PT90296B - Processo para a preparacao de anticorpos monoclonais contra pseudomonas aeruginosa e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Processo para a preparacao de anticorpos monoclonais contra pseudomonas aeruginosa e de composicoes farmaceuticas que os contem Download PDF

Info

Publication number
PT90296B
PT90296B PT90296A PT9029689A PT90296B PT 90296 B PT90296 B PT 90296B PT 90296 A PT90296 A PT 90296A PT 9029689 A PT9029689 A PT 9029689A PT 90296 B PT90296 B PT 90296B
Authority
PT
Portugal
Prior art keywords
preparation
pharmaceutical compositions
monoclonal antibodies
mak
contain
Prior art date
Application number
PT90296A
Other languages
English (en)
Other versions
PT90296A (pt
Inventor
Horst Domdey
Matthias Maget
Bernd-Ulrich Von Specht
Original Assignee
Behringwerke Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Behringwerke Ag filed Critical Behringwerke Ag
Publication of PT90296A publication Critical patent/PT90296A/pt
Publication of PT90296B publication Critical patent/PT90296B/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56911—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • C07K16/1203—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria
    • C07K16/1214—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-negative bacteria from Pseudomonadaceae (F)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
    • C12N5/16—Animal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

DESCRIÇÃO
DA
PATENTE DE INVENÇÃO
N.° 90 296 rfoufrfntf· BEHRINGWERRE AKTIENGESELLSCHAFT, alemã, v ' com sede em D-3550 Marburg, República Federal Alemã
EPÍGRAFE: PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE ANTICORPOS
MONOCLONAIS CONTRA PSEUDOMONAS AERUGINOSA E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM
INVENTORES: Dr. Horst Domdey, Matthias Maget e Prof. Dr. Bemd-Ulrich von Specht
Reivindicação do direito de prioridade ao abrigo do artigo 4.° da Convenção de Paris de 20 de Março de 1883.
República Federal Alemã em 19 de Abril de 1988, sob o N° P 38 13 023.8.
INPI. MOD. 113 RF 16732
Descrição referente a patente de invenção de BEHRINGWERKE AKTIENGESELLSCHAFT, alemã, industrial e comercial, com sede em D-3550 Marburg, República Federal Alema, (inventores: Dr. Horst Domdey, Matthias Maget e Prof· Dr. Bernd—Ulrich von Specht, residentes na Alemanha 0 ci denta1), para PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE ANTICORPOS MONOCLONAlS CONTRA PSEUDOMONAS
AERUGINOSA E DE COMPOSIÇOES
FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM.
DESCRIÇÃO
A invenção refere—se a um anticorpo monoclonal (mAK) que apresenta reacçao cruzada com todos os 19 serotipos de Pseudomonas aeruginosa até agora conhecidos. Este an ti corpo pode servir como meio de diagnóstico, como ingrediente activo ou como veículo de ingrediente activo.
A pseudomonas aeruginosa ó uma bactéria patogánica, gram—negativa, oportunista. Pode causar doenças mortais, por exemplo pneumonia em doentes com fibrose cística ou septicómia em pacientes com queimaduras ou infecções ósseas ou das vias urinárias. A terapia das doenças causadas pela Pseudomonas aeruginosa por meio de antibióticos é, devido ao seu espectro de resistência, difícil e muitas vezes falhada.
M **
Por isso, a atençao na luta contra as infecções dirigiu-se pa
N
