NO138183B - Diagnosemiddel for bestemmelse av gammaglutamyl-transpeptidase i biologiske vaesker - Google Patents
Diagnosemiddel for bestemmelse av gammaglutamyl-transpeptidase i biologiske vaesker Download PDFInfo
- Publication number
- NO138183B NO138183B NO3286/73A NO328673A NO138183B NO 138183 B NO138183 B NO 138183B NO 3286/73 A NO3286/73 A NO 3286/73A NO 328673 A NO328673 A NO 328673A NO 138183 B NO138183 B NO 138183B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- micromoles
- gamma
- glutamyl
- diagnostic agent
- mineral acid
- Prior art date
Links
- 101710107035 Gamma-glutamyltranspeptidase Proteins 0.000 title claims description 31
- 101710173228 Glutathione hydrolase proenzyme Proteins 0.000 title claims description 31
- 102000006640 gamma-Glutamyltransferase Human genes 0.000 title claims description 31
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title claims description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 50
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 30
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 28
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims description 22
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 15
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 claims description 14
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 229940050906 magnesium chloride hexahydrate Drugs 0.000 claims description 13
- DHRRIBDTHFBPNG-UHFFFAOYSA-L magnesium dichloride hexahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[Cl-].[Cl-] DHRRIBDTHFBPNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 13
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 13
- 108010008488 Glycylglycine Proteins 0.000 claims description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 9
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 claims description 9
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims description 9
- 229940043257 glycylglycine Drugs 0.000 claims description 9
- WMZTYIRRBCGARG-VIFPVBQESA-N (2s)-2-azaniumyl-5-(4-nitroanilino)-5-oxopentanoate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WMZTYIRRBCGARG-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 8
- 239000012875 nonionic emulsifier Substances 0.000 claims description 6
- MRUMAIRJPMUAPZ-UHFFFAOYSA-N quinolin-8-ol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.C1=CN=C2C(O)=CC=CC2=C1 MRUMAIRJPMUAPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XFRVVPUIAFSTFO-UHFFFAOYSA-N 1-Tridecanol Chemical class CCCCCCCCCCCCCO XFRVVPUIAFSTFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- UXFQFBNBSPQBJW-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-methylpropane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(C)CO UXFQFBNBSPQBJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- -1 of et water-soluble Substances 0.000 claims description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 17
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 7
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 5
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 4
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 125000002642 gamma-glutamyl group Chemical group 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 3
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 3
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 3
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 2
- 206010023129 Jaundice cholestatic Diseases 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 201000005267 Obstructive Jaundice Diseases 0.000 description 2
- YYVFXSYQSOZCOQ-UHFFFAOYSA-N Oxyquinoline sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O.C1=C[NH+]=C2C(O)=CC=CC2=C1.C1=C[NH+]=C2C(O)=CC=CC2=C1 YYVFXSYQSOZCOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N (9Z)-octadecen-1-ol Chemical class CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCO ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- GZTKYOABNIDNQU-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-methylpropane-1,3-diol;hydrochloride Chemical compound Cl.OCC(N)(C)CO GZTKYOABNIDNQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 206010004659 Biliary cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 206010019695 Hepatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- 102000002704 Leucyl aminopeptidase Human genes 0.000 description 1
- 108010004098 Leucyl aminopeptidase Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010033647 Pancreatitis acute Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108090000279 Peptidyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 201000003229 acute pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 208000003167 cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 201000001352 cholecystitis Diseases 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000012812 general test Methods 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- WSZKUEZEYFNPID-UHFFFAOYSA-N hydrogen sulfate;quinolin-1-ium Chemical compound OS(O)(=O)=O.N1=CC=CC2=CC=CC=C21 WSZKUEZEYFNPID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002337 magnesium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L magnesium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Mg+2] VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000347 magnesium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001862 magnesium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 208000011645 metastatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYDLBVPAAFVANX-UHFFFAOYSA-N octylphenoxy polyethoxyethanol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(OCCOCCOCCOCCO)C=C1 UYDLBVPAAFVANX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000424 optical density measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- MCJGNVYPOGVAJF-UHFFFAOYSA-N quinolin-8-ol Chemical compound C1=CN=C2C(O)=CC=CC2=C1 MCJGNVYPOGVAJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 229960000819 sodium nitrite Drugs 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2337/00—N-linked chromogens for determinations of peptidases and proteinases
- C12Q2337/10—Anilides
- C12Q2337/12—Para-Nitroanilides p-NA
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Gamma-glutamyl-transpeptidase er et enzym som er funnet i nyreekstrakter og det katalyserer transpeptidasjons-omsetninger hvor det deltar metaboliske gamma-glutamyl-peptider og aminosyrer, hvorved det blir dannet nye peptider inneholdende gamma-glutamyl-andelen. Omsetningen består i overføring av gamma-glutamyl -
gruppen fra binding med peptidet til binding med aminosyregruppen i en "akseptor"-aminosyre. Transpeptid-omsetninger resulterer således i en omfordeling av gamma-glutamyl-grupper.
