PT1024792E

PT1024792E - Composição antifúngica tópica

Info

Publication number: PT1024792E
Application number: PT98951104T
Authority: PT
Inventors: Greg Davey; Albert Zorko Abram
Original assignee: Connetics Australia Pty Ltd
Priority date: 1997-10-17
Filing date: 1998-10-19
Publication date: 2007-01-31
Also published as: DE69836555T2; AUPO983897A0; AU732456B2; ES2277394T3; JP4917204B2; ATE346588T1; DE69836555D1; US20090149473A1; AUPP121798A0; US8586066B2; AU9728898A; US20110251146A1; WO1999020250A1; JP2001520184A; EP1024792B1; EP1024792A4; US7553835B1; EP1024792A1; CA2306560A1; DK1024792T3

Description

ΕΡ 1 024 792 /PT DESCRIÇÃO "Composição antifúngica tópica"

Antecedentes do invento 0 presente invento refere-se a uma composição antifúngica capaz de formar espuma para o tratamento de vários problemas de pele.

Os agentes antifúngicos são muito conhecidos, e incluem antibióticos macrólitos tais como griseofulvina, e imidazol tal como a clotrimazol e cetoconazol. O cetoconazol foi originalmente descrito por Heeres et al. na Patente U.S. 4335125, na qual a sua principal utilidade era um composto antifúngico útil no tratamento de vários problemas incluindo dermite seborreica, caspa, tinea cruris e tinha.

As composições antifúngicas são tradicionalmente aplicadas na forma de loções ou cremes. Existem, contudo, desvantagens para essas formas. Em particular, as formulações são frequentemente muito viscosas requerendo fricção substancial para atingir penetração na área afectada, um acto que por si só causa desconforto e muitas vezes irritação. Se as formulações viscosas não forem aplicadas vigorosamente, o agente activo antifúngico não atinge necessariamente o local que necessita de tratamento, sendo a epiderme da pele. Os cremes e loções não viscosas costumam escorrer do local afectado antes de haver penetração. Uma desvantagem final é que as bases de cremes ou loções por si só podem adicionar irritação ao local dependendo da sua composição. 0 cetoconazol foi apresentado na Patente U.S. 4569935 como sendo útil no tratamento tópico de psoríase e dermite seborreica. De acordo com esta utilidade, o cetoconazol foi comercializado numa formulação de champô a 2% para o tratamento de escamação devido a caspa, vendido sob o nome de marca "Nizoral©". Este champô é aplicado peio utilizador e depois removido em pouco tempo após a sua aplicação, por exemplo 3-5 minutos, enxaguando com aaua. O acente activo 2

ΕΡ 1 024 792 /PT está assim em contacto com a área a tratar apenas durante um período de tempo muito limitado.

Uma outra patente que descreve champôs à base de cetoconazol é a U.S. 5456851 no nome de JOHNSON & JOHNSON CONSUMER PRODUCTS, INC que procura proporcionar boas propriedades cosméticas ao champô incluindo espuma de sabão, e retardar a degradação do cetoconazol. Esta composição é uma formulação que 'produz espuma. A desvantagem destas formulações de champô é que, durante a utilização normal, a formulação não permanece no couro cabeludo durante um período de tempo suficiente para permitir que o agente anti-fúngico atinja o seu efeito terapêutico máximo visto ser concebida para ser aplicada, por exemplo, no banho ou duche, e pouco tempo depois enxaguada com água. Tipicamente, as instruções para a aplicação de esses champôs sugerem que a formulação seja retirada após 3-5 minutos,

Para atingir o efeito terapêutico máximo, uma alternativa como a descrita em AU 80257/87 é proporcionar uma quantidade elevada de sólidos residuais que permanecem após a aplicação para tratar o problema ofensivo da pele. É apresentada em AU 80257/87 uma composição de espuma para a entrega de minoxidilo. As formulações apresentadas neste documento contêm, todas, uma elevada percentagem de resíduos não voláteis, incluindo propilenoglicol. Embora não se-ia apresentada a razão pela qual essas formulaições contêm uma grande quantidade de propilenoglicol, supõe-se que 0 propilenoglicol seja necessário, provavelmente, Para potenciar a penetração e/ou para melhorar a solubilidade ^ minoxidilo. A desvantagem, de uma composição com um teo--residual elevado é que os resíduos não voláteis ficam retíg,-^ no local de aplicação e, deste modo, são desagradáveis pouco atractivos par o utilizador.

