HU201954B - Process for producing curative nucleosides - Google Patents

Description

A találmány 6-szubsztituált-2’,3’-didezoxi-nukleozidok és gyógyászatilag elfogadható származékaik előállítására vonatkozik, amelyek alkalmasak bizonyos vírusfertőzések megelőzésére és gyógyítására.

Az AIDS betegségről ismét, hogy immunoszupresszív vagy immunodestruktív hatása van és gyakran végzetes kimenetelű fertőzések kiváltója lehet. Közelebbről az AIDS okozója a T-sejtek, különösen az OKTP-felületi markert hordozó helper-indukáló alcsoport fokozatos elpusztulásának.

A Humán Immunodefficiency Virus-t (HTV) AIDS-betegekből vagy AIDS-t kiváltó tünetekkel rendelkező betegekből izolálták. A HÍV citopatikus hatású és különösen az OKT⁴ markért hordozó Tsejteket fertőzi és pusztítja és most általában az AIDS kórokozójaként ismert.

Mióta felismerték, hogy a HTV az AIDS kórokozója, különösen sok javaslat született HTV-ellenes kemoterápiás szerekre, amelyek hatásosak lehetnek AIDS-betegségben szenvedők esetében is. így például javasolták a 3’-azido-3’-dezoxi-timidint (zidovudin) és gyógyászatilag elfogadható származékait humán retrovírus, így az AIDS által kiváltott fertőzések kezelésére (1.961.185. számú európai szabadalmi leírás).

A 0.206.497. számú európai közzétételi iratban purin-nukleozidokat írnak le, amelyek alkalmasak HIV-fertőzések kezelésére, különösen kiemelik a

2,6-díammo-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribuf uranozid hatását.

Felismertük, hogy bizonyos 6-szubsztituált2’,3’-didezoxi-nukleozidok alkalmasak vírusos fertőzések, különösen retrovírusok, így például AIDSfertőzések megelőzésére és kezelésére.

Bizonyos 6-szubsztituált-purin-nukleozidok, különösen a 6-metil-amino-purin-9-béta-D-2’,3’didezoxi-rubofuranozid ismert, mint HlV-fertőzések kezelésére alkalmas szer (Bioorg. Khim. 9(1) 52-59/1983/).

A találmány tárgya eljárás (I) általános képletű új, 6-szubsztituált-2’,3’-didezoxi-nukleozidok előállítására, amelyek képletében

Rl jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport,

R2 jelentése halogénatom, előnyösen klóratom, 1-6 szénatomos alkoxi-, előnyösen propil-oxi- vagy izopropiloxi-csoport, amely adott esetben 3-6 szénatomos cíkloalkil-csoporttal szubsztituálva lehet, előnyösen jelenthet ciklopropil-metoxi-csoportot; 3-8 szénatomos cikloalkoxi-, előnyösen ciklobutoxi- vagy ciklopentoxi-csoport; fenil-(l-4 szénatomos alkil)-oxi-, előnyösen benzil-oxi-csoport, 1-4 szénatomos alkil-tio-csoport, vagy fenil-(l-4 szénatomos alkil)-tio-csoport, vagy

R2 jelentése lehet még egy oxigénatomot és egy nitrogénatomot vagy egy nitrogénatomot és 3-7 szénatomot tartalmazó telített heterociklusos gyűrű, előnyösen piperidino-, pirrolidino-csoport, vagy

Rl jelentése lehet még imidazolil-tio-csoport, amelyben az imidazolil-csoport még 1-4 szénatomos alkilcsoporttal és/vagy a szénatomon nitrocsoporttal szubsztituálva lehet, vagy

R2 jelentése lehet még aminocsoport, amely a következő csoportokkal mono- vagy diszubsztituálva lehet, 1-6 szénatomos alkil-, előnyösen metil2 vagy etil-, hidroxi-1 -4 szénatomos alkil-, előnyösen hidroxi-etü-, és/vagy 3-6 szénatomos cikloalkil-, előnyösen ciklopropil- vagy ciklopentil-, fenil-, fenil(1—4 szénatomos alkü) előnyösen benzil-csoport, továbbá 1-4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituált allilcsoport, és

R3 jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport -, kivéve azokat a vegyületeket, amelyek képletében Rl és R3 jelentése hidrogénatom és R2 jelentése metoxi-, metü-tio-, vagy metü-amino-csoport.

A találmány oltalmi körébe tartozik a fenti (I) általános képletű vegyületek gyógyászatilag elfogadható észterszármazékainak előállítása is. Ezek az észterszármazékok a következők: adott esetben 1-4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituált 2-12 szénatomos alkanoil-, fenil-(l-4 szénatomos alkil)-, adott esetben 1-4 szénatomos alkil-, nitro- vagy aminocsoporttal szubsztituált benzoilészter.

A fenti (I) általános képletben R2 jelentésében előnyösek a szubsztituált aminocsoportok, így például az etil-amino-, etü-metil-amino-, cildopropilamino- és izopropil-amino-csoport.

Az 1 -6 szénatomos alkilcsoport előnyösen metilvagy etilcsoportot jelent, a halogénatom jelentése klór-, bróm-, jód- vagy fluoratom, előnyösen fluor-, klór- vagy jódatom.

Előnyösek azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyek képletében Rí és R3 jelentése hidrogénatom és R3 jelentése hidrogénatom és R2 jelentése szubsztituált aminocsoport, így például mono(3-6 szénatomos cikloalkil)-amino-, mono- vagy di(l -6 szénatomos alkil)-amino- vagy heterociklusos csoport, így például piperidino- vagy pirrolidino-csoport.

Különösen előnyösek a következő vegyületek:

1. 6-N-piperidÍno-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

2. 6-ldőr-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

3. 6-etil-amino-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxiribofuranozid,

4.6-(etil-metil-amino)-9-béta-D-2’,3’-didezoxiribofuranozid,

5. 6-jód-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

6. 6-(ciklopropil-metil-amino)-purin-9-béta-D2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

7. 6-(izopropil-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

8. Tiamiprin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

9. 2-(amino-6-(n-propoxi)-purin-9-béta-D2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

10. 6-(etil-tio)-purin-9-béta-D-2’,3 ’-didezoxiribofuranozid,

11. 2-amino-6-(benzil-tio)-purin-9-béta-D2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

12. 6-etoxi-purin-9-béta-D-2’,3 ’-didezoxi-ribofuranozid,

13. 6-(dimetil-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

14. 6-(hidroxi-etil-amino)-purin-9-béta-D2’,3 ’-didezoxi-ribofuranozid,

15. 6-(ciklopropil-amino)-purin-9-béta-D-2’,3 ’didezoxi-ribofuranozid,

-2HU 201954Β

16. 6-(ciklopentü-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’didezoxi-ribofuranozid,

17. 2-amino-6-metoxi-purin-9-béta-D-2’,3 ’-didezoxi-ribofuranozid,

18. 6-(n-propoxi)-purin-9-béta-D-2’,3 ’-didezoxi-ribofuranozid,

19. 6-(n-butoxi)-purm-9-béta-D-2’,3’-didezoxiribofuranozid,

20. 6-(ciklopropü-metoxi)-purin-9-béta-D2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

21. 6-(ciklopentU-oxi)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

22. 6-(ciklohexil-oxi)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

23. 6-(ciklobutil-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’didezoxi-ribofuranozid,

24. 6-(dietü-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

25. 6-pirrolidmo-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

26. 6-morfolmo-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxiribofuranozid,

27. 6-(-y,7-dimetil-allil)-amino-purin-9-béta-D2’, 3 ’-didezoxi-ribof uranozid,

28.6- furfuril-amino-purin-9-béta-D-2’,3’-dldezoxi-ribofuranozid,

29. 6-(benzil-tio)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

30. 6-anüino-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

31. 2-amino-6-etoxi-purin-9-béta-D-2',3’-dÍdezoxi-ribofuranozid,

32. 2,6,8-triamino-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

33. 2-amino-6-(benzil-amino)-purin-9-béta-D2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

34. 2-amino-6-(ciklopropiI-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

35. 2-amino-6-(metü-amino)-purin-9-béta-D2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

36. 2-amino-6-(n-propoxi)-purin-9-béta-D2’,3’-didezoxi-ribofuranozÍd,

37.6- (benzü-amino)-purin-9-béta-D-2’,3 ’-didezoxi-ribofuranozid,

38. 6-izopropoxi-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid,

39.6- (propÍl-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-dide zoxí-ribofuranozid,

40.6- (ciklohexil-amino)-9-béta-D-2’,3 ’-didezoxi-ribof uranozid,

41. 6-(metil-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid.

A fenti vegyületek közül, különösen jó anti-HTV hatásuk alapján igen előnyös az 1.. 6., 13., 15., 16., 25. és 41. számú vegyület.

Az (I) általános képletű vegyületeket és gyógyászatilag elfogadható származékait, beleértve azon vegyületeket, amelyek képletében R i hidrogénatom és R.2 metü-amino-csoport — említve a fenti Bioorg. Khim. hivatkozásban — a továbbiakban a találmány szerinti eljárással előállított vegyületeknek nevezzük.

A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek előnyösen alkalmazhatók a gyógyászatban, különösen retrovírusok okozta fertőzések megelő4 zésére és kezelésére. Ilyen retrovírusok például a következők: humán retrovírusok, így például a HTV, HIV-2 és humán T-sejt limfotropíkus vírus (HLTV), így például HLTV-I vagy HLTV-IV. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek különösen alkalmasak az AIDS és AIDS-szel társult klinikai tünetek, így például AIDS-szel kapcsolatos komplex (ARC), progresszíve általánosított limfadenopátia (PGL), AIDS-szel kapcsolatos neuralgiai tünetek, Kaposi szarkóma és trombocitopenía purpura kezelésére, alkalmasak továbbá psoríasis megelőzésére és kezelésére is.

A találmány szerinti eljárással nyert vegyületeket a fenti betegségek kezelésére általában gyógyszerkészítmények formájában alkalmazzuk.

A vegyületekre való hivatkozásnál minden esetben azok gyógyászatüag elfogadható észter-származékait is értjük.

Előnyösek például a következő 5’-észter-származékok: 3-metil-butirát, oktanoát, benzoát, 4-metil-benzoát, pivalát, propionát, valerát és mezilát.

A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket más egyéb ismert gyógyhatású anyaggal együttesen is alkalmazhatjuk a fentiekben részletezett vírusfertőzések kezelésére, így például alkalmazhatjuk a következő HIV-fertőzések kezelésére alkalmas vegyületekkel kombináltan: 3’-azido-3’dezoxi-timidín (zidovudin), más 2’,3’-dídezoxinukleozídok, így például 2’,3’-didezoxi-citídín, 2’,3’-didezoxi-adenozín, 2’,3’-dídezoxi-inozín, acüdusos nukleozidok, így például aciklovir, interferonok, így például alfa-interferon, vese kiválasztást gátló anyagok, így például alfa-interferon, vese kiválasztást gátló anyagok, így például probenicid, nukleozid-átvitelt gátló anyagok, így például dipiridamol, valamint Immunomodulátorok, így például ínterleukin Π és leukocita makrofág kolónia stimuláló faktorok Az említett vegyületek adagolása történhet egyidejűleg akár közös, akár külön készítmény formájában vagy külön időben, így például egymást követően.

A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények lehetnek orális, rektális, nazális, helyi (például bukkális vagy szublinguális), vaginális vagy parenterális (így például szubkután, intramuszkuláris, intravénás vagy intradermális) adagolásra alkalmas készítmények. A legmegfelelőbb adagolási módot a orvos választja meg és függ a beteg állapotától, a fertőzés fajtájától és az adagolni kívánt vegyülettől. A dózis általában 3-120 mg testtömegküogrammonként naponta, előnyösen 6-90 mg, még előnyösebben 15-60 mg. A kívánt adagot két, három, négy, öt, hat vagy még több részletben is adagolhatjuk, meghatározott időközönként, amelyeklehetnek egységdózisok, így például 10-1500 mg, előnyösen 201000 mg, még előnyösebben 50-700 mg hatóanyagtartalmú dózisok.

A hatóanyagmennyiséget úgy választjuk meg, hogy a plazma koncentráció csúcsa 1-75 pmól, előnyösen 2-50 pmól, még előnyösebben 3-30 pmól értéknél legyenek. Ezt elérhetjük, ha például intravénás injekciók esetében a hatóanyag mennyisége 0,1-5% sóoldatban vagy orális adagolás esetében a bolus 1-100 mg/kg hatóanyag tartalmú. A kívána3

-3HU 201954Β tos vérszintet folyamatos infúzióval is fenntarthatjuk, amely infúziós készítmény mennyisége 0,1— 5 mg/kg/óra vagy szakaszos adagolás esetében 0,415 mg/kg.

Az aktív alkotórészt lehet önmagában is adagolni, azonban előnyösebb gyógyászati készítmények alkalmazása. A jelen találmány szerinti készítmények legalább egy, az előzőekben meghatározott aktív alkotórészt tartalmaznak egy vagy több elfogadható hordozóanyaggal, és tetszés szerint más gyógyhatású szerekkel kombinálva. Mindegyik hordozóanyagnak „elfogadható ”-nak kell lennie olyan értelemben, hogy a készítmény más alkotórészeivel összeférhető legyen, és a betegre ne legyen káros. A készítmények orális, rektális, nazális, helyi (beleértve a száji és nyelvalatti), vaginális vagy parenterális (beleértve a szubkután, intramuszkuláris, intravénás és intradermális) adagolásra használhatók. A készítmények szokásosan dózisegység formájában adagolhatok és a gyógyszergyártásban bármilyen jól ismert módszerrel előállíthatók. Ilyen módszerek magukba foglalják az aktív alkotórész egy vagy több járulékos alkotórészből álló hordozóanyaggal történő egyesítések műveletét. Általában a készítmények az aktív alkotórész folyékony hordozóanyaggal, vagy finomeloszlású szilárd hordozóanyaggal, vagy finom eloszlású szilárd hordozóanyaggal, vagy mindkettővel történő egyenletes és alapos egyesítésével állíthatók elő és ha szükséges, a termék formálható.

Az orális adagolásra alkalmas készítmények különálló egységekként, mint kapszulák, ostyák vagy tabletták, melyek mindegyike az alkotórész előre meghatározott mennyiségét tartalmazza; mint a porok vagy granulátumok; vagy mint olaj-a-vízben folyékony emulziók, vagy víz-az-olajban folyékony emulziók adagolhatok Az aktív alkotórész pirula, liktárium vagy paszta formájában is adagolható. Az orális készítmények szokásosan további más szereket is tartalmazhatnak, mint amilyenek az édesítőszerek, ízesítőszerek és a sűrítők.

