogenizare, măcinare, microfluidizare, precipitare sau recristalizare, în prezenţa unui fosfolipid şi a unui agent tensioactiv.

Description

Invenția se referă la o compoziție care conține microparticule și la un procedeu de preparare a microparticulelor stabile, de mărime submicronică sau micronică, ale unui compus insolubil sau slab solubil în apă, utilizabil industrial.

în industria farmaceutică și alte industrii având la bază biologia, există necesitatea critică de a formula substanțe insolubile sau foarte puțin solubile în apă pentru preparate administrate pe cale orală, injectabilă, ca inhalant și pe cale oftalmică. Compușii insolubili în apă sunt aceia care prezintă solubilitate scăzută în apă, ceea ce înseamnă < 5 mg/ml la pH fiziologic (6,5...7,4). De preferință, solubilitatea lor în apă este < 1 mg/ml, în special, preferabil < 0,1 mg/ml. Este de dorit ca medicamentul să fie stabil în apă sub formă de dispersie; se poate prefera o formă liofilizată sau solidă uscată prin pulverizare.

Așa cum se utilizează în continuare, micro se referă la o particulă având diametrul de ordinul nanometri până la micrometri.

Microparticule, așa cum se utilizează în continuare, se referă la particule solide cu forme neregulate, nesferice sau sferice. Formulările conținând aceste micropaticule, prezintă o serie de avantaje specifice comparativ cu particulele medicamentoase neformulate, nemicronizate, care includ biodisponibilitatea orală îmbunătățită, a medicamentelor care sunt puțin absorbite de tractul gastrointestinal, realizarea de formulări injectabile care sunt utilizabile în mod curent numai în formă orală de dozare, formulări injectabile mai puțin toxice, care sunt în mod curent preparate cu solvenți organici, omologarea susținută de medicamente injectabile intramuscular, care sunt curent administrate prin injectare zilnică sau infuzie constantă și prepararea de formulări de medicamente pentru inhalări sau oftalmice, care nu pot fi formulate pe altă cale pentru uz nazal sau ocular.

Tehnologia curentă de realizare a medicamentelor insolubile, așa cum este descrisă în brevetele US 5091188, US 5091187 și US 4725442, se concentrează pe (a) fie acoperirea particulelor mici de medicamente cu fosfolipide naturale sau sintetice, fie (b) dizolvarea medicamentului într-un suport lipofil adecvat și formarea unei emulsii stabilizate cu fosfolipide naturale sau semisintetice. Unul din dezavantajele acestor formulări constă în aceea că anumite particule de medicamente în suspensie tind să crească în timp din cauza fenomenului de dizolvare și reprecipitare cunoscut sub numele de maturarea Oswald.

Compoziția conform invenției care conține microparticule de compus insolubil în apă sau slab solubil, utilizabil industrial, având suprafețe pe care sunt absorbite sau aderate un fosfolipid și un agent tensioactiv, obținută prin utilizarea unui consum de energie la un amestec de particule de compus, fosfolipid și agent tensioactiv, astfel încât mărimea medie, ponderată volumic, a microparticulelor, este cu cel puțin 50% mai mică decât a particulelor compusului obținut fără agent tensioactiv, utilizând același consum de energie, iar procedeul cuprinde reducerea dimensiunii particulelor compusului prin sonicare, omogenizare, măcinare, microfluidizare, precipitare sau recristalizare, în prezența unui fosfolipid și a unui agent tensioactiv.

Compoziția de microparticule stabile, conform invenției, prezintă următoarele avantaje:

- în timpul reducerii dimensiunii sau precipitării particulelor, este necesar ca atât fosfolipidele, cât și agenții tensioactivi să fie prezenți în același timp;

- fosfolipidele și unul sau mai mulți agenți tensioactivi transformă suprafețele lipofilice în suprafețe hidrofilice cu stabilitate sterică mărită;

- concentrațiile de agenți de modificare a suprafeței facilitează formarea de particule submicronice prin stabilizarea particulelor.

RO 120603 Β1

Compoziția conform prezentei invenții include combinații de fosfolipide naturale sau 1 sintetice și unul sau mai mulți agenți tensioactivi neionici, anionici sau cationici, care acoperă sau aderă la suprafața particulelor de compus insolubil în apă. Combinația fosfolipidelor și 3 surfactanților permite formarea și stabilizarea particulelor de compus cu dimensiune submicronică sau micronică, pe cale hidrofilă, lipofilă și prin interacțiuni electrostatice, și de aceea 5 nu permite agregarea sau flocularea respectivelor particule.

Prezenta invenție se concentrează asupra preparării particulelor cu dimensiuni sub- 7 micronice, utilizând o combinație de agenți de modificare a suprafeței cu o fosfolipidă și asupra modului în care creșterea dimensiunii particulei, și ca urmare, stabilitatea ei la depozitare 9 este controlată prin adăugarea în formulare a unei combinații de agent(i) de modificare a suprafaței cu o fosfolipidă. Utilizarea unui agent de modificare a suprafeței sau unei combi- 11 nații de agenți de modificare a suprafeței în adiție la o fosfolipidă este caracterizată prin capacitatea acestuia de a avea ca rezultat valori ale dimensiunii medii a particulei ponderate 13 volumic care sunt (i) cu cel puțin 50% și, de preferință, aproximativ 50...90% mai mici decât acelea obținute utilizând doar o fosfolipidă fără agentul tensioactiv, cu același consum ener- 15 getic și (ii) formează compoziții rezistente la creșterea dimensională a particulei în timpul depozitării, în timp ce rezistența dimensiunii particulei în timpul depozitării a reprezentat un 17 obiectiv al prezentei invenții, s-a putut constata cu surprindere o reducere semnificativă a dimensiunii particulei odată cu adăugarea agentului tensioactiv. 19

