PT2771342T - Derivados de purina e o seu uso no tratamento de doença - Google Patents

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Description

DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE PURINA E O SEU USO NO TRATAMENTO DE DOENÇA"
Campo da invenção A invenção refere-se a derivados de purina e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, processos para a sua preparação, o seu uso no tratamento de doenças, o seu uso, quer isoladamente ou em combinação com pelo menos um agente terapêutico adicional e, opcionalmente, em combinação com um veiculo farmaceuticamente veiculo aceitável, para o fabrico de preparações farmacêuticas, o uso das preparações farmacêuticas para o tratamento de doenças, e um método de tratamento das referidas doenças, compreendendo a administração dos derivados de purina a um animal de sangue quente, especialmente um ser humano.
Antecedentes da Invenção A superfamilia fosfatidilinositol-3-quinase compreende 4 diferentes lipidos ou proteínas quinases relacionadas com PI3K. Classes I, II e III são lipidos quinases que diferem em virtude das suas especificidades de substrato, enquanto as Pl3Ks de classe IV (também chamados PIKKs) são proteínas quinases. Classe I fosfatidilinositol-3-quinases compreendem uma família de lipidos quinases que catalisam a transferência do fosfato para a posição de lipidos de inositol D-3' para produzir fosfoinositol-3-fosfato (PIP), fosfoinositol-3,4-difosfato (PIP2) e fosfoinositol-3,4,5-trifosfato (PIP3), que, por sua vez, atuam como segundos mensageiros em cascatas de sinalização por encaixe de proteínas contendo plecstrina-homologia, FYVE, Phox e outros domínios de ligação de fosfolípidos numa variedade de complexos de sinalização, muitas vezes na membrana do plasma ((Vanhaesebroeck e outros, Annu. Rev. Biochem 70:535 (2001); Katso e outros, Annu. Rev. Ce// Dev. Biol. 17:615(2001)). Das duas PI3Ks Classe I, as Pl3Ks Classe IA são heterodímeros compostos por uma subunidade catalítica pllO (a β, δ, isoformas) constitutivamente associados com uma subunidade reguladora que pode ser ρ85α, ρ55α, ρ50α, ρ85β ou ρ55γ. A subclasse Classe IB tem um membro da família, um heterodímero composto por uma subunidade catalítica ρΙΙΟγ associada com uma das duas subunidades reguladoras, plOl ou p84 (Furman e outros, Annu Rev. Biochem. 67:481 (1998); Suire e outros, Curr. Biol. 15:566 (2005)). Os domínios modulares das subunidades p85/55/50 incluem domínios de Homologia Src (SH2) que ligam resíduos de fosfotirosina num contexto de sequência específica sobre o receptor ativado e tirosina-quinases citoplasmáticas, resultando na ativação e localização de PI3K Classe ΙΑ. PI3K Classe IA é ativada directamente por receptores acoplados à proteína G que se ligam a um repertório diverso de ligandos peptídicos e não peptídicos (Stephens e outros, Cell 89:105 (1997)); Katso e outros, Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17:615-675 (2001)) . Por conseguinte, os produtos de fosfolípidos resultantes de receptores a montante da ligação de PI3K Classe I com atividades celulares a jusante incluindo a proliferação, sobrevivência, quimiotaxia, tráfego celular, mobilidade, metabolismo, respostas inflamatória e alérgica, transcrição e tradução (Cantley e outros, Cell. 64:281 (1991); Escobedo e Williams, Nature 335:85 (1988); Fantl e outros, Cell 69:413 (1992) ) .
Em muitos casos, PIP2 e PIP3 recrutam Akt, o produto do homólogo humano do oncogene viral v-Akt, para a membrana do plasma onde actua como um ponto nodal para muitas vias de sinalização intracelulares importantes para o crescimento e sobrevivência (Fantl e outros, Cell. 69: 413-423 (1992); Bader e outros, Nature Rev. Cancer 5:921 (2005); Vivanco e Sawyer, Nature Rev. Cancer 2:489 (2002)). A regulação aberrante de PI3K, que frequentemente aumenta a sobrevivência através da ativação de Akt, é um dos acontecimentos mais prevalentes no cancro humano e tem sido demonstrado ocorrer em múltiplos níveis. O gene supressor de tumor PTEN, que desfosforila fosfoinositidos na posição 3' do anel de inositol e ao fazê-lo antagoniza a atividade de PI3K, é funcionalmente suprimido numa variedade de tumores. Noutros tumores, os genes para a isoforma pllOa, PIK3CA, e para Akt são amplificados e a expressão de proteínas aumentada dos seus produtos de genes tem sido demonstrada em vários cancros humanos. Além disso, mutações e translocação de p85a que servem para sobre-regular o complexo ρ85-ρ110 foram descritas em cancros humanos. Além disso, as mutações somáticas missense em PIK3CA que ativam vias de sinalização a jusante já foram descritas em frequências significativas numa larga diversidade de cancros humanos (Kang e outros, Proc. Natl. Acad. Sei. EUA 102:802 (2005); Samuels e outros, Science 304:554 (2004); Samuels e outros, Cancer Cell 7:561-573 (2005)). Estas observações mostram que a desregulação de fosfoinositol-3-quinase e dos componentes a montante e a jusante desta via de sinalização é uma das desregulações mais comuns associadas com cancros humanos e doençass proliferativas (Parsons e outros, Nature 436:792 (2005); Hennessey e outros, Nature Rev. Drug Disc. 4:988-1004 (2005) ) . 0 alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR) é um membro da PI3K classe IV. A mTOR monta uma rede de sinalização que transduz sinais de nutrientes e outros estímulos para regular uma vasta gama de funções celulares, incluindo crescimento celular, a proliferação, sobrevivência, autofagia, vários tipos de diferenciação e o metabolismo. Em células de mamífero, a proteína mTOR encontra-se complexado em duas entidades distintas chamadas mTORCl e mTORC2. O complexo mTORCl, isto é mTOR associado com RAPTOR, tem sido o assunto de vários estudos. É a mTORCl que integra entradas de nutrientes e fatores de crescimento, e por sua vez é responsável pela regulação do crescimento celular, principalmente através de reguladores de síntese de proteínas, tais como 4EBP1 ou RPS6. A regulação mTORCl requer PI3K e ativação de Akt para a ativação, o que significa que mTORCl é um efector da via PI3K. A mTOR, quando associada no complexo mTOR 2 (mT0RC2), tem sido demonstrado ser responsável pela ativação de Akt por fosforilação de S473 (numeração Akt 1) (Sarbassov e outros, Science 307:7098 (2005)). mTORC2 é aqui, portanto, considerada como um ativador a montante da Akt. Curiosamente, mTOR pode, portanto, ser considerada como importante quer a montante, quer a jusante de Akt. A inibição catalítica de mTOR pode, portanto, representa uma forma única de abordar um bloco muito forte na via PI3K-Akt, abordando efetores a montante e a jusante.
Também foi demonstrado uma ligação entre a inibição de mTOR e autofagia (Ravikumar e outros, Nat Genet. 36(6):585-95 (2004)).A autofagia é essencial para a homeostase neuronal e a sua disfunção tem sido associada a neurodegeneração. A perda de autofagia em neurónios em causa a doença neurodegenerativa em ratinhos (Komatsu e outros, Nature 441:880-4 (2006); Hara e outros, Nature 441:885-9 (2006)), sugerindo um papel crítico para a autofagia para manter a homeostase de proteína em neurónios. As doenças neurodegenerativas são caracterizadas por inclusões de proteínas deformadas como uma das marcas. A indução de autofagia aumenta a eliminação de proteínas deformadas e, portanto, é proposta como terapia para proteinopatias neurodegenerativas. Doença de Huntington (DH) é uma desordem neurodegenerativa dominante autossómica em que uma mutação do gene IT15 que codifica a proteína Huntingtina (HTT) leva à expansão de poliglutamina no Exão 1 de Htt. A agregação intracelular desta proteína Htt mutante e atrofia do cérebro (em particular o córtex e estriado) são as principais marcas da HD. Leva clinicamente à perturbação de movimento e disfunção cognitiva além de distúrbios psiquiátricos e perda de peso. A inibição da mTOR induz autofagia e reduz a agregação Htt mutante e morte celular mediada por células Htt mutantes in vitro e in vivo em modelos de HD (Ravikumar e outros, Nat Genet. 36(6):585-95 (2004)). A inibição de mTOR proporciona, portanto, uma oportunidade para intervenção farmacêutica e modulação dos processos celulares interrompidos característicos de HD.
Em vista do acima exposto, os inibidores de mTOR são considerados de valor no tratamento de doenças proliferativas, como o cancro, e outras doenças, em particular, HD. O documento WO 2010/114494 descreve derivados de purina que são inibidores de mTOR. A presente invenção refere-se a novos derivados de purina com atividade inibidora de mTOR, à sua preparação, à sua utilização médica e aos medicamentos que os compreendem.
Sumário da Invenção
Num primeiro aspecto, a invenção refere-se a um composto da fórmula (I), ou um seu sal f armaceuticamente aceitável 4
(!) em que R1 é selecionado do grupo que consiste em
em que R18 em cada ocorrência, representa, independentemente, fluoro ou metilo; m representa 0, 1, 2 ou 3; R19 e R20 representam, independentemente, hidrogénio ou flúor; R21 representa flúor; R22 em cada ocorrência, representa, independentemente, flúor, metóxi, hidroximetilo ou metoxicarbonilo; q representa 0, 1 ou 2 e r representa 0, 1, 2 ou 3 desde que q + r seja não 0; R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 e R9 independentemente representam hidrogénio, Ci-3alquilo ou fluoro-Ci-3alquilo; ou R3 e R6 em conjunto formam uma ponte metileno; ou R3 e R8 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R5 e R6 conjunto formam uma ponte etileno. n e p independentemente representem 0, 1 ou 2; R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16 e R17 em cada ocorrência independentemente representam hidrogénio, Ci_3alquilo ou f luoro-Ci_3alquilo ou hidroxi-Ci-3alquilo; ou R11 e R16 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R13 e R14 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R14 e R15 em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados, ligam-se para formar um anel tetrahidropiranilo; e Y representa 0, CHR23, CR24R25 ou NR26, em que R23 representa hidroxilo ou fluoro-Ci-3alquilo; ou R23 e R13, em conjunto como átomo de carbono ao qual estão ligados, são ligados para formar um anel tetrahidrofuranilo fundido; R24 e R25 representam independentemente hidrogénio ou halogénio; ou R24 e R25, em conjunto como átomo de carbono ao qual estão ligados, estão ligados para formar um anel tetrahidrofuranilo; R26 representa Ci_3alquilo ou oxetanilo; e um composto, ou um seu sal f armaceuticamente aceitável, selecionado de entre a seguinte lista de compostos: 8- (lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2- [1,4]oxazepan-4-il-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(3-propil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol; 2-(3-Etil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol-4-il) -6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-metil-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(6-oxa-2-aza-spiro[3.5]non-2-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-oxetan-3-il-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il) -2-(tetrahydro-furo[3,4-c]pirrol-5-il)-9H-purina; 2-(Hexahydro-furo[3,4-c]piridin-5-il)-8-(lH-indol-4-il)-6- (3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-2-(3-isopropil-morfolin-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-trifluorometil-piperidin-l-il)-9H-purina; 2-(2,6-Dimetil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(7-oxa-l-aza-spiro[3.5]non-l-il)-9H-purina; {4-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol; e {4-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol.
DEFINIÇÕES
Tal como aqui utilizado, o termo "halogénio" ou "halo" refere-se a flúor, cloro, bromo, e iodo.
Tal como aqui utilizado, o termo "Ci-3alquilo" refere-se a uma porção de hidrocarboneto ramificado ou não ramificado completamente saturado com até 3 átomos de carbono. Exemplos representativos de Ci-3alquilo incluem metilo, etilo, n-propilo e iso-propilo.
Tal como aqui utilizado, o termo "hidroxi-Ci- 3alquilo" refere-se a um grupo Ci_3alquilo tal como aqui definido acima, substituído por um radical hidroxilo. Exemplos representativos de hidroxi-Ci_3alquilo incluem, mas não estão limitados a, hidroxil-metilo, 2-hidroxi-etilo, 2-hidroxi-propilo e 3-hidroxi-propilo.
Tal como aqui utilizado, o termo "f luoro-Ci_3alquilo" refere-se a um qrupo Ci-3alquilo tal como aqui definido acima, substituído por um ou mais radicais flúor. Exemplos representativos de fluoro-Ci-3alquilo incluem trifluoroetilo, difluorometilo, fluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 1-fluorometil-2-fluoroetilo e 3,3-trifluoropropilo.
Tal como aqui utilizados, os termos "um", "uma", "o", "a" e termos similares, utilizados no contexto da presente invenção (especialmente no contexto das reivindicações) devem ser interpretados para cobrir tanto o sinqular como o plural, a menos que de outra maneira aqui esteja claramente indicado ou seja claramente contradito pelo contexto. 0 uso de qualquer e todos os exemplos, ou linquaqem exemplar (por exemplo, "como") aqui fornecidos apenas visam ilustrar melhor a invenção e não limitam o alcance da invenção de outra forma reivindicado. 0 termo "compostos da presente invenção" (a menos que especificamente identificado de outro modo) designa os compostos de fórmula (I) compostos dos Exemplos, sais farmaceuticamente aceitáveis de tais compostos, e/ou hidratos e solvatos de tais compostos, assim como todos os estereoisómeros (incluindo diastereoisómeros e enantiómeros), tautómeros e compostos marcados isotopicamente (incluindo deutério). 0 termo "agentes da invenção" pretende ter o mesmo significado que "compostos da presente invenção".
Tal como aqui utilizado, o termo "inibir", "inibição" ou "inibindo" refere-se à redução ou supressão de um dado estado, sintoma, desordem ou doença, ou uma diminuição significativa na atividade de linha de base de uma atividade ou processo biológico.
Tal como aqui utilizado, o termo "isómeros" refere-se a compostos diferentes que têm a mesma fórmula molecular mas que diferem na disposição e configuração dos átomos. Também como aqui utilizado, o termo "um isómero óptico" ou "um estereoisómero" refere-se a qualquer uma das várias configurações estereoisoméricas que podem existir para um dado composto da presente invenção e inclui isómeros geométricos. Entende-se que um substituinte pode estar ligado a um centro quiral de um átomo de carbono. 0 termo "quiral" refere-se a moléculas que possuem a propriedade de não-sobreposição no seu parceiro espelho, enquanto o termo "aquiral" refere-se a moléculas que são sobreponíveis ao seu parceiro espelho. Portanto, a invenção inclui enantiómeros, diastereómeros ou racematos do composto. "Enantiómeros" são um par de estereoisómeros que são imagens de espelho não sobreponíveis um do outro. Uma mistura 1:1 de um par de enantiómeros é uma mistura "racémica". 0 termo é usado para designar uma mistura racémica quando apropriado. "Diastereómeros" são estereoisómeros que têm pelo menos dois átomos assimétricos, mas que não são imagens espelhadas um do outro. A estereoquimica absoluta é especificada de acordo com o sistema Cahn- Ingold- Prelog R-S. Quando um composto é um enantiómero puro a estereoquimica em cada carbono quiral pode ser especificada por R ou S. Os compostos resolvidos cuja configuração absoluta é desconhecida podem ser designados por (+) ou (-) dependendo da direção (dextro- ou levorotatório) na qual rodam a luz polarizada em plano no comprimento de onda da linha D do sódio. Alguns dos compostos aqui descritos contêm um ou mais centros assimétricos ou eixos e podem, assim, dar origem a enantiómeros, diastereómeros, e outras formas estereoisoméricas que podem ser definidas, em termos de estereoquimica absoluta, como (R) - ou (S)-.
Tal como aqui utilizado, o termo "veiculo farmaceuticamente aceitável" inclui todos e quaisquer solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes tensioativos, antioxidantes, conservantes (por exemplo, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos), agentes isotónicos, agentes de retardamento da absorção, sais, conservantes, fármacos, estabilizadores de fármacos, ligantes, excipientes, agentes de desintegração, lubrificantes, agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, corantes, e semelhantes, e combinações dos mesmos, como seria conhecido para os especialistas na técnica (ver, por exemplo, Remington's
Pharmaceutical Sciences, 18a Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289-1329). Excepto na medida em que qualquer veiculo convencional seja incompatível com o ingrediente ativo, a sua utilização nas composições terapêuticas ou farmacêuticas está contemplada.
Tal como aqui utilizado, o termo "prevenção" de qualquer doença ou distúrbio particular refere-se à administração de um composto da invenção a um sujeito antes de quaisquer sintomas de doença ou distúrbio serem evidentes.
Tal como aqui utilizado, os termos "sal" ou "sais" referem-se a um sal de adição ácido de um composto da invenção. "Sais" inclui, em particular, "sais farmaceuticamente aceitáveis". O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se a sais que retêm a eficácia biológica e as propriedades dos compostos desta invenção e, que, tipicamente, não são biologicamente ou de outro modo indesejáveis.
Tal como aqui utilizado, o termo "sujeito" refere-se a um animal. Tipicamente, o animal é um mamífero. Um sujeito também se refere a, por exemplo, primatas (por exemplo, humanos, do sexo masculino ou feminino), vacas, ovelhas, cabras, cavalos, cães, gatos, coelhos, ratazanas, ratos, peixes, aves e semelhantes. Em certas incorporações, o sujeito é um primata. Em ainda outras incorporações, o sujeito é um ser humano.
