FI91763B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen 2',3'-dideoksi-3'-fluoripyrimidiini- tai -puriininukleosidin valmistamiseksi - Google Patents
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen 2',3'-dideoksi-3'-fluoripyrimidiini- tai -puriininukleosidin valmistamiseksi Download PDFInfo
- Publication number
- FI91763B FI91763B FI885094A FI885094A FI91763B FI 91763 B FI91763 B FI 91763B FI 885094 A FI885094 A FI 885094A FI 885094 A FI885094 A FI 885094A FI 91763 B FI91763 B FI 91763B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- formula
- group
- dideoxy
- purine
- active ingredient
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
- A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
91 763
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen 2',3'-dideoksi-3'-fluoripyrimidiini- tai -puriininukleosidin valmistamiseksi 5 Esillä oleva keksintö koskee menetelmää terapeutti sesti käyttökelpoisen 2 ', 3 '-dideoksi-3'-fluoripyrimidiini-tai -puriininukleosidin valmistamiseksi, jolla on kaava
(I> B
F
jossa kaavassa B on ryhmä, jolla on kaava 15 0 R3 (A) tai (B) R2^N^f
20 I T
joissa R1 on kloori- tai jodiatomi, R2 on vetyatomi tai aminoryhmä ja R3 on C^-sykloalkyyliaraino, suoraketjuinen tai haarautunut C^-alkoksi, C3.7-sykloalkoksi tai 5- tai 6-jäseninen heterosyklinen rengas liitettynä puriiniryhmään • : 25 mainitun renkaan typpiatomin välityksellä.
Uudet yhdisteet ovat terapeuttisesti käyttöökelpoi-sia, erityisesti eräiden virusperäisten infektioiden hoidossa tai ennaltaehkäisyssä.
Virusvastaisen kemoterapian alueella tunnetaan vain ··. 30 muutama lääke, joka tuhoaa itse viruksen, johtuen vaikeudesta tuhota virus jättäen infektoitumattomat isäntäsolut vahingoitumattomina. On juuri osoitettu, että eräät vaiheet viruksen elämänkierrossa, jotka vaihtelevat eri lajien kohdalla, ovat itse viruksen määrittelemiä. Nämä vai-35 heet voivat osoittautua herkiksi hyökkäykselle, mikäli ne 2 91763 eroavat riittävästi vastaavista isäntäsolun toiminnoista. Johtuen viruksen ja isäntäsolun toimintojen suuresta yhtäläisyydestä on kuitenkin ollut erittäin vaikea tunnistaa tehokasta hoitoa.
5 Retrovirukset ovat ryhmä viruksia, joita viime ai koina on pidetty erityisen tärkeinä. Retrovirukset muodostavat RNA-virusten alaryhmän, joiden replikaatio vaatii niiden genomin RNA:n 'käänteistranskription' DNArksi ('transkriptiolla' tarkoitetaan tavanomaisesti DNA:n syn-10 teesiä RNA:sta). Kun viruksen genomi on saatettu DNA-muo-toon se liittyy isäntäsolun genomiin, jolloin se voi hyödyntää isäntäsolun transkriptio/translaatio-koneistoa kokonaisuudessaan omaan replikaatioonsa. Kun viruksen DNA on inkorporoitunut, se on lähes mahdoton erottaa isännän 15 DNAzsta, ja tässä tilassa virus voi säilyä niin kauan kun solu elää. Uskotaan, että se tässä muodossaan on saavuttamaton hyökkäykselle, joten hoito on suunnattava johonkin toiseen viruksen elämänkierron vaiheeseen ja sitä olisi jatkettava kunnes kaikki viruksen infektoimat solut ovat 20 kuolleet.
Eräs retroviruslaji on myös toisinnettavasti eristetty AIDS-potilaista ja sitä kutsutaan nykyisin ihmisen immunikatovirukseksi (HIV) ja tunnetaan myös ihmisen T-solun lymfotrooppisena viruksena III (HTLV III), AIDS:iin : 25 liittyvänä viruksena (ARV) tai lymfadenopatiaan liittyvänä viruksena (LAV). Tämän viruksen on osoitettu ensisijaisesti infektoivan ja tuhoavan OKf-pintamarkkeria kantavia T-soluja ja se on nyt yleisesti hyväksytty AIDS-taudin etio-logiseksi tekijäksi. Potilaasta häviää vähitellen kaikki 30 nämä T-solut, jolloin koko immuunisysteemin tasapaino järkkyy ja potilaan kyky vastustaa muita infektioita vähenee, jolloin hän altistuu muihin infektioihin, jotka usein koituvat kohtalokkaiksi. Täten AIDS-uhrien tavallinen kuolinsyy on jälki-infektio, kuten keuhkokuume tai viruksen 35 aiheuttama syöpä, eikä niinkään HIV-infektion suoranainen seuraus.
l! 91763 3
Viime aikoina HI-virusta on myös eristetty muista kudoksista, kuten T'-markkeria ilmentävistä B-soluista, makrofaageista ja keskushermoston ei-vereen-liittyvistä kudoksista. Tämänkaltainen keskushermoston infektio on to-5 dettu klassisia AIDS-oireita ilmentävillä potilailla ja se liittyy progressiiviseen demyelointiin, joka johtaa riutumiseen ja enkefalopatian, progressiivisen dysartrian, ataksian ja orientaatiovaikeuksien kaltaisiin oireisiin. Lisäksi HIV-infektioon liittyy oireeton kantajavaihe, 10 progressiivinen yleinen lymfadenopatia (PGL) ja AIDS:iin liittyvä kompleksi (ARC).
Me olemme nyt todenneet, että eräät 3'-fluori-2',-3'-dideoksinukleosidit, kuten alla mainitut, ovat käyttökelpoiset virusinfektioiden hoidossa tai ennaltaehkäisys-15 sä, ja erityisesti HIV-infektioissa kuten AIDS, ARC, PGL sekä HIV-kantajille.
Esillä oleva keksintö koskee siten menetelmää terapeuttisesti käyttökelpoisen 2',3'-dideoksi-3'-fluoripyri-midiini- tai -puriininukleosidin valmistamiseksi, jolla on 20 kaava (I)
F
• 25 jossa kaavassa B on ryhmä, jolla on kaava 0 r3 ,JO> "
U Ί R ^ ^ N Y
joissa R1 on kloori- tai jodiatomi, R2 on vetyatomi tai aminoryhmä ja R3 on C3^-sykloalkyyliamino, suoraketjuinen 35 tai haarautunut C^-alkoksi, C3.7-sykloalkoksi tai 5- tai 6- 4 91763 jäseninen heterosyklinen rengas liitettynä puriiniryhmään mainitun renkaan typpiatomin välityksellä.
Kaavan I mukaisilla yhdisteillä on erityisen hyvä aktiivisuus ihmisen retroviruksia vastaan, esimerkiksi ih-5 misen T-solun lymfotrooppisia viruksia (HTLVj vastaan, erityisesti HTLV-I, HTLV-II ja HIV (HTLV-III) vastaan; Täten esitetään kaavan I mukaisia yhdisteitä käytettäviksi yllä mainittujen infektioiden hoidossa tai ennaltaehkäisyssä.
10 Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat myös käyttökelpoi sia muiden retrovirusinfektioihin liittyvien kliinisten tilojen hoidossa tai ennaltaehkäisyssä, esimerkiksi Kapo-sin sarkooma, trombosytopenia purpura, AIDS:iin liittyvä kompleksi, sekä HIV-vasta-aineita kantavien tai HI-viruk-15 selle seropositiivisten potilaiden hoito, kuten myös krooniset neurologiset tilat, kuten multipel skleroosi tai trooppinen spastinen parapareesi. Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat myös käyttökelpoisia HTLV-I, HTLV-II, HTLV-IV ja HIV-2 infektioiden hoidossa ja ennaltaehkäisyssä, ja muis-20 sa AIDS:iin tai immuuunikatoon liittyvissä ihmisen retro-viruksen infektioissa, sekä myös psoriasiksessa. Täten esitetään kaavan I mukaisten yhdisteiden käyttöä yllä mainittujen infektioiden tai tautitilojen hoidossa tai ennaltaehkäisyssä.
: 25 Erityisen hyvä aktiivisuus on todettu retroviruksia vastaan sekä myös sellaisia DNA-viruksia kohtaan, jotka retrovirusten tavoin liittyvät isäntäsolun genomiin elämänkiertonsa aikana, so. retrovirusten kaltaiset DNA-vi-rukset. Täten esitetään myös kaavan I mukaisten yhdistei-.· 30 den käyttö retrovirusten tai retroviruskaltaisten infek tioiden hoitoon tai ennaltaehkäisyyn.
