PT1877390E - Compostos benzisoxazole-piridina e métodos para a sua utilização - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO

"COMPOSTOS BENZISOXAZOLE-PIRIDINA E MÉTODOS PARA A SUA UTILIZAÇÃO"

Campo da Invenção A invenção refere-se a métodos para o tratamento de distúrbios do sono e a composições úteis para tais métodos.

Antecedentes da Invenção A dificuldade em adormecer ou permanecer a dormir é um problema médico que é originado devido a diversas razões. Por vezes, estes problemas são originados por condições endógenas, tais como a apneia do sono ou a insónia. Outras vezes, estes problemas são originados por stresses exógenos tais como o efeito perturbador de horários de trabalho por turnos e dessincronia ("jet lag"). Seja causada por uma fonte endógena ou exógena, a dificuldade em adormecer ou permanecer a dormir pode resultar num problema do sono, o que afecta a saúde, a qualidade de vida, e a segurança daqueles afectados.

Tratamentos farmacêuticos existentes para a indução do sono incluem sedativos ou hipnóticos tais como 2 ΡΕ1877390 derivados da benzodiazepina e de barbituratos. Estes tratamentos têm inúmeras desvantagens, incluindo insónia de abstinência ("rebound"), atraso no inicio dos efeitos sedativos desejados, persistência dos efeitos sedativos após o periodo de sono desejado, e efeitos secundários devidos à actividade não especifica tais como défices psicomotores e de memória, miorrelaxamento, e arquitectura do sono perturbada, incluindo inibição do sono REM. Além disso, os sedativos e agentes hipnóticos podem causar habituação, podem perder a sua eficácia após utilização prolongada, e podem ser metabolizados mais lentamente por algumas pessoas.

Consequentemente, os médicos frequentemente recomendam ou prescrevem agentes anti-histaminicos como um tratamento mais suave para os distúrbios do sono quando os agentes hipnóticos são menos apropriados. No entanto, muitos agentes anti-histaminicos sofrem de diversos efeitos secundários. Estes efeitos secundários incluem o prolongamento do intervalo QT no electrocardiograma de um indivíduo, assim como efeitos secundários do sistema nervoso central (SNC) tais como uma diminuição do tónus muscular e pálpebras pesadas. Finalmente, tais compostos podem se ligar a receptores muscarínicos, o que conduz a efeitos secundários anti-colinérgicos tais como a visão turva, a boca seca, prisão de ventre, problemas urinários, tonturas e ansiedade. WO 97/21439 e WO 02/066446 referem-se à 3 ΡΕ1877390 utilização de derivados de 1-{4-[4-aril(ou heteroaril)-1-piperazinil]-butil}-ΙΗ-azole para a preparação de medicamentos para utilização no tratamento de distúrbios compulsivos obsessivos, apneia do sono, disfunções sexuais, emese e enjoo de movimento. Marcello Leopoldo et al., J. Med. Chem., 2004. Vol. 47, 26, páginas 6616-6624 refere-se a um estudo nas N-(1,2,3,4-tetra-hidronaftalen-l-il)-4-arilo-l-piperazinalquilamidas como uma classe de agentes receptores da 5-hidroxitriptamina7.

Como resultado, são necessários tratamentos promotores do sono com efeitos secundários reduzidos. Além disso, apesar de compostos indutores do sono conhecidos serem eficazes para o tratamento da insónia do inicio do sono, ou seja, a dificuldade de um indivíduo em adormecer, não existem actualmente fármacos indicados para o tratamento da insónia associada à manutenção do sono, ou seja, a manutenção do sono de um indivíduo ao longo de um período de sono normal depois de adormecer. Assim, existe ainda uma necessidade para tratamentos farmacêuticos melhorados para a manutenção do sono em indivíduos que necessitem de tal tratamento.

Sumário da Invenção A presente invenção refere-se a compostos de benzisoxazole que modulam o sono.

Num aspecto, a invenção refere-se a um composto de Fórmula IV: ΡΕ1877390 4

(IV) ou um seu sal farmaceuticamente eficaz em que t é 1 ou 2; Ri, R2, R3, e R4 são, independentemente, H, F, Cl, Br, CF3, CH3, OH, OCH3, CH2OCH3, ou CH2OCH2CH3; R5-Re são H, CH3, CH2CH3, ou R5 e Rg, em conjunto com o carbono ao qual estão ligados, são unidos de modo a formar um anel espiro de tamanho 3, 4, 5, 6, ou 7; e Z é seleccionado de CO2H, CONHS (0)2-alquilo, CONHS (0)2_cicloalquilo, CONHS (0)2-hetero-alquilo, e tetrazole.

Numa forma de forma de realização, Ri, R2, R3, e R4 são cada um H. Noutra forma de realização, Ri, R3, e R4 são cada um H. Noutra forma de realização, Ri, R2, e R4 são cada um H. Noutra forma de realização, pelo menos um de R2 e R3 não é H. Noutra forma de realização, R2 e R3 não são H. Noutra forma de realização, Ri é H. Noutra forma de realização, pelo menos um de R2 e R3 é seleccionado de CH3 ou 0CH3. Noutra forma de realização, R2 é CH3. Noutra forma de realização, R3 é CH3. Noutra forma de realização, R3 é 0CH3. 5 ΡΕ1877390

Numa forma de realização, t é 1. Noutra forma de realização, t é 2.

Numa forma de realização, Rs e R 6 são cada um H. Noutra forma de realização, R5 e R6 são cada um metilo. Noutra forma de realização, R5 e R6 são cada um etilo. Noutra forma de realização, R5 θ R6 em conjunto com 0 carbono ao qual estão ligados são unidos para formar um anel espiro ciclopropilo.

Numa forma de realização, Z é COOH. Noutra forma de realização, Z é seleccionado de C0NHS02-alquilo e C0NHSC>2-heteroalquilo. Noutra forma de realização, Z é CONHSO2CH3. Noutra forma de realização, Z é CONHSO2CH (CH3) 2. Noutra forma de realização, Z é ΛΛ C(O)NHS0j—-N p

Numa forma de realização, o sal é um sal de adição de ácido. Noutra forma de realização, o sal é um sal hidrocloreto.

Noutro aspecto, a invenção refere-se a um composto seleccionado de: ΡΕ1877390 6

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Noutro aspecto, a invenção composição farmacêutica compreendendo Fórmula IV: refere-se a uma um composto de 7 ΡΕ1877390 Ν

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Ζ R* (IV) em que té 1 ou 2; Ri, R2, R3, e R4 são, independentemente, H, F, Cl, Br, CH3, CF3, OH, 0CH3, CH2OCH3, ou CH2OCH2CH3; R5- Rê são H, CH3, CH2CH3, ou R5 e R6, em conjunto com o carbono ao qual estão liqados, são unidos de modo a formar um anel espiro de tamanho 3, 4, 5, 6, ou 7; e Z é seleccionado de C02H, CONHS(0)2-alquilo, CONHS (0)2-cicloalquilo, CONHS (0)2-heteroalquilo, e tetrazole.

Noutro aspecto, a invenção refere-se a um composto representado pela Fórmula IV: R. (

(IV) ou um seu sal f armaceuticamente eficaz em que t é 1 ou 2; ΡΕ1877390

Rlr R2, R3, e R4 são, independentemente, H, F, Cl, Br, CH3, CF3, OH, 0CH3, CH2OCH3, ou CH2OCH2CH3; R5-R6 são H, CH3, CH2CH3, ou R5 e Rg, em conjunto com o carbono ao qual estão ligados, são unidos de modo a formar um anel espiro de tamanho 3, 4, 5, 6, ou 7; e Z é seleccionado de C02H, CONHS (0)2-alquilo, CONHS(0)2_cicloalquilo, CONHS(0)2_ heteroalquilo, e tetrazole; para utilização no tratamento de um distúrbio do sono.

Noutra forma de realização, o distúrbio do sono é seleccionado do grupo que consiste em insónia, hipersonia, narcolepsia, sindrome da apneia do sono, parassonia, sindrome da perna inquieta, e anomalia do ritmo circadiano. Noutra forma de realização, a anomalia do ritmo circadiano é seleccionada do grupo que consiste em "jet-lag", distúrbios causados por horários de trabalho por turnos, e sindrome de fase atrasada ou avançada do sono. Noutra forma de realização, o distúrbio do sono é insónia. Noutra forma de realização, a insónia é tratada no indivíduo realizando-se pelo menos uma acção seleccionada do grupo que consiste na diminuição do tempo para despoletar o sono, aumentar a duração média do periodo de sono, e aumentar a duração máxima do periodo de sono. Numa forma de realização, o composto ou sal, solvato, hidrato, ou pro-fármaco farmaceu-ticamente aceitável, é administrado na forma de uma composição farmacêutica que compreende pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável. Noutra forma de realização, o composto ou sal, solvato, hidrato, ou pro-fármaco farmaceuticamente aceitável é co-administrado com 9 ΡΕ1877390 uma ou mais terapias adicionais. Noutra forma de realização, o composto é seleccionado do grupo de compostos que consiste em:

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Descrição Detalhada

Os detalhes de pelo menos uma forma de realização da invenção são apresentados na descrição que abaixo acompanha este documento. Apesar de quaisquer métodos e materiais similares ou equivalentes àqueles aqui descritos podem ser utilizados na prática ou no teste da presente invenção. Outras características, objectos, e vantagens da invenção serão aparentes da descrição. Na especificação, as formas singulares também incluem o plural excepto se o contexto claramente dite de outro modo. Excepto se definido de outro modo, todos os termos técnicos e científicos aqui utilizados têm os mesmos significados que aqueles geralmente entendidos por qualquer alguém perito na técnica no âmbito da qual pertence esta invenção. Em caso de conflito, a presente especificação prevalece. A invenção refere-se a novas composições ben-zisoxazole piperazina.

Noutro aspecto, a invenção proporciona um composto de Fórmula IV:

(IV) 11 ΡΕ1877390 ou um seu sal f armaceuticamente eficaz em que t é 1 ou 2; Ri, R2, R3, e R4 são, independentemente, H, F, Cl, Br, CH3, CF3, OH, 0CH3, CH2OCH3, ou CH2OCH2CH3; R5-R6 são H, CH3, CH2CH3, ou R5 e Rô, em conjunto com o carbono ao qual estão ligados, são unidos de modo a formar um anel espiro de tamanho 3 a 7; e Z é seleccionado de CO2H, CONHS (0)2-alquilo, CONHS(O)2_cicloalquilo, CONHS(0)2_heteroalquilo, e tetrazole. Num aspecto, a composição de Fórmula IV também inclui um excipiente farmaceuticamente aceitável. Noutro aspecto, a invenção refere-se a uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula IV.

Numa forma de realização, o composto de Fórmula IV é IVa, IVb, IVc, ou IVd. Por exemplo, quando R5 e R6 são metilo, os compostos têm a fórmula geral IVa:

(IVa); quando R5 e R6 estão ligados para formar um anel espiro de 3 membros (ciclopropilo) , os compostos têm a fórmula geral IVb: ΡΕ1877390 12

(IVb); quando R5 e R6 IVc: são etilo, os compostos têm a fórmula geral

(IVc); quando R5 e Rg são etilo, e os carbonos Cl estão ligados para formar um anel espiro de 3 membros (ciclopropilo), os compostos têm a fórmula geral IVd; R, <TT VV Λ i

(IVd) C3, C4, C5 OU C 6,

Numa forma de realização, Z é CCqH ou tetrazole. Noutra forma de realização, Z é uma sulfonamida de acilo. Por exemplo, Z é CONHSCb-alquilo em que alquilo é uma cadeia alquilo linear C2, C3, C4, C5 ou C6, alquilo 13 ΡΕ1877390 ramificado C3, C4, C5 ou C<s, ou cicloalquilo Ci, C2, C3, C4, C5, Cfjr C7 ou Cs. Numa forma de realização, t é 1.

Numa forma de realização, pelo menos um de R4-R4 e pelo menos um de R5-R6 não são hidrogénio.

Num aspecto, a invenção proporciona um composto com a estrutura do composto 1:

São apresentados abaixo compostos representativos da invenção.

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Os compostos da invenção apresentam uma acti vidade de ligação a diversos alvos, incluindo o receptor 5HT2a. Deste modo, estes compostos podem ser úteis para o tratamento ou a prevenção de doenças ou distúrbios que implicam o receptor 5HT2a.

Os compostos da invenção são utilizados para tratar diversos pacientes, incluindo, por exemplo, humanos, animais de companhia, animais de pecuária, animais de laboratório e animais selvagens. 15 ΡΕ1877390

Numa forma de realização, os compostos da invenção podem ser úteis para a modulação do sono num paciente. Por exemplo, o composto pode ser utilizado para a diminuição do tempo para o inicio do sono, o aumento da duração média do periodo de sono, e/ou o aumento da duração máxima do periodo de sono. Numa forma de realização, a modulação de sono pode tratar um distúrbio do sono.

Noutro aspecto, os compostos benzisoxazole da invenção podem ser utilizados no tratamento de um distúrbio do sono, incluindo, por exemplo, anomalias do ciclo circadiano, insónia, parassonia, sindrome da apneia do sono, narcolepsia e hipersonia.

Numa forma de realização, os compostos benzisoxazole da invenção podem ser utilizados no tratamento de uma anomalia do ritmo circadiano, tais como, por exemplo, dessincronia ("jet lag"), distúrbios causados por horários de trabalho por turnos, sindrome da fase atrasada do sono, sindrome da fase avançada do sono e distúrbio de sono-vigilia diferente das 24 horas.

Noutra forma de realização, os compostos benzisoxazole podem ser utilizados no tratamento de insónia, incluindo por exemplo, insónia extrínseca, insónia psico-fisiológica, insónia de altitude, síndroma das pernas inquietas, distúrbio do movimento periódico dos membros, insónia dependente de medicação, insónia dependente de drogas, insónia dependente de álcool e insónia associada 16 ΡΕ1877390 com distúrbios mentais, tais como ansiedade. Os compostos da invenção podem também ser utilizados para tratar a fragmentação do sono com doença de Parkinson, doença de Alzheimer, doenças de Huntington, e outras distonias.

Numa forma de realização, os compostos ben-zisoxazole da invenção podem ser utilizados para tratar um distúrbio de parassonia, tais como, por exemplo, sonambulismo, pavor nocturnus, distúrbio do comportamento de sono REM, bruxismo no sono e enurese.

Noutra forma de realização, os compostos ben-zisoxazole podem ser utilizados para tratar o distúrbio da apneia do sono, tais como, por exemplo, apneia do sono central, apneia obstrutiva do sono e apneia mista do sono.

Noutra forma de realização, os compostos ben-zisoxazole podem ser utilizados para tratar distúrbios relacionados com distúrbios do sono, tais como, por exemplo, fibromialgia.