Tal como aqui utilizado, um sujeito tem "necessidade de" um tratamento, se tal sujeito puder beneficiar biologicamente, medicamente ou na sua qualidade de vida de um tal tratamento. 0 termo "uma quantidade terapeuticamente eficaz" de um composto da presente invenção refere-se a uma quantidade do composto da presente invenção que irá desencadear a resposta biológica ou médica de um sujeito, por exemplo, a redução ou a inibição da atividade de uma enzima ou proteína, ou melhorar os sintomas, aliviar as condições, atrasar ou retardar a progressão da doença, ou prevenir uma doença, etc. Numa realização não limitativa, o termo "uma quantidade terapeuticamente eficaz" refere-se à quantidade do composto da presente invenção que, quando administrado a um sujeito, é eficaz para (1) pelo menos, aliviar parcialmente, inibir, prevenir e/ou melhorar uma condição ou uma desordem ou uma doença (i) mediada por mTOR ou (ii) associada com a atividade da mTOR, ou (iii) caracterizada por atividade (normal ou anormal) de mTOR; (2) reduzir ou inibir a atividade da mTOR. Numa outra forma de realização não limitativa, o termo "uma quantidade terapeuticamente eficaz" refere-se à quantidade do composto da presente invenção que, quando administrado a uma célula ou um tecido, ou um material biológico não celular, ou um meio, é eficaz para reduzir ou inibir a atividade da mTOR, pelo menos parcialmente. 0 significado do termo "uma quantidade terapeuticamente eficaz", tal como ilustrado nas formas de realização acima para mTOR também se aplica pelos mesmos meios a quaisquer outras proteínas/péptidos/enzimas pertinentes, tais como PI3K de classe IV.
Tal como aqui utilizado, os termos "tratar", "tratando" ou "tratamento" de qualquer doença ou desordem referem-se numa forma de realização, à melhoria da doença ou desordem (ou seja, abrandar ou interromper ou reduzir o desenvolvimento da doença ou, pelo menos, uma dos sintomas clínicos da mesma). Noutra forma de realização, "tratar", "tratando" ou "tratamento" refere-se à modulação da doença ou desordem, quer fisicamente, (por exemplo, estabilização de um sintoma discernível), fisiologicamente, (por exemplo, estabilização de um parâmetro físico), ou ambos.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO A presente invenção proporciona compostos e composições farmacêuticas dos mesmos, que podem ser úteis no tratamento ou prevenção de doenças, condições e/ou distúrbios modulados pela inibição de mTOR.
Forma de Realização 1: Um composto de fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, como descrito aqui anteriormente.
Forma de Realização 2: Um composto de fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável
(!) em que R1 é selecionado do grupo que consiste em
em que R18 em cada ocorrência, representa, independentemente, fluoro ou metilo; m representa 0, 1, 2 ou 3; R19 e R20 independentemente representa hidrogénio ou flúor; R21 representa flúor; R22 em cada ocorrência, representa, independentemente, flúor, metóxi, hidroximetilo ou metoxicarbonilo; q representa 0, 1 ou 2 e r representa 0, 1, 2 ou 3 desde que q + r seja não 0; R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 e R9 independentemente representam hidrogénio, Ci-3alquilo ou fluoro-Ci_3alquilo; ou R3 e R6 em conjunto formam uma ponte metileno; ou R3 e R8 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R5 e R6 em conjunto formam uma ponte etileno. n e p independentemente representam 0, 1 ou 2; R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16 e R17 em cada ocorrência independentemente representam hidrogénio, Ci_3alquilo ou f luoro-Ci_3alquilo ou hidroxi-Ci_3alquilo; ou R11 e R16 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R13 e R14 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R14 e R15 em conjunto como átomo de carbono ao qual estão ligados, ligam-se para formar um anel tetrahidropiranilo; e Y representa 0, CHR23, CR24R25 ou NR26, em que R23 representa hidroxilo ou fluoro-Ci_3alquilo; ou R23 e R13, em conjunto como átomo de carbono ao qual estão ligados, are ligados para formar um anel tetrahidrofuranilo fundido; R24 e R25 representam independentemente hidrogénio ou halogénio; ou R24 e R25, em conjunto como átomo de carbono ao qual estão ligados, estão ligados para formar um anel tetrahidrofuranilo; e R26 representa Ci_3alquilo ou oxetanilo;
Forma de realização 3: um composto de acordo com a forma de realização 1 ou a forma de realização 2, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 representa
Forma de realização 4: um composto de acordo com a forma de realização 3, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que m representa 0.
Forma de realização 5: um composto de acordo com a forma de realização 1 ou a forma de realização 2, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 representa
Forma de realização 6: um composto de acordo com a forma de realização 5, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R19 e R20 ambos representam hidrogénio.
Forma de realização 7: um composto de acordo com a forma de realização 1 ou a forma de realização 2, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 representa
Forma de realização 8: um composto de acordo com a forma de realização 7, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que q representa 0 ou 1 e r representa 0, 1 ou 2.
Forma de realização 9: um composto de acordo com qualquer uma das formas de realização 1 a 8, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 e R9 representam, independentemente, hidrogénio ou metilo; ou R3 e R6 em conjunto formam uma ponte metileno; ou R3 e R8 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R5 e R6 em conjunto formam uma ponte etileno.
Forma de realização 10: um composto de acordo com qualquer uma das formas de realização 1 a 9, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que Y representa 0.
Forma de realização 11: um composto de acordo com qualquer uma das formas de realização 1 a 9, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que Y representa CHR23 ou CR24R25.
Forma de realização 12: um composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a forma de realização 1 que é selecionado de entre: 2.6- Bis-(3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il-9H- purina; 2-(3-Metil-morfolin-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-8- (lH-pirazol-3-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2- [1,4]oxazepan-4-il-9H-purina; 8-[4-(lH-Imidazol-2-il)-fenil]-2,6-bis-(3-metil-morf olin-4-il ) -9H-purina; 8-(6-Fluoro-lH-indol-4-il)-2-(3-metil-morfolin-4-il) -6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; {4-[2,6-Bis-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-lH-indol-6-il}-metanol; 2-(3-Metil-morfolin-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il-9H-purina; 2.6- Bis- (3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il-9H- purina; 2.6- Di-morfolin-4-il-8-piridin-2-il-9H-purina; 2.6- Bis-(3-metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol-3-il)-9H-purina; 2.6- Bis-(3-metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol-3-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(3-propil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol; 2- (3-Etil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol-4-il) -6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-metil-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(6-oxa-2-aza-spiro[3.5]non-2-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-oxetan-3-il-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(tetrahidro-furo[3,4-c]pirrol-5-il)-9H-purina; 2-(Hexahidro-furo[3,4-c]piridin-5-il)-8-(lH-indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-2-(3-isopropil-morfolin-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-trifluorometil-piperidin-l-il)-9H-purina; 2-(2,6-Dimetil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(7-oxa-l-aza-spiro[3.5]non-l-il)-9H-purina; {4-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol; {4-[8 - (lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol ; 5-[2,6-Bis-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-piridin-2-ilamina; 5-[2,6-Bis-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-piridin-2-ilamina; 5-[2,6-Bis-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-pirimidin-2-il-amina; 8-[4-(lH-Imidazol-2-il)-fenil]-2,6-bis-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(6-Metoxy-lH-indol-4-il)-2-(3-metil-morfolin-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; Éster metilo do ácido 4-[2,6-Bis-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-lH-indole-6-carboxílico; e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
Forma de realização 12: um composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a forma de realização 1 que é selecionado de entre: 2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il- 9H-purina; 2-((S)-3-Metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol-3-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2- [1,4]oxazepan-4-il-9H-purina; 8-[4-(lH-Imidazol-2-il)-fenil]-2,6-bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(6-Fluoro-lH-indol-4-il)-2-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; {4-[2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-lH-indol-6-il}-metanol; 2-((S)-3-Metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morf ol in- 4 -il) -8-piridin-2-il-9H-purina; 2.6- Bis-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il- 9H-purina; 2.6- Di-morfolin-4-il-8-piridin-2-il-9H-purina; 2.6- Bis-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol- 3-il)-9H-purina; 2.6- Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol- 3-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-((R)-3-propil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il) -9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol; 2-((R)-3-Etil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il) - 2-(4-metil-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(6-oxa-2-aza-spiro[3.5]non-2-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-oxetan-3-il-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(tetrahidro-furo[3,4-c]pirrol-5-il)-9H-purina; 2-(Hexahidro-furo[3,4-c]piridin-5-il)-8-(lH-indol- 4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-2-((R)-3-isopropil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-trifluorometil-piperidin-l-il)-9H-purina; 2-((2S,6R)-2,6-Dimetil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol- 4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(7-oxa-l-aza-spiro[3.5]non-l-il)-9H-purina; {(S)-4-[8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol; {(R)-4-[8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol; 5-[2,6-Bis-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-piridin-2-ilamina; 5-[2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-piridin-2-ilamina; 5- [2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il) - 9H-purin-8-il]-pirimidin-2-il-amina; 8-[4-(lH-Imidazol-2-il)-fenil]-2,6-bis-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(6-Metoxi-lH-indol-4-il)-2-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; Éster metilo do ácido 4-[2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-lH-indole-6-carboxílico; e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
Por causa de um ou mais do que um átomo de carbono assimétrico, o qual pode estar presente em um composto de fórmula (I), um composto correspondente de fórmula (I) pode existir na forma opticamente ativa pura ou na forma de uma mistura de isómeros ópticos, por exemplo, na forma de uma mistura racémica. Todos esses isómeros ópticos puros e todas as suas misturas, incluindo as misturas racémicas, fazem parte da presente invenção.
Dependendo da escolha dos materiais e procedimentos de partida, os compostos podem estar presentes sob a forma de um dos possíveis isómeros ou como misturas dos mesmos, por exemplo, como isómeros puros ópticos, ou como misturas de isómeros, tais como racematos e misturas diastereoisomericas, dependendo do número de átomos de carbono assimétricos. A presente invenção pretende incluir todos estes isómeros possíveis, incluindo misturas racémicas, misturas diastereoisomericas e formas opticamente puras. Isómeros (R) -e (S)- opticamente ativos podem ser preparados usando sintões quirais ou reagentes quirais, ou resolvidos usando técnicas convencionais. Se o composto contém uma ligação dupla, o substituinte pode ser da configuração E ou Z. Se o composto contém um cicloalquilo disubstituido, o substituinte cicloalquilo pode ter uma configuração cis ou trans. Quando um composto que compreende um ou mais centros quirais são desenhados aqui com a estereoquímica indicada na estrutura desenhada, então é pretendido o isómero óptico individual. Quando um composto que compreende um ou mais centros quirais é aqui desenhado sem a estereoquímica indicada na estrutura desenhada, então nenhum isómero óptico específico é pretendido e a estrutura química desenhada pode representar qualquer isómero óptico ou mistura de isómeros com essa estrutura, por exemplo uma mistura racémica ou diastereomérica.
Numa forma de realização, proporciona-se um composto dos Exemplos como um estereoisómero isolado, em que o composto tem um estereocentro e o estereoisómero está na configuração R.
Numa forma de realização, proporciona-se um composto dos Exemplos como um estereoisómero isolado, em que o composto tem um estereocentro e o estereoisómero está na configuração S.
Numa forma de realização, proporciona-se um composto dos Exemplos como um estereoisómero isolado, em que o composto tem dois estereocentros e o estereoisómero está na configuração R R.
Numa forma de realização, proporciona-se um composto dos Exemplos como um estereoisómero isolado, em que o composto tem dois estereocentros e o estereoisómero está na configuração R S.
Numa forma de realização, proporciona-se um composto dos Exemplos como um estereoisómero isolado, em que o composto tem dois estereocentros e o estereoisómero está na configuração S R.
Numa forma de realização, proporciona-se um composto dos Exemplos como um estereoisómero isolado, em que o composto tem dois estereocentros e o estereoisómero está na configuração S S.
Numa forma de realização, proporciona-se um composto dos Exemplos, em que o composto tem um ou dois estereocentros, como uma mistura racémica. É ainda possível que os intermediários e compostos da presente invenção possam existir em diferentes formas tautoméricas e todas essas formas estão englobadas dentro do âmbito da invenção. 0 termo "tautómero" ou "forma tautomérica" refere-se a isómeros estruturais de energias diferentes que são interconvertiveis através de uma barreira de baixa energia. Por exemplo, tautómeros de protões (também conhecidos como tautómeros prototrópicos) incluem interconversões via migração de um protão, tais como isomerizações ceto-enol e imina-enamina. Um exemplo especifico de um tautómero de protões é a porção imidazole em que o protão pode migrar entre os dois azotos do anel. Tautómeros de valência incluem interconversões por reorganização de alguns dos eletrões de ligação.
Os compostos da presente invenção podem ser capazes de formar sais de ácidos em virtude da presença de grupos amino ou de grupos similares a estes.
Numa forma de realização, a invenção refere-se a um composto da fórmula (I), como definido aqui, na forma livre. Numa forma de realização, a invenção refere-se a um composto da fórmula (I), como definido aqui, na forma de sal. Numa forma de realização, a invenção refere-se a um composto da fórmula (I), como definido aqui, naforma de sal de adição ácido. Em ainda uma outra forma de realização, a invenção refere-se a um composto da fórmula (I), tal como aqui definido, na forma de sal farmaceuticamente aceitável. Em ainda uma outra forma de realização, a invenção refere-se a um composto da fórmula (I), tal como aqui definido, na forma de sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável. Em ainda uma outra forma de realização, a invenção refere-se a um dos compostos dos Exemplos na forma livre. Em ainda uma outra forma de realização, a invenção refere-se a qualquer um dos compostos dos Exemplos na forma de sal. Em ainda uma outra forma de realização, a invenção refere-se a qualquer um dos compostos dos Exemplos na forma de sal de adição ácido. Em ainda uma outra forma de realização, a invenção refere-se a qualquer um dos compostos dos Exemplos na forma de sal farmaceuticamente aceitável. Em ainda uma outra forma de realização, a invenção refere-se a qualquer um dos compostos dos Exemplos na forma de sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com ácidos inorgânicos e ácidos orgânicos, por exemplo, acetato, aspartato, benzoato, besilato, brometo/hidrobrometo, bicarbonato/carbonato, bissulfato/sulfato, canforsulfonato, cloreto/hidrocloreto, cloroteofilina, citrato, etanodissulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hipurato, hidroiodeto/iodeto, isetionato, lactato, lactobionato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/ hidrogenofosfato/di-hidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, estearato, succinato, sulfossalicilato, tartarato, tosilato e sais de trifluoroacetato.
Os ácidos inorgânicos a partir dos quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, e outros semelhantes.
Os ácidos orgânicos a partir dos quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido mandélico, ácido metanossulfónico, ácido etanossulfónico, ácido toluenossulfónico, ácido sulfossalicílico, e semelhantes.
Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir de uma porção ácida, por métodos químicos convencionais. Geralmente, esses sais podem ser preparados fazendo reagir as formas de base livre destes compostos com uma quantidade estequiométrica do ácido apropriado. Tais reações são tipicamente realizadas em água ou num solvente orgânico, ou numa mistura dos dois. Geralmente, a utilização de meios não aquosos como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol e acetonitrilo é desejável, sempre que possível. Listas de sais adequados adicionais podem ser encontradas, por exemplo, em "Remington's Pharmaceutical Sciences", 20a Ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa, (1985); e em "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties,
Selection, and Use" de Stahl e Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemanha, 2002) .
Além disso, os compostos da presente invenção, incluindo os seus sais, podem também ser obtidos na forma dos seus hidratos, ou incluem outros solventes usados para a sua cristalização. Os compostos da presente invenção podem inerentemente ou por conceção formar solvatos com solventes farmaceuticamente aceitáveis (incluindo a água); desta forma pretende-se que a invenção inclua tanto as formas solvatadas como não solvatadas. 0 termo "solvato" refere-se a um complexo molecular de um composto da presente invenção (incluindo seus sais farmaceuticamente aceitáveis) com uma ou mais moléculas de solvente. Tais moléculas de solvente são os correntemente utilizados na técnica farmacêutica, os quais são conhecidos como sendo inócuos para o recipiente, por exemplo, água, etanol, e outros semelhantes. O termo "hidrato" refere-se ao complexo onde a molécula de solvente é a água.
Os compostos da invenção, isto é, compostos de fórmula (I) que contêm grupos capazes de actuar como dadores e/ou aceitador de ligações de hidrogénio podem ser capazes de formar co-cristais com formadores de co-cristal adequados. Estes co-cristais podem ser preparados a partir de compostos de fórmula (I) por procedimentos de formação de co-cristais conhecidos. Tais procedimentos incluem trituração, aquecimento, co-sublimação, co-fusão, ou contacto em solução de compostos de fórmula (I) com o formador de co-cristal sob condições de cristalização e isolando os co-cristais assim formados. Formadores de co-cristal adequados incluem aqueles descritos em WO 2004/078163. Por conseguinte, a invenção proporciona ainda co-cristais que compreendem um composto de fórmula (I).
Os compostos da presente invenção, incluindo os seus sais, hidratos e solvatos, podem inerentemente ou por conceção formar polimorfos.
