PT575846E - Produtos alimentares e racoes que contem inibidores da lipase - Google Patents

Description

Descrição •‘Produtos alimentares e rações que contêm inibidores da lipase" A invenção refere-se à utilização das biomassas obtidas na preparação por fermentação de inibidores da lipase, especialmente lipstatina, na preparação de produtos alimentares, rações, aditivos de produtos alimentares, aditivos de rações, rações suplementares, pré-misturas de rações-medicamentos ou medicamentos para administração por via oral. A invenção refere-se ainda a produtos alimentares, rações, aditivos de produtos alimentares, aditivos de rações, rações suplementares, pré-misturas de rações-medicamentos ou medicamentos para administração oral que contêm uma biomassa obtida na preparação por fermentação de inibidores de lipase, especialmente lipstatina e fibras brutas insolúveis em água adicionadas, em que a proporção de inibidores de lipase para fibras brutas está compreendida entre 0,1 e 100 partes em peso de imbidor de lipase para 2000 a 3000 partes em peso de fibras brutas. A invenção refere-se ainda a produtos alimentares, rações, aditivos de produtos alimentares, aditivos de rações, rações suplementares, pré-misturas de rações-medicamentos ou medicamento para administrar por via oral que contêm um ou mais inibidores de lipase, especialmente lipstatina e tetra-hidrolipstatina e fibras brutas insolúveis em água adicionadas, em que a) o inibidor de lipase ou os inibidores de lipase se encontram presentes numa forma pura e/ou na forma da biomassa ou biomassas obtidas na preparação por fermentação do imbidor de lipase ou dos inibidores de lipase, especialmente da lipstatina e b) a proporção de inibidores de lipase para fibras brutas está compreendida entre 0,1 - 100 partes em peso de inibidor de lipase para 2000 a 3000 partes em peso de fibras brutas.

Os animais têm determinadas preferências de paladar e preferem determinada alimentação em vez de outra. Só se um animal for ensinado a tomar uma determinada alimentação com fome, ele tomará esta alimentação quando a fome for suficientemente grande. Mas se as condições de atitude, o animal, especialmente o cão e o gato, procura comer a alimentação de que gosta e, se esta está disponível em excesso, então aumentam de peso. Isto naturalmente encontra-se de maneira crescente em países industriais.

Um factor essencial para a aceitação de um alimento, sobretudo de alimentos de carne, é um determinado teor de gordura presente. Uma redução de gordura no alimento origina, de acordo com a experiência, pelo menos no caso dos alimentos de carne, problemas de aceitação. Portanto existem dificuldades de conseguir habituar os cães a uma assim chamada alimentação de dieta com teor de gordura reduzido. Além disso, os animais precisam de um volume adequado de alimentos até à saturação. A alimentação ideal para cães e gatos consiste numa mistura de albumina, hidratos de carbono e gordura, assim como substâncias minerais, oligoelementos e vitaminas que mantém o peso ideal dos animais. Porque os animais tendem a ingerir alimentos acima das suas necessidades naturais, se estes lhes sabem bem, aproximadamente um terço de todos os cães e gatos são hoje em dia adiposos. A adiposidade podia ser evitada se o cão ou o gato obtivesse uma alimentação que possuísse as seguintes propriedades: deve ser aceite, isto é, agradar ao animal, deve possuir o volume necessário e saciar. deve garantir a ressorção dos componentes essenciais da alimentação,

J /T?<Â não deve provocar o aumento de peso excessivo que origine a adiposidade, as fezes devem ser formadas de modo que possam ser facilmente colectadas.

Para a ressorção da gordura dos alimentos, as ligações de éster primárias de triglicéndos são separadas pela lipase pancreática com a obtenção dos ácidos gordos livres assim como de diglicéridos e monoglicéridos. Estas substâncias são então ressorvidas pelo organismo e utilizadas. Os inibidores de lipase inibem numa parte essencial a separação das gorduras dos alimentos e, por consequência, a ressorção e utilização das gorduras alimentares. Triglicéridos são eliminados não alterados.