Definições

Para conveniência, certos termos utilizados na especificação, são aqui reunidos exemplos e reivindicações anexas. "Tratamento" inclui qualquer efeito, por exemplo, diminuição, redução, modulação, ou eliminação que resulta na melhoria da condição, doença, distúrbio, etc. 17 ΡΕ1877390 "Alquilo" inclui grupos alifáticos saturados, incluindo grupos alquilo de cadeia linear (por exemplo, metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo), grupos alquilo ramificados (por exemplo, isopropilo, tert-butilo, isobutilo), grupos cicloalquilo (por exemplo, aliciclicos) (por exemplo, ciclopropilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclo-octilo), grupos cicloalquilo substituídos com alquilo e grupos alquilo substituídos com cicloalquilo. Nalgumas formas de realização, um alquilo de cadeia linear ou ramificada tem seis ou menos átomos de carbono no seu esqueleto (por exemplo, C1-C6 para cadeia linear, C3-C6 para cadeia ramificada. Além disso, os cicloalquilos têm de três a oito átomos de carbono na sua estrutura anelar. Por exemplo, os cicloalquilos têm cinco ou seis átomos de carbono na estrutura anelar. "C1-C6" inclui grupos alquilo contendo um a seis átomos de carbono. 0 termo "alquilo substituído" refere-se a unidades alquilo com substituintes em substituição de um hidrogénio em pelo menos um dos carbonos do esqueleto de hidrocarboneto. Tais substituintes podem incluir, por exemplo, alquilo, alcenilo, alcinilo, halogéneo, hidroxilo, alquilcarboniloxilo, arilcarboniloxilo, alcoxicarboniloxi-lo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, di-alquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluindo alquil- 18 ΡΕ1877390 amino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, e alquil-arilamino), acilamino (incluindo alquilcarbonilamino, aril-carbonilamino, carbamoilo e ureido) , amidino, imino, sulfi-drilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, al-quilsulfinilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, ou uma unidade aromática ou heteroaromática. Os ciclo-alquilos podem ter uma substituição suplementar, por exemplo, com os substituintes descritos acima. Uma unidade "alquilarilo" ou "aralquilo" é um alquilo substituído com um arilo (por exemplo, fenilmetilo (benzilo)). "Alquilo Substituído" inclui ainda grupos alquilo que têm átomos de oxigénio, azoto, enxofre ou fósforo em substituição de pelo menos um átomo de carbono do esqueleto de hidrocarboneto. "Arilo" inclui grupos com aromaticidade, incluindo grupos aromáticos, de 5 e 6 membros "não conjugados", ou de anel único, que podem incluir desde zero a quatro heteroátomos, assim como sistemas "conjugados", ou multi-ciclicos, com pelo menos um anel aromático. Exemplos de grupos arilo incluem benzeno, fenilo, pirrole, furano, tiofeno, tiazole, isotiazole, imidazole, triazole, tetra-zole, pirazole, oxazole, iso-oxazole, piridina, pirazina, piridazina, e pirimidina. Além disso, o termo "arilo" inclui grupos arilo multiciclico, por exemplo triciclico, biciclico, por exemplo, naftaleno, benzoxazole, benzodioxa-zole, benzotiazole, benzoimidazole, benzotiofeno, metileno-dioxifenilo, quinolina, isoquinolina, neftridina, indole, benzofurano, purina, benzofurano, deazapurina, ou indoli- 19 ΡΕ1877390 zina. Aqueles grupos arilo com heteroátomos na estrutura anelar podem também ser referidos como "heterociclos arilo", "heterociclos", "heteroarilos" ou "heteroaromá-ticos". 0 anel aromático pode ser substituído pelo menos numa posição no anel com tais substituintes tais como descritos acima, tais como por exemplo, halogéneo, hidro-xilo, alcoxilo, alquilcarboniloxilo, arilcarboniloxilo, alcoxicarboniloxilo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, alquilaminocarbonilo, aralquilaminocarbo-nilo, alcenilaminocarbonilo, alquilcarbonilo, arilcarbo-nilo, aralquilcarbonilo, alcenilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluindo alquilamino, dialquil-amino, arilamino, diarilamino, e alquilarilamino) , acil-amino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoílo e ureído), amidino, imino, sulfidrilo, alquil-tio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoílo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, ou uma porção aromática ou heteroaromática. Grupos arilo podem também ser fundidos ou formar uma ponte com anéis alicíclicos ou heterocíclicos, que não são aromáticos, de modo a formar um sistema multicíclico (por exemplo, tetralina, metilenodi-oxifenilo). "Alcenilo" inclui grupos alifáticos insaturados análogos em comprimento e à possível substituição ais alquilos descritos acima, mas que contêm pelo menos uma ligação dupla. Por exemplo, o termo "alcenilo" inclui 20 ΡΕ1877390 grupos alcenilo de cadeia linear (por exemplo, etenilo, propenilo, butenilo, pentenilo, hexenilo, heptenilo, octenilo, nonenilo, decenilo) , grupos alcenilo de cadeia ramificada, grupos cicloalcenilo (por exemplo aliciclico) (por exemplo, ciclopropenilo, ciclopentenilo, ciclo-hexenilo, ciclo-heptenilo, ciclo-octenilo), grupos cicloalcenilo substituídos por alquilo ou alcenilo, e grupos alcenilo substituídos por cicloalquilo ou cicloalcenilo. 0 termo "alcenilo" inclui ainda grupos alcenilo que incluem átomos de oxigénio, azoto, enxofre ou fósforo que substituem em pelo menos um dos átomos de carbono do esqueleto de hidrocarboneto. Nalgumas formas de realização, um grupo alcenilo de cadeia linear ou ramificada tem seis ou menos átomos de carbono no seu esqueleto (por exemplo, C2-C6 para cadeia linear, C3~C6 para cadeia ramificada). Do mesmo modo, grupos cicloalcenilo podem ter de três a oito átomos de carbono na sua estrutura anelar, e, por exemplo, têm cinco ou seis átomos de carbono na estrutura anelar. O termo "alcenilo" também inclui tanto "alcenilos não substituídos" como "alcenilos substituídos", sendo que este último refere-se a porções alcenilo com substituintes que substituem um hidrogénio em pelo menos um dos átomos de carbono do esqueleto de hidrocarboneto. Tais substituintes podem incluir, por exemplo, grupos alquilo, grupos alci-nilo, halogéneos, hidroxilo, alquilcarboniloxilo, arilcar-boniloxilo, alcoxicarboniloxilo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbo-nilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilami- 21 ΡΕ1877390 nocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfo-nato, fosfinato, ciano, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, e alquilarilamino), acilamino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonil-amino, carbamoilo e ureido), amidino, imino, sulfidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsul-finilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluo-rometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, ou uma unidade aromática ou heteroaromática. "Alcinilo" inclui grupos alifáticos insaturados análogos em comprimento e possível substituição aos alquilos descritos acima, mas que contêm pelo menos uma ligação tripla. Por exemplo, "alcinilo" inclui grupos alcinilo de cadeia linear (por exemplo, etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo, heptinilo, octinilo, noninilo, decinilo), grupos alcinilo de cadeia ramificada, grupos alcinilo substituídos por cicloalquilo ou cicloalcenilo. 0 termo "alcinilo" inclui ainda grupos alcinilo que incluem átomos de oxigénio, azoto, enxofre ou fósforo que substituem em pelo menos um dos átomos de carbono do esqueleto de hidrocarboneto. Nalgumas formas de realização, um grupo alcinilo de cadeia linear ou ramificada tem seis ou menos átomos de carbono no seu esqueleto (por exemplo, C2-C6 para cadeia linear, C3-C6 para cadeia ramificada). 0 termo "C2-C6" inclui grupos alcinilo contendo dois a seis átomos de carbono. 0 termo "alcinilo" também inclui tanto "alcinilos 22 ΡΕ1877390 não substituídos" como "alcinilos substituídos", sendo que este último refere-se a porções alcinilo com substituintes que substituem um hidrogénio em pelo menos um dos átomos de carbono do esqueleto de hidrocarboneto. Tais substituintes podem incluir, por exemplo, grupos alquilo, grupos alcinilo, halogéneos, hidroxilo, alquilcarboniloxilo, arilcar-boniloxilo, alcoxicarboniloxilo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicar-bonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquil-aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, e alquilarilamino), acilamino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonilami-no, carbamoílo e ureído), amidino, imino, sulfidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsul-finilo, sulfonato, sulfamoílo, sulfonamido, nitro, trifluo-rometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, ou uma unidade aromática ou heteroaromática.

Excepto se o número de carbonos for especificado de outro modo, "alquilo inferior" inclui um grupo alquilo, tal como definido acima, mas com desde um a dez, por exemplo um a seis, átomos de carbono na sua estrutura de esqueleto. "Alcenilo inferior" e "alcinilo inferior" têm comprimentos de cadeia de, por exemplo, 2-5 átomos de carbono. "Acilo" inclui compostos e porções que contêm o radical acilo (CH3C0-) ou um grupo carbonilo. "Acilo 23 ΡΕ1877390 substituído" inclui grupos acilo em que pelo menos um dos átomos de hidrogénio são substituídos por, por exemplo, grupos alquilo, grupos alcinilo, halogéneos, hidroxilo, alquilcarboniloxilo, arilcarboniloxilo, alcoxicarboniloxi-lo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquil-aminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, e alquilarilamino), acilamino (incluindo alquilcarbonil-amino, arilcarbonilamino, carbamoílo e ureído), amidino, imino, sulfidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfonato, sulfamoílo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, ou uma unidade aromática ou heteroaromática. "Acilamino" inclui unidades em que uma unidade acilo está ligada a um grupo amino. Por exemplo, o termo inclui os grupos alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoílo e ureídos. "Aroílo" inclui compostos e unidades com uma unidade arilo ou heteroaromática ligada a um grupo carbo-nilo. Exemplos de grupos aroílo incluem fenilcarboxilo, naftilo, carboxilo, etc. "Alcoxialquilo", "alquilaminoal-quilo" e "tioalcoxialquilo" incluem grupos alquilo, tais como descritos acima, que incluem ainda átomos de oxigénio, azoto ou enxofre que substituem pelo menos um dos átomos de carbono do esqueleto de hidrocarboneto, por exemplo átomos de oxigénio, azoto ou enxofre. 24 ΡΕ1877390 O termo "alcoxi" ou "alcoxilo" inclui grupos alquilo, alcenilo, e alcinilo substituídos e não substituídos, covalentemente ligados a um átomo de oxigénio. Exemplos de grupos alcoxi (ou radicais alcoxilo) incluem grupos metoxi, etoxi, isopropiloxi, propoxi, butoxi, e pentoxi. Exemplos de grupos alcoxi substituídos incluem grupos alcoxi halogenados. Os grupos alcoxi podem ser substituídos com grupos tais como alcenilo, alcinilo, halogéneo, hidroxilo, alquilcarboniloxilo, arilcarboniloxi-lo, alcoxicarboniloxilo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo, amino-carbonilo, alquilaminocarbonilo, dialquilaminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfi-nato, ciano, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, e alquilarilamino), acilamino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carba-moílo e ureído), amidino, imino, sulfidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinilo, sulfo-nato, sulfamoílo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilarilo, ou uma unidade aromática ou heteroaromática. Exemplos de grupos alcoxi substituídos com halogéneo incluem, mas não estão limitados a, fluorometoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, cloro-metoxi, diclorometoxi, e triclorometoxi.

Os termos "heterociclilo", ou "grupo hetero-cíclico" incluem estruturas anelares fechadas, por exemplo, anéis de 3- a 10-, ou de 4- a 7- membros, que incluem pelo 25 ΡΕ1877390 menos um heteroátomo. 0 termo "heteroalquilo" inclui grupos alquilo que contêm pelo menos um heteroátomo. "Heteroátomo" inclui átomos de qualquer elemento diferente de carbono ou hidrogénio. Exemplos de heteroátomos incluem azoto, oxigénio, enxofre e fósforo. 0 termo "heteroalquilo" inclui grupos cicloalquilo, por exemplo, morfolina, piperidina, piperazina, etc.

Grupos heterociclilo podem ser saturados ou insaturados e incluem pirrolidina, oxolano, tiolano, piperidina, piperazina, morfolina, lactonas, lactamas tais como azetidinonas e pirrolidinonas, sultamas, e sultonas. Grupos heterociclicos tais como pirrole e furano podem ter um carácter aromático. Incluem estruturas anelares fundidas tais como quinolina e isoquinolina. Outros exemplos de grupos heterociclicos incluem piridina e purina. O anel heterociclico pode ser substituído em pelo menos uma posição com tais substituintes tal como descrito acima, como por exemplo, halogéneo, hidroxilo, alquilcarboniloxi-lo, arilcarboniloxilo, alcoxicarboniloxilo, ariloxicarbo-niloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, e alquilarilamino), acilamino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonil-amino, carbamoílo e ureído), amidino, imino, sulfidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, sulfonato, sulfamoílo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, ou uma unidade aromática ou hetero- 26 ΡΕ1877390 aromática. Os grupos heterocíclicos podem também ser substituídos em pelo menos um átomo constituinte com, por exemplo, um alquilo inferior, um alcenilo inferior, um alquiltio inferior, um alquilamino inferior, um alquilcar-boxilo inferior, um nitro, um hidroxilo, -CF3, ou -CN, ou semelhantes. 0 termo "tiocarbonilo" ou "tiocarboxilo" inclui compostos e unidades que contêm um carbono ligado com uma ligação dupla a um átomo de enxofre. 0 termo "éter" inclui compostos ou unidades que contêm um oxigénio ligado a dois átomos de carbono ou heteroátomos diferentes. Por exemplo, o termo inclui "alcoxialquilo" que se refere a um grupo alquilo, alcenilo, ou alcinilo covalentemente ligado a um átomo de oxigénio que está covalentemente ligado a outro grupo alquilo. 0 termo "éster" inclui compostos e unidades que contêm um carbono ou um heteroátomo a um átomo de oxigénio que está ligado ao carbono de um grupo carbonilo. 0 termo éster inclui grupos alcoxicarboxilo tais como metoxi-carbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, butoxicarboni-lo, pentoxicarbonilo, etc. Os grupos alquilo, alcenilo, ou alcinilo são tais como definidos acima. 0 termo "tioéter" inclui compostos e unidades que contêm um átomo de enxofre ligado a dois carbonos ou heteroátomos diferentes. Exemplos de tioéteres incluem, mas 27 ΡΕ1877390 não se limitam a alctioalquilos, alcltioalcenilos e alcltioalcinilos. 0 termo "alcltioalquilos" inclui compostos com um qrupo alquilo, alcenilo, ou alcinilo ligado a um átomo de enxofre que está ligado a um grupo alquilo. Do mesmo modo, o termo "alctioalcenilos" e "alctioalcinilos" refere-se a compostos ou unidades em que um grupo alquilo, alcenilo, ou alcinilo está ligado a um átomo de enxofre que está covalentemente ligado a um grupo alcinilo. 0 termo "hidroxi" ou "hidroxilo" inclui grupos com -OH ou -0'. 0 termo "halogéneo" inclui fluoreto, brometo, cloreto, iodeto, etc. 0 termo "per-halogenado" refere-se geralmente a uma porção em que todos os hidrogénios são substituídos por átomos de halogéneo. alcoxicarbonilo, "Policiclilo" ou "radical policíclico" refere-se a dois ou mais anéis cíclicos (por exemplo, cicloalquilos, cicloalcenilos, cicloalcinilos, arilos e/ou heterociclilos) nos quais um ou mais carbonos são comuns a dois anéis adjacentes. Anéis que sejam unidos através de átomos não adjacentes são denominados anéis "em ponte". Cada um dos anéis do policiclo podem ser substituídos com tais substituintes tais como descrito acima, como por exemplo, halogéneo, hidroxilo, alquilcarboniloxilo, arilcarboniloxi-lo, alcoxicarboniloxilo, ariloxicarboniloxilo, carboxilato, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, alquilaminocarbonilo, 28 ΡΕ1877390 aralquilaminocarbonilo, alcenilaminocarbonilo, alquilcar-bonilo, arilcarbonilo, aralquilcarbonilo, alcenilcarbonilo, aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, e alquilarilamino), acilamino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonil-amino, carbamoilo e ureido), amidino, imino, sulfidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsul-finilo, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluo-rometilo, ciano, azido, heterociclilo, alquilo, alquilari-lo, ou uma porção aromática ou heteroaromática.

Um "grupo aniónico", tal como aqui utilizado, refere-se a um grupo que é carregado negativamente a um pH fisiológico. Os grupos aniónicos incluem carboxilato, sulfato, sulfonato, sulfinato, sulfamato, tetrazolilo, fosfato, fosfonato, fosfinato, ou fosforotionato ou seus equivalentes funcionais. "Equivalentes funcionais" de grupos aniónicos pretendem incluir bioisosteres, por exemplo, bioisosteres de um grupo carboxilato. Os bioisosteres englobam tanto equivalentes bioisosteres clássicos como equivalentes bioisosteres não clássicos. Os bioisosteres clássicos e não clássicos são conhecidos na técnica (ver, por exemplo, Silverman, R. B. The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action, Academic Press, Inc.: San Diego, Calif., 1992, pp. 19-23). Outro grupo aniónico é um carboxilato. O termo "funcionalidade instável" refere-se a um 29 ΡΕ1877390 padrão de substituição que contém uma ligação lábil, por exemplo, uma funcionalidade ou ligação que é susceptível de hidrólise ou quebra em condições fisiológicas (por exemplo, soluções aquosas na gama de pH neutro). Exemplos de funcionalidades instáveis incluem acetais e cetais.

Os termos "polimorfos cristalinos" ou "polimor-fos" refere-se à existência de mais do que uma forma de cristal para um composto, seu sal ou solvato. Os polimorfos cristalinos dos compostos análogos de benzisoxazole são preparados por cristalização sob diferentes condições.

Além disso, os compostos da presente invenção, por exemplo, os sais dos compostos, podem existir quer na forma hidratada ou não hidratada (anidra) ou como solvatos com outras moléculas de solvente. Exemplos não limitantes de hidratos incluem mono-hidratos, di-hidratos, etc. Exemplos não limitantes de solvatos incluem solvatos de etanol, solvatos de acetona, etc. "Tautómeros" refere-se a compostos cujas estruturas diferem marcadamente no arranjo de átomos, mas que existem num equilíbrio fácil e rápido. Deve entender-se que compostos das fórmulas I-IVd podem ser representados como diferentes tautómeros. Deverá também ser entendido que quando os compostos têm formas tautoméricas, pretende-se que todas as formas tautoméricas estejam no âmbito da invenção, e a nomenclatura dos compostos não exclui qualquer forma tautomérica. 30 ΡΕ1877390

Os compostos, sais e profármacos da presente invenção podem existir em várias formas tautoméricas, incluindo a forma enol e imina, e a forma ceto e enamina e isómeros geométricos e suas misturas. Todas tais formas tautoméricas são incluídas no âmbito da presente invenção. Os tautómeros existem na forma de misturas de um conjunto tautomérico em solução. Na forma sólida, geralmente predomina um tautómero. Apesar de um tautómero poder ser descrito, a presente invenção inclui todos os tautómeros dos presentes compostos.