Pentru a se obține avantajele prezentei invenții, este necesar ca fosfolipidă și agentul tensioactiv să fie ambii prezenți în timpul reducerii dimensiunii sau precipitării particulei. Deși 21 nu s-a dorit o dependență de o anumită teorie particulară, se pare că, în general, acești agenți de modificare a suprafeței, adică fosfolipidele și unul sau mai mulți agenți tensioactivi, 23 se adsorb la suprafețele particulelor de medicamente și (a) transformă suprafețele lipofilice în suprafețe hidrofilice cu împiedicare/stabilitate sferică mărită, și (b) posibil modifică 25 potențialul zeta al suprafețelor cu stabilizare mărită la respingerea sarcinilor. Concentrațiile de agenți de modificare a suprafeței, utilizați în procedeul descris în prezenta invenție, sunt 27 în mod normal deasupra concentrațiilor critice micelice (CMC) și ca urmare facilitează formarea de particule submicronice prin stabilizarea particulelor. 29

Fosfolipidele și agentul (agenții) de modificare a suprafeței se adsorb pe suprafețele particulelor de medicamente în cantitate suficientă pentru a întârzia creșterea particulei de 31 medicament, a reduce dimensiunea medie a particulei de la 5 la 100 pm la particule cu dimensiune submicronică și micronică printr-una sau prin combinații de metode cunoscute 33 în stadiul tehnicii, cum arfi ultrasonarea, omogenizarea, măcinarea, microfluidizarea, precipitarea sau recristalizarea sau precipitarea dintr-un fluid supercritic și menținerea particulelor 35 la dimensiuni submicronice sau micronice, în timpul depozitării ulterioare, într-o formă de dozare de suspensie sau solidă. 37

Concentrația fosfolipidei sau modificatorului de suprafață în forma de dozare de suspensie sau solidă este cuprinsă în intervalul 0,1 la 50%, de preferință 0,2 la 20% și, în 39 special 0,5 la 10%. Formulările preparate conform invenției pot fi liofilizate ca pulberi, care pot fi resuspendate sau introduse în capsule sau transformate în granule sau tablete prin 41 adăugare de lianți și alți excipienți cunoscuți în practica tabletării.

în cadrul compușilor insolubili sau puțin solubili, utilizați industrial, sunt incluși corn- 43 puși utili din punct de vedere biologic, agenți de contrast, compuși farmaceutic utili și, în particular, medicamente pentru uz uman și veterinar. Compuși insolubili în apă sunt aceia care 45 au stabilitate redusă în apă, adică sub 5 mg/ml la un pH fiziologic de 6,5 la 7,4, deși solubilitatea în apă poate fi mai mică decât 1 mg/ml și chiar sub 0,1 mg/ml. 47

RO 120603 Β1

Exemple de medicamente preferate, insolubile în apă includ agenți imunosupresivi și imunoactivi, agenți antivirali și antifangici, agenți antineoplastici, analgezici și antiinflamatori, antibiotice, antiepileptice, anestetice, hipnotice, sedative, agenți antipsihotici, agenți neuroleptici, antidepresivi, anxiolitici, agenți anticonvulsivi, antagoniști, agenți de blocare a neuronilor, agenți anticolinergici și colinomimetici, agenți antimuscarinici și muscarinici, antiadrenergici și antaritmici, agenți antihipertensivi, agenți antineoplastici, hormoni și nutrienți. O descriere detaliată a acestora și a altor medicamente adecvate poate fi consultată în Remington's Pharmaceutical Sciences, Ediția 18, 1990, Mack Publishing Co. Philadelphia, PA.

Fosfolipida poate fi orice fosfolipidă naturală sau sintetică, de exemplu, fosfatidilcolină, fosfatidiletanolamină, fosfatidilserină, fosfatidilinozitol, fosfatidilglicerol, acid fosfatidic, lizofosfolipide, fosfolipide din ou sau soia, sau combinații ale acestora. Fosfolipidele pot fi salinizate sau nesalinizate, hidrogenate sau parțial hidrogenate, natural semisintetice sau sintetice.

Exemple pentru cel de al doilea agent adecvat de modificare a suprafeței includ: (a) agenți tensioactivi naturali cum sunt cazeină, gelatină, tragacant, ceruri, rășini enterice, parafină, accacia, esteri colesterolici și trigliceride, (b) agenți tensioactivi neionici cum sunt eteri polioxietilenici de alcool gras, esteri sorbitanici de acid gras, esteri polioxietilenici de acid gras, esteri sorbitanici, monostearat de glicerol, glicoli polietilenici, cetii alcool, cetostearil alcool, stearil alcool, poloxameri, polaxamine, metilceluloză, hidroxiceluloză, hidroxi propilceluloză, hidroxi propilmetilceluloză, celuloză necristalină, alcool polivinilic, polivinilpirolidonă, și fosfolipide sintetice, (c) agenți tensioactivi anionici ca laurat de potasiu, stearat de trietanolamină, laurii sulfat de sodiu, alchil polioxietilen sulfați, alginat de sodiu, dioctil sulfosuccinat de sodiu, fosfolipide încărcate negativ (fosfatidil glicerol, fosfatidil inosit, fosfatidilserină, acid fosfatidic și sărurile acestora), și gliceril esteri încărcați negativ, carboximetilceluloză de sodiu și carboximetilceluloză de calciu, (d) agenți tensioactivi cationici cum ar fi compuși cuaternari de amoniu, clorură de benzalconiu, bromură de cetiltrimetilamoniu, chitosani și clorură de laurildimetilbenzilamoniu, (e) argile coloidale cum ar fi bentonită și veegum. O descriere detaliată a acestor agenți tensioactivi poate fi consultată în Remington's Pharmaceutical Science and Theory and Practice of Industrial Pharmacy, Lachman et al, 1986.