A tabletták préseléssel vagy sajtolással készíthetők, tetszés szerint egy vagy több kiegészítő alkotórésszel. A préselt tabletták megfelelő gépen, az aktív alkotórészt tetszés szerinti kötőanyaggal (povidon, zselatin, hidroxi-propil-metil-cellulóz), csúsztatószerekkel inért hígítóanyagokkal, tartósítószerekkel, szétesést biztosító szerekkel (például nátriumkeményítő-glikolát, térhálósított povidon, térhálósított nátrium-karboxi-metil-cellulóz), felületaktív vagy diszpergálószerekkel keverve, laza por vagy granulátum formájában történő préseléssel készíthetők. A sajtolt tabletták megfelelő gépen, inért folyékony hígítóanyaggal nedvesített porkeverék sajtolásával készíthetők. A tabletták tetszés szerint bevonhatók vagy vájattal elláthatók, és olyan módon formálhatók, hogy az az aktív alkotórész lassú vagy ellenőrzött felszabadulását tegye lehetővé, például különböző arányban hidroxi-propil-metil-cellulóz alkalmazásával, hogy kívánt felszabadulási profilt biztosítson.

Szájban, helyi adagolásra alkalmas készítmények az aktív alkotórészt ízesítőanyagban, szokásosan cukorban, akácmézgában, tragantban tartalmazó gyógycukorkák; az aktív alkotórész inért anyag4 bán, mint zselatinban és glicerinben, vagy cukorban és akácmézgában tartalmazó pasztillák; és az aktív alkotórészt erre alkalmas folyékony hordozóanyagban tartalmazó szájvizek.

A rektális adagolásra alkalmas készítmények például a kúpok, erre alkalmas anyaggal, például kakaóvajjal vagy szaliciláttal készülnek.

A vaginális adagolásra alkalmas készítmények, mint pesszárium, tampon, krém, gél, paszta, hab vagy spray kerülhetnek felhasználásra, melyek az aktív alkotórészen kívül az előzőekből ismert vivőanyagokat tartalmaznak.

Parenterális adagolásra alkalmas készítmények magukba foglalják a vizes és nem-vizes izotónikus steril injekciós oldatokat, melyek antioxidánsokat, puffereket, bakteriosztatikus anyagokat és olyan oldott anyagokat tartalmaznak, melyek a készítményt a választott recipiens vérével izotónikussá teszi; és a szuszpendálószereket és sűrítőszereket tartalmazó vizes és nem-vizes steril szuszpenziókat. A készítmények dózisegységben, vagy többszörös dózisban, lezárt edényekben, például ampullákban vagy fiolákban is kiszerelhetők és fagyasztó-szárítás (liof ilizálás) körülményei között tárolhatók, melyekhez közvetlenül a felhasználás előtt, csak a steril folyékony hordozóanyagot, például vizet kell hozzáadni. Azonnali felhasználásra való injekciós oldatok és szuszpenziók az előzőekben leírtakhoz hason ló steril porokból, granulátumokból és tablettákból is elkészíthetők.

Előnyös dózisegység-készítmények azok, amelyek az aktív alkotórész napi dózisát vagy egységét az előzőekben megadott napi egységdózist vagy megfelelő részét tartalmazzák.

A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket tartalmazó keverékeket hatóanyagként alkalmazhatjuk állatgyógyászati készítményekben is.

A találmány szerinti eljárással előállított gyógyszerkészítmények a fentieken kívül tartalmazhatnak még a készítmény fajtájától függően egyéb ismert adalékanyagokat is, így például édesítőszereket, sűrítőanyagokat vagy ízesítőanyagokat.

Az 0) általános képletű vegyületeket a találmány szerinti eljárással a következőképpen állítjuk elő:

egy 0Π) általános képletű purinbázist — a képletben B jelentése a kivánt purincsoportnak felel meg — vagy ^nnak reakcióképes származékát 3’dezoxitimidinnel reagáltatjuk, majd a fentiekkel egyidőben vagy azokat követően kívánt esetben

i) a kapott 0) általános képletű vegyületet gyógyászatilag elfogadható származékává, előnyösen észterszármazékává alakítjuk, vagy ii) a kapott észterszármazékban a nitrocsoportot aminocsoporttá redukáljuk

A találmány szerinti eljárásnál a kiindulási anyagokat, valamint a reakciókörülményeket a szakirodalomból, a nukleozidok előállítására ismert eljárások alapján választjuk meg vagy a következőkben leírt példák szerint járunk el, amelyek azonban nem korlátozzák a találmány oltalmi körét, azok módosítása—a kívánt (I) általános képletű vegyületek körén belül — szintén a találmány oltalmi körébe tartozik így például a nem-kívánatos mellékreakciók elkerülése érdekében, az egyébként reakcióképes csoportokat védőcsoportokkal láthat-4HU 201954Β juk el, amelyek a reakció végbemenetele után eltávolíthatók.

A találmány szerinti eljárásnál a megfelelő, (ΠΙ) általános képletű purinbázist vagy annak sóját vagy védett származékát 3’-dezoxi-timidinnel reagáltatjuk, például a megfelelő pentozil-transzferáló enzimjelenlétében.

A kapott (I) általános képletű vegyületet foszfátvagy más észter-származékává, például foszforilezőszerrel, például P0Cl3-mal vagy a megfelelő észterező szerrel, így például savhalogeniddel vagy savanhidriddel való reagáltatással alakítjuk át. Az (I) általános képletű vegyületeket vagy azok észterszármazékait ismert módon alakítjuk sóvá, így például bázissal való reagáltatással. Az észter- vagy sószármazékokat hidrolízissel a bázisvegyületté alakíthatjuk.

A következő példákkal a korlátozás szándéka nélkül részletesebben mutatjuk be a találmány szerinti eljárást. A „hatóanyag” megnevezés minden esetben az (I) általános képletű vegyületeket, azok sóit vagy egyéb származékait jelenti.

1. példa

6-N-Piperidíno-purin-9-béta-2’,3’-didezoxi-ri bofuranozid

0,5 g (2,41 mmól) 6-N-piperidino-purint (Sigma Chemicals, St, Louis MO) 10 ml dimetil-szulfoxidban oldunk melegítés közben, majd szobahőmérsékletre lehűtjük és hozzáadunk 0,82 g (3,62 mmól) 3’-dezoxi-timÍdint (Howitz, J.P. és munkatársai, J. Org. Chem. 21,205 /1966/), 30 ml 10 mmól-os kálium-foszfát pufferrel együtt (pH- 6,8), amely még 0,04% kálium-azidot is tartalmaz.

10.000 I.U. tisztított timidin-foszforilázt és 20.000 I.U. purin-nuldeozid-foszforilázt (Krenitsky T A. és munkatársai, Biochemistry, 2Ű, 3615, 1981 és 4.381.444. sz. USA-beli szabadalmi leírás) 10 ml DEAE cellulózon (Whatman) adszorbeálunk, majd a kapott szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten keverjük. 8 óra elteltével a reakciókeveréket szűrjük, a szűrletet egymás után kapcsolt oszlopokra adagoljuk. Az első oszlop töltete ÁGI X2-hidroxid gyanta (2,5x10 cm), a második oszlop töltete Amberlite XAD-2 gyanta (2,5x20 cm), majd a minták feladása után az oszlopokat a nagy térfogatmennyiségű vízzel átmossuk és a terméket metanollal eluáljuk. Az eluátumokból az oldószert eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot kloroform/metanol- 9/1 arányú elegyben oldjuk, ismételten kromatografáljuk (szilikagél, 5x20 cm, kloroform/metanol= 9/1). A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, etanolban oldjuk, 0,22 μ,-os szűrőn átszűrjük, az etanolt elpárologtatjuk és a terméket vízben oldjuk, majd liofilizáljuk. íly módon 0,265 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 0,1 hidrátja formájában, amely 0,3 etanolt is tartalmaz.

Elemanalízis a Ci 5H21N5O2.0,3 C2H6O összegképletű vegyületre:

számított: C:58,74, H: 7,27, N: 21,96%, mért: C: 58,86, H: 7,14,N: 21,82%.

NMR: 8,36 (s, ΙΗ,Ηβ), 8,19(s, 1H.H2), 6,23 (dd, 1H, Hí), 5,01 (t, 1H.J-5.54, OH5), 4,12(m,3H,H₄, CH2), 3,52 (m, 2H, H5), 2,37 (m, 2H, H2), 2,04 (m, 2H.H3), 1,61 (b,2H,CH2).

2. példa

6-Klór-purin-9-béta-2’,3’-didezoxi-ribofurano zid

A cím szerinti vegyület előállítását az 1. példában leírtak szerint végezzük, azzal a különbséggel, hogy a 6-klór-purint (Sigma Chemicals, St, Louis MO) 5 ml dimetil-formamidban és 5 ml dimetoxi-etánban oldottuk.

A szilárd anyag leszűrése után a szűrletet vákuumban 5 ml térfogatra betöményítettük és 100 ml vízben oldottuk. Ezt az anyagot XAD-2 töltetű, 2,5x20 cm méretű oszlopon kromatografáltuk, vízzel átmostuk és a terméket metanollal eluáltuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítettük, hozzáadtunk 20 ml vízmentes szilikagélt, az oldószert vákuumban eltávolítottuk és a szilikagélt egy szilikagél töltetű oszlopra adagoltuk, amelyet kloroform/metanol/ 9/1 eleggyel egyensúlyba hoztunk. A terméket tartalmazó frakciókat, amelyek dezoxi-timidint nem tartalmaznak, egyesítettük, az oldószert vákuumban eltávolítottuk, a maradékot etanolban oldottuk, szűrtük, majd vízben ismételten feloldottuk és liofilizáltuk. Ezt az anyagot ezután ismét kromatografáltuk (Polygosü Ci 8 gyanta, metanol/víz= 8/2), majd az oldószert vákuumban eltávolítottuk, a terméket vízben oldottuk és liofilizáltuk. íly módon 0,199 g cím szerinti vegyületet nyertünk, op.: 100 ‘C.

Elemanalízis a C10H11CIN4O2 összegképletű vegyületre:

számított: C:47,16,H: 22,00, N: 13,92%, mért: C:47,10,H:21,94,N: 13,86%.

3. példa

6-(Etil-amino)-purÍn-9-béta-2’,3’-didezoxi-rib ofuranozid

0,5 g (2,69 mmól) 6-(etil-amino)-purint (előállítása: a 6-klór-purin klóratomjának etil-amin aminocsoportjával való nukleofil helyettesítésével) és

O, 755 g (3,33 mmól) 3’-dezoxi-timidint (Horwitz, J.

P. és munkatársai, J. Org. Chem., 31, 205 /1966/) 50 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferral elegyítünk (pH= 6,8, 0,04% kálium-azid), majd hozzáadunk 4001.U. tisztított timidin-foszforilázt és 700 I.U. purin-nukleozid-foszforilázt, majd a szuszpenziót 37 C-on keverjük. 48 óra elteltével további 700 egység purin-nukleozid-foszforilázt és 400 egység timidin-foszforilázt adagolunk és a keverést 37 ’Con folytatjuk. 5 nap elteltével a reakciókeveréket szűrjük, a szűrletet AG-lX2-hidroxid gyanta töltetű oszlopra adagoljuk (2,5x10 cm), a terméket vízzel eluáljuk, majd Amberlite XAD-2 töltetű oszlopra adagoljuk. Az oszlopot ezután nagy mennyiségű vízzel átmossuk és metanolos eluálást végzünk. Az eluátumból az oldószert eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot vízben és acetonban oldjuk, majd liofilizáljuk. Ily módon 0,299 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,2 vizet és 0,1 acetont tartalmaz, op.: 30 “C, [a] 20’C - -29,45’ (0,5 DMF).

Elemanalízis a C12H17NSO2 . 0,2 H2O . 0,1 C3H6O összegképletű vegyületre: számított: C:54,17, H: 6,64, N: 25,68%, mért: C: 54,13, H: 6,69, N: 25,75%.

-5HU 201954Β

4. példa

6-(N-etil-N-metü-amino)-purin-9-béta-2’,3’-d idezoxi-ribofuranozid

A 2. példában leírtak szerint járunk el. A reakciókeveréket szűrjük, a szűrletet Dowex-1-hidroxid oszlopra adagoljuk (2,5x10 cm), a terméket 90%-os metanol/víz eleggyel eluáljuk és Amberlite XAD-2 töltetű oszlopon (2,5x20 cm) kromatografáljuk, miután az oldószert eltávolítottuk (kb. 5 ml-re besűrítettük) és a maradékot 100 ml vízben feloldottuk. Miután a mintát feladtuk, az oszlopot nagy mennyiségű vízzel átmossuk és az eluálást 95% etanol/víz eleggyel végezzük. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, 20 ml szilikagélt adunk hozzá, az oldószert válőiumban eltávolítjuk, a szárított szilikagélt egy szilikagél töltetű oszlopra adagoljuk (4,8x20 cm) és kloroform/metanol- 98/2 eleggyel kiegyensúlyozzuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot etanolban oldjuk, majd szűrjük. Az oldószer eltávolítása után a maradékot vízben oldjuk, az oldatot liofilizáljuk, amikoris 0,3 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,05 hidrát-tartalmú, op.: ’C.

Elemanalízis a C13H19N5O2.0,05 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C:56,12, H: 6,92, N: 25,17%, mért: C:56,12,H:6,94,N:25,14%.

NMR: 8,36 (s, 1H,H₈), 8,19 (s, 1H.H2), 6,23 (dd, IH, Hí), 5,05 (t, IH, J-5,58, OH5), 4,09 (m, IH, H₄), 4,08 (m, 2H, CH2), 3,51 (m, 2H, Hs’), 3,33 (s, 3H, CH3),2,41 (m,2H,H2),2,03(m,2H,H3), 1,14 (t,3H, J-7.01.CH3).

5. példa

6-jód-purin-9-béta-2’,3’-didezoxi-ribofuranoz id

0,634 g (2,54 mmól) 6-jód-purint (Sigma Chemicals, St. Louis MO) és 0,71 g (3,13 mmól) 3’-dezoxitimidint (Horwitz, J. P. és munkatársa, J. Org. Chem., 31,205 /1966/) elkeverünk 700 ml 10 millimólos kálium-foszfáttal (pH- 6,8, 0,04% káliumazid), hozzáadunk 2000 I.U. tisztított timidin-foszforüázt és 7000I.U. nukleozid-foszforilázt, a kapott szuszpenziót 35 °C hőmérsékleten keverjük, 48 óra elteltével szűrjük és a szűrletet vákuumban betöményítjük. A visszamaradó anyagot 95%-os etanol/víz elegyben oldjuk, majd hozzáadunk 20 ml szilikagélt és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A szárított szilikagélt szilikagél töltetű oszlopra adagoljuk (2,8x50 cm), az eluálást kloroform/metanol- 95/5 eleggyel végezzük, a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a visszamaradó anyagot etanolban oldjuk, majd 0,22 μ-os szűrőn átszűrjük. Ezután az etanolt eltávolítjuk, hozzáadunk kb. 25 ml vizet és az anyagot liofilizáljuk. ilymódon 0,088 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 0,2 hidrát-tartalom mellett, op.: 151 — 153 ’CElemanalízis a C10H11N4O2.0,2 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C:35,15,H:3,46,N: 15,77%, mért: C:35,31, H:3,31,N: 15,83%.

