NO337992B1 - Fremgangsmåte for ekstraksjon av salicinderivater fra Salix - Google Patents
Fremgangsmåte for ekstraksjon av salicinderivater fra Salix Download PDFInfo
- Publication number
- NO337992B1 NO337992B1 NO20080170A NO20080170A NO337992B1 NO 337992 B1 NO337992 B1 NO 337992B1 NO 20080170 A NO20080170 A NO 20080170A NO 20080170 A NO20080170 A NO 20080170A NO 337992 B1 NO337992 B1 NO 337992B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- water
- content
- extract
- extraction
- salicin
- Prior art date
Links
- 241000124033 Salix Species 0.000 title claims abstract description 24
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 47
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 claims abstract description 37
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 claims abstract description 30
- 239000001648 tannin Substances 0.000 claims abstract description 30
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 claims abstract description 30
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 14
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 32
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 19
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 11
- 239000001253 polyvinylpolypyrrolidone Substances 0.000 claims description 11
- 235000013809 polyvinylpolypyrrolidone Nutrition 0.000 claims description 11
- 229920000523 polyvinylpolypyrrolidone Polymers 0.000 claims description 11
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical group CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 4
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 4
- OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N propan-2-one;hydrate Chemical compound O.CC(C)=O OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 3
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 claims description 2
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 claims description 2
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 claims description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 abstract description 10
- 229920002770 condensed tannin Polymers 0.000 abstract description 8
- 239000003921 oil Substances 0.000 abstract description 5
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 abstract description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 abstract description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 abstract description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 abstract description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 abstract description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 26
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 26
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 22
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 4
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 4
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 2
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 2
- 241001299682 Salix purpurea Species 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000012053 oil suspension Substances 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- CQRYARSYNCAZFO-UHFFFAOYSA-N salicyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1O CQRYARSYNCAZFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 1-hexadecanoyl-2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 101150071146 COX2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100114534 Caenorhabditis elegans ctc-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 101150000187 PTGS2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 101000942305 Zea mays Cytokinin dehydrogenase 1 Proteins 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000004821 effect on bone Effects 0.000 description 1
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002952 polymeric resin Substances 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/76—Salicaceae (Willow family), e.g. poplar
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/4841—Filling excipients; Inactive ingredients
- A61K9/4858—Organic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Den foreliggende oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte for ekstraksjon av salicinderivater fra Salix spp som kan oppnås ved fraksjonering på et resin hvor fremgangsmåten består av de trinn som er angitt i krav 1.
Ekstraktet som fremstilles ved fremgangsmåten er særpreget ved et høyt innhold av salicinderivater, et redusert innhold av høymolekylære tanniner og et innhold av proantocyanidiner som er tilstrekkelig til å hemme noen metallproteaser i vev. Produktet blir formulert i oljer som er rike på co-3 og co-6 syrer som gir en bedre absorpsjon av de aktive virkestoffene, og også øker virkningen deres synergistisk.
Teknologisk bakgrunn
Bark og grenekstrakter av forskjellige arter av Salix har blitt benyttet i uminnelige tider til behandling av reumatiske tilstander i ledd og gikt. Salix ekstrakter ble imidlertid stort sett skrinlagt på slutten av det nittende århundre da aspirin ble synteti-sert ved acetylering av salisylsyre, som ble oppnådd ved oksydasjon av forbindelser som er til stede i Salix. Imidlertid har aspirin og Sa//xekstrakter vesentlige forskjel-ler med hensyn til virkningsmekanismer og effekt på benledd. Ekstraktene virker på enzymet COX 2, mens aspirin hovedsakelig virker på COX 1 som involverer de vel-kjente bivirkningene på mavetarmkanalen og blodkoagulasjon, noe som forhindrer langtidsbruk i alvorlig grad, noe som, i motsetning til dette, er nødvendig i tilfelle av slike kroniske degenerative sykdommer som artrose og reumatoid artritt.
Det er kjent fra litteraturen at Sa//x-ekstrakter har ekstremt variabelt innhold av salicin derivater, som er i gjennomsnitt opp til 15 %, og tannininnhold som varierer fra 8 til 20 %. Tanniner som er til stede i Sa//x-ekstrakter, noe som er tilfelle med alle galle og katekiske tanniner, har sterk affinitet til proteiner og proteoglykaner som involverer vevsskader i forbindelse med langtidsbehandling.
