RO119413B1 - Derivaţi izosteri ai substratului aspartat proteazei, sărurile lor, compoziţii farmaceutice şi utilizare - Google Patents

Derivaţi izosteri ai substratului aspartat proteazei, sărurile lor, compoziţii farmaceutice şi utilizare Download PDF

Info

Publication number
RO119413B1
RO119413B1 RO95-01805A RO9501805A RO119413B1 RO 119413 B1 RO119413 B1 RO 119413B1 RO 9501805 A RO9501805 A RO 9501805A RO 119413 B1 RO119413 B1 RO 119413B1
Authority
RO
Romania
Prior art keywords
phenyl
amino
formula
boc
amide
Prior art date
Application number
RO95-01805A
Other languages
English (en)
Inventor
Guido Bold
Hans Georg Capraro
Alexander Fassler
Marc Lang
Shripad Subray Bhagwat
Satish Chandra Khanna
Janis Karlis Lazdins
Jurgen Mestan
Original Assignee
Ciba-Geigy Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ciba-Geigy Ag filed Critical Ciba-Geigy Ag
Publication of RO119413B1 publication Critical patent/RO119413B1/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/12—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/49—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C255/58—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing cyano groups and singly-bound nitrogen atoms, not being further bound to other hetero atoms, bound to the carbon skeleton
    • C07C255/60—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing cyano groups and singly-bound nitrogen atoms, not being further bound to other hetero atoms, bound to the carbon skeleton at least one of the singly-bound nitrogen atoms being acylated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/15—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C311/16—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom
    • C07C311/19—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/30—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/37—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups having the sulfur atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C311/38—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups having the sulfur atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring having sulfur atoms of sulfonamide groups and amino groups bound to carbon atoms of six-membered rings of the same carbon skeleton
    • C07C311/39—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups having the sulfur atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring having sulfur atoms of sulfonamide groups and amino groups bound to carbon atoms of six-membered rings of the same carbon skeleton having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom
    • C07C311/42—Sulfonamides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups having the sulfur atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring having sulfur atoms of sulfonamide groups and amino groups bound to carbon atoms of six-membered rings of the same carbon skeleton having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/44—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C317/48—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C317/50—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups at least one of the nitrogen atoms being part of any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C07D207/273—2-Pyrrolidones with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to other ring carbon atoms
    • C07D207/277—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D207/28—2-Pyrrolidone-5- carboxylic acids; Functional derivatives thereof, e.g. esters, nitriles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/42—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/40—Oxygen atoms
    • C07D211/44—Oxygen atoms attached in position 4
    • C07D211/46—Oxygen atoms attached in position 4 having a hydrogen atom as the second substituent in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D211/62—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/28—Radicals substituted by singly-bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D213/30—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/81—Amides; Imides
    • C07D213/82—Amides; Imides in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/38—Nitrogen atoms
    • C07D277/40—Unsubstituted amino or imino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/14—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D295/155—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with the ring nitrogen atoms and the carbon atoms with three bonds to hetero atoms separated by carbocyclic rings or by carbon chains interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/20—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D309/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D309/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D309/10—Oxygen atoms
    • C07D309/12—Oxygen atoms only hydrogen atoms and one oxygen atom directly attached to ring carbon atoms, e.g. tetrahydropyranyl ethers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/22—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4
    • C07D311/24—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D317/48—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring
    • C07D317/50—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to atoms of the carbocyclic ring
    • C07D317/60—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/10—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being six-membered, e.g. tetraline

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

Invenţia se referă la derivaţi izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I:şi la sărurile acestora, la compoziţii farmaceutice care cuprind aceşti derivaţi sau sărurile lor, şi la utilizarea acestora. Derivaţii izosteri ai aspartat proteazei sunt singuri sau în combinaţie cu alţi compuşi eficienţi împotriva retroviruşilor. ŕ