6. példa

6-(N-ciklopropil-N-metü)-amino-purin-9-béta

-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid

0,5 g (2,64 mmól) 6-(N-cikk>propil-N-metil-amino-purint (előállítása: 6-klór-purinból, amelynek ldóratomját nukleofil helyettesítéssel ciklopropümetil-amin aminocsoportjával helyettesítettük) 5 ml dimetü-formamidban oldunk, lehűtjük szobahőmérsékletre, hozzáadunk 0,9 g (3,98 mmól) 3 ’-dezoxi-timidint (Horwitz, J.P. és munkatársai, J. Org. Chem, 31.205 /1966/) és 30 ml 10 mmólos káliumfoszfátot (pH- 6,8; 0,04%- kálium-oxid), 10.000 I.U. tisztított timidin-foszforilázt és 20.000I.U. purin-nukleozid-foszforilázt, 10 ml DEAE cellulózon (Whatman) abszorbeáltjuk, majd a szuszpenziót 35 ’C-on keverjük 8 óra elteltével a reakciókeveréket szűrjük, a szűrletet egymás után kapcsolt oszlopokra adagoljuk. Az első oszlop töltete AGI-X2 gyanta (OH-forma, 2,5x10 cm), a második oszlop töltete Amberlite XAD-2 gyanta, mérete: 2,5x20 cm. A minta feladása után az oszlopokat 500 ml vízzel átmossuk és a terméket metanollal eluáljuk. A terméket ezután szilikagél töltetű oszlopon flashkromatográfiával tisztítjuk (5x20 cm, kloroform/metanol- 9/1), az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a gumiszerű terméket acetonban oldjuk. Liofilizálás után 0,588 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,15 vizet és 0,15 acetont tartalmaz.

Elemanalízis a C14H19N5O2. 0,15 H2O . 0,15 C3H6O összegképletű vegyületre: számított: C: 57,71, H: 6,77, N: 23,29%, mért: C: 57,73, H: 6,94, N: 23,39%.

7. példa

6-jzopropil-amino)-purin-9-béta-2’,3’-didezo xi-ribofuranozid

A cím szerinti vegyület előállítását az 1. példában leírtak szerint végezzük azzal az eltéréssel, hogy 6izopropil-amino-purint (előállítása: 6-klór-purinból és izopropil-aminból) 5 ml dimetü-formamidban és dimetil-szulfoxidban oldunk. Liofilizálás u tán 0,502 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,2 hidrátot tartalmaz, op.: 55-57 ’C.

Elemanalízis a C13H19N5O2.0,2 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 55,58, H: 6,96, N: 24,93%, mért: C: 55,54, H: 6,96, N: 25,01%.

8. példa

Tiamiprin-9-béta-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid

0,5 g tiamiprint (Burroughs Wellcome Co., Research Triangle Park NC) 2,5 ml dimetü-szulf oxidban és 15 ml dimetoxi-etánban oldunk, hozzáadunk 0,8 g 3’-dezoxi-timidint (Horwitz J.P. és munkatársai J. Org. Chem., 31,205/1966/) és 30 ml kálium-foszfátot (pH- 6,8). Ezután 1600 I.U. tisztított timidinfoszforilázt és 70.0001.U. purin-nukleozid-foszforilázt adagolunk hozzá és a szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten keverjük. 96 óra elteltével a reakciókeveréket szűrjük, vákuumban szirup sűrűségűre töményítjük, hozzáadunk 25 ml vizet és az oldatot 1 éjszakán át 3 ’C hőmérsékleten tartjuk A kiváló csapadékot szűrjük, 5 ml dimetü-formamidban szuszpendáljuk, szűrjük, és a szűrlethez 15 ml metanolt adagolunk és az oldatot -20 ’C hőmérsékleten

-6HU 201954Β tároljuk. 5 nap elteltével a kiváló szilárd anyagot szűrjük, 65%-os metanol/víz elegyben oldjuk és AGI-X2-hidroxid gyantán kromatografáljuk. A terméket 65%-os metanol/víz eleggyel eluáljuk, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a szilárd anyagot 20 ml kloroform/metanol- 9/1 elegyben oldjuk, szilikagélen kromatografáljuk (3x50 cm), amelyet kloroform/metanol- 9/1 eleggyel hozunk egyensúlyba. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a termékből a szilikagélt eltávolítjuk, oly módon, hogy 95%-os etanol/víz elegyben oldjuk, majd 0,22 μ-os szűrőn átszűrjük. Az etanolt elpárologtatjuk, és a visszamaradó anyaghoz 200 ml vizet adunk. A visszamaradó anyagot liofilizáljuk, amikoris 0,05 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,4 hidrátot és 0,7 ekvivalens metanolt tartalmaz, op.: 130 ’C, részlegesen 110 ’C hőmérsékleten.

Elemanalízis a CuHióSNgCU . 0,4 H2O . 0,7 CH4O összegképletü vegyületre: számított: C: 41,84, H: 4,68, S: 7,60, N: 26,55%, mért: C: 41,93, H: 4,43, S: 7,48, N: 26,34%.

9. példa

2-Amino-ó-(n-propoxi)-purin-9-béta-2’,3’-did ezoxi-ribofuranozid

0,21 g 2-amino-6-(n-propoxi)-purint (előállítása 2-amino-6-klór-purinból — Aldrich Chemical Co., Milwaukee Wl —, amelynek klóratomját a propanolból és nátrium-hidridből nyert alkoxi-anionnal helyettesítettük) és 0,29 g 3’-dezoxi-timidint elkeverünk 100 ml kálium-foszfáttal (pH- 6,8, 0,04% kálium-azid), hozzáadunk 1200I.U. tisztított timidin-foszforilázt és 84001.U. purin-nuldeozid-foszforilázt és a szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten keverjük. 48 óra elteltével a keveréket szűrjük, a szűrletet kromatografáljuk (AGI-X2-hidroxid gyanta, 2x5 cm, 90% metanol/víz), az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a visszamaradó anyagot metanolban oldjuk. Az oldathoz 10 ml vízmentes szilikagélt adunk, a metanolt vákuumban eltávolítjuk és az így nyert szilikagélt olyan szilikagél töltetű oszlopra adagoljuk (2,5x30 cm), amelyet kloroform/metanol- 9/1 eleggyel kiegyensúlyoztunk. Az eluálást ugyanezen oldószerrel végezzük, majd a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A szilikagél eltávolítása után a terméket a 8. példában leírtak szerint kezeljük, amikoris 0,132 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,2 hidrátot tartalmaz, op.: 70 ’C.

Elemanalízis a C13H19N5O3.0,2 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 52,91, H: 6,56, N: 23,73%, mért: C: 52,52, H: 6,62, N: 23,49%.

10. példa

6-(Etil-tio)-purin-9-béta-2’,3’-didezoxi-ribofu ranozíd g (5,5 mmól) 6-(etil-tio)-purint (Sigmal Chemical Co., St. Louls MO) és 4,47 mmól 3*-dezoxi-timidint 50 ml 15 mmólos kálium-foszfátban szuszpendálunk (pH- 7,2), Hozzáadunk 7890 I.U. tisztított timidin-foszforilázt és 1980 I.U. purin-nukleozidfoszforilázt és a kapott szuszpenziót 35 ’C-on keverjük. 144 óra elteltével a keveréket szűrjük, a szűrle12 tét -20 ’C hőmérsékleten tároljuk. Felengedés után a szűrlet pH-ját 10,7 értékre beállítjuk ammóniumhidroxiddal és Dowex-l-formiát gyantán kromatografáljuk (2,5x8 cm). Az eluálást 30%-os n-propanol/víz eleggyel végezzük, a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A visszamaradó anyagot 30%-os n-propanol/víz elegyben oldjuk és BioRad P-2 töltetű oszlopon (5x90 cm) kromatografáljuk (30%-os npropanol/víz). A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, amikoris 0,427 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,5 hidrát formában.

Elemanalízis a C12H16SN4O2.0,5 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 49,8 l.H: 5,92, N: 19,36, S: 11,44%, mért: C: 49,63, H: 5,95, N: 19,28, S: 11,06%.

NMR: δ 8,71 (s, IH, Hg), 8,67 (s, IH, H2), 6,33 (t, IH, Hí*), 4,1 (m, 2H, OH, H4’), 3,4-3,6 (m, 2H, 5*CH2), 1,8-2,4 (m, 4H, 2’ és 3*CH3), 1,5 (t, 3H, CH₃).

11. példa

2-Amino-6-(benzü-tio)-purin-9-béta-2’,3’-did ezoxi-ribofuranozid

0,5 g (1,9 mmól) 2-amino-6-(benzil-tio)-purint (Sigma Chemical Co., St. Louis MO) és 0,543 g (2 mmól) 3’-dezoxi-timidint 20 ml 10 mmólos káliumfoszfát pufferban (pH- 7, 0,04% kálium-azid) oldunk, hozzáadunk 20001.U. tisztított timidin-foszforilázt és 29001.U. purin-nukleozid-foszforüázt és a szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten keverjük. 3 nap elteltével 80 ml 10 mmólos kálium-foszfát puffért (pH- 7) adagolunk hozzá, majd 1 nap múlva a keveréket szűrjük. A szűrőlepényt 90%-os metanol/víz elegyben oldjuk, szűrjük, a szűrletet Dowex-1-hidroxid töltetű oszlopon (2,5 x 10 cm) kromatografáljuk (90% metanol/víz). A terméket tartalmazó frakciókat egyesít jük, liofilizáljuk, amikoris 0,086g cím szerinti vegyületet nyerünk.

Elemanalízis a C17H19SH5O2 összegképletü vegyületre:

számított: C: 57,13, H: 5,36, N: 19,59, S: 8,97%, mért: C: 57,02, H: 5,39, N: 19,51, S: 8,89%.

NMR: δ 8,18 (s, IH, Hg), 7,3 (m, 5H, 0), 6,6 (s, 2H, NH2), 6,08 (dd, 1, Hí), 4,93 (b, IH, 5ΌΗ), 4,45 (b, 2H, CH2, 4,08 (m, IH, H4’), 3,43-3,65 (m, 2H, 5*CH2), 2,35 (m, 2H, 2*CH2), 2,0 (m, 2H, 3*CH2).

12. Példa

6-Etoxi-purin-9-béta-2’,3’-didezoxi-ribofuran ozid

0,5 g (3 mmól) 6-etoxi-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 3’-dezoxi-timidint (3,3 mmól, 0,75 g) 25 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferban szuszpendálunk (pH- 6,8,0,04% kálium-azid), hozzáadunk 800 I.U. tisztított timidin-foszforilázt és 1200 I.U. purin-nukleozid-foszforilázt, a kapott szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten keverjük, majd 24 óra elteltével 85 ’C hőmérsékleten keverjük, majd 24 óra elteltével 85 ml 10 mmólos káliumfoszfát puffért adagolunkhozzá (pH- 6,8) és a keveréket további 5 napon át a fenti hőmérsékleten keverjük. Ezután a csapadékot szűréssel elválasztjuk, a szűrletet kromatografáljuk (2,510 cm, Dowex-17

-7HU 201964Β hidroxid, 90% metanol/víz), a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot 30% n-propanol/vízben oldjuk, majd kromatografáljuk (50 x 90 cm-es oszlop, BioRap P-2 gyanta). A terméket tartalmazó frakciókat besűrítjük, liofilizáljuk, amikoris 0,225g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,15 hidrát ja formájában.

Elemanalízis a C13H17N5O2.0,15 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 53,98, H: 6,15, N: 20,98%, mért: C: 54,05, H: 6,15, N: 20,88%.

NMR: δ 8,6 (s, 1H, Hs), 8,5 (s, 1H, H2), 6,3 (dd, 1H, Hi), 4,97 (t, 1H, 5ΌΗ), 4,6 (m, 2H, -CH₂-), 4,1 (m, 1H, H₄), 3,53 (m, 2H, 5’CH2), 2,41 (m, 2H, 2’CH2), 2,03 (m, 2H, 3’CH2), 1,4 (t, 3H, J=0,035Hz, CH3).

13. példa

6-(Dimetil-amino)-purin-9-béta-2’,3’-didezoxi

-ribofuranozid g (6,13 mmól) 6-dimetil-amino-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 3’-dezoxi-timidint (4,44 mmól, 1 g) 50 ml 10 mmólos kálium-foszfát oldatban szuszpendálunk (pH= 7, 0,04% káliumazíd), majd hozzáadunk 2000I.U. tisztított timidinfoszforilázt és 30001.U, purin-nukleozid-foszforilázt és a kapott keveréket 35 ’C hőmérsékleten keverjük. 120 óra elteltével a reakciókeveréket szűrjük, a szűrletet kromatografáljuk (Dowex-1 -hidroxid, 2,5 x 8 cm, 90% metanol/víz), a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A visszamaradó anyagot 25 ml 30%-os n-propanol/víz elegyben oldjuk és kromatografáljuk (BioRad P-2,5 x 90 cm, 30% n-propanol/víz). A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot 30 ml ionmentesített vízben oldjuk, majd kromatografáljuk (Sephadex G-10,5 x 90 cm, víz). A megfelelő frakciókat egyesítjük, liofilizáljuk, amikoris a cím szerinti vegyületet nyerjük 0,3 hidrátja formájában, op.: 162 ’C.

Elemanalízis a C12H17N5O2.0,3 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 53,64, H: 6,60, N: 26,06%, mért: C: 53,63, H: 6,63, N: 25,8%.

14. példa

6-(Hidroxi-etil-amino)-purin-9-béta-2’,3’-dide zoxi-ribof uranozid

0,5 g (2,8 mmól) 6-(hidroxi-etil-amino)-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,76 g (3,3 mmól) 3’-dezoxi-timidint 75 ml 10 mmól kálium-foszfát pufferban szuszpendálunk (pH= 6,8, 0,04% kálium-azíd), hozzáadunk 400 I.U. timidinfoszforilázt és 700 LU. purin-nukleozid-foszforilázt és a szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten keverjük. 8 nap elteltével további 6001.U. timidin-foszforilázt és 1050 I.U. purin-nukleozid-foszforilázt adagolunk hozzá, majd még egy napig keverjük, végül a keveréket szűrjük és a szűrletet kromatografáljuk (Dowex-1-hidroxid, 2,5 x 10 cm, metanol). A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és vákuumban betöményítjük. A maradékot ezután szilikagél oszlopra adagoljuk (2,5 x 50 cm, kloroform/meta8 nol= 8/2, nyomás alatt), a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd liofilizáljuk. íly módon nyerjük a cím szerinti vegyületet 0,65 hidrátja formájában, op.: 153 ’C.

Elemanalízis a C12H17N5O3.0,65 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 49,53, H: 6,34, N: 24,07%, mért: C: 49,85, H: 6,07, N: 23,70%.