Em AU-A-35717/93 estão descritas alternativas a cetoconazol e ao minoxidilo em nome de SMITH KLINE BESCtiAp PLC que apresenta composições que incluem um novo esterói^ de androsteno para utilizar no tratamento de acne seborreia, e AU-A-48851/S6 em nome de MEDEVA PLC que descr6Vt=i 3

ΕΡ 1 024 792 /PT 3 ΕΡ 1 024 792 /PT de rápida utilizar no psoríase do a utilização de betametasona numa espuma desagregação incluindo um agente tampão para tratamento de doenças de pele e em particular d. couro cabeludo.

Em EP 0156508 apresentam-se composições antifúngicas de derivados de imidazol insolúveis. As composições requerem a presença de um álcool inferior, um agente solubilizante na forma de um ácido gordo, sal, éster ou amida, um co-solvente sendo um álcool poli-hídrico, um propelente e um antioxidante.

Em JP 08040899 apresenta-se uma composição de aerossol que compreende 0,3-3,0% em peso de um agente antifúngico, 1-10% em peso de um tensioactivo, 40-90% em peso de água e/ou um álcool inferior e 40-90% de um propelente.

Em FR 2740685 apresentam-se composições de mousse antifúngica. É um objectivo deste invento proporcionar uma composição antifúngica que seja eficaz no seu tratamento de problemas de pele provocados por fungos mas que também seja agradável de usar.

Sumário do invento

Para este fim, num primeiro aspecto do invento, proporciona-se uma composição tópica, capaz de fazer espuma, compreendendo: (a) um agente antifúngico; (b) pelo menos um tensioactivo; (c) álcool de cadeia longa; (d) um teor de álcool inferior superior a 10% em peso da composição total; e (e) gás propelente hidrocarboneto numa quantidade inferior a 60% em peso da composição total, onde a composição é uma mousse de temperatura e possui um componente residual não volátil inferior a 25%. 4

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Verificou-se surpreendentemente que a composição antifúngica do presente invento possui uma atracção cosmética comercialmente aceitável e que durante a utilização normal permite maior penetração e retenção do agente antifúngico nas camadas superiores da pele, em particular na epiderme, proporcionando assim um depósito de agente activo disponível para atingir um efeito antifúngico sustentado quando comparada com formulações conhecidas. Esta última caracteristica conduz a uma maior atracção farmacêutica, assim como uma maior atracção cosmética. Para além disso, o teor residual de sólidos da formulação é tão baixo que não produz desconforto, nem irritação no utilizador. A expressão "período de tempo prolongado" pretende englobar períodos de tempo suficientemente longos para permitir ao agente activo presente ser substancialmente todo absorvido pelo organismo a tratar, ou substancialmente todo metabolizado pelo paciente a tratar.

Numa concretização preferida, o um ou mais agentes antifúngicos são seleccionados do grupo que consiste em dióis, alilaminas (incluindo naftifina e terbinafina), antibióticos macrólitos de polieno (incluindo anfotericina e nistatina), derivados de triazol (tal como fluconazolo), ácidos gordos (tais como ácido caprílico e propiónico), amorolfina, ciclopirox, olamina, ácido benzóico, flucitosina, haloprogina, tolnaftato, ácido undecenóico e os seus sais, griseofulvina e compostos de imidazol. Mais preferencialmente, o antifúngico é um composto de imidazol. 0 mais preferido, o agente antifúngico é cetoconazol ou clorfenesina (3-(4-clorofenoxi)propano-1,2-diol).

De preferência, as composições em conformidade com o invento possuem um teor residual de componentes não voláteis inferior a 10% e, com mais preferência, inferior a 6%.

Proporciona-se a composição tópica, capaz de fazer espuma, na forma de uma mousse. A mousse é uma mousse sensível à temperatura, que colapsa rapidamente quando exposta à temperatura da pele. 5

ΕΡ 1 024 792 /PT A composição é uma mousse etanólica que inclui um teor de álcool inferior superior a 10%, com maior preferência superior a 50% e um teor de gás propelente hidrocarboneto inferior a 60%, com maior preferência inferior a 10%. (A menos que se especifique algo em contrário no fascículo, todas as % se baseiam no peso total da composição).

Na mousse sensível à temperatura, o álcool de cadeia longa pode ser seleccionado de, por exemplo, álcoois cetílico, estearílico, laurílico, miristílico e palmílico e de misturas de dois ou mais desses. 0 álcool inferior pode, de preferência ser seleccionado de álcoois metílico, etílico, isopropílico e butílico, e misturas de dois ou mais desses. Verificou-se que o etanol é particularmente preferido.