Description

Invenția se referă la derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei și la sărurile acestora, la compoziții farmaceutice care cuprind acești derivați sau sărurile lor și la utilizarea acestora, singuri sau în combinație cu alți compuși eficienți împotriva retrovirușilor.
Conform estimărilor Organizației Mondiale a Sănătății (OMS), mai mult de 15 milioane de persoane sunt în prezent infectate cu HIV-1 sau HIV-2.
Inhibitori ai revers transcriptazei, o enzimă care convertește ARN retroviral în ADN, cum ar fi 3'-azido-3‘-deoxitimidina (AZT) sau dideoxiinozina (DDI), fosfonoformiat trisodic de amoniu, 21-tungsto-9-antimoniat, l-p-D-ribofuranoxil-I^Atriazol-S-carboxiamida și dideoxicitidina și, de asemenea, adriamicina au fost utilizați, în principal, până acum, la tratarea bolilor cauzate de retroviruși, cum ar fi SIDA.
S-a încercat, de asemenea, să se introducă receptorul celulelor T4, care este prezent la om, în anumite celule ale sistemului imunitar și care este responsabil de atașarea particulelor virale infecțioase și introducerea lor în acele celule și, în consecință, este responsabil de capacitatea lor de a infecta, în organism, de exemplu o moleculă recombinantă sau un fragment molecular. Aceasta va avea efect asupra titrării situsurilor de legare ale virusului, astfel încât virionii să utilizeze, de asemenea, alte mijloace pentru a preveni penetrarea virusului prin membrana celulară, astfel ca polimonoacetat.
în plus, s-au raportat primele experimente clinice în care un izoster hidroxi-etilenic, Ntert-butildecahidro-2-(2(R)-hidroxi-4-fenil-3(S)-((N-2-chinolilcarbonil-L-asparaginil)amino)butil)(4aS,8aS)-izochinolin-3(S)-carboxamida (Ro 31-8959) este utilizat ca inhibitor al proteazei HIV. Acest compus a avut, în experimente, un efect inhibitor asupra proteazei HIV in vitroși a suprimat replicarea virală în linii celulare experimentale, realizând și nivelurile folositoare în sânge, la rozătoare, chiar cu administrare orală (a se vedea Roberts, N.A., et al., Biochemical Soc. Transactions20, p. 513-516 (1992)); nivelurile în sânge semnificative au fost realizate și la om (a se vedea, de exemplu, GJ. Muirehead et al., Brit. J. Clin. Pharmacol. 34, P-170-171 (1992)). Un așa-numit „marker surogat (titrarea limfocitelor CD4 din sânge, a căror scădere la pacienții netratați reprezintă o măsură a dezvoltării bolii SIDA) a demonstrat primele efecte pozitive la pacienții bolnavi de SIDA (a se vedea “Roche statement on HIV Proteinase Inhibitor (Ro 318959) European Trials Resultd’, care a fost distribuit participanților la cel de-al 9-lea Congres Internațional asupra SIDA, de la Berlin, 7-11 iunie 1993).
în virușii HIV-1 și HIV-2, care provoacă SIDA, și în alți retroviruși, de exemplu virușii corespunzători lui HIV la pisici (FIV) și la maimuțe (SIV), maturarea proteolitică a proteinelor virale, de exemplu cea a proteinelor din nucleul virusului este realizată de o aspartat protează, precum proteaza HIV. Nu pot ti produse particule virale infecțioase fără această maturare proteolitică. Pe baza rolului central jucat de aspartat proteaza menționată, cum ar fi protează HIV-1 sau protează HIV-2, în maturarea virală și pe baza rezultatelor experimentale, în exemplele obținute cu culturi de celule infectate, se admite că prevenirea eficientă in vivo a etapei de maturare care este favorizată de această protează, va preveni asamblarea virionilor maturi. în consecință, inhibitori adecvați pot fi utilizați în scop terapeutic.
Sunt cunoscuți inhibitori ai revers transcriptazei, în particular ai aspartat proteazelor de HIV, cum ar fi HIV-1 și HIV-2, în special analogi de nucleoside, în particular 3'-azido-3'deoxitimidina (zidovudina = ®RETROVIR, Burroughs-Wellcome), 2',3'-dideoxicitidina (zalcitabina = ®HIVID, Hoffman-LaRoche), 2',3'-dideoxinosina (didanosina = ®VIDEX, Bristol-Myers-Squibb) sau (2R,cis)-4-amino-1 -(2-hidroximetil-1,3-oxatiolan-5-il)-( 1 H)-pirimidin-2-ona (lamividina, Glaxo) sau analogi nenucleosidici, cum ar fi 11 -ciclopropil-5,11 -dihidro-4-metil-(6H)-dipirido[3,2b;2',3'-e]-[1,4]diazepin-6-ona.
Astfel sunt cunoscuți: ___________
a) unul dintre inhibitorii indicați în EP 0 346 847 (publicat la 20.12.1989) și EP 0 432 695 (publicat la 10.06.1991; corespunde lui US 5,196,438, publicat la 23.03.1993),în particular
RO 119413 Β1 compusul cu indicativul Ro 31-8959 (saquinavir; Hoffman-LaRoche) din formula
(saquinavir)
b) unul din inhibitorii indicați în EP 0 541 168 (publicați la 12.05.1993); corespunde lui
US 5,413,999), în particular compusul cu indicativul L-735,524 (indinavir = ®CRIXIVAN; Merck 60 & Co., Inc.) cu formula:
c) unul dintre inhibitorii indicați în EP 0 486 948 (publicat la 27.05.1992) corespunde lui US 5 354 866, în particular compusul cu indicativul ABT-538 (Abbott) cu formula:
d) compusul cu indicativul KVX-478 (sau VX-478sau 141W94; Glaxo Wellcome, Vertex
O'
RO 119413 Β1
f) compusul cu indicativul KI-272 (Nippon Mining) cu formula:
jf j KNI-272
YS
g) compusul cu indicativul U-96988 (Upjohn) cu formula:
(U-96988)
h) compusul cu indicativul BILA-2011BS (palinavir; Boehringer-lngelheim) cu formula:
(palinavir)
Este cunoscut procedeul de condensare pentru prepararea unei legături amide. O astfel de legătură poate fi obținută, de exemplu, așa cum este descrisă în lucrări de specialitate, cum ar fi “Houben-Weil, Methoden der organischen Chemie, 4m Edition, Volume 15/11 (1974), Volume IX (1955), Volume E 11 (1985), Georg Verlag, Stuttgart, The Peptides (E. Gross and J. Meienhofer, editors), Volumes 1 and 2, Academic Press, London and New York, 1979/1980, sau M. Bodanski, Principles of Peptide Synthesis, Springer Verlag, Berlin 1984.
Condensarea se poate efectua, de asemenea, în conformitate cu tehnica cunoscută drept sinteză în faza solidă, care este descrisă în Angew. Chem. 97, 801-812 (1985), Naturwissenschaften 71, 252-258 (1984) sau în R.A. Houghten, Proc. Natl. Acad. Sci., SUA 82, 5131-5135 (1985).
Este cunoscut procedeul de utilizare a grupărilor de protecție pentru grupările funcționale din materiile prime a căror reacție trebuie evitată, în particular carboxil, amino, hidroxil și grupările mercapto; aceste grupări includ, în particular, acele grupări protectoare (grupări protectoare convenționale) care sunt folosite, de regulă, în sinteza compușilor peptidici sau ai cefalosporinelor și penicilinelor și, de asemenea, derivați acizi nucleici și zaharuri. Aceste grupări protectoare pot fi deja prezente în substanțele precursoare și au rolul de a proteja grupările funcționale care interesează împotriva reacțiilor secundare nedorite, cum ar fi acilările, eterificările, esterificările, oxidările, etc. în anumite cazuri, grupările protectoare pot avea, în plus, efectul de a realiza o desfășurare selectivă a reacțiilor, de exemplu stereoselectivă. Caracteristic grupărilor de protecție este faptul că sunt ușor detașabile, fără reacții secundare nedorite, de
RO 119413 Β1
150 exemplu solvolitice, de reducere, fotolitice sau enzimatice, aceeași caracteristică fiind valabilă și în condiții fiziologice și nu sunt prezente în produșii finali de reacție. Protecția grupărilor funcționale de către asemenea grupări protectoare, grupările protectoare și reacțiile de eliminare ale acestora sunt descrise, de exemplu, în lucrări cum ar fi J.F.W. McOmie, “Proiective Groups in Organic Chemistiy, Plenum Press, London and New York 1973, în Th.W. Greene, Protective Groups in Organic Sinthesys, Wiley, New York 1981, în The Peptides; Volume 3 (E. Gross and J. Meienhofer, editors), Academic Press, London and New York 1981, în “Methoden der organischen Chemie, Houben Weyl, 4^1 Edition, Volume 15/1, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974, în H.-D. Jakubke și H. Jescheit, “Aminosauren, peptide, proteine, Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach and Basel 1982 și în Jochen Lehmann, Chemie der Kohlenhydrate·. Monosaccharide und Derivate, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974.
Problema pe care invenția de față o rezolvă este obținerea unei clase noi de compuși care posedă, în particular, acțiune anti-retrovirală, în special împotriva virușilor HIV-1 și HIV-2, considerați agenții care provoacă SIDA, care să prezinte proprietăți farmacologice superioare, cum ar fi o bună farmacocinetică, compatibilitate biologică și/sau tolerabilitate și care să poată fi administrați singuri sau în asociere sinergică cu alți compuși anti-retrovirali.
Invenția de față are ca obiect derivați izosteri ai substratului aspartil proteazei cu
155
160
formula I:
K î“ Xjz< țj Λ (l)
Z J \/ \
în care: 0 R,
165
170
R, este un alcoxi inferior-alcanoil inferior (inclusiv alcoxicarbonil inferior);
R2 și R3 sunt, independent unul de celălalt, fenil care este substituit sau nu cu unul sau mai mulți radicali selectați în mod independent dintre:
alchil inferior, fenil, cian-fenil, fenil-alchil inferior, halogen, halo-alchil inferior, cian, hidroxil, alcoxi inferior, fenil-alcoxi inferior, piridil-alcoxi inferior, în care piri- 175 dil este legat print-un atom de carbon din ciclu, alcoxi inferior-alcoxi inferior, alcoxicarbonil inferior-alcoxi inferior, carboxil-alcoxi inferior, hidroxil-alcoxi inferior având cel puțin doi atomi de carbon, în care hidroxilul nu este legat în poziția 1, carbamoil-alcoxi inferior, cian-alcoxi inferior și alchilendioxi inferior;
R4 este alchil inferior; 180
R5 este alchil inferior;
n este 1 sau 2 și unde inferior definește un radical având mai mult de 7 atomi de carbon, sau săruri ale acestora, cu condiția ca să fie prezentă cel puțin o grupare ce formează sare.
Un alt obiect al prezentei invenții este o compoziție farmaceutică conținând un compus 185 cu formula I sau o sare a acestuia, acceptabilă farmaceutic, în asociere cu purtători acceptabili farmaceutic.
Invenția se referă, de asemenea, la utilizarea unui compus cu formula I sau o sare a sa acceptabilă farmaceutic, la fabricarea unui medicament pentru profilaxia sau tratamentul bolilor retrovirale. 190
Un alt obiect al prezentei invenții îl constituie un preparat medicamentos care conține:
a) cel puțin un compus cu formula I sau o sare a acestuia acceptabilă farmaceutic, cu condiția existenței unei grupări capabile să formeze sare; și
b) unul, doi sau mai mulți alți compuși activi, care sunt eficienți contra retrovirusurilor, în prezența sau absența unuia sau mai multor adjuvanți farmaceutici, și care poate fi utilizat ca 195 un preparat combinat pentru folosire simultană sau eventual cronologică, într-o perioadă de
RO 119413 Β1 timp suficient de mică pentru ca ambii componenți activi a) și b) să fie prezenți simultan în corpul pacientului, pentru tratarea bolilor retrovirale care răspund la astfel de compuși activi.
Invenția se mai referă la un procedeu de preparare a compușilor cu formula I care constă în:
a) condensarea unui acid cu formula:
R.-OH (II) sau a unui derivat reactiv al acestuia, în care R, are aceeași semnificație ca și R) din formula I, cu un compus aminic cu formula:
(ΠΙ) cu un derivat reactiv al acestuia, în care n și radicalii au semnificația specificată în cazul compusului cu formula I, cu grupări funcționale libere, cu excepția acelora participante la reacție, care sunt prezente, dacă este necesar, în forma protejată în materiile prime cu formulele II și III și eliminarea grupelor de protecție prezente sau
b) condensarea unui acid carboxilic cu formula:
ΒΟΗ sau a unui derivat reactiv al acestuia, în care radicalii au semnificația specificată pentru compusul cu formula I, cu un compus aminic având formula (VI):
(VI) cu un derivat reactivai acestuia, în care n și radicalii au semnificațiile specificate pentru compusul cu formula I, cu grupări funcționale libere, cu excepția celor participante la reacție, care sunt prezente, dacă este necesar, în forma protejată în materiile prime cu formulele V și VI, iar grupările de protecție prezente fiind eliminate, sau
c) condensarea unui acid carboxilic cu formula:
(VII) sau a unui derivat reactiv al acestuia, în care radicalii au semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, cu un compus aminic cu formula (VIII):
CH, O
RO 119413 Β1 sau cu un derivat reactiv al acestuia, în care n și R5 au semnificațiile specificate pentru compușii 245 cu formula I, cu grupările funcționale libere, cu excepția celor participante la reacție, care sunt prezente, dacă este necesar, în forma protejată în materiile prime cu formulele VII și VIII, iar grupările de protecție prezente fiind eliminate, sau
d) fie (i) eterificarea unui compus hidroxi cu formula (IX):
250
(IX)
255 sau sarea lui alcoolată, în care n și radicalii au semnificațiile specificate în compușii cu formula I, cu un compus cu formula:
(X)
260 în care R5 are semnificația specificată pentru compușii cu formula I și W, este o grupare scindabilă selectată dintre grupările hidroxil esterificate, cu un acid organic tare sau cu un acid anorganic sau (ii) eterificarea unui derivat reactiv al compusului hidroxi cu formula IX cu un compus cu formula:
265 sau sarea lui alcoolată, în care R5 este definit ca mai sus, cu grupările funcționale libere, cu excepția celor participante la reacție, care sunt prezente, dacă este necesar, în forma protejată în materiile prime cu formulele IX, X și Xa, iar 270 grupările de protecție prezente fiind eliminate, sau
e) eliminarea grupărilor de protecție prezente în compușii cu formula I, în care substituenții sunt cei definiți anterior, cu condiția ca în compușii de interes cu formula I cel puțin o grupare funcțională să fie protejată, fiind posibil, în etapele de procedeu a)-e), dacă nu există alte precizări pentru materiile prime implicate care pot fi utilizate, să fie folosite 275 sub formă de sare, cu condiția existenței grupărilor formatoare de sare, și/sau dacă este cerut un compus cu formula I, care este obținut prin unul din procesele menționate anterior a)-e) și care are cel puțin o grupare care formează sare, sub forma lui de sare, și/sau convertirea unei sări obținute în compusul liber sau în altă sare, și/sau separarea amestecurilor izomere, care pot fi obținute, a compușilor cu formula I, și/sau transfor- 280 marea unui compus cu formula I în alt compus cu formula I.
Prin aplicarea invenției se obțin avantaje care decurg din furnizarea unor compuși cu proprietăți farmacologice favorabile, astfel ca proprietăți farmacocinetice, biodisponibilitate și/sau tolerabilitate bună, în consecință fiind eficienți în tratamentul unor maladii virale, precum
SIDA.
285
Alte avantaje ale prezentei invenții sunt următoarele:
- derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform invenției, au proprietăți farmacologice valoroase, posedând acțiune anti-retrovirală, în special împotriva virușilor HIV-1 și HIV-2, care sunt considerați agenții care provoacă SIDA;
- derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform invenției, sunt inhibitori ai 290 aspartat proteazelor retrovirale, în special inhibitori ai aspartat proteazelor pentru HIV-1 și HIV-2 și, de aceea, sunt indicați pentru tratarea bolilor cauzate de retroviruși, cum ar fi SIDA sau stadiile sale preliminare (ARDS);
RO 119413 Β1
- derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform invenției, au un efect împotriva retrovirușilor corespunzători ai animalelor, cum ar fi SIV (la maimuțe) sau FIV (la pisici);
- derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform invenției, au proprietăți farmacodinamice deosebit de avantajoase, de exemplu o bună farmacodinamie, cum ar fi o biodisponibilitate ridicată și/sau nivele sanguine ridicate (în special, când sunt administrați oral) și/sau o tolerabilitate bună;
- derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform invenției, pot fi utilizați la prevenirea, controlul și terapia infecțiilor cauzate de retroviruși, în particular HIV, cum ar fi HI V-1 sau HIV-2, în culturi de celule, în particular culturi celulare din liniile de limfocite provenind de la mamifere, ceea ce este deosebit de avantajos în cazul unor culturi celulare foarte valoroase, care produc, de exemplu, anticorpi specifici, vaccinuri sau substanțe mesager, cum ar fi interleukinele și, de aceea, au mare valoare comercială;
- derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform invenției, pot fi folosiți ca standarde în experimente, de exemplu ca standarde HPLC sau ca standarde pentru compararea modelelor animale, în relație cu diferiți inhibitori ai aspartat proteazei, de exemplu în ceea ce privește nivelele sanguine care pot fi obținute;
- derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform invenției, au, surprinzător, efecte sinergetice cu alți compuși care posedă acțiune împotriva aspartat proteazelor retrovirale, în particular ai HIV, ca HIV-1 sau HIV-2, atunci când sunt folosiți în combinație cu acești compuși și, din acest motiv, pot fi administrați și în combinație cu alte substanțe care sunt active împotriva retrovirușilor, în special împreună cu inhibitori ai revers transcriptazei, în special analogi de nucleozide sau săruri ale acestor substanțe, cu condiția ca cel puțin o grupare ce formează sare să fie prezentă;
- față de cazul când se utilizează fiecare individual, avantajul particular al combinațiilor dintre derivații izosteri conform invenției și alți compuși activi împotriva retrovirușilor constă în micșorarea cantitativă a dozelor necesare și, simultan, o acțiune mai puternică împotriva retrovirușilor; aceasta oferă avantaje cu privire la eventualele efecte secundare ale compușilor individuali și conduc la un număr mai mic de viruși în organism, astfel încât frecvența mutațiilor poate fi, de asemenea, micșorată și de aceea posibilitatea dezvoltării rezistenței poate fi redusă.
O realizare preferată a prezentei invenții o constituie derivații cu formula l,în care: R1t R4, R5 și n sunt definiți în revendicarea 1 și
R2 și R3 sunt selectați independent unul de celălalt, dintre:
fenil, f enil-alcoxif enil inferior, dif luorfenil, cianfenil, alcoxifenil inferior, tri-alcoxifenil inferior, alcoxi inferior-alcoxifenil inferior, alchilen dioxifenil inferior, în care radicalul alchilen dioxi inferior este legat prin cei doi atomi de oxigen ai săi, la doi atomi de carbon alăturați din inelul de carbon al grupării fenil, piridil alcoxi inferior-fenil, în care radicalul piridil este legat de un inel de atomi de carbon, 4-alcoxi inferior-2-fluorfenil, 4-fluor-2-alcoxifenil inferior, 4-alcoxi inferior-2-hidroxifenil, fenil care este substituit până la de trei ori de alchil inferior și alcoxi inferior, fenil-alchil fenil inferior, fluorfenil, hidroxifenil și di-alcoxifenil inferior sau săruri ale acestora, cu condiția ca cel puțin o grupare ce formează sare să fie prezentă, într-o realizare mai preferată a invenției sunt furnizați compuși cu formula I, în care semnificațiile lui R,, R2, R4, R5, R6 și n sunt definite ca mai sus și R3 este 2, 3, 4-alcoxifenil inferior și săruri ale acestora, cu condiția să fie prezentă cel puțin o grupare care formează sare.
Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I, în care R, este alcoxicarbonil inferior,
R2 și R3 apar în următoarele combinații:
RO 119413 Β1
345
R? = fenil R3 = cianfenil
R2 = fenil R3 = dif luorf enil
R2 - fenil R3 = 4-alcoxifenil inferior
R? = 4-(alcoxi inferior-alcoxi inferior)fenil R3 = 4-fenil-alcoxifenil inferior
R? = fenil R3 = fenil
R2 = fenil R3 = 4-fenil-alcoxifenil inferior
R? = fenil R3 = 4-(piridin-3-alcoxi inferior) fenil
R? = fenil R3 = 3, 4-alchilendioxifenil inferior
R? = fenil R3 = 2, 3, 4-tri-alcoxifenil inferior
R4 este izopropil,
R5 este metil și n este 1.
O realizare preferată a prezentei invenții sunt derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, care au formula I' ce provine din formula I:
350
355 în care radicalii au semnificațiile date pentru derivații izosteri cu formula I.
O realizare preferată a acestora sunt derivații cu formula I, în care:
R, este alcoxicarbonil inferior,
R2 este fenil și R3 este alcoxifenil inferior sau 2, 3, 4-tri-alcoxifenil inferior,
R4 este izopropil,
R5 este metil și n este 1.
360
365
Compușii preferați ai invenției sunt selectați dintre următori: 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-cianfenil)metil]hexanoil-(/L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4-difluor-fenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-(fenilmetil)-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil) amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-(3-piridilmetoxi)fenil)-metil]hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[p-(metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4-metilendioxifenil)metil]hexanoil-(L)-ValN-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(2-etoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(3-metoxipropil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(3-etoxipropil)amida;
370
375
380
385
RO 119413 Β1
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(3-(n-propiloxi)propil)amida;
sau săruri ale acestora, cu condiția ca cel puțin o grupare, ce formează sare, să fie prezentă. De asemenea, compușii preferați ai invenției sunt cei selectați dintre următorii: 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]-hexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-cianfenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(o-fluorfenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[p-(2-feniletil)fenil]metilhexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)-metil]hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)-2(R)-[((p-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amide;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-(izobutoxi)fenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)-metil]hexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-(fenilmetil)-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-benziloxifenil)-metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
SțSXBoc-aminoHțSJ-hidroxi-e-fenil^țRHțp-hidroxifeniOmetilj-hexanoil-țlJ-Val-N-^metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-izobutiloxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val·N(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[p-(2-piridilmetoxi)fenil)-metil]-hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4,-dimetoxifenil)metil]-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4,5-trimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4-dimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3-dimetil-4-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4,5-trimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4,6-trimetoxi-fenil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,5-dimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidrδxl·δ:ϊenίl·2(R)-[(2,6-dimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
RO 119413 Β1
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-hidroxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-nnetoxietil)amidași
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-2-metoxietoxi)fenil]metil-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida sau săruri ale acestora, cu condiția ca cel puțin o grupare, ce formează sare, să fie prezentă.
O altă grupă de compuși preferați ai invenției sunt următorii: 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(4-bifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenil)-metil]hexanoil-(L)-ValN-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)-2(R)-[(4-bifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-[(4-bifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(2'-cianbifenil)-4-il]-metilhexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)-2(R)-[(2’-cianbifenil)-4-il]-metilhexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida și
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-[(2'-cianbifenil)-4-il]-metilhexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida sau săruri ale acestora, cu condiția ca cel puțin o grupare, ce formează sare, să fie prezentă
440
445
450
455
460
465
Sunt preferați derivații izosteri cu formula I, în care sunt prezente următoarele combinații ale radicalilor R2 și R3:
Radical R2 Radical R3
1 4-(fenil-alcoxi inferior)-fenil, în particular 4-(benziloxi)fenil 4-(fenil-alcoxi inferior)-fenil, în particular 4(benziloxi)fenil
2 Fenil cianfenil, în particular 4-cianfenil
3 Fenil 2-fluorfenil
4 Fenil 2,4-difluorfenil
5 Fenil 4-fenil-alchilfenil inferior, în particular 4(2-feniletil)fenil
6 Fenil 4-alchilfenil inferior, în particular 4-metoxifenil sau, în plus, 4-izobutoxifenil
7 Fenil Diclorfenil-alcansulfonilfenil inferior, în particular 4-(2,6-diclorobenzilsulfonil) fenil
8 4-(alcoxi inferior-alcoxi inferior)fenil, în particular 4-(2-metoxietoxi)fenil 4-(fenil-alcoxi inferior)fenil, în particular 4-(benziloxi)feniletoxi)fenil
9 4-(alcoxi inferior-alcoxi inf erior)f enil, în particular 4-(2-metoxietoxi)fenil hidroxifenil, în particular 4-hidroxifenil
10 4-(alcoxi inferior-alcoxi inferior)fenil, în particular 4-(2-metoxietoxi)fenil 4-(alcoxi inferior)fenil, în particular 4-metoxifenil
470
475
480
RO 119413 Β1
Tabel (continuare)
Radical R2 Radical R3
11 4-(alcoxi inferior-alcoxi inferior)fenil, în particular 4-(2-metoxietoxi)fenil 4-(alcoxi inferior-alcoxi inferior)fenil, în particular 4-(2-metoxietoxi)fenil
12 4-(fenil-alcoxi inferior)-fenil, în particular 4-(benziloxi)fenil 4-(alcoxi inferior)-fenil, în particular 4metoxifenil
13 4-hidroxifenil 4-(alcoxi inferior)-fenil, în particular 4-metoxifenil
14 4-(alcoxi inferior)-fenil, în particular 4metoxifenil sau 4-izobutoxifenil 4-alcoxifenil inferior, în particular 4-metoxifenil
15 4-(alcoxi inferior)-fenil, în particular 4-metoxifenil fenil
16 tenii 4-(alcoxi inferior)-2-fluorfenil, în particular 4-metoxi-2-fluorfenil
17 tenii 4-fluor-2-alcoxifenil inferior, în particular 4-fluor-2-metoxifenil
18 tenii 4-alcoxi inferior-2-hidroxifenil, în particular 4-metoxi-2-hidroxifenil
19 tenii fenil
20 tenii 4-(fenil-alcoxi inferior)fenil, în particular 4-(benziloxi)fenil
21 tenii 4-((piridin-2-il- sau piridin 3-il)-alcoxi inferior)-fenil, în particular 4-(piridin-2-il- sau, în special, piridin-3-il)metoxifenil
22 tenii 3.4- alchilendioxifenil inferior, în particular 3.4- metilendioxifenil
23 tenii 3.4- di-alcoxifenil inferior, în particular 3.4- dimetoxifenil
24 tenii 3-alcoxifenil inferior,în particular 3-metoxifenil
25 tenii 2.3.4- tri-alcoxifenil inferior, în particular 2.3.4- trimetoxifenil
26 tenii 3.4.5- tri-alcoxifenil inferior, în particular 3.4.5- trimetoxifenil
27 tenii 2.4- di-alcoxifenil inferior, în particular 2.4- dimetoxifenil
28 tenii 2-(alcoxi inferior)fenil, în particular 2-metoxifenil
29 tenii 4-alcoxi inferior-2,3-di-alchilfenil inferior, în~ particular 4-metoxi-2,3-dimetilfenil
RO 119413 Β1
525
Tabel (continuare)
Radical R2 Radical R3
30 fenil 2.4.5- tri-alcoxifenil inferior, în particular 2.4.5- trimetoxifenil
31 fenil 2.4.6- tri-alcoxifenil inferior, în particular 2.4.6- trimetoxifenil
32 fenil 5,6,7,8-tetrahidro-1 -naftil
33 fenil 2,5-di-alcoxifenil inferior, în particular 2,5dimetoxifenil
34 fenil 2,6-di-alcoxifenil inferior, în particular 2,6dimetoxifenil
sau alternativ sau adițional
35 fenil bifenilil, în particular 4-bifenilil
36 4-(fenil-alcoxi inferior)-fenil, în particular 4-benziloxifenil bifenilil, în particular 4-bifenilil
37 4-hidroxifenil bifenilil, în particular 4-bifenilil
38 4-(alcoxi inferior)-fenil, în particular 4metoxifenil bifenilil, în particular 4-bifenilil
39 fenil (cianfenil)fenil, în particular 2'-cianbifenil4-il
40 4-(fenil-alcoxi inferior)-fenil, în particular 4-benziloxifenil (cianfenil)fenil, în particular 2'-cianbifenil4-il
41 4-hidroxifenil (cianfenil)fenil, în particular 2'-cianbifenil- 4-il
42 4-alcoxifenil inferior, în particular 4metoxifenil (cianfenil)fenil, în particular 2'-cianbifenil4-il
43 fenil 4-hidroxifenil
530
535
540
545
550
Pe parcursul prezentei descrieri, termenii generali, utilizați mai sus și cei utilizați în cele ce urmează, au următoarele semnificații, în lipsa altor indicații:
Termenul „inferior, de exemplu din expresia „alchil inferior, descrie un radical neavând 555 mai mult de 4 atomi de carbon, fiind posibil ca acești radicali să nu fie ramificați sau să fie ramificați o dată sau de mai multe ori.
Atunci când sunt menționați compuși, săruri, etc, acești termeni înseamnă, de asemenea, un compus, o sare, etc.
Atomii de carbon asimetrici care pot fi prezenți, incluzând pe aceia dintre substituenții 560 Ri, R2, R3, R4 și R5, pot fi în configurațiile (R), (S) sau (R,S), de preferință în configurațiile (R) sau (S). Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform invenției, pot exista, în consecință, ca amestecuri izomerice sau ca izomeri puri, în particular ca amestecuri diastereomere, enantiomere sau, de preferință, enantiomeri puri.
Formularea suplimentară „alternativ sau adițional înseamnă fie că semnificațiile sub- 565 stituenților corespunzători desemnați, combinate cu grupurile respective ale semnificațiilor substituenților nu sunt indicate cu acest tip de formulare suplimentară, formează o grupă de
RO 119413 Β1 substituenți, fie că mijloacele substituente indicate corespunzător formează ele însele un grup, fie înseamnă că semnificațiile substituenților desemnate corespunzător formează propria lor grupă care nu este desemnată cu această formulare suplimentară, formează o grupă de semnificații ale substituenților.
Sărurile derivaților izosteri ai substratului aspartat proteazei din formula I sunt, în particular (când grupările de bază sunt prezente în derivații izosteri din formula I), săruri de adiție de acid, săruri de adiție de baze (când grupările acide sunt prezente în derivații izosteri din formula I) sau săruri altfel amestecate sau săruri interne, când sunt prezente mai multe grupări care formează săruri.
Sărurile sunt, în primul rând, sărurile cele netoxice ale derivaților izosteri ai substratului aspartat proteazei din formula I, utilizabile în scop farmaceutic.
Astfel de săruri sunt formate, de exemplu, din izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I, având o grupare acidă, de exemplu o grupare carboxil, o grupare sulfo sau o grupare fosforil care este substituită de una sau două grupări hidroxil, și sunt, de exemplu, sărurile lor cu baze adecvate, cum ar fi săruri netoxice ale metalelor din grupele la, Ib, Ha și llb din sistemul periodic al elementelor, în primul rând, săruri adecvate ale metalelor alcaline, de exemplu litiu, săruri de sodiu sau de potasiu sau săruri ale metalelor alcalino-pământoase, de exemplu săruri de magneziu sau de calciu și, de asemenea, săruri de zinc sau de amoniu și, de asemenea, acele săruri care sunt formate cu amine organice, cum ar fi mono-, di- sau tri-alchilamine, în particular mono-, di- sau tn-alchilamine inferioare, care sunt substituite sau nu de hidroxil sau cu compuși cuaternari de amoniu, de exemplu cu N-metil-N-etilamină, dietilamină, trietilamină, mono-, bis- sau tr/-(2-hidroxi-alchil inferiorjamine, precum mono-, bis- sau tri-2-hidroxi-terțbutilamină sau tri-(hidroximetil)metilamina, N, N-dZ-alchil inf erior-N-(hidroxi-alchil inferior) amine, precum N,N-dimetil-N-(2-hidroxietil)amină și tri-(2-hidroxietil)amină, N-metil-D-glucamine sau săruri cuaternare de amoniu, cum ar fi săruri de tetrabutilamoniu.
Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I, care au o grupare bazică, de exemplu o grupare amino, pot forma săruri de adiție de acid, de exemplu cu acizi anorganici, de exemplu hidracid, cum ar fi acid clorhidric, acid sulfuric sau acid fosforic sau cu acizi organici carboxilici, sulfonici, sulfatici (-O-SO3H) sau fosforici sau acizi sulfamici N-substituiți, de exemplu acid acetic, acid propionic, acid glicolic, acid succinic, acid maleic, acid hidroximaleic, acid fumărie, acid malic, acid tartric, acid gluconic, acid glutaric, acid glucuronic, acid citric, acid benzoic, acid cinamic, acid mandelic, acid salicilic, acid 4-aminosalicilic, acid 2-fenoxibenzoic, acid 2-acetoxibenzoic, acid embionic, acid nicotinic sau acid izonicotinic și, în plus, cu aminoacizi, de exemplu a-aminoacizii menționați mai sus, în particular acid glutamic și acid aspartic, și, de asemenea, cu acid metansulfonic, acid etansulfonic, acid 2-hidroxietansulfonic, acid etan-1,2disulfonic, acid benzensulfonic, acid 4-metilbenzensulfonic, acid naftalen-2-sulfonic, 2- sau 3fosfoglicerat, glucoza-6-fosfat sau acid N-ciclohexilsulfamic (cu formare de ciclamați) sau cu alți compuși organici acizi aciclici, cum ar fi acid ascorbic. Derivații izosteri cu formula I, care posedă grupări acide și bazice, pot forma, de asemenea, săruri interne.
Săruri neadecvate în scop farmaceutic, de exemplu perclorații sau picrații, pot fi, de asemenea, folosite pentru izolare sau purificare. Numai sărurile utilizabile în scop farmaceutic, care nu sunt toxice atunci când sunt utilizate cum se cuvine, sunt adecvate pentru utilizare în scop terapeutic și de aceea sunt preferate.
Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I au proprietăți farmacologice valoroase. Ei posedă acțiune anti-retrovirală, în special împotriva virușilor HIV-1 și HIV-2, care sunt considerați agenții care provoacă SIDA, și au, surprinzător, efecte sinergetice când sunt folosiți în combinație cu alți compuși care posedă acțiune împotriva aspartat proteazelor retrovirale. Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I sunt inhibitori ai aspartat proteazelor retrovirale, în special inhibitori ai aspartat proteazelor pentru HIV-1 și HIV-2
RO 119413 Β1 și de aceea sunt potriviți pentru tratarea bolilor cauzate de retroviruși, cum ar fi SIDA sau a stadiilor sale preliminare (ARDS). Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I au, de asemenea, un efect împotriva retrovirușilor corespunzători animalelor, cum ar fi SIV (la maimuțe) sau FIV (la pisici).
în acest context, derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I au proprietăți farmacodinamice deosebit de avantajoase, de exemplu o bună farmacodinamie, cum ar fi o biodisponibilitate ridicată și/sau niveluri sanguine ridicate (în special, când sunt administrați oral) și/sau o tolerabilitate bună.
Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I pot fi, de asemenea, utilizați la prevenirea, controlul și terapia infecțiilor cauzate de retroviruși, în particular HIV, cum ar fi HI V-1 sau HIV-2, în culturi de celule, în particular culturi celulare din liniile de limfocite, provenind de la mamifere, ceea ce este deosebit de avantajos în cazul unor culturi celulare foarte valoroase, care produc de exemplu anticorpi specifici, vaccinuri sau substanțe mesager, cum ar fi interleukinele și de aceea au mare valoare comercială.
în final, derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei, cu formula I pot fi folosiți ca standarde în experimente, de exemplu ca standarde HPLC sau ca standarde pentru compararea modelelor pe animale, legați de diferiți inhibitori ai aspartat proteazei, de exemplu, în ceea ce privește nivelele sanguine care pot fi obținute.
620
625
630
Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I pot fi administrați simplu sau în combinație (ca o combinație fixă de preparații adecvate sau ca o combinație de compuși individuali activi sau ca preparații individuale administrate în stadii cronologice succesive) cu alte substanțe care sunt active împotriva retrovirușilor, în particular HIV, ca HIV-1 sau HIV-2, sau săruri ale acestor substanțe, cu condiția ca cel puțin o grupare ce formează sare să fie prezentă; în special împreună cu inhibitori ai revers transcriptazei, în special analogi de nucleoside, în particular 3'-azido-3'deoxitimidina (zidovudina=®RETROVIR, Burroughs-Wellcome), 2*,3'-dideoxicitidina (zalcitabina = ®HIVID, Hoffman-LaRoche), 2',3'-dideoxinosina (didanosina = ®VIDEX, Bristol-Myers-Squibb) sau (2R,cis)-4-amino-1 -(2-hidroximetil-1,3-oxatiolan-5-il)-(1 H)pirimidin-2-ona (lamivudina, Glaxo) sau analogi nenucleozidici, cum ar fi 11 -ciclopropil-5,11dihdro-4-metil-(6H)-dipirido[3,2-b;2',3'-e]-[1,4]diazepin-6-ona; și, în primul rând, cu unul sau mai mulți (în particular cu unul sau doi) alți inhibitori ai aspartat proteazelor retrovirale, în particular ai aspartat proteazelor de HIV, cum ar fi HIV-1 și HIV-2, în particular cu unul sau mai mulți (de preferință 1 sau 2), dintre:
635
640
645
a) saquinavir cu formula:
(saquinavir)
650
655
b) indinavir cu formula:
660
665
RO 119413 Β1
c) ABT-538 (Abbott) cu formula:
d) KVX-478 cu formula:
sau 141W94;
e) compusul cu indicativul AG-1343 (Agouron), cu formula:
(AG-1343)
f) compusul KNI-272 (Nippon Mining) cu formula:
-272
(U-96988)
HO
RO 119413 Β1
715
h) palinavir (Boehringer-lngelheim), cu formula:
(palinavir)
720 în particular, când un eter izoster al substratului aspartat proteazei cu formula I este combinat cu unul sau mai mulți inhibitori ai aspartat proteazelor retrovirale, pot fi observate 725 efectele sinergetice, ceea ce este un lucru surprinzător, dacă se ține cont de faptul că inhibitorii acționează pe aceeași enzimă. Avantajul particular al acestor combinații (față de cazul când se utilizează compuși individuali) constă în micșorarea cantitativă a dozelor necesare și, simultan, o acțiune mai puternică împotriva retrovirușilor. Aceasta oferă avantaje cu privire la eventualele efecte secundare ale compușilor individuali și conduc într-un număr mai mic de viruși 730 în organism, astfel încât frecvența mutațiilor poate fi, de asemenea, micșorată și de aceea posibilitatea dezvoltării rezistenței poate fi redusă.
în grupările derivaților izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I care sunt menționați mai jos, definițiile substituențilordin definițiile generale susmenționate, pot fi folosite de o manieră semnificativă, de exemplu la înlocuirea mai multor definiții generale cu definiții mai 735 specifice sau, în particular, acele definiții caracterizate ca fiind preferate.
Este preferat un derivat izoster cu formula I (în particular cu formula Γ), în care: R2 = fenil și R3 = 4-alcoxifenil inferior, în special 4-metoxifenil sau, de preferință, 2,3,4-fr/-alcoxifenil inferior, în special 2,3,4-trimetoxicarbonil; R4 este izopropil și R5 este metil.
Cei mai preferați eteri izosteri, cu formula I sunt cei amintiți în exemple sau săruri ale 740 acestora care sunt acceptabile din punct de vedere farmaceutic, cu condiția ca cel puțin o grupare care formează sare să fie prezentă.
Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I sau săruri ale acestora, având cel puțin o grupare care formează sare, sunt obținuți prin procedee cunoscute, de exemplu prin: 745
a) condensarea unui acid cu formula:
RrOH (II) sau un derivat acid reactiv al acestuia, în care R, are aceeași semnificație ca R, din compușii 750 formulei I, cu un compus aminic cu formula:
H
760
RO 119413 Β1 sau un derivat reactiv al acesteia, în care n și radicalii au semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, cu grupările funcționale libere, cu excepția acelora care participă la reacție, fiind prezente, dacă este necesar, într-o formă protejată a materiilor prime cu formulele II și III (sau ΙΙΓ) și eliminând grupările protectoare prezente sau
b) condensarea unui acid carboxilic cu formula:
în particular cu formula:
(V) (V) sau a unui derivat reactiv al acestuia, în care radicalii au semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, cu un compus aminic cu formula:
0 <»k o
(VI) în particular cu formula:
O h2n (VI')
«4 sau un derivat reactiv al acestuia, în care n și radicalii au semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, cu grupările funcționale libere, cu excepția acelora care participă la reacție, fiind prezente, dacă este necesar, sub formă protejată în materiile prime cu formulele V (sau V) și VI (sau VI’), iar grupările de protecție prezente fiind eliminate, sau
c) condensarea unui acid carboxilic cu formula:
(VII) în particular cu formula:
(VW)
RO 119413 Β1
815 sau un derivat reactiv al acestuia, în care radicalii au semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, cu un compus aminic cu formula:
(vni) sau un derivat reactiv al acestuia, în care n și R5 au semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, cu grupările funcționale libere, cu excepția acelora care participă la reacție, fiind prezente, dacă este necesar, sub formă protejată în materiile prime cu formulele VII (sau VII') 820 și VIII, iar grupările protectoare prezente sunt eliminate (dacă se dorește), sau
d) se poate alege una din următoarele căi:
(i) eterificarea unui compus hidroxi cu formula:
(IX’)
830
835 sau sarea sa alcoolată, în care n și radicalii au semnificațiile specificate pentru compușii având formula I, cu un compus cu formula:
WrR5 (X) în care R6 are semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I și W, este o grupare care 840 se desprinde, sau ii) eterificarea unui derivat reactiv al compusului hidroxi cu formula IX (sau IX’) cu un compus cu formula:
HO-R5 (Xa)
845 sau sarea sa alcoolată, în care B5 este definit chiar mai sus, cu grupările funcționale libere, cu excepția acelora care participă la reacție, fiind prezente, dacă este necesar, sub forma protejată în materiile prime cu formulele IX (sau IX'), X și Xa, iar grupările protectoare prezente fiind eliminate, sau
e) eliminarea grupărilor de protecție care sunt prezente într-un compus cu formula I (în 850 particular Γ), în care substituenții sunt definiți ca mai sus, cu condiția ca, în compusul cu formula I, cel puțin o grupare funcțională este protejată de grupări protectoare, acest lucru fiind posibil, în etapele specificate a)...e) ale procesului, pentru materiile prime care se întrebuințează, de asemenea, sub formă de sare, cu condiția ca grupări care formează săruri să fie prezente și/sau, dacă se dorește, un compus cu formula I (sau Γ), care este obținut prin una dintre 855 procedurile a)...e) susmenționate și care are cel puțin o grupare care formează sare, în propria sare și/sau transformând o sare, posibilă de obținut, în compusul liber sau într-o altă sare și/sau separând din nou amestecurile izomerice, care ar putea fi obținute, ale derivaților izosteri cu formula I (sau Γ) și/sau transformând un compus nou cu formula I (sau I’), într-un alt compus cu formula I (sau Γ). 860
RO 119413 Β1
Procedeele susmenționate sunt descrise mai detaliat în continuare:
în descrierea etapelor de procedeu respective, radicalii R1f R2, R3, R4 și R5 și n, au atât mai sus, cât și mai jos, semnificațiile specificate pentru derivații izosteri cu formula I, cu excepția cazurilor când există alte indicații.
în fiecare caz, prepararea compușilor cu formula:
în care n și radicalii au semnificațiile specificate pentru eterii izosteri cu formula I, este preferată.
în procedeele respective, derivații cu formulele marcate cu apostrof: I’, la', III', lila', V’, VI', VII' și IX', având stereospecificitatea indicată, sunt preferați în mod deosebit în comparație cu derivații corespunzători care nu au o stereospecificitate indicată și cu formulele I, la, III, lila, V, VI, VII și IX; amestecurile corespunzătoare de compuși, în care atomii de carbon (în catena dată C(5), C(2) și C(4)) care conțin radicalul R2-CH2-, radicalul R3-CH2- și gruparea OH localizată între aceștia, sunt în configurația (2R, 4S, 5S) și în configurația (2S, 4R, 5R) și în fiecare caz sunt mai puțin preferați decât derivații marcați cu apostrof, dar mai preferați decât derivații corespunzători fără nici un fel de stereospecificitate indicată.
în cele ce urmează, amestecurile corespunzătoare de compuși, având configurațiile (2R, 4S, 5S) și (2S, 4R, 5R), sau, în particular, compușii din formulele corespunzătoare pentru fiecare caz și care sunt marcate cu apostrof pot fi utilizate în locul compușilor cu formulele I, la, III, lila, V, VI, VII și IX, cu condiția ca aceasta să aibă semnificație din punct de vedere chimic; acest lucru se aplică și la partea referitoare la măsurile suplimentare și la materiile prime folosite în procedee.
Procedeul a). Prepararea unei legături aminice în materiile prime cu formulele III și III', grupările funcționale, cu excepția grupărilor care urmează să ia parte la reacție sau care nu reacționează în condițiile reacției, sunt, independent una de cealaltă, protejate de grupări protectoare.
Grupările protectoare pentru grupările funcționale din materiile prime a căror reacție trebuie evitată, în particular carboxil, amino, hidroxil și grupările mercapto, includ, în particular, acele grupări protectoare (grupări protectoare convenționale) care sunt folosite, de regulă, în sinteza compușilor peptidici sau ai cefalosporinelor și penicilinelor și, de asemenea, derivați acizi nucleici și zaharuri. Aceste grupări protectoare pot fi deja prezente în substanțele precursoare și au rolul de a proteja grupările funcționale care interesează împotriva reacțiilor secundare nedorite, cum ar fi acilările, eterificările, esterificările, oxidările, etc. în anumite cazuri, grupările protectoare pot avea, în plus, efectul de a realiza o desfășurare selectivă a reacțiilor, de exemplu stereoselectivă. Caracteristic grupărilor de protecție este faptul că sunt ușor detașabile, fără reacții secundare nedorite, de exemplu solvolitice, de reducere, fotolitice sau enzimatice, aceeași caracteristică fiind valabilă și în condiții fiziologice, și nu sunt prezente în produșii finali de reacție.
Derivații izosteri cu formula I, care posedă grupări funcționale protectoare (care sunt detașabile în condiții fiziologice), pot avea un grad mai ridicat de stabilitate metabolică sau proprietăți farmacodinamice îmbunătățite, în comparație cu compușii corespunzători care au grupări funcționale libere.
O grupare carboxil este, de exemplu, protejată ca o grupare ester care poate fi scindată selectiv în condiții moderate. O grupare carboxil protejată în forma esterificată este esterificată la început cu o grupare alchil inferioară care este ramificată, de preferință, în poziția 1 a grupării alchil inferioare sau este substituită de către substituenți adecvați în pozițiile 1 sau 2 ale grupării alchil inferioare.
RO 119413 Β1
O grupare carboxil protejată care este esterificată cu o grupare alchil inferioară este, de exemplu, metoxicarbonil sau etoxicarbonil.
O grupare carboxil protejată, esterificată cu o grupare alchil inferioară, care este ramificată în poziția 1 a grupării alchil inferioare, este, de exemplu, terț-alcoxicarbonil inferior, de 915 exemplu tert-butoxicarbonil.
în înțelesul prezentei invenții, un suport polimeric, ca cel potrivit, de exemplu, pentru sinteza Merrifield, și care este legat astfel, încât să fie ușor detașabil de gruparea funcțională protejată, de exemplu o grupare carboxil, se înțelege a fi o grupare protectivă, de exemplu o grupare proiectivă a grupării carboxil. Un suport polimeric adecvat de această natură este, în parti- 920 cular, o rășină polistirenică ce este slab conectată încrucișat, prin copolimerizare cu divinilbenzen și care conține membri-„pod adecvați pentru legăturile reversibile.
Acizii din formula II sunt acizi carboxilici sau sulfonici și au fie o grupare carboxilică liberă, fie o grupare sulfo- liberă, fie sunt prezenți ca un derivat reactiv al acestora, de exemplu ca un ester activat care este derivat din compusul carboxi liber sau din compusul sulfo-, ca o 925 anhidridă reactivă, sau, în plus, ca o amidă ciclică reactivă. Derivații reactivi pot fi formați, de asemenea, in situ.
Procedeul b). Prepararea unei legături amidice în materiile prime cu formulele V și VI, grupările funcționale, cu excepția grupărilor care urmează să participe la reacție sau care nu reacționează în condițiile reacției, sunt protejate, 930 independent una de alta, de către grupări protectoare.
Grupările protectoare, acizii carboxilici liberi și derivații lor reactivi, aminele libere și derivații lor reactivi și procedeele folosite pentru condensare sunt complet analoage celor descrise la procedeul a), pentru prepararea unei legături amide, pornind de la compușii cu formulele II și III, dacă acizii carboxilici cu formula V sunt utilizați acolo în locul celor cu formula II și dacă 935 compușii amino cu formula VI sunt utilizați în locul celor cu formula III.
în plus față de derivații reactivi în mod analog cu procedeul a), un derivat reactiv al unui acid carboxilic din formula V poate fi, de asemenea, γ-lactona corespunzătoare cu formula XXA.
i Ri (XXA)
940
945 (în particular cu formula XXA')
I *1 (XXA’ în care radicalii Rn R2 și R3 au semnificațiile specificate pentru eterii izosteri cu formula I.
Reacția se desfășoară direct pentru a obține produsul final în prezența unui acid organic slab, de exemplu un acid alcanoic inferior substituit sau (de preferință) nesubstituit, cum ar fi acidul trihaloacetic, de exemplu acidul tricloroacetic, sau, în particular, acidul acetic, sau alți acizi organici cu aciditate similară, de exemplu 2-hidroxipiridina, la temperaturi între 10...100°C, în particular între 60...100°C, în prezența (preferabil absența) solvenților, preferabil fără atmosferă, de exemplu în tuburi-bombă. De preferință, compusul cu formula VI, în particular VI', este folosit într-un ușor exces, de exemplu între 1,01 ...4 exces molar față de compusul din formula XXA,
950
955
960
RO 119413 Β1 în particular XXA', cu acidul organic slab, pe de altă parte, fiind folosit, de preferință, într-un slab exces, în cantitate echimolară sau într-un deficit ușor, în comparație cu compusul cu formula VI, în particular VI', de exemplu într-o proporție molară mai mare de 0,3...2.
Eliberarea grupărilor funcționale, protejate de grupări protectoare în eterii izosteri rezultanți, cu formula l, este efectuată folosind una sau mai multe căi specificate la procedeul e).
Procedeul c). Prepararea legăturii amidice în materiile prime cu formulele VII și VIII, grupările funcționale, cu excepția grupărilor care urmează să participe la reacție sau care nu reacționează în condițiile reacției, sunt protejate, independent una de cealaltă, de către grupări protectoare.
Grupările protectoare, acizii carboxilici liberi și derivații lor reactivi, aminele libere și derivații lor reactivi și procesele folosite pentru condensare sunt complet analoage celor descrise în procedeul a), pentru prepararea unei legături amide pornind de la compușii cu formulele II și III, dacă acizii carboxilici cu formula VII sunt folosiți acolo, în locul celor cu formula II și compușii amino cu formula VIII sunt folosiți în locul celor cu formula III.
Eliberarea grupărilor funcționale, care sunt protejate de grupări protectoare în eterii izosteri rezultanți, cu formula I, este efectuată utilizând una sau mai multe dintre căile specificate în procedeul f).
Procedeul d). Prepararea unei legături eterice prin substituire nucleofilică în materiile prime cu formulele IX, X și Xa, grupările funcționale, cu excepția grupărilor care urmează să participe la reacție sau care nu reacționează în condițiile reacției, sunt protejate, independent una de alta, de către grupări protectoare.
Grupările protectoare, și metodele de introducere ale acestora, corespund celor specificate în procedeul a).
în substituția nucleofilică, fie, în cazul (i), compusul cu formula IX are o grupare hidroxil liberă care urmează a fi eterificată și W, în compusul cu formula X este o grupare care se desprinde, fie, în cazul (ii), compusul cu formula IX este sub forma unui derivat reactiv și este reacționat cu gruparea hidroxil care urmează a fi eterificată. în acest context, gruparea hidroxil a compusului hidroxil respectiv, care urmează a fi reacționată, este convertită în sarea sa alcoolată, fie in situ, fie într-o reacție anterioară independentă. într-o sare alcoolată, gruparea hidroxil (-OH) este prezentă sub forma anionică, cu un contra-ion adecvat ca fiind un cation metalic, cum ar fi un cation de metal alcalin, de exemplu K+, Cs+ sau, în particular, Na+.
O grupare scindabilă \N, este, în particular, o grupare nucleofugică de scindare, selectată din hidroxil, care este esterificat cu un acid anorganic sau organic puternic, cum ar fi hidroxil care este esterificat cu un acid mineral, de exemplu acid hidrohalogenat, ca acidul clorhidric, bromhidric sau iodhidric sau cu un acid organic puternic, cum ar fi acidul alcansulfonic inferior care este substituit sau nu, de exemplu, de halogen, ca fluor, sau un acid sulfonic aromatic, de exemplu un acid benzensulfonic care este substituit sau nu de alchil inferior, ca metil, halogen, ca brom, și/sau nitro, de exemplu un acid metansulfonic, p-bromotoluensulfonic sau p-toluensulfonic, sau hidroxil care este esterificat cu acid hidrazoic. Este posibil, de asemenea, să se prepare in situ compusul care interesează prezenta invenție, prin substituirea altui radical W1 corespunzător, de exemplu C1, cu un alt radical W1t de exemplu I (utilizând, de preferință, o iodură de metal alcalin, gen Nai) și, în consecință, continuând cu reacția în amestecul de reacție rezultant.
într-un derivat reactiv al unui compus cu formula IX, o grupare scindabilă, ca cea descrisă, chiar mai sus pentru Wn este prezentă în locul grupării hidroxil.
Eterificarea are loc, de preferință, în prezența unei baze relativ slabe, cum ar fi un carbonat de metal alcalin, de exemplu carbonat de sodiu sau de potasiu, a unei baze tari, de exemplu o bază care conține hidroxid, de exemplu un hidroxid al unui metal, cum ar fi un hidroxid al unui metal alcalin, ca hidroxid de sodiu sau de potasiu, sau, în particular, folosind un
RO 119413 Β1
1010 alcoolat metalic al respectivului compus hidroxi sau prepararea sa insitu, în prezența unei baze tari, ca hidrura de sodiu, sau în prezența unui metal alcalin, ca sodiu, în absența sau prezența unor solvenți sau amestecuri de solvenți adecvate, în particular solvenți aprotici, de exemplu DMPU, un eter, ca eter dietilic, dioxan sau tetrahidrofuran, a unei carboxamide, ca dimetilformamida, sau a unui amestec de 2 sau mai mulți dintre acești solvenți, la temperaturi între O’C și temperatura de reflux, în particular între 20°C și temperatura de reflux, în condițiile prezenței unui gaz protector ca azot sau argon.
în funcție de condițiile de reacție, substituția poate avea loc ca o substituție nucleofilă de ordinul I sau II.
Deoarece în reacție pot avea loc o serie de reacții secundare, în conformitate cu procedeul d) (de exemplu racemizare prin formare de carbanioni), acest proces poate fi realizat în condiții de reacție foarte strict controlate (de exemplu o măsurare atentă a bazei utilizate sau a alcoolatului respectiv, etc). Posibile reacții de interferență și condiții de reacție adecvate sunt imediat evidente pentru un specialist în domeniu, într-o variantă preferată a procedeului, pentru prepararea derivaților izosteri cu formula I, conform invenției, procedeul e) este exclus din acest motiv.
Eliberarea grupărilor funcționale, care sunt protejate de grupări protectoare în compușii rezultanți cu formula I, având funcții protectoare, este efectuată folosind una sau mai multe dintre căile specificate la procedeul f).
Procedeul e). Scindarea grupării protectoare
Scindarea grupărilor de protecție, care nu sunt componente ale produsului final cu formula I (derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei), de exemplu grupările carboxil, amino, hidroxil și/sau mercapto, este efectuată într-o manieră cunoscută, de exemplu folosind solvoliza, în particular hidroliza, alcooliza sau acidoliza, sau prin mijloace de reducere, în particular hidrogenoliza, sau cu ajutorul altor agenți reducători, și, de asemenea, fotoliza, succesiv sau simultan, fiind posibil să se utilizeze metode enzimice. Scindarea grupărilor de protecție este descrisă, de exemplu, în lucrările menționate mai sus, la paragraful referitor la grupări protectoare”.
Astfel, o grupare carboxil protejată, de exemplu alcoxicarbonil inferior (care este ramificat, de preferință, în prima poziție), cum ar fi tert-alcoxicarbonil inferior, alcoxicarbonil inferior care este substituit în a doua poziție de o grupare silii fri-substituită sau în prima poziție de alcoxi inferior sau alchiltio inferior, sau difenilmetoxicarbonil care este substituit sau nu, poate fi convertită în carbonil liber, prin tratarea cu un acid adecvat, ca acidul formic, acid acetic, acid hidrocloric sau trifluoracetic, adaugându-se un compus nucleofilic, ca fenol sau anisol. Benziloxicarbonil, care este substituit sau nu, poate, de exemplu, să fie eliberat prin hidrogenoliză, adică prin tratare cu hidrogen în prezența unui catalizator de hidrogenare metalică, ca paladiu. în plus, benziloxicarbonil, ca 4-nitrobenziloxicarbonil, poate fi transformat în carboxil liber prin reducere, de exemplu prin tratare cu ditionită de metal alcalin, ca ditionita de sodiu, sau cu un metal reducător, de exemplu zinc, sau o sare metalică reducătoare, ca sarea de crom(ll), de exemplu clorură de crom(ll), de regulă în prezența unui agent eliberator de hidrogen, care, împreună cu metalul, pot produce hidrogen nativ, cum ar fi un acid, prima dată un acid carboxilic adecvat, ca acid alcancarboxilic inferior, care este substituit sau nu, de exemplu de hidroxil, de exemplu acid acetic, acid formic, glicolic, difenilglicolic, lactic, mandelic, 4-cloromandelic sau tartaric, sau un alcool sau tiol, la care se adaugă, de preferință, apă. Prin tratarea cu un metal reducător sau cu o sare metalică, așa cum s-a descris mai sus, 2-halo-alcoxicarbonil inferior (după transformarea grupării 2-bromo-alcoxicarbonil inferior într-o grupare 2-iodo-alcoxicarbonil inferior corespunzătoare) sau aroilmetoxicarbonil pot fi, de asemenea, transformați în carboxil liber. Aroilmetoxicarbonil poate fi clivat prin tratare cu un reactiv nucleofilic (de preferință, unul care formează sare), cum ar fi triofenoxid de sodiu sau iodură de sodiu. Gruparea carbonil
1015
1020
1025
1030
1035
1040
1045
1050
1055
RO 119413 Β1 poate fi, de asemenea, eliberată din 1 -aril-alcoxicarbonil inferior, de exemplu arilmetoxicarbonil, ca benziloxicarbonil, prin hidrolizare în prezența unei baze, cum ar fi un hidroxid de metal alcalin, de exemplu hidroxid de sodiu sau de potasiu. 2-(silil tr/-substituit)-alcoxicarbonil inferior, ca 2-irZ-alchilsilil inferior-alcoxicarbonil inferior, pot fi, de asemenea, convertiți în carboxil liber, prin tratare cu o sare a unui acid hidrofluoric care asigură anionul fluor, ca o fluorură de metal alcalin, de exemplu fluorură de sodiu sau de potasiu, în absența sau prezența unui polieter macrociclic („eter coroană), sau cu o fluorură a unei baze cuaternare organice, ca fluorură tetra-alchilamoniu inferior sau fluorură tr+alchilaril inferior-alchilamoniu inferior, de exemplu fluorură de tetraetilamoniu sau de tetrabutilamoniu, în prezența unui solvent polar aprotic, ca dimetil sulfoxid, Ν,Ν-dimetilformamidă sau Ν,Ν-dimetilacetamidă. Carboxilul, protejat ca sililoxicarbonil organic, ca tri-alchilsililoxicarbonil inferior, de exemplu trimetilsililoxicarbonil, poate fi eliberat solvolitic, într-o manieră obișnuită, de exemplu prin tratarea cu apă, alcool sau acid, sau, în plus, fluorură, așa cum s-a descris mai sus. Carboxilul esterificat poate fi, de asemenea, eliberat enzimatic, de exemplu folosind peptidaza sau esteraze adecvate, de exemplu arginina sau lisina esterificată, ca ester metil lisina, folosind tripsina. Carboxil, care este protejat ca un ester intern, ca γ-lactona, poate fi eliberat prin hidroliză, în prezența unei baze care conține hidroxid, ca un hidroxid metalic pământos alcalin sau, în particular, un hidroxid metalic alcalin, de exemplu NaOH, KOH sau LiOH, cu gruparea hidroxil protejată corespunzătoare fiind eliberată simultan.
O grupare amino protejată este eliberată de o manieră care diferă în funcție de natura grupării protectoare, de preferință folosind solvoliza sau reducerea. Alcoxicarbonilamino inferior, ca tert-butoxicarbonilamino, poate fi clivat în prezența acizilor, de exemplu acizi minerali, de exemplu acid hidrohalic, ca acidul hidrocloric sau hidrobromic, în particular acid hidrobromic, sau a acidului sulfuric sau fosforic, de preferință a acidului hidrocloric, sau a acizilor organici relativ puternici, ca acidul formic, tricloroacetic sau trifluoroacetic, în solvenți polari, de exemplu apă sau acid carboxilic, ca acid acetic sau formic, halohidrocarburi, ca alcani inferiori clorinați, de exemplu diclormetan sau cloroform, sau eteri, preferabil eteri ciclici, ca dioxan, sau în acizi carboxilici organici care sunt în stare lichidă la temperatura de reacție, fără solvent, de exemplu în acid formic. 2-halo-alcoxicarbonilamino inferior (după transformarea grupării 2-bromo-alcoxicarbonilamino inferior într-o grupare 2-iodo-alcoxicarbonilamio inferior), aroilmetoxicarbonilamino sau 4-nitrobenziloxicarbonil-amino pot, de exemplu, să fie clivați prin tratare cu un agent reducător adecvat, cum ar fi zincul, în prezența unui acid carboxilic adecvat, cum ar fi acid acetic apos.
Aroilmetoxicarbonilamino poate să fie, de asemenea, clivat prin tratare cu un reactiv nucleofilic, care formează sare, cum ar fi triofenoxid de sodiu, și 4-nitrobenziloxicarbonilamino, de asemenea prin tratare cu un ditionit metalic alcalin, de exemplu ditionit de sodiu. Grupările substituite sau nesubstituite, difenil-metoxicarbonilamino, te/ț-alcoxicarbonilamino inferior sau 2-(silil tri-substituit)-alcoxicarbonilamino inferior, ca 2-trAalchilsilil inferior-alcoxicarbonilamino inferior, pot fi clivate prin tratare cu un acid adecvat, de exemplu acid formic sau trifluoroacetic, de exemplu într-o hidrocarbură halogenată, ca clorură de metilen sau cloroform (în particular, dacă hidroxilul care este protejat simultan cu benzii nu trebuie eliberat), 1-aril-alcoxicarbonilamino inferior, cum ar fi benziloxicarbonilamino substituit sau nu, poate, de exemplu, să fie clivat prin hidrogenoliză, adică prin tratarea cu hidrogen în prezența unui catalizator de hidrogenare adecvat, precum un catalizator de paladiu, de exemplu atașat la un material de suport, precum carbon, de preferință în solvenți polari, ca di-alchil inferior-alcanoliamidă inferioară, de exemplu dimetilformamide, eteri, precum eteri ciclici, de exemplu dioxan, esteri, precum alchil inferior-alcanoați inferiori, de exemplu acetat de etil, sau alcooli, precum metanol, etanol sau propanol inferior, metanolul fiind preferat în mod deosebit, de exemplu, la temperatura camerei, triarilmetilamino sau formilamino substituiți sau nu, pot fi clivați, de exemplu prin tratare cu un acid,
RO 119413 Β1
1110 precum un acid mineral, de exemplu acid hidrocloric, sau un acid organic, de exemplu acid formic, acetic sau trifluoroacetic, în prezența apei, și trifenilaminometilul poate fi clivat, în particular, prin hidrogenoliză, folosind un metal prețios sau un oxid de metal prețios pe post de catalizator, precum platină, paladiu sau, în particular, hidroxid de paladiu, cu catalizatorul de preferință atașat la un suport material, precum carbon, gel de siliciu sau oxid de aluminiu, în solvenți inerți, precum ester, sau preferabil un alchil inferior-alcanoat inferior, precum acetat de etil, la temperaturi între 2O...8O°C, în particular între 5O...7O“C, sub presiune mare, dacă este necesar, de exemplu între 1 ...10 bar, și o grupare care este protejată, precum sililamino poate fi eliberată, de exemplu, prin hidroliză sau alcooliză. O grupare amino care este protejată de 2-haloacetil, de exemplu 2-cloroacetil, poate fi eliberată prin tratare cu tiouree, în prezența unei baze, sau cu o sare tiolată, precum un tiolat metalic alcalin al tioureei, și solvolize corespunzătoare, precum alcoolize sau hidrolize, ale produsului de substituire rezultant. O grupare amino care este protejată de 2-(silil tri-substituit)-alcoxicarbonil inferior, precum 2-tri-alchilsilil inferioralcoxicarbonil inferior, poate fi, de asemenea, transformată într-o grupare amino liberă, prin tratare cu o sare fluorurată care formează anioni, a acidului hidrofluoric, așa cum s-a indicat mai sus, în concordanță cu eliberarea unei grupări carboxil protejate corespunzătoare. Silii, precum trimetilsilil sau tert-butildimetilsilil, care este atașat direct la un heteroatom, precum hidrogen, poate fi, de asemenea, detașat cu ioni de fluor, de preferință folosind o fluorură a unei baze de hidrogen, cuaternare organice, precum fluorură de tetra-alchilamoniu inferior sau fluorură de frZ-alchilaril inferior-alchilamoniu inferior, de exemplu fluorură de tetraetilamoniu sau de tetrabutilamoniu, în prezența unui solvent polar aprotic, precum sulfoxid dimetil sau N,N-dimetilacetamidă, sau, în particular, a unui eter, precum tetrahidrofuran, la temperaturi între O...5O°C, în particular, de exemplu, la temperatura camerei.
Radicalul amino, care este protejat sub forma unei grupări azido, este transformat în amino liber, de exemplu, prin reducere, de exemplu prin hidrogenare catalitică cu hidrogen în prezența unui catalizator de hidrogenare, precum oxid de platină, paladiu sau nichel Raney, prin reducere cu compuși mercapto, precum ditiotreitol sau mercaptoetanol, sau prin tratare cu zinc, în prezența unui acid, precum acidul acetic. Hidrogenarea catalitică este efectuată, de preferință, într-un solvent inert, precum o hidrocarbură halogenată, de exemplu clorură de metilen, sau în apă sau un amestec de apă și solvent organic, precum un alcool sau dioxan, la aproximativ 2O...25°C sau alte temperaturi (în timpul răcirii sau încălzirii).
O grupare hidroxil sau o grupare mercapto care este protejată de o grupare acil adecvată, o grupare frZ-alchilsilil inferior sau de o grupare substituită sau nu de 1 -arii (precum 1 -fenil) -alchil inferior este eliberată, într-un mod asemănător, către o grupare amino protejată corespunzătoare. O grupare hidroxil sau o grupare mercapto, care este protejată de 2,2-dicloroacetil este eliberată, de exemplu, prin hidroliză bazică, în timp ce o grupare hidroxil sau o grupare mercapto care este protejată de un radical hidrocarburile tert-alchil inferior sau de 2-oxo- sau 2-t/a-alifatic sau -cicloalifatic, este eliberată prin acidoliză, de exemplu prin tratare cu un acid mineral sau un acid carboxilic puternic, de exemplu acid trifluoroacetic. O grupare hidroxil care este protejată de benziloxi este eliberată prin hidrogenoliză, adică prin tratare cu hidrogen, în prezența unui catalizator de hidrogenare adecvat, precum catalizator de paladiu, de exemplu atașat la un suport material, precum cărbune, de preferință în solvenți polari, precum di-alchil inferior-alcanoilamide, de exemplu dimetilformamide, eteri precum eteri ciclici, de exemplu dioxan, esteri, precum alchilalcanoați inferiori, de exemplu acetat de etil, hidrocarburi clorurate, precum diclormetan, sau alcooli, precum metanol, etanol sau propanol, metanolul fiind preferat în mod deosebit, sau amestecuri de doi sau mai mulți dintre acești solvenți, la temperatura camerei. Gruparea mercapto, care este protejată de piridilfenilmetil, poate fi eliberată de săruri de mercur (II), la pH 2-6 sau de zinc/acid acetic sau reducere electrolitică, acetamidometil și /zo-butirilamidometil, de exemplu, prin reacție cu săruri de mercur (II), la pH 2-6,
