PT96139B

PT96139B - Processo para a preparacao de novos derivados de glicopeptido

Info

Publication number: PT96139B
Application number: PT96139A
Authority: PT
Inventors: Ramakrishnan Nagarajan; Amelia Apolinaria Schabel
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1989-12-13
Filing date: 1990-12-10
Publication date: 1998-04-30
Also published as: CA2031803C; RU2053240C1; IE904485A1; JP3590638B2; NO905354L; AU633165B2; ES2131496T3; FI906083A; FI906083A0; EP0435503B1; EP0435503A1; NO905354D0; CN1052483A; DE69033087D1; IL96603A0; NZ236393A; ZA909847B; YU234790A; PH27373A; HUT55802A

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA

Resumo

O presente invento refere-se a um processo para a preparação de novos derivados de N-alquilo e N-acilo de A82846A, A82846B, AS2846C e PA-42867-A, os quais são úteis para o tratamento de infecções bacterianas susceptíveis, especialmente infecções devidas a microorganismos Sram-positivos» Estes compostos podem ser preparados por reacção de um composto de fórmula II

na qual R₇ é por exemplo hidrogénio com um aldeído de fórmula

Bx na qual R ê por exemplo H, para se formar uma base de Schiff intermediária, que é então reduzida para se obter o derivado N-alquilo« presente invento refere-se a glicopeptido de fórmula is novos derivados de

R é um glucosilo de hidrogénio ou um fórmula grupo de í4-epi-van c osam i n i1o)-0-

ou um grupo de glucosilo de fórmula

-4HO ι

Η·

- ch₂oh ο

X é hidrogénio?

Y é hidrogénio ou cloro?

R., , R_o e R^. são independentemente hidrogénio? alquilo Λ >*£>

alcanoilo C_o-Cg? ou um grupo de fórmula

-(CH₂)_n-

né 1,2 ou 3?

é hidrogénio, halo, alquilo C^-C_q, alcóxi C^-Cg, ou um grupo de fórmula

R_r

Rg e R& são independentemente hidrogénio ou alquilo C^-C^.?

p é 0, 1 ou 2?

m é 2 ou 3 e r - 3 - m?

desde que, quando R for um grupo <4-epi-vancosaminilo)— O— glucosilo, R^, R^ e R^ não sejam todos hidrogénio e quando R for glucosilo ou hidrogénio, e R_? não sejam ambos hidrogénio? ou a um seu sal farmaceuticamente aceitável.»

Este invento também se refere a um processo para a preparação dos compostos de fórmula £, o qual consiste na reacção de um composto de fórmula II

II na quais

Ry é hidrogénio, um grupo (4-epi-vancosaainilo? —D-g1ucosi1o de fórmula

ou um grupo glucosilo de fórmula

X é hidrogénio ou cloro?

Y é hidrogénio ou cloros

a) um aldeído de fórmula

D il / \

H R x

ns qual R_w

Λ é H_s alquilo ^C11 ou um grupo de fórmula

é hidrogénio, halo, alquilo C^-Cg, alcóxi C^-Cg, ou um grupo de fórmula /

- N \

R, o

R₌. e R, u O são independentemente hidrogénio ou alquilo m é 2 ou 3 e r - 3 - m? para se formar uma base de Schiff intermediária que é então reduzida para se obter o derivado de N-alquilo?

ou b) alternativamente com um éster activada do derivada do ácida alcanóico do grupo acilo desejado de fórmula '3

ο η

Z-C-R y

na qual R é alquila C^-Cg au usi grupo de fórmula •(CH,)

p é β, 1 ou 2 e Z é um grupa de activação.

Este invento também se refere a composições para o tratamento de infecções bacterianas sensíveis, as quais consistem num composto de fórmula X em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável. Ds métodos para o tratamento de infecções bacterianas sensíveis com composições de fórmula X fazem também uma parte do presente invento.

/

Continua a haver uma procura intensa de novos antibióticos aperfeiçoados, especialmente para □ tratamento de doenças em seres humanos. Potência superior, espectro de inibição baeteriana mais alargado, eficácia in vivo superior e propriedades farmacêuticas melhoradas são alguns dos objectivos postos na procura de novos antibióticos»

Os enterococos são patogénios humanas importantes» As infecções provocadas pelos enterococos são normalmente difíceis de tratar. Os glicopeptidos, tais como a vancomicina e a

-1Θ· teicoplanina, tornaram-se em terapias importantes para o tratamento de infecções provocadas pelos enterococos» No entanto, as estirpes de E. faseiam e E» faecalis. que foram isoladas recentemente, mostraram-se resistentes à vancomicina. R« Leclerq et al.» Plasmid Nediatsd Rssistance to Vancomycina and Teicoplanin in Enterococcus Faecium, The New Enqland Journal of Medicine, 319(3). 157-116 (1988) e A.H.C. Utley et_al., “Vancomycin-Resistant Enterococci, Lançet, X, 57-58 (1988). Os isolados mostraram-se também resistentes a outros antibióticos.

Os glicopeptidos, tais como a vancomicina e a teicoplanina, apresentam vários níveis de ligação da proteína do soro. 0 nível de ligação da proteína do soro humano para a vancomicina e para a teicoplanina foi referido como sendo de 557. a 90%, respectivamente. R„ Noellering et al.. “Farmocinéticos da Vancomicina em Indivíduos Normais e em Doentes com a Função Renal Reduzida”, Reviews of Infectious Eissase, 3 (Supp»), S230-S235 (1981) e A. Assandri e A. Bernareggi, Ligação da Teicoplanina à Albumina de Soro Humano, Eur. J» Clinicai Pharmacol.. 55, 191-195 (1987). A percentagem de ligação da proteína de soro apresentada pela Teicoplanina é considerada como um nível elevado de ligação? contudo, o nível de ligação da proteína de soro apresentado pela vancomicina é relativamente baixo» A forma livre ou não ligada do antibiótico é a forma que participa na actividade biológica. Por isso, a ligação dos antibióticos às proteínas de soro afecta as propriedades farmacêuticas do antibiótico.

Na procura de novos antibióticos, a modificação estrutural dos antibióticos conhecidos é considerada sempre que possível. Os antibióticos de glicopeptido têm estruturas de tal maneira complexas que mesmo pequenas alterações são difíceis. Por outro lado, é difícil prever o efeito que estas modificações vão ter nas propriedades antimicrobianas e fisiológicas. Os processos para a modificação de novos antibióticos, bem como os novos derivados activos preparados por estes processos, continuam, por isso, a ser de grande importância.

Até à data, preparam—se os derivados de N-alquilo e de N-acilo dos glicopeptidos vancomicina, A51568A, A51568B, N43A e M43D (Patentes Norte Americanas 4.639.433, 4.643.987 e 4.698.327). Vários destes compostos apresentaram actividade microbiológica contra os isolados resistentes á vancomicina. T„ Nicas et al.. Agentes Antimicrobianos e Quimioteramia, 35(9), 1477-1481 C19S9).

De acordo com o presente invento, proporcionam-se novos derivados de glicopeptido, os quais apresentam aquelas propriedades fortemente desejadas que consistem em os referidos derivados possuírem actividade antimicrobiana contra os isolados resistentes à vancomicina e em possuírem níveis relativamente baixos de ligaçSes da proteína de soro.

presente invento proporciona também um processo para a preparação dos novos derivados de glicopeptido de fórmula £. Além disso, o presente invento proporciona composiçSes farmacêuticas que compreendem uma quantidade eficaz de um novo derivado de glicopeptido de fórmula £ e um veiculo farmacêutico adequado.

Os compostos de fórmula £ são novos membros do grupo glicopeptido dos antibióticos. Estes novos compostos são os derivados de N-alquilo e de N-acilo dos glicopeptidos A82846 conhecidos, factores A, B e C (EPO 265.071 Aí) e PA-42867-A CEF‘0

231.111 A2)

Os compostos de fórmula 1 representativos mostraram possuir actividade antimicrohiana contra os isolados resistentes à vancomicina. Da mesma forma, os novos compostos apresentam uma ligação da proteína de soro tão elevada como outros glicopeptidos» 0 nível da ligação da proteína de soro para os compostos de fórmula X ê semelhante ao exibido pela vancomicina. Este nível é muito inferior ao de outros glicopeptidos muito potentes, tais como a teicoplanina.

termo derivado de N-alquilo significa um derivado de A82846A, A82846B, AS2846C ou PA-428Ó7-A, em que um átomo de hidrogénio de um ou. mais dos grupos amino ê substituído por um grupo alquilo ou alquilo substituído.

termo derivado N-acilo significa um derivado de A8284ÒA, A8284ÓB, A82B46C ou PA-42867-A, em que um átomo de hidrogénio de um ou mais dos grupos amino é substituído por um grupo de alcanoilo ou alcanoilo substituído.

termo alquilo significa um hídrocarboneto de cadeia linear ou ramificada, por exemplo metilo, etilo, n-propilo, iso— propila, n-butila, s~butilo, t-butilo, n-pentila, isapentilo, n-hexilo, 2-metilhexilo, 3-metilhexilo, n-heptilo, 2-metilheptilo, n-octilo, 2-metiloctila, 3-metiloctilo, n—actila.