Qualquer fórmula aqui apresentada também se destina a representar as formas não marcadas, bem como as formas isotopicamente marcadas dos compostos. Os compostos marcados isotopicamente tem estruturas representadas pelas fórmulas aqui indicadas, excepto que um ou mais átomos são substituídos por um átomo com uma massa atómica ou número de massa selecionado. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos da invenção incluem isótopos de hidrogénio, carbono, azoto, oxigénio, fósforo, flúor e cloro, tais como 2H, 3H, HC, 13C, 14C, 15N, 18F 31P, 32P, 35S, 36C1, 125I, respectivamente. A invenção inclui vários compostos isotopicamente marcados como aqui definido, por exemplo aqueles nos quais estão presentes isótopos radioativos, tais como 3H e 14C, ou aqueles nos quais estão presentes isótopos não radioativos, tais como 2H e 13C. Tais compostos marcados isotopicamente são úteis em estudos metabólicos (com 14C), estudos cinéticos de reação (com, por exemplo 2H ou 3H) , técnicas de deteção ou de imagem, como tomografia por emissão de positrões (PET) ou tomografia computadorizada por emissão de fotão único (SPECT) incluindo ensaios de distribuição de fármacos ou substrato de tecido, ou no tratamento radioativo de doentes. Em particular, um 18F ou um composto marcado pode ser particularmente desejável para os estudos de PET ou SPECT. Os compostos marcados isotopicamente de fórmula (I) podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas dos especialistas na técnica ou por processos análogos aos descritos nos Exemplos e Preparações anexos utilizando reagentes isotopicamente marcados adequados em vez do reagente não marcado anteriormente empregue.
Além disso, a substituição com isótopos mais pesados, em particular deutério (isto é, 2H ou D) pode proporcionar certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, por exemplo maior meia-vida in vivo ou requisitos de dosagem reduzidos ou uma melhoria no índice terapêutico. Entende-se que o deutério, neste contexto, é considerado como um substituinte de um composto da fórmula (I) . A concentração de um tal isótopo mais pesado, especificamente deutério, pode ser definida pelo factor de enriquecimento isotópico. 0 termo "factor de enriquecimento isotópico", tal como aqui utilizado, significa a proporção entre a abundância isotópica e a abundância natural de um isótopo especificado. Se um substituinte num composto da presente invenção é indicado como deutério, tal composto tem um factor de enriquecimento isotópico para cada átomo de deutério designado de pelo menos 3500 (52,5% incorporação de deutério em cada átomo de deutério designado), pelo menos 4000 (60% de deutério de incorporação), pelo menos 4500 (67,5% de incorporação de deutério), pelo menos 5000 (75% de incorporação de deutério), pelo menos 5500 (82,5% de incorporação de deutério), pelo menos 6000 (90% de incorporação de deutério), pelo menos 6333,3 (95% de deutério de incorporação), pelo menos, 6466,7 (97% de incorporação de deutério), pelo menos 6600 (99% de incorporação de deutério), ou, pelo menos 6633,3 (99,5% de incorporação de deutério).
Solvatos farmaceuticamente aceitáveis, de acordo com a invenção incluem aqueles em que o solvente de cristalização pode ser isotopicamente substituído, por exemplo D2O, d6_ acetona, d6-DMSO.
Os compostos da presente invenção podem ser sintetizados por vias sintéticas que incluem processos análogos aos conhecidos nas artes químicas, particularmente à luz da descrição aqui contida. Os materiais de partida estão geralmente disponíveis em fontes comerciais, tais como Sigma-Aldrich, ou são prontamente preparados utilizando métodos bem conhecidos dos especialistas na técnica (por exemplo, preparados pelos métodos geralmente descritos em Louis F. Fieser e Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-19,
Wiley, Nova Iorque (ed. 1967-1999), ou Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin, incluindo suplementos (também disponível através da base de dados Beilstein online)).
Num aspecto adicional, a invenção refere-se a um processo para a preparação de um composto da fórmula (I), na forma livre ou na forma de sal, que compreende (a) a reação de um composto de fórmula (II)
M ca em que Y, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, r9, rio, rii, r12, R13, R14, R15, R16, R17, n e p são como definido para a fórmula (I), com um composto de fórmula (III), (IV) ou (V)
em que R1 é como definido para a fórmula (I), ou (b) a reação de um composto de fórmula (VI)
(VI) em que Y, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17,Hal representa halogénio, por exemplo cloro, com um composto de fórmula (VII)
em que Y, R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16, R17, n e p são como definido para a fórmula (I), e (c) a redução opcional, a oxidação ou outra funcionalização do composto resultante, (d) a clivagem de qualquer grupo(s) protector(es) presente(s) e (e) a recuperação do composto de fórmula (I) assim obtido na forma livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitável, (f) a separação opcional de misturas de isómeros opticamente ativos nas suas formas isoméricas opticamente ativas individuais.
As reações acima podem ser efectuadas de acordo com métodos convencionais. Por exemplo, a reação descrita no passo (a) acima pode ser levada a cabo na presença de um catalisador de metal adequado, por exemplo, Pd(PPh3)4 ou PdCl2(dppf), opcionalmente uma base adequada, por exemplo fluoreto de césio, um adequado solvente, por exemplo tolueno ou NEt3, acetonitrilo/água, e a uma temperatura adequada, por exemplo 90 a 150°C. A reação descrita no passo (b) acima pode ser levada a cabo na presença de uma base adequada, por exemplo DIPEA, num solvente adequado, por exemplo 1-butanol, e a uma temperatura adequada, por exemplo 70 a 90°C. A redução adicional opcional, a oxidação ou outra funcionalização dos compostos de fórmula (I) pode ser realizada de acordo com métodos bem conhecidos dos peritos na arte.
No âmbito deste texto, apenas um grupo facilmente removível que não seja um constituinte do produto final desejado particular dos compostos da presente invenção é designado um "grupo protector", a menos que o contexto indique o contrário. A proteção de grupos funcionais por tais grupos protectores, os próprios grupos protectores e as suas reações de clivagem estão descritos por exemplo em trabalhos de referência padrão, tais como J. F. W. McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, Londres e Nova Iorque 1973, em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Terceira edição, Wiley, Nova Iorque 1999, em "The PeptidesVolume 3 (editores: E. Gross e J. Meienhofer), Academic Press, Londres e Nova Iorque 1981, em "Methoden der organischen Chemie" (Métodos de Quimoca Orgânica), Houben Weyl, 4a edição, Volume 15/1, Georg Thieme Verlag, Estugarda 1974, e em H.-D. Jakubke e H. Jeschkeit, "Aminosâuren, Peptide, Proteine" (Aminoácidos, Péptideos, Proteínas) , Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, e Basel 1982. Uma característica dos grupos protetores é que podem ser removidos prontamente (isto é, sem a ocorrência de reações secundárias indesejadas) por exemplo por solvólise, redução, fotólise ou alternativamente sob condições fisiológicas (por exemplo, por clivagem enzimática).
Os sais dos compostos da presente invenção com pelo menos um grupo formador de sal podem ser preparados de uma forma conhecida para os especialistas na técnica. Por exemplo, sais de adição ácidos dos compostos do presente invento são obtidos do modo habitual, por exemplo por tratamento dos compostos com um ácido ou um reagente de permuta de anião adequado.
Os sais podem ser convertidos nos compostos livres de acordo com métodos conhecidos dos especialistas na técnica. Sais de adição ácidos podem ser convertidos, por exemplo, por tratamento com um agente básico adequado.
Quaisquer misturas resultantes de isómeros podem ser separadas na base das diferenças fisico-quimicas dos constituintes, nos isómeros geométricos ou ópticos puros ou substancialmente puros, diastereómeros, racematos, por exemplo, por cromatografia e/ou cristalização fracionada.
Para aqueles compostos que contêm um átomo de carbono assimétrico, os compostos existem em formas isoméricas individuais opticamente ativas ou como suas misturas, por exemplo como misturas racémicas ou diastereoméricas. As misturas diastereoméricas podem ser separadas nos seus diastereómeros individuais na base das suas diferenças físico-químicas por métodos bem conhecidos dos peritos na arte, tais como por cromatografia e/ou cristalização fracionada. Os enantiómeros podem ser separados convertendo a mistura enantiomérica numa mistura diastereomérica por reação com um composto opticamente ativo apropriado (por exemplo, quiral auxiliar tal como um álcool quiral ou cloreto de ácido de Mosher) , separando os diastereoisómeros e convertendo (por exemplo, hidrolisando) os diastereoisómeros individuais nos enantiómeros puros correspondentes. Os enantiómeros podem também ser separados por utilização de uma coluna de HPLC quiral comercialmente disponível A invenção inclui ainda qualquer variante dos presentes processos, nos quais os componentes da reação são usados na forma dos seus sais ou um material opticamente puro. Os compostos da invenção e intermediários podem também ser convertidos uns nos outros de acordo com métodos geralmente conhecidos dos peritos na arte.
Para fins ilustrativos, os esquemas de reação descritos a seguir proporcionam potenciais vias para a síntese dos compostos da presente invenção, bem como intermediários chave. Para uma descrição mais detalhada dos passos de reação individuais, ver a seção de Exemplos abaixo. Os especialistas na técnica apreciarão que outras vias de síntese podem ser utilizadas para sintetizar os compostos da invenção. Embora os materiais de partida e reagentes específicos sejam descritos nos esquemas e discutidos abaixo, outros materiais de partida e reagentes podem ser facilmente utilizados em substituição para proporcionar uma variedade de derivados e/ou condições de reação. Alem disso, muitos dos compostos preparados pelos métodos descritos abaixo podem ser ainda modificados, à luz da presente descrição, utilizando a química convencional bem conhecida dos peritos na arte.
Esquema 1. Procedimento Geral 1 para a síntese de compostos purina
Geralmente, os compostos de fórmula (I) podem ser preparados de acordo com o Esquema 1, em quatro passos, a partir de material disponível comercialmente (VIII). Como para os passos individuais no esquema mostrado acima, o primeiro passo envolve a preparação do intermediário (X) pelo deslocamento de cloro com um nucleófilo tal como morfolino funcionalizado intermediário (IX). 0 intermediário (XI) pode ser preparado por reação do intermediário (X) com o intermediário (VII) na presença de uma base adequada tal como di-isopropiletilamina, solvente tal como dimetilacetamida e calor. 0 passo três envolve a bromação do intermediário (XI) no intermediário (II) utilizando bromo num solvente apropriado tal como diclorometano. Os compostos alvo de fórmula (I) podem ser preparados por acoplamento do intermediário (II) com uma variedade de ácidos ou ésteres borónicos de estruturas (III) ou (IV), disponíveis comercialmente ou sintetizados, ou derivados de tributilestanilo de fórmula (V), utilizando catalisadores de metal na maioria das vezes exemplificados por complexos de paládio disponíveis comercialmente.
Esquema 2. Procedimento Geral 2 para a síntese de compostos purina
Geralmente, os compostos de fórmula (I) podem ser preparados de acordo com o Esquema 2, em quatro passos, a partir de material disponível comercialmente (VIII). Como para os passos individuais no esquema mostrado acima, o primeiro passo envolve a preparação do intermediário (X) pelo deslocamento de cloro com um nucleófilo tal como morfolino funcionalizado intermediário (IX). 0 intermediário (XII) pode ser preparado por bromação do intermediário (X) na presença de um solvente apropriado tal como diclorometano. 0 passo três envolve o acoplamento do intermediário (XII) com uma variedade de ácidos ou ésteres borónicos de estruturas (III) ou (IV), disponíveis comercialmente ou sintetizados, ou derivados de tributilestanilo de fórmula (V) , utilizando catalisadores de metal na maioria das vezes exemplificados por complexos de paládio disponíveis comercialmente. Os compostos alvo de fórmula (I) podem ser preparados por acoplamento do intermediário (XIII) com um intermediário (VII) morfolino funcionalizado na presença de uma base adequada tal como di-isopropiletilamina, solvente tal como dimetilacetamida e calor ou sob irradiação de microondas.
Esquema 3. Procedimento Geral para a síntese de ésteres borónicos
Ésteres borónicos de fórmula (IV) pode ser preparados de acordo com o Esquema 3 em um passo em que R1 é tal como descrito na fórmula (I). 0 passo envolve a reação de brometo de arilo substituído ou hetero brometo de arilo de fórmula (XIV) com bis(pinacolato)diboro, na presença de um catalisador de paládio disponível comercialmente, num solvente tal como dioxano, e a uma temperatura variando de 80°C a 120°C. A invenção inclui ainda qualquer variante dos presentes processos, nos quais os componentes da reação são usados na forma dos seus sais ou um material opticamente puro. Os compostos da invenção e intermediários podem também ser convertidos uns nos outros de acordo com métodos geralmente conhecidos dos peritos na arte.
Os compostos da fórmula (I), na forma livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitávelem seguida frequentemente referidos como "agentes da invenção", exibem propriedades farmacológicas valiosas quando testados in vitro, e podem, portanto, ser úteis em medicamentos, na terapia ou para utilização como produtos químicos de pesquisa, por exemplo, como compostos ferramenta.
Os agentes da invenção são inibidores de mTOR. As propriedades inibidoras de um agente da invenção em relação a mTOR podem ser avaliadas nos ensaios como descrito a seguir.
Ensaios Biológicos
Teste 1: Ensaio de ligação mTOR ATP baseado em TR-FRET para mTOR recombinante humana. 1. Diluições em série de 8 pontos dos compostos (10 mM) são realizadas em 90% de DMSO em "placas mestras" de 384 cavidades e 50 nL é transferido para placas de ensaio de 384 cavidades (poliestireno branco, pequeno volume, Matrix/Thermo Scientific Cat. N.° #4365). 2. O volume final do ensaio é 10 pL e a ordem de adicionamento é a seguinte: 50 nL de diluição de compostos; 5 pL de uma mistura de GST-mTOR e Europium anti-GST anticorpo com ou sem oinibidor Pl3K/mTOR PI-103 (3-(4-(4-morfolinil)pirido[3',2':4,5]furo[3,2-d]pirimidin-2-il)fenol, Calbiochem); 5 pL de marcador-314.
Incubado durante 60 minutos à temperatura ambiente. TR-FRET medido num leitor Biotek Synergy2 a:
Excitação 340nm/emissão 665nm
Excitação 340nm/emissão 620nm O tampão de ensaio consiste em 50 mM HEPES pH 7,5, 5 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 0,01 % Pluronic F-127. Marcador-314 (inibidor competitivo de quinase marcado com ATP marcado com Alexa Fluor® 647- Cat. N.° PV6087), Europium anti-anticorpo GST (Cat. N.° PV5594) e mTOR humano truncado marcadoa com GST N-terminalmente (FRAPl) (Cat. N.° PV4754) estão disponíveis em Invitrogen.
Utilizam-se as concentrações finais: 3 nM GST-mTOR; 1 nM Europium anti-anticorpo GST; + /- 10 μΜ PI-103; e 10 nM marcador-314.
As concentrações finais de compostos diluídos são 9091; 2730; 910; 273; 91; 27; 9; e 3 nM. A concentração final de DMSO é de 0,45%. São utilizados os seguintes controlos:
Sinal alto: veículo solvente, GST-mTOR, Eu-anti-anticorpo-GST, marcador-314;
Sinal baixo: veículo solvente, GST-mTOR, Eu-anti-anticorpo-GST, PI-103, marcador-314; 3. As determinações IC50 podem ser realizadas como se segue: O sinal em bruto a 340/665 é dividido pelo sinal em bruto a 340/620 para fornecer uma proporção de emissão. A proporção de emissão é convertida numa percentagem de inibição para a concentração de cada composto. Os valores de IC5o são calculados por ajuste de uma curva sigmoidal de resposta a uma dose num gráfico de leitura de ensaio sobre a concentração do composto. Todos os ajustes e análises são realizados com o programa XLfit4 (ID Business Solutions, Guildford, Reino Unido).
Teste 2: Ensaior mTOR celular.
Um ensaio à base de células (formato de 384 cavidades) foi desenvolvido para a determinação dos efeitos de compostos sobre a atividade da mTOR quinase celular em células MEFs (fibrobrastos de embrião de ratinho) derivadas de ratinhos sem TSC1 (complexo esclerose tuberosa 1) um supressor potente da atividade da quinase mTOR. Devido à falta de TSC1, a quinase mTOR é constitutivamente ativada, resultando na fosforilação permanentemente melhorada de Thr 389 de quinase S6 1 (S6K1) que é um dos alvos a jusante de mTOR (Kwiatkowski D. J., Zhang H., Bandura J. L. e outros. Um modelo de rato com TSC1 revela letalidade dependente de sexo de hemangiomas de fígado, e aumento da regulação da atividade quinase p70S6 em células nulas TSC. Hum.Mol.Gen. 11: 525-534).
Dia 0:
Inoculação das células: TSCl-/-MEFs subconfluentes são cultivadas em DMEM de alto teor de glucose suplementado com com 10% de FCS inativado pelo calor e 2% de HEPES. mTOR é constitutivamente ativa nestas células que conduzem à fosforilação de permanentemente melhorada de quinase p70S6. As células são colhidas por tripsinização, ressuspensas em meio de crescimento, contadas e ajustadas para 133,333 células/ml. 30 μΐ são adicionados por cavidade a uma placa de 384 cavidades utilizando um instrumento Multidrop (Thermo Scientific), resultando em 4000 células/cavidade. As placas são incubadas a 37°C/5% de C02 durante 20 horas (para permitir a deposição e a aderência à superfície).
