PT668279E

PT668279E - Inibidores de sintase de tromboxano 6-azaindole

Info

Publication number: PT668279E
Application number: PT95300551T
Authority: PT
Inventors: Sandra Kay Sigmund; Alan David Palkowitz; Joseph Anthony Jakubowski
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1994-01-31
Filing date: 1995-01-30
Publication date: 2001-09-28
Also published as: GR3036570T3; DE69521223T2; ES2157292T3; US5468757A; ATE202103T1; CA2141231A1; EP0668279B1; SI0668279T1; EP0668279A3; DE69521223D1; JPH0853448A; EP0668279A2; DK0668279T3

Description

DESCRIÇÃO "INIBIDORES DE SINTASE DE TROMBOXANO 6-AZAINDOLE"

Esta invenção relaciona-se com compostos do tipo 6-azaindole úteis como inibidores de sintase de tromboxano. A EP-A-530579 revela compostos do tipo 6,8-diazaindole com actividade anti-tumor. O composto bicíclico, 6-azaindole (Registo de CA n° 271-29-4), também conhecido como 1,6-diazaindeno, e harmirina formam o núcleo dos compostos desta invenção.

Agentes terapêuticos para reduzirem especialmente a produção de tromboxano A2 (TXA2) são úteis para o tratamento de condições tais como doença renal, (e.g., hidronefrose, rejeição ao transplante, e nefrite) doença pulmonar, (e.g., asma, e hipertensão pulmonar), prevenção e tratamento de lesão hepática e intestinal, doença cardiovascular (e.g., arteriosclerose, trombose, hipertensão, e choque) ou resultando de procedimentos cirúrgicos tais como angioplastia e cirurgia de "bypass" coronário. A aspirina tem utilidade como inibidor indirecto não específico da síntese do tromboxano; contudo, é desejável para descobrir novos compostos contendo propriedades de inibição de sintase de tromboxano (TSI) mais específica e mais potente do que a aspirina.

Esta invenção é uma nova série de compostos do tipo 6-azaindole cuja inactividade de sintase TXA2 em plaquetas e outras células de sangue humano, ditos compostos contendo a fórmula estrutural geral (I): -2- (Rl)n

Esta invenção também é uma formulação farmacêutica contendo como ingrediente activo os compostos 6-azaindole de fórmula (I); em que Rl9 R2, n, m, La, A, B4, B5 e B7 são definidos a seguir.

Esta invenção também é uma composição farmacêutica multi-componente compreendendo os compostos 6-azaindole da invenção juntamente com agentes trombolíticos, inibidores da enzima conversora da angiotensina, e/ou antagonistas receptores do tromboxano.

Esta invenção é um método de inibição da produção do tromboxano dando a um mamífero uma dose terapeuticamente eficaz de um composto da invenção.

Esta invenção também é um método melhorado de conduzir operações cirúrgicas tais como angioplastia e cirurgia de "bypass" por administração ao paciente de uma dose terapeuticamente eficaz de um composto da invenção.

Esta invenção relaciona-se com novos inibidores de sintase de tromboxano 6-azaindole, e sua utilização como anticoagulantes para profilaxia e tratamento de doenças tromboembólicas tais como trombose venosa, embolismo pulmonar, trombose arterial, em particular isquémia miocardial, enfarte miocardial e trombose cerebral, estados gerais hipercoaguláveis e estados -3- localizados hipercoaguláveis tais como angioplastia seguinte e operações de "bypass" coronário, e lesão de tecido generalizado como se relaciona com o processo inflamatório.

Definições: O termo "alquilo" por si só ou como parte de outro substituinte, a menos que de estabelecido de outra forma signifique uma radical alquilo de cadeia linear ou ramificada contendo o número estabelecido de átomos de carbono tais como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, e terc-butilo. O termo "halogéneo" significa um radical derivado de flúor, cloro, bromo, ou iodo. O termo "arilo" como utilizado aqui refere-se para um radical orgânico derivado de um hidrocarboneto aromático por remoção de um átomo; e.g., fenilo, e naftilo. O termo "fenilo substituído" significa um radical fenilo substituído em uma ou mais posições por um ou mais grupos CrC6 alquilo, Ci-C6 alcenilo, CpCô alcinilo, CpCô alcoxilo, acilo, halogéneo, sulfo, amino, ou hidroxilo. O termo "grupo acídico" refere-se a um radical orgânico que é um dador de protões. O termo "quantidade eficaz" como utilizado aqui, significa uma quantidade do composto da invenção que seja capaz de inactivar a sintase TXA2 em plaquetas e outras células de sangue humano alcançando uma dimensão de resultado terapêutico e/ou profilático benéfico. -4- \

As palavras "sais farmacologicamente aceitáveis" incluem ambos os sais de adição ácida e básica.

As palavras "cadeia de átomos" significa o número de átomos na cadeia mais curta entre as duas ligações do grupo de ligação -(La)-. A presença de um anel benzeno ou de ciclohexano na cadeia mais curta conta como dois átomos. Por exemplo, os grupos de ligação (a) e (b); e (CH2)3 \ / (a) CH3

(Ch2v (b) têm cadeia de 5 e 7 átomos, respectivamente. I. Compostos da invenção:

Os novos compostos da invenção são representados pela fórmula (I) ou um seu sal farmacologicamente aceitável ou pró-fármaco, em que a linha tracejada de fórmula (I) representa insaturação opcional: (Rl)n