Gamma-glutamyl-transpeptidase er først og fremst funnet i nyrer hos forskjellige dyrearter. Det er» kjent fremgangsmåter for isolering av gamma-glutamyl-transpeptidase fra sauenyre, svine-
nyre, oksenyre og bukspyttkjertel, og også fra nyrer til kuer og mennesker.
Det er kjent at gamma-glutamyl-transpeptidase er tilstede i forskjellige kroppsorganer og vev, og også i urin og blod-serum og plasma. I det senere har påvisning av unormale mengder med gamma-glutamyl-transpeptidase i visse kroppsvæsker blitt funnet å være et tegn på nærvær av visse sykdomstilstander. F.eks. har Szczeklik et al., Gastroenteroligy, 41, 353-359 (1961) rapportert
at det bare ble iakttatt moderate økninger av gamma-glutamyl-transpeptidase i pasienter med viral eller kronisk hepatitt. Men det ble funnet svært høye aktiviteter i pasienter som lider av hemmende gulsott, galle cirrhose, cholangite og lever neoplasma, både primær lever-kreft og intrahepatiske metastaser. Enzym-aktiviteten i disse pasienter var nå og da 100 ganger så stor som aktiviteten i normale pasienter. Svært høy gamma-glutamyl-transpeptidase-aktivitet, som ikke har forbindelse med gulsott, gir sterk mistanke om primær eller metastatisk lever-kreft.
I 1966 sammenlignet Nosslin et al., Scand. J. Clin. and Lab.
Invest., 18, 178-80 Suppl. 92 (1966) gamma-glutamyl-transpeptidase-aktivitet med alkalisk fosfatase i tilfeller som består av hepatitt og hemmende gulsott. Forfatterne konkluderte-med at selv om fosfatase og gamma-glutamyl-transpeptidase hadde identiske reaksjonsmønstre, så var transpeptidase mer påviselig i de patologiske forhold som ble studert.
Videre viste Lum et al., Clin. Chem. 18_, 358-362 (1972) at gamma-glutamyl-transpeptidase-aktivitet var over det normale ved alle former av lever-sykdommer som ble studert (viral hepatitt, cirrhose, cholecystite, metastatisk carcinoma i lever, pankreatisk carcinoma, lever granuloma og akutt pankreatite). Gamma-glutamyl-transpeptidase indikerte heptatisk sykdom mer følsomt enn alkalisk fosfatase gjorde, og mye mer følsomt enn leucin-aminopeptidase. Dessuten ble det funnet at måling av gamma-glutamyl-transpeptidase-aktivitet ga et enkelt, følsomt og direkte middel for å avgjøre om ben eller lever var kilden for øket serumalkalisk fosfatase-aktivitet. Aktiviteten var høyest i hemmende leversykdom.
I årenes løp har det blitt beskrevet en rekke metoder for å bestemme gamma-glutamyl-transpeptidase-konsentrasjon i biologiske væsker. Fra før av ble glutation anvendt som substrat, og virkningen av gamma-glutamyl-transpeptidase på substratet ble målt. Senere har syntetiske substrater, innbefattet gamma-D,L-glutamyl-aminopropionitril, gamma-L-glutamyl-a-haftylamid og N-D,L-gamma-glutamyl -an il id , blitt benyttet ved slike bestemmelser. Ved disse sistnevnte forsøk ble fremkomsten av et eller flere spaltnings-produkter som stammer fra virkningen av gamma-glutamyl-transpeptidase i den biologiske væske som blir undersøkt på substratet, betraktet som et mål på enzym-aktivitet. Det ble oppnådd forbedrede prøve-fremgangsmåter ved å omsette spaltningsproduktet med en farve-danner for å utnytte fotometriske instrumenter ved målingene. En ytterligere forenkling av denne generelle prøvemetode ble oppnådd når gamma-L-glutamyl-p-nitroanilid ble anvendt som substrat, siden det ble erholdt et farvet spaltningsprodukt, dvs. p-nitroanilih, hvilket kunne måles kolorimetrisk uten ytterligere omsetning for å danne et farvestoff.
Bestemmelse av gammaglutamyl-transpeptidase-aktivitet ved å benytte gamma-L-glutamyl-p-nitroanilid som'substrat, og forskjellige modifikasjoner av denne prøve-metode, har blitt forsket av en rekke videnskapsmenn, innbefattet Orlowski, M., Arch. Immunol.
Therap. Exptl. 13, 538 (1965), Dimov, D-M. et al., clin. Chem.
Act. 16, 271-277 (1967), og Szasz, G., Clin. Chem. 15, 124-136
(1969).