Det er derfor behov for en passende prosess som er lett å applisere i industrien og som gir ekstrakter med standardisert innhold av de aktive komponentene.
WO 2005/002611 beskriver formuleringer til behandling av artritt omfattende saligenin eller saligenin-inneholdende ekstrakter i kombinasjon med andre aktive ing-redienser.
Beskrivelse av oppfinnelsen
Den foreliggende oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte for ekstraksjon av nye Salix spp ekstrakter, som er særpreget ved et høyt innhold av salicinderivater, et redusert innhold av høymolekylære tanniner og et tilstrekkelig innhold av proantocyanidiner for å hemme noen metallproteaser i vev.
Det har overraskende blitt funnet at ekstraksjonen av Sa//x-bark eller -grener under egnede betingelser, og den spesifikke rensebehandlingen av det resulterende ekstraktet, gir ekstrakter med salicinderivatinnhold på opptil 50 %, tannininnhold på ikke mer enn 5 % og innhold av oligomeriske procyanindiner som er høyere enn 5 %.
Fordelen med å benytte Sa//x-ekstrakter, spesielt ekstraktene fremstilt ved fremgangsmåten ifølge den foreliggende oppfinnelsen, sammenlignet med salicinderivater alene, er forbundet med nærvær av proantocyanidiner, sterke radikalfjernere og kraftige hemmere av metallproteaser som er aktivert i artrittilstander via overpro-duksjon av leukocytt III.
Oppfinnelsens prosess til fremstilling av Salix ekstrakter er forskjellig fra de som er kjent fra før med hensyn til ekstraktets innhold av salicin og dets derivater og med hensyn til bruken av matriser som gir den selektive reduksjonen av tannininnhold mens de terapeutisk nyttige proantocyanidinene i ekstraktet beholdes.
Oppfinnelsens fremgangsmåte inkluderer fire hovedtrinn:
a) Ekstraksjon av Salix spp grener og bark med egnede løsningsmidler som løser opp de ønskede produktene (fullstendig ekstrakt); b) Fjerning av vannuløselig (eller dårlig løselige) tanniner; c) Eventuell fjerning av vannløselige tanniner; d) Økning av innholdet av salicinderivater gjennom en rensing på en resinadsorpsjonskolonne.
Trinn (a) oppnås ved ekstraksjon av plantematerialet som består av plantebark og grener, med en C1-C3 alkohol eller aceton eller blandinger av disse løsningsmidlene eller vandige løsninger av disse løsningsmidlene eller vann alene. En 30 % vo-lum/volum vann-etanolløsning er foretrukket.
Ekstraksjonstemperaturen kan variere fra 10 °C til 80 °C, fortrinnsvis er den 25 °C.
Trinn (b) tillater fjerning av vannuløselige, spesielt høymolekylære tanniner fra ekstraktet.
Trinn (c) tillater fjerning av de fleste vannløselige tanninene fra ekstraktet. Dette er et valgfritt trinn som kan utføres for å fjerne hvilke som helst av tanninene som fremdeles er tilstede i ekstraktet etter trinn (b). Disse metabolittene kan fjernes ved å benytte polyvinylpolypyrrolidon (PVPP).
Trinn (d) tillater fraksjonering av ekstraktet ved å fjerne de fleste unyttige metabo-litter (sukker og lignende) mens de ønskede sekundære beholdes, f.eks. salicinderivater og oligomeriske proantocyanidiner. Dette trinnet består av en kromatografisk separasjon gjennom adsorpsjon på et polymerisk resin. Eksempler på egnede resiner til dette formålet er Styren-DVB resiner så som AmberliteHP20<®>eller Rohm og Haas XAD1180<®>, og akrylresiner så som Rohm og Haas XAD7HP<®>.
I løpet av kolonnefraksjoneringstrinnet som benytter egnede løsningsmiddelblan-dinger kan fri salicin bli separert fra sine derivater og det oppnås fraksjoner som er rike på fri salicin med reduserte mengder av dets derivater og fraksjoner med fullstendig forskjellige blandinger.