Inibidores de lipase, como lipstatina (LST) e seus análogos, como tetra--hidrolipstatina (THL) e éster l-[[(2S,3S)-3-etil-4-oxo-2-oxetanil]metil]octadecilico de N-formil-L-leucina (LOC), que são utilizados no âmbito da presente invenção, são descritos em EPA 129 748, EPA 185 359 e EPA 444 482. Outros inibidores de lipase são esterastina e os seus derivados como se descrevem em US 4 189 438 e US 4 202 824. Exemplos de biomassas ou bolos de fermentação obtidos na preparação de inibidores de lipase como lipstatina ou esterastina por fermentação, são descritos na EPA 129 748 enaUS 4 189 438.

Convenientemente, a adição dos inibidores da lipase à ração realiza-se em função do teor de gordura do alimento. Por adição de 0,1 a 100 mg de imbidor. da lipase por g de gordura, preferivelmente de 1 a 50 mg de inibidor da lipase por g de gordura presente no alimento, é possível a preparação de um alimento ideal para cães e gatos.

As substâncias que inibem a lipase podem ser adicionadas como aditivos alimentares como se indica por exemplo nas directivas sobre Géneros Alimentares da União Europeia ao alimento diário, especialmente para alimento diário sozinho. 4

Um tal alimento tomava então supérfluo um alimento de dieta convencional para evitar ou realizar a terapia da adiposidade. Podem também ser adicionados a um artigo alimentar de dieta que contém uma dieta pobre em sal. E também possível pensar na utilização de um alimento de dieta especial que é utilizado para evitar ou para a terapia da adiposidade.

As substâncias que inibem a lipase podem também ser utilizadas como alimento suplementar ou como alimento para administrar por via oral sob a forma de comprimidos, cápsulas, grânulos, pós, aditivos para a água de beber como composição individual ou combinação em mistura com outros componentes de alimentos complementares ou para medicamentos para a administração por via oral.

Para utilizar mibidores de lipase sob a forma de artigos alimentares com medicamentos como por exemplo são definidos na directiva da União Europeia os inibidores da lipase podem também ser adicionados como pré-misturas de produtos alimentares-medicamentos.

Por adição de fibras brutas insolúveis em água melhora-se a acção dos inibidores da lipase. São exemplos dessas fibras brutas celulose microcristalina, por exemplo AV1CEL, farelo de trigo e farelo de aveia. O teor de fibras brutas na ração de alimento, depois da adição das fibras brutas em relação ao teor de gordura do alimento deve ser igual a uma proporção em peso mínima de 1/1,5. Um aumento do teor das fibras brutas é inteiramente possível para conseguir um posterior aumento da actividade do inibidor da lipase. Um adição óptima de fibras brutas tem uma proporção em peso para a gordura dos alimentos de 1:2 ou 1:3, quer dizer, o teor de fibras brutas devia ser cerca do dobro até o triplo do teor de gordura do alimento. Por meio da adição de fibras brutas, além do aumento do impedimento da ressorção 3 de gordura, também se consegue obter a consistência das fezes dos animais.

Para todas as finalidades acima mencionadas, pode utilizar-se substância que inibe a lipase quimicamente preparada sob a forma pura ou material preparado microbiologicamente, como é por exemplo o caso da lipstatina.

Uma preparação especialmente vantajosa para a utilização em animais é a. utilização do bolo de fermentação (da biomassa) sob a forma pura, semissólida ou seca. O bolo de fermentação contém, além de lipstatina, também ainda albumina valiosa e gordura. Por causa da sua composição, o bolo de fermentação pode também ser considerado como um produto alimentar natural que contém um inibidor da lipase. Por adição directa do bolo de fermentação ao alimento, pode-se poupar outros componentes dos alimentos adicionados antes, por exemplo albumina sob a forma de farinha de soja e gorduras animais ou vegetais. A substância pura ou o bolo de fermentação pode utilizar-se da seguinte maneira: a) como adição dos alimentos para rações diárias ou para rações de dieta de animais, especialmente de cães e gatos para se obter o peso ideal do animal ou para evitar e tratar a adiposidade nestes animais, b) como alimento suplementar ou medicamento a administrar por via oral ou como aditivo para rações complementares ou para administração oral de medicamentos, em combinação com outros componentes do alimento suplementar ou medicamentos, c) como aditivo de medicamentos alimentares ou pré-misturas de medicamentos alimentares.