Um tautómero é um de dois ou mais isómeros estruturais que existem em equilíbrio e são facilmente convertidos de uma forma isomérica para outra. Esta reacção resulta na migração formal de um átomo de hidrogénio acompanhada por um desvio de ligações duplas conjugadas adjacentes. Em soluções em que a tautomerização é possível, atingir-se-á um equilíbrio químico dos tautómeros. A razão exacta dos tautómeros depende de diversos factores, incluindo temperatura, solvente, e pH. O conceito de tautómeros que são interconvertíveis por tautomerizações é denominado tautomerismo.

Dos vários tipos de tautomerismo que são possíveis, dois são frequentemente observados. No tautomerismo ceto-enol, ocorre um desvio simultâneo de electrões e de um átomo de hidrogénio. Um tautomerismo anel-cadeia é apresentado pela glucose. Ocorre como resultado do grupo 31 ΡΕ1877390 aldeído (-CH0) numa molécula de cadeia de açúcar que reage com um dos grupos hidroxi (-0H) na mesma molécula para lhe dar uma forma cíclica (em forma de anel).

As tautomerizações são catalisadas por: Base: 1. desprotonação; 2. formação de um anião deslocalizado (por exemplo, um enolato); 3. protonação numa posição diferente do anião; Ácido: 1. protonação; 2. formação de um catião deslocalizado; 3. desprotonação numa posição diferente adjacente ao catião.

Pares tautoméricos comuns são: tautomerismo cetona - enol, amina - nitrilo, lactama - lactima, amida -ácido imídico em anéis heterocíclicos (por exemplo, nas bases nucleotídicas guanina, timina, e citosina), amina -enamina e enamina -enamina. Exemplos incluem:

"Solvatos" significa formas de adição de solvente que contêm quantidades de solvente ou estequiométricas ou não estequiométricas. Alguns compostos têm a tendência de aprisionar uma razão molar fixa de moléculas de solvente no 32 ΡΕ1877390 estado sólido cristalino, formando assim um solvato. Se o solvente for água, o solvato formado é um hidrato, quando o solvente é um álcool, o solvato formado é um alcoolato. Os hidratos são formados pela combinação de uma ou mais moléculas de água com uma das substâncias em que a água retém o seu estado molecular como H20, sendo tal combinação capaz de formar um ou mais hidratos.

Será notado que a estrutura de alguns dos compostos da invenção incluem átomos de carbono assimétricos. Deve assim entender-se que os isómeros que resultam de tal assimetria (por exemplo, todos os enantiómeros e diastereó-meros) são incluídos no âmbito da invenção, excepto se indicado de outro modo. Tais isómeros podem ser obtidos em forma substancialmente pura através de técnicas clássicas de separação e através de sintese controlada estereoquimi-camente. Além disso, as estruturas e outros compostos e porções discutidas neste pedido também incluem todos os seus tautómeros. Os alcenos podem incluir qualquer das geometrias E ou Z, quando apropriado.

Além disso, as estruturas e outros compostos discutidos neste pedido incluem todos os seus isómeros atrópicos. Os isómeros atrópicos são um tipo de estereo-isómero nos quais os átomos de dois isómeros são arranjados de forma diferente no espaço. Os isómeros atrópicos devem a sua existência a uma rotação restrita causada pelo impedimento da rotação de grupos volumosos em relação à ligação central. Tais isómeros atrópicos existem típica- 33 ΡΕ1877390 mente sob a forma de uma mistura, no entanto como resultado de avanços recentes em técnicas cromatográficas, foi possível separar misturas de dois isómeros atrópicos em casos seleccionados. "Composto estável" e "estrutura estável" pretende indicar um composto que é suficientemente robusto para sobreviver o isolamento até um grau útil de pureza de uma mistura reaccional, e a formulação num agente terapêutico eficaz. A linguagem compostos benzisoxazole ou "compostos análogos ao benzisoxazole", "compostos do tipo benzisoxazole" ou "compostos derivados do benzisoxazole" pretende incluir análogos de benzisoxazole ou compostos que incluem um anel benzeno ligado a um isoxazole, (ou seja, similar àquele do benzisoxazole) ligado à posição 4 de um anel piperazina.

Tal como aqui utilizado, o termo "análogo" refere-se a um composto químico que é estruturalmente similar a outro mas difere ligeiramente em composição (como na substituição de um átomo por um átomo de elemento diferente ou na presença de um grupo funcional particular, ou a substituição de um grupo funcional por outro grupo funcional). Assim, um análogo é um composto que é similar ou comparável em função e aparência, mas não em estrutura ou origem do composto de referência. Por exemplo, o composto de referência pode ser um composto de referência 34 ΡΕ1877390 como um benzisoxazole, e um análogo é uma substância que possui uma estrutura química ou propriedades químicas similares àquelas do benzisoxazole de referência.

Tal como aqui definido, o termo "derivado", por exemplo, no termo "derivados de benzisoxazole", refere-se a compostos que têm uma estrutura nuclear comum, e são substituídos com vários grupos tais como aqui descritos. Por exemplo, todos os compostos representados pelas fórmulas I-IVd são derivados benzisoxazole, e têm uma das fórmulas I-IVd como núcleo comum. 0 termo "bioisostere" refere-se a um composto que resulta da permuta de um átomo ou de um grupo de átomos com outro átomo ou grupo de átomos, em termos gerais similar. O objectivo de uma substituição bioisostérica é criar um novo composto com propriedades biológicas similares à do composto de origem. A substituição bioisostérica pode ter uma base físico-química ou topológica. Exemplos de bioisosteres de ácido carboxílico incluem sulfonimidas de acilo, tetrazoles, sulfonatos, e fosfonatos. Ver, por exemplo, Patani e LaVoie, Chem. Ver. 96, 3147-3176 (1996). Nalgumas formas de realização, Z é um ácido carboxílico ou um bioisostere ácido carboxílico.

Tal como aqui utilizado, o termo "distúrbio do sono" inclui condições reconhecidas pelo perito na técnica como sendo distúrbios do sono, por exemplo, condições conhecidas na técnica ou condições que foram propostas ou 35 ΡΕ1877390 que se descobriu serem distúrbios do sono. Um distúrbio do sono também ocorre num indivíduo que tem outros distúrbios médicos, doenças, ou lesões, ou num indivíduo em tratamento com outras medicações ou tratamentos médicos, em que o indivíduo, como resultado, tem dificuldade em adormecer e/ou permanecer a dormir, ou tem um sono que não é reparador, por exemplo, o indivíduo sofre de falta de sono. 0 termo "tratamento de um distúrbio do sono" também inclui uma componente de distúrbio do sono de outros distúrbios, tais como distúrbios do SNC (por exemplo, distúrbios mentais ou neurológicos tais como ansiedade). Adicionalmente, o termo "tratamento de um distúrbio do sono" inclui o efeito benéfico de melhoria de outros sintomas associados com o distúrbio. 0 termo "o período de pico de sono não REM" é definido como uma quantidade absoluta de pico de sono não

REM por hora após o tratamento, com a administração do fármaco a ocorrer ao Tempo Circadiano (TC) 18, que é 6 horas após se desligar as luzes num rato de laboratório nocturno quando hospedado num ciclo de claro-escuro CE 12:12 (12 horas de claridade e 12 horas de escuridão). O critério nominal de 55% de sono não REM por hora é equivalente a 33 minutos de sono não REM por hora.

Tal como aqui utilizado, o termo "sono não REM cumulativo" é definido como o aumento acumulado total líquido no número de minutos de sono não REM, medido ao 36 ΡΕ1877390 longo da duração total do efeito soporífero de um fármaco, o qual tipicamente, mas nem sempre, ocorre nas primeiras 6 horas após o tratamento, ajustada para o número de minutos acumulado total líquido de minutos de sono não REM que ocorreu durante os tempos correspondentes de linha de base sem tratamento do dia registados 24 horas mais cedo, em relação ao tratamento similar com um controlo utilizando somente o veículo.

Tal como aqui definido, o termo "período de sono" refere-se a um episódio discreto de sono contínuo ou praticamente contínuo, compreendido de sono não REM, sono REM, ambas as fases de sono não REM e de sono REM, delimitadas antes e depois do episódio por mais do que dois períodos contíguos de 10 segundos de vigília.

Tal como aqui utilizado, o termo "promoção do sono" é definido como uma diminuição na latência do início do sono tal como é frequentemente, mas não exclusivamente, medido pelo Teste de Latência Múltipla do Sono, ou uma diminuição da latência para voltar a dormir após acordar, ou reduz a tendência para acordar ou permanecer acordado seja espontaneamente ou como resposta a um estímulo ambiental promotor do acordar (por exemplo, barulho, vibração, odor, dor, luz). Em geral, um fármaco promotor do sono encurta a latência para o início do sono para uma duração de permanência na cama desejada, ou encurta a latência para se voltar a adormecer após um período de vigília durante a noite, ou pode aumentar o tempo total de 37 ΡΕ1877390 sono durante a noite. Diz a um composto que apresente estas propriedades que promove o sono.

Tal como aqui utilizado, o termo "consolidação do sono" define-se como a capacidade de se permanecer adormecido ou de outro modo apresentar sono persistente após o inicio do sono, e ao longo do periodo de sono com pouco ou nenhum acordar, tal como medido objectivamente pelo número de vezes em que se acorda de noite, eficiência do sono (número de vezes em que se acorda por quantidade de tempo na cama), ou número de despertares transientes. Em geral, os fármacos de consolidação do sono melhoram a capacidade de permanecer adormecido através do aumento da duração do sono continuo entre episódios espontâneos de vigilia. Diz-se de um composto que apresente estas propriedades que consolida o sono.

Em comparação com a vigilia ou o sono não REM, o sono REM provoca uma depressão respiratória e alterações cardiovasculares episódicas. Durante a insónia de abstinência ("rebound"), os efeitos fisiológicos do sono REM são ampliados e interrompem os ciclos de sono normais.

Tal como aqui definido, "inibição da actividade locomotora desproporcionada" é uma redução da actividade locomotora que excede a redução normal e esperada na actividade comportamental que pode ser atribuída ao sono. "Terapia de combinação" (ou "co-terapia") inclui 38 ΡΕ1877390 a administração de um composto da invenção e de pelo menos um segundo agente como parte de um regime de tratamento especifico que pretende proporcionar o efeito benéfico da co-acção destes agentes terapêuticos. 0 efeito benéfico da combinação inclui, mas não se limita a, co-acção ou farmacocinética ou farmacodinâmica que resulta da combinação de agentes terapêuticos. A administração destes agentes terapêuticos com combinação é tipicamente levada a cabo ao longo de um periodo de tempo definido (geralmente minutos, horas, dias, ou semanas, dependendo da combinação seleccionada). "Terapia de combinação" pode, mas geralmente não, pretende englobar a administração de dois ou mais destes agentes terapêuticos como parte de regimes de mono-terapia separados de um modo sequencial, ou seja, em que cada agente terapêutico é administrado a um tempo diferente, assim como a administração destes agentes terapêuticos, ou pelo menos dois dos agentes terapêuticos de um modo substancialmente simultâneo. A administração substancialmente simultânea pode ser conseguida, por exemplo, através da administração ao indivíduo de uma cápsula com uma razão fixa de cada agente terapêutico ou um cápsulas múltiplas ou simples para cada um dos agentes terapêuticos. A administração sequencial ou substancialmente simultânea de cada agente terapêutico pode ser conseguida por qualquer via apropriada incluindo, mas sem se limitar a, vias orais, vias intravenosas, vias intramusculares, e absorção directa através de tecidos a membrana mucosa. Os agentes terapêuticos podem ser administrados pela mesma via ou por vias diferentes. Por 39 ΡΕ1877390 exemplo, um primeiro agente terapêutico da combinação seleccionada pode ser administrado por injecção intravenosa enquanto que os outros agentes terapêuticos da combinação podem ser administrados por via oral. Alternativamente, por exemplo, todos os agentes terapêuticos podem ser administrados por via oral ou todos os agentes terapêuticos podem ser administrados por injecção intravenosa. A sequência na qual os agentes terapêuticos são administrados não é substancialmente crítica. "Terapia de combinação" também abrange a administração de agentes terapêuticos tais como descritos acima ainda noutra combinação com outros ingredientes activos e terapias sem fármacos (por exemplo, tratamentos cirúrgicos ou mecânicos) . Quando a terapia de combinação compreende ainda um tratamento sem fármaco, o tratamento sem fármaco pode ser realizado a qualquer tempo adequado desde que o efeito benéfico da co-acção da combinação dos agentes terapêuticos e do tratamento sem fármacos seja conseguido. Por exemplo, em casos apropriados, o efeito benéfico é ainda conseguido quando o tratamento sem fármacos é temporariamente removido da administração dos agentes terapêuticos, talvez durante dias ou mesmo semanas.

Os termos "administração parentérica" e "parente-ricamente administrado" tal como aqui utilizados referem-se a modos de administração diferentes da administração entérica e tópica, geralmente por injecção, e inclui, sem limitação, infusão e injecção intravenosa, intramuscular, 40 ΡΕ1877390 intra-arterial, intratecal, intra-capsular, intra-orbital, intra-cardíaca, intra-dérmica, intra-peritoneal, trans-traqueal, subcutânea, sub-cuticular, intra-articular, subcapsular, subaracnóide, intraespinhal e intraesternal. 0 termo "pulmonar" tal como aqui utilizado refere-se a qualquer parte, tecido ou órgão cuja função principal é a permuta de gás com o ambiente externo, por exemplo, permuta de O2/CO2, num paciente. "Pulmonar" refere-se tipicamente a tecidos do tracto respiratório. Assim, a frase "administração pulmonar" refere-se à administração das formulações aqui descritas a qualquer parte, tecido ou órgão cuja função principal é a permuta de gases com o ambiente externo (por exemplo, boca, nariz, faringe, orofaringe, laringofaringe, laringe, traqueia, Carina, brônquios, bronquiolos, alvéolos). Para os objectivos da presente invenção, "pulmonar" também inclui um tecido ou cavidade pertencente ao tracto respiratório, em particular, os seios nasais.

Uma "quantidade eficaz" de um composto da invenção apresentada é a quantidade que, quando administrada a um indivíduo que necessite de tratamento, melhora os sintomas originados de um distúrbio do sono, por exemplo, resulta no indivíduo adormecer mais rapidamente, resulta num sono mais reparador, reduz a duração ou a frequência da vigilia durante um periodo de sono, ou reduz a duração, frequência, ou intensidade de outras dissonias, parassonias. A quantidade do composto apresentado a ser 41 ΡΕ1877390 administrada a um individuo dependerá do distúrbio particular, do modo de administração, dos compostos co-administrados, se algum, e das caracteristicas do individuo, tais como estado geral de saúde, outras doenças, idade, sexo, genótipo, peso corporal e tolerância a fármacos. 0 perito na técnica será capaz de determinar as doses apropriadas dependendo destes e doutros factores.

Um "sal farmaceuticamente aceitável" ou "sal" do composto apresentado é um produto do composto apresentado que contém uma ligação iónica, e é tipicamente produzido através da reacção do composto apresentado ou com um ácido ou com uma base, adequado para administração a um indivíduo.

Uma "composição farmacêutica" é uma formulação contendo os compostos apresentados numa forma adequada para administração a um indivíduo. Noutra forma de realização, a composição farmacêutica está a granel ou em fora de dose unitária. A forma de dose unitária é de qualquer variedade de formas, incluindo, por exemplo, uma cápsula, um saco IV, um comprimido, uma única bomba num inalador de aerossóis, ou um frasquinho. A quantidade do ingrediente activo (por exemplo, uma formulação do composto apresentado ou dos seus sais) numa composição de dose unitária é uma quantidade eficaz e varia de acordo com o tratamento particular envolvido. Um perito na técnica apreciará que é por vezes necessário fazer variações rotineiras na dosagem dependendo da idade e da condição do paciente. A dosagem também 42 ΡΕ1877390 dependerá da via de administração. São contempladas diversas vias, incluindo oral, pulmonar, rectal, paren-térica, transdérmica, subcutânea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, intranasal. As formas de dosagem para a administração tópica ou transdérmica de um composto desta invenção incluem pós, sprays, unguentos, pastas, cremes, loções, geles, soluções, emplastros e inaladores. Noutra forma de realização, o composto activo é misturado sob condições de esterilidade com um veiculo farmaceutica-mente aceitável, e com guaisguer conservantes, agentes tamponizantes, ou propulsores gue sejam necessários. 0 termo "dose flash" refere-se a formulações de compostos que são formas de dosagem que se dispersam rapidamente. O termo "libertação imediata" é definido como a libertação de um composto de uma forma de dosagem num periodo de tempo relativamente breve, geralmente até cerca de 60 minutos. O termo "libertação modificada" define-se como incluindo libertação retardada, libertação prolongada, e libertação pulsada. O termo "libertação pulsada" define-se como um série de libertações de um fármaco de uma forma de dosagem. O termo "libertação continuada" ou "libertação prolongada" é definido como a libertação continua de um composto a partir de uma forma de dosagem ao longo de um periodo prolongado.

