PT87191B - Processo para a preparacao de nucleosidos - Google Patents

Description

A presente invenção refere-se a 6 substi tuído-2’,3’-didesoxinucelósidos, aos seus derivados farmacêuticamente aceitáveis e ã sua utilização na terapêutica, particularmente na profilaxia ou no tratamento de certas infecções víricas.

A SIDA ê uma doença imunosupressora ou imunodestrutiva que predispõe os indivíduos a infecções oportunistas fatais. A SIDA está característicamente associada com uma diminuição progressiva das células T, especialmente das células da sub-série de indutoras auxiliares que possuem os marcadores de superfície 0Kt\

Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) tem sido reprodutivelmente isolado de doentes com SIDA ou com sinais e sintomas que frequentemente a precedem. 0 HIV é patogénico para a célula, parece infectar e destruir preferencialmente as células T que possuem os marcadores OKT^ e é agora geralmente reconhecido, que o HIV é o agente etiolégico da SIDA.

Desde a descoberta do HIV como agente etiolégico da SIDA, têm sido feitas numerosas propostas de agentes quimioterapêuticos anti-HIV que podem ser eficazes no tratamento dos doentes com SIDA. Assim, por exemplo a Patente Europeia Especificada N2.196185 descreve o composto 3’-azido-3’-desoxitimidina ( que possui a designação aprovada de zidovudina), os seus derivados farmacêuticamente aceitáveis e a sua utilização no tratamento de infecções humanas por retrovírus compreendendo a SIDA e situações clínicas associadas.

A Patente Europeia Publicada N2.0206497 refere-se em geral aos nucleósidos de purina para utilização no tratamento de infecções por HIV e situações relacionadas. A referida publicação em particular divulga os compostos 2,6-diaminopurino-9-/Ò-D-2¹-3’-didesoxirribofuranosidos para o tratamento de infecções por HIV.

Os requerentes verificaram que certos com postos 6 substituído-2'-3’-didesoxinucleósidos, como adiante referidos, são úteis para o tratamento ou profilaxia de infecções víricas, particularmente de infecções retrovíricas e especialmente da SIDA.

Têm sido descritos certos 6 substituídos-nucleósidos de purina e em particular o composto 6-metilaminopurina-9-/5-D-2’-3'-desoxirribofuranosido, referido a seguir quanto à sua utilização no tratamento de infecções por HIV e situações relacionadas. Tem sido divulgado em Bioorg Khim 9 (1) 52-59, 1983.

Num primeiro aspecto da presente invenção, proporcionam-se os compostos 6 substituídos-2’-3¹-didesoxinucleósidos tendo a fórmula geral seguinte (I)

na qual

Rj. representa um átomo de hidrogénio ou um grupo amina; e

R-2 representa um átomo de halogéneo (por exemplo cloro), um grupo alcoxi (por exemplo propiloxi ou isopropoxi), opcionalmente substituído por exemplo, por um grupo cicloalquilo (por exemplo ciclopropilmetoxi); um grupo cicloalquiloxi Cg.g (por exemplo ciclobutiloxi ou ciclopentiloxi); um grupo ariloxi (por exemplo feniloxi), aralquilo (por exemplo benzi lo) ou aralquiloxi (por exemplo benziloxi) nos quais o grupo arilo pode ser opcionalmente substituído por um grupo alquilo inferior, hidroxi ou um átomo de halogéneo; um grupo cicloalquiltio ’ ^um S^ruP° alquiltio um grupo ariltio ou aralquiltio nos quais o grupo arilo pode estar opcionalmente substituído por um grupo alquilo inferior, hidroxi ou um átomo de halogéneo ; ou R₂ apresenta um grupo heterocíclico contendo um átomo de oxigénio ou um ou dois átomos de azoto e três a sete átomos de carbono com ligações duplas opcionais no anel (por exemplo piperidino, pirrolidino ou furfurilo)opcionalmente contendo um heteroátomo de enxofre e/ou de oxigénio e opcionalmente substituído no anel por um ou mais grupos de alquilo inferior, hidroxi ou de halogéneo, um grupo cicloalquiltio Cg.g, aralquiltio, no qual o grupo arilo pode ser substituído por um grupo alquilo inferior, hidroxi ou um átomo de halogéneo ;

ou

R-2 representa um grupo imidazoliltio no qual a parte de imidazolilo pode ser substituída por um grupo alquilo inferior e/ou C substituído por um grupo ni tro ;

ou

R-2 representa um grupo amina mono ou di-substituído por um grupo alquilo (por exemplo metilo ou etilo), alcoxi (por exemplo metoxi) hidroxi-alquilo

Cq_6 (P^or exemplo hidroxi-etilo) e/ou cicloalquilo (por exemplo ciclopropilo ou ciclopentilo), um grupo arilo ( por exemplo fenilo), aralquilo (por exemplo benzilo) em que o grupo arilo pode opcionalmente ser substituído por um grupo alquilo inferior, um grupo hidroxi ou um átomo de halogéneo, um grupo alilo opcionalmente substituído por grupos mono ou di-alquilo ou alcoxi (por exemplo dimetilalilo) ;

e

Rg representa um átomo de hidrogénio ou um grupo amina, e seus derivados farmacêuticamente aceitáveis diferentes dos compostos com a fórmula (I) em que

R^ e R3 representam um átomo de hidrogénio e R2 representa um grupo metoxi, metiltio ou metilamina.

Os exemplos de grupos amina substituídos representados por R2 na fórmula (I) compreendem os grupos etilamina, etilmetilamina, ciclopropilamina e isopropilamina.

As referências anteriores a grupos de alquilo inferior designam os grupos que contêm de 1 a 6 átomos de carbono preferivelmente grupos metilo ou etilo. As referências a átomos de halogéneo compreendem os átomos de cloro, bromo, iodo e flúor, sendo particularmente preferidos os átomos de cloro e de iodo.

As classes preferidas dos compostos com a fórmula (I) incluem as classes em que R^ e R^ representam hidrogénio e R2 representa um grupo amina substituído, por exemplo um grupo monocicloalquil amina, um grupo mono

ou di-alquil g amina ou um grupo heterocíclico tal como o grupo piperídino ou o grupo pirrolidino.

Os compostos seguintes são os compostos preferidos da presente invenção:

1. 6-N-Piperidinopurino-9-$ -D-2'-3’-didesoxirribofuranosido

2. 6-Cloropurino-9-/0 -D-2', 3'-didesoxirribofuranosido

3. 6-Etilaminopurino-9-β-D-2¹,3’-didesoxirribofuranosido

4. 6-Etilmetilamino-9-_//3 -D-2',3 ’-didesoxirribofuranosido

5. 6-Iodopurino-9-3 -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

6. 6-Ciclopropilmetilaminopurino-9-/3 -D-2',3’-didesoxirribo furanosido

7. 6-Isopropilaminopurino-9-/3 -D-2’,3'-didesoxirribofuranosido

8. Trianiprino-9-/3 -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

9. 2-Amino-6-n-propoxipurino-9-/? -D-23'-didesoxirribofuranosido

10. 6-Etiltiopurino-9-y$ -D-2’,3’-didesoxirribofuranosido

11. 2-Amino-6-benziltiopurino-9-/3 -D-2’,3’-didesoxirribofura nosido

12. 6-Etoxipurino-9-/^ -D-23’-didesoxirribofuranosido

13. 6-Dimetilaminopurino-9-/5-D-2’,3’-didesoxirribofuranosido

14. 6-Hidroxi-etilaminopurino-9-/^ -D-2’,3’-didesoxirribofuranosido

15. 6-Ciclopropilaminopurino-9y$ -D-2’,3'-didesoxirribofuranosido

16. 6-Ciclopentilaminopurino-9-/^ -D-2’^'-didesoxirribofuranosido

17. 2-Amino-6-metoxipurino-9-_j/^ -D-2'^'-didesoxirribofuranosido

18. 6-n-Propoxipurino-9-/^ -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

19. 6-n-Butoxipurino-9-p -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

20. 6-Ciclopropilmetoxipurino-9-^) -D-2',3'-didesoxirribofura· nosido

21. 6-Ciclopentiloxipurino-9-p -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

6-Ciclohexiloxipurino-9-/o -D-2’,3'-didesoxirribofuranosido

6-Ciclobutilaminopurino-9-/^ -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

6-Di-etilaminopurino-9-/^ -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

6-Pirrolidinopurino-9-/3 -D-2', 3'-didesoxirribofuranosido

6-Morfolinopurino-9--D-2',3¹-didesoxirribofuranosido 6-y,y-Dimetilalilaminopurino-9-/?-D-2',3'-didesoxirribofuranosido

6-Furfurilaminopurino-9-^ -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

6-Benzilmercaptopurino-9-/$ -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

6-Anilinopurino-9-/^ -D-2', 3' -didesoxirribofuranosido

2-Amino-6-etoxipurino-9--D-2',3'-didesoxirribofuranosido

2,6,8-Triaminopurino-9-^/3 -D-2' ^'-didesoxirribofuranosido

2-Amino-6-benzilaminopurino-9y3 -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

2-Amino-6-ciclopropilaminopurino-9-/3-D-2',3'-didesoxirribofuranosido

2-Amino-6-metilaminopurino-9-/$ -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

2-Amino-6-n-propoxipurino-9-_/$ -D-2',3'-didesoxirribofura nosido

6-Benzilaminopurino-9-fé-D-2',3'-didesoxirribofuranosido 6-. Isopropoxipurino-9-/3 -D-2',3'-didesoxirribofuranosido 6-Propilaminopurino-9-/3 -D-2',3'-didesoxirribofuranosido 6-Ciclo-hexilamino-9- /^-D-2',3'-didesoxirribofuranosido 6-Metilaminopurino-9-/3 -D-2',3'-didesoxirribofuranosido

Os compostos 1,6,13,15,16,25 e 41 atrás referidos sao particularmente preferidos por causa da sua acti vidade anti-HIV ser surpreendentemente elevada.

Os compostos com a fórmula (I) atrás referida e os seus derivados farmacêuticamente aceitáveis compreendendo também o composto com a fórmula (I) em que

R^ representa hidrogénio e

R₂ representa um grupo metilamina,atrás mencionado na referência de Bioorg Khim são referidos a seguir como os compostos de acordo com a presente invenção.

Num aspecto da invenção proporcionam-se os compostos de acordo com a invenção para a utilização na terapêutica médica, particularmente na profilaxia e tratamento de infecções retrovíricas.

Exemplos de infecções retrovíricas que podem ser prevenidas ou tratadas de acordo com a presente invenção, compreendem as infecções retrovíricas humanas tais como as infecções por Vírus da Imunodeficiência Humana, por HIV-2 e por vírus das células T linfotrópico humana (HLTV) por exemplo : HTLV-I ou HTLV-IV. Os compostos de acordo com a invenção são especialmente úteis para a profilaxia ou para o tratamento da SIDA e de situações clínicas relacionadas tais como o complexo relacionado com a SIDA (ARC), a linfadenopatia generalizada progressiva (PGL), as situações neurológicas relacionadas com a SIDA, tais como a esclerose múltipla ou a paralesia tropical, as situações de anticorpos positivos anti-HIV e as situações de HIV positivos, o sarcoma de Kaposi e a trombocitopénia púrpura. Os compostos podem também ser utilizados na prevenção e no tratamento da psoríase.

Em mais um aspecto da invenção compreendem-se :

a) 0 método para a profilaxia ou para o tratamento de infecções retrovíricas que consiste em tratar o doente com uma quantidade terapêuticamente eficaz de um composto de acordo com a invenção.

b) A utilização de um composto de acordo com a invenção na composição de um medicamento para a profilaxia ou para o tratamento de qualquer das infecções ou situações atrás mencionadas.

“7

Pela designação de um derivado farmacêuticamente aceitável designa-se qualquer sal farmacêuticamente aceitável, éster, ou sal do éster de um composto de acordo com a invenção ou qualquer outro composto que administrado ao beneficiário é capaz de proporcionar (directa ou indirectamente) um composto de acordo com a invenção, ou um seu metabolito activo antiviral ou um seu resíduo.

Os ésteres preferidos dos compostos de acordo com a invenção compreendem ésteres de ácido carboxílicos em que a parte do éster não carbonilo é escolhida de entre uma cadeia de alquilo linear ou ramificada por exemplo n-propilo, t-butilo, n-butilo, um grupo alcoxi-alquilo (por exemplo :metoximetilo), aralquilo (por exemplo :benzilo), arilç) xi-alquilo (por exemplo fenoximetilo), arilo (por exemplo:fenilo opcionalmente substituído por um átomo de halogêneo, um grupo alquilo ou alcoxi C^_^); ésteres sulfonatos tais como alquil - ou aralquilsulfonil (por exemplo: metanosulfonilo); ésteres de aminoácidos (por exemplo: L-valilo ou L-isoleucilo); e ésteres mono, di ou tri-fosfatos.

Com respeito aos ésteres atrás descritos a menos que seja de outro modo especificado, qualquer parte de alquilo presente contém vantajosamente, de 1 a 18 átomos de carbono, particularmente de 1 a 4 átomos de carbono. Qualquer parte de arilo presente nesses ésteres compreende vantajosamente um grupo fenilo.