Blandt de ovennevnte metoder for å bestemme aktiviteten til gamma-glutamyl-transpeptidase, har fremgangsmåten til Szasz oppnådd ålmenn anerkjennelse, og den blir nå generelt betraktet som den kliniske standardmetode. Hovedfordelen ved prøven er at den er meget enkel, for ved.rutinemessige kliniske prøver er det spesielt ønskelig å kunne utelate eller påskynde et eller annet fremgangsmåte-trinn. Ikke desto mindre er det fortsatt visse mangler ved metoden til Szasz. Man må f.eks. utføre en blind-
prøve for hver serum-prøve for å være sikker på å få nøyaktige bestemmelser, siden grumsethet i prøven ofte innvirker på målinger av optisk densitet. Dessuten tar ikke metoden til Szasz ikke-enzymatisk hydrolyse av substratet i betraktning. Dette begrenser nødvendigvis nøyaktigheten av bestemmelsene, på grunn av det faktum at høye nivåer med enzymatisk aktivitet i en eller annen prøve som blir undersøkt, kunne gi optiske densitets-avlesninger som ligger utenfor rekkevidden for vanlige kliniske laboratorie-instrumenter. Dette problem blir ytterligere forsterket i tilfeller hvor svært store mengder med bilirubin, som gir en gul-farving, er tilstede i undersøkelsesprøven: Den gule farve blir forsterket i den utstrekning at det kreves mer innviklede instrumenter for nøyaktige målinger.
På grunn av alle ovennevnte årsaker vil automatisering av Szasz-metoden være i høy grad vanskelig.
Det er således et reelt behov for en forbedret fremgangsmåte for å bestemme konsentrasjonen av gamma-glutamyl-transpeptidase i kroppsvæsker.
Oppfinnelsen vedrører et diagnosraiddel som omfatter en substratoppløsning og en farvekobler for anvendelse ved bestemmelse a\ gamma-glutamyl-transpeptidasekonsentrasjon i biologiske væsker. Substrat-oppløsningen omfatter minst 45 mikromol med L-gamma-glutamyl-p-nitroanilid pr. milliliter biologisk væske, minst 400 mikromol glycylglycin pr. milliliter biologisk væske, minst
36,2 mikromol natriumnitritt pr. milliliter biologisk væske og eventuelt minst 100 mikromol magnesiumklorid-heksahydrat pr. milliliter biologisk væske, i en vandig oppløsning som er buffer-behandlet til å holde en pH på fra 7,9 til 8,4. Farvekobleren
i
er en mineralsyre-oppløsning av fra 11,8 til 29,5
mikromol 8-hydroksykinolinsulfat pr. milliliter biologisk væske,
og fra 1 til 5 volum%, basert på det samlede volum av mineralsyre-oppløsning, av et vannoppløselig, ikke-ionisk emulgeringsmiddel, og farvekobleren er justert til en pH på
fra 0,8 til 1,3.
Et nytt diagnosemiddel
for anvendelse ved en forbedret bestemmelse av gamma-glutamyl-transpeptidase-aktivitet i biologiske væsker har nå blitt utviklet.
Substratet som blir anvendt i forsøkene i henhold til denne oppfinnelse,er en bufferbehandlet oppløsning av L-gamma-glutamyl-p-nitroanilid, glycylglycin, natriumnitritt og eventuelt magnesiumklorid-heksahydrat. L-gamma-glutamyl-p-nitroanilidet er substratet som gamma-glutamyl-transpeptidase-enzymet virker på. Glycyl-glycinet virker som en akseptor for glutamyl-andelen. Natrium-nitrittet, i sure omgivelser, diazoterer p-nitroanilin-spaltningsproduktet. Magnesiumklorid-heksahydratet, som er en eventuell bestanddel er tenkt som et hjelpemiddel til å holde substratet i oppløsning og blir også ansett for å aktivere omsetningen. Men anvendelsen av magnesiumklorid-heksahydrat er ikke absolutt nød-vendig ved bestemmelsen av gamma-glutamyl-transpeptidase.
Bufferen i substrat-oppløsningen opprettholder en pH i opp-løsningen på fra omkring 7,9 til omkring 8,4, fortrinnsvis omkring 8,2, for å oppnå den beste enzymatiske aktivitet. Som buffer kan det anvendes (2-amind-2-metyl-propan-l,3-diol)-hydroklorid (kjent som Ammediol-HCl) og tris(hydroksymetyl)amino-metan-hydroklorid (kjent som tris-HCl).