ra a imunoprofilaxia e para a imunoterapia. Obteve—se protecçao contra todos os 19 serotipos de Pseudomonas aeruginosa com uma mistura de proteínas de membrana externas (OMP) purificadas} F} β I (vide Specht et al· (1987) Infection 15» (i08-412)· No trabalho acima mencionado isolaram—se linfócitos de ratos imunizados e fundiram—se} por um processo conhecido, com células de mieloma NS—1 (Kearny et al· (1979)} J. Immunology} 123} 15^8-1550)· A partir de cerca de 5θθ hibridomas obtidos escolheu—se um mAK — em seguida designado por mAK 6A4 — que possui as propriedades vantajosas a seguir enumeradas:
— reacçao forte e unitêria com todos os 19 serotipos de Pseudomonas aeruginosa — teste de ligaçao Clq positivo at — efeito protector em infecções provocadas em ratos com Pseudomonas aeruginosa·
Determinou—se também o cDNA (ver exemplos e Tabelas 1 e 2)· Pode então obter-se um mAK humano, no qual se substituem as zonas genéticas constantes do anticorpo dos ra— tos pelas sequências humanas correspondentes· A expressão des ta sequencia de anticorpos humanizada em células eucarióticas} por exemplo em células CHO ou em leveduras> dé origem ao 15 mAK humano correspondente} que se pode empregar para fins diagnósticos, para a profilaxia e para a terapia· at
A invenção refere—se sucessivamente a:
a) sequências de DNA purificadas e isoladas, que codifiquem para o mAK 6A4 ou para partes deste} incluindo os seus pro m at dutos de transcrição, bem como as combinações respectivas das sequências humanizadas}
b) estruturas de DNA e vectores que contenham total ou parcial mente estas sequências
c) cêl ulas procarióticas e eucarióticas transformadas com esse DNA*
d) polipéptidos ou partes deles exprimidos a partir dessas cê lulas apos transformaçao,
e) respectivas sequências de aminoácidos,
f) meios de diagnóstico, de profilaxia ou de terapêutica, que contenham os pêptidos ou as sequências de aminoácidos mencionadas em e), isoladamente ou em combinação,
g) um processo para a preparaçao por engenharia genética dos polipéptidos mencionados em (d) ou de partes destes,
h) bem como o epítopo ao qual se ligam os anticorpos codifica dos pelas sequências referidas em a).
Os restantes aspectos da invenção encontram— —se referidos nos exemplos seguintes, nas tabelas e nas rei— vindicaçoes da patente.
Exemplo ií Preparaçao do mAK 6A4 la) Purificação das proteínas de membrana externas a utili— zar para a imunização OMP F, H e I de Pseudomonas aeru—
A ginosa serotipo 12
Purificaram—se OMP F, Hg e I, como descrito por T. Mizuro e M. Kageyama no J. Biochem. 84, 179—25θ (1978)» a partir de Pseudomonas aeruginosa serotipo 12. Para tal, colheram—se as células na fase logarítmica tardia, abriram—se por tratamento com ultrassons, e recolheram-se as membranas celulares por centrifugação durante uma hora a 100 000 g. Extraíram—se as membranas celulares sucessivamente com 2% de SDS, 10% de glicerina e 2% de SDS e finalmente com NaCl 0,1 M. A fracçao insolóvel residual contem principalmente OMP F,
OMP H e um pouco de OMP I.
lb) Imunização de ratos Balb/c com OMP F, Hg e I
Para a imunização administrou—se a cada rato
de ΟΜΡ's purificadas (80 jj.1 ) numa suspensão com 20 de Al(OH)^, por via i.p·» ao 1Q dia» repetindo-se com a mesma dose aos dias 14 e 21« Após mais 4 semanas administrou-se a mesma dose e passados mais 3 dias removeram—se os baços· lc) Fusão celular