On ymmärrettävä, että kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan myös käyttää valmistettaessa lääkeainetta yllämainittujen lääketieteellisten tai eläinlääketieteellisten 35 indikaatioiden hoitoa tai ennaltaehkäisyä varten.
h 91763 5
Viittaus mihin tahansa yllämainituista yhdisteistä kattaa myös viittauksen sen farmaseuttisesti hyväksyttävään suolaan.
Esimerkkejä kaavan I mukaisten yhdisteiden farmase-5 uttisesti hyväksyttävistä suoloista ovat emäksiset suolat, esim. sopivasta emäksestä, kuten alkalimetallista (esim. natrium), maa-alkalimetallista (esim. magnesium), ammoni-umista ja NX4+ (jossa X on CM-alkyyli) johdetut suolat. Fysiologisesti hyväksyttävät vetyatomin tai aminoryhmän 10 suolat ovat esim. orgaanisten karboksyylihappojen, kuten etikkahapon, maitohapon, viinihapon, maleiinihapon, iso-tionihapon, laktobionihapon ja meripihkahapon suolat; orgaanisten sulfonihappojen, kuten metaanisulfonihapon, eta-anisulfonihapon, bentseenisulfonihapon ja p-tolueenisul-15 fonihapon suolat sekä epäorgaanisten happojen, kuten kloo- rivetyhapon, rikkihapon, fosforihapon ja sulfamiinihapon suolat. Fysiologisesti hyväksyttäviä hydroksiryhmän suoloja ovat yhdisteen anionit yhdistettyinä sopivaan kationiin, kuten Na+, NH4+ ja NX4+ (jossa X on CM-alkyyliryh-20 mä).
Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat ne, joissa R2 on vetyatomi ja R3 on C3^-sykloalkyylaminoryhmä ja ne, joissa R2 on aminoryhmä ja R3 on C145-alkoksiryhmä. Esimerkkejä kaavan I mukaisista yhdisteistä ovat: : 25 1. 2', 3'-dideoksi-3'-fluoriuridiini 2.5- jodi-l-(2,3-dideoksi-3-fluori-fi-D-erytropento-furanosyyli)urasiili 3.5- kloori-l-(2,3-dideoksi-3-fluori-B-D-erytropen-tofuranosyyli)urasiili 30 4.6—syklopropyyliamino-9-(β—D—2,3—dideoksi—3—fluo— riribofuranosyyli)-9H-puriini 5. 2-amino-6-metoksi-9-(B-D-2,3-dideoksi-3-fluori-ribofuranosyyli)-9H-puriini 6. 6-syklopentoksi-9-(B-D-2,3-dideoksi-3-fluoriri-35 bofuranosyyli)-9H-puriini 91763 6 7. 6-isopropoksi-9-(B-D-2,3-dideoksi-3-fluoriribo-furanosyyli)-9H-puriini 8. 6-piperidinyyli-9-(B-D-2, 3-dideoksi-3-fluoriri-bofuranosyyli)-9H-puriini 5 Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että (A) yhdiste, jolla on kaava (II)
Ra 10 \ / (II)
F
jossa B on kuten yllä määriteltiin ja R, on hydrok-15 siryhmän esiasteryhmä, saatetaan reagoimaan sellaisen aineen kanssa tai sellaisissa olosuhteissa että mainittu esiasteryhmä muuttuu vastaavaksi halutuksi ryhmäksi; tai (B) puriini- tai pyrimidiiniemäs, jolla on kaava 20 B - H (III) jossa B on kuten yllä määriteltiin, tai sen toiminnallinen vastine, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, joka liittää halutun ribofuranosyy-25 lirenkaan kaavan (III) mukaisen puriiniemäksen 9-asemaan tai pyrimidiiniemäksen 1-asemaan.
Yllä esitetyssä keksinnön mukaisessa menetelmässä on edullista, että sekä kaavan II mukaiset esiasteyhdis-teet että yllä mainitut aineet ja olosuhteet ovat nukleo-30 sidien synteettisen kemian alalla tunnettuja. Esimerkkejä tämänkaltaisista menetelmistä on tässä alla esitetty ohjeena ja on ymmärrettävä, että ne voidaan modifioida tavanomaisin keinoin riippuen halutusta kaavan I mukaisesta yhdisteestä. Erityisesti silloin kun kuvataan konversio, 35 joka muutoin johtaisi labiilin ryhmän ei-haluttuun reak- li 7 91 763 tioon, tämänkaltaiset ryhmät voidaan suojata tavanomaisin keinoin, jolloin suojaavat ryhmät poistetaan konversion loppuunsaattamisen jälkeen.
Liittyen menetelmään (A) , R, voi olla suojattu hyd-5 roksiryhmä, esim. esteriryhmä kuten asetoksi tai metoksi-karbonyyli, tai eetteriryhmä kuten trialkyylisilyloksiryh-mä, esim. t-butyylidimetyylisilyloksi tai aralkoksiryhmä, esim. trifenyylimetoksi. Nämä ryhmät voidaan muuttaa halutuksi hydroksiryhmäksi esimerkiksi hydrolyysin avulla tai 10 vaihtoehtoiseksi esteriryhmäksi transesteröinnin avulla. R2 voi olla ryhmä, jota voidaan konvertoida introdusoimalla sopiva aine haluttuun fluoriryhmään, jolloin saadaan haluttu yhdiste.
Liittyen menetelmään (B) , tämä voidaan suorittaa 15 esimerkiksi käsittelemällä sopiva kaavan III mukainen pu-riini tai pyrimidiiniemäs tai sen suola tai suojattu johdannainen 2'-3'-dideoksitymidiinillä esimerkiksi sopivan pentosyyliä siirtävän entsyymin läsnäollessa, esimerkiksi tapauksessa, jossa B on puriiniemäs, käyttäen puriininuk-20 leosidifosforylaasia ja tymidiinifosforylaasia.
Kaavan I mukainen yhdiste, jossa B on urasiili voidaan valmistaa kuten esimerkiksi julkaisussa G. Kowollik ym., J. Prakt. Chem. 1973, 315(5), 895-900 esitetään.
Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa pyrimidiinin 5-25 asema on substituoitu kloori- tai jodiatomilla, voidaan valmistaa esimerkiksi halogenoimalla vastaava kaavan I mukainen yhdiste, jossa B on haluttu ei-substituoitu emäs ja jossa 5'-hydroksiryhmä on suojattu, esimerkiksi asyyli-ryhmällä kuten p-toluoyyliryhmällä. Yllä esitetyn lähtö-·, 30 materiaalin halogenointi voidaan suorittaa tavanomaisin keinoin, esimerkiksi jodinoimalla käyttäen jodimonoklori-dia, esim. metyleenidikloridissa, brominoimalla käyttäen bromia, esim. jääetikkahapossa, ja kloorinoimalla käyttäen jodibentseenin kloorikompleksia, esim. jääetikkahapossa.
8 91763
Yllä esitetty toluoyylijohdannainen voidaan valmistaa käsittelemällä sopiva kaavan I mukainen yhdiste esimerkiksi p-toluoyylikloridilla, esim. pyridiinissä. Yllä esitetyn halogenoinnin jälkeen suojaava p-toluoyyliryhmä 5 voidaan poistaa esimerkiksi käyttäen natriummetoksidia metanolissa.
Kaavan I mukainen yhdiste voidaan konvertoida farmaseuttisesti hyväksyttäväksi esteriksi reaktiolla sopivan esteröivän aineen, esim. happaman halogenidin tai anhyd-10 ridin kanssa. Kaavan I mukainen yhdiste voidaan muuttaa farmaseuttisesti hyväksyttäviksi suoloiksi tavanomisin keinoin, esim. käsittelemällä sopivalla emäksellä. Kaavan I mukaisen yhdisteen suola voidaan muuttaa perusyhdisteeksi, esim. hydrolysoimalla.
15 Kaavan I mukaiset yhdisteet, joita tässä myös kut sutaan aktiivisiksi aineosiksi, voidaan hoitotarkoitukses-sa antaa mitä tahansa sopivaa antomuotoa noudattaen, kuten oraalisesti, rektaalisesti, nasaalisesti, paikallisesti (myös poskeen ja kielenalaisesti), vaginaalisesti tai pa-20 renteraalisesti (sekä subkutaanisesti, lihaksen sisään, laskimoon ja intradermaalisesti) . On ymmärrettävä, että suosittu antomuoto vaihtelee vastaanottajan tautitilan ja iän, infektion luonteen ja valitun aktiivisen aineosan mukaan.
» 25 Yleensä sopiva annos on suuruusluokkaa 0,1-120 mg/kg vastaanottajan ruumiinpainoa päivässä, edullisesti 0,5-40 mg/kg ruumiinpainoa päivässä ja edullisimmin 1- 15 mg/kg ruumiinpainoa päivässä. Haluttu annos esitetään edullisesti kahtena, kolmena, neljänä, viitenä, kuutena 30 tai useampana osa-annoksena annettuina sopivin väliajoin pitkin vuorokautta. Nämä osa-annokset voidaan antaa kerta-annoksina, sisältäen esimerkiksi 10 - 1500 mg, edullisesti 20 - 1000 mg ja edullisimmin 50 - 700 mg aktiivista aineosaa kerta-annosta kohden.
I; 91763 9
Ihanteellisesti aktiivinen aineosa annetaan siten, että aktiivisen yhdisteen plasman konsentraatiohuipuksi saadaan noin 1-75 μΜ, edullisesti noin 2 - 50 μΜ ja edullisimmin noin 3-30 μΜ. Tämä voidaan saavuttaa esi-5 merkiksi injisoimalla laskimoon 0,1-5 %:n liuos aktiivista yhdistettä, vaihtoehtoisesti suolaliuoksena, tai oraalisesti annettuna boluksena, jossa on noin 1 - 100 mg/kg aktiivista ainetta. Halutut pitoisuudet veressä voidaan saavuttaa jatkuvalla infuusiolla, joilla annetaan 10 0,01 - 5,0 mg/kg/tunti, tai jaksottaisella infuusiolla, jossa on noin 0,4 - 15 mg/kg aktiivista ainetta.
Vaikka onkin täysin mahdollista antaa aktiivista ainetta yksistään, on kuitenkin edullista antaa se farmaseuttisena formulaationa. Esillä olevan keksinnön mukainen 15 formulaatio sisältää ainakin yhden aktiivisen aine-osan, kuten yllä määritettiin, yhdistettynä yhteen tai useampaan hyväksyttävään kantajaan ja vaihtoehtoisesti muihinkin lääkinnällisesti aktiivisiin aineisiin. Jokaisen kantajan on oltava "hyväksyttävä" siten, että se on yhteensopiva 20 formulaation muiden ainesosien kanssa, eikä ole potilaalle haitallinen. Formulaatiot käsittävät kaikkia oraaliselle, rektaaliselle, nasaaliselle, paikalliselle (myös poskeen ja kielenalaiselle), vaginaaliselle tai parenteraaliselle (sekä subkutaaniselle, lihaksensisäiselle, laskimonsisäi-: 25 selle että intradermaaliselle) antomuodolle soveltuvat formulaatiot. Formulaatiot voidaan edullisesti esittää kerta-annosmuodossa ja ne voidaan valmistaa käyttäen kaikkia farmasian alalla tunnettuja menetelmiä. Nämä menetelmät käsittävät vaiheen, jossa aktiivinen aineosa saatetaan • 30 kosketukseen kantajaan, joka sisältää yhden tai useamman lisäaineen. Yleensä formulaatiot valmistetaan liittämällä aktiivinen aine nestemäiseen tai hienojakoiseen kiinteään kantajaan, tai molempiin, tasaisesti ja kiinteästi, jonka jälkeen tuote tarpeen vaatiessa muotoillan.
91763 10
Esillä olevan oraalista antomuotoa varten soveltuvat formulaatiot voidaan esittää erillisinä yksikköinä, kuten kapseleina, pulvereina tai tabletteina, jotka kaikki sisältävät ennakkoon määritetyn määrän aktiivista ainetta; 5 jauheena tai rakeina; liuoksena tai suspensiona vesipohjaisessa tai ei-vesipohjaisessa nesteessä; tai öljy/vesi-neste-emulsiona tai vesi/öljy-neste-emulsiona. Aktiivinen aineosa voidaan myös esittää boluksena, puurona tai tahnana .
10 Tabletti voidaan valmistaa puristamalla tai vala malla, vaihtoehtoisesti yhden tai useamman lisäaineen läsnäollessa. Puristetabletit voidaan valmistaa puristamalla sopivassa koneessa vapaasti juoksevassa muodossa, kuten jauheena tai rakeina, oleva aktiivinen aineosa vaihtoeh-15 toisesti sekoitettuna sidosaineen (esim. povidoni, gelatiini, hydroksipropyylimetyyliselluloosa), liukastavan aineen, inertin laimennusaineen, säilöntäaineen, hienontavan aineen (esim. natriumtärkkelysglykolaatti, ristisidottu povidoni, ristisidottu natriumkarboksimetyyliselluloosa), 20 pinta-aktiivisen tai dispersoivan aineen kanssa. Valetut tabletit voidaan valmistaa sopivassa koneessa valamalla seos, jossa jauhemainen yhdiste on kostutettu inertillä nestemäisellä laimennusaineella. Tabletit voidaan vaihtoehtoisesti päällystää tai uurtaa, ja ne voidaan formuloida ! 25 siten, että niissä käytetty aktiivinen aineosa vapautuu hitaasti tai kontrolloidusti, esimerkiksi käyttäen hydrok-sipropyylimetyyliselluloosaa vaihtelevin määrin jotta saadaan haluttu vapautumisprofiili. Tabletit voidaan vaihtoehtoisesti varustaa suolistopäällysteellä, jolloin vapau-30 tuminen aikaansaadaan muualla ruuansulatuskanavassa kuin vatsassa. Tämä on erityisen edullista, jos kaavan I mukaisessa yhdisteessä B on puriini, koska tämänkaltainen yhdiste on herkkä happamalle hydrolyysille.
Paikalliseen antomuotoon suussa soveltuvat formu-35 laatiot ovat tabletit, joissa aktiivinen aineosa sisältyy i 91763 11 maustettuun pohjaan, yleensä sakkaroosiin tai akasiaan tai traganttiin; pastillit, joissa aktiivinen aineosa sisältyy inerttiin pohjaan, kuten gelatiiniin tai glyseroliin, tai sakkaroosiin ja akasiaan; sekä suuvedet, joissa aktiivinen 5 aine sisältyy sopivaan nestemäiseen kantajaan.
Rektaaliseen antomuotoon soveltuvat formulaatiot voidaan esittää peräpuikkoina, joissa on soveltuva pohja, kuten esimerkiksi kaakaovoi tai salisylaatti.
Vaginaaliseen antomuotoon soveltuvat formulaatiot 10 voidaan esittää emätinrenkaina, tamponeina, voiteina, geeleinä, tahnoina, vaahtoina tai suihkeformulatioina, joissa aktiivisen aineen lisäksi on alalla sopivina tunnettuja kantajia.
Parenteraaliseen antomuotoon soveltuvat formulaa-15 tiot ovat vesipohjaiset ja ei-vesipohjaiset isotoniset steriilit injektioliuokset, joissa voi olla antioksidant-teja, puskureita, bakteriostaatteja ja liuotteita, jotka saattavat liuokset isotonisiksi vastaanottajan veren suhteen; sekä vesipohjaiset ja ei-vesipohjaiset steriilit 20 suspensiot, joissa voi olla suspendoivia aineita ja paksuntavia aineita. Formulaatiot voidaan esittää yksikköan-noksina tai mönikkoannoksina suljetuissa pakkauksissa, kuten esim. ampulleissa ja pulloissa, ja ne voidaan säilyttää kuivapakastettuna (lyofilisoituna), joka vaatii ·* 25 vain steriilin nestemäisen kantajan lisäämistä, esim. vettä injektioita varten, välittömästi ennen käyttöä. Käytön yhteydessä valmistettavat injektioliuokset ja suspensiot voidaan valmistaa yllä esitettyjen kaltaisista steriileistä jauheista, rakeista ja tableteista.
.. 30 Edulliset yksikköannokset ovat ne, joissa on aktii visen aineen päivittäinen annos tai yksikkö, päivittäinen osa-annos, kuten yllä esitettiin, tai sen sopiva osa.