Qualquer referência a algum dos compostos atrás referidos também se inclui a referência a um seu sal farmacêuticamente aceitável.

Exemplos de sais farmacêuticamente aceitáveis dos compostos de acordo com a invenção e dos seus derivados farmacêuticamente aceitáveis compreendem sais de base, por exemplo: derivados de bases adequadas, tais como sais de metais alcalinos (por exemplo: de sódio), de metais alcalino - terrosos (por exemplo: de magnésio), de amónia e de NX^ (em que X representa um grupo alquilo C^_^). Os sais fisiológicamente aceitáveis de um átomo de hidrogénio ou de um grupo amina compreendem os sais de ácidos carboxílicos orgânicos tais como os ácidos acético, láctico, tartárico, má8

lico,isetiónico, lactobiónico e succínico; de ácidos sulfónicos orgânicos tais como os ácidos metanosulfónico, etanosulfónico, benzenosulfónico e p-toluenosulfónico e de ácidos inorgânicos tais como os ácidos clorídrico, sulfúrico, fosfórico e sulfâmico. Os sais fisiológicamente aceitáveis de um composto com um grupo hidroxi compreende o anião do composto ~ ~ 4referido em combinação com um catiao adequado tal como Na ,

X -L

NH^ e NX^ ( em que X representa um grupo alquilo ·

Os exemplos específicos de derivados far macêuticamente aceitáveis do composto com a fórmula (I) que podem ser utilizados de acordo com a presente invenção compreendem o sal monossódico e os ésteres 5’ seguintes: monofosfato; monofosfato dissódico; difosfato; trifosfato; acetato; 3-metil-butirato; octanoato; palmitato;3-cloro-benzoato; benzoato; 4-metil-benzoato; hidrogeno-succinato; pivalato; propionato; valerato e mesilato.

Os compostos de acordo com a invenção atrás referidos e os seus derivados farmacêuticamente aceitáveis podem ser utilizados em combinação com outros agentes te_ rapêuticos para a profilaxia ou tratamento das infecções ou situações atrás referidas. Exemplos de mais estes agentes terapêuticos compreendem os que são eficazes para o tratamento ou profilaxia de infecções por HIV ou situações associadas tais como a 3'-azido-3’-desoxitimidina (zidovudina), outros 2’,3’-didesoxinucleósidos tais como a 2',3'-didesoxicitidina, 2’,3’-didesoxiadevosina e 2',3’-didesoxi-inosina, nucleósidos acíclicos (por exemplo: aciclovir), interferões tais como o & -interferão, inibidores de excreção renal tal como o probenecide, inibidores do transporte de nucleósidos tal como o dipiridanol, assim como imunomodulares tal como a interleucina II e factores estimulantes de colónias de granulócitos macrófagos. Os compostos que fazem parte desta terapêutica de combinação podem ser administrados simultâneamente, tanto em formulações separadas como combinadas, ou administrados em tempos diferentes, por exemplo: sequencialmente de tal modo que seja alcançado o efeito combinado.

Os compostos de acordo com a presente in vençao, também referidos como o ingrediente activo, podem ser

administrados na terapêutica por qualquer via adequada compreendendo a via oral, rectal, nasal, tópica (incluindo bucal e sub-lingual), vaginal e a parentérica (incluindo a subcutânea, intramuscular, intravenosa e intradêrmica). Deverá ser considerado que a via preferida, deverá variar com a situação e idade do beneficiário, a natureza da infecção e a escolha do ingrediente activo.

Em geral a dose adequada deverá estar compreendida entre 3,0 a 120 mg por kilograma de peso do ben£ ficiário por dia, preferivelmente compreendida entre 6 a 90mg por kilograma de peso por dia e mais preferivelmente compreen dida entre 15 a 60 mg por kilograma de peso por dia.

A dose desejada ê apresentada preferiveJL mente, como duas, três, quatro, cinco, seis ou mais sub-doses administradas a intervalos adequados através do dia. As sub-doses podem ser administradas em formas de unidades de dosagem, por exemplo, contendo 10 a 1500 mg, preferivelmente contendo 20 a 1000 mg e mais preferivelmente contendo 50 a 700 mg de ingrediente activo por forma de unidade de dosagem.

ingrediente activo idealmente, deverá ser administrado de modo a alcançar o pico de concentração plasmática do composto activo de cerca de 1 a cerca de 75 MM, preferivelmente de cerca de 2 a 50 yUM, mais preferivelmente de cerca de 3 a cerca de 30 ^jM. 0 pico de concentração plasmática pode ser atingido, por exemplo, por injecção intravenosa de 0,1 a 5% de solução do ingrediente activo, opcionalmente em soro fisiológico, ou oralmente administrando uma pílula grande contendo cerca de 1 a 100 mg/kg do ingrediente activo. Os Níveis sanguíneos desejados podem ser mantidos por infusão contínua para proporcionar cerca de 0,01 a 5,0 mg/kg/ /hora ou por infusões descontínuas contendo cerca de 0,4 a 15 mg/kg do ingrediente activo.

Embora seja possível administrar o ingrediente activo isoladamente ê preferível apresentá-lo numa com posição farmacêutica.

As formulações da presente invenção compreendem pelo menos um ingrediente activo, como atrás definido, juntamente com um ou mais veículos aceitáveis e opcional10

mente com outros agentes terapêuticos.

Cada veículo deverá ser aceitável no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação e não prejudicar o doente.

As composições compreendem as que são adequadas para administração oral, rectal, nasal, tópica (in cluindo a bucal e a sublingual), vaginal ou parentêrica (incluindo a subcutânea, intramuscular, intravenosa e intradérmica).

As formulações podem ser adequadamente apresentadas em formas de unidade de dosagem e podem ser preparadas por qualquer dos métodos conhecidos na ciência farmacêutica. Esses métodos incluem o passo de associar o ingrediente activo com o veículo que constitui um ou mais ingredientes adjuvantes. Em geral, as composições são preparadas juntando uniformemente o ingrediente activo com os veículos líquidos ou os veículos sólidos finamente divididos ou a ambos posteriormente se necessário moldando o produto.

As formulações da presente invenção adequadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades descontínuas tais como cápsulas, hóstias ou comprimidos que contêm uma quantidade pré-determinada do ingrediente activo; podem ser apresentadas como um pó ou em grânulos; como uma solução ou uma suspensão num líquido aquoso ou não aquoso; ou como uma emulsão líquida de óleo em água ou uma emulsão líquida de água em óleo. 0 ingrediente activo pode também ser apresentado na forma de uma pílula grande, de electuário ou de uma pasta.

Um comprimido pode ser preparado por com pressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes adjuvantes. Os comprimidos podem ser preparados por compressão numa máquina adequada do ingrediente activo numa forma finamente dividida tal como um pó ou em grânulos, opcional, mente misturado com um aglutinante (por exemplo: povidona,gelatina, hidroxipropilmetilcelulose), lubrificador, diluente inerte, conservante, desagregante (por exemplo: amido glicolato de sódio, povidona recticulada, carboximetilcelulose sódica recticulada) agentes tensioactivos ou agentes disperso11

res. Os comprimidos moldados podem ser preparados por moldagem numa máquina adequada de uma mistura húmida do composto em pó com um diluente líquido inerte. Os comprimidos podem ser opcionalmente revestidos ou gravados e podem ser formulados para proporcionar apenas a libertação lenta ou controlada do ingrediente activo utilizando por exemplo, hidroxipropilmetilcelulose em proporções variadas para proporcionar o perfil de libertação desejado. Os comprimidos podem opcionalmente ter um revestimento entérico, para proporcionar a libertação nas secções do intestino e não no estômago, o que é particularmente vantajoso para os derivados de nucleósidos de purina pois estes compostos são susceptíveis à hidrólise ácida.

As formulações adequadas para a adminis_ tração tópica na boca compreendem as formas de pastilhas com o ingrediente activo numa base aromatizada, habitualmente sacarose e acácia em goma adraganta ; de pastilhas com o ingrediente activo numa base inerte tal como gelatina e glicerjL na ou sacarose e acácia; e de loções para a boca com o ingrediente activo num veículo líquido adequado.

As formulações para a administração rectal podem ser apresentadas como supositórios com uma base adequada compreendendo por exemplo, manteiga de cacau ou um salicilato.

As formulações adequadas para a administração vaginal podem ser apresentadas como óvulos, tampões, cremes, geles, espumas ou formulações de aerossoles contendo adicionalmente ao ingrediente activo os veículos adequados conhecidos na ciência farmacêutica .

As formulações adequadas para a administração parentérica compreendem as soluções injectáveis estéreis isotónicas aquosas e não aquosas que podem conter anti-oxidantes. Soluções tampão, bacteriostáticos e solutos que tornem a composição isotónica com o sangue de um possível beneficiário; e as suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem conter agentes suspensores e agentes espessantes.

As formulações podem ser apresentadas em recipientes selados de dose unitária ou de dose múltipla,por

exemplo, em ampolas e em frascos-ampolas e podem ser acondicionados em condições de secagem por congelação (liofilizados) requerendo apenas a adição do veículo líquido estéril, por exemplo água para injectáveis, imediatamente antes da admini£ tração.

As soluções e suspensões injectáveis extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós, grânulos e > comprimidos estéreis da maneira anteriormente descrita. I

As composições em unidades de dosagem são as que contêm uma dose diária ou única, uma sub-dose diária, como atrás descrito, ou uma sua fracção adequada de um ingrediente activo de acordo com a presente invenção.

Os compostos de acordo com a invenção podem também ser apresentados para utilização na forma de composições veterinárias, que podem ser preparadas, por exemplo, pelos métodos habituais da ciência farmacêutica.

Deverá ser considerado que adicionalmente aos ingredientes particulares atrás mencionados, as formulações da presente invenção podem incluir outros agentes habituais da ciência farmacêutica com respeito ao tipo de formulação em causa, por exemplo, as que são adequadas para administração oral podem incluir agentes adicionais como edulcorantes, espessantes e aromatizantes.

A presente invenção refere-se ainda ao processo para a preparação de um composto de acordo com a invenção e dos seus derivados farmacêuticamente aceitáveis compreendendo :

(A) fazer reagir um composto com a fórmula :

Rp R₂ e Rg têm as significações anteriores e

A representa um grupo precursor do grupo hidroxi ou de um seu grupo derivado farmacêuticamente aceitável, com um agente adequado ou sob condições adequadas para converter o grupo precur sor referido no correspondente grupo desejado ; ou (B) fazer reagir uma base de purina com a fórmula

B - Η (III) na qual

B representa a parte de purina adequada de um composto de acordo com a invenção, ou um seu equivalente funcional, com um composto adequado para introduzir o anel de ribofura nosilo desejado na posição 9 da base de purina com a fórmula (III);

e simultaneamente ou posteriormente, realizar uma ou mais das conversões opcionais seguintes :

(i) quando for preparado um composto com a fórmula (I), convertê-lo num seu derivado farmacêuticamente aceitável, (ii) quando for preparado um derivado farmacêuticamente aceitável de um composto com a fórmula (I), converter o derivado referido num composto com a fórmula (I) ou num seu derivado diferente.

No processo de acordo com a invenção atrás descrito, deve ser considerado que os precursores dos compostos com a fórmula (I) assim como os agentes e condições atrás referidos, devem ser escolhidos de entre os conhecidos na química de síntese de nucleósidos. Exemplos de métodos de

conversão são descritos posteriormente para orientação e deverá ser entendido que podem ser modificados do modo habitual dependendo do composto com a fórmula (I) desejado. Em particular, quando é descrita uma conversão que pode resultar de outro modo numa reacção não desejada dos grupos instáveis nesse caso os grupos podem ser protegidos do modo habitual, com a consequente remoção dos grupos de protecção após a realização da conversão.

Com respeito ao processo da alínea (A). A pode representar um grupo hidroxi protegido por exemplo: um grupo de éster do tipo atrás referido em relação ã fórmula (I), particularmente um grupo acetóxi, ou um grupo de éter tal como um grupo tri-alquilsililoxi por exemplo: um grupo t-butildimetilsililoxi ou um grupo aralcóxi por exemplo: um grupo trifenilmetoxi. Os grupos referidos podem ser convertidos por exemplo por hidrólise no desejado grupo hidroxi ou por trans-esterificação, num grupo éster alternativo.

Com respeito ao processo da alínea (B) pode ser realizado por exemplo por tratamento de uma base de purina com a fórmula (III) adequada ou de um seu sal ou de um seu derivado protegido, com 3’-desoxitimidina por exemplo na presença de uma enzima de transferência de pentosilo adequada.

Um composto com a fórmula (I) pode ser convertido num fosfato farmacêuticamente aceitável ou num ou tro éster pela reacção com respectivamente, um agente de fosforilação, por exemplo: POCl^ ou um agente de esterificação adequado, por exemplo: um halogeneto de ácido ou um anidrido de ácido. 0 composto com a fórmula (I), compreendendo os seus ésteres, podem ser convertidos nos seus sais farmacêuticamente aceitáveis de modo habitual, por exemplo: por tratamento com uma base adequada. Um éster ou um sal de um composto com a fórmula (I) pode ser convertido no composto inicial, por exemplo: por hidrólise.