e em que; n é um número inteiro de zero a 3; m é um número inteiro de zero a 4; B4, B5, e B7 são carbono; é um radical na posição 4, 5 ou 7 em que cada Ri é independentemente seleccionado de hidroxilo, halogéneo, ciano, sulfo, nitro, amino, carboxilo, carbamilo, carbonilo, alcoxicarbonilo, arilo, ariloxilo, C1-C12 alquilo, C2-Ci2 alcenilo, C2-Ci2 alcinilo, CrCi2 alcoxilo, C4-C8 cicloalquilo, Cr C12 halogeneto de alquilo, C1-C12 alquilo hidroxilado, aminoalquilo, cianoalquilo, fenilo substituído, o fenilo que pode ser opcionalmente substituído por C1-Q2 alquilo, halogéneo, hidroxilo, ou C2-C6 alcenilo, C2-C6 alcinilo, CrC6 alquiltio, Ci-C6 alcoxilo, ou Cj-Cô alquilsulfonilo; R2 é um radical na posição 2 ou 3 em que cada R2 é independentemente seleccionado de hidroxilo, halogéneo, ciano, sulfo, nitro, amino, carboxilo, carbamilo, carbonilo, alcoxicarbonilo, arilo, ariloxilo, CrCi2 alquilo, C2-Ci2 alcenilo, C2-Ci2 alcinilo, Ci-C]2 alcoxilo, C4-C8 cicloalquilo, Cr C12 halogeneto de alquilo, Q-C12 alquilo hidroxilado, aminoalquilo, cianoalquilo, fenilo substituído, o fenilo que pode ser opcionalmente substituído por C,-C12 alquilo, halogéneo, hidroxilo, ou C2-Cô alcenilo, C2-C6 alcinilo, Q-Cô alquiltio, CpCó alcoxilo, ou Ci-C6 alquilosulfonilo;

Posições 2, 3, 4, 5, e 7 na fórmula (I), não substituídas por R! ou R2 são substituídas com hidrogénio; (La) é um grupo de ligação bivalente; e A é um grupo acídico.

Compostos preferidos de fórmula (I) em que o grupo acídico A é seleccionado do seguinte: -5-tetrazole, -SO3H, -carboxilo, 6- At Ο

-P—OH OR4

O O—P—OH OR4

I II N—S—CF3

II o

HO

N \

S /

N 9 e onde R4 é seleccionado de hidrogénio, C1-C12 alquilo, fenilo ou fenilo substituído.

Mais preferidos são compostos de fórmula (I) em que o grupo acídico é carboxilo.

Também preferidos são compostos de fórmula (I) em que o grupo de ligação bivalente -(La)- tem uma cadeia de 4 a 8 átomos e mais preferencialmente uma cadeia de 5 ou 6 átomos. Particularmente preferidos são compostos de fórmula (I) em que o grupo de ligação bivalente, -(La)-, é seleccionado das seguintes fórmulas:

(CH2)2-, 5

^(CH2)2-6^

^CH2)2-6^

(CH2)2-6' ch3

-(CH2)0-4^ NH

-(CH2)0-, (CH2)0-4^

Ο

NH

(CH2)o-4t

(CH2)o-4-

/ \ (CH2)2-fr (CH2)2-6-C=C- (CH2)2.6—CH=CH-

O (CH2)0.

(CH2)0.

o

-CH— (CH2)2.6—CH2— —CH— ΓΊ O (CH2)2*6—CH2— 5 -CH—(CH2)2_g—CH2— —CH— Λ rl (CH2)2_6—CH2—

NH (CH2)o.; s -10-

(ch2)o- o 5 ch3

(CH2)o-3^ O

(CH2)o-3 O ch3 » e

(CH2)o-3 o ch3

Uma sub-série de compostos 6-azaindole de fórmula (I) que inactivam a sintase TXA2 em plaquetas e outras células de sangue humano é representada pela fórmula (II) e sais farmacologicamente aceitáveis, solvatos, ou pró-fármacos seus; (Rl)n

- 11 - em que; n é um número inteiro de zero a 3; m é um número inteiro de zero a 2; R] é um radical na posição 4, 5 ou 7 em que cada Ri é independentemente seleccionado de hidroxilo, halogéneo, ciano, sulfo, nitro, amino, carboxilo, carbamilo, carbonilo, alcoxicarbonilo, arilo, ariloxilo, C1-C12 alquilo, C2-C12 alcenilo, C2-C12 alcinilo, C1-C12 alcoxilo, C4-C8 cicloalquilo, Cr C12 halogeneto de alquilo, C1-C12 alquilo hidroxilado, aminoalquilo, cianoalquilo, fenilo substituído, o fenilo que pode ser opcionalmente substituído por Q-C12 alquilo, halogéneo, hidroxilo, ou C2-C6 alcenilo, C2-C6 alcinilo, Ci-C6 alquiltio, CpQ alcoxilo, ou CrC6 alquilsulfonilo; R2 é um radical na posição 2 ou 3 em que cada R2 é independentemente seleccionado de hidroxilo, halogéneo, ciano, sulfo, nitro, amino, carboxilo, carbamilo, carbonilo, alcoxicarbonilo, arilo, ariloxilo, Q-C12 alquilo, C2-C12 alcenilo, C2-Ci2 alcinilo, Q-C12 alcoxilo, C4-Cg cicloalquilo, Cr C12 halogeneto de alquilo, Ci-C12 alquilo hidroxilado, aminoalquilo, cianoalquilo, fenilo substituído, o fenilo que pode ser opcionalmente substituído por C1-C12 alquilo, halogéneo, hidroxilo, ou C2-C6 alcenilo, C2-C6 alcinilo, CrC6 alquiltio, C|-Cé alcoxilo, ou Q-Cô alquilosulfonilo; posições 2, 3, 4, 5, e 7 na fórmula (II), não substituídas por R! ou R2 são substituídas com hidrogénio; (La) é um grupo de ligação bivalente contendo uma cadeia de 4 a 6 átomos; e A é um grupo acídico;

Compostos preferidos de fórmula (II) são aqueles em que nenhuma das posições n é zero (posições 4, 5, e 7 são substituídos com hidrogénio), m é zero (posições 2 e 3 são substituídas com hidrogénio), ou (n+m) é zero, -(La)- é seleccionado de um grupo consistindo de; - 12-

C

—(CH2)s e —(CH2)6· e A é carboxilo.

Uma sub-série de compostos 6-azaindole de fórmula (II) que inactivam a sintase TXA2 em plaquetas de sangue é representada pela fórmula (III) e seus sais farmacologicamente aceitáveis ou pró-fármacos.

em que p é um número inteiro de 3 a 5; ou um seu sal farmacologicamente aceitável, solvato, ou pró-fármaco;

Compostos (e todos os seus derivados sais farmaceuticamente aceitáveis, solvatos e pró-fármacos) que são ilustrativos de compostos da invenção incluem os seguintes: (a) ácido 6-azaindole-1-pentanóico, (b) ácido 6-azaindole-1-hexanóico, (c) ácido 6-azaindole-1-heptanóico, (d) misturas de qualquer de (a) a (c).