Mai specific, exemple pentru cel de al doilea agent de modificare a suprafeței includ unul sau o combinație dintre următorii compuși: polaxomeri cum ar fi Pluronic™ F68, F108 și F127, care sunt bloc copolimeri de oxid de etilenă și oxid de propilenă produși de BASF, și poloxamine cum ar fi Tetronic™908 (T908), care este un bloc copolimer tetrafuncțional, derivat din adiția secvențială a oxidului de etilenă și oxidului de propilenă la etilendiamină, produs de BASF, Triton™X-200, care este un alchil arii polieter sulfonat, produs de Rohm și Haas, Tween 20,40, 60 și 80, care sunt esteri polioxietilen sorbitani de acid gras, produși de ICI Speciality Chemicals, Carbowax™3550 și 934, care sunt polietilen glicoli, produși de Union Carbide, hidroxipropilmetilceluloză, sarea de sodiu a dimiristoil fosfatidilglicerolului, dodecil sulfat de sodiu, deoxicholat de sodiu și bromură de cetiltrimetilamoniu.

Se crede că unele dintre funcțiile celui de al doilea agent (agenți) de modificare a suprafeței, menționați în prezenta invenție este de a împiedica procesul de maturare Oswald și ca urmare de menținere a dimensiunii particulei, creștere a stabilității la depozitare, reducere a sedimentării și scădere a creșterii particulei prin liofilizare și reconstituire; de a adera sau acoperi complet suprafețele particulelor insolubile în apă ale medicamentelor și ca urmare de a modifica interfețele dintre particule și lichid în formulările rezultate; de creștere a compatibilității interfeței între particulele de medicament insolubile în apă și lichid; și posibil de a le orienta preferențial pe acestea cu porțiunea hidrofilă lipită de soluția apoasă și porțiunea lipofilă adsorbită puternic la suprafețele insolubile în apă ale particulelor medicamentelor.

RO 120603 Β1

Variații considerabile în ceea ce privește natura și tipurile de fosfolipide și, în special, 1 de agent sau agenți activi de suprafață sunt de așteptat în funcție de medicamentul sau agentul activ selectat, deoarece proprietățile superficiale ale acestor particule mici sunt dife- 3 rite. Cel mai avantajos agent activ de suprafață pentru medicamentul insolubil va fi pus în evidență urmărind testele empirice pentru a identifica agentul tensioactiv sau sistemul/combi- 5 nația de agent tensioactiv care are ca rezultat dimensiunea redusă a particulei și stabilitatea dimensională a particulei în timp, la depozitare. 7

Se pot utiliza diverse procedee pentru a produce aceste particule cu dimensiuni stabile submicronice sau micronice, constând în amestecarea substanței insolubile cu fosfo- 9 lipidă și precipitarea dintr-un amestec dizolvat, a substanței, fosfolipidei și agentului activ de suprafață, utilizând alți agenți activi de suprafață, urmată de ultrasonare, măcinare, omoge- 11 nizare, microfluidizare și precipitare a antisolventului și solventului. Se pot adăuga manitol și alți agenți pentru a regla formularea finală la izotonicitate, precum și un aditiv de stabilizare 13 în timpul uscării. Dacă nu se specifică altfel, toate părțile și procentele din descriere sunt date în greutate pe unitatea de volum (w/v), în care volumul de la numitor reprezintă volumul 15 total al sistemului. Diametrele dimensiunilor sunt date în milimetri (mm = 10'³ m), micrometri (pm = 10^ m), nanometri (nm = 10'⁹ m) sau unități Angstrom (= 0,1 nm). Volumele sunt date 17 în litri (I), mililitri (ml = 10'³1) și microlitri (pl = 10^-61). Diluțiile sunt date în volum. Toate temperaturile sunt date în grade Celsius. Compozițiile invenției pot conține sau pot consta din 19 materialele stabilite, iar procedeul poate conține sau poate consta din etapele stabilite pentru aceste materiale. Următoarele exemple explică și ilustrează în continuare invenția. 21

Exemplul 1. Se prepară, după cum se descrie în continuare, microparticule de ciclosporină, un medicament imunosupresiv. Compoziția și concentrația de excipienți ai formulării 23 ciclosporinei sub formă de microparticule este dată mai jos:

Ciclosporină 50 mg/ml

Fosfatidilcolină din ou 100 mg/ml27

Manitol 55 mg/ml

Tween 80 10 mg/ml29

Apă distilată qs la 100%

Volum total 20 ml31

Ciclosporină, cu o dimensiune medie a particulei de 5...100 pm, și manitolul au fost 33 procurate de la Sigma, fosfatidilcolină din ou a fost produsă de Pfanstiehl, Tween 80 a fost procurat de la ICI. Componentele de mai sus se introduc într-un vas de 30 ml și se 35 preamestecă cu un bioomogenizator acționat manual (Honeywell DR 4200 model GP), timp de 1 ...5 min. în timpul omogenizării, se adaugă în preamestec NaOH diluat, pentru a ajusta 37 pH-ul de la 3,1 la 7 ± 0,5. Preamestecul se plasează într-un recipient cu manta de apă (capacitate 50 ml) prin care circulă apă termostatată la 4°C, pentru a controla temperatura 39 formulării. Preamestecul este supus la o forță mare de forfecare într-un aparat de ultrasonare cu sondă (Fisher, model 550 Sonic Dismembrator) cu o sondă cu diametrul de de 0,5 inch. 41

S-au utilizat pulsații ultrasonice de 10 s, la intervale de 10 s, la o valoare stabilită a puterii de 5. în timpul ultrasonării, temperatura formulării a fost 18 ± 2°C. pH-ul, în timpul ultrasonării 43 a fost ajustat la 7 ± 0,5 cu NaOH diluat. Timpul de ultrasonare utilizat pentru a prepara microparticule de ciclosporină a fost în general de 10,5 h sau mai mic. Formularea de 45 microparticule de ciclosporină a fost introdusă în fiole de 20 ml și depozitată la 4 și 25°C pentru studii ulterioare de stabilitate. 47

Distribuția dimensiunii particulelor în suspensie a fost analizată cu un analizor de dimensiune a particulelor NICOMP model 370. Acest instrument utilizează spectroscopia de 49 corelare fotonică pentru dimensionarea particulelor în intervalul submicronic. Un volum mic

RO 120603 Β1 de suspensie s-a diluat cu apă și a fost introdus în celula analizorului de dimensiune a particulei. Determinarea dimensiunii particulei, bazată pe determinarea dimensiunii particulei, ponderate volumic și ponderate numeric, a suspensiei, reprezentată ca o distribuție Gaussiană prin programul NICOMP 370, a dus la obținerea unor valori ale dimensiunii medii a particulelor, care sunt date mai jos în tabelul I.