1115
1120
1125
1130
1135
1140
1145
1150
1155
RO 119413 Β1
2-cloroacetamidometil, de exemplu, de 1-piperidinotiocarboxamidă, S-etilio, S-te/i-butilio și Ssulfo, de exemplu, prin tioliză cu tiofenol, acid tioglicolic, tiofenoxid de sodiu sau 1,4-ditiotreitol. Două grupări hidroxil sau o grupare amino adiacentă și o grupare hidroxil, care sunt protejate împreună cu ajutorul unei grupări protectoare bivalente, de exemplu o grupare metilen care este substituită o dată sau de două ori de alchil inferior, precum alchiliden inferior, de exemplu izopropilidena, cicloalchilidena, de exemplu ciclohexilidena, sau benzilidena, pot fi eliberate prin solvoliză acidă, în special în prezența unui acid mineral sau a unui acid organic puternic. O grupare tri-alchilsilil inferior este, de asemenea, detașată prin acidoliză, de exemplu de acid mineral, de preferință acid hidrofluoric, sau un acid carboxilic puternic. Gruparea hidroxil poate fi, de asemenea, eliberată din fr/'-alchilsililoxi inferior prin tratarea cu o sare fluorurată, care produce anioni, a unui acid hidrofluoric, precum o fluorură metalică alcalină, de exemplu fluorură de sodiu sau de potasiu, în absența sau prezența unui polieter macrociclic („eter coroană) sau cu o fluorură a unei baze cuaternare organice, precum fluorură de tetra-alchilamoniu inferior sau fluorură de fr/-alchilariI inferior-alchilamoniu inferior, de exemplu fluorură de tetraetilamoniu sau fluorură de tetrabutilamoniu, în prezența unui solvent polar aprotic, precum dimetil sulfoxid sau Ν,Ν-dimetilacetamidă. 2-halo-alcoxicarbonil inferior este îndepărtat de agenții reducători susmenționați, de exemplu prin reducerea metalului, precum zinc, săruri reducătoare ale metalelor, precum săruri de crom (II), sau de compuși sulfurici, de exemplu ditionită de sodiu sau, de preferință, sulfit de sodiu și disulfit de carbon, grupările hidroxil esterificate, de exemplu alcanoiloxi inferior, precum acetiloxi, pot fi, de asemenea, eliberate cu esterazele, în timp ce grupările amino acilate pot, de exemplu, să fie eliberate folosind peptidaze adecvate.
Temperaturile pentru eliberarea grupărilorfuncționale protejate sunt, de preferință, între -80°C și temperatura de fierbere a amestecului de reacție, în particular între -80 și 110°C; se preferă, în mod special, temperaturi între -20 și 50°C, de exemplu între 10 și 35°C, cum ar fi, de exemplu, la temperatura camerei, sau începând de la 80°C până la temperatura de fierbere a amestecului de reacție, de exemplu la aproximativ 100°C.
Când sunt prezente mai multe grupări funcționale, grupările protectoare sunt selectate astfel, încât mai mult de o asemenea grupare poate fi detașată simultan, de exemplu acidolitic, prin tratare cu acid trifluoracetic sau cu hidrogen și un catalizator de hidrogenare, precum catalizatorul de cărbune/paladiu. Invers, grupările pot fi de asemenea selectate, astfel încât să nu poată fi detașate toate deodată, ci, în schimb, într-o catenă dorită, cu intermediarii corespunzători, fiind gata obținuți.
în procedeul de preparare a derivaților izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform invenției, pot fi luate măsuri suplimentare, cum ar fi grupările funcționale ale compușilor de început care nu vor participa la reacție, pot fi neprotejate sau sub formă protejată, de exemplu protejate de una sau mai multe grupări protectoare specificate la procedeul a). Grupările protectoare pot fi detașate, pe de-a întregul sau doar în parte, folosind una din căile specificate la procedeul e).
Sărurile derivaților izosteri cu formula I care au cel puțin o grupare care formează sare, pot fi preparate într-o manieră cunoscută. Astfel, sărurile derivaților izosteri cu formula I având grupări acide pot fi formate, de exemplu, prin tratarea cu compuși metalici, precum săruri ale metalelor alcaline ale acizilor carboxilici organici, de exemplu sarea de sodiu a acidului 2-etilhexanoic, cu compuși anorganici ai metalelor alcaline sau ai metalelor pământoase, precum hidroxizii corespunzători, carbonați sau carbonați acizi, precum hidroxid de sodiu sau de potasiu, carbonat sau carbonat acid, cu compușii de calciu corespunzători sau cu amoniu, sau cu o amină organică adecvată, în cantități stoechiometrice, sau folosind numai un mic exces de agent formator de sare. Săruri de adiție acidă ale derivaților izosteri cu formula I sunt obținute— printr-un procedeu obișnuit, de exemplu prin tratare cu un acid sau cu un reactiv cu schimb de anioni. Sărurile interne ale derivaților izosteri cu formula I care conțin grupări formatoare de
RO 119413 Β1
1210 sare, acide și bazice, de exemplu o grupare carboxilică liberă și o grupare amino liberă, pot fi formate, de exemplu, prin neutralizarea sărurilor, precum săruri de adiție de acid, la punctul izoelectric, de exemplu utilizând baze slabe, sau prin tratare cu schimbători de ioni.
Sărurile pot fi transformate în compuși liberi, printr-un procedeu cunoscut; sărurile metalelor și sărurile de amoniu pot fi transformate, de exemplu, prin tratare cu acizi sau schimbători de ioni acizi, și sărurile de adiție de acid pot fi transformate, de exemplu, prin tratare cu un agent bazic adecvat, în particular cu compuși anorganici ai metalelor alcaline sau cu compuși ai metalelor alcalino-pămânioase, precum hidroxizii, carbonații sau carbonații acizi corespunzători, precum hidroxid de sodiu și de potasiu, carbonat sau carbonat acid, cu compuși de calciu corespunzători sau cu amoniac sau cu o amină organică adecvată, în cantități stoechiometrice sau utilizând numai un mic exces de agent formator de sare, de exemplu halohidrocarburile, precum diclormetan, în prezența sau absența apei; sau prin tratare cu schimbători de ioni bazici.
Amestecurile stereoizomere ale derivaților izosteri cu formula I, adică amestecurile diastereomerilor și/sau enantiomerilor, de exemplu amestecurile racemice, pot fi separate în izomerii corespunzători, într-un mod cunoscut, utilizând metode de separare adecvate. Amestecurile diasteromere, de exemplu, pot fi separate în diasteromeri individuali, prin cristalizare fracționată, cromatografie, distribuție în solvent sau alte metode. Racemații pot fi separați unul de celălalt, după transformarea antipozilor optici în diastereomeri, de exemplu prin reacționare cu compuși optic activi, de exemplu acizi sau baze optic active, prin cromatografie pe coloană pe materiale acoperite cu compuși optic activi, sau prin metode enzimatice, de exemplu prin reacția selectivă a unuia dintre cei doi enantiomeri. Această separare poate fi efectuată fie la nivelul uneia dintre materiile prime, fie la nivelul derivaților izosteri cu formula I.
într-un derivat izoster cu formula I, în care unul din radicalii Rn R2 sau R3 sau mai mulți dintre acești radicali sunt substituiți de 1 -fenil-alcoxi inferior, precum benziloxi, radicalul 1 -fenilalcoxi inferior poate fi detașat așa cum s-a descris la procedeul e). Derivații izosteri corespunzători cu formula I sunt obținuți astfel încât în locul 1-fenil-alcoxi inferior este prezent hidroxilul.
într-un derivat izoster cu formula I, poate fi esterificată o grupare carboxil care este prezentă în stare liberă sau sub forma reactivă sau o grupare carboxil esterificată poate fi transformată într-o grupare carboxil liberă.
în scopul esterificării grupării carboxil într-un derivat izoster cu formula I, acidul liber poate fi utilizat sau convertit într-unul din derivații reactivi specificați mai sus, la procedeul a) și poate fi reacționat cu un alcool corespunzător, sau, pentru esterificare, acidul liber sau o sare reactivă, de exemplu sarea de cesiu, poate fi reacționată cu un derivat reactiv al unui alcool. De exemplu, sarea de cesiu a acidului carboxilic poate fi reacționată cu o halogenură sau cu un ester al unui acid sulfonic organic corespunzător alcoolului(cu halogen sau radicalul unui acid sulfonic organic, precum acidul toluensulfonic, în locul grupării hidroxil). Esterificarea grupării carboxil poate fi, de asemenea, efectuată folosind alți agenți de alchilare obișnuiți, de exemplu folosind diazometan, halogenuri de alchil inferior, esteri ai acizilor sulfonici, săruri Meerwein sau 3-ariltriazene 1 -substituite.
în scopul transformării unei grupări carboxil esterificate, într-o grupare carboxil liberă, se poate folosi unul dintre procedeele descrise mai sus, în asociere cu scindarea grupărilor de protecție carboxil, sau se poate folosi hidroliza alcalină în condiții obișnuite, ca cele specificate la procedeul e), preferabil în prezența unui hidroxid metalic alcalin, precum LiOH, în solvenți adecvați, precum alcooli, de exemplu metanol sau etanol, apă sau amestecuri ale acestora.
O grupare alcoxicarbonil inferior-alcoxi inferior, care este prezentă ca substituent, de exemplu al fenilului sau naftilului R2 și/sau R3, poate fi transformată prin reducere, într-o grupare hidroxi-alcoxi inferior (în care radicalul alchil inferior are cel puțin 2 atomi de carbon), prin reducere cu hidrizi complecși care reduc selectiv gruparea carbonil, în condiții de reacție adecvate;' de exemplu folosind LiBH4 în 1,2-dimetoxan, la temperaturi între 0°C și temperatura de reflux, preferabil între 15...30°C.
1215
1220
1225
1230
1235
1240
1245
1250
1255
RO 119413 Β1 într-un derivat izoster cu formula I, o grupare amino sau imino poate fi acilată. Acilarea este efectuată în mod analog cu metodele specificate pentru grupările protectoare.
într-un derivat izoster cu formula I, în care substituenții au semnificațiile menționate și există cel puțin o grupare hidroxil liberă, și grupări funcționale adiționale sunt prezente sub formă protejată, gruparea hidroxil liberă, de exemplu cea de pe tenii sau naftil R2 și/sau fenil sau naftil R3, poate fi eterificată cu ajutorul radicalului unui alcanol inferior, al unui fenil-alcanol inferior, a unui alcoxi inferior-carbonil-alcanol inferior, a unui carbamoil-alcanol inferior, a unui piridil-alcanol inferior, a unui cian-alcanol inferior sau a unui alcoxi inferior-alcanol inferior, cu alcoolii amintiți fiind folosiți, de preferință, sub o formă în care o grupare nucleofugică ce se desprinde este prezentă în locul unei grupări hidroxil, de exemplu precum s-a definit pentru W, în compușii din formula X.
Eterificarea poate fi efectuată în mod analog cu condițiile procedeului e) și este preferabil realizată folosind diazometan sau alchil inferior-, fenil-alchil inferior-, alcoxi inferior-alchil inferior-, carbamoil-alchil inferior-, piridil-alchil inferior-, cian-alchil inferior-sau alcoxi inferioralchil inferior halide sau esteri acizi sulfonici. Reacția este realizată folosind alchil inferior-, fenilalchil inferior-, alcoxi inferior-alchil inferior-, carbamoil-alchil inferior-, piridil-alchil inferior-, cianalchil inferior, sau alcoxi inferior-alchil inferior, halogenuri, precum -ioduri, -bromuri, -cloruri, în prezența bazelor, preferabil o bază hidroxil, precum hidroxid de sodiu sau de potasiu, sau carbonat de sodiu, potasiu, sau cesiu în solvenți sau amestecuri de solvenți adecvate, de exemplu în N,N-d/-alchil inferior-alcanoilamide inferioare, precum dimetilformamida sau dimetilacetamida, cetone, precum alcanone inferioare, de exemplu acetona sau eteri, precum dioxan, sau amestecuri ale acestora, la temperaturi între -10°C și temperatura de reflux, preferabil între O...6O°C, de exemplu între aproximativ O...5O°C.
într-un derivat izoster cu formula I, grupările care sunt prezente și care corespund grupărilor de protecție sau, în plus, radicali R, adecvați, cu excepția hidrogenului, pot fi detașați folosind una dintre căile specificate la procedeul e), în particular prin hidroliză, de exemplu în prezența bazelor, precum hidroxizi ai metalelor alcaline sau alcalino-pământoase, de exemplu hidroxid de sodiu, sau acizi, precum acizi organici sau minerali, de exemplu acid halogenat, precum acid clorhidric. Hidroliză se efectuează în condiții obișnuite, de exemplu în soluție apoasă sau în solvenți anhidri, în particular în eteri, precum dioxan, la temperaturi între -50°C și temperatura de reflux a amestecurilor de reacție corespunzătoare, de exemplu între O...5O°C, preferabil în prezența unui gaz protector, precum argon sau hidrogen, sau prin hidrogenoliză (de exemplu, în cazul radicalilor benziloxicarbonilici), de preferință în solvenți polari, precum alcooli, de exemplu metanol sau etanol, sau a esterilor, precum alchil inferior-alcanoați inferiori, de exemplu acetat de etil, la temperaturile susmenționate și în prezența unor catalizatori de hidrogenare adecvați, precum paladiu, care este de preferință legat de un suport, precum cărbune.
Invenția se referă, de asemenea, la compoziții farmaceutice care cuprind derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei și sărurile acestora cu formula I, în particular cu formula I'.
Derivații izosteri ai substratului aspartat proteazei și sărurile acestora, utilizabili din punct de vedere farmaceutic, conform invenției de față, pot fi folosiți la fabricarea preparatelor farmaceutice care cuprind o cantitate eficace de compus activ împreună (sau într-un amestec) cu o cantitate semnificativă de substanțe purtătoare, utilizabile din punct de vedere farmaceutic, solide sau lichide, organice sau anorganice.
Preparatele farmaceutice conform invenției sunt cele pentru administrare enterică (nazal, rectal, oral) sau parenterală (intramuscular sau intravenos) la mamifere (om sau animale) și cuprind o doză eficientă din compusul farmacologic activ, singur sau împreună cu o cantitate semnificativă de purtător utilizabil farmaceutic.
Doza de derivat izoster activ depinde de speciile de mamifere, de greutatea corpului, de vârstă și de individ, de circumstanțele farmacocinetice individuale, de boală și de modul de administrare.
RO 119413 Β1
1310
Invenția se referă, de asemenea, la preparatele farmaceutice și la utilizarea lor, la fabricarea unui medicament pentru tratarea bolilor provocate de retroviruși, de exemplu SIDA sau stadiile sale preliminare, în particular, când HIV-2 sau, în special, HIV-1 cauzează boala, sau, în plus, pentru tratarea bolilor analoage, sau a stadiilor lor preliminare, la mamifere (cu excepția omului), care sunt provocate, de exemplu, de SIV la maimuțe sau FIV la pisici, în care o cantitate este eficientă terapeutic împotriva bolilor retrovirale, precum SIDA sau stadiile sale preliminare, sau bolilor analoage la mamifere (cu excepția omului), dintr-un derivat izoster cu formula I sau, în particular, I', este inclusă într-un preparat farmaceutic ce este adecvat administrării la un mamifer, în particular la om, pentru tratarea unei boli retrovirale, precum SIDA sau, în plus, boli analoage la alte mamifere decât omul, sau în care o cantitate eficientă terapeutic dintr-un derivat izoster cu formula I sau, în particular Γ, este administrată, în asociație cu metoda de tratament, la un mamifer, de exemplu la oameni, care, pe baza uneia dintre bolile amintite, în particular SIDA sau stadiile sale preliminare, sau, în plus, bolile corespunzătoare la alte mamifere decât omul, presupune un tratament de această natură, într-o cantitate care este eficientă terapeutic împotriva bolilor retrovirale, precum SIDA, sau, în plus, corespunzător altor mamifere decât omul. Cantitățile dozajelor pentru administrarea la mamifere, de exemplu la un om, în greutate de aproximativ 70 kg, sunt între aproximativ 3 mg...10 g, preferabil între 20 mg...4 g, de exemplu între aproximativ 100 mg...2,5 g per persoană pe zi, distribuite, preferabil, în 1 -3 doze individuale care pot, de exemplu, să fie egale. De regulă, copiilor li se administrează jumătate din doza pentru adulți. “Eficient terapeutic” înseamnă, în particular, că atacul bolii poate fi întârziat în comparație cu pacienții netratați, adică cel puțin un simptom poate fi întârziat sau atenuat, cel puțin un tip de celule (de exemplu celulele umane CD4) poate fi protejat total sau parțial de boală, sau boala poate fi chiar vindecată complet.
Preparatele farmaceutice cuprind aproximativ între 1%...95%, preferabil între 20%...90%, compus activ. Preparatele farmaceutice conform invenției pot, de exemplu, să fie prezente sub formă de unitate de dozaj de preparat, precum fiole, flacoane, supozitoare, tablete acoperite, tablete sau capsule.
Preparatele farmaceutice din invenția de față sunt realizate prin procedee cunoscute, de exemplu folosind procedee convenționale de solubilizare, liofilizare, amestecare, granulare sau acoperire.
Se folosesc, de preferință, soluții ale compusului activ și, de asemenea, suspensii sau dispersii, în particular soluții, dispersii sau suspensii apoase izotonice, de exemplu, în cazul preparațiilor liofilizate, care cuprind susbstanța activă singură sau împreună cu un purtător, de exemplu manitol, pentru preparare înainte de utilizare.
Preparatele farmaceutice pot fi sterilizate și/sau pot cuprinde substanțe auxiliare, de exemplu conservanți, stabilizatori, agenți de reticulare și/sau emulgatori, solubilizatori, săruri pentru reglarea presiunii osmotice și/sau tampoane, și sunt produse prin procedee cunoscute, de exemplu procede convenționale de solubilizare sau liofilizare. Soluțiile menționate pot cuprinde substanțe care măresc viscozitatea, precum carboximetilceluloză de sodiu, carboximetilceluloză, dextran, polivinilpirolidonă sau gelatină.
Suspensiile în ulei conțin drept componentă uleioasă, uleiurile vegetale, sintetice sau semi-sintetice care sunt de regulă folosite la injecții. Uleiurile de această natură sunt, în particular, esteri ai acizilor grași lichizi care, drept componentă acidă, conțin un acid gras cu catenă lungă având 8-22, în particular 12-22 atomi de carbon, de exemplu acid lauric, tridecanoic, miristic, pentadecanoic, palmitic, margaric, stearic, arachidonic, behenic, sau acizi nesaturați corespunzători, de exemplu acid oleic, elaidic, erucic, brasidic sau linoleic, cu sau fără adăugare de antioxidanți, de exemplu vitamina E, //-caroten sau 3,5-d/-te/f-butil-4-hidroxitoluen. Componenta alcoolică a acestor esteri ai acizilor grași are cel mult 6 atomi de carbon și este monosau poli-hidroxilică, de exemplu alcool monohidroxilic, dihidroxilic sau trihidroxilic, de exemplu
1315
1320
1325
1330
1335
1340
1345
1350
1355
RO 119413 Β1 metanol, etanol, propanol, butanol sau pentanol, sau izomerii acestora, în special glicol și glicerina. Esterii acizilor grași care vor fi menționați prin exemple sunt: oleat de etil, miristat de izopropil, palmitat de izopropil, “Labrafil M 2375 (trioleat de polioxietilenglicerol de la Gattefose, Paris), “Miglyol 812 (trigliceridă de acizi grași saturați cu lungimea catenei între C8 - C12, de la Huls AG, Germania), în mod particular, uleiuri vegetale precum ulei de bumbac, de migdale, de măsline, de ricin, de susan, de soia, de nuci.
Producerea preparatelor injectabile este efectuată în manieră obișnuită, în condiții sterile, la fel ca și introducerea lor în fiole sau flacoane și sigilarea containerelor.
Preparatele farmaceutice pentru administrare orală pot fi obținute prin combinarea compusului activ cu substanțe purtătoare solide, prin granularea unui amestec obținut și, dacă se dorește sau dacă este necesar, după ce s-au adăugat substanțele auxiliare adecvate, se prelucrează în tablete, miezuri de tablete acoperite sau capsule, sau prin prepararea dispersiilor, preferabil cu fosfolipide, care sunt umplute în fiole de sticlă. în același timp, compușii activi pot fi, de asemenea, încorporați în suporturi sintetice care îi eliberează progresiv și îi lasă să difuzeze.
Substanțe purtătoare adecvate sunt, în particular, substanțe de umplutură, precum zaharuri, de exemplu lactoză, sucroză, manitol sau sorbitol, preparate de celuloză și/sau fosfați de calciu, de exemplu fosfat tricalcic sau fosfat acid de calciu și, în plus, lianți, precum paste de amidon utilizând, de exemplu amidon de porumb, de grâu, orez sau cartof, gelatină, tragacant, metilceluloză, hidroxipropilmetilceluloză, carboximetilceluloză de sodiu și/sau polivinilpirolidonă și/sau, dacă se dorește, dezintegranți, precum amidonurile descrise mai sus. Adjuvanții sunt, în primul rând, regulatori de curgere și lubrifianți, de exemplu acid silicic, talc, acid stearic sau săruri ale acestora, precum stearat de magneziu sau de calciu și/sau polietilen glicol. Miezurile tabletelor acoperite sunt prevăzute cu acoperiri adecvate care sunt, sau nu sunt, rezistente la sucurile gastrice, între altele, cu soluții de zahăr concentrat, care conțin sau nu gumă arabică, talc, poilvinilpirolidonă, polietilen glicol și/sau dioxid de titan, utilizându-se soluții de lacuri în solvenți organici adecvați sau, pentru prepararea acoperirilor rezistente la sucuri, soluții de preparate celulozice adecvate, precum ftalat de etilceluloză sau ftalat de hidroxipropilmetilceluloză.
Capsulele sunt capsule tari din gelatină și, de asemenea, capsule închise moi, realizate din gelatină și un emolient precum glicerină sau sorbitol. Capsulele tari pot conține un derivat izoster activ sub formă granulată, de exemplu conținând substanțe de umplutură precum lactoza, lianți precum amidonuri și/sau glidanți, precum talc sau stearat de magneziu, și stabilizatori. în capsule, compusul activ este, de preferință, în suspensie sau dizolvat în substanțe auxiliare uleioase, precum uleiurile vegetale, sintetice sau semi-sintetice. Uieiurile de această natură, care vor fi menționate, sunt esteri grași lichizi care conțin, drept componentă acidă, un acid gras cu catenă lungă, de exemplu având 8-22, în particular 12-22 atomi de carbon, de exemplu acid lauric, acid tridecanoic, miristic, pentadecanoic, palmitic, margaric, stearic, arahidonic, behenic sau acizi nesaturați corespunzători, de exemplu acid oleic, elaidic, erucic, brasidic sau linoleic, cu sau fără adăugare de antioxidanți, de exemplu vitamina E, β-caroten sau 3,5-c//-te/f-butil-4-hidroxitoluen. Componenta alcoolică a acestor esteri ai acizilor grași are cel mult 6 atomi de carbon și este un alcool mono- sau poli-hidroxilic, de exemplu alcool monohidroxilic, dihidroxilic sau trihidroxilic, de exemplu metanol, etanol, propanol, butanol sau pentanol sau izomerii lor, în special etilen glicol sau propilen glicol și glicerină. Esterii acizilor grași, care vor fi menționați în exemple, sunt: oleat de etil, miristat de izopropil, palmitat de izopropil, Labrafil M 2375“ (trioleat polioxietilenglicerol de la Gattefosse, Paris), „Migliol 812 (trigliceridă a acizilor grași saturați, cu lungimea lanțului între C8-C12, de la Huls AG, Germania), în particular uleiuri vegetale, precum ulei de bumbac, de migdale, de măsline, de ricin, de nuci, de soia și, în special, de susan. Se poate folosi, de asemenea, ulei de parafină. Se pot adăuga
RO 119413 Β1
1405 stabilizatori, precum emulgatori, agenți de umectare sau agenți activi de suprafață, lianți, precum paste de amidonuri, de exemplu paste de amidon, de porumb, de grâu, de orez sau de cartofi, gelatină, metilceluloză, hidroxipropilmetilceluloză, carboximetilceluloză de sodiu, ciclodextrine și/sau polivinilpirolidonă și/sau agenți anti-bacterieni. Emulgatori adecvați sunt, în particular, acidul oleic, agenți activi de suprafață ne-ionici, de tipul ester polihidroxialcoolic de acid gras, precum monolaurat de sorbitan, oleat, stearat sau palmitat de sorbitan, tristearat sorbitan sau trioleat sorbitan, aducți de polioxietilenă ai esterilor acizilor grași cu polietilen glicol, precum stearat de polioxietilenglicol-(300 sau 400), stearat de polietilenglicol-2000, bloccopolimeri etilenoxid-propilenoxid, în particular tipul ®Pluronic (Wyandotte Chem. Corp.·, marcă comercială a BASF, Germany) sau ®Synperonic (ICI). Dacă nu este solubilă în uleiurile menționate, substanța activă este prezentă, de preferință, sub formă de suspensie, de exemplu cu substanța activă având o mărime a particulelor între aproximativ 1-100 pm.
Coloranți sau pigmenți pot fi adăugați tabletelor sau acoperirii tabletelor acoperite și învelișului capsulei, de exemplu pentru identificarea sau marcarea diferitelor doze de compus activ.
Derivații izosteri cu formula I pot fi prezenți fie singuri, fie în combinație cu alți compuși care sunt eficienți împotriva retrovirușilor și folosiți așa cum s-a menționat mai sus.
Invenția se referă, de asemenea, la o metodă pentru tratarea bolilor cauzate de retroviruși, de exemplu SIDA sau stadiile preliminare ale acesteia, în particular când HIV-2 sau, în special HIV-1 provoacă boala, sau, în plus, boli analoage, sau stadiile lor preliminare, la alte mamifere decât omul, de exemplu cele cauzate de SIV la maimuțe sau FIV la pisici, care cuprinde administrarea unei combinații, care este eficientă terapeutic împotriva bolilor retrovirale, precum SIDA și stadiile preliminare care conține: a) un derivat izoster cu formula I sau, în particular Γ (sau mai mulți din acești compuși) și b) alt compus, sau doi sau mai mulți, care este/sunt eficienți împotriva retrovirușilor, în particular mai mulți sau, preferabil, unul dintre inhibitorii, menționat mai sus ca fiind preferat, revers transcriptazei sau, în particular, al aspartat proteazei retrovirale, care este, de exemplu, inclusă într-un produs sau într-o preparație farmaceutică care este adecvată pentru administrarea la un mamifer, în particular, omul, care necesită un astfel de tratament, pentru tratarea unei boli retrovirale ca SIDA sau alte boli analoage la alte mamifere decât omul, într-o cantitate care este eficientă terapeutic împotriva bolilor retrovirale precum SIDA sau stadiile sale. Cantitatea dozelor compușilor activi individuali combinați, care vor fi administrați la mamifere, de exemplu, la oameni cu greutatea de aproximativ 70 kg, este între 3 mg și 10 g, preferabil între 20 mg și 4 g, de exemplu 50 mg...2,5 g per persoană pe zi, preferabil împărțită între 1 -3 doze individuale care pot fi egale ca mărime. De regulă, copiilor li se administrează jumătate din doza adulților.
Expresia “eficient terapeutic” înseamnă, în particular, că atacul bolii respective poate fi întârziat în comparație cu pacientul netratat, că cel puțin un simptom poate fi întârziat sau atenuat, că cel puțin un tip de celule (de exemplu celulele umane CD4) poate fi protejat total sau parțial de boală, sau că boala poate fi chiar complet vindecată.
Invenția se referă, de asemenea, la compoziții farmaceutice care cuprind:
a) cel puțin un derivat izoster cu formula I sau o sare a acestuia, cu condiția ca o grupare formatoare de sare să fie prezentă, și
b) unul, doi sau mai mulți alți compuși activi, care sunt eficienți împotriva retrovirușilor, în particular HIV, precum HIV-1 sau HIV-2, selectați, în particular, dintre inhibitorii revers transcriptazei susmenționați sau, în special, dintre ceilalți inhibitori ai aspartat proteazelor susmenționați în prezența sau absența unuia sau mai multor purtători aor-optahiii din punct de vedere farmaceutic, drept preparate combinate pentru utilizare simultană sau eșalonată, într-o perioadă de timp care este suficient de mică pentru ca compușii activi ai componentelor a) și b) să fie
1410
1415
1420
1425
1430
1435
1440
1445
1450
RO 119413 Β1 prezenți simultan în pacient (de exemplu în sânge), pentru tratarea unei boli retrovirale care răspunde la compuși activi de acest tip. Conceptul de bază este că, în acest mod, sinergismele terapeutice pot avea loc.
Invenția se referă, de asemenea, la preparate farmaceutice care cuprind (preferabil împreună) o cantitate activă antiretrovirală de a) cel puțin, (și preferabil) un derivat izoster cu formula I și b), unul sau mai mulți dintre compușii menționați care sunt eficienți împotriva retrovirușilor, împreună cu sau fără unul sau mai mulți purtători acceptabili farmaceutic, cu compușii activi descriși mai sus, în fiecare caz ca fiind preferați.
Invenția se referă, de asemenea, la utilizarea unei combinații constituite din a), un derivat izoster cu formula I și b), unul sau mai mulți dintre compușii activi susmenționați, care sunt eficienți împotriva retrovirușilor (în particular HIV, precum HIV-1 sau HIV-2), pentru producerea de preparate farmaceutice care să fie folosite drept compoziții împotriva infecțiilor retrovirale, în particular cele cauzate de HIV, precum HIV-1 sau HIV-2, cu compușii menționați în fiecare caz ca fiind preferați.
Invenția se referă, de asemenea, la posibilitatea ca produsul sau amestecul susmenționat să fie folosit într-o metodă pentru tratamentul terapeutic al oamenilor sau animalelor.
în acest context, compoziția și preparatele farmaceutice cu componente individuale sau cu amestecuri de compuși, destinate administrării simultane sau treptate, sunt analoage celor ale preparatelor farmaceutice susmenționate pentru derivații izosteri activi cu formula I.
în fiecare caz, este preferată, în mod deosebit, o combinație compusă din:
a) derivat izoster cu formula I, având formula chimică 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă și
b) unul sau mai mulți dintre compușii activi saquinavir sau indinavir.
Derivații izosteri activi cu formula I și/sau ceilalți compuși activi, care sunt eficienți împotriva retrovirușilor, pot fi înlocuiți, în fiecare caz, de către sărurile lor utilizabile din punct de vedere farmaceutic.
în continuare, se prezintă materiile prime și/sau intermediarii utilizați pentru obținerea derivaților izosteri ai substratului aspartat proteazei, precum și procedeele de preparare a acestora. De preferință, se utilizează acei compuși ca materii prime și sunt alese acele condiții de reacție, care să poată fi utilizați pentru obținerea acelor derivați izosteri pentru care s-a specificat mai sus că sunt preferați.
Toate materiile prime pot fi preparate în mod analog cu metodele specificate în exemple. Totuși câteva precizări sunt necesare.
în prepararea tuturor materiilor prime, grupările funcționale libere care nu participă la reacția respectivă pot fi neprotejate sau, în caz de necesitate, pot fi sub formă protejată, de exemplu protejate de grupările protectoare menționate mai sus la procedeul a), grupări ce pot fi introduse în stadii adecvate în mod analog cu metodele menționate. Grupările protectoare sau cele protejate pot fi eliberate la momente potrivite, în mod analog cu căile descrise la procedeul e). Materiile prime și intermediarii, care au grupări formatoare de sare, pot fi utilizate, în fiecare caz, drept compuși liberi sau săruri, iar sărurile pot, în orice stadiu, să fie preparate sau transformate din nou în compuși liberi.
în mod analog cu etapele procedeului descris mai sus pentru măsuri suplimentare pentru proces, radicalii R2 fenil substituit cu hidroxi și/sau R3 fenil din intermediari pot fi eterificați, în stadii adecvate ale reacției, cu radicalul unui alcanol inferior, fenil-alcanol inferior, alcoxi inferior-carbonil-alcanol inferior, carbamoil-alcanol inferior, piridil-alcanol inferior, cian-alcanol inferior sau al unui alcoxi inferior-alcanol. Eterificarea este efectuată utilizând de preferință diazometan sau alchil inferior-, fenil-alchil inferior-, alcoxicarbonil inf erior-alchil inferior-, carbamoil-alchil inferior-, piridil-alchil inferior, cian-alchil inferior-sau alcoxi inferior-alchil inferior-halogenuri sau esteri ai acizilor sulfonici. Se preferă reacțiile cu alchil inferior-, fenil-alchil inferior-, alcoxiRO 119413 Β1
1505 carbonil inferior-alchil inferior-, carbamoil-alchil inferior-, piridil-alchil inferior-, cian-alchil inferiorsau alcoxi inferior-alchil inferior-halogenuri, precum ioduri, bromuri sau cloruri, în prezența bazelor, preferabil o bază de tip hidroxil, în particular un hidroxid metalic bazic, precum hidroxid de sodiu sau de potasiu, sau, mai ales, în prezența unui carbonat metalic sau carbonat acid, precum carbonat de sodiu, de potasiu sau de cesiu, în solvenți sau amestecuri de solvenți adecvate, de exemplu N,N-d/-alchil inferior-alcanoilamide inferioare, precum dimetilformamida sau acetamida, cetone, precum alcanone inferioare, de exemplu acetona, sau eteri, precum dioxan, sau amestecuri ale acestora, la temperaturi între -10°C și temperatura de reflux, preferabil între O...6O°C, de exemplu între 0...50Ό.
în intermediarii în care cel puțin unul dintre radicalii R2 sau R3 este o grupare fenil și/sau unul sau mai multe nuclee de fenil adiționale sunt prezente, fiind posibil ca radicalii fenil să fie substituiți, așa cum s-a descris mai sus, un radical fenil adecvat poate fi redus selectiv, în stadii potrivite ale reacției, în mod analog cu etapele procedeului descris mai sus, pentru măsuri suplimentare ale procedeului;radicalul fenil adecvat poate să fie redus, adică să fie hidrogenat, ajungându-se la radicalii ciclohexil corespunzători. Hidrogenarea se efectuează, de preferință, în prezența unui catalizator care permite hidrogenarea selectivă a legăturilor duble, în prezența legăturilor peptidice, în particular a unui catalizator ce constă în oxizi ai metalelor grele, precum un catalizator de oxid Rh(l I l)/Pt(VI) (conform Nishimura), în solvenți adecvați, în particular apă, alcooli, precum metanol sau etanol, esteri, precum acetat de etil, sau eteri precum dioxan, de exemplu în metanol, la temperaturi între O...15O°C, preferabil între 10...50’0, de exemplu la temperatura camerei și la presiuni ale hidrogenului între 0,1...50 bar, de exemplu la presiune standard sau la presiune scăzută.
Cu condiția ca stereochimia atomilor asimetrici de carbon să nu fie definită direct prin alegerea simbolurilor de legătură corespunzătoare, configurația atomilor asimetrici de carbon, care este preferată în fiecare caz, este arătată în formule prin indicarea configurației, selectată dintre (S), (R) și (R,S), care este dată în paranteze, în fiecare caz. în plus, alți izomeri sau amestecuri de izomeri pot fi, de asemenea, prezente în locul acestora.
Acizii carboxilici cu formulele II și IV, sau derivații lor reactivi, sunt cunoscuți și sunt disponibili în comerț sau pot fi preparați prin metode cunoscute.
Compușii cu formulele III și III' sunt cunoscuți sau pot fi preparați prin procedee cunoscute. De exemplu, ei pot fi obținuți din compuși cu formula:
/S.C00H
Ț(S) (XI)
HN Pa în care R2 are semnificațiile derivaților izosteri cu formula I, iar Pa este o grupare protectoare a grupării amino, în particular alcoxicarbonil inferior, precum tert-butoxicarbonil, sau 1 -fenil-alcoxicarbonil inferior, precum benziloxicarbonil (sau analogi ai acestuia, în care hidrogenul înlocuiește Pa, analogi care pot fi protejați în consecință), care, într-o primă etapă, sunt transformați prin reducere în compuși corespunzători cu formula:
(ΧΠ)
HN
Pa (sau analogul având hidrogen în locul Pa), în care radicalii sunt descriși mai sus.
Reducerea derivaților aminoacizi având formula XI, pentru obținerea aldehidelor corespunzătoare formulei XII, este efectuată, de exemplu, prin reducerea acestora la alcoolii corespunzători și apoi oxidarea acestora din urmă, pentru a forma aldehidele cu formula XII.
1510
1515
1520
1525
1530
1535
1540
1545
1550
RO 119413 Β1
Reducerea la alcooli este efectuată, în particular, prin hidrogenarea halogenurilor acide corespunzătoare sau a altor derivați ai acizilor carboxilici activați, care sunt specificați la procedeul a), sau prin reacționarea derivaților acizilor carboxilici activați ai compușilor cu formula XI, în particular anhidride cu acizi carboxilici organici, preferabil cei care sunt obținuți cu esteri ai acizilor haloformici, de exemplu cloroformiat de izobutil (care sunt obținuți, de preferință, prin reacționarea compușilor cu formula XI în prezența aminelor bazice, de exemplu te-alchilamine inferioare, precum trietilamina, în solvenți organici, precum eteri ciclici, de exemplu dioxan, la temperaturi între -5O...8O°C, preferabil între 0,..50°C), cu hidruri complexe, precum borohidruri metalice alcaline, de exemplu borohidrură de sodiu, în soluție apoasă, în prezența sau absența ultimului solvent organic menționat mai sus, la temperaturi între -5O...8O°C, preferabil între Ο.,.δΟΌ. Oxidarea ulterioară a alcoolilor rezultanți este efectuată, de preferință, utilizând acei agenți de oxidare care transformă selectiv gruparea hidroxil într-o grupare aldehidă, de exemplu acid cromic sau derivații săi, precum cromat de piridină sau cromat terț-butil, acid sulfuric/dicromat, trioxid de sulf în prezența bazelor heterociclice, precum piridină/SO3 (preferabil dizolvată în sulfoxid d/-alchil inferior, precum sulfoxid de dimetil, solvenți aromatici, precum toluen sau amestecuri ai acestor solvenți) și, de asemenea, acid azotic, dioxid de magneziu sau dioxid de seleniu, în apă, solvenți organici sau apoși, precum solvenți halogenați, de exemplu clorură de metilen, carboxamide, precum dimetilformamidă, și/sau eteri ciclici, precum tetrahidrofuran, în prezența sau absența aminelor bazice, de exemplu te-alchil inferior-amine, precum trietilamina, la temperaturi între -70...100°C, preferabil între -7O...5O°C sau -1O...5O°C, după cum se descrie în EPA 0236734, sau prin reacționare cu halogenuri dicarbonilice, precum clorură de oxalil și sulfoxizi d/-alchil inferior, precum dimetil sulfoxid, într-o hidrocarbură halogenată, în prezența unei baze terțiare de azot, precum trietilamina, la temperaturi preferate între -7O...OeC, de exemplu -60°C.
Este, de asemenea, posibilă reducerea compușilor cu formula XI la aldehide, de exemplu prin hidrogenare în prezența unui catalizator de paladiu parțial otrăvit sau prin reducerea esterilor aminoacizilor corespunzători, de exemplu esterii de alchil inferior, precum esterii de etil, cu hidruri complexe, de exemplu borohidruri, precum borohidrură de sodiu sau, preferabil, hidrura de aluminiu, de exemplu hidrura de litiu-aluminiu, hidrura litiu-te-(tert-butoxi) aluminiu sau, în particular, hidrura de diizobutilaluminiu, în solvenți nepolari, de exemplu în hidrocarburi sau solvenți aromatici, precum toluen, la temperaturi între -100...0°C, preferabil între 7O...3O°C, transformând, în consecință, mai întâi produsele în semicarbazone corespunzătoare, de exemplu folosind sărurile acide corespunzătoare ale semicarbazonelor, precum hidroclorura de semicarbazură, în sisteme apoase de solvenți, precum alcool/apă, de exemplu etanol/apă, la temperaturi între -2O...6O°C, preferabil între 1O...3O°C, și apoi reacționând semicarbazona rezultantă cu o aldehidă reactivă, de exemplu formaldehida, într-un solvent inert, de exemplu un solvent organic polar, de exemplu o carboxamidă, precum dimetilformamidă, la temperaturi între -3O...6O°C, preferabil între O...3O°C, și apoi reacționând cu un acid, de exemplu un acid mineral puternic, precum acid halogenat, în soluție apoasă, în absența sau prezența unui solvent care a fost utilizat anterior, la temperaturi între -4O...5O°C, preferabil între -10...30Ό. Esterii corespunzători sunt obținuți prin reacționarea aminoacizilor cu alcoolii corespunzători, de exemplu etanol, în mod analog cu condițiile utilizate la condensare, la procesul b), de exemplu prin reacționare cu halogenuri acide anorganice, precum clorură de tionil, în amestecuri de solvenți organici, precum amestecuri de solvenți aromatici și alcoolici, de exemplu toluen și etanol, la temperaturi între -5O...5O°C, preferabil între -1O...2O°C.
în scopul sintetizării compușilor cu formula III sau III1, compușii cu formula XII sunt apoi reacționați cu un tetraalchilsilan reactiv, preferabil un halometil-te-alchilsilan inferior, precum
RO 119413 Β1 clorometiltrimetilsilan, într-un solvent inert, de exemplu un eter, precum dietil eter, un eter ciclic, 1600 precum dioxan, sau un ester, precum acetat de etil, la temperaturi între -100...50°C, preferabil între -65...40°C, fiind obținuți compuși cu formula:
(ΧΙΠ)
1605 în care R6, R7 și R8 sunt alchil inferior, de exemplu metil, iar restul radicalilor sunt definiți ca mai sus, compușii rezultanți sunt transformați, în prezența unui acid Lewis, precum eterat etil de trifluorură de bor, într-un solvent inert, în particular o hidrocarbură halogenată, precum clorură de metilen sau cloroform, cu tratare ulterioară, în consecință cu o bază apoasă, de exemplu soluție de hidroxid de sodiu, la temperaturi între -3O...8O°C, în particular între 0...50°0, cu eliminare și scindare a grupării protectoare, în compuși oleofinici cu formula:
1610
(XIV)
1615 în care R2 are semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, o grupare protectoare a grupării amino Pa, de exemplu terț-butoxicarbonil, este din nou introdusă în oleofina corespunzătoare, așa cum s-a descris la procedeul a), pentru introducerea grupărilor de protecție ale grupării amino, în particular utilizând o anhidridă acidă într-o hidrocarbură clorurată, precum clorură de metilen sau cloroformul, la temperaturi între -5O...8O°C, în particular între O...35°C, obținând o grupare olefin-amino cu formula:
1620
(XV)
1625 i Pa în care radicalii sunt definiți ca mai sus, dubla legătură este transformată într-un oxiran, folosind de preferință peroxizi selectivi, în particular acizi peroxicarboxilici, de exemplu, acid haloperbenzoic, precum acid m-cloroperbenzoic, într-un solvent organic inert, preferabil o hidrocarbură halogenată, precum clorură de metilen sau cloroform, la temperaturi între -5O...6O°C, în particular între -1O...25°C și, dacă este necesar, se realizează o descompunere diastereomerică, cu obținerea epoxizilor cu formula:
1630
1635
1640 în care radicalii sunt definiți ca mai sus, se adăugă un diester adecvat al acidului malonic, de exemplu dimetil malonat sau dietil malonat, la oleofine, de exemplu prin activarea grupării metilenice a diesterului acidului malonic, cu ajutorul unui metal alcalin, de exemplu sodiu, într-un solvent polar anhidru, precum un alcool, de exemplu metanol sau etanol, la temperaturi între 1645 -5O...8O°C, în particular între O...35°C, iar soluția este tratată cu un acid, de exemplu acid carboxilic, precum acid citric, cu o lactonă cu formula:
RO 119413 Β1 (XVII)
ι Pa în care R9 este alcoxi inferior, de exemplu metoxi sau etoxi, iar radicalii rămași sunt definiți ca mai sus, obținându-se compușii cu formula XVII, care sunt reacționați cu un reactiv care introduce radicalul R3-CH2-, de exemplu cu formula:
R3-CH2-W (XVIII) în care R3 are semnificațiile specificate pentru derivații izosteri cu formula I, iar W este o grupare de scindare nucleofugică, de preferință selectată din hidroxil, care este esterificat cu un acid tare organic sau anorganic, precum hidroxil esterificat cu un acid mineral, de exemplu acid halogenat, precum acidul clorhidric, bromhidric sau iodhidric, cu un acid sulfonic organic tare, precum acidul alcansulfonic inferior care este substituit sau nu, de exemplu, de halogen, precum fluor, sau un acid sulfonic aromatic, de exemplu un acid benzensulfonic care este substituit sau nu de alchil inferior, precum metil, halogen, precum brom, și/sau nitro, de exemplu un acid metansulfonic, trimetansulfonic sau p-toluensulfonic, iar hidroxilul care este esterificat cu acid hidrazoic, în particular bromură, într-un solvent polar anhidriu, de exemplu un alcool, precum etanol, în prezența unui metal alcalin, de exemplu sodiu, la temperaturi între -5O...8O°C, preferabil între O...35°C, pentru a forma compuși cu formula:
I Pa în care radicalii sunt definiți ca mai sus; compușii cu formula XIX sunt hidrolizați și decarboxilați, de exemplu prin hidroliză cu o bază, precum un hidroxid de metal alcalin, de exemplu hidroxid de litiu sau NaOH, la temperaturi între -50...80°C, preferabil între 0...35Ό, într-un solvent organic, de exemplu un eter, precum 1,2-dimetoxietan, sau un alcool, precum etanol, iar decarboxilarea se face prin încălzire într-un solvent inert, preferabil o hidrocarbură, de exemplu o hidrocarbură aromatică, precum toluen, la temperaturi între 40...120°C, preferabil între 70...120°C, obținându-se un compus cu formula:
(XX) i Pa în care radicalii sunt definiți ca mai sus, izomerii rezultanți (R,S,S) și (S,S,S) sunt descompuși prin cromatografie pe coloană, izomerul (R,S,S) este refolosit și, pentru deschiderea nucleului de lactonă, este reacționat cu o bază, precum un hidroxid de metal alcalin, de exemplu hidroxid de litiu sau de sodiu, într-un solvent inert, precum un eter, de exemplu dimetoxietan, sau un
RO 119413 Β1 (XXI)
1700 alcool, precum etanol, pentru a forma un compus cu formula:
*2 T COOH
HN
Pa în care radicalii sunt definiți ca mai sus și se introduce o grupare hidroxil protectoare Py, de exemplu, una din grupările hidroxil protectoare specificate la procedeul a), în particular o grupare tri-alchilsilil inferior, în condițiile deja specificate, în compusul rezultant folosind halo-trialchilsilan inferior corespunzător, de exemplu tert-butildimetilclorosilan, într-un solvent polar, precum <#-alchil-inferior-alcanoilamidă inferioară, precum dimetilformamidă, în prezența unui compus aminic, precum amina ciclică, de exemplu imidazol, la temperaturi între -50...80’0, preferabil între O...35°C, iar gruparea carboxil, care este, de asemenea, sililată în același timp, este eliberată din nou prin reacționare cu o sare metalică bazică, în particular un hidroxid de metal alcalin sau carbonat acid metalic sau, preferabil, un carbonat de metal alcalin, precum carbonat de potasiu, preferabil în alcool, precum metanol sau etanol, un eter ciclic, precum tetrahidrofuran, în apă sau, în particular, un amestec de 2 sau 3 din acești solvenți, la temperaturi între 0...50Ό, în particular între 10...35’0, obținându-se un compus cu formula:
1705
1710
1715
1720 i Pa în care radicalii sunt definiți ca mai sus, iar compușii cu formula III sau ΙΙΓ, având radicalii din procesul a), sunt preparați, de exemplu, dintr-unul din compușii cu formula XXII, prin condensare, cu un compus cu formula V, în care radicalii au semnificațiile date la procedeul c), în condiții analoage celor date la procedeul a), în particular prin reacție in situ, în prezența unui agent de condensare, precum Ν,Ν-diciclohexilcarbodiimidă, cianfosfonat de etil, hexafluorofosfat de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfoniu sau hexafluorofosfat de O-benzotriazol-1-ilΝ,Ν,Ν',Ν'-tetrametiluroniu, o amină împiedicată steric, precum trietilamina sau N-metilmorfolina, și, dacă se dorește, un compus de prevenire a racemizării, precum 1-hidroxibenztriazol, într-un solvent polar, preferabil o amidă acidă, de exemplu o cfl-alchilamino inferior-alcanoilamidă inferioară, precum dimetilformamidă, un eter ciclic, precum tetrahidrofuran, sau nitril, precum acetonitril, la temperaturi între -50...80’0, în particular între 0...35Ό, în atmosferă de gaz protector, precum argon sau azot, și prin scindarea grupării protectoare Pa, în condiții analoage ca cele descrise la procedeul e), (cu condiția ca Pa să nu fie un radical care corespunde radicalului Rn având semnificațiile prezentate mai sus, pentru derivații izosteri cu formula I, care ar conduce direct la compușii cu formula I) și, în final, scindarea grupării Py, în condiții analoage celor descrise la procedeul e). în scopul preparării compușilor cu formula III sau III', este, de asemenea, posibilă condensarea compușilor cu formula XXII, cu compuși care introduc radicalii -HN(CHR4)-CO- (materie primă: aminoacizii corespunzători H2N-(CHR4)-COOH) și -NH-CH2-(CH2)nO-R5 (materie primă: compusul amino corespunzător H2N-CH2-(CH2)n-O-R5) ai compusului cu formula III sau III', în condiții analoage celor specificate pentru procedeul a), preferabil prin reacționarea unui compus care este analog cu compusul cu formula (i) V sau V-, (ii) VII sau VII' sau (iii) IX sau IX', în care este prezent hidrogenul în locul lui R1; cu un compus cu formula (i) VI sau VI’ (corespunde unui compus cu formula XXII ,în care Pa = hidrogen), (ii) VIII sau X,
1725
1730
1735
1740
1745
RO 119413 Β1 unde radicalii rămași au, în fiecare caz, semnificațiile specificate și pot fi, de asemenea, prezente materii prime precum derivații reactivi, în mod analog cu condițiile specificate la (i) procedeul c), (ii) procedeul d) sau (iii) procedeul e), fiind posibilă scindarea grupării protectoare Py din compușii cu formula III sau III', folosind una dintre căile descrise la procedeul e).
Următoarea cale poate fi, de asemenea, urmată în scopul preparării unui compus cu formula XX dintr-un compus susmenționat cu formula XVII.
Hidroliza unui compus racemic cu formula XVII (care poate fi preparat din racematul unui compus cu formula XV, prin racematul corespunzător unui compus cu formula XVI) și decarboxilarea în condiții analoage celor de la hidroliza și decarboxilarea compușilor cu formula XIX, duce la un compus analog compusului cu formula XIX în care lipsesc radicalii R3-CH2- și Rg-(C—O) (în ambele cazuri, în locul lor este prezent un atom de hidrogen) și care este prezent ca racemat (sau ca amestec de diastereomeri, cu condiția ca, să fie prezent în R3 și/sau R9), un centru suplimentar de asimetrie; acest ultim compus este reacționat cu un compus cu formula XVIII, definit ca mai sus, în care W este una din grupările nucleofugice de scindare susmenționate, în particular halo, precum iod, sau, preferabil, brom sau clor, mai întâi prin deprotonizarea ei în prezența unei baze tari, precum o b/(tr/-alchilsilil inferior)amidă de metal alcalin, de exemplu bi(trimetilsilil)amida de litiu, și apoi alchilarea sa cu compusul cu formula R3-CH2-W (obținând, de preferință, compușii cu formula XX [1 '(S),3(R)-(R3-CH2-),5(S)] și [1'(R), 3(S)-(R3-CH2-),5(R)], adică un racemat ce privește atomii de carbon asimetrici amintiți).
Compușii susmenționați cu formula XIV pot fi, de asemenea, prezenți în configurația (R,S), în locul configurației (S) indicate la atomul de carbon care poartă radicalul -NH2, în timp ce compușii formulelor XI, XII și XIII și, în particular, cei din formulele XV, XVI, XVII, XIX, XX, XXI și/sau XXII pot fi, de asemenea, prezenți în configurația (R,S), în locul configurației (S), la atomul de carbon care poartă radicalul Pa-NH. Compușii susmenționați cu formulele XV, XVI și XVII pot fi, de asemenea, prezenți ca racemați. Sunt, de asemenea, posibile alte amestecuri ale antipozilor optici cu formulele indicate. Compușii corespunzători cu formula V, de exemplu, pot fi obținuți din acei racemați sau amestecuri (de exemplu racemați sau amestecuri de antipozi, dacă R, nu conține nici un centru de asimetrie), astfel încât, în acest mod, derivați izosteri cu formula I sau Γ sunt accesibili, în care fie atomul de carbon care poartă R2-CH2- este în configurația (S), atomul de carbon care poartă HO- este în configurația (S) și atomul de carbon care poartă R3-CH2- este în configurația (R) (2R,4S,5S), fie atomii de carbon amintiți au configurația opusă (2S,4R,5R); fie sunt prezente alte amestecuri ale compușilor cu formula V sau I, având ambele configurații. Amestecuri racemice sau amestecuri diastereomere corespunzătoare pot fi dizolvate la stadii adecvate, (preferabil) în izomeri individuali.
Compușii cu formula XX, în care radicalii au semnificațiile menționate, sunt preparați de la compuși cu formula XII, în care radicalii au semnificațiile menționate, prin reacționarea aldehidelor cu formula XII, cu esteri ai acizilor 2-halopropionici, în particular alchil inferior-2-iodopropionați, precum 2-iodopropionat de etil, obținându-se compușii cu formula:
R:
HN (XXIII)
Pa în care radicalii au semnificațiile menționate și în care atomul de carbon ce poartă radicalul PaNH- poate fi, de asemenea, prezent, de exemplu, în configurația (R,S).
Reacția are inițial loc cu formarea homoenolatului de ester al acidului 2- halopropionicalchil inferior (precum etil), în prezența unui amestec de Zn/Cu, în c//-alchil inferior-alcanoilamidă inferioară, precum dimetilacetamidă, sau a unei hidrocarburi aromatice, precum toluen, sau amestecuri ale acestora, la temperaturi între 0...100°C, în particular între 2O...8O°C, dacă se
RO 119413 Β1
1795 dorește, în atmosferă de gaz protector, precum argon sau N2. într-un amestec de reacție ulterior, este tratat un ortotitanat de tetra-alchil inferior adecvat, precum ortotitanat de tetraizopropil, preferabil în gaz protector, precum azot sau argon, într-un solvent aromatic, precum toluen sau xilen, în prezența unei halohidrocarburi, precum clorură de metilen, cu o tetrahalogenură de titan, precum tetraclorura de titan, la temperaturi între -5O...5O°C, preferabil între -4O...25°C, iar amestecul este agitat cu dihalo-titan-d/'-alchilatul inferior corespunzător sau, preferabil, se formează trihalo-titan-alchilatul inferior, în particular diizopropilatul de triclortitan. Soluția de homoenolat de Zn este adăugată la acesta din urmă, prin picurare, la temperaturi între -50...0*0, în particular între -4O...-25°C, iar aldehida cu formula XII într-o hidrocarbură, de exemplu clorură de metilen, este adăugată ulterior prin picurare, reacția având loc la temperaturi între 5O...3O°C, preferabil între -4O...5°C, cu formarea precursorului alchil inferior-(în particular etil) ester, în particular esterul de etil, al compusului cu formula XXIII. Acest ester este apoi hidrolizat și ciclizat, cu formarea compusului cu formula XXIII, așa cum s-a definit mai sus, preferabil într-un solvent anorganic, precum un compus aromatic, de exemplu în toluen sau xilen, în prezența unui acid, precum acidul carboxilic, de exemplu acid acetic, la temperaturi între 20°C și temperatura de fierbere a amestecului de reacție, în particular între 70...100°C. Dacă este necesar, diastereomerii sunt separați, de exemplu prin cromătografie, de exemplu pe gel de silice, utilizând un amestec de solvenți organici, precum un amestec de alean și ester, precum alean inferior și ester alchil inferior-alcanoil inferior, precum acetat de hexan/etil.
Compusul corespunzător cu formula XX este apoi obținut din compusul cu formula XXIII, prin deprotonizare cu ajutorul unei baze tari, cu formarea carbanionului la carbonul-α, de lângă gruparea oxo a lactonei, și substiția nucleofilă ulterioară a radicalului W a unui compus cu formula XVIII, în care R3 și W sunt definiți ca mai sus, în asociere cu prepararea compușilor cu formula XIX (W este în particular brom), reacția conducând stereoselectiv la configurația (R) la atomul de carbon, în compusul cu formula XX, care poartă radicalul R3-CH2-, Reacția cu o bază tare, în particular cu un compus amidic de organosiliciu-metalic alcalin, de exemplu o b/(tr/-alchilsilil inferior)amidă de metal alcalin, precum bi(trimetilsilil)amida de litiu, sau o cfr-alchilamidă inferioară de metal alcalin, precum diizopropilamida de litiu, este efectuată, de preferință, într-un solvent organic inert, în particular un eter, de exemplu un eter ciclic, precum tetrahidrofuran sau 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1 H)-pirimidon (DMPU) sau amestecuri ale acestor solvenți, la temperaturi între -100...0°C, preferabil între -78...-50°C, în timp ce substituția nucleofilă este realizată prin adăugarea compusului din formula R3-CH2-W în același solvent și la temperaturi între -100...0°C, preferabil între -6O...-4O°C.
Un compus cu formula XIV, în care radicalii au semnificațiile menționate, și în care atomul de carbon ce poartă gruparea -NH2 este, de preferință, în configurația (R,S), poate fi, de asemenea, obținut prin transformarea unui ester al acidului formic, de exemplu formiat de alchil inferior, precum formiat de etil, în alilamida acidului formic, prin reacționarea acestuia cu alilamină, la temperaturi între 2O...7O’C, în particular între 5O...6O°C. Această amidă este apoi deshidratată în atmosferă de gaz protector, precum azot sau argon, utilizând de preferință o halogenură acidă, precum oxiclorura de fosfor, fosgen, sau, în particular, o sulfonil halogenură organică, de exemplu o clorură de arilsulfonil, precum clorură de toluensulfonil, în prezența unei baze, de exemplu o tri-alchilamină inferioară, precum trietilamina, sau, în particular, o amină mono- sau bi-ciclică, precum piridina sau chinolina, la temperaturi între 50...100°C, în particular între 80...100°C. Aceasta va avea ca rezultat formarea de alil izocianidă, care este transformată într-o sare de litiu corespunzătoare, prin reacție cu o sare organolitică, de exemplu alchillitiu inferior, precum n-butillitiu, reacția realizându-se, de preferință, într-un solvent organic inert, în particular un eter, precum dioxan sau dietil eter, sau un alean, de exemplu hexan, sau un amestec al acestor solvenți, la temperaturi între -12O...-5O°C, în particular între -100...-70°C. Sarea de litiu care s-a format este apoi reacționată cu un compus cu formula R2-CH2-W, în care
1800
1805
1810
1815
1820
1825
1830
1835
1840
RO 119413 Β1
R2 are semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I și W are semnificațiile specificate mai sus, pentru compușii cu formula XVIII, în particular brom, preferabil cu adăugare, prin picurare ,de R2-CH2-W într-un solvent organic, de exemplu un eter, precum tetrahidrofuran, la temperaturile menționate mai sus, și apoi încălzind la temperaturi între O...5O°C, preferabil între
2O...3O°C. Aceasta va avea ca rezultat formarea unei izocianuri cu formula:
în care radicalii au semnificațiile menționate. Compusul cu formula XXIV este, în continuare, hidrolizat, preferabil în soluție apoasă la care se adaugă acid, de exemplu în acid halogenat apos, precum acid clorhidric, în particular în acid clorhidric concentrat, la temperaturi între 2O...3O°C, în particular între 0...10°C, obținându-se astfel compusul cu formula XIV, în care radicalii sunt definiți ca mai sus și în care atomul de carbon ce poartă gruparea -NH2 este, de preferință, în configurația (R,S).
Compușii aminici cu formula III sau ΙΙΓ, sau derivații lor reactivi, sunt cunoscuți sau pot fi preparați prin metode cunoscute, de exemplu prin condensarea aminoacizilor cu formula HΒ,-ΟΗ, în care B, are semnificațiile specificate pentru compușii cu formula III sau ΙΙΓ, sau derivații reactivi ai acestora, cu compușii aminici cu formula III sau III', sau derivații reactivi ai acestora, cu derivații reactivi și în condițiile de condensare analoage celor descrise la procedeul a).
Compușii cu formula V sau V’ sunt preparați, de exemplu, cu condiția ca gruparea protectoare Pa, în formula XXI sau XXII să nu corespundă direct unui radical Rn de la compușii aminici cu formula XXI sau XXII, de exemplu prin introducerea unei grupări carboxil protectoare, așa cum s-a descris la procedeul a), și prin scindarea grupării protectoare Pa, așa cum s-a descris la procedeul e), prin condensare cu un acid carboxilic cu formula Π,-ΟΗ, sau un derivat reactiv al acestuia, în care radicalii au semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, în condiții analoage condițiilor de condensare de la procedeul a).
Compușii cu formula XXA sau XXA' sunt preparați, de exemplu, cu condiția ca gruparea protectoare Pa în formula XX să nu corespundă direct unui radical Rv de la compușii γlactonici, cu formula XX (preferabil din izomerul (R,S,S)), de exemplu prin scindarea grupării protectoare Pa, așa cum s-a descris la procedeul e), prin condensare cu un acid carboxilic cu formula RpOH, sau un derivat reactiv al acestuia, în care radicalii au semnificațiile specificate pentru derivați izosteri cu formula I, în condiții analoage condițiilor specificate la procedeul a).
Compușii cu formula VI (sau VI’) sunt preparați, de exemplu, de la aminoacizi corespunzători cu formula:
(XXV) în particular cu formula:
(XXV’)
RO 119413 Β1 în care radicalii au semnificațiile amintite, sau de la derivați acizi reactivi ai acestora, iar componenta aminică cu formula VIII, în care radicalii sunt definiți în fiecare caz ca mai sus, sau de la derivații reactivi ai acestora, prin condensare în mod analog cu metoda descrisă la procedeul a) și, dacă se dorește, folosind derivați reactivi analogi.
Compușii cu formula VII (sau VII') pot fi preparați, de exemplu, din compuși cu formula V (sau V’), prin condensare cu un aminoacid cu formula XXV (sau XXV’), așa cum s-a definit chiar mai sus, care introduc radicalul -NH-CH(R4)-COOH. Reacția este realizată în mod analog cu condițiile descrise la procedeul a), folosind compușii liberi corespunzători sau derivații lor reactivi sau pot fi preparați din compuși cu formula XXA (sau XXA’), prin condensare cu un aminoacid cu formula XXV sau (XXV’), așa cum s-a definit imediat mai sus, care introduce radicalul -NH-CH(R4)-COOH. Reacția este efectuată în mod analog cu condițiile descrise la procedeul c), folosind γ-lactonele corespunzătoare cu formula XXA, în particular XXA'.
Compusul aminic cu formula VIII este cunoscut sau preparat prin metode cunoscute.
Compușii cu formula IX (sau IX') sunt cunoscuți sau pot fi preparați prin metode cunoscute și sunt obținuți, de exemplu, prin condensarea unui compus cu formula VII (sau VII'), în care radicalii au semnificațiile menționate, și o amină (dacă este necesar, hidroxil-protejată) cu formula:
H2N-CH2-(CH2)n-OH (XXVI) sau un derivat reactiv al acesteia, în care n are semnificațiile date pentru compușii cu formula I, în condiții de reacție analoage celor descrise la procedeul a).
Compușii cu formula X sau Xa sunt cunoscuți, se găsesc în comerț sau pot fi preparați prin metode cunoscute.
Compușii cu formula XVIII și cu formula R2-CH2-W sunt cunoscuți sau pot fi preparați prin procedee cunoscute sau pot fi obținuți din comerț. Ca exemplu, se poate menționa prepararea unui compus cu formula XVIII sau R2-CH2-W, în care W este Br sau I, prin reacționarea precursorului corespunzător, în care W este CI, cu o iodură sau bromură de metal alcalin, precum Nai, de exemplu în cetone, precum o alcanonă inferioară, de exemplu acetonă, la temperaturi între 0.,.50’C, în particular la temperatura camerei, sau cu iodura sau bromura tri- sau penta-fosforică, precum PBr3, de exemplu în hidrocarburi, de exemplu o hidrocarbură aromatică, precum toluen, la temperaturi între O...4O°C, de exemplu la temperatura camerei. Precursorul (W = CI) poate fi obținut din comerț, este cunoscut sau poate fi preparat prin procedee cunoscute.
De exemplu, un precursor, în care o grupare hidroxil este prezentă în locul CI (= W), poate fi transformat în compusul clorurat corespunzător, prin reacționare cu PCI3, PCI5 sau, în particular, SOCI2, în prezența unei baze terțiare de azot, de exemplu baza polyhunig sau piridina, în solvenți adecvați, de exemplu un eter, precum dietil eter, sau o hidrocarbură, precum clorură de metilen, sau cloroform, la temperaturi între -10 și 30°C, preferabil între O...25°C. Precursorii cunoscuți, în care o grupare hidroxil este prezentă în locul lui W, pot fi preparați prin procedee cunoscute sau se găsesc în comerț.
Restul materiilor prime sunt cunoscute, sunt preparate prin procedee cunoscute, și/sau se găsesc în comerț.
Intermediarii următori, care sunt specificați la punctele (i) până la (iv), sunt:
(i) un compus cu formula XIXA:
1895
1900
1905
1910
1915
1920
1925
1930
1935
1940
RO 119413 Β1 în particular cu formula XIXA':
O
Bl HN
Re (XIXA*) în care:
Q este hidrogen, o grupare Pa protectoare a grupării aminice, așa cum s-a definit pentru compușii cu formula XI (în particular, una din grupările amino protectoare specificate la procesul a)) sau un radical R,, așa cum s-a definit, pentru derivații izosteri cu formula I, cu excepția radicalilor care intră sub incidența definiției grupării protectoare Pa;
R2 are una din semnificațiile specificate în definiția derivaților izosteri cu formula I;
R3 este fenil, care este trisubstituit de radicalii selectați dintre alchil inferior, alcoxi inferior și halogen, sau este alchilendioxifenil inferior, în particular2,3,4-tr/-alcoxifenil inferior, în special 2,3,4-trimetoxifenil; și
R9 este alcoxi inferior, de exemplu metoxi sau etoxi, sau o sare a acestora, cu condiția ca grupările formatoare de sare să fie prezente.
Un compus cu formula XIXA, în particular XIXA', este preferat în mod deosebit când Q este hidrogen sau, în particular, 1-fenil-alcoxicarbonil inferior, în particular benziloxicarbonil, 1fenil-alchil inferior, în particular benzii, sau este alcoxicarbonil inferior, precum te/ț-butoxicarbonil;
R2 este ciclohexil sau, în particular, fenil;
R3 este 2,3,4-tr/-alcoxifenil inferior, în particular 2,3,4-trimetoxifenil; și
R9 este alcoxi inferior, precum metoxi sau etoxi, sau o sare a acestora, cu condiția ca grupările formatoare de sare să fie prezente.
Compușii cu formulele XIXA sau XIXA' fie corespund direct compușilor cu formula XIX, când Q este o grupare protectoare Pa de protejare a grupării amino, fie pot fi preparați din acești compuși, prin scindarea grupării protectoare în mod analog cu condițiile descrise la procedeul e) (se obțin compuși cu formula XIXA sau XIXA’, în care Q = H) și, dacă se dorește, introducerea unui radical Ri cu un acid cu formula II, așa cum s-a definit la procedeul a), în condiții analoage celor specificate la procedeul a).
(ii) Un compus cu formula XXA:
(XXA)
HN în particular XXA':
O (XXA»)
HN
RO 119413 Β1 în special cu formula XXA:
în care:
(XXA”)
1995
Q este hidrogen, o grupare protectoare a grupării amino, preferabil o grupare Pa, așa cum s-a definit pentru compușii cu formula XI (în particular una din grupările protectoare specificate la procedeul a)); sau un radical Rv așa cum s-a definit pentru compușii cu formula I, cu excepția celor care cad sub incidența definiției grupării protectoare Pa;
R2 are una din semnificațiile specificate în definiția derivaților izosteri cu formula I; și
R3 estefenil, care este trisubstituit de radicalii selectați dintre alchil inferior, alcoxi inferior și halogen, sau este alchilendioxifenil inferior, în particular 2,3,4-frbalcoxifenil inferior, în special 2,3,4-trimetoxifenil; sau o sare a acestora, cu condiția ca grupările formatoare de sare să fie prezente.
2000
2005
Un compus cu formula XXA, în particular XXA', în special XXA, este preferat când Q este hidrogen sau, în particular, este 1 -fenil-alcoxicarbonil inferior, în particular benziloxicarbonil, 1 -fenil-alchil inferior, în particular benzii, sau este, în primul rând, alcoxicarbonil inferior, precum terț-butoxicarbonil;
R2 este ciclohexil sau, în particular, fenil; și
R3 este 2,3,4-fe-alcoxifenil inferior, în particular 2, 3,4-trimetoxifenil sau o sare a acestora, cu condiția ca grupările formatoare de sare să fie prezente.
Este preferat un compus cu formula XXA'1, cu indicativul 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-ciclohexiletil]-3(R)-(2,3,4-trimetiloxifenilmetil)-dihidrofuran-2-(3H)-onă.
Este preferat, în mod deosebit, un compus cu formula XXA”, cu denumirea chimică 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-(2,3,4-trimetoxifenilmetil)dihidrofuran-2-(3H)-onă.