Det fullstendige ekstraktet som oppnås fra Salix bark og grener med 30 % etanol blir konsentrert til en tørr rest som varierer fra 5 % til 50 % vekt/vekt, fortrinnsvis 25 % vekt/vekt, og får stå i en temperatur fra 1 °C til 20 °C, fortrinnsvis ved 4 °C, uten omrøring i en tidsperiode fra 1 time til 24 timer, fortrinnsvis 16 timer.
Den resulterende suspensjonen blir sentrifugert ved 4 °C for å fjerne restbunnfall som inneholder høymolekylære derivater og tanniner fra den klare vandige løsning-en.
Vannuløselige eller dårlig løselige tanniner som er i det fullstendige ekstraktet blir fjernet ved vannrensing som kan forbedres ytterligere ved valgfri behandling (trinn c) med polyvinylpolypyrrolidon (PVPP). Den delvise vannrensingen (trinn b) kan bare fjerne deler av tanninene (over 50 % vekt/vekt av tanniner som er til stede), mens PVPP rensing fjerner resttanniner innenfor verdier under 5 % av det endelige ekstraktets vekt.
Derfor blir den klare vandige løsningen fra trinn b) behandlet med PVPP (1-50 % vekt/vekt, fortrinnsvis 1:30, mest ønsket 1:20 på den tørre resten av det vandige ekstraktet som skal behandles) og fortsetter omrøring i 1 eller flere timer.
Løsningen blir filtrert fra PVPP og adsorberte tanniner. Deretter blir den vandige løsningen adsorbert på resinet og substratet vaskes grundig med vann for å fjerne uønskede løselige substanser. Ikke tilbakeholdt løsning blir kastet.
Produktet blir slemmet med en vann-alkoholløsning (C1-C3 alkoholer, fortrinnsvis etanol), med vanninnhold som varierer fra 50 % volum/volum til 0 % volum/volum, fortrinnsvis 10 % volum/volum. Alternativt kan en vann-acetonløsning med vanninnhold som varierer fra 50 % volum/volum til 0 % volum/volum, fortrinnsvis 10 % volum/volum, også bli benyttet. Vann-etanolløsningen blir konsentrert til tørrhet eller atomisert. Det resulterende ekstraktet kan bli formulert i vanlige farmasøytis-ke faste former eller som en oljesuspensjon i kapsler, spesielt i oljer rik på co-3/co-6 flerumettede fettsyrer; spesielt foretrukket er Enothera biennis olje og fiskeolje og dets derivater.
Aktive doseringer til behandling av artrose og reumatoid artritt hos mennesker varierer fra 100 til 1000 mg daglig, avhengige av alvorlighetsgraden til sykdommen som skal behandles.
Oppfinnelsen blir beskrevet mer detaljert i de følgende eksemplene.
Eksempel 1
Ekstraksjon av Salix grener oa bark med en vann- etanolløsnina ( trinn a):
I dette trinnet blir det fullstendige ekstraktet som kan bli benyttet som startmate-rialet ved påfølgende kolonnekromatografiseparasjon fremstilt.
1000 gram Salix grener og bark blir dekket med 1,5 liter 30 % volum/volum etanol ved 20 °C i 4 timer i en statisk perkolator. Etter 4 timer, blir perkolatet innhentet og ekstrahert ytterligere 6 ganger under de samme betingelsene, men ved å benytte 1 liter løsningsmiddel per ekstraksjon for å oppnå omtrent 7 liter totalt perkolat.
De kombinerte perkolatene blir filtrert for å fjerne urenheter og planterester. Denne løsningen (produkt 1) har en total tørr-rest på 154 gram, utbytte versus startmateriale er 15,4 % vekt/vekt.
Det frie salicin HPLC-innholdet er 4,63 %; det totale salicin HPLC-innholdet er
15,4 % vekt/vekt. Tannininnholdet er 16,26 % vekt/vekt.
Eksempel 2
Ekstraksjon av Salix grener og bark med en vann- acetonløsninq ( trinn a):
I dette trinnet blir det fullstendige ekstraktet som kan bli benyttet som startmate-rialettil den påfølgende kolonnekromatografiseparasjon, fremstilt.