Os Exemplos seguintes são referidos com fins de ilustração e não devem ser considerados como possuindo carácter limitativo da invenção. A designação ingrediente activo utilizado nos Exemplos refere-se a um composto com a fórmula (I) ou a um seu derivado farmacêuticamente aceitável.

Exemplo 1

6-N-Piperidinopurino-9- β-D-2¹,3'-didesoxirribofuranosido

Foi dissolvido o composto 6-N-piperidinopurina (2,41 mmol, 0,5 g, Sigma Chemicals, St. Louis MO) em 10 ml de dimetilsulfóxido com aquecimento.

Após arrefecimento à temperatura ambiente foi adicionado o composto 3’-desoxitimidina (3,62 mmol, 0,82 g) (Howitz, J.P. e outros, J. Org. Chem. 31,205 (1966)) juntamente com 30 ml de tampão de fosfato de potássio lOmM com o pH de 6,8 contendo azida de potássio 0,04 %.

Foram adicionadas timidina fosforilase purificada ( 10.000 l.U.) e purina nucleósido fosforilase (20.000 l.U. (Krenitsky T.A. e outros., Biochemistry,20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana Νθ. 4.381.444) adsorvidas em 10 ml de celulose DEAE (Whatman) e a suspensão foi agi tada a 352C. Após 8 horas a mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi aplicado em séries de colunas ligadas. A coluna inicial contendo hidróxido de resina AGI X2 (2,5 x lOcm) enquanto a segunda coluna se encheu com resina de Amberlite XAD-2 (2,5 x 20 cm). Após a aplicação da amostra, as colunas foram lavadas com um grande volume de água e o produto foi eluído com metanol. Depois da remoção do solvente e re-dissolução em clorofórmio/metanol (9:1, v/v) foi realizada uma cromatografia adicional numa coluna contendo silicagel (5x20cm). A fase móvel consistiu em clorofórmio/metanol (9:1, v/v). As fracçóes contendo o produto foram combinadas, dissolvidas novamente em etanol e filtrados através de um filtro de 0,22 ^u. 0 etanol foi evaporado e o produto foi dissolvido novamente em água. Após a liofilização, o composto 6-N-piperidinopurino-9- -D-2’,3’-didesoxirribofuranosido (0,265 g) foi analisado como um hidrato 0,1 contendo 0,3 equivalentes de etanol.

Análise calculada para ^C15^H21^N5°2 ^G2^H6° ^0,3:

Calculado : C, 58.74 ; H, 7,27; N,21.96

Encontrado : C, 58,86 ; H, 7,14; N,21.82

RMN : 8.36 (s, 1 H, H_g), 8,19 (s, 1 H, H₂), 6,23 (dd, 1H,

Η_χ,), 5,01 (t, 1 H, J = 5,54, 0H₅,), 4,12 (m, 3H,H

CH₂), 3.52 (m, 2 H, H₅«), 2.37 (m, 2 H, H₂«), 1.61 (b, 2 H, CH₂), 2.04 (m, 2 H, H ).

Exemplo 2

6-Cloropurino-9--D-2¹,3¹-didesoxirribofuranosido

A síntese do composto 6-cloropurino-9-/5 -D-2’,3'-didesoxirribofuranosido foi realizada como descrito no Exemplo 1 com a excepção de que o composto 6-cloropurina (Sigma Chemicals, St. Louis Mo) foi dissolvido em 5 ml de dimetilformamida e dimetoxi-etano.

Depois da filtração dos sólidos, o filtrado foi reduzido a cerca de 5 ml sob vácuo e depois dissolvido em 100 ml de água. 0 material referido foi cromatografado numa coluna de 2,5 x 20 cm contendo resina XAD-2.

Depois de lavada a referida coluna com 500 ml de água, o produto foi eluído com metanol. As fracções contendo o produto foram combinadas e foi adicionada a. 20ml de silicagel seca.

Todos os solventes foram removidos sob vácuo. A silicagel seca foi aplicada no topo de uma coluna de silicagel equilibrada com clorofórmio/metanol (9:1. v/v). As fracções contendo o produto livre de desoxitimidina foram com binadas e após a remoção do solvente sob vácuo, o resíduo foi dissolvido em etanol, filtrado, depois dissolvido em água e liofilizado. 0 material referido foi ainda’purificado por crç) matografia numa coluna contendo resina de Poligosil C^g com metanol:água (8:2, v/v). Após a remoção do solvente no vácuo, o produto foi dissolvido em água e liofilizado obtendo-se 0,199 g de 6-cloropurino-9-/3-D-2',3'-didesoxirribofuranosido (pf = 1002G).

Calculada : C, 47.16 ; H, 4.35; N, 22.00; Cl, 13.92

Encontrado : C, 47.10 ; H, 4.35; N, 21.94; Cl, 13.86

Exemplo 3

6-Etilaminopurino-9-y3 -D-2

3'-didesoxirribofuranosido

Foram combinados quimicamente os compostos 6-etilaminopurina (2,69 mmol;0,5 g) (preparado por substituição nucleofílica do grupo cloro da 6-cloropurina, Sigma Chemicals, St. Louis Mo, pelo grupo amina da etilamina) e 3'-desoxitimidina (3,33 mmol ; 0,755g) (Horwitz, J.P. et al J. Org. Chem., 31 205,1966) juntamente com 50 ml de solução tampao de fosfato de potássio lOmM com o pH de 6,8, contendo azida de potássio 0,04%.

Foram adicionada timidinas fosforilase purificada ( 400 U.I.) e purina nucleósido fosforilase (700 U.I.) e a suspensão foi agitada a 37QC.

Após 48 horas foram adicionadas mais 700 unidades de purina nucleosido fosforilase e 400 unidades de timidina-fosforilase e a reacção foi agitada a 37QC. Cinco dias mais tarde a mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi aplicado numa coluna contendo hidróxido de resina AG-1X2 (2,5 x 10 cm). 0 produto foi eluído com a água de lavagem e cromatografado numa resina de Amberlite XAD-2 (2,5 x x 20 cm). Depois da aplicação da amostra, a coluna referida foi lavada com grande volume de água.

O produto foi eluído com metanol. Após a remoção do solvente, o produto foi re-dissolvido em água e acetona e depois disso liofilizado, obtendo-se 0,299 g de 6-etilaminopurino-9-/3-D-2',3',- didesoxirribofuranosido ana lisado com 0,2 equivalentes de água e 0,1 equivalentes de acetona (p.f. * ^302C, [oí] 20QC - -29,45QC (0,5; DMF)).

Calculada ; C, 54.17 ; H, 6.64; N, 25.68

Encontrado : C, 54.13 ; H, 6.69 ; N, 25.75

Exemplo 4

6-Etilmetilaminopurino-9-/^ -D-2¹,3'-didesoxirribofuranosido método para a síntese do composto 618

-etilmetilaminopurino-9-/^ -D-2’,3’-didesoxirribofuranosido foi idêntico ao do Exemplo 2. A mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi aplicado numa coluna de Dowex-1-hidróxido (2,5 x 10 cm). 0 produto foi eluído com metanol/água 90% (v/v) e cromatografado numa resina de Amberlite XAD-2 (2,5 x x 20 cm) após a remoção do solvente até cerca de 5 ml e re-dissolução em água ( 100 ml). Depois da aplicação da amostra, a coluna foi lavada com um grande volume de água e o produto foi eluído com etanol/água 95% (v/v). As fracções contendo o produto foram combinadas e foi adicionado 200 ml de silicagel seca. Foi removido todo o solvente sob vácuo. A silicagel seca foi aplicada na parte superior de uma coluna de silicagel (4,8 x 20 cm) equilibrada com clorofórmio/metanol (98:2, v/v). As fracções contendo o produto foram combinadas e após a remoção do solvente sob vácuo, foram dissolvidas primeiro em etanol e filtradas. Depois da remoção do solvente e da re-dissolução em água, a solução foi liofilizada, obtendo-se 0,3 g de 6-etilmetilamino-9-/^-D-2',3'-didesoxirribofuranosilpurina que se analisou como um hidrato 0,05 (p.f.< 302C).

Análise calculada para	C13H19N5°2 0	,05	H20;
Calculada : C, 56.12	; H, 6.92 ;	N,	25.17
Encontrada : C, 56.12	; H, 6.94 ;	N,	25.14
NMR :d 8.36 (s, 1 H,	Hg), 8.19 (s,	1	H, H2), 6	23	(dd, 1 H,
Ηχ,), 5.05 (t,	1H, J= 5.58,	OH	5’), 4.09	(m,	1, H, H4.)

4.08 (m, 2 H, CH₂), 3.51 (m, 2 H, H₅’), 3.33 (s, 3 H, CH₃), 2.41 (m, 2 H, H₂,), 2.03 (m, 2 Η, Η_β,), 1.14 ( t, 3 H, J= 7.01, CH₃).

Exemplo 5

6-Iodopurino-9-β -D-2*,3'-didesoxirribofuranosido

Foram combinados quimicamente os compostos 6-iodopurina (0,624 g ; 2,54 mmol, Sigma Chemicals,St. Louis MO) e 3’-desoxitimidina (0,71 g ; 3,13 mmol) (Horwitz, J. P. et al J.Org. Chem., 31.205, 1966) com 700 ml de uma

solução tampão de fosfato de potássio lOmM com pH de 6.8, contendo azida de potássio 0,04%. Foram adicionadas timidina fosforilase purificada ( 2000 UI) e purina nucleósido fosforilase ( 7000 UI) (Krenitsky T.A., et al., Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e a suspensão foi agitada a 352C. Após 48 horas a mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi seco sob vácuo.

resíduo resultante foi dissolvido em etanol/água 95% (v/v) e depois de adicionar cerca de 20 ml de silicagel, o solvente foi removido sob vácuo. A sílica seca foi aplicada na parte superior da coluna de silicagel (2,8 x 50 cm) e o produto foi eluído com clorofórmio/metanol (95:5, v/v). Foram combinadas apenas as fracções contendo o produto e o solvente foi removido sob vácuo. 0 resíduo foi re-dissolvido em etanol e filtrado através de um filtro de 0,22 p. Após a remoção da maior parte do etanol e de adicionar-se cerca de 25 ml de água, o material foi liofilizado, obtendo-se 0,088 g de 6-iodopurino-9-/ã-D-2’,3’-didesoxirribofuranosido que se analisou como hidrato 0,2 (p.f. 151-153QG) Análise Calculada para C^qH-qN^C^ 0,2^0:

Calculado : C, 35.15; H, 3.46; N, 15.77

Encontrado: C, 35.31; H, 3.31; N, 15.83

Exemplo 6 6-Ciclopropilmetilaminopurino-9-/ff -D-2*,3¹-didesoxirribofuranosido

Foi preparado o composto 6-ciclopropilmetilaminopurina por substituição nucleofílica do grupo cloro da 6-cloropurina ( Sigma Chemicals, St. Louis MO) pelo grupo amina da ciclopropilmetilamina ( Sigma Chemicals, St. Louis MO).

composto 6-ciclopropilmetilaminopurina (2,64 mmol: 0,50 g) foi dissolvido em 5 ml de dimetilformamida. Após arrefecimento à temperatura ambiente foi adicionado 3’-desoxitimidina (3,98 mmol; 0,90 g) (Horwitz, J.P. et al., J. Org. Chem., 31. 205, 1966) juntamente com 30 ml de uma solução tampão de fosfato de potássio lOmM com o pH de

6,8 , contendo azida de potássio 0,04Z. Foram adicionadas timidina fosforilase purificada ( 10 000 UI) e purina nucleósido fosforilase (20 000 UI) (Kremitsky T.A. et al., Biochemistry 20.3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444 )adsor vidas em 10 ml de celulose DEAE (Whatman) e a suspensão foi agitada a 35QC. Após 8 horas, a mistura reaccional foi filtra da e o filtrado foi aplicado numa série de colunas unidas. A coluna inicial contendo resina AG1-X2 (na forma OH), 2,5x10 cm, enquanto a segunda coluna contém resina Amberlite XAD-2 , 2,5x20 cm. Após a aplicação da amostra, as colunas foram lavadas com 500 ml de água e o produto foi eluído com metanol. 0 produto foi depois cromatografado rápidamente numa coluna de silicagel, 5x20 cm, com uma mistura de clorofórmio/metanol (9:1, v/v). 0 solvente foi removido no vácuo e o produto em gama foi transferido em acetona para um frasco-ampola. Após a liofilização obteve-se 0,588 g do composto 6-ciclopropilmetilaminopurino-9-/3-D-2',3’-didesoxirribofuranosido que se analisou com 0,15 equivalentes de água e com 0,15 equivalentes de acetona.

Análise Calculada para C-^H^gN^C^ 0,15^0 0,15 C^H^O:

Calculada ; C, 57.71 ; H, 6.77; N, 23.29 Encontrada : C, 57.73 ; H, 6.94; N, 23.39

Exemplo 7

6-Isopropilaminopurino-9-β-D-2 *,3'-didesoxirribofuranosido

A síntese do composto 6-isopropilaminopu rino-9-β-D-2’,3’-didesoxirribofuranosido foi realizada como foi descrito no Exemplo 1 com a excepção de que o composto 6-isopropilaminopurina (preparado a partir do composto 6-cloropurina, Sigma Chemicals, St. Louis MO, e do composto isopropilamina) foi dissolvido em 5 ml de dimetilformamida e de dimetilsulfóxido.