Compușii cu formula XXA sau XXA' sau XXA pot fi preparați din compușii formulei XIX sau XIXA, printr-un procedeu analog celui descris mai sus, pentru transformarea compușilor cu formula XIX în cei cu formula XX; sau aceștia corespund direct compușilor cu formula XX, când Q este o grupare amino protectoare Pa, sau pot fi preparați direct din acești compuși, prin scindarea grupării protectoare, în mod analog cu condițiile specificate la procedeul e) (se obțin compuși cu formula XIXA sau XIXA', în care Q = H) și, dacă se dorește, introducerea unui radical R! cu un acid cu formula II, așa cum s-a definit mai sus pentru procedeul a), în condiții analoage celor specificate la procedeul a).
(iii) Un compus cu formula VA:
2010
2015
2020
2025
2030
(VA')
2035
2040
RO 119413 Β1 în care:
Q este hidrogen; o grupare amino protectoare, preferabil o grupare amino protectoare Pa, așa cum s-a definit pentru compușii cu formula XI (în particular una dintre grupările amino protectoare specificate la procedeul a)); sau un radical Rn așa cum s-a definit pentru derivații izosteri cu formula I, cu excepția acelor radicali ce cad sub incidența definiției grupării protectoare Pa;
R2 are una cu semnificațiile specificate în definiția compușilor cu formula I;
R3 este fenil, care este trisubstituit de radicalii selectați dintre alchil inferior, alcoxi inferior și halogen, sau este alchilendioxifenil inferior, în particular este 2,3,4-fr/-alcoxifenil inferior, în special 2, 3, 4-trimetoxifenil;
Py* este hidrogen sau o grupare protectoare hidroxil, preferabil una dintre grupările protectoare specificate la procedeul a), în particular tn-alchilsilil inferior, precum te/i-butiIdimetilsilil; Și
E este hidroxi sau o grupare carboxil protectoare, preferabil așa cum s-a definit la procedeul a), în particular alcoxi inferior, precum metoxi, etoxi sau terț-butoxi, sau tri-alchilsililoxi inferior, în particular terț-butildimetilsililoxi, sau radicalul -(C=O)-E este un derivat reactiv al unei grupări carboxilice, în particular este o grupare carboxilică în forma unui ester activat, a unei anhidride reactive sau a unei amide ciclice reactive, preferabil de o manieră analoagă celei descrise pentru derivații reactivi ai compușilor cu formula II de la procedeul a); sau o sare a acestora, cu condiția ca grupările formatoare de sare să fie prezente.
Următoarele aspecte se aplică, în general, la toate procedeele menționate mai sus și mai jos:
Ca o consecință a relației strânse dintre derivații izosteri cu formula I și sărurile lor și materiile prime (compuși de început și intermediari), sub formă liberă și sub forma sărurilor lor, compușii liberi și/sau sărurile lor vor avea semnificația (mai înainte și în cele ce urmează) sărurilor corespunzătoare și/sau a compușilor liberi.
Toate etapele de procedeu listate mai sus pot fi realizate în condiții de reacție cunoscute, de preferință în condițiile specificate în mod expres, în absența (sau, de regulă, în prezența) solvenților sau diluanților, preferabil aceia care dizolvă și sunt inerți față de reactivii utilizați, în absența sau prezența catalizatorilor, agenților de condensare sau a agenților de neutralizare, de exemplu schimbători de ioni, precum schimbătorii de cationi, de exemplu sub forma H+, depinzând, în fiecare caz, de natura reacției și/sau de reactiv, la temperatură scăzută, normală sau ridicată, de exemplu în intervalul de temperaturi -10°...190°C, preferabil între -
80...150°C, de exemplu între -8O...-6O°C, la temperatura camerei, între -2O...4O°C sau la temperatura de reflux, la presiune atmosferică sau într-un recipient închis, la presiune coborâtă sau ridicată, într-o atmosferă inertă, de exemplu într-o atmosferă de argon sau azot și/sau în absența luminii.
Dacă se dorește, amestecurile izomerice, care apar în oricare dintre stadiile reacției, pot fi descompuse în izomeri individuali, de exemplu diastereomeri sau enantiomeri sau în amestecuri arbitrare de izomeri, de exemplu amestecuri de racemați sau diastereomeri, de exemplu în mod analog cu metodele care sunt descrise la “procese suplimentare de verificare”.
în anumite cazuri, de exemplu în cazul hidrogenărilor, este posibil să se realizeze reacții stereoselective, ușurând în acest fel izolarea izomerilor individuali.
Solvenții care sunt adecvați pentru fiecare reacție includ, de exemplu, apă, esteri, precum alchil inferior-alcanoați inferiori, de exemplu acetat dietil, eteri, precum eteri alifatici, de exemplu dietil eter sau 1,2-dimetoxietan, sau eteri ciclici, de exemplu tetrahidrofuran, hidrocarburi aromatice lichide, precum benzen, toluen sau o-, m- sau p-xilen, hidrocarburi aciclice lichide, precum hexan sau heptan, alcooli, precum metanol, etanol sau 1 - sau 2-propanol, nitrili, precum acetonitril, hidrocarburi halogenate, precum clorură de metilen sau cloroform, amide
RO 119413 Β1 acide, precum dimetil formamida sau dimetilacetamida, cetone, precum alcanone inferioare, 2090 de exemplu acetona, solvenți heterociclici, de exemplu baze, precum baze heterociclice de azot, de exemplu piridina, sau 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1 H)-pirimidona, acizi carboxilici, precum acid acetic sau acid formic, anhidride carboxilice, precum anhidride alcanoice inferioare, de exemplu anhidrida acetică, hidrocarburi ciclice, liniare sau ramificate, precum ciclohexan, hexan sau izopentan, sau amestecuri ale acestor solvenți, de exemplu soluții apoase, cu 2095 excepția cazurilor când se indică altfel în descrierea procesului. Amestecurile de solvenți de această natură pot fi utilizate, de asemenea, în procesul de obținere, de exemplu prin cromatografie sau divizare.
Derivații izosteri (inclusiv sărurile lor) pot fi, de asemenea, obținuți sub formă de hidrați, sau cristalele lor pot, de exemplu, să includă solventul folosit pentru cristalizare. 2100
Procedeul de obținere este realizat conform căilor cunoscute, preferabil în mod analog cu procedeele descrise în exemple.
Un compus, care poate fi obținut ca un intermediar, într-un stadiu oarecare al procedeului, descris mai sus, poate fi folosit drept materie primă, iar etapele de procedeu, care nu au fost incluse, sunt realizate ulterior sau, se utilizează un compus ca materie primă, format în 2105 condițiile reacției, fie sub forma unui derivat, de exemplu sub forma protejată sau sub formă de sare, fie un compus ce poate fi obținut conform procedeului respectiv și supus procesării ulterioare. Condițiile de reacție preferate, în primul rând, sunt cele analoage specificate în exemple.
Compușii protejați, utilizați ca materii prime, pot fi utilizați în toate stadiile procedeului, iar grupările protectoare pot fi îndepărtate în stadii adecvate ale reacției. 2110
Grupările protectoare, introducerea și eliberarea lor sunt descrise la procedeul a) și procedeul e).
Se dau, în continuare, exemple de realizare a invenției.
Pentru realizarea invenției sunt necesare câteva precizări privind condițiile tehnice și abrevierile utilizate în descrierea procedeelor de obținere a derivaților izosteri, conform invenției. 2115 Temperaturile sunt date în grade Celsius (°C). Dacă nu se dă nici o valoare a temperaturii, reacțiile menționate au loc aproximativ la temperatura camerei. Valorile Rf, care indică raportul dintre distanța parcursă de substanța respectivă și distanța parcursă de eluent și sunt determinate prin cromatografie TLC pe plăci subțiri de silicagel, (Merck, Darmstadt, Germania) utilizând următoarele sisteme de dizolvare: 2120
Sisteme de eluent TLC:
A Acetat de etil
B Clorură de metilen/metanol 1:1
C Hexan/acetat de etil 1:1
D Hexan/acetat de etil 2:1 2125
E Hexan/acetat de etil 3:1
F Clorură de metilen/metanol 12:1
G Hexan/acetat de etil 6:1
H Clorură de metilen/THF 2:1
I Clorură de metilen/eter 25:1 2130
J Hexan/acetat de etil 1:2
K Cloroform/metanol/apă/acid acetic 85:13:1,5:0,5
L Clorură de metilen/metanol 10:1
M Clorură de metilen/metanol 15:1
N Acetat de etil/metanol 9:1 2135
O Clorură de metilen/etanol 10:1
P Clorură de metilen/acetat de etil/etanol 30:20:1
Q Toluen/acetat de etil 9:1
R Clorură de metilen/THF 4:1
RO 119413 Β1
Abrevierea “Rf(A)” înseamnă, de exemplu, că valoarea lui Rf se determină în sistemul de solvent A. Raportul dintre cantitățile de solvenți este dată întotdeauna în părți volumice (v/v). Rapoartele cantitative se dau, de asemenea, în părți volumice atunci când se definesc sistemele de solvenți mobili pentru cromatografie pe coloană.
Cromatografie la presiune medie - faza: LiChroprep® Si 60 (Merck, Dietikon, Elveția); presiune: 10-15 bar.
Gradienți HPLC:
I 20% - 100% a) în b) peste 35 min;
II 20% - 100% a) în b) peste 20 min;
III 5% · 40% a) în b) peste 15 min.
Eluent a): acetonitril + 0,05% TFA; eluent b): apă + 0,05% TFA.
Coloana (250 x 4,6 mm) este umplută cu material de fază inversă C18 - Nucleosil® (silicagel cu mărimea medie a particulelor de 5 pm, derivat covalent cu octadecilsilani, Macherey & Nagel, Diiren, Germania), detecție prin absorbție cu ultraviolete la 215 nm. Timpii de reținere (tRet) sunt dați în minute, viteza de curgere, 1 ml/min.
Măsurătorile stereoscopice ale masei sunt, de regulă, obținute prin metoda bombardamentului cu atomi rapizi. Dacă nu este indicat altceva, valorile masei se referă la ionul de moleculă protonată (M+H)+.
Valorile pentru spectrele IR sunt date în cm'1, cu solventul relevant dat în paranteze rotunde.
Abreviațiile obișnuite în chimia peptidelor sunt folosite la desemnarea radicalilor bivalenți ai α-aminoacizilor, configurația atomului de carbon a este indicată prin prefixul (L)- sau (D)-, cu condiția ca aceasta să fie cunoscută. Radicalul glicil, care este atașat la restul moleculei via azotul din amino și carbonul din carboxil este indicat prin -[(ciclohexil)Gly]- când este substituit la atomul de carbon a de un radical ciclohexil și de -[(fenil)Gly]- când este substituit la atomul de carbon a de un radical fenil.
Alte abrevieri folosite sunt următoarele:
abs. anal. calc, anal, găsit atm.
Boc
BOP
TLC
DCC dimetoxietan
DIPE
DMF
DMPU
EDC
Eter sat. h
HBTU
HOBT
HV min
MS sulfat de sodiu pur (indică faptul că solventul este anhidru); valoarea calculată pentru analiza elementară; valoarea găsită pentru analiza elementară (valoarea reală); atmosferă (1 atm corespunde la 1,013 bar); tert-butoxicarbonil;
hexafluorofosfat benzotriazol-1 -iloxitri(dimetilamino)fosfoni; cromatografie în strat subțire;
diciclohexilcarbodiimidă;
1.2- dimetoxietan; diizopropil eter; dimetilformamidă;
1.3- dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(IH)-pirimidonă; clorhidrat de N-etil-N'-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimidă; dietil eter;
saturat;
oră (oră);
hexafluorfosfat de O-benzotriazol-l-il-N,N,N',N'-tetrametiluroniu; 1 -hidroxibenzotriazol;
vid înalt;
minute; ___ spectroscopie de masă;
sulfat disodic (Na2SO4);
RO 119413 Β1
2190
NMM N-metilmorfolină;
salină soluție saturată de clorură de sodiu;
THF tetrahidrofuran;
TBAF tihidrat fluorură de tetrabutilamoniu;
Z benziloxicarbonil;
Exemplul 1.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(benziloxifenil)-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil] -hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă mg (0,301 mmoli) de TBAF se adaugă, sub atmosferă de azot, la o soluție de 135 mg (0,151 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)2(R)[p-benziloxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă în 1,3 ml de DMF, amestecul se agită la temperatura camerei, timp de 16 h. Amestecul de reacție este turnat apoi peste apă, iar acest amestec este extras cu 4 porții de acetat de etil. Faza organică este spălată cu soluție saturată de NaHCO3, apă și soluție saturată de clorură de NaCI, uscată cu Na2SO4 și evaporată. Solubilizând de două ori cu DIPE, rezultă compusul pur din titlu: tRet(ll) = 18,5 min; FAB-MS (M+H)+ = 782.
Materia primă se prepară astfel:
la) Z-(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
19,8 g (78,8 mmoli) de Z-(L)-valină în 720 ml 0,25M NMM/CH3CN se tratează, sub gaz inert, cu 7,5 ml (87,3 mmoli) de 2-metoxi-etilamină (Fluka; Buchs, Elveția). 32,3 g (85,2 mmoli) de HBTU se adaugă la suspensia albă, groasă, iar acest amestec este agitat perfect la temperatura camerei, timp de 24 h. Amestecul de reacție se evaporă sub vid înaintat, iar reziduul se reia în acetat de etil; soluția se extrage cu apă, de două ori cu 10% soluție de acid citric, apă, de două ori cu soluție saturată de NaHCO3 și soluție saturată de NaCI.
Faza apoasă se extrage de mai mult de două ori cu acetat de etil, iar fazele organice se usucă pe Na2SO4 și se evaporă. Cristalizarea din acetat de etil/hexan 1:1 conduce la compusul din titlu: TLC Rf(G) = 0,6; tRet(lI) = 11,5 min.
lb) H-(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
Hidrogenând 22,8g (74 mmoli) de Z-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă în 496 ml de metanol, la temperatura camerei, sub presiune joasă și în prezența a 2,3 g de 10% Pd/C, se obține, după filtrarea catalizatorului, evaporarea filtratului și separare pe coloană cromatografică (SiO2, clorură de metilen, folosind 2,5 - 5 - 7,5 - 10% metanol), sub formă de ulei, compusul din titlu: TLC Rf(B) = 0,3; FAB-MS (M+H)+ = 175;
1H-NMR (360 MHz, CD3OD): 0,90 și 0,95 (2d, J=7 Hz, (H3C)2C), 1,9 (m, HC-Me2), 3,05 (d, J=6Hz, HCa), 3,32 (s, H3C-O), 3,37 (m, H2C), 3,44 (m, H2C).
lc) 5-(S)-(Boc-amino)-4(S)-(teiț-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-benzHoxifenil)metil]-hexanoil-(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
Sub atmosferă de azot, 100 mg (0,135 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)metil]hexanoic [preparare în Exemplullj)] și 26 mg (0,148 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă se dizolvă în 1,2 ml de 0,25M NMM/CH3CN, iar soluția este tratată cu 56,3 mg (0,148 mmoli) de HBTU. După 18 h, la temperatura camerei, amestecul de reacție este evaporat, iar reziduul este reluat în acetat de etil; soluția este spălată energic cu apă, cu 2 porții de soluție de acid citric 10%, apă, cu 2 porții de soluție saturată de NaHCO3 și, în final, cu soluție salină. Faza anorganică se extrage de mai mult de două ori cu acetat de etil, iar fazele organice se usucă pe Na2SO4 și se evaporă dând compusul din titlu: tRet(ll) = 24,4 min; FAB-MS (M+H)+ = 896.
ld) lodura de p-benziloxibenzil __
O soluție de 1,0 g (4,3 mmoli) de clorură de 4-benziloxibenzil (Fluka; Buch, Elveția), în 8 ml de acetonă, este amestecată la temperatura camerei cu 3,13 g (20,9 mmoli) de iodură de
2195
2200
2205
2210
2215
2220
2225
2230
2235
RO 119413 Β1 sodiu. După 90 min, cromatograma în fază gazoasă a amestecului de reacție indică faptul că reacția este completă; amestecul de reacție este apoi turnat peste eter, iar acest amestec este spălat cu soluție de tiosulfat de sodiu 10% și cu soluție saturată de NaCI. Prin uscarea fazei organice pe Na2SO4 și evaporare se obține compusul din titlu:
1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 4,48 (s, 2H), 5,06 (s, 2H), 6,85-6,95 (m, 2H), 7,25-7,48 (m, 7H).
e) (S)-N-Boc-(L)-(p-benziloxifenilalaninol)
37,1 g (100 mmoli) de Boc-(L)-(p-benziloxi)fenilalanină (Bachem, Bubendorf, Elveția) în 116 ml de THF se tratează, la temperatura de -5 până la-10°C, cu 15,33 ml (110 mmoli) de trietilamină, iar la acest amestec se adaugă o soluție de 14,36 ml (110 mmoli) de cloroformiat de izobutil, în 70 ml de THF. După amestecare la temperatura camerei, timp de 0,5 h, precipitatul format se filtrează la vid. Amestecul de reacție filtrat se adaugă în picături la 7,57 g (200 mmoli) de borohidrură de sodiu și 44 ml apă (aproximativ la 10-15°C), iar acest amestec se agită energic la temperatura camerei, timp de 3,5 h. Se corectează pH-ul amestecului la 2, prin adăugarea de soluție de acid citric 10% și se evaporă parțial amestecul într-un evaporator rotativ. Reziduul se extrage cu 3 porții de acetat de etil, iar fazele organice se spală cu 2 x 2N NaOH, soluție saturată de NaCI, soluție saturată de NaHCO3 și soluție saturată de NaCI, se usucă pe Na2SO4 și se evaporă; produsul brut se solubilizează în hexan pentru a da compusul din titlu: TLC Rf(C) = 0,50; FAB-MS (M+H)+ = 358.
f) (S)-N-Boc-(p-benziloxifenilalaninal) într-un amestec de 4,76 g (37,5 mmoli) de clorură de oxalil în 33,6 ml de clorură de metilen se adaugă, în picături, la -60°C și sub atmosferă de N2, o soluție de 3,5 ml (49 mmoli) de DMSO în 60 ml de clorură de metilen. După ce amestecul este agitat timp de 15 min, se adaugă 8,94 g (25 mmoli) de (S)-N-Boc-(p-benziloxifenilalanonil) în 150 ml de clorură de metilen, iar acest amestec se agită apoi aproximativ 25 min. Se adaugă apoi 14 ml (100 mmoli) de trietilamină în 30 ml de clorură de metilen și se agită amestecul 30 min. Se adaugă 222 ml de soluție de KHSO4 20% și 187 ml de hexan, iar amestecul se încălzește la 0°C. Faza apoasă se separă și se extrage de 2 ori cu acetat de etil. Fazele organice se spală cu soluție saturată de NaHCO3 și soluție saturată de NaCI, se usucă pe Na2SO4 și se evaporă pentru a da compusul din titlu: TLC Rf(C) = 0,71;
1H-RMN (200 MHz, CDCl3): 1,44 (s, 9H), 3,06 (d, J=6 Hz, 2H), 4,39 (m, 1H), 5,03 (s+sb, H2CO+HN), 6,86-6,98 și 7,03-7,15 (2m, fiecare 2H), 7,30-7,48 (m, 5H), 9,62 (s, 1H).
Ig) 5(S)-[ 1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)etil]dihidrofuran-2-(3H)-ona (vezi A.E. DeCamp et al., Tetrahedron Lett. 32,1867 (1991))
6,0 g (91,8 mmoli) de Zn/Cu (preparare: vezi R.D. Smith, H.E.Simmons, W.E. Parham, M.D. Bhavsar, Org. Synth., Coli. Voi. 5,855 (1973)) și 9,69 ml de dimetilacetamidă se adaugă, sub atmosferă de N2, la o soluție de 7,7ml (57,1 mmoli) de 2-iodopropionat de etil [Exemplul 1 k)], în 100 ml de toluen, iar acest amestec, ulterior, se agită energic la temperatura camerei timp, de 1 h și la 80°C, timp de 4 h (- soluție homoenolată de Zn). într-un alt aparat, o soluție de 4,17 ml (14,2 mmoli) de ortotitanat de tetraizopropil în 12 ml de toluen și 69 ml de clorură de metilen se tratează, sub atmosfera de N2 și cu răcire slabă, cu 4,41 ml (40,2 mmoli) de TiCI4; acest amestec se agită la temperatura camerei, timp de 15 min (rezultă o soluție galbenă) și se răcește la -40°C, rezultând izopropoxid de triclortitaniu. Soluția homoenolată de Zn se decantează de solidul metalic și se transferă cu ajutorul unei canule, la izopropoxidul de titan, care a fost răcit la -40°C, menținându-se temperatura în intervalul -40°C la -30°C (soluție roșu intens). Soluția se încălzește la -25°C, timp de 5 min și apoi se răcește din nou la -40°C. O soluție de 9,7 g (27 mmoli) de (S)-N-Boc-(p-benziloxifenil)alaninal în 24,5 ml de clorură de metilen se adaugă apoi la nivel de picătură, iar amestecul se agită ulterior la aproximativ -20oC. timp de 15 h și în final la 0°C, timp de 1 h. Amestecul de reacție se toarnă în 0,4 kg de gheață cu apă și 0,51 de eter, amestecul agitându-se, energic, timp de 10 min. Faza apoasă se separă
RO 119413 Β1 și se extrage cu 2 porții de eter; fazele organice se spală cu apă, soluție saturată de carbonat acid de sodiu, apă și soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă (- cristale de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)hexanoat de etil).
Intermediarul obținut mai sus se încălzește în 220 ml de toluen și 6,73 ml de acid acetic la 100°C, timp de 2,5 h. Amestecul de reacție răcit se tratează cu 0,51 de apă, iar faza apoasă se separă și se extrage cu 2 porții de eter; fazele organice se spală cu soluție saturată de carbonat acid de sodiu, apă și soluție saturată de NaCI, se usucă cu sulfat de sodiu și se evaporă. Cristalizarea reziduului din eter/hexan conduce la produsul pur din titlu: TLC Rf(E) = 0,28; tRet(l) = 23,5 min;
1H-RMN (200 MHz, CDCI3): 1,40 (s, 9H), 2,03-2,2 și 2,44-2,64 și 2,73-2,98 (3m, fiecare 2H), 3,95 și 4,48 (2m, fiecare 1H), 4,62(d, J=9 Hz, 1H), 6,87-6,97 și 7,09-7,21 (2m, fiecare 2H), 7,27-7,48 (m, 5H).
lh) 5(S)-[l(S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)etil]-3(R)-[(p-benziloxifenil)-metil]dihidrofuran-2-(3H)-ona
2,47 g (6,0 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(/>benziloxifenil)etil)dihidrofuran-2-(3H)onă dizolvate în 12 ml de THFși 1,2 ml de 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinonă se tratează la -70°C, sub un gaz inert, cu 11,73 ml de soluție 1M de litiu bis(trimetilsilil)amidă în THF, iar amestecul se agită timp de 15 min; se alchilează apoi cu 1,946 g (6,0 mmoli) de iodură de p-benziloxibenzil [Exemplul 1d)J, în 3 ml de THF (60 min). Pentru hidroliză, se adaugă 2,23 ml de acid propionic și 2,23 ml de apă, iar amestecul se încălzește la 0°C. Amestecul de reacție se toarnă în 30 ml de soluție 10% de acid citric, iar acest amestec se extrage de două ori cu acetat de etil; fazele organice se spală de două ori cu soluție saturată de NaHCO3 și, în final, cu soluție saturată de NaCI. Uscând fazele organice pe Na2SO4, evaporându-le și separând reziduul pe coloana cromatografică (SiO2, hexan/acetat de etil 4:1), apoi prin cristalizare, din hexan/acetat de etil, se obține compusul pur din titlu: TLC Rf(D) = 0,45; tRet(l) = 19,9 min; FAB-MS (M+H)+= 608.
li) Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-benziloxi-fenil)metil] hexanoic
2,7 g (4,43 mmoli)de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)etil]-3(R)-[(p-benziloxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă în 59 ml de dimetoxietan și 31,8 ml de apă se tratează, în absența aerului, cu 14,8 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu. Amestecul se agită apoi la temperatura camerei, timp de 3 h și se evaporă parțial. Reziduul se toarnă într-un amestec de gheață, 181 ml de soluție saturată de NH4CI, 16,2 ml de soluție de acid citric 10% și 400 ml de acetat de etil și se adaugă THF până când precipitatul solid se dizolvă. Faza apoasă se separă și se extrage cu 2 porții de acetat de etil, iar fazele organice se spală cu soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4, se evaporă și se solubilizează în hexan: TLC Rf(C) = 0,07.
lj) Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxi-fenil)-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]hexanoic
2,44 g (3,90 mmoli)de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(pbenziloxifenil)metil]hexanoic în 14 ml de DMF se agită, sub atmosferă de N2, împreună cu 2,70 g (17,6 mmoli) de tert-butildimetilclorosilan și 2,18 g (32 mmoli) de imidazol la temperatura camerei, timp de 18 h. Amestecul de reacție se toarnă peste apă-gheață, iar acest amestec se extrage cu 3 porții de acetat de etil; fazele organice se spală cu soluție de acid citric, apă și soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă. Uleiul rezultat se reia în 30 ml de metanol/THF/apă 3:1:1, iar această soluție se tratează cu 3,2 g de K2CO3 și se agită la temperatura camerei, timp de 1 h. Amestecul de reacție se evaporă parțial, reziduul apos se toarnă peste o soluție de acid citric 10% și gheață, iar acest amestec se extrage de 3 ori cu acetat de etil; fazele organice se spală de două ori cu apă și, în final, cu soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă. Cromatografia pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil 2:1 -1:1) a produsului brut permite identificarea compusului din titlu: TLC Rf(C) = 0,53; FAB-MS (M+H)+ = 740.
2290
2295
2300
2305
2310
2315
2320
2325
2330
2335
RO 119413 Β1
1k) 2-lodopropionat de etil
O suspensie de 170 ml de 2-brompropionat de etil (Fluka; Buch, Elveția) și 950 g de iodură de sodiu în 1,81 ml de acetonă se agită la 60°C, timp de 20 h. Amestecul de reacție se filtrează, iar filtratul se evaporă parțial, reziduul fiind turnat în aproximativ 2,5 I de eter; acest amestec se spală cu 1,0 I de soluție de tiosulfat 1% și în final cu soluție saturată de NaCI, se usucă pe Na2SO4 și se evaporă. Distilarea (83 0°C, 20 mbar) permite obținerea compusului pur din titlu: MS (M)+ = 228;
1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 4,17 (q, 7 Hz, 2H), 3,34 și 2,97 (2t, 7 Hz, 2x2H), 1,28 (t, 7 Hz, 3H).
Exemplul 2.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-cianfenil)-metil-hexanoil-(L) Val-N-(2-metoxietil)amida.
Analog cu Exemplul 1), 2,73 g (3,85 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/i-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(p-cianfenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxi-etil)amidă în 90,4 ml de DMF se desililează cu 3,65 g (11,6 mmoli) de TBAF și se prelucrează. Prin cristalizare, din clorură de metilen/hexan rezultă compusul din titlu: tRet(ll) = 14,0 min; FAB-MS (M+H)+ = 595.
Materia primă se prepară astfel: 2a)5(S)-Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[p-cianfenil)metil]-hexanoil(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
2,173 g (3,93 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)[(p-cianfenil)metiljhexanoic [preparare, vezi Exemplul 2e)J, 839 mg (4,07 mmoli) de DCC și 596 mg (4,41 mmoli) de HOBT se adaugă, în absența aerului, la o soluție de H-(L)-Val-N-(2metoxietil)amidă [Exemplul 1 b)], în 47 ml de THF. După 24 h, la temperatura camerei, amestecul de reacție se filtrează, iar filtratul se evaporă. Reziduul se distribuie în trei porții de acetat de etil, soluție 10% de acid citric, soluție saturată de NaHCO3 și soluție saturată de NaCI. Prin uscarea fazelor organice pe Na2SO4, evaporarea lor și agitarea reziduului în Dl PE se obține compusul din titlu: tRet(ll) = 20,8 min.
2b)5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]dihidrofuran-2-(3H)-ona [vezi de asemenea, A.E. De Câmp, A.T. Kawaguchi, R.P. Volante și I. Shinkai, Tetrahedron Left. 32,1867 (1991)].
8,03 g de Zn/Cu [preparare: R.D. Smith, H.E. Simmons, W.E. Parham, M.D. Bhavsar, Org. Synth., Coli., Voi 5,855 (1973)] și 12,96 ml de dimetilacetamidă se adaugă, sub atmosferă de N2, la o soluție de 17,4 g de 2-iodopropionat de etil [Exemplul 1 k)] în 130 ml de toluen, iar amestecul se agită apoi energic la temperatura camerei, timp de 1 h și la 80°C, timp de 4 h (soluție homoenolată de Zn). într-un al doilea aparat (atmosferă de N2), o soluție de 5,58 ml (18,9 mmoli) de ortotitanat de tetraizopropil, în 16,4 ml de toluen și 91,8 ml de clorură de metilen se tratează, în timp ce se răcește ușor, cu 5,90 ml (53,8 mmoli) de tetraclorură de titan, iar acest amestec se agită la temperatura camerei, timp de 15 min (- soluție galbenă) și se răcește la -40°C (- cristalizare parțială a izopropoxid triclortitaniului). Folosind o canulă, soluția homoenolată de Zn, care este răcită la temperatura camerei, se decantează de solidul metalic și se adaugă, în picături, la izopropoxid triclortitaniu, menținând temperatura la -40°C până la -30°C (- soluție roșu închis); amestecul se încălzește la -25°C, timp de 5 min și se răcește din nou la -40°C. O soluție de 9,0 g de (S)-N-Boc-fenilalaninal [preparare: vezi DJ. Kempf, J. Org. Chem. 51, 3921 (1986)] în 32,8 ml de clorură de metilen se adaugă apoi în picături, iar acest amestec se agită la aproximativ -20°C, timp de 15 h și în final la 0°C, timp de 1 h. Amestecul de reacție se toarnă în 0,5 kg de gheață-apă și 0,5l de eter, iar acest amestec se agită energic timp de 10 min. Faza apoasă se separă și se extrage cu 2 porții de eter; fazele organice se spală cu două porții de apă, soluție saturată de NaHCO3 și cu soluție saturată de NaCI, se usucă pe Na2SO4 și se evaporă. Se obține ca intermediar 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil hexanoat de etil cristalizat. Acest intermediar se încălzește la 80°C, timp de 2,5 h în 295 ml de toluen și 9 ml de acid acetic. Amestecul de reacție se tratează cu 0,51 de apă, iar faza apoasă
RO 119413 Β1
2390 se separă și se extrage cu 2 porții de eter; fazele organice se spală cu soluție saturată de NaHCO3, apă, soluție saturată de NaCI și se usucă cu Na2SO4. Evaporarea parțială a fazelor organice și tratarea cu hexan permite obținerea compusului din titlu cristalizat, din care aproximativ 10% constă, în conformitate cu analizele, în epimer (5R) (TLC Rf(E) = 0,08). Prin cromatografie pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil 2:1) se recoltează produsul pur din titlu: TLC Rf(E) = 0,14; [ct]D = 17,7’ (c=1; etanol).
2c) 5(S)-[1(S)-Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(p-cianfenil)rnetil]dihidrofuran-2-(3H)-onă în mod analog cu Exemplul 1 h), 1,5 g de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]dihidro-furan2-onă, dizolvată în 32 ml de THF, se deprotonează cu 9,8 ml de soluție 1M de litiu bis(trimetilsilil)amidă în THF și se alchilează cu 1,0 g de 4-brommetilbenzonitril (Fluka, Buchs, Elveția), dizolvat în 3 ml de THF. Prin cromatografie pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil 1:1) se obține compusul pur din titlu: TLC Rf(D) = 0,33.
2d) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-cianfenil)metil]hexa-noic în mod analog cu Exemplul 1 i), 0,50 g de 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(pcianfenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă în 19 ml de dimetoxietan și 10 ml de apă se hidrolizează cu 4,8 ml de soluție de hidroxid de litiu 1M, pentru a forma compusul din titlu: TLC Rf(B) = 0,3.
2e)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(p-cian-fenil)metil] hexanoic în mod analog cu Exemplul 1 j), 0,62 g de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil2(R)-[(p-cian-fenil)metil]hexanoic în 6,2 ml de DMF se sililează cu 0,98 g de ie/ț-butildimetilclorsilan și 0,79 g de imidazol. După hidroliza funcției silii ester cu 1,2 g de carbonat de potasiu, în 31 ml de metanol/THF/apă, 3:1:1, se obține compusul din titlu, după acidulare cu soluție de acid citric și extragere cu acetat de etil: TLC Rf(D) = 0,29; FAB-MS (M+H)+= 553.
Exemplul 3.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(o-fluorofenil)metil]-hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 1), 184,9 mg (0,263 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tertbutildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(o-fluorofenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă,în5ml de DMF se desililează (îndepărtarea radicalului silii substituit) cu 249,3 mg (0,79 mmoli) de TBAF și se prelucrează. Agitând apoi cu DIPE se obține compusul din titlu: tRet(ll) = 14,8 min; FAB-MS (M+H)+ = 588.
Materia primă se prepară astfel:
3a) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(o-fluorofenil) metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
168,9 mg (0,309 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-fenil2(R)-[(o-fluorofenil)metil]hexanoic [preparare, vezi Exemplul 3d)], 77,1 mg (0,374 mmoli) de DDC și 45,5 mg (0,337 mmoli) de HOBT se adaugă, sub atmosferă de gaz inert, la o soluție de 59,3 mg (0,34 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1b)] în 3,5 ml de THF. După 24 h la temperatura camerei, amestecul de reacție se filtrează, iar filtratul se evaporă. împărțind reziduul între 3 porții de acetat de etil, soluție 10% acid citric, soluție saturată de NaHCO3 și soluție saturată de NaCI, uscând apoi fazele organice cu Na2SO4 și evaporându-le, rezultă compusul din titlu: tRet(lI) = 22,3 min.
3b) 5(S)-[l(S)-Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(o-fluorfenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-ona în mod analog cu Exemplul 1 h), 5,0 g (16,37 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil)dihidrofuran-2-(3H)-onă [Exemplul 2b)], dizolvată în 75 ml de THF se deprotonizează, la -75’C, cu 32,7 ml de soluție 1M de litiu bis(trimetilsilil)amidă în THF și se alchilează cu 2,1 ml de (18,0 mmoli) de bromură de o-fluorobenzil (Fluka, Buchs, Elveția) la -75’C inițial (încălzind la maximum -60°C, o perioadă de 60 min). Cromatografia pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 3:1) conduce la compusul din titlu: TLCRf(D) = 0,6L
2395
2400
2405
2410
2415
2420
2425
2430
RO 119413 Β1
3c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(o-fluorofenil)metil]hexanoic în mod analog cu Exemplul 1 i), 4,5 g (10,8 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]3(R)-[(o-fluorofenil)metil)dihidrofuran-2-(3H)-onă în 170 ml de dimetoxietan se hidrolizează cu
43.5 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu. Reziduul de la evaporarea masei de reacție se toarnă într-un amestec de gheață, 120 ml soluție saturată de clorură de amoniu și 240 ml de soluție de acid citric 10%, iar acest amestec se extrage cu 3 porții de clorură de metilen. Faza organică se spală cu apă și soluție saturată de NaCI, se usucă pe Na2SO4 și se evaporă: tRet(ll) =
14.5 min.
3d) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4S-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(o-fluor-fenil) metil] hexanoic
Prin analogie cu Exemplul 1 j), 1,5 g (3,47 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi6-fenil-2(R)-[(o-fluorfenil)metil]hexanoic în 15 ml de DMF se sililează cu 2,4 g (16 mmoli) de tert-butildimetilclorsilan și 1,95 g (28,5 mmoli) de imidazol. Hidroliza funcțiunii silii esterice cu 2,8 g de carbonat de potasiu în 50 ml de metanol/THF/apă, 4:1:1, conduce, după cromatografie pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 2:1), la compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,33; tRel(ll) = 20,7 min.
Exemplul 4.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4-difluorfenil)-metil]hexanoil- (L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
Prin analogie cu Exemplul 1), 197 mg (0,274 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terțbutildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,4-difluorfenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă,în 5 ml de DMF se desililează cu 173 mg (0,548 mmoli) de TBAF și se prelucrează. Precipitând cu Dl PE dintr-o soluție concentrată de clorură de metilen rezultă compusul din titlu: TLC Rf(A) = 0,71; tRet(ll) = 14,9 min; FAB-MS (M+H)+ = 606.
Materiile prime se prepară astfel:
4a) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6'fenil-2(R)-[(2,4-difluor-fenil) metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
6,03 mg (0,39 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1b)], 80,5 mg (0,39 mmoli) de DCC și 57,5 mg (0,426 mmoli) de HOBT se adaugă, sub atmosferă de N2, la 200 mg (0,354 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(fe/țbutildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,4-difluorfenil)metil]hexanoic [preparare, vezi Exemplul 4d)] în 4,6 ml de THF. După 19 h, la temperatura camerei, amestecul se prelucrează în mod analog cu Exemplul 3 a) pentru a da compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,14; tRet(ll) = 21,7 min.
4b)5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2,4-difluorfenil)metil]dihidrofu-ran-2-(3H)ona
Prin analogie cu Exemplul 1 h), 5,0 g (16,37 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]dihidrofuran-2-(3H)-onă [Exemplul 2b)], dizolvată în 100 ml de THF se deprotonează, la 75°C, cu 32,7 ml de soluție 1M de litiu bis(trimetilsilil)amidă în THF și se alchilează cu 2,51 ml (19,6 mmoli) de bromură de difluorbenzil (Aldrich; Milwaukee, SUA) la -75°C inițial (încălzind la maximum -60°C, într-o perioadă de 2 h). Cromatografia pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 2:1) conduce la compusul din titlu: TLC Rf(D) - 0,5; tRet(ll) = 17,2 min.
4c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4-difluorfenil)metil] hexanoic
Prin analogie cu Exemplul 1 i), 3,1 g (7,18 mmoli) 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-fenil-etil]3(R)-[(2,4-difluorfenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă, în 77 ml de dimetoxietan și 19 ml de apă se hidrolizează cu 28,7 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu (19 h, la temperatura camerei) pentru a da compusul din titlu: tRet('l) =17,2 min.
4d) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[2,4-diflu-orofenil) metiljhexanoic _____
Prin analogie cu Exemplul 1 j), 3,2 g (7,12 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi6-fenil-2(R)-[(2,4-difluorfenil)metil]hexanoic, în 67 ml de DMF se sililează cu 4,93 g (32,7 mmoli)
RO 119413 Β1 de te/ț-butildimetilclorsilan și 3,97 g (58,4 mmoli) de imidazol. Hidrolizând funcțiunea silii esterică cu 5,9 g de carbonat de potasiu în 77 ml de metanol, 20 ml de THF și 20 ml de apă, se obține, după cromatografie pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 2:1), compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,22; tRet(ll) = 20,8 min.
Exemplul 5.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-{[p-(2-feniletil)-fenil]-etil} hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Prin analogie cu Exemplul 1), 115 mg (0,146 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/f-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-{[p-(2-feniletil)fenil]metil)hexanoil-(L)-Val-N-(2-(metoxietil)amidăîn 2,1 ml de DMF se desililează cu 92 mg (0,292 mmoli) de TBAF și se extrage: TLC Rf(A) = 0,58; tRet(ll) =18,1 min.
Materiile prime se prepară astfel:
5a) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-{[p-(2-feniletil)fenil] metil} hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Sub atmosferă de N2,100 mg (0,158 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-([p-(2-feniletil)fenil]rnetil}hexanoic [Exemplul 5f)] și 30 mg (0,174 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1 b)] se dizolvă în 1,52 ml de 0,25M NMM/CH3CN, iar această soluție se tratează cu 66 mg (174 mmoli) de HBTU. După 18 h, la temperatura camerei, amestecul de reacție este turnat peste apă, iar acest amestec se extrage cu 3 porții de acetat de etil. Fazele organice se spală cu soluție de acid citric 10%, apă, soluție saturată de NaHCO3, apă și soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă: tRet(lI) = 24,4 min.
5b) Alcool p-(2-feniletil)benzilic
Prin hidrogenarea a 10 g (48 mmoli) de 4-stilbenmetanol (Aldrich; Milwaukee, SUA) în 100 ml de THF, în prezența a 0,5 g de 5% Pd/C, la presiune joasă și la temperatura camerei, filtrare prin Celite® (strat filtrant pe bază de kieselguhr; Johns-Manville Corp., poate fi obținut de la Fluka, Buchs, Elveția) și evaporarea filtratului, rezultă compusul din titlu, în care, conform spectrului 1H-NMR, aproximativ 15% este p-(2-feniletil) toluen: TLC Rf (A) = 0,62; 1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 2,92 (s, 4H), 4,68 (s, 2H), 7,15-7,35 (m,9H).
5c) Bromura de p-(2-feniletil)benzil
3,14 ml (33,4 mmoli) de tribromură de fosfor în 11 ml de toluen se adaugă în picături, sub răcire și sub atmosferă de N2, la 8,36 g (85%; 33,4 mmoli) de alcool p-(2-feniletil)benzilic în 100 ml de toluen. După 2 h, la temperatura camerei, amestecul se toarnă în apă-gheață, iar faza organică se separă, se spală cu soluție saturată de NaHCO3, apă și soluție saturată de NaCI. Fazele apoase se extrag de 2 ori cu eter, iar fazele organice combinate se usucă cu Na2SO4 și se evaporă: TLC Rf(A) = 0,77;
1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 2,92 (s, 4H), 4,50 (s, 2H), 7,15-7,35 (m, 9H); semnale suplimentare pentru aproximativ 20% p-(2-feniletil)toluen.
5d)5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-{[p-(2-feniletil)fenil]metil}dihidro-furan-2-(3H)oria
O soluție de 4,4 g (14,53 mmoli) de 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil] dihidrofuran-2(3H)-onă [preparare vezi Exemplul 2b)] în 21,4 ml de THF abs. și 2,4 ml de DMPU se tratează, la -75°C și sub atmosferă de N2, cu 28 ml de soluție 1M de litiu bis(trimetilsilil)amidă în THF (Aldrich, Steinheim, Germania), iar amestecul se agită apoi la această temperatură timp de 15 min. O soluție de 6,0 g (aproximativ 80%, 17,5 mmoli) de bromură de p-(2-feniletil)benzil în 5,4 ml de THF abs. se adaugă apoi în picături, iar acest amestec se agită puternic la -70°C, timp de 30 min. Se adaugă 5,4 ml de acid propionic la -75°C, urmați apoi de 5,4 ml de apă. Amestecul se încălzește la 0°C și se diluează cu 150 ml de acetat de etil; acest amestec se spală apoi cu 80 ml de soluție de acid acetic 10%, cu soluție saturată de NaHCO3 și cu soluție saturată de NaCI. Fazele apoase se reextrag de 2 ori cu acetat de etil, iar fazele organice se usucă cu Na2SO4 și se evaporă. Cromatografia pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 3:1) conduce la compusul pur din titlu: TLC Rf(E) = 0,27; tRet(ll) = 20,8 min; FAB-MS (M-buten+H)+ = 444.
2485
2490
2495
2500
2505
2510
2515
2520
2525
2530
RO 119413 Β1
5e) Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-{[p-(2-feniletil)fenil]metil} hexanoic
5,15 g (10,31 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-([p-(feniletil) f eniljm eti I] dihidrofuran-2-(3H)-onă în 166 ml de dimetoxietan și 85 ml de apă se hidrolizează, sub un gaz inert, cu 41 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu. După 3 h, se evaporă dimetoxietanul într-un evaporator rotativ, iar reziduul se tratează cu un amestec răcit cu gheață de 506 ml soluție saturată de NH4CI, 42 ml de soluție de acid citric 10% și 207 ml de clorură de metilen. Se adaugă metanol pentru a dizolva complet produsul. Faza apoasă se separă și se extrage de 2 ori cu clorură de metilen/metanol 10:1. Fazele organice se spală cu soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă: tRet(ll) = 17,8 min.
5f) Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-{[p-(2-feniletil)fenil] metiljhexanoic
5,08 g (9,81 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[[p-(2-feniletil) fenil]metil}hexanoic în 22 ml de DMF se sililează, sub un gaz inert, cu 6,80 g (45,1 mmoli) de terț-butilclorsilan și 5,48 g (80,4 mmoli) de imidazol, la temperatura camerei timp de 20 h. Amestecul de reacție se toarnă în 500 ml de gheață-apă, iar acest amestec se extrage de 3 ori cu acetat de etil. Fazele organice se spală cu soluție de acid citric 10%, de 2 ori cu apă și soluție saturată de NaCI, se usucă pe Na2SO4 și se evaporă. Reziduul se dizolvă în 119 ml de metanol și 46 ml de THF, iar această soluție se tratează cu 8,1 g de carbonat de potasiu și 46 ml de apă, agitându-se apoi la temperatura camerei, timp de 17 h. Amestecul de reacție se toarnă apoi în gheață-soluție rece de acid citric 10%, iar acest amestec se extrage cu acetat de etil. Fazele organice se spală cu 2 porții de apă și soluție saturată de NaCI, se usucă pe Na2SO4 și se evaporă. Cromatografia pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil 2:1 -1:1 - acetat de etil) conduce la compusul pur din titlu: TLC R,(D) = 0,22; tRet(lI) = 23,3 min.
Exemplul 6. 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-metoxi-fenil) metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
1,11 g (1,35 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)2(R)-[(P‘metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă în 15 ml de DHF se desililează, sub atmosferă de N2, cu 0,85 g (2,70 mmoli) de TBAF. După 18 h la temperatura camerei, amestecul de reacție se toarnă în apă, iar acest amestec se extrage cu clorură de metilen. Fazele organice se spală cu soluție saturată de NaHCO3 și cu soluție saturată de NaCI, se usucă pe Na2SO4 și se evaporă. Agitând în DIPE, rezultă compusul din titlu: TLC Rf(B) = 0,6; tRet(lI) = 16,6 min; FAB-MS (M+H)+ = 706.
6a)5(S)-[1(S)-Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)etil]-3(R)-[(p-metoxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-ona
Prin analogie cu Exemplul 5d), 2,9 g (7,04 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino-2-(p-benziloxi-fenil)etiIJdihidrofuran-2-(3H)-onă, [preparare, vezi Exemplul 1 g)], dizolvate în 10,3 ml de THF și 1,2 ml de DMPU, se deprotonează, la -70°C, cu 14,1 ml de soluție 1M de litiu bis(trimetilsilil)amidă în THF, se alchilează (la temperatura de la -75°C la -50°C), cu 2,6 g (10,57 mmoli) de iodură de p-metoxibenzil [preparare, vezi Exemplul 6e)] în 10 ml de THF. Protonarea, la -75°C, cu 2,6 ml (35,2 mmoli) de acid propionic și 2,6 ml de apă, extracția și cromatografia pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 2:1), conduc la obținerea compusului din titlu: TLC Rf(D) - 0,48; tRet(ll) = 18,8 min.
6b) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)metil] hexanoic
2,6 g (4,89 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxi-fenil)-etil]-3(R)-[(p-metoxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă în 50 ml de dimetoxietan se hidrolizează, sub atmosferă de N2, cu 19,6 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu, în apă. După 25 h la temperatura camerei, se evaporă dimetoxietanul într-un evaporator rotativ, iar reziduul se tratează cu gheață-amestec rece din 150 ml de soluție saturată de NH4CI, 25 ml de soluție de acid citric 10% și clorură de
RO 119413 Β1 metilen. Faza apoasă se separă și se extrage de 2 ori cu clorură de metilen. Fazele organice se spală cu soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă pentru a da compusul din titlu: TLC Rf(B) = 0,28; tRet(ll) -16,4 min.
6c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)-2 (R)-[(p-metoxifenil)metil] hexanoic
2,5 g (4,54 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(pmetoxifenil)metil]hexanoic în 42 ml de DMF se sililează, sub atmosferă de gaz inert, cu 3,15 g (20,9 mmoli) de terț-butiIdimetilclorsilan și 2,53 g (37,3 mmoli) de imidazol la temperatura camerei, timp de 20 h. Amestecul de reacție se diluează cu acetat de etil, iar acest amestec se spală cu soluție saturată de NaHCO3, apă și soluție saturată de NaCI. Fazele apoase se extrag de 2 ori cu acetat de etil, iar fazele organice se usucă pe Na2SO4 și se evaporă. Reziduul se dizolvă în 50 ml de metanol și 13 ml de THF, iar această soluție se tratează cu 3,8 mg de carbonat de potasiu în 13 ml apă și se agită la temperatura camerei, timp de 1 h. Ulterior, amestecul de reacție se evaporă parțial, iar reziduul se diluează cu gheață-soluție rece de acid citric 10%; acest amestec se extrage apoi de 3 ori cu acetat de etil. Fazele organice se spală cu 2 porții de apă și soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă. Cromatografia pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 2:1) conduce la compusul pur din titlu: TLC Rf(C) = 0,13; tRet(H) = 21,7 min.
6d)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsHiloxi)-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
960 mg (1,44 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxi-fenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)metil] hexanoic și 290 mg (1,66 mmoli) de H-(L)-Val-(2-metoxietil) amidă [Exemplul 1b)] în 14,5 ml de 0,25M NMM/CH3CN reacționează la temperatura camerei, timp de 20 h, sub atmosferă de N2, cu 630 mg (1,66 mmoli) de HBTU. Acest amestec se evaporă și se reia în acetat de etil; soluția se spală cu agitare cu apă, de 2 ori, cu soluție de acid citric 10%, încă o dată cu apă, de 2 ori cu soluție saturată de NaHCO3, apă și soluție saturată de NaCI.Fazele apoase se extrag de mai mult de 2 ori cu acetat de etil, iar fazele organice se usucă cu Na2SO4 și se evaporă. Solubilizând produsul brut în hexan, rezultă compusul din titlu: TLC Rf(B) = 0,70; tRet(il) = 22,5 min.
6e) lodura de p-metoxibenzil
O soluție de 1,7 ml (12,8 mmoli) de clorură de 4-metoxibenzil (Fluka; Buchs, Elveția) în 25 ml de acetonă se agită la temperatura camerei, împreună cu 9,4 g (62,6 mmoli) de iodură de sodiu. Cromatograma în fază gazoasă a amestecului de reacție, făcută după 90 min, arată că reacția este completă; amestecul de reacție se toarnă în eter, iar acest amestec se spală cu soluție de tiosulfat de sodiu 10% și soluție saturată de NaCI. Uscarea fazei organice pe Na2SO4 și evaporarea ei conduc la compusul din titlu: 1H-NMR (200 MHz, CD3OD): 3,78 (s, 3H), 4,54 (s, 2H), 6,8-6,95 și 7,2-7,4 (2m, fiecare 3H).
Exemplul 7. 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)-2(R)-[(p-metoxi-fenil)-metil] -hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Hidrogenând 500 mg (0,708 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 6)], la presiune joasă, în 33 ml de metanol în prezența a 0,11 g de 10% Pd/C, se obține compusul din titlu, după filtrare, evaporarea filtratului și solubilizare în DIPE:TLC Rf(B) = 0,53; tRet(lI) = 12,2 min; FAB-MS (M+H)+-616.
Exemplul 8.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-[(p-metoxi-fenil)-metil] -hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
100 mg (0,162 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 7)] în 3 ml de DMF/dioxan, 1:1, se tratează, la 0°C sub atmosferă de N2, cu 105 mg (0,324 mmoli) de Cs2CO3 și 10,1 pl
2585
2590
2595
2600
2605
2610
2615
2620
2625
2630
RO 119413 Β1 (0,162 mmoli) de iodură de metil, iar amestecul se agită la temperatura camerei, timp de 20 h. Pentru prelucrare, amestecul de reacție se toarnă în apă, iar acest amestec se extrage cu 3 porții de clorură de metilen. Fazele organice se spală cu apă și soluție saturată de NaCI, se usucă pe Na2SO4 și se evaporă. Agitând în Dl PE, într-o baie cu ultrasunete, rezultă compusul din titlu: TLC Rf(B) = 0,62; tRet(ll) = 14,2 min; FAB-MS (M+H)+ = 630.
Exemplul 9.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(izobutoxi)-fenil]-2(R)-[(p-etoxifenil) metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
100 mg (0,162 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(/>hidroxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 7)] în 3 ml de DMF/dioxan, 1:1, se tratează la 0°C, într-un gaz inert cu 105 mg (0,324 mmoli) de CS2CO3 și 18,7 pl (0,162 mmoli) de iodură de izobutil, iar acest amestec se agită la 50°C, timp de 16 h. în timp ce HPLC arată că materia primă este încă prezentă, se adaugă în porții 5 echivalenți de iodură de izobutil și 10 echivalenți de Cs2CO3. După fiecare porție, amestecul se agită la 50°C, timp de o zi, până când HPLC arată că toată cantitatea de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(phidroxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil) metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă a reacționat. Lucrând în mod analog cu Exemplul 8), se obține compusul din titlu: TLC Rf(B) = 0,76; tRe,(ll) = 16,8 min; FAB-MS (M+H)+ = 672.
Exemplul 10.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-(fenilmetil)-hexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
2,07 g (2,90 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-(p-metoxifenil)2(R)-(fenilmetil)hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă, în 50 ml de DMF se desililează, sub atmosferă de N2, cu 1,83 g (5,80 mmoli) de TBAF. După 18 h, amestecul de reacție se toarnă în apă, iar acest amestec se extrage cu 4 porții de acetat de etil. Fazele organice se spală cu soluție saturată de NaHCO3, apă și soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă. Solubilizând de două ori în DIPE, rezultă compusul din titlu: tRet(ll) = 14,2 min; FAB-MS (M+H)+ = 600.
Materia primă se prepară astfel:
10a) 5(S)-[ 1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-metoxifenil)etil]dihidrofuran-2-(3H)-ona
O suspensie de 4,00 g (12,44 mmoli) de 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-(p-hidroxifenil) etil] dihidrofuran-2-(3H)-onă [Exemplul 11 f)] în 240 ml de DMF/dioxan, 1:1, reacționează sub atmosferă de N2, cu 8,1 g (24,88 mmoli) de Cs2CO3 și 0,77 ml (12,44 mmoli) de iodură de metil. După 18 h, amestecul de reacție se toarnă în 190 ml de gheață-apă, iar acest amestec se extrage de 3 ori cu clorură de metilen. Fazele organice se spală cu apă și soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă. După agitarea cu hexan într-o baie de ultrasunete, se obține compusul din titlu: TLC Rf(C) = 0,43; tRet(ll) = 13,5 min; FAB-MS (M+H)+ = 336.
10b) 5(S)-[ 1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-metoxifenil)etil]-3(R)-(fenilmetil) dihidrofuran-2-(3H)ona
Prin analogie cu Exemplul 5d), 4,17 g (12,44 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-metoxifenil)etil]dihidrofuran-2-(3H)-onă, dizolvată în 22,4 ml de THF și 2,5 ml de DMPU, se deprotonează, la -70°C, cu 24 ml dintr-o soluție 1M de litiu bis(trimetilsilil)amidă în THF și se alchilează (-75°C, 1 h) cu 1,5 ml (12,44 mmoli) de bromură de benzii. Protonarea, la -75°C, cu 4,6 ml de acid propionic și 4,6 ml de apă, extracția și separarea pe coloana cromatografică (SiO2, clorură de metilen/eter 25:1) conduc la compusul din titlu: TLC Rf(C) = 0,74; tRet(ll) = 16,6min; FAB-MS (M+H)+ = 426.
10c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-(fenilmetil) hexanoic
3,00 g (7,05 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-metoxifenil)-etil]-3(R)-(fenilmetil)dihidrofuran-2-(3H)-onă, în 112 ml de dimetoxietan și 57 ml de apă se hidrolizează, sub un gaz inert, cu 28 ml de soluție 1M hidroxid de litiu. După 20 h, la temperatura camerei, amestecul de reacție se toarnă în amestec răcit cu gheață de 340 soluție saturată de NH4CI, 28 ml de soluție
RO 119413 Β1 de acid citric 10% și clorură de metilen. Se adaugă metanol în scopul de a dizolva complet produsul. Faza apoasă se separă și se extrage de 2 ori cu clorură de metilen. Fazele organice se spală cu soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă, obținându-se compusul denumit în titlu: tRet(ll) = 14,0 min; FAB-MS (M+H)+ = 444.
10d)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-(p-metoxifenil)-2(R)-(fenilmetil)hexanoic
2,9 g (6,54 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-(fenilmetil)hexanoic, în 7 ml de DMF se sililează, la temperatura camerei timp, de 20 h, sub atmosferă de N2, cu 4,5 g (30 mmoli) de terț-butildimetilclorsilan și 3,65 g (53,6 mmoli) de imidazol. Amestecul de reacție se toarnă în 500 ml de gheață-apă, iar acest amestec se extrage de 3 ori cu acetat de etil. Fazele organice se spală cu soluție de acid citric 10%, de 2 ori cu apă și soluție saturată de NaCI, se usucă cu Na2SO4 și se evaporă. Hidroliza reziduului în 80 ml de metanol și 30 ml de THF cu 5,4 g de carbonat de potasiu și 30 ml de apă și prelucrarea amestecului timp de 3 h, prin analogie cu Exemplul 7c), urmată de cromatografie pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 2:1), conduce la compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,13; tRet(ll) = 20,3 min.
10e)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butHdimetilsililoxi)-6-(p-metoxifenil)-2(R)-(fenilmetil)hexanoil-(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
1,56 g (2,8 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-(p-metoxifenil)-2(R)-(fenilmetil)hexanoicși 538 mg (3,09 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1b)], în 27 ml de 0,25M NMM/CH3CN reacționează, la temperatura camerei, timp de 20 h, sub atmosferă de N2, cu 1,17 g (3,09 mmoli) de HBTU. Prelucrând analog cu Exemplul 5a), rezultă compusul din titlu: tRet(ll) = 21,1 min; FAB-MS (M+H)+ = 714.
10f) 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-(p-hidroxifenil)etH]dihidrofuran-2-(3H)-ona
Hidrogenând 3,0 g (7,29 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil) etil] dihidrofuran-2-(3H)-onă [preparare, vezi Exemplul 1g)], în 100 ml de metanol, cu 0,6 g de 10% Pd/C, rezultă, după filtrarea catalizatorului și evaporarea filtratului, compusul din titlu: tRet(ll) = 10,6min.
Exemplul 11. Compușii următori sunt preparați în mod analog cu unul din exemplele date mai sus sau mai jos:
I) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(o-fluor-p-metoxifenil)metil]he-xanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida
II) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-fluor-o-metoxifenil)metll]he-xanoil-(L)Val-N-(2-meioxietil)amida lll5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(o-hidroxi-p-metoxifenil)metil]hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida
Exemplul 12.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-(fenilmetil)-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 1,0,82 g (1,19 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-fenilmetilhexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă, în 12 ml de DMF reacționează cu 0,756 g (2,38 mmoli) de trihidrat TBAF pentru a se obține compusul din titlu. După prelucrare, compusul pur din titlu este obținut prin agitare cu dietil eter și filtrare. TLC Rf(A) = 0,37; tRet(ll) = 14,58min; FAB-MS (M+H+) = 570.
Compusul inițial este preparat, după cum urmează:
12a) 5(S)-[ 1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]dihidrofuran-2-(3H)-ona [vezi Exemplul 2c)] [vezi de asemenea, A.E. DeCamp, A.T. Kawaguchi, R.P. Volante și I. Shinkai, Tetrahedron Lett. 32,1867(1991)]. 173 g de Zn/Cu [pentru preparare, vezi R.D. Smith, H.E. Simmons, W.E. Parham, M.D. Bhavsar, Org. Synth. Coli., Voi 5, 855 (1973)] și 280 ml de dimetilacetamidă sunt adăugați, în atmosferă de N2, la o soluție de 375 g (1,65 moli) de 2-iodpropionat de etil [Exemplul 1 k)], în 1700 ml de toluen și acest amestec este apoi agitat
2685
2690
2695
2700
2705
2710
2715
2720
2725
2730
RO 119413 Β1 energic la temperatura camerei, timp de o oră și la 80°C, timp de 4 h (- soluție homoenolată de Zn). într-un alt recipient (atmosferă de N2), o soluție de 122 ml (0,40 moli) de ortotitanat de tetraizopropil în 350 ml de toluen și 1900 ml de clorură de metilen, este tratată, sub răcire ușoară, la o temperatură internă cuprinsă între 15 și 25°C, cu 127 ml (1,14 moli) de tetraclorură de titan și acest amestec este agitat la temperatura camerei, timp de 15 min (- soluție galbenă) și este răcit până la -40°C (- cristalizare parțială a izopropoxidului de triclorotitan). Soluția de homoenolat de Zn, care este răcită până la temperatura camerei, este filtrată sub atmosferă de argon, printr-o frită de sticlă G3 și adăugată, prin picurare, la isopropoxidul de triclortitan, temperatura fiind menținută între -30°C și -25°C (- soluție roșu închis), după care amestecul este agitat la -25°C, timp de 5 min și apoi răcit până la -40°C. O soluție de 233 g (0,85 moli) de (S)-N-Boc-fenilalaninal [pentru preparare vezi DJ. Kempf, J. Org. Chem. 51,3921 (1986), cristalizare din hexan (0°C, aproximativ 18 h), spălare cu hexan rece și uscare] în 1500 ml de clorură de metilen, este adăugată prin picurare și amestecul este agitat la o temperatură cuprinsă între -22 și -18°C, timp de 15 ore și, în final, la 0’C timp de 1h. Amestecul de reacție este luat în 101 de amestec gheață-apă și 121 de te/ț-butilmetileter și acest amestec este agitat energic timp de 7-10 min. Faza apoasă este separată, este extrasă de două ori cu 101 de eter, fazele organice sunt spălate cu 81 de apă, 81 de soluție saturată de carbonat acid de sodiu, 81 de apă și 51 de soluție salină: acestea sunt uscate cu sulfat de sodiu și evaporate (- 5(S)-(Boc-amino)4(S)-hidroxi-6-fenilhexanoat de etil cristalin).
Intermediarul obținut mai sus este încălzit în 6500 ml de toluen și 230 ml de acid acetic și în atmosferă de argon, la 100°C, timp de 2,5 h. Când acesta s-a răcit, amestecul de reacție este turnat, în timp ce este agitat, în 61 de amestec gheață-apă, și faza apoasă este separată și extrasă de 2 ori cu 2000 ml de toluen; fazele organice sunt spălate cu 51 de soluție de carbonat acid de sodiu, 5 I de soluție 40% de sulfit acid de sodiu, 4 I de apă și 4 I de soluție salină, și uscate pe sulfat de sodiu. Evaporând fazele organice până când se ajunge la aproximativ 300 g și tratându-le în final cu 800 ml de hexan (cu agitare timp de câteva ore), se obține lactona cristalină, a cărei HPLC arată că aceasta conține aproximativ 10% din epimerul (5R). (TLC Rf(E) = 0,08; tRet(lI) = 18,8 min). Acest material este folosit în etapa următoare. Compusul pur din titlu poate fi obținut prin cromatografiere pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 2:1): TLC Rf(E) = 0,14; tRet(ll) = 19,2 min; [a]D = 17,70 (c = 1; etanol).
12b) 5(S)-[ 1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-fenilmetildihidrofuran-2-(3H)-ona [vezi, de asemenea, A.K. Ghosh, S.P. McKee, și W.J. Thompson, J. Org. Chem. 56, 6500 (1991)]. Sub o atmosferă de N2, o soluție de 1943 g (6,32 moli) de 5(S)-[1 (S)-(Bocamino)-2-feni1etil]dihidrofuran-2-(3H)-onă în 12,01 de THF și 1,911 de 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1 H)-pirimidinonă este răcită până la -75°C și tratată, la o temperatură internă mai mică de -70°C, cu 14000 ml de soluție 1M de litiu bis(trimetilsilil)amidă în THF (Aldrich) și acest amestec este, după aceea, agitat la o temperatură de -75°C, timp de 20 min. Sunt adăugați 835 ml (7,00 moli) de bromură de benzii sub formă de picături, într-un interval de timp de o oră, în tot acest timp nepermițându-se creșterea temperaturii peste -70°C și apoi amestecul este agitat la -75°C, timp de 30 min. Ulterior, 2320 ml de acid propionic (90 min) și apoi 2320 ml de apă (o oră) sunt adăugați la soluția clară, temperatura fiind lăsată să crească la -100°C. Amestecul de reacție este turnat peste 30 I de acetat de etil și 35 I de soluție de acid citric 10% și faza apoasă este separată și reextrasă de 2 ori cu 101 de acetat de etil. Fazele organice sunt spălate de 3 ori cu soluție saturată de bicarbonat de sodiu, 201 de soluție salină și de 2 ori cu 201 de apă și apoi concentrate. Reziduul uleios este luat în 101 de toluen și acest amestec este evaporat până se ajunge la aproximativ 5 I. Filtrând reziduul evaporat prin 4 kg de silicagel Merck (0,063-0,200 mm), spălându-l cu toluen și cristalizând produsul brut din hexan (41 de hexan/kg de produs brut), se obține compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,54; FAB-MS (M+H)+ - 414.
RO 119413 Β1
12c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-fenilmetilhexanoic
O soluție de 17,6 g de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-fenilmetil-dihidrofuran-2(3H)-onă, în 710 ml de etilen glicol dimetil eter și 352 ml de apă, este tratată prin picurare, la 20°C și timp de 10 min, cu 176 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu. După aceea, amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 1,5 h și solventul este evaporat. Reziduul este turnat peste 1 I de acid citric 10% rece, această soluție acidă este extrasă de 3 ori, de fiecare dată cu 800 ml de acetat de etil. Produsele extrase combinate sunt spălate prima dată cu 800 ml de apă și apoi cu 800 ml de soluție salină. După ce soluția organică a fost uscată pe sulfat de sodiu, solventul este distilat. Compusul brut din titlu este supus etapei următoare fără nici o purificare ulterioară. FAB-MS (M+H)+ = 414.
12d)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-fenil-metilhexanoic O soluție de 6,35 g de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-fenilmetilhexanoic, în 90 ml de DMF este tratată, în timp ce este agitată, cu 8 g de imidazol și 10 g de t-butildimetilclorsilan. După ce a fost agitată la temperatura camerei timp de 18 h, soluția limpede de culoare galbenă este turnată peste un amestec apă-gheață și acest amestec este extras de trei ori, de fiecare dată cu câte 250 ml de acetat de etil. Extrasele combinate sunt spălate, succesiv, de 3 ori cu acid citric 10%, o dată cu apă și de trei ori cu soluție apoasă saturată de bicarbonat de sodiu, din nou cu apă, și în final, cu soluție salină. După uscare pe sulfat de sodiu, solventul este evaporat și terf-butildimetileterul rezultat (13,5 g) este dizolvat în 53 ml de THF și tratat cu 53 ml de acid acetic și 20 ml de apă. După ce este agitat la temperatura camerei, timp de 3 h, amestecul este turnat în apă și acest amestec este extras de 3 ori cu eter. Extrasele eterice colectate sunt spălate de două ori cu apă și o dată cu soluție salină și uscate cu sulfat de sodiu. După concentrare, produsul brut este purificat prin cromatografiere pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil: 3,5:1,5) și astfel este obținut compusul din titlu. TLC R,(D) = 0,37; FAB-MS (M+H)+ = 528.
12e)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-(fenilmetil)hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida
O soluție de 1,25 g (2 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetil-sililoxi)-6fenil-2(R)-(fenilmetil)hexanoic, 0,98 g (2,21 mmoli) de BOP, 0,3 g (2,21 mmoli) de HOBT și 0,55 ml (4,98 mmoli) de N-metilmorfolină, în 15 ml de DMF, este tratată, după ce a fost agitată timp de 30 min la temperatura camerei, cu 0,208 ml (2,42 mmoli) de (L)-Val-N-(2-metoxietil) amidă. După ce este agitat la temperatura camerei timp de 5,5 h, amestecul este turnat în 300 ml de apă și acest amestec este extras de 3 ori cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt spălate cu apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu (de două ori) și soluție salină și după uscare cu sulfat de sodiu, sunt concentrate la presiune redusă. Compusul din titlu este purificat prin cromatografie pe coloană (SiO2, D la A); TLC Rf(C) = 0,23.
Exemplul 13.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-benziloxifenil)-metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 1), compusul din titlu este obținut plecând de la 1,29 g (1,63 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetil-sililoxi)-6-fenil-2(R)-[(p-benziloxifenil) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă și 1,03 g (3,26 mmoli) de TBAF trihidrat. TLC Rf(M) = 0,58; tRet(l) - 16,9 min.
Materia primă este preparată, după cum urmează:
13a) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(p-benziloxi-fenil) metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-methoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 1c), compusul din titlu este obținut sub forma unei rășini incolore, după purificare cromatografică cu silicagel, utilizând hexan/acetat de etil (1:1), pornind de la 1,14 g (1,8 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildime-tilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(pbenziloxifenil)metil]hexanoic, 313 mg (1,8 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-methoxietil)amidă
2780
2785
2790
2795
2800
2805
2810
2815
2820
2825
RO 119413 Β1 [prepararea în Exemplul 1b)] și 751 mg (1,98 mmoli) de HBTU în 18 ml de soluție 0,25M de NMM, în acetonitril. TLC Rf(acetat de hexan/etil (1:1)) = 0,19; tRet(l) = 23,3 min; FAB MS (M+H)+ =790.
13b) 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(p-benziloxifenil)metil] dihidrofu-ran-2-(3H)ona în mod analog cu Exemplul 1h), 1,13 g (3,70 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]dihidrofuran-2-(3H)-onă [Exemplul 2b)], dizolvate în 4,8 ml de THF și 0,75 ml de 1,3 dimetil3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinonă, sunt deprotonate la -75°C, cu 7,25 ml de soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu în THF și alchilat (15 min) cu 1,2 g (3,7 mmoli) de iodură de p-benziloxibenzil [Exemplul 1 d)] în 2 ml de THF. Cromatografia pe coloană (SiO2, acetat de hexan/etil, 2:1) dă compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,30; tRet(l) = 28,2 min; FAB-MS (M+H)+ = 502.