Por meio desta utilização obtém-se o seguinte:

a) Um impedimento essencial da ressorção de gordura no tracto estômago--intestino. A ressorção da gordura de acordo com a dose do inibidor da lipase e das fibras brutas adicionadas está compreendida entre 1 e 100% da quantidade de gordura ingerida com a alimentação, mas preferivelmente entre cerca de 40 e 70% da gordura dos alimentos. b) Evitar e tratar a adiposidade, nomeadamente em cães e gatos, em que se obtém a possibilidade de os animais serem saciados e não se aproximarem de outros produtos alimentares para matar o resto da fome. c) Evitar e tratar a adiposidade por alimentação com um alimento ou um alimento de dieta que contém substâncias que inibem a lipase e o animal come com agrado, isto é, continua a conseguir a completa aceitação de modo que um adestramento mais ou menos forçado para ingerir mais alimento é supérfluo. d) Economia de componentes de origem vegetal e/ou animal no produto alimentar. O mesmo se aplica “mutatis mutandis” também para os seres humanos. É ainda de mencionar que as substâncias que inibem a ressorção da gordura dos alimentos para animais, podem ser utilizadas para a formação de musculatura pobre em gorduras dos animais, especialmente dos animais de engorda.

Exemplo 1

Demonstração da activ idade de um inibidor da lipase, no Exemplo de tetra--hidrolipstatina (THL) sobre a ressorção da gordura proveniente da alimentação e influência de celulose sobre a acção de THL em cães. Cães do sexo feminino com a idade de 7 a 15 anos e um peso corporal 7 compreendido entre 13 e 22 kg são divididos em 2 grupos cada um de 6 animais. Os animais são alimentados com uma ração corrente para cães. Os animais tèm acesso li vre à água de bebida.

No dia do ensaio, os cães obtêm uma refeição de ensaio. Esta contêm como componentes da ração 7,5% de proteína, 19% de hidratos de carbono, 6% de gordura, 1,6% de sais minerais, 45% de água e 20% de materiais de balastro. A gordura da alimentação consiste em 58% de azeite, que se misturou com trioleina de C-I4. A gordura restante consiste principalmente em ácidos gordos saturados. O inibidor da lipase THL e eventualmente a celulose são misturados com a refeição nas doses indicadas nos Quadros. A ressorção da gordura administrada oralmente com a refeição foi medida com base na radioactividade encontrada nas fezes dos cães. A diferença entre a quantidade administrada oralmente de trioleina marcada com C-14 e a radioactividade determinada nas fezes ao fim de 3 dias depois de a refeição ter sido ingerida é considerada como gordura ressorvida. A quantidade ressorvida é indicada como percentagem da quantidade utilizada. Quanto menos for ressorv ida, quer dizer quanto menor for o valor da percentagem, tanto maior é a actividade do inibidor da lipase.

No Quadro 1 estão referidos os resultados. 8

Quadro 1: A actividade de THL sozinha e THL + celulose sobre a ressorção da gordura em cães.

Controlo Grupo I Grupo 2 Refeição em g 420 340 420 340 420 Quantidade total de gordura em g/' Refeição 26 26 26 26 26 Celulose em g/Refeição Dose de THL 80 0 80 0 80 em mg/Refeição 0 20 20 50 50 em mg/kg de peso corporal 0 1,5 1,5 4 4 Ressorção de triolema em % da dose aplicada 100 70 48 63 28

No Quadro 2 comparam-se as concentrações de glicerina no plasma do sangue de cães, cuja refeição continha 50 mg de THL + 80 g de celulose com os controlos sem THL mas com celulose.

Quadro 2: Comparação das concentrações no plasma sanguíneo depois de uma refeição com 50 mg de THL e 80 g de celulose e uma refeição de ensaio com 80 g de celulose sem THL.