15. példa

6-Ciklopropil-amino-purin-9-béta-D-2’,3’-did ezoxi-ribofuranozid

0,5 g (2,86 mmól) 6-(ciklopropil-amino)-purint (előállítása: 6-klór-purinból /Sigma Chemicals Co., St. Louis MO/ és ciklopropil-aminból) és 3’-dezoxitimidint (4,3 mmól, 1 g) feloldunk 10 ml 1:1 arányú dimetil-szulfoxidJ4^,,N’-dimetil-formamid keverékkel és hozzáadunk 30 ml 10 mmólos káliumfoszfát puffért (pH- 6,8, 0,04% kálium-azid), továbbá 10.000 I.U. tisztított timidin-foszforilázt és 20,0001.U. purin-nukleozid-foszforilázt adagolunk hozzá, amely 10 ml DEAE cellulózzal volt elkeverve, és a kapott szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten keverjük. 8 óra elteltével areakciókeveréket szűrjük, a szűrletet egymás után kapcsolt következő két oszlopra adagoljuk: Dowex-1-hidroxid töltetű oszlop (2,5x10 cm), Amberlite XAD-2 gyanta töltetű oszlop (2,5x20 cm). A minta feladása után az oszlopokat nagy mennyiségű vízzel átmossuk és a terméket metanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd liofilizáljuk, amikoris 0,54 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 0,55 hidrátja formájában, op.: 63-65 ’C.

Elemanalízis a C13H17N5O2.0,55 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 54,75, H: 6,40, N: 24,55%, mért: C: 54,67, H: 6,43, N: 24,57%.

16. példa

6-(Cikklopentil-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-d idezoxi-ribofuranozid

0,506 g (2,49 mmól) 6-(ciklopentil-amino)-purint (előállítása: 6-klór-purinból és ciklopentilaminból) 5 ml N.N-dimetil-formamidban és 5 ml dimetil-szulfoxidban oldunk, hozzáadunk 0,894 g (3,94 mmól) 3’-dezoxi-timidint 30 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferral együtt (pH- 6,8 és 0,04% kálium-azid), a pH értékét ecetsavval 6,8-ra beállítjuk, hozzáadunk 10.000 LU. tisztított timidin-foszforilázt és 20.000 LU. purin-nukleozid-foszforilázt, amely DEAE cellulózhoz van kötve és a kapott szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten 8 órán át keverjük, majd szűrjük és a szűrletet 1 éjszakán át -20°C hőmérsékleten tároljuk. Felengedés után a szűrletet kromatografáljuk (2,5x10 cm, Dowex-1-hidroxid, víz), a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, kromatografáljuk (XAD-2 gyanta, 2,5 x 20 cm, 350 ml víz, majd metanol), a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és a metanolt vákuumban eltávolítjuk. A visszamaradó anyagot vízben oldjuk, liofilizáljuk, amikoris 0,459 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 0,05 hidrátja formájában, op.: 88 C.

Elemanalízis a C15H21N5O2.0,05 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 59,21, H: 6,99, N: 23,02%,

-8HU 201954Β mért: C: 59,24, H: 7,05, N: 22,95%.

77. példa

2-Amino-6-metoxi-purm-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid

0,5 g (3 mmól) 2-amino-6-metoxi-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból (Aldrich Chemical Co., Milwaukee WI és metanolból) és 3’-dezoxi-timidint (1 g, 4,5 mmól) 10 ml 1:1 arányú dimetilszulfoxid:N’74’-dimetil-fonnamid keverékben oldunk, hozzáadunk 30 ml 10 mmól kálium-foszfátot (pH- 6,8,0,04% kálium-azid), majd 10.0001.U. tisztított timidin-foszforilázt és 20.0001.U. purin-nukleozid-foszforilázt, amely 10 ml DEAE cellulózhoz van kötve, és a kapott szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten keverjük. 8 óra elteltével a keveréket szűrjük, a szűrletet kromatografáljuk (2,5x10 cm, Dowex1 -hidroxid), a terméket tartalmazó frakciókat besűrítjük és a mintát Amberlite XAD-2 töltetű oszlopra adagoljuk. Az oszlopot nagy mennyiségű vízzel átmossuk és a terméket metanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd lioflllzáljuk, amikoris a cím szerinti vegyületet mérjük.

Élemanalízis a C11H15N5O3 összegképletű vegyületre:

számított: C: 49,81, H: 5,70, N: 26,40%, mért: C: 49,70, H: 5,72, N: 26,34%.

18. példa

6-(n-Propoxi)-purin-9-béta-D-2’,3’-dldezoxi-r íbofuranozid

0,5 g (2,8 mmól) 6-(n-propoxi)-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louís MO) és 0,96 g (4,2 mmól) 3’-dezoxi-timldint 5 ml dimetil-szulfoxidban és 5 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban oldunk, hozzáadunk 30 ml 10 mmólos kálium-foszfát puffért (pH- 6,8,0,04% kállum-azid), majd 20.0001.U. purin-nukleozid-foszforilázt és 10.000 I.U. timidinfoszforilázt (10 ml DEAE-cellulózhoz kötve) és a kapott reakciókeveréket 35 ’C hőmérsékleten 7 órán át keverjük. A gyantát centrifugálással eltávolítjuk, a felülúszót AG1-X2 (OH-forma) töltetű oszlopra adagoljuk, amely oszlophoz XAD-2 töltetű oszlop van kapcsolva (2,5x10 cm, illetve 2,5x20 cm). Az oszlopokat 500 ml vízzel átmossuk és a terméket metanollal eluáljuk. A terméket ezután flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 3x50 cm, kloroform/metanol- 9/1), majd liofilizáljuk, amikoris 0,554 g cím szerinti vegyületet nyerünk.

Elemanalízis a C13H18N4O3.0,3 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 55,04, H: 6,61, N: 19,75%, mért: C: 55,05, H: 6,61, N: 19,72%.

19. példa

6-(n-Butoxi)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ri bofuranozid

0,5 g (2,6 mmól) 6-(n-butoxi)-purínt (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,7 g (3,1 mmól) 3 ’-dezoxi-timidint 100 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferban szuszpendálunk (pH- 6,8,0,04% káliumazid), hozzáadunk 3500 I.U. tisztított purin-nukleozid-foszforilázt és 800 I.U. timidin-foszforilázt és a kapott oldatot 32 ’C hőmérsékleten keverjük. 7 nap elteltével a reakciókeveréket szűrjük, a szúrletet ¹⁶ kromatografáljuk (AGI-X2 (OH-forma), 2,5x10 cm, 90% víz/metanol), a frakciókból az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a terméket flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 2,5x80 cm, kloroform/metanol- 8/2). A terméket vízben oldjuk és XAD-2 töltetű oszlopon kromatografáljuk (2,5x20 cm). Az oszlopot először 500 ml vízzel átmossuk, majd metanollal eluáljuk. A termék mennyisége liofilizálás után 0,276g, op.: 55 ’C.

Elemanalízis a C14H20N4O3 összegképletű vegyületre:

számított: C: 57,52, H: 6,90, N: 19,17%, mért: C: 57,86, H: 7,29, N: 18,83%.

20. példa

6-(Ciklopropil-metoxi)-purin-9-béta-D-2’,3’-d idezoxi-ribofuranozid

0,505 g (26,5 mmól) 6-ciklopropíl-metoxi-purint (előállítása: 6-klór-purinból a klóratom nukleofil helyettesítésével, amit nátrium-hidridből és cíklopropil-metil-alkoholból nyert alkoxi-anionnal végzünk) és 0,908 g (40,1 mmól) 2,’3’-didezoxi-tímidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint AG1-X2 (OH-forma) és XAD-2 töltetű oszlopokon kromatografálunk. A terméket tartalmazó frakciókat flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 3x50 cm, acetonitril/víz- 98/2) és liofilizáljuk. íly módon 0,496 g cím szerinti vegyületet nyerünk.

Élemanalízis a C14H18N4O3 összegképletű vegyületre:

számított: C: 57,92, H: 6,25, N: 19,30%, mért: C: 57,99, H: 6,28, N: 19,27%.

27. példa

6-(CÍklopentil-oxí)-purín-9-béta-D-2’,3’-didez oxi-ribofuranozid

0,506 g (2,48 mól) 6-(ciklopentil-oxi)-purint (előállítása: 6-klór-purinból oly módon, hogy a klóratomot nukleofil helyettesítéssel nátrium-hidridből és ciklopentanolból nyert alkoxi-anionnal helyettesítjük), és 0,856 g (3,78 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint AG1-X2 (OH-forma) és XAD-2 töltetű oszlopokon kromatografáljuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a visszamaradó anyagot flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 3x50 cm, kloroform/metanol- 95:5), liofilizálás után 0,385 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,15 hidrátja formájában.

Elemanalízis a C15H20N4O3.0,15 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 58,68, H: 6,66, N: 18,25%, mért: C: 58,61, H: 6,53, N: 18,25%.

22. példa

6-(Ciklohexil-oxi)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezo xi-ribofuranozid

0,5 g (2,29 mmól) 6-(ciklohexil-oxi)-purint (előállítása: 6-klór-purinból oly módon, hogy a klóratomot nukleofil helyettesítéssel nátrium-hidridből és ciklohexanolból nyert alkoxi-anionnal helyettesítjük) és 0,776 g (3,42 mmól) 3’-dezoxi-timidínt reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografáljuk, azzal az eltéréssel, hogy az 5 ml dimetil-szulfoxid és 5 ml Ν,Ν-dimetil-formamid mel9

-9HU 201954Β lett még 10 ml, glymet és 70 ml 10 mmólos káliumfoszfát puffért (pH- 6,8,0,04% kálium-azid) is alkalmazunk. Liofilizálás után 0,102 g cím szerinti vegyületet nyerünk, op.: 105 ’C.

Elemanalízis a C16H22N4O3.0,2 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 59,69, H: 7,01, N: 17,40%, mért: C: 59,69, H: 6,93, N: 17,27%.

23. példa

6-(Ciklobutil-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozid

0,510 g (2,62 mmól) 6-ciklobutil-amino-purint (előállítása: 6-klór-purinból oly módon, hogy a klóratomot nukleofil helyettesítéssel ciklobutil-amin aminocsoportjával helyettesítjük) és 0,896 g (3,96 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografáljuk. Áz oldószert a terméket tartalmazó frakcióból eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 3x50 cm, kloroform/metanol- 9/1). Liofilizálás után 0,524 g cím szerinti vegyületet nyerünk, op.: 96-98 ’C.

Elemanalízis a C14H19N5O2 összegképletű vegyületre:

számított: C: 58,12, H: 6,62, N: 24,20%, mért: C:58,19,H:6,65,N:24,16%.

24. példa

6-(Dietil-amino)-purin-9-béta-D-2',3’-didezox i-ribofuranozid

0,246g (1,28 mmól) 6-(dietil-amino)-purint (előállítása: 6-klór-purinból oly módon, hogy a klóratomot nukleofil helyettesítéssel dietil-amin aminocsoportjával cseréljük le) és 0,463 kg (2,04 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk és a 18. példában leírtak szerint kromatografáljuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk a terméket tartalmazó frakciókból és a visszamaradó anyagot flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 5x20 cm, kloroform/metanol- 9/1). A terméket tartalmazó frakciókból az oldószert eltávolítjuk és a visszamaradó anyagot egy második oszlopon flash-kromatografáljuk (szilikagél, 2,5x50 cm, etil-acetát). A termék gumiszerű anyag, amelyet acetonban oldunk, majd liofilizálunk, amikoris 0,098 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,25 vizet és 0,20 acetont tartalmaz.

Elemanalízis a C14H21N5O2.0,2 C3H6O . 0,25 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 57,03, H: 7,44, N: 22,78%, mért: C: 57,02, H: 7,39, N: 22,72%.

25. példa

6-PirroHdino-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ri bofuranozid

0,5 g (2,64 mmól) 6-pÍrrolidino-purint (előállítása: 6-klór-purinból oly módon, hogy a klóratomot nukleofil helyettesítéssel a pirrolidin nitrogénatomjával helyettesítjük) és 0,901 g (3,98 mmól) 3’-dezoxi-timidint 5 ml dimetil-szulfoxid és 5 ml Ν,Ν-dimetil-formamid elegyében oldunk, hozzáadunk 30 ml 10 mmólos kálium-foszfát puffért (pH- 6,8,0,04% kálium-azid), majd 20.0001.U. tisztított purin-nukleozid-foszforílázt és 10.0001.U. timidin-foszforilázt, 10 ml DEAE-cellulózhoz kötve, és a kapott reakciókeveréket 35 ’C hőmérsékleten 7 órán át keverjük. A gyantát ezután centrifugálással elválasztjuk, a felülúszót AG1-X2 (OH-fonna) oszlopra, majd XAD-2 oszlopra (2,5x10 cm, 2,5x20 cm) adagoljuk, végül 500 ml vízzel átmossuk és metanollal eluáljuk. Ily módon 0,385 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 0,05 hidrát tartalommal, op.: 158-159 ’C.

Elemanalízis a C14H19N5O2.0,05 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 57,94, H: 6,63, N: 24,13%, mért: C: 57,92, H: 6,67, N: 24,11 %.

26. példa

6-Morfolino-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ri bofuranozid

0,501 g (2,44 mmól) 6-morfolino-purint (előállítása: 6-klór-purinból oly módon, hogy a klóratomot nukleofil helyettesítéssel a morf olin aminocsoportjával helyettesítjük) és 0,842g (3,72mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografáljuk. íly módon 0,292 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,2 hidrát-tartalommal, op.: 97 ’C.

Elemanalizis a C14H19N5O3.0,20 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 54,43, H: 6,33, N: 22,67%, mért: C: 54,48, H: 6,28, N: 22,51%.

27. példa

6-(7,γ-dimetil-allil) -amino-purin-9-béta-D2',3’-didezoxi-ribofuranozid

0,5 g (2,46 mmól) 6-(7,7-dimetil-allil)-aminopurint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,752 g (3,32 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografáljuk, A terméket tartalmazó frakciókból az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 3x50 cm, kloroform/metanol- 95/5), majd a terméket tartalmazó frakciókat XAD-2 töltetű oszlopra adagoljuk (2,5 x 20 cm) és metanollal eluáljuk A gumiszerű terméket acetonban oldjuk, majd liofilizáljuk, amikoris 0,445 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,45 vizet és 0,2 acetont tartalmaz.

Elemanalízis a C15H21N5O2 . 0,45 H2O . 0,2 C3H6O összegképletű vegyületre: számított: C: 57,99, H: 7,21, N:21,68%, mért: C:57,77,H:6,91,N:21,41%.

28. példa

6-(Furfuril-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-didez oxi-ribofuranozid

0,502 g (2,33 mmól) 6-furfurü-amino-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,754 g (3,33 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk és a 18. példában leírtak szerint kromatografálunk. A terméket tartalmazó frakciókból az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 5x50 cm, kloroform/metanol- 9/1). Liofüizálás után 0,303 gcím szerinti vegyületet nyerünk 0,2hidrátja formájában.

Elemanalízis a C15H17N5O3.0,2 H2O összegképletű vegyületre:

-10HU 201954Β számított: C: 56,49, H: 5,50, N: 21,96%, mért: C: 56,50, H: 5,53, N: 21,97%.

