PT1443967E - Combinação de inibidor da ciclooxigenase-2/inibidor da histona-desacetilase - Google Patents

Description

ΡΕ1443967 1 DESCRIÇÃO "COMBINAÇÃO DE INIBIDOR DA CICLOOXIGENASE-2/INIBIDOR DA HISTONA-DESACETILASE" A invenção relaciona-se com uma combinação a qual compreende (a) um inibidor da ciclooxigenase-2 ("inibidor da COX-2") e (b) um inibidor da histona-desacetilase ("HDAI") para utilização simultânea, concorrente, separada ou sequencial, em especial para utilização no tratamento de lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon ou outras malignidades num mamifero, em particular num ser humano. A invenção também se relaciona com composições farmacêuticas compreendendo uma tal combinação. A presente invenção relaciona-se ainda com uma embalagem ou produto comercial compreendendo uma tal combinação.

Os inibidores da COX-2 utilizados na combinação da presente invenção são tipicamente aqueles que têm uma IC50 para a inibição da COX-2 menor do que cerca de 2 μΜ e uma IC50 para inibição da COX-1 maior do que cerca de 5 μΜ, e.g. quando medidas nos ensaios descritos por Brideau et al., Inflamm. Res. 45-68-74 (1996). Preferencialmente o inibidor da COX-2 tem uma razão de selectividade de pelo menos 10, mais preferencialmente pelo menos 40, para inibição da COX-2 em relação à inibição da COX-1. 2 ΡΕ1443967

Dos inibidores da COX-2 conhecidos, os ácidos 2-arilaminofenilacéticos 5-alquil-substituidos e derivados são especialmente úteis na presente invenção. Estes compostos, a sua utilização e preparação são descritos na Patente U.S. n° 6 291 523.

Os ésteres pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis são derivados de tipo éster que podem ser convertidos por solvólise ou em condições fisiológicas aos ácidos carboxilicos livres de fórmula Ia. Estes ésteres são e.g. ésteres de alquilo inferior (tal como o éster de metilo ou etilo), ésteres de carboxi-alquilo inferior tais como os ésteres de carboximetilo, ésteres de nitroxi- alquilo inferior (tal como o éster de 4-nitroxibutilo) e semelhantes.

Assim, os inibidores da COX-2 úteis para serem utilizados na presente invenção são compostos de fórmula I

em que R* é metilo ou etilo; R*i é cloro ou fluoro; R*2 é hidrogénio ou fluoro; 3 ΡΕ1443967 r*3 é hidrogénio, fluoro, cloro, metilo, etilo, metoxilo, etoxilo ou hidroxilo; R*4 é hidrogénio ou fluoro; R*5 é cloro, fluoro, trifluorometilo ou metilo; e R*6 é hidroxilo ou -OCH2COOH; seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis; e ésteres pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis representam sais de metal, tais como sais de metal alcalino, e.g. sais de sódio, potássio, magnésio ou cálcio, assim como sais de amónio, os quais são preparados e.g. com amoníaco e mono-ou dialquilaminas, tais como sais dietilamónio, e com aminoácidos, tais como os sais de arginina e histidina. O composto ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6'-fluoro-anilino)-fenilacético, assim como os seus sais farmaceuti-camente aceitáveis, é um inibidor da COX-2 especialmente útil para ser utilizado na presente invenção.

Igualmente úteis na prática da invenção são os seguintes compostos de inibição da COX-2, seus derivados, ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis, ou qualquer hidrato destes: rofecoxib, etoricoxib, celecoxib, valde-coxib e parecoxib.

Os compostos HDAI com particular interesse para serem utilizados nas associações e métodos da invenção são os compostos de hidroxamato descritos pela fórmula II (II) (II) 4 ΡΕ1443967 a Ο HO \

R» em que

Ri é H, halo ou um alquilo Ci-C6 de cadeia linear (especialmente metilo, etilo ou n-propilo, substituintes metilo, etilo e n-propilo esses que estão não substituídos ou substituídos com um ou mais substituintes descritos abaixo para substituintes de alquilo); R.2 é seleccionado de H, alquilo C1-C10, (preferencialmente alquilo Ci-C6, e.g. metilo, etilo ou -CH2CHrOH), cicloalqui-lo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilalquilo C4-C9, cicloalquilalquilo (e.g., ciclopropilmetilo), arilo, heteroarilo, arilalquilo (e.g. benzilo), heteroarilalquilo (e.g. piridilmetilo), - (CH2) nC (0) R6, - (CH2) n0C (0)R6, amino- acilo, HON-C(0)-CH=C(Ri)-aril-alquil- e -(CH2)nR7; R3 e R4 são iguais ou diferentes e independentemente H, alquilo Ci-C6, acilo ou acilamino, ou R3 e R4 conjuntamente com o carbono ao qual eles estão ligados representam C=0, C=S ou C=NR8, ou R2 conjuntamente com o azoto ao qual ele está ligado e R3 conjuntamente com o carbono ao qual ele está ligado podem formar um heterocicloalquilo C4-C9, um heteroarilo, um poli-heteroarilo, um poli-heterociclo não aromático ou um anel poli-heterociclo misto de arilo e não arilo; R5 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, 5 ΡΕ1443967 heterocicloalquilo C4-C9, acilo, arilo, heteroarilo, aril-alquilo (e.g. benzilo), heteroarilalquilo (e.g. piridilme-tilo), policiclos aromáticos, policiclos não aromáticos, policiclos mistos de arilo e não arilo, poli-heteroarilo, poli-heterociclo não aromáticos e poli-heterociclos mistos de arilo e não arilo; η, ηχ, n2 e n3 são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de 0-6, quando ηχ é 1-6, cada átomo de carbono pode estar opcional e independentemente substituído com R3 e/ou R4; X e Y são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de H, halo, alquilo C1-C4, tais como CH3 e CF3, N02, C (0) Ri, OR9, SR9, CN e NR10R11; R6 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, cicloalquilalquilo (e.g., ciclo-propilmetilo), arilo, heteroarilo, arilalquilo (e.g., benzilo, 2-feniletenilo), heteroarilalquilo (e.g., piridilme-tilo) , OR12, θ NRi3Ri4; R7 é seleccionado de OR15, SR15, S(0)R16, SO2R17, NRi3Ri4 e NR12SO2R6;

Re é seleccionado de H, OR15, NR13R14, alquilo Ci-Cê, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo (e.g., benzilo) e heteroarilalquilo (e.g., piridilmetilo);

Rg é seleccionado de alquilo C1-C4, por exemplo, CH3 e CF3, C(O)-alquilo, por exemplo C(0)CH3 e C(0)CF3;

Rio e Rn são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de H, alquilo C1-C4 e -C(O)-alquilo; R12 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, 6 ΡΕ1443967 heterocicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilalquilo C4-C9, arilo, policiclo misto de arilo e não arilo, heteroarilo, arilalquilo (e.g., benzilo) e heteroarilalquilo (e.g., piridilmetilo); R13 e R14 são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo (e.g., benzilo), heteroarilalquilo (e.g., piridilmetilo), aminoacilo, ou R13 e Ri4 conjuntamente com o azoto ao qual eles estão ligados são heterocicloalquilo C4-C9, heteroarilo, poli-heteroarilo, poli-heterociclo não aromático ou poli-heterociclo misto de arilo e não arilo;

Ris é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo e (CH2)mZRi2;

Ri6 é seleccionado de alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, poli-heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo e (CH2)mZRi2;

Ri? é seleccionado de alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, policiclos aromáticos, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, poli-hetero-arilo e NR13R14; m é um número inteiro seleccionado de 0 até 6; e Z é seleccionado de 0 NRi3, S e S(0), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Consoante apropriado, não substituído significa que não há substituinte ou que os únicos substituintes são hidrogénio. 7 ΡΕ1443967

Os substituintes halo são seleccionados de fluo-ro, cloro, bromo e iodo, preferencialmente fluoro ou cloro.

Os substituintes alquilo incluem alquilo Ci-C6 linear e ramificado, a menos que assinalado de outro modo. Exemplos de substituintes alquilo Ci-Cô lineares e ramificados adequados incluem metilo, etilo, n-propilo, 2-pro-pilo, n-butilo, sec-butilo, t-butilo e semelhantes. A menos que assinalado de outro modo, os substituintes de alquilo incluem grupos alquilo não substituídos e grupos alquilo que estão substituídos com um ou mais substituintes adequados, incluindo insaturação (i.e. existem uma ou mais ligações duplas ou triplas C-C), acilo, cicloalquilo, halo, oxialquilo, alquilamino, aminoalquilo, acilamino e ORis, por exemplo, alcoxilo. Os substituintes preferidos para grupos alquilo incluem halo, hidroxilo, alcoxilo, oxialquilo, alquilamino e aminoalquilo.