-meti Inanilo, n-decilo, 2-metildecilo, n-undecilo, 2-metilundecilo ou n-dadecilo, Quando a termo alquilo é descrito como alquilo a Cg, o termo significa, por exemplo, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentilo, isopentilo, n-hexilo, n-heptilo ou π-octilo. Quando o termo alquilo é descrito como alquilo Cg a Cjg, o termo significa, por exemplo, n-octilo, 2-metiloctilo, 3-metiloctilo, n—nonilo, 2—metilnonilo, n-deciio, n-undecilo, 2-metilundecilo ou n-dodecilo. Quando o termo alquilo é descrito como alquilo Cg a C^, o termo significa, por exemplo, n-actilo, 2-metiloctilo, 3-metiloctilo, n-nonilo, Z-metilnonilo ou n-decilo» Quando o termo “alquilo é descrito como alquilo a C_T, o termo significa metilo, etilo, n-propilo ou isopropilo»

Q ^C1 ^{a C}8 ^deligado a um termo alcanoilo C.-, a C^ significa um grupo alquila cadeia linear ou. ramificada, como definido supra, grupo earbonilo» termo alcoxi a C_p significa um grupo alquilo Cj a C_g, como definido supra, ligado a um átomo de oxigénio, □ grupo alcóxi a Cg pode ser, por exemplo, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, n~butóxi, s-butóxi, n—pentóxi, isopentóxi, n-hexilóxi, n-heptilóxi e n-octilóxi» termo halo significa um halogénio do grupo flúor, cloro, bromo e iodo» De preferência, o termo “halo pode ser flúor, cloro e bromo» Ds sais de adição farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula X constituem uma parte deste invento» Qs sais de adição farmaceuticamente aceitáveis são aqueles sais que são úteis para a quimoterapia de um animal de sangue quente, de tal modo que a toxicidade da forma salina não seja superior à da forma não salina. Os compostas de fórmula X possuem, cada um, um grupo carboxilo e um ou mais grupos amino que não reagem para formarem vários sais» Os sais de adição de ácido, formados pelas reacção “Standard dos compostos de fórmula X com ambos os ácidos orgânico e inorgânico, são um grupo preferido de sais» Exemplos dos sais farmaceuticamente aceitáveis são os sais formados por reacção de um composto de fórmula X com o ácido clorídrico, succínico, cítrico, láctico, tartérico, fosfórico e acético.

Os compostas de fórmula X, nos quais R é um grupo (4-epi-vancosaminill-O-glucosilo são prerados a partir dos antibióticos A82846, dos factores A, B e C, e a partir de PA-42:867-A. As estruturas destes antibióticos são apresentadas na fórmula III. Os métodos para a preparação de A82B46A, AB2846B e A8284ÓC são descritos na Publicação da Patente Europeia 265. €^71 Aí. 0 método para a preparação de PA-42867--A é descrito na Publicação da Patente Europeia 23Í.1Í1 A2„

15·

Compostos de Fórmula III

No.	Composto	X	Y
Illa	A82846A	H	Cl
Illb	A82S4&B	Cl	Cl
IIIc	A8284&C	H	H
Illd	PA-42867-A	Cl	H

Os compostos de fórmula X, em que R é hidrogénio, ou é o grupo glucosilo, são preparados a partir dos produtos de hidrólise ácida de A82846A, A82846B, AS2S46C e PA-42867-A.. As estruturas dos produtos de hidrólise ácida são apresentadas nas fórmulas IV e V. Os métodos para a preparação dos produtos de hidrólise ácida de PA-42867-A, de des-(4-epi-vancosamini1?-PA428Ó7-A (IVd) e de des—(4-epi-vancosamini1-0—glucosil)-Pft-42867-A (Vd) são descritos na Publicação da Patente Europeia 231.111 A2. Os derivados de des- (4-epi-vancosamin .i lo 1 e de des-(4-epi-vancosaminil-Q-glucosilo) de A8284ÓA, B e C são preparados por tratamento de A8284ÓA, B e 0 com ácido trifluoroacêtico ÍATF) a uma temperatura de cerca de ~10°C a cerca de S0^c'C, durante um período de cerca de 1 a 60 horas (ver a Patente Norte Americana 4.552.701 para a descrição de métodos para a remoção de grupos de açúcar dos antibióticos do tipo glicopeptidos)« Períodos de reação cu?— tos, por exemplo de 1 a 2 horas, e temperaturas baixas, 0*8, favorecem a formação dos derivados de des~(4-epi-vancosaminilo) de A8284ÓA, B e C, fórmulas IVa-c.

“17 «Λ

Compostos de Fórmulas IV e V

Composto NS	^R8	X	Y
IVa	glucosilo	H	Cl
IVb	glucosilo	Cl	Cl
IVc	glucosilo	H	H
IVd	glucosilo	Cl	H
Va	H	H	Cl
Vb	H	Cl	Cl
Vc	H	H	H
Vd	H	Cl	H

—ÍBOs derivados de N-alquilo deste invento são preparados por reacção de um composto de fórmula II com um aldeído para se formar uma base de Schiff intermediária» A reacção é efectuada num solvente orgânico polar, tal como a dimetilformamida, ou numa mistura de solventes orgânicos polares, por exemplo uma mistura de dimetilformamida e metanol, a uma temperatura de cerca de 25°C a cerca de A reacção para a formação da base de Schiff é de preferência efectuada a uma temperatura entre cerca de 60°C e cerca de 7©°C, durante um período que pode variar entre 3@ minutos e 2 horas, numa mistura de dimetilformamida e metanol»

A base de Schiff intermediária é então reduzida, preferência sem isolamento, para produzir os derivados N-alquilo. A redução da base de Schiff pode ser efectuada de de por um ou num utilização de um agente boroidreto metálico, por cianoboroidreto de sódio» de redução químico, tal como exemplo boroidreto de sódio A reacção pode ser efectuada solvente orgânico polar, fal como a dimetilformamida, ou numa mistura de solventes orgânicos polares, tal como a dimetilformamida e o metanol» A redução pode ser efectuada a uma temperatura de cerca de 25°C a cerca de durante í a 5 horas» A redução é de preferência efectuada por utilização de um excesso de cianoboroidreto de sódio numa mistura de dimetil formamida e metanol, a cerca de 6@°C a cerca de 7ô‘^:,C, durante í a 2 horas»

Os aldeídos que podem ser utilizados num processo para preparar os compostos do presente invento são representados pela seguinte fórmulas

19em que

Η / \

Η R

X

R έ· hidrogénio, alquilo _{? ou UÍR} grupo de fórmula

n varia entre 1 e 3? m é 2 ou 3 e r =3 - m? e R^ é hidrogénio, halo, alquila C^-Cg, alcóxi C^-Cg, ou um grupa de fórmula {<.

'6

Rg e R_a são independentemente hidrogénio ou alquilo C^-C-j?

p é 0 a 2?

m é 2 ou 3 e r = 3 - m.

fí relação de aldeído para o composto de fórmula II e as condições de reacção determinam os produtos de reacção» A formação dos derivados mono-aIquilados é favorecida pela utilização de um excesso ligeiro do aldeído, por um tempo de reacção mais curto e por uma temperatura mais baixa. Os derivados monoalquilados são os derivados de IM—alquilo em que um átomo de hidrogénio de um grupo amino ê substituído por ura grupo alquilo ou por um grupo alquilo substituído» Normalmente, o grupo amino do grupo C4-eoi-vancosamini15-0-glucosilo, quando alquilada sm primeiro lugar para preparar os fórmula X, nos quais R._, é alquila ou alquilo presente, é compostos de substituído e aldeído favorece trialquilados dos e R,. são hidrogénio» Um excesso grande do a formação de derivados dialquilados e compostos de fórmula III e a formação de derivados dialquilados dos compostos de fórmula IV e V. Os derivados dialquilados são os derivados de M-alquilo em que um átomo de hidrogénio de dois dos grupos amino έ substituído por um grupo de alquilo ou alquilo substituído» Geralmente, este grupo de derivados dos compostos de fórmula III abrange os compostos de fórmula I em que R^ e também R, ou R_» são um grupo alquilo ou alquilo substituído e Ré um grupo (4-~gpi-vancosamin i 1 l-O-glu— cosilo. Qs derivados dialquilados dos compostos de fórmula IV e V são grupos alquilo ou alquilo substituído e R é o grupo glucosilo e hidrogénio, respectivamente» Os derivados trialquilados são os compostos de fórmula X em que R é um grupo (4-epi-vancosaminil )~0~glucosi.lo e Rj, R^ e R^ são grupos alquilo ou alquilo substituído»

Ds derivados de M-alquilo deste invento compreendem os compostos de fórmula X em que R^ , R_o e R-^ são independentemente alquilo Cj a ou hidrogénio» Os derivados de M-alquilo preferidos deste grupo são aqueles em que R é um grupo de (4-epivancosaminil)-Q-glucosilo, R. e R._? são hidrogénio e R_? é alquila

Cg-Cj^j. Exemplos dos derivados de alquilo preferidos são aqueles em que R_? é n-octilo, 2-metiloctilo, 3-metiloctilo, n-nonilo, 2-metilnonilo, n-decilo, 2-metiIdacilo, rv-undeeilo, 2-meti lundeci. lo ou n-dodecilo. Com maior preferência, X e Y são cloro e R_o é n-octilo, n-nonilo ou n-decilo.

Os derivados de N-alquilo deste invento também compreendem os compostos de fórmula £ em que R^ , R^ e R_T são independentemente hidrogénio ou um grupo alquilo substituído de fórmula?