29. példa

6-(Benzil-tio)-purm-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ri bofuranozid

0,501 g (2,07 mmól) 6-benzil-tio-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,704 g (3,14 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk és AG1-X2 (OH-forma) töltetű oszlopon a 18. példában leírtak szerint kromatografáljuk azzal az eltéréssel, hogy a purin-bázlst 10 ml glimben oldjuk. A terméket tartalmazó frakciókból az oldószert eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 3x50 cm, kloroform/metanol95/5), a terméket etanolban oldjuk, majd liofilizáljuk. íly módon 0,304 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,05 vizet és 0,05 etanolt tartalmaz, op.: 81-83’C.

Elemanalízis a C17H18N4O2.0,05 H2O . 0,05 C2H6O összegképletű vegyületre: számított: C: 59,43, H: 5,37, N: 16,21, S: 9,28%, mért: C: 59,49, H: 5,38, N: 16,32, S: 9,30%.

30. példa

6-Anllino-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribof uranozid

0,5 g (2,37 mmól) 6-aniIíno-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,752 g (3,32 mmól) 3’dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint AG1-X2 gyantán (OH-forma) kromatografálunk, majd az oldószert a terméket tartalmazó frakcióból eltávolítjuk és a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szilikagél, 2,5x50 cm, kloroform/metanol- 5/5). Liofilizálás után 0,470 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,05 hidrát formájában, op.: 170-172 ’C.

Elemanalízis a C16H17N5O2.0,05 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 61.55, H: 5,52, N: 22,43%, mért: C: 61,57, H: 5,55, N: 22,43%.

31. példa

2-Amino-6-etoxi-purin-9-béta-D-2’,3^,-didezo xi-ribofuranozid

0,5 g 2-amino-6-etoxi-purint (előállítása: 2-amiηο-6-klór-purinból /Aldrich Chemical Co., Milwaukee WI/, oly módon, hogy a klóratomot a nátriumhidrid és etanol reagáltatásával nyert alkoxi-anionnal helyettesítjük) és 0,950g (4,19 mmól) 3 ’-dezoxitimidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint AG1-X2 és XAD-2 töltetű oszlopon kromatografálunk. A terméket tartalmazó frakcióból az oldószert elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szilikagél, 5 x 20 cm, kloroform/metanol - 9/1), majd a terméket liofilizáljuk. íly módon 0,443 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,3 hidrátot tartalmaz, op.: 150 ’C, egy része 65’C.

Elemanalízis a C12H17N5O3.0,3 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 50,63, H: 6,23, N: 24,60%, mért: C: 50,77, H: 6,21, N: 24,63%.

32. példa

2,6,8-Triamino-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi

-ribofuranozid

0,5 g (3 mmól) 2,6,8-triamino-purmt (Davies, R., és munkatársai, Biochim. Biophys, Acta, 564(3), 448, 1979) és 1,02 g (4,5 mmól) 3’-didezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografálunk. Liofilizálás után 0,148 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,7 metanolt tartalmaz, op.: 154 ’C,

Elemanalízis a C10H15N7O2.0,7 CH4O összegképletű vegyületre:

számított: C: 44,76, H: 6,24, N: 34,08%, mért: C: 44,51, H: 5,95, N: 33,78%.

33. példa

2-Amino-6-(benzil-amino)-purin-9-béta-D-2',

3’-didezoxi-ribofuranozid

0,2 g (0,8 mmól) 2-amino-6-(benzil-amino)-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból /Aldrich Chemical Co., Milwaukee WI/ oly módon, hogy a klóratomot nukleofü helyettesítéssel benzil-aminra cseréljük) és 3’-dezoxi-timidint (0,282 g, 1,2 mmól) reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografálunk, kivéve, hogy kisebb mennyiségű purin-nukleozid-kfoszforilázt (10.0001.U.) és timidin-foszforilázt (5.000LU.) alkalmazunk. Liofilizálás után 0,182 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,6 metanolt tartalmaz, op.: 92-94 C.

Elemanalízis a C17H20N6O2.0,6 CH4O összegképletű vegyületre:

számított: C: 58,78, H: 6,28, N: 23,37%, mért: C: 58,60, H: 6,06, N: 23,48%.

34. példa

2-Amino-6-(ciklopropil-amino)-purin-9-bétaD-2’,3 ’-didezoxi-ribof uranozid

0,495 g (2,1 mmól) 2-amino-6-(ciklopropil-amino)-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból oly módon, hogy a klóratomot nukleofil helyettesítéssel cíklopropil-aminnal cseréljük le) és 3’-dezoxi-timidlnt (0,73 g, 3,2 mmól) reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografálunk, Liofilizálás után 0,419 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 0,3 hidrát-tartalommal, op.: 82-84 ’C.

Elemanalízis a C13H18N6O2.0,3 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 52,80, H: 6,34, N: 28,42%, mért: C: 52,83, H: 6,35, N: 28,44%.

35. példa

2-Amino-6-(metil-amino)-purin-9-béta-D-2’,3 ’-didezoxi-ribofuranozid

0,5 g (3 mmól) 2-amino-6-(metü-amino)-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból nukleofil helyettesítéssel, amikor a klóratomot metü-aminra cseréljük) és 0,893 g (3,9 mmól) 3’-dezoxi-timidint 100 ml lOmmólos kálium-foszfát pufferban szuszpendálunk (pH- 6,8, 0,04% kálium-azid), hozzáadunk 28801.U. tisztított purin-nukleozid-foszforilázt és 12001.U. timídin-foszforilázt és a keveréket 33 C hőmérsékleten 72 órán át keverjük, majd AG1-X2 (OH-forma) töltetű oszlopra adagoljuk (2,5x10 cm) és a terméket 90%-os vizes metanollal eluáljuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szi11

-11HU 201954 Β likagél, 2,5x30 cin, kloroform/metanol- 97/3), majd liofilizálás után 0,3 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,4 hidrátja formájában, op.: 95 ‘C, részlegesen 75’C.

Elemanalízis a CuHióNöOz . 0,4 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 48,66, H: 6,24, N: 30,95%, mért: C: 48,57, H: 6,27, N: 30,77%.

36. példa

2-Amino-6-n-propoxi-purin-9-béta-2’,3’-dide zoxi-ribofuranozid

1,21 g (1,1 mmól) 2-amino-6-n-propoxi-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból nukleofil helyettesítéssel, amikor a klóratomot nátrium-hidridből és n-propanolból nyert alkoxi-anionnal cseréljük le) és 0,293 g (1,3 mmól) 3’-dezoxi-timidint 100 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferban szuszpendálunk (pH- 7,0,04% kálium-azid), majd hozzáadunk 28801.U. tisztított purin-nukleozid-foszforilázt és 12001.U. timidin-foszforilázt és a keveréket 33 ‘C hőmérsékleten 48 órán át keverjük. A reakciókeveréket AG1-X2 (OH-forma) töltetű oszlopra adagoljuk (2,5x5 cm), 90%-os vizes metanollal eluáljuk és az oldószert vákuumban eltávolítjuk, majd a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szilikagél, 2,5x30 cm, kloroform/metanol9/1). Liofilizálás után 0,132 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 0,2 hidrát formájában, op.: 70 ’C.

ElemanalízÍs a C13H19N5O3.0,2 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 52,29, H: 6,59, N: 23,59%, mért: C: 52,52, H: 6,62, N: 24,49%.

37. példa

6-(Benzil-amino)-purin-9-béta-2’,3’-didezoxiribofuranozid g (4,44 mmól) 6-(benzil-amino)-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 1 g (4,4 mól) 3’-dezoxi-timidint 50 ml 15 mmólos kálium-foszfátban szuszpendálunk (pH- 7,2), hozzáadunk 2000 I.U. tisztított purin-nukleozid-foszforilázt és 7900 I.U. timidin-foszforilázt, majd a reakciókeveréket 25 ’C hőmérsékleten keverjük. 1 óra elteltével 6 ml diglimet adunk a keverékhez és a keverést 37 ’C-on 6 napon át folytatjuk. Ezután a keveréket szűrjük, a pHértékét ammónium-hidroxiddal 10,5-re beállítjuk, AG1-X2 töltetű oszlopra adagoljuk (2x6 cm), és a terméket 30%-os vizes propanollal eluáljuk. A terméket ezután P-2 oszlopon kromatografáljuk (2,5x90 cm) 30%-os vizes propanollal eluáljuk, majd liofilizáljuk, amikoris 0,063 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,5 hidrát formájában, op.: 65 ’C.

Elemanalízis a C17H19N5O2.0,5 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 61,06, H: 6,03, N: 20,94%, mért: C: 61,29, H: 6,21, N: 20,69%.

38. példa

6-(Izopropoxi)-purin-9-béta-2’,3 ’-d idezoxi-rib ofuranozid

0,5 g (2,8 mmól) 6-(izopropoxi)-purint (Sigma Chemicals Co„ St. Louis MO) és 0,95 g (4,2 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografáljuk. A terméket tartalmazó frakciókból az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot 30%-os vizes propanolban oldjuk, G-10 töltetű oszlopon kromatografáljuk (5x90 cm), 30%-os vizes propanollal eluáljuk és a visszamaradó gumiszerű anyagot acetonban oldjuk. Liofilizálás után 0,313 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,2 vizet és 0,2 acetont tartalmaz, op. 75 ’C.

Elemanalízis a C13H18N4O3.0,2 C₃HóO . 0,2 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 55,65, H: 6,73, N: 19,09%, mért: C: 55,65, H: 6,59, N: 19,12%.

39. példa

6-(n-Propil-amino)-purin-9-béta-2’,3’-didezox i-ribofuranozid

0,5 g (2,81 mmól) 6-(n-propü-amino)-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,957 g (4,26 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografálunk, kivéve, hogy az 5 ml dimetil-szulfoxidot további 5 ml Ν,Ν-dimetü-formamÍddal helyettesítjük A terméket tartalmazó frakcióból az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szilikagél, 3x50 cm, kloroform/metanol- 9/1, amikoris liofilizálás után 0,499 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,7 mól vizet tartalmaz.

Elemanalízis a C13H19N5O2.0,7 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 53,85, H: 7,09, N: 24,15%, mért: C:53,93,H:7,08,N:24,18%.

40. példa

6-(CÍklohexil-amino)-purin-9-béta-2’,3’-didez oxi-ribofuranozid g (5 mmól) 6-(cilohexil-amino)-purint (előállítása: 6-klór-purinból és ciklohexil-aminból) 2,07 g (9,1 mmól) 3’-dezoxi-timidint 25 ml 2-metoxi-etüéterben és 500 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferban oldunk (pH- 7,2), hozzáadunk 5000 I.U. tisztított purin-nukleozid-foszforilázt és 3850IU. timidin-foszforilázt és a keveréket 37 ’C hőmérsékleten 7 napon át keverjük Ezután a keveréketXAD-2 töletű oszlopra adagoljuk, vízzel jól átmossuk és 90%os vizes metanollal eluáljuk AzUVabszorbciót mutató frakciókat összegyűjtjük AG1-X2 (OH-forma) töltetű oszlopra adagoljuk (2x12 cm), majd 30 %-os vizes metanollal eluáljuk A terméket ezután P-2 töltetű, majd G«-10 töltetű oszlopon (2,5x90 cm, ill. 2,5x90 cm) kromatografáljuk, mindkét oszlopot 30%-os vizes propanollal eluáljuk Liofilizálás után 0,093 g cím szerinti vegyületet nyerünk, op. 70-72’C.

ElemanalízÍs a C16H23N5O2 összegképletű vegyületre:

számított: C: 60,55, H: 7,30, N: 22,07%, mért: C:60,37,H:7,39,N:21,94%.

41. példa

6-(Metil-amino)-purin-9-béta-2’,3’-didezoxi-r ibofuranozid g (4,31 mmól) 6-(metil-amino)-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 1 g (4,4 mmól) 3’dezoxi-timidint 50 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferban (pH- 7,0,04% kálium-azid) szuszpendá-12HU 201954Β lünk, majd hozzzáadunk 2000 I.U. tisztított timidin-foszforilázt és 2400 LU. purin-nukleozid-foszforilázt és a kapott szuszpenziót 35 ’C hőmérsékleten keverjük. 3 nap elteltével a reakciókeveréket 20 ’C hőmérsékleten tároljuk, majd felengedés után szűrjük és a szűrletet Dowex-1-hidroxid töltetű oszlopon (2,5x10 cm) kromatografáljuk, az eluálást 90%-os metanol/víz eleggyel végezve. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot kétszer BioRad P-2 töltetű oszlopon (5x90 cm) kromatografáljuk, az eluálást 30%-os n-propanol/víz eleggyel végezve. A terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, majd liofilizáljuk, amikoris 0,391 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,1 hidrát-tartalommal.

Elemanalízis a C11H15N5O2.0,1 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 52,62, H: 6,10, N: 27,89%, mért: C:52,75,H:6,16,N:28,01%.

20. példa szerint nyert vegyület NMR adatai:

Ή-NMR (200 MHz, DMSO-dó): δ 8,59 és 8,47 (2s, 2H, H2 és He), 6,30 (dd, IH, J=4,2Hz, Hí), 4,95 (t, IH, J-5,5Hz, OH5,), 4,36 (d, 2H, J-7,3 OCH2),

4,12 (m, IH, H4,), 3,54 (m, 2H, H5, és Hs), 2,42 (m, 2H, H2, és H2”), 2,03 (m, 2H, H3, és H₃”), 1,32 (m, IH, CH), 0,58 és 0,39 (2m, 4H, 2CH2).

27. példa szerint nyert vegyület NMR adatai:

'H-NMR (200 MHz, DMSO-dó): δ 8,32 és 8,18 (, 2H, H2 és H₈), 7,79 (b, IH, NH), 6,20 (m, IH, Hí,), 5,28 (m, 2H, CH), 5,03 (t, IH, J=5,5,5ΌΗ), 4,09 (m, 4H, CH2 és H4,), 3,59 és 3,51 (m, 2H, 5’CH2), 2,38 (m,2H,2’CH2),2,10(m,2H,3’CH2), 1,68 és 1,65 (s, 6H,2CH₃).

42. példa

6-(Benzil-oxi)-9-/(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidrox i-metil)-2-f uril/-9H-pur in

0,5 g (2,2 mmól) 6-benzil-oxi-9H-purint feloldunk 5 ml Ν,Ν-dimetil-formamid és 5 ml dimetilszulfoxid elegyében, hozzáadunk 0,62 g (2,8 mmól) 3’-dezoxi-timidint és 0,04% kálium-azidot tartalmazó K-foszfát puffért (32 ml, 10 mmólos), majd 8 ml DEAE cellulózon abszorbeált 16000 I.U. mennyiségű purin-nukleozid-foszforilázt és 8000 I.U. timidin-foszforilázt (Krenitsky, TA. és mtársai; Biochemistry 2Q, 3615, 1981 és 4.381.444. számú egyesült államokbeli szabadalmi leírás) adagolunk, a pH-t ecetsawal 6,8-ra beállítjuk és az elegyet vízfürdőn 37 ’C hőmérsékleten rázatjuk. 7 óra elteltével a keveréket szűrjük, metanollal addig mossuk, amíg ultra-ibolya fényt abszorbeáló anyagtól mentes lesz, majd vízzel kb. 10% szerves oldószertartalomig hígítjuk. Az így nyert anyagot ezután kromatografáljuk, először AG1-X2 (2,5x10 cm, OH*) töltetű majd XAD-2 (2,5x20 cm) töltetű oszlopon. Ezután az oszlopokat 700 ml vízzel átmossuk, majd a terméket metanollal eluáljuk, az eluátumot betöményítjük, a visszamaradó anyagot flash kromatografáljuk (szilikagél, etil-acetát/metanol95/5). Liofilizálás után 0,339 g 6-(benzil-oxi)-9[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2-furil]-9H -purint nyerünk, op.: 87 ’C.