Dia 1:
Tratamento do composto: Oito diluições em série de 3 vezes de compostos-teste (começando em 1,8 mm) são preparados em 90% de DMSO e compilados em placas mestre de 384 cavidades (Greiner). Um inibidor pan-pPl3K/mTOR (0,8 mM de 8—(6— metoxipiridin-3-il)-3-metil-l-(4-piperazin-l-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona em 90% de DMSO) é adicionado às cavidades para o controlo inferior. 90% de DMSO é adicionado às cavidades para os controlos superiores.
Os compostos são fornecidos como disparos 250 nl (Hummingbird) em microplacas de 384 cavidades de polipropileno (placas de composto) . 50 μΐ de meio de crescimento é adicionado às placas de composto (diluição 1:200) com o Multidrop. Depois de agitação (1 min a 2000 rpm), 10 μΐ da primeira diluição são então transferidos para a placa de células com uma pipeta Matrix Plate Mate 2x3 (diluição final 1:4).
Depois de 1 hora de tratamento, o meio é removido da placa e 20 μΐ de tampão de Use Surefire são adicionados por cavidade com o Multidrop.
Ensaio Surefire: Os lisados celulares são congelados durante 15 minutos, descongelados com agitação e transferidos para o Proxiplate de 384 cavidades experimental (5 μΐ/cavidade) para o ensaio Surefire P-p70S6K (T389) (Perkin Elmer #TGR70S50). A mistura é composta pelo tampão de reação (contendo o anticorpo específico), o tampão de ativação e os grânulos aceitadoros (40 vol, 10 vol, 1 vol, respectivamente) . 5 μΐ por poço são adicionados aos lisados com um Zephyr® SPE Workstation (Caliper Life Sciences) e incubados durante 2 horas com agitação à temperatura ambiente. Após este período de incubação, a segunda mistura de tampão de diluição e grânulos doadores (20 vol e 1 vol, respectivamente) é adicionada à placa com o mesmo instrumento (2 μΐ/cavidade). Após 2 horas, a placa pode ser lido com um Envision® Multilabel Reader (Perkin Elmer) . Uma vez que os grânulos são sensíveis à luz, a sua transferência e incubação são executadas num quarto escuro (luz verde).
Dia 2 :
Análise de dados: Os dados em bruto são usados para gerar curvas de resposta de dose para os compostos de teste e os valores de IC5o calculados.
Teste 3: Ensaio de Autofagia
Autofagia é uma via catabólica que degrada citosol em bruto em compartimentos lisossomais que permitem que aminoácidos e ácidos gordos sejam reciclado. Um dos principais reguladores da autofagia é o alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR), uma serina/treonina quinase conservada que suprime a iniciação do processo autofágico quando os nutrientes, factores de crescimento e de energia estão disponíveis. Para quantificar a indução de autofagia por inibidores de mTOR, usamos um repórter mCherry-GFP-LC3 que é passível de entrega retroviral em células de mamíferos, expressão estável e análise por microscopia de fluorescência.
Repórter mCherry-GFP-LC3 A sequência de aminoácidos da construção mCherry-GFP-LC3 é mostrada abaixo (SEQ ID NO: 1). A sequência mCherry está sublinhada, a sequência GFP está em negrito e sequência LC3A está numa caixa.
Descrito em seguida está um algoritmo de protocolo de imagem e reconhecimento de imagem para visualizar e medir as mudanças na via autofágica.
Quantificação de autofagia utilizando imagiologia e análise de alto teor 1. Dia 0: Plaqueamento de células As células subconfluentes H$ mCherry-GFP-LC3 são colhidas por tripsinização, ressuspensas em meio de crescimento, contadas (células H4: Linha de células neuroglioma humano (ATCC)). Uma suspensão de células de 66 000 células/ml é preparada e 30 μΐ são adicionados às cavidades de uma placa de 384 cavidades com uma pipeta de canais múltiplos electrónica. Isto resulta em 2000 células/cavidade serem plaqueadas. As placas de células são centrifugadas brevemente e colocadas a 37°C e 5% de CO2. 2. Dia 1: Tratamento do composto: Respostas dose do composto são preparadas em DMSO. As respostas dose são em seguida diluídas a 1:50 em meio. 10 μΐ do composto diluído são adicionados a 30 μΐ de células, obtendo-se uma diluição final de 1:200 do composto original e final de 0,5% de DMSO. Os tratamentos-composto são realizados em triplicados. As placas de 384 cavidades são colocadas a 37°C e 5% de C02. O tratamento composto é realizado durante 16-18 h (ver nota 1). 3. Dia 2: Fixação de células. As células são fixadas por adição de 10 pL/cavidade de fixador de Mirsky 5x concentrado suplementado com 25 pg/mL de Hoechst33342. Isto resulta num volume total de 50 pL por cavidade e uma concentração de fixador de Mirsky lx e 5 pg/mL de Hoechst33342 . A placa de 384 cavidades é brevemente centrifugada e incubada durante 1 h à temperatura ambiente. As células são então lavadas com um lavador de placas de 384 cavidades, usando um protocolo que aspira o volume para 10 pL/cavidade antes de dispensar 100 pL/cavidade de TBS IX. A aspiração e passos de distribuição são repetidos 4 vezes e um volume final de 100 pL/cavidade é deixado. A placa é vedada usando uma lâmina PCR adesiva. 4. Imagens. 0 fundo da placa é limpo com etanol a 70% e, em seguida, feitas imagens usando o microscópio de fluorescência automatizada Incell 1000. É utilizada ampliação de 20x e 4 diferentes áreas (campos) são gravadas por cavidade, isso normalmente capta um total de cerca de 400 células por cavidade. As imagens Hoechst33342 são adquiridas usando uma excitação de 360 nm (filtro de D360_40x) , uma emissão de 460 nm (filtro de HQ460_40M) e um tempo de exposição de 150 ms. As imagens GFP são adquiridas usando uma excitação de 475 nm (filtro de S475_20x), uma emissão de 535 nm (filtro de HQ535 50M) e um tempo de exposição de 1 s. As imagens mCherry são adquiridas usando uma excitação de 535 nm (filtro de HQ535 50x) , uma emissão de 620 nm (filtro de HQ620_60M) e um tempo de exposição de 1 s. Um espelho de passagem de banda quádrupla é usado para todas as imagens. 5. Análise das imagens. É usado o software Incell Analysis para analisar as imagens usando o algoritmo Multi Target Analysis. Em primeiro lugar, os núcleos são detectados na imagem Hoechst33342 usando segmentação Top-Hat e uma área nuclear minima de 50pm2. As células são definidas utilizando um colar de 10 pm em torno dos núcleos. Em segundo lugar, os pontos (organelas) são identificados na imagem mCherry no interior das células utilizando segmentação multi-top-hat. Em terceiro lugar, a máscara de pontos mCherry é transferida para a imagem de GFP. Em quarto lugar, a intensidade de fluorescência de GFP no interior da máscara de pontos mCherry é medida (intensidade de referência). 6. 0 parâmetro 1organelas' reflete os pontos positivos-mCherry do repórter mCherry-GFP-LC3 e é usado para calcular 'LC3 pontos/célula'. Para este efeito, o número de organelos é calculado por célula e em média sobre todas as células de uma determinada cavidade (média por base de célula). Os números de pontos LC3 mCherry-positivos (eixo y) em função de valores de dose-resposta do composto (eixo x) e os valores de EC50 são calculados para cada composto. Os valores de EC50 representam potência do composto em termos de ativação da autofagia (por exemplo, aumento na contagem de pontos LC3 mCherry-positivos).
Notas 1. Modulação de autofagia e redistribuição de mCherry-GFP-LC3 já pode ser observada depois de um tempo de tratamento com o composto de 3-4 h. No entanto, os efeitos mais robustos são vistos com 16-18 h de tempo de tratamento.
Os compostos dos Exemplos apresentaram os valores IC50 apresentados na Tabela 1 abaixo, quando testado nos ensaios acima.
Tabela 1
Tal como indicado pelos resultados dos ensaios descritos aqui anteriormente, os compostos da presente invenção podem ser úteis para o tratamento de doenças, condições e distúrbios modulados pela inibição da enzima mTOR; por conseguinte, os compostos da presente invenção (incluindo as composições e processos aqui utilizados) podem ser utilizados no fabrico de um medicamento para as aplicações terapêuticas aqui descritas. Assim, uma outra forma de realização da presente invenção é uma composição farmacêutica compreendendo um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável.
Uma formulação típica é preparada misturando um composto da presente invenção e um veículo, diluente ou excipiente. Os veículos adequados, diluentes e excipientes são bem conhecidos dos peritos na arte e incluem materiais tais como hidratos de carbono, ceras, solúveis em água e/ou polímeros dilatáveis, materiais hidrofílicos ou hidrofóbicos, gelatina, óleos, solventes, água e similares. 0 veículo, diluente ou excipiente particular utilizado dependerá dos meios e finalidade para a qual está a ser aplicadas o composto da presente invenção. Os solventes são geralmente selecionados com base em solventes reconhecidos por peritos na arte como seguros para administração a um mamífero. Em geral, os solventes seguros são solventes aquosos não-tóxicos tais como água e outros solventes não-tóxicos que são solúveis ou miscíveis em água. Os solventes aquosos adequados incluem água, etanol, propileno glicol, polietileno glicóis (por exemplo, PEG400, PEG300), etc. e suas misturas. As formulações podem também incluir um ou mais tampões, agentes estabilizantes, tensioativos, agentes molhantes, agentes lubrificantes, emulsionantes, agentes de suspensão, conservantes, antioxidantes, agentes opacificantes, deslizantes, auxiliares de processamento, corantes, edulcorantes, agentes perfumantes, agentes aromatizantes e outros conhecidos aditivos para proporcionar uma apresentação elegante do fármaco (isto é, um composto da presente invenção ou composição farmacêutica do mesmo) ou ajudar no fabrico do produto farmacêutico (ou seja, medicamento).
As formulações podem ser preparadas usando processos convencionais de dissolução e mistura. Por exemplo, o fármaco em massa (isto é, o composto da presente invenção ou forma estabilizada do composto (por exemplo, complexo com um derivado de ciclodextrina ou outro agente de complexação conhecido)) é dissolvido num solvente adequado na presença de um ou mais excipientes. 0 composto da presente invenção é tipicamente formulado em formas de dosagem farmacêuticas para proporcionar uma dosagem facilmente controlável do fármaco e para dar ao paciente um produto elegante e facilmente manuseável. A composição farmacêutica (ou formulação) para aplicação pode ser embalada numa variedade de formas, dependendo do método utilizado para administrar o fármaco. Geralmente, um artigo para distribuição inclui um recipiente tendo depositada a formulação farmacêutica numa forma adequada. Os recipientes adequados são bem conhecidos dos peritos na arte e incluem materiais tais como garrafas (de plástico e vidro), saquetas, ampolas, sacos de plástico, cilindros de metal, e semelhantes. 0 recipiente pode também incluir uma tampa à prova de violação para impedir o acesso indiscreto ao conteúdo da embalagem. Além disso, o recipiente tem um rótulo que descreve o conteúdo do recipiente. A etiqueta também inclui os avisos apropriados.
Numa forma de realização, a invenção diz respeito ao tratamento de doenças proliferativas celulares, tais como tumor e/ou crescimento celular canceroso mediado por mTOR. As doenças podem incluir aquelas que mostram a sobre-expressão ou amplificação de alfa PI3K, Rheb, mutação somática de PIK3CA ou mutações da linha germinativa ou de mutação somática de PTEN, TSC1, TSC2, ou mutações e translocação de p85a que servem para sobre-regular o complexo p85-pll0. Em particular, os compostos são úteis no tratamento de cancros humanos ou animais (por exemplo, murinos), incluindo, por exemplo, sarcoma; do pulmão; brônquio; próstata; de mama (incluindo cancros de mama esporádicos e pessoas que sofrem de doença de Cowden); pâncreas; cancro gastrointestinal; cólon; reto; carcinoma do cólon; adenoma colorrectal; tiróide; fígado; dueto biliar intra-hepático; hepatocelular; glândula adrenal; estômago; gástrico; glioma; glioblastoma; endometrial; melanoma; rim; pelve renal; bexiga urinária; corpo uterino; colo uterino; vagina; ovário; mieloma múltiplo; esófago; leucemia; leucemia mielogénica aguda; leucemia mielóide crónica; leucemia linfocítica; leucemia mielóide; cérebro; carcinoma do cérebro; cavidade oral e faringe; laringe; intestino delgado; linfoma não-Hodgkin; melanoma; adenoma do cólon das vilosidades; neoplasia; neoplasia de carácter epitelial; linfomas; carcinoma mamário; carcinoma de células basais; carcinoma de células escamosas; queratose actínica; doenças tumorais, incluindo tumores sólidos; tumor do pescoço ou cabeça; policitemia vera; trombocitemia essencial; mielofibrose com metaplasia mielóide; e doença de Waldenstrom.
Em outras formas de realização, a doença ou distúrbio é selecionado de entre o grupo consistindo de: policitemia vera, trombocitemia essencial, mielofibrose com metaplasia mielóide, asma, COPD, ARDS, síndroma de Loffler, pneumonia eosinofílica, infestação de parasitas (em particular metazoário) (incluindo eosinofilia tropical), aspergilose broncopulmonar, poliarterite nodosa (incluindo síndroma de Churg-Strauss) , granuloma eosinofílico, doenças relacionadas com eosinófilos que afectam as vias aéreas ocasionadas por reação a fármacos, psoríase, dermatite de contacto, dermatite atópica, alopecia areata, eritema multiforme, dermatite herpetiforme, escleroderma, vitiligo, angeíte de hipersensibilidade, urticária, penfigóide bolhoso, lúpus eritematoso, pênfigo, epidermólise bolhosa adquirida, distúrbios hematologicos auto-imunes (por exemplo anemia hemolítica, anemia aplástica, anemia pura dos glóbulos vermelhos e trombocitopenia idiopática), lúpus eritematoso sistémico, policondrite, escleroderma, granulomatose de Wegener, dermatomiosite, hepatite ativa crónica, miastenia gravis, síndroma de Steven-Johnson, psilose idiopática, doença intestinal inflamatória autoimune (por exemplo, colite ulcerativa e doença de Crohn), oftalmopatia endócrina, doença de Grave, sarcoidose, alveolite, pneumonite de hipersensibilidade crónica, esclerose múltipla, cirrose biliar primária, uveite (anterior e posterior), fibrose pulmonar intersticial, artrite psoriática, glomerulonefrite, doenças cardiovasculares, aterosclerose, hipertensão, trombose venosa profunda, acidente vascular cerebral, enfarte do miocárdio, angina instável, tromboembolismo, embolismo pulmonar, doenças trombolíticos, isquemia arterial aguda, oclusões trombóticas periféricas, e doença arterial coronária, lesões de reperfusão, retinopatia, tal como retinopatia diabética ou retinopatia induzida por oxigénio hiperbárico, e condições caracterizadas por pressão intra-ocular elevada ou secreção de humor aquoso ocular, como o glaucoma. Síndromas adicionais com uma ligação molecular estabelecida ou potencial para a desregulação da atividade da mTOR quinase são, por exemplo, descritos em "K. Inoki e outros; Disregulation of the TSC-mTOR pathway in human disease, Nature Genetics, vol 37, 19-24"; "D.M. Sabatini; mTOR and cancer: insights into a complex relationship, Nature Reviews, vol. 6, 729-734"; e em "B.T. Hennessy e outros; Exploiting the PI3K/Akt pathway for cancer drug discovery, Nature Reviews, vol. 4, 988-1004", e são como se segue: • Rejeição de transplante de órgão ou tecido, por exemplo para o tratamento de receptores de transplantes de, por exemplo, coração, pulmão, coração-pulmão combinados, fígado, rim, pâncreas, pele ou córnea; doença do enxerto contra hospedeiro, tal como após transplante de medula óssea; • Reestenose; • Esclerose tuberosa; • Linfangioleiomiomatose; • Retinite pigmentosa e outras desordens degenerativas retinianas; • Doenças autoimunes, incluindo a encefalomielite, a diabetes mellitus dependente de insulina, lúpus, dermatomiosite, artrite e doenças reumáticas; • Leucemia linfoblástica aguda resistente a esteróides; • Doenças fibróticas, incluindo esclerodermia, fibrose pulmonar, fibrose renal, fibrose cística; • Hipertensão pulmonar; • Imunomodulação; • Esclerose múltipla; • Síndroma de VHL; • Complexo de Carney; • Plipose adenomatosa familiar; • Síndroma de polipose juvenil; • Síndroma de Birt-Hogg-Dube; • Cardiomiopatia hipertrófica familiar; • Síndroma de Wolff-Parkinson-White; • Desordens neurodegenerativas tais como doença de Parkinson, doença de Huntington, doença de Alzheimer e demências provocadas por mutações tau, ataxia espinocerebelar tipo 3, doença dos neurónios motores provocadas por mutações S0D1, lipofucinoses ceróides neuronais/doença de Batten (neurodegeneração pediátrica); • Doenças oftalmológicas tais como a degeneração macular molhada e seca, uveite, incluindo uveíte auto-imune, retinopatia, tal como retinopatia diabética ou retinopatia induzida por oxigénio hiperbárico, e glaucoma; • Perda de massa muscular (atrofia, caquexia) e miopatias, tais como a doença de Danon; • Infeções bacterianas e virais, incluindo M. tuberculosis, estreptococos do grupo A, HSV tipo I, infeção por VIH; • Neurofibromatose incluindo neurofibromatose tipo 1; e • Síndroma de Peutz-Jeghers, doença de Cowden.