Quando n é 1 exemplos deste grupo de alquilo o-bromobenz i 1 o.

substituído são? benzilo, p-fluorobenzilo, p-bromobenzilo, p-iodobenzilo, m-fluorohenzilo m-bromotaenz i 1 o, m-iodoben silo, o-iodoben ζ i1o ρ t_ 1 orobenzi 1 o, m-cloroben z i1o, o—c1o robenz i1o, p—etilbenzilo, o—fluorobenzilo, p—metilbenzilo, p-propilbenzilo, p-isopropiltaenzilo, p-butilbenzilo, p-pentilbenzilo, p-hexilbenzilo, p—heptilbenzilo, p-octilbenzilo, m—metilbenzilo, m-etilbenzilo, m-propilbenzilo, m-isopropilbenzilo, m-butilbenzilo, m-pentilbenzilo, m-hexilbenzilo, m-heptilbenzilo, m-octilbenzilo, o-metilbenzilo, o-etilbenzilo, o-propilbenzilo, o-isopropilbenzilo, o-hutilbenzilo, o-pentilbenzilo, o-hexilbenzilo, o-heptilbenzilo, o-octilbenzilo, p-metoxibenzilo, p-etoxibenzilo, p-propoxibenzilo, p-isopropoxibenzilo, p-butoxibenzilo,

p—pentoxibenzilo, p—hexiloxibenzilo, p-heptiloxibenzilo, p-octiloxibenzilo, m-metoxibenzilo, m-etoxibenzilo, m-propoxibenzilo, m-isopropoxibenzilo, m-butoxibenzilo, m-pentoxibenzilo, m-hexiloxibenzilo, m-heptiloxibenzilo, m-octiloxibenzilo, α-metoxibenzilo, o-etoxibenziio, o-propoxibenzilo, o-isopropoxibenzilo, α-butoxibenzilo, o-pentoxibenzilo, o-hexiloxibenzilo, o-heptiloxibenzilo, o-octiloxiberizilo, p-aminobenzilo, p-metilaminobenzilo, p-dimetilaminobenzilo, p-etilaminobenzilo, p-dietilaminobenzilo, p-propilaminofaenzilo, p-dipropilaminobenzilo, m-aminobenzilo, m-metilaminobenzilo, m-dimetilaminohenzilo, m-etilaminobenzi1o, m-dieti1aminobenzi1o, m-propi1aminobenzi1o, m-dipropi1aminabenzilo, o-aminobenzilo, o-metilaminobenzilo, o-dimetilaminoben·zilo, o-etiIaminobenzi1o, o-dieti1aminobenzi1amino, o-propi1aminobenzilo ou o-dipropilaminobenzilo.

De preferência, R„ é halo, alquilo C,-C„, alcóxi C.-C4 · o o‘ o 8 ou dialquilo(C.-C-r)amino. Exemplos preferidos deste grupa são p-bromobenzilo, p-clorofoenzilc, p—f luorobenzilo, m-clorobenzilo, o-clorobenzilo, p-octilbenzilo, ρ-octiloxibenzilo e p-dietilaminobenzilo. Com maior preferência, o grupo alquilo substituído ê p-bromobenzilo, p-octilbenzilo, p-octiloxibenzilo ou p-dietilaminobenzilo.

De preferência, quando R^ é halo, alquila C&-C_s, alcóxi C^-Cg ou dialquiloCC^-C-^Jamino, X e Y são cloro. Com mais preferência, R é um grupo (4-epi-vancosaminilí-O-glucosilo e e R,r são hidrogénio. Com mais preferência, R₂ p-bromobenzilo, p-octilbenzilo, p—octiloxibenzilo ou dietilaminobenzilo.

Suando n ê 2, exemplos deste grupo alquilo substituído sãos feniletilo, íp-fluorofenilletilo, <p-clorofenilletilo, < p-foromofenil)etilo, Cp-metilfenil)etilo, < p-etilfenil)etilo, (p-mefcoxifenilletilo e Cp-dimetilaminofenil)etilo, De

-jL-i preferência, α grupo alquilo substituido é feniletilo <R^ é hidrogénio). Com mais preferência, R é um grupo C4-epi-vancosamini1)-0-glucosiIo, ê feniletilo, X e Y são cloro e Rj e R^ são hidrogénio.

Quando n é 3, exemplos deste grupo de alquilo substituído sãos fenilpropilo, (p-fluorofenil)propilo, íp~clorofenil)~ propilo, íp-bromofenil)propilo, íp-metilfeni1)propilo, Cp-etilfenil)propilo, í p-metoxifen.il )propilo e Cp-dimetilaminofeni 1)propilo. De preferência, o grupo alquilo substituído é fenilpropilo CR^ é hidrogénio).

Os derivados de ÍM-alquilo deste invento também são os compostos de fórmula I_ em que o grupo alquilo é um grupo alquilo substituído de fórmula;

—CH₂-CH_r-^Q>^

Exemplos deste grupo são difeniletilo Cm = 2, r - í) e trifeniletilo (m =3, r ~ ©). De preferência, X ε Y são cloro, R é um grupo de C4-epi-vartcosamlnil )-0-glucosilo, R-, é hidrogénio e R, e R_o são ambos hidrogénio ou difeniletilo.

Os derivados de hi-acilo deste invento são preparados por reacção de um composto de fórmula II com um éster activado do ãcido alcanóico do grupo acilo desejado» 0 termo éster activado significa um éster que proporciona a ligação da função

-24carboxilo do grupo reactivo de acilação com o grupo amino do glicopeptido» A reacção é efectuada num solvente orgânico polar, tal como a dimetilformamida, a uma temperatura que varia entre cerca de 50°C e cerca de íl®°C, durante 3. a 5 horas. A reacção para a formação dos derivados de N-acilo é de preferência efectuada a uma temperatura que varia entre cerca de 70°C e cerca de 80°C, durante cerca de 2 a 4 horas» □ derivado de éster activado ê preparado por esterificação do ácido livre do grupo de acilo desejada, com activação de grupos tais como p—nítrofenol, 2,4-dinitrofenol, 2,4,5-tric1orofeno1, 2-c1oro-4,ó-dimetox itriazina, M-c1orossuccinimida, imida N-clcromaisica, N-cIoroftalimida, i-hidroxibenzotriazole ou l-hidróxi-6-cloro-ÍH-benzotriazole» Ds derivados de éster activado são representados pela fórmula geral na qual

R é alquilo C^-Cg ou um grupo de fórmula

p varia entre 0 ε 2 ε Ζ é ο grupo de activação. 0 derivado de éster activado preferido é o éster 2,4,5-triclorofenol»

A relação do éster activado do composto de fórmula II e as condições de reacção determinam os produtos de reacção. A formação dos derivados monoacilados ê favorecida pela utilização de um ligeiro excesso do éster activado e por um tempo de reacção curto. Os derivados monoacilados são os derivadas de N-acilo em que um átomo de hidrogénio de um dos grupos amino é substituído por um grupo alcanoilo ou alcanoilo substituído. Normalmente, os derivados monoacilados dos compostos de fórmula 111 são os compostos de fórmula I_ em que R é um grupo (4-epi-vancosamini 1 ') O-glucosilo s Rp ou R^. é um grupo alcanoilo ou alcanoilo substituído. Os derivados monoacilados dos compostos de fórmula IV ou V são os compostos de fórmula £ em que Rj ou R^. é um grupo alcanoilo ou alcanoilo substituído e R é o grupo glucosilo ou hidrogénio, respectivamente. Os derivados diacilados e triacilados dos compostos de fórmula III e os derivados diacilados dos compostos de fórmula IV e V são produzidos por utilização de grande excesso do éster activado. Os derivados diacilados são os derivados de N-acilo em que um átomo de hidrogénio de dois dos grupos amino é substituído por um grupo alcanoilo ou alcanoilo substituído» Normalmente, este grupo de derivados dos compostos

I de fórmula III compreende os compostos de fórmula !_ em que R é um grupo (4-epi.-vancosamin il )-0-qlucosilo e dois de R,, R~ e R^ * a * a» ·.?

são grupos alcanoilo ou alcanoilo substituído. Os derivados diacilados dos compostas de fórmula IV ou V são os compostos de fórmula Ϊ. em que R, e R·^ são ambos grupos alcanoilo ou alcanoilo substituído e R é o grupo glucosilo ou hidrogénio, respectivamente. Os derivados triacilados são os derivados dos compostos de fórmula III, em que R^, R^ e R_? são grupos alcanoilo ou alcanoilo substituído,, —2ό—

Qs derivados N-acilo deste invento incluem os compostas de fórmula 1 em que R' , R_o e R_T são independentemente alcanoilo Cg a Cç ou hidrogénio. Exemplos dos derivados de acilo são, por exemplo, acetilo, propionilo, isopropionilo, n-butirilo, n-pentanaílo, n-hexanoílo, n-heptanaílo, n-octanoílo e n-nonanaílo. Qs grupos acilo preferidos slo o n-butirilo, n-pentanoílo, n-hexanoí lo e π-heptanoílo» De preferência, R é um grupo C4-gpi-vancasaminil )-O~gl ucosi lo, R_. é hidrogénio e R, ou R« é um grupo acilo,

Os derivados de M—acilo deste invento incluem também os compostos de fórmula X, em que R*, Rg e são independentements hidrogénio ou um grupo alcanoilo substituido de fórmula»

Exemplos deste grupo acilo fenilacetilo e fenilpropionilo» De (4-epi-vancosaminil )-O~gI ucosi lo, R-? grupo acilo substituído, Exemplos preparados e que fazem parte deste Quadros I, II e III para os compostos substituido são benzoílo, preferência, R é um grupo é hidrogénio e Rj ou Rg é um dos compostos que foram invento são listados nos de fórmula Σ.

•27”

Quadro I. Exemplos dos Compostos de Fórmula I

X = Η, Y - Cl

R - Srupo <4-epi-vancosaminilJ-Q-glucosilo

Composto

NQ	^R1	^R2	^R3
1	H	n—qcti lo	H
	H	H	n-octilo
•jí	H	n—octilo	n-octilo
4	n-octilo	n-octilo	n-octilo
5	H	rs-pen ti lo	H
6	H	H	n—pentilo
7	H	n-pentilo	n-pentilo
e	n-pentilo	n-pentilo	n-pentilo
9	H	n-decilo	H
10	H	benzilo	H
il	benzilo	benzilo	H
12	benzilo	benzilo	benzilo
13	H	4-pen ti1ben z i1o	4-pentilbenzi lo
14	4-pen tilben z i1o	4—pen tilbensilo	4-pen ti1ben silo
15	H	4-octilbensilo	H
ló	H	4-oc t i1ben z i1o	H
17	H	4-dietilaminobenzilo	H

Quadro I (Continuação)

R.