Momento da determinação Antes da aplicação (valor de partida) 3 horas depois da aplicação 7 horas depois da aplicação

Glicerina total do plasma (mmol/ ± SEM) Controlo Inibidor da lipase (80 g de celulose) (50 g de THL + 80 g de celulose) 0,6 ± 0,05 0,7 ± 0,07 1,3 ±0,17 0,5 ±0,02 0,8 ±0,07 0,9 + 0,13

Discussão dos resultados: A partir do Quadro 1 é evidente que o inibidor de lipase THL já como aditivo único para a refeição de ensaio origina uma redução da ressorção da gordura contida na alimentação, de acordo com a dose, compreendida entre 30 e 37%. A actividade do inibidor da lipase é essencialmente aumentada se à refeição de ensaio for 9

Y\ adicionada celulose conjuntamente com o inibidor da lipase. No exemplo, depois da adição de celulose, verificou-se um aumento de 30-37% para 52-70% da inibição da ressorção da gordura da alimentação marcada radioactivamente aplicada.

Os resultados referidos no Quadro I são confirmados pela determinação do teor de glicerina no plasma de cães que obtiveram uma refeição de ensaio com 80 g de adição de celulose com ou sem 50 mg de THL. 3 horas depois de terem ingerido a refeição de ensaio as concentrações de glicerina no plasma dos cães sem THL subiu consideravelmente o que se pode atribuir a uma ressorção da gordura de alimentação aplicada, enquanto no grupo com THL não se verificou qualquer aumento, o que confirma a inibição da ressorção de gorduras de alimentação. O ligeira aumento da ressorção 7 horas pós prandiais deve considerar-se em ligação com a ressorção da gordura acumulada de 28%.

As fezes dos cães em animais que obtiveram celulose sozinha ou em combinação com THL, eram sólidas e bem formadas, enquanto nos animais que obtiveram THL sem celulose eram pastosas.

Exemplo 2

Demonstração da actividade de um inibidor da lipase no exemplo de lipstatina (LST, quimicamente pura ou como componente de um bolo de fermentação) sobre a ressorção de gorduras da alimentação em ratos e cães e influência da celulose sobre a actividade. O exemplo divide-se em 2 partes. Na parte a) descreve-se um ensaio com ratos, cujos resultados foram confirmados por meio do ensaio com cães (parte b)). Nesta parte do ensaio investiga-se também a importância da celulose sobre a acção do inibidor de lipase.

Em ambas as partes do ensaio, como inibidor da lipase, utiliza-se lipstaíina (LST) preparada microbiologicamente. Comparou-se LST como substância quimicamente pura com LST como componente de um bolo de fermentação preparado de acordo com Exemplo 4 de EP 129 748. O teor do bolo em LST foi determinado antes do princípio dos ensaios com os métodos analíticos correntes sob 4 g de LST por kg de bolo de fermentação fresco.

Uma análise de Weender para a determinação do teor de agentes nutritivos de alimentos de animais proporcionou os seguintes valores para os bolos de fermentação:

Teor de substância seca do bolo de fermentação: 192 g/kg Teor da substância seca por kg:

Cinzas brutas 31,4g

Proteína bruta 251,6 g

Fibra bruta 9,1 g

Gordura bruta 499,4 g

Materiais extraídos isentos de N 208,5 g a) Ensaio sobre ratos. Comparação de LST quimicamente puro com LST como componente de um bolo de fermentação.

Suspendeu-se LST pura ou o bolo de fermentação seco em uma composição de 5% de goma arábica/5% de pó de leite utilizáveis em ensaios farmacológicos e administrou-se como refeição única numa quantidade de 10 ml/kg oralmente a ratos previamente em jejum durante 24 horas imediatamente a seguir a uma refeição líquida. A refeição continha 2,5% de amido, 24% de glucose, 12% de leite em pó e 7,6% de azeite marcado com trioleina de C-14. A quantidade de LST puro ou de bolo é determinada de tal modo que se garantam as doses referidas no Quadro 3. Em seguida, o ratos obtiveram alimentação corrente usual. O cálculo da gordura de alimentação ressorvida foi realizado como se descreveu no Exemplo I.