Os compostos com uma atividade inibidora sobre mTORCl têm demonstrado benefícios na imunomodulação e no tratamento de doenças proliferativas, tais como carcinoma de células renais avançado ou Tubero-Esclerose (TSC) desordens associadas a mutação germinal.
Para os usos acima referidos, a dosagem requerida irá naturalmente variar, dependendo do modo de administração, a condição particular a ser tratada e do efeito desejado. Em geral, os resultados satisfatórios são indicados como sendo obtidos sistemicamente com dosagens diárias de desde cerca de 0,03 a cerca de 100,0 mg/kg por peso corporal, por exemplo cerca de 0,03 a cerca de 10,0 mg/kg por peso corporal. Uma dosagem diária indicada em mamíferos maiores, por exemplo seres humanos, está no intervalo de desde cerca de 0,5 mg a cerca de 3 g, de preferência desde cerca de 5 mg a cerca de 1.5 g convenientemente administrado, por exemplo, em doses divididas até quatro vezes por dia ou em forma de libertação sustentada. As formas de dosagem unitária adequadas para administração oral compreendem desde cerca de 0,1 a cerca de 500 mg, por exemplo cerca de 1,0 a cerca de 500 mg de ingrediente ativo.
Em geral, os compostos da presente invenção serão administrados como composições farmacêuticas por uma qualquer das seguintes vias: oral, sistémica (por exemplo, transdérmica, intranasal ou por supositório), ou parentérica (por exemplo, intramuscular, intravenosa ou subcutânea). A forma preferida de administração é a oral utilizando um regime de dosagem diária conveniente que pode ser ajustado de acordo com o grau de aflição. As composições podem tomar a forma de comprimidos, pílulas, cápsulas, semi-sólidos, pós, formulações de libertação sustentada, soluções, suspensões, elixires, aerossóis ou quaisquer outras composições apropriadas. Outra forma preferida para administração dos compostos da presente invenção é a inalação. Este é um método eficaz para a entrega de um agente terapêutico directamente ao tracto respiratório.
Consequentemente, a invenção também fornece: um método para a prevenção ou tratamento de estados, distúrbios ou doenças mediadas pela ativação da via PI3K (por exemplo, quinase PI3 alfa) e/ou enzimas mTOR, por exemplo como indicado acima, num sujeito com necessidade de tal tratamento, método esse que compreende a administração ao referido sujeito de uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Numa forma de realização, é proporcionado um método para a prevenção ou tratamento do cancro, uma doença neurodegenerativa ou uma doença oftalmológica, num sujeito com necessidade de tal tratamento, método esse que compreende a administração ao referido sujeito de uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Numa outra forma de realização, o distúrbio neurodegenerativo é de Parkinson, doença de Huntington e doença de Alzheimer. Numa outra forma de realização, o distúrbio neurodegenerativo é doença de Huntington. - um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para uso como medicamento, por exemplo em qualquer uma das condições, distúrbios ou doenças aqui indicadas, em particular para o uso em um ou mais doenças mediadas fosfatidilinositol 3-quinase. Numa forma de realização, é fornecido um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização no tratamento ou prevenção de cancro, de uma doença neurodegenerativa ou uma doença oftalmológica. Numa outra forma de realização, o distúrbio neurodegenerativo é de Parkinson, doença de Huntington e doença de Alzheimer. Numa outra forma de realização, o distúrbio neurodegenerativo é doença de Huntington. - a utilização de um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, como ingrediente farmacêutico ativo num medicamento, por exemplo em qualquer uma das condições, distúrbios ou doenças aqui indicadas, em particular para o uso em um ou mais doenças mediadas fosfatidilinositol 3-quinase. Numa forma de realização, é proporcionado o uso de um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, como ingrediente farmacêutico ativo num medicamento para o tratamento ou prevenção de cancro, de uma doença neurodegenerativa ou uma doença oftalmológica. Numa outra forma de realização, o distúrbio neurodegenerativo é de Parkinson, doença de Huntington e doença de Alzheimer. Numa outra forma de realização, o distúrbio neurodegenerativo é doença de Huntington. - a utilização de um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para o tratamento ou prevenção de uma ou mais doenças mediadas por fosfatidilinositol 3-quinase. Numa forma de realização, é proporcionado o uso de um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para o tratamento ou prevenção de cancro, de uma doença neurodegenerativa ou uma doença oftalmológica. Numa outra forma de realização, o distúrbio neurodegenerativo é de Parkinson, doença de Huntington e doença de Alzheimer. Numa outra forma de realização, o distúrbio neurodegenerativo é doença de Huntington.
Um agente da invenção pode ser administrado como único ingrediente farmacêutico ativo ou como uma combinação com, pelo menos, um outro ingrediente farmacêutico ativo eficaz, por exemplo, no tratamento ou prevenção de cancro ou uma doença neurodegenerativa. Tal combinação farmacêutica pode estar na forma de uma forma de dosagem unitária, cuja forma de dosagem unitária compreende uma quantidade pré-determinada de cada um dos pelo menos dois componentes ativos em associação com pelo menos um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável. Alternativamente, a combinação farmacêutica pode estar na forma de uma embalagem que compreende pelo menos dois componentes ativos separadamente, por exemplo uma embalagem ou dispositivo dispensador adaptado para a administração concomitante ou separada dos pelo menos dois componentes ativos, em que estes componentes ativos são dispostos separadamente. Num aspecto adicional, a invenção refere-se a tais combinações farmacêuticas.
Num aspecto adicional, a invenção refere-se portanto a um produto de combinação compreendendo um agente da invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um outro agente terapêutico.
Numa forma de realização da presente invenção, o produto de combinação é uma composição farmacêutica compreendendo um composto da invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e outro agente terapêutico e um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável.
Numa forma de realização, o produto de combinação é um kit que compreende duas ou mais composições farmacêuticas separadas, pelo menos uma das quais contém um agente da invenção. Numa forma de realização, o kit compreende meios para reter separadamente as referidas composições, tais como um recipiente, garrafa dividida, ou pacote de folha dividido. Um exemplo de um tal kit é uma embalagem blister, como normalmente utilizado para a embalagem de comprimidos, cápsulas e semelhantes. 0 kit da invenção pode ser utilizado para administrar diferentes formas de dosagem, por exemplo, oral e parentérica, para administrar as composições separadas em intervalos de dosagem diferentes, ou para titular as composições separadas uma contra a outra. Para auxiliar a conformidade, o kit da invenção compreende tipicamente instruções para administração.
Em virtude da sua atividade inibidora de mTOR, os compostos da invenção, isoladamente ou combinados, podem ser úteis no tratamento do cancro. Numa forma de realização, a invenção refere-se portanto a um composto da invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um outro agente terapêutico, em que o outro agente terapêutico é selecionado de entre o grupo de agentes anticancerigenos apresentado abaixo: (a) Inibidores de Quinase: por exemplo, inibidores de quinases de Fator de Crescimento Epidérmico Receptor (EGFR), tais como quinazolinas de pequenas moléculas, incluindo gefitinib (US 5.457.105, US 5.616.582 e US 5.770.599), ZD-6474 (WO 01/32651), erlotinib (Tarceva®, US 5.747.498 e WO 96/30347), e lapatinib (US 6.727.256 e WO 02/02552); inibidores de quinase de Receptor do Factor de Crescimento Endotelial Vascular (VEGFR), incluindo SU-11248 (WO 01/60814), SU 5416 (US 5883113 e WO 99/61422), SU 6668 (US 5883113 e WO 99/61422), CHIR-258 (US 6.605.617 e US 6.774.237), vatalanib ou PTK-787 (US 6.258.812), VEGF-trap (WO 02/57423), B43-genisteína (WO-09606116), fenretinide (ácido retinóico p-hidroxifenilamina) (US 4.323.581), IM-862 (WO 02/62826), bevacizumab ou Avastin® (WO 94/10202), KRN-951, 3-[5-(metilsulfonilpiperadina metil)-indolil]-quinolona, AG-13736 e AG-13925, pirrolo[2,l-f][1,2,4]triazinas, ZK-304709, Veglin®, VMDA-3601, EG-004, CEP-701 (US 5.621.100), Cand5 (WO 04/09769); inibidores de tirosina-quinase Erb2 tal como pertuzumab (WO 01/00245), trastuzumab, e rituximab; inibidores da proteina-quinase Akt, tal como RX-0201; inibidores da proteína quinase C (PKC), tal como LY-317615 (WO 95/17182), e perifosina (US 2003171303); inibidores da quinase Raf/Map/MEK/Ras incluindo sorafenib (BAY 43-9006), ARQ-350RP, LErafAON, BMS-354825 AMG-548, e outros revelados em WO 03/82272; inibidores de quinase de Receptor do Factor de Crescimento de Fibroblastos (FGFR); inibidores de quinase dependentes das células (CDK), incluindo CYC-202 ou roscovitina (WO 97/20842 e WO 99/02162); inibidores de quinase de Receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGFR), tais como CHIR-258, 3G3 mAb, AG-13736, SU-11248 e SU6668; e inibidores de quinase Bcr-abl e proteínas de fusão, tais como STI-571 ou Gleevec (imatinib). (b) Anti-Estroqénios: tais como Moduladores Seletivos do Receptor de Estrógeno (SERMs), incluindo tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno; inibidores de aromatase incluindo Arimidex ou anastrozol; sub-reguladores do Receptor de Estrógeno (ERDs) , incluindo Faslodex® ou fulvestrant. (c) Anti-Androgénios: tais como flutamida, bicalutamida, finasteride, aminoglutetimida, cetoconazol, e corticosteróides. (d) Outros Inibidores: tais como inibidores da Farnesiltransferase de proteínas, incluindo tipifarnib ou R-115777 (US 2003134846 e WO 97/21701), BMS-214662, AZD-3409, e FTI-277; inibidores de topoisomerase incluindo merbarona e diflomotecan (BN-80915); inibidores de proteína de fuso de cinesina mitótica (KSP) incluindo SB-743921 e MKI-833; moduladores do proteassoma, tais como bortezomib ou Velcade® (US 5780454), XL-784; e ciclooxigenase 2 (COX-2), inibidores incluindo fármacos anti-inflamatórios não-esteróides I (NSAIDs). (e) Medicamentos contra o Cancro quimioterapeuticos: tais como anastrozol (Arimidex®), bicalutamida (Casodex®), sulfato de bleomicina (Blenoxane®), busulfan (Myleran®), injeção de busulfano (Busulfex®), capecitabina (Xeloda®), N4-pentoxicarbonil-5-deoxi-5-fluorocitidina, carboplatina (Paraplatin®), carmustina (BiCNU®), clorambucil (Leukeran®), cisplatina (Platinol®), cladribina (Leustatin®) , ciclofosfamida (CYTOXAN® ou Neosar®), citarabina, citosina-arabinósido (Cytosar-U®), a injeção de lipossomas citarabina (DepoCyt®), dacarbazina (DTIC-Dome®), dactinomicina (actinomicina D, Cosmegan), hidrocloreto de daunorubicina (Cerubidine®), injeção de lipossomas de citrato de daunorubicina (DaunoXome®), dexametasona, docetaxel (Taxotere®), cloridrato de doxorrubicina (Adriamycin®, Rubex®), etoposido (Vepesid®), fosfato de fludarabina (Fludara®), 5-fluorouracilo (Adrucil®, Efudex®), flutamida (Eulexin®), tezacitibina, gemcitabina (difluorodeoxicitidina), hidroxiureia (Hydrea®), idarrubicina (Idamycin®), ifosfamida (IFEX®), irinotecano (Camptosar®), L-asparaginase (ELSPAR®), leucovorina de cálcio, melfalano (Alkeran®), 6-mercaptopurina (Purinethol®), metotrexato (Folex® ) , mitoxantrona (Novantrone®), Mylotarg, paclitaxel (Taxol®), Phoenix (Yttrium90/MX-DTPA), pentostatina, polifeprosano 20 com implante de carmustina (Gliadel®), citrato de tamoxifeno (Nolvadex®), teniposido (Vumon®), 6-tioguanina, tiotepa, tirapazamina (Tirazone®), cloridrato de topotecano injectável (Hycamptin®), vinblastina (Velban®), vincristina (Oncovin®), e vinorelbina (Navelbine®). (f) Agentes de Alquilação: tais como VNP-40101M ou cloretizina, oxaliplatina (US 4.169.846, WO 03/24978 e WO 03/04505), glutosfamida, mafosfamida, etopofos (US 5.041.424), prednimustina; treosulfan; busulfan; irofluven (acilfulveno); penclomedina; pirazoloacridina (PD-115934); 06-benzilguanina; decitabina (5-aza-2-desoxicitidina); brostallicin; mitomicina C (MitoExtra); TLK-286 (Telcyta®); temozolomida; trabectedina (US 5.478.932); AP-5280 (formulação platinate de cisplatina); porfiromicina; e clearazide (mecloretamina). (g) Agentes Quelantes: tal como o tetratiomolibdato (WO 01/60814); RP-697; T84.66 quimérico (CT84.66); gadofosveset (Vasovist®); deferoxamina; e bleomicina facultativamente em combinação com electroporação (EPT). (h) Modificadores da resposta biológica: tais como moduladores imunitários, incluindo staurosporina e análogos macrociclicos dos mesmos, incluindo UCN-01, CEP-701 e midostaurina (ver WO 02/30941, WO 97/07081, WO 89/07105, US 5.621.100, WO 93/07153, WO 01/04125, WO 02/30941, WO 93/08809, WO 94/06799, WO 00/27422, WO 96/13506 e WO 88/07045); esqualamina (WO 01/79255); DA-9601 (WO 98/04541 e US 6025387) ; alemtuzumab; interferões (por exemplo IFN-a, IFN-b etc.); interleucinas, especificamente IL-2 ou aldesleucina assim como IL-1, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, e suas variantes ativas biológicas do mesmo, tendo sequências de aminoácidos maior que 70% da sequência humana nativa; altretamina (Hexalen®); SU 101 ou leflunomida (documento WO 04/06834 e US 6331555); imidazoquinolinas tal como resiquimod e imiquimod (US 4.689.338, 5.389.640, 5.268.376, 4.929.624, 5.266.575, 5.352.784, 5.494.916, 5.482.936, 5.346.905, 5.395.937, 5.238.944, e 5.525.612); e SMIPs, incluindo benzazoles, antraquinonas, tio-semicarbazonas, e WO 04/87153 (triptantrinas, WO 04/64759 e WO 04/60308) . (i) Vacinas contra Cancro: incluindo Avicine® (Tetrahedron Lett. 26:2269-70 (1974)); oregovomab (OvaRex®); Theratope® (STN-KLH); vacinas para Melanoma; série GI-4000 (GI-4014, GI-4015, e GI-4016), que são direcionados para cinco mutações na proteína Ras; GlioVax-1; MelaVax; Advexin® ou INGN-201 (WO 95/12660); Sig/E7/LAMP-1, codificadora de HPV-16 E7;
Vacina MAGE-3 ou M3TK (WO 94/05304); HER-2VAX; ATIVE, que estimula as células T especificas para os tumores; vacina contra o cancro GM-CSF; e vacinas com base em Listeria monocytoges. (j) Terapia Antisentido: incluindo composições antisense, tais como AEG-35156 (GEM-640); AP-12009 e AP-11014 (oligonucleidos antisentido específicos de TGF-beta2); AVI-4126; AVI-4557; AVI-4472; oblimersen (Genasense®); JFS2; aprinocarsen (WO 97/29780); GTI-2040 (R2 ribonucleótido redutase mRNA oligo antisentido) (WO 98/05769); GTI-501 (WO 98/05769); oligodesoxinucleótidos encapsulados em lipossomas c-Raf antisentido (LErafAON) (WO 98/43095); e Sirna-027 (terapêutica direccionada para VEGFR-1 mRNA com base em RNAi).
Assim, numa forma de realização, a invenção proporciona uma composição farmacêutica que compreende: i) um composto da invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e ii) pelo menos um composto selecionado a partir de (a) Inibidores de quinase, (b) anti-Estrogénios, (c) Anti-Androgénios, (e) Medicamentos contra o Cancro quimioterapêuticos, (f) Agentes de Alquilação; (g) Agentes Quelantes; (h) Modificadores da resposta biológica, e ii) um ou mais excipientes, diluentes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis.
Numa forma de realização, a invenção proporciona uma composição farmacêutica compreendendo um composto da invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e everolimus (Afinitor®).