Os tensioactivos utilizados na mousse sensível à temperatura podem, de preferência, ser seleccionados de estearato, palmitato e oleato de sorbitano etoxilado, etoxilatos de nonilfenol e etoxilatos de álcoois gordos, e misturas de dois ou mais desses. Deste modo, por exemplo, verificou-se que o Polisorbato 60 (uma mistura de ésteres esteáricos parciais de sorbitol e dos seus anidros na forma de co-polímeros com aproximadamente 20 moles de óxido de etileno por cada mole de sorbitol e seus anidros) é particularmente preferido. O tensioactivo potência a solubilidade do álcool de cadeia longa no sistema e potência a formação de mousse.

Num outro aspecto do invento, proporciona-se uma composição capaz de produzir espuma que inclui: até 5% de álcoois de cadeia longa; até 5% de composto quaternário; até 10% de propilenoglicol; até 5% de agente antifúngico; até 90% de solvente álcool inferior; até 5% de tensioactivo; 5-95% de água, e até 20% e um gás propelente hidrocarboneto 6

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De preferência, o álcool de cadeia longa é álcool cetilico ou estearilico ou suas misturas.

De preferência, o composto quaternário é fosfato de oxi-etil-alquil-amónio quaternária disponível comercialmente sob o nome de marca, Dehyquart SP,

De preferência, o solvente álcool inferior é etanol ou propanol ou suas misturas.

Os gases propelentes adequados incluem gases propelentes não tóxicos, adequados para composições farmacêuticas e cosméticas capazes de produzir espuma e conhecidos dos peritos na especialidade.

Deste modo, pode-se seleccionar o propelente de propano, butano, diclorodifluorometano, diclorotetrafluoroetano, octa-fluorociclobutano, e misturas de dois ou ma is destes. É necessário seleccionar o propelente ma is compatível com todo o sistema. 0 nível máximo de propelente será determinado como a quantidade miscível com a razão de água/álcool inferior utilizada. Para além de actuar como propelente, o propelente também actuará como solvente para o álcool de cadeia longa e substâncias activas no sistema aauoso/alcoólico.

Quando o agente activo preferido é o cetoconazol, o invento proporciona uma composição tópica, capaz de produzir espuma, que se caracteriza por ao efectuar a sua aplicação na pele de um utilizador, se atingir uma penetração de pelo menos 30 yg/cird na epiderme no intervalo de uma hora de aplicação e esta se manter durante 23 horas. um peri •de pe. rn rr·. r\ /-\ c?

Quando o agente activo preferido é clorfenesina, o invento proporciona uma composição tópica, capaz de produzir espuma, que se caracteriza por ao se efectuar a sua aplicação na pele de um utilizador, se atingir uma penetração de pelo menos 10 ug/crrr na epiderme no intervalo de uma hora de aplicaçao e esta se manter durante um período de peio menos 23 horas. 7

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Ainda num aspecto do invento, proporciona-se um método para o tratamento de infecções provocadas por fungos, em particular tinha, tinea cruris, caspa e dermite seborreica, através da aplicação da composição antifúngica do presente invento à área afectada de um paciente a necessitar desse tratamento.

Numa concretização preferida deste aspecto do invento, deixa-se a composição ficar sobre a área afectada durante um período de tempo prolongado.

Neste contexto, "período de tempo prolongado" significa um intervalo de tempo superior ao intervalo de tempo que se prescreve para que as composições tópicas da arte anterior, tais como champôs, fiquem em contacto com a área afectada. Usualmente, os champôs são concebidos para serem lavados em 5 minutos.

Com maior preferência, quando a composição é usada para tratar caspa ou dermite seborreica, esta é aplicada numa lavagem ou entre lavagens e permite-se que permaneça no local de aplicação, tal como o couro cabeludo ou cabelo, até o local de aplicação ser depois novamente lavado. 0 invento engloba também a utilização de um agente antifúngico na preparação de uma composição tópica, capaz de produzir espuma, para o tratamento de doenças provocadas por fungos incluindo caspa, tinha, tinea cruris e dermite seborreica, sendo a composição tópica capaz de produzir espuma caracterizada por conseguir penetrar a epiderme da pele e permanecer no interior ou sobre a área a tratar durante um período de tempo prolongado, e por ter um teor de componentes não voláteis inferior a 25%. 8