1000 gram av Salix grener og bark blir ekstrahert med 1,5 liters 80 % volum/vol-um aceton ved 20 °C i 4 timer i en statisk perkolator. Etter 4 timer blir perkolatet innhentet og ekstrahert ytterligere 6 ganger under de samme betingelser, men ved å benytte 1 liter løsningsmiddel per ekstraksjon, for å oppnå omtrent 7 liter totalt perkolat. De kombinerte perkolatene blir filtrert varmt og konsentrert med en roterende evaporator ved 60 °C under redusert trykk. Dette ekstraktet har en total tørr rest på 143 gram, og utbytte mot startmateriale er 14,3 % vekt/vekt.
Det frie salicin HPLC-innholdet er 4,3 %; det totale salicin HPLC-innholdet er
15,7 % w/w. Tannininnholdet er 15,42 % vekt/vekt.
Eksempel 3
Ekstraksjon av Salix grener og bark med vann ( trinn a):
I dette trinnet blir det fullstendige ekstraktet som kan bli benyttet som startmate-rialet til den påfølgende kolonnekromatografiseparasjon, fremstilt.
1000 gram Salix små grener og bark blir dekket med 1,5 liter vann ved 20 °C i 4 timer i en statisk perkolator. Etter 4 timer blir perkolatet innsamlet og ekstrahert 6 ganger til under de samme betingelsene, men ved å benytte 1 liter løsningsmiddel per ekstraksjon, for å oppnå omtrent 7 liter totalt perkolat. De kombinerte perkolatene blir filtrert med sug og konsentrert med en roterende evaporator ved 60 °C
under redusert trykk. Dette ekstraktet har en tørr rest på 167 gram, og utbytte mot startmateriale er 16,7 % vekt/vekt.
Det frie salicin HPLC-innholdet er 3,94 %; det totale salicin HPLC-innholdet er
13,6 % vekt/vekt. Tannininnholdet er 6,8 % vekt/vekt.
Eksempel 4
Ekstraksjon av Salix grener og bark med metanol ( trinn a):
I dette trinnet blir det fullstendige ekstraktet som kan bli benyttet som startmate-rialet til den påfølgende kolonnekromatografiseparasjon, fremstilt.
1000 gram Salix grener blir dekket med 1,5 liter metanol ved 20 °C i 4 timer i en
statisk perkolator. Etter 4 timer blir perkolatet innsamlet og ekstrahert ytterligere 6 ganger under de samme betingelsene, men ved å benytte 1 liter løsningsmiddel per ekstraksjon, for å oppnå omtrent 7 liter totalt perkolat. De kombinerte perkolatene blir filtrert og konsentrert med en roterende evaporator ved 60 °C under redusert trykk. Dette ekstraktet har en total tørr rest på 101 gram, og utbytte mot startmateriale er 10,1 % vekt/vekt.
Det frie salicin HPLC-innholdet er 5,9 %; det totale salicin HPLC-innholdet er
19,9 % vekt/vekt. Tannininnholdet er 14,5 % vekt/vekt.
Eksempel 5
Rensing av ekstraktet av Salix grener og bark ( trinn b) : fjerning av vannuløselige stoffer: Løsning 1 som er oppnådd på slutten av opparbeidelsen som er beskrevet i Eksempel 1 (trinn a), blir konsentrert med en roterende evaporator ved 60 °C under redusert trykk for å oppnå en vandig suspensjon med en tørr rest på 25 % vekt/vekt av den totale vandige suspensjonen, hvor den totale vekten av nevnte løsning er 615 g.
Den resulterende vandige suspensjonen blir avkjølt til 4 °C og får stå i 16 timer, deretter blir den fremdeles kalde vandige suspensjonen sentrifugert ved 3000 g i 20 minutter for å separere bunnfallsresten fra den klare vandige løsningen. Dette bunnfallet som har en tørr rest på 16,3 g, er rikt på tanniner og høymolekylære produkter og blir fjernet.
Den resulterende klare løsningen (løsning 2) har en tørr rest ekvivalent med 137 g delvis renset ekstrakt som har et HPLC-innhold av fri salicin på 5,0 % og HPLC-innhold av totalt salicin på 16,7 vekt/vekt. Tannininnholdet er 6,9 % vekt/vekt.
Vektutbytte mot startmateriale er 13,7 % vekt/vekt.