Yllä mainitut kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat voidaan käyttää yk-35 sinään tai yhdistettyinä muihin lääkinnällisesti toimiviin 12 91763 aineisiin yllä mainittujen infektioiden tai tautitilojen hoitoon tai ennaltaehkäisyyn. Esimerkkejä tämänkaltaisista muista lääkinnällisesti toimivista aineista ovat ne aineet, jotka ovat tehokkaita HIV-infektioiden ja siihen 5 liittyvien tautitilojen hoidossa tai ennaltaehkäisyssä, kuten 3'-atsido-3'-deoksitymidiini (zidovudine), yhdisteet, jotka täydentävät, tehostavat tai mahdollistavat kaavan I mukaisten yhdisteiden aktiivisuuden, kuten 2'-3'-dideoksi-sytidiinin, -adenosiinin tai -inosiinin kaltaiset 10 2'-3'-dideoksinukleosidit, karbosykliset nukleosidijohdan naiset kuten carbovir, asykliset nukleosidit (esim. asyk-lovir), interferonit kuten α-interferoni, munuaiseritystä inhiboivat aineet kuten probenisiidi tai nukleosidien kuljetusta inhiboivat aineet kuten dipyridamoli, kuten myös 15 immuunimodulaattorit kuten interleukiini-2 ja granulosyyt-timakrofaagien pesäkkeitä stimuloiva tekijä.
On ymmärrettävä, että tässä erityisesti mainittujen aineosien lisäksi, formulaatiot voivat sisältää muita alalla tavanomaisesti käytettyjä aineita, kyseessä olevasta 20 formulaatiolajista riippuen, esimerkiksi oraaliseen anto-muotoon tarkoitetut formulaatiot voivat sisältää aineita kuten makeutusaineita, paksuntavia aineita ja makuaineita.
Seuraavat esimerkit ovat tarkoitettu vain kuvaamaan keksintöä eivätkä ne millään tavalla rajoita keksintöä.
: 25 Käsitettä "aktiivinen aineosa" käytettynä esimerkeissä tarkoittaa kaavan I mukaista yhdistettä tai sen farm-seu-ttisesti hyväksyttävää suolaa.
Esimerkki 1 Tablettiformulaatiot 30 Seuraavat formulaatiot A ja B valmistetaan granu loimalla aineosat kosteana povidoneliuoksessa, jonka jälkeen lisätään magnesiumstearaattia ja puristetaan.
li
Formulaatio A
13 91763 mq/tabletti mq/tabletti (a) Aktiivista aineosaa 250 250 (b) Laktoosia B.P. 210 26 5 (c) Povidonea B.P. 15 9 (d) Natriumtärkkelysglykolaattia 20 12 (e) Magnesiustearaattia 5 3 500 500
Formulaatio B
10 mq/tabletti ma/tabletti (a) Aktiivista aineosaa 250 250 (b) Laktoosia 150 (C) Avicel PH 101 60 26 (d) Povidone B.P. 15 9 15 (e) natriumtärkkelysglykolaattia 20 12 (f) magnesiumstearaattia 5 3 500 300
Formulaatio C
ma/tabletti 20 Aktiivista aineosaa 100 laktoosia 200 tärkkelystä 50
Povidone 5 magnesiumstearaattia 4 -25 359
Seuraavat formulaatiot, D ja E, valmistetaan suoraan puristamalla sekoitetut aineosat. Formulaatiossa E käytetty laktoosi on suoraan puristettavaa laatua (Dairy Crest - "Zeparox").
30 Formulaatio D
• 1 ma/kapseli
Aktiivista aineosaa 250
Esigelatinoitua tärkkelystä NF 15 150 400
Formulaatio E
14 91763 mq/kapseli
Aktiivista aineosaa 250
Laktoosia 150 5 Avicel 100 500
Formulaatio F (Kontrolloidusti vapautuva formulaa- tiol .
Formulaatio valmistetaan granuloimalla aineosat 10 (alla) kosteana povidone-liuoksella, jonka jälkeen lisätään magnesiumsteraattia ja puristetaan.
mq/tabletti (a) Aktiivista aineosaa 500 (b) hydroksipropyyli- 15 metyyliselluloosaa 112 (Methocel K4M Premium) (c) laktoosi B.P. 53 (d) Povidone B.P.C. 28 (e) magnesiumstearaattia 7 20 700 Lääkeaineen vapautuminen tapahtuu noin 6-8 tunnin aikana ja on päättynyt 12 tunnin jälkeen.
Esimerkki 2: Kapseliformulaatio Formulaatio A
! 25 Kapseliformulaatio valmistettiin sekoittamalla esi merkissä 1 formulaatiolle D esitetyt aineosat ja täyttämällä ne kaksiosaiseen kovaan gelatiinikapseliin. Formulaatio B (alla) valmistettiin vastaavalla tavalla.
Formulaatio B
30 ma/kapseli (a) aktiivista aineosaa 250 (b) laktoosia B.P. 143 (c) natriumtärkkelys- glykolaattia 25 35 (d) magnesiumstearaattia _2 420 li
Formulaatio C
15 91 763 mg/kapseli (a) aktiivista aineosaa 250 (b) Macrogol 4000 BP 350 5 600
Kapselit valmistettiin sulattamalla Macrogol 4000 BP, dispergoimalla aktiivinen aineosa siihen ja täyttämällä sulate kaksiosaiseen kovaan gelatiinikapseliin. Formulaatio D
10 mg/kapseli aktiivista aineosaa 250 lesitiiniä 100 arakisöljyä 100 450 15 Kapselit valmistettiin dispergoimalla aktiivinen aineosa lesitiiniin ja arakisölyyn ja täyttämällä dispersio pehmeään, elastiseen gelatiinikapseliin.
Formulaatio E /Kontrolloidusti vapautuva formulaatio) 20 Seuraava kontrolloidusti vapautuva kapseliformulaa- tio valmistettiin pursottamalla aineosat a, b ja c käyttäen pursotinta, jonka jälkeen pursote pisaroitiin ja kuivattiin. Kuivatut pallot päällystettiin tämän jälkeen vapautumista hallitsevalla membraanilla (d) ja täytettiin 25 kaksiosaiseen kovaan gelatiinikapseliin.
mq/kapseli (a) aktiivista aineosaa 250 (b) mikrokiteistä selluloosaa 125 (c) laktoosia BP 125 .. 30 (d) etyyliselluloosaa 13 513 16 91763
Esimerkki 3: Iniektioformulaatio Formulaatio A
Aktiivista aineosaa 0,200 g
Kloorivetyhappoliuosta, 0,1M q.s. pH 4,0-7,0 5 Natriumhydroksidiliuosta, 0,1M q.s. pH 4,0 - 7,0
Steriiliä vettä q.s. 10 ml
Aktiivinen aineosa liuotettiin suurimmassa osassa vettä (35-40 °C) ja pH säädettiin arvoon 4,0 - 7,0 käyttäen sopivaa määrää kloorivetyhappoa tai natriumhydroksi-10 dia. Erän tilavuus säädettiin tämän jälkeen vedellä ja suodatettiin steriilin mikrohuokoisen filtterin läpi steriiliin 10 ml:n keltaiseen lasipulloon (laji 1) ja suljettiin steriilillä sulkimella ja suojalla.
Formulaatio B
15 Aktiivista aineosaa 0,125 g
Steriiliä, pyrogeenivapaata fosfaattipuskuria, pH 7, q.s. 25 ml
Esimerkki 4: Lihaksen sisäisesti annettava injektio Aktiivista aineosaa 0,20 g 20 Bentsyylialkoholia 0,10 g
Glykofurolia 75 1,45 g
Injektiovettä q.s. 3,00 ml
Aktiivinen aineosa liuotettiin glykofuroliin. Tämän jälkeen lisättiin ja liuotettiin bentsyylialkoholi ja li-: 25 sättiin vettä, jotta tilavuudeksi saatiin 3 ml. Seos suo datettiin tämän jälkeen steriilin mikrohuokoisen filtterin läpi ja suljettiin steriiliin 3 ml:n keltaiseen lasipulloon (laji 1).
Esimerkki 5: Siirappi . 30 Aktiivista aineosaa 0,25 g
Sorbitoliliuosta 1,50 g
Gyserolia 2,00 g
Natriumbentsoaattia 0,005 g
Makuainetta, 35 persikka 17.42.3169 0,0125 ml
Puhdistettua vettä q.s. 5,00 ml I: 91763 17
Aktiivinen aineosa liuotettiin glyserolin ja puhdistetun veden seokseen (suurin osa vedestä). Lisättiin natriumbentsoaatti vesiliuoksena, jonka jälkeen lisättiin sorbitoliliuos ja lopuksi makuaine. Tilavuus säädettiin 5 puhdistetulla vedellä ja sekoitettiin hyvin.
Esimerkki 6: Peräpuikko ma/peräpuikko
Aktiivista aineosaa (63 μιη) * 250
Kovaa rasvaa, BP
10 (Witepsol H15 - Dynamit NoBel) 1770 2020 * Aktiivinen aineosa käytettiin jauheena, jossa vähintään 90% partikkeleista olivat halkaisijaltaan 63 μιη tai pienempiä.
15 Viidesosa Witepsol H15:sta sulatettiin hyöryvai- palla varustetussa kattilassa maks. 45 °C:ssa. Aktiivinen aineosa seulottiin 200 μιη seulan läpi ja lisättiin sulan-neeseen pohjaan sekoittaen, käyttäen silversonia johon oli sovitettu leikkaava pää, kunnes saatiin tasainen dis- 20 persio. Seos pidettiin 45 °C:ssa, lisättiin loput Witepsol Hl5:sta suspensioon ja sekoitettiin jotta saatiin tasainen seos. Koko suspensio kaadettiin 250 ml:n ruostumattoman teräskehikon läpi ja annettiin jäähtyä 40 °C-:seen, sekoittaen jatkuvasti. Lämpötilan ollessa 38 - *•25 40 °C, 2,02 g seoksesta täytettiin sopiviin 2ml:n muovi- muotteihin. Peräpuikkojen annettiin jäähtyä huoneenlämpöisiksi .
Esimerkki 7: Emätinrenkaat ma/emätinrenaas , 30 Aktiivista aineosaa (63 μπι) 250
Dekstroosianhydridia 380
Perunatärkkelystä . 363
Magnesiumstearaattia _7 1000 18 91763
Yllä mainitut aineosat sekoitettiin suoraan ja emätinrenkaat valmistettiin suoraan puristamalla saatu seos.
Esimerkki 8 5 5-iodi-l-(2.3-dideoksi-3-fluori-fi-D-ervtropentofu- ranosvvlilurasiili 1-(2,3-dideoksi-3-fluori-B-D-erytro-pentofu-ranosyyli)urasiilia (440 mg, 1,91 mmol) kuivassa pyridii-inissa (10 ml) sisältävään liuokseen lisättiin p-toluoyy-10 likloridia (juuri tislattua, 325 mg, 2,1 mmol). Liuos sekoitettiin 50 °C:ssa 1,5 tuntia ja tämän jälkeen 25 °C:ssa 18 tuntia. Pyridiini haihdutettiin ja jäännös liuotettiin CHCl3:ssa (25 ml). Tämä liuos uutettiin ensin IM H2S04:ssä (5 ml) ja sitten H20:ssa (2 x 10 ml) ja kuivat-15 tiin (MgS04) . CHC13 haihdutettiin ja saatiin väritön lasi (0,72 g), joka kromatografoitiin piidioksidigeelissä.
Eluoitiin 2% MeOH-CHCl3:11a ja saatiin S'-O-toluoyylijohdannainen valkoisena kiinteänä vaahtona (0,66 g, 90%); kromatografisesti homogeeninen ohutlevykromatografiale-20 vyillä (piidioksidigeeli joka kehitettiin 5%:11a MeOH- CHC13) ; rakenne varmistettiin 'H-NMR:n avulla.
1-(2,3-dideoksi-3-fluorί-β-D-erytro-pentofu-ranosyyli)urasiilin 5'-O-toluoyylijohdannainen (200 mg, . 0,574 mmol), jodimonokloridi (139 mg, 0,861 mekv) ja : 25 CH2C12 (10 ml) keitettiin palautusjäähdyttäen 2 tuntia.
Liuos saatettiin värittömäksi minimimäärällä 2% vesipohjaista NaHS03 (n. 2 ml) . Vesikerros erotettiin ja CH2C12-kerros pestiin vedellä (2x5 ml) ja kuivattiin (MgS04) . CH2C12 haihdutettiin jolloin saatiin kermanvärinen kiinteä 30 vaahto (0,25 g), joka liuotettiin MeOHriin (10 ml) ja sekoitettiin natriummetoksidin (0,57 mmol) kanssa typen alla 25 °C:ssa 18 tuntia. Liuos neutraloitiin Dowex 50W-X8 (H+muoto)-hartsilla. Hartsi poistettiin suodattamalla, pestiin MeOHtlla ja suodoksen metanolipesun sisältö kro-35 matografoitiin piidioksidigeelissä. Eluoitiin 10%:11a 11 91763 19
MeOH-CH2Cl2 ja saatiin tuote valkoisena kiinteänä aineena (0,135 g). Kiteytettiin EtOHrssa ja saatiin haluttu yhdiste valkoisina kiteinä (115 mg, 55% kokonaisaanto); s.p. 197,5-198 °C; 5 Analyysi: laskettu C9H10FIN2O4: C, 30,36; H, 2,83; N, 7,87; F, 5,34; I, 35,64;.
todettu: C, 30,50; H, 2,85; N, 7,85; F, 5,31; I, 35,51; UV max (H20): 286 nM; rakenne varmistettu 'H-NMR:n ja mas-10 saspektrin avulla.
Esimerkki 9 5-kloori-l-(2.3-dideoksi-3-fluori-B-D-ervtropento-furanoswli )urasiili
Jodibentseenin kloorikompleksi valmistettiin vä-15 littömästi ennen käyttöä kuten kirjallisuudessa on esi tetty (katso M.J. Robins ym., Can. J. Chem. 1982. 60.
554) ja lisättiin 246 mg:aa (0,895 mmol) esimerkin 8 mukaisesti valmistettua l-(2,3-dideoksi-3-fluori-B-D-eryt-ropentofuranosyyli)urasiilin 5'-O-toluoyylijohdannaista 20 (260 mg, 0,746 mmol) sisältävään jääetikkaan (4 ml). Liu os pidettiin 80 °C:ssa typen alla 20 min ja haihdutettiin valkoiseksi kiinteäksi vaahdoksi. Käsiteltiin natriumme-toksidilla metanolissa kuten esimerkissä 1. Kromatogra-foitiin 2 mm paksuilla piidioksidilevyillä (20 x 20 cm) 25 ja kehitettiin CHCl3:MeOH:NH4OH/180:20:1 jotta 5-kloo- riurasiili (hieman suurempi Rf) erottuisi halutusta yhdisteestä, joka eristettiin likaisenvalkoisena kiinteänä aineena (46 mg). Trituroitiin metanolissa ja saatiin haluttu yhdiste valkoisina neuloina (34 mg); s.p. 183-184 . 30 °C;
Analyysi: laskettu C9H10ClFN2O4: C, 40,85; H, 3,81; Cl, 13,40; N, 10,59.
Saatu: C, 40,71; H, 3,85; Cl, 13,31; N, 10,55; 35 UV \ max (H20) 275 nM; rakenne vahvistettiin 'H-NMR: llä ja massaspektrin avulla.
20 91763
Esimerkki 10 6-svklopropyvliamino-9-(β-Ρ-2'. 3 '-dideoksi-3 ' -fluoriribofuranosvvlil-9H-puriini 6-syklopropyyliaminopuriini (2,2 mmoolia, 0,42 g) 5 ja 2',3'-dideoksi-3'-fluoritymidiini (1,1 mmoolia, 0,29 g) liuotettiin 10 ml N'N'-dimetyyliformamidia ja laimennettiin vielä 35 ml:11a 10 mM kaliumfosfaattipuskuria, jonka pH-arvo oli 6,8 ja joka sisälsi 0,04 % kaliumatsi-dia. Lisättiin puhdistettua tymidiinifosforylaasia (5000 10 IU) ja puriininukleosidifosforylaasia (10 000 IU) (Kre- nitsky, ym. , Biochemistry. 20. 3615, 1981 ja US-patentti 4381 444) adsorboituna 5 ml:aan DEAE hartsia ja suspensio sekoitettiin 35 °C:ssa. Kahdentenatoista päivänä lisättiin taas 5000 IU puhdistettua tymidiinifosforylaasia ja 15 10 000 IU puriininukleosidifosforylaasia absorboituna 5 ml:aan DEAE-hartsia reaktioseokseen. Kolmantenatoista päivänä reaktio suodatettiin ja suodos kaadettiin sarjaan kytkettyihin pylväisiin. Ensimmäinen 2,5 x 10 cm:n pylväs sisälsi Dowex-1-hydroksidia ja toinen 2,5 x 20 cm:n pyl-20 väs sisälsi Amberlite XAD-2-hartsia. Näyte applikoitiin ja pylväät pestiin suurella tilavuudella vettä ja tuote eluoitiin metanolilla. Lisättiin noin 5 ml kuivaa piidio-ksidigeeliä tuotetta sisältäviin fraktioihin ja liuotin haihdutettiin vakuumissa. Tämä piidioksidigeeli applikoi-! ' 25 tiin 2,5 x 50 cm:n piidioksidipylvääseen ja tuote eluoi tiin 9: l/CHCl3:MeOH-seoksella. Tuotetta sisältävät fraktiot yhdistettiin ja liuotin poistettiin vakuumissa. Kiinteä aine liuotettiin 10 ml:aan 95% EtOH. Liuotin poistettiin vakuumissa ja tuote liuotettiin taas 10 ml:aan 95% . 30 EtOH ja suodatettiin jäijelläolevien piidioksidigeeli- % jäännösten poistamiseksi. Liuotin poistettiin vakuumissa, tuote liuotettiin veteen ja lyofilisaation jälkeen saatiin 0,084 g 6-syklopropyyliaminopuriini-9-(B-D-2',3'-dideoksi-3'-fluoriribofuranosyyli)-9H-puriinia.
I: 91763 21
Analyysi;
Laskettu C13H16FN502: C, 53,24; H, 5,50; N, 23,88; F, 6,48 Todettu: C, 53,42; H, 5,56; N, 23,73; F, 6,26 Esimerkki 11 5 2-amino-6-metoksi-9-(fi-D-2'.3'-dideoksi-3'-fluori- ribofuranosvvli)-9H-Puriini 2-amino-6-metoksipuriini valmistettiin nukleofii-lisella vaihtoreaktiolla, jolla 2-amino-6-klooripuriinin klooriryhmä vaihdettiin natriummetoksidiin.
10 2-amino-6-metoksipuriini (3,1 mmoolia, 0,51 g) ja 2',3'-dideoksi-3'-fluoritymidiini (1,3 mmoolia, 0,35 g) liuotettiin 5 ml:aan N'N'-dimetyyliformamidia ja 5 ml: aan dimetyylisulfoksidia. Reaktio laimennettiin 30 ml:11a 10 mM kaliumfosfaattipuskuria, pH 6,8, jossa oli 0,04 % 15 kaliumatsidia. Lisättiin puhdistettua tymidiinifosfory-laasia (3300 IU) ja puriininukleosidifosforylaasia (6900 IU) (Krenitsky, ym., Biochemistry. 20, 3615, 1981 ja US- patentti 4 381 444) adsorboituna 5 ml:aan DEAE hartsia ja suspensio ravisteltiin 35 °C:ssa. Kuuden päivän jälkeen 20 lisätiin reaktioseokseen 3300 IU puhdistettua tymidiini-fosforylaasia ja 6900 IU puriininukleosidifosforylaasia adsorboituna 5 ml:aan DEAE-hartsia. Taas seitsemän päivän jälkeen lisättiin reaktioseokseen 3300 IU puhdistettua tymidiinifosforylaasia ja 6900 IU puriininukleosidifosfo-25 rylaasia adsorboituna 5 ml:aan DEAE-hartsia. Kahdenkymme-nenkolmen päivän jälkeen, eli 36:n päivän kokonaisreakti-on jälkeen, reaktioseos suodatettiin ja suodos kaadettiin sarjaan kytkettyihin pylväisiin. Ensimmäinen 2,5 x 10 cm:n pylväs sisälsi Dowex-1-hydroksidia ja toinen 2,5 x 30 20 cm: n pylväs sisälsi Amberlite XAD-2 hartsia. Näyte applikoitiin ja pylväät pestiin suurella tilavuudella vettä ja tuote eluoitiin metanolilla. Lisättiin noin 5 ml kuivaa piidioksidigeeliä tuotetta sisältäviin fraktioihin ja liuotin haihdutettiin vakuumissa. Tämä piidioksidigee-35 li applikoitiin 2,5 x 50 cm:n piidioksidigeelipylvääseen 22 91763 ja tuote eluoitiin 9:1/CHC13: MeOH-seoksella. Tuotetta sisältävät fraktiot yhdistettiin ja liuotin poistettiin vakuumissa. Kiinteä aine liuotettiin 10 ml:aan 95% EtOH. Liuotin poistettiin vakuumissa ja tuote liuotettiin taas 5 10 ml:aan 95% EtOH ja suodatettiin jäijelläolevien pii- dioksidigeelijäännöksten poistamiseksi. Liuotin poistettiin vakuumissa, tuote liuotettiin veteen ja lyofilisaa-tion jälkeen saatiin 0,204 g 2-amino-6-metoksipuriini-9-(B-D-2',3'-dideoksi-3'-fluoriribofuranosyyli)-9H-purii-10 nia.
Analyysi:
Laskettu C13H16FN502: C, 46,64; H, 4,98; N, 24,72; F, 6,71 Todettu: C, 46,10; H, 5,09; N, 23,96; F, 6,74 ‘H-NMR ja massaspektritiedot tukevat rakennetta.
15 Esimerkki 12 6-svklopentoksi-9-f fi-D-2'.3'-dideoksi-3'-fluoriri-bofuranosvylil-9H-puriini 6-syklopentoksipuriini valmistettiin nukleofiili-sen vaihtoreaktion avulla, jossa 6-klooripuriinin (Sigma 20 Chemical Company, St. Louis, MO) klooriryhmä vaihdettiin natriumhydridin ja syklopentanolin muodostamaan alkoksi-anioniin.
6-syklopentoksipuriini (4,9 mmoolia, 1 g) ja 2',3'-dideoksi-3'-fluoritymidiini (2,1 mmoolia, 0,50 g) : 25 suspendoitiin 5 ml:aan Ν'Ν'-dimetyyliformamidia ja 5 ml- :aan metyylisulfoksidia, ja laimennettiin 35 ml:11a 10 mM kaliumfosfaattipuskuria, pH 6,8, jossa oli 0,04 % ka- liumatsidia. Lisättiin puhdistettua tymidiinifosforylaa-sia (5000 IU) ja puriininukleosidifosforylaasia (10 000 . 30 IU) (Krenitsky, ym., Biochemistry. 20, 3615, 1981 ja US- i patentti 4 381 444) adsorboituna 5 ml:aan DEAE-hartsia ja suspensio ravisteltiin 34 °C:ssa. Kolmenkymmenenviiden päivän kuluttua lisätiin reaktioseokseen 3000 IU puhdistettua tymidiinifosforylaasia ja 6000 IU puriininukle-35 osidifosforylaasia adsorboituna 3 ml:aan DEAE-hartsia.
!< 91763 23
Kahdenkymmenenyhden päivän kuluttua reaktio suodatettiin ja suodos kaadettiin sarjaan kytkettyihin pylväisiin. Ensimmäinen 2,5 x 10 cm:n pylväs sisälsi AG1-X2:ta (OH-muoto) ja toinen 2,5 x 20 cm:n pylväs sisälsi Amberlite 5 XAD-2-hartsia. Näyte applikoitiin ja pylväät pestiin suurella tilavuudella vettä ja tuote eluoitiin metanolilla. Tämän jälkeen tuote "flash"-kromatografoitiin piidioksi-dipylväässä (2,5 x 48 cm) dikloorimetaani:metanolilla (9:1). Liuotin poistettiin vakuumissa ja tuote liuotet-10 tiin veteen ja lyofilisäätion jälkeen saatiin 0,162 g 6-syklopentoksi-9-(B-D-2',3'-dideoksi-3'-fluoriribofuranos-yyli)-9H-puriinia.
Analyysi:
Laskettu C,5H19FN403: C, 55,89; H, 5,94; N, 17,38; 15 Todettu: C, 56,01; H, 5,94; N, 17,20;
Massaspektri- ja NMR-tiedot tukivat rakennetta.