Tabelul I

Stabilitatea dimensiunii particulei de ciclosporină microparticulată, ponderată volumic și numeric

Timp de depozitare	Depozitare la 4’C	Depozitare la 25’C
Dimensiunea medie a particulei (nm)	Dimensiunea medie a particulei (nm)
Zile	Ponderată volumic	Ponderată numeric	Ponderată volumic	Ponderată numeric
0	361	63	361	63
7	337	69	423	67
51	358	76	455	66

Aproximativ 20 pl de suspensie proaspăt preparată se plasează pe o placă curată, se acoperă cu o sticlă curată și se examinează sub un microscop Olympus BH2 cu mărire de 1000 ori. Pentru estimarea dimensiunii particulei, s-a utilizat un ocular cu rețea. Majoritatea particulelor din suspensie au avut dimensiunea de 0,3...0,5 pm.

în continuare, examinarea microscopică a suspensiei a confirmat existența particulelor de medicamente cu dimensiune micronică și submicronică neaglomerată sau floculată, care prezintă mișcare Browniană.

Exemplul 2. în scopul comparării (nu conform invenției), utilizând doar o fosfolipidă, s-a preparat ciclosporină - microparticule cu lecitină (fără agentul de modificare a suprafeței, Tween 80), utilizând aceeași procedură ca în exemplul 1. Suspensia a fost depozitată în fiole din sticlă de 20 ml, pentru studii de stabilitate la depozitare. Valorile dimensiunii medii a particulelor, ponderate volumic și numeric, ale suspensiei stocate la 4 și 25°C, sunt date mai jos. Rezultatele din tabelul II ilustrează că prezența lecitinei singure (fără prezența Tween 80) nu determină reducerea dimensiunii particulelor și îmbunătățirea stabilității la depozitare descrisă în exemplul 1.

Tabelul II

Stabilitatea dimensiunii particulei de ciclosporină microparticulată, ponderată volumic

Timp de depozitare	Depozitare la 4°C	Depozitare la 25°C
Dimensiunea medie a particulei (nm)	Dimensiunea medie a particulei (nm)
Zile	Ponderată volumic	Ponderată numeric	Ponderată volumic	Ponderată numeric
0	704	91	704	91
1	1472	503	2230	755
6	1740	416	2290	874

RO 120603 Β1

Exemplul 3. în scopul comparării (nu conform invenției), utilizând doar un agent de 1 modificare a suprafeței, s-a preparat ciclosporină microparticulată doar cu Tween 80 (fără o fosfolipidă, fosfatidilcolină din ou), utilizând aceeași procedură ca în exemplul 1. Suspensia 3 a fost stocată în fiole de sticlă de 20 ml. Rezultatele din tabelul III indică faptul că prezența doar a Tween 80 (fără prezența fosfolipidei) nu determină reducerea dimensională a parti- 5 culei ca în exemplul 1.

Tabelul III 7

Stabilitatea dimensiunii particulei de ciclosporină microparticulată, ponderată volumic și numeric 9

Dimensiunea medie a particulei (nm)
Zi	Ponderată volumic	Ponderată numeric
0	521	67

Exemplul 4. Următoarele formulări de Doconasol microparticulat au fost preparate prin procedeul conform invenției cu Tween 80, Tween 20, fosfațidilcolină din ou și/sau Fosfo- 15 lipon 90H ca agenți de modificare a suprafeței. Doconasol poate fi procurat de la firma Sigma. Formulările au fost preparate conform procedurilor din exemplul 1. Compozițiile și 17 concentrația excipienților din formulările de microparticule sunt ilustrate mai jos.

Doconasol microparticule (Exemplul 4.1 comparativ)

Doconasol

Fosfatidilcolină din ou

Manitol

Apă distilată qs Volum total

Doconasol microparticule (Exemplul 4.2)

Doconasol

Fosfatidilcolină din ou

Manitol

Tween 80

Apă distilată

Volum total

Doconasol microparticule (Exemplul 4.3)

Doconasol

Fosfatidilcolină din ou

Manitol

Tween 20

Apă distilată

Volum total

Doconasol microparticule (Exemplul 4.4)

Doconasol

Fosfolipon 90H

Manitol

Tween 80

Apă distilată

Volum total

20 mg/ml	21
50 mg/ml
55 mg/ml	23
până la 100%
20 ml	25
20 mg/ml	27
50 mg/ml
55 mg/ml	29
10 mg/ml
qs până la 100%	31
20 ml
	33
20 mg/ml
50 mg/ml	35
55 mg/ml
10 mg/ml	37
qs până la 100%
20 ml	39
20 mg/ml	41
30 mg/ml
55 mg/ml	43
10 mg/ml
qs până la 100%	45
20 ml

RO 120603 Β1

Doconasol microparticule (Exemplul 4.5 comparativ)

Doconasol 20 mg/ml

Manitol 55 mg/ml

Tween 80 10 mg/ml

Apă distilată qs până la 100%

Volum total 20 ml

Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate volumic și numeric, ale suspensiei, au fost de 286 nm și, respectiv, 98 nm.

Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate volumic, ale suspensiei de mai sus, depozitată la 4'C, sunt ilustrate în tabelul IV.