Um "indivíduo" inclui mamíferos, por exemplo, 43 ΡΕ1877390 humanos, animais de companhia (por exemplo, cães, gatos, aves, e semelhantes), animais de pecuária (por exemplo, vacas, carneiros, porcos, cavalos, aves de capoeira, e semelhantes), e animais de laboratório (por exemplo, ratos, ratinhos, cobaias, aves). Tipicamente o individuo é humano. A invenção proporciona um método para a modulação do sono através da administração de uma quantidade eficaz de um análogo do benzisoxazole da invenção, que é uma unidade que é um antagonista ou um agonista inverso do receptor 5HT2 ou uma colecção de receptores 5HT2a.

Moduladores do sono eficazes têm certas caracte-rísticas que correspondem com eficácia acrescida e efeitos secundários decrescidos. Estas caracteristicas incluem uma meia-vida desejada num individuo, inicio controlado dos efeitos sedativos desejados, e efeito minimo ou não detectável em efeitos secundários psicomotores ou outros do sistema nervoso central (SNC) (por exemplo, perdas de memória, diminuição do tónus muscular, pálpebras pesadas ou sonolência).

Uma abordagem para o desenvolvimento de um modulador eficaz do sono é derivatizar estrategicamente um composto ou uma família de compostos conhecidos com actividade moduladora do sono. A derivatização pode aumentar pelo menos uma propriedade biológica para permitir um composto ter um desempenho melhorado. Exemplos de propriedades biológicas favoráveis incluem, mas não se 44 ΡΕ1877390 limitam, a indução de um estado de sono discreto ou hipnótico, actividade do composto terapêutico durante um período discreto de tempo, penetração através da barreira hematoencefálica para o SNC, por exemplo, resultando da lipofilicidade de substituintes ou lipofilicidade conformacional (isto é, a lipofilicidade como resultado de uma conformação particular, tal como formação de sal interno entre um anião carboxilato e uma amina protonada), modulação da meia-vida do composto terapêutico, uma alteração da carga, uma alteração da farmacocinética, uma alteração do log P por um valor de pelo menos um, selectividade aumentada do receptor, meia-vida periférica reduzida, a capacidade de aumentar a dosagem, eliminação periférica aumentada, actividade anti-muscarínica diminuída, actividade anti-colinérgica diminuída, e qualquer combinação destes.

Derivatização dos resultados numa variedade de efeitos e alteração de diferentes mecanismos de acção. Por exemplo, nalgumas circunstâncias, um composto contendo um grupo funcional particular, tal como, por exemplo, um grupo éster, ácido carboxílico, ou álcool, possui uma selectividade melhorada para um receptor desejado em relação a receptores indesejados quando comparado com um composto sem este grupo. Noutras circunstâncias, o composto contendo o grupo funcional particular é mais activo como agente terapêutico para o tratamento de distúrbios do sono do que o composto correspondente sem este grupo. 0 efeito do composto derivatizado depende da identidade da adição. 45 ΡΕ1877390

Através da derivatização de um composto de modo a aumentar as propriedades biológicas favoráveis e diminuir os efeitos secundários desfavoráveis, é possível implementar uma estratégia baseada em potenciais interacções ou efeitos mecanísticos. Por exemplo, nalguns compostos, a presença de um ácido carboxílico resulta na capacidade de formar uma ligação iónica intramolecular que inclui o ião carboxilato correspondente, por exemplo, a formação de uma espécie zwitteriónica com um átomo de azoto no interior do composto ou a formação de uma ponte salina. Estas interacções resultam em efeitos biológicos favoráveis tais como lipofilicidade conformacional, isto é, lipofilicidade acrescida como resultado de uma conformação particular, tal como a formação de um sal interno entre um anião carboxilato e uma amina protonada. Tal lipofilicidade conformacional permite a penetração através da barreira hematoencefálica para o SNC, apesar de se pensar geralmente que a presença de dois iões polares inibe a travessia da barreira hematoencefálica não polar. Outro benefício da presença do ácido carboxílico é uma capacidade melhorada do composto em se ligar selectivamente ao receptor desejado.

Os compostos da invenção podem também ser derivatizados para produzir pro-fármacos. "Pro-fármaco" inclui uma forma precursora do fármaco que é metaboli-camente convertida in vivo para produzir o fármaco activo. A invenção contempla ainda a utilização de pro-fármacos que são convertidos in vivo nos compostos moduladores 46 ΡΕ1877390 utilizados nos métodos da invenção (ver, por exemplo, R. B. Silverman, 1992, "The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action", Academic Press, Cap. 8). Tais pro-fármacos podem ser utilizados para alterar a biodistribuição (por exemplo, para permitir que compostos que tipicamente não atravessariam a barreira hematoencefálica atravessem a barreira hematoencefálica) ou a farmacocinética do composto modulador do sono. Por exemplo, um grupo aniónico, por exemplo, um carboxilato, sulfato ou sulfonato, pode ser esterifiçado, por exemplo, com um grupo alquilo (por exemplo, um grupo metilo) ou um grupo fenilo, para resultar num éster. Quando o éster é administrado a um indivíduo, o éster é clivado, enzimaticamente ou não enzimaticamente, redutivamente ou hidroliticamente, para revelar o grupo aniónico. Tal éster pode ser cíclico, por exemplo, uma sulfona ou um sulfato cíclico, ou duas ou mais porções aniónicas podem ser esterifiçadas através de um grupo de ligação. Um grupo aniónico pode ser esterifiçado com unidades (por exemplo, ésteres de aciloximetilo) que são clivados para originar um composto intermediário modulador do sono que depôs se decompõe para resultar no composto activo modulador do sono. Numa forma de realização, o profármaco é uma forma reduzida de um carboxilato, sulfato ou sulfonato, por exemplo, um álcool ou tiol, que é oxidado in vivo no composto modulador do sono. Além disso, uma unidade aniónica pode ser esterificada num grupo que é activamente transportado in vivo, ou que é selectivamente assimilado por órgãos alvo. 47 ΡΕ1877390

Em geral, noutro aspecto, a presente invenção refere-se à utilização dos compostos de Fórmula IV-IVd para modular o sono. Numa forma de realização, os compostos de Fórmula IV-IVd modulam o sono com diminuição dos efeitos secundários: por exemplo, os compostos não inibem o sono REM (consequentemente, o sono induzido por estes compostos pode assemelhar-se mais proximamente aos ciclos de sono naturais de uma pessoa), a utilização dos compostos não resulta em insónia de abstinência ("rebound") , e/ou os compostos não inibem a actividade locomotora ou afectam de forma adversa a temperatura corporal.

Numa forma de realização, os compostos de Fórmula IV-IVd para utilização nos métodos da invenção têm uma ou mais das seguintes características: uma constante de inibição (Ki) em relação à ligação ao receptor 5HT2a de menos de 1 μΜ; uma Κ± em relação a uma ligação a uma entidade diferente do alvo seleccionada de Ml, M2, M3, Dl, D2, al e a.2 que é mais de 5 vezes superior do que a Ki relativa ao receptor 5HT2a; um valor de pico de tempo não REM que é superior a 55% do sono não REM por hora pela terceira hora após o composto ser administrado a um indivíduo; um aumento cumulativo total no sono não REM não inferior a 20 minutos para doses de composto que produzem um máximo de consolidação do sono; um período de sono mais longo tem uma duração superior a 13 minutos; o período de sono mais longo líquido após o tratamento é superior ou igual a 3 minutos quando ajustado utilizando um valor de linha de base obtido pelo menos 24 horas antes da 48 ΡΕ1877390 administração do composto a um indivíduo; um período de sono médio que é superior a 5 minutos no pico absoluto; a administração do composto num indivíduo não produz quantidades apreciáveis de insónia de abstinência ("rebound"); a administração do composto a um indivíduo não inibe de forma apreciável o sono REM; e a administração do composto a um indivíduo não inibe de forma desproporcionada a actividade locomotora relativamente aos efeitos normais do sono.

Noutra forma de realização, o composto de Fórmula IV-IVd para utilização nos métodos da invenção tem uma ou mais das sequintes características: uma constante de inibição (Ki) em relação à ligação ao receptor 5HT2a de menos de 300 nM; uma Ki em relação a uma ligação a uma entidade diferente do alvo seleccionada de Ml, M2, M3, Dl, D2, ai e oí2 que é mais de 10 vezes superior do que a K± relativa ao receptor 5HT2a; um valor de pico de tempo não REM que é superior a 55% do sono não REM por hora pela terceira hora após o composto ser administrado a um indivíduo; um aumento cumulativo total no sono não REM não inferior a 20 minutos para doses de composto que produzem um máximo de consolidação do sono; um período de sono mais longo tem uma duração superior a 13 minutos; o período de sono mais longo líquido após o tratamento é superior ou igual a 3 minutos quando ajustado utilizando um valor de linha de base obtido pelo menos 24 horas antes da administração do composto a um indivíduo; um período de sono médio 49 ΡΕ1877390 que é superior a 5 minutos no pico absoluto; a administração do composto num individuo não produz quantidades apreciáveis de insónia de abstinência ("rebound"); a administração do composto a um individuo não inibe de forma apreciável o sono REM; e a administração do composto a um individuo não inibe de forma desproporcionada a actividade locomotora relativamente aos efeitos normais do sono.

Noutra forma de realização, o composto de Fórmula IV-IVd para utilização nos métodos da invenção tem uma ou mais das sequintes caracteristicas: uma constante de inibição (K±) em relação à ligação ao receptor 5HT2a de menos de 150 nM; uma Ki em relação a uma ligação a uma entidade diferente do alvo seleccionada de Dl, D2, Ml, M2, M3, ai e cx2 que é mais de 20 vezes superior do que a Ki relativa ao receptor 5HT2a; um valor de pico de tempo não REM que é superior a 55% do sono não REM por hora pela terceira hora após o composto ser administrado a um individuo; um aumento cumulativo total no sono não REM não inferior a 20 minutos para doses de composto que produzem um máximo de consolidação do sono; um periodo de sono mais longo tem uma duração superior a 17 minutos; o periodo de sono mais longo liquido após o tratamento é superior ou igual a 5 minutos quando ajustado utilizando um valor de linha de base obtido pelo menos 24 horas antes da administração do composto a um individuo; um periodo de sono médio que é superior a 6 minutos no pico absoluto; a administração do composto num individuo não produz 50 ΡΕ1877390 quantidades apreciáveis de insónia de abstinência ("rebound"); a administração do composto a um indivíduo não inibe de forma apreciável o sono REM; e a administração do composto a um indivíduo não inibe de forma desproporcionada a actividade locomotora relativamente aos efeitos normais do sono.

Os critérios de selecção in vitro para compostos da invenção são apresentados na Tabela 1.

Tabela 1

Ligação a 5HT2a (Alvo Principal) Ki < 1 pMolar Ligação a uma entidade diferente do alvo • Ml, M2, M3 colinérgico • Ki>5 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a • Dl, D2 dopamina • Ki>5 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a • al, a2 adrenérgico • Ki>5 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a

Noutra forma de realização, a ligação a uma entidade diferente do alvo Ki é 50 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a· Nalgumas formas de realização, a ligação a uma entidade diferente do alvo Ki é 100 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a. 51 ΡΕ1877390

Os ensaios de ligação in vitro são utilizados para determinar a ligação a 5HT2a (ou seja, ligação ao alvo principal) e a ligação a Ml, M2 e M3 (ou seja, ligação a uma entidade diferente do alvo). Estes ensaios de ligação medem a capacidade dos análogos de benzisoxazole em deslocar padrões conhecidos dos receptores 5HT2a, Ml, M2, e M3, em que Ml, M2, e M3 são receptores colinérgicos (muscarinicos). Realizam-se ensaios similares com receptores 5HT2a e da dopamina (Dl, e D2), e com receptores 5HT2a e adrenérgicos (al e oí2) .

Os estudos de ligação contra o receptor 5HT2a indicam afinidade de ligação, e como tal, os resultados dos ensaios de ligação são uma indicação da actividade do composto análogo do benzisoxazole. Os estudos de ligação contra os receptores muscarinicos indicam a extensão com a qual os compostos se ligam aos receptores muscarinicos responsáveis pela actividade anti-colinérgica do composto. A ligação aos receptores muscarinicos resulta em vários ensaios secundários indesejados de muitos anti-histaminicos conhecidos, por exemplo, boca seca. Uma diminuição na ligação dos compostos aos receptores M1-M3, em relação à ligação do composto ao receptor 5HT2a, é uma indicação de uma superior especificidade do composto para o receptor 5HT2a em relação ao receptor muscarinico. Além disso, um fármaco com especificidade acrescida para o receptor 5HT2a possui menos efeitos secundários anti-colinérgicos. 52 ΡΕ1877390 A ligação a 5HT2a de análogos benzisoxazole da invenção (também referidos aqui como "compostos de teste" ou "compostos da invenção") é determinada através da medição da ligação especifica de um dado composto teste, ou uma série de compostos teste, ao receptor 5HT2a, e da comparação com a ligação especifica de um padrão conhecido (ou seja, de um composto de referência).

Os critérios in vitro de selecção para os análogos de benzisoxazole da invenção são apresentados na Tabela 2.

Tabela 2

Ligação a 5HT2a (Alvo Principal) Ki < 300 nMolar Ligação a uma entidade diferente do alvo • Ml, M2, M3 colinérgico • Ki>10 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a • Dl, D2 dopamina • Ki>10 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a • ai, oí2 adrenérgico • Ki>10 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a

Outros critérios in vitro de selecção para os análogos de benzisoxazole da invenção são apresentados na

Tabela 3. ΡΕ1877390 53

Tabela 3

Ligação a 5HT2a (Alvo Principal) Ki < 150 nMolar Ligação a uma entidade diferente do alvo • Ml, M2, M3 colinérgico • Ki>20 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a • Dl, D2 dopamina • Ki>20 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a • al, a2 adrenérgico • Ki>20 vezes a Ki medida para o receptor 5HT2a A ligação a 5HT2a (ligação ao alvo principal) e a ligação a Ml, M2 e M3 (ligação a uma entidade diferente do alvo) são determinadas utilizando os ensaios de ligação a 5HT2a, Ml, M2 e M3 descritos. 0 ensaio de ligação a Ml determina que a ligação a Ml de um composto em teste através da medição de uma ligação especifica de um dado composto em teste a Ml e a sua comparação com a ligação especifica de um composto de referência. (Ver, por exemplo, Buckley, et al., Mol. Pharmacol. 35: 469-76 (1989) (com modificações)). Os compostos de referência utilizados no ensaio de ligação a Ml incluem, por exemplo, escopolamina, MetilBr (K± 0,09 nM); metiodeto de 4-DAMP (Ki 0,27 nM); pirenzepina (K± 2,60 nM); HHSID (Ki 5,00 nM); e metoctramina (Ki 29,70 nM). 54 ΡΕ1877390

Por exemplo, numa forma de realização do ensaio de ligação a Ml, o receptor muscarínico Ml é um Ml recombinante humano expresso em células CHO, e usa-se um radioligando, [3H]-escopolamina, cloreto de N-metilo (80— 100 Ci/mmol) a uma concentração final de ligando de 0,5 nM para detectar a ligação especifica para Ml. As caracte-risticas do ensaio incluem um KD (afinidade de ligação) de 0,05 nM e um Bmax (número de receptor) de 4,2 pmol/mg de proteina. Utiliza-se (-)-escopolamina, metil-, brometo (brometo de metilescopolamina) (1,0 μΜ) na qualidade do determinante não especifico, composto de referência e controlo positivo. As reacções de ligação são levadas a cabo em PBS durante 60 minutos a 25°C. A reacção é terminada através da filtração rápida sob vácuo em filtros de fibra de vidro. 0 nivel de radioactividade aprisionado nos filtros é medido e comparado com valores controlo para averiguar a existência de qualquer interacção entre um dado composto em teste e o local de ligação muscarínico Ml clonado. O ensaio de ligação a M2 determina a ligação a M2 de um composto em teste através a medição da ligação específica de um dado composto em teste a M2 e comparando-o com a ligação específica e um composto de referência. (Ver, por exemplo, Buckley, et al., Mol. Pharmacol. 35: 469-76 (1989) (com modificações)) . Os compostos de referência utilizados no ensaio de ligação a M2 incluem, por exemplo, escopolamina, MetilBr (Ki 0,3 nM) ; metiodeto de 4-DAMP (Ki 55 ΡΕ1877390 20,7 ηΜ); metoctramina (Κι 20,460 ηΜ); HHSID (Κι 212,7 ηΜ) ; e pirenzepina (Κι 832,9 ηΜ).