Esimerkki 13 6-isopropoksi-9-(B-D-2'.3'-dideoksi-3/-fluoriribo-furanosvvli^-9H-puriini 20 6-isopropoksipuriini (5,0 mmoolia, 0,90 g) (Sigma
Chemical Company, St. Louis, MO) ja 2',3'-dideoksi-3'-fluoritymidiini (2,0 mmoolia, 0,50 g) suspendoitiin 5 ml:aan N'N'-dimetyyliformamidia ja 5 ml:aan metyylisul-foksidia ja laimennettiin 35 ml:11a 10 mM kaliumfosfaat-*.25 tipuskuria, pH 6,8, jossa oli 0,04 % kaliumatsidia. Suspensioon lisättiin puhdistettua tymidiinifosforylaasia (5000 IU) ja puriininukleosidifosforylaasia (10 000 IU) (Krenitsky, ym., Biochemistry. 20, 3615, 1981 ja US-pa- tentti 4381 444) adsorboituna 5 ml:aan DEAE-hartsia ja 30 suspensio ravisteltiin 34 °C:ssa. Kolmenkymmenenviiden päivän kuluttua reaktioseokseen lisättiin taas 3000 IU puhdistettua tymidiinifosforylaasia ja 6000 IU puriininukleosidifosforylaasia adsorboituna 3 ml:aan DEAE-hartsia. Kahdenkymmenenkahdeksan päivän kuluttua reaktio suo-35 datettiin ja suodos kaadettiin sarjaan kytkettyihin pyi- 91763 24 väisiin. Ensimmäinen 2,5 x 10 cm:n pylväs sisälsi AG1-X2:ta (OH-muoto) ja toinen 2,5 x 20 cm:n pylväs sisälsi Amberlite XAD-2-hartsia. Näyte applikoitiin ja pylväät pestiin suurella tilavuudella vettä ja tuote eluoitiin 5 metanolilla. Tämän jälkeen tuote "flash"-kromatografol tiin piidioksidigeelipylväässä (2,5 x 48 cm) dikloorime-taani:metanolilla (9:1). Tuote liuotettiin 25 %:seen ase-tonitrilia ja kaadettiin C)g HPLC-pylvääseen (Microsorb 22mm [ID] x 500 mm) ja eluoitiin 25 %:lla asetonitriilil-10 la nopeudella 18 ml/min. Liuotin poistettiin vakuumissa, tuote liuotettiin veteen ja lyofilisaation jälkeen saatiin 0,240 g 6-isopropoksi-9-(B-D-2',3'-dideoksi-3'-fluo-riribofuranosyyli)-9H-puriinia, joka analyysissa todettiin 0,15-hydraatiksi.
15 Analyysi: C13HnFN4030,15H20
Laskettu: C, 52,70; H, 5,78; N, 18,91; F, 6,41 Todettu: C, 52,46; H, 5,78; N, 18,48; F, 6,49 Massaspektri- ja NMR-tiedot tukivat rakennetta.
Esimerkki 14 20 6-piperidinvvli-9-(β-Ρ-2'.3'-dideoksi-3'-fluoriri- bofuranosyvlil-9H-puriini 6-piperidinyylipuriini (5,1 mmoolia, 1,0 g) (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO) ja 2',3'-dideoksi-3' -. fluoritymidiini (2,0 mmoolia, 0,50 g) suspendoitiin 5 * 25 ml:aan N'N'-dimetyyliformamidia ja 5 ml:aan metyylisulf- oksidia ja laimennettiin 35 ml:11a 10 mM kaliumfosfaatti-puskuria, pH 6,8, jossa oli 0,04 % kaliumatsidia. Lisättiin puhdistettua tymidiinifosforylaasia (5000 IU) ja puriininukleosidifosforylaasia (10 000 IU) (Krenitsky, . 30 ym. , Biochemistry. 20, 3615, 1981 ja US-patentti 4 381 444) adsorboituna 5 ml:aan DEAE-hartsia ja suspensio ravisteltiin 34 °C:ssa. Kolmenkymmenenviiden päivän kuluttua reaktioseokseen lisättiin taas 3000 IU puhdistettua tymidiinifosforylaasia ja 6000 IU puriininukleosidifosfo-35 rylaasia adsorboituna 3 ml:aan DEAE-hartsia. Viidenkym- 91763 25 menenkahdeksan päivän kuluttua reaktio suodatettiin ja suodos kaadettiin sarjaan kytkettyihin pylväisiin. Ensimmäinen 2,5 x 10 cm:n pylväs sisälsi AG1-X2:ta (OH-muoto) ja toinen 2,5 x 20 cm:n pylväs sisälsi Amberlite XAD-2 5 hartsia. Näyte applikoitiin ja pylväät pestiin suurella tilavuudella vettä ja tuote eluoitiin metanolilla. Tämän jälkeen tuote "flash^-kromatografoitiin piidioksidigeeli-pylväässä (5 x 20 cm) dikloorimetaani:metanolilla (9:1). Liuotin poistettiin vakuumissa, tuote liuotettiin veteen 10 ja lyofilisaation jälkeen saatiin 0,197 g 6-piperidinyy-li-9-(fi-D-2' , 3 '-dideoksi-3'-fluoriribofuranosyyli)-9H-puriinia, joka sisälsi 0,35 etanolia.
Analyysi: C15H20FN5O20,15EtOH
Laskettu: C, 55,88; H, 6,60; N, 20,75; F, 5,63 15 Todettu: C, 55,72; H, 6,48; N, 20,80; F, 5,78
Massaspektri- ja NMR-tiedot tukivat rakennetta.
Virusvastainen aktiivisuus
Esimerkkien 8, 9 ja 11 mukaisten yhdisteiden HIV-vastainen aktiivisuus määritettiin MT4-soluissa ja yhdis-20 teille saatiin IC^-arvot 1,5, 12,4 ja 9,0 μΜ, tässä järjestyksessä.
Claims (5)
1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen 2', 3'-dideoksi-3'-fluoripyrimidiini- tai -puriininukle-5 osidin val-mistamiseksi, jolla on kaava (I) "lp) 10 f jossa kaavassa B on ryhmä, jolla on kaava V X\ p ““‘,,ΛΛ,/ joissa R1 on kloori- tai jodiatomi, R2 on vetyatomi tai aminoryhmä ja R3 on C^-sykloalkyyliamino, suoraketjuinen 20 tai haarautunut C^-alkoksi, C3.7-sykloalkoksi tai 5- tai 6-jäseninen heterosyklinen rengas liitettynä puriiniryhmään mainitun renkaan typpiatomin välityksellä, tunnet-t u siitä, että (A) yhdiste, jolla on kaava (II) p' F .. 3 0 • jossa B on kuten yllä määriteltiin ja R, on hydrok- siryhmän esiasteryhmä, saatetaan reagoimaan sellaisen aineen kanssa tai sellaisissa olosuhteissa että mainittu esiasteryhmä muuttuu vastaavaksi halutuksi ryhmäksi; tai 35 (B) puriini- tai pyrimidiiniemäs, jolla on kaava 91763 27 B - H (HI) jossa B on kuten yllä määriteltiin tai sen toiminnallinen vastine, saatetaan reagoi-5 maan yhdisteen kanssa, joka liittää halutun ribofurano-syylirenkaan kaavan (III) mukaisen puriiniemäksen 9-ase-maan tai pyrimidiiniemäksen 1-asemaan.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R3 on syklopropyyliamino-, 10 metoksi-, syklopentoksi- tai piperidinyyliryhmä.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 5-kloori-l-(2,3-dideoksi-3-fluori-B-D-erytropentofuranosyyli) ura-siili .
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 5-jodi-1-(2,3-dideoksi-3-fluori-B-D-erytropentofuranosyyli)urasiili.