Os resultados do ensaio estão referidos no Quadro 3, em que a dose de LST é calculada como mg/kg de peso corporal. Os valores são valores médios calculados a partir de determinações respectivamente de 3 ratos por ensaio.

Quadro 3: Acção de LST puro e LST sob a forma de bolos de fermentação sobre a ressorção de gordura e 3 ratos por dose.

Dose de LST Ressorção de tnoleina em % da dose aplicada em mu/kg LST pura LST no bolo de fermentação 2,7 ~ nd 83 5,0 69 nd 15 52 nd 18,0 nd 54 50,0 41 nd nd = não determinada, b) Ensaio com cães.

Este ensaio realizou-se analogamente ao Exemplo l. Como inibidor da lipase serviu LST no bolo de fermentação descrito na parte a) deste exemplo. Este bolo foi misturado à refeição de cães com adicionalmente 80 g de celulose por refeição, como se descreveu no Exemplo 1.

Os resultados estão referidos no Quadro 4.

Quadro 4: Acção de LST como conteúdo de um bolo de fermentação sozinho ou em combinação com celulose sobre a ressorção de gordura em cães.

Dose de LST Números de animais Ressorção de triolcína aplicada oralmcnte em % da quantidade mg/kg de peso corporal mg/rcfeição N LST sozinha LST + celulose 1.9 20 2 nd 94 4.3 50 4 86 68 13.9 150 4 69 38 41.0 460 4 33 14 DIjn em mg/rcfciçào 240 95 As diferenças são estatisticamente asseguradas com a comparação aos pares de Teste t com p < 0.05.

Os resultados do ensaio com cães (b) confirmam primeiramente os resultados obtidos no ensaio a) com ratos, que LST também então se estiver contida no bolo de fermentação, actua muito activamente como inibidor da lipase. Foi surpreendente o facto de que se tenha calculado que o inibidor não se liberta a partir das células em que se forma como é o caso dos outros produtos naturais como vitaminas. O isolamento dispendioso e difícil de LST a partir do bolo de fermentação pode assim ser poupado sem que se tenha de considerar uma perda de actividade. A potência do inibidor da lipase é aumentada de um factor de 3 em presença de celulose como já se descreveu no Exemplo 1 e pôde também ser confirmada pelos resultados da parte b) do presente Exemplo 2.

Exemplo 3

Demonstração da actividade do inibidor da lipase no Exemplo do outro derivado da lipstatina LOC definido acima sobre a ressorção de gordura a partir de alimentos com utilização de uma vez e de várias vezes em ratos.

No ensaio foram utilizados por dose 3 ratos Albino com o peso de 25 g.

Os ratos obtiveram durante vários dias uma assim chamada dieta gorda cujo teor de gordura foi regulado de tal modo que os ratos obtivessem 23,4 g de gordura por Kg de peso corporal por dia. Os ratos foram alimentados durante 8 dias com este

alimento. No dia 3 a 6 do ensaio misturou-se com este alimento trioleina marcada com C-14 e LOC numa dose de 50 mg/kg de peso corporal. As fezes dos ratos foram colectadas em intervalos de 24 horas a partir do dia de ensaio 4 até 8 e avaliaram-se de acordo com as directivas referidas no Exemplo 1.

Os animais de controlo obtiveram respectivamente a refeição sem a substância activa LOC. A ressorção da gordura administrada oralmente foi determinada como nos Exemplos 1 e 2.

Os resultados do ensaio são reunidos no Quadro 5:

Quadro 5: Acção de LOC depois da aplicação 1 ou 4 dias sobre a ressorção da gordura em ratos.

Dose de LOC Ressorção de trioléina em % da quantidade aplicada oralmente (+ 5 DM)

Io Dia 4o Dia

Controlo (sem LOC) 100 100 50 mg/kg de peso corporal 26 + 4 26 + 3 A partir do Quadro é evidente que também depois de medicação durante várias dias a acção de um inibidor da lipase se mantém inalterada, quer dizer, a inibição de ressorção da gordura dos alimentos mantém-se sem diminuição.