Composto

NS R_t R._.

J -------------í

18	H	p-bromobenz i1o	H
19	p— b-romoben z i 1 o	p—hromohenz i 1 o	H
20	H	p-c1orbenz i 1 o	H
21	p-c 1oroben z i 1 o	H	H
·->·* ai.	H	H	p-c1oroben z i1o
rjT Λ-ν»*	p-c1oroben z i lo	ρ-c1oroben z i1o	H
24	H	feniletilo	H
25	feniletilo	H	H
26	H	difeniletilo	H
27	H	n-heptanoxlo	H
OO .liO	H	fenilpropionilo	H
	fenilpropionilo	H	H
30	H	n-butírílo	H
31	H	H	n-butirilo
*ΤΓ5	n-butirilo	H	H
^ρ·~Τ	n-butirilo	n-butirilo	H

Quadro II. Exemplos dos Compostos de Fórmula I

X e Y = CI

R = Brupo (4-ep.i-vancosafflin i 15-U-glucos.il o

Composto

NS

R.

H

H n—pentilo n-pentilo

H n-pentilo n-pentilo

H n-pentilo n-pentila n-pentilo

4© 41

H

H n-octilo n-octilo n-octilo

H

H n-octilo

H n-octilo n-octilo

H n-decilo

H feniletilo feniletilo

H

H difeniletilo difeniletilo

H fenilpropilo

H

5© fenilpropilo

H fenilpropilo fenilpropilo H

Quadro 11 < Continuação?

Composto

N°	R ⁿi	^R2	*3
51	H	benzilo	H
vJ X.	H	H	benzilo
CT-y i-í·-»	benzilo	benzilo	H
54	H	4-octilbenzilo	H
55	H	4-oc ti1ox iben z i1o	H
56	H 4-	-dieti1aminobenzilo	H
57 p-	-d ieti '1 aminoben zilo	p-d i e t i 1 affi i η o ben z i 1 o	H
58	H	p—bromoben zi1o	H
59	ρ-bromobenzilo	ρ-bromobenzilo	H
60	H	p—clorobenzilo	H
hl	p-c 1 oroben z i. 1 o	p-c1oroben zilo	H
62	H	o-c1oroben z i1o	H
64	H	m-c1orobenzi1o	H
65	m-c1oroben z i1o	m-c1oroben z ilo	H
óó	p-f1uoroben z i1o	H	H
hl	H	p-f1«oroben z i1o	H
68	p-f1uorobenz i1o	p-f1uorobenz i1o	H
09	n—heptanoílo	H	H

Quadro III. Exemplos dos Compostos de Fórmula I (Y = Cl>

Composto

NS	^R1	^R3	R	X
70	benzilo	H	glucosilo	H
71	n-pentilo	H	glucosilo	H
	n—pentilo	n-pentilo	glucosilo	H
73	ben silo	H	H	H
74	n—pentilo	H	H	H
75	n-pentilo	n-pentilo	H	«
7Ó	benzilo	H	glucosi1o	Cl
77	n—pentilo	H	glucosilo	Cl
78	n-pentilo	n-pentilo	glucosilo	Cl
79	benzilo	t s s-i	H	Cl

Os vitro e in v As concentra de fórmula I compostos de fórmula X apresentam actividade in ivo contra as bactérias patogénicas Gram-positivas. çSes inibidoras minimas CCIM) às quais os compostos inibem determinadas bactérias são dadas no Quadro

IV. As CIM foram determinadas por utilização de ensaios de diluição em aga?—agar Standard.

fluadro IV

Actividade In Vitro dos Coapostos de Fáraula I flrqanisao

CIM tacg/al) Coaposto Hôaero^a i & 7 1« li 12

Staphylococcus aureus NRRL Xl.i Staphylococcus aureus V4Í Staphylococcus aureus X488 Staphylococcus aureus S13E Staphylococcus epideraidis ΕΡΙ27Φ Staphylococcus epideraidis 222 Streptococcus pyogenes C203 Streptococcus * pneuaoniae Fark i Enterococcus faeciua Xàõ Enterococcus faeciua 2841^CHaesophilus influenza C.L. Haesophilus influenza 7á Escherichia coli Rie Escherichia coli EC14 Escherichia coli TEH Itlehsisíla pneuaoniae X26 klebsiella pneuaoniae UB fclebsiella pneuaoniae KAE

i	.25	i
i	.25	í
1	.25	1
,5	.25	1
1	.5	2
I	.5	1
.25	.125	.5
.5	.125	.5
1	I	2
1	I	0 i.
>128	>128	>12B
>128	>128	>128
>128	>128	>123
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>12B	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128

.25	.25	8
.25	.5	8
.5	.5	8
.125	.25	4
.25	1	8
.25	.5	8
.25	.25	2
.125	.25	j
.25	.25	4
.5	1	8
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128

| Núaeros dos Coapostos dos Quadros 1, II e III

Inicialaente, Streptococcus faeciua Ué

Inicialaente, Streptococcus faecalis 2041

Quadro IV (Continuação) ftctividade In Vitro dos Coapostos de Fóraula I

Orqanisao

CIH íacg/al) Coaposto Háaero*

	13	17	18	21	23	24
Staphyiococcus aureus 8RRL XI.1	4	>5	1	.5	2	.5
Staphyiococcus aureus ¥41	4	<S	i	.5	2	.5
Staphyiococcus aureus X4W	4	>5	1	.3	2	1
Staphyiococcus aureus SÍ3E	4	.5	1	.25	n X	1
Staphyiococcus epideraidis EFI27S	4	1	1	.5	0 £.	(5
Staphyiococcus epideraidis 222	4	.5	.5	.25	í	<5
Streptococcus pyogenes 0283	2	.5	.125	<5	2	.25
Streptococcus pneuaoniae Park 1	1	.25	.25	.5	1	,25
Enterococcug faeciua Ihb	2	i	1	.5	4	.5
Enterococcus faeciua 284i^c	4	í	1	.5	4	,5
Haeaophilus influenza C.L.	>123	>128	>128	>128	>128	>128
Haeaophilus influenza 76	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli HIS	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli EC14	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli TEH	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneuaoniae X26	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneuaoniae X6S	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneuaoniae KfiE m-:— -. .	>128	>128	>128	>128	>128	>128

® Hâãêrõs dos Eoipostos dos Quadros I, II e III

Inicialaente, Streptococcus faeciua Ihh

Inicialaente, Streptococcus faecalis 2041

Quadro IV (Continuação) fictividade In Vitro dos Coanostos de Fôraula I

Organisio

CIH iacg/il) Eoiposto Húaero*

	27	34	35	38	42	43
Staphylococcus aureus HRRL Xi.i	1	.5	.5	.5	.5	.25
Staphylococcus aureus V41	1	.5	.25	1	.5	.5
Staphylococcus aureus X486	1	1	.5	1	.5	1
Staphylococcus aureus S13E	2	.5	.25	.5	1	1
Staphylococcus epideraidis ΕΡΙ27Θ	2	2	1	1	1	1
Staphylococcus epideraidis 222	2	.5	.5	.5	.5	.25
Streptococcus pyogenes C283	.5	>5	.25	,8è	.25	.5
Streptococcus pneuaoniae Park 1	.25	.5	.25	.25	.25	.125
Enterococcug faeciua X6&	2	.5	.5	.25	,9è	1
Enterococcus faeciua 204ί^ε	2	1	.5	.25	*5	.5
Haeaophilus influensa C.L	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Haeaophilus influenza 7à	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli NH?	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli ECÍ4	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli TEK	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneuaoniae X24	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneuaoniae ΧέΒ	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneuaoniae KftE a ... . . .	>128	>128	>128	>128	>128	>128

& Núaeros dos Coapostos dos Quadros ϊ, II e 111

Inicialaente, Streptococcus faeciua Ihb

Inicialaente, Streptococcus faecalis 2041

Suatiro IV (Continuação)

Actividade In Vitro dos Cowostos de Fóriula I

Qrganisio

CIH íicg/il) Coanosto Hóaero^a

	45	51	54	55	56	58
Staphylococcus aureus SSRL Xí.i	.25	.25	32	8		.5
Staphylococcus aureus V4Í	.5	.5	64	4	.5	>5
Staphylococcus aureus X488	.5	r· sU	64	16	1	í
Staphylococcus aureus S13E	.5	.25	64	8	i	I
Staphylococcus epidenidis EPI278	í	1	64	16	2	2
Staphylococcus epidenidis 222	*5	«5	64	8	.5	.5
Streptococcus pyogenes C203	.125	.25	8	4	.5	.125
Streptococcus pneuioniae Parfc 1	.25	.125	4	2	.5	.125
Enterococcug faeciue X66^u	.5	.25	.64	8	í	.25
Enterococcus faeciue 2Ô4i	.5	*5	.64	8	.5	.25
Haeiophilus influenza C.L.	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Haeiophilus influenza 76	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli 81Ô	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli EC14	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli TEH	>128	>128	>128	>128	>128	>128
tlebsiella pneuioniae 126	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klehsiella pneuioniae 168	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klehsiella pneuioniae KflE	>123	>128	>128	>128	>128	>128

& Núaeros dos Cospostos dos Suadros I, II s III

Inicialaente, Streptococcus faecius Ihb

Inicialsente, Streptococcus faecalis 2041

Quadro IV (Continuação)