Mengdene med substrat, glycylglycin, natriumnitritt og magnesiumklorid-heksahydrat som kreves for den diagnostiske undersøkelse med diagnosemidlet i henhold til oppfinnelsen, er avhengig av mengden med.
biologisk væske som blir undersøkt. Det har blitt fastslått at den buffer-behandlede substrat-oppløsning bør inneholde minst 45 mikromol L-gamma-glutamyl-p-nitroanilid, minst 400 mikromol glycylglycin, minst 36,2 mikromol natriumnitritt og eventuelt minst 100 mikromol magnesiumklorid-heksahydrat pr. milliliter med biologisk væske, for å være sikker på at det er tilstede tilstrekkelig mengde med reagenser til å kunne omsettes med den størst kjente mengde med enzym i den biologiske væske som blir' undersøkt. Med hensyn til natriumnitritt-reagenset, er, som nevnt
ovenfor, den minimale mengde som kreves minst 36,2 mikromol pr. milliliter biologisk væske. Men det er vanligvis fordelaktig å
ha et overskudd av natriumnitritt, og mengder på opp til 290 mikromol pr. milliliter med biologisk væske har ingen innvirkning på prøve-resultatene. Det blir fortrinnsvis anvendt 72,4 mikromol natriumnitritt pr. milliliter biologisk prøvevæske.
Den foretrukne buffer-oppløsning inneholder tris(hydroksy-metyl) aminometan-hydroklorid som buffer, og pH blir justert til det krevde nivå ved i tillegg å tilsette mineralsyre, slik som saltsyre.
Farvedanneren som blir anvendt i den nye farvekobler
som utgjør en del av diagnosemidlet, er en mineralsyre-opp-løsning av 8-hydroksy-kinolinsulfat. Syren tjener også til å stoppe den enzymatiske omsetning, slik at man kan måle mengden av spaltningsprodukt som blir dannet i løpet av en spesifisert tidsperiode. For å stabilisere det endelige farvede produkt som blir målt, har det blitt funnet nødvendig å inkludere et vann-oppløselig ikke-ionisk emulgeringsmiddel. Av emulgeringsmidler som kan anvendes for dette formål, kan nevnes etoksylert tridecylalkohol < etoksylert oleylalkohol og etoksylert stearinsyre. Disse produkter blir solgt kommersielt under varenavnene
"Lipal 610", "Lipal 395" og "lipal 20-0A"
Et annet egnet ikke-ioniske emulgeringsmiddel som kan nevnes, er oktyl-fenoksy-polyetoksy-etanol, solgt under varenavnet "Triton X100"
For anvendelse ved den diagnostiske undersøkelse
må farvekobleren inneholde fra
11,8 til .29,5 mikromol, fortrinnsvis omkring 14,8
mikromol, 8-hydroksy-kinolin-sulfat pr. milliliter biologisk væske som blir undersøkt. Det kreves fra 1 til 5 volum- emulgeringsmiddel, basert på det samlede volum av farvekobleren, fortrinnsvis 1 volum- for å stabilisere det dannede farvestoff. Som emulgeringsmiddel anvendes fortrinnsvis etoksylert tridecylalkohol.
En meget viktig faktor ved dannelsen av farvestoffet, er
pH i reaksjonsoppløsningen under farvedannelsen. Det har blitt funnet at den maksimale kobling av farvestoff foregår ved en pH
på fra omkring 1,2 til omkring 2, fortrinnsvis ved en pH på omkring 1,9. For å være sikker på at denne pH blir oppnådd, må farvekobleren som- blir tilsatt til substrat-reaksjonsoppløsningen, dvs. mineralsyre-oppløsningen av 8-hydroksy-I
kinolin-sulfat inneholdende emulgeringsmidlet, ha en pH på fra 0,8 til 1,3, fortrinnsvis omkring 1,1. Denne
pH kan oppnåes ved å anvende en vandig mineralsyre^-oppløsning,
dvs. en vandig saltsyre-oppløsning hvori syren har en konsentrasjon på fra omkring 0,1N til 0,5N. Syre med denne konsentrasjon er også tilstrekkelig til å stoppe den enzymatiske aktivitet før farve-dannelse og måling.
For å bestemme konsentrasjonen av gamma-glutamyl-transpeptidase, blir den biologiske prøvevæske inkubert i en .forhåndsbestemt tidsperiodei.med den ovenfor .beskrevne buffer-behandlede substrat-oppløsning, for å oppnå et p-nitroanilin-spaltningsprodukt i reaksjons-oppløsningen. Denne reaksjons-oppløsning blir så behandlet med den forannevnte farvekobler,
ved en regulert pH. Efter at det er gått 15 sekunder til 10 minutter, blir det tilsatt en tilstrekkelig mengde med alkali for å bringe reaksjonsoppløsningen på en alkalisk pH.
Den optiske densitet i den oppnådde purpurfarvede reaksjons-oppløsning blir så avlest som et mål på enzymaktivitet i den biologiske prøvevæske.
Den endelige tilsetning ved den diagnostiske prøve, er en alkalisk oppløsning som vil gi en pH på mellom omkring 10,5 til omkring 12, fortrinnsvis omkring 10,5, til den endelige reaksjonsblanding for å utvikle farven i farve-produktet som skal måles. Natriumhydroksyd blir vanligvis anvendt, og det har blitt funnet at det trengs en minimal konsentrasjon på minst 0,05N natriumhydroksyd for å tilveiebringe konsekvente avlesninger av absorbsjonsgraden. En økning av natriumhydroksyd-konsentrasjonen på opp til omkring 0,25 N har ingen innvirkning på resultatene.