Os substituintes cicloalquilo incluem grupos cicloalquilo C3-C9, tais como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo e semelhantes, a menos que especificado de outro modo. A menos que assinalado de outro modo, os substituintes cicloalquilo incluem grupos cicloalquilo não substituídos e grupos cicloalquilo que estão substituídos com um ou mais substituintes adequados, incluindo alquilo Ci-C6, halo, hidroxilo, aminoalquilo, oxialquilo, alquilamino e OR15, tal como alcoxilo. Os substituintes preferidos para grupos cicloalquilo incluem halo, 8 ΡΕ1443967 hidroxilo, alcoxilo, oxialquilo, alquilamino e aminoal-quilo. A discussão acima de substituintes alquilo e cicloalquilo também se aplicam às partes de alquilo de outros substituintes, tais como sem limitação, alcoxilo, alquilaminas, alquilcetonas, arilalquilo, heteroarilal-quilo, alquilsulfonilo e substituintes éster de alquilo e semelhantes.

Os substituintes heterocicloalquilo incluem anéis alifáticos de 3 até 9 membros, tais como anéis alifáticos de 4 até 7 membros, contendo desde um até três heteroátomos seleccionados de azoto, enxofre, oxigénio. Exemplos de substituintes heterocicloalquilo adequados incluem pirro-lidilo, tetra-hidrofurilo, tetra-hidrotiofuranilo, piperi-dilo, piperazilo, tetra-hidropiranilo, morfolino, 1,3-dia-zapano, 1,4-diazapano, 1,4-oxazepano e 1,4-oxatiapano. A menos que assinalado de outro modo, os anéis estão não substituídos ou substituídos nos átomos de carbono com um ou mais substituintes adequados, incluindo alquilo Ci-Cê, cicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo (e.g., benzilo) e heteroarilalquilo (e.g., piridilmetilo), halo, amino, alquilamino e OR15, por exemplo alcoxilo. A menos que assinalado de outro modo, os heteroátomos de azoto estão não substituídos ou substituídos com H, alquilo Ci-C4, arilalquilo (e.g., benzilo) e heteroarilalquilo (e.g., piridilmetilo), acilo, aminoacilo, alquilsulfonilo e aril-sulfonilo. 9 ΡΕ1443967

Os substituintes cicloalquilalquilo incluem compostos da fórmula - (CH2) n5-cicloalquilo em que n5 é um número desde 1-6. Os substituintes alquilcicloalquilo adequados incluem ciclopentilmetilo, ciclopentiletilo, ciclo-hexilmetilo e semelhantes. Tais substituintes estão não substituídos ou substituídos na parte de alquilo ou na parte de cicloalquilo por um substituinte adequado, incluindo os listados acima para alquilo e cicloalquilo.

Os substituintes incluem fenilo não substituído e fenilo substituído com um ou mais substituintes adequados, incluindo alquilo Ci-C6, cicloalquilalquilo (e.g., ciclo-propilmetilo), 0(CO)alquilo, oxialquilo, halo, nitro, ami-no, alquilamino, aminoalquilo, alquilcetonas, nitrilo, carboxialquilo, alquilsulfonilo, aminossulfonilo, arilsul-fonilo e ORis, tal como alcoxilo. Os substituintes preferidos incluem alquilo Ci-C6, cicloalquilo (e.g., ciclopro-pilmetilo), alcoxilo, oxialquilo, halo, nitro, amino, alquilamino, aminoalquilo, alquilcetonas, nitrilo, carboxialquilo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo e aminossulfonilo. Exemplos de grupos arilo adequados incluem (alquil C4-C4) fenilo, (alcoxi C4-C4)fenilo, trifluorometilfenilo, me-toxifenilo, hidroxietilfenilo, dimetilaminofenilo, amino-propilfenilo, carbetoxifenilo, metanossulfonilfenilo e tolilsulfonilfenilo.

Os policiclos aromáticos incluem naftilo e nafti-lo substituído com um ou mais substituintes adequados, 10 ΡΕ1443967 incluindo alquilo Ci-C6, alquilcicloalquilo (e.g., ciclo-propilmetilo), oxialquilo, halo, nitro, amino, alquilamino, aminoalquilo, alquilcetonas, nitrilo, carboxialquilo, al-quilsulfonilo, arilsulfonilo, aminossulfonilo e OR15, tal como alcoxilo.

Os substituintes heteroarilo incluem compostos com um anel aromático de 5 até 7 membros contendo um ou mais heteroátomos, por exemplo de 1 até 4 heteroátomos, seleccionados de N, O e S. Os substituintes heteroarilo tipicos incluem furilo, tienilo, pirrole, pirazole, tri-azole, tiazole, oxazole, piridina, pirimidina, isoxazolilo, pirazina e semelhantes. A menos que assinalado de outro modo, os substituintes heteroarilo estão não substituídos ou substituídos num átomo de carbono com um ou mais substituintes adequados, incluindo alquilo, os substituintes de alquilo identificados acima e outro substituinte heteroarilo. Os átomos de azoto estão não substituídos ou substituídos, por exemplo com Ri3; os substituintes do N especialmente úteis incluem H, alquilo C1-C4, acilo, aminoacilo e sulfonilo.

Os substituintes arilalquilo incluem grupos da fórmula - (CH2) n5-arilo, - (CH2) ns-i-(CH-aril) - (CH2) ns-arilo ou - (CH2)n5-iCH (aril) (arilo) em que arilo e n5 são definidos acima. Estes substituintes arilalquilo incluem benzilo, 2-feniletilo, 1-feniletilo, tolil-3-propilo, 2-fenilpropilo, difenilmetilo, 2-difeniletilo, 5,5-dimetil-3-fenilpentilo e semelhantes. Os substituintes arilalquilo estão não 11 ΡΕ1443967 substituídos ou substituídos na unidade de alquilo ou na unidade de arilo ou em ambas, como descrito acima para os substituintes alquilo e arilo.

Os substituintes heteroarilalquilo incluem grupos da fórmula - (CH2) n5-heteroarilo em que heteroarilo e n5 são definidos acima e o grupo de ligação está ligado a um carbono ou um azoto da parte de heteroarilo, tal como 2-, 3- ou 4-piridilmetilo, imidazolilmetilo, quinoliletilo e pirrolilbutilo. Os substituintes heteroarilo estão não substituídos ou substituídos como se discutiu acima para os substituintes heteroarilo e alquilo.

Os substituintes aminoacilo incluem grupos da fórmula -C (0) - (CH2) n-C (H) (NR13R14) - (CH2) n-Rs em que n, Ri3, Ri4 e R5 são descritos acima. Os substituintes aminoacilo adequados incluem aminoácidos naturais e não naturais tais como glicinilo, D-triptofanilo, L-lisinilo, D- ou L-homosserinilo, acilo do ácido 4-aminobutírico, +-3-amin-4-hexenoilo.

Os substituintes de tipo policiclo não aromático incluem sistemas bicíclicos e tricíclicos fundidos em que cada anel pode ter 4-9 membros e cada anel pode conter zero, 1 ou mais ligações duplas e/ou triplas. Exemplos adequados de policiclos não aromáticos incluem decalina, octa-hidroindeno, per-hidrobenzociclo-hepteno, per-hidrobenzo-[f]-azuleno. Estes substituintes estão não substituídos ou substituídos como se descreveu acima para os grupos cicloalquilo. 12 ΡΕ1443967

Os substituintes de tipo policiclo misto de arilo e não arilo incluem sistemas biciclicos e triciclicos fundidos em que cada anel pode ter 4-9 membros e pelo menos um anel é aromático. Os exemplos adequados de policiclos mistos de arilo e não arilo incluem metilenodioxifenilo, bis-metilenodioxifenilo, 1,2,3, 4-tetra-hidronaftaleno, di-benzossuberano, di-hidroantraceno, 9H-fluoreno. Estes substituintes estão não substituídos ou substituídos com nitro ou como se descreveu acima para os grupos cicloalquilo.

Os substituintes poli-heteroarilo incluem sistemas biciclicos e triciclicos fundidos em que cada anel pode ter independentemente 5 ou 6 membros e contém um ou mais heteroátomos, por exemplo, 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos, escolhidos de 0, N ou S de modo a que o sistema cíclico fundido seja aromático. Exemplos adequados de sistemas cíclicos de poli-heteroarilo incluem quinolina, isoquinolina, piridopi-razina, pirrolopiridina, furopiridina, indole, benzofurano, benzotiofurano, benzindole, benzoxazole, pirroloquinolina e semelhantes. A menos que assinalado de outro modo, os substituintes poli-heteroarilo estão não substituídos ou substituídos num átomo de carbono com um ou mais substituintes adequados, incluindo alquilo, os substituintes de alquilo identificados acima e um substituinte da fórmula -0- (CH2CH=CH (CH3) (CH2) ) 1-3H. Os átomos de azoto estão não substituídos ou substituídos, por exemplo com Ri3; os substituintes de N especialmente úteis incluem H, alquilo C1-C4, acilo, aminoacilo e sulfonilo. 13 ΡΕ1443967

Os substituintes poli-heterocíclicos não aromáticos incluem sistemas biciclicos e triciclicos fundidos em que cada anel pode ter 4-9 membros, conter um ou mais hete-roátomos, por exemplo, 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos, escolhidos de 0 N ou S e conter zero ou uma ou mais ligações duplas ou triplas C-C. Exemplos adequados de poli-hete-rociclos não aromáticos incluem hexitol, cis-per-hidro-ciclo-hepta[b]piridinilo, deca-hidro-benzo[f][l,4]oxaze-pinilo, 2,8-dioxabiciclo[3.3.0]octano, hexa-hidro-tieno-[3,2-b]tiofeno, per-hidropirrolo[3,2—b]pirrole, per-hidro-naftiridina, per-hidro-lH-diciclopenta[b,e]pirano. A menos que assinalado de outro modo, os substituintes poli-hete-rocíclicos não aromáticos estão não substituídos ou substituídos num átomo de carbono com um ou mais substituintes, incluindo alquilo e os substituintes de alquilo identificados acima. Os átomos de azoto estão não substituídos ou substituídos, por exemplo, com R13; os substituintes de N especialmente úteis incluem H, alquilo C1-C4, acilo, aminoacilo e sulfonilo.