Actividade In Vitro dos Capostos de Fôraula I

Orqanisao

CIH íacg/il) Coaposto Háaero°

	60	62	64	66	67	69
Staphylococcus aureus HSRL XI. i	.125	.5	.25	.5	.5	1
Staphylococcus aureus ¥41	.25	.5	.25	1	1	2
Staphylococcus aureus X469	.5	1	.5	1	1	4
Staphylococcus aureus S13E	NT	1	.5	1	1	2
Staphylococcus epidereidis EPI270	.5	1	.25	2	2	8
Staphylococcus epidereidis 222	.25	.5	.5	í	.5	2
Streptococcus pyoeenes C2S3	.06	.125	.06	.5	.25	í
Streptococcus pneuaoniae Park 1	M	.125	.25	.25	.125	.5
Ènterococcug faeciua Ibb	.25	.25	.25	í	.5	2
Enterococcus faeciua 204i^c	.25	.5	.25	i	.5	í
Haeaophilus influenza C.L.	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Haeaophilus influema lb	>128	>126	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli N10	>128	>128	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli ECÍ4	>128	>128	>128	>Í2B	>128	>128
Escherichia coli TEH	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klehsiella pneuaoniae X26	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneuaoniae W	>128	>128	>128	>128	>128	>128
klehsiella pneuaoniae KftE	>128	>128	>128	>128	>128	>128

2-—.——-———-------------& Núaeros dos Coapostos dos Quadros I, II e III ^B Inicialaente, Streptococcus faeciua Ibb Inicialaente, Streptococcus faecaiis 2041

Quadro IV (Continuação)

Actividade In Vitro dos Compostos de Fórmula I

Organismo

Clii ímcg/ml) Composto Número”

	70	71	73	74
Staphylococcus aureus NRRL Xí.i	jL.	2	1	4
Staphy1ococcus aureus V41	X.	2	1	4
Staphylococcus aureus X400	2	4	i	4
31aphy1ococcus aureus S13E		2	i	4
Staphylococcus epidermidis ΕΡΣ27®	o A»	4	1	4
Staphylococcus epidermidis 222	X-	4	o Am	4
Streptococcus pyogenes C2®3	2	X-	i	4
Streptococcus pneumonias Park i	2	2	1	4
Enterococcug faecium Xóó^D		8	1	8
Enterococcus •faecium 2®4Í^C	2	8	o	8
Haemophilus influenza C»L.	>128	>128	>128	>128
Haemophilus influenza 76	>123	>128	>128	>128
Escherichia coli IM10	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli ECÍ4	>128	>128	>128	>128
Escherichia coli TEM	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneumoniae X2ó	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneumoniae Xó8	>128	>128	>128	>128
klebsiella pneumoniae KAE	>128	>123	>128	>128

_b Números dos Compostos dos Quadros I, II e III _c Inicialmente, Streptococcus faecium Xóó

Inicialmente, Streptococcus faecalis 2©41

Quadro IV CContinuação)

Actividade In Vitro dos Compostos de Fórmula I

Organismo

CIM ímcg/ml) Composto Número**

Staphylococcus aureus NRRL XI«1 Staphylococcus aureus V41 Staphylococcus aureus X400 Staphylococcus aureus SÍ3E Staphylococcus epidermidis EPI270 Staphylococcus epidermidis 222 Streptococcus pyogenes C203 Streptococcus pneumoniae Park 1 Enterococcug faecium X66^cEnteracoccus faecium 204l^cHaemophilus influenza C.L» Haemophilus influenza 76 Escherichia coli NÍ0 Escherichia coli EC14 Escherichia coli TEM klebsiella pneumoniae X2ó klebsiella pneumoniae X68 klebsiella pneumoniae KAE

76	77	79
*7cr	ssr	*7 ssr
B OÍ.X-J	sj	« £.lj
	cr	*^cr
B Xáw	« w	B
*7 cr α	i	»5
	cr	*7cr.
o	B
«5	7	1
»5	i	.5
.5	„ 25	.25
1	»5	.25
í	2	1
1	2	1
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128
>128	>128	>128

>128 >128 >128 “ Números dos Compostos dos Quadros I, II e ΪΪΙ Inicialmente, Streptococcus faecium X66 Inicialmente, Streptococcus faecalis 2041

-40Ds conspostos de -fórmula X também apresentaram actividade antimicrohiana in vivo contra as infecções induzidas experimentalmente em animais de laboratório» Administraram-se duas doses do composto de ensaio a ratazanas infectadas experimentalmente com o organismo de ensaio e a actividade observada foi medida como um valor ϋΕ^θ Cdose eficaz em mg/kg para proteger 50% dos animais de ensaio; ver Ui, Wick et al«, J.

Bacteriol,, 81, 233-233 (Í9ÓÍ53, Os valores ds DE_.-. observados

--- 5© para os compostos ilustrados são apresentados no Quadra V,

Quadro V

Actividade In Vivo dos Compostos de Fórmula I _DEg^ _íffig/kg/25â &

Número do Composto

Organismo	í	*2	5	Ò	7	8
Staphylococcus aureus	•çr TC	>5,0	0,92	0,86	4,09	>4,0
Streptococccus pyogenes	0 II	0,79	0,17	0,67	0,83	2,69
Streptococccus pneumonias	0,43	í ,25	0,1	0,94	0,98	>4,0
Organismo	9	10	li	13	17	18
Staphylococcus aureus		0,46	0,53		0,78	ί ,74
Streptococccus pyogenes	0,6S	0,2	0,34	0,37		0,15
Streptococccus pneumonias		0,4	0,37	1,26	0,38	0,25
Organismo	20	21		24	25	26
Staphylococcus aureus	>2,0			0,72	>1,0	* - 9
Streptococccus pyogenes	0, 15	0,29	0,3	0,09	0,50	0,48
Streptococccus pneumonias	0,23	0,47	1,02	0,25	0,76	0,47
Organismo	27	42	36	37	38	39
Staphylococcus aureus	>1 ,0	0,77	1,0	>5,0	0 4·->	í >{ 22
Streptococccus pyogenes	0,5	0,44	0,38	1,09	0,11	0,18
Streptococccus pneumonias	0,71	0,44	0,29	0,88	0,062	0,34
doses administradas subeutaneamsnle «	a ratos	, 1 e	4 horas	após

. infseção.

□ Número do Composto é obtido a partir dos Quadros I, II e III.

Quadro V (Continuação)

Actividade In Vivo dos Compostos de Fórmula I _βΕ^ _ímg/kg/2)^ _b

Número do Composto

Organismo		41	42	43	44	45	46
Staphylococcus	aureus	X X .tf, .In.	0,67	0,125	0,3	0,77	0,75
Streptococccus	pyogenes	0,18	0,09	0,38	0,125	0,1	0,14
Streptococccus	pneumoniae	0,32	0,09	0,11	0,2	0,1	0,22
Organismo		50	51	52	53	54	55
S t aphy1ococcus	aureus	>5,0	0,34		1,25
Streptococccus	pyogenes	0,6	0,16	0,5	0,2	0,91	0,73
S t r e p toc oc ceus	pneumoniae	1,02	0,35	0,75	0,18
Organismo		56	57	58	59	60	61
Staphylococcus	aureus	0,65		0,38	3,16	0,25	1,83
Streptococccus	pyogenes	0,06	<0,62	0,05	0,25	0,06	0,10
Streptococccus	pneumonias	0,09		0,08	<0,31	0,08	0,08
Organismo		62	63	64	65	66	67
Staphylococcus	aureus	0,77	1,49	0,55	í ,59	0,37	0,33
Streptococccus	pyogenes	0,20	0,50	0,94	0,15	0,18	<0,12
Streptococccus	pneumoniae	0,17	0,18	0,10	0,11	XZ tf .r.. ,r—	<0,12

-43—

Quadro V (Continuação?

Actividade In Vivo dos Compostos de Fórmula I

DE₅₀ <mg/fcg/2)^a

Número do Composto

Organismo		Ó8	69 70	73	7ó	79
Staphylococcus	aureus	0,80	4,i€*	>8,0	0,87	>1 ,0
Streptococccus	pyogenes	0,@9	<0,62 2,38	7,30	0,62	0,71
S t re ptoc occ cus	pneumonia©	@,12	3,7Ó	>8,0	0,42	0,71

doses administradas subcutaneamente a ratos, 1 e 4 horas após _b infecção.

^D Números dos Compostos obtidos a partir dos Quadros I, II e III»

Um aspecto importante da actividade antimicrobiana dos compostos de fórmula 1 consiste na sua actividade contra os enterococos que são resistentes à vancomicina» Esta actividade é ilustrada no Quadro VI, onde está resumida a comparação da actividade dos compostos ilustrativos contra os enterococos resistentes â vancomicina e os enterococos sensíveis à vancomicina, de acordo com determinações através de um ensaio de diluição em agar» Os pontos de extremidade foram lidos ao fim de 24 horas de incubação» A relação foi calculada por divisão da C1M do composto relativamente às estirpes resistentes à vancomicina pela CIM média do composto relativamente ás estirpes sensíveis à vancomicina» Uma taxa ou relação elevada indica que o composto é muito menos activo contra as estirpes resistentes à vancomicina, quando comparado com as estirpes sensíveis à vancomicina» Os compostos de fórmula χ são normalmente activos contra as estirpes resistentes à vancomicina, conforme é evidenciado pela concentração inibidora mínima média, dentro da gama de cerca de 2 a cerca de 1© mcg/ml»

-45Quadro VI

Sensibilidade das estirpes E. faecium e E. faecalis resistentes à vancomicina CVanco^r) e susceptíveís

à vancomicina CVanco⁵) MIC Média Geométrica Cmcg/ml)
Composto NS	Γ” Estirpes Vanco Cn = 25)	Estirpes Vanco⁵ Cn = 34)	Relação
1	9,7	o o w £ a—	4,9
38	O f	0,73	2,9
42		0,92	2,7
43	4,0	©,77	ss o w y -j2
45	9,4	1,7	s s
56	5,1	0,73	7,0
58	3,1	0,67	4,£>
Ó0	3,6	0,ó5	5,5
A8284ÓB	9,4	0,51	18,4

Uma outra propriedade importante dos compostos de fórmula I. é a baixa ligação dos compostos ãs proteínas de soro, quando comparada com outros antibióticos glicopeptídicos. fts concentrações inibidoras mínimas (MIC) foram medidas para os compostos seleccionados contra seis estirpes de staphilococos e enterococos sensíveis á vancomicina» As MIC foram medidas ambas na ausência C-) e presença ( + ) de soro humano e de caldo suplementado com soro humano a 4@%» As MIC foram determinadas num ensaio de diluição em série, por utilização de volumes de ©,2 ml de meio com «l€í bactérias por mililitro. Os resultados são apresentados no Quadro VII, ft relação entre a MIC medida na presença de soro adicionado e a MIC medida na ausência de soro adicionada (relação) é uma indicação do grau de ligação do soro. Uma relação de cerca de i indica que a presença de soro não tem efeito na actividade antimicrobiana in vitro e que o composto não está fortemente ligado ao soro. Uma relação maior do que 1, por exemplo aproximadamente 1Θ, indica que o composta apresenta um grau elevado de ligação ao soro.