Dersom de eventuelle magnesiumklorid-heksahydrat blir inkludert i den opprinnelige substrat-oppløsning, må det tilsettes en spesifisert mengde med tetranatriumsalt av etylendiamin-tetraeddiksyre sammen med den alkaliske oppløsning for å hindre utfelning av magnesiumklorid (som magnesiumhydroksyd) fra den endelige reaksjonsblanding. Slike utfeininger ville selvsagt inn-virke på avlesningene av absorbsjonsgraden og ødelegge nøyaktigheten og følsomheten ved undersøkelsen. En minimal konsentrasjon på minst 6,0 mikromol etylendiamintetraeddiksyre pr. mikromol magnesiumklorid-heksahydrat kreves for å opprettholde oppløselighet. Det kan anvendes større mengder etylendiamintetraeddiksyresalt, dvs. opp til omkring 10 ganger så mye, med lignende resultater.
Men siden den minimale konsentrasjon er tilstrekkelig, blir den vanligvis foretrukket.
Ved de utførte forsøk kreves det bare
omkring 0,1 milliliter biologisk væske for å bli undersøkt.
Større mengder med undersøkelsesprøver kan selvsagt anvendes om
ønskes. Det er ikke nødvendig å fortynne prøvene. Således kan blod-serum, blod-plasma, urin, cerebrospinal-væske og lignende biologiske væsker bli undersøkt direkte, i henhold til fremgangs-
måten ved denne oppfinnelse.
Vanligvis blir 0,1 milliliter med prøvevæske tilsatt til
1 milliliter av det bufferbehandlede substrat-reagens som er
beskrevet ovenfor, og inkubert i en forhåndsbestemt tidsperiode ved en spesifisert temperatur. Tiden og temperaturen kan
varieres sterkt, men som oftest foretrekkes det så korte tids-
perioder og så lave temperaturer som er nødvendig for å være sikker på å oppnå nøyaktige resultater. En inkubasjon ved omkring 37°c i 10 minutter er pålitelig og kan derfor anbefales. Efter at inkubasjonstiden er over blir det tilsatt 1 milliliter av
mineralsyre-reagens-oppløsningen inneholdende 8-hydroksy-kinolin-
sulfat og vannoppløselig, ikke-ionisk emulgeringsmiddel til
reaksjonsblandingen. Efter forløp av omkring 15 sekunder, men ikke mer enn 10 minutter, blir det til reaksjonsoppløsningen til-
satt omkring 5 milliliter 0,1N natriumhydroksyd-oppløsning
(inneholdende 0,1% natriumsalt av etylendiamin-tetraeddiksyre,
dersom magnesiumklorid-heksahydrat er inkludert i substrat-
oppløsningen). Absorbsjonsgraden i den endelige oppløsning blir avlest ved 570 nanometere, og denne verdi tilsvarer mengden av p-nitroanilid som blir frigitt under den enzymatiske reaksjon.
Konsentrasjonen av p-nitroanilin blir bestemt ved å avlese mot
en standard-kurve fremstilt fra absorbsjonsgradene til en vandig oppløsning inneholdende forskjellige konsentrasjoner av fri
p-nitroanilin. Mikromol med p-nitroanilin som blir oppnådd, blir omdannet til enzymatisk aktivitet i henhold til følgende ligning:
IU = optisk densitet ved 570 nanometere x 0,172.
I.U. er forkortelse for "International Units", definert som
mikromol-mengden av p-nitroanilin som blir frigitt pr. 1.000 ml serum i et minutt.
Bestemmelsen av gamma-glutamyl-transpeptidase-konsentrasjonen
ved anvendelse av den nye substrat-oppløsning og farvekobler i henhold til denne oppfinnelse, har blitt funnet å
være fire og en halv ganger mer følsom enn den tidligere teknikk med Szasz-metoden: Den molare ekstinksjonskoeffisient i det endelige farvede kompleks som blir oppnådd ved å anvende de nye reagenser og metoden i henhold til denne oppfinnelse, er tilnærmet fire og en halv ganger større enn den molare ekstinksjonskoeffisient for p-nitroanilin oppnådd ved Szasz-metoden.
Det er således tilveiebragt en enkel, nøyaktig og følsom metode for bestemmelse av enzymkonsentrasjon uten at det er nødvendig å foreta blindprøver for hver prøve som blir undersøkt. Dessuten har ikke .den bilirubin som vanligvis er tilstede i kroppsvæsker lenger noen skadelig virkning på avlesingen av absorbsjonsgraden. Den optiske densitet i den purpurfarvede oppløsning av spaltningsproduktet kan avleses direkte mot en standard-kurve for absorberingsgraden av oppløsninger av fri p-nitroanilin, utsatt for de samme farvedannende reaksjoner. Aktiviteten til gamma-glutamyl-transpeptidase-enzym blir uttrykt i internasjonale enheter (I.U.) som mengden av mikromol med p-nitroanilin frigitt pr. 1.000 ml serum i et minutt.
For ytterligere å belyse oppfinnelsen blir det gitt følgende eksempler:
Eksempel 1
Fremstilling av substrat- oppløsning
4,5 millimolar L-gamma-glutamyl-p-nitroanilin, 40 millimol glycylglycin, 7,25 millimol natriumnitritt og 10 millimol magnesiumklorid-heksahydrat. Man oppløser 126,3 milligram L-gamma-glutamyl-p-nitroanilid, 290,7 milligram glycylglycin, 50 milligram natriumnitritt og 223,7 milligram magnesiumklorid-heksahydrat under konstant omrøring i 100 milliliter Ammediol-(2-amino-2-metyl-propan-1,3-diol)-HCl buffer, 0,05M, pH 8,6 ved 50-60°C. Oppløsningen har en pH på omkring 8,05 ved 25°C.
Eksempel 2
Man oppløser 126,3 milligram L-gamma-glutamyl-p-nitroanilid, 290,7 milligram glycylglycin, 50 milligram natriumnitritt, 223,7 milligram magnesiumklorid-heksahydrat og 605,7 milligram tris (hydroksymetyl)aminometan i 90 milliliter destillert vann, under omrøring. pH justeres til 8,2 (25°C) med IN saltsyre. Med ytterligere destillert vann fortynner man til et volum på
100 milliliteren.
Eksempel 3
Fremstilling av svreoppløsningen av 8- hvdroksv- kinolin- sulfat
Man oppløser 100 milligram 8-hydroksy-kinolin-sulfat i tilnærmet 80 milliliter 0,2N saltsyre. Tilsetter 1 milliliter "Lipal-610" og fortynner til 100 milliliter med 0,2N saltsyre.
Eksempel 4
Fremstilling av natriumhydroksyd- oppløsningen inneholdende natriumsalt av etylendiamintetraeddiksyre
Man oppløser 500 milligram av natriumsaltet av etylendiamintetraeddiksyre i 100 milliliter 0,05N natriumhydroksyd Eksempel 5
Bestemmelse av gamma- glutamyl- transpeptidase i blod- serum
Man anbringer 1 milliliter av substrat-oppløsningen fra eksempel 2 i et prøverør og tilsetter 0,1 milliliter blod-serum. Inkuberer ved 37°c i 10 minutter. Når inkubasjonen er ferdig, tilsettes 1 milliliter av reagens-oppløsningen fra eksempel 3. Man venter minst 15 sekunder, men ikke mer enn 10 minutter, og tilsetter 5 milliliter av reagens-oppløsningen fra eksempel 4. Absorbsjonsgraden til reagens-oppløsningen avleses på et Gilford 300 N spektrofotometer ved 570 nanometere. Det blir oppnådd en avlesning på 1.033. Dette blir avlest mot standardkurven, og det blir oppnådd en mengde på 0,177 mikromol med frigitt p-nitroanilin. Konsentrasjonen av gamma-glutamyl-transpeptidase i prøve-serumet blir beregnet i henhold til formelen:
I. U. = OD x 0,172
I. U. = 1.033 x 0,172 I. U. = 0,177 (eller 177 millienheter pr. milliliter)
Eksempel 6
Bestemmelse av gamma- glutamyl- transpeptidase i urin
Man anbringer 1 milliliter av substrat-oppløsningen fra eksempel 2 i et prøverør og tilsetter 0,1 milliliter urin. Inkuberer ved 37°c i 10 minutter. Når inkubasjonen er ferdig tilsettes 1 milliliter av reagensoppløsningen fra eksempel 3. Man venter så minst 15 sekunder, men ikke mer enn 10 minutter, og tilsetter 5 milliliter av reagens-oppløsningen fra eksempel 4.
Absorbsjonsgraden til reagens-oppløsningen avleses på et
Gilford 300 N spektrofotometer ved 570 nanometere. Det blir oppnådd en avlesning på 0,200. Dette blir avlest mot standardkurven og det blir oppnådd en mengde på 0,034 mikromol med frigitt p-nitroanilin. Konsentrasjonen av gamma-glutamyl-transpeptidase i prøVe-serumet blir beregnet i henhold til formelen:
I.U.= OD x 0,172
I.U.= 0,200 x 0,172
I.U.= 0,034 (eller 34 millienheter pr. milliliter),
i i
Claims (7)
1. Diagnosemiddel for bestemmelse av gamma-glutamyl-
transpeptidase-konsentrasjoner i biologiske væsker under an- vendelse av et substrat i form av en vandig substratoppløsning som er bufret til en pH-verdi fra 7,9-8,4 og som pr. milliliter biologisk væske inneholder: A. minst 4 5 mikromol L-gamma-glutamyl-p-nitroanilid og B. minst 400 mikromol glycylglycin og C. eventuelt minst 100 mikromol magnesiumklorid-heksa
hydrat , og under anvendelse av natriumnitritt og av en farvekobler,karakterisert ved at substratoppløsningen inneholder D. minst 36,2 mikromol natriumnitritt pr. milliliter
biologisk væske, og ved at farvekobleren er en vandig mineralsyreoppløsning som er justert til en pH fra 0,8 til 1,3, og som inneholder: a. fra 11,8 til 29,5 mikromol
8-hydroksykinolinsulfat pr. milliliter biologisk
væske, og b. fra 1 til 5 volum%, basert på det
samlede volum av mineralsyreoppløsningen, av et
vannoppløselig, ikke-ionisk emulgeringsmiddel.