Tabelul IV

Stabilitatea dimensională a dimensiunii particulei, ponderate volumic și numeric, de Doconasol microparticulat, depozitat la 4 ‘C

Timp de depozitare	(Exemplul 4.1)	(Exemplul 4.2)
Dimensiunea medie a particulei (nm)	Dimensiunea medie a particulei (nm)
Zile	Ponderate volumic	Ponderate numeric	Ponderate volumic	Ponderate numeric
0	688	—	112	55
30	ND	ND	156	81

Timp de depozitare	(Exemplul 4.3)	(Exemplul 4.4)
Dimensiunei	medie a particulei (nm)	Dimensiunec	medie a particulei (nm)
Zile	Ponderate volumic	Ponderate numeric	Ponderate volumic	Ponderate numeric
0	129	61	90	35
30	184	99	127	39

ND = nedeterminat

Rezultatele de mai sus ilustrează existența unor particule mult mai mici, produse conform prezentei invenții, cu prezența unui agent tensioactiv adăugat la fosfolipidă și că aceste particule își păstrează dimensiunea în timp, fără o creștere dimensională semnificativă.

Exemplul 5. Următoarele șapte formulări de microparticule RTP-4055 (un medicament antiviral) au fost preparate cu combinații de Tween 80, Tetronic 908, Pluronic F-68, fosfatidilcolină de ou, și/sau fosfolipon 90H, ca agenți de modificare a suprafeței. Detalii ale metodei de ultrasonare sunt similare celor prezentate în exemplul 1. Compozițiile și concentrația excipienților formulărilor de microparticule sunt prezentate în continuare.

RTP-4055 microparticulat (Exemplul 5.1 comparativ)

RTP-4055 Fosfatidilcolină din ou Apă distilată

Volum total mg/ml mg/ml qs până la 100% ml

RO 120603 Β1

Dimensiunea medie a particulei, ponderate volumic, a suspensiei, a fost de 3195 nm.	1
RTP-4055 microparticulat (Exemplul 5.2)		3
RTP-4055	50 mg/ml
Fosfatidilcolină din ou	50 mg/ml	5
Manitol	55 mg/ml
Pluronic F-68	5 mg/ml	7
Apă distilată	qs până la 100%
Volum total	25 ml	9
Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate numeric și volumic, ale suspensiei,	11
au fost de 672 nm, respectiv, 76 nm.
		13
RTP-4055 microparticulat (Exemplul 5.3)
RTP-4055	50 mg/ml	15
Fosfatidilcolină din ou	50 mg/ml
Manitol	55 mg/ml	17
Tetronic 908	5 mg/ml
Apă distilată	qs până la 100%	19

Volum total 25 ml

Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate numeric și volumic, ale suspensiei,

au fost de 436 nm, respectiv, 59 nm.		23
RTP-4055 microparticulat (Exemplul 5.4 comparai	tiv)	25
RTP-4055	50 mg/ml
Fosfolipon 90H	30 mg/ml	27
Apă distilată	qs până la 100%
Volum total	25 ml	29
Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate numeric și volumic, ale suspensiei,	31
au fost de 1117 nm, respectiv, 108 nm.
		33
RTP-4055 microparticulat (Exemplul 5.5)
RTP-4055	50 mg/ml	35
Fosfolipon 90H	30 mg/ml
Manitol	55 mg/ml	37
Dimiristoilfosfatidil colină (DMPG)	3 mg/ml
Tween 80	10 mg/ml	39
Apă distilată	qs până la 100%
Volum total	25 ml	41
Dimensiunea medie a particulei, ponderate volumic,	a suspensiei, a fost de 236 nm.	43
Dimensiunea particulei suspensiei, depozitate la 4°C, timp	de 1 săptămână și 1 lună, este
de 328 și, respectiv, 397 nm, ceea ce indică stabilitatea su	spensiei.	45

RO 120603 Β1

RTP-4055 microparticulat (Exemplul 5.6) RTP-4055 Fosfolipon 90H Manitol Tween 80 Apă distilată Volum total

50 mg/ml 30 mg/ml 55 mg/ml 10 mg/ml qs până la 100% 25 ml

Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate numeric și volumic, ale suspensiei, au fost de 382 nm, respectiv, 59 nm, în cadrul limitelor de eroare, nu există o variație a dimensiunii medii a particulei, după stocarea timp de o săptămână la 4’C.

RTP-4055 microparticulat (Exemplul 5.7 comparativ)

RTP-4055 50 mg/ml

Manitol 55 mg/ml

Tween 80 10 mg/ml

Apă distilată qs până la 100%

Volum total 25 ml

Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate numeric și volumic, ale suspensiei, au fost de 545 nm, respectiv, 75 nm, în interiorul limitelor de eroare și nu a existat o variație a dimensiunii medii a particulei, după o săptămână de depozitare la 4°C.

Exemplul 6. Următoarele șase formulări de Piroxicam microparticulat au fost preparate în combinație cu Tween 80, Tetronic 908, Pluronic F-68 și/sau fosfatidilcolină din ou, ca agenți de modificare a suprafeței. Piroxicam a fost procurat de la firma Cipla. Detaliile metodei de ultrasonare sunt similare cu cele prezentate în exemplul 1. Compozițiile și concentrația excipienților formulării microparticulate sunt ilustrate mai jos.

Piroxicam microparticule (Exemplul 6.1)

Piroxicam

Fosfatidilcolină din ou Manitol

Tween 80

Tetronic 908

Apă distilată

Volum total mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml qs până la 100% (greut/vol) ml

Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate volumic și numeric, ale suspensiei, sunt de 674 nm și, respectiv, 72 nm.

Piroxicam microparticule (Exemplul 6.2)

Piroxicam

Fosfatidilcolină din ou

Manitol

Tetronic 908

Apă distilată

Volum total mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml qs până la 100% (greut/vol) ml

RO 120603 Β1

Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate volumic și numeric, ale suspensiei, 1 sunt de 455 nm și, respectiv, 58 nm.