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Descrição detalhada do invento

Prepararam-se duas formulações do presente invento: D Composição em mousse de cetoconazol a 0,5% Álcool cetílico 1,10 Álcool estearílico 0,50 Quaternio 52 (50%) 1,00 Pr· op i 1 e n oglicol 2,00 Cetoconazol USP 0,50 Etanol 95PGF3 60,55 Agua desionizada o n r\ cr v ¥ v 3 Propelente uidrocaroonc 5to P75 4,30 2) Composição em mousse de cetoconazol a 1% Álcool cetílico 1, 10 Álcool estearílico 0,50 Quaternio 52 (50%) 1,00 Pr op í 1 e η o g 1 i c o 1 2,00 Cetoconazolo USP 1,00 Etanol 95PGF3 60,20 Água desionizada 2 9,9 0 Propelente Hidrocarbom 510 P75 4,30 Prepararam-se as composições dissolvendo o agente activo no etanol. Adicionaram-se, então, o álcool cetílico e o estearílico, à solução aquecida e misturaram-se até se dissolverem. Adicionaram-se então o quaternio 52, o propilenoglicol e a água e agitaram-se até ficarem homogéneos, enquanto se mantinha a temperatura elevada. Faz-se então a dispersão da solução em latas de aerossol onde depois se adapta a válvula do aerossol e se carrega a lata com propelente.

Exemplo 1

Realizou-se um estudo para comparar a penetração epidérmica das duas composições em mousse anteriores, com o champô Nizoral® contendo 2% de cetoconazol comercialmente disponível. Em particular, aplicaram-se as respectivas 9

ΕΡ 1 024 792 /PT formulações e removeram-se como um champô convencional, de modo a comparar a penetração das respectivas formulações na epiderme.

Equipamento e Materiais Células de difusão Franz in vitro (área de superfície 1,33 cm2, volume receptor 3,5 ml) incorporando epiderme humana;

Equipamento de HPLC: Sistema de HPLC automático Shímadzu com detector de UV, albumina de soro bovino dissolvido em salino tamponado com fosfato (pH 7,4) como fase receptora para imitar as condições fisiológicas·

Prot oco1o experiment a1

Dosagem finita (50 mg para champô e 100 mg para mousses);

Fase receptora: 4% de BSA em salino tamponado com fosfato a pH 7,4;

Tempo de amostragem: 6, 10, 2 4 horas (quantidade na fase receptora (g/célula) e na epiderme (pg/célula)); E s t u d o d e não-oclusão;

Cada período de tempo e formulação conduzida err, triplicado.

Procedimento de aplicação

Champô: dose de 50 mg de champô (equivalente a 1 mg ^ cetoconazol) aplicada a pele previamente molhada com agitação e lavagem com água desionizada após 4 minutos.

Mousse: dose de 100 mg de mousse (equivalente a 1 mg d cetoconazol para mousse a 1% e 500 yg de cetoconazol pa mousse a u,5%) aplicada (não enxaguada).

Protocolo^ retenção epidérmica A epiderme removida da célula após um intervalo de tem-0o lavada com água destilada e seca para remover o cetoconaz~* que permanece sobre a superfície. O cetoconazol é extraí^ ^ amostra de epiderme, mergulhando-a em metanol durante 1 10

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Repetiu-se este procedimento com um segundo volume de metanol durante 30 minutos. As amostras de metanol são combinadas para a análise de HPLC (este procedimento foi validado com uma taxa de recuperação de 99%).

Teste de HPLC

Coluna: Coluna em aço Nova Pak Ci8, 3,9x150 mm

Fase Móvel: MeOH 70% em tampão de fosfato 0,02M, pH 6,8

Comprimento de onda: 254 nm

Caudal: 1,3 ml/min

Volume de injecção: 10 μΐ

Tempo de retenção: cerca de 7 min

Resultados O Quadro 1 mostra o cetoconazol acumulado na fase receptora e na epiderme, em instantes definidos, a seguir à aplicação da mousse em conformidade com o invento e o champô da arte anterior.