Quadro VII

Efeito do Soro Humano na MIC

Composto N2	_a	₊ ^b	relação
38	0,75	0,43	0,58
42	0,87	0 , óó	0,7Ó
58	0,43	1,0	2,3
Ó0	0,7ó	1,5	2,0
ΑΘ2846Β	0,5	0,75	1,5
Teicoplanina	0,25	3,8	12,ó

s

MIC determinada na ausência de soro adicionado.

MIC determinada na presença de soro humano»

Os compostos de fórmula X apresentaram um nível inesperadamente baixo de ligação de soro» Uma relação de cerca de dois, ver Quadro VII, indica que o composto é aproximadamente 50% de ligação de soro» Este nível de ligação é similar ao nível exibido pela vancomicina, Anteriormente, os derivados N-alquilo da vancomicina mostraram exibir um grau maior de ligação de soro, relação que se situa, entre cinco e dez, do que o apresentado pela vancomicina» ft alquilação de um ou mais grupos amino da vancomicina foi considerada como a causa do aumento da ligação da proteína de soro» Contudo, os compostos de fórmula X denotam inesperadamente aproximadamente o mesmo nível ds ligação de soro que o composto afim, i.e., A82S46B»

As formulações farmacêuticas dos compostos de fórmula X fazem também parte deste invento» Deste modo, o composto, de

48preferência na forma de um seu sal farmaceuticamente aceitável, pode ser formulado para administração oral ou parentérica para o tratamento terapêutico ou profilático das infecções bacterianas.

Por exemplo, o composto pode ser misturado com veículos e excipientes farmacêuticos convencionais e pode ser utilizada na forma de comprimidos, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes, tampões, etc» As composições que compreendem um composto de fórmula I, contêm cerca de 0,1 a cerca de 90% em peso do composto activo, e geralmente, mais cerca de 1© a cerca de 30%. As composições podem conter veículos e excipientes comuns, tais como amido de milho ou gelatina, lactose, sacarose, celulose microcristalina, caulino, manitol, fosfato de dicálcio, cloreto de sódio e ácido algínico»

Os desintegredores normalmente utilizadas nas formulações deste invento incluem croscarmelose, celulose microscritalina, amido de milho, glicolato de amido de sódio e ácido algínico»

Os ligantes de comprimidos que podem ser incluídos são a acácia, a metilcelulose, a carboximetilcelulose de sódio, a polivinilpirrolidona CPovina), a hidroxipropil metilcelulose, a sacarose, o amido e a etilcelulose»

Os luisrificantes que podem ser utilizados incluem o estearato de magnésio ou outros estearatos metálicos, o ácido esteárico, fluido de silicone, talco, ceras, óleos e sílica coloidal,

Os agentes aromatizantes, tais como a hortelã pimenta, o óleo de gaultéria, aroma de cereja, etc», podem também ser utilizados»

Poda ser desejável adicionar—se um agente corante para tornar o aspecto da forma de dosagem mais atractivo ou para ajudar a identificar o produto»

Com vista á utilização intravenosa (IV), uma forma solúvel em água do antibiótica pode ser dissolvida num dos fluídos intravenosos normalmente utilizados, após o que é administrada por infusão» Podem-se utilizar como fluídos salina fisiológica, uma solução de Ringer ou uma solução de dextrose a

Para a preparação de preparações intramusculares, pode-se dissolver e administrar uma formulação esterilizada de uma forma solúvel salina adequada do composto, por exemplo o sal cloridrato, num diluente farmacêutico tal como água livre de pirogénio (destilada), soro fisiológico ou uma solução de glicose a 5)(. Pode-se preparar e administrar uma forma insolúvel adequada do composto como uma suspensão numa base aquosa ou numa base oleosa farmaceuticamente aceitável, por exemplo, um éster de um ácido gordo de cadeia longa, tal como oleato de etilo.

Para utilização oral, uma formulação esterilizada de uma forma salina adequada do antibiótico, por exemplo, o sal cloridrato, formulada num diluente tal como água destilada ou água desionizada, é espeeialmente útil.

Alternativamente, a forma de dosagem unitária do antibiótico pode ser uma solução do antibiótico, de preferência na sua forma salina, num diluente adequado em ampolas fechadas hermeticamente e esterilizadas» A concentração do antibiótico na unidade de dosagem pode variar, por exemplo entre cerca de 1 por cento e cerca de 50 por cento, dependendo da forma particular do antibiótico e da sua solubilidade» bem como da dose recomendada pela médica

De acordo com um outro aspecto, este invento proporciona um método para o tratamento de doenças infecciosas, especialmente aquelas causadas por microorganismos Gram-positivos, em animais» Os compostos deste invento são particularmente úteis para o tratamento de infecções provocadas pelas estirpes estafilococos resistente à meticilina» Igualmente, os composto são úteis para o tratamento de infecções provocadas pelas estirpes enterococos» Exemplos destas doenças são infecções graves por estafilococos, i.e., estafilococos endocartis e estafilococos septicemia. G animal poda ou ser sensível a, ou ser infectado com o microorganismo. 0 método compreende a administração ao animal de uma quantidade do composto de fórmula I_ eficaz para esse fim» Em geral, uma quantidade eficaz de um composto de fórmula X è uma dose que varia entre cerca de 0,5 e cerca de 10© mg/kg. Uma dose preferida varia entre cerca de í e cerca de 60 mg/kg de composto activo. Uma dose diária típica para um ser humano adulto varia entre csrca de 50 mg e cerca de 1,0 g»

Na colocação em prática deste método, o antibiótico pode ser administrado segundo uma dose diária individual, ou em doses múltiplas diárias, O regímen de tratamento pode requerer a administração durante períodos prolongados de tempo, por exemplo, durante vários dias, ou durante uma a seis semanas. A quantidade por dose administrada ou a quantidade total administrada depende de factores tais como a natureza e gravidade da infecção, a idade e o estado geral de saúde do doente, a tolerânica do doente ao antibiótico e o microorganismo ou microorganismos envolvidos na infecção»

Um processo adequado para a colocação em prática do método de tratamento consiste em administrar o antibiótico através de infusão intravenosa» De acordo com este procedimento, uma formulação esterilizada de um sal solúvel adequada do antibiótico é incorporada num fluído fisiológico, tal como uma solução de dextrose a 5%, e a solução resultante é submetida lentamente a infusão IV» Alternativsmente, pode-se também utilizar o método de de infusão IV piggy-back,

A fim de se ilustrar com maior pormenor □ funcionamento deste invento, apresentam-se em baixo os seguintes exemplos. Normalmente, os compostos de fórmula III ou IV são preparados da maneira descrita nas Preparações i e 2» Os derivados de N-alquilo são preparados da maneira descrita nos Exemplos 1 e 2. Da mesma forma, os derivados de N-acilo são preparados da maneira descrita nos Exemplos 3 e 4»

I»

FREPARAçSO ί

Preparação dos Compostos IIIa e IVa

A82SÓA (500 mg, 0,32 (nmoles) foi dissolvido em ácido trifluoroacético íl©© ml) contendo anisole (1® ml). A mistura de reacção foi agitada durante 24 horas à temperatura ambienta sob azoto. Os solventes voláteis foram removidos sob vácuo para se obter um resíduo cinzento-bronzeado» 0 resíduo foi triturado com éter dieíílico/clorofórmio (lsi, 5© ml x 2). 0 material sólido assim obtido (sal do ácido trifluoroacético) foi dissolvido em égua í~ 5© ml) e o pH desta solução foi ajustado para 6,2 com piridina» A solução foi filtrada e o filtrado foi liofilizado para produzir 426 mg de um pó quase branco» A análise por cromatografia líquida de alto rendimento (ciar) mostrou dois picos principais (nas quantidades de κ 237« e 437»),

Qs dois produtos principais foram separados por ciar de fase invertida e escala preparativa, empregando-se uma coluna Waters Prep—pak ÍMilford, Ma), eluindo-se com um gradiente de Q L de acetato de piridínio aquoso a ÍX para acetonitrilo/acetato de piridínio aquoso a l’í (ls3), ε depois com 2 litros do dltimo» Recolheram-se fracções de 25© ml, cada, a um caudal de 25© ml/minuto e estas foram analisadas por cromatografia de camada fina (ccf) e ciar»

As fracçSes que continham o composto llla (#1©-Íó) foram combinadas e liofilizadas para se obterem 82 mg do referido composto llla sob a forma de um sólido de cor creme» 0 Espectro de Massa FAB (ΕΜ-FAB) (Μ + 1)ϊ 1414 (massa exacta calculada para C^HyyMO.-j^Cl = 1414,477©; encontrados 1414,4©)«

As fracçSes que continham o composto IVa (#27-29) foram

também combinadas e liofilizadas para se obterem 128 mg do composto IVa sob a forma de um pó de cor creme. ΕΜ-FAB iii + 1)? 1252, 1109 (calculado para ^εέί@^Η67^Νφ°_1?εΐ = 1252,4242? encontrados í 252,424©).