Piroxicam microparticule (Exemplul 6.3)

Piroxicam	67 mg/ml	5
Fosfatidilcolină din ou	67 mg/ml
Manitol	67 mg/ml	7
Pluronic F-68	5 mg/ml
Apă distilată	qs până la 100% (greut/vol)	9
Volum total	15 ml	4 4
Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate volumic și numeric, ale suspensiei,	11
sunt de 564 nm și, respectiv, 68 nm.		13
Piroxicam microparticule (Exemplul 6.4)		15
Piroxicam	67 mg/ml
Fosfatidilcolină din ou	67 mg/ml	17
Manitol	67 mg/ml
Tween 80	5 mg/ml	19
Bromură de cetiltrimetilamoniu	10 mg/ml
Apă distilată	qs până la 100% (greut/vol)	21
Volum total	15 ml
		23
Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate volumic și numeric, ale suspensiei,
sunt de 479 nm și, respectiv, 80 nm.		25

Piroxicam microparticule (Exemplul 6.5)		27
Piroxicam	67 mg/ml
Fosfatidilcolină din ou	67 mg/ml	29
Manitol	67 mg/ml
Bromură de cetiltrimetilamoniu	10 mg/ml	31
Apă distilată	qs până la 100% (greut/vol)
Volum total	15 ml	33

Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate volumic și numeric, ale suspensiei, 35 sunt de 670 nm și, respectiv, 128 nm.

Piroxicam microparticule (Exemplul 6.6 comparativ)

Piroxicam	67 mg/ml	39
Manitol	67 mg/ml
Tween 80	5 mg/ml	41
Tetronic 908	5 mg/ml
Apă distilată	qs până la 100% (greut/vol)	43
Volum total	15 ml
		45
Valorile dimensiunii medii a particulei, ponderate volumic și numeric, ale suspensiei,
î 1184 nm și, respectiv, 385 nm.		47

Claims

Revendicări

1) amestecarea particulelor unui compus utilizabil industrial, insolubil în apă sau slab solubil, cu un fosfolipid și un agent tensioactiv și 17

1) amestecarea particulelor unui compus utilizabil industrial, insolubil în apă sau slab solubil, cu un fosfolipid și un agent tensioactiv și

1. Compoziție care conține microparticule de compus insolubil în apă sau slab solubil, utilizabil industrial, având suprafețe pe care sunt absorbite sau aderate un fosfolipid și un agent tensioactiv, obținută prin utilizarea unui consum de energie la un amestec de particule de compus, fosfolipid și agent tensioactiv, astfel încât mărimea medie, ponderată volumic, a microparticulelor, este cu cel puțin 50% mai mică decât a particulelor compusului obținut fără agent tensioactiv, utilizând același consum de energie.

2) utilizarea unui consum de energie asupra amestecului, suficientă pentru a se obține microparticule ale compusului, cu o mărime medie, a particulei ponderate volumic, 19 care este cu cel puțin 50% mai mică decât a particulelor obținute în absența agentului tensioactiv, la utilizarea aceluiași consum de energie, în care agentul tensioactiv este ales 21 din grupul format dintr-un sorbitan ester, un ester gras al sorbitanului, un ester al acidului gras cu polioxietilen sorbitan, un bloc copolimer al etilen oxidului cu propilen oxid, un bloc 23 copolimer tetrafuncțional, derivat prin adiția secvențială a etilen oxidului și propilen oxidului la etilendiamină, un alchil arii polieter sulfonat, polietilen glicol, dodecilsulfat de sodiu, 25 deoxicolat de sodiu, un colesterol ester, monostearat de glicerol, alcool cetilic, alcool cetostearilic, alcool stearilic, ester al unui acid gras polioxietilenic, un alcool polivinilic, 27 polivinilpirolidonă, laurat de potasiu, stearat de trietanolamină, un sulfat de alchil polioxietilenă, dioctil sodiu sulfosuccinat, un gliceril ester încărcat negativ, un surfactant 29 cationic pe bază de amoniu cuaternar, clorură de benzalconiu, bromură de cetiltrimetil amoniu, un chitosan, clorură de laurildimetilbenzilamoniu și combinații ale acestora. 31

2) aplicarea unei energii suficiente amestecului, pentru a se obține microparticule ale compusului cu o mărime medie, ponderată volumic, a particulei, care este cu cel puțin 50% mai mică decât a particulelor obținute în absența agentului tensioactiv, la același consum de energie.

2. Compoziție conform revendicării 1, care este o compoziție farmaceutică.

3. Compoziție farmaceutică, conform revendicării 2, în care compoziția se formulează pentru administrare orală, inhalare, oculară, nazală sau injectabilă.

4. Compoziție conform revendicării 2 sau 3, în care compoziția se formulează sub formă injectabilă pentru administrare intravenoasă, intraarterială, intramusculară, intradermală, subcutanată, intraarticulară, cerebrospinală, epidurală, intracostală, intraperitoneală, intratumorală, intravezicală, intralezionară sau subconjuctivală.

5. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările 1 la 4, în care compoziția este sub formă de suspensie uscată, care poate fi resuspendată în mediu apos sau neapos.

6. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările 1 la 4, în care compoziția se formulează sub formă de suspensie, pulbere uscată prin pulverizare, granule pulverulente liofilizate sau tablete.

7. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările precedente, în care compusul insolubil în apă sau parțial solubil este un compus utilizabil biologic sau un agent de contrast.

8. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările precedente, în care agentul tensioactiv este un ester al acidului gras cu polioxietilensorbitan, un bloc copolimer al oxidului de etilenă cu propilen oxid, un bloc copolimer tetrafuncțional, derivat prin adiția secvențială a etilen oxidului și propilen oxidului la etilendiamină, un alchil arii polieter sulfonat, polietilen glicol, dodecilsulfat de sodiu, deoxicolat de sodiu, bromură de cetiltrimetilamoniu sau combinații ale acestora.

9. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările precedente, în care fosfolipidul este de origine vegetală sau din ou, semisintetic sau sintetic.