Os compostos da invenção possuem pelo menos um substituinte funcional acídico (isto é, grupo A de Fórmula I) e, como tal, são capazes de formar sais. Sais farmaceuticamente aceitáveis representativos, incluem mas não -13-estão limitados a, os sais alcalinos e alcalino terrosos tal como lítio, sódio, potássio, cálcio, magnésio, alumínio e outros. Os sais são convencionalmènte preparados a partir de ácido livre por tratamento do ácido em solução com uma base ou por exposição do ácido a uma resina de troca iónica.

Incluídos na definição de sais farmaceuticamente aceitáveis estão os sais de adição básica relativamente não-tóxicos, inorgânicos ou orgânicos dos compostos da presente invenção, por exemplo, catiões amónio, amónio quaternário, e amina, derivados de bases azotadas de basicidade suficiente para formar sais com os compostos desta invenção (ver, por exemplo, S. M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts", J. Phar. Sei., 66: 1-19 (1977)).

Naqueles exemplos em que os compostos da invenção contêm grupo(s) básico(s) podem reagir com os ácidos orgânicos ou inorgânicos adequados para formar sais tal como acetato, benzenossulfonato, benzoato, bicarbonato, bissulfato, bitartarato, borato, brometo, camsilate, carbonato, cloreto, clavulanato, citrato, cloreto, edetato, edissilato, estolato, esilato, fluoreto, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolilarssanilato, hexilressorcinato, brometo, cloreto, hidroxinaftoato, iodeto, isotionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, malseato, mandelato, mesilato, metilbrometo, metilnitrato, metilsulfato, mucato, napsilato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pantotenato, fosfato, poligalacturonato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, tanato, tartarato, tosilato, trifluoroacetato, trifluorometano sulfonato, e valerato.

Os compostos da fórmula (I) também podem estar na forma de zwiteriões, desde que contenham tanto funcionalidade ácida como básica e que sejam capazes de se auto-protonarem.

Certos compostos da invenção possuem um ou mais centros quirais e podem assim existir em formas opticamente activas. Igualmente, quando os - 14-compostos contêm um grupo alcenilo ou alcenileno então existe a possibilidade de haver as formas isoméricas cis- e trans- dos compostos. Os isómeros R- e S- e misturas suas, incluindo misturas racémicas bem como as misturas de isómeros cis- e trans-, são contempladas por esta invenção. Átomos de carbono assimétricos adicionais podem estar presentes num grupo substituinte tal como um grupo alquilo. E intencional que todas estes isómeros bem como as suas misturas estejam incluídas na invenção. Se é desejado um estereoisómero em particular, ele pode ser preparado por métodos bem conhecidos na arte utilizando reacções estereoespecífícas com materiais de partida que contenham os centros assimétricos e que estejam já resolvidos ou, altemativamente por métodos que conduzam a misturas de estereoisómeros e subsequente resolução por métodos conhecidos.

Os pró-fármacos são derivados dos compostos da invenção que têm grupos quimicamente ou metabolicamente cliváveis e que se tomam por solvólise ou sob condições fisiológicas nos compostos da invenção que são farmaceuticamente activos in vivo. Derivados dos compostos desta invenção têm actividade em ambas das suas formas derivadas básica e ácida, mas a forma derivada ácida muitas vezes oferece vantagens de solubilidade, compatibilidade de tecido, ou atraso de libertação no organismo de um mamífero (ver, Bundgard, H., Design of Prodmgs, pp. 7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985). Pró-fármacos incluem derivados ácidos bem conhecidos dos profissionais da arte, tal como, por exemplo, ésteres preparados por reacção do composto acídico de origem com um álcool adequado, ou amidas preparadas por reacção do composto ácido de origem com uma amina adequada. Derivados alifáticos simples ou ésteres aromáticos de grupos acídicos pendentes nos compostos desta invenção são pró-fármacos preferidos. Em alguns casos é desejável para preparar pró-fármacos do tipo éster duplo tal como ésteres (aciloxilo)alquilo ou ésteres ((alcoxicarbonil)oxi)alquilo. (2.. -«(^ (2.. -«(^ -15- Μ II. Formulações farmacêuticas da invenção:

Esta invenção também fornece formulações compreendendo um composto novo como descrito na Secção I anterior ou um seu sal farmaceuticamente aceitável ou pró-fármaco em combinação com um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

Para as formulações farmacêuticas pode ser utilizado qualquer veículo adequado conhecido na arte. Em tal formulação, o veículo pode ser um sólido, líquido ou mistura de um sólido e de um líquido. Formulações de forma sólida incluem pós, comprimidos e cápsulas. Um veículo sólido pode ser uma ou mais substâncias que também podem actuar como agente aromatizante, lubrificante, solubilizante, agente de suspensão, ligantes, agentes desintegrantes de comprimidos e material de encapsulação.

Nos pós o veículo é um sólido finamente dividido que é uma mistura com o ingrediente activo finamente dividido. Nos comprimidos o ingrediente activo é misturado com o veículo contendo as propriedades ligantes necessárias em proporções adequadas e compactado na forma e tamanho desejado. Os pós e comprimidos preferencialmente contêm desde cerca de 1 a 99 porcento em peso do ingrediente activo que seja um novo composto desta invenção. Veículos sólidos adequados são carbonato de magnésio, estearato de magnésio, talco, açúcar de lactose, pectina, dextrina, amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, ceras de baixo ponto de fusão, e manteiga de cacau.

Formulações de formas líquidas estéreis incluem suspensões, emulsões, xaropes e elixires. -16- C—— O ingrediente activo pode ser dissolvido ou suspendido num veículo farmaceuticamente aceitável, tal como água esterilizada, solvente orgânico esterilizado ou uma mistura de ambos. O ingrediente activo pode muitas vezes ser dissolvido num solvente orgânico adequado, por exemplo propileno glicol aquoso. Outras composições podem ser feitas por dispersão do ingrediente activo finamente dividido em amido aquoso ou uma solução de carboximetilo celulose de sódio ou num óleo adequado.