Eksempel 6
Rensing av ekstraktet av Salix grener og bark ( trinn c):
Den klare vandige løsningen som er oppnådd på slutten av den delvise rensepro-sessen i trinn b (Eksempel 5, løsning 2), som har en tørr rest på 137 g, blir behandlet for å fjerne vannløselige tanniner.
Løsningen blir tilsatt 14 g PVPP, tilsvarende omtrent 10 % vekt/vekt av den tørre resten av ekstraktet som skal behandles. Etter omrøring i 1 time ved romtempera-tur blir PVPP separert fra løsningen ved sentrifugering.
Den resulterende løsningen (løsning 3) har en tørr rest ekvivalent med 125 g delvis renset ekstrakt som har HPLC-innhold av fritt salicin på 5,3 % og HPLC-innhold av totalt salicin på 8 % vekt/vekt. Tannininnholdet er 1,2 % vekt/vekt.
Vektutbytte mot startmateriale er 12,5 % vekt/vekt.
Eksempel 7
Kromatoorafisk rensing av ekstraktet av Salix grener og bark ( trinn d):
Den vandige løsningen som er oppnådd fra trinn c (Eksempel 6, løsning 3), blir overført til en kromatografisk kolonne som inneholder 1250 ml Rohm og Haas XAD1180<®->resin behandlet med vann. Vann-alkoholløsningen blir adsorbert i resinet mens den tilbakeholdte løsningen som kommer ut av kolonnen blir kastet. Resinet blir deretter vasket med 1,25 liter vann, og også denne løsningen fjernes da dens innhold av ønskede komponenter er ubetydelig. Disse vandige løsningene (produkt 1) som kastes, har i virkeligheten en total tørr rest på 52,6 g, med HPLC- innhold av fritt salicin på 0,87 %, og HPLC-innhold av totalt salicin på 0,92 % ve kt/ve kt.
Kolonnen blir slemmet med 3,75 liter 90 % volum/volum vandig etanol. Det resulterende eluatet blir innsamlet og tørket ved 60 °C under redusert trykk for å gi et
utbytte på 72,4 gram av tørt produkt (produkt 2), tilsvarende et utbytte mot startmateriale på 7,2 % vekt/vekt. HPLC-innhold av fritt salicin er 8,95 %, totalt salicin HPLC-innhold er 30,0 % vekt/vekt. Innholdet av oligomeriske proantocyanidiner er 11,2 % vekt/vekt, innholdet av tanniner er 2,1 % vekt/vekt.
Eksempel 8
Kromatoqrafisk rensing av ekstraktet av Salix grener og bark ( trinn d) og separasjon av fritt salicin fra dets derivater: Den vandige løsningen fra trinn c (Eksempel 6, løsning 3) blir overført til en kromatografisk kolonne som inneholder 1250 ml Rohm og Haas XAD1180<®->resin behandlet med vann. Vann-alkoholløsningen blir adsorbert til resinet mens den ikke-tilbakeholdte løsningen som kommer ut av kolonnen, blir kastet. Resinet blir deretter vasket med 1,25 liter vann, og også denne løsningen fjernes da dens innhold av ønskede komponenter er ubetydelige. Disse vandige løsningene (produkt 3) som kastes, har i virkeligheten en total tørr rest på 51,7 g, med fritt salicin HPLC-innhold på 1,34 %, og totalt salicin HPLC-innhold på 1,41 % vekt/vekt.
Resinet blir vasket med 2,5 liter 10 % volum/volum vandig etanol, for å oppnå en løsning (produkt 4) med en tørr rest på 17,1 g (utbytte mot startmateriale på
1,7 % vekt/vekt.). Fritt salicin HPLC-innhold er 34,6 %, totalt salicin HPLC-innhold er 34,9 % vekt/vekt.
Kolonnen blir slemmet med 3,75 liter 90 % volum/volum vandig etanol. Det resulterende eluatet blir innsamlet og tørket ved 60 °C under redusert trykk for å gi et utbytte på 43,2 gram tørt produkt (produkt 5), tilsvarende et vektutbytte mot startmateriale på 4,3 % vekt/vekt, HPLC-innhold av fritt salicin på 0,45 %, HPLC-innhold av totalt salicin på 39,7 % vekt/vekt.
