NO823619L - Fremgangsmaate ved kvantitativ bestemmelse av blodkoaguleringsfaktor xii i menneskeplasma - Google Patents
Fremgangsmaate ved kvantitativ bestemmelse av blodkoaguleringsfaktor xii i menneskeplasmaInfo
- Publication number
- NO823619L NO823619L NO823619A NO823619A NO823619L NO 823619 L NO823619 L NO 823619L NO 823619 A NO823619 A NO 823619A NO 823619 A NO823619 A NO 823619A NO 823619 L NO823619 L NO 823619L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- factor
- plasma
- ylamino
- nitro
- factor xii
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 239000008280 blood Substances 0.000 title 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims abstract description 23
- 102000000429 Factor XII Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 108010080865 Factor XII Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 8
- -1 4-hydroxybenzylmethyl residue Chemical group 0.000 claims description 7
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 5
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 5
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 claims description 5
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 claims description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 5
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 claims description 3
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 3
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 claims description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 3
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- AFSDNFLWKVMVRB-UHFFFAOYSA-N Ellagic acid Chemical compound OC1=C(O)C(OC2=O)=C3C4=C2C=C(O)C(O)=C4OC(=O)C3=C1 AFSDNFLWKVMVRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ATJXMQHAMYVHRX-CPCISQLKSA-N Ellagic acid Natural products OC1=C(O)[C@H]2OC(=O)c3cc(O)c(O)c4OC(=O)C(=C1)[C@H]2c34 ATJXMQHAMYVHRX-CPCISQLKSA-N 0.000 claims description 2
- 229920002079 Ellagic acid Polymers 0.000 claims description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 2
- 125000004210 cyclohexylmethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 2
- 229960002852 ellagic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 235000004132 ellagic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 2
- FAARLWTXUUQFSN-UHFFFAOYSA-N methylellagic acid Natural products O1C(=O)C2=CC(O)=C(O)C3=C2C2=C1C(OC)=C(O)C=C2C(=O)O3 FAARLWTXUUQFSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011651 chromium Substances 0.000 claims 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 108010071241 Factor XIIa Proteins 0.000 abstract 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 6
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CFWRDBDJAOHXSH-SECBINFHSA-N 2-azaniumylethyl [(2r)-2,3-diacetyloxypropyl] phosphate Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](OC(C)=O)COP(O)(=O)OCCN CFWRDBDJAOHXSH-SECBINFHSA-N 0.000 description 2
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical group NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 108010074506 Transfer Factor Proteins 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 2
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Substances C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 1
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000113 Plasma Kallikrein Proteins 0.000 description 1
- 102000003827 Plasma Kallikrein Human genes 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- DEKPYXUDJRABNK-UHFFFAOYSA-N dimethyl 5-aminobenzene-1,3-dicarboxylate Chemical compound COC(=O)C1=CC(N)=CC(C(=O)OC)=C1 DEKPYXUDJRABNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 1
- 229950003188 isovaleryl diethylamide Drugs 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 1
- WCYWZMWISLQXQU-UHFFFAOYSA-N methyl Chemical compound [CH3] WCYWZMWISLQXQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000405 phenylalanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 125000002233 tyrosyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002114 valyl group Chemical group 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/56—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving blood clotting factors, e.g. involving thrombin, thromboplastin, fibrinogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2337/00—N-linked chromogens for determinations of peptidases and proteinases
- C12Q2337/10—Anilides
- C12Q2337/12—Para-Nitroanilides p-NA
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/95—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99)
- G01N2333/964—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue
- G01N2333/96425—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals
- G01N2333/96427—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general
- G01N2333/9643—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general with EC number
- G01N2333/96433—Serine endopeptidases (3.4.21)
- G01N2333/96441—Serine endopeptidases (3.4.21) with definite EC number
- G01N2333/96458—Factor XII (3.4.21.38)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte ved kvantitativ bestemmelse av koaguleringsfaktor XII (Hagemann
tpr) i humanplasma ved aktivering av faktor XII (proenzym)
som er tilstede i plasmaet, til faktor Xlla (enzym), og direkte omsetter sistnevnte med et substrat som kan spalies enzymatisk.
Faktor XII er den første faktor som aktiveres i den endogene blodkoaguleringsrekkefølge. Fordi denne faktor spiller en nøkkelrolle ikke bare i koaguleringssystemet, men også i kallikrein-kininsystemet og i det fibrinolytiske system,
er det viktig å ha midler for kvantitativ bestemmelse av
denne faktor i blodplasma. Den målemetode som hyppigst anvendes består i å inkubere en plasmaprøve med kaolin for å
gi en maksimum aktivering av Hageman faktoren, inkubere akti--véringsblandingen med plasma som mangler.Hagaman faktor, rékalisfisere inkuberingsblandingen etter en forutbestemt tid ved tilsetning av kalsiumioner og måle koagulerings^-tiden for denne rekalsifiserte blanding. Koaguleringstidén er en omtrentlig funksjon av konsentrasjonen av Hageman
faktoren i orøven (se f.eks. Oscar D. Ratnoff i "Thrombosis j ' ■ 1 i I an1 d Bleeding Disorders", 1971, Georg Thieme Verlag, Stutti - ;!igart, Germany, sidene 215-218) . Denne målemetoden ligger i atj måI n måler en verdi som stammer fra en lang ' rekke følger avi j I re! aksjoner og derfor avhenger av et stort antall reaksjohI s.-■parametre. En ytterligere vanskelighet kommer av at plasma 1 [soim mangler Hageman faktor og er nødvendig for o<p>pstilling jav kalibreringskurver er meget knapt tilgjengelige.
i
!Man har nå funnet at denne enzymatiske aktiviteten til i
I
i faktor Xlla som dannes fra faktor XII kan males direkte og | i . ■ I kvi antitativt i blodplasma ved å bruke bestemte kromoaeneI tripeptidderivater som substrater som kan spaltes. !
i Fremgangsmåten ifølge, oppfinnelsen består i a behandle plasma med en aktivator for å overføre faktor XII som er I
I
tilstede i plasma i faktor Xlla, og omsette sistnevnte med et tripeptidderivat med den generelle formel:
i.. i
hvor jR betyr en kromogen eller fluorogen substituert aminogrup-1 pe som kan avspaltes enzymatisk,
2 3
IR| betyr hydrogen, R betyr en rettkjedet eller forgrenet I alkylrest med 1-4 karbonatomer eller en benzyl, p-hydroksybenzy1, cvkloheksylmetyl eller 4-hydroksybensyl-4*5- I ;metylrest og R og R betyr hydrogen eller;iR^ I betyr hydrogen og R^ og R"* tilsa3 mmen betyr en alkylrIest
■ med 3 eller 4 karbonatomer og R har ovenfor angitte be-1 tydning, eller
2 3 ! i ■ iRj og R tilsammen betyr en alkylenrest med 3 eller 4 karbon-i atomer, Ri betyr hydrogen og R har samme betydning som R , eller ;
i ■ med et salt derav med en syre, og måle mengden av farget ;eller fluoriserende spaltningsprodukt R H som frigjøres en-
■ zymatisk fra tripeptidderivatet med faktor Xlla ved ' l fotometriske, spektrofotometriske eller fluoresens-: ' i 1 I spektrofotom' etriske metoder. • 'iii Kaolin eller et preparat som inneholder sefalin og allagin- ;
■ ' ' 'I . i syre kan f. eks. brukes som aktivator. Aktiveringen av faktor, XII er lett å utføre ved ca. 0°C. Omsetningen av faktor klia jmed tripeptidderivatet utføres fortrinnsvis i nærvær av soya-jbønner trypsin inhibitor i et buffersystem ved endH på 7,41
i8,0, fortrinnsvis 7,7 og ved en ionestyrke på 0,025-0,2,
<,><.>i[fortrinnsvis 0,05. i ii- ! il i i ! :Saltene av tripeptidderivatene kan være salter med mineral- ! .syrer, f.eks. HC1, HBr, H2S04eller H^PO^, eller med en pr- j !ganisk syre, f.eks. maursyre, eddikksyre, propionsyre, melké-
i syre, sitronsyre, oksalsyre, vinsyre, benzoinsyre, pftalsyre, i I I ! t! ii rikloreddiksyre eller tri fluoreddiksyre. iIi
ITripeptidderivatene som brukes ifølge oppfinnelsen kan frem-jstilles på i og for seg kjente metoder. j
! Die følgende individuelle tripeptidderivater omfattes av i den ovennevnte generelle formel: aAcOH.H-D-Ala-GXy-Arg-pNIA,I I2AcOH.H-D-But-Gly-Arg-pNA, 2AcOH-H-D-Val-Gly-Arg-pNA, 2AcOH.
i 1 II HrD-Nval-Gly-Arg-pNA, 2AcOH . H-D-Leu-Gly-Arg-pNA , 2AcOH.Hj-D- i ;Nleu-Gly-Arg-pNA, 2AcOH.H-D-Ile-Gly-Arg-pNA, 2AcOH.H-D-Phe- j I Gly-Arg-pNA, 2AcOH.H-D-Tyr-Gly-Arg-pNS, 2AcOH.H-D-CHA-Gly-Arg-jpNA, 2AcOH.H-D-CHT-Gly-Arg-pNA, 2AcOH.H-D-Phe-Pro-Arg-pNA, j 2AcOH.H-D-CHA-Pro-Arg-pNA, 2AcOH.H-D-CHA-Pip-Arg-pNA, 2AcOH. i H-D-CHT-Pip-Arq-pNA-2AcOH.H-D-Pro-Phe-Arg-oNA, 2AcOH.H-DpPrd-
i ■ ' ! i<!>Tyr-Arg-DNA, 2AcOH.H-D-Pro-CHA-Arg-pNA, 2AcOH.H-D-Pro-CHT- ! i-i i i!Arg-pNA, 2AcOH.H-D-Pip-Phe-Arg-pNA, 2AcOH.H-D-Pip-Tyr-Arg- , li " 1
'• pNA , 2AcOH .H-D-Pip-CHA-Arg-pNA og 2AcOH . H-D-Pip-CHT-Arg-i
•PNA. i
: • M
[Forkortelsene som brukes i ovennevnte liste har følgende; ! :; betydning: | . i!
i i i AcOH = eddikksyre
<;>' i
Ala = alanyl |
Arg = arginyl \ But = a-aminobutyry1 | j CHA = 3-cykloheksyl-alanyl ; i
CHT = 3-(4-hydroksycykloheksyl)-alanyl ' |i i I
i 1 GLY = glycyl i I ' Ile = isoleukyl |
Leu = leukyl
i
'Nleu = norleucykl j
I Nval = norvalyl;
■ ' Phe = fenylalanyl i
i •Pip = pipekolinoyl !
<1>Pro = prolyl j | Tyr = tyrosyl 1 I I Val = valyl.
De to aminosyregrupper som er knyttet til D-aminogruppen har :L^f orm. -
De ovennevnte tripeptidderivater er forbindelser som er i og for seg kjente, hvori p-nitrofenylaminogruppen kan erstattes med andre kromogene eller fluorgene substituerte aminogrupper, f Ji eks. med l-karboksy^2-nitrofen-5-ylamino,1-sulfo-2.-nitro-fen-|5-jylamino, 203-naf tylamino , 4-metoksy-[3-naf tylamino, 5-nitro--.a-jnaf tylamino , quinon-5-ylamino, 8-nitro-quinon-5-ylaminc, j4-jmetyl-coumar-7-ylamino eller 1, 3-di (metoksykarbonyl) -f en-5--ylaminogruppe (avledet fra dimetyl 5-amino-isoftalat).
Fremgangsmåten ifølge op<p>finnelsen kan utføres som følger: For å måle faktor XII i citratplasma blandes sistnevnte med et vandig preparat som inneholder cefalin og ellaginsyrej
' If.J' eksR . Actin ^ (fremstilt av ' DADE, Miami, USA), eller Cefo'-jtést (fremstilt av Nyegaard & Co. A/S, Oslo), og blandingen inkuberes noen få minutter, fortrinnsvis 4 minutter, vedjlavj<1>' ' temperatur, fortrinnsvis 0 C for å overføre faktor XII til faktor Xlla. Anvendelsen av lave temperaturer er viktig for a ^unngå dannelse av. enzymkomplekser med plasmainhibitoreJ a2_makroglobulin fordi disse komplekser kan spalte enzymatisk de tripeptidderivater som brukes som substrater, men ved 'lavere hastigheter enn de tilsvarende fri enzymer. Deretter I settes en alikvot del av den erholdte aktiveringsblanding j rtil et f orsøkssystem fremstilt ved å blande en buffer, f Jeks;
tris-imidazolebuffer med en pHDp 7,4 - 8,0, fortrinnsvis
! i7n,i n 1 ehoog ledn endioe nesosytyabrkøe nnpetå ry0p,0s2in5--0in' ,h2i, bifotorr trminend sven is va0n,d0i5g , olgøsji- ;'ning av et av de ovenfor angitte tripeptidderivater og erl vandig løsning av aktivatoren (Actin R eller Cephotest ^)[ ,og preinkubere blandingen i noen minutter ved den temperatur; hvorved spaltningen av tripeptidderivatet skal måles. ^ j. Deretter måles mengden av av farget eller fluoriserende j j spaltningsprodukt som frigjøres pr. tidsenhet ved fotometriske, spektorfotometriske eller fluorescens-spektrofotometriske i metoder. Hvis spaltningsproduktet er p-nitroanilin, utføres målingen fortrinnsvis ved 405 nm. j
1
JSoyabønnetripsin-inhibitor tilstede i forsøkssysternet har den funksjon at den selektivt inhiberer plasma-kalli-kri ein aktivert samtidig med aktiveringen av faktor XII t'il faktor Xlla, slik at den enzymatiske aktivering av tripeptidderivatet som brukes som substrat forhindres. På den annen side har soyabønnetrypsin-inhibitor ingen inhiberende virk-ning på faktor Xlla;
Målemetoden i oppfinnelsen har flere fordeler sammenlignet jmed kjente eldre målemetoder forsåvidt som den gir en direkts jmåling av faktor XII via aktivert faktor Xlla hvis enzyma-Itiske aktivitet kan bestemmes i et eneste trinn ved hjelp I lav I de ovenfor angitte tripeptidderivater. I den eldre met!od<e>jble aktiviteten til faktor Xlla målt indirekte ved hjelp|av jkpaguleringstiden. Koaguleringen opptrer ikke før den full-jstendige endogene koaguleringsrekkefølge som utløses av ifaktor Xlla er avsluttet-. For å oppnå sammenlignbare måle-L Ive, rdier er det nødvendig å bruke olasma som mangler HagemIan ifaktor for å bestemme innflytelsen av faktor Xlla på koagulerings-1 ti■ den og oppstille kalibreringskurver for dette. Den eldrIe me• tode hvori sluttresultatet av målingen oppnås først ett' er iI i 'at ' de kompliserte innvirkende enzymatiske Drosesser er fél !' r- r ji|dige inneholder tallrike ukontrollerbare feilkilder og er ^følgelig unøyaktige. Det er ekstremt vanskelig å oppnå et 'plasma som er helt fritt for faktor XII. På denne tid bruken i<!>i kliniske laboratorier gjerne automatiske analyseinstrumenj - ter ved hvilke analyser kan utføres raskt og nøyaktig med et- minimum av personell. Målemetoden ifølge oppfinnelsen! j er spesielt egnet for bruk i slike automatiske analyseinstrur-1 li menter, mens den eldre metode bare kan utføres manuelt og I 'semi-kvantitativt av utdannet laboratoriepersonale på tidl - \i
■ krevende måte. [ \
'i ' j
'Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen kan utføres på den måte som ,er beskrevet i det etterfølgende eksempel. j !
i I EKSEMPEL
Et målesystem bestående, av 0,75 ml. tris-imidazolbuf fer med ei pH i på 7,7 og en ionestyrke på 0,05 og som innehold-e3r 0,1 mg soyabønnetrypsin-inhibitor pr. ml, 0,25 ml 2 x 10 molar vandig løsning av 2AcOH.H-D-Leu-Gly-Arg-pNA og 0,20 ml i vDAai I nDEdi, g Maikamtiiv, eUrSt Ac) effoarloipnkluabsetri' ners eai ge4 nms in(A. ctvien d r37°fCre. mFsotir lt inkaI v-u-
jbatet tilsettes 0,05 ml av et inkubat fremstilt ved å blande j0]1 ml normal citratplasma og 0,2 ml vandig aktivert cefalo-plastinreagens og inkubering i 4 min. ved 0°C. Etter blanding jav de to bestanddeler måles den mengde p-nitroanilin som ifrigjøres av faktor Xlla spektrofotometrisk ved 405 nm i |5|min. Aktiviteten til faktor Xlla beregnes i enzymenheter<;>pr. ml plasma fra økningen i optisk densitet pr. min. r i
■Ved denne metode måles et gjennomsnitt på 0,15-0,30 enzym-jenheter faktor Xlla pr. ml i normal plasma. Da et molekyl 'av faktor XII gir et molekyl av faktor Xlla som følge av aktiveringen er de målte verdier for faktor Xlla samtidig etjmål! jfor mengden faktor XII som oppfinnelig var tilstede i plasmaet, j
Claims (1)
- Ii . Fremgangsmåte ved kvantitativ bestemmelse, av blod■ koaIgu-leringsfaktor XII i human blodplasma, k a r ak te r i-s r t ved at man behandler plasma med en aktivator for å overføre faktor XII som er tilstede i plasmaet i faktor Xlla, omsettes sistnevnte med et tripeptidderivat nied den generelle formel:<!><!> I hvor i. I i i I R"^ betyr en krom. ogen eller fluorog■ en substituert aminog.rup-pe som er istand til å avspaltesenzymatisk, i 2 3 1 I R betyr hydrogen, R betyr en rettkjedet eller forgrenet .alkylrest med 1-4 karbonatomer eller en benzyl, p-hydroksy- ! benzyl, cykloheksylmetyl eller 4-hydroksybenzylmetylrest, 4 5 i ; og R og R' betyr hydrogen eller ■ 2 4 5 'i R betyr hydrogen og R og R .er 3 tilsammen en alkylenres1 t j' ■ med 3 eller 4 .karbonatomer og R har ovenfor angitte be- j tydning, eller ■ \ ■ 1 R 2 og R 3 danner tilsammen en alkylenrest med 3 eller 4 k1 arbo;n- ! atomer, ] i 1 i <1> 4 5 3 : R betyr hydrogen og.R har samme betydning som R , eller' \ med et salt derav med en syre, og måler mengden av farget j eller fluorescerende spaltningsprodukt R"^H som enzymatisk frigjøres fra tripeptidderivatet av faktor Xlla ved foto- i i ■ i metrisk, spektrofotometrisk eller fluorescensspektrofoto- i' ! metriske metoder. I 21 Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakter i-sjert ved at kaolin eller et preparat som inneholder icéfalin og ellaginsyre brukes som aktivator. J 3 L Fremgangsmåte ifølge krav 1 og 2, karakter i-sje r t v e d at omsetningen av faktor Xlla med tripeptid-dérivat utføres i nærvær av soyabønnetrypsin-inhibitor. !4 i. Fremgangsmåte ifølge krav 1-3, k a r a k t e r i-;s e r t ved at reaksjonen utføres i et buffersystem ved en pH på 7,4-8,0 og en ionestyrke.på 0,025-0,2. 1 i ■ v5! ji e d Fart emakgatnivgesmriåntge en iføav lge fakktroav r X1I, I kutaførreas vked te0 0Cr.isert i i 16; Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakter i- <!> 1 1 is e r t ved at det anvendes tripeptidderivater hvori R ,er en p-nitrofenylamino, l-karboksy-2-nitro-fen-5-ylamino, j 1 !l-1 sulfo-2-nitro-fen-5-ylamino■ , 3-■ nafylamino , 4-metoksy-(3- 1 I; maf tylamino , 5-nitro-a-naf tylamino , quinon-5-ylamino' , 8- I 1 ,nitro, quinon-5-ylamino, 4-metyl-ko. umar-7-ylamino eller 1i ,3-i 'di(metoksykarbonyl)-fen-5-ylaminogruppe (avledet fra dimetyl; 15-aminoisoftalat) . J
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH697281 | 1981-11-02 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO823619L true NO823619L (no) | 1983-05-03 |
Family
ID=4317925
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO823619A NO823619L (no) | 1981-11-02 | 1982-11-01 | Fremgangsmaate ved kvantitativ bestemmelse av blodkoaguleringsfaktor xii i menneskeplasma |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4598043A (no) |
| EP (1) | EP0078764B1 (no) |
| JP (1) | JPS5886100A (no) |
| AT (1) | ATE17262T1 (no) |
| CA (1) | CA1184837A (no) |
| DE (1) | DE3268329D1 (no) |
| DK (1) | DK156668C (no) |
| ES (1) | ES8400603A1 (no) |
| NO (1) | NO823619L (no) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4882272A (en) * | 1986-10-01 | 1989-11-21 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | High molecular weight kininogen assay |
| JP3213831B2 (ja) * | 1993-08-06 | 2001-10-02 | 日本臓器製薬株式会社 | 被検物質の活性測定方法 |
| JP3213832B2 (ja) * | 1993-08-06 | 2001-10-02 | 日本臓器製薬株式会社 | 被検物質の活性測定法 |
| US6913900B2 (en) * | 2001-08-29 | 2005-07-05 | Nippon Zoki Pharmaceutical Co., Ltd. | Plasma prekallikrein activation and kallikrein production assay |
| GB0208989D0 (en) * | 2002-04-19 | 2002-05-29 | Amersham Biosciences Uk Ltd | Methods for measuring enzyme activity |
| CA2511125A1 (en) * | 2002-12-20 | 2004-07-08 | Axis-Shield Diagnostics Limited | Detection or determination of variants of factor xiia |
| DE102005003145B4 (de) * | 2005-01-21 | 2006-10-19 | Dade Behring Marburg Gmbh | Stablies, chromogenes Flüssigreagenz und dessen Verwendung in gerinnungsdiagnostischen Tests |
| US20070166344A1 (en) * | 2006-01-18 | 2007-07-19 | Xin Qu | Non-leaching surface-active film compositions for microbial adhesion prevention |
| GB0607515D0 (en) * | 2006-04-13 | 2006-05-24 | Axis Shield Diagnostics Ltd | Anti-factor xlla therapy |
| EP2333555A1 (de) | 2009-12-09 | 2011-06-15 | Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH | Heterogener Gerinnungstest |
| EP2465941A1 (de) | 2010-12-20 | 2012-06-20 | Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH | Verfahren zur simultanen Bestimmung mehrerer Gerinnungsproteasen |
| EP3198270A1 (en) | 2014-09-26 | 2017-08-02 | Abbott Point Of Care, Inc. | Cartridge device with fluidic junctions for coagulation assays in fluid samples |
| ES2911898T3 (es) | 2014-09-26 | 2022-05-23 | Abbott Point Of Care Inc | Dispositivo de cartucho de canal único para ensayos de coagulación de sangre en muestras de fluidos |
| CN107107057B (zh) | 2014-09-26 | 2020-12-15 | 雅培医护站股份有限公司 | 用于流体样本中的凝结测定的盒设备识别 |
| CN107110875A (zh) | 2014-09-26 | 2017-08-29 | 雅培医护站股份有限公司 | 用在凝固测定中的鞣花酸制剂 |
| US10048281B2 (en) | 2014-09-26 | 2018-08-14 | Abbott Point Of Care Inc. | Cartridge device with segmented fluidics for assaying coagulation in fluid samples |
| EP3197602B1 (en) | 2014-09-26 | 2021-09-01 | Abbott Point Of Care, Inc. | Microfabricated device with micro-environment sensors for assaying coagulation in fluid samples |
| ES2881861T3 (es) | 2014-09-26 | 2021-11-30 | Abbott Point Of Care Inc | Sensores para evaluar la coagulación en muestras de fluidos |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE380258B (sv) * | 1972-05-02 | 1975-11-03 | Bofors Ab | Nya diagnostiskt verksamma substrat med hog specificitet till trypsin och andra enzymer av typen peptidyl-peptid-hydrolaser |
| SE380257B (sv) * | 1972-05-02 | 1975-11-03 | Bofors Ab | Nya diagnostiskt verksamma substrat med hog specificitet till trombin och andra proteolytiska enzymer av typen peptidyl-peptid-hydrolaser |
| SE407058B (sv) * | 1974-12-05 | 1979-03-12 | Kabi Ab | Nya kromogena enzymsubstrat for serinproteaser |
| US4137225A (en) * | 1975-07-11 | 1979-01-30 | Ab Kabi | Novel chromogenic enzyme substrates |
| SE407571B (sv) * | 1975-07-11 | 1979-04-02 | Kabi Ab | Nya kromogena enzymsubstrat for serinproteaser |
| US4169015A (en) * | 1975-07-11 | 1979-09-25 | Ab Kabi | Novel chromogenic thrombin substrates |
| CH634662A5 (de) * | 1976-05-28 | 1983-02-15 | Pentapharm Ag | Verwendung von tripeptidderivaten zur quantitativen bestimmung von plasminogen-aktivatoren. |
| US4302538A (en) * | 1978-03-27 | 1981-11-24 | Ortho Diagnostics Inc. | Buffer system in an anti-thrombin III test |
| US4275153A (en) * | 1978-08-03 | 1981-06-23 | American Hospital Supply Corporation | Analytical fluorogenic substrates for proteolytic enzymes |
| DE3061860D1 (en) * | 1979-04-24 | 1983-03-17 | Marcel Jozefonvicz | Process for the determination of proteases and antiproteases |
-
1982
- 1982-10-13 DE DE8282810427T patent/DE3268329D1/de not_active Expired
- 1982-10-13 AT AT82810427T patent/ATE17262T1/de not_active IP Right Cessation
- 1982-10-13 EP EP82810427A patent/EP0078764B1/de not_active Expired
- 1982-10-28 US US06/437,207 patent/US4598043A/en not_active Expired - Lifetime
- 1982-10-29 ES ES516987A patent/ES8400603A1/es not_active Expired
- 1982-10-29 CA CA000414506A patent/CA1184837A/en not_active Expired
- 1982-11-01 JP JP57190895A patent/JPS5886100A/ja active Granted
- 1982-11-01 DK DK484682A patent/DK156668C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-11-01 NO NO823619A patent/NO823619L/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5886100A (ja) | 1983-05-23 |
| DK484682A (da) | 1983-05-03 |
| ES516987A0 (es) | 1983-10-16 |
| EP0078764B1 (de) | 1986-01-02 |
| DE3268329D1 (en) | 1986-02-13 |
| DK156668C (da) | 1990-02-12 |
| DK156668B (da) | 1989-09-18 |
| CA1184837A (en) | 1985-04-02 |
| US4598043A (en) | 1986-07-01 |
| JPH0346119B2 (no) | 1991-07-15 |
| ES8400603A1 (es) | 1983-10-16 |
| ATE17262T1 (de) | 1986-01-15 |
| EP0078764A1 (de) | 1983-05-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO823619L (no) | Fremgangsmaate ved kvantitativ bestemmelse av blodkoaguleringsfaktor xii i menneskeplasma | |
| Rick | Trypsin | |
| US4234682A (en) | Method and reagent for determining biologically active heparin in plasma | |
| DK163671B (da) | Reagens og fremgangsmaade til fotometrisk bestemmelse af thromboplastintiden, reagensets fremstilling og anvendelse | |
| NO151787B (no) | Tripeptidderivater og anvendelse av disse ved bestemmelser av enzymer | |
| NO135245B (no) | ||
| DK149333B (da) | Tripeptidderivater samt salte deraf med mineralsyrer eller organiske syrer til anvendelse som substrater til kvantitativ bestemmelse af thrombin og thrombinlignende enzymer, ecarinthrombin, plasmin og plasminlignende enzymer samt proenzymer, proenzymaktivatorer og enzyminhibitorer herfor i legemsvaeskerfra mennesker og pattedyr samt i dyriske celleekstrakter | |
| CA1086614A (en) | Substrate for the determination of plasminogen activators | |
| JPH0417640B2 (no) | ||
| JPS5856695A (ja) | 新規なトロンビン測定用基質 | |
| Wirnt | Chymotrypsin | |
| DK162179B (da) | Reagens til ettrinsbestemmelse af den aktiverede partielle thromboplastintid samt reagensets anvendelse | |
| JPH01309700A (ja) | 第１０３因子の動態測定のための方法および該測定のための手段を含むキツト | |
| US7723058B2 (en) | Test system for the determination of in-vivo active hemostasis proteases in biological fluids and/or the usage thereof to determine the in-vivo activation of hemostasis | |
| Kato et al. | Excretion of X-prolyl dipeptidyl-aminopeptidase in human urine as determined with a new fluorogenic substrate. | |
| NO138183B (no) | Diagnosemiddel for bestemmelse av gammaglutamyl-transpeptidase i biologiske vaesker | |
| US4732860A (en) | Process for determining the perkallikrein content and the partial thromboplastin time of a plasma sample | |
| Hoffmann et al. | Automated determination of the antitrypsin activity of serum | |
| DK168574B1 (da) | Peptidderivater og salte deraf med mineralsyrer eller organiske syrer samt anvendelsen heraf som substrat til kvantitativ bestemmelse af C1-esterase | |
| JP2966968B2 (ja) | プラスミノーゲン活性化因子及びそのインヒビターの測定方法、並びにその測定用キット | |
| EP0166690B1 (en) | Analytical process and means for measuring protease inhibitor capacity of serum | |
| US4260681A (en) | Reagent system and method for assaying peptidase enzymes | |
| CN107677834B (zh) | TAFIa含量的检测方法、用于检测TAFIa含量的试剂盒及二者的应用 | |
| JP3667470B2 (ja) | 酸性カルボキシペプチダーゼ活性の測定法及び測定試薬 | |
| Rutkowski | Human plasma and serum trypsin-like esterase activity |