Preferencialmente a formulação farmacêutica é em formas de dosagem unitária. A forma de dosagem unitária pode ser ela mesma em cápsula ou comprimido, ou um número apropriado de qualquer destes. A quantidade de ingrediente activo numa dose da composição pode variar ou ajustar de cerca de 0,1 a cerca de 1000 miligramas ou mais de acordo com o tratamento particular envolvido. Pode ser estimado que possa ser necessário para fazer variações de rotina para a dosagem dependendo da idade e condição do paciente. A dosagem também dependerá da via de administração. As formulações de acordo com a invenção podem ser feitas para administração oral, parentérica ou rectal ou numa forma adequada para administração por inalação ou insuflação, tanto através da boca como do nariz.

As seguintes formulações farmacêuticas 1 a 8 são apenas ilustrativas e não são de qualquer modo limitativas ao objectivo da invenção. "Ingrediente activo", refere-se a um composto de acordo com a Fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, solvato, ou pró-fármacos.

Formulação 1

As cápsulas de gelatina dura são preparadas utilizando os seguintes ingredientes:

Quantidade Ingrediente activo ('me/cápsula') 250 Amido, seco 200 Estearato de magnésio 10 Total 460 mg Formulação 2 Um comprimido é preparado utilizando os ingredientes seguintes: Ingrediente activo Quantidade (me/comprimidol 250 Celulose, microcristalina 400 Dióxido de silício, micronizado 10 r Acido esteárico 5 Total 665 mg

Os componentes são misturados e comprimidos para formar comprimidos pesando cada um 665 mg.

Formulação 3

Uma solução para aerossol é preparada contendo os seguintes componentes: - 18-

Peso Ingrediente activo 0,25 Etanol 25,75 Propulsor 22 (clorodifluorometilo) 74,00 Total 100,00 O composto activo é misturado com etanol e a mistura adicionada a uma porção de propulsor 22, arrefecido a -30° C e transferido para um sistema de enchimento. A quantidade requerida é então alimentada para um recipiente de aço inoxidável e diluído com o restante propulsor. A válvula unitária é então ajustada ao recipiente.

Formulação 4

Comprimidos, cada um contendo 60 mg de ingrediente activo, são feitos do seguinte modo:

Ingrediente activo 60 mg

Amido 45 mg

Celulose microcristalina 35 mg

Polivinilpirrolidona (como solução 10% em água) 4 mg

Carboximetilamido de sódio 4,5 mg

Estearato de magnésio 0,5 mg

Talco 1 mg

Total 150 mg O ingrediente activo, amido e celulose são passados através de um peneiro de malha n° 45 U.S. e perfeitamente misturados. A solução aquosa contendo polivivilpirrolidona é misturado com o pó resultante, e a mistura é então passada através de um peneiro de malha n° 14 U.S. Os grânulos assim produzidos são secos a 50° C e passados através de um peneiro de malha n° 18 U.S. São então adicionados aos grânulos carboximetilamido de sódio, estearato de magnésio e talco, previamente passado através de um peneiro de malha n° 60 U.S. que, após mistura, são comprimidos numa máquina de fazer comprimidos para obter comprimidos pesando cada um 150 mg.

Formulação 5 Cápsulas, contendo cada uma 80 mg do ingrediente activo, são feitos do seguinte modo: Ingrediente activo 80 mg Amido 59 mg Celulose microcristalina 59 mg Estearato de magnésio 2 mg Total 200 mg O ingrediente activo, celulose, amido, e estearato de magnésio são misturados, passados através de um peneiro de malha n° 45 U.S., e enchem-se cápsulas de gelatina dura com quantidades de 200 mg.

Formulação 6

Supositórios, cada um contendo 225 mg do ingrediente activo, são feitos do seguinte modo: 0,225 mg 2,000 mg 2,225 mg

Ingrediente activo

Glicéridos de ácidos gordos saturados Total O ingrediente activo é passado através de um peneiro de malha n° 60 U.S. e suspenso em glicéridos de ácidos gordos saturados fundidos utilizando o mínimo de aquecimento necessário. A mistura é então vertida para dentro do molde do supositório de capacidade nominal 2 g e deixa-se arrefecer.

Formulação 7

Suspensões, cada uma contendo 50 mg do ingrediente activo por dose de 5 mL, são feitas do seguinte modo:

Ingrediente activo 50 mg

Carboximetilcelulose de sódio 50 mg

Xarope 1,25 mL

Solução de ácido benzóico 0,10 mL

Aroma q.v.

Corante q.v.

Água purificada para o total 5 mL O ingrediente activo é passado através de um peneiro de malha n° 45 U.S. e misturado com o carboximetilcelulose e xarope para formar uma pasta macia. Uma solução de ácido benzóico, aroma e corante são diluídos com uma porção de água e adicionada, com agitação. E então adicionada água suficiente para produzir o volume requerido. -21 - 1«Λ

Formulação 8

Uma formulação intravenosa pode ser preparada como a seguir:

Ingrediente activo 100 mg

Salino isotónico 1,000 mg A solução dos ingredientes acima geralmente é administrada intravenosamente ao sujeito a uma razão de 1 mL por minuto. As formulações farmacêuticas da invenção toma inactiva a sintase TXA2 em plaquetas e outras células de sangue humano. III. Formulações Farmacêuticas Multi-Mode Utilizando Compostos da Invenção em Combinação com Agentes Terapêuticos Seleccionados:

Os compostos da invenção actuam como inibidores de sintase de tromboxano e são vantajosamente combinados com outros agentes tendo diferentes modos de acção para dar composições farmacêuticas multi-mode. A combinação resultante de ingredientes pode ser utilizado como Ingrediente Activo na formulação farmacêutica descrita na Secção II, acima. Assim, um Ingrediente Activo (para formulações farmacêuticas multi-modo) pode ser formado por combinação de compostos desta invenção (como representado pela fórmula I, II, e III) com agentes terapêuticos seleccionados de uma ou mais das seguintes classes: a) agentes trombolíticos; b) inibidores da enzima de conversão da angiotensina; c) antagonistas receptores de tromboxano;

Exemplos de agentes trombolíticos (a) são activadores de tecido -22- C_ plasminogéneo (t-PA) e estreptoquinase. Estes agentes devem ser preferencialmente utilizados em combinação com os compostos da invenção para indicações cardiovasculares.