10. Procedeu de preparare a microparticulelor stabile, de mărime submicronică sau micronică, ale unui compus utilizabil industrial, insolubil în apă sau parțial solubil, pe ale cărui suprafețe sunt absorbite sau aderate un fosfolipid și un agent tensioactiv, care procedeu cuprinde reducerea dimensiunii particulelor compusului prin sonicare, omogenizare, măcinare, microfluidizare, precipitare sau recristalizare, în prezența unui fosfolipid și a unui agent tensioactiv.

11. Procedeu de preparare a microparticulelor unui compus utilizabil industrial, insolubil în apă sau slab solubil, cu suprafețe pe care sunt absorbite sau aderate un fosfolipid și un agent tensioactiv, care procedeu cuprinde:

12. Procedeu conform revendicării 10 sau 11, în care fosfolipidul este de origine vegetală sau din ou, semisintetic sau sintetic.

RO 120603 Β1

13. Procedeu conform cu oricare dintre revendicările 10 la 12, în care agentul tensio- 1 activ este un ester al unui acid gras cu polioxietilensorbitan, un bloc copolimer al oxidului de etilenă cu propilen oxid, un bloc copolimer tetrafuncțional, derivat prin adiția secvențială a 3 etilen oxidului și propilen oxidului la etilendiamină, un alchil arii polieter sulfonat, polietilen glicol, dodecilsulfat de sodiu, deoxicolat de sodiu, bromură de cetiltrimetilamoniu sau orice 5 combinație a acestora.

14. Procedeu conform cu oricare dintre revendicările 10 la 13, în care agentul tensio- 7 activ este prezent într-o concentrație peste concentrația micelară critică.

15. Procedeu conform cu oricare dintre revendicările 10 la 14, în care compusul este 9 un compus utilizabil biologic sau un agent de contrast.

16. Procedeu conform cu oricare dintre revendicările 10 la 15, care procedeu include 11 formularea particulelor într-o compoziție.

17. Compoziție conform revendicării 7, în care compusul utilizabil biologic este ales 13 din grupul format dintr-un agent imunosupresor, un agent imunoactiv, un agent antiviral, un agent antifungic, un agent antineoplazic, un agent analgezic, un agent antiinflamator, un 15 antibiotic, un agent antiepileptic, un anestezic, un hipnotic, un sedativ, un agent antipsihotic, un agent neuroleptic, un antidepresiv, un anxiolitic, un agent anticonvulsiv, un antagonist, 17 un agent neuroblocant, un agent anticolinergic, un agent colinomimetic, un agent antimuscarinic, un agent muscarinic, un antiadrenergic, un antiaritmic, un agent antihipertensiv, un hor- 19 mon, un agent nutritiv și orice combinații ale acestora.

18. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările 1 ...9, în care fosfolipidul este 21 hidrogenat parțial sau total.

19. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările 1 ...9 și 18, în care fosfolipidul 23 este în formă liberă sau de sare.

20. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările 9,18 și 19, în care fosfolipidul 25 este o fosfatidilcolină, fosfolipid din soia, sare de sodiu a dimiristoil fosfatidilglicerolului, o fosfatidiletanolamină, o fosfatidilserină, un acid fosfatidic, un lisofosfolipid, un fosfotidilinozitol 27 sau orice combinație a acestora.

21. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările 1...7, 9, 17...20, în care 29 agentul tensioactiv este un colesterol ester, un ester gras al sorbitanului, un sorbitan ester, monostearat de glicerol, alcool cetilic, alcool cetostearilic, alcool stearilic, ester al unui acid 31 gras polioxietilenic, un alcool polivinilic, polivinilpirolidonă, laurat de potasiu, stearat de trietanolamină, un sulfat de alchil polioxietilenă, dioctil sodiu sulfosuccinat, un gliceril ester 33 cu sarcină negativă, un surfactant cationic pe bază de amoniu cuaternar, clorură de benzalconiu, bromură de cetiltrimetilamoniu, un chitosan, clorură de laurildimetil- 35 benzilamoniu sau orice combinație a acestora.

22. Procedeu conform revendicării 12, în care fosfolipidul este hidrogenat parțial sau 37 total.

23. Procedeu conform revendicărilor 12 sau 22, în care fosfolipidul este în formă 39 liberă sau de sare.

24. Procedeu conform cu oricare dintre revendicările 12,22 și 23, în care fosfolipidul 41 este ales din grupul format din fosfatidilcolină, fosfolipid din soia, sare de sodiu a dimiristoil fosfatidilglicerolului, o fosfatidiletanolamină, o fosfatidilserină, un acid fosfatidic, un 43 lisofosfolipid, un fosfotidilinozitol sau orice combinație a acestora.

25. Procedeu conform revendicării 15, în care compusul utilizabil biologic este un 45 agent imunosupresor, un agent imunoactiv, un agent antiviral, un agent antifungic, un agent antineoplazic, un agent analgezic, un agent antiinflamator, un antibiotic, un agent antiepi- 47 leptic, un anestezic, un hipnotic, un sedativ, un agent antipsihotic, un agent neuroleptic, un

RO 120603 Β1 antidepresiv, un anxiolitic, un agent anticonvulsiv, un antagonist, un agent neuroblocant, un agent anticolinergic, un agent colinomimetic, un agent antimuscarinic, un agent muscarinic, un antiadrenergic, un antiaritmic, un agent antihipertensiv, un hormon, un agent nutritiv și orice combinații ale acestora.

26. Procedeu conform cu oricare dintre revendicările 14...16 și 22...25, în care agentul tensioactiv este un colesterol ester, un estergras al sorbitanului, un sorbitan ester, monostearat de glicerol, alcool cetilic, alcool cetostearilic, alcool stearilic, un ester al unui acid gras polioxietilenic, un alcool polivinilic, polivinilpirolidonă, lauratde potasiu, stearat de trietanolamină, un sulfat de alchil polioxietilenă, dioctil sodiu sulfosuccinat, un gliceril ester cu sarcină negativă, un surfactant cationic pe bază de amoniu cuaternar, clorură de benzalconiu, bromură de cetiltrimetilamoniu, un chitosan, clorură de laurildimetilbenzilamoniu sau orice combinație a acestora.