Os substituintes poli-heterociclos mistos de arilo e não arilo incluem sistemas biciclicos e triciclicos fundidos em que cada anel pode ter 4-9 membros, conter um ou mais heteroátomos escolhidos de O, N ou S, e pelo menos um dos anéis tem de ser aromático. Exemplos adequados de poli-heterociclos mistos de arilo e não arilo incluem 2,3-di-hidroindole, 1,2,3,4-tetra-hidroquinolina, 5,11-di-hidro-lOH-dibenz[b,e][1,4]diazepina, 5H-dibenzo[b,e][1,4]- 14 ΡΕ1443967 diazepina, 1,2-di-hidropirrolo[3,4-b][1,5]benzodiazepina, 1,5-di-hidropirido[2,3-b][1,4]diazepin-4-ona, 1,2,3,4,6,11-hexa-hidro-benzo[b]pirido[2,3-e][1,4]diazepin-5-ona. A menos que assinalado de outro modo, os substituintes poli-heterocíclicos mistos de arilo e não arilo estão não substituídos ou substituídos num átomo de carbono com um ou mais substituintes adequados, incluindo, -N-OH, =N-OH, alquilo e os substituintes de alquilo identificados acima. Os átomos de azoto estão não substituídos ou substituídos, por exemplo, com Ri3; os substituintes de N especialmente úteis incluem H, alquilo C1-C4, acilo, aminoacilo e sulfonilo.

Os substituintes amino incluem aminas primárias, secundárias e terciárias e aminas quaternárias na forma de sal. Exemplos de substituintes amino incluem mono- e di-alquilamino, mono- e di-arilamino, mono- e di-arilal-quilamino, aril-arilalquilamino, alquil-arilamino, alquil-arilalquilamino e semelhantes.

Os substituintes sulfonilo incluem alquilsul-fonilo e arilsulfonilo, por exemplo metanossulfonilo, benzenossulfonilo tosilo e semelhantes.

Os substituintes acilo incluem grupos de fórmula -C (0) -W, -0C (0) -W, —C (0) —0—W ou -C (0)NRi3Ri4, em que W é Ri6, H ou cicloalquilalquilo.

Os substituintes acilamino incluem substituintes 15 ΡΕ1443967 da fórmula -N (Ri2) C (0) -W, -N (Ri2) C (0) -0-W e -N (Ri2) C (0) -NH0H e Ri2 e W são definidos acima. 0 substituinte R2 HON-C(0)-CH=C(Ri)aril-alquil- é um grupo da fórmula

As preferências para cada um dos substituintes incluem as seguintes:

Ri é H, halo ou um alquilo C1-C4 de cadeia linear; R2 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, alquilcicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, - (CH2)nC(0)R6, aminoacilo e -(CH2)nR7; R3 e R4 são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de H e alquilo Ci-C6, ou R3 e R4 conjuntamente com o carbono ao qual eles estão ligados representam C=0, C=S ou C=NR8; R5 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, um policiclo aromático, um policiclo não aromático, um policiclo misto de arilo e não arilo, poli-heteroarilo, um poli-heterociclo não aromático e um poli-heterociclo misto de arilo e não arilo; 16 ΡΕ1443967 η, ni, η2 e η3 são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de 0-6, quando nl é 1-6, cada átomo de carbono está não substituído ou independentemente substituído com R3 e/ou R4; X e Y são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de H, halo, alquilo C1-C4, CF3, N02, C(0)Ri, OR9, SR9, CN e NRioRn; R6 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, alquilcicloalquilo, arilo, hete-roarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, OR12 e NR13R14; R7 é seleccionado de OR15, SR15, S(0)Ri6, SO2R17, NRi3Ri4 e NRi2S02R6 ; R8 é seleccionado de H, OR15, NR13R14, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R9 é seleccionado de alquilo C1-C4 e C (O)-alquilo;

Rio e Rn são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de H, alquilo C1-C4 e -C(O)-alquilo; R12 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R13 e R14 são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo e aminoacilo; R45 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo e (CH2)mZRi2;

Ri6 é seleccionado de alquilo C1-C6, cicloalquilo C4-C9, 17 ΡΕ1443967 heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo e (CH2)mZRi2; R17 é seleccionado de alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo e NR13R14; m é um número inteiro seleccionado de 0 até 6; e Z é seleccionado de 0, NRi3, S, S(0), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Os compostos úteis da fórmula (II) incluem aqueles em que cada um de Ri, X, Y, R3 e R4 é H, incluindo aqueles em que um de n2 e n3 é zero e o outro é 1, especialmente aqueles em que R2 é H ou -CH2-CH2-OH.

Um género adequado de compostos de hidroxamato corresponde aos de fórmula lia

(Ha) em que n4 é 0-3, R2 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo 04-09, heterocicloalquilo C4-C9, alquilcicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, -(CH2) nC (0) R6, aminoacilo e -(CH2)nR7; 18 ΡΕ1443967 R.51 é heteroarilo, heteroarilalquilo (e.g., piridilmetilo), policiclos aromáticos, policiclos não aromáticos, poli-ciclos mistos de arilo e não arilo, poli-heteroarilo, ou poli-heterociclos mistos de arilo e não arilo, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Outro género adequado de compostos de hidroxamato corresponde aos compostos de fórmula lia em que n4 é 0-3, R2 é seleccionado de H, alquilo Ci-Cê, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, alquilcicloalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, -(CH2) nC (O)R6, ami-noacilo e -(CH2)nR7; R5' é arilo, arilalquilo, policiclos aromáticos, policiclos não aromáticos e policiclos mistos de arilo e não arilo; especialmente arilo, tais como p-fluorofenilo, p-cloro-fenilo, p-0-(alquil C1-C4)fenilo, tal como p-metoxifenilo, e p-(alquil C1-C4) fenilo; e arilalquilo, tais como benzilo, orto, meta ou para-tluorobenzilo, orto, meta ou para-clorobenzilo, orto, meta ou para-mono, di ou tri-O-(alquil C1-C4)benzilo, tais como orto, meta ou para-metoxibenzilo, m,p-dietoxibenzilo, o,m,p-trimetoxibenzilo , e orto, meta ou para-mono, di ou tri (alquil C1-C4) fenilo, tais como p-metil, m,m-dietilfenilo, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 19 ΡΕ1443967

Outro género interessante são os compostos de fórmula Ilb

(Hb> em que R2' é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C6, cicloalquilalquilo (e.g., ciclopropilmetilo), (CH2)2-40R2i em que R2i é H, metilo, etilo, propilo e i-propilo, e Rs" é lH-indol-3-ilo, benzofuran-3-ilo ou quinolin-3-ilo não substituído, ou lfí-indol-3-ilo substituído, tal como 5-f luoro-lfí-indol-3-ilo ou 5-metoxi-lfí-indol-3-ilo, benzo-furan-3-ilo ou quinolin-3-ilo, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. A presente invenção relaciona-se ainda com compostos HDAI da fórmula lie

m ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Os substituintes variáveis são como definidos acima. 20 ΡΕ1443967

Compostos especialmente úteis de fórmula (lie) são aqueles em que Ri8 é H, fluoro, cloro, bromo, um grupo alquilo C1-C4, um grupo alquilo C1-C4 substituído, um grupo cicloalquilo C3-C7, fenilo não substituído, fenilo substituído na posição para, ou um anel heteroarilo (e.g., piri-dilo).

Outro grupo de compostos úteis de fórmula (lie) são aqueles em que R2 é H, ou - (CH2)pCH2OH, em que p é 1-3, especialmente aqueles em que Ri é H; tais como aqueles em que Ri é H e X e Y são cada um H, e em que q é 1-3 e r é 0 ou em que q é 0 e r é 1-3. Entre estes compostos R2 é preferencialmente H ou -CH2-CH2-OH e a soma de q e r é preferencialmente 1.

Outro grupo de compostos úteis de fórmula (lie) são aqueles em que Ris é H, metilo, etilo, t-butilo, trifluorometilo, ciclo-hexilo, fenilo, 4-metoxifenilo, 4-trifluorometilfenilo, 2-furanilo, 2-tiofenilo, ou 2-, 3- ou 4-piridilo em que os substituintes 2-furanilo, 2-tiofenilo e 2-, 3- ou 4-piridilo estão não substituídos ou substi tuídos como se descreveu acima para os anéis heteroarilo; R2 é H, ou - (CH2)pCH2OH, em que p é 1-3; especialmente aqueles em que Ri é H e X e Y são cada um H, e em que q é 1-3 e r é 0 ou em que q é 0 e r é 1-3. Entre estes compostos R2 é preferencialmente H ou -CH2-CH2-OH e a soma de q e r é preferencialmente 1. 21 ΡΕ1443967

Os compostos de fórmula lie em que R20 é H ou alquilo C1-C6, especialmente H, são membros importantes de cada um dos subgéneros de compostos de fórmula lie descritos acima. N-hidroxi-3-[4-[[(2-hidroxietil) [2-(lH-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, N-hidroxi-3-[4-[[[2-(lH-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida e N-hidroxi-3-[4-[[[2-(2-metil-lH-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2£-2-propenamida, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são compostos importantes de fórmula (lie) .

Os compostos HDAI descritos acima e a sua preparação são descritos na WO 02/22577 publicada em 21 de Março de 2002.

Os compostos HDAI utilizados na combinação da presente invenção são tipicamente aqueles que têm uma IC50 menor do que 2 μΜ, especialmente menor do que 500 nM e muito preferencialmente menor do que 100 nM no ensaio de inibição da histona-desacetilase descrito no Exemplo B2 da WO 02/22577.

Num primeiro aspecto, a presente invenção relaciona-se com uma combinação, tal como uma preparação de combinação ou uma composição farmacêutica, a qual compreende (a) um inibidor da COX-2, especialmente os inibidores da COX-2 mencionados atrás, em particular aqueles mencionados como sendo preferidos, e (b) um HDAI, 22 ΡΕ1443967 especialmente os HDAI mencionados atrás, em particular aqueles mencionados como sendo preferidos, na qual as substâncias activas (a) e (b) estão presentes em cada um dos casos na forma livre ou na forma de um sal farmaceuticamente aceitável, para utilização simultânea, concorrente, separada ou sequencial. 0 termo "uma preparação de combinação" define especialmente um "estojo de partes" no sentido de que os parceiros de combinação (a) e (b) como definidos acima podem ser doseados independentemente ou através da utilização de associações fixas diferentes com quantidades distintas dos parceiros da combinação (a) e (b), i.e., simultaneamente, concorrentemente, separadamente ou sequencialmente. As partes do estojo de partes podem ser depois, e.g., administradas simultaneamente ou alternadas de modo cronológico, isto é em diferentes momentos e com intervalos de tempo iguais ou diferentes para qualquer uma das partes do estojo de partes. A proporção das quantidades totais do parceiro de combinação (a) em relação ao parceiro de combinação (b) a serem administradas na preparação de combinação pode ser diferente, e.g. para fazer face às necessidades de uma subpopulação de doentes a ser tratada ou às necessidades do doente, em que as necessidades diferentes podem ser devidas à doença particular, gravidade da doença, idade, sexo, peso corporal, etc. dos doentes.

Do modo mais preferidos, a presente invenção relaciona-se com uma combinação de (a) um inibidor da COX-2 23 ΡΕ1443967 o qual é o ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6'-fluoro-anilino)-fenilacético, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e (b) um HDAI seleccionado do grupo consistindo de N-hidroxi-3-[4-[[(2-hidroxietil)[2-(lH-indol-3-il)etil]-amino]metil]-fenil]-2E-2-propenamida, N-hidroxi-3-[4-[[[2-(lH-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida e N-hidroxi-3-[4-[[[2-(2-metil-lH-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, e sais farmaceuticamente aceitáveis destes. Preferencialmente, o HDAI é a N-hidroxi-3-[4-[[(2-hidroxietil)[2-(lH-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Numa forma de realização preferida, a presente invenção relaciona-se com uma combinação da presente invenção para ser utilizada no tratamento de uma doença tal como, em especial, lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon ou outras malignidades, preferencialmente lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon, num mamífero, em particular num ser humano.

Outras malignidades a serem tratadas de acordo com a presente invenção são preferencialmente seleccionadas do grupo consistindo de cancro da mama, cancro do pulmão, cancro do ovário, linfoma, cancro da cabeça e pescoço e cancro do esófago, estômago, bexiga, próstata, útero e cérvix.

No contexto da presente invenção os termos "tratamento" ou "tratar" referem-se ao tratamento profi- 24 ΡΕ1443967 láctico ou preventivo, assim como ao tratamento curativo ou de modificação da doença, incluindo o tratamento de doentes em risco de contrair a doença ou que se suspeita terem contraído a doença, assim como doentes que estão enfermos ou que foram diagnosticados como sofrendo de uma doença ou patoloqia clínica.

No contexto desta descrição, qualquer referência a um inibidor da COX-2 ou um HDAI é entendido como incluindo os referidos compostos na sua forma livre ou como sais farmaceuticamente aceitáveis ou quaisquer formas cristalinas destes incluindo hidratos ou solvatos, se nada for indicado em contrário e nos casos em que for apropriado e oportuno.

Noutro aspecto, a presente invenção relaciona-se com a utilização de um inibidor da COX-2, especialmente os inibidores da COX-2 mencionados atrás, em particular aqueles mencionados como sendo preferidos, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para a preparação de um medicamento, para ser utilizado associado a um HDAI, especialmente os HDAI mencionados atrás, em particular aqueles mencionados como sendo preferidos, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon ou outras malignidades, preferencialmente lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon, num mamífero, em particular num ser humano. 25 ΡΕ1443967 A presente invenção também se relaciona com a utilização de um HDAI, especialmente os HDAI mencionados atrás, em particular aqueles mencionados como sendo preferidos, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para a preparação de um medicamento, para ser utilizado associado a um inibidor da COX-2, especialmente os inibidores da COX-2 mencionados atrás, em particular aqueles mencionados como sendo preferidos, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon ou outras malignidades, preferencialmente lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon, num mamifero, em particular num ser humano. A presente invenção relaciona-se ainda com uma embalagem ou produto comercial compreendendo (a) um inibidor da COX-2, especialmente os inibidores da COX-2 mencionados atrás, em particular aqueles mencionados como sendo preferidos, ou um seu sal f armaceuticamente aceitável, e (b) um HDAI, especialmente os HDAI mencionados atrás, em particular aqueles mencionados como sendo preferidos, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, conjuntamente com instruções para a sua utilização simultânea, concorrente, separada ou sequencial no tratamento de uma doença tais como, em especial, lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon ou outras malignidades, preferencialmente lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon, num mamifero, em particular num ser humano. 26 ΡΕ1443967

De acordo com a presente invenção, um doente é tratado com quantidades terapeuticamente eficazes de um inibidor da COX-2 e um HDAI para tratar lesões pré-malignas do cólon, tais como pólipos, ou cancro do cólon, ou outra malignidade, cada um de acordo com um regimen de dosagem que é apropriado para o agente em questão. Por exemplo, o inibidor da COX-2 pode ser administrado uma ou mais vezes ao dia e o HDAI pode ser administrado uma vez ao dia, em dias alternativos ou em algum outro plano - como é apropriado para o agente HDAI quando utilizado sem o inibidor da COX-2. Um especialista na técnica tem a aptidão para determinar quantidades farmaceuticamente eficazes apropriadas dos componentes da combinação.

Os inibidores da COX-2 e os HDAI podem ser preparados e administrados como descrito na técnica tais como nos documentos citados acima. Se eles estiverem disponíveis no mercado eles podem ser administrados por exemplo na forma como comercializado.

No caso do inibidor da COX-2 ser o ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6'-fluoro-anilino)-fenilacético, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e o mamífero ser um humano, uma dose apropriada de ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6'-fluoro-anilino) -fenilacético situa-se na gama desde 100 até 1500 mg por dia, por exemplo, 200-1000 mg/dia, tal como 200, 400, 500, 600, 800, 900 ou 1000 mg/dia, administrada em uma ou duas doses diárias. Preferencialmente, o ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6'-fluoro-anilino)-fenilacético, ou um seu sal 27 ΡΕ1443967 farmaceuticamente aceitável, é administrado como uma formulação farmacêutica oral na forma de um comprimido, cápsula ou xarope.

Os Exemplos seguintes ilustram a invenção descrita acima; eles não se destinam, contudo, a limitar o âmbito da invenção seja de que forma for. Os efeitos benéficos dos métodos, composições e associações aqui descritas também podem ser determinados por outros modelos de ensaio conhecidos como tal do especialista na técnica pertinente.

Exemplos: As formas curtas e abreviaturas utilizadas têm as definições seguintes

AcOEt acetato de etilo AcOH ácido acético aq. aquoso DMSO sulfóxido de dimetilo equiv. equivalente(s) Et etilo GC cromatografia em fase gasosa HPLC cromatografia liquida de alta eficiência MeOH metanol TFA ácido trifluoroacético THF tetra-hidrofurano 28 ΡΕ1443967

Exemplo 1: Preparação de ácido [2-(2'-cloro-6'-fluoro-fenilamino)-5-metil-fenil]acético

Aquece-se a refluxo uma mistura de 20 g de 1— (2 * — cloro-6'-fluorofenil)-5-metil-l,3-di-hidro-indol-2-ona, 266 ml de etanol e 11 ml de água. Adiciona-se lentamente 24 g de uma solução a 30% de hidróxido de sódio e prossegue-se o refluxo durante 1 hora. Arrefece-se a solução até 40-45°C e trata-se lentamente com uma solução de 18 g de ácido clorídrico concentrado em 94 g de água desionizada até um pH de 3-4. Arrefece-se a suspensão obtida até 20-25°C e recolhe-se o material cristalino por filtração, lava-se com etanol/água desionizada e seca-se sob pressão reduzida para produzir 19,5 g de ácido [2-(2 '-cloro-6'-fluoro-fenilami-no)-5-metilfenil]acético puro. Ponto de fusão: 152-154°C. RMN de XH (DMSO-d6, 500MHz , 300K) δ 2,21 (s, 3H, CH3), 3,64 (S, 2H, CH2); 6,42 [dd, J = 8,0Hz, JH-F = 3, 0, 1H, HC(6)], 6,90 [dd, J = 8,0, 2,0Hz, 1H, HC (5)], 7,01 [d, J = 2,0Hz, 1H, HC (3)], 7,09 (s I-1 NH), 7, 09 [ddd, J = 8,5Hz, Jh-f = 5,5, 1H, HC (4' ) ] , 7,23 [ddd, J = 8,5, 1,5Hz, JH-F = 11,0, 1H, HC (5' ) ] , 7,34 [ddd, J = 8,5, 1,5Hz, JH-F = 1,5, 1H, HC(3')], 12,67 (s, 1 H, COOH).

Passo 1.1A: Preparação de (2'-cloro-6'-fluorofenil)-(4-metilfenil)-ami na

Dissolve-se 14,65 g (100 mmol) de 2-cloro-6-fluo-rofenol em 50 ml de 2-propanol seguida da adição de 15,5 g (112 mmol) de carbonato de potássio e 18,9 g (103 mmol) de 29 ΡΕ1443967 2-cloro-N-(4-metilfenil)acetamida. Aquece-se a mistura a refluxo durante 4 horas. Nesta altura, a formação de 2 — (2 — cloro-6'-fluorofenoxi)-N-(4-metilfenil)acetamida está concluída. Adiciona-se lentamente 20 ml de solução de metilato de sódio a 30% em metanol. Para manter uma temperatura de pelo menos 75°C, destila-se cerca de 25 ml de solvente durante a adição. Leva-se a mistura à ebulição durante mais 2 horas para completar a formação de (2'-cloro-6'-fluo-rofenil)-(4-metilfenil)-amina.

Destila-se então 15 ml de solvente e adiciona-se 35 ml de água para se obter uma solução de duas fases. Rejeita-se a camada inferior. Diluiu-se a camada superior com 35 ml de heptano e lava-se com 3x 25 ml de água.

Separa-se a fase orgânica e concentra-se in vacuo para se obter 21,8 g de óleo em bruto de (2'-cloro-6'-fluorofenil)-(4-metilfenil)-amina. Este composto (pureza por HPLC 92%) é utilizado no passo seguinte sem ser purificado (Passo 1.2). RMN de XH (DMSO-d6, 500 MHz, 300K) δ 2,17 (s, 3H, CH3); 6,53 [dd, J = 8,5Hz, JH-F = 1,5, 2H, HC(2) e HC (6) ] , 6,94 [d, J = 8,0Hz, 2H, HC (3) e HC(5)], 7,16 [ddd, J = 8,0Hz, JH-f = 6,0, 1H, HC (4' ) ] , 7,25 [ddd, J = 8,0, 1,5Hz, JH-f = 8,0, 1H, HC (5' ) ] ; 7,34 [ddd, J = 8,0, 1,5Hz, JH-F = 1,5, 1 H, HC(3 ' ) ] ; 7,63 (s, 1 Η, NH) . MS(EI) m/z 235 (100, M+), 200 (35, (M-C1)+), 185 (55) Preparação do material de partida 2-cloro-6-fluorofenol

Aquece-se até 60-65°C uma solução de 12,1 g (108 30 ΡΕ1443967 mmol) de 2-fluorofenol, 70 mg de diisopropilamina e 400 ml de fracção de hexano. Introduz-se 4 g (56 mmol) de cloro a esta temperatura. Adiciona-se então gota a gota 60,5 g (540 mmol) de 2-fluorofenol na solução ao longo de cerca de 2 horas, enquanto se adiciona à mesma velocidade mais 42 g (590 mmol) de cloro. Depois disso introduz-se mais 4 g de cloro para completar a cloração.

Verificação por GC: 91% de 2-cloro-6-fluorofenol 5,2% de 4-cloro-6-fluorofenol 3,5% de 2,4-dicloro-6-fluorofenol

Destila-se 200-250 ml de solvente à pressão normal. Arrefece-se lentamente a solução concentrada resultante até 0-5°C. Agita-se a suspensão espessa obtida a esta temperatura durante 1 hora, lava-se com fracção de hexano fria e seca-se à temperatura ambiente.

Rendimento: 78 g de cristais brancos. GC 99,7%. Ponto de fusão: 63,5-64,5°C. MS (EI) m/z 146 (100, M+) , 126 [19, (M-HF)+] RMN de XH (DMSO-dê, 500MHz, 300K) δ 6,8 [ddd, J = 8,2 Hz, Jh-f = 5,5, 1 H, HC (4) ] , 7,15 [m, 2H, HC(3) e HC (5) ] , 10,3 (S, 1 H, OH) .

Preparação do material de partida 2-cloro-N-(4-metilfenil)-acetamida A uma mistura mantida sob agitação de 34,5 g (322 mmol) de p-toluidina, 100 ml de tolueno e 100 ml de água a 31 ΡΕ1443967 20-25°C adiciona-se a partir de dois funis de carga 42,3 g (375 mmol) de cloreto de cloroacetilo e 39 ml de hidróxido de sódio concentrado a 30% a uma velocidade tal de modo a manter um pH de 8-12. Arrefece-se a suspensão obtida até 0-5°C. Filtra-se o composto cristalino, lava-se com água e tolueno frio e seca-se.

Rendimento: 55 g, HPLC > 99%.

Passo 1.1B: Preparação alternativa de (2'-cloro-6'-fluoro-fenil)-(4-metilfenil)-amina

Agita-se sob azoto durante cerca de 30 minutos uma mistura de 2-bromo-l-cloro-3-fluorobenzeno (32 g, 153 mmol), p-toluidina (16,4 g, 153 mmol), terc-butilato de sódio (27,5 g, 286 mmol), (±)-BINAP [2,2'-Bis-(difenil-fosfino)-1,1'-binaftalina, 0,66 g, 1,1 mmol) e tolueno (250 ml). Depois da adição de Paládio-bis-(dibenzilidenacetona) (0,8 g, 1 mmol) aquece-se a mistura até 110°C (refluxo ligeiro) durante 14-20 horas. Arrefece-se então a mistura até 30°C, água (60 ml), adiciona-se ácido clorídrico concentrado (60 ml) assim como carvão e celite (5 g de cada) e prossegue-se a agitação durante uma hora. Filtra-se a mistura e separa-se o filtrado nas fases. Lava-se a fase orgânica com água (3 vezes, 70 ml cada) e concentra-se in vacuo para se obter 37,2 g de (2'-cloro-6'-fluorofenil)-(4-metilfenil)-amina em bruto. O produto pode ser utilizado no passo seguinte (Passo 1.2) tal e qual; alternativamente ele pode ser destilado por Kugelrohr in vacuo. 32 ΡΕ1443967

Passo 1.1C: Preparação alternativa de (21-cloro-6'-fluoro-fenil)-(4-metilfenil)-amina

Agita-se a 25 °C sob azoto durante 30 minutos uma mistura de 2-cloro-6-fluoroanilina (4,00 g, 27,5 mmol), 4-bromotolueno (4,70 g, 27,5 mmol), terc-butilato de sódio (4,75 g, 49,4 mmol) e tolueno (55 mL). A esta mistura, adiciona-se uma solução de paládio-bis-(dibenzilidenacetona) (15,8 mg, 55 mmol) e tri-terc-butilf osf ina (1) (8,3 mg, 0,04 mmol) em tolueno (5 mL) e agita-se a suspensão resultante a 110°C durante 14 horas. Arrefece-se então a mistura até 30°C. Adiciona-se água (30 ml), ácido clorídrico concentrado (10 ml), carvão e celite (1 g de cada) e prossegue-se a agitação durante 1 hora. Filtra-se a mistura e separa-se o filtrado nas suas fases. Lava-se a fase orgânica três vezes com água (10 mL) e concentra-se in vacuo para dar 6,5 g de (2'-cloro-6'-fluorofenil)-(4-metilfenil)-amina em bruto. O produto pode ser utilizado directamente no passo seguinte (Passo 1.2). Alternativamente, ele pode ser destilado in vacuo por Kugelrohr.