Inibidores da enzima de conversão da angiotensina (b) (inibidores ACE) tal como, captopril, (l-[(2S)-3-mercapto-2-metilpropionil]-L-prolina) devem ser preferencialmente utilizados em combinação com os compostos da invenção para indicações renais tais como nefropatia diabética.

Exemplos de antagonistas receptores de tromboxano (c) são Vapiprost (Glaxo) e composto S-1452™ (reg. CAS n° 132747-47-8); (ácido 5-heptanóico, sal 7-[3-[(fenilsulfonil)amino]biciclo[2.2.1]hep-2-il] de cálcio (2:1), [lR-[la, 2α(Ζ), 3β, 4α]]; e composto VAPIPROST™ (reg. CAS n° 87248-13-3); cloreto do ácido [lR-[la(Z) ,2β, 3β, 5a]]-(+)-7-[5-[(l,r-Bifenil)-4-ilmetoxi]-3-hidroxi-2-(l-piperidinil)ciclopentil]-4-heptanóico; e composto Bay-u-3405™ (reg. CAS n° 116649-85-5); (ácido 9H-carbazole-9-propiónico, 3-[[(4-fluorofenil)sulfonil]amino]-l,2,3,4-tetrahidro, (R)-. Estes antagonistas devem preferencialmente ser utilizados em combinação com os compostos da invenção para indicações cardiovasculares e renais. Combinações destes compostos da invenção com antagonista receptor do tromboxano (TRA) é um aspecto preferido desta invenção, porque o (TRA) bloqueia a actividade da prostaglandina H2 que é melhorada por compostos inibidores da sintase do tromboxano desta invenção (representada pela fórmula I, II e III).

As proporções relativas dos ingredientes (razão em peso de compostos da invenção para agentes terapêuticos) deverão geralmente estar na gama de 1 para 1000 a 1000 para 1 e é rapidamente determinada por combinação de dosagens dos ingredientes em pesos conhecidos para serem farmaceuticamente eficazes. -23-

Composições farmacêuticas multi-modo podem ser formadas a por mistura de compostos da invenção com um ou mais agentes terapêuticos (a), (b), ou (c) listados acima. Altemativamente, cada ingrediente, (i) o composto da invenção, e (ii) o agente terapêutico seleccionado pode ser embalado conjuntamente, por exemplo num comprimido tendo duas partes, de modo que a sua administração ao paciente seja concomitante. IV. Um Método Aperfeiçoado da Inibição da Produção do Tromboxano Utilizando Compostos da Invenção:

Esta invenção é um método para inibição da produção do tromboxano que compreende administração a um hospedeiro mamífero (e.g. humano) uma quantidade eficaz de novos compostos das fórmulas (I), (II), ou (III). O tratamento de um mamífero com os compostos da invenção podem ser tanto para objectivos terapêuticos como profiláticos.

Um método preferido da invenção para inibição da produção de tromboxano é a administração a um mamífero de formulações farmacêuticas da invenção descrita na Secção II, acima, ou as formulações farmacêuticas multi-modo descritas na Secção III, acima.

Uma dose específica de um composto da invenção administrada para obter efeitos terapêuticos e/ou profiláticos deverão, concerteza, ser determinados pelas circunstâncias particulares envolvendo o caso, por exemplo, a via de administração e a condição a ser tratada. Uma dose diária típica deve conter um nível de dosagem não tóxico de um composto de cerca de 0,01 mg/kg até cerca de 50 mg/kg de peso corporal. Doses diárias preferidas geralmente devem ser de cerca de 0,05 mg/kg a cerca de 20 mg/kg.

Esta invenção também é um método aperfeiçoado de conduzir a angioplastia por administração antes e/ou durante a angioplastia os novos compostos de fórmula (I), (II) ou (III) da prevenção da trombose.

Esta invenção é um método para a prevenção ou tratamento de um primeiro ou recorrente enfarte miocardial ou um primeiro ou recorrente ataque num humano compreendendo administração a um humano numa quantidade eficaz para prevenção ou tratamento de um primeiro ou recorrente enfarte miocardial para primeiro ou recorrente ataque, uma combinação de ingredientes activos compreendendo os compostos da fórmula (I), (II) ou (III) ou sal farmaceuticamente aceitável ou pró-fármaco seu. V. Método de Preparar os Compostos 6-azaindole da Invenção: A preparação de material de partida de 6-azaindole pode ser feito como mostrado por Prokopov, A. A. e Yakhontov, L. N. Chemistrv of Heterocvclic Compounds. 1977, n° 8, pagina 919; a divulgação do qual é incorporada aqui por referência. A reacção básica ensinada por Prokopov e Yakhontov para a preparação do material de partido é a seguinte: O 4-metil-3-nitropiridina comercialmente disponível é condensado com o acetal Ν,Ν-dimetilformamida dietílico para obter E-4-[2-(N,N-dimetilamino)-l-etenil]-3-nitropiridina, que é depois sujeito a hidrogenação catalítica para dar 6-azaindole. O 6-azaindole assim produzido pode ser desprotonado em N-l com base e alquilado com um haloalcanoato de alquilo adequado. O éster resultante pode ser hidrolizado com uma base para dar um derivado ácido como ilustrado no Esquema I abaixo: -25-

Esquema I

N

CH=CH-N(CH3)2 H, no2 (5% Pd/C temp. amb.) ch3 H5C2Ox OC2H5 H/C^N(CH3)2 no2 (DMF 85-95°C)

1) NaH 2) I(CH2)5C02CH2CH3 (DMF temp. amb.)

1) NaH 2) HC1 (CH2)5C02CH2CH3

(CH2)5C02H A substituição do núcleo 6-azaindole pode ser acompanhado por uma variedade de métodos anteriores à alquilação do 6-azaindole ou anterior à hidrólise do éster ao ácido final, (ver, (1) Prokopov, A. A. e Yakhontov, L. N., Chesmistry of Heterocvclic Compounds, 1978, p. 402-405, 406-410, 695, e 1224-1227; e (2) Fisher, Μ. H. e Matzuk, A. R. Journal of Heterocvclic Chesmistry, 6, -26-ρ. 775, 1969; as revelações das quais são incorporados aqui por referência.