A*
Para a fusão celular utilizou-se essencialmen te o método de G. Kbhler e C. Milstein, Eur. J. Immunol. G»
Q
511-519 (1976)· Fundiram—se cerca de 1x10 células de baço» preparadas a partir dos baços removidos como indicado em (lb)» com 5x10' células de mieloma NS—1 (Kearny et al·» vide acima» fornecidas comercialmente pela American Type Culture Collecti— on ATCC NO TIB 18), em 2 ml de pliietilenoglicol 1500 a 50% (Serva» Heidelberg). Apés a fusão» misturaram—se as células com 1x10θ/ml de células de baço normais em meio mínimo de Dul becco modificado (MEM), que contém hipoxantina» aminopterina ** e timidina (HAT). A produção de anticorpos testou-se por meio do ensaio ”Enzyme—linked-Immuno-sorbent Assay (ELISA) a seguir descrito e obtiveram-se os clonos de interesse por meio
A* de diluição.
A* ld) Teste ELISA para a identificação de clonos secretores de anticorpos
Por meio de um teste ELISA directo determinou -se se e em que proporçoes os v&rios mAK se ligam ao antigene.
A*
Cobriram—se placas de microtitulaçao da firma Dynatech, Plochingen, de cloreto de polivinilo, com 96 orifícios, com 100 jil de sonicato de Pseudomonas aeruginosa (s«u. , diluição 1:200 com PBS * 4,5 jig/ml) do serotipo 12 e incubou-se durante a noite a 4°C. Lavaram-se depois as placas três vezes e saturaram-se durante 1 hora a 37°C com albumina de so ro bovino diluída em PBS. Apés nova lavagem cobriram—se os orifícios com uma película transparente e guardaram—se as pia cas a -20 C ate a sua posterior utilização.
- 4 Para cada clono a testar pipetaram-se (numa série de diluições logarítmica 1:2* 1:4* 1:8* I:l6* ·.·) 50jil de ascites (como amostra dupla)·
Como controle positivo utilizou-se soro de ra to policlonal de ratos imunizados 4 vezes com proteínas de membrana activadas (1:100, 1:1000* 1:10000). Como controle ne gativo utilizou—se o soro de ratos nao imunizados.
Como meio de diluição utilizou—se PBS (phos— phate buffered saline)(solução salina tamponizada com fosfato). Apos incubaçao das placas durante 1 hora a 37 C e tres lavagens adicionaram-se 50 jil de peroxidase conjugada anti—ra to—F(ab) na diluição de ΐ:5θθ· a ** Ο
Apos nova incubaçao durante 1 hora a 37 C e três lavagens adicionaram—se 50 /il do substracto o—fenilenodiamina (0,2% de ODP, 0,15% de H 0 ). Todos os reagentes para o teste ELISA provieram de um Kit NEI 5θ1 da firma NEN, New England Nuclear, Dreieich.
Apés nova incubaçao durante 3 minutos parou— -se a reacçao com 5θ /il de H^SO^ ^>5 M e determinou—se a extinção a 450 nm com um espectrémetro ELISA MR 58O da firma
Dynatech. Os clonos positivos apresentavam uma extinção ^0,2 0D.
A partir de 7 clonos da éltima escolha escolheu—se o clono que segrega mAK 6A4, para os testes seguintes uma vez que o mAK 6A4 apresenta as vantagens indicadas nas pégs. 2 e 3 e além disso ê fortemente segregado (cerca de 1% da fracção de gama-globulina no líquido de ascites ê constituída por mAK 6A4). 0 mAK 6A4 pertence à classe IgG2a e reage com OMP I.
Preparaçao de sonicato:
Cultivaram—se as bactérias do serotipo 0-12
- 5 ‘?.·ΐ.7ΟΕ?Ι!ΐ1!Ββ«»»Β»β