Eksempel 9
Formulering av ekstraktet i myke qelatinkapsler
Formulering av Salix rubra ekstrakt i oljesuspensjon til myke gelatinkapsler.
Enhetsblanding:
Fremstilling:
1) Varm opp Enothera biennis olje til omtrent 70 °C og smelt glyseryl-monostearat i denne under omrøring.
2) Tilsett soyalecitin til den resulterende løsningen.
3) Disperger Salix rubra ekstrakt i den resulterende løsningen og forårsak en homogen distribusjon med et egnet omrøringssystem.
Avkjøl den resulterende løsningen gradvis under omrøring.
Claims (10)
1. Fremgangsmåte for ekstraksjon av salicinderivater fra Salix spp grener og bark,
karakterisert vedat fremgangsmåten i sekvens består av trinn a) til d): a) ekstraksjon av Salix spp grener og bark med egnede løsningsmidler som løser opp de ønskede produktene (fullstendig ekstrakt); b) fjerning av vannuløselige (eller dårlig løselige) tanniner; c) eventuell fjerning av vannløselige tanniner; d) rensing på en resinadsorpsjonskolonne for å øke innholdet av salicinderivater.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1,
karakterisert vedat trinn (a) utføres ved ekstraksjon av plantematerialet med en C1-C3 alkohol eller blandinger av disse løsningsmidlene eller vandige løsninger av disse løsningsmidlene eller vann alene.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2,
karakterisert vedat ekstraksjonsløsningsmidlet er etanol.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 2,
karakterisert vedat ekstraksjonsløsningsmidlet er en 30 % vann-etanolløsning i alkohol volum/volum.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 2,
karakterisert vedat ekstraksjonsløsningsmidlet er aceton.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 2,
karakterisert vedat ekstraksjonsløsningsmidlet er en 80 % vo-lum/volum vann-acetonløsning.
7. Fremgangsmåte ifølge kravene 2-6,
karakterisert vedat ekstraksjonen utføres ved en temperatur på 25 °C.
8. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 7,karakterisert vedat trinn (c) blir utført ved å benytte polyvinylpolypyrrolidon (PVPP).
9. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 7,karakterisert vedat den kromatografiske separasjonen blir utført på et styrendivinylbenzen- eller akryl-resin.
10. Fremgangsmåte for fremstilling av medikamenter til behandling av artrose, reumatoid artritt, og kronisk degenerative sykdommer i ledd,karakterisert vedat den omfatter fremgangsmåten ifølge krav 1.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT001349A ITMI20051349A1 (it) | 2005-07-14 | 2005-07-14 | Estratto di salice uso e formulazioni che lo contengono |
| PCT/EP2006/005703 WO2007006384A1 (en) | 2005-07-14 | 2006-06-14 | Salix extract, its use and formulations containing it |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20080170L NO20080170L (no) | 2008-01-29 |
| NO337992B1 true NO337992B1 (no) | 2016-07-18 |
Family
ID=36968761
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20080170A NO337992B1 (no) | 2005-07-14 | 2008-01-10 | Fremgangsmåte for ekstraksjon av salicinderivater fra Salix |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20090143315A1 (no) |
| EP (1) | EP1901698B1 (no) |
| JP (1) | JP2009501165A (no) |
| KR (1) | KR101330778B1 (no) |
| CN (1) | CN101217969B (no) |
| AT (1) | ATE446103T1 (no) |