2. Diagnosemiddel i henhold til krav 1,karakterisert ved at substratoppløsningen er buffer-behandlet til en pH på omkring 8,2 med et (2-amino-2- metyl-propan-1,3-diol)HC1 buffersystem. I
3. Diagnosemiddel i henhold til krav 1, karakterisert ved at substrat-oppløsningen er buffer-behandlet til en pH på omkring 8,2 med et tris(hydroksy-metyl)-amino-metan-hydroklorid buffersystem.
4. Diagnosemiddel i henhold til krav 1-3, karakterisert ved at substratoppløsningen inneholder omtrentlig 72,4 mikromol natriumnitritt pr. milliliter biologisk væske.
5. Diagnosemiddel i henhold til krav 1, karakterisert ved at farvekobleren er en mineralsyre-oppløsning som inneholder omkring 14,8 mikromol 8-hydroksy-kinolin-sulfat pr. milliliter biologisk væske og har en pH på omkring 1,1.
6. Diagnosemiddel i henhold til krav 5, karakterisert ved at farvekobleren er en mineralsyre-oppløsning som inneholder omkring 1 volum%, basert på det samlede volum av mineralsyre-oppløsningen, etoksylert tridecylalkohol som det vann-oppløselige ikke-ioniske emulgeringsmiddel .
7. Diagnosemiddel i henhold til krav 1, karakterisert ved at mineralsyren i farvekobleren er en vandig saltsyre.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US28263272A | 1972-08-21 | 1972-08-21 | |
| US369046A US3878048A (en) | 1972-08-21 | 1973-06-11 | Determination of gamma-glutamyl transpeptidase in biological fluids and diagnostic reagents used therefor |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO138183B true NO138183B (no) | 1978-04-10 |
| NO138183C NO138183C (no) | 1978-07-26 |
Family
ID=26961570
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO3286/73A NO138183C (no) | 1972-08-21 | 1973-08-20 | Diagnosemiddel for bestemmelse av gammaglutamyl-transpeptidase i biologiske vaesker |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US3769173A (no) |
| JP (1) | JPS4987392A (no) |
| CA (1) | CA1007552A (no) |
| CH (1) | CH599548A5 (no) |
| FR (1) | FR2197470A5 (no) |
| GB (1) | GB1389913A (no) |
| IT (1) | IT998325B (no) |
| NO (1) | NO138183C (no) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS584560B2 (ja) * | 1976-06-01 | 1983-01-26 | 三共株式会社 | 鉄錯塩を用いた酵素活性測定法 |
| US4167449A (en) * | 1976-07-29 | 1979-09-11 | American Hospital Supply Corporation | Composition and method for determining transferase and protease activity |
| US4087331A (en) * | 1977-01-12 | 1978-05-02 | Coulter Electronics, Inc. | Colorimetric method for determining gamma-glutamyl transpeptidase and compositions useful therein |
| JPS5569549A (en) * | 1978-11-16 | 1980-05-26 | Nitto Boseki Co Ltd | Novel substrate for determination of enzyme activity |
| US4321364A (en) * | 1980-04-17 | 1982-03-23 | Minister For Public Works For The State Of New South Wales | Preparation of soluble chromogenic substrates |
| US4448715A (en) * | 1981-11-02 | 1984-05-15 | University Of Miami | Tagged pyroglu-L-Phe-L-Arg derivatives, substrates and assays for kallikrein |
| US4511651A (en) * | 1982-07-30 | 1985-04-16 | American Monitor Corporation | Reagent composition and assay for the determination of γ-glutamyltransferase activity |
| US5506114A (en) * | 1992-02-07 | 1996-04-09 | Osborn Laboratories | Methods and kits for detecting the presence or concentration of biological analytes |
| US5474906A (en) * | 1993-03-26 | 1995-12-12 | Eiken Kagaku Kabushiki Kaisha | Reagent for determining γ-glutamyl transpeptidase activity |
| US6235493B1 (en) * | 1997-08-06 | 2001-05-22 | The Regents Of The University Of California | Amino acid substituted-cresyl violet, synthetic fluorogenic substrates for the analysis of agents in individual in vivo cells or tissue |
| JP3709332B2 (ja) * | 2000-09-14 | 2005-10-26 | 株式会社エーシーバイオテクノロジーズ | 骨粗鬆症の診断および／または骨粗鬆症骨折リスクの予測の方法 |
| US20050266579A1 (en) * | 2004-06-01 | 2005-12-01 | Xihai Mu | Assay system with in situ formation of diazo reagent |
| KR101772428B1 (ko) | 2015-03-31 | 2017-08-30 | 한국외국어대학교 연구산학협력단 | 감마 글루타밀 전이효소 검출용 조성물, 이를 포함하는 검출 센서 및 검출 방법 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS4910718B1 (no) * | 1969-06-23 | 1974-03-12 | ||
| AT308050B (de) * | 1970-08-28 | 1973-06-25 | Boehringer Mannheim Gmbh | Reagens zur Bestimmung der γ-Glutamyltranspeptidase |
-
1972
- 1972-08-21 US US00282632A patent/US3769173A/en not_active Expired - Lifetime
-
1973
- 1973-06-11 US US369046A patent/US3878048A/en not_active Expired - Lifetime
- 1973-08-06 IT IT27557/73A patent/IT998325B/it active
- 1973-08-07 GB GB3737073A patent/GB1389913A/en not_active Expired
- 1973-08-17 FR FR7329955A patent/FR2197470A5/fr not_active Expired
- 1973-08-20 NO NO3286/73A patent/NO138183C/no unknown
- 1973-08-20 JP JP48093211A patent/JPS4987392A/ja active Pending
- 1973-08-20 CA CA179,218A patent/CA1007552A/en not_active Expired
- 1973-08-21 CH CH1203773A patent/CH599548A5/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CH599548A5 (no) | 1978-05-31 |
| US3878048A (en) | 1975-04-15 |
| FR2197470A5 (no) | 1974-03-22 |
| IT998325B (it) | 1976-01-20 |
| CA1007552A (en) | 1977-03-29 |
| DE2338043A1 (de) | 1974-03-21 |
| NO138183C (no) | 1978-07-26 |
| US3769173A (en) | 1973-10-30 |
| JPS4987392A (no) | 1974-08-21 |
| DE2338043B2 (de) | 1975-06-05 |
| AU5868473A (en) | 1975-01-30 |
| GB1389913A (en) | 1975-04-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Black et al. | Determination of bilirubin UDP-glucuronyl transferase activity in needle-biopsy specimens of human liver | |
| Babson et al. | The use of a diazonium salt for the determination of glutamic-oxalacetic transaminase in serum | |
| US4067775A (en) | Process and composition for determining the activity of creatinekinase-MB | |
| NO138183B (no) | Diagnosemiddel for bestemmelse av gammaglutamyl-transpeptidase i biologiske vaesker | |
| NO176072B (no) | Fremgangsmåte og materiale for bestemmelse av ioner i fluider, og blandinger for bestemmelse av kalium- og natriumioner | |
| RU2627177C2 (ru) | Способ определения биологической активности дефибротида, основанный на применении эуглобулина | |
| US3892631A (en) | Diagnostic reagents used for the determination of gamma-glutamyl transpeptidase in biological fluids | |
| Orsonneau et al. | Simple and sensitive determination of urea in serum and urine | |
| US6949351B1 (en) | Cell assay, method and reagents | |
| Lundin et al. | Sensitive assay of creatine kinase isoenzymes in human serum using M subunit inhibiting antibody and firefly luciferase | |
| CA1073328A (en) | Fluorimetric demonstration and determination of a reduced coenzyme or derivative in an aqueous system | |
| NL8201987A (nl) | Werkwijze voor het bepalen van de activiteit van plasminogeenactivator van het weefseltype, alsmede voor gebruik bij deze werkwijze geschikte combinatie van het "kit"-type. | |
| Watson | Enzymic determination of glucose and easily hydrolyzable glucose esters in blood | |
| US3801466A (en) | Uric acid assay and reagents therefor | |
| US4237044A (en) | Antibodies against creatinekinase-M8 and process for the production thereof | |
| DK164512B (da) | Fremgangsmaade til simultan bestemmelse af prokallikrein og den partielle thromboplastintid | |
| Hayakawa et al. | A simple and specific determination of trypsin in human duodenal juice | |
| Wirnt | Trypsin | |
| Babson et al. | An evaluation of serum" trypsin" tests | |
| Cheung et al. | The ribonuclease-catalyzed hydrolysis of uridine-2', 3'-phosphate | |
| AU6881898A (en) | Method of detecting procarboxypeptidase a and carboxypeptidase a levels in biological fluids | |
| Tomisek et al. | Fluorometric assay of ultramicro quantities of glucose with Somogyi filtrate and hexokinase | |
| RU2559778C2 (ru) | Способ прогнозирования эффективности лечения при алкогольном гепатите | |
| RU2766143C2 (ru) | Жидкая композиция дефибротида для лечения и профилактики веноокклюзионной болезни | |
| CA1320114C (en) | Method and test kit for neutralization/immunoinhibition assay |