Elemanalízis a Ci7Hi8N4O₃.0,05 H2O összeg24 képletű vegyületre:

számított: C: 62,39, H: 5,57, N: 17,12%, mért: C: 62,36, H: 5,61, N: 17,08%.

Az 'H-NMR és tömegspektrometriai adatok igazolják a vegyület szerkezetét.

43. példa

6-(N-Ciklopropil-N-metil-amino)-9-[(2R,5S)-t etrahidro-5-((pivaloil-oxi)-metíl)-2-furil]-9H-pur in

0,322 g (1,1 mmól) 6. példa szerinti 6-(N-ciklopropil-N-metil-amino)-9-[(2R,5S)-tetrahidro-5(hidroxi-metil)-2-furil]-9H-purint 50 ml acetonitrilben feloldunk, hozzáadunk 10,5 mg (0,1 mmól) 4(dimetil-amino)-piridint (Aldrich Chemical Co., Madison WI) és 620 μΐ (4,4 mmól) trietil-amint (Aldrich Chemical Co., Madison WI), majd a lombikot jégfürdőn lehűtjük. Ezután 450 μΐ (2,2 mmól) (Aldrich Chemical Co.) pivalinsav-anhidridet feloldunk 10 ml acetonitrilben és cseppenként 15 perc leforgása alatt az elegyhez adagoljuk, majd szobahőmérsékleten keverjük. Ezután 620 μΐ (4,4 mmól) trietil-amint és 250 pl (2 mmól) pivaloil-kloridot adagolunk még 24 óra, 48 óra, 72 óra és 96 óra elteltével, majd 120 órán át keverjük az elegyet és ezután még egy további 500 pl (4 mmól) pivaloü-kloridot és 1,24 ml (8,8 mmól) dietil-amint adagolunk hozzá és 16 órán át visszafolyatás mellett melegítjük A reakciót ezután metanollal leállítj uk, az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot 25 ml etil-acetátban szuszpendáljuk és a kapott sót szűréssel elválasztjuk. Az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot kromatografáljuk (Chromatotron, 2 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 7/3). A kívánt terméket tartalmazó frakciót ezután tovább tisztítjuk szilikagél kromatografáló oszlopon (diklór-metán/metanol- 98/2). A terméket ezután liofilizáljuk, amikoris 0,218 g 6(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-tetrahidro5-((pivaloil-oxi)-metil)-2-furil]-9H-purin-t nyerünk (52%) olajos anyag formájában.

Analízis adatok Cl 9H27NsO₃.0,25 H2O összegképletű vegyületre:

számított: C: 60,38, H: 7,33, N: 18,53%, mért: C: 60,49, H: 7,33, N: 18,38%.

NMR adatok:

'H-NMR (200 MHz, DMSO-de) δ: 8,26 (látszólagos szinglett, 2H, H2 ésHs), 6,25 (m, IH, Hí,), 4,25 (b, IH,H₄,),4,16(m, 2H,H5, ésHs), 3,36(s, 3H,NCH₃), 3,21 (b, IH, N-CHCH2CH2), 2,48 (b, 2H, H₃, és H₃”), 2,11 (m, 2H, H2 és H2¹’), 1,08 (s, 9H, C(CH₃)₃), 0,84 és 0,70 (2m, 2H mindegyik, NCHCH2CH2).

44. példa

9-[(2R,5S)-5-(Acetoxi-metil)-tetrahidro-2-furi

l]-6-(ciklopropü-metil-amino)-9H-purin

0,290 g (1 mmól) 6-(ciklopropü-metil-amino)-9[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2-furil]-9H -purint 10,2 mg (0,1 mmól) 4-(dimetü-amino)-piridint és 620 pl (4,4 mmól) trietil-amint 50 ml acetonitrilben feloldunk, a lombikot jégfürdőn lehűtjük és 150 pl (2,1 mmól) acetil-kloridot adagolunk hozzá. A kapott keveréket négy órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd további 620 pl (4,4 mmól) trie13

-13HU 201954Β til-amint és 150 μΐ (2,1 mmól) acetil-kloridot adagolunk hozzá és egy éjszakán át még keverjük. A reakciót ezután metanollal leállítjuk, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a maradékot 25 ml etilacetátban szuszpendáljuk és a kapott sót szűréssel elválasztjuk. Ezután az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot kromatografáljuk (Chromatotron, 4 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 7/3). Liofilizálás után 0,174 g 9[(2R,5S)-5-acetoxi-metü)-tetrahidro-2-furil]-6-(c iklopropil-metil-amino)-9H-purint nyerünk (51%) olajos anyag formájában.

Elemanalízis a C16H21N5O3.0,55 H2O képletű vegyületre:

számított: C: 56,31, H: 6,53, N: 20,52%, mért: C: 56,26, H: 6,50, N: 20,50%.

NMR adatok:

¹ H-NMR (200 MHz, DMSO-dó) δ: 8,31 és 8,29 (2s, 2H, H2 és Hs), 6,29 (m, 1H, Hí,), 4,32 (b, 1H, H4,), 4,16 (m, 2H, Hs, és Hs”), 3,38 (s, 3H, N-CH3), 3,25 (b, 1H, N-CHCH2CH2), 2,5 (b, 2H, H3, és H3”),

2,14 (m, 2H, H2, és H2”), 1,98 (s, 3H, CH3COO), 0,88 és 0,73 (2m, 2H mindegyik. N-CHCH2CH).

45. példa

6-(Ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5-[(he xanoil-oxÍ)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-purin

0,503 g (1,7 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2-furil]9H-purint, 2 ml (14 mmól) trietil-amint és 10 mg (0,1 mmól) 4-(dimetil-amino)-piridint feloldunk 50 ml acetonitrilben, hozzáadunk 980 pj (7 mmól) hexanoil-kloridot és szobahőmérsékleten három órán át keverjük. Ezután a redukciót metanollal leállítjuk, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot 25 ml etil-acetátban feloldjuk, az oldhatatlan sót szűréssel elválasztjuk, az etilacetátot elpárologtatjuk és a visszamaradó anyagot metanolban oldjuk, majd szilikagél oszlopon kromatografáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, betöményítjük és ismételten kromatografáljuk (Chromatotron, 4 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 8/2). A kapott terméket ismételten kromatografáljuk (Chromatotron, 2 mm-es szilikagél lemez, kloroform/aceton- 99/1). A kapott termék liofilizálás után 0,268 g 6-(ciídopropil-metilamino)-9-[(2R,5S)-5-[(hexanoil-oxi)-metil]-tetra hidro-2-furil]-9H-purin, olajos anyag formájában (40%-os kihozatal).

Elemanalízis a C20H29N5O3.0,10 H2O képletű vegyületre:

számított: C: 61,71,.H: 7,56, N: 17,99%, mért: C:61,81,H:7,58,N: 17,92%.

NMR adatok:

‘H-NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 8,30 és 8,28 (2s, 2H, H2 és Hs), 6,28 (m, 1H, J-6,3Hz, J=4,2Hz, Hí,), 4,30 (b, 1H, H₄,), 4,23 (m, 2H, Hs. és Hs), 3,38 s, 3H N-CH3), 3,24 (m, 1H, N-CHCH2CH2), 2,51 (b, 2H.H3, ésH3”), 2,22 (m,2H,H2, ésH2), 2,14 (m, 2H, OOCCH2CH2(CH2)2CH3), 1,45 látszólagos szinglett 2H, J-7,3Hz, OOCCH2CH2(CH₂)2CH3), 1,20 (m, 4H, OOCCH2CH2(CH2)2CH3). 0,88 és 0,73 (2m, 2H mindegyik, N-CHCH2CH2), és 0,82 (t, 3H, J-6,8Hz, OOCCH2CH₂(CH2)2CH3).

46. példa

6-(Ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5-[(no nanoil-oxi)-metü]-tetrahidro-2-furil]-9H-purin

0,498 g (1,7 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)5 9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2-furil]9H-purint, 10 mg (0,1 mmól) 4-dimetü-amino-piridint és 2 ml (14 mmól) trietü-amint feloldunk 50 ml acetonitrilben, hozzáadagolunk 1,26 ml (7 mmól) nonanoil-klorídot és szobahőmérsékleten három órán át keverjük. A reakciókeveréket ezután metanollal elkeverjük, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot 25 ml etü-acetátban oldjuk, az oldhatatlan sót szűréssel elválasztjuk, az etil-acetátot elpárologtatjuk és a visszama15 radó anyagot metanolban oldjuk, majd szilikagélen kromatografáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, betöményítjük, kromatografáljuk (Chromatotron, 4 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 80/20). A kapott terméket ezután egy20 mást követően kétszer még kromatografáljuk (Chromatotron, 4 mm-es szilikagél lemez, kloroform/aceton- 95/5, illetve hexán/aceton- 85/15) majd a terméket liofilizáljuk, amikoris 0,236 g 6(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5-[(nonanoi l-oxi)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-purínt nyerünk, kihozatal 32% olajos anyag formájában.

Elemanalízis a C23H35N5O3.0,15 H2O képletű vegyületre:

számított: C:63,91,H:8,23,N: 16,20%, mért: C: 63,73,. H: 8,05, N: 16,05%.

NMR adatok:

*H-NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 8,29 és 8,28 (2s, 2H, H2 és Hs), 6,28 (dd, 1H, J-5,9Hz, Hí,), 4,21 (b, 1H, H4,), 4,17 (m, 2H, H5, és H₅), 3,38 (s, 3H,

N-CH3), 3,24 (b, 1H, N-CHCH2CH2), 2,51 (b, 2H,

H3, és H3”), 2,24 (m, 2H, H2, és H2”), 2,16 (m, 2H, OOCCH2CH2(CH2)5CH3), 1,45 (b, 2H,

OOCCH2CH2(CH2)-5CH3), 1,22 (b, 10H,

OOCCH2CH2(CH2)5CH3), 0,88 és 0,72 (2m, 2H mindegyik, N-CHCH2CH2), 0,83 (t, 2H, J-6,7Hz, OOCCH2CH2(CH2)5CH3).

47. példa

6-(Ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5-[(he xanoil-oxi)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-purin

0,310 g (1,1 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metü)-2-furil]9H-purint 10 mg (0,1 mmól) 4-(dimetü-amino)-piridint és 1 ml (7 mmól) trietü-amint feloldunk, 50 ml acetonitrilben, hozzáadunk800 μΐ (5 mmól) heptanoil-kloridot és szobahőmérsékleten 6 órán át keverjük. A reakciókeverékhez ezután metanolt adagolunk, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot acetonban oldjuk és szilika55 gél oszlopon kromatografáljuk A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, betöményítjük, és preparatív szilikagél lemezekre adagoljuk (20x20x0,2 cm). A lemezeket ezután kloroform/aceton-80/20 eleggyel kifejlesztjük, a terméket a preparatív le60 mezről leválasztjuk (Rf 0,5) és a szilikagélről etanollal eluáljuk. Az oldószert ezután elpárologtatjuk, majd a terméket ismételten kromatografáljuk (Chromatotron, 2 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 80/20), majd liofilizáljuk, amikoris

0,227 g 6-(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-514

-14HU 201954Β [(heptanoil-oxi)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-pu rint nyerünk olajos anyag formájában (51%).

Elemanalizis a C21H31N5O3.0,10 H2O képletű vegyületre:

számított: C: 62,54, H: 7,80, N: 17,36%, mért: C: 62,56, H: 7,79, N: 17,28%.

ViVikJvnjD/, u ο,ώ,/ w O_yk.U (2s, 2H, H2 és Hs). 6,26 (m, 1H, Hl,), 4,26 (b, 1H, H4,) 4,15 (m, 2H, Hs, és H₅”), 3,36 (s, 3H, N-CH3),

3,24 (b, 1H, N-CHCH2CH2), 2,48 (b, 2H, H3, és H3”), 2,17 (m, 4H, H₂, és H₂”, OOCCH₂(CH₂)4CH3), 1,42 (b, 2H,

OOCCH2CH2(CH2)2CH3), 1,19 (b, 6H, OOC(CH2)2(CH2)3CH3), 0,85 és 0,71 (2m, 2H mindegyik, N-CHCH2CH2) és 0,80 (t, 3H, J-6,9Hz, OOC(CH2)5CH3).

48. példa

6-(Ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5-(me toxÍ-acetoxi-metil)-2-furil]-9H-purin

0,319 g (1,1 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2-furilj9H-purint, 10 mg (0,1 mmól) 4-(dimetil-amino)-piridint és 1 ml (7 mmól) trietil-amint feloldunk 50 ml acetonitrilben, hozzáadunk 460 μ.1 (5 mmól) metoxi-acetil-klorid és szobahőmérsékleten hat órán át keverjük. Akeverékhezezután metanolt adagolunk, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot acetonban oldjuk és szilikagélen kromatografáljuk. Az ultraibolya fényt abszorbeáló eluátumot ezután betöményítjük és 4 mm-es szilikagél lemezen kloroform/aceton- 95/5 eleggyel elválasztjuk. Az oldószert ezután vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot 20x20x0,2 cm-es preparatív szilikagél lemezen fejlesztjük kloroform/aceton- 70/30 elegy alkalmazásával. A terméket a preparatív szilikagél lemezről lekaparjuk és a szilikagélről etanollal eluáljuk. Liofilizálás után 0,217 g 6-(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5(metoxi-acetoxi-metíl)-tetrahidro-2-furil]-9H-pu rint nyerünk olajos anyag formájában (53%).

Elemanalízis Cl 7H23NSO4.0,45 H2O: számított: C: 55,26, H: 6,52, N: 18,95%, mért: C: 55,17, H: 6,38, N: 18,84%.

NMR adatok:

¹ H-NMR (200 MHz, DMSO-dó) δ 8,30 és 8,26 (2s, 2H, H2 és Hs), 6,27 (látszólagos triplett, 1H, Hí,), 4,31 (b, 1H, H4,), 4,21 (b, 2H, H₅, és H₅”), 3,99 (látszólagos dublett, 2H, OOCCH2OCH3), 3,37 (s, 3H, N-CH3), 3,25 (s, 3H, OOCCH2OCH3), 3,19 (b, 1H, N-CHCH2CH2), 2,46 (b, 2H, H3, és H3”) 2,12 (m, 2H, H2, és H2), 0,87 és 0,73 (2m, 2H mindegyik N-CHCH2CH2).