27. Procedeu conform revendicării 10, în care procedeul cuprinde reducerea mărimii particulelor compusului prin precipitare cu antisolvent/solvent.

28. Procedeu conform revendicării 10, în care procedeul cuprinde reducerea mărimii particulelor compusului prin precipitare din fluide supercritice.

29. Procedeu conform revendicării 10, care procedeu implică precipitarea și microfluidizarea compusului în prezență de fosfolipid și agent tensioactiv.

30. Procedeu conform revendicării 29, care procedeu implică precipitarea particulelor de compus în prezența fosfolipidului și agentului tensioactiv, urmată de microfluidizarea particulelor precipitate, fosfolipid și agent tensioactiv.

31. Procedeu conform revendicării 30, în care compusul insolubil în apă sau slab solubil este un agent antifungic.

32. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările 1 ...9 și 17...21, în care compoziția conține o combinație de fosfolipide.

33. Microparticule solide, ale unui compus insolubil în apă sau slab solubil, având suprafețele pe care s-a absorbit sau aderat un fosfolipid și un agent tensioactiv, în care microparticulele se obțin prin utilizarea unui consum de energie la un amestec de particule ale compusului, fosfolipidului și agentului tensioactiv, astfel că mărimea medie a particulelor, ponderată volumic, este cu cel puțin 50% mai mică decât a particulelor compusului obținut fără agent tensioactiv, la același consum de energie.

34. Compoziție care conține microparticulele conform revendicării 33.

35. Compoziție conform revendicării 34, în care microparticulele sunt neagregate.

36. Compoziție conform revendicării 34 sau 35, în care microparticulele sunt nefloculate.

37. Compoziție conform cu oricare dintre revendicările 34...36, în care compoziția este o compoziție acceptabilă farmaceutic și compusul insolubil în apă sau slab solubil este un agent antifungic.

38. Compoziție care conține microparticule ale unui compus insolubil în apă sau slab solubil, utilizabil industrial, având suprafețe pe care sunt aderate sau absorbite un agent tensioactiv și un fosfolipid, care microparticule se obțin prin utilizarea unui consum de energie asupra unui amestec de particule ale compusului, fosfolipidului și agentului tensioactiv, astfel încât mărimea medie, ponderată volumic, a microparticulelor, este cu cel puțin 50% mai mică decât a particulelor compusului obținut fără agent tensioactiv, la utilizarea aceluiași consum de energie, în care agentul tensioactiv este ales din grupul format dintr-un sorbitan ester, un ester gras al sorbitanului, un ester al acidului gras cu polioxietilen sorbitan, un bloc copolimer al etilen oxidului cu propilen oxid, un bloc copolimer tetrafuncțional, derivat prin adiția secvențială a etilen oxidului și propilen oxidului la etilendiamină, un alchil arii polieter sultanat, polietilen glicol, dodecilsulfat de sodiu, deoxicolat de sodiu, un colesterol ester, monostearat de glicerol, alcool cetilic, alcool cetostearilic, alcool stearilic, ester al unui acid gras polioxietilenic, un alcool polivinilic, polivinilpirolidonă, laurat de potasiu, stearat de trietanolamină, un sulfat de alchil polioxietilenă, dioctil sodiu sulfosuccinat, un gliceril ester

RO 120603 Β1 încărcat negativ, un agent tensioactiv cationic pe bază de amoniu cuaternar, clorură de 1 benzalconiu, bromură de cetiltrimetil amoniu, un chitosan, clorură de laurildimetilbenzil amoniu și combinații ale acestora.

39. Compoziție conform revendicării 38, în care compoziția este o compoziție acceptabilă farmaceutic și compusul insolubil în apă sau slab solubil este un agent imunosupresor, 5 un agent imunoactiv, un agent antiviral, un agent antifungic, un agent antineoplazic, un agent analgezic, un agent antiinflamator, un antibiotic, un agent antiepileptic, un anestezic, un hip- 7 notic, un sedativ, un agent antipsihotic, un agent neuroleptic, un antidepresiv, un anxiolitic, un agent anticonvulsiv, un antagonist, un agent neuroblocant, un agent anticolinergic, un 9 agent colinomimetic, un agent antimuscarinic, un agent muscarinic, un antiadrenergic, un antiaritmic, un agent antihipertensiv, un hormon, un agent nutritiv sau orice combinație a 11 acestora.

40. Procedeu de preparare a microparticulelor unui compus insolubil în apă sau slab 13 solubil, utilizabil industrial, având suprafețe pe care sunt aderate sau absorbite un fosfolipid și un surfactant, care procedeu cuprinde: 15

41. Procedeu conform revendicării 40, care procedeu include reducerea mărimii particulelor compusului prin sonicare, omogenizare, măcinare, microfluidizare, precipitare sau 33 recristalizare, în prezența fosfolipidului și agentului tensioactiv.

42. Procedeu conform revendicării 41, în care compusul insolubil în apă sau slab 35 solubil este un agent imunosupresor, un agent imunoactiv, un agent antiviral, un agent antifungic, un agent antineoplazic, un agent analgezic, un agent antiinflamator, un antibiotic, un 37 agent antiepileptic, un anestezic, un hipnotic, un sedativ, un agent antipsihotic, un agent neuroleptic, un antidepresiv, un anxiolitic, un agent anticonvulsiv, un antagonist, un agent 39 neuroblocant, un agent anticolinergic, un agent colinomimetic, un agent antimuscarinic, un agent muscarinic, un antiadrenergic, un antiaritmic, un agent antihipertensiv, un hormon, un 41 agent nutritiv sau orice combinație a acestora.