Após a liofilização, o composto 6-isopro pilaminopurino-9-/^-D-2',3 ’-didesoxirribofuranosido (0,502g) foi analisado como 0,2 hidrato (p.f.=55-57°C).

Analise Calculada para

Calculada : C, 55.58;

Encontrada: C, 55.54;

^G13^H19^N5°2

H,

H,

6.96;

6.96;

0,2 H₂0:

N, 24.93

N, 25.01

Exemplo 8

Tiamiprino-9-jb -D-2¹,3¹-didesoxirribofuranosido

Foi dissolvido o composto tiamiprina (Burroughs Wellcome Co., Research Triangle Park NC) (0,5g) em 2,5 ml de dimetilsulfóxido e 15 ml de dimetoxi-etano e combinado com o composto 3’-desoxitimidina (0,8 g) (Horwitz et al J. Org. Chem., 31, 205, 1966) em 30 ml de fosfaForam adicionadas timidinas

J.P.

to de potássio com pH de 6,8.

fosforilase purificada ( 1600 UI) e purina nucleosido fosforilase (70 000 UI) (Krenitsky T.A., et al., Biochemistry,

20. 3015 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e a suspensão foi agitada a 35°C. Após 96 horas, a Mistura reaccional foi filtrada e o volume foi reduzido no vácuo até se for mar um xarope. Foi adicionada água ( 25 ml) e a solução foi armazenada a 3°C durante toda a noite.

precipitado foi ção, foi colocado em suspensão em 5 ml e foi filtrado.

recolhido por filtrade dimetilformamida

Foi adicionado ao filtrado 15 ml de metanol e a solução foi armazenada a -202C. Após 5 dias os sólidos foram recolhidos por filtração, dissolvidos em metanol/água 65% (v/v) e cromatografados numa resina hidróxido AG-1 X2 . 0 produto foi eluído com metanol/água 65% (v/v). Após a remoção do solvente no vãcuo, os sólidos foram dissolvidos em 20 ml de clorofórmio/metanol (9:1) e cromatografados numa base de silicagel (3x50cm) equilibrada com clorofórmio/metanol (9:1, v/v). As fracções contendo o produto foram combinadas e o solvente foi removido sob vácuo. 0 resíduo de sílica gel foi removido do produto por dissolução em etanol/água 95% (v/v) e filtrado através de um filtro de 0,22 ^u. Foi evaporado o etanol e foi adicionado cerca de 200 ml de água. A suspensão resultante foi liofilizada obtendo-se 0,056 g do composto tiamiprina-9-/B -D-23’-didesoxirribofuranosido que foi analisado como 0,4 hidrato contendo 0,7 equivalentes de metanol (p.f.=1302C, fusão parcial a 110QC).

Analise Calculada para :	C14	,H16SN8	°4	0,4 H2O	0,7	CH4O:
Calculada : C,	41.84 ;	H,	4.68;	s,	7.60 ;	N,	26.55
Encontrada: C,	41.93 ;	H,	4.43;	s,	7.48 ;	N,	26.34

Exemplo 9 2-Amino-6-n-propoxipurino-97^ D-2¹,3'-didesoxirribofuranosido

Foram combinados quimicamente os compostos 2-amino-6-n-propoxipurina (preparado por substituição nucleofílica do grupo cloro do 2-amino-6-cloropurina, Aldrich Chemical Co., Milwaukee Wl, pelo anião de alcóxi formado entre o hidreto de sódio e o propanol) (0,21 g) e 3'-desoxitimidina (0,29g) (Horwitz J.P. et al, J. Org. Chem.31.205 1966) em 100 ml de solução de fosfato de potássio, pH=6,8, com azida de potássio 0,04%.

Foram adicionadas timidina fosforilase purificada ( 1200 UI) e purina nucleósido fosforilase (8400 UI) (Krenitsky T.A. et al., Biochemístry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e a suspensão foi agitada a 352C. Após 48 horas a mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi cromatografado numa coluna contendo resina AG-1 X2 hidróxido (2x5 cm). O produto foi eluído com metanol/ /água 90% (v/v). 0 solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em metanol. Foram adicionados 10 ml de silicagel seca e o metanol foi removido sob vácuo. A silicagel seca foi aplicada numa coluna de silicagel (2,5x30 cm) equilibrada com clorofórmio/metanol (9;1, v/v), que foi também o solvente eluente. Foram combinadas somente as fracções conten do o produto e o solvente foi removido sob vácuo.

Foi removido o resíduo de silicagel e o produto foi seco como referido no Exemplo 8. Obteve-se 0,132 g do composto 2-amino-6-n-propoxipurino-9-/^ -D-2',3'-didesoxírribofuranosido que foi analisado como 0,2 de hidrato (p.f.=702C).

Análise Calculada para ^C13^H19^N5°3 °’^2H2^O: !

Calculada : C, 52.91 ; H, 6.56; N, 23.73 Encontrada: C, 52.52 ; H, 6.62; N, 23.49

Exemplo 10

6-Etiltiopurino-9-/^ -D-2¹,3 ¹ -didesoxirribofuranosido

Foram colocados em suspensão os compostos 6-etiltiopurina (5,5 mmoles, lg) obtido por Sigma Chemical Co., St. Louis MO e 3’-desoxitimidina (4,47 mmoles) (Horwitz, J.P. et al., J. Org. Chem., 31. 205, 1966) em 50 ml de uma solução de fosfato de potássio 15mM com o pH de 7,2.

Foram adicionadas timidina fosforilase purificada (7890 U.I.) e purina nucleósido fosforilase (1980 U.I.) (Krenitsky T.A., et al., Biochemistry, 20.3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e a suspensão foi agitada a 352C. Após 144 horas a mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi armazenado a -202C. 0 filtrado depois de se liquefazer foi ajustado a pH de 10,7 com hidróxido de amónio e cromatografado numa coluna contendo resina Dowex-1- formato (2,5 x 8 cm). A coluna referida, foi eluída com n-propanol/ãgua 30% (v/v). As fracções contendo o produto foram combinadas e o solvente foi removido sob vácuo. 0 resíduo foi dissolvido em n-propanol/água 30% (v/v) e cromatografado numa coluna contendo BioRad P-2 (5x90 cm). O produto foi eluído da coluna com n-propanol/água 30% (v/v). As fracções contendo o produto foram combinadas e o solvente foi removido sob vácuo obtendo-se 0,427 g do composto 6-etiltiopurino-9--D-2’,3'-didesoxirribofuranosido que foi analisado como 0,5 de hidrato.

Análise Cal	culada	para	C12H16SN	4°2	0,5 H20 :
Calculado	: C, 49	.81;	H,5.92;	N,	19.36; s, 11.44
Encontrado	: C, 49	.63;	H,5.95;	N,	19.28; s, 11.06
NMR dados :	cT 8.71	(s,	1H, Ηθ),	8.67	(s, 1H, Hf, 6.33	(t, 1H,
	Hf),	4.1	(m, 2H,	OH,	Hf), 3.4-3.6 (m,	2H,5'CH2)

1.8-2.4 (m, 4H, 2' e 3' Chf , 1.5’ (t, 3H, CHf.

Exemplo 11

2-Amino-6-Benziltiopurino-9-f -D-2¹,3 *-didesoxirribofuranosido

Foram dissolvidos os compostos 2-amino -6-benziltiopurina (1,9 mmoles, 0,5 g) obtido pelo Sigma Chemical Co., St. Louis, MO e 3'-desoxitimidina (2,0 mmoles, 0,543 g) (Horwitz, J.P. et al., J. Org. Chem . 31 205 1966) em 20 ml de solução tampão de fosfato de potássio lOmM, pH de 7, contendo azida de potássio 0,04%. Foram adicionadas timidina fosforilase purificada ( 2000 UI) e purina nucleósido fosforilase (2900 UI) (Krenitsky T.A., et al., Biochemistry, 20.3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444 ) e a suspensão foi agitada a 352C. Após três dias foram adicionados 80 ml de solução tampão de fosfato de potássio 10mM,pH de 7. Um dia depois, a mistura reaccional foi filtrada. A massa foi dissolvida em metanol/água 90% (v/v), foi filtrada e o filtrado foi cromatografado numa coluna de 2,5 x 10 cm contendo Dowex-l-hidróxido. 0 produto foi eluído da coluna com metanol/ /água 90% (v/v). As fracções contendo o produto foram combinadas e após a liofilização obteve-se 0,08.6 g do composto 2-amino-6-benziltiopurino-9-β -D-2 ’,3’-didesoxirribofuranosido.

Análise Calculada para ^C17^H19^SH5°2^:

Calculada : C, 57.13 ; H, 5.36; N, 19.59; S, 8.97 Encontrada : C, 57.02 ; H, 5.39; N, 19.51; S, 8.89

NMR dados :£ 8.18 (s, 1H, H_g), 7.3 (m, 5H, 0), 6.6 (s,2H, NH₂), 6.08 (dd, 1 Hp), 4.93 (b, 1H, 5’ OH) 4.45 (b, 2H, CH₂ ), 4.08 (m, 1H, H^’), 3.43-3.65 (m, 2H, 5’ CH₂), 2.35 (m, 2 H, 2’ CH₂), 2.0 (m, 2H, 3’ CH₂)

Exemplo 12

6-Etoxipurino-9-A-D-2',3 *-didesoxirribofuranosido

Foram colocados em suspensão os compostos 6-etoxipurina (3,0 mmoles; 0,5 g : Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) e 3’-desoxitimidina (3,3 mmoles; 0,75g ) (Horwitz, J.P., et al ., J. Org. Chem. 31.205, 1966) em 25 ml de tampão de fosfato de potássio lOmM com pH de 6,8 contenO K

do azida de potássio 0,04%. Foram adicionados timidina fosforilase purificada (800 U.I.) e purina nucleosido fosforilase (1200 U.I.) (Krenitsky T.A. et al ., Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e a suspensão foi agitada a 352C. Após 24 horas, foi adicionado 85 ml de solução tampão de fosfato de Potássio lOmM com pH 6,8 e a mistura reaccional foi agitada por mais cinco dias a 35°C. O precipi. tado da mistura reaccional foi removido por filtração e ο I filtrado foi cromatografado numa coluna de 2,5 x 10 cm contendo Dowex-1-hidróxido. 0 produto foi eluído com metanol/ /água 90% (v/v) e foram combinadas as fracções contendo ο I produto. Apos remoção do solvente por vacuo, o produto foi :

dissolvido em n-propanol/água 30% (v/v) e cromatografado nu- j ma coluna 5x90 cm contendo resina BioRad P-2. As fracções contendo o produto foram reunidas e após a liofilização obteve-se 0,225 g do composto 6-etoxipurino-9-^-D-2’,3’- dide- i soxirribofuranosido que foi analisado como 0,15 de hidrato.

Análise Calculada para ^G13^H17^N5°2 H₂O :

Calculada ; C, 53.98; H, 6.15 ; N, 20.98

Encontrado : C, 54.05; H, 6.15; N, 20.88

NMR dados: / 8.6 (s, 1 H, H_g), 8.5 (s, 1H, H₂), 6.3 (dd, 1 H,

Hl’)	4 > ·	97	(t, 1 H, 5'	OH),	4.6	(m,	2 H,	-CH2-), ;
4.1	(m 1	H,	H4,), 3,53	(m,	2 H,	5’	ch2),	2.41
(m,	2 H,	2'	CH2), 2.03	(m,	2 H,	3'	ch2),	1.4
(t,	3 H,	J	= 0.035 Hz,	ch3)	•

Exemplo 13

6-Dimetilaminopurino

-D-2'

3’-didesoxirribofuranosido

Foram colocados em suspensão os compos- I tos 6-dimetilaminopurina (6,13 mmoles, lg, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) e 3'-desoxitimidina (4,44 mmoles, lg) (Horwi- ; tz, J. P. et al., J. Org. Chem., 31. 205, 1966) em 50 ml de solução de fosfato de potássio lomM com pH de 7,0 e contendo azida de potássio 0,04%. Foram adicionados timidina fosfori- ί

lase ( 2000 U.I.) e purina nucleósido fosforilase ( 3000 U.I.) (Krenitsky T.A. et al., Biochemistry, 20. 3615. 1981 e Paten te Norte-Americana 4.381.444) e a suspensão foi agitada a 35QC. Após 120 horas a mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi cromatografado numa coluna contendo resina de Dowex-l-hidróxido (2,5 x 8 cm) com Metanol /água 90% (v/v) como eluente. As fracçoes contendo o produto foram combinadas e o solvente foi removido sob vácuo. 0 resíduo foi dissolvido em 25 ml de n-propanol/água 30% (v/v) e cromatografado numa coluna contendo BioRad P-2 (5x90 cm). 0 produto foi eluído com n-propanol/água 30% (v/v). As fracçoes contendo o produto foram combinadas e o solvente foi removido sob vácuo. 0 resíduo foi dissolvido em 30 ml de água desionizada e cromatografada numa coluna contendo resina Sephadex G-10 ( 5 x 90 cm) e o eluente foi a água. As fracçoes adequadas foram combinadas e após a liofilização obteve-se o composto 6-dimetilaminopurino-9-β-D-2',3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado como 0,3 de hidrato (p.f.=16220).