Por exemplo, numa forma de realização do ensaio de ligação a M2, o receptor muscarinico M2 é um M2 recombinante humano expresso em células CHO, e usa-se um radioligando, [3H]-escopolamina, cloreto de N-metilo (80— 100 Ci/mmol) a uma concentração final de ligando de 0,5 nM para detectar a ligação especifica para Ml. As caracterís-ticas do ensaio incluem um KD (afinidade de ligação) de 0,29 nM e um Bmax (número de receptor) de 2,1 pmol/mg de proteína. Utiliza-se (-)-escopolamina, metil-, brometo (brometo de metilescopolamina) (1,0 μΜ) na qualidade do determinante não específico, composto de referência e controlo positivo. As reacções de ligação são levadas a cabo em PBS durante 60 minutos a 25°C. A reacção é terminada através da filtração rápida sob vácuo em filtros de fibra de vidro. O nível de radioactividade aprisionado nos filtros é medido e comparado com valores controlo para averiguar a existência de qualquer interacção entre um dado composto em teste e o local de ligação muscarinico M2 clonado. 0 ensaio de ligação a M3 determina a ligação a M3 de um composto em teste através a medição da ligação específica de um dado composto em teste a M3 e comparando-o com a ligação específica e um composto de referência. (Ver, por exemplo, Buckley, et al., Mol. Pharmacol. 35: 469-76 (1989) (com modificações)) . Os compostos de referência 56 ΡΕ1877390 utilizados no ensaio de ligação a M3 incluem, por exemplo, escopolamina, MetilBr (K± 0,3 nM) ; metiodeto de 4-DAMP (Ki 0,8 nM) ; HHSID (K± 14,5 nM); pirenzepina (Ki 153,3 nM) ; e metoctramina (Κ± 700,0 nM).

Por exemplo, numa forma de realização do ensaio de ligação a M3, o receptor muscarinico M3 é um M3 recombinante humano expresso em células CHO, e usa-se um radioligando, [3H]-escopolamina, cloreto de N-metilo (80-100 Ci/mmol) a uma concentração final de ligando de 0,2 nM para detectar a ligação especifica para Ml. As caracteristicas do ensaio incluem um KD (afinidade de ligação) de 0,14 nM e um Bmax (número de receptor) de 4,0 pmol/mg de proteina. Utiliza-se (-)-escopolamina, metil-, brometo (brometo de metilescopolamina) (1,0 μΜ) na qualidade do determinante não especifico, composto de referência e controlo positivo. As reacções de ligação são levadas a cabo em TRIS-HC1 a 50 mM (pH 7,4) contendo 10 mM de MgCl2, 1 mM de EDTA durante 60 minutos a 25°C. A reacção é terminada através da filtração rápida sob vácuo em filtros de fibra de vidro. O nivel de radioactividade aprisionado nos filtros é medido e comparado com valores controlo para averiguar a existência de qualquer interacção entre um dado composto em teste e o local de ligação muscarinico M3 clonado. A ligação a 5HT2a é determinada tal como descrito por exemplo no British Journal of Pharmacology (1995) 115, 622-628. 57 ΡΕ1877390

Outros critérios de selecção in vitro para análogos benzisoxazole da invenção incluem a ligação a HERG. A ligação a HERG é determinada utilizando um estudo comparativo em bloco hERG para avaliar o efeito de um dado composto em teste em canais hERG clonados expressos em células de mamífero. (Ver, por exemplo, Brown e Rampe, Pharmaceutical News 7: 15-20 (2000); Rampe et al., FEBS

Lett, 417: 28-32 (1997); Weirich e Antoni, Basic Res.

Cardiol. 93 Supl. 1: 125-32 (1998); e Yap e Camm, Clin.

Exp. Allergy, 29 Supl 3, 174-81 (1999)). A ligação de hERG, o canal de potássio cardíaco responsável pela rápida repolarização (IKr) em ventrículos humanos, é avaliada dado que a inibição de IKr é a causa mais comum de prolongamento de potencial de acção cardíaco por fármacos não cardíacos. (Ver Brown e Rampe (2000), Weirich e Antoni (1998) ; e Yap e Camm (1999)) . O aumento do potencial de acção causa o prolongamento do intervalo QT o qual foi associado com uma arritmia ventricular perigosa, torsade de pointes. (Brown and Rampe (2000)).

No teste de hERG, os canais hERG são expressos numa linha celular de célula de rim embrionário humano (HEK293) que não possui IKr endógeno. Nalguns casos, a expressão numa linha celular de mamífero pode ser preferível à expressão transiente em ovócitos de Xenopus, dado que este último apresenta uma consistente 58 ΡΕ1877390 sensibilidade 10-100 vezes inferior aos bloqueadores dos canais hERG. (Ver, Rampe 1997).

Numa forma de realização do ensaio de hERG, o controlo positivo (ou seja, o composto de referência) é a terfenadina (Sigma, St. Louis MO), que se demonstrou que a uma concentração de 60 nM, bloqueava a corrente hERG em aproximadamente 75%. Os compostos em teste foram administrados em tampão salino fisiológico tamponizado com HEPES (HB-PS) + 0,1% de dimetil sulfóxido (DMSO) . Cada composto em teste foi aplicado a uma concentração de 10 μΜ às células HEK2 93 que expressam hERG (n á 3, em que n = o número de células). As células são expostas ao composto em teste durante o tempo necessário para se atingir um bloqueio em estado estacionário, mas não mais de 10 minutos. O controlo positivo (60 mM de terfenadina) é aplicado a duas células (n á 2).

As células expostas a hERG são então transferidas para a câmara de registo e submetidas a superfusão com solução de HB-PS. A solução pipetada para registos de células inteiras inclui aspartato de potássio (130 nM) , MgCl2 (5 nM), EGTA (5 mM), ATP (4 mM), e HEPES (10 mM) a um pH ajustado a 7,2 com KOH. O início e o bloqueio em estado estacionário da corrente de hERG devido ao composto em teste são medidos utilizando um padrão de pulso com amplitudes fixas (despolarização: +20 mV durante 2 segundos; repolarização: -50 mV durante 2 segundos), com repetição a 10 segundos de intervalo, a partir de um 59 ΡΕ1877390 potencial de repouso de -80 mV. A corrente da cauda do pico é medida durante o passo de 2 segundos a -50 mV. É mantido um estado estacionário durante pelo menos 30 segundos antes de se aplicar o composto em teste ou o composto de controlo positivo. As correntes de cauda de pico são medidas até se atingir um novo estado estacionário.

Além dos critérios de selecção in vitro descritos acima, os compostos da invenção podem ser seleccionados utilizando as seguintes avaliações sono-vigília e fisiológicas :

Sono não REM: Os análogos de benzisoxazole são seleccionados se, em ratos Wistar machos, adultos, (i) o valor de pico de tempo não REM é superior a 55% do sono não REM por hora pela terceira hora após o tratamento; (ii) a natureza deste aumento no sono não REM é tal que o aumento cumulativo total no sono não REM nas 6 horas iniciais após o tratamento (ajustado relativamente à linha de base no tempo circadiano correspondente 24 horas mais cedo, e em relação ao tratamento com um veículo controlo) não é inferior a um total de 20 minutos para doses de composto que produzem um máximo de consolidação do sono, medida pela duração do período de sono, quando o fármaco é administrado por via oral. O termo "o período de pico de sono não REM" é definido como uma quantidade absoluta de pico de sono não REM por hora após o tratamento, com a administração do fármaco a ocorrer ao Tempo Circadiano (TC) 18, que é 6 60 ΡΕ1877390 horas após se desligar as luzes num rato de laboratório nocturno quando hospedado num ciclo de claro-escuro CE 12:12 (12 horas de claridade e 12 horas de escuridão). O critério nominal de 55% de sono não REM por hora é equivalente a 33 minutos de sono não REM por hora.

Tal como aqui utilizado, o termo "sono não REM cumulativo" é definido como o aumento acumulado total liquido no número de minutos de sono não REM, medido ao longo da duração total do efeito soporífero de um fármaco, o qual tipicamente, mas nem sempre, ocorre nas primeiras 6 horas após o tratamento, ajustada para o número de minutos acumulado total liquido de minutos de sono não REM que ocorreu durante os tempos correspondentes de linha de base sem tratamento do dia registados 24 horas mais cedo, em relação ao tratamento similar com um controlo utilizando somente o veiculo.

Tal como aqui definido, o termo "período de sono" refere-se a um episódio discreto de sono contínuo ou praticamente contínuo, compreendido de sono não REM, sono REM, ambas as fases de sono não REM e de sono REM, delimitadas antes e depois do episódio por mais do que dois períodos contíguos de 10 segundos de vigília. A seguinte descrição não limitante ilustra este conceito: VVVVSSSSVSSSSSSSWSSSSSSSVVVV, em que cada letra representa o estado predominante (S=sono, V=vigília) observado a cada 10 segundos. A duração de sono medida é de 21 períodos de dez segundos, ou 3,5 minutos de duração. 61 ΡΕ1877390

Consolidação do sono: Os análogos de benziso-xazole são seleccionados se, em ratos Wistar machos adultos, (i) a duração absoluta dos episódios de sono contínuo mais longos (ou seja, "período de sono") após o tratamento tem uma duração superior a 13 minutos; (ii) o período de sono mais longo líquido após o tratamento é superior ou igual a 3 minutos quando ajustado utilizando um valor de linha de base obtido pelo menos 24 horas antes e calculado relativamente a um veículo de tratamento; e (iii) a duração absoluta média de cada período de sono quando a média é calculada ao longo de uma hora, um numa base de uma vez por hora, é superior ou igual a 5 minutos. Os critérios de selecção acima mencionados assumem que as fases de sono e de vigília são determinadas continuamente a cada 10 segundos (ou seja, períodos de registo de sono de 10 segundos) , que o sono e a vigília são medidas poligraficamente utilizando os critérios de EEG e EMG, e que episódios de sono (compreendidos por sono não REM e/ou REM) são definidos como períodos contínuos até o episódio ser interrompido por mais do que dois períodos contíguos de 10 segundos de vigília.

Tal como aqui utilizado, o termo "comprimento máximo de período de sono" é definido como o número total de minutos em que um animal permanece a dormir (fases de sono não REM e/ou REM) durante o período de sono mais longo que ocorreu a partir de uma dada hora após o tratamento. O critério de medição do "comprimento do período de sono" assume que o sono é medido continuamente em períodos de 10 segundos, e é registado com base no estado predominante, 62 ΡΕ1877390 calculado ou determinado de outro modo na forma de uma fase de sono discreta (em que se definem fases de sono como sono não REM, sono REM, ou vigília) durante intervalo de 10 segundos que define o período.

Tal como aqui utilizado, o termo "comprimento médio do período de sono" é definido como a duração média (em minutos) de qualquer e todos os episódios de sono ou períodos que se iniciaram numa dada hora, independentemente da duração individual de cada episódio ou período.

Efeitos Secundários Medidos Simultaneamente: São seleccionados análogos de benzisoxazole se, em ratos Wistar adultos machos, estes compostos (i) não produzem quantidades apreciáveis de insónia de abstinência ("rebound"); (ii) não inibem apreciavelmente o sono REM; e (iii) não inibem desproporcionadamente a actividade locomotora e/ou o tónus motor em relação aos efeitos normais do próprio sono. As definições limite para estas três variáveis de efeitos secundários são como se segue:

Define-se insónia de abstinência ("rebound") como o período de vigília de abstinência ("rebound"), paradoxal, ou compensatório que ocorre após os efeitos promotores do sono de um agente hipnótico ou soporífico. A insónia de abstinência ("rebound") é tipicamente observada durante a fase de repouso circadiano usual 6-18 horas após o tratamento a TC-18 (6 horas após se desligar as luzes, dado CE 12:12), mas pode ocorrer a qualquer altura durante as 30 horas iniciais após o tratamento. A insónia de abstinência 63 ΡΕ1877390 ("rebound") é considerada como inaceitável quando, no rato Wistar macho adulto, o excesso de vigilia cumulativa associada com insónia de abstinência ("rebound") é superior a 10% de redução na média de tempos de sono não REM por hora durante a fase de repouso circadiano após tratamento (luzes ligadas).

Em ratos Wistar machos adultos, a insónia de abstinência ("rebound") manifesta-se como um aumento na vigilia em relação aos tempos correspondentes à linha de base (24 horas mais cedo) subsequentes a um efeito de sono induzido por um fármaco, e a insónia de abstinência ("rebound") é medida cumulativamente. A "inibição do sono REM" é definida como a redução do tempo de sono REM após o tratamento a TC-18 (6 horas após apagar as luzes; CE 12:12) ou a TC-5 (5 horas após acender as luzes; CE 12:12). Os compostos que reduzem o tempo de sono REM em mais de 15 minutos (em relação ao valor de base e ajustado para o tratamento apenas com veiculo) quando administrados ou a TC-18 ou TC-5 são considerados inaceitáveis.

Tal como aqui definido, "inibição da actividade locomotora desproporcionada" é uma redução da actividade locomotora que excede a redução normal e esperada na actividade comportamental atribuível ao sono. A lógica dita que se um animal está a dormir, existirá normalmente uma correspondente redução na actividade locomotora. Se um composto hipnótico ou soporífico reduz os níveis da 64 ΡΕ1877390 actividade locomotora em mais de 20% do que aquela explicada isoladamente pelo sono, o composto é considerado inaceitável. A actividade locomotora (LMA) ou o tónus motor podem ser quantificados objectivamente utilizando qualquer forma de monitorização de actividade locomotora comporta-mental (movimentos não específicos, monitorização da actividade baseada em telemetria, dispositivos de detecção de movimento tridimensional, actividade de corrida em roda, medidas exploratórias, registos electromiográficos) desde que sejam medidos em simultâneo com medidas objectivas de sono-vigília no mesmo animal.

Numa forma de realização, a actividade locomotora na gaiola do animal é medida utilizando um dispositivo de biotelemetria implantado cirurgicamente na cavidade peri-toneal do animal; o dispositivo implantável e o receptor de telemetria associado detectam se e quanto o animal se move no interior da gaiola. O sono e a vigília são medidos simultaneamente em períodos de 10 segundos. As contagens de actividade locomotora por unidade de tempo são divididas pela quantidade simultânea de vigília pela mesma unidade de tempo, resultando numa medição da "intensidade de actividade locomotora" (LMAI) para essa unidade de tempo.

Os compostos hipnóticos ou soporíficos administrados a TC-18 (6 horas após desligar as luzes; CE 12:12) que diminuem a actividade locomotora por unidade de tempo de vigília em mais de 20% em relação ao veículo serão considerados como inaceitáveis. 65 ΡΕ1877390

Noutra forma de realização, os análogos de benzisoxazole da invenção são seleccionados utilizando os critérios de avaliação in vivo de sono-vigilia e fisiológicos apresentados na Tabela 4:

Pontuação-2000 Valor Absoluto Variação ao valor de linha de base relativamente ao veiculo Tempo de Pico Não REM Pico>55% sono/hora Não aplicável Não REM Cumulativo Não aplicável >20 minutos a ED100 para MSBL a Ti_6 Periodo de Sono Mais Pico absoluto>17 >5 minutos Longo minutos Periodo de Sono Pico absoluto>6 Não utilizado Médio minutos Insónia de <20% de redução na Não aplicável abstinência média dos tempos de ("rebound") sono não REM horários durante fase de repouso circadiano após o tratamento (luzes ligadas) Inibição do Sono REM não aplicável não deve exceder 15 minutos, Rx a TC5 LMAI não aplicável Não deve exceder uma redução de 20% LMAI 66 ΡΕ1877390

Os métodos para se avaliar estes critérios de avaliação sono-vigilia e fisiológicos são descritos acima. 0 "valor absoluto" ilustrado na segunda coluna da Tabela 4 refere-se ao valor tal como determinado para cada composto em teste, enquanto que o valor de "variação" apresentado na terceira coluna da Tabela 4 reflecte um valor ajustado no qual o valor absoluto é a diferença relativamente ao veiculo, quando os valores do veiculo são ajustados para uma linha de base.

Nalgumas formas de realização, o periodo de sono mais longo tem uma duração superior a 13 minutos. Noutras, tem uma duração superior a 17 minutos. Nalgumas formas de realização, a duração do período de sono mais longo após o tratamento é superior ou igual a 3 minutos. Noutras, a duração é superior ou igual a 6 minutos.

Outros critérios de avaliação in vivo de sono-vigília e fisiológica utilizados para seleccionar análogos de benzisoxazole da invenção incluem a medição da temperatura corporal aguda e a temperatura corporal latente como uma alteração numa linha de base em relação ao veículo. A alteração da temperatura corporal aguda não deverá exceder -0,60°C, e a alteração da temperatura corporal latente não deverá exceder +0,60°C ao tempo 1-6 horas. A temperatura corporal aguda (Ti_6) é ajustada para a linha de base correspondente medida 24 horas mais cedo, em relação ao veículo (a diminuição relativamente ao veículo). A temperatura corporal latente, medida 7-18 horas após o 67 ΡΕ1877390 tratamento com o fármaco (T7_18) , é ajustada para a correspondente linha de base medida 24 horas mais cedo, em relação ao veiculo (a diminuição relativamente ao veiculo).