em caldo Tripticase-Soy. Lavaram—se depois três vezes e res— suspenderam-se em tampao de abertura dódico. Tratou-se a sus— pensão com ultrassons tres vezes durante 5 minutos (com 2 minutos de intervalo). Após nova centrifugação (1 vez com 5θθθ U/minuto/10 minutos) dividiu—se a camada sobrenadante em por— çoes e guardou—se a —20°C até à próxima utilização. A concentração de proteína nas placas cobertas era de 4,5 ^ig/orifício.
Exemplo 2! Isolamento e sequenciação do cDNA de mAK 6A4 codi ficante para as regiões variáveis
2a) Isolamento do cDNA
Separaram—se células de hibridoma 6A4, por centrifugação (10 minutos a 1500 g e 4°C), a partir de líqui do de ascites. A partir delas» de acordo com o método de H.
Domdey et al· , Cell 39» 611-621 (1984)» obteve-se o poli(A)+— RNA. Sintetizou-se o cDNA a partir de 15 de poli(A)+RNA» com um Kit de síntese de cDNA comercial (da firma Amersham).
cDNA de cadeia dupla e extremos planos guameceu-se com extremos oligo—dC de cadeia simples por meio do Kit de clonagem comercial da firma NEN, New England Nuclear, e anulou-se com o plasmideo pBR322 de extremos oligo-dG correspondente. Após transformaçao (Hanahan, D. (1983) J. Mol. Biol. 166, 557—580) das células E. coli K12 estirpe JM 109 adequadas (Yanisch—Per ron C. et al·, (1985) Gene, 33» 103-119)» obtiveram-se cerca de 12000 transformantes que hibridizam com o oligonucleótido 5’-CAAGGCATCCTAGAGTCAC-3’ (i)» marcado nos extremos com J p, para a identificação de clonos que contem cDNA da cadeia pesa da do subgrupo II B. Utilizou—se também para a hibridaçao o fragmento (li) HindIII—BamHI p—desoxinucleótidotrifosfato ”nick—transiaccionado” com 2850 pares de bases (bp), do plasmídeo Cl (W. 0. Weischert et al., (1982) Nuclein Acids Res.
10, 3827—3845)· (i) ê originário da região do alelo IgG2a* no rato (cadeia pesada)· (li) codifica para a região capa cons— tante (cadeia leve). As hibridações efectuaram-se como descri to por D. Woods, Focus 6, 1-2 (1984). Cerca de 4,2% e 1,6%
- 6 dos clonoe reagiram positivamente com as sondas específicas capa e gama* respectivamente·
2b) Sequenciaçao do cDNA
De entre as colónias contendo plasmídeos ante riormente obtidas escolheram—se aquelas que continham provavelmente cDNA* s completos da cadeia leve ou da cadeia pesada· Sequenciaram-se as inserções de DNA dos plasmídeos pUL5 (contendo o cDNA da cadeia leve) e pBH7 (contendo o cDNA da cadeia pesada) de acordo com métodos padrao (F. Sanger et al·* (1977) Proc. Natl. Acad· Sei. USA 74» 5^63—5^67)» modificados como descrito por E. Y. Chen e P. Seeburg, DNA 4, 165-170 (1935)· As sequências de nucleótidos de cada uma das regiões variáveis encontram-se indicadas na Tab. 1 (cadeia leve) e na Tab. 2 (cadeia pesada). Para as regiões constantes, as sequen cias de nucleótidos respectivas — já nao indicadas nas Tabe— las — sao idênticas com as conhecidas da literatura (cadei ga maS Schreier et al·, (19Ô1) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 78» 4495-4499» cadeia capa! Ρ. Ή. Hamlyn et al. , (1981) Nucleic Acids Res. 9* 4485—4494). 0 comprimento total das regiões codificantes para a cadeia leve á de 717bp e para a cadeia pesa da á de 1407 bp, representando os primeiros 20 aminoácidos da cadeia leve o Leader-peptid, de modo que a cadeia leve madu ra tem o comprimento de 259 aminoácidos. A cadeia pesada tem um Leader peptid” de 19 aminoácidos, tendo por isso a molócu la madura o comprimento de 450 aminoácidos.
3ο ο Té

Claims (5)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Processo para a preparação de anticorpos monoclonais (mAK) , caracterizado por se integrarem as sequências de DNA de acordo com as tabelas 1 e 2.
    TABELA 1
    -60 .
    -96 ctgcagggggggggggggACAGGCAQTGGGAGCAAGATGGATTCACAGGCCCAGGTTCTT MetAspSerGlnAlaGlnValLeu
    -36 ATATTGCTGCTGCTATGGGTATCTGGTACGTGTGGGGACATTGTGATGTCACAGTCTCCA -12 HeLeuLeuLeuLeuTrpValSerGlyThrCysGlyAspIleValMetSerGlnSerPro
    9 6 TCCTCCCTGGCTGTGTCAGCAGGAGAGAAGGTCACTATGAGCTGCAAATCCAGTCAGAGT 9 SerSerLeuAlaValSerAlaGlyGluLysValThrMetSerCysLysSerSerGlnSer
    156 CTGCTCAACAGTATAACCCGAAAGAACTTCTTGQCTTGGTACCAGCAGAAACCAGGGCAG 2 9 LeuLeuAsnSerIleThrArgLysAsnPheLeuAlaTrpTyrGlnGlnLysProGlyGln
    216 TCTCCTAAACTGCTGATCTACTGGGCATCCACTAGGGAATCTGGGGTCCCTGATCGCTTC 49 SerProLysLeuLeuIleTyrTrpAlaSerThrArgGluSerGlyValProAspArgPhe
    27 6 ACAGGCAOTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTGTGCAGGCTGAAGAC 69 ThrGlySerGlySerGlyThrAspPheThrLeuThrlleSerSerValGlnAlaGluAsp
    336 CTGGCAGTTTATTACTGCAAGCAATCTTATAATCTTCGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAG 8 9 LeuAlaValTyrTyrCysLysGlnSerTyrAsnLeuArgThrPheGlyGlyGlyThrLys
    396 CTGQAAATCAAACGGQCTGATGCTGCACCAACTGTATCGATCTTCCCACCATQCAGTGAG 109 LeuGluIleLysArgAlaAspAlaAlaProThrValSerTlf?pheProProSerSerGlu
    113
    TABELA 2
    -120 ctgcaggggggggggAAATACGATCAGCATCCTCTCCACAGACACTGAAAACTCTGACTC
    -57 ......
    -60 ACAATGGAAAGGCACTGGATCTTTCTCTTCCTGTTTTCAGTTACTGCAGGTGTCCACTCC -19 MetGluArgHisTrpIlePhelieuPheLeuPheSerValThrAlaGlyValHisâer
    1 CAGGTCCAGCTTCAGCAGTCTGGGGCTGAACTGGCAAAACCTGGGGCCTCAGTGAAGATG j 1 GlnValGlnLeuGlnGlnSerGlyAlaGluLeuAlaLysProGlyAlaSerValLysMet
    I 1 1
    61 TCCTGCAAGGCTTCTGGCTACACCTTTACTGCCTACTGSATGCACTQGGTAAAACAGAGG
    21 SerCysLysAlaSerGlyTyrThrPheThrAlaTyrTrpMotHisTrpValLysGlnArg
    121 CCTGGACAGGGTCTGGAATGGATTGGATACATTAATCCTAACACTGGTTATACTGAATAC 41 ProGlyGlnGlyLeuGluTrpIleGlyTyrlleAsnProAsnThrGlyTyrThrGluTyr
    181 AATCAGAACTTCAAGGACAAGGCCACATTGACTGCAGACAAATCCTCCAGCACAGCCTAC 61 AsnGlnAspPheLysAspLysAlaThrLeuThrAlaAspLysSerSerSerThrAlaTyr
  2. 2 41 ATGCAACTGAGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCAGTCTATTATTGTACAAGAAGCTAC 81 MetGlnlieuSerSerLeuThrSerGluAspSerAlaValTyrTyrCysThrArgSerTyr
    301 TATAACTACGAGGGGGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA 101 TyrAsnTyrGluGlyAlaMetAspTyrYrpGlyGlnGlyThrSerValThrValSerSer
    361 GCCAAAACAACAGCCCCATCGGTCTATCCACTGGCCCCTGTGTGTGGAGATACAACTGGC
    121 AlaLysThrThrAlaProSerValTyrProLeUAlaProValCysGlyAspThrThrGly que codificam para as regiões variáveis dos anticorpos ou para partes delas, numa estrutura de anticorpo apropriada, e se efectuar a sua expressão em sistemas de expressão adequados.
    2 Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por as regiões constantes ou partes destas serem de origem murina.
  3. 3. Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por as regiões constantes ou partes destes serem de origem humana.
    ί
  4. 4. Processo para a preparação de meios de diagnóstico, caracterizado por se utilizarem anticorpos monoclonais (mAK) preparados de acordo com as reivindicações 1, 2 ou 3.
  5. 5. Processo para a preparação de composiçoes farmacêuticas, caracterizado por se incorporarem ingredientes activos farmacêuticos com um ou mais mAK' s preparados de acordo com qualquer das reivindicações 1, 2 ou 3.
    5. Processo para a preparação de composições farmacêuticas, caracterizado por se incorporarem, como ingredientes activos mAK s quando preparados de acordo comqualquer das reivindicações ι , ? ou 3 com veículos e/ou aditivos farmacológicos habituais adequados.
    í
    A requerente reivindica a prioridade do pedido alemão apresentaatdo em 19 de Abril de 19S3, sob o número P ' 38 13 023.8.
    Lisboa, 18 de Abril de 1989 acrvc; oficiai, da propiw.dadi; indusiiual
PT90296A 1988-04-19 1989-04-18 Processo para a preparacao de anticorpos monoclonais contra pseudomonas aeruginosa e de composicoes farmaceuticas que os contem PT90296B (pt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3813023A DE3813023A1 (de) 1988-04-19 1988-04-19 Monoklonaler antikoerper gegen pseudomonas aeruginosa, seine herstellung und verwendung

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PT90296A PT90296A (pt) 1989-11-10
PT90296B true PT90296B (pt) 1995-01-31

Family

ID=6352325

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PT90296A PT90296B (pt) 1988-04-19 1989-04-18 Processo para a preparacao de anticorpos monoclonais contra pseudomonas aeruginosa e de composicoes farmaceuticas que os contem

Country Status (10)

Country Link
EP (1) EP0338395B1 (pt)
JP (1) JPH0213376A (pt)
KR (1) KR890016165A (pt)
AT (1) ATE116374T1 (pt)
AU (1) AU622446B2 (pt)
DE (2) DE3813023A1 (pt)
DK (1) DK186289A (pt)
ES (1) ES2065932T3 (pt)
FI (1) FI891816A (pt)
PT (1) PT90296B (pt)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0329196A (ja) * 1989-05-09 1991-02-07 Advanced Micro Devicds Inc センス増幅器
CA2038978A1 (en) * 1990-04-06 1991-10-07 Richard P. Darveau Antibodies for the treatment and diagnosis of pseudomonas aeruginosa infections
EP1946768A4 (en) * 2005-10-28 2009-11-11 Meiji Seika Kaisha OUTER COAT PROTEIN PA5158 OF PSEUDOMONAS AERUGINOSA
EP3211011A1 (en) * 2007-11-16 2017-08-30 Nuvelo, Inc. Antibodies to lrp6
CN103038258B (zh) 2010-05-06 2017-02-15 诺华股份有限公司 用于治疗低密度脂蛋白相关蛋白质6(lrp6)的抗体的组合物及使用方法
AU2011249782B2 (en) 2010-05-06 2014-10-02 Novartis Ag Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein - related protein 6 (LRP6) multivalent antibodies
CN104039830A (zh) 2011-11-04 2014-09-10 诺华股份有限公司 低密度脂蛋白相关蛋白6(lrp6)-半寿期延长物构建体

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0256713A3 (en) * 1986-08-06 1989-02-15 Merck & Co. Inc. Therapeutic human antipseudomonas aeruginosa antibodies
JPS63267295A (ja) * 1986-12-03 1988-11-04 Sumitomo Chem Co Ltd ヒト抗体、抗体遺伝子及び対応する組換え体
US4870161A (en) * 1987-09-25 1989-09-26 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Reagents and probes for distinguishing and isolating different GTP-binding proteins
DK8189A (da) * 1988-01-12 1989-07-13 Bunge Australia Antigen-antistof-konjugater, deres fremstilling og anvendelse
AU5435990A (en) * 1989-04-13 1990-11-05 United States of America, as represented by the Secretary, U.S. Department of Commerce, The Monoclonal antibodies to human glutathione s transferase pi

Also Published As

Publication number Publication date
DK186289D0 (da) 1989-04-18
FI891816A0 (fi) 1989-04-17
AU3310189A (en) 1989-10-26
DE3813023A1 (de) 1989-11-16
DK186289A (da) 1989-12-18
ES2065932T3 (es) 1995-03-01
EP0338395A3 (en) 1990-03-28
PT90296A (pt) 1989-11-10
JPH0213376A (ja) 1990-01-17
AU622446B2 (en) 1992-04-09
ATE116374T1 (de) 1995-01-15
EP0338395B1 (de) 1994-12-28
DE58908815D1 (de) 1995-02-09
FI891816A (fi) 1989-10-20
EP0338395A2 (de) 1989-10-25
KR890016165A (ko) 1989-11-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK175703B1 (da) Human vævsfaktor-relaterede DNA-segmenter, polypeptider og antistoffer, hybridomaer, bestemmelsesmetoder, diagnostiske systemer og metoder, isoleringsmetoder og fremstillingsmetoder
JP2638652B2 (ja) カケクチンと反応するモノクロナール抗体
ES2453941T3 (es) Anticuerpos monoclonales contra la proteína beta amiloide y usos de los mismos
RU2264413C2 (ru) РЕКОМБИНАНТНОЕ АНТИТЕЛО К ЧЕЛОВЕЧЕСКОМУ ИНТЕРЛЕЙКИНУ 1β
ES2305110T3 (es) Anticuerpos contra la il-1 beta humana.
KR900004420B1 (ko) 인터류킨-1에 대한 항체
ES2213148T3 (es) Anticuerpo monoclonal dirigido contra el vih.
DE69026627T2 (de) Antikörperantagonisten gegen humanes interleukin-4
ES2356896T3 (es) Anticuerpos humanizados contra icam-1, su producción y usos.
JP6865826B2 (ja) インターロイキン１７ａを標的とする抗体、その製造方法及び応用
DE69010001T2 (de) Synthetisches pseudomonas aeruginosa pilin-peptid und verwandte impfstoffe und diagnostika.
JP7517999B2 (ja) 抗ＩＬ－２３ｐ１９抗体およびその使用
ES2219802T3 (es) Anticuerpo contra el glangliosido gm2, injertado en la zona de determinacion de complementariedad humana (cdr).
EP0256321A1 (de) Expressionsprodukte des menschilchen Papillomvirus Typ 18, für diese Proteine spezifische Antikörper und diese Antikörper bzw. entsprechende DNA enthaltende Diagnostika
JPH0228199A (ja) ヒト神経成長因子
DE69628336T2 (de) Behandlung und diagnose helicobacter pylori infektionen
DE69115917T2 (de) Humane gammainterferonantagonisten
PT90296B (pt) Processo para a preparacao de anticorpos monoclonais contra pseudomonas aeruginosa e de composicoes farmaceuticas que os contem
CN110483640B (zh) 白介素-6r的人源化单克隆抗体、其编码基因及应用
CN109517064B (zh) 白介素-6的人源化单克隆抗体、其编码基因及应用
JPH03172183A (ja) 脳因子発現系
PT85247B (pt) Processo para a preparacao de anticorpos monoclonais contra estirpes de "pseudomonas aeruginosa"flageladas e de composicoes que os contem
JPS611392A (ja) ＩｇＥ結合因子活性を示すポリペプチドをコ−ドするｃＤＮＡクロ−ン
JP4044733B2 (ja) ベロ毒素ｉｉを認識するヒト型化抗体、および該抗体を産生する細胞株
JPH0226959B2 (pt)

Legal Events

Date Code Title Description
FG3A Patent granted, date of granting

Effective date: 19940719

PC3A Transfer or assignment

Free format text: 970814 CHIRON BEHRING GMBH AND CO. DE

MM4A Annulment/lapse due to non-payment of fees, searched and examined patent

Free format text: MAXIMUM VALIDITY LIMIT REACHED

Effective date: 20090719