| AU (1) | AU2006269028B2 (no) |
| CA (1) | CA2614360C (no) |
| DE (1) | DE602006009935D1 (no) |
| DK (1) | DK1901698T3 (no) |
| ES (1) | ES2332289T3 (no) |
| HK (1) | HK1122491A1 (no) |
| IL (1) | IL188706A (no) |
| IT (1) | ITMI20051349A1 (no) |
| NO (1) | NO337992B1 (no) |
| PL (1) | PL1901698T3 (no) |
| PT (1) | PT1901698E (no) |
| RU (1) | RU2399379C2 (no) |
| SI (1) | SI1901698T1 (no) |
| WO (1) | WO2007006384A1 (no) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009242273A (ja) * | 2008-03-31 | 2009-10-22 | Sunstar Inc | 血清ｌｄｌコレステロール値の低下作用を有する経口組成物。 |
| CN102453061B (zh) * | 2010-11-03 | 2014-09-10 | 张守力 | 一种水杨甙的提取方法 |
| CN102247465A (zh) * | 2011-06-04 | 2011-11-23 | 新乡医学院 | 柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性 |
| KR101303383B1 (ko) * | 2012-09-10 | 2013-09-03 | 성균관대학교산학협력단 | 식물 추출물을 포함하는 비만세포의 과립 분비 억제용 조성물 |
| JP2015034140A (ja) * | 2013-08-08 | 2015-02-19 | サンスター株式会社 | 抗肥満剤 |
| CN104861013B (zh) * | 2015-06-15 | 2018-04-27 | 内蒙古昶辉生物科技股份有限公司 | 一种从白柳皮提取水杨苷的方法 |
| CN111647025B (zh) * | 2020-06-18 | 2023-05-02 | 甘肃天顺植物科技有限公司 | 一种从柳树中提取分离精制水杨苷的方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005002611A1 (en) * | 2003-06-27 | 2005-01-13 | Indena S.P.A. | Formulations for the treatment of arhritis conditions |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01218550A (ja) * | 1988-02-25 | 1989-08-31 | Itouen:Kk | 除タンニン茶液及び茶飲料の製造方法 |
| JP3623247B2 (ja) * | 1993-06-16 | 2005-02-23 | 株式会社 伊藤園 | 茶葉サポニン類を含む薬剤 |
| JPH1180002A (ja) * | 1997-09-12 | 1999-03-23 | Noevir Co Ltd | 老化防止用皮膚外用剤 |
| FR2825632B1 (fr) * | 2001-06-11 | 2003-10-03 | Silab Sa | Procede d'extraction d'un principe actif a partir de salix, principe actif obtenu et traitements cosmetiques |
| US20040147459A1 (en) * | 2002-10-23 | 2004-07-29 | Joseph Oneal | Method and composition for maintaining urinary tract health in the face of infections |
| CN1554663A (zh) * | 2003-12-29 | 2004-12-15 | 西安三江生物工程有限公司 | 一种从红皮柳鲜枝条中提取分离水杨甙的方法 |
-
2005
- 2005-07-14 IT IT001349A patent/ITMI20051349A1/it unknown
-
2006
- 2006-06-14 DE DE602006009935T patent/DE602006009935D1/de active Active
- 2006-06-14 US US11/988,586 patent/US20090143315A1/en not_active Abandoned
- 2006-06-14 JP JP2008520732A patent/JP2009501165A/ja active Pending
- 2006-06-14 WO PCT/EP2006/005703 patent/WO2007006384A1/en active Application Filing
- 2006-06-14 CN CN2006800251501A patent/CN101217969B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2006-06-14 PL PL06754350T patent/PL1901698T3/pl unknown
- 2006-06-14 AU AU2006269028A patent/AU2006269028B2/en not_active Ceased
- 2006-06-14 PT PT06754350T patent/PT1901698E/pt unknown
- 2006-06-14 RU RU2008101384/15A patent/RU2399379C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2006-06-14 CA CA2614360A patent/CA2614360C/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-06-14 DK DK06754350.4T patent/DK1901698T3/da active
- 2006-06-14 EP EP06754350A patent/EP1901698B1/en not_active Not-in-force
- 2006-06-14 AT AT06754350T patent/ATE446103T1/de active
- 2006-06-14 KR KR1020087000798A patent/KR101330778B1/ko active IP Right Grant
- 2006-06-14 ES ES06754350T patent/ES2332289T3/es active Active
- 2006-06-14 SI SI200630481T patent/SI1901698T1/sl unknown
-
2008
- 2008-01-10 NO NO20080170A patent/NO337992B1/no not_active IP Right Cessation