5. Jonkin edellä olevista patenttivaatimuksista mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan 20 (III) mukainen emäs menetelmässä (B) saatetaan reagoimaan 2',3'-deoksi-3'-fluoritymidiinin kanssa pentosyyliä siirtävän entsyymin läsnäollessa. 28 91763
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB878726136A GB8726136D0 (en) | 1987-11-07 | 1987-11-07 | Therapeutic nucleosides |
| GB8726136 | 1987-11-07 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI885094A0 FI885094A0 (fi) | 1988-11-04 |
| FI885094A FI885094A (fi) | 1989-05-08 |
| FI91763B true FI91763B (fi) | 1994-04-29 |
| FI91763C FI91763C (fi) | 1994-08-10 |
Family
ID=10626612
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI885094A FI91763C (fi) | 1987-11-07 | 1988-11-04 | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen 2',3'-dideoksi-3'-fluoripyrimidiini- tai -puriininukleosidin valmistamiseksi |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5574149A (fi) |
| EP (3) | EP0670328A1 (fi) |
| JP (1) | JP2731551B2 (fi) |
| KR (1) | KR890008160A (fi) |
| AT (1) | ATE131826T1 (fi) |
| AU (1) | AU616914B2 (fi) |
| CA (1) | CA1333391C (fi) |
| DE (1) | DE3854811T2 (fi) |
| DK (1) | DK615788A (fi) |
| ES (1) | ES2081286T3 (fi) |
| FI (1) | FI91763C (fi) |
| GB (1) | GB8726136D0 (fi) |
| GR (1) | GR3019379T3 (fi) |
| HU (2) | HU204839B (fi) |
| MX (1) | MX9203217A (fi) |
| PT (1) | PT88948B (fi) |
| ZA (1) | ZA888289B (fi) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5506215A (en) * | 1987-11-03 | 1996-04-09 | Medivir Ab | 1-(3'-fluoro-2',3'-dideoxy-β-D-ribofuranosyl)-5-substituted pyrimidine nucleosides |
| US5157114A (en) * | 1988-08-19 | 1992-10-20 | Burroughs Wellcome Co. | 2',3'-dideoxy-3'-fluoro-5-ethyngluridine |
| WO1990003978A1 (en) * | 1988-10-03 | 1990-04-19 | Stichting Rega Vzw | 5-halogeno-3'-fluoro-2',3'-dideoxyuridine compounds and their therapeutic application |
| WO1991006554A1 (en) * | 1989-11-06 | 1991-05-16 | Nycomed As | Nucleoside derivatives |
| FR2668153B1 (fr) * | 1990-10-22 | 1995-03-31 | Pasteur Merieux Serums Vacc | Nouveaux composes ribonucleosides, leur procede de preparation et les medicaments les contenant. |
| GB9200150D0 (en) * | 1992-01-06 | 1992-02-26 | Wellcome Found | Therapeutic nucleosides |
| WO1993014103A1 (en) * | 1992-01-06 | 1993-07-22 | The Wellcome Foundation Limited | Therapeutic nucleosides |
| HU9501978D0 (en) * | 1993-03-31 | 1995-09-28 | Sterling Winthorp Inc | Bifunctional nucleosides, oligomers thereof, and methods of making and using the same |
| EP0698032B1 (en) * | 1993-05-12 | 1998-07-29 | Rhodia Limited | Preparation of fluoro-nucleosides and intermediates for use therein |
| DK0917879T3 (da) * | 1997-11-22 | 2002-11-04 | Roche Diagnostics Gmbh | Forbedret fremgangsmåde til stabilisering af proteiner |
| US6156349A (en) * | 1998-12-14 | 2000-12-05 | Steinbach, Pylant And Herman, L.L.C. | Method of treating HIV infection with suppository containing mammalian liver extract |
| US6514979B1 (en) | 1999-03-03 | 2003-02-04 | University Of Maryland Biotechnology Institute | Synergistic combinations of guanosine analog reverse transcriptase inhibitors and inosine monophosphate dehydrogenese inhibitors and uses therefor |
| AU2002322325A1 (en) * | 2001-06-22 | 2003-01-08 | Emory University | Beta-2'-or 3'-halonucleosides |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3328388A (en) * | 1964-09-02 | 1967-06-27 | Merck & Co Inc | Arabinofuranosyl pyrimidines and methods of preparing same |
| US3775397A (en) * | 1969-11-12 | 1973-11-27 | Akad Wissenschaften Ddr | Novel cytostatic 2',3'-dideoxy-3'-fluoropyrimidine-nucleosides |
| SE8602981D0 (sv) * | 1986-07-04 | 1986-07-04 | Astra Laekemedel Ab | Novel medicinal use |
| US5153180A (en) * | 1986-07-24 | 1992-10-06 | Eckart Matthes | Fluorinated nucleosides and process for treating retrovirus infections therewith |
| DD279407A1 (de) * | 1986-07-24 | 1990-06-06 | Akad Wissenschaften Ddr | Verfahren zur herstellung eines mittels gegen aids |
| GB8719877D0 (en) * | 1987-08-22 | 1987-09-30 | Wellcome Found | Antiviral compounds |
| SE8704298D0 (sv) * | 1987-11-03 | 1987-11-03 | Astra Ab | Compounds for use in therapy |
-
1987
- 1987-11-07 GB GB878726136A patent/GB8726136D0/en active Pending
-
1988
- 1988-11-03 DE DE3854811T patent/DE3854811T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-11-03 EP EP95108714A patent/EP0670328A1/en not_active Withdrawn
- 1988-11-03 ES ES88310344T patent/ES2081286T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-03 EP EP95108713A patent/EP0669341A1/en not_active Withdrawn
- 1988-11-03 EP EP88310344A patent/EP0317128B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-03 AT AT88310344T patent/ATE131826T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-11-04 ZA ZA888289A patent/ZA888289B/xx unknown
- 1988-11-04 DK DK615788A patent/DK615788A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-11-04 HU HU902123A patent/HU204839B/hu not_active IP Right Cessation
- 1988-11-04 AU AU24763/88A patent/AU616914B2/en not_active Ceased
- 1988-11-04 HU HU885714A patent/HU200931B/hu not_active IP Right Cessation
- 1988-11-04 KR KR1019880014472A patent/KR890008160A/ko not_active Application Discontinuation
- 1988-11-04 PT PT88948A patent/PT88948B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-11-04 CA CA000582322A patent/CA1333391C/en not_active Expired - Fee Related
- 1988-11-04 JP JP63279196A patent/JP2731551B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-11-04 FI FI885094A patent/FI91763C/fi not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-06-24 MX MX9203217A patent/MX9203217A/es unknown
-
1993
- 1993-05-17 US US08/062,591 patent/US5574149A/en not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-03-20 GR GR960400779T patent/GR3019379T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PT88948B (pt) | 1993-02-26 |
| ES2081286T3 (es) | 1996-03-01 |
| ATE131826T1 (de) | 1996-01-15 |
| ZA888289B (en) | 1990-07-25 |
| FI885094A0 (fi) | 1988-11-04 |
| EP0317128A2 (en) | 1989-05-24 |
| EP0669341A1 (en) | 1995-08-30 |
| HU902123D0 (en) | 1990-07-28 |
| DE3854811T2 (de) | 1996-08-01 |
| CA1333391C (en) | 1994-12-06 |
| US5574149A (en) | 1996-11-12 |
| GB8726136D0 (en) | 1987-12-09 |
| DK615788D0 (da) | 1988-11-04 |
| DE3854811D1 (de) | 1996-02-01 |
| MX9203217A (es) | 1992-07-01 |
| AU616914B2 (en) | 1991-11-14 |
| GR3019379T3 (en) | 1996-06-30 |
| EP0670328A1 (en) | 1995-09-06 |
| HU200931B (en) | 1990-09-28 |
| HUT48466A (en) | 1989-06-28 |
| JPH01153697A (ja) | 1989-06-15 |
| FI91763C (fi) | 1994-08-10 |
| EP0317128A3 (en) | 1991-10-02 |
| KR890008160A (ko) | 1989-07-10 |
| JP2731551B2 (ja) | 1998-03-25 |
| DK615788A (da) | 1989-05-08 |
| PT88948A (pt) | 1988-12-01 |
| FI885094A (fi) | 1989-05-08 |
| EP0317128B1 (en) | 1995-12-20 |
| AU2476388A (en) | 1989-05-25 |
| HU204839B (en) | 1992-02-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI87783B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 2',3'-dideoxinukleosider | |
| AU668860B2 (en) | Antiviral nucleoside combination | |
| EP0286425B1 (en) | Therapeutic nucleosides | |
| FI91763B (fi) | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen 2',3'-dideoksi-3'-fluoripyrimidiini- tai -puriininukleosidin valmistamiseksi | |
| US5071983A (en) | Therapeutic nucleosides | |
| EP0285432B1 (en) | Therapeutic nucleosides | |
| IE63655B1 (en) | Antiviral compounds | |
| US5157114A (en) | 2',3'-dideoxy-3'-fluoro-5-ethyngluridine | |
| EP0625158B1 (en) | Therapeutic nucleosides of the 2',3'-dideoxy-3'-fluoro-purine series | |
| US4920210A (en) | 2,6-diaminopurine-9-β-D-2',3'-dideoxyribofuranoside | |
| US5198539A (en) | 5'-esters of 2',3'-dideoxy-3'-fluoro-5-ethynyluridine | |
| WO1988009332A1 (en) | Therapeutic nucleosides | |
| CA1336821C (en) | Therapeutic nucleosides | |
| US5175274A (en) | Therapeutic nucleosides | |
| EP0294113A1 (en) | Therapeutic nucleosides |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: THE WELLCOME FOUNDATION LIMITED |