Passo 1.2: Preparação de 2-cloro-N-(2'-cloro-6'-fluoro-fenil)-N-(4-metilfenil)acetamida

Aquece-se até cerca de 80°C, 20,4 g de (2'-cloro-6'-fluorofenil)-(4-metilfenil)-amina em bruto e trata-se com 10,75 g de cloreto de cloroacetilo. Agita-se a mistura durante 2 horas e diluiu-se com 10 ml de 2-propanol. 33 ΡΕ1443967

Arrefece-se a solução até 35-40°C e adiciona-se núcleos de precipitação. Dilui-se a suspensão precipitada com 30 ml de hexano, arrefece-se até 0-5°C e agita-se durante cerca de 1 hora. Isola-se os cristais por filtração, lava-se com uma solução fria de 2-propanol/hexano 1/3. Depois de secar, obtém-se 22,7 g de 2-cloro-N-(2'-cloro-6'-fluorofenil)-N-(4-metilfenil)acetamida. Pureza por HPLC: 99%. Ponto de fusão: 79-80°C. RMN de XH (DMF-d7, 400 MHz, 393K) δ 2,44 (s, 3H, CH3) ; 4,32 (s, 2H, CH2), 7,35 [d, J = 8, 0Hz, 2H, HC(3) e HC (5) ] , 7,43 [ddd, J = 8,0, 2,0Hz, JH-F = 8,0 , 1 H, HC (5') ], 7,48 [d, J= 8, 0Hz, 2H, HC (2) e HC(6)], 7,55 [d, J = 8,0Hz, 1H, HC (3 ' ) ] , 7,60 [ddd, J = 8, 0Hz, JH_F= 5,5, 1H, HC(4')].

Passo 1.3: Preparação de 1-(2'-Cloro-6'-fluorofenil)-5-metil-1,3-di-hidro-indol-2-ona

Trata-se uma massa fundida de 124,8 g (400 mmol) de 2-cloro-N-(2'-cloro-6'-fluorofenil)-N-(4-metilfenil)-acetamida a 100-120°C com 69,3 g (520 mmol) de cloreto de alumínio em partes pequenas. Aquece-se a mistura até 160°C e agita-se durante 4-6 horas a esta temperatura.

Arrefece-se a mistura fundida até 110°C e dilui-se com 300 ml de tolueno. Adiciona-se a solução obtida a 500 ml de água a 60°C. Separa-se a fase orgânica enquanto quente, descolora-se com carvão activado, filtra-se e concentra-se. Dissolve-se o resíduo em 2-propanol quente, descolora-se novamente com carvão activado, filtra-se e 34 ΡΕ1443967 concentra-se até um volume de cerca de 250 ml. Arrefece-se a suspensão obtida até 0-5°C, filtra-se, lava-se com 2-propanol frio. Depois de secar, obtém-se 87 g de l-(2'-cloro-β'-fluorofenil)-5-metil-l,3-di-hidro-indol-2-ona. Ponto de fusão: 137,5-138,5°C. RMN de XH (DMSO-d6, 500 MHz, 300K) δ 2,27 (s, 3H, CH3) ; 3,83 (s, 2H, CH2) ; 6,35 [d, J = 8,0Hz, 1H, HC(7)], 7,01 [d, , 0Hz, 1H, HC (6)], 7,19 [s, 1H, CH (4)] , 7,52 [ddd, J = 2,0Hz, Jh- F = 10,0, 1H, HC (5')1 , 7,60 [ddd, J = 8,5, r Jh-F ; = 1, 5, 1 H, HC(3' )], 7,63 [ddd, J = 8, 5Hz, JH-f = 1H, HC (4' ) ] ·

Exemplo 2: Preparação de N-Hidroxi-3-[4-[[[2-(lH-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida

Produz-se o éster metilico do ácido 4-formil-cinâmico adicionando ácido 4-formilcinâmico (25 g, 0,143 mol) em MeOH e HC1 (6,7 g, 0,18 mol). Aquece-se a suspensão resultante a refluxo durante 3 horas, arrefece-se e evapora-se à secura. Dissolve-se o sólido amarelo resultante em AcOEt, lava-se a solução com NaHCCp saturado, seca-se (MgSCU) e evapora-se para dar um sólido amarelo pálido o qual é utilizado sem qualquer purificação adicional (25,0 g, 92%) . A uma solução de triptamina (16,3 g, 100 mmol) e éster metilico do ácido 4-formilcinâmico (19 g, 100 mmol) em dicloroetano, adiciona-se NaBH(OAc)3 (21 g, 100 mmol). Após 4 horas diluiu-se a mistura com solução de K2C03 a 10%, separa-se a fase orgânica e extrai-se a solução aquosa com CH2C12. Seca-se (Na2S04) os extractos orgânicos reuni- 35 ΡΕ1443967 dos, evapora-se e purifica-se o residuo por cromatografia "flash" para produzir o éster metilico do ácido 3—(4—{ [2 — (lfí-indol-3-il) -etilamino] -metil}-fenil) - (2E) -2-propenóico (29 g) . Adiciona-se uma solução de KOH (12,9 g 87%, 0,2 mol) em MeOH (100 mL) a uma solução de H0NH2*HC1 (13,9 g, 0,2 mol) em MeOH (200 mL) produzindo-se um precipitado. Após 15 minutos filtra-se a mistura, lava-se o bolo de filtração com MeOH e evapora-se o filtrado sob vácuo até aproximadamente 75 mL. Filtra-se a mistura e ajusta-se o volume até 100 mL com MeOH. A solução resultante de HONH2 2m é conservada sob n2 a -20° C durante até 2 semanas. Adiciona-se então éster metilico do ácido 3-(4-{[2-(1H-indol-3-il)-etilamino]-metil}-fenil)-(2E)-2-propenóico (2,20 g, 6,50 mmol) à HONH2 2 M em MeOH (30 mL, 60 mmol) seguida de uma solução de KOH (420 mg, 6,5 mmol) em MeOH (5 mL) . Após 2 horas, adiciona-se gelo seco à reacção e eva-pora-se a mistura à secura. Dissolve-se o residuo em MeOH quente (20 mL), arrefece-se e conserva-se a -20 °C dum dia para o outro. Filtra-se a suspensão resultante, lava-se os sólidos com MeOH gelado e seca-se sob vácuo, produzindo N-Hidroxi-3-[4-[[[2-(lH-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2£-2-propenamida (m/z 336 [MH+]).

Exemplo 3: Preparação de N-Hidroxi-3-[4-[[(2-hidroxi- etil) [2 - (lH-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2£-2-propenamida

Aquece-se até 50° C uma solução de éster metilico do ácido 3-(4— { [2-(lfí-indol-3-il) -etilamino] -metil}-fenil) - 36 ΡΕ1443967 (2Ε)-2-propenóico (12,6 g, 37,7 mmol), (2-bromoetoxi)-terc-butildimetilsilano (12,8 g, 53,6 mmol), (í-Pr)2NEt, (7,42 g, 57,4 mmol) em DMSO (100 mL). Após 8 horas partilha-se a mistura com CH2C12/H20. Seca-se (Na2S04) a camada orgânica e evapora-se. O residuo é cromatografado sobre silica gel para produzir éster metilico do ácido 3-[4-({[2-(terc-butildimetilsilaniloxi)-etil]-[2-(lH-indol-3-il)-etil] -aminoj-metil)-fenil]-(2E)-2-propenóico (13,1 g) . Adiciona-se uma solução de KOH (12,9 g (87% puro), 0,2 mol) em MeOH (100 mL) a uma solução de H0NH2*HC1 (13,9 g, 0,2 mol) em MeOH (200 mL) formando-se um precipitado. Após 15 minutos filtra-se a mistura, lava-se o bolo de filtração com MeOH e evapora-se o filtrado sob vácuo até aproximadamente 75 mL. Filtra-se a mistura e acerta-se o volume para 100 mL com MeOH. A solução de HONH2 2M resultante é conservada sob N2 a -20° C durante até 2 semanas. Adiciona-se então o éster metilico do ácido 3-[4-({[2-(terc-butildimetilsilaniloxi)-etil] - [2 - (líí-indol-3-il) -etil] -amino}-metil) -fenil] - (2E) -2-propenóico (5,4 g, 11 mmol) à HONH2 2 M em MeOH (90 mL, 180 mmol) seguida de uma solução de KOH (720 mg (87% puro), 11,2 mmol) em MeOH (5 mL) e agita-se a mistura dum dia para o outro. Adiciona-se gelo seco à reacção e dilui-se a mistura com H20 resultando na formação de um precipitado. Decantou-se o liquido e dissolveu-se o sólido em MeOH e filtrou-se. O filtrado é evaporado para proporcionar N-hidroxi-3-[4-({[2-(terc-butildimetilsilaniloxi)-etil] -[2-(lfí-indol-3-il) -etil] -amino}-metil) -fenil] - (2E) -2-prope- 37 ΡΕ1443967 namida (5,1 g,) o qual é utilizado sem qualquer purificação adicional. Em seguida dissolve-se o ácido hidroxâmico (5,0 g, 13,3 mmol) em 95% de TFA/H20 (59 mL) e aquece-se até 40-50 °C durante 4 horas. Evapora-se a mistura e purifica-se o residuo por HPLC de fase inversa para produzir N-Hidroxi-3-[4- [ [ (2-hidroxietil) [2- (lfí-indol-3-il) -etil] -amino] metil] -fenil]-2£-2-propenamida como o sal de trifluoroacetato (m/z 380 [MH+]).

Exemplo 4: Preparação de N-hidroxi-3-[4-[ [ [2-(2-metil-lH-indol-3-il) -etil] -amino] metil] fenil] -2E'-2-propenamida

Arrefece-se até 0 °C uma suspensão de L1AIH4 (17 g, 445 mmol) em THF seco (1000 mL) e adiciona-se 2-metil-indole-3-glioxilamida (30 g, 148 mmol) em fracções ao longo de 30 minutos. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 30 minutos e mantém-se então a refluxo durante 3 horas. Arrefece-se a reacção até 0 °C e trata-se com H20 (17 ml), NaOH a 15% (aq., 17 ml) e H20 (51 ml). Trata-se a mistura com MgSCh, filtra-se e evapora-se o filtrado para dar 2-metiltriptamina a qual é dissolvida em MeOH. Adiciona-se 4-formilcinamato de metilo (16,9 g, 88,8 mmol) à solução, seguida de NaBH3CN (8,4 g) e AcOH (1 equiv.). Após 1 hora dilui-se a reacção com NaHCCb (aq.) e extrai-se com AcOEt. Seca-se (MgS04) os extractos orgânicos, filtra-se e evapora-se. Purifica-se o residuo por cromatografia para dar o éster metílico do ácido 3-(4-{ [2-(2-metil-l/í-indol-3-il)-etilamino]-metil}-fenil)-(2E)-2-propenóico. 38 ΡΕ1443967

Dissolve-se o éster em MeOH, adiciona-se HC1 1,0 M/dioxano (1-1,5 equiv.) seguido de Et20. Filtra-se o precipitado resultante e lava-se o sólido com Et20 e seca-se prolongadamente para dar o cloridrato do éster metilico do ácido 3—(4—{[2-(2-metil-lH-indol-3-il)-etilamino]-metil}-fenil)-(2E)-2-propenóico. Adiciona-se NaOH 1,0 M (aq., 85 mL) a uma solução gelada do cloridrato do éster metilico (14,9 g, 38,6 mmol) e HONH2 (solução aquosa a 50%, 24,0 mL, ca. 391,2 mmol). Após 6 horas, dilui-se a solução gelada com H20 e NH4CI (aq., 0,86 M, 100 mL) . Filtra-se o preci pitado resultante, lava-se com H20 e seca-se para proporcionar N-hidroxi-3-[4-[[[2-(2-metil-lH-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2£-2-propenamida (m/z 350 [MH+] ) .

Exemplo 5: O ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6'-fluoro-anilino)-fenilacético (alternativamente designado ácido [ 2 —(2' — cloro-6'-fluoro-fenilamino)-5-metil-fenil]acético; para a preparação ver Exemplo 1) ("COX") e o N-hidroxi-3-[4-[[(2- hidroxietil)[2-(lH-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida (alternativamente chamado (E)-N-Hidroxi-3-[4-({ (2-hidroxi-etil) - [2 - (lfí-indol-3-il) -etil] -amino} -metil) -fenil]-acrilamida; para a preparação ver Exemplo 3) ("HDAI") são testados como agentes únicos e em conjunto na forma de terapia de combinação num modelo de polipose adenomatosa em ratinho para a prevenção e tratamento de pólipos intestinais. O HDAI é administrado por via 39 ΡΕ1443967 intravenosa ao ratinho a 10 mg/kg numa solução aquosa de dextrose a 5% (p/v), q.b., 3 vezes por semana durante três semanas. A COX é administrada misturada na dieta a uma concentração de 125 ppm. % T/C é o quociente do número médio de pólipos nos ratinhos tratados dividido pelo número médio de pólipos nos ratinhos de controlo vezes 100. Observa-se os seguintes resultados para experiências em duplicado: FÁRMACOS PÓLIPOS ANIMAIS Composto Via Regímen Dose (mg/kg) Contagem média de pólipos intestinais (# ± EPM) %T/C % Alteração do peso corporal Mortos/ Total Controlo ração ad libitum - 23 ± 2,0 - + 8,2 ± 0,1 0/4 COX ração ad libitum 125 ppm 14 ± 0,7 60 +10 ± 0,1 0/7 HDAI i. V. 3x/ semana 10 mg/kg 12 ± 0,57 52 + 3,5 ± 0,1 0/7 COX + HDAI ração + i. V. ad libitum + 3x/ semana 125 ppm + 10 mg/kg 8 ± 0,27 33 + 4,8 ± 0,1 0/7 Controlo ração ad libitum - 26 ± 0,4 - +16,3 ± 0, 2 0/4 COX ração ad libitum 125 ppm 12 ± 0,3 46 + 8, 1 ± 0, 2 0/7 HDAI i. v. 3x/ semana 10 mg/kg 15 ± 0,3 57 + 9, 6 ± 0,1 0/7 COX + HDAI ração + i. V. ad libitum + 3x/ semana 125 ppm + 10 mg/kg 8 ± 0,3 30 + 6,7 + 0,1 0/7

Ambos os agentes sozinhos originam uma redução 40 ΡΕ1443967 estatisticamente significativa no número de pólipos intestinais formados de novo. A combinação reduz ainda mais o número de pólipos até um nivel que é significativamente menor em termos estatísticos do que o número de pólipos obtidos por tratamento com qualquer um dos agentes sozinho. As avaliações estatísticas são realizadas utilizando o teste t de Student unilateral e todos os valores de p são menores do que 0,01.

Lisboa, 2 de Abril de 2007

Claims (25)

1. ΡΕ1443967 1 REIVINDICAÇÕES 1. Combinação a qual compreende (a) um inibidor da COX-2 seleccionado de um composto de fórmula I RVh CHjCOR^ u k NH I (D Λ __y U1· s Rz T R'. R% em que R* é metilo ou etilo; R*i é cloro ou fluoro; R*2 é hidrogénio ou fluoro; R*3 é hidrogénio, fluoro, cloro, metilo, etilo, metoxilo, etoxilo ou hidroxilo; R*4 é hidrogénio ou fluoro; R*5 é cloro, fluoro, trifluorometilo ou metilo; e R*6 é hidroxilo ou -OCH2COOH; seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis; e ésteres pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes e (b) um inibidor da histona-desacetilase seleccionado de um composto de fórmula II ΡΕ1443967 2

   * em que Ri é H, halo, ou um alquilo Ci-C6 de cadeia linear; R2 é seleccionado de H, alquilo C1-C10, cicloalquilo C4-C9. heterocicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilalquilo C4-C9, cicloalquilalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, hete-roarilalquilo, - (CH2) nC (0) R8, - (CH2) n0C (0)R6, aminoacilo, HONC (0)-CH=C (Ri)-aril-alquil- e -(CH2)nR7,· R3 e R4 são iguais ou diferentes e independentemente H, alquilo Ci-C6, acilo ou acilamino, ou R3 e R4 conjuntamente com o carbono ao qual eles estão ligados representam C=0, C=S ou C=NR6, ou R2 conjuntamente com o azoto ao qual ele está ligado e R3 conjuntamente com o carbono ao qual ele está ligado podem formar um heterocicloalquilo C4-C8, um heteroarilo, um poli-heteroarilo, um poli-heterociclo não aromático ou um anel poli-heterociclo misto de arilo e não arilo: R5 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, acilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, policiclo aromático, policiclo não aromático, policiclo misto de arilo e não arilo, poli-heteroarilo, poli-heterociclo não aromático e poli-heterociclo misto de arilo e não arilo; n, ni, n2 e n3 são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de 0-6, quando n2 é 1-6, cada átomo de car- 3 ΡΕ1443967 bono pode estar opcional e independentemente substituído com R3 e/ou R4; X e Y são iguais ou diferentes e independentemente selec-cionados de H, halo, alquilo C1-C4, N02, C(0)Ri, 0Rg, SR9, CN e NR10R11; R6 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, cicloalquilalquilo, arilo, hete-roarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, OR12 e NRi3Ri4; R7 é seleccionado de OR15, SR15, S(0)Ri6, SO2R17, NR13R14 e NR12SO2R6; R8 é seleccionado de H, OR15, NRi3Ri4, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R9 é seleccionado de alquilo C1-C4 e C(O)-alquilo; Rio e R11 são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de H, alquilo C1-C4 e -C(0)-alquilo; R12 é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilalquilo C4-C8, arilo, policiclo misto de arilo e não arilo, heteroarilo, arilalquilo e heteroarilalquilo; R13 e R14 são iguais ou diferentes e independentemente seleccionados de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-Cs, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, aminoacilo, ou R13 e R14 conjuntamente com o azoto ao qual eles estão ligados são heterociclo alquilo C4-C9, heteroarilo, poli-heteroarilo, poli-hetero-ciclo não aromático ou poli-heterociclo misto de arilo e não arilo; Ris é seleccionado de H, alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, 4 ΡΕ1443967 heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo e (CH2)mZRi2; Rí6 é seleccionado de alquilo Ci-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, heteroarilo, poli-hetero-arilo, arilalquilo, heteroarilalquilo e (CH2)mZRi2; R17 é seleccionado de alquilo Ci~Cs, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, arilo, policiclo aromático, heteroarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, poli-heteroarilo e NR13R14; m é um número inteiro seleccionado de 0 até 6: e z é seleccionado de 0, nr13, S e S(0); ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização simultânea, concorrente, separada ou sequencial.
2. 2. Combinação da reivindicação 1, em que o ini-bidor da COX-2 é seleccionado de um composto de fórmula Ia

   R* em que R* é metilo ou etilo; R*i é cloro ou fluoro; R*2 é hidrogénio ou fluoro; 5 ΡΕ1443967 R*3 é hidrogénio, fluoro, cloro, metilo, etilo, metoxilo, etoxilo ou hidroxilo; R*4 é hidrogénio ou fluoro; e R*5 é cloro, fluoro, trifluorometilo ou metilo; seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis; e ésteres pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.
3. 3. Combinação da reivindicação 2, em que o ini-bidor da COX-2 é o ácido 5-metil-2-(2'-cloro-6'-fluoro-ani-lino)-fenilacético ou um seu sal farmaceuticamente aceitável .
4. 4. Combinação de qualquer uma das reivindicações 1-3, em que o inibidor da histona-desacetilase é um composto de fórmula (II) da reivindicação 1 em que cada um de Ri, X, Y, R3 e R4 é H, ou um sal farmaceuticamente aceitável de um tal composto.
5. 5. Combinação da reivindicação 4, em que o inibidor da histona-desacetilase é um composto de fórmula (II) da reivindicação 1 em que cada um de Ri, X, Y, R3 e R4 é H e um de n2 e n3 é zero e o outro é 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável de um tal composto.
6. 6. Combinação da reivindicação 4, em que o inibidor da histona-desacetilase é um composto de fórmula (II) da reivindicação 1 em que cada um de Ri, X, Y, r3 e R4 é H, um de n2 e n3 é zero e o outro é 1 e R2 é H ou -CH2-CH2-OH, ou um sal farmaceuticamente aceitável de um tal composto. 6 ΡΕ1443967
7. 7. Combinação da reivindicação 4, em que o ini-bidor da histona-desacetilase é um composto da fórmula lia \ O HO N H

   (Ha) em que no é 0-3, R.2 é seleccionado de H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C4-C9, heterocicloalquilo C4-C9, alquilcicloalquilo, arilo, hete-roarilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, -(CH2) nC (O)R6, ami-noacilo e -(CH2)nR7; R5' é heteroarilo, heteroarilalquilo, um policiclo aromático, um policiclo não aromático, um policiclo misto de arilo e não arilo, poli-heteroarilo ou um poli-heterociclo misto de arilo e não arilo ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
8. 8. Combinação da reivindicação 4, em que o ini-bidor da histona-desacetilase é um composto da fórmula Iib 0 HO \

   (itb) em que 7 ΡΕ1443967 R.2' é seleccionado de H, alquilo C1-C6, cicloalquilo C4-C8, alquilcicloalquilo e (CH2)2-40R2i em que R21 é H, metilo, etilo, propilo ou isopropilo, e Rs" é lfí-indol-3-ilo, benzofurano-3-ilo ou quinolin-3-ilo não substituído ou substituído ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
9. 9. Combinação da reivindicação 4, em que o ini-bidor da histona-desacetilase é um composto da fórmula lie O R1

   (He) em que os substituintes variáveis são como definidos para um composto de fórmula (II) da reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
10. 10. Combinação da reivindicação 9, em que o ini bidor da histona-desacetilase é um composto de fórmula (lie) da reivindicação 9 em que R48 é H, fluoro, cloro, bromo, um grupo alquilo C1-C4, um grupo cicloalquilo C3-C7, fenilo ou um anel heteroarilo, ou um sal farmaceuticamente aceitável de um tal composto. ΡΕ1443967
11. 11. Combinação da reivindicação 9, em que o ini-bidor da histona-desacetilase é um composto de fórmula (lie) da reivindicação 9 em que Ri8 é H, fluoro, cloro, bromo, um grupo alquilo C1-C4, um grupo cicloalquilo C3-C7, fenilo ou um anel heteroarilo, R2 é H ou -(CH2)3CH2OH e s é 1-3, ou um sal farmaceuticamente aceitável de um tal composto.
12. 12. Combinação da reivindicação 10, em que o inibidor da histona-desacetilase é um composto de fórmula (lie) da reivindicação 10 em que Ri8 é H, fluoro, cloro, bromo, um grupo alquilo C1-C4, um grupo cicloalquilo C3-C4, fenilo ou um anel heteroarilo, R2 é H ou - (CH2) sCH2OH, s é 1-3, Ri é Η, X e Y são cada um H e q é 1-3 eréOouqéO e r é 1-3, ou um sal farmaceuticamente aceitável de um tal composto.
13. 13. Combinação da reivindicação 5, em que o inibidor da histona-desacetilase é seleccionado do grupo consistindo de N-hidroxi-3-[4-[[(2-hidroxietil)[2-(1H— indol-3-il)etil]-amino]-metil]fenil]-2E-2-propenamida, N-hidroxi-3-[4-[[[2-(lH-indol-3-il)etil]-amino]metil]-fenil]-2E-2-propenamida e N-hidroxi-3-[4-[[[2-(2-metil-lH-indol-3-il)-etil]-amino]-metil] fenil]-2E'-2-propenamida, e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.
14. 14. Combinação da reivindicação 13, em que o inibidor da histona-desacetilase é W-hidroxi-3-[4-[[[2-(2-metil-lH-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2£-2-prope-namida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 9 ΡΕ1443967
15. 15. Combinação de qualquer uma das reivindicações 1-14 para ser utilizada no tratamento de uma doença num mamífero.
16. 16. Combinação da reivindicação 15 para ser utilizada no tratamento de lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon ou outras malignidades num mamífero.
17. 17. Combinação da reivindicação 16, em que as outras malignidades a serem tratadas são seleccionadas do grupo consistindo de cancro da mama, cancro do pulmão, cancro do ovário, linfoma, cancro da cabeça e pescoço, e cancro do esófago, estômago, bexiga, próstata, útero e cérvix.
18. 18. Combinação de qualquer uma das reivindicações 15-17, em que o mamífero a ser tratado é um ser humano.
19. 19. Composição farmacêutica a qual compreende (a) um inibidor da COX-2 de fórmula I da reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e (b) um inibidor da histona-desacetilase de fórmula II da reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, conjuntamente com pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável.
20. 20. Composição farmacêutica da reivindicação 19, em que o inibidor da COX-2 é o ácido 5-metil-2-(2'-cloro- 10 ΡΕ1443967 6'-fluoro-anilino)-fenilacético, ou um seu sal farmaceu-ticamente aceitável.
21. 21. Composição farmacêutica da reivindicação 20, em que o inibidor da histona-desacetilase é seleccionado do grupo consistindo de N-hidroxi-3-[4-[[(2-hidroxietil)[2-(lH-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, N-hidroxi-3-[4-[[[2-(lH-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil] -2E-2-propenamida e N-hidroxi-3-[4-[[[2-(2-metil-lH-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2£-2-propenamida, e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.
22. 22. Composição farmacêutica da reivindicação 21, em que o inibidor da histona-desacetilase é a N-hidroxi-3-[4 - [ [ [2 - (2-metil-l/í-indol-3-il) -etil] -amino]metil] fenil] -2£-2-propenamida ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
23. 23. Utilização de uma combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-14 para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon ou outras malignidades num mamífero.
24. 24. Embalagem ou produto comercial compreendendo (a) um inibidor da COX-2 de fórmula I da reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e (b) um inibidor da histona-desacetilase de fórmula li da reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, conjuntamente com instruções para utilização simultânea, concorrente, 11 ΡΕ1443967 separada ou sequencial daqueles no tratamento de uma doença num mamífero.
25. 25. Embalagem ou produto comercial da reivindicação 24 compreendendo instruções para utilização no tratamento de lesões pré-malignas do cólon ou um cancro do cólon ou outras malignidades num mamífero. Lisboa, 2 de Abril de 2007