49. példa

6-(Ciklopropil-metil-anrino)-9-[(2R,5S)-5-[(iz obutiroil-oxi)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-purin

0,321 g (1,1 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2-furilj9H-purint, 10 mg (0,1 mmól) 4-dimetil-amino-piridint és 1 ml (7 mmól) dietil-amint feloldunk 50 ml acetonitrilben, hozzáadunk 830 μΐ izovajsav-anhidridet és hat órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a keverékhez metanol t adagolunk, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamara28 dó anyagot acetonban oldjuk és szilikagél oszlopon kromatografáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat ezután egyesítjük, betöményítjük, 20x20x0,2 cm-es preparatív szilikagél lemezre adagoljuk és a lemezeket kloroform/aceton- 80/20 eleggyel kifejlesztjük. A terméket a preparatív lemezről lekaparjuk (Rf 0,5) és a szilikagélről etanollal eluáljuk. Az oldószer elpárologtatása után a terméket ismételten kromatografáljuk (Chromatotron, 2 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 80/20). Liofilizálás után 0,277 g 6-(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5[(ÍzobutiroiÍ-oxi)-metil]- tetrahidro-2-furil]-9Hpurint nyerünk olajos anyag formájában (69%).

Elemanalizis a C18H25N5O3.0,30 H2O képletű vegyületre:

számított: C: 59,26, H: 7,07, N: 19,20%, mért: C: 59,30, H: 6,92, N: 19,05%.

NMR adatok:

‘H-NMR (200 MHz, CDCb): δ 8,39 és 7,99 (2s, H2 és Hs), 6,31 (m, 1H, Hí,), 4,38 (b, 1H, H4,) 4,30 (m, 2H, H5, és H5”), 3,46 (s, 3H, N-CH3), 3,22 (b, 1H, N-CHCH2CH2), 2,56 (b, 3H, H3,, H3” és OOCH(CH3)2),2,11 (m,2H,H2,ésH2”), l,16(d,6H, J-7Hz, OOCH(CH3)2), 0,98 és 0,76 (2m, 2H mindegyik, N-CHCH2CH2).

50. példa

6-(Ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5[(pentanoil-oxi)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-pu

-rin

0,624 g (2,1 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2-furü]9H-purint, 27 mg (0,2 mmól) 4-(dimetil-amino)-piridint és 2 ml (14 mmól) trietil-amint 100 ml acetonitrilben oldunk, hozzáadunk 1,08 ml (8,9 mmól) valeril-kloridot és hat órán át szobahőmérsékleten keverjük. A keverékhez ezután metanolt adagolunk, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot acetonban oldjuk, majd szilikagélen kromatografáljuk. Ezután az oldószert elpárologtatjuk, a kapott terméket ismételten kromatografáljuk (Chromatotron, 4 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 85/15). A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, betöményítjük, majd 20x20x0,2 cm-es preparatív szilikagél lemezre adagoljuk, a lemezeket kloroform/aceton- 80/20 eleggyel kifejlesztjük, a terméket a lemezről lekaparjuk és s szilikagélről etanollal eluáljuk. A terméket ezután flash kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, kloroform/aceton- 95/5). Liofilizálás után 0,463 g 6(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5-[(pentano én-oxi)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-purint nyerünk olajos anyag formájában (58%).

Elemanalízis C19H27N5O3.0,25 H2O képletű vegyületre:

számított: C: 60,38, H: 7,33, N: 18,53%, mért: C:60,66,H:7,36,N:18,14%.

NMR adatok:

’H-NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 8,30 és 8,28 (2s, 2H, H2 és Hs), m, 2H, H5, és H5”), 3,38 (s, 3H, N-CH3), 3,25 (b, 1H, N-CHCH2CH2), 2,51 (b, 2H, H3, és H3”), 2,22 (m, 2H, OOCCH2CH2CH2CH3),

1,23 (m, 2H, OOCCH2CH2CH2CH3), és 0,89 és 0,74 (2m, 2H mindegyik, N-CHCH2CH2) és 0,82 (t, 3H, J-7,2Hz, OOCCH2CH2CH2CH3).

-15HU 201954 Β

57. példa

6-(Ciklopropil-metü-amino)-9-[(2R,5S)-5-[(pr opanoil-oxi)-metü]-tetrahidro-2-furil]-9H-purin

0,369 g (1,3 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)- 5

9-[(2R,5S)-5-(hidroxi-metil)-2-furil]-9H-purint, mg (0,1 mmól) 4-dimetil-amino-purint és 2 ml (14 mmól) trietil-amint 50 ml acetonitrilben feloldunk, hozz áadunk 450 μΐ (5,2 mmól) propinoil-kloridot és 10 szobahőmérsékleten 2 órán át keerjük. A keveréket ezután metanollal elkeverjük, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a maradékhoz etil-acetátot adagolunk és az oldhatatlan sót szűréssel elválasztjuk. A szűrletet szilikagélen metanollal eluálva kro- 15 matografáljuk, majd oldószert elpárologtatjuk és a terméket Chromatotron 4 mm-es szilikagél lemezre adagoljuk és hexán/aceton= 75/25 eleggyel kifejlesztjük. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, ismételten kromatografáljuk (Chromatotron, 2 20 mm-es szilikagél lemez, kloroform/aceton=95/5). A terméket tartalmazó frakciókat 20x20x0,2 cm-es preparatív szilikagél lemezekre adagoljuk, amelyeket kloroform/aceton- 85/15 eleggyel kifejlesztünk. A végső tisztítást egy ismételt kromatografá- 25 lássál végezzük (Chromatotron 2 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 80/20). Liofilizálás után 0,178 g 6-(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5[(propanoil-oxí)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-pu rint nyerünk olajos anyag formájában (39%). 30

Elemanalizis a C17H23N5O3.0,20 H2O képletű vegyületre:

számított: C: 58,51, H: 6.76, N: 20,07%, mért: C: 58,58, H: 6,78, N: 19,90%.

NMR adatok: 35

H-NMR (200 MHz, DMSO-dó) δ 8,28 és 8,26 (2s, 2H, H2 és Hs), 6,26 (m, IH, Hi,)(, 4,28 (b, IH,

H₄,), 4,14 (m, 2H, Hs, és Hs”), 3,36 (s, 3H, N-CH3),

3,21 (b, IH, N-CHCH2CH2), 2,48 (b, 2H, H3, és H3”), 2,26 (q, 2H, J-7,7Hz, OOCCH2CH3), 2,18 (m, 40

2H, H2, és H2”), 0,96 (t, 3H, J=7,5Hz, OOCCH2CH3), 0,84 és 0,70 (2m, 2H mindegyik, NCHCH2CH2).

52. példa 45

6-(Ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-5-[(p

-metil-benzoil-oxi)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H

-purin

0,295 g (1,0 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2-furil]- 50 9H-purint, 20 mg (0,2 mmól) 4-(dimetil-amino)-piridint és 2 ml (14 mmól) trietil-amint feloldunk 50 ml acetonitrilben, hozzáadunk 1,08 ml (7 mmól) pmetíl-benzoil-kloridot és szobahőmérsékleten hat órán át keverjük. A keverékhez ezután metanolt 55 adagolunk, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot etil-acetátban szuszpendáljuk és az oldhatatlan sót szűréssel elválasztjuk. A szűrletet ezután betöményítjük, 20x20x0,2 cm-es szilikagél lemezre adagoljuk, a lemezeket 60 kloroform/aceton- 95/5 eleggyel kifejlesztjük, majd a terméket lekaparjuk és a szilikagélről etanollal eluáljuk. A terméke tezután még flash kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, kloroform/metanol- 98/2). Liofilizálás után 0,330 g 6-(ciklopropil- 65 metil-amino)-9-[(2R,5S)-5-[(p-metü-benzoü-oxi) -metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-purint nyerünk, olajos anyag formájában (78%).

Elemanalízis C22H25N5O3.0,20 H2O képletű vegyületre:

számított: C: 63,89, H: 6,45, N: 16,48%, mért: C:64,10,H:6,24,N:16,29%.

NMR adatok:

’H-NMR (200 MHz, DMSO-dó) δ 8,28 és 8,25 (2s, 2H, H2 és He), 7,75 és 7,25 (2m, 2H mindegyik OOCCóH4-CH3), 6,28 (dd, IH, J-6,5Hz, J-4,0Hz, Hí,), 4,42 (b, 3H, H4,, Hs, és Hs), 3,35 (s, 3H, NCH3), 3,22 (b, IH, N-CHCH2CH2), 2,54 (b, 2H, H3, és H3”), 2,35 (s, 3H, OOCC6H4CH2), 2,24 (m, 2H, H2, és H2”), 0,85 és 0,70 (2m, 2H mindegyik, NCHCH2CH2).

53. példa

6-(Ciklopropil-metü-amino)-9-[(2R,5S)-5[(benzoil-oxi)-metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-purin

0,310 g (1,1 mmól) 6-(ciklopropü-metil-amino)9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metü)-2-furü]9H-purint, 27 mg (0,2 mmól) 4-(dimetü-amino)-piridint és 1,1 ml (8 mmól) trietü-amint feloldunk 50 ml acetonitrilben majd hozzáadunk 0,2 g (4 mmól) benzoesav-anhidridet és szobahőmérsékleten hat órán át keverjük. Ezután a keveréket metanollal elkeverjük, az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot etil-acetátban szuszpendáljuk és az oldhatatlan sót szűréssel elválasztjuk. A szűrletet betöményítjük, 20x20x0,2 cm-es preparatív szilikagél lemezekre adagoljuk, a lemezeket diklór-metán/metanol= 90/10 eleggyel kifejlesztjük, a terméket a lemezről lekaparjuk és a szilikagélről etanollal eluáljuk. A végső tisztítást flash kromatográfiával végezzük (szüikagél oszlop, diklór-metán/metanol- 90/10). Liofilizálás után 0,42 g 6-(ciklopropü-metü-amino)-9-[(2R,5S)-5-[(benzoil-oxi) -metil]-tetrahidro-2-furil]-9H-purint nyerünk, olajos anyag formájában (78%).

Elemanalízis C21H23N5O3.0,30 H2O képletű vegyületre:

számított: C: 63,24, H: 5,96, N: 17,56%, mért: C: 63,23, H: 5,95, N: 17,50%.

NMR adatok:

*H-NMR (200 MHz, DMSO-dó) δ 8,29 és 8,25 (2s, 2H, H2 és Hs), 7,86,7,61 és 7,47 (3m, 5H összes, OOCC6H5), 6,29 (dd, IH, J-6,5Hz, J-4,0Hz, Hí,),

4,45 (b, 3H, H₄„ H5, ésH5”), 3,35 (s, 3H, N-CH3), 3,20 (b, IH, N-CHCH2CH2), 2,52 (b, 2H, H3, és H3”), 2,22 (b, 2H, H2, és Hí”), 0,83 és 0,69 (2m, 2H mindegyik, N-CHCH2CH2).

54. példa

6-(Ciklopropil-metü-ammo)-9-[(2R,5S)-tetrah idro-5-[(4-nitro-benzoü)-oxi]-metil-2-furil]-9Hpurin

0,3 g (0,96 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)purin-9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2furil]-9H-purint feloldunk 10 ml acetonitrilben, hozzáadunk 10 ml acetonitrilben oldott 4,4 mmól trietil-amint és 0,0102 g (0,086 mmól) 4-(dimetüamino)-piridint, a lombikot 0 ’C hőmérsékletre lehűtjük, majd cseppenként ezt a hőmérsékletet tartva keverés közben 7 ml acetonitrilben oldott 0,27 g (2 mmól) p-nitro-benzoil-kloridot adagolunk hozzá.

-16HU 201954Β

Kilencven perc elteltével az oldószert elpárologtatjuk és a visszamaradó anyagot metanolban oldjuk.

Ezután 25 ml száraz szilikagélt adagolunk hozzá, az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a visszamaradó anyagot szilikagélen kromatografáljuk. A mobil 5 fázis kloroform/metanol- 95/5 elegye. A terméket tartalmazó frakciókat ezután egyesítjük, ismételten kromatografáljuk (Chromatotron 4 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 7/3). A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd liofilizáljuk ami- 10 kőris 0,311 g 6-(ciklopropil-metil-amino)-9[(2R,5S)-tetrahidro-5-[[(4-nitro-benzoil)-oxi]-me til]-2-furü]-9H-purint nyerünk.

Elemanalízis C21H22N6O5 képletű vegyületre: számított: C: 57,53, H: 5,06, N: 19,17%, 15 mért: C: 57,50, H: 5,10, N: 19,22%.

NMR adatok:

¹ H-NMR (200 MHz, DMSO-dó) δ 8,05-8,29 (m,

4H, O), 8,04 és 8,00 (2s, 2H, H2 és He), 6,27 (m, IH,

Hí,), 4,56 (b, IH, H4,, 4,41 (m, 2H, H₅, és H₅), 3,30 20 (s, 3H, N-CH3), 3,17 (b, IH, ciklopropil CH), 2,6 (b,

2H, H2, és H₂”), 2,14 (m, 2H, H3, és H3”), 0,87 és 0,79 (2m, 4H, ciklopropil CH2CH2).

55. példa 25

6-(Ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-tetrah idro-5-(p-amÍno-benzoil-metil)-2-furil]-9H-purin

0,203 g (0,463 g (0,463 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(p-nitro- benzoil)-2-furil]-9H-purint, elkeverünk 10% palládiu- 30 mot tartalmazó aktívszénnel (0,1 g), hozzáadunk 0,012 g (0,086 mmól) 4-(dimetil-amino)-piridint 150 ml metanolban oldva. A redukciót hidrogénatmoszférában ~3,6.10³ Pa nyomáson 6 órán át végezzük. Ezután a szilárd terméket elválasztjuk, a szűr- 35 letet megszárítjuk, szilikagélen kromatografáljuk (CHCI3/CH3OH- 95/5). A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd az oldószert elpárologtatjuk, ilymódon 0,127 g 6-(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(p-amino-benzoil-m 40 etil)-2-furil]-9H-purint nyerünk, amely az analízis szerint 0,5 ekvivalens vizet tartalmaz (66%).

Op.: 63 ’C; TLC Rf 0,69 (szilikagél,

CHCl3:CH3OH/9:l), [ű]d 6,4’ (c 0,5, DMF); UV Xmax (exlO’³) pH 7-nél, 275,5 nm (32,2). 45

Elemanalízis C21H24N6O3.0,5 H2O képletű vegyületre:

számított: C: 60,42, H: 6,04, N: 20,13%, mért: C: 60,54, H: 6,06, N: 20,01 %.

NMR adatok: 50 ‘H-NMR (200 MHz, DMSO-dó) δ 8,28,8,26 (s,

2H, H2 és Hg), 7,56 (d, 2H, J=8,6Hz, O_a,d), 6,51 (d,

2H, J-8,6Hz, O_b,c), 6,27 (ro, IH, Hí,), 5,96 (b, 2H,

NH2), 4,32 (m, 3H, H₄„ H5, és H5”), 3,36 (s, 3H, NCH₃), 3,2 (b, IH, N-CHCH2CH2), 2,48 (b, 2H, H3, és 55

H3”), 2,17 (m, 2H, H2, és H2”), 0,86 és 0,71 (m, 2H mindegyik, N-CHCH2CH2).