Em virtude da sua atividade inibidora de mTOR, os compostos da invenção, isoladamente ou combinados, podem ser úteis no tratamento de doenças neurodegenerativas. Numa forma de realização, a invenção refere-se portanto a um composto da invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um outro agente terapêutico, em que o outro agente terapêutico é selecionado de entre: (a) inibidores da acetilcolinesterase: tais como donepezil (Aricept™), rivastigmina (Exelon™) e galantamina (Razadyne™); (b) antagonistas de glutamato; tais como memantina (Namenda™); (c) medicamentos antidepressivos: para o mau humor e irritabilidade, como citalopram (Celexa™), fluoxetina (Prozac™), paroxeína (Paxil™), sertralina (Zoloft™) e trazodona (Desyrel™); (d) ansiolíticos, para a ansiedade, agitação, comportamento verbal perturbador e resistência, como o lorazepam (Ativan™) e oxazepam (Serax™); (e) medicamentos antipsicóticos, para alucinações, delírios, agressividade, agitação, hostilidade e falta de cooperação, tais como o aripiprazol (Ability™) , clozapina (Clozaril™), haloperidol (Haldol™) , olanzapina (Zyprexa™), quetiapina (Seroquel™), risperidona (Risperdal™) e ziprasidona (Geodon™); (f) estabilizadores de humor; tais como a carbamazepina (Tegretol™) e divalproato (Depakote™); (g) agonistas nicotínico alfa-7; (h) antgonistas mGluR5; (i) agonistas H3; e (j) vacinas de terapia amilóide.
Assim, numa forma de realização, a invenção proporciona uma composição farmacêutica compreendendo: i) um composto da invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e ii) pelo menos um composto selecionado a partir de: (a) inibidores da acetilcolinesterase, (b) antagonistas de glutamato, (c) medicamentos antidepressivos, (d) ansiolíticos, (e) medicamentos antipsicóticos, (f) estabilizadores de humor, (g) agonistas nicotinico alfa-7; (h) antgonistas mGluR5; (i) agonistas H3 e ii) um ou mais excipientes, diluentes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis.
Consequentemente, a invenção também fornece em aspectos adicionais: - uma combinação farmacêutica, por exemplo para uso em qualquer dos métodos aqui descritos, que compreendem uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e outro agente terapêutico, para a administração simultânea ou sequencial. - um produto de combinação compreendendo um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um outro agente terapêutico. - um produto de combinação compreendendo um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um outro agente terapêutico tal como uma preparação combinada para uso em terapia, por exemplo, para uso em qualquer uma das terapias aqui descritas. Numa forma de realização, a terapia é o tratamento ou prevenção de cancro ou de uma doença neurodegenerativa. Numa outra forma de realização, a terapia é o tratamento ou prevenção da doença de Parkinson, doença de Huntington e doença de Alzheimer. Em ainda outra forma de realização, a terapia é o tratamento ou prevenção da doença de Huntington. uma composição farmacêutica compreendendo um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, outro agente terapêutico e um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável. - um método como definido acima compreendendo a co-administração, por exemplo, concomitantemente ou em sequência, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e outro agente terapêutico, por exemplo tal como indicado acima. uma combinação farmacêutica, e.g. um kit, compreendendo a) um primeiro agente que é um composto da presente invenção como aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e b) outro agente terapêutico, por exemplo como indicado acima; pelo que tal kit pode compreender instruções para a sua administração.
Os seguintes exemplos de compostos da presente invenção ilustram a invenção. Os métodos para a preparação de tais compostos encontram-se descritos a seguir.
EXEMPLOS
Abreviaturas
EtOAc acetato de etilo
AcOH ácido acético brs singuleto largo CDCI3clorofórmio deuterado
CsF fluoreto de césio d dupleto CH2C12 diclorometano DIPEA amina di-isopropiletilo DMSO dimetilsulfoxido DMS0-d6 sulfóxido de dimetilo deuterado dppf 1,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno
EtOH etanol LC-MS espectrometria de massa de cromatografia liquida
MeOH metanol m multipleto MS MS espectrometria de massa NEt3 trietilamina NMR ressonância magnética nuclear 1HNMRressonância magnética nuclear de protões
Pd(PPh3)4 tetrakis(trifenilfosfina)paládio PPh3 fosfina trifenilo s singuleto TFA ácido trifluorocético THF tetrahidrofurano UV ultravioleta
EtOH etanol CDCI3clorofórmio deuterado SÍO2 gel silica
MgS04sulfato de magnésio
Na2S04 sulfato de sódio
Pd paládio aq aquoso TBME tertbutilmetileter mL mililitro LDA litiodiisopropilamina
Raney-Ni niquel de Raney ax axial eq equatorial MHz megahertz
Rt tempo de retenção
Na2S203 tiossulfato de sódio
MÉTODOS ANALÍTICOS NMR: os spectros de protões são registrados num espectrómetro Bruker Avancespectrometer ou Varian Oxford 400 salvo indicação em contrário. Os desvios químicos são apresentados em ppm em relação ao sulfóxido de dimetilo (δ 2,50) ou clorofórmio (δ 7,26). Uma pequena quantidade da amostra seca (2-5 mg) é dissolvida num solvente deuterado adequado (1 mL). LC/MS: A amostra é dissolvida num solvente adequado, tal como MeCN, DMSO ou MeOH e é injetada directamente na coluna utilizando um manipulador automático de amostras. A análise é realizada utilizando um dos seguintes métodos: LC-MS-Método 1
Coluna: Acquity HSS T3, l,8mm, 2,1 x 50 mm;
Eluente: Água (+ 0,05% + ácido fórmico + 3,75 mM acetato de amónio) : acetonitrila (+ 0,04% ácido fórmico), desde 98:2 a 2:98 em 1,4 min, mantém 98% durante 0,75 min;
Taxa de fluxo/Temperatura: 1,2 ml/min a 50°C. LC-MS-Método 2
Coluna: Machery-Nagel Nucleosil 100-3 C18 (70 x 4,6 mm) ;
Solventes/Gradiente: A: 0,05% TFA em água; B: 0.05% TFA em acetonitrilo; desde 95% A/5% B a 5% A/95% B em 8min.
Taxa de fluxo/Temperatura: 1,4 ml/min a 45°C. Síntese de intermediários amina
Os intermediários de amina estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados como descrito na literatura, ou de uma forma análoga, ou pode ser preparados como descrito a seguir, ou de uma forma análoga. Síntese de intermediários de amina bicíclica
Amina bicíclica 1: Éster terc-butílico do ácido 3-hidroxi-8-aza-biciclo[3.2.1]octano-8-carboxílico
A uma solução de éster terc-butílico do ácido 3-oxo-8-aza-biciclo[3.2.1]octano-8-carboxílico (1,03 g, 4,57 mmol) em EtOH (20 mL) foi adicionado gota a gota NaBH4. A mistura foi agitada durante 4,5 horas à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto, seguido de uma segunda adição de NaBH4 (0,36 g, 9,60 mmol) . A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 17,5 horas e uma última adição de NaBH4 (0,36 g, 9,60 mmol) foi realizada. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, em seguida, foi adicionada uma solução saturada de cloreto de amónio e a fase aquosa foi extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e concentradas. 0 produto em bruto foi purificado por cromatografia flash sobre gel de silica, utilizando ciclohexano/EtOAc como eluente para se obter, após evaporação, aos isómeros axial e equatorial (186 mg, 17,9%) e (205 mg, 19,7%) como sólidos brancos. XH NMR (600 MHz, CDC13) : 4,57 (d, 1 H) , 4,02 (m, 2H) , 3,89 (d, 1 Hax), 1,89-1,71 (m, 5H) , 1, 65-1,54 (m, 1 H) , 1,47-1,28 (m, 11H) e 4,60 (d, 1H) 3,99 (m, 2H) , 3,91 (m, 1 Heq) , 2,18-2,03 (m, 2H) , 1, 92-1,72 (m, 4H) , 1, 67-1,56 (m, 2H) , 1,39 (s, 9H) .
Amina bicíclica 2: 8-Aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol
Uma solução de HC1 (4N em dioxano, 0,82 mL, 3,27 mmol) foi adicionado a uma suspensão de éster terc-butílico do ácido 3-hidroxi-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxílico em acetonitrilo. A mistura foi agitada a 70°C durante 1 hora, arrefecida e concentrada. O produto (138 mg, 93%) foi isolado como um sal de ácido clorídrico. 1H NMR (600 MHz, CDCI3) : 9,07-8,49 (m, 1 H), 3,94 (m, 2H) , 3,85 (m, 1 H) , 1, 97-1,74 (m, 6H) , 1,60 (t, 2H) 0 isómero axial (137 mg, 93%) foi preparado da mesma maneira. 1H NMR (600 MHz, CDC13) : 9,01-8,44 (m, 1 H), 3,89 (m, 3H), 2,29 (d, 2H), 2,07 (dt, 2H), 1,96-1,84 (m, 2H), 1,83-1,71 (m, 2H). Síntese de intermediários indole
Os intermediários de indole estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados como descrito na literatura, ou de uma forma análoga, ou pode ser preparados como descrito a seguir, ou de uma forma análoga. índole 1: 4-Bromo-6-metoxi-lH-indole
(a) N-(3-Bromo-5-metoxi-fenil)-N-hidroxi-acetamida 3-Bromo-5-nitroanilina (1,5 g, 6,46 mmol) foi dissolvido em 20 mL de 1,2-dicloroetano e 20 mL de etanol, e a mistura foi arrefecida a 0°C. Ni de Raney (30 mg) e hidrato de hidrazina (0,79 mL, 12,9 mmol) foram adicionados em 10 minutos, e a reação foi agitada durante 4 horas à temperatura ambiente, quando foram adicionados 50 mg de Ni de Raney. Depois de se agitar durante 16 horas, foram adicionados mais 50 mg de
Ni de Raney, e após agitação adicional durante 4 horas, foram adicionados mais 50 mg de Ni de Raney. A agitação foi continuada durante 4 horas à temperatura ambiente, quando o material de partida desapareceu completamente. A mistura de reação foi filtrada através de celite, e o solvente foi removido sob pressão reduzida para proporcionar N-(3-bromo-5-metoxi-fenil)-N-hidroxilamina como um sólido, que foi dissolvido em 80 ml de tolueno. Bicarbonato de sódio (597 mg, 7,11 mmol) foi adicionado, seguido por cloreto de acetilo (0,51 mL, 7,11 mol) . A agitação continuou à temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura de reação foi, em seguida, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (40 g SÍO2; EtOAc/heptano num gradiente de 5/95 a 03/01) para se obter o composto do título como um sólido (360 mg, 21% em 2 passos). LC-MS a 254 nm; [M+H] 260,0/262,1; Rt 0,82 min; (LCMS método 1), íH-NMR (600 MHz; DMSO-d6) : 10,85 (brs, 1H) , 7,50 (dd, 1H) , 7,26 (dd, 1H) , 6,94 (dd, 1H) , 3,77 (s, 3H) , 2,22 (s, 3H) . (b) 4-Bromo-6-metóxi-lH-indole N-(3-Bromo-5-metoxi-fenil)-N-hidroxi-acetamida (360 mg, 1,384 mmol) foi dissolvido em acetato de vinilo (1,92 mL, 20,8 mmol), e Li2PdCl4 (18,2 mg, 69 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 3 horas a 60°C. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e solução salina; a camada orgânica foi separada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um sólido, o qual foi dissolvido em 20 ml de MeOH. NaOH aquoso IN (2,61 mL, 2,61 mmol) foi adicionado, e a reação foi agitada durante duas horas à temperatura ambiente. A mistura de reação foi extinta por adição de HC1 aquoso 2 N (1,3 mL, 2,6 mmol), seguido pela adição de 500 mg de Na2C03. Após a adição de 50 mL de EtOAc, as camadas orgânicas foram separadas, secas sobre Na2S04, filtradas, e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (20 g Si02; EtOAc/heptano num gradiente de 0/100 a 1/4) para se obter o composto do título como um líquido (145 mg, 46% em 2 passos). 1H-NMR (600 MHz; DMSO-dg) : 11,26 (brs, 1H) , 7,31 (dd, 1H) , 6,93 (d, 1H) , 6,90 (d, 1H) , 6,29 (dd, 1H) , 3,78 (s, 3H) . índole 2: 4-Cloro-6-metoxi-lH-indole
(a) l-Cloro-5-fluoro-5-nitro-benzeno
Tetra-hidrato de perborato de sódio (7,69 g, 50,0 mmol) foi suspenso em 30 mL de ácido acético, e esta suspensão foi aquecida a 55°C. 3-Cloro-5-fluoroanilina (1,46 g, 10 mmol) foi dissolvida em 20 mL de ácido acético e adicionada dentro de uma hora. A reação foi agitada durante 1 hora a 55°C e, em seguida, arrefecida até à temperatura ambiente. Foram adicionados 300 mL de TBME, e a mistura de reação foi filtrada. A camada orgânica foi lavada com salmoura, em seguida por 20 ml de Na2S203 aquoso, em seguida por salmoura. A camada orgânica foi seca sobre Na2S04 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo, que foi purificado por cromatografia em coluna (40 g de Si02; ciclohexano) para se obter o composto do título como um sólido (320 mg, 18%). 1H-NMR (400 MHz; DMSO-d6) :8,20 (s, 1H) , 8,18 (d, 1H) , 8,07 (d, 1H) . (b) N-(3-Cloro-5-fluoro-fenil)-N-hidroxi-acetamida l-Cloro-3-fluoro-5-nitrobenzeno (320 mg, 1,82 mmol) foi dissolvido em 5 mL de 1,2-dicloroetano e 5 mL de etanol, e a mistura foi arrefecida a 0°C. Ni de Raney (30 mg, 2,0 mmol) e hidrato de hidrazina (0,11 mL, 1,82 mmol) foram adicionados em 10 minutos, e a reação foi agitada durante 4 horas à temperatura ambiente, quando foram adicionados 50 mg de Ni de Raney. Depois de se agitar durante 16 horas, foram adicionados mais 50 mg de Ni de Raney, e após agitação adicional durante 4 horas, foram adicionados mais 50 mg de Ni de Raney. A agitação foi continuada durante 4 horas à temperatura ambiente, quando o material de partida desapareceu completamente. A mistura de reação foi filtrada através de celite, e o solvente foi removido sob pressão reduzida para proporcionar N-(3-bromo-5-fluor-fenil)-N-hidroxilamina como um sólido, que foi dissolvido em 15 ml de tolueno. Bicarbonato de sódio (160 mg, 1,91 mmol) foi adicionado, seguido por cloreto de acetilo (136 yL, 1.91 mmol) em 0,5 mL de tolueno. A agitação continuou à temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura de reação foi, em seguida, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (40 g Si02; EtOAc/heptano num gradiente de 5/95 a 1/3) para se obter o composto do título como um sólido (214 mg, 53% em 2 passos) . LC-MS a 254nm; [M+H] 204,1; Rt 0,83 min; (LCMS método 1), XH-NMR (DMSO-de) : 10,95 (s, 1H) , 7,62 (s, 1H) , 7,51 (dd, 1H) , 7,19 (d, 1H), 2,24 (s, 3H). (c) 4-Cloro-6-fluor-lH-indole N-(3-Bromo-5-fluór-fenil)-N-hidroxi-acetamida (200 mg, 982 ymol) foi dissolvido em acetato de vinilo (1,81 mL, 19,6 mmol) , e Li2PdCl4 (25,7 mg, 98 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante 3 horas a 60°C. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e solução salina; a camada orgânica foi separada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um sólido, o qual foi dissolvido em 8 ml de MeOH. NaOH aquoso IN (1,89 mL, 1,89 mmol) foi adicionado, e a reação foi agitada durante duas horas à temperatura ambiente. A mistura de reação foi extinta por adição de HC1 aquoso 2 N (0,95 mL, 1,9 mmol), seguido pela adição de 300 mg de Na2C03. Após a adição de 50 mL de EtOAc, as camadas orgânicas foram separadas, secas sobre Na2S04, filtradas, e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (12 g gSi02; EtOAc/heptano num gradiente de 0/100 a 1/4) para se obter o composto do título como um líquido (72 mg, 45% em 2 passos). 1H-NMR (DMSO-de) : 11,52 (brs, 1H) , 7,45 (d, 1H), 7,20 (d, 1H), 7,05 (d, 1H) , 6,45 (d, 1H) . Síntese de intermediários de éster borónico
Os intermediários de éster borónico estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados como descrito na literatura, ou de uma forma análoga, ou pode ser preparados como descrito a seguir, ou de uma forma análoga. Éster borónico 1: 6-Metoxi-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-lH-indole A uma solução de 4-bromo-6-metoxi-lH-indole (200 mg, 885 ymol) em dioxano (5 mL) foi adicionado, sob árgon, cloreto de bis(pinacolato)diboro (247 mg, 973 umol) seguido por triciclohexilfosfina (14,9 mg , 53 pmol), bis(dibenzilidenoacetona)Pd (15,3 mg, 27 ymol) e acetato de potássio (130 mg, 1,33 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 18 horas a 65°C sob argão. A mistura de reação foi então diluída por adição de 30 ml de EtOAc e 20 ml de salmoura. Os solventes orgânicos foram separados, secos sobre Na2S04, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatograf ia em coluna (20 g de Si02, éter metil-terc-butílico/heptano na proporção de 3/7) para fornecer o produto (190 mg, 79%). 1H-NMR (DMSO-ds) : 10,89 (brs, 1H) , 7,22 (dd, 1H) , 7,03 (dd, 1H) , 7,00 (d, 1H) , 6,64 (dd, 1 H) , 3,77 (s, 3H) , 1,33 (s, 12H).