13c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil] hexanoic în mod analog Exemplului 1 i), 1,4 g (2,79 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil)]3(R)-[(p-benziloxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă, în 45 ml de dimetoxi etan și 23 ml de apă sunt hidrolizate cu 11 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu. Amestecul de reacție, care a fost parțial evaporat, este turnat într-un amestec de gheață, 137 ml de soluție saturată de NH4CI, 11 ml de soluție 10% de acid citric și 56 ml de clorură de metilen și este adăugat metanol până când se dizolvă precipitatul solid. Faza apoasă este extrasă cu 2 părți de clorură de metilen / metanol, aproximativ 10:1 și fazele organice sunt spălate cu soluție salină, uscate cu Na2SO4 și evaporate: tRet(l) = 24,0 min; FAB-MS (M+H)+ - 520.
13d)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(benzil-oxifenil)metiljhexanoic
1,4 g (2,69 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-benziloxifenil) metil]hexanoic în 2,9 ml DMF sunt agitate, la temperatura camerei timp de 18 h, împreună cu 1,87 g (12,4 mmoli) de te/i-butildimetilclorosilan și 1,5 g (22 mmoli) de imidazol. Amestecul de reacție este apoi turnat în apă cu gheață și acest amestec este extras cu 3 părți de acetat de etil; fazele organice reunite sunt spălate cu soluție 10% de acid citric, apă și soluție salină, apoi uscate cu sulfat de sodiu și evaporate. Se obține un ulei. Acesta este urmat de hidroliza funcției de ester silii a uleiului, la temperatura camerei, folosind 2,2 g de carbonat de potasiu în 63 ml de metanol/apa/THF, 3:1:1 și evaporare parțială la temperatura camerei. Reziduul apos este turnat în soluție 10% de acid citric și gheață, iar amestecul obținut este extras de 3 ori cu acetat de etil; fazele organice sunt spălate cu apă și soluție salină, uscate pe sulfat de sodiu și evaporate. Cromatografia pe coloană a produsului brut dă compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,17; tRet(l) = 33,7 min; FAB-MS (M+H)+ = 634.
Exemplul 14.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-hidroxifenil)-metil]hexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
O soluție de 718 mg (1,06 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă din Exemplul 13), în 50 ml de metanol, este hidrogenată la temperatura camerei, timp de 3 h, în prezența a 150 mg de 10% paladiu pe cărbune și la o presiune de hidrogen de 1 atm. Compusul de titlu este obținut ca un solid amorf, după ce catalizatorii au fost filtrați și produsul filtrat este evaporat. TLC Rf (hexan/acetat de etil, 2:1) = 0,29; tRet(l) = 12,8 min; FAB-MS (M+H)+ = 586.
Exemplul 15.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-izobutoxifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
O suspensie conținând 585 mg (1 mmol) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)[(p-hidroxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă din Exemplul 14) și 1,22 g de carbonat de cesiu în 50 ml de dioxan este amestecată la temperatura camerei timp de 16 h, într-o atmosferă de azot; aceasta este apoi tratată cu 2,7 ml de iodură de izobutil (Fluka, Buchs, Elveția) și încălzită la 80°C, timp de 3 h, până când monitorizarea TLC nu mai poate detecta
RO 119413 Β1 nici o urmă de materie primă. în final, soluția este diluată cu clorură de metilen și precipitatul este îndepărtat prin filtrare. Produsul filtrat este evaporat și conține compusul din titlu după purificarea cromatografică pe silicagel, folosind clorură de metilen/metanol (95:5) ca eluent și cristalizare din acetat de etil/hexan. TLC Rf(L) = 0,5; tRet(l) = 17,1 min; FAB-MS (M+H)+ = 642.
Exemp\u\16.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-(2-piridilmetoxi)-fenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 15), compusul din titlu este obținut, după purificare cromatografică cu silicagel utilizând clorură de metilen/metanol (97:3) ca eluent și cristalizator din acetat de etil, plecând de la 65 mg de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-hidroxifenil) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă din Exemplul 14), 137 mg de carbonat de cesiu și 3 ml de clorură de 2-picolil [eliberată din sarea HCI (Fluka, Buchs, Elveția) cu soluție de NaHCOJ. TLC R((L) = 0,4; tRet(l) =11,7 min; FAB-MS (M+H)+ = 677.
Exemplul 17.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-(3-piridilmetoxi)fenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
O suspensie alcătuită din 585 mg (1 mmol) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil2(R)- [p-hidroxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă din Exemplul 14) și 1,22 g carbonat de cesiu este agitată peste noapte, la temperatura camerei, într-o atmosferă de azot; aceasta este apoi tratată cu 4,0 g de clorură de 3-picolil [eliberată din sarea HCI (Fluka, Buchs, Elveția), cu soluție NaHCO3] și încălzită la 85°C, timp de 6 h. După adăugarea a 100 mg de iodură de sodiu și 500 mg de carbonat de cesiu, aceasta este încălzită timp de 18 h. Pentru prelucrare, amestecul este eluat cu clorură de metilen și precipitatul este filtrat. Produsul filtrat este evaporat și conține compusul din titlu, sub forma unui solid amorf, după purificarea cromatografică folosind clorură de metilen/THF (2:1) și liofilizare din dioxan. TLC Rf(L) = 0,5; tRel(l) =11,5 min; FAB MS (M+H)+ = 677.
Exemplul 18.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-metoxifenil) metil] hexanoil(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
O soluție de 90 mg (0,154 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)- [(phidroxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metioxifenil)amidă din Exemplul 14), în 5 ml de dioxan/DMF (1:1) este tratată, la 0“C, cu 100 mg (0,31 mmoli) de carbonat de cesiu și apoi cu 0,01 ml (0,15 mmoli) de iodură de metil. După ce este agitat la temperatura camerei, timp de 19 h, într-o atmosferă de azot, amestecul de reacție este turnat peste apă cu gheață și acest amestec este extras cu clorură de metilen. Extractele organice sunt spălate cu soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină, filtrate prin vată și evaporate. Compusul din titlu este obținut după purificarea cromotografică pe silicagel, folosind clorură de metilen/metanol (19:1) și liof ilizarea din dioxan. TLC Rf(clorură de metilen/metanol, 19:1) = 0.27; tRet(l) = 14,6 min; FAB MS (M+H)+ = 600.
Exemp\u\‘\9.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4-metilendioxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
O soluție de 165 mg de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(/ert-butildimetilsilioxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4metilendioxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă, în 4,04 ml de DMF pur, este tratată cu 127,4 mg de TBAF și amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 21 de h. Soluția ușor tulbure, cu aspect gălbui, este turnată în 30 ml de apă și acest amestec este extras cu acetat de etil. Faza organică este spălată cu soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină, astfel încât aceasta devine neutră și apoi este uscată cu sulfat de sodiu. Compusul din titlu este dizolvat în clorură de metilen și precipitat cu hexan. TLC R((A) = 0,42; FAB-MS (M+H)+ = 614.
2880
2885
2890
2895
2900
2905
2910
2915
2920
RO 119413 Β1
Materia primă este preparată, după cum urmează:
19a) Clorură de 3,4-metilendioxibenzil
15,04 ml de clorură de tionil sunt adăugate prin picurare la 0°C, într-un interval de 25 min și în atmosferă de argon, la 10,82 g de alcool 3,4-metilendioxibenzil (Fluka, Buchs, Elveția) și 48 g de diizopropilaminoetilpolistiren (bază polyhunig: polistiren reticulat cu 2% divinilbenzen, diizopropilaminometilat; Fluka, Buchs, Elveția) în 200 ml de eter pur. După ce este agitat la temperatura de 0’0, timp de 1,5 h, amestecul este filtrat prin sucțiune și filtratul este concentrat într-un evaporator rotativ și apoi sub vid înalt. Ceea ce a rămas este purificat prin cromatografie pe silicagel (eluent: C) și compusul din titlu este astfel obținut. TLC R, (hexan:acetat de etil, 4:1);
1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 6,95-6,7 (Μ, 3H), 5,97 (s, 2H), 4,53 (s, 2H).
19b) lodura de 3,4-metilendioxibenzil
11,65 g clorură de 3,4-metilendioxibenzil în 128 ml de acetonă pură sunt tratate cu 49,7 g iodură de sodiu și acest amestec este agitat la temperatura camerei, timp de 2,5 h, în atmosferă de argon și fără lumină. Amestecul de reacție este diluat cu 1,5 I de eter și acest amestec este spălat cu o soluție 10% de tiosulfat de sodiu (600 ml) și soluție salină. Compusul din titlu este obținut după uscare, pe sulfat de sodiu și îndepărtarea solventului. Acesta este recristalizat din eter/hexan. Punct de topire: 5TC. TLC Rf (hexan:acetat de etil, 4:1) = 0,43. 1H-NMR (360 MHz, CDCI3): 6,93-6,77 (m, 2H), 6,77-6,64 (m, 1H), 5,95 (s, 2H), 4,44 (s, 2H).
19c) 5(3)-(1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(3,4-metilendioxifenil)metil]dihidrofuran-2(3H)-ona
Sub atmosferă de N2, o soluție de 500 mg de 5(S)-[ 1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-dihidrofuran-2-(3H)-onă din Exemplul 2b), în 2 ml de THF pur și 0,33 ml de 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1 H)-pirimidonă (DMPU) este răcită până la -75°C și tratată, la o temperatură internă mai mică de -70°C, cu 3,21 ml de soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu în THF (Aldrich, Steinheim, Germania) și acest amestec este agitat la -75°C, timp de 20 min. 429 mg de iodură de 3,4-metilendioxibenzil în 1 ml de THF pur sunt adăugate prin picurare, la soluția de reacție, pe parcursul a 10 min, folosind o seringă, timp în care temperatura internă nu poate să crească peste -70°C și acest amestec este apoi agitat la -75°C, timp de 1h. Se adaugă apoi la soluție 0,611 ml de acid propionic, la o temperatură situată în intervalul -75°C...-70°C, folosind o seringă și aceasta este urmată de 0,611 ml de apă. în timpul acestei proceduri, temperatura crește până la -30°C. După aceea, amestecul de reacție este diluat cu 35 ml de acetat de etil și amestecul este agitat și amestecat cu 10 ml de soluție 10% de acid citric, timp de 5 min, la rece (gheață/apă în răcire). Faza apoasă este separată și faza organică este spălată, succesiv, cu soluție salină și soluție saturată de bicarbonat de sodiu și din nou cu soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase de 2 ori cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe sulfat de sodiu și concentrate. Compusul din titlu este obținut ca un ulei maroniu. Purificarea se realizează prin cromatografie pe silicagel (eluent D). TLC Rf(D) = 0,38; FAB-MS (M+H)+ = 440.
19d) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4-metilendioxifenil) metil] hexanoic
O soluție de 278 mg de 5(S)-[1 (S)-(Boc-Amino)-2-feniletil]-3(R)-[(3,4-metilendioxifenil) metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă în 10,25 ml de etilenglicol dimetil eter și 5,15 ml de apă este tratată prin picurare, la temperatura camerei, cu 2,53 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu. După aceasta, amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 3 h, diluat cu acetat de etil și THF și spălat într-o pâlnie de separare, până când devine neutru, cu un amestec constând din 31 ml de soluție saturată de clorură de amoniu și 2,6 ml de soluție de acid citric, urmată de soluție salină și apă. Compusul din titlu, care este supus procesării ulterioare fără purificare ulterioară, este obținut după uscarea pe sulfat de sodiu și îndepărtarea solventului. FABMS (M+H)+ = 458.
RO 119413 Β1
2975
19e) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4-metilendioxifenil)metil]hexanoic
O soluție de 271 mg de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4-metilendioxifenil)metil]hexanoic, în 2,13 ml de DMF, este tratată, în timp ce este agitată, cu 338 mg de imidazol și 415 mg de tert-butildimetilclorsilan. După ce este agitată la temperatura camerei, timp de 20 h, soluția de reacție este turnată peste un amestec gheață-apă și amestecul astfel obținut este extras cu acetat de etil. Faza organică este spălată cu soluție 10% de acid citric și soluție salină. Este obținut un produs brut și acesta este dizolvat cu 7,13 ml de metanol și 2,75 ml de THF, fiind tratat apoi la temperatura camerei, cu o soluție de 485 mg de carbonat de potasiu, în 2,75 ml de apă. Amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 2 h, acesta fiind concentrat până la jumătate din volumul inițial și turnat peste soluție 10% de acid citric și gheață; acest amestec este apoi extras cu acetat de etil. Faza organică este spălată cu soluție salină rece. După uscarea pe sulfat de sodiu, solventul este evaporat și reziduul este cromatografiat pe silicagel (eluent C), fiind obținut astfel compusul din titlu. TLC Rf(C) = 0,27. FAB-MS (M+H)+ = 572.
19f)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tefț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4-metilen-dioxifenH) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Un amestec de 120 mg de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-fenil2(R)-[(3,4-metilendioxifenil)metil]hexanoic, 87,6 mg de HBTU și 40,2 mg de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [pentru preparare, vezi Exemplul 1 b)] în 1,97 ml de soluție 0,25M de NMM în acetonitril, este agitată la temperatura camerei, timp de 19 h, într-o atmosferă de argon. Soluția este concentrată la jumătate din volumul inițial, într-un evaporator rotativ, diluată cu acetat de etil rece și apoi spălată, succesiv, cu soluție 10% de acid citric, apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Compusul din titlu, care este supus procesărilor ulterioare fără a fi purificat, este obținut după uscarea cu sulfat de sodiu și îndepărtarea solventului. TLC Rf(D) = 0,21. FAB-MS (M+H)+ = 728.
Exemplul 20.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4-dimetoxifenil)metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 19), 136 mg de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/Î-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4-dimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă în 3,38 ml de DMF pur sunt desililate cu 113,6 mg de TBAF pentru a obține compusul din titlu. Purificarea este realizată prin cromatografiere de două ori pe silicagel (eluent A, THF și metanol). Compusul din titlu este recristalizat din clorură de metilen/hexan. TLC Rf(A) = 0,37. FAB-MS (M+H)+ = 630.
20a) Clorură de 3,4-dimetoxibenzil în mod analog cu Exemplul 19a), compusul din titlu este obținut din 10 g de alcool 3,4dimetoxibenzil (Fluka, Buchs, Elveția), 46,2 g de diizopropilaminometilpolistiren (bază polyhunig) și 4,62 ml de clorură de tionil în 200 ml de eter pur. TLC Rf(hexan:acetat de etil, 4:1) - 0,31. 1H-NMR (200MHz, CDCI3): 7,0-6,87 (m, 2H); 6,82 (d, 1H); 4,56 (s, 2H); 3,9 (s, 3H); 3,87 (s, 3H).
20b) lodura de 3,4-dimetoxibenzil în mod analog cu Exemplul 19b), compusul din titlu este obținut din 6,185 g de clorură de 3,4-dimetoxibenzil și 24,19 g iodură de sodiu, în 62 ml de acetonă pură. TLC Rf(hexan:acetat de etil, 4:1) = 0,40.1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 6,95 (dxd, 1H); 6,88 (d, 1H); 6,75 (d, 1H); 4,47 (s, 2H); 3,87 (s, 3H); 3,86 (s, 3H).
20c) 5(S)-[ 1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(3,4-dimetoxifenil)metil]dihidro-furan-2(3H)-ona în mod analog cu Exemplul 19c), 1 g de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletilj hidrofuran-2(3H)-onă [Exemplul 2b)j, în 4 ml de THF pur este deprotonat (-75°C) cu 6,42 ml de soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu în THF, cu adăugarea a 0,66 ml de DMPU și alchilată cu 911 mg de iodură de 3,4-dimetoxibenzil. Cromatografierea pe silicagel (eluenți D, C și J) dă compusul din titlu. TLC Rf(C) = 0,42. MS M+ = 455.
2980
2985
2990
2995
3000
3005
3010
3015
3020
RO 119413 Β1
20d) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4-dimetoxifenil) metil] hexanoic în mod analog cu Exemplul 19d), 778 mg de 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)[(3,4-dimetoxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă în 27,67 ml de dimetoxietan și 13,91 ml de apă sunt hidrolizate cu 6,83 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu, pentru a se obține compusul din titlu, care este supus direct operațiilor ulterioare. TLC R((C) = 0,07.
20e)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4-dimetoxifenil) metil] hexanoic în mod analog cu Exemplul 19e), 804 mg de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil2(R)-[(3,4-dimetoxifenil)metil]hexanoic în 5,94 ml de DMF sunt sililate cu 1,162 g de te/ț-butiIdimetilclorosilan și 946,6 mg de imidazol. Esterul silii din produsul brut este adăugat la temperatura camerei, timp de 2 h, într-un amestec format din 19,61 ml de metanol, 7,56 ml de TMF, 7,56 ml de apă și 1,334 g de carbonat de potasiu. Compusul din titlu este purificat prin cromatografiere, de două ori, pe silicagel (eluenți: D, C, J și B). TLC Rf(C) = 0,27. MS M+ = 557.
20f)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4-dime-toxifenil) metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 19f), 109,9 mg de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/țbutildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4-dimetoxifenil)metil]hexanoic, 78,1 mg de HBTU și 35,9 mg de H-(L)Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1 b)] în 1,75 ml de 0,25M NMM/CH3CN reacționează pentru a obține compusul din titlu. TLC Rf(A) = 0,39. FAB-MS (M+H)+ = 744.
Exemplul 21.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3-metoxifenil)-metil]hexanoil(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 19), 300 mg de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butidimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3-metoxifenil)metil]hexanoxil-(L)-Val-N-(2-metoxi-etil)amidă, în 6,63 ml de DMF pur sunt desililate cu 217,7 mg de TBAF, pentru a da compusul din titlu. Purificarea este efectuată prin cromatografie pe silicagel (eluent A și metanol) sau prin precipitarea substanței din acetat de etil rece. TLC Rf(A) = 0,32. FAB-MS (M+H)+ = 600.
21a) lodura de 3-metoxibenzil în mod analog cu Exemplul 19b), compusul din titlu este obținut din 2 ml de clorură de 3-metoxibenzil (Fluka, Buchs, Elveția) și 9,72 g de iodură de sodiu, în 23 ml de acetonă pură. TLC Rf(hexan/acetat de etil, 2,5:1) = 0,71.1H-NMR (200MHz, CDCI3): 7,20 (m, 1H); 7,0-6,87 (m, 2H); 6,78 (dxd, 1H); 4,42 (s, 2H); 3,8 (s, 3H).
21b)5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(3-metoxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)ona în mod analog cu Exemplul 19c), 1,5 g de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-dihidrofuran-2-(3H)-onă [Exemplul 2b)], în 3 ml de TMF pur, sunt deprotonate (-75°C) cu 9,62 ml de soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu în THF și cu adăugarea a 0,998 ml de DMPU și alchilate cu 1,22 g de iodură de 3-metoxibenzil. Cromatografia pe silicagel (eluent E) permite obținerea compusului din titlu. TLC Rf (hexan/acetat de etil, 2,5:1) = 0,32. FAB-MS (M+H)+ = 426.
21c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3-metoxifenil)metil] hexanoic în mod analog cu Exemplul 19d), 1,315 g de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(3metoxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă în 49,9 ml de dimetoxietan și 25,16 ml de apă sunt hidrolizate cu 12,36 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu pentru a se obține compusul din titlu, care este apoi supus procesărilor ulterioare. TLC Rf(C) = 0,09. FAB-MS (M+H)+ = 444.
21d) Acid 5(S)-(Boc~amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3-metoxifenil) metiljhexanoic în mod analog cu Exemplul 19e), 1,3 g de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil2(R)-[(3-metoxifenil)metil]hexanoic, în 13 ml de DMF, sunt sililate cu 1,987 g de terț-butildimetiIclorosilan și 1,646 g de imidazol. Grupul silii ester în produsul brut este separat la temperatura camerei, în 2 h, într-un amestec conținând 38,94 ml de metanol, 13,34 ml de THF, 13,34 ml de apă și 2,35 g de carbonat de potasiu. Prin cromatografie pe silicagel (eluenți: E, D și C) se obține compusul din titlu pur. TLC Rf(D) = 0,06. FAB-MS (M+H)+ = 558.
RO 119413 Β1
e) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3-metoxife-nil) metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 20f), 200 mg de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3-metoxifenil)metil]hexanoicși 68,6 mg de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil) amidă [Exemplul 1b)], în 3,36 ml de 0,25M NMM/CH3CN, reacționează cu 149,4 mg de HBTU pentru a da compusul din titlu. TLC Rf(C) = 0,20. FAB-MS (M+H)+ = 714.
Exemplul 22.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida cu formula:
3075
3080
3085
3090
337 mg (0,379 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă, în 7,28 ml de DMF pur sunt tratate cu 244 mg (0,758 mmol) de TBAF și amestecul este agitat timp de 20 de h, în atmosferă de argon. Amestecul de reacție este diluat cu aproximativ 50 ml de acetat de etil și acest amestec este spălat, succesiv, cu apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Fazele apoase sunt extrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate peste sulfat de sodiu și concentrate la aproximativ 30°C. Restul este dizolvat în puțin acetat de etil. Prin adăugarea hexanului se obține compusul din titlu cristalizat. Un produs suplimentar este obținut prin purificarea soluției apoase inițiale pe silicagel (eluent, acetat de etil/metanol, 9:1). Punct de topire: 141-143’C. TLC Rf(acetat de etil) = 0,16. FAB-MS (M+H)+ = 660. HPLC tRet = 14,59 min (gradient II). IR(KBr) = inter alia, 1687, 1651, 1622, 1525, 1495 și 1172 cm'1.1H-NMR (CD3OD) = inter alia, 7,30-7,10/m (5H); 6,78 și 6,63/fiecare d (fiecare 1H); 4,03/d (1H); 3,85, 3,81 și 3,80/fiecare s (fiecare 3H); 1,32 și 1,26/fiecare s (în toate, 9H de la Boc); 0,82/pseudo t (6H).
Materia primă este preparată, după cum urmează:
22a) Clorură de 2,3,4-trimetoxibenzil g (24,47 mmoli) de alcool 2,3,4-trimetoxibenzil (Aldrich, Steinheim, Germania) sunt dizolvate sub argon, în 13,9 ml de clorură de metilen pură și această soluție este tratată cu 0,278 ml de piridină. 3,05 ml de clorură de tionil în 6,94 ml de clorură de metilen sunt adăugați în picături la această soluție, în timp ce se răcește ușor (gheață/apă), timp de 20 de min. în timpul acestei operații, temperatura internă crește până la aproximativ 18-23°C. După aceea, amestecul este lăsat să reacționeze timp de 45 min și soluția ușor gălbuie este apoi turnată peste un amestec gheață/apă. După ce fazele au fost separate, faza organică este spălată o dată cu acid sulfuric 1N și apoi cu apă. După uscarea cu Na2SO4 și înlăturarea solventului, restul uleios este distilat sub vid înalt (punct de fierbere: 93-95°C / 7 torri) și astfel este obținut compusul din titlu. 1H-NMR (220 MHZ, CDCI3): 7,05 (d, 1H); 6,65 (d, 1H); 4,61 (s, 2H); 3,97 (s, 3H); 3,85 (s, 3H). HPLC: tRet = 8,1 min (gradient II).
22b) lodura de 2,3,4-trimetoxibenzil
46,64 g (215,2 mmoli) de clorură de 2,3,4-trimetoxibenzil în 466 ml de acetonă purăsunt tratate cu 156,7 g (4,86 echivalent) de iodură de sodiu și acest amestec este agitat la temperatura camerei, timp de 2,75 h, la întuneric. Amestecul de reacție este tratat apoi cu aproximativ
3095
3100
3105
3110
3115
3120
RO 119413 Β1
I de eter rece și faza organică este spălată o dată cu soluție 10% de tiofosfat de sodiu și de două ori cu soluție salină (ambele tipuri de soluții fiind reci). Fazele apoase combinate sunt reextrase cu eter. Fazele organice reunite sunt uscate cu Na2SO4 și evaporate într-un evaporator rotativ, la aproximativ 30°C. Reziduul, care este de fapt compusul din titlu, este uscat din nou sub vid înalt și supus prelucrărilor ulterioare ca un produs brut. 1H-NMR (200MHz, CDCI3): 7,03 și 6,59 (fiecare d; fiecare 1H); 4,47 (s, 2H); 4,05, 3,86, 3,84 (fiecare s, fiecare 3H).
22c)5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feni!etil]-3(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]-dihidrofuran-2(3H)-ona
O soluție de 1,368 g (4,48 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]dihidrofuran-3-(3H)onă [Exemplul 2b)] în 5 ml de THF pur și 0,91 ml (1,67 echivalenți) de DMPU este răcită până la -75°C, sub argon și tratată prin picurare, la o temperatură internă sub -70°C și timp de aproximativ 20 min, cu 8,78 ml de soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu în THF (Aldrich). După încă 15 min, o soluție de 1,38 g (1 echivalent) de iodură de 2,3,4-trimetoxibenzil în 2,5 ml de THF pur este adăugată, prin picurare, la această soluție, într-un interval de aproximativ 15 min și amestecul este lăsat să reacționeze la o temperatură de -75°C, timp de 2,25 h. Pentru prelucrare, amestecul de reacție este tratat cu 1,67 ml de acid propionic și 1,67 ml de apă și temperatura este lăsată să crească la 0°C. Amestecul este turnat în 20 ml de soluție 10% de acid citric rece și aproximativ 50 ml de acetat de etil rece este adăugat la amestec. După ce amestecul este agitat timp de 5 min, fazele sunt separate. Faza organică este spălată, succesiv, cu soluție salină, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și din nou soluție salină. Fazele apoase reunite sunt extrase de două ori cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate cu Na2SO4 și concentrate. Ceea ce rămâne după înlăturarea solventului este cromatografiat pe silicagel (hexan/acetat de etil, 3:1) și compusul din titlu este astfel obținut. HPLC tRet= 16,49 minute (gradient II). FAB-MS (M+H)+ = 486 și M+ = 485. IR(KBr) = inter alia, 3312,1759,1686, 1537,1165 și 1104 cm1.1H-NMR (CD3OD) = inter alia, 7,30-7,10 (m, 5H); 6,84 și 6,66 (fiecare d, fiecare 1H); 3,85, 3,82 și 3,87 (fiecare s, fiecare 3H); 1,30 (s, 9H).
22d) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2l3,4-trimetoxifenil) metil] hexanoic
O soluție de 1,354 g (2,685 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă, în 43,36 ml de dimetoxietan și 21,86 ml de apă este tratată, la temperatura camerei, cu 10,74 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu în apă și acest amestec de reacție este agitat timp de 2 h. Acesta este apoi transferat într-o pâlnie de separare, diluat cu 132 ml de soluție saturată de clorură de amoniu și 11 ml de soluție 10% de acid citric și acest amestec este extras cu acetat de etil și puțin THF. Compusul din titlu, care este uscat sub vid înalt și supus prelucrării ulterioare fără a fi purificat, este obținut după spălarea fazei organice cu soluție salină rece și uscat pe sulfat de sodiu. TLC R((C) = 0,03; MS (M-H2O)+ = 485.
22e)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil] hexanoic
O soluție din 1,308 g (2,597 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoic, 1,443 g (20,776 mmoli) de imidazol și 1,816 g (11,686 mmoli) de terț-butildimetilclorosilan în 13 ml de DMF pur este agitată la temperatura camerei, timp de 17 h, în atmosferă de argon. După aceea, amestecul de reacție este turnat peste un amestec gheață-apă și acest nou amestec este extras cu acetat de etil. Faza organică este spălată cu soluție 10% de acid citric rece și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe sulfat de sodiu și evaporate în evaporator rotativ, la aproximativ 30°C. Produsul rezultat este dizolvat în 34,51 ml de metanol și 11,82 ml de THF și această soluție este tratată la temperatura camerei, cu 2,08 g de carbonat de potasiu, în 11,82 ml de apă. După ce acesta este agitat timp de 2,5 h, amestecul de
RO 119413 Β1
3175 reacție este concentrat până la jumătate din volumul inițial, la aproximativ 30°C și tratat cu acetat de etil și soluție 10% de acid citric rece, apoi fazele sunt separate. Faza organică este spălată de încă două ori cu soluție salină rece. Fazele apoase combinate sunt uscate cu Na2SO4 și concentrate. Reziduul este purificat prin cromatografie pe silicagel (hexan/acetat de etil, 1:1 și apoi 1:1,5) și compusul din titlu este astfel obținut. TLC Rf(J) = 0,02. FAB-MS (M+H)+ = 618. IR(KBr) inter alia: 1712,1495,1366, 1101 și 836 cm'1.1H-NMR (CD3OD) inter alia: 7,30-7,10 (m, 5H); 6,84 și 6,67 (fiecare d, fiecare 1H); 6,23 și 5,55 (fiecare d, în toți 1H din NH); 3,86,3,81 și 3,80 (fiecare s, fiecare 3H); 1,31 și 1,20 (fiecare s, în toți 9H din Boc); 0,93 (s, 9H); 0,14 și 0,11 (fiecare s, fiecare 3H).
22f) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trime-toxifenil) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Un amestec de 250 mg (0,405 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoic, 168,8 mg (0,445 mmoli) de HBTU și 77,55 mg (0,445 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2)-metoxietil)amidă [Exemplul 1b)] în 3,8 ml de soluție 0,25M de NMM în acetonitril (2,35 echivalenți) este agitat timp de 21 h, sub argon și la temperatura camerei. După aceea, amestecul de reacție este concentrat într-un evaporator rotativ, la aproximativ 30°C și reziduul este reluat în acetat de etil; această soluție este spălată, succesiv, cu soluție 10% de acid citric, apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină (toate fiind reci). Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate cu Na2SO4 și concentrate. Produsul brut (compusul din titlu) este supus prelucrării ulterioare fără purificare. TLC Rf(A) = 0,57. FAB-MS (M+H)+ = 774. HPLC tRet = 21,68 min (gradient II). IR(KBr) = inter alia 1711,1653,1495,1468,1100 și 836 cm’1.1H-NMR (CD3OD) = inter alia, 7,3-7,1 (m, 5H); 6,79 și 6,65 (fiecare d, fiecare 1H); 5,93 și 5,57 (fiecare d, în toți 1H de la NH); 3,87, 3,83,3,80 (fiecare s, fiecare 3H); 3,35 (s, 2H); 1,30 și 1,20 (fiecare s, în toți 9H din Boc); 0,96 (s, 9H); 0,90 și 0,87 (fiecare3H); 0,18 și 0,16 (fiecare s, fiecare 3H).
Alternativ, compusul descris în Exemplul 22) poate fi, de asemenea, obținut în felul următor [vezi, în acest context, J. Med. Chim. 37, 2991 (1994)]:
22g)(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-NVal-N-(2-metoxietil)amida g (2,06 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2,3,4-trimetoxi-fenil) metil] dihidrofuran-2-(3H)-onă [preparată conform Exemplului 22c)] și 2,51 g (7 echivalenți) de H-(L)Val-N-(2-methoxietil)amidă [preparată conform Exemplului 1b)] reacționează la 70°C, timp de 18 h, cu 0,354 ml (3 echivalenți) de acid acetic, într-un tub bombă. Amestecul este lăsat să se răcească și reziduul este reluat în acetat de etil și faza organică este spălată, succesiv, cu acid clorhidric 1N, apă și soluție salină. După uscarea pe sulfat de sodiu și îndepărtarea solventului, restul este recristalizat din etanol/apă. Compusul rezultat este identic cu compusul din titlu descris în Exemplul 22).
Un alt procedeu alternativ pentru obținerea compusului din titlu Exemplului 22) este: 22h)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida
500 mg (1,03 mmoli) de 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil) metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă [preparată conform Exemplului 22c)] și 538,5 mg (3 echivalenți) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [preparată conform Exemplului 1b)] reacționează la 90°C, timp de 40 h, cu 101 mg (1 echivalent) de 2-hidroxipiridin, într-un tub bombă. Restul este luat în 4 ml de etanol și turnat peste 50 ml de apă și acest amestec este agitat timp de 2 h. Precipitatul cristalin este filtrat prin absorbție, spălat cu apă și uscat. Compusul rezultat este indentic cu compusul din titlu descris în Exemplul 22).
Alternativ și în mod analog celui indicat în Exemplul 22c), compusul din titlu, descris în acest exemplu, poate fi, de asemenea, preparat folosind bromură de 2,3,4-trimetoxibenzil (în
3180
3185
3190
3195
3200
3205
3210
3215
3220
RO 119413 Β1 locul iodurii de 2,3,4-trimetoxibenzil). Bromura de 2,3,4-trimetoxibenzil este preparată, după cum urmează:
i) Bromura de 2,3,4-trimetoxibenzil
2,04 g (10 mmoli) de alcool 2,3,4-trimetoxibenzil, în 30 ml de toluen pur sunt tratate cu 0,258 ml (0,32 echivalenți) de piridină și soluția este răcită până la aproximativ 4°C, folosind gheață cu apă. 0,951 ml de tribromură de fosfor în 5 ml de toluen pur este adăugată sub formă de picături, la această temperatură și într-un interval de 30 min, la această soluție, care este lăsată la agitare, la aceeași temperatură, timp de încă 45 min. Amestecul de reacție este diluat apoi cu eter și totul este turnat peste un amestec gheață-apă, acest nou amestec fiind agitat timp de 5 min. După ce fazele sunt separate, faza organică este spălată, succesiv, cu apă, soluție salină, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și din nou cu soluție salină (toate fiind reci). După ce faza organică este uscată pe sulfat de sodiu, aceasta este concentrată și solvenții reziduali sunt înlăturați din restul amestecului, prin vidare, timp de o oră. Compusul din titlu rezultat este supus, fără purificare, procedurilor ulterioare. 1H-NMR (200 MHz; CDCI3) = 7,05/d (1H); 6,65/d (1H); 4,55/s (2H); 3,88 și 3,85/fiecare s (fiecare 3H).
Exemplul 23.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4,5-trimetoxifenil)metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 19,191 mg de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsilioxi)6-fenil-2(R)-[(3,4,5-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă, în 4,6 ml de DMF pur sunt desililate cu 159 mg de TBAF pentru a da compusul din titlu. Produsul brut este purificat prin cromatografiere pe silicagel (eluent A), dizolvat în dioxan și liofilizat. TLC Rf(A) = 0,26; FAB-MS (M+H)+ = 660.
Materia primă este preparată, după cum urmează:
23a) lodura de 3,4,5-trimetoxibenzil în mod analog cu Exemplul 19b), compusul din titlu este obținut din 5 g de clorură de 3,4,5-trimetoxibenzil (Fluka, Buchs, Elveția) și 16,89 g de iodură de sodiu, în 40 ml de acetonă pură. TLC R((hexan:acetat de etil, 4:1) = 0,27.1H-NMR (360MHz, CDCI3): 6,60 (s, 2H); 4,44 (s, 2H); 3,86 (s, 6H); 3,83 (s, 3H).
23b)5(S)-[(1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(3,4,5-trimetoxifenil)metil]di-hidrofuran-2(3H)-ona în mod analog cu Exemplul 19c), 1 g de 5(S)-[l(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-dihidrofiiran-2(3H)-onă [Exemplul 2b)], în 4 ml de THF pur este deprotonat (-75°C) cu 6,42 ml de soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu în THF și cu adăugarea a 0,66 ml de DMPU și apoi alchilat cu 1,008 g de iodură de 3,4,5-trimetoxibenzil. Cromatografia pe silicagel (eluent, hexan/acetonă 3:1) permite obținerea compusului din titlu. TLC Rf(hexan/acetonă, 3:1) = 0,22. FAB-MS M+ = 485.
23c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4,5-trimetoxifenil metil] hexanoic în mod analog cu Exemplul 19d), 1,097 g de 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)[(3,4,5-trimetoxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă în 36,48 ml de dimetoxietan și 18,39 ml de apă sunt hidrolizate cu 9,03 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu pentru a obține compusul din titlu, care este supus, fără purificare, procesărilor ulterioare.
23d)Acid-5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4,5-trimetoxifenil)metil]hexanoic în mod analog cu Exemplul 19e), 1,526 g de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil2(R)-[(3,4,5-trimetoxifenil)metil]hexanoic, în 15,16 ml de DMF, sunt sililate cu 2,11 g de terțbutildimetilclorsilan și 1,683 g de imidazol. Grupul ester silii în produsul brut este detașat, la temperatura camerei, în 2,5 h, într-un amestec constând din 40,3 ml de metanol, 13,8 ml de THF, 13,8 ml de apă și 2,42 g de carbonat de potasiu. Compusul din titlu este purificat prin cromatografiere de două ori pe silicagel (solvenți: hexan, C și J). TLC R((A) = 0,39. FAB-MS (M+H)+ = 618.
RO 119413 Β1
3275
23e) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4,5-trime-toxifenil) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 19f), 202 mg de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(3,4,5-trimetoxifenil)metil]hexanoic și 62,6 mg de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [obținută conform Exemplului 1b)], în 3,07 ml de 0,25M NMM/CH3CN reacționează cu 136,4 mg de HBTU și cu alte 24,8 mg de HBTU, pentru a forma compusul din titlu, care este supus, fără purificare, procesărilor ulterioare, după un timp de reacție de 20 h. TLC Rf(A) = 0,32. FAB-MS (M+H)+ = 774.
Exemplul 24. 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4-dimetoxifenil) metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
599 mg (0,805 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)[(2,4-dimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă, în 15,5 ml de DMF pur sunt tratate cu 508 mg (1,61 mmoli) de TBAF și amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, într-un interval de 20 h, sub argon. Acesta este apoi diluat cu aproximativ 80 ml de acetat de etil și totul este spălat, succesiv, cu apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe Na2SO4 și concentrate în evaporator rotativ, până se ajunge la aproximativ 30 ml. în timpul acestui proces, compusul din titlu precipită în forma pură. Acesta din urmă este filtrat prin absorbție, spălat cu hexan și uscat la greutate constantă. TLC Rf(A) = 0,28. FAB-MS (M+H)+ = 630. HPLC tRet = 14,79 min (gradient II). IR(KBr) = inter alia 3463, 3340, 3305,1685,1620 și 1524 cm'1. Ή-NMR (CD3OD) = inter alia 7,29-7,09/m (5H); 6,90/d (1H); 6,35/dxd (1H); 4,01/d (1H); 3,80 și 3,75/fiecare s (fiecare 3H); 3,30/s (3H); 1,35/s (9H); 0,83/pseudo t (6H).
Materia primă este preparată, după cum urmează:
24a) Bromura de 2,4-dimetoxibenzil g (11,77 mmoli) de alcool 2,4-dimetoxibenzilic (Aldrich, Steinheim, Germania) sunt dizolvate în 30 ml de toluen pur și această soluție este tratată cu 0,3 ml de piridin. Soluția clară este răcită până la aproximativ 4°C și sunt adăugați 1,12 ml (0,992 echivalenți) de PBr3în 6 ml de toluen pur, sub formă de picături, într-un timp de 30 min. După încă 45 min, soluția de reacție este turnată peste un amestec gheață-apă și totul este apoi extras cu eter. Faza organică este spălată succesiv cu apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină (toate fiind reci). Fazele apoase reunite sunt reextrase cu eter. Fazele organice reunite sunt uscate pe Na2SO4 și eterul este înlăturat într-un evaporator rotativ, la aproximativ 300°C. Soluția toluenică, care rămâne și care conține acest compus, poate fi imediat folosită în continuare. TLC (hexan/acetat de etil, 1:1): descompunere.
24b)5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2,4-dimetoxifenil)metil]dihidro-furan-2-(3H)ona
O soluție de 3,57 g (11,7 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil] dihidrofuran-2(3H)-onă [Exemplul 2b)], în 12 ml de THF pur și 2,35 ml de DMPU (1,65 echivalenți) este răcită până la -750°C, sub argon și este tratată prin picurare, la o temperatură internă mai scăzută de -70°C și într-un timp de 30 min, cu 22,9 ml (1,96 echivalenți) de soluție 1M bis(trimetilsilil) amidă de litiu în THF (Aldric, Steinheim, Germania). După încă 15 min, 25 ml de soluție de toluen, conținând aproximativ 1 echivalent de bromură de 2,4-dimetoxibenzil, este adăugată prin picurare la acest amestec, într-un interval de timp de 20 min și acest amestec este lăsat să reacționeze la -70°C, timp de 2 h. 4,36 ml de acid propionic și 4,36 ml de apă sunt apoi adăugate la această soluție și temperatura este lăsată să crească până la 0°C. Acest amestec de reacție este diluat cu 200 ml de acetat de etil (rece) și agitat timp de 5 min, împreună cu acid citric 10% (rece). După aceea, fazele sunt separata. Faza organică este spălată, succesiv, cu soluție salină, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și din nou cu soluție salină, este uscată apoi pe Na2SO4 și concentrată. Compusul din titlu este izolat prin cromatografie rapidă pe silicagel (E). TLC
3280
3285
3290
3295
3300
3305
3310
3315
RO 119413 Β1
Rf(E) = 0,24. FAB-MS (M+H)+ = 455. HPLC tRet = 16,85 min (gradient II). IR(CH2CI2) = inter alia 3429, 1769, 1712, 1613 și 1506 cm·1. 1H-NMR (CDCI3) = inter alia 7,34-7,10/m (5H); 6,98/d (1H); 6,45-6,29/m (2H); 4,31/txd (1H); 3,78 și 3,71/fiecare s (fiecare 3H); 3,08 și 2,66/fiecare dxd (fiecare 1H); 1,35/s (9H).
24c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4-dimetoxifenil)metil] hexanoic
O soluție de 1,58 g (3,47 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2,4-metoxifenil)metil]dmidrofuran-2-(3H)-onă, în 56 ml de etilen glicol dimetil eter și 28,2 ml de apă, este tratată, la temperatura camerei, cu 13,87 ml de soluție 1M de LiOH în apă și acest amestec este agitat timp de 1,75 h. După aceea, amestecul de reacție este diluat cu acetat de etil și puțin THF și totul este spălat prima dată cu un amestec format din 170,6 ml de soluție saturată de clorură de amoniu și 14,25 ml de soluție 10% de acid citric (ambele reci) și apoi cu soluție salină. Fazele apoase reunite sunt uscate pe Na2SO4 și evaporate în evaporator rotativ, la aproximativ 30°C. Reziduul, adică compusul din titlu, este triturat cu hexan și filtrat. Punct de topire: 144-145°C. TLC R,(d) = la început. FAB-MS (M+H)+ = 474. HPLC tRet -14,34 min (gradient II). IR(KBr) = u.a. 3420, 3350, 2818, 1686, 1518 și 1508 cm’1.1H-NMR (CD^D) - inter alia 7,307,09/m (5H); 6,94/d (1H); 6,47/d (1H); 6,37/dxd (1H); 3,78 și 3,75/fiecare s (fiecare 3H); 1,33/s (9H).
24d)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,4-dimetoxifenil) metiljhexanoic
O soluție formată din 1,5 g (3,17 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil2(R)-[(2,4-dimetoxifenil)metil]hexanoic, 1,76 g (25,36 mmoli) de imidazol și 2,22 g (14,26 mmoli) de tert-butildimetilclorosilan, în 16 ml de DMF pur, este agitată la temperatura camerei, timp de 20 h, sub argon. După aceea, amestecul de reacție este turnat peste un amestec apă-gheață și totul este extras cu acetat de etil. Faza organică este spălată cu soluție 10% de acid citric rece și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe Na2SO4 și solventul este înlăturat în evaporator rotativ, la aproximativ 30°C. Se obține un ulei care este dizolvat în 42,1 ml de metanol și 14,4 ml de THF și această soluție este tratată la temperatura camerei, cu 2,5 g carbonat de potasiu în 14,4 ml de apă. După ce amestecul este agitat timp de 2 h, amestecul de reacție este concentrat la jumătate din volumul inițial, la aproximativ 30°C și restul este diluat cu acetat de etil; întreaga masă este apoi spălată cu soluție 10% acid citric și soluție salină (ambele fiind reci). Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe Na2SO4 și apoi evaporate. Compusul din titlu este obținut prin cromatografie pe silicagel (D). TLC Rf(C) = 0,34. FABMS (M+H)+ = 588. HPLC tRet= 20,24 min (gradient II). IR(KBr) = inter alia 1712,1654,1614, 1588 și 1507 cm’1.1H-NMR (CD3OD) = inter alia 7,30-7,10/m (5H); 6,98/d (1H); 6,50/d (1H); 6,40/dXd (1H); 3,80 și 3,76/fiecare s (fiecare 3H); 1,31/s (9H); 0,93/s (9H); 0,14 și 0,11/fiecare s (fiecare 3H).
24e) 5(S)-(Boc-amino) -4(S)-(terț-butildimetHsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,4-dimetoxifenil)metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Un amestec de 497 mg (0,845 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,4-dimetoxifenil)metil]hexanoic, 352 mg (0,929 mmoli) de HBTU și 162 mg (0,929 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1b)] în 7,94 ml de soluție 0,25M de NMM în acetonitril (2,35 echivalenți) este agitat la temperatura camerei, timp de 20 h, sub argon. După aceea, amestecul de reacție este concentrat într-un evaporator rotativ, la aproximativ 30° C și reziduul este luat în acetat de etil, iar această soluție este spălată cu soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe Na2SO4 și solventul este înlăturat într-un evapo-__ rator rotativ. Reziduul reprezintă compusul din titlu, într-o formă virtual pură. TLC Rf(J) = 0,25. FAB-MS (M+H)+ = 744. HPLC tRet = 21,55 min (gradient II). IR(CH2CI2) = inter alia 3434,1703,
RO 119413 Β1
1667, 1506 și 838 cm’1. 1H-NMR (CD3OD) = inter alia 7,31-7,11/m (5H); 6,91/d (1H); 6,50/d (1H); 6,37/dxd (1H); 3,84 și 3,76/fiecare s (fiecare 3H); 3,31/s (3H); 1,30/s (9H); 0,85 și 0,83/fiecare d (fiecare 3H); 0,16 și 0,15/fiecare s (fiecare 3H).
Exemplul 25.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2-metoxifenil) metiljhexanoil(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
311 mg (0,436 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă în 8,4 ml de DMF pur sunt tratate cu 275 mg (0,871 mmoli) de TBAF și acest amestec de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 21 h, sub argon. Acesta este apoi diluat cu aproximativ 60 ml de acetat de etil și întrega masă de reacție este apoi spălată succesiv cu apă, soluție staurată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe Na2SO4 și concentrate până la 10 ml, în evaporator rotativ, la aproximativ 30°C. în timpul acestei proceduri, compusul din titlu este precipitat în formă pură. Este filtrat apoi prin absorbție, spălat cu hexan și uscat peste noapte, sub vid înaintat. TLC R,(acetat de etil) = 0,38. FAB-MS (M+H)+ = 600. HPLC tRet = 14,78 min (gradient II). IR(KBr) = inter alia 3335, 1685, 1653, 1619 și 1526 cm’1. 1H-NMR (CD3OD) = inter alia 7,28-7,06/m (6H); 7,00/d (1H); 6,88/d (1H); 6,76/t (1H); 3,81/s (3H); 3,48/s (3H); l,33/s(9H); 0,81/pseudo t (6H).
Materia primă este preparată, după cum urmează:
25a) Clorură de 2-metoxibenzil
16,8 ml de clorură de tionil sunt adăugați prin picurare, într-un interval de aproximativ 30 min, la 10 ml de alcool 2-metoxibenzil (Fluka, Buchs, Elveția) și 53,76 g de diizopropilaminometilpolistiren [bază polyhiinig, vezi Exemplul 19a)], în 200 ml de eter pur. După ce amestecul este agitat la 0°C, timp de 1,5 ore, acesta este filtrat prin absorbție și filtratul este concentrat într-un evaporator rotativ, sub vid înaintat. Reziduul este purificat prin cromatografie pe silicagel (eluent: hexan/acetat de etil, 6:1). TLC R((hexan:acetat de etil, 4:1) = 0,5.1H-NMR (200 MHz, CDCIg): 7,42-7,24 (m, 2H); 7,0-6,84 (m, 2H); 4,68 (s, 2H); 3,9 (s, 3H).
25b) Iodură de 2-metoxibenzil g de clorură de 2-metoxibenzil în 22 ml de acetonă pură sunt tratate cu 9,3 g de iodură de sodiu și amestecul de reacție este agitat peste noapte, la temperatura camerei. Acesta este apoi diluat cu 250 ml de eter și întreaga cantitate este spălată cu soluție 10% tiosulfat de sodiu și soluție salină. După uscarea pe sulfat de sodiu și înlăturarea solventului, este obținut compusul din titlu, care este supus, fără purificare, procesărilor ulterioare. TLC Rf(hexan:acetat de etil, 4:1) = 0,46.1H-NMR (200MHz, CDCI3): 7,36-7,2 (m, 2H); 6,92-6,8 (m, 2H); 4,48 (s, 2H): 3,91 (s, 3H).
25c) 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2-metoxifenil)metil] dihidrofuran-2-(3H)ona
O soluție de 1 g (3,275 mmoli) de 5(S)-[ 1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil] dihidrofuran-2-(3H)onă [Exemplul 2b)], în 4 ml de THF pur și 0,66 ml de DMPU (1,67 echivalenți) este răcită până la -75°C, sub argon și tratată prin picurare, la o temperatură internă mai mică de -70°C, timp de 30 min, cu 6,42 ml (1,96 echivalenți) de soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu în THF (Ardrich, Steinheim, Germania). După încă 15 min, 812 mg (3,275 mmoli) de iodură de 2-metoxibenzil, dizolvată în 2 ml de THF, sunt adăugate sub formă de picături, la acest amestec, întrun timp de 10 min și apoi întreaga masă de reacție este lăsată să reacționeze la -70°C, timp de 2 h. 1,22 ml de acid propionic și 1,22 ml de apă sunt apoi adăugate la această soluție și temperatura este lăsată să crească la 0°C. Amestecul de reacție este diluat cu 50 ml de acetat de etil și agitat, pentru 5 min, cu 20 ml de soluție 10% acid citric (rece) și după aceea, fazele sunt separate. Faza organică este spălată succesiv cu soluție salină, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și încă o dată cu soluție salină, uscată pe Na2SO4 și concentrată. Compusul din titlu este izolat prin cromatografie rapidă pe silicagel (hexan/acetat de etil = 3:1). TLC
3370
3375
3380
3385
3390
3395
3400
3405
3410
34+5
RO 119413 Β1
R((hexan:acetat de etil, 3:1) = 0,54. MS M+ = 455. HPLC tRet = 17,09 min (gradient II). IR(CH2CI2) = inter alia 3429,1769,1712 și 1495 cm’1.1H-NMR (CDCI3) = inter alia 7,38-7,13/m (5H); 7,20/d (1H); 7,08/d (1H); 6,81/d (1H); 3,74/s (3H); 1,34/s (9H).
25d) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2-metoxifenil)metil]hexanoic
O soluție de 474 mg de 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2-metoxifenil) metil] dihidrofuran-2-(3H)-onă, în 18 ml de dimetoxietan și 9,07 ml de apă este tratată prin picurare, la temperatura camerei, cu 4,45 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu. După aceea, amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 3 h și diluat cu acetat de etil și THF, întreaga masă de reacție fiind spălată într-o pâlnie de separare, până la neutralizare, cu un amestec format din 54,78 ml de soluție saturată de clorură de amoniu și 4,58 ml de soluție 10% de acid citric, urmată de spălare cu soluție salină și apă. Compusul din titlu, care este supus procesărilor ulterioare fără purificare suplimentară, este obținut după uscarea pe sulfat de sodiu și înlăturarea solventului. TLC Rf(hexan/acetat de etil, 2,5:1) = 0,15.
25e)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsiHloxi)-6-fenil-2(R)-[(2-metoxifenil)metiljhexanoic
O soluție de 500 mg de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2-metoxifenil) metil]hexanoic în 5 ml de DMF este tratată sub agitare, cu 614 mg de imidazol și 796 mg de te/ț-butildimetilclorsilan. După ce aceasta este agitată la temperatura camerei, timp de 20 h, soluția de reacție este turnată peste un amestec apă-gheață și întreaga masă de reacție este extrasă cu acetat de etil. Faza organică este spălată cu soluție 10% acid citric și soluție salină. Gruparea silii esterică în produsul brut este scindată, la temperatura camerei, timp de 2 h, întrun amestec format din 13,29 ml de metanol, 5,13 ml de THF, 5,13 ml de apă și 904 mg de carbonat de potasiu. Amestecul este concentrat la jumătate din volumul inițial, în evaporator rotativ, la aproximativ 30°C și reziduul este diluat cu acetat de etil și faza organică este spălată cu soluție 10% acid citric și soluție salină (toate fiind reci). Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe sulfat de sodiu și reziduul este cromatografiat pe silicagel (eluent, hexan/acetat de etil, 3:1 și 1:1) și astfel este obținut compusul din titlu. TLC Rf(hexan/acetat de etil 2,5:1) = 0,12. FAB-MS (M+H)+ = 558.
25f) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2-metoxi-fenil) metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Un amestec de 250 mg (0,448 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsilioxi)-6-fenil-2(R)-[(2-metoxifenil)metil]hexanoic, 187 mg (0,493 mmoli) de HBTU și 86 mg (0,493 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1b)] în 4,2 ml de soluție 0,25M de NMM în acetonitril (2,35 echivalenți) este agitat la temperatura camerei, timp de 20 h, sub argon. După aceea, amestecul de reacție este concentrat în evaporator rotativ, la aproximativ 30°C și reziduul este reluat în acetat de etil și întreaga masă de reacție este spălată succesiv cu soluție 10% de acid citric, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină (toate fiind reci). Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele combinate organice sunt uscate pe Na2SO4 și solventul este înlăturat într-un evaporator rotativ. Reziduul reprezintă compusul din titlu într-o formă virtual pură. TLC Rf(hexan:acetat de etil 1:2) - 0,29. FAB-MS (M+H)+ = 714. HPLC tRet= 21,66 min (gradient II). IR(CH2CI2) = inter alia 3453,1704,1667,1495 și 836 cm·1. 1H-NMR (CD3OD) = inter alia 7,29-7,10/m (6H); 7,02/d (1H); 6,9 l/d (1H); 6,08/t (1H); 3,86/s (3H); 3,30/s (3H); 1,31/s (9H); 0,85/d (6H); 0,16 și 0,15/fiecare s (fiecare 3H).
Exemplul 26.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3-dimetil-4-metoxifenil)metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
323,5 mg (0,436 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsilioxi)-6-fenil-2(R)[(2,3-dimetil-4-metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă, în 8,4 ml de DMF pur, sunt tratate cu 280,7 mg (0,872 mmoli) de TBAF și acest amestec de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 20 de h, sub argon. Acesta este apoi diluat cu aproximativ 80 ml de
RO 119413 Β1
3470 acetat de etil și întreaga masă de reacție este apoi spălată succesiv cu apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe sulfat de sodiu și apoi concentrate. Produsul rezultat, cu aspect de gel, este cromatografiat pe silicagel (hexan/acetat de etil 1:2). Fracțiunile ce conțin produsul sunt extrase și apoi concentrate. Reziduul este dizolvat în dioxan și liofilizat, compusul din titlu fiind astfel obținut. TLC Rf(hexan/acetat de etil 1:2) = 0,18. FAB-MS (M+H)+ = 628. HPLC tRet= 15,52 min (gradient II). IR(KBr) = inter alia 1688,1650,1619,1519 și 1261 cm'1.1HNMR (CDgOD) = inter alia 7,31-7,10 (m, 5H); 6,87 și 6,63 (fiecare d, fiecare 1H); 4,03 (d, 1H); 3,75, 2,20 și 2,11 (fiecare s, fiecare 3H); 1,35 (s, 3H); 0,83 (pseudo t,6H).
Materia primă este preparată, după cum urmează:
26a) Clorură de 2,3-dimetil-4-metoxibenzil g (6,016 mmoli) de alcool 2,3-dimetil-4-metoxibenzilic (Aldrich, Steinheim, Germania) și 4,8 g de diizopropilaminometilpolistiren [bază polyhunig, vezi Exemplul 19a)], în 21 ml de eter pur, sunt tratate prin picurare, la o temperatură cuprinsă între 0°C și 5’C, într-un interval de timp de aproximativ 25 min, cu 0,482 ml de clorură de tionil. După ce reacția a luat sfârșit, amestecul este filtrat prin absorbție, iar solventul și reactivul în exces sunt înlăturați. Reziduul, care este chiar compusul din titlu dorit, este supus, fără purificare, procesărilor ulterioare. TLC Rf(hexan/acetat de etil 4:1) = 0,59.IR(CH2CI2) inter alia: 1599,1485,1466 și 1107 cm1.1H-NMR (200 MHz, CDCIg): 7,14 (d, 1H); 6,69 (d, 1H); 4,64 (s, 2H); 3,82, 2,34 și 2,18 (fiecare s, fiecare 3H).
26b) lodura de 2,3-dimetil-4-metoxibenzil
838,6 mg (4,54 mmoli) de clorură de 2,3-dimetil-4-metoxibenzil, în 8,5 ml de acetonă pură, sunt tratate cu 3,328 g (22,1 mmoli) de iodură de sodiu și acest amestec este agitat la temperatura camerei, timp de 15 h, la întuneric. Este obținută o suspensie maro-închis și aceasta este prelucrată cu 100 ml de dietil eter, această soluție fiind apoi spălată cu soluție 10% de tiosulfat de sodiu. După uscarea pe sulfat de sodiu și îndepărtarea solventului, compusul din titlu dorit este obținut sub forma unui solid gălbui, acesta fiind supus, fără purificare, procesărilor ulterioare. TLC Rf(hexan: acetat de etil 4:1) = 0,63. IR(CH2CI2) inter alia: 1610,1495,1120 și 820 cm'1.1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 7,17 și 6,65 (fiecare d, fiecare 1H); 4,52 (s, 2H); 3,82, 2,23 și 2,18 (fiecare s, fiecare 3H).
26c) 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2,3-dimetil-4-metoxifenil)metil] dihidrofuran-2-(3H)-ona
O soluție de 1,248 g (4,087 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-feniletil] dihidrofuran-2(3H)-onă [Exemplul 2b)], în 5 ml de THF pur și 0,823 ml (6,825 mmoli) de DMPU, este răcită până la -75°C, sub argon și tratată prin picurare, la o temperatură internă mai mică de -70°C, timp de aproximativ 17 min, cu 8 ml de soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu în THF (Aldrich). După încă 15 min, o soluție de 1,128 g (4,087 mmoli) de iodură de 2,3-dimetil-4-metoxibenzil în 3 ml de THF pur este adăugată prin picurare, la acest amestec, într-un timp de 10 min și întreaga masă de reacție este lăsată să reacționeze la -75°C, timp de 2 h. Pentru prelucrare, amestecul de reacție este tratat cu 1,5 ml de acid propionic și 1,5 ml de apă, iar temperatura este lăsată să crească până la 0°C. Amestecul este turnat în 35 ml de soluție 10% de acid citric (rece) și aproximativ 70 ml de acetat de etil (rece) este adăugat la acesta. După ce amestecul este agitat timp de încă 5 min, fazele sunt separate. Faza organică este spălată succesiv cu soluție salină, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și încă o dată cu soluție salină, uscată pe Na2SO4 și concentrată. Reziduul, care a rămas după înlăturarea solventului, este cromatografiat pe silicagel (hexan/acetat de etil 2:1). Compusul din titlu este obținut ca o spumă incoloră. TLC Rf(hexan/acetat de etil 2:1) = 0,37. HPLC tRet = 17,83 min (gradient II). FAB-MS (M+S)+ = 453. IR(CH2CI2) = inter alia 3428, 1769, 1712 și 1495 cm1. 1H-NMR (CDCI3) = inter alia 7,38-7,08 (m, 5H); 6,86 și 6,62 (fiecare d, fiecare 1H); 3,78 (3H); 3,21 și 2,16 (fiecare dxd, fiecare 1H); 2,19 și 2,13 (fiecare s, fiecare3H); și 1,35 (s, 9H).
3475
3480
3485
3490
3495
3500
3505
3510
3515
RO 119413 Β1
26d) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3-dimetil-4-metoxifenil) metil] hexanoic
O soluție de 1,001 g (2,2 mmoli) de 5(S)-[(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(2,3-dimetil-4metoxifenil)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă, în 35,8 ml de dimetoxietan și 18 ml de apă, este tratată, la temperatura camerei, cu 8,8 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu în apă și acest amestec de reacție este agitat timp de 2,5 h. Acesta este apoi transferat într-o pâlnie și diluat cu 108,5 ml de soluție saturată de clorură de amoniu și 9 ml de soluție de acid citric 10% (ambele fiind reci); întreaga masă de reacție este apoi extrasă cu acetat de etil și puțin THF. Compusul din titlu, care este supus procesărilor ulterioare fără a fi purificat, este obținut după spălarea fazei organice cu soluție salină (rece) și uscarea acestuia cu sulfat de sodiu. TLC Rf(hexan/acetat de etil 1:1) = la început. FAB-MS (M+H)+ = 472; IR(KBr) inter alia: 1724,1666,1527 și 1169 cm' 1.1H-NMR (CD3OD) inter alia: 7,31-7,11 (m, 5H); 6,93 și 6,68 (fiecare d, fiecare 1H); 3,76 (s, 3H); 3,23 și 2,59 (fiecare dxd, fiecare 1H); 2,21 și 2,12 (fiecare s, fiecare 3H); 1,27 (s, 9H).
26e)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3-dimetil-4-metoxifenil)metil]hexanoic
O soluție de 1,153 g (2,445 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)[(2,3-dimetil-4-metoxifenil)metil]hexanoic, 1,372 g (20,05 mmoli) de imidazol și 1,709 g (11,0 mmoli) de tert-butildimetilclorsilan în 8,7 ml de DMF pur este agitată la temperatura camerei, timp de 18 h, în atmosferă de argon. După aceea, amestecul de reacție este turnat peste un amestec apă-gheață și întreaga masă de reacție este extrasă cu acetat de etil. Faza organică este spălată cu soluție 10% de acid citric rece și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe sulfat de sodiu și evaporate întrun evaporator rotativ, la aproximativ 30°C. Produsul rezultat este dizolvat în 28,8 ml de metanol și 11,2 ml de THF și această soluție este tratată, la temperatura camerei, cu 1,962 g de carbonat de potasiu, în 11,2 ml apă. După ce este agitat timp de 2,25 h, amestecul de reacție este concentrat până la jumătate din volumul inițial, la aproximativ 30°C și reziduul este tratat cu acetat de etil (rece) și soluție 10% de acid citric și fazele sunt separate. Faza organică este spălată de încă două ori cu soluție salină. Fazele apoase reunite sunt uscate cu sulfat de sodiu și concentrate. Reziduul este purificat de două ori prin cromatografiere cu silicagel (hexan/acetat de etil, 1:1 și apoi 3:1) și compusul din titlu este astfel obținut. TLC Rf(hexan/acetat de etil, 1:1) = 0,42. FAB-MS (M+H)+ = 586. IR(KBr) inter alia: 1711, 1485, 1260 și 1107 cm'1. 1H-NMR (CD3OD) inter alia: 7,30-7,06 (m, 5H); 6,91 și 6,65 (fiecare d, fiecare 1H); 6,00 și 5,41 (fiecare d, în toți 1H din NH); 3,75 (s, 3H); 2,21 și 2,12 (fiecare s, fiecare 3H); 1,31 și 1,21 (fiecare s, în toți 9H din Boc); 0,89 (s, 9H); 0,12 și 0,08 (fiecare s, fiecare 3H).
26f)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,S-dimetil-4-metoxifenil)metil]hexanoil-(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
Un amestec format din 319,6 mg (0,546 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsilioxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3-dimetil-4-metoxifenil)metil]hexanoic, 232,5 mg (0,613 mmoli) de HBTU și 106,8 mg (0,613 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [pentru preparare vezi Exemplul 1 b)], în 5,3 ml de soluție 0,25M de NMM în acetonitril (2,4 echivalenți), este agitat la temperatura camerei, timp de 2,25 h, în atmosferă de argon. După aceea, amestecul de reacție este concentrat într-un evaporator rotativ, la aproximativ 30“C și reziduul este luat în acetat de etil; această soluție este apoi spălată succesiv cu soluție 10% de acid citric, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină (toate fiind reci). Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe Na2SO4 și concentrate. Produsul brut este cromatografiat de două ori pe silicagel (hexan/acetat de etil, 1:2 și 1:1) și astfel este obținut compusul din titlu. TLC Rf(hexan/acetat de etil, 1:1) = 0,16. FAB-MS (M+H)+ = 742. HPLC tRet = 22,41 min (gradient II). IR(CH2CI2) = inter alia 3434,170Ϊ, 1667,1499 și 1165 cm'1.1H-NMR (CD3OD) = inter alia 7,3-7,1 (m, 5H); 6,85 și 6,64 (fiecare d, fiecare 1H); 5,59 și 5,61 (fiecare
RO 119413 Β1 d, în toți 1H din NH); 3,75 (s, 3H); 2,16 și 2,02 (fiecare s, fiecare 3H); 1,31 și 1,20 (fiecare s, în toți 9H din Boc); 0,95 (s, 9H); 0,68 și 0,66 (fiecare d, fiecare 3H); 0,17 și 0,16 (fiecare s, fiecare 3H).
Exemplul 27.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4,5-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 19), compusul din titlu este obținut din 5(S)-(Boc-amino)4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,4,5-trimetoxifenil)metil]hexa-noil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă în DMF pur, folosind TBAF. [Compusul de pornire pentru substituentul 2,4,5-trimetoxibenzil poate fi cumpărat de la Fluka, Buchs, Elveția, ca 2,4,5-trimetoxibenzaldehidă, din care este obținut alcoolul corespunzător ca un intermediar, prin reducere cu borohidrură de sodiu],
Exemp\u\23.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4,6-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 19), compusul din titlu este obținut din 5(S)-(Boc-amino)4(S)-(terț-butidimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,4,6-trimetoxifenil)metil]-hexa-noil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă în DMF pur, folosind TBAF. [Compusul de pornire pentru substituentul 2,4,6-trimetoxibenzil poate fi cumpărat de la Fluka, Buchs, Elveția, ca 2,4,6-trimetoxibenzaldehidă, din care alcoolul corespunzător este obținut ca un intermediar, prin reducerea cu borohidrură de sodiu].
Exemplul 29.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,5-dimetoxifenil) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 19), compusul din titlu este obținut din 5(S)-(Boc-amino)4(S)-(ferț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,5-dimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietiljamidă în DMF pur, folosind TBAF. [Compusul de pornire pentru substituentul 2,5-dimetoxibenzil poate fi cumpărat de la Fluka, Buchs, Elveția ca alcool 2,5-dimetilbenzil],
Exemplul 30.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,6-dimetoxifenil) metil) hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 19), compusul din titlu este obținut din 5(S)-(Boc-amino)4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,6-dimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă în DMF pur, folosind TBAF. [Compusul de pornire pentru substituentul 2,6-dimetoxibenzil este alcool 2,6-dimetoxibenzilic și este preparat din 2,6-dimetoxibenzoat de metil, prin reducere cu hidrură de litiu și aluminiu în THF pur. 2,6-dimetoxibenzoatul de metil este obținut din acid 2,6-dimetoxibenzoic (Fluka, Buchs, Elveția) prin reacție cu sulfat de dimetil în acetonă și în prezența carbonatului de potasiu (vezi instrucțiunile din Chem. Letters, 1990, 389)].
Exemplul 31.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-benziloxifenil)-metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
1,21 g (1,41 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 31f)], în 31 ml de DMF sunt desililate cu 890 mg (2,82 mmoli) de TBAF, în atmosferă de N2. După 18 h la temperatura camerei, amestecul este turnat peste 430 ml de apă și întreaga masă de reacție este extrasă cu 3 porții de acetat de etil/metanol, aprox. 10:1. Fazele organice sunt spălate de două ori cu soluție saturată de NaHCO3 și soluție salină, uscate pe Na2SO4 și evaporate pentru a da compusul din titlu: TLC Rt(F) = 0,38; tRet(ll) = 16,4 min; FAB-MS (M+H)+ = 750.
Materia primă este preparată, după cum urmează:
31a) 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-(p-hidroxifenil)etil]dihidrofuran-2-(3H)-ona
Hidrogenând 3,0 g (7,29 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)-etil]dihidrofuran-2(3H)-onă [pentru preparare vezi Exemplul 1g)] în 100 ml de metanol, cu 0,6 g de Pd/C 10%, se obține produsul din titlu, după filtrarea catalizatorului și evaporarea filtratului: tRet(H) = 10,6 min.
3565
3570
3575
3580
3585
3590
3595
3600
3605
3610
RO 119413 Β1
31b) 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-[p-(2-metoxietoxi)fenil]etil]dihidrofuran-2-(3H)-ona
3,17 g (9,86 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-hidroxifenil)etil]dihidrofuran-2-(3H)onă în 190 ml de DMF/dioxan, 1:1, sunt tratate, sub atmosferă de N2, cu 6,4 g (19,7 mmoli) de Cs2CO3 și 2,0 g (9,86 mmoli) de iodură de 2-metoxietil. Deoarece HPLC indică faptul că 5(S)[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-hidroxifenil)etil]dihidrofuran-2-(3H)-ona, care nu a participat la reacție, este încă prezentă după 18 h la temperatura camerei, se mai adaugă, în porții, încă 1,2 g de iodură de 2-metoxietil. Imediat ce HPLC indică faptul că reacția este completă, amestecul de reacție este turnat în 190 ml de apă cu gheață, iar întreaga masă de reacție este extrasă de 3 ori cu clorură de metilen. Fazele organice sunt spălate cu apă și soluție salină, uscate pe Na2SO4 și evaporate. Agitând reziduul cu hexan, într-o baie de tratare cu ultrasunete, rezultă compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,08; FAB-MS (M+H)+ = 380.
31b') Iodură de 2-metoxietil
O soluție de 10 ml (109 mmoli) de 2-cloretil metileter în 205 ml de acetonă este tratată, în porții, cu 80,1 g (534 mmoli) de Nai, iar amestecul se fierbe sub reflux, timp de 20 de h. Distribuind în porții amestecul de reacție, între 2 porții de eter și soluție salină, uscând fazele organice pe Na2SO4 și evaporându-le (temperatura camerei, 300 mbari), rezultă compusul din titlu: 1H-NMR (200MHz, CDCI3): 3,25 (t, J=7 Hz, 2H), 3,39 (s-,3H), 3,65 (t, J=7 Hz, 2H).
31c) 5(S)-[ 1 (S)-(Boc-amino)-2-[p-(2-metoxietoxi)fenil]etil-3(R)-[(p-benziloxife-nil)metH] dihidrofuran-2-(3H)-ona