- 2008-01-10 IL IL188706A patent/IL188706A/en not_active IP Right Cessation
- 2008-12-12 HK HK08113543.7A patent/HK1122491A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2012
- 2012-07-02 US US13/539,970 patent/US20120270825A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005002611A1 (en) * | 2003-06-27 | 2005-01-13 | Indena S.P.A. | Formulations for the treatment of arhritis conditions |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2614360C (en) | 2017-01-17 |
| ES2332289T3 (es) | 2010-02-01 |
| AU2006269028B2 (en) | 2011-08-04 |
| SI1901698T1 (sl) | 2010-01-29 |
| CN101217969A (zh) | 2008-07-09 |
| RU2008101384A (ru) | 2009-08-20 |
| IL188706A (en) | 2010-11-30 |
| PL1901698T3 (pl) | 2010-03-31 |
| IL188706A0 (en) | 2008-08-07 |
| HK1122491A1 (en) | 2009-05-22 |
| KR101330778B1 (ko) | 2013-11-18 |
| WO2007006384A1 (en) | 2007-01-18 |
| RU2399379C2 (ru) | 2010-09-20 |
| ITMI20051349A1 (it) | 2007-01-15 |
| CA2614360A1 (en) | 2007-01-18 |
| ATE446103T1 (de) | 2009-11-15 |
| EP1901698A1 (en) | 2008-03-26 |
| KR20080031273A (ko) | 2008-04-08 |
| PT1901698E (pt) | 2009-11-27 |
| US20120270825A1 (en) | 2012-10-25 |
| CN101217969B (zh) | 2011-09-28 |
| EP1901698B1 (en) | 2009-10-21 |
| JP2009501165A (ja) | 2009-01-15 |
| DK1901698T3 (da) | 2010-02-15 |
| AU2006269028A1 (en) | 2007-01-18 |
| NO20080170L (no) | 2008-01-29 |
| US20090143315A1 (en) | 2009-06-04 |
| DE602006009935D1 (de) | 2009-12-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO337992B1 (no) | Fremgangsmåte for ekstraksjon av salicinderivater fra Salix | |
| JP2009501708A (ja) | チョウセンアザミ抽出物、その使用及びそれを含む配合物 | |
| JP5717317B2 (ja) | 化合物の医薬品的使用 | |
| RU2400246C2 (ru) | Экстракты из виноградных косточек, получаемые фракционированием на смоле | |
| JP2009525863A (ja) | 近臨界流体抽出方法 | |
| WO2010073404A1 (ja) | カシューアップルのプロアントシアニジン、プロアントシアニジン含有組成物、およびその用途 | |
| EP1153033B1 (fr) | Procede de purification d'un extrait de fruit rouge contenant des anthocyanosides | |
| AU2002342778B2 (en) | Solvent extraction process | |
| JP2014533676A (ja) | チコリ抽出物を含む組成物 | |
| JP3071669B2 (ja) | 抗アレルギー物質、その製造方法、抗アレルギー剤及び機能性食品 | |
| US20080306141A1 (en) | Method of Extraction of Catechin Type-A Proanthocyanidins | |
| US20210290720A1 (en) | Extracts of citrus aurantium var. bergamia, combinations thereof and formulations containing them | |
| JP2009155259A (ja) | カシューアップルの用途 | |
| US20140378405A1 (en) | Salix extract, its use and formulations containing it | |
| WO2017119416A1 (ja) | 黄杞葉又は黄杞葉抽出物を有効成分として含むシノビオリンの活性阻害剤 | |
| US20140314883A1 (en) | Process for obtaining partially purified extracts of antioxidant compounds of palm fruits of the genus euterpe | |
| KR20230052732A (ko) | 원산지가 다른 프로폴리스를 혼합사용하여 초임계 추출한 면역기능개선 건강기능식품 조성물 및 그 제조방법 | |
| KR101388597B1 (ko) | 지치 뿌리의 천연 색소를 함유하는 골관절염 예방 및 치료용 조성물 및 이의 제조 방법 | |
| KR20230052731A (ko) | 원산지가 다른 프로폴리스를 혼합사용한 프로폴리스 초임계추출물과 초임계추출박을 활용한 주름개선 기능성화장품 조성물 및 이의 제조방법 | |
| JP2019199453A (ja) | カフェオイルキナ酸類化合物含有複合体 | |
| JP2007238454A (ja) | 血管新生抑制剤 | |
| JP2013014550A (ja) | アグリカン分解抑制剤 | |
| JPH0873365A (ja) | 血液凝固阻害物質及びその製造方法 | |
| EP0298787A1 (fr) | Procédé de préparation d'extraits lipidiques à haute teneur en phospholipides à partir de matériau placentaire |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |