PL201264B1 - Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu papillowirusowi i HPV 16L1VLP i HPV 18LI VLP - Google Patents
Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu papillowirusowi i HPV 16L1VLP i HPV 18LI VLPInfo
- Publication number
- PL201264B1 PL201264B1 PL362069A PL36206900A PL201264B1 PL 201264 B1 PL201264 B1 PL 201264B1 PL 362069 A PL362069 A PL 362069A PL 36206900 A PL36206900 A PL 36206900A PL 201264 B1 PL201264 B1 PL 201264B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- mpl
- hpv
- antigen
- vlp
- hbs
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 56
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 56
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 56
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 37
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 25
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 23
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 19
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 16
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 15
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 8
- 230000022023 interleukin-5 production Effects 0.000 claims description 3
- 101100209958 Borrelia hermsii vlp18 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100055824 Arabidopsis thaliana APO4 gene Proteins 0.000 claims 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 abstract description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 4
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 abstract description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 abstract description 3
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 abstract 1
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 abstract 1
- 241000223997 Toxoplasma gondii Species 0.000 abstract 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 abstract 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 abstract 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 abstract 1
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 35
- 102000000743 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 20
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 20
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 15
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 14
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 13
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 12
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 12
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 12
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 10
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 10
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 10
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 9
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 9
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 7
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 7
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 6
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 5
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 5
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 5
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 5
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 5
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 5
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- 229910017119 AlPO Inorganic materials 0.000 description 4
- 241000341655 Human papillomavirus type 16 Species 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 4
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000022361 Human papillomavirus infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 208000009608 Papillomavirus Infections Diseases 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 3
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 3
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 3
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 3
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 3
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 3
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 3
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 3
- 206010059313 Anogenital warts Diseases 0.000 description 2
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000009458 Carcinoma in Situ Diseases 0.000 description 2
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 2
- 206010008263 Cervical dysplasia Diseases 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 238000010161 Student-Newman-Keuls test Methods 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 2
- 208000007951 cervical intraepithelial neoplasia Diseases 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 201000004933 in situ carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 238000011551 log transformation method Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229940031346 monovalent vaccine Drugs 0.000 description 2
- 229940031348 multivalent vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 description 1
- 101100209954 Human papillomavirus type 16 L1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000641175 Human papillomavirus type 18 Major capsid protein L1 Proteins 0.000 description 1
- 241000709701 Human poliovirus 1 Species 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 102000001109 Leukocyte L1 Antigen Complex Human genes 0.000 description 1
- 108010069316 Leukocyte L1 Antigen Complex Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- 208000006994 Precancerous Conditions Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 230000029662 T-helper 1 type immune response Effects 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 208000021145 human papilloma virus infection Diseases 0.000 description 1
- 230000008696 hypoxemic pulmonary vasoconstriction Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003780 keratinization Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 210000005088 multinucleated cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229960002566 papillomavirus vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029069 type 2 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/081—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from DNA viruses
- C07K16/084—Papovaviridae, e.g. papillomavirus, polyomavirus, SV40, BK virus, JC virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/29—Hepatitis virus
- A61K39/292—Serum hepatitis virus, hepatitis B virus, e.g. Australia antigen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
-
- E—FIXED CONSTRUCTIONS
- E02—HYDRAULIC ENGINEERING; FOUNDATIONS; SOIL SHIFTING
- E02D—FOUNDATIONS; EXCAVATIONS; EMBANKMENTS; UNDERGROUND OR UNDERWATER STRUCTURES
- E02D3/00—Improving or preserving soil or rock, e.g. preserving permafrost soil
- E02D3/11—Improving or preserving soil or rock, e.g. preserving permafrost soil by thermal, electrical or electro-chemical means
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5258—Virus-like particles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20023—Virus like particles [VLP]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
- C12N2730/00011—Details
- C12N2730/10011—Hepadnaviridae
- C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
- C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Structural Engineering (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Civil Engineering (AREA)
- Paleontology (AREA)
- Mining & Mineral Resources (AREA)
- General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
1. Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu papillowirusowi, znamienna tym, ze zawiera: HPV 16 L1 VLP, HPV 18 L1 VLP, wodorotlenek glinu i 3D MPL. 2. Kompozycja szczepionki wed lug zastrz. 1, znamienna tym, ze VLP s a formu lowane z wyko- rzystaniem wst epnie zaadsorbowanych du zych ilo sci monowalentnego antygenu lub 3D MPL na wo- dorotlenku glinu. 3. Kompozycja szczepionki wed lug zastrz. 1 albo 2, znamienna tym, ze oczyszczone du ze ilo- sci VLP 16 i VLP 18 dodano do wodorotlenku glinu dla otrzymania stosunku 2g VLP / 10g Al(OH) 3 . 4. Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu papillowirusowi, znamienna tym, ze sk lada sie z HPV 16 L1, HPV 18 L1, wodorotlenku glinu i 3D MPL. PL PL PL PL
Description
(12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 201264 (21) Numer zgłoszema: 362069 (22) Data zgłoszenia: 07.09.2000 (62) Numer zgłoszenia, z którego nastąpiło wydzielenie:
354039 (86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego:
07.09.2000, PCT/EP00/08784 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
15.03.2001, WO01/17551 PCT Gazette nr 11/01 (51) Int.Cl.
A61K 39/12 (2006.01) A61K 39/29 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01)
Opis patentowy przedrukowano ze względu na zauważone błędy
Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu papillowirusowi i HPV 16L1VLP i HPV 18LI VLP (30) Pierwszeństwo:
07.09.1999,GB,9921146.8 (43) Zgłoszenie ogłoszono:
15.12.2003 BUP 25/03 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono:
31.03.2009 WUP 03/09 (73) Uprawniony z patentu:
SMITHKLINE BEECHAM BIOLOGICALS S.A., Rixensart,BE (72) Twórca(y) wynalazku:
Moncef Mohammed Slaoui,King of Prussia,US (74) Pełnomocnik:
Janina Kossowska, PATPOL Sp. z o.o.
(57) 1 . Komozyceja sczeepionki precciwko luzzkiemu aapillowirssow i , naaminnaa tym, eeaawiera:
HPV 16 L1 VLP, HPV 18 L1 VLP, wodorotlenek glinu i 3D MPL.
2. Kompozycja szczepionki według zastpz. 1, znamienna tym, że VLP są formułowane z wykorzystaniem wstępnie zaaUsopbowanych dużych ilości monowalentnego antygenu lub 3D MPL na wodorotlenku glinu.
3. Kompozycja szczepionki według zastrz. 1 albo 2, znamienna tym, że oczyszczone duże ilości VLP 16 i VLP 18 dodano do wodorotlenku glinu dla otrzymania stosunku 2g VLP / 10g Al(OH)3.
4. Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu eaeillowipusowi, znamienna tym, że składa się z HPV 16 L1, HPV 18 L1, wodorotlenku glinu i 3D MPL.
PL 201 264 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu papillowirusowi i HPV 16L1VLP i HPV 18L1 VLP.
Wynalazek dotyczy nowych formulacji szczepionek przeciwko ludzkiemu papillowirusowi w szczególności do podawania młodzieży.
Papillomawirusy są małymi nowotworowymi wirusami DNA, które są wysoce swoiste gatunkowo. Jak dotąd opisano ponad 70 poszczególnych genotypów ludzkich papillomawirusów (HPV). HPV są zazwyczaj swoiste albo dla skóry (np. HPV-1 i -2) albo powierzchni śluzówkowych (np. HPV-6 i -11) i zwykle wywołują nowotwory łagodne (brodawki), które utrzymują się przez kilka miesięcy lub lat. Takie nowotwory łagodne mogą niepokoić dotknięte nimi osoby, ale z reguły nie stanowią zagrożenia życia, z kilkoma wyjątkami.
Niektóre HPV są również związane z rakami. Najsilniejszy związek między HPV i rakiem ludzkim jest ten, który istnieje między HPV-16 i HPV-18 a rakiem szyjki macicy. Rak szyjki macicy jest najbardziej rozpowszechnionym nowotworem złośliwym w krajach rozwijających się, z co roku występującymi na świecie około 500 000 nowymi przypadkami. Aktywne zwalczanie najważniejszych zakażeń HPV-16, a nawet ustalonych raków zawierających HPV-16, jest technicznie wykonalne za pomocą szczepionek. W celu dokonania przeglądu perspektyw profilaktycznych i terapeutycznych szczepień przeciwko HPV-16 patrz Cason J., Clin. Immunother. 1994; 1(4) 293-306 i Hagenesee M.E., Infections in Medicine 1997 14(7) 555-556,559-564.
Innymi szczególnie interesującymi serotypami HPV są 31,33 i 45.
Obecnie za pomocą systemów klonowania w bakteriach, a ostatnio za pomocą amplifikacji techniką PGR wyizolowano i scharakteryzowano różne typy HPV. Organizację genomów HPV określono na podstawie porównania z dobrze scharakteryzowanym bydlęcym papillowirusem typu l (BPV1).
Choć zdarzają się drobne różnice, wszystkie opisane genomy HPV mają co najmniej siedem genów wczesnych, E1 do E7 i dwa geny późne, L1 i L2. Ponadto region regulatorowy powyżej niesie sekwencje regulatorowe, które wydają się kontrolować najbardziej transkrypcyjne zdarzenia genomu HPV.
Geny E1 i E2 są zaangażowane odpowiednio w replikację i kontrolę transkrypcji wirusa i często są rozrywane przez integrację wirusową. E6 i E7 oraz według ostatnich doniesień również E5 są zaangażowane w transformację wirusa.
W HPV związanych z rakiem szyjki macicy, takich jak HPV 16 i 18, proces onkogenny rozpoczyna się po integracji DNA wirusa. Integracja powoduje inaktywację genów kodujących kapsydowe białka L1 i L2 i ciągłe instalowanie nadekspresji dwóch wczesnych białek E6 i E7, co prowadzi do stopniowej utraty prawidłowego różnicowania komórkowego i rozwoju raka.
Rak szyjki macicy jest powszechny u kobiet i rozwija się przez pośredni stan przedrakowy do raka inwazyjnego, który często prowadzi do śmierci. Stany pośrednie choroby są znane jako śródnabłonkowa neoplazja szyjki macicy i są stopniowane od I do III zgodnie ze zwiększającym się nasileniem.
Klinicznie zakażenie HPV kobiecego układu odbytowo-płciowego manifestują się jako kłykcina płaska szyjki, której cechą charakterystyczną jest koilocytoza, odziaływująca głównie na komórki powierzchniowe i pośrednie szyjkowego łuskowatego nabłonka.
Koilocyty, które są konsekwencją efektu cytopatycznego wirusa, pojawiają się jako komórki wielojądrzaste z okołojądrową przezroczystą obwódką. Nabłonek jest pogrubiony przez nienormalną keratynizację odpowiedzialną za brodawkowaty wygląd zmian chorobowych.
Takie kłykciny płaskie, gdy są dodatnie dla serotypów HPV 16 lub 18, są czynnikami wysokiego ryzyka rozwoju w kierunku śródnabłonkowej neoplazji szyjki macicy (GIN) i raka in situ (CIS), które są uważane za prekursory zmian chorobowych inwazyjnego raka szyjki macicy.
W międzynarodowym zgłoszeniu patentowym WO 96/19496 ujawniono odmiany białek E6 i E7 ludzkiego papilliomawirusa, zwłaszcza białka fuzyjne E6/E7 z delecją w obu białkach E6 i E7. Te delecyjne białka fuzyjne uważa się za immunogenne. Szczepionki na bazie L1 HPV ujawniono w WO 94/00152, WO 94/20137, WO 93/02184 i WO 94/05792. Taka szczepionka może zawierać antygen L1 jako monomer, kapsomer lub cząstkę wirusopodobną. Takie cząstki mogą dodatkowo zawierać białka L2. Szczepionki na bazie L2 opisano na przykład w WO 93/00436. Inne szczepionki HPV są oparte na białkach wczesnych, takich jak E7 lub białkach fuzyjnych, takich jak L2-E7.
Istnieje potrzeba dostarczania skutecznych szczepionek w celu zapobiegania chorobom, na które szczególnie podatna jest młodzież.
PL 201 264 B1
Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu papillowirusowi według wynalazku zawiera: HPV
L1 VLP, HPV 18 L1 VLP, wodorotlenek glinu i 3D MPL.
Korzystnie VLP w szczepionce według wynalazku są formułowane z wykorzystaniem wstępnie zaadsorbowanych dużych ilości monowalentnego antygenu lub 3D MPL na wodorotlenku glinu.
Bardziej korzystnie oczyszczone duże ilości VLP 16 i VLP 18 dodano do wodorotlenku glinu dla otrzymania stosunku 2g VLP / 10 g Al(OH)3.
W zakres wynalazku wchodzi też kompozycja szczepionki składająca się z HPV 16 L1, HPV 18 L1, wodorotlenku glinu i 3D MPL.
Wynalazek dotyczy również HPV 16 L1 VLP sformułowanego z alumem (wodorotlenkiem glinu)/3D-MPL z wykorzystaniem wstępnie zaadsorbowanych dużych ilości monowalentnego antygenu lub 3D MPL na wodorotlenku glinu lub AlPO4.
Ponadto w zakres wynalazku wchodzi również HPV 18 L1 VLP sformułowany z alumem (wodorotlenkiem glinu)/3D-MPL z wykorzystaniem wstępnie zaadsorbowanych dużych ilości antygenu lub 3D MPL na wodorotlenku glinu lub AlPO4.
Odpowiedzi immunologiczne można generalnie podzielić na dwie zasadnicze kategorie, którymi są odpowiedź humoralna oraz za pośrednictwem komórek (tradycyjnie charakteryzowana odpowiednio przez mechanizmy ochrony z wytworzeniem przeciwciał i mechanizm komórkowy ochrony). Te kategorie odpowiedzi nazwano odpowiedzią typu TH1 (odpowiedź za pośrednictwem komórek) i odpowiedzią immunologiczną typu TH2 (odpowiedź humoralna).
Zasadnicze odpowiedzi immunologiczne typu TH1 charakteryzują się wytwarzaniem swoistych antygenowo, ograniczonych do haplotypu cytotoksycznych limfocytów T i odpowiedzi naturalnych komórek zabójców. U myszy odpowiedzi typu TH1 charakteryzują się często wytwarzaniem przeciwciał podtypu IgG2a, gdy tymczasem u ludzi odpowiadają one przeciwciałom typu IgG1. Odpowiedzi immunologiczne typu TH2 charakteryzują się wytwarzaniem szerokiego zakresu izotypów immunoglobulin, w tym IgG1 u myszy.
Można uważać, że siłą napędzającą rozwój tych dwóch typów odpowiedzi immunologicznej są cytokiny. Wysokie poziomy cytokin typu TH1 sprzyjają wywoływaniu odpowiedzi immunologicznej na dany antygen za pośrednictwem komórek, podczas gdy wysokie poziomy cytokin typu TH2 sprzyjają wywoływaniu humoralnej odpowiedzi immunologicznej na antygen.
Rozróżnienie typów odpowiedzi immunologicznej TH1 i TH2 nie jest bezwzględne. W rzeczywistości dany osobnik będzie wykazywał odpowiedź immunologiczną opisywaną jako głównie TH1 lub głównie TH2. Jednakże często jest wygodnie rozważać rodziny cytokin w kategoriach opisanych dla klonów limfocytów T mysich CD4 +ve przez Mosmann i Coffman (Mosmann, T. R. i Coffman, R.L. (1989) TH1 and TH2 cells: different patterns of lymphokine secretion lead to different functional properties. Annual Review of Immunology, 7, str. 145-173). Tradycyjnie odpowiedzi typu TH1 są związane z produkcją cytokin INF-γ przez limfocyty T. Inne cytokiny, często wiązane bezpośrednio z indukcją odpowiedzi immunologicznej typu TH1, nie są wytwarzane przez komórki T, tak jak IL-12. Kontrastuje z tym fakt, że odpowiedzi typu TH2 są związane z sekrecją IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 oraz czynnika martwicy nowotworu-β-β (TNF-(e).
Wiadomo, że pewne adiuwanty szczepionkowe nadają się szczególnie do stymulacji odpowiedzi cytokinowej typu TH1 albo TH2. Tradycyjnie najlepsze wskaźniki równowagi TH1:TH2 odpowiedzi immunologicznej po szczepieniu lub infekcji obejmują bezpośredni pomiar produkcji cytokin TH1 i TH2 przez limfocyty T in vitro po ponownej stymulacji antygenem i/lub pomiar (przynajmniej u myszy) stosunku odpowiedzi przeciwciał IgG1:IgG2a swoistych dla antygenu.
Adiuwantem typu TH1 jest zatem ten, który stymuluje wyizolowane populacje limfocytów T do wytwarzania wysokiego poziomu cytokin typu TH1 w wyniku restymulacji antygenem in vitro oraz wywołuje odpowiedź immunoglobulin swoistych dla antygenu, związaną z izotypem typu TH1.
Adiuwanty, które są zdolne do selektywnego stymulowania odpowiedzi komórkowej TH1 opisano w międzynarodowych zgłoszeniach patentowych nr WO 94/00153 i WO 95/17209.
de-O-acylowany monofosforylolipid A (3D-MPL) jest jednym z takich adiuwantów. Jest on znany z patentu GB-V2220211 (Ribi). Chemicznie jest on mieszaniną 3 de-O-acylowanego monofosforylolipidu A z 4, 5 lub 6 acylowanymi łańcuchami i jest wytwarzany przez Ribi Immunochem, Montana. Korzystną formę 3 de-O-acylowanego monofosforylolipidu A ujawniono w patencie europejskim EP-0689454B1 (SmithKline Beecham Biologicals SA).
Korzystnie cząstki 3D-MPL są na tyle małe, aby mogły być sterylnie filtrowane przez membranę 0,22 ąm (jak opisano w patencie europejskim EP-0689454). 3D-MPL będzie zawarty w kompozycji
PL 201 264 B1 w ilości w zakresie 10 ug -100 ug, korzystnie 25-50 ug na dawkę, w której antygen będzie zazwyczaj obecny w zakresie 2-50 ug na dawkę.
W kompozycji szczepionki według wynalazku obecny jest również nośnik. Nośnikiem może być sól glinu, taka jak fosforan glinu lub wodorotlenek glinu.
Antygeny kompozycji szczepionki według wynalazku łączone są z 3D-MPL i alumem.
Typowo w szczepionce do podawania ludziom, 3D-MPL będzie obecny w szczepionce w zakresie 1 ug -200 ug, na przykład 10-100 ug, korzystnie 10 ug - 50 ug na dawkę.
W jednym z korzystnych wykonań antygen HPV w kompozycji szczepionki według wynalazku zawiera L1, główne białko kapsydu HPV, i ewentualnie białko L2, szczególnie z HPV 16 i/lub HPV 18. W tym wykonaniu korzystną formą białka L1 jest skrócone białko L1. Korzystnie L1, ewentualnie fuzja L1-L2, przybiera formę cząstek wirusopodobnych (VLP). L1 można połączyć z innym białkiem HPV, w szczególności E7, co daje fuzję białkową L1-E7. Szczególnie korzystne są chimerowe VLP, zawierające L1-E lub L1-L2-E.
Białka według wynalazku korzystnie wyrażane są w E. coli. W korzystnym wykonaniu białka są wyrażane wraz z ogonem histydynowym, zawierającym od 5 do 9, korzystnie sześć reszt histydyny. Są one pożyteczne ułatwiając oczyszczanie. Opis wytwarzania takich białek jest w pełni przedstawiony w złożonym jednocześnie zgłoszeniu patentowym w Wielkiej Brytanii numer GB 9717953.5. Antygen HPV w kompozycji szczepionki może zostać zaadsorbowany na Al(OH)3.
W jednym z korzystnych aspektów kompozycja szczepionki wynalazku jest szczepionką poliwalentną, na przykład szczepionką cztero- lub pięciowalentną.
Kompozycje według niniejszego wynalazku bardzo skutecznie indukują odporność ochronną, nawet przy bardzo niskich dawkach antygenu (np. zaledwie 5 ug rgD2t).
Dostarczają doskonałej ochrony przeciw głównej infekcji i stymulują, co korzystne, zarówno specyficzną humoralną odpowiedź immunologiczną (przeciwciała neutralizujące), jak i odpowiedź immunologiczną, w której pośredniczą komórki efektorowe (DTH).
Wynalazek w swym kolejnym aspekcie, dostarcza kompozycji szczepionki, jak tu opisana, do stosowania w medycynie, a szczególnie w leczeniu lub profilaktyce infekcji ludzkim papillomawirusem.
Szczepionka według wynalazku będzie zawierała ilość antygenów zapewniającą ochronną odpowiedź immunologiczną i może być wytworzona za pomocą konwencjonalnych technik.
Wytwarzanie szczepionek jest opisane ogólnie w Pharmaceutical Biotechnology, Tom 61 Vaccine Design - the subunit and adjuvant approach, wydane przez Powell i Newman, Plenum Press, 1995. New Trends and Developments in Vaccines, wydane przez Voller i wsp., University Park Press, Baltimore, Maryland, U.S.A. 1978. Zamykanie w liposomach zostało opisane, na przykład, przez Fullerton, patent US-4235877. Dołączanie białek do makrocząsteczek jest ujawnione, na przykład, przez Likhite, patent US-4372945 i przez Armor i wsp., patent US-4474757.
Ilość białka w danej dawce szczepionki dobrano jako ilość, która wywołuje ochronną odpowiedź immunologiczną bez znaczących niekorzystnych efektów ubocznych u typowych osób zaszczepionych. Ilość ta będzie się zmieniać w zależności od zastosowania konkretnego immunogenu. Przewiduje się ogólnie, że każda dawka będzie zawierać 1-1000 ug białka, korzystnie 2-100 ug, najkorzystniej 4-40 ug. Ilość optymalna danej szczepionki może zostać określona w typowych badaniach obejmujących oznaczenie miana przeciwciał i innych odpowiedzi u pacjentów. Pacjenci mogą otrzymać dawkę przypominającą po około 4 tygodniach po szczepieniu początkowym.
Obok szczepienia osób podatnych na zakażenia HPV kompozycje farmaceutyczne według niniejszego wynalazku mogą być stosowane do leczenia, immunoterapeutycznie, pacjentów cierpiących na takie infekcje wirusowe.
Jeśli jest to konieczne, można dodać inne antygeny, w dowolnej kolejności, aby utworzyć poliwalentne kompozycje szczepionek, jak tu opisano.
Następujące przykłady ilustrują, ale nie ograniczają wynalazku.
P r z y k ł a d 1
Porównawcza immunogenność HPV Ags/HBs/gD w szczepionkach monowalentnych albo skojarzonych zawierających AS04
Wstęp
Badania immunogenności przeprowadzono u myszy Balb/C przy zastosowaniu czterech różnych antygenów:
1. Cząstki wirusopodobne HPV16 L1 (VLP-16)
2. Cząstki wirusopodobne HPV18 L1 (VLP18)
PL 201 264 B1
3. antygen gD z HSV-2
4. HBsAg sformułowane z alumem/3D-MPL (AS04) z zastosowaniem monowalentnego antygenu w dużej ilości antygenu albo 3D-MPL wstępnie zaadsorbowanych na Al(OH)3 lub AlPO4.
Kompozycje z 3D-MPL/Al(OH)3 są określane jako AS04D, podczas gdy kompozycje w oparciu o 3D-MPL/AlPO4 są określane jako AS04C.
Testowano następujące szczepionki:
1. VLP16 + VLP18 AS04D;
2. gD AS04D,
3. HBs AS04C i oceniano możliwość łączenia tych szczepionek.
Celem doświadczeń było porównanie immunogenności dwóch różnych kombinacji AS04 wytworzonych z:
1. VLP16 + VLP18 i gD.
2. VLP16 + VLP18 i gD oraz HBsAg
Protokół eksperymentalny jest w pełni opisany w części
Materiały i Metody.
W skrócie, grupy 10 myszy immunizowano domięśniowo dwukrotnie w odstępach 3 tygodni kompozycjami w oparciu o różne Ag. Odpowiedź przeciwciał na VLPs, gD i HBs Ag oraz profil izotypowy indukowany przez szczepienie śledzono w teście ELISA w dniu 14 post II. W tym samym punkcie czasowym analizowano wytwarzanie cytokin (IFNy/IL5) ) po restymulacji in vitro komórek śledziony antygenami VLPs, gD i HBs.
Materiały i metody
Formulacja
Formulacja kompozycji
VLP16, VLP18, gD i HBs sformułowano z 3D-MLP na soli glinu.
Użyte składniki
| Składnik | Stężenie | Bufor |
| HPV 16 VLP | 560 ąg/ml | Tris 20 mM/NaCl 500 mM |
| HPV 18 VLP | 550 ąg/ml | NaCl 500 mM/NaPO4 20 mM |
| Al(OH)3 | 10380 ng/ml | H2O |
| HBs | 1219 ąg/ml | PO4 10 mM/NaCl 150 mM |
| gD | 443 ąg/ml | PBS pH 7,4 |
| 3D-MPL | 1170 ąg/ml | Woda do iniekcji |
| AlPO4 | 5 mg/ml | NaCl 150 mM |
Adsorpcja
a) Adsorpcja VLP
Oczyszczoną partię VLP 16 i VLP 18 dodaje się do Al(OH)3 tak aby otrzymać stosunek 2 ąg VLP/10 ąg Al(OH)3. Mieszaninę przechowuje się w temperaturze między 2-8°C do przygotowania końcowej formulacji.
b) Adsorpcja gD ąg gD miesza się z 10 ąg Al(OH)3. Mieszaninę przechowuje się w temperaturze między 2-8°C do przygotowania końcowej formulacji.
c) Adsorpcja HBs ąg Hbs miesza się z 10 ąg AlPO4. Mieszaninę przechowuje się w temperaturze między 2-8°C do przygotowania końcowej formulacji.
d) Adsorpcja 3D-MPL ąg 3D-MPL miesza się z 10 ąg Al(OH)3. Mieszaninę przechowuje się w temperaturze między 2-8°C do przygotowania końcowej formulacji.
ąg 3D-MPL miesza się z 10 ąg AlPO4. Mieszaninę przechowuje się w temperaturze między 2-8°C aż do przygotowania końcowej formulacji.
PL 201 264 B1
Formulacja
H2O i NaCl miesza się (10 x zatężony) i po 10 minutach mieszania w temperaturze pokojowej dodaje się różne składniki: zaadsorbowany antygen, zaadsorbowany 3D-MPL i Al(OH)3 (patrz tabela poniżej). Wytrząsa się w temperaturze pokojowej przez 10 minut i przechowuje w 4°C aż do użycia do iniekcji.
| Antygen (y) | Immunostymulatory | Nośnik | ||||
| Grupa | Typ | μ9 | Typ | P9 | Typ | P9 |
| A | gD | 2 | Al(OH)3 | 10 | ||
| VLP16 | 2 | Al(OH)3 | 10 | |||
| VLP18 | 2 | Al(OH)3 | 10 | |||
| 3D-MPL | 5 | Al(OH)3 | 10 | |||
| Al(OH)3 | 10 | |||||
| B | gD | 2 | Al(OH)3 | 10 | ||
| VLP16 | 2 | Al(OH)3 | 10 | |||
| HPV18 | 2 | Al(OH)3 | 10 | |||
| HBs | 2 | AlPO4 | 10 | |||
| 3D-MPL | 5 | Al(OH)3 | 10 | |||
| C | gD | 2 | Al(OH)3 | 10 | ||
| 3D-MPL | 5 | Al(OH)3 | 10 | |||
| Al(OH)3 | 30 | |||||
| D | VLP16 | 2 | Al.(OH)3 | 10 | ||
| VLP18 | 2 | Al(OH)3 | 10 | |||
| 3D-MPL | 5 | Al(OH)3 | 10 | |||
| Al(OH)3 | 20 | |||||
| E | HBs | 2 | AlPO4 | 10 | ||
| 3D-MPL | 5 | Al(OH)3 | 10 | |||
| Al(OH)3 | 30 |
Serologia myszy
Serologia anty-VLP16 i anty-VLP18
Ocenę ilościową przeciwciał anty-VLP16 i anty-VLP18 przeprowadzono przy zastosowaniu testu ELISA używając jako antygeny opłaszczające VLP16 503/1 (20/12/99) i VLP18 504/2 (25/10/99F). Zastosowano 50 μΙ roztworu antygenu i przeciwciała na studzienkę. Antygen rozcieńczono do stężenia końcowego 0,5 μg/ml w PBS i adsorbowano przez noc w 4°C do ścianek studzienek 96-studzienkowych płytek do mikromiareczkowania (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dania). Płytki inkubowano następnie przez 1 godzinę w 37°C z PBS zawierającym 1% albuminę z surowicy bydlęcej. Dwukrotne rozcieńczenia surowicy (rozpoczynając od rozcieńczenia 1/400) w buforze wysycającym dodano do opłaszczonych VLP płytek i inkubowano przez 1,5 godziny w 37°C. Płytki przemyto czterokrotnie PBS 0,1% Tween 20 i do każdej studzienki dodano skoniugowane z biotyną anty-mysie Ig (Amersham, UK) rozcieńczone 1/1500 w buforze wysycającym i inkubowano przez 1,5 godziny w 37°C. Po etapie przemywania, dodano kompleks streptawidyna-biotynylowana peroksydaza (Amersham, UK) rozcieńczony 1/1000 w buforze wysycającym na dodatkowe 30 minut w 37°C. Płytki przemyto jak wyżej i inkubowano 20 minut z 0,04% roztworem o-fenylenodiaminy (Sigma), 0,03% H2O2 w 0,05 M buforze cytrynianowym pH 4,5 z 0,1% Tween 20. Reakcję zatrzymano 2N H2SO4 i odczytano przy 490/630 nm. Miana ELISA obliczono względem odnośnika przy użyciu SoftmaxPro (stosując równanie z czterema parametrami) i wyrażono jako EU/ml.
Odpowiedź anty-gD
Ocenę ilościową przeciwciał anty-gD przeprowadzono przy zastosowaniu testu ELISA używając gD (gD 43B318) jako antygenu opłaszczającego. Zastosowano 50 μl roztworu antygenu i przeciwciała na studzienkę. Antygen rozcieńczono do stężenia końcowego 1 μg/ml w PBS i zaadsorbowano przez noc w 4°C do ścianek studzienek 96-studzienkowych płytek do mikromiareczkowania (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dania). Płytki inkubowano następnie przez 1 godzinę w 37°C z PBS zawierającym 1% albuminę z surowicy bydlęcej i 0,1% Tween 20 (bufor wysycający 100 μl/studzienkę). Dwukrotne rozcieńczenia surowicy (rozpoczynając od rozcieńczenia 1/100) w buforze wysycającym dodano do opłaszczonych gD płytek i inkubowano przez 1,5 godziny w 37°C. Płytki przemyto czterokrotnie PBS
PL 201 264 B1 z 0,1% Tween 20 i do każdej studzienki dodawano skoniugowane z biotyną anty-mysie Ig, IgGl, IgG2a, IgG2b lub Ig (Amersham, UK) rozcieńczone 1/1000 w buforze wysycającym i inkubowano przez 1,5 godziny w 37°C. Po etapie przemywania, dodano kompleks streptawidyna-biotynylowana peroksydaza (Amersham, UK) rozcieńczony 1/1000 w buforze wysycającym na dodatkowe 30 minut w 37°C. Płytki przemyto jak wyżej i inkubowano 20 minut z 0,04% roztworem o-fenylenodiaminy (Sigma), 0,03% H2O2 w 0,05 M buforze cytrynianowym pH 4,5 z 0,1% Tween 20. Reakcję zatrzymano 2N H2SO4 i odczytano przy 490/630 nm. Miana ELISA obliczono względem odnośnika przy użyciu SoftmaxPro (stosując równanie z czterema parametrami) i wyrażono jako EU/ml.
Serologia anty-HBs
Ocenę ilościową przeciwciał anty-HBs przeprowadzono przy zastosowaniu testu ELISA używając HBs (Hep 286) jako antygenu opłaszczającego. Zastosowano 50 μΙ roztworów antygenu i przeciwciała na studzienkę. Antygen rozcieńczono do stężenia końcowego 1 μg/ml w PBS i zaadsorbowano przez noc w 4°C na ściankach studzienek 96-studzienkowych płytek do mikromiareczkowania (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dania). Płytki inkubowano następnie przez 1 godzinę w 37°C z PBS zawierającym 1% albuminę z surowicy bydlęcej i 0,1% Tween 20 (bufor wysycający). Dwukrotne rozcieńczenia surowicy (rozpoczynając od rozcieńczenia 1/100) w buforze wysycającym dodano do opłaszczonych HBs płytek i inkubowano przez 1,5 godziny w 37°C. Płytki przemyto czterokrotnie PBS z 0,1% Tween 20 i do każdej studzienki dodano skoniugowane z biotyną anty-mysie Ig (Amersham, UK) rozcieńczone 1/1500 lub IgG1, IgG2a, IgG2b (IMTECH, USA) rozcieńczone odpowiednio 1/4000, 1/8000, 1/4000, w buforze wysycającym i inkubowano przez 1,5 godziny w 37°C. Po etapie przemywania, dodano kompleks streptawidyna-biotynylowana peroksydaza (Amersham, UK) rozcieńczony 1/1000 w buforze wysycającym na dodatkowe 30 minut w 37°C. Płytki przemyto jak wyżej i inkubowano 20 minut z 0,04% roztworem o-fenylenodiaminy (Sigma), 0,03% H2O2 w 0,05 M buforze cytrynianowym pH 4,5 z 0,1% Tween 20. Reakcję zatrzymano 2N H2SO4 i odczytano przy 490/630 nm. Miana ELISA obliczono względem odnośnika przy użyciu SoftmaxPro (stosując równanie z czterema parametrami) i wyrażono jako EU/ml.
Wytwarzanie cytokin
Dwa tygodnie po drugiej immunizacji myszy zabito, pobrano aseptycznie śledziony i zgromadzono je w pule. Otrzymano zawiesiny komórkowe w pożywce RPMI 1640 (GIBCO) zawierającej 2 mM L-glutaminę, antybiotyki, 5x105 M 2-merkaptoetanol i 5% płodową surowicę cielęcą. Komórki hodowano przy końcowym stężeniu 5x106 komórek/ml w 1 ml w 24-sudzienkowych płaskodennych płytkach z różnymi stężeniami (10-1 μg/ml) każdego Ag (antygenu VLPs, gD lub HBs).
Supernatanty zebrano 96 godzin później i zamrażono do czasu testowania pod kątem obecności IFNy i IL5 przy zastosowaniu testu ELISA.
IFNy (Genzyme)
Ocenę ilościową IFNy przeprowadzono w teście ELISA stosując odczynniki z firmy Genzyme. Roztwór próbek i przeciwciała zastosowano w objętości 50 μl na studzienkę. 96-studzienkowe płytki do mikromiareczkowania (Maxisorb Immunoplate, Nunc, Dania) opłaszczono przez noc w 4°C 50 μl chomiczego anty-mysiego IFNy rozcieńczonego 1,5 μg/ml w buforze węglanowym pH 9,5. Płytki inkubowano następnie przez 1,5 godziny w 37°C z 100 μl PBS zawierającym 1% albuminę z surowicy bydlęcej i 0,1% Tween 20 (bufor wysycający). Dwukrotne rozcieńczenia supernatantu ze stymulacji in vitro (rozpoczynając od rozcieńczenia 1/2) w buforze wysycającym dodano do opłaszczonych anty-IFNy płytek i inkubowano przez 1,5 godziny w 37°C. Płytki przemyto 4 razy PBS z 0,1% Tween 20 (bufor do przemywania) i do każdej studzienki dodano skoniugowane z biotyną kozie anty-mysie IFNy rozcieńczone w buforze wysycającym do końcowego stężenia 0,5 ng/ml i inkubowano przez 1 godzinę w 37°C. Po etapie przemywania, dodano koniugat AMDEX (Amersham) rozcieńczony 1/10000 w buforze wysycającym na 30 minut w 37°C. Płytki przemyto jak wyżej i inkubowano z 50 μl TMB (Biorad) przez 10 minut. Reakcję zatrzymano 0,4 N H2SO4 i odczytano przy 450/630 nm. Stężenia obliczono przy użyciu krzywej standardowej stosując SoftmaxPro (równanie z czterema parametrami) i wyrażono jako pg/ml.
IL5 (Pharmingen)
Ocenę ilościową IL5 przeprowadzono przy zastosowaniu testu ELISA używając odczynników z firmy Pharmingen. Roztwór próbek i przeciwciała zastosowano w objętości 50 μl na studzienkę. 96-studzienkowe płytki do mikromiareczkowania (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dania) opłaszczono przez noc w 4°C 50 μl szczurzego przeciwciała anty-mysia IL-5 rozcieńczonego do 1 μg/ml w buforze węglanowym pH 9,5. Płytki inkubowano następnie przez 1 godzinę w 37 C z 100 μl PBS zawierającym 1% albuminę z surowicy bydlęcej i 0,1% Tween 20 (bufor wysycający). Dwukrotne rozcieńczenia su8
PL 201 264 B1 pernatantu ze stymulacji in vitro (rozpoczynając od rozcieńczenia 1/2) w buforze wysycającym dodano do opłaszczonych anty-IL-5 płytek i inkubowano przez 1,5 godziny w 37°C. Płytki przemyto 4 razy PBS z 0,1% Tween 20 (bufor do przemywania) i do każdej studzienki dodano skoniugowane z biotyną szczurze anty-mysie IL5 rozcieńczone w buforze wysycającym do końcowego stężenia 1 ng/ml i inkubowano przez 1,5 godziny w 37°C. Po etapie przemywania, dodano koniugat AMDEX (Amersham) rozcieńczony 1/10000 w buforze wysycającym na 30 minut w 37°C. Płytki przemyto jak wyżej i inkubowano z 50 nl TMB (Biorad) przez 10 minut. Reakcję zatrzymano 0,4 N H2SO4 i odczytano przy 450/630 nm. Stężenia obliczono przy użyciu krzywej standardowej (zrekombinowana mysia IL-5) stosując SoftmaxPro (równanie z czterema parametrami) i wyrażono jako pg/ml.
Grupy
Grupy po 10 myszy Balb/C immunizowano domięśniowo następującymi formulacjami:
T a b e l a 1 Grupy i formulacje
| Grupa | Formulacja |
| A | VLP16 2 pg / VLP18 2 ng / gD 2 ng / 3D-MPL 5 ng / Al(OH)s 50 ng |
| B | vlp16 2 pg / vlp18 2 pg / HBs 2 pg / gD 2 pg / 3D-mpl 5 pg / ai(oh)3 40 pg / aipo4 10 pg |
| C | gD 2 pg / 3D-MPL 5 pg / Al(OH)a 50 pg |
| D | VLP16 2 pg / VLP18 2 pg / 3D-MPL 5 pg / Al(OH)s |
| E | HBs 2 pg / 3D-MPL 5 pg / AlPO4 10 pg / Al(OH)a 40 pg |
Szczegóły formulacji są opisane powyżej w części
Materiały i Metody
Wyniki
1. Serologia
a) Odpowiedź anty-VLP16:
Odpowiedzi humoralne (Ig) mierzono w teście ELISA stosując VLP16 503-1 (20/12/99) jako antygen opłaszczający.
Surowicę zanalizowano dnia 14 post II.
Na fig. 1 pokazano odpowiedzi przeciwciał Ig anty-VLP16 mierzone w poszczególnych surowicach dnia 14 post II.
Miana anty-VLP16 otrzymane po immunizacji kombinacją VLPs, gD i Ag HBs (Grupa B) były nieco niższe niż otrzymane bądź z kombinacją VLPs i gD (Grupa A) bądź monowalentną formulacją VLPs (grupa D) (GMT wynoszące odpowiednio 27578 versus 48105 EU/ml versus 44448 EU/ml). Przed analizą statystyczną wobec każdej populacji zastosowano test T-Grubbs dla wykluczenia danych. Dwie nieodpowiadające myszy w grupach A i D wyeliminowano z analizy.
Wykazano, że stosując test Student Newman Keuls zaobserwowane między grupami różnice nie są statystycznie istotne.
b) Odpowiedź anty-VLP18:
Odpowiedzi humoralne (Ig) mierzono w teście ELISA stosując VLP18 504-2 (25/10/99) jako antygen opłaszczający. Surowicę zanalizowano dnia 14 post II.
Na fig. 2 pokazano odpowiedzi przeciwciał Ig anty-VLP18 mierzone w poszczególnych surowicach z dnia 14 post II.
Miana anty-VLP18 otrzymane po immunizacji kombinacją VLPs, gD i Ag HBs (Grupa B) były tego samego rzędu wielkości co miana otrzymane bądź dla kombinacji VLPs i gD (Grupa A) bądź dla monowalentnej formulacji VLPs (grupa D) (GMT wynoszące odpowiednio 56078 versus 88786 EU/ml versus 76991 EU/ml).
Przed analizą statystyczną wobec każdej populacji zastosowano test T-Grubbs w celu wykluczenia danych. Dwie nieodpowiadające myszy w grupach A i D wyeliminowano z analizy.
Wykazano, że różnice te nie są statystycznie istotne przy zastosowaniu jednokierunkowej analizy wariancji.
c) Odpowiedź anty-gD:
Odpowiedzi humoralne (I g i izotypy) mierzono przy zastosowaniu testu ELISA stosując gD jako antygen opłaszczający. Surowicę analizowano 14 dnia post II.
PL 201 264 B1
Na fig. 3 pokazano odpowiedzi przeciwciał anty-gD mierzone w poszczególnych surowicach z 14 dnia post II.
Odnośnie do odpowiedzi anty-gD zaobserwowano niewielkie zmniejszenie dla GMT otrzymanego z kombinacją VLPs/ gD/HBs (Grupa B) w porównaniu z samym gD (Grupa C) bądź kombinacją VLPs/gD (grupa A) (GMT wynoszące 18631 versus 32675 EU/ml versus 27058 EU/ml). Przed analizą statystyczną wobec każdej populacji zastosowano test T-Grubbs dla wyeliminowania danych. Dwie nieodpowiadające myszy w grupach A i D wyeliminowano z analizy.
Przeprowadzono jednokierunkową analizę wariancji dla mian anty-gD po przekształceniu logarytmicznym danych post II. Nie zaobserwowano istotnych statystycznie różnic pomiędzy trzema kompozycjami.
Analizowany rozkład izotypowy w połączonych w pule surowicach był następujący:
| Rozkład izotypowy (%) | |||
| IgG1 | IgG2a | IgG2b | |
| Grupa A | 96 | 3 | 2 |
| Grupa B | 96 | 3 | 2 |
| Grupa C | 97 | 1 | 1 |
Nie zaobserwowano znaczących różnic w profilu izotypowym indukowanym przez te trzy kompozycje: w tych trzech grupach indukowana była głównie odpowiedź IgG1 (96-97% IgG1) jak przedstawiono w tabeli poniżej.
d) Odpowiedź anty-HBs:
Odpowiedzi humoralne (Ig i izotypy) zmierzono przy zastosowaniu testu ELISA wykorzystując HBsAg (Hep286) jako antygen opłaszczający. Zanalizowano surowicę z dnia 14 post II.
Na fig. 4 pokazano odpowiedzi przeciwciał anty-HBs zmierzone w poszczególnych surowicach dnia 14 post II.
Nieco niższą odpowiedź anty-HBs obserwuje się dla kombinacji z grupy B zawierającej antygeny VLPs, gD i HBs w porównaniu z samym HBs (grupa E) (GMT wynoszące 28996 EU/ml versus 20536 EU/ml).
Przeprowadzono jednokierunkową analizę wariancji dla mian anty-HBs po przekształceniu logarytmicznym danych post II. Nie zaobserwowano różnic statystycznie istotnych między grupą B (VLP/HBs/gD) versus grupa E (HBs AS04C) przy zastosowaniu testu Student Newman Keuls.
Analizowany rozkład izotypowy w połączonych w pule surowicach był następujący i nie wykazywał różnic pomiędzy 2 grupami z proporcją IgG2a zachowaną w szczepionce skojarzonej.
| Rozkład izotypowy (%) | |||
| IgG1 | IgG2a | IgG2b | |
| Grupa B | 54 | 24 | 21 |
| Grupa E | 56 | 23 | 21 |
2. Odpowiedź immunologiczna za pośrednictwem limfocytów
Odpowiedzi immunologiczne za pośrednictwem komórek (limfoproliferacja, wytwarzanie IFNy/IL5) oceniono dnia 14 post II po restymulacji komórek in vitro antygenami VLPs, gD lub HBs. Dla każdej grupy myszy utworzono pule z 5 narządów. Procedura eksperymentalna jest w pełni opisana w części
Materiały i Metody.
3. Wytwarzanie cytokin
a) Restymulacja in vitro przez VLP16 i VLP18
Na fig. 5 pokazano wytwarzanie cytokin monitorowane w komórkach śledziony po 96 godz. restymulacji in vitro przez VLP16.
Na fig. 6 pokazano wytwarzanie cytokin monitorowane w komórkach śledziony po 96 godzinach restymulacji in vitro przez VLP18.
Stosując do restymulacji 10 ug i 1 ug Ag dla żadnego z antygenów VLP nie zaobserwowano wyraźnego wpływu wielkości dawki na wytwarzanie obydwu cytokin.
PL 201 264 B1
Dla wszystkich kompozycji zaobserwowano wyraźny profil TH1.
T a b e l a 2
Stosunek IFN-y/IL-5 po restymulacji in vitro przez VLP16 i VLP18.
| Stosunek IFN / IL-5 | Grupa A | Grupa B | Grupa D |
| VLP16 10 ąg/ml | 5,2 | 8,9 | 11,8 |
| VLP16 1 ąg/ml | 15,1 | 14,3 | 16,5 |
| Stosunek IFN / IL-5 | Grupa A | Grupa B | Grupa D |
| VLP18 10 ąg/ml | 19,6 | 11,1 | 16,1 |
| VLP18 1 ąg/ml | 23,2 | 14,3 | 18,2 |
b) Restymulacja in vitro przez gD
Na fig. 7 pokazano wytwarzanie cytokin monitorowane w komórkach śledziony po 96 godzinach restymulacji in vitro przez antygen gD.
Nie zaobserwowano wyraźnego wpływu wielkości dawki przy zastosowaniu dawki 10 ąg i 1 ąg Ag do restymulacji.
IFN-γ jest wytwarzany w znacznie wyższych stężeniach w porównaniu z IL-5 (tabela 3) wskazując na wyraźny profil TH-1 odpowiedzi immunologicznej we wszystkich ocenianych grupach (szczepionka monowalentna versus skojarzona).
T a b e l a 3
Stosunek IFN-y/IL-5 po restymulacji in vitro przez gD.
| Stosunek IFN / IL-5 | Grupa A | Grupa B | Grupa C |
| gD 10 ąg/ml | 6,2 | 7,2 | 3,1 |
| gD 1 ąg/ml | 6,2 | 11,2 | 2,3 |
c) Restymulacja in vitro przez HBs
Na fig. 8 pokazano wytwarzanie cytokin monitorowane w komórkach śledziony po 96 godzinach restymulacji in vitro przez antygen HBs.
Dla grupy B obserwowano znaczący poziom wytwarzania IFN-γ, ale nie IL5. Jak pokazano w tabeli 2 zaobserwowano wyższy poziom wytwarzania IFN-γ dla grupy E w porównaniu z grupą B. Jednakże wyższe wartości tła dla IFNy zaobserwowano w grupie E (monowalentna HBs) dla kontroli bez antygenu przy restymulacji. Bardzo wysoki stosunek IFN-y/IL-5 zaobserwowano dla szczepionki monowalentnej wskazując, że indukowana jest mocna odpowiedź TH1. Podobnie, wysoki stosunek IFN-y/IL-5 zmierzono dla szczepionki skojarzonej potwierdzając zdolność tej kompozycji do indukowania również odpowiedzi TH-1.
T a b e l a 4
Stosunek IFN-y/IL-5 po restymulacji in vitro przez HBs
| Stosunek IFN / IL5 | Grupa B | Grupa E |
| HBs 10 ąg/ml | 15,8 | 65,3 |
| HBs 1 ąg/ml | 7,6 | 67,6 |
Wnioski
Wpływ kombinacji Ag VLPs/gD lub Ag VLPs/gD/HBs sformułowanych w AS04 na immunogenność oceniano na myszach Balb/C:
Odnośnie do analizy serologicznej, nie zaobserwowano ujemnego wpływu kombinacji Ag na serologię anty-VLPs, anty-gD i anty-HBs.
Kombinacja antygenów VLPs i gD lub VLPs, gD i HBs nie ma ujemnego wpływu na profil izotypowy i odpowiedzi przeciwciał wykazywane przez szczepionki monowalentne gD i HBs.
Przy ocenie cytokin, profil TH1 (stosunek IFN-y/IL-5) obserwowany dla każdej szczepionki monowalentnej potwierdzono w grupach, gdzie stosowano szczepionki skojarzone.
PL 201 264 B1
Claims (8)
1. Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu papillowirusowi, znamienna tym, że zawiera: HPV 16 L1 VLP, HPV 18 L1 VLP, wodorotlenek glinu i 3D MPL.
2. Kompozycja szczepionki według zastrz. 1, znamienna tym, że VLP są formułowane z wykorzystaniem wstępnie zaadsorbowanych dużych ilości monowalentnego antygenu lub 3D MPL na wodorotlenku glinu.
3. Komppozcjaszzczeionkiweeług zzstrz.1 albb 2, zznmieenntym. żż ooczszzczne dużż i I ości VLP 16 i VLP 18 dodano do wodorotlenku glinu dla otrzymania stosunku 2g VLP / 10g Al(OH)3.
4. Komppnzyja szzczeionki przzeiwwo Iugdkiemp ppailiowirugzwi, zznmieenn tym, żż ssłaad się z HPV 16 L1, HPV 18 L1, wodorotlenku glinu i 3D MPL.
5. HHV 16 L1 VLP,zznmieeny t ymi, żż j ess sto-mpłowese z θ^ρη! / 3D-MPL z weSonzzstaniem wstępnie zaadsorbowanych dużych ilości monowalentnego antygenu lub 3D MPL na wodorotlenku glinu lub APO4.
6. HHP 11 U WL^.zznmieeny tym, żż j ess Lto-mpłowese z zkju^pm 1 LD-MPL z weSo-zzstaniem wstępnie zaadsorbowanych dużych ilości monowalentnego antygenu lub 3D MPL na wodorotlenku glinu lub APO4.
Rysunki
PL 201 264 Β1
FIG. 2: Odpowiedź anty-VLPl 8 14 dnia post II Wyniki dla poszczególnych surowic (EU/ml)
Grupy
PL 201 264 Β1
FIG. 3: Odpowiedź anty-gD 14 dnia post II Wyniki dla poszczególnych surowic (EU/ml)
Grupy
PL 201 264 Β1
FIG. 4: Odpowiedź anty-HBs 14 dnia post II Wyniki dla poszczególnych surowic (EU/ml)
Grupy
PL 201 264 Β1
FIG. 5. Wyniki dla cytokin - dzień 14 post II
Wytwarzanie IFN-g po stymulacji in vitro przez VLP16
Grupy
Wytwarzanie EL-5 po stymulacji in vitro przez VLP16
PL 201 264 Β1
FIG. 6; Wyniki dla cytokin - dzień 14 post II
Wytwarzanie ŁFN-g po stymulacji in vitro przez VLP18
Grupy
PL 201 264 Β1
FIG.
7: Wyniki dla cytokin - dzień 14 post II
Wytwarzanie IFN-g po stymulacji in yjtro przez gD
Wytwarzanie IL-5 po stymulacji in yitro przez gD
PL 201 264 Β1
FIG.
8. Wyniki dla cytokin - dzień 14 post II
Wytwarzanie IFN-g po stymulacji in vitro przez HBs
E
CO co ź
Ll
Grupy
Wytwarzanie IL-5 po stymulacji in vitro przez HBs
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB9921146A GB9921146D0 (en) | 1999-09-07 | 1999-09-07 | Novel composition |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL201264B1 true PL201264B1 (pl) | 2009-03-31 |
Family
ID=10860520
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL362069A PL201264B1 (pl) | 1999-09-07 | 2000-09-07 | Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkiemu papillowirusowi i HPV 16L1VLP i HPV 18LI VLP |
| PL354039A PL201767B1 (pl) | 1999-09-07 | 2000-09-07 | Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkim papillomawirusom i wirusowi opryszczki |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL354039A PL201767B1 (pl) | 1999-09-07 | 2000-09-07 | Kompozycja szczepionki przeciwko ludzkim papillomawirusom i wirusowi opryszczki |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US6936255B1 (pl) |
| EP (3) | EP1210113B1 (pl) |
| JP (2) | JP4689910B2 (pl) |
| KR (2) | KR100594668B1 (pl) |
| CN (2) | CN100389824C (pl) |
| AR (1) | AR025502A1 (pl) |
| AT (2) | ATE321569T1 (pl) |
| AU (1) | AU766494B2 (pl) |
| BR (1) | BR0014171A (pl) |
| CA (2) | CA2384064C (pl) |
| CO (1) | CO5280045A1 (pl) |
| CY (2) | CY1107457T1 (pl) |
| CZ (2) | CZ2002843A3 (pl) |
| DE (2) | DE60024893T2 (pl) |
| DK (2) | DK1410805T3 (pl) |
| ES (2) | ES2253636T3 (pl) |
| GB (1) | GB9921146D0 (pl) |
| GC (1) | GC0000201A (pl) |
| HK (1) | HK1048435B (pl) |
| HU (2) | HU228687B1 (pl) |
| IL (3) | IL158107A0 (pl) |
| MX (1) | MXPA02002484A (pl) |
| MY (2) | MY142842A (pl) |
| NO (3) | NO332800B1 (pl) |
| NZ (2) | NZ517621A (pl) |
| PL (2) | PL201264B1 (pl) |
| PT (1) | PT1210113E (pl) |
| SG (1) | SG110072A1 (pl) |
| SI (2) | SI1210113T1 (pl) |
| TR (1) | TR200200607T2 (pl) |
| TW (1) | TWI258374B (pl) |
| WO (1) | WO2001017551A2 (pl) |
| ZA (2) | ZA200306402B (pl) |
Families Citing this family (74)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6207646B1 (en) | 1994-07-15 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
| US20060029617A1 (en) * | 1997-10-03 | 2006-02-09 | Charreyre Catherine E | Porcine circovirus and Helicobacter combination vaccines and methods of use |
| FR2772047B1 (fr) | 1997-12-05 | 2004-04-09 | Ct Nat D Etudes Veterinaires E | Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection |
| ATE335510T1 (de) | 1998-05-22 | 2006-09-15 | Ottawa Health Research Inst | Methoden und produkte zur induzierung mukosaler immunität |
| CZ301212B6 (cs) | 1998-10-16 | 2009-12-09 | Smithkline Beecham Biologicals S. A. | Vakcinacní prostredek |
| US20050002958A1 (en) * | 1999-06-29 | 2005-01-06 | Smithkline Beecham Biologicals Sa | Vaccines |
| GB9921147D0 (en) | 1999-09-07 | 1999-11-10 | Smithkline Beecham Biolog | Novel composition |
| EP1243655B1 (en) * | 2001-03-23 | 2007-02-21 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts | Modified HPV E6 and E7 genes and proteins useful for vaccination |
| GB0110431D0 (en) * | 2001-04-27 | 2001-06-20 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Novel compounds |
| GB0206360D0 (en) * | 2002-03-18 | 2002-05-01 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Viral antigens |
| PT1506222E (pt) † | 2002-05-17 | 2009-06-12 | Univ Cape Town | Proteínas l1 quiméricas do papilomavírus humano 16 incluindo um péptido l2, partículas semelhantes a vírus preparadas a partir daquelas e um método de preparação das partículas |
| AU2003254585A1 (en) | 2002-07-24 | 2004-02-16 | Intercell Ag | Antigens encoded by alternative reading frame from pathogenic viruses |
| EP1537418A2 (en) | 2002-09-13 | 2005-06-08 | Intercell AG | Method for isolating hepatitis c virus peptides |
| MXPA05004588A (es) | 2002-10-29 | 2005-12-14 | Coley Pharmaceutical Group Ltd | Metodos y productos relacionados con el tratamiento y prevencion de infeccion de virus de hepatitis c. |
| WO2004053104A2 (en) | 2002-12-11 | 2004-06-24 | Coley Pharmaceutical Group, Inc. | 5’ cpg nucleic acids and methods of use |
| JP5475939B2 (ja) * | 2002-12-20 | 2014-04-16 | グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | Ｈｐｖ−１６およびｈｐｖ−１８ｌ１ｖｌｐワクチン |
| SI1572233T1 (sl) * | 2002-12-20 | 2011-07-29 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Uporaba HPV16 in HPV18 kot cepivo proti enemu ali več onkogenih HPV tipa 31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,66,68 |
| US7858098B2 (en) * | 2002-12-20 | 2010-12-28 | Glaxosmithkline Biologicals, S.A. | Vaccine |
| CN100355453C (zh) * | 2003-03-24 | 2007-12-19 | 英特塞尔股份公司 | 改进的疫苗 |
| DE602004029657D1 (de) | 2003-03-24 | 2010-12-02 | Intercell Ag | Verbesserte impfstoffe |
| GB0413510D0 (en) * | 2004-06-16 | 2004-07-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
| US7758866B2 (en) * | 2004-06-16 | 2010-07-20 | Glaxosmithkline Biologicals, S.A. | Vaccine against HPV16 and HPV18 and at least another HPV type selected from HPV 31, 45 or 52 |
| JP2008502633A (ja) * | 2004-06-16 | 2008-01-31 | グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | Ｈｐｖ１６およびｈｐｖ１８ならびにｈｐｖ３１、４５または５２から選ばれる少なくとも１つの別のｈｐｖ型に対するワクチン |
| US7833707B2 (en) | 2004-12-30 | 2010-11-16 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Methods of overexpression and recovery of porcine circovirus type 2 ORF2 |
| EP1850871A2 (en) * | 2005-02-16 | 2007-11-07 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Adjuvant composition comprising aluminium phosphate and 3d-mpl |
| JP4182074B2 (ja) | 2005-03-03 | 2008-11-19 | ファナック株式会社 | ハンド及びハンドリングロボット |
| EP1863529A1 (en) * | 2005-03-23 | 2007-12-12 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Novel composition |
| SG159529A1 (en) * | 2005-04-26 | 2010-03-30 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
| EP1877086A2 (en) * | 2005-04-26 | 2008-01-16 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Vaccine |
| TWI457133B (zh) | 2005-12-13 | 2014-10-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | 新穎組合物 |
| US7790203B2 (en) * | 2005-12-13 | 2010-09-07 | Lowder Tom R | Composition and regimen for the treatment of herpes simplex virus, herpes zoster, and herpes genitalia epidermal herpetic lesions |
| DK2371383T3 (en) | 2005-12-29 | 2015-11-30 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Use of a PCV2 immunogenic composition for reduction of clinical symptoms in pigs |
| EP3320919B1 (en) | 2005-12-29 | 2020-05-27 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Multivalent pcv2 immunogenic compositions and methods of producing such compositions |
| US20090246220A1 (en) | 2006-08-28 | 2009-10-01 | Ertl Hildegund C J | Constructs for enhancing immune responses |
| US20090181078A1 (en) | 2006-09-26 | 2009-07-16 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
| US8273361B2 (en) | 2006-09-26 | 2012-09-25 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
| EP1941903A1 (en) | 2007-01-03 | 2008-07-09 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Prophylaxis and treatment of PRDC |
| EP1958644A1 (en) | 2007-02-13 | 2008-08-20 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Prevention and treatment of sub-clinical pcvd |
| WO2008112125A1 (en) | 2007-03-09 | 2008-09-18 | Merck & Co., Inc. | Papillomavirus vaccine compositions |
| WO2009001867A1 (ja) * | 2007-06-26 | 2008-12-31 | Japan Health Sciences Foundation | 高リスク群ヒトパピローマウイルスに対する交差性中和抗体を誘導するワクチン抗原 |
| US7829274B2 (en) | 2007-09-04 | 2010-11-09 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Reduction of concomitant infections in pigs by the use of PCV2 antigen |
| KR101507822B1 (ko) | 2008-06-04 | 2015-04-24 | 잇빤 자이단호진 가가쿠오요비겟세이료호겐쿠쇼 | 불활성화 일본 뇌염 바이러스 입자를 어쥬번트로서 사용하는 방법 |
| RS53607B1 (sr) * | 2008-07-31 | 2015-04-30 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vakcina protiv hpv |
| CN106924728B (zh) * | 2009-05-22 | 2021-02-05 | 健诺西生物科学公司 | 针对ⅱ型单纯疱疹病毒的疫苗：诱发免疫应答的组合物和方法 |
| LT2437753T (lt) | 2009-06-05 | 2016-12-12 | Infectious Disease Research Institute | Sintetiniai gliukopiranozillipidų adjuvantai ir juos turinčios vakcinų kompozicijos |
| AU2009348078B2 (en) * | 2009-06-19 | 2013-03-14 | Eyegene Inc. | Vaccine for cervical cancer |
| PE20120563A1 (es) * | 2009-06-25 | 2012-05-17 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Construcciones novedosas de proteina del virus de papiloma humano (hpv) y su uso en la prevencion de la enfermedad por el hpv |
| AR078253A1 (es) | 2009-09-02 | 2011-10-26 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Metodos para reducir la actividad antivirica en composiciones pcv-2 y composiciones pcv-2 con mejor inmunogenicidad |
| JP6034285B2 (ja) * | 2010-05-28 | 2016-11-30 | ゾエティス・ベルジャム・エス・アー | 抗原および免疫調節ワクチンおよびコレステロール、ならびにその使用 |
| UA112970C2 (uk) * | 2010-08-05 | 2016-11-25 | Мерк Шарп Енд Доме Корп. | Інактивований вірус вітряної віспи, спосіб його одержання і застосування |
| CA2808285C (en) * | 2010-08-27 | 2016-09-06 | Intervet International B.V. | Potency test for vaccine formulations |
| CN102008721A (zh) * | 2010-11-16 | 2011-04-13 | 浙江大学 | 一种hpv多肽/dc混合疫苗及其制备 |
| WO2012074881A2 (en) | 2010-11-24 | 2012-06-07 | Genocea Biosciences, Inc. | Vaccines against herpes simplex virus type 2: compositions and methods for eliciting an immune response |
| WO2012141984A1 (en) | 2011-04-08 | 2012-10-18 | Immune Design Corp. | Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses |
| CN102210858B (zh) * | 2011-05-18 | 2013-05-08 | 北京科兴生物制品有限公司 | 一种肠道病毒71型与甲型肝炎联合疫苗 |
| WO2012177970A1 (en) | 2011-06-24 | 2012-12-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Hpv vaccine formulations comprising aluminum adjuvant and methods of producing same |
| WO2013006569A2 (en) * | 2011-07-01 | 2013-01-10 | The Regents Of The University Of California | Herpes virus vaccine and methods of use |
| JP6199878B2 (ja) | 2011-11-23 | 2017-09-20 | ジェノセア バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド | 単純ヘルペスウイルス２型に対する核酸ワクチン：免疫応答を誘発する組成物及び方法 |
| US11510875B2 (en) | 2012-02-07 | 2022-11-29 | Access To Advanced Health Institute | Adjuvant formulations comprising TLR4 agonists and methods of using the same |
| LT2850431T (lt) | 2012-05-16 | 2018-06-25 | Immune Design Corp. | Vakcinos, skirtos hsv-2 |
| US9624510B2 (en) | 2013-03-01 | 2017-04-18 | The Wistar Institute | Adenoviral vectors comprising partial deletions of E3 |
| KR102039520B1 (ko) | 2013-04-18 | 2019-11-01 | 이뮨 디자인 코포레이션 | 암 치료에 이용하기 위한 gla 단일요법 |
| US9463198B2 (en) | 2013-06-04 | 2016-10-11 | Infectious Disease Research Institute | Compositions and methods for reducing or preventing metastasis |
| IL310015B1 (en) | 2013-12-31 | 2025-10-01 | Access To Advanced Health Inst | Single vial formulation |
| CN109804075A (zh) | 2016-08-01 | 2019-05-24 | 威斯塔解剖学和生物学研究所 | 用于疫苗应用的复制缺陷型腺病毒载体的组合物和方法 |
| WO2018064232A1 (en) | 2016-09-28 | 2018-04-05 | Genocea Biosciences, Inc. | Methods and compositions for treating herpes |
| CN107987159B (zh) * | 2017-11-28 | 2021-06-22 | 上海药明生物医药有限公司 | 一种使用大剂量dna免疫技术免疫动物使血清中抗体滴度提高的方法 |
| GB201821207D0 (en) * | 2018-12-24 | 2019-02-06 | Tcer Ab | Immunotherapy therapy |
| CN114340665A (zh) | 2019-05-25 | 2022-04-12 | 传染病研究所 | 用于对佐剂疫苗乳剂进行喷雾干燥的组合物和方法 |