Amo st ra Cetoconazol ug/célula 6 horas 10 horas 24 horas Rec.eptor Epiderme Receptor Epiderme Receptor Epiderme Mousse a 0,5% 4,36 33,15 9, 04 69, 46 14,63 42, 10 Mousse a 0,5% 2,83 35, 71 18, 06 48, 04 24, 77 39,19 Mousse a 0,5% 14, 37 34,3 21,3 55, 29 9,82 48,27 Média±desvio padrão 7,4+6,1 34,4+1,3 16,1+6, 4 57, 6±10, 9 16,4±7,6 43,2+4,6 Mousse a 1% 12, 86 46, 4 31,50 67, 51 21, 90 51, 43 Mousse a 1% 10, 03 61, 8 11,05 55,65 35, 85 46,64 Mousse a 1% 18,6.1 38, 6 19, 33 56,83 10, 72 43,28 Mé d i a ±d esvio padrão 13,8+4,4 48,9±11,8 20,6+10,3 60+6,5 22,3+12,6 47, 1 + 4,1 Champô a 2% N N N 0, 83 N N Champô a 2% N N N 0, 28 N 0,38 Champô a 2% N ίί N N N 0, 34 Médialdesvio padrão - - - 0,. 39±0,46 - 0,24±0,21 li: não detectável <assume-se ser zero para cálculo da média e desvio padrão} . - não disponível. 0 Quadro 2 mostra 0 cetoconazol acumulado η o receptor (expresso como ug/mi de fluido receptor) e na epiderme (expresso como ug/cm2 de área de superfície) em instantes definidos a. seguir à aplicação da mousse em conformidade com 11

ΕΡ 1 024 792 /PT ο presente invento e o champô da arte anterior.

Quadro 2

Cetoconazol pg/célula 6 horas 10 horas 24 horas Amostra Recepitor Epiderme Receptor Epiderme Receptor Epiderme Mousse a 0,5% 1,42 26, 95 2,58 56, 47 4, 20 34,23 Mousse a 0,5% 0, 81 29, 03 5, 46 39,06 7, 08 31,06 Mousse a 0,5% 4, 11 2 7, 89 6,09 44, 95 2, 81 33,24 Médiatdesvlo padrão 2,11±1,76 27, 96±1,04 4, 61±i, 82 46, 8.3±8f 86 4, 70±2,18 35,11±3,77 Mousse a 1% 3,67 3 7 77 9,00 54, 89 6,26 41, 81 Mo u s s e a 1 % 2, 87 50, 2 4 3,16 45, 24 10, 24 37, 92 Mousse a 1% 5, 32 31, 38 5, 54 46,20 3, 06 35,19 Méá i a ±de s vio pa dr áo 3, 35±1,25 39,78+9,60 5, 90+2, 94 48,78+5,31 8,52+3,80 38,31+3,33 Champô a 2% N N N 0, 72 N N Champô a 2% N N N 0, 23 N 0, 31 Champô a 2% N N N N N 0, 28 M é d 1 a ± d e s v 1 o p a d r ã o 0, 32±0, 3 7 0, 20+0, 17 N: não detectável (assume-se ser zero para cálculo da média e desvio padrão). não disponível A Figura 1 mostra a penetração de cetoconazol através da epiderme humana para o fluido receptor ao longo do tempo. Os pontos a cheio do gráfico representam a rnousse a 0,5%, os pontos abertos representam a rnousse a i,0%. Os dados são a médiafdesvio padrão dos triplicados (Quadro 2), A Figura 2 representa o cetoconazol retido na epiderme ao longo do tempo. Os pontos a cheio do gráfico representam a rnousse a 0,5%, os pontos abertos representam a rnousse a 1,0%. Os dados são a médiaidesvio padrão dos triplicados (Quadro 2). A Figura 3 compara os níveis de retenção de cetoconazol sobre a pele, os níveis de retenção do cetoconazol na peie e a quantidade de cetoconazol que passa através da pele nos testes em que foi utilizada uma rnousse em conformidade com o invento com as mesmas medidas usando Nizoral®. Saliente-se que os níveis de cetoconazol encontrados após a aplicação de Nizoral® champô foram baixos e, portanto, não são visíveis nesta figura. 12

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Pode ser facilmente observado a partir dos resultados do Exemplo 1 que: 1. O cetoconazol nas composições de mousse do presente invento penetraram a pele em quantidade apreciável; 2. 0 cetoconazol nas composições de mousse do presente invento foi retido preferencialmente na epiderme em comparação com a penetração para a solução receptora; 3. A aplicação do champô da arte anterior, Nizoral®, resultou em quantidades insiqnificantes de cetoconazol na epiderme e penetração para a fase receptora em qualquer dos instantes a seguir à aplicação usando um procedimento de aplicação do champô normalizado; 4. A comparação das formulações de mousse a 1% e a 0,5% do presente invento mostra que existe pouca diferença nas concentrações na epiderme e na fase receptora.

Exemplo 2

Conduziu-se um segundo estudo para comparar a penetração e retenção de cetoconazol na pele a partir da composição de mousse de cetoconazol a 1% do presente invento com Nizoral® Champô (1% p/p) . A composição de mousse a 1% tinha um teor total de resíduo de 5,1% de sólidos incluindo o activo.

Equipamento e Materiais vitro (área de superfície ) incorporando pele humana Células de difusão de Franz in 3 cm2, volume de receptor 3,5 md de espessur completa.

Equipamento de HPLC: sistemas de HPLC automáticos Shimadzu, com detector de UV.

Protocolo Experimental

Dosagem finita (50 mg de cada formulação colocada na superfície da pele);

Fase receptora: 4% de albumina de soro bovino (BSA) em salino tamponado com fosfato (PBS) de pH 7,4;

Tempos de amostragem para a retenção da pele: 15 minutos, 1, 12, 24 horas; 13

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Tempos de amostragem para a penetração na pele para a fase receptora: 12, 24 horas;

Quantidade de cetoconazol em pele de espessura total e fase receptora medida por teste de HPLC a seguir a procedimento de extracção correcto;

Estudo de não oclusão;

Medições em triplicado.

Procedimento de aplicação

Aplicou-se a mousse e o champô e deixou-se em contacto com a pele durante o tempo que demorou o estudo de penetração. Depois disso, lavou-se a formulação da pele com água destilada antes do procedimento de extracção da amostra e o teste de HPLC quanto ao teor de cetoconazol.

Teste de HPLC

Colu

Coluna em aço Nova Pak Cis, 3,9x150 mm (Waters)

Fase Móvel: Comprimento de onda: Caudal: Volume de injecção: Tempo de retenção: 70% de MeOH em PBS a 0,02 M, pH 6,8 254 nm 1,0 ml/min 10 μΐ aproximadamente 8 min

Protocolo de retenção em pele de espessura total

Removeu-se a pele de espessura total da célula a seguir a um intervalo de tempo; enxaguou-se com água destilada e secou-se para remover o cetoconazol que ficou sobre a superfície. Extractou-se o cetoconazol da amostra de pele com espessura total, mergulhando-a em metanol durante 1 hora. Repetiu-se este procedimento com um segundo volume de metanol durante 30 minutos. Combinaram-se as amostras de metanol da análise de HPLC. (Este procedimento foi validado com uma taxa de recuperação de 99%).

Resultados A Figura 4 mostra a curva padrao de HPLC para o cetoconazol. 14

ΕΡ 1 024 792 /PT Ο Quadro 3 mostra a quantidade de cetoconazol retido na pele (pg7 cnQ aos 15, 6 0 mi nu Γ. OS ; 12 e 24 horas após ap i i c ss. ç a o da mousse em conf orir iidade com o invento, ou champô da arte anterior.

Quadro 3

Cetoconazol retido na pele (ug/cnr) aos 15, 60 minutos, 12, 24 horas após a aplicação de mousse ou champô

Cetoconazol na pele (yg/crró) Amostra Média ± SEM 15 minutos 60 minutos 12 horas 24 horas Champô 11 0 q. Π 0, Ί -i- J- / — - j J J. 2 4,2 ± 1,5 8 39,7±12,3 70,1+18,8 Mousse fl A 1-4-0 O 7 ‘i‘ú f J- HC u r *- 128,37+19,1 228,57±14,8 O Quadro 4 mostra a quantidade de cetoconazol que penetrou na fase receptora (pg/crrf) às 12 e 24 horas após a aplicação da mousse em conformidade com o invento, ou do c hampô da ar t e ant er ior.

Quadro 4

Cetoconazol que penetrou na fase receptora (μα/ml) às 12, 24 horas após a aplicação de mousse ou champô

Amostra Cetoconazol no receptor (vkj/ctíC} Média ± SEM 15 m. i π u t. o s 60 minutos 12 horas 24 horas Champô MO li S S Θ _ — N 0,07±0,05 0,04+0,04 0,30±0,04 N: não de t e c t. áve .1 náo testado A Figura 5 mostra a quantidade de cetoconazol retido na pele em função do tempo após a aplicação da formulação em conformidade com o invento. Os dados são a média ± SEM (n=3) do Quadro 4. A formulação de mousse em conformidade com o invento demonstrou uma retenção na pele significativamente maior de cetoconazol do que a formulação de champô da arte anterior durante o período de 24 horas. 15

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Pode ser facilmente observado dos resultados do exemplo 2 que: 1. A penetração de cetoconazol para a fase receptora durante as 24 horas a seguir à aplicação foi mínima tanto para o champô, como para a mousse; 2. A retenção de cetoconazol na pele foi significativamente maior a seguir à aplicação da formulação de mousse quando comparado ao champô (p<0,05).