56. példa

6-(Ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-tetrah 60 idro-5-[(fenil-acetil)-metil]-2-furil]-9H-purin

0,5 g (1,44 mmól) 6-(ciklopropil-metil-amino)9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-(hidroxi-metil)-2-furilj9H-purint feloldunk 20 ml acetonitrilben, hozzáadunk 10,2 mg (0,08 mmól) 4-(dimetil-amino)-pu- 65 rint és 620 μΐ (4,4 mmól) trietil-amint, majd a lombikot nitrogénatmoszférában jégfürdőn lehűtjük. Ezután 1,11 g (7,2 mmól) fenil-acetil-kloridot adunk hozzá cseppenként 15 perc leforgása alatt és szobahőmérsékleten 0,5 órán át keverjük Akeveréket ezután metanollal elkeverjük az oldószert vákuumban elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot 2 ml CHCI3/CH3OH- 9/1 elegyben oldjuk, majd szilikagélen kromatografáljuk Az eluált terméket ezután ismételten kromatografáljuk (Chromatotron, 2 mm-es szilikagél lemez, hexán/aceton- 7/3). Liofilizálás után 0,459 g 6-(ciklopropil-metil-amino)-9-[(2R,5S)-tetrahidro-5-[(fenil-acetil)-metil] -2-furÜ]-9H-purint nyerünk olajos anyag formájában (78%), op.: 25 ’C.

Elemanalízis C22H25N5O3 képletű vegyületre: számított: C: 64,85, H: 6,18, N: 17,19%, mért: C: 64,90, H: 6,20, N: 17,10%.

MHz, DMSO-dó) δ 8,29,8,27 (s,

2H, H2 és He), 7,23 (m, 5H, O), 6,27 (m, IH, Hí,),

4,24 (m, 3H, H₄„ H5, és Hs”), 3,61 (d, 2H, Jgem1,5Hz, CH2), 3,36 (s, 3H, N-CH3), 3,21 (b, IH, NCHCH2CH2), 2,2 (b, 2H, H3, és H3”),. 2,12 (m, 2H, H2, és H2”), 0,83 és 0,70 (2m, 2H, mindegyik NCHCH2CH2).

58. példa

Tabletta készítmény

A következő A, B és C összetételekben szereplő anyagokat nedvesen granuláltuk a povidon-oldat segítségével, majd hozzáadtuk a magnézium-sztearátot és sajtoltuk

NMR adatok: H-NMR (200

A összetétel mg/tabletta	mg/tabletta
(a) Hatóanyag	250	250
(b) Laktóz BJ*.	210	26
(c) Povidon B.P. (d) Nátrium-	15	9
keményítőglikolát	20	12
(e) Magnézium-sztearát	5	3
	500	300
B összetétel mg/tabletta	mg/tabletta
(a) hatóanyag	250	250
(b) Laktóz	150	-
(c) AvicelPH 101	60	26
(d) PovidonB.P. (e) Nátrium-	15	9
keményítőglikolát	20	12
(f) Magnézium-sztearát	5	3
	500	300
C összetétel		mg/tabletta
Hatóanyag		100
Laktóz		200
Keményítő		50
Povidon		5
Magnézium-sztearát		4 359

A következő D és E összetételeknek megfelelő készítményeket közvetlenül sajtoltuk. A laktóz-tartalmú E összetétel közvetlen sajtolásra alkalmas típus (tej származék: „Zeparox”).

-17HU 201954Β

D összetétel mg/tabletta

Hatóanyag 250

Előgélesített keményítő 150

400

E összetétel mg/tabletta

Hatóanyag 250

Laktóz 150

Avicel 100

500

F készítmény (szabályozott felszabadulású készítmény)

Az alábbi összetevőket a povidon-oldat segítségével nedvesen granuláltuk, majd hozzáadtuk a magnézium-sztearátot és sajtoltuk.

	mg/tabletta
(a) Hatóanyag (b) Hidroxi-propil-metil-cellulóz-	500
(Methocel K4M Prémium)	112
(c) Laktóz B.P.	53
(d)PovidonB.P.	28
(e) Magnézium-sztearát	7 700

Afenti készítményből a hatóanyag felszabadulása 6-8 óra időtartam után megy végbe és teljesen 12 óra elteltével fejeződik be.

59. példa

Kapszula készítmény

A összetétel

A kapszula készítményt az előző D összetételnek megfelelő anyagokból állítottuk elő úgy, hogy a keveréket a kétrészes kemény zselatinkapszulába töltöttük. A következő B összetételt hasonlóképpen formuláztuk.

B összetétel mg/kapszula (a) Hatóanyag 250 (b) Laktóz B.P. 143 (c) Nátrium-keményítőglikolát 25 (d) Magnézium-sztearát 2

420

C összetétel mg/kapszula (a) Hatóanyag 250 (b) Macrogol 4000 B.P. 350

600

A fenti készítményt úgy állítjuk elő, hogy a Macrogol 4000 B.P-t megolvasztjuk, a hatóanyagot az olvadékban diszpergáljuk és kétrészes kemény zselatinkapszulába töltjük.

D összetétel mg/kapszula

Hatóanyag 250

Lecitin 100

Arachizolaj 100

450

A fenti összetételű készítményt úgy állítjuk elő, hogy a hatóanyagot a lecitinben és az olajban diszpergáljuk, kétrészes lágy, elasztikus zselatinkapszulába töltjük.

E összetétel (szabályozott felszabadulású kapszula)

A következő összetételű szabályozott felszabadulású kapszula készítményt úgy állítjuk elő, hogy az (a), (b) és (c) összetevőket extrudáljuk, majd az extrudált anyagot formázzuk és szárítjuk. A szárított pelleteket ezután a szabályozott felszabadulást biztosi tó (d) anyaggal bevonjuk és kétrészes kemény zselatinkapszulába töltjük.

mg/kapszula (a) Hatóanyag 250 (b) Mikrokristályos cellulóz 125 (c) Laktóz B.P. 125 (d) Etil-cellulóz 13

513

60. példa

Injekció készítmény

A összetétel

Hatóanyag 0,200 g

Sósav oldat, 0,lM vagy

Nátrium-hidroxid oldat, 0,lM pH 4,0-7,0-ig

Steril víz 10 ml-ig

A hatóanyagot a víz túlnyomó részében 35-40°C hőmérsékleten oldjuk, a pH értékét 4 és 7 közötti értékre beállítjuk a megfelelő mennyiségű sósav és nátrium-hidroxid adagolásával, majd a vízzel a szükséges mennyiségre kiegészítjük, sterilen szűrjük steril 10 ml-es üvegfiolába, majd sterilen lezárjuk.

B összetétel

Hatóanyag 0,125g

Steril, lázkeltő anyagtól mentes, pH= 7 foszfát puffer 25 ml-ig

61. példa

Intramuszkuláris injekció

Hatóanyag 0,20 g

Benzil-alkohol 0,10 g

Glycofurol75 1,45 g

Víz (inj.) 3,00 ml-ig

A hatóanyagot a Glycofurolban oldjuk, hozzáadjuk a benzil-alkoholt és a 3 ml mennyiésgű vizet, majd a keveréket steril mikroporózus szűrőn átszűrjük és steril 3 ml-es üvegfiolába töltjük.

62. példa

Szirup készítmény

Hatóanyag 0,25 g

Szorbit oldat 1,50 g

Glicerin 2,00 g

Nátrium-benzoát 0,005 g ízanyag, Peach 17.42.3169 0,0125ml

Desztillált víz 5,00 ml-ig

A hatóanyagot a glicerin és a desztillált víz túlnyomó részében oldjuk, hozzáadjuk a nátrium-benzoát vizes oldatát, majd a szorbit-oldatot, végül az

-18HU 201954Β ízanyagot. A térfogatot ezután vízzel a szükséges mennyiségre kiegészíjük.

63. példa

Kúp készítmény #	mg/kúp készítmény
Hatóanyag (63 pm)	250
Kemény zsír, Β.P.
(WitepsolH15
- Dynamit NoBel)	1770
	2020
A felhasznált hatóanyag por formájú, és 90%-

ának a szemcsemérete kisebb, mint 63m m.

A Witepsol H15 1/5 részét gőzköpenyes edényben 45 ’C hőmérsékleten megolvasztjuk, a hatóanyagot 200 pm-es szitán átszitáljuk, az olvadékban jól elkeverjük, a homogenizálást addig végezve, amíg teljesen sima diszperziót nyerünk, majd 45 ’C hőmérsékleten a fennmaradó Witepsol H15 menynyiséget még hozzáadjuk és teljes homogenitásig keverjük. A kapott szuszpenziót ezután 250 pm-es rozsdamentes szitán átszitáljuk állandó keverés közben, majd 40 ’C hőmérsékletre lehűtjük. 38-40 ’C közötti hőmérsékleten 2,02 g mennyiségű keveréket a megfelelő 2 ml térfogatú műanyag formába öntjük, majd szobahőmérsékletre lehűtjük.

64. példa
Pesszárium készítmény	mg/pesszárium
Hatóanyag (63 pm)	250
Vízmentes dextróz	380
Burgonya keményítő	363
Magnézium-sztearát	7 1000

A fenti összetevőket jól elkeverjük és közvetlenül pesszárium formába sajtoljuk.

Vírus ellenes aktivitás

6-(Ciklopropil-amino)-purin-9-béta-D-2’,3’-di dezoxi-ribofuranozidot és 6-(metil-amino)-purin9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribofuranozidot HÍV elleni aktivitásra vizsgáltunk a következő irodalmi helyen leírt eljárás szerint: Mitsuya és munkatársai, Proc. Nat. Acad. Sci, USA, 82, (1985. okt.) 70967100, és megállapítottuk, hogy az aktivitás értéke 1 pmól.

Claims (5)

1. Eljárás az (I) általános képletű vegyületek és adott esetben 1-4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituált 2-12 szénatomos alkanoil-, fenil-( 1 -4 szénatomos alkil)-, vagy adott esetben 1 -4 szénatomos alkil-, nitro- vagy aminocsoporttal szubsztituált benzoilészter-származékaik előállítására — a képletben

Rl jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport,

R2 jelentése halogénatom, előnyösen klóratom, 1-6 szénatomos alkoxi-, előnyösen propil-oxi- vagy izopropiloxi-csoport, amely adott esetben 3 -6 szénatomos cikloalkil-csoporttal szubsztituálva lehet, előnyösen jelenthet ciklopropil-metoxi-csoportot; 3-8 szénatomos cikloalkoxi-, előnyösen ciklobutoxi- vagy cildopentoxi-csoport; fenil-(1-4 szénatomos alkil)-oxi-, előnyösen benzil-oxi-csoport, 1-4 szénatomos alkil-tio-csoport, vagy fenil-(l-4 szénatomos alkil)-tio-csoport, vagy

R2 jelentése lehet még egy oxigénatomot és egy nitrogénatomot vagy egy nitrogénatomot és 3-7 szénatomot tartalmazó telített heterociklusos gyűrű, előnyösen piperidino-, pirrolidino-csoport, vagy

Rl jelentése lehet még imidazolil-tio-csoport, amelyben az imidazolü-csoport még 1-4 szénatomos alkilcsoporttal és/vagy a szénatomon nitrocsoporttal szubsztituálva lehet, vagy

R2 jelentése lehet még aminocsoport, amely a következő csoportokkal mono-vagy diszubsztituálva lehet, 1-6 szénatomos alkil-, előnyösen metilvagyetil-, hidroxi-1-4 szénatomos alkil-, előnyösen hidroxi-etil-, és/vagy 3-6 szénatomos cikloalkii-, előnyösen ciklopropil- vagy ciklopentil-, fenil-, fenil(1-4 szénatomos alkil) előnyösen benzil-csoport, továbbá 1-4 szénatomos alkücsoporttal szubsztituált allilcsoport, és

R₃ jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport kivéve azokat a vegyületeket, amelyek képletében

Rl és R₃ jelentése hidrogénatom és R2 jelentése metoxi-, metil-tio-, vagy metil-amino-csoport, azzal jellemezve, hogy egy (ΠΙ) általános képletű purinbázist — a képletben B jelentése a kívánt purincsoportnak felel meg — vagy annak reakcióképes származékát 3’dezoxitimidinnel reagáltatjuk, majd a fentiekkel egyidőben vagy azokat követően kívánt esetben

i) a kapott (I) általános képletű vegyületet gyógyászatilag elfogadható származékává, előnyösen észterszármazékává alakítjuk, vagy ii) a kapott észterszármazékban a nitrocsoportot aminocsoporttá redukáljuk.

(Elsőbbsége: 1987.04.09.)

2. Eljárás (I) általános képletű vegyületek és adott esetben 1-4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituált 2-12 szénatomos alkanoil-, fenfl-(l-4 szénatomos alkü)-, vagy adott esetben 1-4 szénatomos alkil-, nitro- vagy aminocsoporttal szubsztituált benzoilészter-származékaik előállítására — a képletben

Rl jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport,

R2 jelentése 1-6 szénatomos alkoxi-, fenü-(l-4 szénatomos alkü)-oxi-, 1-6 szénatomos alkü-tio-, fenil-(l-4 szénatomos alkil)-tio-csoport vagy aminocsoport, amely a következő csoportokkal monovagy diszubsztituálva lehet 1-6 szénszomos alkil-, 3-6 szénatomos cikloalkii- vagy hidroxi-(l-4 szénatomos alkil)-csoport,

R₃ jelentése hidrogénatom — kivéve azokat a vegyületeket, amelyek képletében Rí és Rs jelentése hidrogénatom és R2 jelentése metoxi-, metü-tio-, vagy metü-amino-csoport, azzal jellemezve, hogy egy (III) általános képletű purinbázist — a képletben B jelentése a kívánt purincsoportnak felel meg — vagy annak reakcióképes származékát 3’dezoxitimidinnel reagáltatjuk, majd kívánt esetben a kapott (I) általános képletű vegyületet gyógyászatilag elfogadható származékává, előnyösen észterszármazékává alakítjuk.

(Elsőbbsége: 1987.05.29.)

3. Eljárás (I) általános képletű vegyületek és adott esetben 1-

4 szénatomos alkücsoporttal szubsztituált 2-12 szénatomos alkanoil-, fenil-(l-4

-19HU 201954Β szénatomos alkil)-, vagy adott esetben 1 -4 szénatomos alkil-, nitro- vagy aminocsoporttal szubsztituált benzoilészter-származékaik előállítására — a képletben

Rl jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport, R2 jelentése 1-6 szénatomos alkoxi-, fenil-(l-4 szénatomos alkil)-tío-csoport vagy 1-4 szénatomos alkilcsoporttal mono- vagy diszubsztituált aminocsoport,

R.3 jelentése hidrogénatom—kivéve azokat a vegyületeket, amelyek képletében Rí és R3 jelentése hidrogénatom és R2 jelentése metoxi-, metil-tio-, vagy metil-amino-csoport, azzal jellemezve, hogy egy (ΙΠ) általános képletű purinbázist — a képletben B jelentése a kívánt purincsoportnak felel

5 meg — vagy annak reakcióképes származékát 3’dezoxitimidinnel reagáltatjuk, majd kívánt esetben a kapott (I) általános képletű vegyületet gyógyászatilag elfogadható származékává, előnyösen észterszármazékává alakítjuk