Os compostos, ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis, são administrados por via oral, nasal, trans-dérmica, pulmonar, por inalação, por via bucal, sublingual, intraperitoneal, intravenosa, rectal, intrapleural, intra-tecal e parentérica. Noutra forma de realização, o composto é administrado oralmente. Um perito na técnica reconhecerá as vantagens de certas vias de administração.

Nalgumas reivindicações, um composto de Fórmula IV-IVd é administrado na forma de um sal farmaceuticamente aceitável. Um perito na técnica reconhecerá os vários métodos para criar sais farmaceuticamente aceitáveis e para identificar o sal apropriado. Noutra forma de realização, o composto ou seu sal farmaceuticamente aceitável é incluído numa composição farmacêutica.

Um "indivíduo" inclui mamíferos, por exemplo, humanos, animais de companhia (por exemplo, cães, gatos, aves, e semelhantes), animais de pecuária (por exemplo, vacas, carneiros, porcos, cavalos, aves de capoeira), e animais de laboratório (por exemplo, ratos, ratinhos, cobaias, aves). Tipicamente o indivíduo é humano.

Um indivíduo que necessite de tratamento tem uma doença ou um distúrbio que pode afectar a saúde e/ou o bem-estar do indivíduo. 68 ΡΕ1877390

Por exemplo, o distúrbio pode ser um distúrbio do sono. É bem conhecido na técnica que certos distúrbios médicos, por exemplo, distúrbios do SNC, por exemplo, distúrbios mentais ou neurológicos, por exemplo, ansiedade, podem ter uma componente de distúrbio do sono, por exemplo, privação do sono. Assim, "tratamento de um distúrbio do sono" também inclui o tratamento de uma componente de distúrbio do sono de outros distúrbios, por exemplo, distúrbios do SNC. Além disso, o tratamento da componente de distúrbio do sono de distúrbios do SNC pode também ter o efeito benéfico de melhoria de outros sintomas associados com o distúrbio. Por exemplo, nalguns indivíduos que sofrem de ansiedade com conjunto com privação do sono, o tratamento da componente de privação do sono também trata a componente de ansiedade. Assim, a presente invenção também inclui um método de tratamento de tais distúrbios médicos.

Por exemplo, distúrbios do sono associados com distúrbios mentais incluem psicoses, distúrbios de humor, distúrbios de ansiedade, distúrbios de pânico, vícios. Distúrbios mentais específicos incluem, por exemplo, depressão, distúrbio obsessivo compulsivo, neurose/distúr-bio afectivo, neurose/distúrbio depressivo, neurose de ansiedade; distúrbio distímico, distúrbios comportamentais, distúrbios de humor, esquizofrenia, depressão maníaca, delírio, e alcoolismo.

Os distúrbios do sono associados com distúrbios 69 ΡΕ1877390 neurológicos incluem, por exemplo, distúrbios cerebrais degenerativos, demência, parkinsonismo, doença de Huntin-gton, doença de Alzheimer, insónia familiar fatal, epilepsia relacionada com o sono, "status epilepticus" eléctrico do sono, e dores de cabeça relacionadas com o sono. Os distúrbios do sono associados com outros distúrbios médicos incluem, por exemplo, doença do sono, isquemia cardiaca nocturna, doença pulmonar obstrutiva crónica, asma relacionada com o sono, refluxo gastroeso-fágico relacionado com o sono, doença da úlcera péptica, e sindrome de fibrosite.

Nalgumas circunstâncias, os distúrbios do sono estão também associados com dor, por exemplo, dor neuropática associada com sindrome das pernas inquietas; enxaquecas; hiperalgesia, fibromialgia, dor; sensibilidade à dor aumentada ou exagerada, tal como hiperalgesia, causalgia e alodinia; dor aguda; dor de queimadura; dor facial atípica; dor neuropática; dor de costas; síndromes complexas de dor regional de tipos I e II; dor artrítica; dor por lesão desportiva; dor relacionada com infecção, por exemplo, HIV, sindrome pós-poliomielite, e neuralgia pós-herpética; dor do membro fantasma; dor laborai; dor oncológica; dor pós-quimioterapia; dor pós-acidente vascular cerebral; dor pós-operatória; neuralgia; doenças associadas com dor visceral incluindo sindrome do intestino irritado, enxaqueca e angina.

Outros distúrbios do sono incluem, por exemplo, 70 ΡΕ1877390 sono curto, sono longo, síndrome de hipovigília, mioclonia fragmentária, hiper-hidrose do sono, distúrbios do sono associados à menstruação, distúrbios do sono associados à gravidez, alucinações hipnagógicas aterrorizantes, taqui-pneia neurogénica relacionada com o sono, laringoespasmo relacionado com o sono, e sindrome de engasgos durante o sono. A insónia é tipicamente classificada em insónia de dificuldade em adormecer, na qual um indivíduo leva mais do que 30 minutos a adormecer; e insónia da manutenção do sono, em que o indivíduo demora mais do que 30 minutos acordado durante um periodo de sono esperado, ou, por exemplo, acordar antes da hora desejada com dificuldade ou incapacidade de voltar a adormecer. Os compostos apresentados são particularmente eficazes no tratamento das insónias de dificuldade em adormecer ou de manutenção do sono, insónia resultante de distúrbios do ajustamento do ritmo circadiano, ou insónia resultante de distúrbios do SNC. Uma forma de realização é o tratamento de um indivíduo para um distúrbio do ajustamento do ritmo circadiano. Outra forma de realização é o tratamento de um indivíduo para insónia resultante de um distúrbio do humor. Noutras formas de realização, um indivíduo é tratado relativamente à apneia do sono, sonambulismo, terrores nocturnos, sindrome das pernas inquietas, insónia de dificuldade em adormecer, e insónia de manutenção do sono. Por exemplo, um indivíduo é tratado relativamente à insónia de dificuldade em adormecer ou à insónia de manutenção do sono. Os compostos 71 ΡΕ1877390 apresentados são eficazes para o tratamento da insónia de dificuldade em adormecer. Os compostos apresentados são também eficazes para o tratamento da insónia de manutenção do sono. Numa forma de realização, os compostos apresentados melhoram a qualidade do sono, por exemplo, a quantidade de sono de onda lenta é aumentada. 0 regime de dosagem na utilização dos compostos é seleccionado de acordo com uma variedade de factores incluindo tipo, espécie, idade, peso, sexo e condição médica do paciente; a gravidade da condição a ser tratada; a via de administração; a função renal e hepática do paciente; e o composto particular ou seu sal utilizado. Um médico ou veterinário competente na técnica pode facilmente determinar e prescrever a quantidade eficaz de fármaco necessária para tratar, prevenir, contrariar ou cessar a progressão da condição.

Dosagens orais em humanos da presente invenção, quando utilizadas para os efeitos indicados, situar-se-ão na gama de cerca de 0,05 a 5000 mg/dia oralmente. Quantidades eficazes dos compostos apresentados situam-se tipicamente na gama de entre cerca de 0,01 mg por dia e cerca de 100 mg por dia, e entre cerca de 0,1 mg por dia e cerca de 10 mg/dia. Técnicas para a administração dos compostos apresentados da invenção podem ser encontrados em: Remington: the Science and Practice of Pharmacy, 19a edição, Mack Publishing Co., Easton, PA (1995). 72 ΡΕ1877390

Por exemplo, nalgumas formas de realização, um sal ácido de um composto contendo uma amina ou outro grupo básico é obtido através da reacção do composto com um ácido orgânico ou inorgânico adequado, tal como cloreto de hidrogénio, brometo de hidrogénio, ácido acético, ácido perclórico e semelhantes. Compostos com um grupo quaternário de amónio também contêm um contra-ião tal como cloreto, brometo, iodeto, acetato, perclorato e semelhantes. Outros exemplos de tais sais incluem citratos, fumaratos, tartaratos (por exemplo (+)-tartaratos, (-)-tartaratos ou suas misturas incluindo misturas racémicas) , succinatos, benzoatos e sais com aminoácidos tais como ácido glutâmico.

Sais de compostos contendo um ácido carboxilico ou outro grupo funcional acidico são preparados através da reacção com uma base adequada. Tal sal farmaceuticamente aceitável é preparado com uma base que resulta num catião farmaceuticamente aceitável, que inclui sais de metais alcalinos (especialmente sódio e potássio), sais de metais alcalino terrosos (especialmente cálcio e magnésio), sais de alumínio e sais de amónio, assim como sais preparados a partir de bases orgânicas fisiologicamente aceitáveis, tais como trimetilamina, trietilamina, morfolina, piridina, piperidina, picolina, diciclo-hexilamina, N,N'-diben-ziletilenodiamina, 2-hidroxietilamina, bis-(2-hidroxi-etil)amina, tri-(2-hidroxietil)amina, procaína, dibenzilpi-peridina, N-benzil- -feniletilamina, desidroabietilamina, N,Ν'-bisdesidroabietilamina, glucamina, N-metilglucamina, colidina, quinino, quinolina, e aminoácidos básicos tais como a lisina e a arginina. 73 ΡΕ1877390

Nalgumas formas de realização, certos compostos e os seus sais também existem na forma de solvatos, por exemplo, hidratos, e a presente invenção inclui cada solvato e suas misturas.

Os compostos apresentados, e os seus sais e solvatos, podem existir em mais do que uma forma cristalina, por exemplo, na forma de "cristais polimorfos" ou "polimorfos". Cristais polimorfos dos compostos apresentados são preparados por cristalização sob diversas condições. Por exemplo, utilizando diferentes misturas de solventes para recristalização; cristalização a diferentes temperaturas; vários modos de arrefecimento, desde arrefecimento muito rápido a muito lento durante a cristalização, e semelhantes. Também se obtêm polimorfos através do aquecimento ou da fusão dos compostos apresentados seguindo-se um arrefecimento gradual ou rápido. A presença de polimorfos é determinada por espectroscopia de ressonância magnética nuclear de sonda sólida, espectroscopia de infravermelho, calorimetria de varrimento diferencial, difracção de raios-X de pós, e outras técnicas conhecidas pelo perito na técnica.

Numa forma de realização, os compostos aqui descritos, e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis são utilizados em preparações farmacêuticas em combinação com um veiculo ou diluente farmaceuticamente aceitável. Veiculos farmaceuticamente aceitáveis incluem agentes de enchimento sólidos inertes e soluções estéreis orgânicas ou 74 ΡΕ1877390 aquosas. Os compostos estarão presentes em tais composições farmacêuticas em quantidades suficientes para proporcionar a quantidade de dosagem desejada na gama aqui descrita. Técnicas para formulação e administração dos compostos apresentados da invenção podem ser encontradas em Remington: the Science and Practice of Pharmacy, acima.

Tipicamente, o composto é preparado para administração oral, em que os compostos apresentados ou os seus sais são combinados com um veiculo ou diluente sólido ou liquido adequado para formar cápsulas, comprimidos, pílulas, pós, xaropes, soluções, suspensões e outros semelhantes.

Os comprimidos, pílulas, cápsulas, e semelhantes contêm de desde cerca de 1 a cerca de 99 porcento em peso do ingrediente activo e um aglutinador tal como goma de tragacanto, goma arábica, amido de milho ou gelatina; excipientes tais como fosfato dicálcico; um agente desintegrante tal como amido de milho, amido de batata ou ácido algínico; um lubrificante tal como estearato de magnésio; e/ou um agente adoçante tal como sacarose, lactose, sacarina, xilitol, e semelhantes. Quando uma forma de dosagem unitária é uma cápsula, contém frequentemente, além dos materiais do tipo acima, um veículo líquido tal como um óleo gordo.

Nalgumas formas de realização, vários outros materiais estão presentes como revestimentos ou para 75 ΡΕ1877390 modificar a forma fisica da unidade de dosagem. Por exemplo, nalgumas formas de realização, os comprimidos são revestidos com "shellac", açúcar ou ambos. Nalgumas formas de realização, um xarope ou elixir contém, além do ingrediente activo, sacarose como agente adoçante, metil e propilparabenos como conservantes, um corante e um aromatizante tal como aroma a cereja ou laranja, e semelhantes.

Para algumas formas de realização relativas à administração parentérica, os compostos apresentados, ou os seus sais, solvatos, ou polimorfos, podem ser combinados com meio aquoso ou orgânico estéril para formar soluções ou suspensões injectáveis. As composições podem ser esterilizadas e/ou conter adjuvantes, tais como agentes conservantes, estabilizantes, molhantes ou emulsionantes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões. Além disso, podem também conter outras substâncias terapeuticamente valiosas. As composições são, respectivamente, preparadas de acordo com métodos de mistura, granulação ou revestimento convencionais, e contêm cerca de 0,1 a 75%, por exemplo 1 a 50%, do ingrediente activo.

Por exemplo, produzem-se soluções injectáveis utilizando solventes tais como óleo de sésamo ou de amendoim ou propileno glicol aquoso, assim como soluções aquosas de sais farmaceuticamente aceitáveis solúveis em água dos compostos. Nalgumas formas de realização, preparam-se dispersões em glicerol, polietilenoglicóis liquidos 76 ΡΕ1877390 e suas misturas em óleos. Sob condições normais de armazenamento e utilização, estas preparações contêm um conservante para de forma útil evitar o crescimento de microrganismos. Os termos "administração parentérica" e "administrado parentericamente" tal como aqui utilizado significa modos de administração diferentes da administração entérica ou tópica, geralmente por injecção, e inclui, sem limitação, injecção e infusão intravenosa, intramuscular, intra-arterial, intratecal, intracapsular, intra-orbital, intracardiaca, intradérmica, intraperitoneal, transtra-queal, subcutânea, subcuticular, intra-articular, subcapsu-lar, subaracnóide, intraespinhal e intraesternal.

Para administração rectal, composições farmacêuticas adequadas são, por exemplo, preparações tópicas, supositórios ou clisteres. Os supositórios são com vantagem preparados a partir de emulsões ou suspensões gordas. As composições podem ser esterilizadas e/ou conter adjuvantes, tais como agentes conservantes, estabilizantes, molhantes ou emulsionantes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões. Além disso, podem também conter outras substâncias terapeuticamente valiosas. As composições são, respectivamente, preparadas de acordo com métodos de mistura, granulação ou revestimento convencionais, e contêm cerca de 0,1 a 75%, por exemplo 1 a 50%, do ingrediente activo.

Nalgumas formas de realização, os compostos são formulados para administrar o agente activo através de administração pulmonar, por exemplo, administração de uma 77 ΡΕ1877390 de uma formulação em aerossol contendo o agente activo a partir de, por exemplo, um spray de bomba manual, um nebulizador ou um inalador pressurizado de dose calibrada. Nalgumas formas de realização, formulações adequadas deste tipo também incluem outros agentes, tais como agentes anti-estáticos, para manter os compostos apresentados na forma de aerossóis eficazes.

Um dispositivo de administração de fármacos para a administração de aerossóis compreende uma lata de aerossol adequada com uma válvula calibrada contendo uma formulação farmacêutica para aerossol tal como descrito e um invólucro actuador adaptado para se fixar à lata e permitir a administração do fármaco. A lata no dispositivo de administração de fármaco tem um volume livre superior a cerca de 15% do volume total da lata. Frequentemente, o polimero pretendido para administração pulmonar é dissolvido, suspendido ou emulsionado numa mistura de um solvente, surfactante e propulsor. A mistura é mantida sob pressão numa lata que foi selada com uma válvula calibrada.

Para administração nasal, pode ser usado um veiculo sólido ou um veiculo liquido. 0 veiculo sólido inclui um pó grosseiro com um tamanho de partícula na gama de, por exemplo, desde cerca de 20 a cerca de 500 micron e tal formulação é administrada através da inalação rápida através das vias nasais. Nalgumas formas de realização em que se utiliza o veiculo liquido, a formulação é administrada sob a forma de um spray nasal ou de gotas e inclui soluções aquosas ou oleosas dos ingredientes activos. 78 ΡΕ1877390

Também são contempladas formulações que são formas de dosagem de dispersão rápida, também conhecidas com formas de dosagem "flash". Em particular, algumas formas de realização da presente invenção são formuladas como composições que libertam os seus ingredientes activos num curto período de tempo, por exemplo tipicamente menos do eu cerca de cinco minutos, por exemplo menos do que cerca de noventa segundos. Além disso, algumas formas de realização da presente invenção são formuladas como composições que libertam os seus ingredientes activos em menos do que cerca de trinta segundos, por exemplo, em menos do que cerca de dez ou quinze segundos. Tais formulações são adequadas para administração a um indivíduo através de diversas vias, por exemplo, através da inserção numa cavidade corporal ou aplicação a uma superfície corporal húmida ou numa ferida aberta.

Tipicamente, uma dosagem "flash" é uma forma de dosagem sólida que é administrada oralmente, que se dispersa rapidamente na boca, e que assim não necessita de um grande esforço para engolir e permite que o composto seja rapidamente ingerido ou absorvido através das membranas das mucosas orais. Nalgumas formas de realização, as formas de dosagem de dispersão rápida adequadas são também utilizadas noutras aplicações, incluindo o tratamento de feridas e outras lesões corporais e estados de doença nas quais a libertação do medicamento através de humidade fornecida externamente não é possível. 79 ΡΕ1877390

Formas de dosagem "flash" são conhecidas na técnica; ver por exemplo, formas de dosagem efervescentes e revestimentos de libertação rápida de microparticulas insolúveis em U.S. Pat. Nos. 5,578,322 e 5, 607, 697; líquidos e espumas liofilizados em U.S. Pat. No. 4642,903 e 5,631,023; formas de dosagem preparadas em tambor regelante nas U.S. Pat. Nos. 4,855,326, 5,280,473 e 5,518,730; fabricação de sólidos de forma livre na Pat. U.S. No. 6,472,992; matriz veículo baseada em sacáridos e um aglutinante líquido nas U.S. Pat. Nos. 5,587,172, 5,616,344, 6,277,406, e 5,622,719; e outras formas conhecidas na técnica.

Os análogos benzisoxazole da invenção são também formulados na forma de formulações de "libertação pulsada", nas quais o análogo é libertado das composições farmacêuticas numa série de libertações (ou seja, pulsos). Os análogos de benzisoxazole são também formulados na forma de formulações de "libertação controlada" nas quais o análogo é continuamente libertado da composição farmacêutica ao longo de um período prolongado.

Também são contempladas formulações, por exemplo, formulações líquidas, incluindo agentes de solvatação ou encapsulação cíclicos ou acíclicos, por exemplo, ciclodextrinas, poliéteres, ou polissacáridos (por exemplo, metilcelulose). Por exemplo, derivados de β-ciclodextrina polianiónica com um grupo de sal sulfonato separado da cavidade lipofílica por um grupo espaçador éter de alquilo ou polissacáridos. Numa forma de realização, o agente é 80 ΡΕ1877390 metilcelulose. Noutra forma de realização, o agente é um derivado de β-ciclodextrina polianiónica com um grupo de sal sulfonato separado da cavidade lipofílica por um grupo espaçador éter de butilo, por exemplo, CAPTISOL® (CyDex, Overland, KS) . Um perito na técnica pode avaliar razões adequadas de formulação de agente/composto apresentado através da preparação de uma solução do agente em água, por exemplo, uma solução 40% em peso; através da preparação de diluições em série, por exemplo, para preparar soluções de 20%, 10, 5%, 2,5%, 0% (controlo), e semelhantes; adição de um excesso (em comparação com a quantidade que pode ser solubilizada pelo agente) do composto apresentado; mistura sob condições apropriadas, por exemplo, aquecimento, agitação, sonicação, e semelhantes; centrifugação ou filtração das misturas resultantes para obter soluções translúcidas; e análise das soluções relativamente à concentração do composto apresentado.

Além das formulações terapêuticas descritas acima, uma terapia incluindo os compostos da presente invenção inclui opcionalmente, a co-administração com pelo menos uma terapia adicional, por exemplo, fármacos ou tratamentos fisicos ou comportamentais (por exemplo, terapia da luz, estímulos eléctricos, modificação do comportamento, terapia cognitiva, modificação do ritmo circadiano, e semelhantes). Tal prática é referida como "terapia de combinação". A outra terapia ou terapias na terapia de combinação incluem terapias reconhecidas por um perito na técnica como desejadas em combinação com o composto da invenção, por exemplo, terapias conhecidas na 81 ΡΕ1877390 técnica ou terapias que são propostas ou descobertas na técnica para o tratamento de distúrbios do sono ou o tratamento de doenças associadas com distúrbios do sono, por exemplo, terapias para qualquer um dos distúrbios do sono ou outras condições aqui apresentadas. Nalgumas formas de realização, o composto é administrado como uma terapia de combinação enquanto que é administrado como uma monoterapia noutras formas de realização.

Tipicamente, o composto é administrado como uma monoterapia.

Um perito na técnica reconhecerá que uma terapia administrada em combinação com os compostos da presente invenção está dirigida para o mesmo ou diferentes distúrbios alvo que aquela dirigida pelos compostos da presente invenção. A administração do composto da invenção é a primeira, sendo seguida pela outra terapia; ou alternativamente, a administração da outra terapia pode ser primeiro. A outra terapia é qualquer na técnica a tratar, prevenir, ou reduzir os sintomas do distúrbio alvo, por exemplo, um distúrbio do sono, ou outros distúrbios, por exemplo, outros distúrbios do SNC. Além disso, algumas formas de realização da presente invenção têm compostos administrados em combinação com outras terapias conhecidas para o distúrbio alvo. Além disso, a outra terapia inclui qualquer agente de beneficio ao paciente quando administrado em combinação com o composto apresentando.

Por exemplo, nalgumas formas de realização em que 82 ΡΕ1877390 a outra terapia é um fármaco, é administrada na forma de uma formulação distinta ou na mesma formulação que o composto da invenção. Um composto da invenção é administrado em terapia de combinação com pelo menos um dos medicamentos comercialmente disponíveis de venda livre ou mediante receita médica, incluindo, mas sem se limitar, a anti-histaminicos, agentes antimicrobianos, agentes fungis-táticos, agentes germicidas, hormonas, agentes antipiréticos, agentes anti-diabéticos, broncodilatadores, agentes anti-diarreicos, agentes anti-arrítmicos, agentes de dilatação coronária, glicósidos, espasmolíticos, agentes anti-hipertensores, anti-depressivos, agentes ansioliticos, agentes anti-psicóticos, outros agentes psicoterapêuticos, esteróides, corticoesteróides, analgésicos, medicamentos para constipações, vitaminas, sedativos, hipnóticos, contraceptivos, fármacos anti-inflamatórios não esteróides, agentes de abaixamento a glucose no sangue, agentes de abaixamento do colesterol, agentes anti-convulsivos, outros agentes anti-epilépticos, imunomoduladores, anticolinér-gicos, simpatoliticos, simpatomiméticos, agentes vasodila-tadores, anticoagulantes, antiarritmicos, prostaglandinas com várias actividades farmacológicas, diuréticos, adjuvantes do sono, agentes anti-histaminicos, agentes anti-neoplásicos, agentes oncoliticos, antiandrogénios, agentes antimaláricos, agentes antileprosos, e vários outros tipos de fármacos. Por exemplo, agonistas GABA, moduladores alfa-2-delta; outros antagonistas 5-HT2a e agonistas inversos são úteis em combinação com os compostos da invenção para o tratamento de distúrbios do sono. Ver Goodman and Gilman's The Basis of Therapeutics (Oitava 83 ΡΕ1877390

Edição, Pergamon Press, Inc., EUA, 1990) e The Merck Index (Décima primeira edição, Merck & Co., Inc., EUA, 1989).

Exemplos de fármacos utilizados em combinação com os compostos da invenção incluem mas não se limitam a, AMBIEN® STILNOX® (tartarato de zolpidem), indiplon, ESTORRA™ (eszopiclona), NEURONTIN® (gabapentina), LYRICA® (pregabalina), eplivanserina, SONATA® (zaleplon), LUNESTA™ (eszopiclona), ZOPICLONE™ (imovane), DESYREL™ (hidroclo-reto de trazodona), SEROQUEL® (fumarato de quetiapina), CLOZARIL® (clozapina), ZYPREXA™ (olanzapina), RISPERDAL® (risperidona), M100907 e antagonistas da melatonina, por exemplo, ROSEREM™ (ramelteon).

Numa forma de realização, os compostos da invenção são úteis em combinação com uma terapia mecânica, tal como CPAP. "CPAP" ou "pressão positiva continua na via aérea" é um tratamento mecânico para a apneia do sono e outros distúrbios respiratórios relacionados com o sono (incluindo o ressonar) que é tipicamente administrado através do nariz ou da boca do paciente.

Durante o tratamento CPAP, um indivíduo usa uma máscara de plástico bem apertada sobre o nariz durante o sono. A máscara está ligada a um compressor que força o ar para o interior do nariz criando uma pressão positiva nas vias aéreas do paciente. O princípio do método é que a pressurização das vias aéreas proporciona uma acção de "fixação" das vias aéreas, o que previne ou reduz o colapso das vias aéreas e assim, a apneia obstrutiva do sono. 84 ΡΕ1877390

Apesar de uma resposta terapêutica eficaz ser observada na maioria dos pacientes que se submetem a tratamento CPAP, muitos pacientes não toleram o equipamento ou a pressão e recusam o tratamento. Além disso, recentes estudos de monitorização com ocultação mostraram que o cumprimento do tratamento CPAP é muito baixo. É sabido que os pacientes removem a máscara enquanto estão a dormir.

Num aspecto, o composto da invenção é administrado em conjunto com um dispositivo CPAP para promover o sono. Noutro aspecto, o composto da invenção é administrado em conjunto com um dispositivo CPAP para melhorar o sono. Noutro aspecto, o composto da invenção é administrado em conjunto com um dispositivo CPAP para melhorar o cumprimento do tratamento CPAP. Sem se pretender qualquer ligação a uma teoria, pensa-se que através da administração de uma quantidade eficaz de um composto da invenção promotor do sono em conjunto com o tratamento CPAP, o paciente dormirá melhor e de forma mais saudável e assim, não terá tendência a remover a máscara.

Numa forma de realização, o composto da presente invenção é administrado antes do tratamento CPAP. Noutra forma de realização, o composto da presente invenção é administrado substancialmente ao mesmo tempo que o tratamento CPAP. Numa forma de realização, a administração paralela de uma quantidade eficaz do composto é conseguida através da adição de um canal de aerossol adicional à porção de tratamento da pressão e ar do dispositivo CPAP, 85 ΡΕ1877390 administrando assim o composto da presente invenção numa forma nebulizada através a máscara nasal ou oral do dispositivo CPAP. Alternativamente, uma quantidade eficaz do composto pode ser adicionada a água ou no reservatório de liquido que faz tipicamente parte do dispositivo de tratamento CPAP.

Utilizando o tratamento com a máscara CPAP, o composto da invenção é administrado numa concentração baixa ao longo da noite, ou a concentrações mais elevadas, na forma de um bolus, a diferentes alturas no inicio e durante o decurso da noite. EXEMPLO 1: Síntese de Compostos Benzisoxazole

Uma síntese geral de um composto benzisoxazole piperazina é apresentada no Esquema 1.

+

Esquema 1 86 ΡΕ1877390

Reage-se 3-cloro-l,2-benzisoxazole com excesso de piperazina na presença de piridina para originar 3-(piperazin-l-il)benzo[d]isoxazole (3A) com um rendimento de 76%. A aminação redutiva do composto (3A) com 2-carbometoxi 2-metil propionaldeido originou a piperazina alquilada (4A) , que foi purificada sobre silica gel. A hidrólise básica do éster de metilo de (4A) em etanol aquoso seguida de acidificação originou o ácido carboxilico (1) na forma do sal mono-HCl.

Os compostos sulfanamida podem ser sintetizados, por exemplo, como ilustrado no Esquema 2:

ESQUEMA 2 EXEMPLO 2: Avaliação dos Compostos 0 sono em mamíferos pode ser dividido no sono que ocorre durante os períodos de movimento rápido dos olhos (REM), acompanhado por uma actividade cerebral substancial, e períodos de sono não REM (NREM) , acompanhados por uma actividade cerebral menor. Tipicamente, um período de sono 87 ΡΕ1877390 nocturno normal é ocupado primeiramente pelo sono NREM, e assim a acumulação de NREM pode servir como uma medição da acumulação total de sono, por exemplo, um NREM substancialmente diminuído pode ser associado a insónia e uma acumulação de "défice de sono", por exemplo, uma necessidade fisiológica acumulada para dormir que tende a persistir até se acumular uma quantidade suficiente de sono adicional. Assim, um aumento de NREM associado com um tratamento pode indicar a eficácia do tratamento para o tratamento da insónia. A qualidade do sono pode ser associada com continuidade ou manutenção do sono. Por exemplo, um indivíduo com apneia do sono acorda diversas vezes durante um período de sono, por exemplo, o indivíduo tem dificuldade em manter um sono contínuo. Apesar de tal indivíduo poder acumular uma duração de sono nocturno típica, por exemplo, 8 horas, o sono não é reparador devido ao acordar causado pela apneia do sono. Assim, um aumento no período de sono ininterrupto mais longo (LUSB, também conhecido como período de sono mais longo) associado com um tratamento, pode indicar a eficácia do tratamento no aumento da continuidade do sono, e assim no tratamento da insónia da manutenção do sono. O sono-vigília, a actividade locomotora e a temperatura corporal são monitorizados em ratos Wistar machos tratados com o composto em teste (ou seja, análogo do benzisoxazole) inicialmente numa concentração de 10 ΡΕ1877390 mg/kg. Doses mais elevadas e mais baixas são testadas para compostos seleccionados (por exemplo, tão elevadas quanto 45 mg/kg e tão baixas quanto necessário para estabelecer uma dose sem efeito) . Os tratamentos são administrados a TC-18, o pico do período dominado por actividade (6 horas após se desligarem as luzes), e produziram efeitos soporíficos (indutores do sono) caracterizados pelo aumento do tempo de sono não REM, aumentaram a continuidade do sono, mas sem evidências de inibição do sono REM ou de insónia de abstinência ("rebound")· 0 sono-vigília, a actividade locomotora e a temperatura corporal foram monitorizados in vivo com vários compostos da invenção. Ratos Wistar machos adultos (250 g na altura da cirurgia, Charles River Laboratories, Wilmington MA) foram anestesiados (2% de isoflurano em oxigénio medicinal) e preparados cirurgicamente com um implante craniano para permitir o registo crónico de electroencefalograma (EEG) e electrocardiograma (EMG). A temperatura corporal e a actividade locomotora foram monitorizadas através de um transmissor miniatura (Mini-Mitter, Bend, OR) cirurgicamente colocado no abdómen. 0 implante craniano consistiu em parafusos de aço inoxidável (dois frontais [ + 3,2 AP do bregma , ±2,0 mL] e dois occipitais [-6,9 AP, ±5 , 5 mL] para o registo do EEG. Dois fios de aço inoxidável revestido a Teflon® foram posi- cionados sob os músculos trapezóides da nuca para o registo do EMG. Todas os fios condutores foram soldados a um conector de miniatura antes da cirurgia, e esterilizados por fase gasosa com óxido de etileno. 0 conjunto do im- 89 ΡΕ1877390 plante foi fixado ao crânio com acrílico dental. Permitiu-se um mínimo de três semanas para a recuperação cirúrgica.

Cada rato foi permanentemente hospedado na sua gaiola de registo individual localizada no interior de compartimentos separados e ventilados de câmaras de aço inoxidável construídas por medida. Cada gaiola foi melhorada com um tubo de exaustão com filtro e um comutador giratório de binário reduzido. Disponibilizou-se alimento e água ad libitum. Foi mantido ao longo do estudo um ciclo claro-escuro de 24 horas (12 horas de claridade, 12 horas de escuridão). Os animais foram deixados sossegados durante pelo menos 48 horas antes e depois dos tratamentos. 0 sono e a vigília foram determinados utilizando o sistema de monitorização de sono-vigília e fisiológica baseado na internet "SCORE-2004™” (Hypnion, Worcester, MA) . 0 sistema monitorizou EEG amplificado (passa banda 1-30 Hz), EMG integrado (passa banda 10-100 Hz), temperatura corporal e actividade locomotora não específica (LMA) através de telemetria, e o beber, continuamente e simultaneamente. Os estados da existência foram classificados Online como sono não REM (NREM), sono REM, vigília, ou vigila dominada pelo ritmo teta em cada 10 segundos. As contagens da bebida total e da actividade locomotora e a temperatura corporal foram quantificadas e registadas cada minuto, utilizando algoritmos de reconhecimento de padrões e extracção de características do EEG. Destes dados, o período de sono ininterrupto mais longo (LUSB) foi obtido. 0 algoritmo de classificação utilizou modelos de EEG de 90 ΡΕ1877390 estados da existência individualmente calibrados, em conjunto com critérios EMG para diferenciar de sono REM de vigília dominada pelo ritmo teta, em conjunto com regras contextuais dependentes do comportamento (por exemplo, se o animal estava a beber, então está acordado). O beber e a intensidade da actividade locomotora (LMA) foram registados a cada 10 segundos, enquanto que a temperatura corporal foi registada a cada minuto. A actividade locomotora foi detectada através de um receptor de telemetria (Mini-Mitter) colocado por baixo da gaiola. As medições de telemetria (LMA e temperatura corporal) não foram parte do algoritmo de classificação; assim, a classificação do sono e os dados de telemetria constituíram medições independentes .