Substituição ilustrativa da posição 3 é mostrado a seguir:

Br

Os seguintes Exemplos são planeados para ilustrar a invenção e não para serem analisados como limitações disso. As temperaturas são dadas em graus Centígrados e todas as fracções onde quer que sejam dadas são fracções em peso a menos que seja indicado de outra forma.

Exemplo 1

Parte A: CH3S/ NO, + h5c2on /oc2h5 H^N(CH3)2

DMF ÇH=CHN(CH3)2 ,no2

Preparação de E-4-[2-(N,N-dimetilamino)-l-etenil]-3-nitropiridina (material de partida):

Uma solução agitada de 4-metil-3-nitropiridina (14,0 g, 101 mmole), Ν,Ν-dimetilformamida dietil acetal (19,8 g, 134 mmole) e DMF anidro -27- C- (40 mL) sob azoto foi aquecida em banho de óleo para uma temperatura de banho de 85-95° C por 3,5 horas. Deixou-se arrefecer a solução reaccional até temperatura ambiente antes de de ser concentrada in vacuo. O resíduo foi recristalizado de benzeno para dar 14,31 g (73%) do produto desejado como agulhas de cor granada, ponto de fusão 102-104° C (lit. 106-107° C).

Análise para C9H11N3O2:

Calculado c, 55,95; H, 5,74; N, 21,75 Encontrado C, 56,15; H, 5,83; N, 21,94 Parte B: CH=CHN(CH3)2 A no2 -► Γ r> ^NH

Preparação do 6-azaindole:

Uma mistura de 5% de paládio em carbono (1,5 g, 0,70 mmole), E-4-[2-(N,N-dimetilamino)-l-etenil]-3-nitropiridina (3,5 g, 18,1 mmole) e etanol (200 mL, 0,44% tolueno) foi agitada sob 42 psi (2,90 x 105 Pa.) de pressão de hidrogénio até que 90% do consumo teórico de hidrogénio tenha sido esgotado. A mistura reaccional foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo encontrado, após cromatografia (S1O2, acetato de etilo) e recristalização (de benzeno), 1,5 g, (70%) agulhas incolores com ponto de fusão 133-134° C.

Análise para C7H6N2:

Calculado Encontrado C, 71,17; H, 5,12; C, 71,01; H, 5,29; N, 23,71 N, 23,56 -28- H '—

Parte C: -28- H '—

1) NaH, DMF 2) I—(CH2)5—C02CH2CH3

> N I (CH2)5C02CH2CH3

Preparação do 6-azaindole-l-hexanoato de etilo: A uma suspensão de NaH (0,37 g, 9,2 mmole, 60% dispersão em óleo) em DMF anidro (10 mL) sob azoto foi adicionada gota a gota (durante 15 min.) uma solução de 6-azaindole (0,90 g, 7,6 mmole) em DMF anidro (9 mL) a uma tal razão que a temperatura interna da reacção não exceda os 35° C. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente até se obter uma solução (20 min.), nessa altura foi adicionada gota a gota uma solução de 6-iodohexanoato de etilo (2,2 g, 8,1 mmole) em DMF anidro (7 mL) a uma razão que a temperatura interna não exceda os 35° C. A solução reaccional foi então agitada à temperatura ambiente sob azoto por 3 horas antes que fosse adicionada a água gelada (100 mL) e extraída com acetato de etilo (3 x 50 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com brine (30 mL), secas (MgS04) e concentradas in vacuo. A cromatografia (Si02, acetato de etilo) do resíduo forneceu 1,32 g (67%) do produto desejado como um óleo amarelo.

Análise para C15H20N2O2: Calculado C, 69,20; H, 7,74; N, 10,76 Encontrado C, 69,44; H, 7,93; N, 10,78

Parte D: O O 1) NaOH 2) HC1 1^1 0> 1 3) Cu(OAc)2 X(CH2)5C02H (CH2)5C02CH2CH3 4) H2S -29- CL~-—«-Ι ^

Preparação do ácido 6-azaindole-l-hexanóico: A uma solução de 6-azaindole-l-hexanoato de etilo (5,96 g, 22,9 mmole) em etanol (200 mL) foi adicionado NaOH 5N (40 mL, 200 mmole) e a solução resultante agitada à temperatura ambiente por 3,5 horas antes de ser concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água e acidificado com HC1 5N, depois concentrado in vacuo a 2,5 g de sólido. A 1,0 g de amostra deste resíduo em água (20 mL) foi adicionada uma solução de Cu(02CCH3)2.H20 (0,80 g, 4,0 mmole) em água (8 mL) e a solução resultante agitada à temperatura ambiente até se formar um precipitado azul (15 min.). O precipitado foi recolhido e suspendido em água (100 mL); a suspensão foi aquecida a uma temperatura interna de 48° C e fez-se borbulhar H2S gasoso por 30 min. A agitação a 48-50° C continuou por 3 horas e 20 minutos antes da mistura arrefecer à temperatura ambiente. O CuS precipitado foi removido por filtração e o filtrado concentrado in vacuo. O resíduo foi tratado com carvão activado e recristalizado de acetato de etilo para dar 0,26 g (12%) do produto desejado como agulhas douradas com ponto de fusão 115-116,5° C.