Exemplo 3

Realizou-se um terceiro estudo para comparar a penetração e a retenção na pele de duas formulações em conformidade com o invento nas quais o agente antifúngico foi clorfenesina (0,5% p/ p) . Uma formulaçã o era etanólica e tinha um teor de resíduo tot al de 2,5% de sólidos incluindo o activo, a outra i—I O U O ão era aquosa e tinha um teor de resíduo total de 4,6% de sói idos incluindo o activo.

Formulação aquosa (fora do âmbito das reivindicações) %(P/P)

Clorfenesina 0,50 Álcool cetílico 0,70 Álcool estearílico 0,30 Álcool Isocetílico 2,50 Ceteth 20 0,50 Conservantes 0,10 Água purificada 90,40 Propelente Hidrocarboneto P75 5,00 Formulação etanólica Clorfenesina 0,50 Álcool cetílico 1,10 Álcool estearílico 0,50 Polissorbato 0,40 Etanol a 95% 60, 79 Água purificada 32,41 Propelente Hidrocarboneto P75 4,30 16

ΕΡ 1 024 792 /PT

Equipamento e Materiais 16 ΕΡ 1 024 792 /PT Células de difusão de Franz 1,33 cmh, volume de receptor 3,1 de espessura total. Equipamento de HPLC: sis Shimadzu, com detector de UV. in vitro (área de superfície ml) incorporando pele humana temas de HPLC automáticos

Protocolo Experimental

Dosagem finita (50 mg de cada formulação colocada na superfície da pele);

Fase receptora: albumina de soro bovino a 4% (BSA) em salino tamponado com fosfato (PBS) a pH 7,4;

Tempos de amostragem para a retenção da pele: 15 minutos, 1, 12, 24 horas;

Quantidade de clorfenesina em pele de espessura total e fase receptora medida por teste de HPLC a seguir a extracção para acetonitrilo (ACN) e metanol (MeOH) (9:1);

Estudo de não oclusão;

Medições em triplicado.

Aplicação

Aplicaram-se mousses em conformidade com o invento e deixou-se em contacto com a pele durante o tempo que demorou o estudo de penetração. Depois disso, lavou-se a formulação com água destilada antes da extracção e da HPLC quanto ao teor de clorfenesina.

Teste de HPLC

Coluna: Coluna em aço Nova Pac Cis, 3,9x150 mm (Waters)

Fase Móvel: Comprimento de onda: Caudal:

Volume de injecção: Tempo de retenção: ACN a 30% 280 nm 1,0 ml/min 20 μΐ aproximadamente 3,6 min 17

ΕΡ 1 024 792 /PT

Protocolo de retenção em pele

Removeu-se a pele da célula a seguir a um intervalo de tempo e enxaguou-se com água destilada para remover a clorfenesina sobre a superfície. Extractou-se a clorfenesina da pele homogeneizada, mergulhando-a em 1 ml de mistura de ACN-MeOH durante 1 hora. Repetiu-se este procedimento por quatro períodos, ainda, de 30 minutos. Combinaram-se as cinco amostras para análise de HPLC. (Este procedimento foi validado com uma taxa de recuperação de 99%).

Resultados A Figura 6 mostra a curva padrão de HPLC para a clorfenesina. Os dados são a médialdesvio padrão (n=3). O Quadro 5 mostra a quantidade de clorfenesina retida na pele (ug/cm'·) aos 15, 60 minutos, 12 e 24 horas após a aplicação da mousse em conformidade com o invento.

O Quadro 6 mostra a quantidade de clorfenesina que penetrou na fase do receptor (pg/ml) às 12, 24 horas após a aplicação da mousse em conformidade com o invento.