Sub atmosferă de N2,3,6 g (9,48 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2[p-(2-metoxietoxi) fenil]etil]dihidrofuran-2-(3H)-onă, dizolvate în 17,3 ml de THF și 1,9 ml de DMPU, sunt deprotonate, la -70°C, cu 18,58 ml de soluție 1M de litiu bis(trimetil-silil)amidă în THF și, după 15 min, sunt alchilate cu 3,07 g (9,48 mmoli) de iodură de p-benziloxibenzil [Exemplul ld)J, în 6 ml de THF. După o perioadă de timp de 30 min, la o temperatură de -75°C, amestecul este protonat cu 3,53 ml (47,4 mmoli) de acid propionic și 3,53 ml de apă și este încălzit la temperatura de 0°C. Amestecul de reacție este diluat cu 95 ml de acetat de etil și întreaga masă de reacție este spălată cu o soluție de acid citric 10%, cu soluție saturată de NaHCO3 și soluție salină. Fazele apoase sunt extrase cu 2 porții de acetat de etil. Fazele organice sunt uscate pe Na2SO4 și evaporate. Cromatografia pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 1:1) și cristalizarea din acetat de etil/hexan produc compusul din titlu pur: TLC Rf(C) = 0,38: tRet(ll) = 18,0 min; FAB-MS (M+H)+ = 576.
31d) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]hexanoic
3,85 g (6,68 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-[p-(2-metoxietoxi)fenil]etil-3(R)-[(p-benziloxifenil)metil]dihidroturan-2-(3H)-onă, în 107 ml de dimetoxietan și 54 ml de apă, sunt hidrolizate, sub un gaz de protecție, cu 26,5 ml de soluție 1M de hidroxid de litiu. După 17 h la temperatura camerei, amestecul de reacție este tratat cu un amestec răcit cu gheață, de 324 ml de soluție saturată de NH4CI, 27 ml de soluție de acid citric 10% și 134 ml de clorură de metilen. Se adaugă metanol pentru a dizolva complet produsul. Faza apoasă este separată și extrasă de 2 ori cu clorură de metilen. Fazele organice sunt spălate cu soluție salină, uscate pe Na2SO4 și evaporate: tRet(ll) = 15,8 min; FAB-MS (M+H)+ = 594.
31e)Acid5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)[(p-benziloxifenil)metiljhexanoic
3,85 g (6,48 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi) fenilj2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]hexanoicîn 11 ml de DMFsuntsililate, la temperatura camerei, pentru un timp de 16 h și sub gaz de protecție, cu 4,49 g (29,8 mmoli) de terț-butil-dimetilclorsilan și 3,6 g (53,1 mmoli) de imidazol. Amestecul de reacție este turnat în apă cu gheață și întreaga masă de reacție este extrasă de 3 ori cu acetat de etil. Fazele organice sunt spălate cu o soluție de acid citric 10%, de 2 ori cu apă și soluție salină, sunt uscate pe Na2SO4 și evaporate.
RO 119413 Β1
3665
Reziduul este dizolvat în 79 ml de metanol și 30 ml de THF, iar această soluție este tratată cu 5,37 g de carbonat de potasiu și 30 ml de apă și agitată la temperatura de reacție, timp de 3 h. Amestecul de reacție este turnat după aceea într-o soluție de acid citric 10% rece ca gheața, iar acest amestec este extras de 3 ori cu acetat de etil. Fazele organice sunt spălate cu 2 porții de H2O și soluție salină, uscate pe Na2SO4 și evaporate. Cromatografia pe coloană (SiO2, hexan/acetat de etil, 1:1) conduce la compusul din titlu: TLC Rf(C) = 0,28; tRet(ll) = 20,9 min.
f) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-[p-(2-metoxietoxi) fenil]-2(R)-[(pbenziloxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
1,00 g (1,41 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-benziloxif enil)metil]hexanoic și 270 mg (1,55 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1 b)] în 13,5 ml de 0,25M NMM/CH3CN sunt reacționate, sub atmosferă de gaz de protecție, cu 588 mg (1,55 mmoli) de HBTU. După 18 h la temperatura camerei, amestecul se evaporă în final. Reziduul este reluat în acetat de etil, iar soluția este spălată cu apă, de două ori cu soluție de acid citric 10%, cu apă, de două ori cu soluție saturată de NaHCO3, cu apă și cu soluție salină. Fazele apoase sunt extrase suplimentar de două ori, cu acetat de etil, iar fazele organice sunt uscate pe sulfat de sodiu și evaporate. Se obține compusul din titlu: tRet(ll) = 22,7 min; FAB-MS (M+H)+ = 864.
Exemp\u\32.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-hidroxifenil)-metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Prin hidrogenarea unei soluții de 600 mg (0,80 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 31)] în 20 ml de metanol, în prezența a 200 mg de Pd/C 10%, filtrând și evaporând această soluție, se obține compusul din titlu. TLC Rf(F) = 0,19; tRet(ll) = 12,3 min; FAB-MS (M+H)+ = 660.
Exemplul 33.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidmxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Sub atmosferă de N2,100 mg (0,152 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(/>hidroxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxi-etil)amidă [Exemplul 32)] în 3 ml de DMF/dioxan, 1:1, sunt tratate la 0°C, cu 98,7 mg (0,303 mmoli) de Cs2CO3 și 9,4 pl (0,152 mmoli) de iodură de metil, iar amestecul este agitat la temperatura camerei, timp de 24 h. Dacă HPLC indică faptul că materia primă mai este încă prezentă, este necesară adăugarea suplimentară a încă 6 μΙ de iodură de metil. După încă 20 h, la temperatura camerei, amestecul de reacție este turnat în apă și întreaga masă de reacție este extrasă cu trei porții de clorură de metilen. Fazele organice sunt spălate cu apă și soluție salină, uscate pe Na2SO4 și evaporate. Recristalizarea din clorură de metilen, puțin metanol și DIPE conduc la obținerea compusului din titlu: TLC Rf(H) = 0,47; tRet(ll) = 14,0 min; FAB-MS(M+H)+= 674.
Exemplul 34.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-{[p-(2-metoxietoxi)fenil]metil}hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Sub atmosferă de N2,100 mg (0,152 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-hidroxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxi-etil)amidă [Exemplul 32)] în 3 ml de DMF/dioxan, 1:1, sunt tratate la 0°C, cu 98,7 mg (0,303 mmoli) de Cs2CO3 și 40 mg (0,152 mmoli) de iodură de 2-metoxietil [Exemplul 31 b’)] și amestecul este agitat la temperatura camerei, timp de 24h. Dacă HPLC indică încă prezența materiei prime, sunt adăugate, în trei porții, încă 60 mg de iodură de 2-metoxietil, amestecul fiind agitat la temperatura camerei, timp de câteva ore, la fiecare adăugare. Precipitând amestecul de reacție cu 4 ml de amestec apă-gheață, filtrând, cromatografiind (SiO2, clorură de metilen/THF, 3:1) și solubilizând în hexan, se obține compusul pur din titlu. TLC Rf(H) = 0,59; tRet(ll) = 13,9 min; FAB-MS (M+H)+ = 718.
3670
3675
3680
3685
3690
3695
3700
3705
3710
RO 119413 Β1
Exemplul 35.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(4-bifenilil)metil]he-xanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida
0,21 g (0,276 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(4bifenilil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă sunt desililate sub atmosferă de azot, cu 0,174 g (0,55 mmoli) de TBAF. După 18 h la temperatura camerei, amestecul de reacție este turnat în apă și totul este extras cu 3 porții de acetat de etil. Fazele organice sunt spălate cu o soluție saturată de NaHCO3 și cu o soluție salină, după care sunt uscate pe Na2SO4 și evaporate. Agitarea în DIPE conduce la compusul din titlu: TCL Rf(B) = 0,55; tRet(lI) = 1,65 min; FABMS (M+H)+ = 646.
Materia primă este preparată, după cum urmează;
35a) 5(S)-[ 1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]-3(R)-[(4-bifenH)metil]dihidrofuran-2-(3H)-ona în mod analog cu Exemplul 5d), 0,5 g (16,37 mmoli) de 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-feniletil]dihidrofuran-2-(3H)-onă, dizolvate în 24 ml de THF și 2,8 ml de DMPU, sunt deprotonizate, la -70°C, cu 32,7 ml de soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu în THF, și alchilate (de la -70 la -50°C) cu 6,07 g (24,6 mmoli) de bromură de bifenilil-metil (Salor, Milwaukee, SUA), în 20 ml de THF. Protonarea cu 6,1 ml (81,9 mmoli) de acid propionic și 6,1 ml de apă, la -75°C, extracția și cromatografia la presiune medie (gradient: 0-1% acetat de etil în toluen) dau compusul din titlu: TLC Rf(D) - 0,57; tRet(ll) = 18,8 min.
35b) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(4-bifenilil)metil] hexanoic
1,3 g (2,76 mmoli) de 5(S)-[ 1 (S)-(Boc-amino)-2-f en ileti l]-3( R)-[(4-bif en il il) m etiljdihid rof uran-2-(3H)-onă sunt hidrolizate, în 28 ml de dimetoxietan, cu 11 ml dintr-o soluție 1M de hidroxid de litiu, în apă. După 16 h la temperatura de reacție, dimetoxietanul este evaporat în evaporator rotativ și reziduul este tratat într-un amestec (răcit cu gheață) de 15 ml de soluție saturată de NH4C, 80 ml dintr-o soluție de acid citric 10% și clorură de metilen. Faza apoasă este separată și extrasă de două ori cu clorură de metilen. Fazele organice sunt spălate cu soluție salină, uscate cu Na2SO4 și evaporate pentru a da compusul din titlu: TLC Rf(B) = 0,4; tRet(ll) = 16,4 min.
35c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(4-bifenilil)metil] hexanoic
Sub o atmosferă de gaz de protecție, 1,23 g (2,51 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(4-bifenilil)metil]hexanoicîn 25 ml de DMF suntsililate, la temperatura camerei și pentru o perioadă de timp de 20 h, cu 1,74 g (11,5 mmoli) de te/ț-butildimetilclorsilan și 1,40 g (20,6 mmoli) de imidazol. Amestecul de reacție este evaporat și reziduul este reluat în acetat de etil, această soluție fiind spălată cu soluție saturată de NaHCO3, apă și soluție salină. Fazele apoase sunt extrase de două ori cu acetat de etil, iar fazele organice sunt uscate pe Na2SO4 și evaporate. Reziduul este dizolvat în 30 ml de metanol și 7 ml de THF, iar această soluție este tratată cu 2,0 g de carbonat de potasiu și 7 ml de apă și este agitată la temperatura camerei, timp de o oră. Amestecul de reacție este după aceea evaporat parțial și reziduul este diluat cu o soluție de acid citric 10 %, răcită cu gheață și întreaga masă de reacție este extrasă de 3 ori (3x) cu acetat de etil. Fazele organice sunt spălate cu 2 porții de apă și soluție salină, uscate pe Na2SO4 și evaporate. Cromatografia la presiune medie (gradient: 0-50% acetat de etil în hexan) dă compusul din titlu: TLC Rf(C) = 0,56; tRet(ll)= 22,1 min.
35d) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(4-bifenil) metiljhexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
280 mg (0,46 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)[(4-bifenilil)metil]hexanoic în 4,44 ml de 0,25M NMM/CH3CN sunt activate, sub atmosferă de N2, cu 193 mg (0,51 mmoli) de HBTU. După 5 min, se adaugă 90 mg (0,51 mmoli) de H-(L)-ValN-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1 b)] și amestecul este agitat la temperatura camerei, timp de 20 h. Procedând în mod analog cu Exemplul Ic) și dizolvând produsul brut în hexan, rezultă compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,2; tRet(ll) = 22,7 min.
RO 119413 Β1
3765
Exemplul 36.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil)metil]hexanoil-(L)- Val-N-(2-metoxietil)amida
Sub o atmosferă de gaz de protecție, 1,4 g (1,6 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/țbutildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil) amidă în 30 ml de DMF sunt desililate cu 1,0 g (3,2 mmoli) de TABF și, după 20 h, sunt prelucrate în mod analog cu Exemplul 35). Cromatografia pe coloană (silicagel, clorură de metilen - clorură de metilen/metanol 9:1) și agitarea în DIPE conduc la compusul din titlu: tRet(lI) = 18,0 min; FAB-MS (M+H)+ = 752.
Materia primă este preparată în următorul mod:
36a)5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)-etil]-3(R)-[(4-bifenilil)metil]dihidrofuran-2(3H)-ona în mod analog cu Exemplul 5d), 5,55 g (13,5 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(pbenziloxifenil)etil]dihidrofuran-2-(3H)-onă [preparare, vezi Exemplul 1 g)], dizolvate în 20 ml de THF și 2,3 ml de DMPU, sunt deprotonate, la -70°C, cu 27 ml dintr-o soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu, în THF și alchilate (1 h) cu 0,5 g (20,2 mmoli) de bromură de 4-bifenililmetil (Salor, Milwaukee, SUA), în 16 ml de THF. Protonarea cu 5 ml (67,4 mmoli) de acid propionic și 5 ml de apă, la -75°C, extracția și cromatografia la presiune medie (gradient: 30-50% acetat de etil în toluen) dau compusul din titlu: TLC Rf(Q) = 0,15; tRet(ll) = 20,0 min.
36b) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil)metil] hexanoic
4,56 g (7,9 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)etil]-3(R)-[(4-bifenilil) metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă sunt hidrolizate, în 80 ml de dimetoxietan, cu 31,6 ml dintr-o soluție 1M de hidroxid de litiu, în apă. După 18 h la temperatura camerei, dimetoxietanul este evaporat într-un evaporator rotativ și reziduul este tratat cu un amestec răcit cu gheață, constituit din 43 ml de soluție saturată de NH4CI, 229 ml de soluție saturată de acid citric 10% și clorură de metilen. Faza apoasă este separată și extrasă de 2 ori cu clorură de metilen. Fazele organice sunt spălate cu soluție salină, uscate cu Na2SO4 și evaporate. Cristalizarea din DIPE dă compusul din titlu: tRet(ll) = 17,9 min.
36c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil)metil]hexanoic
3,19 g (5,4 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil)metil]hexanoic, în 55 ml de DMF sunt sililate la temperatura camerei, timp de 20 de h și sub atmosferă de gaz de protecție, fiind tratate pentru sililare cu 3,71 g (24,6 mmoli) de terțbutildimetilclorsilan și 3,0 g (44 mmoli) de imidazol. Amestecul de reacție este evaporat și reziduul este reluat în acetat de etil; această soluție este spălată după aceea cu o soluție saturată de NaHCO3, apă și soluție salină. Fazele apoase sunt extrase de 2 ori cu acetat de etil și fazele organice sunt uscate pe Na2SO4 și evaporate. Reziduul este dizolvat în 64 ml de metanol și 15 ml de THF, iar această soluție este tratată cu 4,5 g carbonat de potasiu și este agitată la temperatura camerei, timp de o oră. Prelucrarea în mod analog cu Exemplul 35c) și cromatografia la presiune medie (gradient: 0-10% metanol în clorură de metilen) dau compusul din titlu: TLC Rf(B) = 0,7; tRet(ll) = 22,7 min.
36d)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetUsUiloxi)-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
1000 mg (1,44 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil)metil]hexanoic, în 13,8 ml de soluție 0,25M de NMM/CH3CN sunt activate, sub atmosferă de N2, cu 601 mg (1,58 mmoli) de HBTU. După 5 min, se adaugă o cantitate de 276 mg (1,58 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 1b)] și amestecul este agitat complet la temperatura camerei, timp de 20 h. Prelucrarea similară cu Exemplul 1 c) și cromatografia la presiune medie (gradient: 40-60% acetat de etil în hexan) dau compusul din titlu: TLC Rf(C) = 0,33; tRet(ll) = 23,5 min.
3770
3775
3780
3785
3790
3795
3800
3805
3810
RO 119413 Β1
Exemplul 37.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Hidrogenând 200 mg (0,265 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-2-metoxietil)amidă [Exemplul 36)] în 20 ml de metanol/clorură de metilen, în prezența a 0,1 g de Pd/C 10%, filtrând catalizatorul și evaporând, se obține compusul din titlu: tRet(ll) = 14,5 min; FAB-MS (M+H)+ = 662.
Exemplul 38.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-[(4-bifenilil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
O soluție de 173 mg (0,26 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)2(R)-[(4-bifenilil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 37)] în 5ml DMF/dioxan, 1:1, sub atmosferă de N2, este supusă răcirii cu gheață; în acest timp, aceasta este tratată cu 170 mg (0,52 mmoli) de Cs2CO3 și 16 pl (0,26 mmoli) de iodură de metil. După ce amestecul este agitat la temperatura camerei, timp de 20h, se adaugă 4,5 ml de apă cu gheață, iar în final amestecul este diluat cu apă și clorură de metilen. Faza apoasă este separată și este extrasă de 2 ori cu clorură de metilen. Fazele organice sunt spălate cu apă și soluție salină, uscate cu Na2SO4 și evaporate. Agitarea reziduului în hexan duce la obținerea compusului din titlu: tRet(H)16,2 min; FAB-MS (M+H)+ = 676.
Exemplul 39.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[({2‘-cianbifenil}-4il)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Sub atmosferă de N2,2,11 g (2,36 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/ț-butildimetilsililoxi)-6-(/>benziloxifenil)-2(R)-[({2'-cianbifenil}-4-il)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă, în 49 ml de DMF sunt desililate cu 1,49 g (4,7 mmoli) de TBAF și, după 20 h, sunt prelucrate în mod analog cu Exemplul 35). Operația de agitare în hexan duce la compusul din titlu: tRet(lI) = 17,4 min; FAB-MS (M+H)+ = 777.
Materia primă este preparată în modul următor:
39a) 5(S)-[1(S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)etil]-3(R)-[({2'-cianbifenil}-4-il) metil] dihidrofuran-2-(3H)-ona în mod analog cu Exemplul 5d), se deprotonează 5,00 g (12,1 mmoli) de 5(S)-[1(S)(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)etil]dihidrofuran-2-(3H)-onă [preparare, vezi Exemplul 1 g)], dizolvate în 22 ml de THF și 2,4 ml de DMPU, la o temperatură de -70°C, cu 23,5 ml dintr-o soluție 1M bis(trimetilsilil)amidă de litiu, în THF și se efectuează în continuare alchilarea timp de 2 h, cu 3,43 g (12,1 mmoli) de 4-(bromometil)-2‘-cianbifenil [96%; pentru preparare, vezi de exemplu: J. Med. Chem. 34, 2525 (1991)] Protonarea cu 4,5 ml de acid propionic și 4,5 ml de apă, la o temperatură de -75°C, extracția, cromatografia pe coloană (silicagel, hexan/acetat de etil, 2:1), precum și recristalizarea conduc la compusul din titlu: TLC Rf(D) = 0,3; tRet(ll) = 19,0 min; FAB-MS (M+H)+ = 603.
39b) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[({2‘-cianbifenil}-4-il) metiljhexanoic (sare de litiu)
4,59 g (7,6 mmoli) de 5(S)-[1 (S)-(Boc-amino)-2-(p-benziloxifenil)etil]-3(R)-[({2'-cianbifenil]-4-il)metil]dihidrofuran-2-(3H)-onă, în 120 ml dimetoxietan și 61 ml de apă, sunt agitate împreună cu 30 ml dintr-o soluție 1M de hidroxid de litiu în apă, formându-se o suspensie albă. După 16 h la temperatura camerei, cristalele sunt separate prin filtrare sub vid și spălate cu dimetoxetan (- sarea de litiu a compusului din titlu):
calc. anal, pentru C38H39N2O6Li x 2H2O: C 68,87%, H 6,54%, N 4,23%, H2O 5,44;
valori găsite: C 68,4%, H 6,5%, N 4,2%, H2O 5,23; tRet(lI) = 7,2 min; FAB-MS (M+H)+ = 627.
Soluția mumă este evaporată parțial și reziduul este tratat cu un amestec de 340 ml de soluție saturată de NH4CI, răcit cu gheață, 30 ml soluție de acid citric 10% și clorură de metilen. Faza apoasă este separată și extrasă de 2 ori cu clorură de metilen. Prin spălarea fazelor organice cu soluție salină, uscarea acestora pe Na2SO4 și prin evaporarea acestora rezultă compusul din titlu, sub formă de acid liber.
RO 119413 Β1
3865
39c) Acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[({2‘cianbifenil)-4-il)metil]hexanoic
4,7 g (7,5 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-ammo)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[({2'cianbifenil)-4-il)metil]hexanoic (sare de litiu) în 8,1 ml de DMF sunt tratate, la temperatura camerei, timp de 20 de h, sub agitare, împreună cu 5,2 g (34,6 mmoli) de terț-butildimetilclorsilan și 4,18 g (61,4 mmoli) de imidazol, în absența umidității. Dacă HPLC indică faptul că materia primă mai este încă prezentă, se mai adaugă încă 1,02 g de imidazol și 1,13 g de tert-butildimetilclorosilan. După 2 zile, amestecul de reacție este turnat în apă cu gheață și totul este extras de 3 ori cu acetat de etil. Fazele organice sunt spălate cu o soluție de acid citric 10%, apă și soluție salină, sunt uscate pe Na2SO4 și sunt evaporate. Reziduul este reluat în 91 ml de THF, iar această soluție este tratată cu 6,2 g carbonat de potasiu și 34 ml de apă, și agitată la temperatura camerei, timp de 1,5 h. Amestecul de reacție este apoi supus evaporării parțiale și reziduul este diluat cu o soluție de acid citric 10%, după care amestecul total urmează să fie extras cu acetat de etil de 3 ori. Fazele organice sunt spălate cu 2 porții de apă și și soluție salină, urmând să fie uscate pe Na2SO4 și evaporate. Cromatografia pe coloană (silicagel, hexan/acetat de etil, 1:1) conduce la compusul din titlu: TLC Rf(C) = 0,2 l;tRet(ll) = 22,0 min.
39d)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[({2‘-cianbifenil}-4-il)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida g (2,72 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[({2'-cianbifenil)-4-il-)metil]hexanoic, 652 mg (4,83 mmoli) HOBT, 1,54 g (8,05 mmoli) EDC și 1,17 ml (8,37 mmoli) trietilamină sunt inițial introduse în 24 ml de DMF, sub atmosferă de N2. La acest amestec sunt adăugate 674 mg (3,87 mmoli) de H-(L)-Val-N-(2-metoxietil) amidă [Exemplul 1b)] și masa de reacție rezultată este agitată la temperatura camerei peste noapte. Amestecul de reacție este evaporat sub vid înaintat. Reziduul este repartizat în 3 părți, între clorură de metilen, o soluție de acid citric 10% și o soluție saturată de NaHCO3 și soluție salină. Uscarea fazelor organice pe Na2SO4, evaporarea lor și recristalizarea reziduului din acetat de etil/hexan conduc la compusul din titlu: tRel(lI) - 22,7; FAB-MS (M+H)+ = 891.
Exevnp\u\4Q.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)-2(R)-[({2‘-cianbifenil}-4-il) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amlda
Hidratarea a 1,2 g (1,54 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)2(R)-[([2'-cianbifenil]-4-il)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil) amidă [Exemplul 39)] în 440 ml de metanol și 15 ml de THF, în prezența a 0,24 g de Pd/C 10%, filtrarea catalizatorului, evaporarea și precipitarea cu DIPE, dintr-o soluție concentrată în metanol, conduc la compusul din titlu: tRet(ll) =13,7 min; FAB-MS (M+H)+ = 687.
Exemplul 41.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-[({2'-cianbifenil}-4-il) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
O soluție de 100 mg (0,145 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)2(R)-[([2,-cianbifenil}-4il)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă [Exemplul 40)] în 3 ml de DMF/dioxan, 1:1, este tratată, sub atmosferă de N2 și în timp ce este răcită cu gheață, cu 94,6 mg (0,29 mmoli) de Cs2CO3 și cu 9 pl (0,145 mmoli) de iodură de metil. După ce amestecul a fost agitat la temperatura camerei, timp de 20 h, HPLC indică faptul că materia primă mai este încă prezentă; din acest motiv se mai adaugă încă o dată aceleași cantități de Cs2CO3 și iodură de metil, după care amestecul este agitat până a doua zi. 2,5 ml de apă cu gheață sunt adăugați amestecului de reacție și se diluează suspensia cu apă și clorură de metilen. Faza apoasă este separată și extrasă de 2 ori cu clorură de metilen. Fazele organice sunt spălate cu apă și soluție salină, sunt uscate pe Na2SO4 și sunt evaporate. Cromatografia pe coloană (silicagel, clorură de metilen/THF 15:1 - 4:1) și agitarea reziduului în hexan dau compusul din titlu: TLC Rf(R) = 0,1; tRet(ll) = 15,5 min; FAB-MS (M+H)+ = 701.
3870
3875
3880
3885
3890
3895
3900
3905
RO 119413 Β1
Exemplul 42.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil] hexanoil-(L)-Val-N-(2-etoxietil)amida
1120 mg (1,42 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)[(2,3,4,-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-etoxietil)amidă, în 14 ml de DMF pur, sunt tratate cu 920 mg (2,84 mmoli) de TBAF, iar amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 21 de h, sub argon. După aceea, acesta este turnat într-o soluție salină rece și este filtrat. Solidul este dizolvat în acetat de etil și soluția este spălată succesiv cu apă, cu o soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe sulfat de sodiu și sunt concentrate la aproximativ 30°C. Reziduul este preluat în eter diizopropilic și filtrat. După îndepărtarea prin filtrare, compusul din titlu este spălat cu hexan și ulterior este uscat sub presiune redusă. Punct de topire: 117°C. TLC RAA) = 0,28. FAB-MS (M+H)+ = 674. HPLC tRet= 45,19 min (gradient II); I R(clorură de metilen) = inter alia 3431,2967,1680,1494,1467,1367,1275 și 1166 cm'1;1HNMR (DsOD) = inter alia 7,30-7,10/m (5H); 6,78 și 6,61/fiecare d (fiecare 1H); 4,03/d (1H); 3,85,
3,81 și 3,80/fiecare s (fiecare 3H); 3,46/q (2H); 1,32 și 1,26/fiecare s (în toți 9H din Boc), 1,15/t (3H); 0,82/pseudo t (6H).
Materia primă este preparată după cum urmează:
42a) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4,-trimetoxifeni) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-etoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 1 c), 1,27 g (2,05 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terțbutildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoic [Exemplul 47e)] și 460 mg de-H-(L)-Val-N-(2-etoxietil)amidă, în 19,2 ml de NMM/CH3CN 0.25M sunt reacționate cu 860 mg de HBTU, într-o perioadă de timp de reacție de 20 h, pentru a forma compusul din titlu. Acesta este dizolvat în acetat de etil și această soluție este spălată succesiv, cu acid citric 10% rece, cu apă, cu o soluție de bicarbonat de sodiu saturată și soluție salină (de 2 ori). După ce faza organică a fost uscată pe sulfat de sodiu, aceasta este filtrată și concentrată sub o presiune redusă. Compusul din titlu este purificat prin intermediul cromatografiei de coloană, la presiune medie (8 bari, clorură de metilen/metanol) TLC Rf(A) = 0,5; FAB-MS (M+H)+ = 788; I R(clorură de metilen) = inter alia 3436,2932,1666,1602,1495,1467,1367,1249 și 1164 cm’1.
42b) H-(L)- Val-N-(2-etoxietil)amida în mod analog cu Exemplul 1b), compusul din titlu pur este obținut ca un ulei, după ce s-a efectuat filtrarea catalizatorului și evaporarea filtratului, prin hidrogenarea a 6,12 g (19,59 mmoli) de Z-(L)-Val-N-(2-etoxietil)amidă în 120 ml de metanol, la temperatura camerei, sub presiune scăzută și în prezența a 0,61 g de Pd/C 10%: 1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 0,80 și 0,95 (2d, 6H), 1,2 (t, 3H), 1,35 (b, 2H), 2,25 (m, 1H), 3,2 (d, 1H), 3,45 (t, 2H), 3,47 (m, 4H), 7,5 (b, 1H).
42c) Z-(L)- Val-N-(2-etoxietil)amida
5,025 g (20 mmoli) de Z-(L)-valină sunt dizolvate în 20 ml de clorură de metilen și această soluție este tratată, la o temperatură cuprinsă între -10 și -15°C, cu 2,68 ml (20,4 mmoli) de cloroformiat de izobutil (Fluka, Buchs, Elveția) și 22,2 ml (20 mmoli) de NMM. După ce amestecul a fost agitat timp de 15 min, se adaugă 2,064 g (23,3 mmoli) de 2-etoxietilamină (Pfaltz&Bauer, Waterbury, SUA), sub atmosferă de gaz de protecție. Suspensia de culoare bej este încălzită la temperatura camerei și este tratată cu 100 ml de acetat de etil și 40 ml de apă. După ce faza organică a fost separată, aceasta este spălată cu 40 ml soluție de hidroxid de sodiu 1N și cu soluție salină (de 3 ori). Soluția este uscată pe sulfat de sodiu și este evaporată sub vid înaintat. Reziduul este dizolvat în hexan și filtrat prin absorbție. Compusul din titlu, care a fost astfel obținut, poate fi supus reacțiilor ulterioare, fără nici un fel de purificare suplimentară: TLC Rf(A) = 0,4; 1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 0,95 (2d, 6H), 1,2 (t, 3H), 2,1 (m, tH), 3,4-3,55 (m, 6H), 3,97 (dd, 1H), 5,2 (s, 2H), 5,4 (b, 1H), 6,2 (b, 1H), 7,35 (s, 5H).
RO 119413 Β1
Exemplul 43.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil] hexanoil-(L)-Val-N-(3-metoxipropil)amida
1,19 g (1,51 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2-(R)-[(2,3, 4-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(3-metoxipropil)amidă în 14,5 ml de DMF pur sunt tratate cu 980 mg (3,02 mmoli) de TABF, iar amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 22 h, sub argon. Acesta este turnat apoi în soluție salină rece și solidul este supus filtrării. Acest solid este dizolvat în acetat de etil și soluția este spălată, succesiv, cu apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe sulfat de sodiu și sunt concentrate la o temperatură de aproximativ 30°C. Reziduul este dizolvat în eter diizopropilic și este supus filtrării. După filtrare, compusul din titlu este uscat sub presiune redusă. Punct de topire: 131-132°C; TLC Rf(A) = 0,23; FAB-MS (M+H)+ = 674; HPLC tRet = 14,88 min (gradient II). IR(clorură de metilen) = inter alia 3430, 2966, 1665,1494,1467,1367,1275 și 1167 cm'1; NMR (CD3OD) = inter alia 7,30-7,20/m (5H), 6,78 și 6,61/fiecare d (fiecare 1H); 4,03/d (1H); 3,85, 3,81 și 3,80/fiecare s (fiecare 3H); 3,7 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,39 (t, 2H), 3,29 (s, 3H), 1,32 și 1,26/fiecare s (în toate 9H din Boc), 0,85/pseudo t (6H).
Materia primă este preparată, după cum urmează:
43a) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2-(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil) metil]hexanoil-(L)-Val-N-(3-metoxipropil)amida în mod analog cu Exemplul 1 c), 2,47 g (4 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoic [Exemplul 22 e)J și 830 mg (4,4 mmoli) de H-(L)-Val-N-(3-metoxipropil)amidă, în 37,6 ml de NMM/CH3CN 0,25M sunt reacționate cu 1,67 g HBTU, încadrându-se într-un timp de reacție de 22 h, pentru a forma compusul din titlu. Acesta este dizolvat în acetat de etil și această soluție este spălată succesiv cu acid citric 10% rece, apă, soluție de bicarbonat de sodiu saturată și cu soluție salină (de 2 ori). După ce faza organică a fost uscată pe sulfat de sodiu, aceasta este filtrată și concentrată sub presiune redusă. Compusul din titlu este supus purificării prin cromatografie de coloană, la presiune medie (8 bari, clorură de metilen/metanol).TLC Rf(A) = 0,35; FAB-MS (M+H)+ = 788; IR(clorură de metilen) = inter alia 3436, 2932, 1665,1602, 1494, 1468, 1390, 1367, 1250 și 1165 cm'1.
43b) H-(L)- Val-N-(3-metoxipropil)amida în mod analog cu Exemplul 1 b), compusul din titlu pur este obținut ca un ulei, după filtrarea catalizatorului și evaporarea filtratului, prin hidrogenarea a 22,26 g (69,044 mmoli) de Z-(L)Val-N-(3-metoxipropil)amidă în 463,3 ml de metanol, la temperatura camerei, sub presiune scăzută și în prezența a 2,226 g de Pd/C 10%: FAB-MS (M+H)+= 189; 1H-NMR (360 MHz, DMSOD6): 0,76 și 0,87 (2d, 6H), 1,6 (b, 2H), 1,63 (m, 2H), 1,84 (m, 1H), 2,9 (m, 1H), 3,1 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 3,31 (m, 2H), 7,82 (b, 1H).
43c) Z-(L)- Val-N-(3-metoxipropil)amida în mod analog cu Exemplul 1a), 20 g (79,6 mmoli) de Z-(L)-valină în 250 ml de CH3CN și 20,5 ml de NMM 95% (175,1 mmoli) sunt tratate cu 9 ml (87,55 mmoli) de 3-metoxipropilamină (Fluka, Buchs, Elveția), 33,2 g (87,55 mmoli) de HBTU sunt adăugate la suspensia groasă și amestecul este supus unei agitări complete, la temperatura camerei, timp de 22 h. Amestecul de reacție este evaporat sub vid înalt și reziduul este reluat în acetat de etil, această soluție fiind extrasă cu apă, de două ori soluție de acid citric 10%, apă, de două ori cu soluție saturată de NaHCO3 și cu soluție salină. Fazele apoase sunt extrase suplimentar de 2 ori, cu acetat de etil și fazele organice sunt uscate pe Na2SO4 și evaporate. Cristalizarea din acetat de etil/hexan conduce la compusul din titlu: TLC Rf(G) = 0,41; tRet(ll) = 11,86 min; FAB-MS (M+H)+ = 323.
3960
3965
3970
3975
3980
3985
3990
3995
4000
4005
RO 119413 Β1
Exemplul 44.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(3-etoxipropil)amida
0,97 g (1,57 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tert-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4 -trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(3-etoxipropil)amidă, în 11 ml de DMF pur sunt tratate cu 814 mg de TBAF și amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de 18 h, sub argon. Acesta este apoi dizolvat în acetat de etil și această soluție este spălată, succesiv, cu apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate cu ajutorul sulfatului de sodiu și sunt concentrate la aproximativ 30°C. Reziduul este purificat prin cromatografie de coloană (silicagel, C). TLC R((A) = 0,44; FAB-MS (M+H)+ = 688; HPLC tRet = 15,43 min (gradient II); 1HNMR (CD3OD) = inter alia 7,30-7,10/m (5H); 6,78 și 6,61/fiecare d (fiecare 1H); 4,0 (d, 1H);
3,85,3,81 și 3,80/fiecare s (fiecare 3H); 3,7 (m, 1H), 3,53 (m, 1H); 3,45 (q, 2H) și (m,2H), 3,17 (m, 2H), 2,85-2,7 (2m, 5H), 1,93-1,6 (m, 5H), 1,32 și 1,26/fiecare s (în toți 9H din Boc), 0,85/pseudo-t (6H).
Materia primă este preparată, după cum urmează:
44a) 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil) metil]hexanoH-(L)-Val-N-(3-etoxipropil)amida în mod analog cu Exemplul 1c), 1,235 g (2 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(tertbutildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoic [Exemplul 47e)j și 445 mg (2,2 mmoli) de H-(L)-Val-N-(3-etoxipropil)amidă, în 18,8 ml de NMM/CH3CN 0,25M sunt reacționate cu 0,835 g de HBTU, pentru o perioadă de timp de reacție de 22 h, în vederea formării compusului din titlu. După ce suspensia a fost concentrată, aceasta este dizolvată în acetat de etil și această soluție este spălată succesiv, cu acid citric 10% rece, apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină (de 2 ori). După ce faza organică a fost uscată pe sulfat de sodiu, aceasta este filtrată și concentrată sub o presiune redusă. Compusul din titlu este purificat prin cromatografie de coloană (silicagel, clorură de metilen/ metanol, 99:1). TLC Rf(C) = 0,32; tRet(ll) = 22,58 min; FAB-MS (M+H)+ = 802
44b) H-(L)- Val-N-(3-etoxipropil)amida în mod analog cu Exemplul 1 b), compusul din titlu pur este obținut ca un ulei, după filtrarea catalizatorului și evaporarea filtratului, prin hidrogenarea a 6,2 g (18,4 mmoli) de Z-(L)-ValN-(3-etoxipropil)amidă în 120 ml de metanol, la temperatura camerei, sub presiune scăzută și în prezența a 0,62 g de Pd/C 10%: Ή-NMR (200 MHz, CDCI3): 0,8 și 0,97 (2d, 6H), 1,2 (t, 3H), 1,3 (b, 2H), 1,8 (m, 2H), 2,25 (m, 1H), 3,2 (d, 1H), 3,38 (m, 2H), 3,45 (m, 4H), 7,55 (b, 1H).
44c) Z-(L)- Val-N-(3-etoxipropil)amida
5,025 g (20 mmoli) de Z-(L)-valină sunt dizolvate în 20 ml de clorură de metilen și această soluție este tratată, la o temperatură de la -10 la -15°C, cu 2,68 ml (20,4 mmoli) de cloroformiat de izobutil și 2,2 ml (20 mmoli) de NMM. După ce amestecul a fost agitat timp de 15 min, se adaugă 2,78 ml (23,2 mmoli) de 3-etoxipropilamină, sub atmosferă de gaz de protecție. Suspensia de culoare bej este încălzită la temperatura camerei și este tratată cu 100 ml de acetat de etil și 40 ml de apă. După ce faza organică a fost separată, aceasta este spălată cu 40 ml de soluție de hidroxid de sodiu 1N și cu soluție salină (de 3 ori). Soluția este uscată pe sulfat de sodiu și după aceea este evaporată sub vid înaintat. Reziduul este dizolvat în hexan și filtrat prin absorbție. Compusul din titlu, care este astfel obținut, este supus reacțiilor ulterioare fără purificare suplimentară. TLC Rf(C) = 0,35; 1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 0,95 (2d, 6H), 1,2 (t, 3H), 1,75(m,2H), 2,1 (m, 1H), 3,3-3,55(m, 7H), 3,93 (dd, 1H), 5,1 (s, 2H), 5,4 (b, 1H), 6,55 (b, 1H), 7,35 (s, 5H).
Exemplul 45.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil] hexanoil-(L)-Val-N-[3-(n-propiloxi)propil]amida
1,4g(1,71 mmoli) de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(teȚf-buțildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4trimetoxifenil)metil]hexanoii-(L)-Val-N-[3-(n-propiloxi)propil)amidă, în 16 ml de DMF pur, sunt tratate cu 1,17 g de TBAF și amestecul de reacție este agitat la temperatura camerei, timp de
RO 119413 Β1
4060 h, sub argon; ulterior, acesta este turnat în soluție salină/gheață, iar materialul insolubil este filtrat. Reziduul este dizolvat în acetat de etil și soluția aceasta este spălată, succesiv, cu apă, cu o soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină. Fazele apoase reunite sunt reextrase cu acetat de etil. Fazele organice reunite sunt uscate pe sulfat de sodiu și sunt concentrate la aproximativ 30°C. Reziduul este cristalizat din eter diizopropilic, puțin acetat de etil și hexan. TLC R,(A) = 0,53; FAB-MS (M+H)+ = 702; HPLC tRet =16,31 min (gradient II); 1HNMR(CD3OD) = inter alia 7,30-7,10/(m,5H); 6,78 și 6,61 /fiecare d (fiecare 1H); 4,0 (d, 1H), 3,85,
3,81 și 3,50 (fiecare s, fiecare 3H); 3,7 (m, 1H), 3,54 (m, 1H), 3,43 (t, 2H), 3,37 (t, 2H), 3,15 (m, 2H), 2,9-2,63 (2m, 5H), 1,93 (m, 1H), 1,82-1,5 (m, 6H), 1,32 și 1,26/fiecare s (în toți 9H din Boc), 0,85/pseudo t (6H).
Materia primă este preparată în următorul mod:
45a)5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(terț-butildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil)hexanoil-(L)-Val-N-[3-(n-propiloxi)propil]amida în mod analog cu Exemplul 1c), 1,235 g (2 mmoli) de acid 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-(te/țbutildimetilsililoxi)-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoic [Exemplul 47e)J și 497 mg (2,3 mmoli) de H-(L)-Val-N-[3-(n-propiloxi)propil]amidă, în 18,8 ml de NMM/CH3CN 0,25M sunt reacționate cu 0,835 g de HBTU, în timp de reacție de 22 h, în vederea formării compusului din titlu. După ce suspensia a fost concentrată, aceasta este dizolvată în acetat de etil rece și această soluție este spălată succesiv cu acid citric 10% rece, apă, soluție saturată de bicarbonat de sodiu și soluție salină (de 2 ori). După ce faza organică a fost uscată pe sulfat de sodiu, aceasta este filtrată și concentrată sub presiune redusă. Compusul din titlu este purificat prin cromatografie de coloană (silicagel, clorură de metilen/metanol, 99:1). TLC Rf(C) = 0,27; tRet(lI) = 23,09 min; FAB-MS (M+H)+ = 816.
45b) H-(L)- Val-N-[3-(n-propiloxi)propil]amida în mod analog cu Exemplul 1b), compusul pur din titlu este obținut ca un ulei, după filtrarea catalizatorului și evaporarea filtratului, prin hidrogenareaa 6,3 g (17,48 mmoli) deZ-(L)-ValN-[3-(n-propiloxi)propil]amidă în 120 ml de metanol, la temperatura camerei, sub presiune scăzută și în prezența a 0,63 g de Pd/C 10%: 1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 0,8 (d, 3H), 0,9 și 0,97 (2d, 6H), 1,25 (b, 2H), 1,4 (m, 2H), 1,78 (m, 2H), 2,25 (m, 1H), 3,2(d, 1H), 3,38 (m, 4H), 3,5 (m, 2H), 7,5 (b, 1H).
45c) Z-(L)- Val-N-[3-(n-propiloxi)propil]amida
5,025 g (20 mmoli) de Z-(L)-valină sunt dizolvate în 20 ml de clorură de metilen și această soluție este tratată, la o temperatură de la -10 până la -15°C, cu 2,68 ml (20,4 mmoli) de cloroformiat de izobutil și 2,2 ml (20 mmoli) de NMM. După ce amestecul a fost agitat timp de 15 min, se adaugă 2,72 ml (23,2 mmoli) de 3-(n-propil-oxi)propilamină (Tokyo Kasei Organic Chemicals, Tokyo, Japonia), sub atmosferă de gaz de protecție. Suspensia de culoare bej este încălzită la temperatura camerei și este tratată cu 100 ml de acetat de etil și 40 ml de apă. După ce faza organică a fost separată, aceasta este spălată cu 40 ml de soluție de hidroxid de sodiu 1N și cu soluție salină (de 3 ori). Soluția este uscată pe sulfat de sodiu și după aceea este evaporată sub vid înaintat. Reziduul este dizolvat în hexan și separat prin filtrare cu vid. Compusul din titlu, obținut astfel, poate fi supus în continuare unei reacții, fără a fi necesară o purificare suplimentară. TLC Rf(C) = 0,6; 1H-NMR (200 MHz, CDCI3): 0,92 (m, 9H), 1,6 (m, 2H), 1,75 (m, 2H), 2,1 (m, 1H), 3,35 (m, 4H), 3,5 (m, 2H), 3,93 (dd, 1H), 5,1 (s, 2H), 5,4 (b, 1H), 6,5 (b, 1H), 7,35 (s, 5H).
Exemplul 46.5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[({2'-cianbifenil}-4-il)metil]- hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida
Compusul din titlu este preparat în mod analog cu una dintre metodele descrise în exemplele mai sus menționate.
4065
4070
4075
4080
4085
4090
4095
4100
4105
RO 119413 Β1
Exemplul 47. Capsule (I)
5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-(2,3,4-trimetoxifenilmetil)-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida (substanță activă) este micronizată (dimensiunea particulei, de la aproximativ 1 la 100 pm) cu un amestecător cu cuțit obișnuit (de exemplu Turmix). ©Pluronic F 68 (polimer bloc, constând din polietilenă și polipropilenglicol; Wyandotte Chem. Corp., Michigan, SUA; există, de asemenea, posibilitatea procurării acestuia de la Emkalyx, Franța, marca comercială BASF) este, de asemenea, micronizat cu un amestecător obișnuit, iar fracțiunea fină este separată prin sitare, folosind o sită (0,5 mm) și este supusă unei utilizări suplimentare, așa cum s-a descris mai jos. 16,00 g de ulei de susan sunt introduse inițial într-un pahar de laborator și
1,20 g de substanță activă micronizată, 1,20 g din fracțiunea fină de ©Pluronic F 68 și 1,20 g de hidroxipropil metilceluloză (celuloză HP-M-603 de la Shin-Etsu Chemicals Ltd., Tokyo, Japonia) sunt adăugate, în timp ce se agită cu un agitator (IKA-Werk, Germania), care este combinat cu un agitator tip paletă, de amestecat cu zimți (diametru: 46 mm; viteză de agitare: 2000 rpm). După 20 de min de agitare, la viteza de agitare dată, se produce o suspensie cu o consistență de pastă, care este folosită pentru a umple capsulele tari de gelatină (20 x 40 mm; R.P. Scherer AG, Eberbach, Germania).
Exemplul 48. Capsule (II)
Următoarele elemente constituente sunt folosite pentru a prepara 10.000 de capsule, conținând 100 mg de compus activ (de exemplu 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)(2,3,4-trimetoxifenilmetil)-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil) amidă) per capsulă:
Compus activ 1000 g ®PluronicF68 1000g
Hidroxipropil metilceluloză 1000g Ulei de susan 1000g (originea elementelor constituente, vezi Exemplul 47).
Uleiul de susan este introdus într-un vas care poate fi încălzit (Fryma), iar componenta ®Pluronic F 68 este introdusă prin pulverizare. Vasul este încălzit la o temperatură de 60°C și componenta ®Pluronic F 68 este distribuită prin agitarea amestecului (durata de aproximativ 2 h). Amestecul este supus răcirii până la o temperatură de aproximativ 30°C, în timp ce se efectuează agitarea, realizându-se, în acest mod, omogenizarea acestuia. Hidroxipropil metilceluloza și compusul activ sunt introduse prin pulverizare, iar distribuirea în masa uleioasă se realizează pe măsura agitării și omogenizării (aproximativ o oră). Suspensia, care are o consistență de pastă, este folosită pentru a umple capsulele tari de gelatină tare [mărimea 0; pot fi obținute, de exemplu, de la Elanco sau Parke-Davies (Caprogel)] sau în capsule moi de gelatină (20 mm lungime; R.P.Scherer AG, Eberbach, Germania), cu ajutorul echipamentului obișnuit.
Exemplul 49. Soluție de gelatină
O soluție apoasă, care a fost sterilizată prin filtrare și care conține, drept compus activ, unul dintre compușii cu formula I, menționați în exemplele precedente, împreună cu ciclodextrină 20 % ca solubilizator, este amestecată în condiții aseptice, în timp ce este încălzită, cu o soluție sterilă de gelatină, care conține fenol drept conservant, astfel încât 1,0 ml de soluție are următoarea compoziție:
Compus activ...................................................3mg
Gelatină................................................... 150,0mg
Fenol....................................................... 4,7mg
Apă distilată conținând 20% ciclodextrină drept solubilizator..............1,0 ml
Exemplul 50. Substanță uscată sterilă pentru injecții
O cantitate de 5 mg din unul dintre compușii având formula I, menționați în exemplele anterioare, drept compus activ, este dizolvată în 1 ml de soluție apoasă conținând 20 g de manitol și ciclodextrină 20% drept solubilizatori. Soluția este sterilizată prin filtrare și este folosită
RO 119413 Β1 în condiții aspetice pentru a umple o fiolă de 2 ml, după care aceasta este congelată și liofili- 4155 zată. înaintea utilizării, liofilizatul este dizolvat în 1 ml de apă distilată sau 1 ml de soluție fiziologică de clorură de sodiu. Soluția este utilizată pentru administrare intramusculară sau intravenoasă. Acest tip de formulare poate fi utilizat și pentru a umple seringile de unică folosință cu două compartimente.
Exemplul 51. Pulverizator nazal 4160
O cantitate de 500 mg de pulbere cu granulație fină (< 5,0 pm), dintr-unul dintre compușii având formula I, menționați în exemplele anterioare, drept compus activ, sunt suspendate într-un amestec de 3,5 ml de Myglyol 812® și 0,08 g de alcool benzilic. Suspensia este introdusă într-un container care este prevăzut cu o supapă dozatoare. 5,0 g de Freon 12®, care se află sub presiune datorită supapei, sunt introduse în container. Freonul este dizolvat în ames- 4165 tecul de Myglyol/alcool benzilic prin scuturare (agitare). Acest container pulverizator conține aproximativ 100 doze individuale care pot fi administrate individual.
Exemplul 52. Tablete cu peliculă
Următorii constituenți sunt procesați pentru prepararea a 10.000 de tablete, fiecare conținând 100 mg de substanță activă, respectiv de compus activ:4170
Compus activ................................................. 1000g
Amidon granulat ............................................... 680g
Acid silicic coloidal.............................................. 200g
Stearat de magneziu............................................. 20g
Acid stearic.................................................... 50 g4175
Carboximetil amidon de sodiu..................................... 250g
Apă ...................................................quantum satis
Un amestec de compuși având formula I, menționați în exemplele precedente, drept compus activ, 50 de grame de amidon de porumb și acidul silicic coloidal, este procesat împreună cu o pastă de amidon, constând din 250 g amidon de porumb și 2,2 kg de apă demine- 4180 ralizată, pentru a forma o masă umedă. Aceasta este trecută forțat printr-o sită cu ochiuri de 3 mm și este uscată într-un uscător în pat fluidizat, la o temperatură de 45 °C, timp de 30 de min. Granulatul uscat este presat printr-o sită cu ochiuri de dimensiunea de 1 mm, amestecat cu un amestec sitat anterior (sită de 1 mm) de 330 g amidon de porumb, stearat de magneziu, acid stearic și carboximetil amidon de sodiu și este presat într-o tabletă ușor bombată. 4185
Exemplul 53. Teste bilogice
Demonstrarea efectului inhibitor asupra acțiunii proteolitice a proteazei HIV-1
Efectul inhibitor al derivaților izosteri ai substratului aspartat proteazei HIV, cu formula I asupra acțiunii proteolitice a proteazei HIV-1 poate fi demonstrat, de exemplu, utilizând o metodă analoagă celei descrise de A.D. Richards et al, J. Biol. Chem. 265(14), 7733-7736 (1990). 4190 în acest caz, inhibarea acțiunii proteazei HIV-1 (preparată conform S. Billich, J. Biol. Chem. 263(34), 17905-17908 (1990) este măsurată în prezența icosapeptidei
RRSNQVSQNYPIVQNIQGRR (un substrat artificial al proteazei HIV-1, preparată prin sinteza peptidelor, folosind metode cunoscute, a se vedea J. Schneider, Cell 54,363-368 (1988)), care, ca un substrat analog, cuprinde unul din situsurile de clivaj ale proteinei cu precursor gag (sub- 4195 stratul natural al proteazei HIV-1). Acest substrat și produsele sale de clivaj sunt analizate prin cromatografie în faza lichidă de înaltă performanță (HPLC).
Compusul activ ce trebuie testat este dizolvat în dimetilsulfoxid. Testul enzimatic este efectuat prin adăugarea de diluții adecvate ale inhibitorului în 20 mM tampon de acid β-morfolinoetansulfonic (MES) pH 6,0, la amestecul testat. Acesta din urmă constă în icosapeptida 4200 susmenționată (122 μΜ) în 20 mM tampon MES, pH 6,0. Se folosesc 100 μΙ per amestec testat. Reacția este inițiată prin adăugarea de 10 μΙ soluție de protează HIV-1 și este întreruptă după o oră de incubare, la 37°C, prin adăugarea a 10 μΙ de HCIO4 0,3 M. După ce eșantionul a fost
RO 119413 Β1 centrifugat la 10.000 g, timp de 5 min, 20 pl din supernatantul rezultat sunt alimentate pe o coloană HPLC Nucleosil C18-5p, de 125 x 4,6 mm (material cu fază reversă de la Macherey & Nagel, Diiren, Germania, pe bază de silicagel acoperit cu catene alchil C18). Icosapeptida neclivată și produsele sale de clivaj sunt îndepărtate de pe coloană utilizând următorul gradient: 100% eluent 1 - 50% eluent 1 + 50 % eluent 2 (eluent 1:10% acetonitril, 90% H20,0,1% acid trifluoroacetic (TFA); eluent 2: 75% acetonitril, 25% H2O, 0,08% TFA), timp de peste 15 min, debit 1 ml/min. Fragmentele de peptide eluate sunt cuantificate prin măsurarea maximului corespunzător produsului de clivaj la 215 nm.
Compușii cu formula I au efecte inhibitoare în domeniul 10 5...10'9 M. în acest context, valorile IC50 (IC50 = acea concentrație care micșorează cu 50% activitatea proteazei HI V-1, comparativ cu activitatea unui martor fără inhibitor) se obțin de preferință între 5 x 10‘5...10’9 M.
într-un test ulterior, se poate arăta că acești compuși cu formula I, fie că protejează celulele infectate normal cu o astfel de infecție cu HIV, fie cel puțin întârzie o astfel de infecție. Acest test utilizează celule umane T din linia de celule leucemice MT-2 (Science 229, 563 (1985)), care sunt extrem de sensibile la efectul citopatic al HIV, din moment ce acesta produce încontinuu HLTV-1 (un virus care provoacă leucemia). Celulele MT-2 sunt cultivate într-un mediu RPMI1640 (Gibco, Scoția; RPMI cuprinde un amestec de aminoacizi din care lipsește glutamina) la care se adaugă 10% ser fetal de vițel, inactivat la căldură, glutamina și antibiotice standard. Celulele sunt întotdeauna fără microplasme. Virusul HI V-1 (din tulpina LAV) este cultivat în celulele A 3.01 (NIH, Bethesda, SUA), o linie de celule care este utilizată pentru cultivarea HIV-1 și care derivă din linia de celule CEM. Măsurarea prin testul revers transcriptazei (a se vedea mai jos) indică faptul că titrul preparatului viral conține 2 x 107 Ul/ml.
în scopul măsurării efectului inhibitor al infecției de către compușii de testat, 50 pl din substanța testată respectivă, aflată în mediul de cultură și 100 pl de HIV-1 aflați în mediul de cultură (800 TCID50/ml, TCID50 - doza infectantă în culturi de țesuturi -doza care infectează 50% dintre celulele MT-2) sunt adăugați la 10 x 104 celule MT-2 aflate în creștere exponențială, care inițial sunt introduse în 50 μΙ de mediu de cultură, pe plăci de microtitrare cu 96 de godeuri. După 4 zile de incubare, o probă constând din 10 μΙ de supernatant este prelevată din fiecare godeu pentru a se măsura acțiunea revers transcriptazei. Titrul enzimei revers transcriptazei, care este specific retrovirușilor, este folosit ca o măsură a titrului virusului. Pentru a determina titrul, probele care au fost prelevate sunt întâi adăugate pe alte plăci de microtitrare cu 96 de godeuri și stocate la -20°C, până ce vor fi măsurate.
Când se efectuează măsurătoarea, 30 μΙ de amestec de revers transcriptază sunt adăugați la fiecare godeu. Amestecul de revers transcriptază este format din 50 mM Tri (a ,a ,atris(hidroximetil)metilamină, Ultra pur, Merk, Germania), pH 7,8; 75 mM KCI, 2 mM ditiotreitol, 5 mM MgCI2; 0,1% Nonidet P-40 (detergent; Sigma, Elveția), 0,8 mM EDTA, 10 (pg/ml poli-A (Pharmacia, Uppsala, Suedia) și 0,16 pg/ml oligo(T) (=pdT(12-18), Pharmacia, Uppsala, Suedia) ca primer-matriță. Amestecul este filtrat printr-un filtru Acrodisc de 0,45 pm (Gelman Sciences Inc., An Arbor, SUA) și stocat la -20°C. înaintea testului se adaugă 0,1% (v/v) din [alfa-32P] dTTP, la fracțiuni de soluție, pentru a se ajunge la o radioactivitate finală de 10 pCi/ml.
După ce s-a efectuat amestecul, placa este incubată la 37°C, timp de 2 h. 5 μΙ din amestecul de reacție sunt apoi transferați pe hârtie DE81 (Whatman, un filtru per godeu). Filtrele uscate sunt spălate de trei ori, timp de 5 min, cu 300 mM NaCI / 25 mM citrat trisodic și apoi spălate o dată cu etanol și uscate cu aer.
Radioactivitatea filtrelor este măsurată într-un numărător Packard Matrix cu 96 godeuri (Packard, Ziirich, Elveția). Valorile lui ED90 sunt calculate și sunt definite drept concentrații ale compușilor testați, care reduc acțiunea revers transcriptazei cu 90%, în comparație cu cea a martorului fără compușii testați.
RO 119413 Β1 în acest test, compușii cu formula I inhibă, de preferință, replicarea virală la concentrații cuprinse între 5 x 10'5...10’8 M.
Astfel, compușii cu formula I sunt indicați pentru a întârzia în mod activ replicarea virusului HIV-1 în celulele de cultură.
Este, de asemenea, posibilă determinarea nivelelor sanguine ale compușilor cu formula I.
în acest scop, compușii cu formula I, care urmează a fi investigați, sunt dizolvați, de exemplu, în dimetilsulfoxid (DMSO) la o concentrație de 240 mg/ml. Soluțiile rezultante sunt diluate cu 20% (greutate/volum) hidroxipropil-p-ciclodextrină (HPpCD), în scopul obținerii unei concentrații de 12 mg/ml a substanței de testat. Această soluție este administrată oral la șoareci, cu ajutorul unei sonde, prin gavaj, într-o doză de 120 mg/kg. Animalele sunt sacrificate după 30, 60, 90 și 120 min de la administrare și se recoltează sângele. Trei sau patru șoareci sunt examinați la fiecare din intervalele de timp menționate. Sângele este heparinizat și supus analizelor, după cum urmează: se introduce un standard intern la sângele heparinizat pentru a se obține în final o concentrație de 4 μΜ. Sângele este centrifugat. 0,25 ml de plasmă sunt prelevați și deproteinizați cu un volum egal de acetonitril. După centrifugare, supernatantul este uscat în vacuum și reziduul este suspendat în 20 pl de soluție NaCI 3M și 100 μΙ de 0,05M tampon ftalat, având pH-ul 3,0. Suspensia este extrasă prima dată cu 1 ml, apoi cu 0,2 ml de eter diizopropilic. Soluția de eter diizopropilic este evaporată până la uscare și reziduul este dizolvat în 50% (v/v) acetonitril apos. Această soluție este examinată prin HPLC cu fază inversă.
Analiza prin HPLC cu fază inversă este efectuată utilizând o coloană 125 x 4,6 mm Nucleosil C18 (Macherey-Nagel, Diiren, Germania, pe bază de silicagel care este derivat din reziduurile de hidrocarburi cu 18 atomi de carbon), care este echilibrată cu o fază mobilă de 50% acetonitril în apă / 0,1% acid trifluoroacetic. Debitul este 1 ml/min. Citirea are loc la 215 nm. Standardele pentru compușii în sânge sunt prelucrate în mod analog cu eșantioanele de sânge și sunt folosite la trasarea curbelor standard care sunt apoi utilizate la determinarea concentrațiilor in vivo.
Experimentele descrise și, de asemenea, experimentele referitoare la administrarea parenterală demonstrează că, folosind compușii cu formula I, se pot obține nivele sanguine cu valori mai mari decât ED90, din proba biologică efectuată pe celule, menționată anterior. De aceea, compușii de acest tip sunt, de asemenea, indicați pentru prevenirea dezvoltării virusului in vivo.
Combinația inhibiției aspartat proteazei in vitro, inhibarea replicării virale în cultura de celule și măsurarea nivelelor sanguine la rozătoare, cum ar fi șobolani sau șoareci, este utilizată la determinarea potențialului clinic al inhibitorilor aspartat proteazei (a se vedea Roberts, N.A., Biochemical Soc. Transactions 20, 513-516 (1992)).
Nivelele din sânge mai mari de ED90, în proba biologică susmenționată, pot fi, de asemenea, observate atunci când compușii cu formula I sunt administrați (de exemplu oral) la câini, în consecință, combinația datelor din experimentul pe celule, nivelele sanguine la rozătoare și nivelele sanguine la câini oferă în mod plauzibil posibilitatea utilizării compușilor la tratarea bolilor cauzate de retroviruși, în particular la alte mamifere, cum ar fi omul.
Farmacocinetica la câine
Formulare utilizată: capsule conform Exemplului 47.
Conducerea experimentului.
Se utilizează pentru experimentare 2 femele din rasa Beagle (Ciba Geigy, Sisseln). Pe durata desfășurării experimentului, animalele au acces liber la apă și primesc ultima masă cu 16 h înaintea începerii acestuia. După 8 h de la începerea experimentului, cățelele primesc din nou hrană. Fiecare cățea primește câte 2 capsule conform formulării specificate; acestea conțin împreună 1,2 g de 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-(2,3,4-trimetoxifenilmetil)hexanoil
4255
4260
4265
4270
4275
4280
4285
4290
4295
4300
RO 119413 Β1 (L)-Val-N-(2-metoxietil)amidă (substanță activă), corespunzător unei doze medii, de aproximativ 100 mg/kg greutate corp. Se colectează sânge din vena safenă, în tuburi heparinizate, la diferite momente după administrare.
în vederea analizării concentrației în plasmă, sângele heparinizat este supus centrifugării (4000 x g, 20 min) și plasma este îndepărtată și amestecată cu un volum egal de acetonitril. Amestecul este păstrat la gheață pentru o perioadă de 30 de min. Precipitatul proteinic este îndepărtat prin centrifugare (10.000 x g, 5 min) și supernatantul este supus centrifugării încă o dată. Concentrația substanței active în supernatantul final care se obține este determinată cu ajutorul HPLC cu fază inversă: analiza HPLC se efectuează pe o coloană analitică 125 x 4,6 mm Nucleosil C 18 (5 pm (Macherey & Nagel, Dîiren, Germania), care este echilibrată cu o fază mobilă de 50% acetonitril și 0,1 % acid trifluoroacetic în apă. Debitul este de 1 ml/min. în aceste condiții, limita de detecție este de 0,1 μΜ. Substanța activă este detectată prin absorbția U V la 215 nm. Concentrațiile sunt determinate prin metoda cu standard extern; înălțimile picurilor sunt utilizate pentru determinarea concentrațiilor, prin compararea cu curbele standard. Curbele standard se obțin prin analiza HPLC a plasmelor de câine, care conțin concentrațiile adăugate cunoscute de substanță activă, plasme care la rândul lor sunt prelucrate într-un mod analog cu acela folosit pentru probe, prin intermediul etapelor menționate mai sus.
Rezultate
Tabel de valori
Valorile sunt date în ng/ml
Timp (ore) Cățeaua 1 Cățeaua 2
2 7592 13947
4 4688 4570
6 616 192
8 44 18
12 11 <0,1
24 14 <0,1
Aria de sub curbă (AUC) pentru o perioadă de la 0 la 24 de h (ng x h/ml) 26101 37473
Efect sinergetic produs de combinarea 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amidei[compusuldin Exemplul47)] cu indinavir sau saquinavir în cadrul experimentului folosind linii celulare
Acțiunea combinațiilor și, în particular, efectele sinergetice, pot fi verificate, de exemplu, cu ajutorul experimentelor cu linii de celule și celule periferice sanguine mononucleare (limfocite și monocite).
Celulele CEM-SS (a se vedea Nara, P.L., AIDS Res. Human. Retroviruses 3,283-302 (1987), sau Nara, P.L., Nature 322, 469-70 (1988)) și șirul de celule permanent infectate H9/HTLV-IIIB NIH 1983 (H9/HIV-1/IIIB) al lui Gallo (vezi Popovic, M., Science 224, 497-500 (1984); Popovic, M., Lancet (1984) ii, 1472-3; sau Ratner, L. Nature 313, 277-84 (1985)), de exemplu, sunt utilizate la experimentele cu linii celulare.
Pentru experimentele cu celule mononucleare din sângele periferic, celulele sunt izolate din sânge uman sănătos (HlV-seronegativ), utilizând o combinație de leukaforeză și decantare centrifugală contorizată în conformitate cu metodele cunoscute (vezi Alteri, E., Antimicrob. Agent Chemoter. 37(10), 2087-92 (1993)).
Izolatul limfocitotrofic HIV-1/LAV.04/A.301), de exemplu, este folosit ca virus (vezi Science 220, 868-71 (1983)).
RO 119413 Β1
Compușii supuși testării, de exemplu un compus cu formula I și unul dintre ceilalți inhibitori ai aspartat proteazelor retrovirale menționate mai sus, de exemplu saquinavirsau indinavir, sunt dizolvați în dimetilsulfoxid (DMSO; 2mM), făcându-se diluări ulterioare, cu ajutorul mediului de cultură tisulară complet (vezi mai jos). Concentrația finală a DMSO în stare liberă este mai mică de 0,5%.
Experimentele pentru testarea acțiunii antivirale sunt realizate după cum urmează: Când se utilizează linii celulare:
Liniile celulare sunt menținute într-un mediu de cultură complet, având următoarea compoziție: RPMI 1640(GIBCO, Paisley, Scoția), suplimentat cu serfetal de vițel 10%(SEROMED, Berlin, Germania), 10 mM acid 4-(2-hidroxietil)piperazin-1 -etansulfonic (HEPES) și 2 mM L-glutamină (AMIMED, Muttenz, Elveția). Acțiunea antivirală a compușilor este testată într-un sistem cu mai multe culturi cu celule CEM-SS și cu celule H9/HIV-1 /IIIB, infectate permanent. Compușii testului sunt testați ca substanțe individuale sau ca o combinație de două substanțe active cu concentrații procentuale definite.
Celulele H9/HIV-1/IIIB sunt amestecate (după ce au fost spălate de două ori și suspendate în mediu proaspăt) cu celule CEM-SS, într-o proporție de 1:50,100 pl de amestec de celule și sunt depuse în fiecare godeu al plăcilor de cultură tisulară cu 96 de godeuri, fiecare godeu conținând 400 celule H9/HIV/IIIB și 2 x 104 celule CEM. Imediat după ce au fost distribuite celulele, sunt adăugate două diluții înseriate ale compușilor testului (100 μΙ per godeu), în fiecare caz, în seturi de câte șase. în loc de aceasta, 100 μΙ de mediu sunt adăugați la fiecare godeu pentru controlul virusului (VC). Celulele CEM-SS (fără H9/HIV-1/IIIB) sunt utilizate separat pentru control (CC). Volumul final este 200 μΙ/godeu. După o incubație de 24 h, la 37°C în 5% CO2, sunt îndepărtați 150 μΙ din fiecare supernatant, fără a se îndepărta celulele și înlocuiți de 150 μΙ de mediu proaspăt care conține (sau în cazul lui VC nu conține) substanță sau substanțe de testare proaspete. 10 μΙ de eșantioane de supernatanți de cultură sunt colectați în a patra zi și adăugați la altă placă de microtitrare cu 96 godeuri și, dacă este necesar, depozitați la 20°C. Producția de viruși este determinată ca acțiunea revers transcriptazei (RT) în conformitate cu metoda următoare, care a fost deja descrisă mai sus (vezi Alteri, E., Antimicrob. Agent Chemoter. 37(10), 2087-92 (1993)):
Când se face măsurătoarea, 30 μΙ de „cocktair de revers transcriptază sunt adăugați la fiecare godeu. Cocktailul revers transcriptazei constă din 50 mM Tri(a,a,a-tri(hidroximetil) metilamină( Ultra pur, Merck, Germania), pH 7,8; 75 mM KCI, 2 mM ditiotreitol, 5 mM MgCI2; 0,1% Nonidet P-40 (detergent; Sigma, Elveția), 0,8 mM EDTA, 10 pg/ml poli-A (Pharmacia, Uppsala, Suedia) și 0,16 pg/ml oligo(T) (pdT(12-18), Pharmacia, Uppsala, Suedia) drept primer matriță.
Amestecul este filtrat printr-un filtru Acrodisc 0,45 pm (Gelman Sciences Inc., Ann Arbor, SUA) și depozitat la -20’C. Anterior testului, 0,1% (v/v) [alpha-32P]dTTP este adăugat la componentele soluției, în scopul obținerii unei radioactivități finale de 10 pCi/ml.
După amestecare, placa este incubată la 37°C, timp de 1,5 h. 5 μΙ din amestecul de reacție sunt transferați pe hârtia DE81 (Whatman, un filtru per godeu). Filtrele uscate sunt spălate de trei ori, câte 5 min, cu 300 mM NaCI / 25 mM citrat trisodic și apoi spălate o singură dată cu etanol și uscate în aer. Radioactivitatea filtrelor este măsurată într-un contor Packard Matrix cu 96 godeuri (Packard, Zurich, Elveția). Efectul antiretroviral este dat ca reducere procentuală în acțiunea revers transcriptazei, în comparație cu valorile VC.
Când sunt utilizate celule mononucleare din sângele periferic:
Amestecul de celule mononucleare (limfocite și monocite), care se obține după cum s-a descris mai sus, este cultivat, în prezența a 0,25 pg/ml fitohemaglutinină (Wellcome Diagnostics, Temple Hill, Dartford, Anglia), timp de 2 zile, în RPMI-1640 (GIBCO, Paisley, Scoția), 50 mU/ml penicilină, 50 pg/ml streptomicină (ANIMED, Muttenz, Elveția), 2 mM L-glutamină
4350
4355
4360
4365
4370
4375
4380
4385
4390
4395
RO 119413 Β1 (AMIMED, Muttenz, Elveția) și 10 mM tampon HEPES (GIBCO, Paisley, Scoția). Activarea reușită este contorizată prin măsurarea creșterii dimensiunilor celulelor (Analiza FCM). Celulele sunt resuspendate în mediu complet care conține 10% ser uman AB (Sigma, St. Louis, SUA) și infectate cu HIV-1 timp de 6 ore. După adsorbția virală, celulele sunt spălate și resuspendate în mediu complet care este suplimentat cu 100 U/ml recombinant uman IL-2 (Genzyme, Cambridge, SUA). 9 x 104 celule din fiecare godeu (0,3 ml) și depuse pe plăci cu 96 godeuri au fundurile godeurilor în formă de U. Compușii antivirali sunt adăugați fie singuri, fie în combinație, la seturi de 5 culturi de celule, în fiecare caz, imediat după infecție. Două treimi din mediul de cultură, cu sau fără compuși antivirali, sunt înlocuite din 3 în 3 zile. Testul este încheiat în ziua a 13-a de la infectare. Avansarea infecției virale este măsurată prin determinarea acțiunii revers transcriptazei, așa cum s-a descris mai sus pentru liniile celulare.
Activitățile compușilor individuali și ale combinațiilor, menționate în titlu, în co-cultura liniei de celule CEM-SS și în linia de celule infectate permanent H9/HIV-1/IIIB sunt determinate, folosind metoda descrisă mai sus, în asociere cu descrierea proprietăților farmacologice. Rezultatul măsurătorilor este exprimat în procente ale reducerii activității revers transcriptazei (RT). Rezultatele sunt prezentate în următoarele tabele; rezultatele măsurătorilor care confirmă apariția unui sinergism sunt puse în evidență prin subliniere:
a) Combinația cu saquinavir
Concentrația compusului activ Inhibiția (în %) a activității RT
Exemplul 47 Compusul din Titlu (nM) Saquinavir (nM) Exemplul 47 Compusul din titlu singur Saquinavir singur Combinația dintre Ex. 47 și saquinavir
3125 78156 2,7% 6,6% 14,7% 39,3% 24,2% 23,7% 83,7%
625 1563125 1,3% 14,7% 39,3% 93,8% 58.0% 90,5% 96,6%
b) Combinația cu indinavir:
Concentrația compusului activ Inhibiția (în %) a activității RT
Exemplul 47 Compusul din Titlu (nM) Indinavir (nM) Exemplul 47 Compusul din titlu singur Indinavir singur Combinația dintre Ex. 47 și indinavir
625 125 1,3% 3,2% 39,1%
125 12525 52,0% 3,2% 59,7% 76,6% 90,7%
în consecință, se poate observa o creștere a efectului sinergetic în co-cultură.
Efect sinergetic produs de combinarea 5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3, 4-trimetoxifenil)metil]hexanoil-(L)- Val-N-(2-metoxietil)amidei[compusul din Exemplul 4 7] cu indinavir sau saquinavir în cadrul experimentului folosind celule sanguine mononucleare periferice
Activitățile compușilor individuali și ale combinațiilor, specificate în titlu, în cultura de celule sanguine mononucleare periferice sunt determinate folosind metoda descrisă mai sus, în asociere cu descrierea proprietăților farmacologice. Rezultatul măsurătorilor este exprimat ca activitate cumulativă a revers transcriptazei (RT), în cpm/1,25 pl (număr de dezintegrări 32P, măsurate per 1,25 μΙ de amestec de test și pe minut), în ziua a 17-a după infectare. Rezultatele
RO 119413 Β1
4445 sunt prezentate în tabelul următor; rezultatele măsurătorilor care confirmă apariția sinergismului sunt scoase în evidență prin subliniere. Compusul (compușii) de testat este (sunt) readăugat (readăugați) în asociație cu fiecare schimbare a mediului (în zilele 0, 3, 6,10 și 13):
Tabel
Activitate cumulativă RT (cpm/μΙ) în ziua 17 după infectare
Concentrația compusului din titlul Exemplului 47 Concentrația saquinavir-ului (nM)
0 75 15 30 60 120
0 7505 9411 10299 111 64 47
75 7909 8724 541 57 64 57
15 9132 5381 120 61 58 50
30 8457 255 63 51 59 53
60 1823 91 59 45 57 43
120 49 60 50 70 63 63
în consecință, un efect sinergetic poate fi, de asemenea, detectat în cadrul experimentului, folosind celule sanguine periferice umane.