Exemplo 4

Dieta cuidadosa com proteína reduzida e teor de sal das cozinhas para cães (a quantidade corresponde a uma ração diária para um cão com 10 kg de peso): 200 g de fígado de galinha ou carne picada 10 g de manteiga 100 a de arroz 14 14 60 n 4 a de farelo de trmo de fosfato dicálcico 2,5 g de mistura de vitaminas, em que Vitamina A e E devem estar contidas em quantidades suficientes sob a forma nào esterifícada. 50 a 100 g de bolo de fermentação que contém lipstatina (4 g de lipstatina/kg de bolo). A carne é fritada na manteiga e misturada com arroz (cozido com pouco sal). Em seguida adiciona-se o bolo de fermentação que contém lipstatina. as fibras brutas, a mistura de sais minerais e vitaminas e conserva-se correspondentemente, por exemplo numa caixa de conservação de 500 g. Se se pretenda apenas dieta com pouco sal, a quantidade de carne pode aumentar e a quantidade de arroz ser correspondentemente diminuída.

Exemplo 5

Mistura simples com a utilização de bolo de fermentação que contém lipstatina como alimento complementar: 800 g de alimento enlatado para cães (75% de água, 8-13% de proteína, 4-7% de gordura) 200 g de alimento em cubos para cães (15-20% de água, 19-22% de proteína, 5-15% de gordura) 80 g de farelo de trigo lOOg de bolo de fermentação que contém lipstatina (4 g de lipstatinadcg de bolo)

Mistura-se o bolo de fermentação de lipstatina com o farelo de trigo para a li formação da refeição de modo que se obtenha uma pasta. A quantidade corresponde a uma ração para um dia para um cão com 20 kg de peso que convenientemente se dá em duas porções.

Assegura-se uma alimentação com Vitaminas A e E por adição de doses adequadas 3 horas antes ou depois da refeição.

Lisboa, 3 de Novembro de 2000

Raa SiiSitrc, !95, r/c-Srt 125« USSGA

Claims (3)

1. I

   Reivindicações 1. Utilização da biomassa obtida na preparação de inibidores da lipase por fermentação, especialmente lisptatina, para a preparação de produtos alimentares, produtos para rações, aditivos para produtos alimentares, aditivos para rações, rações suplementares, pré-misturas de alimentos-medicamentos ou medicamentos para administrar oralmente.
2. 2. Produtos alimentares, produtos para rações, aditivos para produtos alimentares, aditivos para rações, rações suplementares, pré-misturas de alimentos/medicamentos ou medicamentos para administrar oralmente que contém uma biomassa obtida na preparação de inibidores de lipase, especialmente lipstatina por fermentação e fibras brutas insolúveis em agua adicionadas, em que a proporção inibidor da lipase para fibras brutas está compreendida entre 0,1 e 100 partes em peso de inibidor da lipase para 2000 a 3000 panes em peso de fibras brutas.
3. 3. Produtos alimentares, produtos para rações, aditivos para produtos alimentares, aditivos para rações, rações suplementares, pré-misturas de alimentos/medicamentos ou medicamentos para administração oral que contém um ou mais inibidores da lipase. especialmente lipstatina e tetra-hidrolipstatina e fibras brutas insolúveis em água adicionadas, em que a) o inibidor da lipase ou os inibidores da lipase se encontram sob a forma pura e/ou sob a forma da biomassa ou das biomassas obtidas na preparação do inibidor da lipase ou dos inibidores da lipase especíalmente da lipstatina por fermentação e b) a proporção inibidor da lipase para fibras brutas está compreendida entre 0,1 e 100 partes em peso de inibidor da lipase para 2000 a 3000 partes em peso de fibras brutas.

   3C3E SE 3AJU?A10 Ra a do Saírira, 193, r/c-Urt. 1250 LISBOA Resumo “Produtos alimentares e rações que contêm inibidores da lipase” Utilização das biomassas obtidas na preparação de inibidores da lipase, especialmente lipstatina, por fermentação para a preparação de produtos alimentares, rações, aditivos para produtos alimentares, aditivos para rações, rações suplementares, pré-misturas de forragens e medicamentos ou medicamentos para administração por via oral. Lisboa, 3 de Novembro de 2000