| CN110576034B (zh) * | 2019-10-09 | 2020-06-30 | 北京尚华生态环保科技股份公司 | 一种土壤原位修复方法 |
| CN110652980B (zh) * | 2019-10-09 | 2020-06-30 | 北京尚华生态环保科技股份公司 | 一种土壤原位修复剂 |
| WO2021097347A1 (en) | 2019-11-15 | 2021-05-20 | Infectious Disease Research Institute | Rig-i agonist and adjuvant formulation for tumor treatment |
| CN114681602B (zh) * | 2020-12-25 | 2023-12-01 | 中国食品药品检定研究院 | 一种双价人乳头瘤病毒疫苗 |
| CN114796479A (zh) * | 2022-06-02 | 2022-07-29 | 金宇保灵生物药品有限公司 | 一种畜类动物疫苗用水包油包水佐剂及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH085804B2 (ja) | 1988-04-28 | 1996-01-24 | 財団法人化学及血清療法研究所 | Ａ型及びｂ型肝炎混合アジュバントワクチン |
| GB9113809D0 (en) * | 1991-06-26 | 1991-08-14 | Cancer Res Campaign Tech | Papillomavirus l2 protein |
| DK1298211T3 (da) * | 1991-07-19 | 2006-11-13 | Univ Queensland | Polynukleotidsegment af HPV16-genom |
| US5618536A (en) * | 1992-09-03 | 1997-04-08 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Chimeric papillomavirus-like particles |
| US5437951A (en) * | 1992-09-03 | 1995-08-01 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Self-assembling recombinant papillomavirus capsid proteins |
| ES2162139T5 (es) | 1993-03-23 | 2008-05-16 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Composiciones de vacuna que contienen monofosforil-lipido a 3-o-desacilado. |
| GB9326253D0 (en) * | 1993-12-23 | 1994-02-23 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
| GB9409962D0 (en) * | 1994-05-18 | 1994-07-06 | Smithkline Beecham Biolog | Novel compounds |
| CA2211995A1 (en) * | 1995-02-24 | 1996-08-29 | Cantab Pharmaceuticals Research Limited | Polypeptides useful as immunotherapeutic agents and methods of polypeptide preparation |
| CA2242200A1 (en) * | 1996-01-26 | 1997-07-31 | Innogenetics N.V. | Toxoplasma gondii antigen tg20 |
| KR100365986B1 (ko) * | 1996-02-09 | 2003-02-20 | 스미스클라인 비이참 바이오로지칼즈 에스.에이. | 수두대상포진바이러스유전자63생성물에대한백신 |
| GB9711990D0 (en) * | 1997-06-11 | 1997-08-06 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| GB9717953D0 (en) * | 1997-08-22 | 1997-10-29 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| CA2229955C (en) * | 1998-02-20 | 2003-12-09 | Medigene Gmbh | Papilloma virus capsomere vaccine formulations and methods of use |
| KR20010041629A (ko) * | 1998-03-09 | 2001-05-25 | 장 스테판느 | 혼합 백신 조성물 |
| US6500284B1 (en) | 1998-06-10 | 2002-12-31 | Suraltech, Inc. | Processes for continuously producing fine grained metal compositions and for semi-solid forming of shaped articles |
| GB9819898D0 (en) | 1998-09-11 | 1998-11-04 | Smithkline Beecham Plc | New vaccine and method of use |
| CZ301212B6 (cs) | 1998-10-16 | 2009-12-09 | Smithkline Beecham Biologicals S. A. | Vakcinacní prostredek |
| PT1150712E (pt) * | 1999-02-05 | 2008-12-22 | Merck & Co Inc | Formulações para a vacina do vírus do papiloma humano |
| GB9921147D0 (en) * | 1999-09-07 | 1999-11-10 | Smithkline Beecham Biolog | Novel composition |
-
1999
- 1999-09-07 GB GB9921146A patent/GB9921146D0/en not_active Ceased
-
2000
- 2000-09-05 MY MYPI20033661A patent/MY142842A/en unknown
- 2000-09-05 AR ARP000104636 patent/AR025502A1/es active IP Right Grant
- 2000-09-05 CO CO00066605A patent/CO5280045A1/es not_active Application Discontinuation
- 2000-09-05 MY MYPI20004083A patent/MY130084A/en unknown
- 2000-09-06 GC GCP2000892 patent/GC0000201A/en active
- 2000-09-07 IL IL15810700A patent/IL158107A0/xx unknown
- 2000-09-07 CN CNB008154244A patent/CN100389824C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-09-07 DE DE2000624893 patent/DE60024893T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-07 EP EP20000967654 patent/EP1210113B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-07 DK DK03078635T patent/DK1410805T3/da active
- 2000-09-07 BR BR0014171A patent/BR0014171A/pt not_active IP Right Cessation
- 2000-09-07 ES ES03078635T patent/ES2253636T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-07 EP EP20060075129 patent/EP1769806A3/en not_active Withdrawn
- 2000-09-07 EP EP20030078635 patent/EP1410805B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-07 ES ES00967654T patent/ES2261243T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-07 CZ CZ2002843A patent/CZ2002843A3/cs unknown
- 2000-09-07 ZA ZA200306402A patent/ZA200306402B/xx unknown
- 2000-09-07 JP JP2001521339A patent/JP4689910B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2000-09-07 KR KR1020037013500A patent/KR100594668B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-07 PL PL362069A patent/PL201264B1/pl unknown
- 2000-09-07 CA CA 2384064 patent/CA2384064C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-09-07 CA CA 2443214 patent/CA2443214C/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-07 US US10/070,479 patent/US6936255B1/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-09-07 WO PCT/EP2000/008784 patent/WO2001017551A2/en not_active Ceased
- 2000-09-07 KR KR1020027003023A patent/KR100557665B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2000-09-07 CN CNB2004100489635A patent/CN1325117C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-07 SI SI200030859T patent/SI1210113T1/sl unknown
- 2000-09-07 DK DK00967654T patent/DK1210113T3/da active
- 2000-09-07 NZ NZ517621A patent/NZ517621A/en unknown
- 2000-09-07 AU AU77751/00A patent/AU766494B2/en not_active Ceased
- 2000-09-07 HK HK02108383.6A patent/HK1048435B/en not_active IP Right Cessation
- 2000-09-07 DE DE2000627029 patent/DE60027029T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-09-07 HU HU0202804A patent/HU228687B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2000-09-07 MX MXPA02002484A patent/MXPA02002484A/es active IP Right Grant
- 2000-09-07 PT PT00967654T patent/PT1210113E/pt unknown
- 2000-09-07 CZ CZ20032326A patent/CZ302811B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-09-07 NZ NZ52756000A patent/NZ527560A/xx not_active IP Right Cessation
- 2000-09-07 PL PL354039A patent/PL201767B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2000-09-07 SG SG200305672A patent/SG110072A1/en unknown
- 2000-09-07 AT AT00967654T patent/ATE321569T1/de active
- 2000-09-07 AT AT03078635T patent/ATE312624T1/de active
- 2000-09-07 SI SI200030796T patent/SI1410805T1/sl unknown
- 2000-09-07 IL IL14845600A patent/IL148456A0/xx not_active IP Right Cessation
- 2000-09-07 HU HU0303215A patent/HU229099B1/hu unknown
- 2000-09-07 TR TR200200607T patent/TR200200607T2/xx unknown
- 2000-09-19 TW TW92125370A patent/TWI258374B/zh not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-03-05 ZA ZA200201810A patent/ZA200201810B/xx unknown
- 2002-03-06 NO NO20021116A patent/NO332800B1/no not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-08-20 JP JP2003296403A patent/JP2004067696A/ja active Pending
- 2003-08-21 NO NO20033715A patent/NO331825B1/no not_active IP Right Cessation
- 2003-09-25 IL IL158107A patent/IL158107A/en active IP Right Grant
- 2003-12-12 US US10/734,857 patent/US7101560B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2006
- 2006-02-01 CY CY061100126T patent/CY1107457T1/el unknown
- 2006-06-05 CY CY20061100713T patent/CY1106090T1/el unknown
- 2006-06-29 US US11/477,879 patent/US7220551B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2012
- 2012-10-08 NO NO2012016C patent/NO2012016I1/no unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4689910B2 (ja) | 新規組成物 | |
| JP4510283B2 (ja) | 併合ワクチン組成物 | |
| JP4694745B2 (ja) | 新規組成物 | |
| AU2003236490B2 (en) | Novel composition | |
| HK1107519A (en) | Vaccine against hpv | |
| HK1099204A (en) | Vaccine against hbv and hpv |