Claims (16)

  1. Revendicări
    1. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei, caracterizați prin aceea că au formula (I):
    4460 în care:
    R, este un alcoxi inferior-alcanoil inferior (inclusiv alcoxicarbonil inferior);
    R2 și R3 sunt, independent unul de celălalt, fenil care este substituit sau nu cu unul sau mai mulți radicali selectați în mod independent dintre:
    alchil inferior, fenil, cian-fenil, fenil-alchil inferior, halogen, halo-alchil inferior, cian, hidroxil, alcoxi inferior, fenil-alcoxi inferior, piridil-alcoxi inferior, în care piridil este legat print-un atom de carbon din ciclu, alcoxi inferior-alcoxi inferior, alcoxicarbonil inferior-alcoxi inferior, carboxil-alcoxi inferior, hidroxil-alcoxi inferior având cel puțin doi atomi de carbon, în care hidroxilul nu este legat în poziția 1, carbamoil-alcoxi inferior, cian-alcoxi inferior și alchilendioxi inferior;
    R4 este alchil inferior;
    R5 este alchil inferior;
    n este 1 sau 2, și unde inferior definește un radical având mai mult de 7 atomi de carbon sau săruri ale acestora, cu condiția ca cel puțin o grupare ce formează sare să fie prezentă.
  2. 2. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că R,, R4, R5 și n sunt definiți în revendicarea 1 și
    R2 și R3 sunt selectați în mod independent dintre:
    fenil, fenil-alcoxifenil inferior, dif luorfenil, cianfenil, alcoxifenil inferior, tri-alcoxifenil inferior, alcoxi inferior-alcoxifenil inferior, alchilendioxifenil inferior în care radicalul alchilen dioxi inferior este legat prin cei doi atomi de oxigen ai săi la doi atomi de carbon adiacenți ai ciclului fenil, piridil alcoxi inferior-fenil în care radicalul piridil este legat de un atom de carbon al ciclului, 4-alcoxi inferior-2-fluorfenil, 4-fluor-2-alcoxifenil inferior, 4-al
    4465
    4470
    4475
    4480
    4485
    RO 119413 Β1 coxi inferior-2-hidroxifenil, fenil care este substituit până la de trei ori de alchil inferior și alcoxi inferior, fenil substituit de până la 3 ori cu alchil inferior sau alcoxi inferior, fenilalchil fenil inferior, fluorfenil, hidroxifenil și di-alcoxifenil inferior;
    sau săruri ale acestora, cu condiția ca cel puțin o grupare ce formează sare să fie prezentă.
  3. 3. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I, conform revendicărilor 1 Și 2, caracterizați prin aceea că R,, R2, R4, R5, R6 și n sunt definiți în revendicarea 1 sau 2 și R3 este 2,3,4-alcoxifenil inferior sau săruri ale acestora, cu condiția ca să fie prezentă cel puțin o grupare ce formează sare.
  4. 4. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că
    R1 este alcoxicarbonil inferior,
    R2 și R3 apar în următoarele combinații:
    R, = fenil R3 = cianfenil R2 = fenil R3 = dif luorf enil R, = fenil R3 = 4-alcoxifenil inferior R, = 4-(alcoxi inferior-alcoxi inferior)fenil R3 = 4-f enil-alcoxif enil inferior R? = fenil R3 = fenil Rp = fenil R3 = 4-fenil-alcoxifenil inferior R, = fenil Rs = 4-(piridin-3-alcoxi inferior)fenil Rp = fenil R3 = 3, 4-alchilendioxifenil inferior R, = fenil R3 = 2, 3, 4-tri-alcoxifenil inferior
    R4 este izopropil,
    Rs este metil și n este 1.
  5. 5. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că
    R, este fe/ț-butoxicarbonil,
    R2 și R3 sunt prezenți în următoarele combinații:
    R2 = fenil și R3 = 2,3, 4-trimetoxifenil sau
    R2 = fenil și R3 = 4-metoxifenil,
    R4 este izopropil,
    Rs este etil sau metil și n este 2 sau 1, sau săruri ale acestora, cu condiția ca să fie prezentă cel puțin o grupare ce formează sare.
  6. 6. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei, conform oricăreia dintre revendicările 1...5, cu formula Γ, caracterizați prin aceea că derivă din formula:
    în care radicalii au aceleași semnificații cu toate cazurile prezentate, ca cei din formula I.
  7. 7. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei conform revendicării 6, caracterizați prin aceea că
    R, este alcoxicarbonil inferior,
    R2 este fenil și R3 este alcoxifenil inferior sau 2, 3,4-ftT-alcoxifenil inferior,
    R4 este izopropil,
    R5 este metil și n este 1.
    RO 119413 Β1
    4540
  8. 8. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că sunt selectați dintre compușii următori:
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-cianfenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4-diflor-fenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-(fenilmetil)-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil) amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-(3-piridilmetoxi)fenil)-metil]hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[p-(metoxifenil)metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4-metilendioxifenil)metil]hexanoil-(L)-ValN-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(2-etoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(3-metoxipropil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(3-etoxipropil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3,4-trimetoxifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(3-(n-propiloxi)propil)amida;
    sau săruri ale acestora, cu condiția ca să fie prezentă cel puțin o grupare ce formează sare.
  9. 9. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei cu formula I, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că sunt selectați dintre următorii compuși;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-benziloxifenil)metil]-hexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-cianfenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(o-fluorfenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[/>(2-feniletil)fenil]metilhexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)-metil]hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(/>hidroxifenil)-2(R)-[((p-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(/>metoxifenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amide;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-(izobutoxi)fenil)-2(R)-[(p-metoxifenil)-metil]hexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-(fenilmetil)-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(/>benziloxifenil)-metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    4545
    4550
    4555
    4560
    4565
    4570
    4575
    4580
    4585
    RO 119413 Β1
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-hidroxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(p-izobutiloxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[p-(2-piridilmetoxi)fenil)-metil]-hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4-dimetoxifenil)metil]-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(3,4,5-trimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4-dimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,3-dimetil-4-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4,5-trimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,4,6-trimetoxi-fenil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,5-dimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(2,6-dimetoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-hidroxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-metoxifenil)metil]-hexanoil-(L)-Val-N-(2-nnetoxietil)amida și
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-[p-(2-metoxietoxi)fenil]-2(R)-[(p-2-metoxietoxi)fenil]metil-hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida sau săruri ale acestora, cu condiția ca să fie prezentă cel puțin o grupare ce formează sare.
  10. 10. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei, cu formula I, conform revendicării
    1, caracterizați prin aceea că sunt selectați dintre următorii compuși:
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-fenil-2(R)-[(4-bifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(4-bifenil)-metil]hexanoil-(L)-ValN-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)-2(R)-[(4-bifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-[(4-bifenil)-metil]hexanoil-(L)-Val-N(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-benziloxifenil)-2(R)-[(2'-cianbifenil)-4-il]-metilhexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida;
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-hidroxifenil)-2(R)-[(2'-cianbifenil)-4-il]-metilhexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida și
    5(S)-(Boc-amino)-4(S)-hidroxi-6-(p-metoxifenil)-2(R)-[(2'-cianbifenil)-4-il]-metilhexanoil(L)-Val-N-(2-metoxietil)amida sau săruri ale acestora, cu condiția ca să fie prezentă cel puțin o grupare ce formează sare.
    RO 119413 Β1
    4640
  11. 11. Derivați izosteri ai substratului aspartat proteazei, cu formula I, conform oricărora dintre revendicările 1 ...10, caracterizați prin aceea că sunt utilizați într-o metodă de diagnostic sau tratament terapeutic al corpului uman sau animal.
  12. 12. Compoziție farmaceutică conținând un compus cu formula I sau o sare a acestui compus, acceptabilă farmaceutic, definite în revendicările 1 ...10, caracterizată prin aceea că este în asociere cu purtători acceptabili farmaceutic.
  13. 13. Utilizare a unui compus cu formula I sau o sare a acestui compus, acceptabilă farmaceutic, definit în revendicările 1 ...10, la fabricarea unui medicament pentru profilaxia sau tratamentul bolilor retrovirale.
  14. 14. Preparat medicamentos care conține a) cel puțin un compus cu formula I în concordanță cu oricare dintre revendicările 1 ...10 sau o sare a acestuia acceptabilă farmaceutic, cu condiția existenței unei grupări capabile să formeze sare, și b) unul, doi sau mai mulți alți compuși activi, care sunt eficienți contra retrovirusurilor, în prezența sau absența unuia sau mai multor adjuvanți farmaceutici, caracterizat prin aceea că este utilizat ca un preparat combinat pentru folosire simultană sau eventual cronologică, într-o perioadă de timp suficient de mică pentru ca ambii componenți activi a) și b) să fie prezenți simultan în corpul pacientului, pentru tratarea bolilor retrovirale care răspund la astfel de compuși activi.
  15. 15. Un preparat conform revendicării 14, caracterizat prin aceea că este utilizat într-o metodă de tratament terapeutic al corpului uman sau animal.
  16. 16. Procedeu de preparare a compusului cu formula I, conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că acest compus cuprinde:
    a) condensarea unui acid cu formula:
    4645
    4650
    4655
    RrOH (II)
    4660 sau a unui derivat acid reactiv al acestuia, în care Ri are aceeași semnificație ca și R, din formula I, cu un compus aminic cu formula:
    «3
    CH» O
    4665 cu un derivat reactiv al acestuia, în care n și radicalii au semnificația specificată în cazul compusului cu formula I, având grupări funcționale libere, cu excepția acelora participante la reacție, care sunt prezente, dacă este necesar, în forma protejată în materiile prime cu formulele II și III, și eliminarea grupelor de protecție prezente sau
    b) condensarea unui acid carboxilic cu formula:
    4670 (V)
    4675 sau cu un derivat reactiv al acestuia, în care radicalii au semnificația specificată pentru compusul cu formula I, cu un compus aminic având formula (VI):
    4680 (VI)
    RO 119413 Β1 sau cu un derivat reactiv al acestuia, în care n și radicalii au semnificațiile specificate pentru compusul cu formula I, având grupări funcționale libere, cu exepția celor participante la reacție, care sunt prezente, dacă este necesar, în forma protejată în materiile prime cu formulele V și VI, iar grupele protectoare prezente fiind eliminate, sau
    c) condensarea unui acid carboxilic cu formula:
    sau a unui derivat reactiv al acestuia, în care radicalii au semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, cu un compus aminic cu formula (VIII):
    (VIU) hm'* r n
    sau cu un derivat reactiv al acestuia, în care n și R5 au semnificațiile specificate pentru compușii cu formula I, cu grupări funcționale libere, cu excepția celor participante la reacție, care sunt prezente, dacă este necesar, în forma protejată în materiile prime cu formulele VII și VIII, iar grupările de protecție prezente fiind eliminate, sau
    d) fie (i) eterificarea unui compus hidroxi cu formula (IX):
    (IX) sau sarea lui alcoolată, în care n și radicalii au semnificațiile specificate în compușii cu formula I, cu un compus cu formula:
    WrR (X) în care Rs are semnificația specificată pentru compușii cu formula I și W, este o grupare scindabilă, selectată dintre grupările hidroxil esterificate cu un acid organic tare sau cu un acid anorganic sau (ii) eterificarea unui derivat reactiv al compusului hidroxi cu formula IX, cu un compus cu formula:
    HO-RS (Xa) sau sarea lui alcoolată, în care R5 este definit ca mai sus, cu grupările funcționale libere, cu excepția celor participante la reacție, care sunt prezente, dacă este necesar, în forma protejată în materiile prime cu formulele IX, X și Xa, iar grupările de protecție prezente fiind eliminate, sau
    RO 119413 Β1
    4730
    e) eliminarea grupărilor de protecție prezente în compușii cu formula I, în care substituenții sunt cei definiți anterior, cu condiția ca în compușii de interes cu formula I, cel puțin o grupare funcțională să fie protejată, fiind posibile, în etapele procesului specificat a)-e), dacă nu există alte precizări pentru materiile prime implicate, care pot fi utilizate și sub formă de sare, cu condiția existenței grupărilor formatoare de sare, și/sau dacă este cerut un compus cu formula I, care este obținut prin unul din procesele menționate anterior a)-e) și care are cel puțin o grupare care formează sare, sub forma lui de sare, și/sau convertirea unei sări obținute în compusul liber sau în altă sare, și/sau separarea amestecurilor izomere, care pot fi obținute, ale compușilor cu formula I, și/sau transformarea unui compus cu formula I, în alt compus cu formula I.
RO95-01805A 1994-10-19 1995-10-18 Derivaţi izosteri ai substratului aspartat proteazei, sărurile lor, compoziţii farmaceutice şi utilizare RO119413B1 (ro)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH314094 1994-10-19
CH238295 1995-08-21