Análise Calculada para ^C12^H17^N5°2

0,3 H₂0

Calculado : C, 53.64; H, 6.60; N, 26.06 i

Encontrado: C, 53.63; H, 6.63; N, 25.8í i

i Exemplo 14í

6-Hidroxi-etilaminopurino-9-4 -D-2',3'-didesoxirribofuranosi- | doi

Foram colocados em suspensão os compos- i tos 6-hidroxi-etilaminopurina (2,8 mmoles; 0,5 g, Sigma Che- j mical Co. St. Louis, MO) e 3’-desoxitimidina (3,30 mmoles;

0,76g ) (Horwitz J.P. et al , J. Org. Chem., 31 205, 1966) em 75 ml de solução tampão de fosfato de potássio lOmM, pH de 6,8 e contendo azida de potássio 0,04%. Foram adicionados timidina-fosforilase purificada ( 400 U.I.) e purino-nucleosido-fosforilase (700 U.I.) (Krenitsky T.A., et al, Biochemistry, 20 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e a suspensão foi agitada a 352C. Após oito dias, foram adicionados 600 U.I. de timidina fosforilase e 1050 U.I. de purina nucleosido fosforilase. Após mais um dia, a mistura rea£

cional foi filtrada e o filtrado foi aplicado numa coluna de

2,5 x 10 cm contendo Dowex-1-hidróxido. O produto foi eluído com metanol. As fracções contendo o produto foram combinadas e evaporadas sob vácuo. 0 resíduo foi depois aplicado e eluído de uma coluna de silicagel sob pressão e com uma mi_s tura de clorofórmio/metanol (8:2). As fracções contendo o produto foram combinadas e após a liofilização obteve-se o composto 6-hidróxi-etilaminopurino-9-^-D-2',3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado como 0,65 de hidrato (p.f.= =1532C.)

Análise Calculada para C

0,65 H₂0:

Calculado : C, 49.53; H, 6.34; N, 24.07

Encontrado : C, 49.85; H, 6.07; N, 23.70

Exemplo 15

6-Ciclopropilaminopurino-9-ffi -D-2'

3'-didesoxirribofuranosido

Foram dissolvidos os compostos 6-ciclopropilaminopurina (preparado a partir da 6-cloropurina, Sigma Chemicals, St. Louis MO, e ciclopropilamina) (2,86 mmoles; 0,5g ) e 3’-desoxitimidina (4,30 mmoles, lg) (Horwitz, J.P. et al J. Org. Chem, 31. 205, 1966 ) em 10 ml de uma mistura de dimetilsulfóxido/ N’,N*-dimetilformamida 1:1 e diluídos ainda com 30 ml de solução tampão de fosfato de potássio lOmM com pH de 6,8 contendo azida de potássio 0,04%. Foram adicionados timidina fosforilase purificada ( 10 000 U.I.) e purina nucleosido fosforilase ( 20 000 U.I.) (Krenitsky T.A., et al, Biochemistry, 20. 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444)adsorvidas em 10 ml de resina DEAE (Whatman) e a suspensão foi agitada a 352C. Após 8 horas a mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi aplicado numa série de colunas unidas. A coluna inicial contendo Dowex-1-hidróxido ί (2,5 x 10 cm) enquanto a segunda coluna foi preenchida com resina Amberlite XAD-2 (2,5 x 20 cm) . Após a aplicação da amostra, as colunas foram lavadas com um grande volume de água e o produto foi eluído com metanol. As fracções contendo ' o produto foram combinadas e após a liofilização obteve-se ί

0,54 g do composto 6-ciclopropilaminopurino-9yj-D-2',3'-didesoxirribofuranosido que foi analisado como 0,55 de hidrato (p.f.=63-6520.

Análise Calculada para : ^cq3^Hi7^N5°2 θ’55 1^0 ^:

Calculado : C, 54.75; H, 6.40; N, 24.55

Encontrado : C, 54.67; H, 6.43; N, 24.57

Exemplo 16

6-Ciclopentilaminopurino-/ò -D-2*,3 *-didesoxirribofuranosido

Foi dissolvido o composto 6-ciclopentila minopurina (preparado da 6-cloropurina, Sigma Chemicals, St. Louis MO, e da ciclopentilamina) (2,49 mmoles, 0,506 g) em 5 ml de Ν,Ν-dimetilformamida e 5 ml de dimetilsulfóxido. Foi I | adicionado o composto 3’-desoxitimidina (3,94 mmoles, 0,894g) ; (Horwitz, J.P., et al J. Org. Chem., 31, 205, 1966) juntamen- ί te com 30 ml de solução tampão de fosfato de potássio lOmM, j pH de 6,8 e com azida de potássio 0,04%. 0 pH foi ajustado a 6,8 com ácido acético. Foi adicionado à mistura reaccional timidina fosforilase purificada (10 000 U.I.) e purina núcleo^ sido fosforilase ( 20 000 U.I.) (Krenitsky T.A., et al, I

Biochemistry, .20.3615 , 1981 e Patente Norte-Americana 4.381. 444) ligada ã DEAE-celulose. A suspensão foi agitada a 352C durante oito horas, foi filtrada e o filtrado foi armazenado a -202C durante toda a noite. Depois de se liquefazer, o filtrado foi aplicado numa coluna de 2,5 x 10 cm contendo resina Dowex-l-hidróxido. 0 produto foi eluído com água. As fracções contendo o produto foram combinadas e cromatografadas numa coluna contendo resina xad-2 (2,5 x 20 cm) . O referido produto foi eluído com 350 ml de água seguido por metanol. As I fracções contendo o produto foram combinadas e o metanol foi removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em água e após a liofilização, obteve-se 0,459g do composto 6-ciclopentilaminopurino-^3 -D-2’,3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado como 0,05 hidrato (p.f.=882C).

- 29 Análise Calculada para : C^l^N^C^O. 05 H^O

Calculado : C, 59,21 ; H, 6.99; N, 23.02 Encontrado: C, 59,24 ; H, 7.05; N, 22.95

Exemplo 17

2-Amino-6-metoxipurino-9-^ -D-2 *,3'-didesoxirribofuranosido

Foram dissolvidos os compostos 2-amino-6-metoxipurina (3,0 mmoles, 0,5g, preparado da 2-amino-6-cloropurina, Aldrich Chemical Co., Milwaukee Wl, e metanol) e 3'-desoxitimidina (4,50 mmoles, lg) (Horwitz, J.P. et al, J. Org. Chem, 31.205, 1966) em 10 ml de uma mistura de dimetilsulfóxido/ N’,N'-dimetilformamida 1:1 e diluídos ainda com 30 ml de solução tampão de fosfato de potássio com o pH de 6,8 e contendo azida de potássio 0,04%. Foram adicionadas timidina fosforilase purificada ( 10 000 U.I.) e purina nucleosido fosforilase ( 20 000 U.I.) Krenitsky, et al., Biochemístry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) adsorvidas em 10 ml de DEAE-resina e a suspensão foi agitada a 352C. Após 8 horas a mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi aplicado numa coluna de 2,5 x 10 cm contendo Dowex-l-hidróxido. As fracções contendo o produto foram reunidas e o volume foi reduzido a 70 ml. A referida amostra foi aplicada numa coluna de 2,5 x 20 cm preenchida com resina de Amberlite XAD-2. A coluna foi lavada com um grande volume de água e o produto foi eluído com metanol. As fracções contendo o produto foram combinadas e após a liofilização obteve-se o com posto 2-amino-6-metoxipurino-9-//3 -D-2',3'-didesoxirribofuranosido .

Análise Calculada para : ^ch^h15^N5°3 :

Calculada : C, 49.81; H, 5.70; N, 26.40 Encontrado : C, 49.70; H, 5.72; N, 26.34

Exemplo 18 6-n-Propoxipurino-9-/3-D-2',3¹-didesoxirribofuranosido

Foram dissolvidos os compostos 6-n-pro-

poxipurina (0,5 g : 2,8 mmoles, Sigma Chemicals, St. Louis MO) e 3'-desoxitimidina (0,96 g ; 4,2 mmoles) (Horwitz, J.P., et al J. Org. Chem. 31, 205, 1966) em sulfóxido dimetílico e 5 ml de Ν,Ν-dimetilformamida. Foram adicionados 30 ml de solução tampão de fosfato de potássio lOmM, pH de 6,8, conten do azida de potássio 0,04% e purina nucleósido fosforilase purificada ( 20 000 U.I.) e timidina fosforilase ( 10 000 U. I.) (Krenitsky, T.A., et al., Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana n°. 4.381.444) adsorvidas em lOml de resina DEAE -celulose e a Mistura reaccional foi agitada a 352C durante 7 horas. A resina foi removida por centrifugação e o sobrenadante foi aplicado numa coluna de AG1-X2 (na forma OH), 2,5x10 cm, unida a uma coluna de XAD-2, de

2,5 x 20 cm. As colunas foram lavadas com 500 ml de água e o produto foi eluído com metanol. O produto foi cromatografado rapidamente numa coluna de sílica gel, de 3x50 cm, com clorofórmio/metanol (9:1 v/v). Da liofilização obteve-se 0,554g do composto 6-n-propoxipurino-9-/3 -D-2’,3'-didesoxirribofuranosido que foi analisado com um hidrato 0,3.

0,3 H₂0

Calculado : C, 55.04; H, 6.61; N, 19.75

Encontrado: C, 55.05; H, 6.61; N, 19.72

Exemplo 19 >

6-n-Butoxipurino-9--D-2',3¹-didesoxirribofuranosido

Foram colocados em suspensão os compostos 6-n-butoxipurina (0,5 g; 2,6 mmoles, Sigma Chemicals, St. Louis,MO) e 3’-desoxitimidina (0,70 g; 3,1 mmoles) (Hor- i i witz J.P. et al, J.Org. Chem., 31, 205, 1966) em 100 ml de solução tampão de fosfato de potássio lOmM de 6,8, contendo I azida de potássio 0,04 Z. Foram adicionados purino nucleosi- | do fosforilase purificada ( 3500 U.I.) e timidina fosforila- | se (800 U.I.) (Krenitsky, T.A., et al., Biochemistry, 20, I 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e a solução I foi agitada a 322C. Após 7 dias a mistura reaccional foi fil- í trada e o filtrado foi aplicado numa coluna contendo AGI -X2

I

I 0 produto foi eluído com meta-ί removido in vacuo do produto i rapidamente numa coluna de sí-^! clorofõrmio/metanol (8:2, v/v)J (na forma OH), de 2,5 x 10 cm. nol aquoso 90%. 0 solvente foi e o resíduo foi cromatografado lica gel, de 2,5 x 80 cm, com

O produto foi dissolvido em água e aplicado numa coluna coni tendo XAD-2,de 2,5 x 20 cm. A coluna foi lavada com 500 ml de água e depois foi eluída com metanol. Da liofilizaçao obte ' ve-se 0,276 g do composto 6-n-butoxipurino-9-y^-D-2’,3’-dide-ί soxirribofuranosido (p.f.552C).

Análise Calculada para ^C14^H20^N4°3

Calculado : C, 57.52;

H, 6.90;

N, 19.17

Encontrado: C, 57.86;

H, 7.29; N, 18.83

Exemplo 20

6-Ciclopropilmetoxipurino-9-/^ -D-2¹,3¹-didesoxirribofuranosido

Foi preparado o composto 6-ciclopropilmetoxipurina por substituição nucleofílica do grupo cloro na 6-cloropurina (Sigma Chemical Co., St.Louis MO) pelo anião alcoxi formado entre hidreto de sódio e ciclopropilmetil-álcool.

Foram sujeitos à reacção os compostos 6-ciclopropilmetoxipura (0,505 g; 26,5 mmoles) e 2',3’-didesoxitimidina (0,908 g ; 40,1 mmoles) (Horwitz et al, J. Org. Chem., 31, 205, 1966) e foram cromatografados em AG1-X2 (na forma OH) e XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18. As fracçoes contendo o produto foram rapidamente cromatografadas numa coluna de sílica gel de 3x50 cm, com acetonitrilo /água (98:2, v/v). Da liofilizaçao obteve-se 0,496 g do composto 6-ciclopropilmetoxipurino-9-^ -D-2’,3’-didesoxirribofuranosido .

Análise Calculada para : 4ΛΛο₃

Calculado : C, 57.92s H, 6.25 ; N, 19.30

Encontrado: C, 57.99; H, 6.28 ; N, 19.27

Exemplo 21

6-Ciclopentiloxipurino-9-//£> -D-2¹,3 * -didesoxirribofuranosido Foi preparado o composto 6-ciclopentiloxipurina por substituição nucleofílica do grupo cloro da 6-cloropurina (Sigma Chemical Co., St. Louis, 31, 205 , 1966) pelo anião alcoxi formado entre o hidreto de sódio e ciclopentanol.

Os compostos 6-ciclopentiloxipurina (0,506 g, 2,48 mmole) e 3'-desoxitimidina (0,856 g; 3,78 mmoles) (Horwitz J.P., et al. J. Org. Chem., 31, 205, 1966) foram sujeitos à reacçao e cromatografadas em AG1-X2 (na forma OH) e XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18.

solvente foi removido no vácuo das fracções com o produto e o resíduo foi rapidamente cromatogra fado numa coluna de sílica gel, de 3x 50 cm, com clorofórmio/ /metanol (95:5, v/v).