Quadro 6

Amostra Clorfenesina no receptor (pg/ml) Média ± SD 15 minutos 60 minutos 12 horas 24 horas Aquosa Não-aquosa ... — 2,9 ± 0, 4 5±0,7 5, 611,1 5,l±i,5 não testado A Figura 7 mostra a quantidade de clorfenesina retida na pele em função do tempo após a aplicação da formulação em conformidade com o invento. Os dados são a médialdesvio padrão (n=3) do quadro 5. Os pontos abertos são a formulação 18

ΕΡ 1 024 792 /PT aquosa. Os pontos a cheio representam a formulação etanólica.

Nos resultados do exemplo 3 é facilmente observado que outros agentes activos diferentes do cetoconazol formulados como composições etanólicas e aquosas atingem os níveis de penetração e retenção desejados para o tratamento eficaz de problemas de pele causados por fungos.

Lisboa,

Claims

ΕΡ 1 024 792 /PT 1/3 REIVINDICAÇÕES 1. Composição tópica, capaz de formar espuma, que compreende: (a) um agente antifúngico; (b) pelo menos um tensioactivo; (c) álcool de cadeia longa; (d) um teor de álcool inferior superior a 10% em peso da composição total; e (e) gás propelente de hidrocarboneto numa quantidade inferior a 60% em peso da composição total; em que a composição é uma mousse sensível à temperatura e possui um componente residual não volátil inferior a 25%.
2. Composição de acordo com a reivindicação 1, onde o álcool inferior é o etanol.
3. Composição de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, que possui um teor de componente residual não volátil inferior a 10% em peso.
4. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-3, que possui um componente residual não volátil inferior a 6% em peso.
5. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-4, que compreende: até 5% em peso de álcoois de cadeia longa; até 5% em peso de composto de amónio quaternário; até 10% em peso de propilenoglicol; até 5% em peso do agente antifúngico; até 90% em peso de solvente de álcool inferior; até 5% em peso de tensioactivo; 5-95% em peso de água; e até 20% em peso de um gás propelente de hidrocarboneto.
6. Composição reivindicações I-5 seleccionado do < o de acordo com qualquer uma das >, onde pelo menos um agente antifúngico é grupo que consiste em compostos dióis, ΕΡ 1 024 792 /PT 2/3 alilaminas, antibióticos macrólitos de polieno, derivados de triazol, ácidos gordos, amorolfina, ciclopirox, olamina, ácido benzóico, flucitosina, haloprogina, tolnaftato, ácido undecenóico e os seus sais, griseofulvina e imidazol.
7. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6, onde o antifúngico é um composto de imidazol.
8. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-7, onde o agente antifúngico é cetoconazol.
9. Composição de acordo com a reivindicação 8, onde o cetoconazol penetra a epiderme de um utilizador a uma taxa de pelo menos 30 pg/cm2 no período de uma hora após aplicação, e se mantém durante um período de pelo menos 23 horas.
10. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6, onde o agente antifúngico é clorfenesina.
11. Composição de acordo com a reivindicação 10, onde a clorfenesina penetra a epiderme de um utilizador a uma taxa de pelo menos 10 pg/cm2 no espaço de uma hora após aplicação e se mantém durante um período de pelo menos 23 horas.
12. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-11, onde o tensioactivo é seleccionado do grupo que consiste em estearato de sorbitano etoxilado, palmitato de sorbitano etoxilado, oleato de sorbitano etoxilado, etoxilados de nonilfenol e etoxilados de álcoois gordos e suas misturas.
13. Composição tópica, capaz de formar espuma, de acordo com a reivindicação 1, que compreende: (a) até 5% em peso de um agente antifúngico seleccionado de um composto de imidazol e clorfenesina; (b) até 90% em peso de álcool inferior; (c) até 5% em peso de pelo menos um tensioactivo; (d) até 5% em peso de álcool de cadeia longa; (e) até 5% em peso de composto de amónio quaternário; (f) até 10% em peso de propilenoglicol; (g) 5-95% em peso de água; e (h) até 20% em peso de um gás propelente hidrocarboneto. ΕΡ 1 024 792 /PT 3/3
14. Composição de acordo com a reivindicação 13, onde o composto de imidazol é cetoconazol.
15. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, onde o tensioactivo é monoestearato de polioxietileno(20)sorbitano.
16. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, onde o álcool de cadeia longa é álcool cetílico ou álcool estearílico ou suas misturas.
17. Utilização de uma composição de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, para a preparação de um farmacêutico para utilizar no tratamento de doenças causadas por fungos incluindo tinea cruris, tinha, caspa e dermite seborreica. Lisboa,