Análise para C13H16N2O2:

Calculado C, 67,22; H, 6,94; N, 12,06

Encontrado C, 67,24; H, 7,01; N, 12,05

ENSAIO A capacidade de um composto da presente invenção para ser inibidor de sintase de tromboxano eficaz foram avaliados no seguinte Ensaio de Inibição de Sintase do Tromboxano (TSI) com os resultados apresentados na Tabela 1 abaixo: -30-

Tabela 1

Composto do Exemplo 1 Parte D (μΜ) SoroTXB2 *(ng/mL) 0 (veículo) 375 ± 85,8 0,01 235 ± 47,3 0,1 109 + 46,5 1 18,8 + 4,9 ?? ?? ± ?? * Média ± DP, n=3. Método para Teste de Inibidor de Sintase do Tromboxano (TSI): O composto teste - ácido 6-azaindole-l-hexanóico (o composto do Exemplo 1, Parte D) foi dissolvido em dimetilsulfóxido a diversas concentrações. As soluções do composto e apenas dimetilsulfóxido (veículo) forma incubadas com sangue humano fresco inteiro que tenha sido anticuagulado com 0,38% de citrato de trissódio, por 30 minutos a 37° C. Após 30 minutos, foi adicionado 0. 025 mL de solução de cloreto de cálcio 0,5 M a cada 1 mL de sangue e posteriormente incubado por uma hora a 37° C. Foi preparado soro por centrifugação do sangue a 2000 x g por 15 minutos numa centrifugadora de bancada Beckman. Soro TXB2 e 6-ceto-PGFla, metabolitos estáveis e marcadores de síntese de TXA2 e prostaciclina respectivamente, foram medidos por ensaio de radioimunidade pelos métodos teste vulgarmente utilizados (ver, Refs., 1 e 2 abaixo). Os resultados dos ensaios de radioimunidade de TXB2 são mostrados na Tabela 1 e indicada a potência de dependência de dose do composto do Exemplo 1, Parte D como um inibidor de sintase de tromboxano. Estes dados foram utilizados para calcular o IC50 ( concentração requerida do composto para reduzir a produção de tromboxano para 50% da obtida apenas com o veículo) o qual para o ácido 6-azaindole-l-hexanóico foi 23+4,1 nM (média ± DP, n=3).

Os dados determinados do ensaio de radioimunidade de soro 6-ceto-PGFia (reflectindo produção de prostaciclina) permitiram a determinação da especificidade do ácido 6-azaindole-l-hexanóico para a inibição da sintase do tromboxano versos cicloxigenase e sintase de prostaciclina como indicado pelos níveis de soro de 6-ceto-PGFla. Estes valores decrescem na presença de um inibidor não-específico (i.e., aspirina) mas ficam inalterados ou aumentam por TSI específico. Os dados na Tabela 2 documentam o efeito estimulador de dose-dependente esperado do composto do ácido 6-azaindole-l-hexanóico em níveis de soro humano 6-ceto-PGFia e confirmam o TSI específico pelo ácido 6-azaindole-l-hexanóico.

Tabela 2

Composto do Exemplo 1 Parte D (μΜ) Soro 6-ceto-PGFla *(ng/mL) 0 (veículo) 1,6 ±0,2 0,01 1,7 ±0,1 0,1 2,4 ± 0,6 1 2,6 ± 0,7 ?? ?? + ?? * Média ± DP, n=3. A actividade oral do ácido 6-azaindole-l-hexanóico foi estabilizada pelo tratamento de ratazanas pela via oral com soluções do composto e recolhendo sangue uma hora depois. Permitiu-se que o sangue coagula-se em tubos de vidro por 1 hora a 37° C. O soro foi recolhido após sedimentação do coágulo por centrifugação a 2000 x g por 15 minutos numa centrifugadora de bancada Beckman. Os níveis de TXB2 foram medidos no soro por ensaio de -32- radioimunidade. Um decréscimo dos níveis de TXB2 indicam a presença do composto no sangue resultante da absorção oral. Os resultados desta experiências são mostrados na Tabela 3 e documentam a disponibilidade do composto via percurso oral de administração e a dependência de dose do efeito inibitório desejado no soro TXB2.

Tabela 3

Dose Administrada do Composto do Exemplo 1 Parte D (mg/kg, p.o.) Soro TXB2 *(ng/mL) 0 340 ±31,2 1 85,1 ± 14 10 18,4 ±4,0 * Média ± DP, n=3.

Ref. 1. Sors, H., Pradelles, P. e Dray, F., Prostaglandins. 16:277, 1978

Ref. 2. Dray et al, Advances in Prostaglandin and Thromboxane Research, 6:167, 1980.

Lisboa, 21 de Junho de 2001 v ^--

ALBERTO CANELAS Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA

Claims

-1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto 6-azaindole que inactiva a sintase do TXA2 em plaquetas de sangue de mamífero, sendo o referido composto representado pela fórmula (I): (Rl)n

e em que; n é um número inteiro de zero a 3; m é um número inteiro de zero a 4; B4, B5, e B7 são carbono; Ri é um radical na posição 4, 5, ou 7 em que cada Ri é independentemente seleccionado de hidroxilo, halogéneo, ciano, sulfo, nitro, amino, carboxilo, carbamilo, carbonilo, alcoxicarbonilo, fenilo, naftilo, feniloxilo, naftiloxilo, Cp C12 alquilo, C2-Ci2 alcenilo, C2-Q2 alcinilo, CrCi2 alcoxilo, C4-C8 cicloalquilo, CpCj2 halogeneto de alquilo, CpCj2 alquilo hidroxilado, aminoalquilo, cianoalquilo, fenilo substituído, o fenilo que pode ser opcionalmente substituído por CpCi2 alquilo, halogéneo, hidroxilo, ou C2-C6 alcenilo, C2-C6 alcinilo, CrC6 alquiltio, CpCô alcoxilo, ou CpC$ alquilsulfonilo; R2 é um radical na posição 2 ou 3 em que cada R2 é independentemente seleccionado de hidroxilo, halogéneo, ciano, sulfo, nitro, amino, carboxilo, carbamilo, carbonilo, alcoxicarbonilo, fenilo, naftilo, feniloxilo, naftiloxilo, Cp Ci2 alquilo, C2-Ci2 alcenilo, C2-C]2 alcinilo, CpCi2 alcoxilo, C4-C8 cicloalquilo, CpC]2 halogeneto de alquilo, CpCp alquilo hidroxilado, aminoalquilo, cianoalquilo, fenilo substituído, 0 fenilo que pode ser opcionalmente substituído -2- por C1-C12 alquilo, halogéneo, hidroxilo, ou C2-C6 alcenilo, C2-C6 alcinilo, CrC6 alquiltio, CrC6 alcoxilo, ou CrC6 alquilosulfonilo; posições 2, 3, 4, 5, e 7 na fórmula (I), não substituídas por Ri ou R2 são substituídas com hidrogénio; (La) é um grupo de ligação bivalente seleccionado das seguintes fórmulas:

(CH2)2-i 9 ,0 ^(CH2)2-6^ >X^(CH2)2-6^

(CH2)2-6' 9 ch3

9

O 9 (CH2)0-.