Da liofilização obteve-se 0,385 g do composto 6-ciclopentiloxipurino-9-/^ -D-2 ’,3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado com um hidrato 0,15.

Análise Calculada para ^C15^H2o^N4°3 °>^{15 H}2°

Calculado : C, 58.68; H, 6.66; N, 18.25

Encontrado : C, 58.61; H, 6.53; N, 18.25

Exemplo 22

6-Ciclo-hexiloxipurino-9-/^-D-2¹,3¹-didesoxirribofuranosido

Foi preparado o composto 6-ciclo-hexiloxipurina por substituição nucleofílica do grupo cloro da 6-cloropurina (Sigma Chemical Co., St. Louis MO) pelo anião alcoxi formado entre hidreto de sódio e ciclo-hexanol.

Os compostos 6-ciclo-hexiloxipurina (0,50 g: 2,29 mmoles) e 3-desoxitimidina (0,776 g : 3,42 mmoles) (Horwitz J.P. et al J. Org. Chem., 31,205, 1966) foram cromatografados em AGI- X2 (na forma OH) e em XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18 com a excepção de que foram utilizados 10 ml de glime em adição a 5 ml de sulfóxido dimetílico e 5

ml de Ν,Ν-dimetilformamida e um total de 70 ml de solução tampão de fosfato de potássio lOmM, de pH 6,8, contendo azida de potássio 0,04%. Da liofilização obteve-se 0,102 g do composto 6-ciclo-hexiloxipurino-9-y^ -D-2',3’-didesoxirribofuranosido (p.f. 105QC) que foi analisado como um hidrato 0,2.

Análise Calculada para ^C16^H22^N4°3 ^{0,2 H}2°

Calculado : C, 59.69; H, 7.01; N, 17.40

Encontrado : C, 59.69; H, 6.93; N, 17.27

Exemplo 23 6-Ciclobutilaminopurino-9y^ -D-2¹,3'-didesoxirribofuranosido

Foi preparado o composto 6-ciclobutilaminopurina por substituição nucleofílica do grupo cloro da 6-cloropurina ( Sigma Chemical Co., St. Louis MO) pelo grupo amina da ciclobutilamina.

Os compostos 6-ciclobutilaminopurina (0,510 g; 2,62 mmoles) e 3'-desoxitimidina (0,896 g ; 3,96 mmoles) (Horwitz J.P. et al J. Org. Chem. 31, 205, 1966) foram sujeitos à reacção e cromatografadas em AGI -X2 ( na forma OH) e em XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18. O solvente foi removido das fracçoes contendo o produto e o resíduo foi cromatografado rapidamente numa coluna de sílica gel, de 3x50 cm, com clorofórmio / metanol (9:1, v/v).

Da liofilização obteve-se 0,524 g do composto 6-ciclobutilaminopurino-9-/3 -D-2',3’-didesoxirribofuranosido (pf. 96-98QC).

Análise Calculada para ^C14^H19^N5°2

Calculado : C, 58,12; H, 6.62; N, 24.20

Encontrado : C, 58,19; H, 6.65; N, 24.16

Exemplo 24 6-Dietilaminopurino-9-/^ -D-2' ,3'-didesoxirribofuranosido

Foi preparado o composto 6-dietilamino34

purina por substituição nucleofílica do grupo cloro da 6-cloropurina (Sigma Chemical Co., St. Louis MO) pelo grupo amina da dietilamina.

Os compostos 6-dietilaminopurina (0,246g; 1,28 mmoles) e 3’-desoxitimidina (0,463 g ; 2,04 mmoles) (Horwitz J.P. et al J. Org. Chem., 31, 205, 1966) foram sujeitos à reacção e cromatografados em AGI- X2, (na forma OH) e em XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18.

solvente foi removido no vácuo das fracções contendo o produto e o resíduo foi rapidamente cromatografado numa coluna de sílica gel, de 5 x 20 cm, com clorofórmio/metanol (9:1, v/v). Foi removido o solvente no vácuo das fracções contendo o produto e o resíduo foi rapidamente cromatografado numa segunda coluna de silica gel, de

2,5 x 50 cm, com acetato de etilo. 0 produto na forma de goma, foi transferido na acetona para um frasco-ampola e obte · ve-se da liofilização , 0,098 g do composto 6-dietilaminopurino-9--D-2',3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado ! com 0,25 equivalentes de água e 0,20 equivalentes de acetona. ; Análise Calculada para : θ’2 C^H^O 0,25 \

Calculado	: C,	57.03;	H,	7.44;	N,	22.78
Encontrado	: C,	57.02;	H,	7.39;	N,	22.72
Exemplo 25
6-Pirrolidinopurino-9-/?J -D-	2’,3’	-didesoxirribofuranosido

Foi preparado o composto 6-pirrolidino- í purina por substituição nucleofílica do grupo da 6-cloropurina pelo grupo amina da pirrolidina.

i

Os compostos 6-pirrolidinopurina (0,500g 2,64 mmoles) e 3'-desoxitimidina (0,901 g; 3,98 mmoles) (Horwitz J.P. et al J. Org. Chem, 31, 205, 1966) foram dissol vidos em 5 ml de sulfóxido dimetílico e 5 ml de N,N-dimetilformamida. Foram adicionados trinta ml de solução tampão de fosfato de potássio, pH de 6,8, contendo azida de potássio j 0,04% e purino nucleosido fosforilase purificada ( 20 000 UI) ί e timidina fosforilase ( 10 000 UI) (Krenitsky, T.A. et al

Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381. 444) adsorvidas em 10 ml de resina DEAE-celulose e a mistura reaccional foi agitada a 35QC durante 7 horas. A resina foi removida por centrifugação e o sobrenadante foi aplicado numa coluna de AG1-X2 (na forma de OH), de 2,5 x 10 cm, unida a uma coluna de XAD-2, de 2,5 x 20 cm.

As colunas foram lavadas com 500 ml de água e o produto foi eluído com metanol. Da liofilização obteve-se 0,385 g do composto 6-pirrolidinopurino-9-/^ -D-2’,3 ’-di_ desoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,05 (p.f. 158-159QC).

Análise Calculada para: 0,05 ^0

Calculado: C, 57.94; H, 6.63; N, 24.13 I

Encontrado : C, 57.92; H, 6.67; N, 24.11

Exemplo 26

6-Morfolinopurino-9^D-2',3'-didesoxirribofuranosido

Foi preparado o composto 6-morfolinopurina por substituição nucleofílica do grupo cloro da 6-cloropurina ( sigma Chemical Co., St. Louis MO) pelo grupo amina da morfolina.

Os compostos 6-morfolinopurina (0,501 g 2,44 mmoles) e 3’-desoxitimidina (0,842 g; 3,72 mmoles) (Horwitz J.P. et al J. Org. Chem., 31, 205, 1966) foram sujeitos ã reacção e cromatografados em AG1-X2 (na forma OH) e em XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18. Da liofilização obteve-se 0,292 g do composto 6-morfolinopurino-9y^ -D-2',3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,2 (p.f. 97°C).

Análise Calculada para

0,20 H₂0

Calculado : C, 54.43; H, 6.33; N, 22,67

Encontrado : C, 54.48; H, 6.28; N, 22.51

Exemplo 27

6-Y-Y-Dimetilalilaminopurino-9-^ -D-2¹,3¹-didesoxirribofuranosido

Os compostos 6-Y-Y-dimetilalilaminopurina (0,500 g ; 2,46 mmoles, Sigma Chemicals, St. Louis, MO) e 3’-desoxitimidina (0,752 g ; 3,32 mmoles) (Horwitz J.P. et al , J. Org. Chem., 31, 205, 1966) foram sujeitos ã reacção e cromatografados em AGI -X2 (forma OH) como foi descrito no Exemplo 18.

solvente foi removido das fracções con tendo o produto no vácuo e o resíduo foi rapidamente cromatografado numa coluna de sílica gel, de 3x50 cm, com clorofórmio/metanol (95:5, v/v). As fracções contendo o produto foram depois aplicadas numa coluna XAD-2, de 2,5 x 20 cm e eluídas com metanol. 0 produto na forma de goma foi transferido em acetona para um frasco-ampola e da liofilizaçao obteve-se 0,445g do composto 6-Y-Y-dimetilalilaminopurino-9-/$-D-2',3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado com 0,45 equivalen tes de água e 0,20 equivalentes de acetona.

Análise Calculada para	: C15H2AO2 0,45 H20 0,2C3H6O
Calculado : C, 57.99;	H, 7.21; N, 21.68
Encontrado : C, 57.77;	H, 6.91; N, 21.41
Exemplo 28 6-Furfurilaminopurino-9·	-p -D-21,3’-didesoxirribofuranosido

Foram sujeitos á reacção os compostos 6-furfurilaminopurina (0,502 g; 2,33 mmoles, Sigma Chemicals, St. Louis, MO) e 3¹-desoxitimidina (0,754g ; 3,33 mmoles) (Horwitz J.P. et al J. Org. Chem., 31, 205, 1966) e cromatografadas em AG1-X2 (na forma OH) e em XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18. 0 solvente foi removido das fracções contendo o produto, no vácuo e o resíduo foi rapidamente cromatografado numa coluna de sílica gel, de 5x50 cm, com clorofórmio/metanol (9:1, v/v).

Da liofilização obteve-se 0,303g do composto 6-furfurilaminopurino-9y3 -D-2',3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,2.

Análise Calculada para ^C15^H17^N5°3 ^{0,2 H}2°

Calculado : C,	56.49;	H,	5.50;	N,	21.96
Encontrado : C,	56.50;	H,	5.53;	N,	21.97

Exemplo 29

6-Benzilmercaptopurino-9-^ -D-2¹,3¹-didesoxirribofuranosido Foram sujeitos à reacção os compostos 6-benzilmercaptopurina (0,501 g; 2,07 mmoles, Sigma Chemicals, St. Louis , MO) e 3'-desoxitimidina (0,704 g; 3, 11 mmoles) (Horwitz J. P. et al J. Org. Chem., 31, 205, 1966) e cromatografados em AGI- X2 (forma OH) como foi descrito no Exemplo 18. Com a excepção de que foi utilizado 10 ml de glime para dissolver a base de purina. O solvente foi removido no vácuo das fracções contendo o produto e o resíduo foi rapidamente cromatografado numa coluna de sílica gel, de 3x50 cm, com clorofórmio / metanol (95:5, v/v).

produto foi transferido em etanol para um frasco-ampola e da liofilização obteve-se 0,304 g do composto 6-benzilmercaptopurino-9-^ -D-2',3'-didesoxirribofuranosido que foi analisado com 0,05 equivalentes de água e 0,05 equivalentes de etanol (p.f. 81-832C).

Análise Calculada para C^yH-^gN^C^S 0,05 ^0 0,05 ^ΗθΟ

Calculado : C, 59.43; H, 5.37; N, 16.21; S, 9.28

Encontrado: C, 59.49; H, 5.38; N, 16.32; S, 9.30

Exemplo 30

6-Anilinopurino-9-/3 -D-2¹,3¹-didesoxirribofuranosido

Foram sujeitos á reacção os compostos 6-anilinopurina (0,500 g; 2,37 mmoles, Sigma Chemicals, St. Louis, MO) e 3’ -desoxitimidina (0,752 g; 3,32 mmoles) (Horwitz. J.P. et al J. Org. Chem., 31, 205, 1966) e cromato grafados em AGI- X2 (na forma OH) como foi descrito no Exemplo 18. 0 solvente foi removido das fracções contendo o pro duto no vácuo e o resíduo foi rapidamente cromatografado numa coluna de sílica gel, de 2,5 x 50 cm, com clorofórmio/metanol (95:5, v/v). Da liofilização obteve-se 0,470 g do composto 6-anilinopurino-9-/^-D-2’,3’-didesoxirribofuranosido

(p.f.170-172QC).

que foi analisado como um hidrato 0,05

Análise Calculada para 0,05 H^O

Calculado : C, 61.55; H, 5.52; N, 22.43

Encontrado: C, 61.57; H, 5.55; N, 22.43

Exemplo 31 2-Amíno-6-etoxipurino-9-/B -D-2¹,3¹-didesoxirribofuranosido

Foram sujeitos à reacção os compostos 2-amino-6-etoxipurina (0,5 g ; 2,8 mmoles preparado por substituição nucleofílica do grupo cloro da 2-amino-6-cloropurina (Aldrich Chemical Co., Milwaukee Wl) pelo anião alcoxi formado entre o hidreto de sódio e etanol) e 3'-desoxitimidina (0,950 g ; 4,19 mmoles) (Horwitz J.P. et al J. Org.Chem. 31, 205, 1966) e á cromatografia em AG1-X2 (na forma OH) e em XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18. 0 solvente foi removido no vácuo das fracções contendo o produto e o resíduo foi cromatografado numa coluna de sílica gel, de 5x20cm, com clorofórmio/metanol (9:1, v/v). Da liofilização obteve-se 0,443 g do composto 2-amino-6-etoxipurino-9-/^-D-2',3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,3 (p.f. 150QC, fusão parcial a 65QC).