PRFFARflçaO 2

Preparação dos Compostos Illb e IVb

A8286A (1 g) foi dissolvido eis ácido trif luoroacético (200 ml) contendo anisole (10 ml). A mistura de reacção foi agitada durante 24 horas à temperatura ambiente sob azoto.

A mistura de reacção foi tratada da maneira descrita na Preparação 1 para proporcionar i,12 g da mistura de produto. ΕΜ-FAB ÍM + 1)s 1448, 1286, 1252, 1142» A análise por meio de cromatografia liquida de alto rendimento demonstrou que este material continha dois picos principais (em quantidades de κ 42% e 43%, respectivamente).

A ciar de fase invertida preparativa, empregando-se as condições descritas na Preparação í, produziu 283 mg do composto Illb- ΕΜ-FAB (M + Ds 1448 (calculado para C,..H,,rt,Q„,Cl_n « 1448,4380s encontrados 1448,4375)«

A ciar de fase invertida preparativa também produziu 27ft mg do composto IVb. ΕΜ-FAB CP + Ds 1286 (calculado para ^60^66^9^19^½ ⁼ 286,38525 encontrados 1286,3879).

EXEMPLO 1 (MéTQDQ A)

Preparação dos Compostos 1, 2 e 5

A base livre A82846A (293,5 mg, 0,19 mmoles) foi dissolvida numa mistura de dirnetilformamida e metanol (1© ml cada). Esta solução foi tratada com aldeído de n-octilo (44,8 mg, 0,35 mmole) e foi agitada durante í hora e 3/4 a 70°C„ A solução foi tratada com cianoboroidreto de sódio (75 mg, 1,19 mmoles) e foi agitada durante mais duas horas a 70°C« A solução de reacção foi concentrada in vacuo, o resíduo fai diluída com 25 ml de água e esta solução foi liofilisada. Os produtos foram separados por cromatografia líquida de alto rendimento de fase invertida (ciar), utilizando-se uma coluna de Waters C,_o (19 mm x 150 mm), eluindo-se com um gradiente linear (20 min.) de 15% de acetonitrilo/0,05% de fosfato de trietilamina aquoso (pH 3) para 60% de acetonitrilo/0,05% de fosfato de trietilamina aquoso (pH

3). As fracções que continham os produtos, conforme mostrado por ciar analítica, foram dessalifiçadas por utilização da resina HP20SS com metanol/ácido acético a 1% (8s2). Qs eluentes foram evaporados até à secura, foram tratados com água e foram liofilizados para se obterem 36,6 mg do composto X (14,8% de ! rendimento), 39,6 mg do composto 2 ííó,0% de rendimento) e 11,7 mg do composto 3 (3,5% de rendimento)..

EXEMPLO 2 (MÉTODO B)

Preparação do Composto 38

A base livre A82S46B (1,1 g, 0,69 mmole) foi dissolvida em dimetilformamida (50 ml). Esta solução foi tratada com aldeído de n-octilo (195 mg, 1,32 mmoles) e foi agitada durante 30 minutos a 70°C. A solução foi tratada com cianofeoroidreto de sódio (162,6 mg, 2,5 mmoles) e foi agitada durante 90 minutos a 70*0» Depois de se deixar arrefecer até à temperatura ambiente, a solução da reacção foi filtrada. 0 resíduo foi dissolvido em ácido acético a 5% em metanol (50 ml> e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Esta solução foi evaporada até à secura in vacuo, o resíduo foi tratado com 5® ml de égua e n-butanol (algumas gotas) e foi liofilizado. 0 produto foi purificado por ciar de fase invertida, utilizando-se uma coluna tíe Raining (5 cm x 35 cm, Woburn, MA), eluintío-se com um gradiente linear (20 min.) de 20% de acetonitrilo /1% de acetato de piridínio aquoso para 40% de acetonitrilo/1% de acetato de piridínio aquoso a 1%, para se obterem 120 mg do composto 36 (10% de rendimento).

-57EXEMPLQ 3 (MÉTODO C)

Preparação dos Compostos 28 e 29

A base livre ΑΘ2846Α (100,5 mg, 0,06 mmole) foi dissolvida em dimetilformamida (15 ml). Esta solução foi tratada com o éster 2,4,5-triclorofenílico do ácido 3-fenilpropiónico (75 mg, €*,23 mmole) e foi agitada durante 2 horas a 70^C‘C„ A solução foi evaporada até à secura in vacuo; 0 resíduo foi tratado com água e foi liofilizado. 0 resíduo foi triturado com diclorometano para se remover o éster activado que não reagiu. Os produtos foram separados por ciar de fase invertida, utilizando-se uma coluna Waters de 19 mm x 150 mm, eluindo-se com um gradiente linear (30 min.) de 15% de acetonitrilo/1% de acetato de piridínio aquoso para 40% de acetonitrilo/1% de acetato de piridínio aquoso, para se obter 4,£j mg do composto 28 <3,5% de rendimento) e 3,6 mg do composto 59 (3,37. de rendimento).

-58EXEMPLQ 4 (MÉTODO D)

Preparação do Composto 69

A base livre A82846B (195,4 mg, 0,12 mmole) foi dissolvida numa mistura de dimetilformamida e de metanol (1© ml de cada). Esta solução foi tratada com o éster 2,4,5-triclorofenílico do ácido n-heptanóico (53 mg, ©,Í7 mmole) e foi agitada durante 4 horas a 11©°C. A solução foi evaporada até secura in vacuo? 0 resíduo foi tratado com água e foi liofilizado. 0 resíduo foi triturada com diclorometano para se remover o éster activado que não reagiu. O produto foi separado por ciar de fase invertida, utilizando-se uma coluna C»_ Waters lo de 19 mm x 15© mm, eluindo—se com um gradiente linear (2© min.) de 157 de acetonitrilo/©,57 de fosfato de trietilamina aquoso CpH 3) para 357 de acetonitrilo/©,57 de fosfato de trietilamina aquoso (pH 3). As fracções que continham o produto foram combinadas e dessalificadas por utilização de uma resina HP20SS, para se obterem 7,6 mg do composto 69 (3,67 de rendimento),

EXEMPLO 5

Os Quadros VIII ε IX resumem a preparação e determinadas características físicas dos compostos exemplificados. O rendimento do produto foi calculado por utilização da quantidade do composto de fórmula 11, III ou IV, como reagente regulador. 0 método de síntese reporta-se aos métodos descritos nos Exemplo 1-4, Os equivalentes de reagente correspondem aos equivalentes molares quer do aldeído, quer do éster activado para o derivado de N-alquilo ou de M-acilo, relativamente à quantidade do composto de fórmula II, III ou IV. Os tempos de retenção ítp.) da cromatografia líquida de alto rendimento (ciar) foram medidos por utilização de uma coluna Waters pbondapak (4 mm x 3© mm, P/N 27324), eluindo—se com um gradiente linear (15 min.) de 5% de acetonitri10/0,2% de tampão de fosfato de trietilamina aquoso (pH 3) para 80% de acetonitrilo/0,2% de tampão de fosfato de trietilamina aquoso (pH 3), utilizando-se um caudal de i ml/min e detecção por ultravioletas a 280 nm»

Quadra VIII. Método de Síntese e Caracteristicas Físicas

Composto NQ	Rendimento ÍX)	Método	Reagente³CEquiv,ϊ	Tempo	*R ímin.I
Rxn, (min,í	EM-FAB CM+H)
1	14,8	A	1,8	105	1669	J J «yjE? £ jL «S ‘-Jxd
X.	16, ©	A	1,8	105	1669	11,60
	T er	A	1,8	105	1781	13,75
8	8,2	A	10,€*	60^c	1893	14,79
5	5,2	A	2,0	Í20^C	1627	8,43
6	6,6	A	2,0	Í20^c	1627	9,21
7	3,8	A	2,0	Í20^C	Í697	10,44
8	í-5	B	3,5	55	1767	15,10
9	8,0	B	3,8	90	1697	12,17
10	11,4	B	3,5	3€í	1647	8,71
11	42,5	B	5,0	80	1737	S,61^d
í i, x»	11,9	B	5,0	80	1827	11,30^d
13	29,0	B	Q ·»- ? ‘	20	1717	11,45^d
14	9,2	B	r? e? X» 5 Í	2©	1877	13,19^d
15	20,9	A	1,2	150	1759	12,90
16	<5,0	B	1,4	135		12,86
17	23,0	A	4^3	210	1718	12,83

-ól

Quadro VIII (Continuação)

Tempo*³

Composto IMS	Rendimento Í7.)	Método	Reagente³CEquiv.)	Rxn. ímin.)	EM—FAB ÍM+H>	^tR ímin.)
18	27,3	A	í ,5	90	1726	O cr*·? 7 9 Ο·->
19	3,€í	A	1,5	90	1895	11,37
2£	9,4	B	2,6	45	1681	10,84®
21	6,2	B	2,0	90	1681	9,10®
OO diitw	O o ju. q 7	B	2,6	45	1681	13,74®
23	12,5	B	2,0	90	1805	10,09
24	8,4	A	í ,5	90	1661	8,68
25	2,4	A	1,5	90	1661	9,05
26	16,3	A	1,6	150	1737	10,68
34	11,4	B	-^r5t	50	1661	8,97
35	4,4	B	3,2	50	1661	9,76
3ó	18,5	B	3,2	50	1731	10,59
37	6,8	B	4 _?3	30	1801	11,71
38	10,2	B	o o x. 5 x.	30	1703	1 í ,36
39	5,0	B	1,65	120	1703	15,65®
40	1 ,0	B	2,0	105	1845	12,54
41	4,4	B	o o	60	1815	X Í3 9 ϋ·-.¹
42	7,8	A	2,9	90	1731	11,96

Quadro VIII (Continuação)

Tempo’³

Composto NS	Rendimento Í7.)	Método	Reagente³CEquiv.)	Rxn. Cmin.)	EM-FAB CM+H)	*R ímin.)
43	9,6	A	1,68	90	1685	9,Ô4
44	4,0	A	1,68	90	1695	9,24
45	15,2	A	4. 5 U	150	1771	10,72
46	·-> 7	A	1,5	Í50	1771	10,27
47	4,6	A	2,0	90	1951	12,88
48	5,1	S	1,3	90^C	1709	9,65
49	3,1	B	1,3	90^c	1709	10,51
50	11,9	B	2,5	•HtcrC	1827	11,87
51	20,3	B	3,6	50	1681	8,48
52	4,5	B	3,4	40	1681	8,66
53	2,7	B	3,4	40	1771	p
54	o o Q 5	A	1,2	120	1793	12,67
55	16,7	A	1,5	X c*5	Í809	12,61
56	7,8	A	1. 5 *4?	9Θ	1752	8,75
57	17,4	A	·& Ow *(	60	1913	10,14
58	31,7	A	X t[ A	90	1760	9,71
59	4,1	A	1,6	90	1928	11,47

63—

Quadro VIII (Continuação)

Tempo^b

Composto N°	Rendimento Í7.)	Método	Reagente³(Equi v.)	Rxn. (min.)	EM-FAB CM+H)	t_R (min.)
6®	20,3	ft	i ,£» y X	í©5	1715	9,58
61	20,2	ft	2,1	1®5	1839	11,09
62	35,9	A	2,34	70	1715	8,27
63	7,7	A	2,34	70	1839	10,56
64	11,®	A	2,36	1®5	1715	9,64
65	7,1	A	2,36	105	1839	11,34
66	4,7	ft	2,4	1Θ5	1699	11,02®
67	7,4	A	2,4	105	1699	10,79®
68	2,1	A	2,4	105	1807	X Ο ς OaL
70	13,0	B	4,®	60	1504	10,90®
71	5,6	B	'7 Q j- 5 ff	120	1484	9,43®
72	1 1 5 /	B	i-j 7	120	1554	11,23
73	19,6	B	2,9	20	1341	X v.¹ y
74	5,®	B	«y H· ·-> 3 O	45	1321	10,97
75	17,2	B	•ζ»· ύ y ·—³	45	1391	12,77
79	87 h Λ» ff g G	B	3,6	120	1376	14,11
76	59,4	B	4,8	90	1538	-í -~J X >£» y Ww
77	10,8	B	3,6		1518	9,53
78	28,9	B	y 6	3©	1588	11,32

Equivalentes molares de aldeído relativamente ao glicopeptido»

Tempo de reacção; reacções efectuadas a uma temperatura entre 50°C e 70*C, excepto quando indicada em contrário,

ReacçSes realizadas à temperatura ambiente»

Eluição com um gradiente linear <15 min, 3 de 107» de acetonitrilo/0,2% de fosfato de trietilamina aquoso ípH 35 para 80% de acetonitrilo/0,2% de fosfato ds trietilamina aquoso CpH 35 .

Eluição com um gradiente linear <25 min.5 de 5% de acetonitrilo/0,2% de fosfato de trietilamina aquoso CpH 33 para 80% de acetonitrilo/0,2% de fosfato de trietilamina aquoso ípH 33 .

Eluição com um gradiente linear <15 min»3 de 5% de acetonitri10/0,2% ds fosfato de trietilamina aquoso CpH 33 para 50% de acetonitrilo/0,2% de fosfato de trietilamina aquoso ípH

Quadro IX. Método de Síntese e Características Físicas

Composto Rendimento

NS (7.) Método

Reagente^a(Equiv.)

Tempo^b ΕΜ-FAB t_Rímin.) CM+H) ímin.) a

b

27	*7 cr '•if 3f W		D	7,5	6®^c	1669	11,41
2B	*7 w 3 t		C	3,5	Í2&	1689	1©_S88
29	τ O , ·->		c	•3,5	120	1689	11,47
30	11,®		C	3,7	180	1627	9,17
31	2,7		c	*1 -» X. JS	27Θ	1627	9,83
	5,3		c	3_?7	18©	1627	10,02
•ζ/ζ	3,4		c	3,7	13©	1627	11,02
69	—‘, 6		A	6,©	3@©-36©^d	1703	11,19
	Equivalentes glicopeptido.	molares	do éster £	ictivado relativamente ai
	Tempo de reacção;	as r	eacções foram realizadas	a uma	tSíBpS?
	ratura entre	6®''C	e 7 Θ	°C, excepto	quando indicado em	cantrã-

rio»

EXEMPLO 6

Formulação para Cápsulas

Prepararam-se cápsulas com 250 mg do Composta 38, por emprego dos seguintes ingredientes?

Ingrediente

Sal de HCl do composto 38 Pó fluível de amido de milho Amido de milho

Peso

255,4 mg 150 mg 144,ó mg composto 38 ina forma do sal de HCl, 255,4 mg), o pó fluível de amido de milho (150 mg) e o amido de milho (144,6 mg) foram misturadas num misturador adequado, até a mistura se tornar homogénea. A mistura é utilizada para encher uma cápsula de gelatina dura com um peso de enchimento líquido de 550 mg.

EXEMPLQ 7

Formulação para Suspensão

Uma forma insolúvel esterilizada do Composto 58 é moída ou crivada para uma dimensão de partícula adequada para suspensão. Este material moído em partículas é suspenso no seguinte veículos

Ingrediente

Lecitina

Citrato de sódio Propi1parabéns Âgua destilada

Peso

1%

27.

0,015%

q.b. para o volume desejado

EXEMPLO 8

Formulação para Comprimidos

Prepararam-se comprimidos de 250 mg do composto 38 a seguinte composição:

com

Inqrediente	Peso
Sal de HCI do composto 38	255,4 mg
Celulose microcristalina	101,1 mg
Croscarmelose sódica	12,0 mg
Providona	12,0 mg
Estearato de magnésio	3,@ mg
Ácido esteárico	4,0 mg
Água purificada	0,16 ml

REIVINDICAÇÕES

Claims

REIVINDICAÇÕES iã Processo para a preparação de um composto de fórmula I

H,s na quals

R ê um hidrogénio ou um grupo de C 4-epi-vancosamini1o) -glucosilo de fórmula

NH

HO-κ I HO

-ch₂oh ou um grupo de glucosilo de fórmula

X é hidrogénio?

Y é hidrogénio ou cloro?

R.. R_o e são independentemente hidrogénio

C|-C|2? alcanoilo ou um grupo de fórmula alquilo

71—(CHj)n

Ra o

II

-C'—{CHílp m

π ê i, 2 ou 3:

é hidrogénio, halo, alquilo C^~C_g? alcóxi C^-Cg, ou um grupo de fórmula

R_t •N

FL

Re- e R, são independen temen te hidrogénio ou alquilo C.-C^-í •v-í α * i o * pé©, 1 ou 2, m è 2 ou 3 e r = 3 - m? desde que, quando R for um grupo <4-egi~vancasaminilo)-0-glucasilo, Rj , R^ e R^ não sejam todos hidrogénio e quando R for glucosilo ou hidrogénio, R^ e R^_t não sejam ambos hidrogénio? caracterizado por compreender a reacção de um composto de fórmula II

II na qual;

Ry é hidrogénio, um grupo <4-egi.~vancosaminilo)-Q~glucosilo de fórmula au um grupo glucosilo de fórmula •73--

X έ hidrogénio ou cloro?

Y é hidrogénio ou cloro? com a) um aldeído de fórmula na. qual R_v é H, alquilo ou um grupo de fórmula

Rx η é ί, 2 ou 3;

R_s» ê hidrogénio» 4 grupo de fórmula halo, alquilo C^-Cg, alcóxi C^-Cg, ou um

R<

Rg e R₆ sao independentemente hidrogénio ou alquilo C,-C₃, m é 2 ou 3 8 r ~ 3 - m; para se formar uma base de Schiff intermediária, que é então reduzida para se obter o derivado N—alquilo;

ou b) alternativamente com um éster activado do derivado de ácido alcanóico do grupo acilo desejada de fórmula

R-5

-Ν

Re na qual R é alquilo Cj-Οθ ou ura grupo de fórmula

II

Z-C-R y

p é 0, 1 ou 2 e

Z é um grupo de actívação.
2ã, - Processo de acordo com a terizado por se preparar um composto de grupo (4-epi-vancosamini1o)-0-g1ucosi1o, são hidrogénio e R, é alquilo C_g-Cj^» reivindicação 1, caracfórmula £ em que R é um X e Y são cloro, R^ e R-.
3â. - Processo de acordo com a reivindicação 2, terizado por se preparar um composto em que R.-, ê n-octilo.

carac·
4â„ - Processo de acordo com a reivindicação 1, terizado por se preparar um composto de fórmula £ em que grupo (4-epi-vancosaminilo)-Q-q1ucosi1o. X e Y são cloro, são hidrogénio e R^ é um grupo de fórmula caracR é um R. e R-,

76—

Sã, - Processo da acordo com a reivindicação 4, carac terizado por se preparar um composto em que n é í e é cloro»

Pede a V.Exâ., se digne conceder-lhe a respectiva patente de invenção

Lisboa, 10 de Dezembro de 197€í