NH \ / 9 -3-

Ο -(CH2)o-<r^ νη \\ // (CH2)0-4^

(CH2)0-zr (CH2)o.+ -4- M (CH2)2-fr / \ (CH2)2-6- (CH2)2- (CH2)2-6—CH=CH- -CH— (CH2)2-6— CH2— -CH— ri o (CH2)2.6—CH2— 3 -CH—(CH2)2-6— CH2— -CH— ri \í (CH2)2_6—CH2— 3

0 -5-

0 (CH2)o- 5

(CH2)0-3^ O 5

(CH2)o.

o CH3 e

(CH2)o- O CH3 e A é um grupo acídico seleccionado do seguinte: -5-tetrazole, -S03H, -carboxilo, O P—OH O O—P—OH OR4 OR4 -6- C_Λ

Η Η Ο Ν—S—CF3 II ο

ΗΟ

Ν \ S / Ν y e em que R4 é seleccionado de hidrogénio, C1-C12 alquilo, fenilo ou radical fenilo substituído em uma ou mais posições por um ou mais CpC6 alquilo, C2-C6 alcenilo, C2-C6 alcinilo, C\-Ce alcoxilo, halogéneo, nitro, sulfo, amino, ou grupos hidroxilo; ou um seu sal farmacologicamente aceitável, solvato, ou pró-fármaco éster ou amida.
2. Um composto 6-azaindole que inactive a sintase de TXA2 em plaquetas de sangue de mamífero, o dito composto é representado pela fórmula (Π): (Rl)n

em que; -7- C~l n é um número inteiro de zero a 3; m é um número inteiro de zero a 2; Rj é um radical na posição 4, 5, ou 7 em que cada Rj é independentemente seleccionado de hidroxilo, halogéneo, ciano, sulfo, nitro, amino, carboxilo, carbamilo, carbonilo, alcoxicarbonilo, fenilo, naftilo, feniloxilo, naftiloxilo, C]-C]2 alquilo, C2-Ci2 alcenilo, C2-Ci2 alcinilo, CrCi2 alcoxilo, C4-C8 cicloalquilo, Ci-C]2 halogeneto de alquilo, Cj-Ci2 alquilo hidroxilado, aminoalquilo, cianoalquilo, fenilo substituído, o fenilo que pode ser opcionalmente substituído por C1-C12 alquilo, halogéneo, hidroxilo, ou C2-C6 alcenilo, C2-C6 alcinilo, CrC6 alquiltio, CpCô alcoxilo, ou CpCé alquilsulfonilo; R2 é um radical na posição 2 ou 3 em que cada R2 é independentemente seleccionado de hidroxilo, halogéneo, ciano, sulfo, nitro, amino, carboxilo, carbamilo, carbonilo, alcoxicarbonilo, fenilo, naftilo, feniloxilo, naftiloxilo, Ci-C12 alquilo, C2-C12 alcenilo, C2-Ci2 alcinilo, Ci-Ci2 alcoxilo, C4-C8 cicloalquilo, Ci-Ci 2 halogeneto de alquilo, Q-C12 alquilo hidroxilado, aminoalquilo, cianoalquilo, fenilo substituído, o fenilo que pode ser opcionalmente substituído por CrCi2 alquilo, halogéneo, hidroxilo, ou C2-C6 alcenilo, C2-Cô alcinilo, Ci-Có alquiltio, CpCô alcoxilo, ou Ci-C6 alquilosulfonilo; posições 2, 3, 4, 5, e 7 na fórmula (II), não substituídas por Ri ou R2 são substituídas com hidrogénio; (La) é um grupo de ligação bivalente contendo de 4 a 6 átomos de carbono; e A é um grupo acídico; (La) e A sendo definidos como na reivindicação 1; um sal farmacologicamente aceitável, solvato, ou pró-fármaco seu de éster ou amida.
3. O composto da Reivindicação 2, em que m é zero e A é carboxilo, n é 0 e -(La)- é seleccionado do grupo consistindo de: —(CH2)5—

-8- e -(CH2)6— . )
4. Um composto 6-azaindole que inactiva a sintase do TXA2 em plaquetas de sangue humano e outras células, o dito composto é representado pela fórmula (III):

em que; p é um número inteiro de 3 a 5; ou um sal farmacologicamente aceitável, solvato, ou pró-fármaco seu.
5. Um composto seleccionado do grupo consistindo do seguinte: (a) ácido 6-azaindole-1-pentanóico, (b) ácido 6-azaindole-1-hexanóico, (c) ácido 6-azaindole-1-heptanóico, (d) mistura de qualquer um de (a) a (c); ou um sal farmacologicamente aceitável, solvato, ou pró-fármaco derivado seu.
6. Uma formulação farmacêutica compreendendo um composto da Reivindicação 1 a 5 juntamente com um veículo ou diluente farmaceutica-mente aceitável seu.
7. Uma formulação farmacêutica multi-modo compreendendo: (1) um composto como reivindicado nas Reivindicações -9- 1 a 5; (2) um agente terapêutico seleccionado escolhido de um grupo consistindo de: a) agentes trombolíticos; b) inibidores da enzima conversora da angiotensina; e c) antagonistas receptores de tromboxano; juntamente com um veículo farmacêuticamente aceitável, ou diluente seu.
8. A utilização de um composto 6-azaindole da Reivindicação 1 a 5 para a produção de um medicamento para a inactivação da sintase de TXA2 em plaquetas de sangue de mamífero.
9. A utilização de acordo com a Reivindicação 8 para a produção de um medicamento para tratar o ataque ou enfarte miocárdico em humanos. Lisboa, 21 de Junho de 2001 |j,Ur ΗΓ ^ ALBERTO CANELAS Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA V/ICTOR CORDON, 14 1200 USBOA