Análise Calculada para ^G12^H17^N5°3

0,3 H₂0

Calculado : C, 50.63; H, 6.23; N, 24.60

Encontrado : C, 50.77; H, 6,21; N, 24.63

Exemplo 32

2.6.8- Tri-aminopurino-9-y^ -D-2¹^'-didesoxirribofuranosido

Foram sujeitos ã reacção os compostos

2.6.8- tri-aminopurina (0,500 g; 3,0 mmoles) (Davies, R., et al., Biochem. Biophys, Acta., 564 (3), 448, 1979) e 3'-desoxitimidina (1,02 g ; 4,50 mmoles) (Horwitz J.P. et al J.

Org. Chem. 31, 205, 1966) e cromatografados em AG1-X2 (na forma OH) e em XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18. Da liofilização obteve-se 0,148 g do composto 2,6,8-triaminopurino-9-/3 -D-2',3'-didesoxirribofuranosido que foi analisado com

0,7 equivalentes de metanol (p.f. 154QC).

Análise Calculada para	0,7 N,	ch4o 34.08
Calculado	: C,	44.76;	H,	6.24;
Encontrado	: C,	44.51;	H,	5.95;	N,	33.78

Exemplo 33

2-Amino-6-benzilaminopurino-9-_Í/⁷⁾ -D-2',3 *-didesoxirribofuranosido

Foram sujeitos à reacção os compostos 2-amino-6-benzilaminopurina (0,2 g; 0,8 mmoles preparado por substituição nucleofílica do grupo cloro da 2-amino-6-cloro- > purina pela benzilamina. Aldrich Chemical Co. Milwaukee Wl) i ! e 3’-desoxitimidina (0,282 g 1,2 mmoles) (Horwitz J.P. et al J. Org. Chem., 31, 205, 1966) e cromatografados em AGI- X2 (na forma OH) e em XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18, com a excepção de que foram utilizadas pequenas quantidades de purina nucleosido fosforilase ( 10 000 U.I.) e de timidina fosforilase ( 5 000 U.I.). Da liofilização obteve-se 0,182 g do composto 2-amino-6-benzilaminopurino-9-^-D-2’,3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado com 0,60 equivalentes de metanol (p.f. 92-94QC).

Análise Calculado para ^C17^H20^N6°2 ^o-^6OCH4°

Calculado : C, 58.78; H, 6.28; N, 23.37

Encontrado : C, 58.60; H, 6.06; N, 23.48

Exemplo 34 2-Amino-6-ciclopropilaminopurino-9-/^-D-2¹,3¹-didesoxirribofuranosido ΐ

Ϊ I

Foram sujeitos à reacção os compostos j 2-amino-6-ciclopropilaminopurina (0,495 g; 2,1 mmoles preparado por substituição nucleofílica do grupo cloro da 2-amino-6-cloropurina pela ciclopropilamina, Aldrich Chemical Co i i Milwaukee Wl) e 3'-desoxitimidina (0,73 g; 3,2 mmoles) (Horwi4 tz J.P. et al J. Org. Chem. ,31, 205, 1966) e cromatografadosi

em AGI- X2 (na forma OH) e em XAD-2 como foi descrito no Exemplo 18. Da liofilização obteve-se 0,419 g do composto 2-amino-6-ciclopropilaminopurino-9-yô -D-2*,3'-didesoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,3 (p.f.82-842C).

Análise Calculada para

Calculado : C, 52.80;

Encontrado :C, 52.83;

C13H	18N6°2	0,3	h2o
H,	6.34;	N,	28.42
H,	6.35;	N,	28.44

Exemplo 35 2-Amino-6-metilaminopurino-9-/^ -D-2* ^'-didesoxirribofuranosido

Os compostos 2-amino-6-metilaminopurina (0,5 g ; 3,0 mmoles preparado por substituição nucleofílica do grupo cloro da 2-amino-6-cloropurina pela metilamina, Aldrich Chemical Co., Milwaukee Wl) e 3’-desoxitimidina (0,893 g ; 3,9 mmoles ) (Horwitz J.P. et al., J. Org. Chem., 31, 205, 1966) foram colocados em suspensão em 100 ml de solução tampão de fosfato de potássio, pH de 6,8 contendo azida de potássio 0,04%. Foram adicionados purina nucleosido fosforila se purificada ( 2 880 U.I.) e timidina fosforilase ( 1200 U.I) (Krenitsky T.A. et al., Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e amistura reaccional foi agitada a 33QC durante 72 horas. A mistura reaccional foi aplicada numa coluna de AG1-X2 (na forma OH) de 2,5 x 10 cm e o produto foi eluído com metanol aquoso 90%. 0 solvente foi removido no vácuo e o resíduo foi cromatografado numa coluna de sílica gel, de 2,5 x 30 cm, com clorofórmio/metanol (97:3, v/v). Da liofilização obteve-se 0,3 g do composto 2-amino-6-metilaminopurino-9--D-2’,3¹-didesoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,4 (p.f. 95QC, fusão parcial a 752C.)

Análise Calculada para	C11H	16N6°2	0,4 H2O
Calculado : C,	48.66;	H,	6.24;	N, 30.95
Encontrado: C,	48.57;	H,	6.27;	N, 30.77

Exemplo 36

2-Amino-6-n-propoxipuríno-9-^-D-2 ', 3 *-didesoxirribofuranosido

Os compostos 2-amino-6-n-propoxipurina (o,21 g; 1,1 mmoles preparado por substituição nucleofílica do grupo cloro da 2-amino-6-cloropurina, Aldrich Chemical Co., Milwaukee Wl, pelo anião alcoxi formado entre o hidreto de sódio e o n-propanol) e 3'-desoxitimidina (0,293 g; 1,3 mmoles) (Horwitz, J.P. et al, J. Org. Chem., 31, 205, 1966) foram colocados em suspensão em 100 ml de solução tampão de fosfato de potássio lOmM, pH de 7,0. contendo azida de potássio 0,04%. Foram adicionados purina nucleosido fosforilase purificada (2880 U.I.) e timidina fosforilase ( 1200 U.I.) (Krenitsky, T.A. et al., Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e a mistura reaccional foi agitada a 332C durante 48 horas. A mistura reaccional foi aplicada numa coluna de AGI- X2 ( na forma OH) de 2,5 x 5 cm e eluída com metanol aquoso 90%. 0 solvente foi removido no vácuo e o resíduo foi rapidamente cromatografado numa coluna de sílica gel de 2,5 x 30 cm, com clorofórmio / metanol (9:1 v/v).

Da liofilização obtew-se 0,132 g do composto 2-amino-6-n-propoxipurino-9yÔ -D-2’,3'-didesoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,2 (p.f.702C).

Análise Calculada para ^C13^H19^N5°3

0,2 H₂O

Calculada : C, 52.59; H, 6.59; N, 23.59

Encontrado : C, 52.52; H, 6.62; N, 24.49

Exemplo 37

6-Benzilaminopurino-9-^) D-2',3¹-dídesoxirribofuranosido

Os compostos 6-benzilaminopurina (l,0g ;

4,44 mmoles, Sigma Chemicals, St. Louis, MO) e 3’-desoxitimi dina (1,0 g ; 4,4 mmoles) (Horwitz, J.P. et al., J. Org.Chem. 31, 205, 1966) foram colocados em suspensão em 50 ml de solução tampão de fosfato de potássio 15mM, pH de 7,2. Foram adi cionados purina nucleosido fosforilase purificada ( 2000 U.I.) e timidina fosforilase ( 7900 U.I.) (Krenitsky, T.A., et al

Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381. 444) e amistura reaccional foi agitada a 25QC. Após 1 hora, foi adicionado 6 ml de diglime e a mistura reaccional foi agitada a 37QC durante 6 dias. A mistura reaccional foi filtrada e o filtrado foi ajustado ao pH de 10,5 com hidróxido de amónio, foi aplicado numa coluna de AGI - X2 (na forma de formiato) de 2 x 6 cm e o produto foi eluído com propanol aquoso 30Z. O produto foi depois cromatografado numa coluna de P-2, de 2,5 x 90 cm, foi eluída com propanol aquoso 30Z e da liofilização obteve-se 0,063 g do composto 6-benzilaminopurino-9-^-D-2’,3’- didesoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,5 (p.f. 652C).

Análise Calculada para ^C17^H19^N5°2

0,5 H₂O

Calculado : C, 61.06; H, 6.03; N, 20.94

Encontrado : C, 61.29; H, 6.21; N, 20.69

Exemplo 38

6-iso-Propoxipurino-9-β-D-2',3'-didesoxirribofuranosido

Foram sujeitos á reacção os compostos 6- i -iso-propoxipurina (0,5 g ; 2,8 mmoles, Sigma Chemicals, St.

I Louis MO) e 3’-desoxitimidina (0,95 g ; 4,2 mmoles) (Horwitz ; J.P. et al J.Org. Chem., 31, 205, 1966) e à cromatografia em AGI- X2 (na forma OH) e em XAD-2 como descrito no Exemplo 18. 0 solvente foi removido no vácuo das fracções contendo o produto e o resíduo foi dissolvido em propanol aquoso 30Z.

Após cromatografia numa coluna de G-10, de 5 x 90 cm, desenvolvida com propanol aquoso 30%, obteve-se ; uma goma que foi transferida em acetona para um balão de lio- ; filização . Da liofilização obteve-se 0,313 g do composto 6-iso-propoxipurino-9-/3-D-2’,3’-didesoxirribofuranosido que i foi analisado com 0,2 equivalentes de água e 0,2 equivalentes

de acetona (p.f. 75°C)
Análise Calculada para	: C13H18N	4°3	0,2 C3H6O 0,2 H20
Calculado : C, 55.65;	H, 6.73;	N,	19.09
Encontrado : C, 55.65;	H, 6.59;	N,	19.12

Exemplo 39

6-n-Propilaminopurino-9-/3 -D-2¹,3¹-didesoxírribofuranosido Foram sujeitos ã reacção os compostos

6-n-propilamina (0,500 g; 2,81 mmoles, Sigma Chemicals, St. Louis, MO) e 3'-desoxitimidina (0,957 g ; 4,26 mmoles) (Horwitz, J. P. et al., J. Org. Chem., 31, 205, 1966) e ã cromatografia em AGI -X2 (na forma OH) e em XAD-2 como descrito no Exemplo 18 com a excepção de que os 5 ml de sulfóxido dimetílico foram substituídos por um adicional de 5 ml de N,N-dimetilformamida. 0 solvente foi removido no vácuo das fracções contendo o produto e o resíduo foi rapidamente cromatografado numa coluna de sílica gel, de 3 x 50 cm. Com clorofórmio/ /metanol (9:1 v/v). Da liofilização obteve-se 0,499 g do composto 6-n-propilaminopurino-9-/0 -D-2’,3'-didesoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,7.

Análise Calculada para

0,7H₂O

Calculado : C, 53.85; H, 7.09; N, 24.15

Encontrado: C, 53,93; H, 7.08; N, 24.18

Exemplo 40

6-Ciclo-hexilaminopurino-9-^ -D-2* ^'-dídesoxirribofuranosido

Foi preparado o composto 6-ciclo-hexilaminopurina por substituição nucleofílica do grupo cloro da 6-cloropurina pela ciclo-hexilamina.

Os compostos 6-ciclo-hexilaminopurina (1,0 g; 5 mmoles) e 3'-desoxitimidina (2,07 g; 9,1 mmoles) (Horwitz, J. P. et al., J. Org.Chem., 31, 205, 1966 ) foram dissolvidos em 25 ml de 2-metoxi-etil-éter e 500 ml de solução tampão de fosfato de potássio lOmM, pH de 7,2. Foram adicionados purina nucleosido fosforilase purificada ( 5000 U.I.) e timidina fosforilase ( 3850 U.I.) ( Krenitsky T.A. et al., Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381. 444) e a mistura reaccional foi agitada a 37QC durante 7 dias.

A mistura reaccional foi aplicada numa coluna de XAD-2 e foi lavada extensivamente com água.

produto foi eluído com metanol aquoso

90%. As fracçoes que absorvem UV foram reunidas e aplicadas j numa coluna AGI - X2 (na forma OH), de 2x12 cm, e o produto | foi eluído com metanol aquoso 30%. 0 produto foi ainda croma-i tografado numa coluna P-2, de 2,5 x 90 cm e numa coluna G-10 | de 2,5 x 90 cm e cada coluna foi eluída com propanol aquoso 30%. Da liofilização obteve-se 0,093 g do composto 6-ciclo-hexilaminopurino-9-β -D-2',3'-didesoxirribofuranosido (p.f. 70-72QC).