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RO119413B1 true RO119413B1 (ro) 2004-10-29

Family

ID=25690311

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RO95-01805A RO119413B1 (ro) 1994-10-19 1995-10-18 Derivaţi izosteri ai substratului aspartat proteazei, sărurile lor, compoziţii farmaceutice şi utilizare

Country Status (26)

Country Link
US (3) US5663200A (ro)
EP (1) EP0708085B1 (ro)
JP (1) JP3192070B2 (ro)
KR (1) KR960014094A (ro)
CN (1) CN1132756A (ro)
AT (1) ATE220661T1 (ro)
AU (1) AU707283B2 (ro)
BG (1) BG63042B1 (ro)
BR (1) BR9504466A (ro)
CA (1) CA2160763A1 (ro)
CZ (1) CZ290123B6 (ro)
DE (1) DE69527405T2 (ro)
DK (1) DK0708085T3 (ro)
ES (1) ES2180600T3 (ro)
FI (1) FI954913A7 (ro)
HU (1) HUT74744A (ro)
IL (1) IL115639A0 (ro)
MX (1) MX9504415A (ro)
NO (1) NO314457B1 (ro)
NZ (1) NZ280256A (ro)
PL (1) PL184292B1 (ro)
PT (1) PT708085E (ro)
RO (1) RO119413B1 (ro)
RU (1) RU2164229C2 (ro)
SK (1) SK282339B6 (ro)
TR (1) TR199501284A2 (ro)

Families Citing this family (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5997873A (en) 1994-01-13 1999-12-07 Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York Method of preparation of heat shock protein 70-peptide complexes
ATE213725T1 (de) 1996-07-17 2002-03-15 Novartis Ag Anilinopeptid-derivate
US5972943A (en) * 1996-11-19 1999-10-26 Nisshin Flour Milling Co., Ltd. Pyridinecarboxamide derivatives
US6403587B1 (en) 1997-02-26 2002-06-11 Pfizer Inc. Heteroaryl-hexanoic acid amide derivatives, their preparation and their use as selective inhibitors of MIP-1-α binding to its CCR 1 receptor
US6344476B1 (en) 1997-05-23 2002-02-05 Bayer Corporation Inhibition of p38 kinase activity by aryl ureas
UA61064C2 (uk) * 1997-12-02 2003-11-17 Рон-Пуленк Агро Синергічна фунгіцидна композиція, що містить 2-інідазолін-5-он та спосіб боротьби з фітопатогенними грибками культур
US20080300281A1 (en) * 1997-12-22 2008-12-04 Jacques Dumas Inhibition of p38 Kinase Activity Using Aryl and Heteroaryl Substituted Heterocyclic Ureas
US7329670B1 (en) 1997-12-22 2008-02-12 Bayer Pharmaceuticals Corporation Inhibition of RAF kinase using aryl and heteroaryl substituted heterocyclic ureas
US7517880B2 (en) 1997-12-22 2009-04-14 Bayer Pharmaceuticals Corporation Inhibition of p38 kinase using symmetrical and unsymmetrical diphenyl ureas
ATE337307T1 (de) * 1998-02-05 2006-09-15 Pfizer Prod Inc Neue dihydroxyhexansäurederivate
US6673801B1 (en) 1998-02-05 2004-01-06 Pfizer Inc. Dihydroxyhexanoic acid derivatives
US20080269265A1 (en) * 1998-12-22 2008-10-30 Scott Miller Inhibition Of Raf Kinase Using Symmetrical And Unsymmetrical Substituted Diphenyl Ureas
US8124630B2 (en) 1999-01-13 2012-02-28 Bayer Healthcare Llc ω-carboxyaryl substituted diphenyl ureas as raf kinase inhibitors
ES2384160T3 (es) 1999-01-13 2012-07-02 Bayer Healthcare Llc Difenil ureas sustituidas con omega-carboxi arilo como agentes inhibidores de la cinasa p38
US7928239B2 (en) 1999-01-13 2011-04-19 Bayer Healthcare Llc Inhibition of RAF kinase using quinolyl, isoquinolyl or pyridyl ureas
EP1140840B1 (en) 1999-01-13 2006-03-22 Bayer Pharmaceuticals Corp. -g(v)-carboxyaryl substituted diphenyl ureas as raf kinase inhibitors
ME00275B (me) 1999-01-13 2011-02-10 Bayer Corp ω-KARBOKSIARIL SUPSTITUISANI DIFENIL KARBAMIDI KAO INHIBITORI RAF KINAZE
EP1498417A1 (en) * 2000-02-04 2005-01-19 Pfizer Products Inc. Heterocyclic amide derivatives
SK10882002A3 (sk) * 2000-02-04 2003-10-07 Pfizer Products Inc. Heterocyklické amidové deriváty
US6992081B2 (en) 2000-03-23 2006-01-31 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds to treat Alzheimer's disease
ES2275675T3 (es) * 2000-03-23 2007-06-16 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compuestos y metodos para tratar la enfermedad de alzheimer.
US6846813B2 (en) * 2000-06-30 2005-01-25 Pharmacia & Upjohn Company Compounds to treat alzheimer's disease
CN1217920C (zh) * 2000-06-30 2005-09-07 艾兰制药公司 治疗早老性痴呆的化合物
US20030096864A1 (en) * 2000-06-30 2003-05-22 Fang Lawrence Y. Compounds to treat alzheimer's disease
PE20020276A1 (es) 2000-06-30 2002-04-06 Elan Pharm Inc COMPUESTOS DE AMINA SUSTITUIDA COMO INHIBIDORES DE ß-SECRETASA PARA EL TRATAMIENTO DE ALZHEIMER
US7235576B1 (en) 2001-01-12 2007-06-26 Bayer Pharmaceuticals Corporation Omega-carboxyaryl substituted diphenyl ureas as raf kinase inhibitors
US7371763B2 (en) * 2001-04-20 2008-05-13 Bayer Pharmaceuticals Corporation Inhibition of raf kinase using quinolyl, isoquinolyl or pyridyl ureas
EP1401452A1 (en) * 2001-06-27 2004-03-31 Elan Pharmaceuticals, Inc. Beta-hydroxyamine derivatives useful in the treatment of alzheimer's disease
US20070213407A1 (en) * 2001-06-29 2007-09-13 Elan Pharmaceuticals And Pharmacia & Upjohn Company Llc Compounds to treat Alzheimer's disease
BR0213139A (pt) * 2001-10-04 2004-08-10 Elan Pharm Inc Composto, método de tratamento ou prevenção de doenças e de preparação de um composto, uso de um composto e composição farmacêutica
KR100447931B1 (ko) * 2001-10-24 2004-09-08 한국화학연구원 초발수성 유／무기 복합막
PT2305255E (pt) * 2001-12-03 2012-09-04 Bayer Healthcare Llc Compostos de arilureia em combinação com outros agentes citostáticos ou citotóxicos para tratamento de cancros humanos
US8110587B2 (en) * 2002-02-11 2012-02-07 Bayer Healthcare Llc Aryl ureas as kinase inhibitors
US20030216396A1 (en) * 2002-02-11 2003-11-20 Bayer Corporation Pyridine, quinoline, and isoquinoline N-oxides as kinase inhibitors
AU2003210969A1 (en) * 2002-02-11 2003-09-04 Bayer Corporation Aryl ureas with raf kinase and angiogenesis inhibiting activity
EP1478358B1 (en) 2002-02-11 2013-07-03 Bayer HealthCare LLC Sorafenib tosylate for the treatment of diseases characterized by abnormal angiogenesis
WO2004058686A1 (en) * 2002-04-30 2004-07-15 Elan Pharmaceuticals, Inc. Hydroxypropyl amides for the treatment of alzheimer’s disease
US7557129B2 (en) 2003-02-28 2009-07-07 Bayer Healthcare Llc Cyanopyridine derivatives useful in the treatment of cancer and other disorders
DK1626714T3 (da) 2003-05-20 2007-10-15 Bayer Pharmaceuticals Corp Dirarylurinstoffer mod sygdomme medieret af PDGFR
EA010485B1 (ru) 2003-07-23 2008-10-30 Байер Фамэсьютиклс Копэрейшн Производное n,n'-дифенилмочевины, фармацевтическая композиция (варианты) и способ лечения и предупреждения заболеваний и состояний с его использованием (варианты)
CN1296347C (zh) * 2003-12-08 2007-01-24 中国科学院海洋研究所 新碳骨架抗肿瘤抗生素化合物及其制备方法和应用
GB0401332D0 (en) * 2004-01-21 2004-02-25 Novartis Ag Organic compounds
US7476733B2 (en) 2005-03-25 2009-01-13 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Development of a real-time PCR assay for detection of pneumococcal DNA and diagnosis of pneumococccal disease
JO3090B1 (ar) * 2009-12-11 2017-03-15 Janssen Sciences Ireland Uc 5- امينو-4- هيدروكسي-بنتويل اميدات
US9051304B2 (en) * 2009-12-22 2015-06-09 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Carboxamide compounds and their use as calpain inhibitors V
KR20140063577A (ko) 2011-06-30 2014-05-27 피라말 이미징 에스에이 Pet 영상화를 위한 18f-플루오로메톡시 화합물의 직접 합성 및 o-([18f]플루오로메틸) 티로신의 보호된 유도체의 직접 방사성합성을 위한 신규 전구체의 제공
EP2540710A1 (en) 2011-06-30 2013-01-02 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft New precursors for direct radiosynthesis of protected derivatives of O-([18F]Fluoromethyl) tyrosine
WO2013023145A1 (en) * 2011-08-10 2013-02-14 Neupharma, Inc. Certain chemical entities, compositions, and methods
JP7254771B2 (ja) * 2018-03-29 2023-04-10 株式会社カネカ 長鎖ペプチドの製造方法

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5189017A (en) * 1982-07-23 1993-02-23 Ciba-Geigy Corporation Use of sugar derivatives for the prophylaxis and treatment of virus infections
US4894437A (en) * 1985-11-15 1990-01-16 The Upjohn Company Novel renin inhibiting polypeptide analogs containing S-aryl-D- or L- or DL-cysteinyl, 3-(arylthio)lactic acid or 3-(arylthio)alkyl moieties
JPH02500025A (ja) * 1986-09-30 1990-01-11 ジ・アップジョン・カンパニー 新規なｃ末端基を有するレニン抑制ペプチド
EP0278158A3 (en) * 1986-11-12 1990-05-23 Merck & Co. Inc. Renin inhibitors containing phenylalanyl-histidine replacements
US4927807A (en) * 1987-10-06 1990-05-22 Abbott Laboratories Glaucoma treatment
GB8803365D0 (en) * 1988-02-13 1988-03-16 Ciba Geigy Ag Antiviral combination
IL89900A0 (en) * 1988-04-12 1989-12-15 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids and pharmaceutical compositions containing them
IL91307A0 (en) * 1988-08-24 1990-03-19 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors and pharmaceutical compositions for the treatment of aids containing them
EP0374097A3 (de) * 1988-12-15 1991-06-12 Ciba-Geigy Ag Verwendung von Peptidisosteren als retrovirale Proteasehemmer
WO1991006561A1 (en) * 1989-10-27 1991-05-16 The Upjohn Company Method for treating hiv and other retroviruses and compounds useful therefor
CA2032259A1 (en) * 1989-12-18 1991-06-19 Wayne J. Thompson Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids
WO1991010442A1 (en) * 1990-01-09 1991-07-25 Smithkline Beecham Corporation Hiv protease inhibitors
GB9015658D0 (en) * 1990-07-17 1990-09-05 Shell Int Research Herbicidal compounds
EP0487270A3 (en) * 1990-11-19 1992-11-25 Merck & Co. Inc. Hiv protease inhibitors having polyether substituents
WO1992009297A1 (en) * 1990-11-30 1992-06-11 Smithkline Beecham Corporation Hiv protease inhibitors
US5235039A (en) * 1991-06-10 1993-08-10 Eli Lilly And Company Substrates for hiv protease
US5753652A (en) * 1991-07-03 1998-05-19 Novartis Corporation Antiretroviral hydrazine derivatives
CA2076204A1 (en) * 1991-08-16 1993-02-17 Samuel L. Graham Hiv protease inhibitors with n-terminal polyether substituents
US5643878A (en) * 1991-09-12 1997-07-01 Ciba-Geigy Corporation 5-amino-4-hydroxyhexanoic acid derivatives
EP0618222A3 (en) * 1993-03-11 1997-01-02 Ciba Geigy Ag Dipeptid derivatives of 5-amino-4-hydroxy-hexanoic acid.

Also Published As

Publication number Publication date
JP3192070B2 (ja) 2001-07-23
HU9503007D0 (en) 1995-12-28
FI954913A7 (fi) 1996-04-20
SK128595A3 (en) 1997-04-09
KR960014094A (ko) 1996-05-22
NO954142D0 (no) 1995-10-18
PL184292B1 (pl) 2002-09-30
HUT74744A (en) 1997-02-28
BG100067A (bg) 1996-04-30
TR199501284A2 (tr) 1996-06-21
DK0708085T3 (da) 2002-11-11
JPH08208580A (ja) 1996-08-13
ATE220661T1 (de) 2002-08-15
NO314457B1 (no) 2003-03-24
DE69527405D1 (de) 2002-08-22
CZ271395A3 (en) 1996-05-15
IL115639A0 (en) 1996-01-19
US5807891A (en) 1998-09-15
RU2164229C2 (ru) 2001-03-20
AU707283B2 (en) 1999-07-08
EP0708085A2 (en) 1996-04-24
CZ290123B6 (cs) 2002-06-12
EP0708085B1 (en) 2002-07-17
ES2180600T3 (es) 2003-02-16
US5663200A (en) 1997-09-02
BR9504466A (pt) 1997-05-20
DE69527405T2 (de) 2003-03-13
MX9504415A (es) 1997-03-29
NZ280256A (en) 1997-07-27
CN1132756A (zh) 1996-10-09
PL311027A1 (en) 1996-04-29
SK282339B6 (sk) 2002-01-07
PT708085E (pt) 2002-11-29
CA2160763A1 (en) 1996-04-20
NO954142L (no) 1996-04-22
EP0708085A3 (en) 1997-10-08
FI954913A0 (fi) 1995-10-16
AU3427995A (en) 1996-05-02
BG63042B1 (bg) 2001-02-28
US5935976A (en) 1999-08-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RO119413B1 (ro) Derivaţi izosteri ai substratului aspartat proteazei, sărurile lor, compoziţii farmaceutice şi utilizare
TWI790704B (zh) 含腈之抗病毒化合物類
AU2018260314B2 (en) Antitumoral compounds
JP5558710B2 (ja) Ｈｄａｃ阻害剤としてのｆｋ２２８誘導体
SK280292A3 (en) New derivatives of 5-amino-4-hydroxyhexane acid effecting as therapeutic agents
JP3187535B2 (ja) 医薬的に活性なヒドラジン誘導体およびその製造方法
EA019749B1 (ru) Противовирусные соединения
SK63498A3 (en) Novel macrocyclic compounds as metalloprotease inhibitors
JP2022516685A (ja) ホスファターゼ結合化合物およびそれらを使用する方法
HUT74453A (en) 2,9-diamino- and 2-amino-8-carbamoyl-4-hydroxy-alkane-carboxylic acid derivatives, process for preparing them, their intermediates, use and pharmaceutical compns. contg. the said compds.
JPH02300199A (ja) レトロウイルスプロテアーゼ阻害剤
EP0601486A1 (en) Cis-epoxide derivatives useful as irreversible HIV protease inhibitors and process and intermediates for their preparation
JP4604161B2 (ja) フェニルアラニン誘導体
CZ54194A3 (en) Derivatives of acylhexanoic acid, process of their preparation, pharmaceutical preparations in which they are comprised and their pharmaceutical use
US7226991B1 (en) Phenylalanine derivatives
JPH09508417A (ja) 抗ウイルス剤として有用なマクロ環式ジフルオロスタトン誘導体類
CZ2001276A3 (cs) Inhibitory urokinázy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje