PT93122A

PT93122A - Processo para a preparacao de didesoxinucleosidos isomericos e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT93122A
Application number: PT93122A
Authority: PT
Inventors: Steve Yik-Kai Tam; Donna Mary Huryn; Manfred Weigele
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1989-02-13
Filing date: 1990-02-12
Publication date: 1990-08-31
Also published as: ZA90487B; NO900661D0; US5126347A; HU205367B; NZ232452A; KR900012944A; HUT52781A; HU900757D0; MC2095A1; CZ63990A3; NO900661L; RU1809831C; CA2009658A1; EP0383239A1; MX19466A; YU26690A; IL93336A0; FI900677A0; AU4972090A; JPH02235883A

Description

1

F. HOFFMANN-LA ROCHE AG "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE DIDESOXINU-CLEOSIDOS ISOMÉRICOS E DE COMPOSIÇOES FARMACÊUTICAS OUE OS CONTÊM» A presente invenção refere-se a derivados isoméricos de 2’,3*-didesoxinucleddiso de fórmula geral,

A

(I) na qual Â representa um radical 6-amino-9H-purin-9-ilo ou 2-amino-6-hidroxi-9H-purin-9-ilo, em que o grupo ami no pode ser substituído por um radical de fórmula geral HMCÍOjRg ou N^CHR^R^ e R representa um grupo OH ou um radical de fórmula geral 0C(0)R^, em que R^, R^, R^ e Rj^ representam, cada um, independentemente, um grupo al quilo C1-C2g de cadeia linear ou ramificada, alcoxi-al-quilo C^-0^2 5 fenoxi-alquilo C^-C^ eventualmente substi tuído ou fenilo, eventualmente substituído, sendo os substituintes seleccionados entre o grupo constituído por átomos de halogeneo ou grupos alcoxi C-^-C^, nitro, hidroxi, carboxilo ou alquilamino, e aos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico e também às composições farmacêuticas que contêm esses compostos. A presente invenção refere-se também a um processo pa- ra a síntese dos compostos da invenção e bem assim dos compos, tos intermédios utilizados. * A presente invenção visa também o tratamento de infec ções retrovirais, particularmente de HIV, utilizando compostos da invenção.

Tal como agora utilizado a designação "alquilo inferior" significa alquilo com 1 a 7 átomos de carbono. 0 termo "halogéneo" significa átomos de flúor, cloro, bromo ou iodo. 0 termo "nucleobase" refere-se a qualquer base comum presente ^os ntiSfeoeldúg’ tal coe© adenina, guanina, citosina, timina, 2,6--diaminopurina, uracilo, purina, 2-aminopurina, etc. 0 termo "AIBN" significa um iniciador de radicais comum, tal como ©( , ef\azoisobutironitrilo. A designação "grupo removível" refere-se a um grupo funcional adequado para deslocamentos nucleõ-filos, tais como os sulfonatos de alquilo ou de arilo, grupos 0-H activados tais como O-PPh^, átomos de halogéneo, etc. 0 termo "l8-coroa-6" refere-se a ura reagente de transferência de fase comum tal como o l,^,7?10,13,l6-hexaoxaciclooctadecano.

Uma linha cénica afilada significa que o resíduo se situa acima do plano da molécula. Uma linha quebrada ou a traço internem pido significa que o resíduo se situa abaixo do plano da molécula. Uma linha ondulada significa que o resíduo pode situar-se acima ou abaixo do plano da molécula. A designação "precurssor dissimulado"("masked") refere-se a um composto em que um grupo funcional específico se encontra presente numa forma que é facilmente convertível nesse grupo funcional mediante algumas transformações simples. Por exemplo^ os acetais e os éteres são precursores dissimulados de grupos hidroximetilo; os éteres arílicos θ os áteres silílicos constituem precursores dissimulados de grupos hidroxi.

Os compostos preferidos de fórmula geral I são aqueles em que A representa um grupo 6-amino-9H-purio-9-Ílo Insubsti-tuído ou 2-amino-6-hIdroxi-9H-purin-9-iio insubstituído, parti cularmente os compostos Iso-didesoxiadenosina (Ia) (Isoddii) e isó-didesoxiguanosina (Ib) (IsoddG) e os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico e bem assim as composições farmacêuticas que contêm esses compostos. Os sais farmaeeuti-camente aceitáveis podem ser sais de ácidos orgânicos tais como os ácidos lácticoj acáticc, málico e p-tolueoc-sulfcnicc e se, melhantesj bem como -os sais de ácidos inorgânicos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico tais como o ácido clorídrico aquo so, o ácido sulfárico e semelhantes.

De acordo com a presente invenção} ê possível preparar os compostos de fórmula geral I utilizando um processo que eon siste em: a) fazer-se reagir um composto de fórmula geral,

(Γ/-Ι) na qual X representa um grupo removível e C representa um grupo hidroximetilo ou um seu precursor dissimulado, com adenina ou guanina e, se necessário, converter-se um grupo C precursor dissimulado ou um grupo hidroximetilo; ou b) hidrcllsar-se o substltuinte cloro num composto de fórmula /

com amoníaco ou d) fazer-se reagir um composto de fórmula

HO

O

NH2

O

XIII com um ortoformato ou com um acetato de dietoximetilo e, se necessário converter-se o composto de fórmula geral I obtido em um sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico ou num derivado N- ou O-acilado ou numa base de Schiff.

Seguidamente, descreve-se com mais pormenor a prepara çao dos compostos de fórmula geral I incluindo a preparação dos novos compostos intermédios. É possível preparar os compostos da presente invenção a partir de um derivado de açócar simples tal como 1,2-0-metil-etilideno-B-xilofuranose, o qual, após uma serie de reacções, é convertido num composto intermédio acetoneto de tosilo, de acordo com o esquema seguinte: , η

V * .¾

m

No esquema anterior, faz-se reagir o composto 1,2-0--(1-metiletilideno)- 0( -D-xilofuranose com cloreto de tosilo para se obter l,2-0-(l-TÒietiletilideno)-5-0-£-(tolilsulfonil)-- ç( -D-xilofuranose. Depois, faz-se reagir o composto obtido com 1,2-dicloroetano e tiocarbonil-diimidazol, obtendo-se um novo derivado de ácido imidazol-carbotíóico (composto III) o qual, após reacção com hidreto de tri-n-butil-estanho e AIBN no seio de tolnéno dá 3-desoxi-l,2-0-(l-metiletilideno)- -D-eri tro-pentofuranose-^f-metilbenzeno-sulfonato. Ê possível conver ter depois este acetoneto de tosilo, mediante um de dois métodos possíveis, em um novo composto intermádio de fórmula geral

B

IV na qual B representa um grupo amino, hidroxi ou qualquer forma dos grupos NHg ou OH, qualquer dos seus precursores dissimulados, ou um grupo removível; e C é seleccionado entre o gru po constituído por um grupo hidroximetilo ou qualquer dos seus precursores dissimulados tais como um grupo halogeno-metilo, ácido carboxílico, aldeído, éster, acetal, tioacetal, alcoxime tilo, etc. Este composto intermédio serve depois como base pa ra a síntese de uma grande variedade de didesoxinucleósidos isomérieos incluindo os compostos de fórmulas gerais Ia e Ib.

Este novo composto intermédio pode ser sintetizado de acordo com o esquema seguinte:

IV (b) IV (c) %

Trata-se o acetoneto de tosílo com 1,2-propanoditiol e com eterato de trifluoreto de boro para se obter o diol de cadeia aberta. Após a purificação, agita-se o diol de fórmu la V de cadeia aberta e numa solução de cloreto de metileno e piridina para se obter tetrahidrofurano de fórmula IV(a), o qual se faz reagir imediatamente com cloreto de tosilo para se obter o tioacetal tosilado de fórmula IV(b). Após a purificação do tioacetal tosilado, por cromatografia rápida em coluna, efectua-se a conversão no novo composto intermédio de fórmula IV£e) por hidrólise com cloreto merciírico e reacção subsequen te com boro-hidreto de sóiio. Neste esquema, os compostos de fórmulas IV(a), (b), (c) e V são compostos intermédios novos.

Os compostos de fórmula geral I? também podem ser sintetizados de acordo com o esquema seguinte:

Ssq-

s %

OH

TsCH

J

%

TsCI piridina ( .4

De acordo com este esquema, a reacção do acetoneto de tosilo com uma solução de ácido acetico/metanol dá uma mistura de metilglicosido, dimetilacetal de anel aberto e do produto desejado de formula IV(d). Depois de se agitar esta mistura durante vários dias,consegue-se a conversão completa em dime-til-acetal tetrahidrofurano de fórmula I¥(d). Este composto impuro 4 depois tosilado sob condições normalizadas para se ob ter o tosilato de dimetil-acetal de fórmula IV(e), o qual pode ser depois convertido no composto de fórmula IV(c) por hidrólise ácida e redução com boro-hidreto de sódio. Neste esquema, os compostos de fórmulas IV(d) e IV(e) são compostos intermédios novos. EÍ possível utilizar depois o composto de fórmula IV para sintetizar uma diversidade de nucleósidos incluindo os compostos de fórmulas.Ia e Ib, através de duas estratégias básicas. A primeira abordagem implica o deslocamento directo de um grupo removível do açiicar isodidesoxi por uma nucleobase con forme ilustrado na equação 1, A síntese de análogos carboxíli-cos de nucleósidos (particularmente derivados de adenina), de acordo com este tipo de reacção, encontra-se descrita na litera tura, mas este método não é habitualmente utilizado.

Equação 1:

X = Grupo removível Base-H = Nucleobase C = CHjpH-ou q eeu precursor dissimulado 0 método alternativo clássico baseia-se na construção por fases da nucleobase. A síntese de nucleósidos, particularmente dos derivados de purina e de pirimidina, de acordo com esta método logia encontra-se bem documentada na literatura. Admite-se que todas aas nucleobases clássicas possam ser incorporadas na es trutura do isodidesoxinucleósido partindo do isodidesoxi-açdcar de fórmula IV. 0 derivado amino de fórmula IV(f) obtém-se fa- cilmente a partir do composto de fórmula IV mediante transfor mações químicas convencionais, de tal modo que é possível uti lizsr o mesmo composto intermédio em qualquer dos métodos. 0 composto de fórmula IV(f) é um composto intermédio novo na equação 2.

X = Grupo removível C = CH20H ou o seu precursor dissimulado

Por exemplo, é possível sintetizar o composto de fórmula Ia, isoddA, tratando o composto de fórmula IV(c) quer com adenina, carbonato de potássio e um reagente de transferencia de fase tal como o composto Ig-eòífcã-è 5 quer com o sal de sódio de adenina conforme se indica, a seguir. èã

0 composto de fórmula IV(e) pode ser utilizado para sin tetizar o composto de fórmula geral I de acordo com o esquema seguinte:

J

Esq-

De acordo com o esquema anterior, faz-se reagir a ade-nina, carbonato de potássio e o composto l8-coroa-6 com dimet.il-acetal iso-açúcar para se obter o composto iso-ddA acetal de fór mula VI. Depois efectua-se a hidrólise do dimetilacetal para §e obter o aldeído de fórmula III, utilizando ume solução de ácido oxáliço. Após a neutralização, o aldeído instável é imediatamente reduzido por hidrogenação catalítica para se obter iso-ddA de fórmula geral I. Neste esquema, os compostos de fórmula (IV(e), VI e VII são compostos intermédios novos.

Também é possível sintetizar o composto de fórmula Ib, de acordo com os métodos gerais anteriormente descritos. Faz-se reagir primeiro o composto de fórmula IV(c) com 2-amino-6-cloro purina, com um reagente de transferência de fase, comum tal como o composto l8-coroa-6, e com carbonato de potássio para se obter o novo 2-amino-6-cloropurina-isodidesoxinucleósido de fór mula VIII.

Depois converte-se este composto no composto de fórmula Ib sob condições ácidas ou alcalinas, por exemplo, aquecendo-o na pre sença de HC1: ο α

ο

νη3 ο Ib

VIIJ

Neste esquema, ο composto de formula YlII á um compos to intermádio novo.

Também ê possível sintetizar os didesoxinucleósidos iso méricõs da presente invenção de acordo com uma metodologia mais clássica que implica a formação da nucleobase a partir de uma ati na”

Esq-

c:

EícN, iSuOH

J

1. (EíO)2CHOAc,A2. pTsOH7t°luen·0 C!

X

W0 esquema anterior, faz-se reagir o composto de fórmu-la IV' (c) com azida de sódio. C composto resultante é hidrqge-nado eataliticamente com paládio sobre carvão para se obter a correspondente amina de fórmula IV (f). A reacção dessa soaina com 5-amiro“^,6-diclcropirimidina5 na presença de uma base, dá c derivado de pirimidina de formula IX, o qual por sua vez é convertido no condensado (UaductV) de purina de fórmula X per condensação cem acetato de dimetoximetilo. Segue-se a eliminação induzida por ácido para se obter ó-eloropurlna-isodidesoxi-nucleósido de fórmula X. Um tratamento subsequente com uma solução de amoníaco mstanólica dá IsòddA de fórmula Ib em conjunto com o composto de fórmula XI. weste esquema, os compostos de formulas IX, X de XI são compostos intermédios novos. 0 composto IsoddG também pode ser sintetizado a partir do composto de fórmula 17 (f) por construção sequencial da «u-cleobase conforme se ilustra a seguir, A reacção do composto de fórmula IV(f) com 2-amino-6- cloro-^K 3H)-pirimidinona na pre sença de t.rietilamina dá a pirimidinona de fórmula XII. A redução catalítica do composto de fórmula XIX na presença de óxido de platina (PtC^) dá a aminopirimidinona de formula XIII. C tra tamento do composto de fórmula XIII com ortoformato de trietilo e com ácido permite obter IsoddG de fórmula Ib. Cs compostos de fórmulas XII e XIII são compostos intermédios ^wcs.

Cs derivados dos compostos de fórmula creral I que são substituídos na posição aaino e hidroxi podem ser preparados ?§ eilmente fazendo reagir um composto de fórmula geral I cem os anidridos de fórmulas gerais (ArCO^C, (ArCHgCCjgC ou (RGCOgCj

em que (ArCO^Q representa um anidrido aromático tal como o anidrido benzdico e (ArCH^COj^O representa um anidrido aral-quílico tal como o anidrido fenilacetico, e (RC02)0 representa um anidrido alcanóico. Os produtos assim obtidos serão os derivados de ester-amida do composto de formula geral I. A hidrólise parcial selectiva desses derivados com trietilamina, ou sob condições alcalinas, dará os desejados compostos de fór mula geral I parcialmente substituídos.

J 20

XIII 21

0 composto de fórmula geral I é utilizável no tratamento de um paciente infectado por um retrovirus, particularmente o HIV, administrando-se ao paciente uma quantidade eficaz dos compostos ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, inactivadorasdo vírus.

J

Outros didesoxinucleósidos tais como 2,3-didesoxiade-nosina e 2,3-didesoxiinosina exibem também actividade anti-rg troviral devido ao facto de inibirem a transcriptase inversa. Contudo, a utilização terapêutica destes compostos é limitada pela sua rápida degradação por hidrólise da ligação açúcar-ba se. Em consequência, a presente invenção abrange os derivados isoméricos de 2,3-didesoxinucledsidos que apresentam uma ligação nucleósido mais estável.

Os compostos de fórmula geral I podem ser administrados por qualquer via adequada incluindo a via oral, tópica e parenteral, por exemplo, subcutânea, intravenosa, intramuscular ou intradármiea.

J

Embora seja possível administrar um composto de fórmula geral I isoladamente, é preferível incorporá-lo em composições farmacêuticas. As composições da presente invenção são constituídas pelo menos por um composto de fórmula geral I em conjunto com um ou mais veículos aceitáveis e opcionalmente por outros agentes terapêuticos. Cada veículo deve ser "aceitável" no sentido de que deve ser compatível com outros ingredientes da composição e não deve ser prejudicial para o paciente. As composições englobam as que são adequadas para administração oral e intravenosa. Convenientemente é possível apresentar as composições em formas de dosagem unitária, podendo ser prepara das por métodos bem conhecidos na especialidade farmacêutica.

As composições da presente invenção adequadas para ad ministraçio oral podem ser apresentadas como unidades discretas tais como cápsulas, pílulas ("cachets") ou comprimidos, contendo cada um deles uma quantidade predeterminada de um composto de formula geral I; também podem ser apresentadas sob a forma de pé ou de grânulos; na forma de uma solução ou de uma suspen são num liquido aquoso ou não aquoso, ou na forma de uma emulsão líquida do tipo oleo-em-água ou de uma emulsão do tipo-água-em--éleo. 0 composto de férmula geral I também pode ser apresentado sob a forma de pílula grande, electuário ou pasta . E possível preparar um comprimido por compressão ou por moldagem, podendo ser formulado de modo a proporcionar a libertação lenta ou controlada do ingrediente activo nele contido, utilizando por exemplo hidroxipropilmetilcelulose em pro porções variáveis para proporcionar o perfil de libertação desejado. As composições adequadas para administração parente-ral englobam as soluções para injecções estéreis isotonicas aquosas e não aquosas, as quais podem conter anti-oxidantes, tampões, bacteriostatos e solutos que tornem a composição iso-tonica com o sangue do paciente visado, podendo ser armazenadas num estado liofilizado, apenas sendo necessário adicionar o veículo líquido estéril, por exemplo água para injecçÕes, imediatamente antes da utilização.

Descrever-se-á agora a presente invenção através dos exemplos que seguem, os quais são apresentados apenas com ob-jectivos de ilustração.

Exem- 22 /

Exemplo 1 Síntese do éster do ácido 1,2-0-( l-metiletilideno)-V--B-xilofuranose-3-0-( IH-imidazol-l-ácido carbotlóico)- (Composto III) --f-met i Ibenzeno-sulf ónico

J

Utilizou-se um balão de fundo redondo de três bocas e com a capacidade de 1 litro seco k chama, equipado cor. agitador magnético e com um funil de adição igualizador de pressão de 250 ml, tendo-se carregado com uma solução de *+0,0 g de l,2-f-(l-metiletilideno)-<^-D-xÍlofuranose (21,0 imncles) em 125 ml de cloreto de aetileno. Tratcu-se a solução com M-C ml de piri-dina seca e depois arrefeceu-se até k temperatura de -5°C sob atmosfera de azoto. *Tesse momento, carregou-se o funil de adição com uma solução de kk92 g de cloreto de tosilo (1,1 eq.;

J 23,1 mmoles) em ICO ml de cloreto de metileno. Durante 30 minutos , adicionou-se, gota a gota, o ccntetido do funil de adição k mistura reaccional arrefecida. Depois de se ter agitado durante uma noite, período em que a temperatura da mistura reac-ccional subiu até ao valor da temperatura ambiente, procedeu-se h diluição do cçnteddo dc balão com 500 ml de cloreto de metile no e lavou-se primeiro com 600 ml de água a depois com 2 x *+C0 ml de água e finalmente cem *+00 ml de uma solução satura- éâ de cloreto de sódio. Secou-se a fase orgânica com --'gSO^, filtrou-se, evaporou-se sob pressão reduzida e, depois , secou-se novamente k temperatura de 23°C e k pressão de C,C5 mmEg, durante uma noite para se remover a piridina residual, obtendo-se uma produção de 71 g de produro bruto no estado sólido e de cor branco sujo. Dissolveu-se esta subs- 2k

{ tância em 100 ml de cloreto de metileno e, depois, tratou-se com hexano até a solução ficar turva. Armazenou-se esta mistura à temperatura de 0°C durante a noite. Recolheu-se por filtração os sólidos resultantes, lavou-se bem com hexano e secou-se ao ar para se obter 52,^ g de l,2-0-(l-metiletilide-no)-5-0-£-(tolilsulfonil)- o( -D-xilofuranose no estado sdlido e de cor branca. Obteve-se uma segunda colheita de 5j7 £ do produto desejado por evaporação dos licores-mãe (80 % de rendi mento).

Utilizou-se depois um balão de fundo redondo com a capacidade de 2 litros equipado com um agitador magnético e carregou-se com 58,1 g de l,2-0-(l-metiletilideno)-5-0-]>-(tolil-sulfonil)-©< -D-xilofuranose (168 mmoles) e 1,0 litro de 1,2--dicloroetano e, depois, tratou-se com 3&1 £ de tiocarbonildi-imidazol (1,2 eq., 202 mmoles). Aqueceu-se a solução amarela à temperatura de refluxo durante 2 horas e, decorrido esse tem po, verificou-se por TLC que ainda havia composto de partida, adicionou-se mais *+,2 g de tiocarbonildiimidazol (0,15 eq.; 23,5 mmoles) e manteve-se o aquecimento durante mais uma hora. Arrefeceu-se a mistura reaceional e eliminou-se o dissolvente num evaporador rotativo. Partilhou-se o resíduo cor de laranja entre cloreto de metileno e 1,*+ litro de égua.· Separou-se a fase orgânica e lavou-se com 700 ml de égua e, depois, com 500 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio. A secagem sobre KgSO^, a filtração e a evaporação proporcionaram 91 g de éster do acido l,2-0-(l-metilêtilideno)-O(-D-xilofuranose-3-0--(lH-imidazol-l-acido carbotióicoí-^-metilbenzeno-sulfónico (Composto III) no estado sólido e cor de laranja.

Exemplo 2 Síntese de (2S ,^11)-1+-(1,3-ditian-2-il)-l,2,4-butano--triol-l-O-C^-metilbenzeno-sulfonato) (Composto Y).

Utilizou-se um balão de três bocas com a capacidade de 2 litros equipado com um agitador magnaetico e com um funil de adição igualizador de pressão de 1 litro e carregou-se com 600 ml de tolueno seco. Desgasificou-se o dissolvente com ár gon e, depois, aqueceu-se à temperatura de refluxo e tratou-se com 27,1 ml de hidreto de tri-n-butil-estanho (1,5 eq., 100 mmoles) e 5ÍQ mg de AIBN. Garregou-se o funil de adição com a solução desgasifiçada com árgon contendo 30,3 S do composto an terior (66,7 mmoles) em 600 ml de tolueno seco. Durante 1 ho ra adicionou-se esta mistura h solução aquecida. Depois de se ter aquecido durante mais 2 horas, verificou-se por TLC que na mistura de reacção existia ainda composto de partida. Adicionou-se alíquotas de 9 ml de hidreto de tri-n-butil-estanho (0,5 eq.; 3^ mmoles) e 50 mg de AIBN e manteve-se o aquecimento até se verificar por TLC que já não havia composto de partida (aproximadamente 1 hora mais tarde). Apds o arrefecimento eliminou-se o tolueno num evaporador rotativo e partilhou-se o resíduo entre 1 litro de acetonitrilo e 800 ml de he xano. Recolheu-se a camada de acetonitrilo e evaporou-se para se obter 27,3 g de um resíduo de cor branco sujo, o qual se dis solveu num volume mínimo de uma solução de 30 % de acetato de etilo/70 % de hexano. Fez-se passar esta mistura através de uma camada de gel de sílica e fez-se a eluição com mais solu- 26 ção de 3° % de acetato de etilo/70 % de hexano. Após a evaporação do eluente dissolveu-se o resíduo num volume mínimo de^ éter e depois trstou-se com éter de petróleo até a solução ficar turva. 0 arrefecimento em um banho de neve carbónica seguido pelo armazenamento s temperatura de 0°C durante uma noite e a recolha dos sólidos resultantes proporcionaram 9>3 £ de 3-d.esoxi-l ,2-0-(l-metiletilideno)-0< -B-eritro-pentofurano se-^-metilbenzeno-sulfonato no estado sólido e de cor branca. Becolheu-se mais ^,0 j de produto, após evaporação dos licores--mãe (61 % de rendimento).

Sob atmosfera de azoto, arrefeceu-se até à temperatura de -78°C uma solução de 3-desoxi-l,2-0-(l-metiletilideno)-o<-D--eritro-pentofuranose-^-metilbenzeno-sulfonato (12 g·, 36,5 mmo les) em cloreto de metileno seco (60 ml). Lentamente, adicionou-se à solução 1,3-propano-ditiol (*f,0 ml 39,8 mmoles) e, depois, adicionou-se-lhe eterato de trifluoreto de boro, (5,Cml; mmoles). Agitou-se a mistura à temperatura de -78oC durante kO horas e, decorrido esse tempo, diluiu-se a mistura arrefeci da com cloreto de metileno (200 ml), lavou-se com uma solução saturada de cloreto de sódio (2 x 50 ml), secou-se sobre MgSO^, filtrou-se e evaporou-se. 0 óleo de cor clara foi purificado por cromatografia rápida em coluna, utilizando uma solução de 50 % de EtOAc/hexano como eluente, tendo-se obtido 7 S do composto de fórmula V sob a forma de um óleo incolor (50 % de ren dimento; 90 % de rendimento tomando como base 0 composto de partida recuperado). Isolou-se também 5,3 g de composto de par tida recuperado.

Exem

*

Exemplo 3

Preparação de (2R-trans)-tetrahidro-5-(l,3“ditian-2-il)--3-furanol (composto IV(a)) e ^-metilbenzeno-sulfonato de (2R-trans)-tetrahldro-g-(l,3-dltlan-2-ll)-3-furanol (Composto IV(b))

Preparou-se uma solução do composto V (7 g; 18,5 mmo-les em cloreto de metileno (20 ml) e tratou-se com piridina (*+ ml, mmoles) $ agitou-se a solução durante uma noite e, depois, diluiu-se com cloreto de metileno (50 ml) e* a seguir, extraiu-se com uma solução saturada de cloreto de sódio (1 x 20 ml). Secou-se a fase orgânica sobre MgSO^, filtrou-se e evapo rou-se. Dissolveu-se novamente o resíduo (composto IV(a); 5>5δ; 26,6 mmoles) em cloreto de metileno (10 ml) e agitou-se com cio reto de tosilo (5,5 g: 288 mmoles) e piridina (3 ml: 37 >1 mmoles), a temperatura ambiente durante uma noite. A diluição com cloreto de metileno (100 ml) seguida da lavagem com uma solução saturada de cloreto de sódio (25 ml), secagem sobre MgSO^, filtração, evaporação e cromatografia (30 % de Et0Ac/70 % de hexa-no) proporcionaram k,2 g (32 % a partir do composto de partida acetoneto) de ^--metilbenzeno-sulfonato de (2R)-trans-tetrahidro--5-(l,3-ditian-2-il)-3-furanol, (composto IV(b) sob a forma de óleo incolor: EM 360 (M+).

Exemplo ** Síntese de (2R-trans)-tetrahidro-1+-/]T (^-metilfenil^sul-fonil ,7-oxi J7-2-furan-metanol (Composto IV(c)) durante 5 horas, aqueceu-se a temperatura de 80°C uma mistura de ^-metilbenzeno-sulfonato de (2R)-tra.ns-tetrahidrd--5-(l,3-ditian-2-il)-3-furanol (1,0 g; 2,77 mmoles), cloreto de mercórico (1,66 g; 6,1 mmoles) e óxido mercilrico (1,32 g; 6,1 mmoles) numa solução de 80 fo de acetonitrilo/agua (25 ml). Arrefeceu-se a solução ate a temperatura ambiente, filtrou-se e evaporou-se parcialmente para eliminar o acetonitrilo. Diluiu-se o resíduo com uma solução de 50 % de M@€H/água(10mLf ar refeceu-se ate à temperatura de 0°C e, depois, tratou-se com bo ro-hidreto de sódio (100 mg; 2,7 mmoles). Depois de se ter agi tado à temperatura de 0°C durante 15 minutos, concentrou-se a solução e partilhou-se o resíduo sntre 0Η2012 e salmoura. Reco lhsu-se a fase orgânica, secou-se com KgSO^, filtrou-se e eva-porou-se. Purificou-se o óleo resultante por cromatografia ró pida em coluna utilizando uma solução de 6o % BtOAcAo % de he xano como eluente para se obter 530 mg (7-0 %) do composto IV(c) sob a forma de um óleo, o qual solidificou mediante arrefecimento: EM 2*fl(M+-CH20H).

Exemplo 5 Síntese de (3S-trans)-tetrahidro-5-dimetoximetil-3-fura-ndl (Composto IV(d) e ^-metilbenzeno-sulfonato de (3S--trans)-tetrahidro-5-dimetoximetil-3-furanol (Composto IV(e))

Durante três dias, aqueceu-se à temperatura de 70°C uma solução de ^-metilbenzeno-sulfonato de 3-desoxi-l,2»Q-( 1-metil etilideno)-(Χ,-D-eritno-pentofuranose (*+0 g; 0,12 mmole) em 1 % (v/v) de ácido acético em metanol (800 ml). Após arrefecimen to ate à temperatura ambiente, ajustou-se o pH da solução para 6,0 por adição de uma solução de metóxido de sódio. Depois, evaporou-se a mistura sob vazio até à secura para se obter um sólido espumoso, composto IV(d). Adicionou-se a esta subatiãn-cia l60 ml de piridina seca e cloreto de tosilo (50 g) e agitou-se a mistura à temperatura de 0°C durante 15 horas. Depois de se ter vertido sobre ^00 ml de gelo/água, extraiu-se a mistura com CH^C^ (2 x M)0 ml) e lavou-se com ácido clorídrico IN, hidrogenocarbonato de sódio e com água, sucessivamente. Depois, evaporou-se a solução orgânica até a. secura, sob vazio, para se obter 35,7 g de um líquido instável (93 rendimen to. IV(d)s BKH (200MHz, CDClO Σ 2,00 (m, 2H), 3,^5 (s, 6H), c J3 3,78, 3,96 (AB de ABX, 2H, JAB = 9¾, = 2HZ, JBX = ^29 (m> 2H)’ (m> 1H)·

Exemplo 6 Síntese de (SR-transJ-tetrahidro-1*-/"/’^-metilfenil)--sulfonil .7- oxi 27-2-furan-metanol (Composto IV(c)).

Durante 5 horas aqueceu-se à temperatura de 80°C uma mistura de ^-metilbenzeno-sulfonato de (3S-trans)-tetrahidro--5-(dimetoximetil)-3-furanol, (composto IV(e)j 10,0 g; 31,6 mmo les, 1 % de CF^CX^H (50 ml) e dioxano (80 ml) num balão de fundo redondo com a capacidade de 250 ml, equipado com um condensador de refluxo. Após arrefecimento ate à temperatura am- biente, agitou-se a solução para pH 7?0 com hidróxido de sódio IN, tratou-se com NaBH^ (1,2 g; 31>7 mmoles) e deixou-se em agitação ? temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Removeu-se o dissolvente parcialmente e depois extraiu-se com acetato de etilo (100 ml x 3). Secou-se a fase orgânica sobre MgSOfc^filtrou-se, evaporou-se e purificou-se por cromatografia rápida em coluna (60 % de EtOAcAO % de hexano) para se obter 3,6 g de composto de partida recuperado 2,7 § (rendimento de: kj % tomando como base o composto de partida recuperado) do composto IV(c).

Exemplo 7 Síntese de (2R-cis)A-(6-amino-9H-purin-9-il)-tetrahidro- -2-furanometsnpl (composto Ia) — -.................. ........^'>·ΜΜΓίι·ΙΤ·· iii .......................... A um balão de fundo redondo seco à chama e sob atmosfe ra de árgon, equipado com um agitador magnético e um condenss-dor, adicionou-se adenina (50 mg; 0,37 mrnole), carbonato de potássio (100 mg; 0,73 mrnole), l8-coroa-6 (97 mg ff,37 ^nole) e dime-tilformamida (10 ml). Deixou-se esta mistura em agitação a temperatura ambiente durante 30 minutos sob uma corrente de ár gon. Depois, adicionou-se, gota a gota, a mistura ?gitada,uma solução de (2R-trans)-tetrahidroA— £ t(^-mstilfenil)-sulfonil7--oxi J-* -furanmetanol, o composto IY(c),(Í00 mg; 0,37 mrnole) em 2 ml de dimetilformamida. Aqueceu-se a mistura resultante a temperatura de 80°C e agitou-se a essa temperatura durante uma noite. Após a remoção do dissolvente in vácuo, purificou-se 0 resíduo sólido por eromatografia rápida utilisando como eluente uma solução de 10' % de Me0H/90 % de CE^CL· . Purificou-se mais este composto isolado por HPLC de fase inversa utilizando um o sistema de eluiçio de gradiente de CH^CN/BLO para se obter 25 mg (29 %) de composto Ia no estado solido e de cor branca. Cristalizou-se uma amostra analítica em metanol: ?. F. 183-185°C, + *+7,91° (c 0,67, KeOH). IJV\ máx (heOH) 260 nm (€.13990); UV X máx (pH 1) 210 nm ( ε 19700), 259 nm ( £ I36OO);

Exemplo 8 Síntese de (3R-cis)-9-/’tetrahidro-5-(dimetoximetil)-3--furanil-7-9H-purin-6-amina (Composto VI) A um balão de fundo redondo seco a. chama e sob atmosfera de árgon, equipado com um agitador magnético e um condensador, adicionou-se adenina (2,1^ g; 15,8 mmoles), K^CO^ (^,37 g; 31,6 mmoles), l8-coroa-6 (^17 mg; 1,58 mmoles e dimetilformami-da (^00 ml). Deixou-se esta mistura em agitação à temperatura ambiente durante 30 minutos sob uma corrente de árgon. Depois adicionou-se à mistura sob agitação uma solução de ^-metilben-zeno-sulfonato de (3S-trans)-tetrahidro-5-(dimetoximetil)-3-fu ranol, composto IV(e), (5,0 g; 15,8 mmoles em 100 ml de DMF. Aqueceu-se a mistura resultante a temperatura de 80°C e agitou--se a essa temperatura durante uma noite. A filtração, seguida de evaporação da dimetilformamida proporcionou um resíduo sólido. Fez-se passar este produto através de uma camada de gel de sílica utilizando como eluente uma solução de 7 % de MeOH/93 % de GH^Cl^. Recolheram-se as fraeções que continham o produto

desejado e evaporou-se para se obter 3,0 g (71 f>) de composto VI no estado sólido e de cor branca: P. F. lMt-l4-6°C; UV X máx (MeOH) 2lk nm ( £» 18890) 25 B nm í 6 IblCO); irv3sf máx (pH 1) 2C8 nm ( £ 20000) 258 nm ( 6 13780); ϋνλ máx (pH 13) 259 nm (& &12C).

Exemplo 9

J Síntese de (2R-cis)-b-amIno-tetrahidro-2-furanmetanol (Composto IV(f))-

J

Arrefeceu-se até b temperatura de -5°C uma solução de (2R-trans-tetrahidro-b-^£ (b-metilfe^iD-sulforilJ^-oxi 2-2--furanmetanol, composto TVOe), 150 mg; 0,55 lamole) em dimetil-formamida previamente seca (3 ml) e tratou-se com j^aTi^ (90 mg; 1,36 amole). Deixou-se a solução retomar a temperatura amblen te e, depois, aqueceu-se até b temperatura de 70° C durante 5 horas. Após a remoção da dimetilforraamida, partilhou-se o resíduo entre StOAc (5>0 ml) e água (1C ml). Removeu-se a camada orgânica e, depois, lavou-se com solução saturada de hidrogeno carbonato de sódio (10 ml) e com uma solução saturada de clore to de sódio (10 ml). Reuniram-se as camadas aquosas e lavou-se novamente com 3t0Ac (50 ml * 3)· Reuniram-se todas as combi-ções orgânicas, secou-se sobre MgSO^, filtrou-se e evaporou-se.

Combinou-se este produto com metanol previamente seco (5 ml) e com catalisador de paládio a 10 $ sobre carvão (15 mg) num balão de fundo redondo seco a chama e com a capacidade de 2.5 ml. Submeteu-se 0 balão a uma atmosfera de hidrogénio e deixou-se em agitação b temperatura ambiente durante três horas. Removeu-se 0 catalisador por filtração e evaporou-se 0

e dissolvente para se obter 5½ mg (8½ %) de (2R-cis-A-amino-te-t rahidro-2-fura.nffietanol sob a forma de nm óleo incolor, o qual, não necessitou de purificação adicional: SM 99 (M+-H2Q).

Exemplo 10 Síntese de (2R-cis(5-amino-6-cloro-tf-pirimidinil)~ -amino ,7-tetrahidro-2-furanmetanol (composto IX)

J

J A -um balão de fundo redondo com a capacidade de 50 ml equipado com um condensador de refluxo adicionou-se (2R-cis)-amino-tetrahidro-2-furanmetanol, composto IV(f), (18½ mg; 1,57 mmole), 5-9^^0-½ ,6-dicloropirimidina (770 mg; 70 mmo-les) trietilamina (0,½½ ml; 3jl6 mmoles) e álcool t-butílico (16 ml). Aqueceu-se a mistura reaccional à temperatura de refluxo sob atmosfera de árgon durante 72 horas e decorrido esse tempo, fez-se a remoção das substâncias voláteis num evapora-dor rotativo. Dissolveu-se o resíduo em 100 ml de acetato de etilo, lavou-se com uma solução saturada de hidrocárbonato de sódio (50 ml) e com uma solução saturada de cloreto de sódio (50 ml) e, depois, secou-se sobre MgSO^. Após filtração e a evaporação, purificou-se o produto por cromatografia rápida em coluna (5o % de Et0Ac/50 % de hexano) para se obter 220 mg (58 %) de composto IX. ϋνλ máx (MeOH) 206 nm, 265 nm, 295 nm; máx (pH 1) 20*+ nm, 30½ nm.

Sxem-

Exemplo 11 Síntese de (2R-cis)-)+-(6-cioro-9H-purin--9--il)-tetra-hidro-2-furanmetanol (composto X)

Durante 120 horas aqueceu-se à temperatura de 100°C uma solução de C2R-cis)-14— £ ^-amino-ó-cloro-if-pirimidinil)--amino JP-tetra hidro-2-furanmetanol, composto IX, (220 mg; 0,90 mmole) e acetato de dietoximetilo (5 ml) num balão de fundo redondo com a capacidade de 10 ml equipado com um conden sador de refluxo. Procedeu-se à remoção das substancias volá-teis num evaporador rotativo e recombinou-se o resíduo com to-lueno (9 ml) e ácido jo-tolueno-sulfonico (5 mg). Depois de se ter agitado à temperatura ambiente durante 1 hora e apds remoção de tolueno, purificou-se o conteúdo do balão por cromato-grafia rápida em coluna (10 $ de Me0H/90 % de CEbjC^) para se obter 109 mg (Μ3 %) de composto X no estado solido e de cor branca: wX máx (MeOH) 26b nm; UV X máx (pHl) 265 um.

Exemplo 12 Síntese de (2R-cis)-i+-(6-amino-9H-purin-9-il)-tetra-hidro-2-furanmetanol (composto Ia) e (2R-cis)-tetra hidro-^-metoxi^H-purin-g-il^P-furanmets no 1 (composto XI)

Vedou-se hermeticamente uma solução de (2R-cis j-1+^(6-

/ -cloro-9H-purin-9-il)-tetrahidro-2-furanmetanol (73 mg; 0,28 mmole.) em 16 % de KH../metanol (15 ml) numa bomba de aço inoxi 3 dável e deixou-se reagir durante 96 horas. A evaporação da solução seguida de cromatografia rápida em coluna (10 % de MeOH/ /90 % de C^Cl^) proporcionou o composto Ia (20 mg; 29 %) e o composto XI (38 mg; 53 % no estado solido e de cor branca. XI: UV X máx (MeOH) 2^9 nm; OV% máx (pHl) 250 nm.

Exemplo 13 Síntese de (2R-cis)-Íi~(2-amino-6-cloro~9H-purin-9-il)-te-trahidro-2-furanmetanol (composto VIII) A um balão de fundo redondo seco à chama e em atmosfera de árgon, equipado com um agitador magnético e com um condensador, adicionou-se 2-amino-6-cloropurina (63 mg; 0,37 mole), carbonato de potássio (100 mg; 0,73 mmole), l8-coroa-6 (97 mg; 0,37 mmole) e dimetilformamida (10 ml). Deixou-se a mistura em agitação a temperatura ambiente durante 60 minutos, sob uma corrente de árgon. Gota a gota, adicionou-se depois a mistura agitada uma solução de (2R-trans)-tetrahidro-lf-/*(Li-metilfenil)--sulfonile7-oxi-2-furanmet?nol (100 mg; 0,37 mmole) em 2 ml de dimetilformamida, aqueceu-se s mistura resultante s. temperatu-ra de 80" 0 e agitou-se a essa temperatura durante a noite.

Apás remoção do dissolvente in vacuo, purificou-se 0 resíduo sá lido por cromatografia rápida utilizando como eluente uma solução de 5 % de MeOH/95 % de CHgC^. 0 produto isolado foi purificado novamente por HPLC de fase inversa utilizando um sistema de eluição de gradiente de CH3PN/I32Q para se obter 30 mS (30$) de composto VIII no estado sólido e de cor branca: UV X máx (EtOH) 221 nm, 2*+0 nm, 303 nm. • Exemplo l*t Síntese de (25-013)-^--( 6-amino-9H-purin-9“il)-tetra-hidro-2-furancarbaldeído (composto VII) e (2R-015)-^-(6--amino-9H-purin-9-il)-1 etrahid ro-2 -furanmetsnol (composto Ia)

Durante 18 horas aqueceu-se à temperatura de refluxo uma solução de (3R-cis)-9-/*tetrahidro-5-(dimetoximetil)-3-fu ranil^-9H-pupin-6-amina (M-,35 g; l6?3 mmoles) numa solução de ácido oxálico 0,1M (200 ml) para se obter 0 composto VII. Após arrefecimento ate a temperatura ambiente, neutralizou-se a solução que continha o composto VII utilizando uma solução de NaOH IN, Combinou-se a mistura resultante com PtO^ (50 mg,, catalisador) e agitou-se sob atmosfera de hidrogénio durante ¥8 horas. Mediante filtração, evaporação e purificação por cromatografia rápida em coluna (5 % de MeOHx/95 % de CELjClg) ob teve-se t,0· g (52 %) de composto Ia no estado sólido e de cor branca. Se necessário, ainda é possível purificar melhor 0 produto por recristalização em metanol.

Exemplo 15 Síntese de (3R-cis)-2-amino-l,9-dihidro-9-/'tetrahidro--5-(hidroximetil)-3-furanil ,7-6K-purÍu^6-ona -(composto Ib)

Durante 3 horas aqueceu-se a temperatura de refluxo

>r uma solução de (2R-cis )-*+-( 2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-te-trahidro-2-furanmetanol (170 mg; 0,63 mmole em ácido clorídr^, co IN (25 ml). Neutralizou-se a mistura reaccional com uma solução de hidróxido de potássio a *+0 % e, depois, evaporou-se para se obter um sólido branco. A purificação por HPLC de fase inversa utilizando um sistema de eluição de gradiente de CH^CN/H20 deu 65 mg (*+l fi) de composto Ib no estado sólido e de cor branca: P. F. 229 - 230o 5 wX máx (pH 0) 205 nm, 253 nm, 278 nm; UV X máx (pH 6) 252 nm, 270 nm; UV X máx. (pH 13) 255 nm, 2ô;8 nm.

Exemplo 16

Síntese do composto Ib através dos compostos áII e XIII A um balão de fundo redondo com a capacidade de 25 ml equipado com um condensador de refluxo, adicionou-se (2R-cis)--!+-amino-tetrahidro-2-furanmetanol (*+27 mg; 3>6*+ mmoles), 2--amino-5-nitro-6-cloro-^(3H)-pirimidinona (5^0 mg; 2,83 mmole£)5 trietilamina (3?5 ml; 25 mmoles) e dimetilformamido (5 ml). Aqueceu-se a mistura reaccional à temperatura de 6o°C durante 6 horas e, decorrido esse tempo, verificou-se por TLC o desapa recimento do composto inicial. Após arrefecimento ate à tempe ratura ambiente, concentrou-se a mistura reaccional na presença de gel de sílica num evaporador rotativo. Com o produto resultante absorvido c^rregou-se uma coluna de gel de sílica (aproximadsmente 300 ml) e eluiu-se com uma solução de CELGl^/ /Me0H a 5:1 e, depois, com uma solução de C^O^/MeOH a 3^.1 pa ra se obter 730 mg (9½ %) dó produto desejado, o composto XII. Juntou-se o composto XII (200 mg; 0,7 mmole) a Pt02 (75 mg; c£ talisador) e 50 ml de uma solução de acido fórmico e metanol a 1:3 (v/v). Hidrogenou-se esta mistura à pressão de 3>75 bar durante *t8 horas. A filtração seguida de evaporação deu o com posto XIII. Juntou-se este resíduo a dimetilformamida (5 ml), ortoformato de trietilo (5 ml) e ácido t-tolueno-sulfónico (200 mg, catalisador) e aqueceu-se à temperatura de 8o°C duran te ½ horas. Depois, evaporou-se a solução e juntou-se a 10 ml de ácido clorídrico 0,5N e agitou-se durante mais ½ horas.

Após a neutralização, evaporou-se a mistura e purificou-se para se obter o composto Ib.

Exemplo 17

Teste da actividade anti-HIV dos compostos Ia e Ib mm·»^·ιΐΜΜη1immmtmtmmm· i iw— iwnw*—·;—wg—1mmw

Testou-se os compostos Ia e Ib utilizando o ensaio de inibição do efeito citopático de HIV, conforme descrito na publicação de Mitsuya et al. Proc.Mat1! Acad. Sei., USA. 83 , (1986) 1911 , aqui incorporada a título de referência.

As células foram expostas ao composto Ia, ao composto Ib ou a 3-azido-2;,3-didesoxitimidina (AZT) e decorridos sete dias determinou-se as células alvo sobreviventes tratadas com o fár maco.

Os resultados encontram-se reunidos na Figura 1. As barras negras representam as .cetulas alvo sobreviventes tratadas com o composto quando se adiciona HIV (HTLV-III). As barras brancas representam as células alvo sobreviventes tratadas com o composto na ausência de vírus.

Os compostos Ia e Ib exibem actividade anti-HIV equivalente à dos férmacos anti-rectrovirais conhecidos por possui rem actividade in vivo contra HIV, mais parti cuia mente a AZT.

Exemplo 18

Ensaio da actividade anti-HIV dos compostos Ia e Ib em sistema de teste_ ELISA.

Utilizou-se um ensaio imuno-absorvente associado a enzima (ELISA) para testar a actividade anti-HIV dos compostos Ia e Ib, através da medição do desenvolvimento do vírus em lin focitos T CD*++ através da detecção do ar.tigene, libertado no sobrenadante da cultura de tecidos de células infectadas.

Materiais e métodos

Preparação de amostras para o "ELISA" do antigene.

Utilizou-se reservas de vírus de título elevado /*HIV, HTLV III; estirpe RF e fez-se o seu desenvolvimento em células H9 em meio RPMI ΐ6*+0 (Flov? Laboratories) enriquecido com 10 % de soro de vitela fetal, penicilina (100 Ιϋ/ml) e estre£ tomicina (100 yag/ml). Procedeu-se à remoção dos fragmentos celulares por centrifugação a baixa velocidade e armazenou-se o sobrenadante à temperatura de -70°C até ser necessário. A Hrfea de células hospedeira utilizada nos ensaios anti-virais foi a linha de células T CD^ C‘8l66, a qual é particularmente sus-ceptível a infecções com HIV. Procedeu-se-se à incubação das

células com 10 TCID^, HIV/HTLV III (RF) à temperatura de 37°C durante 90 minutos e, depois, lavou-se 3 vezes com PBSA. Pre- 5 parou-se nova suspensão de alíquotas de células (2 x 10') em 1,5 ml de meio de desenvolvimento em tubos de ensaio de 6 ml e fez-se a incubação & temperatura de 37°G* Decorridas 72 horas pcís-infecção procedeu-se ao ensaio imediato do antigene de HIV nos sobrenadantes das culturas celulares. "ELISA" para a captura do antigene de HIV 0 "ELISA" para a captura do antigene foi adquirido a Coulter (Luton, UK). Os ensaios foram efectuados em sobrenadantes extraídos de culturas de células infectadas, utilizando os passos descritos pelos fabricantes. Em cada ensaio as correspondentes amostras de controlo interno, positivas e negativas, foram in-luídas em conjunto com uma amostra de sobrenadante de controlo extraída das células não infectadas. As placas foram lidas uti lizando um sistema de detecção espectrofotométrico apropriado.

Resultados:

Seguidamente apresenta-se o ensaio "ELISA" do composto Ia e do ddA (o qual é um agente anti-HIV conhecido).

Composto I ddA IC50 (MM) •MMntaai «·»ι·ι·—''mm 3-io 1-3 0 composto Ia tem.actividade anti-viral neste sistema de ensaio, comparável à de ddA, um conhecido agente anti-HIV.

Exemplo 19

Composições em comprimido para os compostos Is e Ib. A. Comprimido de 0,05 mg

Ingredientes Comprimido 1. Composto Ia ou Composto Ib 0,05 2. Lactose Anidra 9^,00 3. ✓ Oxido de ferro negro 0,15 k. Celulose microcristalina 25,00 (Avicel PH-102) 5. Croscarmelose de sddio, Tipo A 5,00 (Ac-Di-Sol) 6. Sstearato de magnésio 0,80 Total 125,00 mg B. Comprimido de 2 mg

Ingredientes mg/pastilha 1. Composto Ia ou Composto Ib 2,00 2. Lactose, Anidra 1^7,00 3- Óxido de ferro amarelo para cosmética 0,1+0 k. Celulose microcristalina (Avicel PH-102) *+0,00 5. Croscarmelose de sddio. Tipo A (Ac-Di-Sol) 8,1+0 6. Estearato de magnésio 2,20 Total 200,00 mg

Exemplo 20

Composições injectáveis dos compostos Ia e IP. A. Pó estéril para injecção I. Composto Ia ou composto Ib em pó liofilisado

Ingredientes mg/frasco 1. Composto Ia ou Composto Ib 100,00 10,00 2. Manitol 50,00 50,00 3. ácido clorídrico aquoso (1 % v/v) Jígua para injecção a. Utilizou-se solução de ácido clorídrico aquoso para ajustar o pH de toda a solução, b. A água para injecção é essencialmente volatilizada durante a liofilização, B. Pó para reconstituição I. Dose de 0,5 mg de pó de composto Ia ou de Sompos-to Ib.

Ingredientes m S 1. Composto Ia ou composto Ib 0,50 2. Lactose, Anidra 99,50 Total 100,00 mg

Claims

REI V I N D I C A Ç õ E S 1,- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral A T

na qual A representa um grupo 6-amino-9H-purin-9-ilo ou 2-amino-6-hidroxi-9H-purin-9-ilo, em que o grupo amino pode ser substituído por um radical de formula geral NHC(0)R2 ou N=CHR3R^ e R representa um grupo OH ou um grupo de fórmula geral 0C(0)R1, em que R^, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um radical alquilo C^-C20, de cadeia linear ou ramificada, alcoxi- 44 /

-alquilo CrC12' fenoxi-alquilo C^-C^ eventualmente substituído, fenilo eventualemnte substituído por átomos de halogineo ou grupos alcoxi C^-C^, nitro, hidroxi, carboxilo ou alquilamino, e dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto: a) de se fazer reagir ura composto de fórmula geral

IV-1 na qual X representa um grupo eliminãvel e C representa um grupo hidroximetilo ou o seu percursor pro tegido, com adenina ou guanina e, sè necessário, de'se converter um gru po percursor protegido C num grupo hidroximetilo; ou b) de se hidrolisar o sunstituinte cloro em um composto de fórmula Cl

VIII

ou c) de se fazer reagir um composto de fórmula

com um ortoformato ou com acetato de dietoximetilo; e, eventualmente, de se converter o composto de fórmula geral I obtido em um sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico ou em um derivado N“ ou o-acilo ou em uma base de Schiff.
2.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se obter um composto de fõrmula geral I na qual A representa 6-amino-9H-purin-7-ilo insubstituldo.
3. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se obter o (2R-cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)- -tetrahidro-2-furanometanol.
4. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se obter um composto de fõrmula geral I na qual A reprssenta 2-amino-6-hidroxi-9H-purin-9-ilo insubstituldo.
5. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se obter a (3R-cis)-2-amino-l,9-dihidro-9-£ tetra-hidro-5-(hidroxi-metil)-3-furanil J7-6H-purin-6-ona.
6. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se fazer reagir (2R-trans)-tetrahidro-4-f[ (4- -metilfenil)-sulfonil ,7-oxi j2-furanometanol com adenina na presença de 18-coroa-6 e carbonato de potássio em dimetilformamida para se obter o (2R-cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-tetrahidro--2-furanometanol.
7. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se fazer reagir (2R-cis)-4-(6-cloro-9H-purin-9-il)--tetrahidro-2-furanometanol com amoníaco em metanol para se obter 47

o (2R-cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-tetrahidro-2-furanometanol.
8. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se hidrogenar (2R-cis)-4-(6-amino—9H-purin-9-il)--tetrahidro-2-furanocarbaldeído na presença de PtC>2 para se obter o (2R-cis)-4-(6-amino-9H-purin-9-il)-tetrahidro-2-furanometanol.
9. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se aquecer (2R-cis)-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9--il)-tetrahidro-2-furanometanol com ácido clorídrico para se obter (3R-cis) -2-airdno-l, 9-dihidro-9-£ tetrahidro-5- (hidroxi-metil)--3-furanilJ —6H-purin-6-ona.
10. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se fazer reagir (2R-cis)-2,5-diamino-6-f£ tetra-hidro-5-(hidroxi-metil)-3-furanilJ -aminojj -4 (3H)-pirimidinona com ortoformato de trietilo e ácido p-tolueno-sulfónico para se obter a (3R-cis)-2-amino-l,9-dihidro-9—jTtetrahidro-5-(hidroxi--metil) -3-furanil _J-6H-purin-6-ona.
11. - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado pelo facto de se misturar um composto de fórmula geral I ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, quando preparado pelo processo de acordo com as reivindicações anteriores, como ingrediente activo, com agentes auxi- liares de formulação apropriados. Lisboa, 12 de Fevereiro de 1990 O Agsite Oficia! da Prcpt saade Industrial