Análise Calculada para ^C16^H23^N5°2 i

Calculado : C, 60.55; H, 7.30; N, 22.07 ΐ í

Encontrado : C, 60.37; H, 7.39; N, 21.94

Exemplo 41

6-Metilaminopurino-9-^ D-2* ,3'-didesoxirribofuranosido

Foram colocados em suspensão os compostos 6-metilaminopurina (4,31 mmoles; lg ) obtido de sigma Che mical Co., St. Louis MO e 3'-desoxitimidina (4,40 mmoles;

g) (Horwitz J. P. et al ; J. Org. Chem. 31, 205, 1966) em 50 ml de solução tampao de fosfato de potássio lOmM, pH de 7, e azida de potássio 0,04%. Foram adicionadas timidina fosforilase purificada ( 2 000 U.I.) e purina nucleosido fosforilase (2 400 U.I.) (Krenitsky T.A., et al ., Biochemistry,20 3615, 1981 e Patente Norte-Americana 4.381.444) e a suspensão foi agitada a 352C. Após três dias, a mistura reaccional foi armazenada a -20QC. Ϊ

A mistura reaccional depois de lique- i feita, foi filtrada e o filtrado foi aplicado numa coluna de \ 2,5 x 10 cm contendo Dowex-1 -hidróxido. O produto foi eluí- | do da coluna com metanol/água 90% (v/v). ί

As fracçoes contendo o produto foram com binadas e o solvente foi removido sob vácuo . O referido material foi cromatografado segunda vez numa coluna de 5x90 cm contendo resina BioRad P-2 com n-propanol / água 30% | (v/v). As fracçoes contendo o produto foram reunidas e depois | da liofilização obteve-se 0,391 g do composto 6-metilamino- j

purino-9-^ -D-2’,3’-didesoxirribofuranosido que foi analisado como um hidrato 0,1.

Analise Calculada para	C1;lH	15N5°2 0,1 H2°
Calculado : C, 52.62;	H,	6.10; N, 27.89
Encontrado : C, 52.75;	H,	6.16; N, 28.01
NMR dados 8.34 (s,	1 H8	), 8.12 (s, 1 H,	h2)	, 7.72 (b, 1H,
NH) 6.23	(dd,	1 H, H-p, 5.06	(t,	1 H, 5' OH)
4.10 (m,	1 H,	H4.) 3.58-3.69	(M,	1 H 5' CH2),

3.45-3.55 (m, 1 H, 5' CHp, 2.95 (b, 3H, CHp, 2.40 (m, 2H, 2’CH₂) e 2.07 (m, 2 H, 3’ CH₂).

Exemplo 42

Formulações de comprimidos

As formulações que se seguem A, B e C são preparadas por granulação a húmido dos ingredientes com uma solução de povidona, seguida pela adição de estearato de magnésio e pela compressão.

mg /comprimido mg/comprimido

Formulação A

(a) Ingrediente activo	250	250
(b) Lactose B.P.	210	26
(c) Povidona B.P.	15	9
(d) Amido glicolato de sódio	20	12
(e) Estearato de magnésio	5	3
	500	300
Formulação B
(a) Ingrediente activo	250	250
(b) Lactose	150	-
(c) Avicel PH 101	60	26
(d) Povidona B.P.	15	9
(e) Amido glicolato de sódio	20	12
(f) Estearato de magnésio	5	3
	500	300
Formulação C
mg/	comprimido
Ingrediente activo	100
Lactose	200
Amido	50
Povidona	5
Estearato de magnésio	4
	359

As formulações que se seguem D e E , são preparadas por compressão directa dos ingredientes misturados .

A lactose na formulação E é do tipo de compressão directa ( Dairy Crest - Zeparox).

Formulação D

Ingrediente activo

Amido pré-gelatinado

Formulação E

Ingrediente activo

Lactose

Avicel mg/ comprimido

250

150

400 mg/ comprimido

250

150

100

500

Formulação F ( Formulação de libertação controlada)

A formulação é preparada por granulação a húmido dos ingredientes, com uma solução de povidona, seguida pela adição de estearato de magnésio e compressão.

mg/ comprimido

(a)	Ingrediente activo	500
(b)	Hidroxipropilmetilcelu- lose
	(Methocel K 4M Premium)	112
(c)	Lactose B.P.	53
(d)	Povidona B.P.	28
(e)	Estearato de magnésio	7

700

A libertação da droga é realizada durante um período de cerca de 6 a 8 horas e fica completa após 12 horas.

Exemplo 43

Formulações de cápsulas

Formulação A

A formulação da cápsula é preparada por mistura dos ingredientes da Formulação D do Exemplo 19 atrás referido e enchi, mento numa cápsula de duas partes de gelatina dura. A Formulação B (a seguir) é preparada de maneira semelhante.

Formulação B mg/ cápsula

(a)	Ingrediente activo	250
(b)	Lactose B.P.	143
(c)	Amido glicolato de sódio	25
(d)	Estearato de magnésio	2

420

Formulação C

	mg/ cápsula
(a) Ingrediente activo	250
(b) Macrogol 4 000 B.P.	350

600

As cápsulas da formulação C são preparadas por fusão do Macrogol 4000 BP, por dispersão do ingrediente activo na substância fundida e enchimento de cápsulas de duas partes de gelatina dura.

Formulação D

Ingrediente activo

Lecitina óleo de Arachis mg/ cápsula

250

100

100

450

As cápsulas da formulação D são preparadas por dispersão do ingrediente activo na lecitina e no

óleo de Arachis e por enchimento em cápsulas de gelatina elástica mole.

Formulação E (Cápsula de Libertação Controlada)

A formulação da cápsula de libertação controlada que se segue, é preparada por extrusão dos ingredientes a, b e c , utilizando um aparelho de extrusão, seguida pela formação de esferas e secagem. As pílulas secas são depois revestidas com uma membrana (d) de libertação controlada e enchem-se em cápsulas de duas partes de gelatina dura.

mg/ cápsula

(a)	Ingrediente activo	250
(b)	Celulose microcristalina	125
(c)	Lactose B.P.	125
(d)	Etilcelulose	13

513

Exemplo 44

Formulação de injectável

Formulação A

Ingrediente activo

Solução de ácido clorídrico, 0, 1M ou

Solução de hidróxido de sódio

0, 1M q. b. p.

Água esterilizada q.b. p.

0,200 g pH 4,0 ou 7,0 ml ingrediente activo é dissolvido na maior parte de água (35-40QC) e o pH é ajustado entre 4,0 e 7,0 com ácido clorídrico ou com hidróxido de sódio conforme adequado. Depois é completado o volume com a água, è filtrado através de um filtro micropore estéril para um frasco -ampola de vidro ( tipo 1) de cór âmbar e selado com revestimentos estéreis e sobre-selado.

Formulação B

Ingrediente activo 0,125 g

Solução tampão de fosfato de pH7 esterilizada e apirogénica,

q.b.p.

ml

Exemplo 45

Injectável intramuscular

Ingrediente activo	0,20 g
Álcool benzílico	0,10 g
Glicofurol 75	1,45 g
Água para injectáveis q.b. p.	3,00 ml
0 ingrediente	activo é dissolvido em

glicofurol. 0 álcool benzílico é depois adicionado e dissol- i vido e adiciona-se água até 3 ml.

A mistura é depois filtrada através de um filtro micropore estéril e selada em frasco-ampola de vidro ( tipo 1) de cor âmbar e de 3 ml.

Exemplo 46
Xarope
Ingrediente activo		0,25	S
Solução de sorbitol		1,50	g
Glicerol		2,00	g
Benzoato de sódio		0,005 g
Essência de pêssego	17.42.3169	0,0125 ml
Água purificada q.b.	P·	5,00	ml

Dissolve-se o ingrediente activo numa mistura de glicerol e da maior parte da água purificada. Adi- ; ciona-se uma solução aquosa de benzoato de sódio à solução, seguida pela adição da solução de sorbitol e finalmente do aromatizante. Completa-se o volume com a água purificada j e mistura-se bem.

Exemplo 47

Supositório

mg/ supositório

Ingrediente activo (63 yum) *

Excipiente lipossolúvel duro, BP (Witepsol H 15 -Dynamit NoBel)

250

770

020 * Utiliza-se o ingrediente activo como um pó em que pelo menos 90Z das partículas têm 63 yum de diâmetro ou menos.

Funde-se um quinto de Witepsol H 15 numa panela de vapor revestida, a 452C no máximo. Peneira-se o ingrediente activo através de uma peneira de 200 yum e adiciona-se à base fundida com agitação, utilizando um dispositivo ” silverson adaptado com uma cabeça cortante, até se alcançar uma dispersão regular. Mantendo-se a mistura a 452C adiciona-se o restante Witepsol H15 à suspensão e agita-se para assegurar uma mistura homogénea.

Passa-se toda a suspensão através de uma peneira de aço inoxidável de 250 yum e deixa-se arrefecer até 402C, com agitação contínua.

à temperatura entre 382C a 402C, preenchem-se com 2,02 g da mistura, moldes de plástico adequados de 2 ml. Os supositórios são deixados a arrefecer até ã temperatura ambiente.

Exemplo 48

Óvulos mg/ óvulo

Ingrediente activo (63 yum )	250
Dextrose desidratada	380
Fécula de Batata	363
Estearato de magnésio	7 1000

Os ingredientes turados directamente e os óvulos são são directa da mistura resultante.

atrás referidos são mispreparados por compresActividade antivírica

Os compostos 6-ciclopropilaminopurino-9-^-D-2',3'-didesoxirribofuranosido e 6-metilaminopurino-D-2 ', 3 ’-didesoxirribofuranosido, foram testados para a actividade contra o HIV genericamente de acordo com o método descrito por Mitsuya et al, Proc. Nat. Acad. Sei., USA Vol 82, págs. 7096-7100, Out.1985 e foi verificado possuírem actividade contra o HIV nas concentrações de 1 uM.

Claims (1)

1. Processo para a preparação de um composfórmula (I) (I) na qual

   R^ ^R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo amino; e representa um átomo de halogéneo, um grupo alcoxi ⁸l-6 °P^ci°nalmente substituído por um grupo cicloalquilo Οβ_θ; um grupo cicloalquiloxi C₃_g; ariloxi, aralquilo ou aralquiloxi nos quais o grupo arilo pode ser opcionalmente substituído com um gru po alquilo inferior, hidroxi ou átomo de halogéneo; um grupo cicloalquiltio Cg_^; um grupo alquiltio C^_g> ariltio ou aralquiltio nos quais o grupo arilo pode estar opcionalmente substituído por um gru po alquilo inferior, hidroxi ou um átomo de halogé neo; ou r₂ representa um grupo heterociclico contendo um átomo de oxigénio ou um ou dois átomos de azoto e três a sete átomos de carbono com opcionais ligações duplas no anel opcionalmente contendo um heteroátomo de enxofre e/ou de oxigénio e opcionalmente substituído no anel por um ou mais grupos de alquilo inferior,hidroxi ou de halogéneo,um grupo ci cloalquiltio aralquiltio no qual o grupo arilo pode ser substituído por um grupo alquilo inferior, hidroxi ou um átomo de de halogéneo; ou

   R-2 representa um grupo imidazoliltio no qual a parte de imidazolilo pode ser substituído por um grupo alquilo inferior e/ou C substituído por um grupo nitro; ou

   R-2 representa um grupo amino mono ou di-substituida por um grupo alquilo C-^_g, alcoxi hidroxialquilo 6^-6 ^e/°^u cicloalquilo um grupo arilo, aralquilo nos quais o grupo arilo pode ser opcionalmente substituído por um grupo alquilo in ferior, hidroxi ou por um átomo de halogéneo, um grupo alilo opcionalmente substituído por grupos mono ou di-alquilo ou alcoxi e

   R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo amino; e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis, além dos compostos com a fórmula (I) em que e R^ representam átomos de hidrogénio e

   R2 representa um grupo metoxi, metiltioou metilamina, caracterizado por:

   (A) fazer-se reagir um composto com a fórmula (II) na qual ^Rl’ ^R2 ^{e R}3 têm as significações anteriores

   A representa um grupo precursor do grupo hidroxi, com um agente ou sob condiçoes adequadas para converter o referido grupo precursor no desejado grupo ; ou (B) fazer-se reagir uma base de puriria com a .fórmula (III)

   B-H (III) na qual

   B representa una· base de purina ou um seu equivalente funcional com um composto adequado para introduzir o anel de didesoxiribofuranosilo desejado na posição 9 da base de purina com a fórmula (III), e se efectuar simultânea ou posteriormente uma ou mais das conversões opcionais seguintes:

   (i) quando se preparar um composto com a fórmula (I) converter-se no seu derivado farmaceuticamente aceitável.

   (ii) quando se preparar um derivado farmaceuticamente aceitável do composto com a fórmula (I) converter-se o referido derivado no composto com a fórmula (I) ou num seu derivado diferente.

   - 2â -

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por

   R^ e Rg representarem cada um, um átomo de hidrogénio.

   - 3ê -

   Processo de acordo com qualquer das rei vindicações 1 ou 2, caracterizado por

   Rj e R^ representarem cada um, um átomo de hidrogénio e por

   R2 reoresentar um grupo cicloalquilamina Cg.g·

   - 56 Λ * r

   - Processo de acordo com as reivindicações anteriores caracterizado por se obter o composto 6-ciclopropilaminopurino-9-3 -0-2’-3'-didesoxiribofuranosido.

   - ₅a _

   Processo para a preparação de composições farmacêuticas, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo um composto quando preparado de acordo com qualquer das reivindicações anteriores em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável.

   A requerente declara que os primeiros pedidos desta patente foram apresentados no Reino Unido em 9 de Abril de 1987, 29 de Maio de 1987 e em 30 de Setembro de 1987, sob os n°s. 8708512, 8712691 e 8723013, respectiva mente.