Os compostos foram administrados ao TC-18, o pico do período dominado por actividade, permitiu-se tempo suficiente para verificar a evolução no tempo do efeito do tratamento antes de se ligarem as luzes (6 horas após o tratamento). Os compostos foram suspendidos em metilce-lulose estéril a 0,25% ou 0,5% (1-2 mL/kg). Os tratamentos foram administrados oralmente na forma de um bolus.

Utilizou-se um desenho de estudo de grupos paralelos. Os veículos controlo foram recolhidos de um conjunto numeroso (N>200): seleccionou-se um subconjunto dos veículos controlo recolhidos, com base na combinação computorizada com a linha de base de 24 horas pré-tratamento do grupo de tratamento activo. 91 ΡΕ1877390

Calcularam-se os parâmetros farmacocinéticos seguintes das concentrações de plasma individuais do composto de benzisoxazole modificado utilizando uma abordagem não compartimentai e um programa informático farmacocinético apropriado validado (por exemplo, WinNonlin Professional). Os valores de concentração reportados como BLQ são postos a zero. Se estiverem disponíveis dados de concentração, são realizados cálculos provisórios (dados não-QC.d) entre períodos se possível. 0 aumento progressivo das doses não depende dos cálculos farmacocinéticos.

Calculam-se as estatísticas descritivas, incluindo média, desvio padrão, coeficiente de variação, média geométrica, mediana, mínimo e máximo para cada parâmetro farmacocinético por grupo de dosagem. As estatísticas descritivas para a transformada logarítmica natural de AUC(O-t), AUC(O-inf), e Cmax são fornecidas para cada nível de dose. Além disso, são fornecidos gráficos da a concentração média e mediana em função do tempo. A proporcionalidade da dose seguindo a medicação do estudo é explorada através da análise das transformadas logarítimcas naturais das variáveis farmacocinéticas AUC(0-t) , AUC(O-inf), e Cmax com um modelo linear incluindo a transformada logarítmica natural da dose como covariadas. A proporcionalidade com a dose é concluída se o intervalo de confiança de 95% para o declive da covariada inclui o valor de 1. A linearidade da dose para AUC(O-t), AUC(O-inf), e Cmax é também explorada por um modelo linear. Ver, por 92 ΡΕ1877390 exemplo, Gibaldi e Perrier, Pharmacokinetics, Segunda Ed, Mareei Dekker: Nova Iorque, Nova Iorque (1982). Utilizaram-se tempos de recolha nominais nos cálculos, excepto quando os tempos de amostragem caiam fora das gamas temporais aceitáveis especificadas pelo protocolo. Foram estimados os seguintes parâmetros:

Cmax Concentração máxima no plasma.

Tmax Tempo para concentração máxima.

Cmax e Tmax foram registados directamente dos dados concentração-tempo. AUCo-t Área sob a curva concentração no plasma-tempo desde o tempo 9 até ao último ponto no tempo com concentrações mensuráveis, estimado utilizando a regra dos trapézios. AUCo-oo Área sob a curva concentração no plasma-tempo desde o tempo extrapolada para o infinito, calculada utilizando a fórmula: AUCo-oo = AUCo-i + Co/λο

Em que Ct é a última concentração mensurável no plasma e λζ é constante de eliminação de fase terminal estimada utilizando uma regressão log-linear durante a fase de eliminação terminal. O número de pontos utilizados no cálculo de λζ foi determinado através de inspecção visual dos dados que descrevem a fase terminal. Pelo menos os três últimos pontos com valores mensuráveis são utilizados no cálculo de λζ. O número de pontos utilizado no cálculo de λζ é baseado na melhor correlação (r2 ajustado) obtida para 93 ΡΕ1877390 os pontos de tempo que descrevem a fase de eliminação terminal. Um valor r2 ajustado para a linha de regressão é considerado definir com precisão a fase de eliminação terminal se o valor for >0,7.

Ti/2 Meia vida de eliminação determinada por Ln(2) λζ. CL Eliminação sistémica; para bolus intravenoso ou infusão, calculada utilizando a fórmula: CL=Dose/AUC0-oo

Reporta-se CL/F, em que F=Biodisponibilidade absoluta, para todas as outras vias de administração. V2 Volume de distribuição para todas as vias de administração, calculado utilizando a fórmula: V2 = CL λζ

Utiliza-se CL/F para calcular V2/F para vias de administração extravasculares. A análise farmacocinética é utilizada utilizando WinNonlin Professional Edition (Pharsight Corporation, Versão 3.3 ou 4.1). As estatísticas descritivas tais como a média e o desvio padrão são calculadas em Microsoft Excel (Versão 8.Oe). 0 metabolismo dos artigos em teste em hepatócitos criopreservados humanos e de macaco é testado como se segue: 94 ΡΕ1877390

MATERIAIS

Materiais Fabricante, número de lote e prazo de vai. Hepatócitos de Cellzdirect Macaco Humano Meio E de Williams Sigma W1878, vai 2004-11 Soro fetal bovino Fisher BW 14-501F, lote 01104637, vai 17 Fev 10 Azul de Tripano 0,45 Biowhittaker 17-942E, lote 01104637, vai Jan 14 Solução de Armazenagem de Material em Teste CB-l/III/6 DMSO Fisher BP231-100, lote 041215, vai 12 Jul 09 Etoxicumarina a 10 mM em metanol PSLB 22-A-15, vai 25-9-04 ACN Fisher A998-4, lote 041181, vai 6/07 Ácido fórmico Fisher 032879, vai 14-03-06

Preparação Pré-Incubação: A amostra é diluída com DMSO, para se preparar stocks de 100 μΜ e 10 μΜ. Prepara-se 0,1% de ácido fórmico em acetonitrilo através da adição de 1 mL de ácido fórmico por 1L de acetonitrilo (armazena-se à temperatura ambiente durante 3 meses). Prepararam-se placas de 96 poços de 95 ΡΕ1877390 paragem da reacção aos 10 minutos, 60 e 120 minutos com 150 pL de acetonitrilo + 0,1% de ácido fórmico em cada poço. Armazena-se em gelo ou refrigerado.

De seguida, os hepatócitos foram descongelados e colocou-se 100 pL de uma suspensão celular num tubo de microcentrifuga com 100 pL de uma solução de Azul de Tripano e misturou-se suavemente por inversão. Colocou-se uma pequena porção da suspensão celular corada (aproxima-damente 15 pL) num hemacitómetro limpo com uma lamela. O hemacitómetro é colocado na platina do microscópio e a focagem e a ampliação são ajustadas até um único quadrado de contagem preencher o campo. Conta-se o número de células nos quatro quadrados subdivididos no canto exterior do hemacitómetro. As células viáveis são opalescentes, redondas, e pálidas com um contorno mais escuro. As células não viáveis, são de um azul escuro opaco. A % de viabilidade é calculada como o número de células viáveis dividido pelo número de células totais x 100.

Calcula-se a densidade celular e o número total de células viáveis:

Densidade de células viáveis (D)=Média 3 de células viáveis contadas (C)xl04xf2; Número total de células viáveis (E)=Dx26 (volume de ressuspensão). É calculado o meio adicional necessário para se conseguir uma concentração de lxlO6 células/mL: 96 ΡΕ1877390

Volume de meio adicional=células viáveis totais(E)-26 mL 1 x 106

As células são diluídas em conformidade e armazenadas à temperatura ambiente.

Incubações

Transferem-se 198 pL de hepatócitos para os poços relevantes numa placa de doseamento. A suspensão de hepatócitos remanescente é combinada e colocada num recipiente adequado de água quase a ferver e deixada 5 minutos para inactivar as células (para controlos inactivos e preparação da curva de calibração).

Transferem-se 198 pL de hepatócitos inactivos para poços controlo el98 pL de meio em branco são transferidos para os poços de controlo de tampa. As placas são pré-incubadas durante pelo menos 15 min. As reacções são iniciadas com 2 pL de diluição apropriada de composto em teste da placa de dosagem. As placas são incubadas num incubador colocado a 37°C durante aproximadamente 10 minutos, depois remove-se 50 pL de incubado para uma placa de paragem da reacção aos 10 minutos contendo 150 pL de acetonitrilo + 0, 1% de ácido fórmico e armazena-se refrigerado ou em gelo. Após 60 minutos, remove-se 50 pL do incubado para uma placa de paragem da reacção aos 60 minutos contendo 150 pL de acetonitrilo+0,1% de ácido fórmico e armazena-se refrigerado ou em gelo. Após 120 minutos, remove-se 50 pL do incubado para uma placa de paragem da 97 ΡΕ1877390 reacção aos 120 minutos contendo 150 pL de acetonitrilo + 0,1% de ácido fórmico e armazena-se refrigerado ou em gelo. Os 50 pL remanescentes são congelados nas placas de incubação. Os tubos são então centrifugados a ~4°C a ~1400 x g durante ~10 minutos. Dilui-se 100 pL de sobrenadante com 100 pL de água em placas para análise, as placas são armazenadas congeladas a -20°C antes da análise.

Preparação de Curvas de Calibração

Prepara-se um padrão a 0,1 μΜ através da adição de 2 pL de soluções de dosagem a 10 pM a 198 pL de hepatócitos inactivados em placas de preparação de padrões. Adiciona-se 150 pL de acetonitrilo+0,1% de ácido fórmico à placa de paragem de reacção de padrão. Transfere-se 150 pL de padrão a 0,1 pM para uma coluna de uma placa de padrão. Adicionam-se 75 pL de hepatócitos inactivos aos poços remanescentes. Transferem-se 75 pL de padrão a 0,1 pM para o poço adjacente na coluna na placa, e mistura-se bem por titulação. Continua-se a diluição em série. Remove-se 75 pL do padrão final (todos os poços contêm 75 pL) . As placas são incubadas a aproximadamente 37 °C durante 10 minutos.

Transfere-se 50 pL para uma placa de paragem de reacção de padrão contendo 150 pL de acetonitrilo+0,1% de ácido fórmico. As placas são centrifugadas em conjunto com as amostras e o sobrenadante diluído 1:1 com água como acima. As amostras são armazenadas congeladas a ~-20°C. São apresentados abaixo parâmetros de sono para compostos representativos. 98 ΡΕ1877390

Ccnposto No EERÍODO EE 9040 ININIERRUPIO MÁXIMA AOMJIAÇÃO EE SOO NREM MAIS IOSGO R4 R5 X RO 0,3 mg/kg 1 mg/kg 3 mg/kg 10 mg/kg 30 mg/kg 0,3 mg/kg 1 mg/kg 3 mg/kg 10 mg/kg 30 mg/kg 1 N 2C- GEM OCOH 6,0 ± 1,7 9,3 ± 1,9 14,4 ± 3,0 16,2 ± 3,0 20 ± 7 16 ± 4 26 ± 4 50 ± 7 3 N 2C- GEM MSCJL OCOH 5,2 ± 1,9 12,3 ± 4,2 25 ± 6 27 ± 5 4 - - N 2C OCOH 9,9 ± 2,2 27 ± 5 5 N CP- 2C OCOH 3,0 ± 1,2 5,1 ± 1,4 7,2 ± 1,5 40 ± 6 37 ± 8 45 ± 9 6 F N 2C- GUM OCOH 9,8 ± 2,9 13,5 ± 4 18 ± 5 26 ± 7 7 och3 N 2C- GEM OCOH -2,5 ± 3,1 6 ± 4 8 ch3 N 2C- GEM OCOH 4,8 ± 2,3 8,6 ± 2,2 14,3 ± 3,6 15 ± 4 29 ± 5 37 ± 6 9 ch3 N 20- GEM OCOH 13,6 ± 4,2 12,9 ± 3,5 24 ± 5 29 ± 8 10 - - N 3C OCOH 10,7 ± 1,9 9,9 ± 3,7 22 ± 5 24 ± 4 11 ch3 N CP- 20 OCOH 12 - ch3 N 20 OCOH 7,3 ± 3,4 16 ± 4 13 - ch3 N 3C OCOH -5,6 ± 2,4 7 ± 5 ΡΕ1877390 99 R* ο *

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Lisboa 25 de Maio de 2010

Claims (11)

1. ΡΕ1877390 1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto de Fórmula IV: Ri

   ou um seu sal farmaceuticamente eficaz em que t é 1 ou 2; Ri, R2, R3, e R4 são, independentemente, H, F, Cl, Br, CF3, CH3, OH, 0CH3, CH2OCH3, ou CH2OCH2CH3; R5-R6 são H, CH3, CH2CH3, ou R5 e R6, em conjunto com o carbono ao qual estão ligados, são unidos de modo a formar um anel espiro de tamanho 3 a 7; e Z é seleccionado de C02H, CONHS (0)2-alquilo, CONHS(0)2-cicloalquilo, CONHS(0)2-heteroalquilo, e tetrazole; em que alquilo é alquilo de cadeia linear C2-C6 ou alquilo ramificado C3-C6; cicloalquilo é um grupo cicloalquilo com 3 a 8 átomos de carbono na sua estrutura anelar; heteroalquilo é um alquilo ou grupo cicloalquilo tal como aqui acima definido que contém pelo menos um heteroátomo seleccionado de azoto, oxigénio, enxofre e fósforo; e tetrazole é 2 ΡΕ1877390 _^jS| N / N
2. 2. O composto da reivindicação 1, em que Ri, R2, R3, e R4 são cada um H. 3. 0 composto da reivindicação 1, em que Ri, R3, e R4 são cada um H. 4. 0 composto da reivindicação 1, em que Ri, R2, e R4 são cada um H. 5. 0 composto da reivindicação 1, em que t é 1. 6. 0 composto da reivindicação 1, em que o composto é seleccionado de:

   ΡΕ1877390 3

   C0NHSD3"<^ S f~~\ CQÍsiHSCyN O * \_í
3. 7. O composto da reivindicação 1, em que o composto é

   \ £02h • >
4. 8. Uma composição farmacêutica compreendendo um composto de qualquer uma das reivindicações 1-7, ou um seu sal, e pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável . 4 ΡΕ1877390
5. 9. Uma formulação compreendendo um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-7 e pelo menos um agente terapêutico de uma medicação comercialmente disponível de venda livre ou sob receita médica.
6. 10. Um composto de qualquer uma das reivindicações 1-7 para utilização em terapia.
7. 11. Um composto de qualquer uma das reivindicações 1-7 para utilização no tratamento de um distúrbio da saúde.
8. 12. Utilização de um composto de qualquer uma das reivindicações 1-7 para o fabrico de um medicamento para tratamento de um distúrbio do sono.
9. 13. Um composto da reivindicação 11 ou a utilização da reivindicação 12, em que o distúrbio do sono é seleccionado de insónia, hipersonia, narcolepsia, sindrome da apneia do sono, parassonia e anomalia do ritmo circadiano.
10. 14. Um composto da reivindicação 11 ou a utilização da reivindicação 12, em que o distúrbio do sono é insónia. Lisboa, 25 de Maio de 2010 1 ΡΕ1877390 REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO Esta lista de referências citadas pelo requerente é apenas para conveniência do leitor. A mesma não faz parte do documento da patente Europeia. Ainda que tenha sido tomado o devido cuidado ao compilar as referências, podem não estar excluídos erros ou omissões e o IEP declina quaisquer responsabilidades a esse respeito. Documentos de patentes citadas na Descrição ÍÍS 5388473 A US 5518730 A «88471392 B U:S5587i72A «S 5818344 A US 8277488 B US 5822713 A VVQ 8721433 Â WO 02888448 A m5578322A L® §887897 A US 4842803 A US 5931023 A US 4355326 A Literatura que não é de patentes citada na Descrição * Brawí ; Rarape, pífs,7W;s®«fA-<3i fe»·®. ®Q8, vol. 7: 15-30..... * Hsssge «ti si. FESS mti 1987. vol. 417. 28-32 * Wwídcfc 5 ArilsM; àasite 199®. YcL 93 í1i. 125-32 * Yap; Caram,· «a Exp. AMim 1888.;
11. 174-Bi * Rw' í jten. thfc SciArss· a ncf· RtStóSc© of PlKs^áQ;'. t®acA P^shm® C1. 18-25 *· Qooeinwi ; etimwYs, Tt» Bsm «t;7l»®pea8c». Fargsrem Pfess, Inc. 11 * Tliô f4epsSc IrçJôx. ® Go.:,:|iiCv 1 Ma1c eH» Laopctto st éL i Sàssl. , 2804$«#: 47 8618-6824 * S8verman,R &.Tfcs Qrgsm:C?>«ra^8H3!^;01· «gn and Acísor Acadsmc P1®». :tó. 1¾¾¾ "13-23 *' Ratara; LaVete>. Réviú Ί386, «. 3®. 3147-3175 * R. B SBverman,Tns- QíssojcGnaíOiSttycf!>,·ο Cs- btígG ar .j 3fu\. Ac1 A-sd^ -we 0νβ'-ΐ'- 1 -«A. * Buefift» «1 si. Mçs. Plmtnspp!,1 1988, v1 3§, 4U9-7S * Snt&ft Jouma! 0 Í39S, vsi -115; 823-528