Exemplo 1: 2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8- piridin-2-il-9H-purina
a) 2-Cloro-6-((R)-3-metl-morfolin-4-il)-9H-purina 2,6-dicloro-9H-purina (2,36 g, 12,5 mmol), hidrocloreto de (R)-3-metilmorfolina (1,89 g, 13,8 mmol), e diisopropiletilamina (5,46 mL, 31,3 mmol) foram dissolvidos em 15 mL de isopropanol, e a mistura de reação foi agitada durante 18 horas a 75°C. A mistura de reação foi então diluída com 200 mL de CH2CÍ2· Os solventes orgânicos foram lavados com Na2CC>3 aquoso, seguido por água e salmoura. A secagem sobre Na2S04, a filtração e concentração sob pressão reduzida forneceu um resíduo, que foi purificado por cromatografia em coluna (150 g de Si02, CH2Cl2/EtOH/NH3 aq numa proporção de 96/4/0,1) para fornecer o produto como um sólido (2,87 g, 91%).
LC-MS a 254 nm; [M+H] 254,1/256, 1; Rt 0,72 min; (LCMS método 1). XH NMR (DMSO-ds) : 13,25 (1H, brs), 8,17 (1H, s) , 6,0- 4,5 (brs, 2H) , 4,0-3,0 (brs, 1H) , 3,96 (dd, 1H) , 3,76 (d, 1H) , 3,67 (dd, 1H) , 3,51 (ddd, 1H), 1,31 (d, 3H) b) 2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina 2-cloro-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (1,02 g, 4 mmol), diisopropiletilamina (1,40 mL, 8 mmol), e hidrocloreto de (R)-3-metilmorfolina (826 mg, 6 mmol) foram agitados em 2-butanol (5 mL) num tubo de microondas selado, sob atmosfera de argão a 50°C, até todos os ingredientes estarem dissolvidos. A reação foi então agitada a 180°C durante 100 horas. A mistura de reação foi então arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com 200 mL de CH2CI2. A camada orgânica foi lavada com Na2C03 aquoso e salmoura. A secagem sobre Na2S04, a filtração e concentração sob pressão reduzida deu um resíduo, que foi purificado por cromatografia em coluna (120 g de S1O2, CH2Cl2/EtOH/NH3 aquoso num gradiente com a proporção de 100/0/0,1 a 94/6/0,1) para fornecer o produto como uma espuma (1,11 g, 87%). LC-MS a 254nm; [M+H] 319,0; Rt 0,71 min; (LCMS método D . XH NMR (DMSO-cU) : 12,44 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 6,0- 4,5 (brs, 2H), 4,51 (dd, 1H), 4,15 (dd, 1 H), 4,0-3,0 (brs, 1 H) , 3,94 (dd, 1 H) , 3,89 (dd, 1 H) , 3,73 (d, 1 H) , 3,69 (d, 1 H) , 3,65 (dd, 1 H), 3,58 (dd, 1H), 3,50 (ddd, 1H), 3,42 (dd, 1H), 3,07 (ddd, 1H), 1,27 (d, 3 H) 1,15 (d, 3 H) . c) 2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9- (tetrahidro-piran-2-il)-9H-purina [2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (600 mg, 1,89 mmol) foi dissolvido em EtOAc (25 mL) sob argão. Após a adição de 3,4-di-hidro-2H-pirano (172 yl, 1,89 mmol), anidrido de ácido trifluoroacetico (27 μΐ, 188 mmol), e ácido trifluoroacetico (319 μΐ, 4,15 mmol), a mistura de reação foi aquecida a 70°C. Após 6 horas, 3,4-dihidro-2H pirano (1,44 mL, 15,7 mmol) foi adicionado. A reação foi então agitada durante 22 horas a 70°C e depois arrefecida à temperatura ambiente. Foram adicionados 500 mg de Na2C03 sólido e a agitação continuou durante 10 minutos. A mistura de reação foi diluída com EtOAc, a camada orgânica foi separada, seca sobre Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar um resíduo, que foi purificado por cromatografia em coluna (40 g de Si02, heptano/EtOAc num gradiente de 01/09 a 2/3) para se obter o produto como uma espuma (600 mg, 79%). LC-MS a 254nm; [M+H] 403,3; Rt 1,11 min; (LCMS método 1) - d) 8-Bromo-2,6-bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9- (tetrahidro-piran-2-il)-9H-purina
Di-isopropilamina (290 μΐ, 2,04 mmol) foi dissolvido em 4 mL de THF a -60 °C, quando butil-litio em hexano foi adicionado (1,27 mL, 2,04 mmol) para formar LDA. 2, 6-Bis-((R)- 3-metil-morfolin-4-il)-9-(tetrahidro-piran-2-il)-9H-purina (585 mg, 1,45 mmol) foi dissolvido em 8 mL de THF e adicionado à mistura de reação a -78°C no decurso de 10 minutos, A reação foi então agitada durante 1 hora a -78°C. Dibromotetracloroetano (947 mg, 2,91 mmol) em 4 mL de THF foi adicionado dentro de 10 minutos. A reação foi então agitada durante 2 horas a -78°C. A reação foi interrompida pela adição de NH4C1 aquoso saturado e aquecida até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com 80 ml de EtOAc e 50 ml de salmoura. As camadas orgânicas foram separadas, secas sobre Na2S04 filtradas e concentradas para fornecer um resíduo, que foi purificado por cromatografia em coluna (30 g de SÍO2, heptano/TBME na proporção de 7/3) para fornecer o produto como uma espuma (54 6 mg, 78%) .
LC-MS a 254nm; [M+H] 481,3/483,2; Rt 1,37 min; (LCMS método 1). XH NMR (DMSO-d6) : 5,50 (dd, 1 H) , 5,4-4,5 (brs, 2H) , 4,48 (brs, 1H) , 4,13 (dd, 1 H) , 4,01 (d, 1H) , 3, 93-3, 87 (m, 2H) , 3, 74-3, 66 (m, 2H) , 3, 64-3,55 (m, 3H), 3,5-3,0 (brs, 1H), 3,46 (ddd, 1H) , 3,40 (dd, 1 H) , 3,11-3,03 (m, 1 H) , 3,00-2,90 (m, 1 H) , 1,96 (d, 1 H) , 1,78 (d, 1 H) , 1,70-1,48 (m, 3H) , 1,24 (d, 3H) , 1, 14 (d, 3H) . e) 2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il-9-(tetrahidro-piran-2-il)-9H-purina 8-Bromo-2,6-bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9-(tetrahidro-piran-2-il)-9H-purina (40 mg, 83 ymol) foi dissolvida em 2 ml de tolueno sob atmosfera de argão num frasco de microondas, e 2-(tributilestanil)piridina (36 mg, 83 umol) e Pd(PPh3)4 (4,8 mg, 4,2 ymol) foram adicionados. O frasco de microondas foi tapado e a mistura de reação foi agitada durante 3 horas a 120°C. O frasco foi arrefecido até à temperatura ambiente e aberto. A mistura foi diluída com EtOAc (20 mL) e salmoura. A camada orgânica foi separada, seca sobre Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (12 g de SÍO2, heptano/TBME num gradiente de 01/04 a 2/3) para fornecer o produto como um sólido (35 mg, 88%) . LC-MS a 254nm; [M+H] 480,3; Rt 1,34 min; (LCMS método D . XH NMR (DMSO-d6) : 8,68 (d, 1H) , 8,06 (d, 1H) , 7,94 (dd, 1H) , 7,46 (dd, 1H) , 6,53 (dd, 1H) , 6,0-4,5 (brs, 2H) , 4,58-4,48 (m, 1 H), 4,18 (dd, 1 H), 3, 99-3, 86 (m, 3H) , 3,78-3,69 (m, 2H) , 3, 69-3, 64 (m, 1 H) , 3, 64-3,56 (m, 1 H) , 3,5-3,0 (brs, 1 H) , 3,55-3,39 (m, 3H) , 3,28-3,17 (m, 1 H) , 3,15-3,05 (m, 1H) , 2,00-1, 92 (m, 1H), 1,85 (dd, 1H), 1, 65-1,45 (m, 3H), 1,28 (d, 3H) , 1,18 (d, 3H) . f) 2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il-9H-purina 2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il-9-(tetrahidro-piran-2-il)-9H-purina (33 mg, 69 ymol) foi dissolvido em 3 mL de THF. HC1 aquoso 2N (344 μΐ, 688 ymol) foi adicionado, e a reação foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente. Foram adicionados 100 mg de Na2C03 e 10 ml de CH2CI2, e a mistura de reação foi agitada durante 20 minutos. A camada orgânica foi separada, seca sobre Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (12 g de S1O2, heptano/ EtOAc num gradiente de 100/0 a 3/2) para fornecer o produto como um sólido (24 mg, 88%). LC-MS a 254nm; [M+H] 396, 3; Rt 1,03 min; (LCMS método D . !H NMR (DMSO-de) : 12,98 (s, 1 H) , 8,62 (d, 1 H) , 8,12 (d, 1H), 7,89 (ddd, 1H), 7,40 (ddd, 1 H), 6,0-4,5 (brs, 2H), 4,57 (dd, 1 H) , 4,20 (d, 1 H) , 4,0-3,0 (brs, 1 H) , 3,97 (dd, 1 H) , 3,89 (dd, 1H), 3,76 (d, 1H) , 3,71-3,66 (m, 2H) , 3,57 (dd, 1H), 3,53 (ddd, 1H), 3,41 (ddd, 1H), 3,09 (ddd, 1H), 1,30 (d, 3 H) 1,17 (d, 3 H) .
Exemplo 2 : 2-((S)-3-Metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3- metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol-3-il)-9H-purina
a) 2-((S)-3-Metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina 2-cloro-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (712 mg, 2,81 mmol), diisopropiletilamina (0,98 mL, 5,61 mmol), e hidrocloreto de (S)-3-metilmorfolina (579 mg, 4,21 mmol) foram agitados em 2-butanol (3 mL) num tubo de microondas selado de 5 mL sob argão a 50 °C, até todos os ingredientes estarem dissolvidos. A reação foi então agitada a 175°C durante 48 horas. A camada orgânica foi diluída com 200 mL de CH2C12 e lavada com salmoura. A secagem sobre Na2S04, a filtração e concentração sob pressão reduzida forneceu um residuo, que foi purificado por cromatografia em coluna (40 g de Si02, CH2Cl2/EtOH/NH3 aquoso num gradiente de 100/0/0,1 a 90/10/0,1) para fornecer o produto como um sólido (588 mg, 66%) . LC-MS a 2 54nm; [M+H] 319,2; Rt 0,70 min; (LCMS método D . XH NMR (DMSO-d6) : 12,42 (s, 1H) , 7,75 (s, 1H) , 6,0-4,5 (brs, 2H) , 4,50 (dd, 1H) , 4,09 (d, 1 H) , 4,0-3,0 (brs, 1 H) , 3,92 (dd, 1 H) , 3,87 (d, 1 H) , 3,71 (d, 1 H) , 3,67 (d, 1 H) , 3,64 (dd, 1 H) , 3,56 (dd, 1H), 3,48 (ddd, 1H), 3,40 (dd, 1H), 3,05 (ddd, 1H), 1,24 (d, 3 H) 1,12 (d, 3 H) . b) 8-Bromo-2-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina
2-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (786 mg, 2,47 mmol) foram dissolvidos em CH2CI2 (25 mL). Bromo (0,16 mL, 3,09 mmol) diluido em 2 mL de CH2CI2 foi adicionado lentamente durante 2 minutos. A
mistura de reação foi agitada durante 6 horas à temperatura ambiente. Na2S203 aquoso (10 mL) foi adicionado à mistura de reação, e a agitação foi continuada durante 15 minutos. A camada orgânica foi lavada com salmoura e NaHC03 aquoso. A secagem sobre Na2S04, a filtração e concentração sob pressão reduzida forneceu um residuo, que foi purificado por cromatografia em coluna (40 g de Si02, heptano/EtOH num gradiente de 2/3 a 4/1) para fornecer o produto como uma espuma (455 mg, 46%) .
LC-MS a 254nm; [M+H] 399, 1/397,2; Rt 0,94 min; (LCMS método 1). c) 2-((S)-3-Metil-morfolin-4-il)-6-((R)—metil- mor folin-4-il) -8-(lH-pirazol-3-il)-9H-purina 8-bromo-2-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (50 mg, 126 ymol) foi dissolvido em dimetoxietano (2 mL) e água (0,2 mL) , seguido pela adição de ácido 1 H-pirazole-3-ilborónico (21,1 mg, 189 ymol) , PdCl2 (dppf) (9,21 mg, 13 ymol) e NEt3 ( 53 μΐ, 378 mmol) sob argão. A mistura de reação foi aquecida a 85°C durante 23 horas. A mistura de reação foi então diluída com EtOAc, a camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca sobre MgS04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (12 g S1O2, EtOAc) para fornecer o produto (19 mg, 39% de rendimento). LC-MS a 254nm; [M+H] 385, 3; Rt 0,81 min; (LCMS método D . !H NMR (DMSO-d6) : 13,13 (s, 1H) , 12,72 (s, 1 H) , 7,82 (s, 1 H), 6,73 (s, 1H), 6,0-4,5 (brs, 2H), 4,54 (d, 1 H) , 4,13 (d, 1 H), 4,0-3,0 (brs, 1 Η), 3,95 (d, 1 Η), 3,89 (d, 1 Η), 3,74 (d, 1 Η), 3,71-3,64 (m, 2H), 3,57 (d, 1 Η), 3,51 (dd, 1 Η), 3,41 (dd, 1 Η), 3,07 (dd, 1 Η), 1,26 (d, 3 Η) 1,15 (d, 3 Η) .
Exemplo_3j_ 8- (lH-Indol-4-il) -6- ((R) -3-metil- morfolin-4-il)-2-[1,4]oxazepan-4-il-9H-purina
a) 8-Bromo-2-cloro-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)- 9H-purina A uma solução de 2-cloro-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (950 mg, 3,74 mmol) em CH2CI2 (19 mL) foi adicionado bromo (0,23 mL, 4,49 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 19 horas. Foi adicionado tiossulfato de sódio saturado. A camada aquosa foi extraída com diclorometano duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas e secas sobre Na2S04 e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (gradiente 0-70%
EtOAc/ciclohexano) para proporcionar o produto como um sólido branco (495 mg, 39%). LCMS a 254 nm; [M+H] 334, 1; Rt 0,89 min; (LCMS método D . XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) : 14,09 (br, s, , 1H) , 5,4-4,9 (m, 2H) 3,96 (d, 1H) 3,75 (d, 1H) 3,65 (dd, 1H) 3,42-3,57 (m, 1H), 3,41-3,37 (m, 1H), 1,29 (d, 3H). b) 2-Cloro-8-(lH-indol-4-il)-6-((R)-3-metil- morfolin-4-il)-9H-purina
Num tubo selado, a uma solução de 8-bromo-2-cloro- 6- ( (R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (495 mg, 1,49 mmol) em CH3CN/H20 (11/1,1 mL) adicionou-se fluoreto de césio (452 mg, 2,98 mmol), ácido indole-4-borónico (266 mg, 1,64 mmol), e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (172 mg, 0,15 mmol). Em seguida, a reação foi realizada sob irradiação com microondas a 160°C durante 30 min. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (20-100% de gradiente de EtOAc/ciclohexano) para fornecer 2-cloro-8-(lH-indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (350 mg, 63,8%) como um sólido amarelo pálido. LC-MS a 2 54nm; [M+H] 369,2; Rt 1,00 min; (LCMS método 1), (400 MHz, DMSO-ds) : 13,59 (s, 1H) , 11,41 (s, 1H) , 7,73 (dd, 1H) , 7,58 - 7,49 (m, 2H) , 7,38-7,20 (m, 2H) , 5,14 (s, 1H) , 4,05-4,01 (m, 1H) , 3,79 - 3, 88 (m, 1H) , 3, 69 - 3,79 (m, 1H) , 3,57 (s, 1H) , 3,60 (s, 1H) , 1,41 (d, 3H) . c) 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-[1,4]oxazepan-4-il-9H-purina À solução de 2-cloro-8-(lH-indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (50 mg, 0,14 mmol) em 1-butanol (300 yL) foi adicionado 1,4-oxazepano (20,6 mg, 0,20 mmol), seguido por DIPEA (47,4 yL, 0,27 mmol). A mistura foi agitada a 120°C durante 24 horas. Após a conclusão da reação, a solução foi vertida em água. A camada aquosa foi extraída com CH2CI2 três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas, concentradas sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (30-100% gradiente de EtOAc/ciclohexano) para fornecer 2-((2S,6R)-2,6-dimetil morfolin-4-il)-6-morfolin-4-il-9H-purina (35 mg, 59%) como um sólido bege. LC-MS a 254nm; [M+H] 432,3; Rt 1,00 min; (LCMS método D . !H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 12,47 (br, s,, 1H), 11,00 (br, s, , 1H) , 7,67 (d, 1H) , 7,43 - 7,39 (m, 2H) , 7,28 (br, s, , 1 Η), 7,16 (t, 1 Η), 5,45 (d, 1 Η), 5,08 (d, 1 Η), 4,10 - 3,95 (m, 1 Η), 3,91 - 3,85 (m, 4Η) , 3, 82 - 3, 75 (m, 4Η) , 3,69-3,65 (m, 2Η) , 3, 63-3, 57 (m, 1 Η), 3,48-3,40 (m, 1 Η), 1, 98-1, 90 (m, 2Η), 1,23 - 1,18 (m, 3Η) μ
Exemplo 4 : 8-[4-(lH-Imidazol-2-il)-fenil]-2, 6-bis- ((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina
a) 8-Bromo-2,6-bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H- purina [2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (637 mg, 2 mmol) foi dissolvido em 50mL de CH2C12 e agitado sob argão. Foi dissolvido bromo (124 μΐ, 2,4 mmol) em 2 mL de CH2C12 e adicionado dentro de 2 minutos. A reação foi agitada durante 6 horas à temperatura ambiente. Foram adicionados 5 ml de Na2S203 aquoso, a mistura foi agitada durante 15 minutos, e os solventes orgânicos foram separados, lavados com salmoura e NaHC03 aquoso, secos sobre Na2S04, filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (40 g de
Si02, heptano/EtOAc num gradiente de 2/3 a 4/1) para fornecer uma espuma (422 mg, 53%). XH NMR (DMSO-ds) : 13,20 (1H, brs) , 5,4-4,5 (brs, 2H) , 4.48 (d, 1H) , 4,12 (d, 1H) , 3,93 (d, 1 H) , 3,89 (dd, 1 H) , 3,73 (d, 1 H) , 3,68 (d, 1 H) , 3,64 (d, 1 H) , 3,56 (dd, 1 H) , 3.48 (ddd, 1 H) , 3,41 (ddd, 1H) , 3,4-3,1 (brs, 1H) , 3,07 (ddd, 1H) , 1,26 (d, 3H) , 1,15 (d, 3H) . b) 8-[4-(lH-Imidazol-2-il)-fenil]-2,6-bis-((R)-3- metil-morfolin-4-il)-9H-purina 8-Bromo-2,6-bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (99 mg, 250 pmmol) foi dissolvido em 2 mL de acetonitrilo e 0,2 mL de água, sob argão. Ácido borónico de 4-(lH-imidazol-2-il)fenilo (58,7 mg, 313 mmol), CsF (57 mg, 375 ymol), e Pd(PPh3)4 (28,9 mg, 25 ymol) foram adicionados. A suspensão foi agitada a 50°C durante 10 minutos, num frasco de microondas fechado. Em seguida foi irradiado, durante 40 minutos, num aparelho de microondas a 150°C. O frasco foi arrefecido e destapado, e a mistura de reação foi diluída com 50 mL de CH2CI2 e 10 mL de isopropanol. Os solventes orgânicos foram lavados com salmoura e NaHC03 aquoso, secos sobre Na2S04, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (40 g de SÍO2, CH2Cl2/EtOAc/NH3 aquoso num gradiente de 100/0/0,1 a 90/10/0,1) para fornecer o produto como um sólido (58 mg, 48%). LC-MS a 254nm; [M+H] 4 61,3; Rt 0,7 6 min; (LCMS método 1) . XH NMR (600 MHz, DMSO-d6) : 13, 03 (s, 1 H) , 12,62 (s, 1H) , 8,10 (d, 2H) , 8,02 (d, 2 H) , 7,31 (s, 1 H) , 7,07 (s, 1 H) , 6,0-4,5 (brs, 2H) , 4,55 (dd, 1 H) , 4,20 (d, 1 H) , 4,0-3,0 (brs, 1 H) , 3,99 (dd, 1H) , 3,92 (dd, 1H) , 3,79 (d, 1H) , 3,74-3,68 (m, 2H) , 3,61 (dd, 1H) , 3,55 (ddd, 1H) , 3,45 (ddd, 1H) , 3,12 (ddd, 1H) , 1,32 (d, 3 H) , 1,19 (d, 3 H) .
Exemplo 5: 8-(6-Fluoro-lH-indol-4-il)-2-((S)-3- metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina
4-Cloro-6-fluoro-lH-indole (72 mg, 0,42 mmol) foi dissolvido em 4 mL de dioxano sob atmosfera de argão. Bis(pinacolato)diboro (198 mg, 778 ymol), triciclohexilfospina (19,8 mg, 71 ymol), bis(dibenzilidenacetona)paládio (20,3 mg, 35 ymol) e acetato de potássio (104 mg, 1,06 mmol) foram adicionados sob argão. A reação foi agitada durante 24 horas a 80°C. A mistura de reação foi arrefecida até â temperatura ambiente e diluída com 30 mL de EtOAc. A camada orgânica foi lavada com 20 mL de salmoura, seca sobre Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi filtrado através de uma coluna (40 g de Si02; EtOAc/heptano num gradiente de 0/100 a 12/88), para se obter uma mistura, a gual foi concentrada sob pressão reduzida, e, em seguida, dissolvida em 2 mL de acetonitrilo e 0,2 mL de água sob argão. 8-bromo-2-((S)-3-metilmorfolin-4-il-)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina (100 mg, 153 ymol) foi adicionado, seguido por fluoreto de césio (25,8 mg, 170 ymol) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (26 mg, 23 pmol). A mistura de reação foi agitada a 135°C durante 2 horas num frasco selado. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com 40 mL de EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2S04, filtrada e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (10 g de Si02; éter metil-terc-butilo) para se obter o composto do título como uma espuma (36 mg, 19% em 2 passos).
LC-MS a 254 nm; [M+H] 452,3; Rt 1,06 min; (LCMS método 1). 1H-NMR (400 MHz; DMSO-d6) : 12,95 (s, 1 H) , 11,33 (s, 1H), 7,57 (d, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,25 (s, 1 H), 7,23 (d, 1 H), 6,0-4,5 (brs, 2H) , 4,56 (d, 1 H) , 4,17 (d, 1 H) , 4,0-3,0 (brs, 1 H) , 4,00 (d, 1 H), 3,91 (d, 1 H) , 3,80 (d, 1 H) , 3,75-3,68 (m, 2H) , 3,60 (d, 1 H) , 3,57 (dd, 1 H) , 3,44 (dd, 1 H) , 3,11 (ddd, 1H), 1,35 (d, 3H), 1,18 (d, 3H).
Exemplo 6: {4-[2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-lH-indol-6-il}-metanol
Éster metílico do ácido 4-[2,6-bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-lH-indole-6-carboxílico (exemplo 32, 72 mg, 146 ymol) foi dissolvido em 10 ml de THF, sob argão. LiAlH4 1 N em THF (0,22 mL, 0,22 mmol) foi adicionado a 5°C, e a reação foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente. A reação foi interrompida pela adição de Na2S04 saturado aquoso (1 mL) . A mistura foi diluída com 30 ml de CH2CI2 e 3 mL de isopropanol. As fases orgânicas foram separadas, secas sobre Na2S04, filtradas, e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (12 g de Si02, CH2Cl2/EtOAc num gradiente de 100/0 a 88/12) para fornecer o produto como um sólido (58 mg, 48%). LC-MS a 254nm; [M+H] 4 64,3; Rt 0,88 min; (LCMS método D . XH NMR (600 MHz, DMSO-d6) : 12,83 (s, 1 H) , 11,22 (s, 1 H) , 7, 63 (d, 1 H), 7,44 (s, 1 H) , 7,40 (dd, 1 H) , 7,18 (dd, 1 H) , 6,0-4,5 (brs, 2H) , 5,16 (t, 1 H) , 4,61 (d, 2H) , 4,55 (dd, 1 H) , 4,19 (d, 1H) , 4,0-3,0 (brs, 1H) , 3,99 (dd, 1H) , 3,90 (dd, 1H), 3,79 (d, 1H) , 3, 74-3, 68 (m, 2H) , 3,59 (dd, 1H) , 3,56 (ddd, 1H), 3,44 (ddd, 1H), 3,10 (ddd, 1H), 1,35 (d, 3 H) , 1, 17 (d, 3 H) .
Exemplos 7 a 32
Os Exemplos 7 a 9 na Tabela 2 abaixo podem ser feitos usando procedimentos análogos aos descritos no Exemplo 1, utilizando o apropriado intermediário ácido borónico ou éster borónico.
Os Exemplos 10 a 11 na Tabela 2 abaixo podem ser feitos usando procedimentos análogos aos descritos no Exemplo 2, utilizando o apropriado intermediário ácido borónico ou éster borónico.
Os Exemplos 12 a 26 na Tabela 2 abaixo podem ser feitos usando procedimentos análogos aos descritos no Exemplo 3, utilizando o apropriado intermediário ácido borónico ou éster borónico.
Os Exemplos 27 a 32 na Tabela 2 abaixo podem ser feitos usando procedimentos análogos aos descritos no Exemplo 4, utilizando o apropriado intermediário ácido borónico ou éster borónico.
LISTAGEM DE SEQUÊNCIA
<110> Novartis AG <120> Novel Purine Derivatives and their Use in the Treatment of Disease <130> 54855-US-PSP <160> 1
<170> Patentln version 3.3 <210> 1 <211> 615 <212> PRT <213> Sequência Artificial <22 0> <223> Fusion protein used for autophagy assay <22 0> <221> mCherry <222> (1) .. (236) <22 0>
<221> GFP <222> (241) . . (479) <22 0> <221> LC3A <222> (495) .. (615) <4 0 0> 1
Lisboa, 9 de Agosto de 2016

Claims (17)

REIVINDICAÇÕES
1. Um composto de fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável,
m em que R1 é selecionado a partir do grupo constituído por
em que R18 em cada ocorrência, representa, independentemente, fluoro ou metilo; m representa 0, 1, 2 ou 3; R19 e R20 representam, independentemente, hidrogénio ou flúor; R21 representa flúor; R22 em cada ocorrência, independentemente, representa flúor, metóxi, hidroximentolo ou metoxicarbonilo; q representa 0, 1 ou 2 e r representa 0, 1, 2 ou 3, desde que q + r não seja 0; R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 e R9 representam, independentemente, hidrogénio, Ci_3alquilo ou fluoro-Ci-3alquilo; ou R3 e R6 em conjunto formam uma ponte de metileno; ou R3 e R8 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R5 e R6 em conjunto formam uma ponte etileno; n e p representam independentemente 0, 1 ou 2; R10, R11, R12, R13, R14, R15, R16 e R17 em cada ocorrência, independentemente, representam hidrogénio, Ci_3alquilo, fluoro-Ci_3alquilo ou hidroxi-Ci-3alquilo; ou R11 e R16 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R13 e R14 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R14 e R15, em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados, estão ligados para formar um anel de tetrahidropiranilo; e Y representa O, CHR23, NR26 ou CR24R25, em que R23 representa hidroxilo ou um grupo fluoro-Ci-3alquilo; ou R23 e R13, em conjunto com os átomos de carbono aos quais estão ligados, estão ligados para formar um anel fundido tetrahidrofuranilo; R24 e R25 representam, independentemente, hidrogénio ou halogéneo; ou R24 e R25, em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados, estão ligados para formar um anel de tetrahidropiranilo; e; r26 representa Ci-3alquilo ou oxetanilo; e um composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, selecionado de entre a seguinte lista de compostos: 8-(lH-lndol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2- [1,4]oxazepan-4-il-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(3-propil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol ; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol; 2-(3-Etil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol-4-il) -6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-metil-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il) -2-(6-oxa-2-aza-spiro[3.5]non-2-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-oxetan-3-il-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(tetrahidro-furo[3,4-c]pirrol-5-il)-9H-purina; 2-(Hexahidro-furo[3,4-c]piridin-5-il)-8-(lH-indol- 4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-2-(3-isopropil-morfolin-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-trifluorometil-piperidin-l-il)-9H-purina; 2-(2,6-Dimetil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il) -9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il) -2-(7-oxa-l-aza-spiro[3.5]non-l-il)-9H-purina; {4-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol; e {4-[8-(lH-Indol-4-il)-6-(3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol.
2. Um composto de acordo com a Reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 representa
3. Um composto de acordo com a Reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 representa
4. Um composto de acordo com a Reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 representa
5. Um composto de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 a 4, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 e R9 representam, independentemente, hidrogénio ou metilo, ou R3 e R6 em conjunto formam uma ponte de metileno; ou R3 e R8 em conjunto formam uma ponte etileno; ou R5 e R6 em conjunto formam uma ponte etileno;
6. Um composto de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 a 5, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que Y representa 0.
7. Um composto de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 a 5, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que Y representa CHR23 ou CR24R25.
8. Um composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com a Reivindicação 1 que é selecionado de: 2.6- Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il- 9H-purina; 2-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol-3-il)-9H- purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2- [1,4]oxazepan-4-il-9H-purina; 8-[4-(lH-Imidazol-2-il)-fenil]-2,6-bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(6-Fluoro-l H-indol-4-il)-2-((S)-3-metil- morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; {4-[2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-lH-indol-6-il}-metanol; 2-((S)-3-Metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morf ol in- 4 -il) -8-piridin-2-il-9H-purina; 2.6- Bis-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il- 9H-purina; 2.6- Di-morfolin-4-il-8-piridin-2-il-9H-purina; 2.6- Bis-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol- 3-il)-9H-purina; 2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol- 3- il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-((R)-3-propil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol; 8-[8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-8-aza-biciclo[3.2.1]octan-3-ol ; 2-((R)-3-Etil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-metil-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(6-oxa-2-aza-spiro[3.5]non-2-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-oxetan-3-il-piperazin-l-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(tetrahidro-furo[3,4-c]pirrol-5-il)-9H-purina; 2-(Hexahidro-furo[3,4-c]piridin-5-il)-8-(lH-indol- 4- il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-2-((R)-3-isopropil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(4-trifluorometil-piperidin-l-il)-9H-purina; 2-((2S,6R)-2,6-Dimetil-morfolin-4-il)-8-(lH-indol- 4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-2-(7-oxa-l-aza-spiro[3.5]non-l-il)-9H-purina; { (S) - 4-[8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol; {(R)-4-[8-(lH-Indol-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-2-il]-morfolin-2-il}-metanol; 5-[2,6-Bis- ( (S)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-piridin-2-ilamina; 5-[2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-piridin-2-ilamina; 5-[2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il) - 9H-purin-8-il]-pirimidin-2-il-amina; 8-[4-(lH-Imidazol-2-il)-fenil]-2,6-bis-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; 8-(6-Metoxi-lH-indol-4-il)-2-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina; Éster metilico do ácido 4-[2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purin-8-il]-lH-indole-6-carboxílico; e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
9. Um composto de acordo com a reivindicação 1 que é 2,6-Bis-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il-9H- purina com a seguinte fórmula
ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
10. Um composto de acordo com a Reivindicação 1 que é 8-(6-Fluoro-lH-indol-4-il)-2-((S)-3-metil_morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-9H-purina que tem a sequinte fórmula
ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
11. Um composto de acordo com a Reivindicação 1 que é 2-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-6-((R)-3-metil-morfolin-4-il)-8-piridin-2-il-9H-purina com a seguinte fórmula
ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
12. Um composto de acordo com a Reivindicação 1 que é 2,6-Bis-((S)-3-metil-morfolin-4-il)-8-(lH-pirazol-3-il)-9H-purina que tem a seguinte fórmula
ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
13. Um composto de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 a 12, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para uso como medicamento.
14. Um composto de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 a 12, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização no tratamento ou prevenção de cancro, de uma doença neurodegenerativa ou uma doença oftalmológica.
15. Uma composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 a 12, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um excipiente, diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável.
16. Um produto de combinação compreendendo um composto de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 a 12, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um outro agente terapêutico. Lisboa,! 9 de Agosto de 2016 REFERENCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO Esta lista de referências citadas pelo requerente é apenas para conveniência do leitor, a mesma não faz parte do documento da patente Europeia, ainda que tenha sido tomado o devido cuidado ao compilar as referências, podem não estar excluídos erros ou omissões e o EPO declina quaisquer responsabilidades a esse respeito. Documentos de patentes citadas na Descrição. • WO 2010114494 A · WO 0257423 A • WO 2004078163 A · WO 09606116 A • US 5457105 A · US 4323581 A • US 5616582 A · WO 0262826 A • US 5770599 A · WO 9410202 A • WO 0132651 A · US 5621100 A • US 5747498 A · WO 0409769 A • WO 9630347 A · WO 0100245 A • US 6727256 B · WO 9517182 A • WO 0202552 A · US 2003171303 A • WO 0160814 A · WO 0382272 A • US 5883113 A · WO 9720842 • WO 9961422 A · WO 9902162 A • US 6605617 B · US 2003134846 A • US 6774237 B · WO 9721701 A • US 6258812 B · US 5780454 A • US 4169846 A · US 5482936 A • WO 0324978 A · US 5346905 A • WO 0304505 A · US 5395937 A • US 5041424 A · US 5238944 A • US 5478932 A · US 5525612 A • WO 0230941 A · WO 0487153 A • WO 9707081 A · WO 0464759 A • WO 8907105 A · WO 0460308 A • WO 9307153 A · WO 9512660 A • WO 0104125 A · WO 9405304 A • WO 9308809 A · WO 9729780 A • WO 9406799 A · WO 9805769 A • WO 0027422 A · WO 9843095 A • WO 9613506 A • WO 8807045 A • WO 0179255 A • WO 9804541 A • US 6025387 A • WO 0406834 A • US 6331555 B • US 4689338 A • US 5389640 A • US 5268376 A • US 4929624 A • US 5266575 A • US 5352784 A • US 5494916 A Literatura que não é de patentes, citada na Descrição •VANHAESEBROECK e outros, Annu. Rev. · SAMUELS e outros, Cancer Cell, 2005, Biochem, 2001, vol. 70, 535 vol. 7, 561-573 • KATSO e outros, Annu. Rev. Ce// Dev. · PARSONS e outros, Nature, 2005, vol. Biol., 2001, vol.
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