CN102247465A - 柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性 - Google Patents

Abstract

本发明属医药技术领域，涉及一种柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性，具体技术方案：取干燥柳芽，粉碎后过筛，加入8-12倍体积量70％乙醇，室温下先浸提2-4小时，然后超声1小时，温度为30℃，功率为120W；然后抽滤，滤渣再分别用10倍体积量和8倍体积量70％的乙醇按以上步骤中超声方法各重复一次，合并三次滤液，减压回收乙醇，在温度70℃下浓缩至相对密度为1.30的浸膏，冷冻干燥成粉末。将乙醇提取物的冷冻干燥粉末进行抗氧化试验，结果表明本发明产品具很强的抗氧化活性。

Description

柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性

技术领域

本发明涉及柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性，属医药技术领域。

背景技术

本发明涉及柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性。柳芽为杨柳科(Salicaceae)柳属(Salix)植物的干燥嫩芽，全国均有分布。目前，有关柳芽的研究报道较少，与柳芽有关的专利申请仅有“柳芽保健茶的制作方法”(公开号：CN 1461596A)。因此，本发明对柳芽的乙醇提取物制备工艺和抗氧化活性进行研究。

机体在生命过程中会不断产生氧自由基，适量氧自由基对细胞的分裂，生长，消炎，解毒等起积极作用，过剩则引起细胞的衰老，造成机体损伤，诱发炎症、免疫失调、恶性肿瘤等多种疾病。自由基清除剂可以直接清除体内过剩自由基，或通过增强体内抗氧化酶活力起增强抗氧化作用，有效地防止或减轻体内自由基所导致的氧化损伤，增强机体免疫能力，延缓衰老。由于合成抗氧化剂的都副作用，天然抗氧化剂受到越来越多的关注。

发明内容

1.本发明涉及柳芽乙醇提取物的制备工艺及抗氧化活性，其特征在于经过以下步骤：

步骤1、取干燥柳芽，粉碎后过筛，加入8-12倍体积量70％乙醇，室温下先浸提2-4小时，然后超声1小时，温度为30℃，功率为120W；

步骤2、将步骤1中的70％的乙醇提取液抽滤，滤渣再分别用10倍体积量和8倍体积量70％的乙醇按步骤1中超声方法各重复一次；

步骤3、将步骤2中的70％的乙醇滤液合并，减压回收乙醇，在温度70℃下浓缩至相对密度为1.30的浸膏，冷冻干燥；

步骤4、将步骤3中的柳芽乙醇提取物干燥粉末进行抗氧化试验，表明柳芽提取物具有很强的抗氧化活性。

2.根据权利要求1所述的制备工艺，所述原料为杨柳科(Salicaceae)柳属(Salix)植物的干燥嫩芽。

具体实施方式

本发明通过以下实施例进一步详述，但本实施例所述的技术内容是说明性的，而不是限定性的，不以任何方式限制本发明。

实例1  本发明的制备工艺

步骤1、取干燥柳芽，粉碎后过筛，加入8倍体积量70％乙醇，室温下先浸提4小时，然后超声1小时，温度为30℃，功率为120W；

步骤2、将步骤1中的70％的乙醇提取液抽滤，滤渣再分别用10倍体积量和8倍体积量70％的乙醇按步骤1中超声方法各重复一次；

步骤3、将步骤2中的70％的乙醇滤液合并，减压回收乙醇，在温度70℃下浓缩至相对密度为1.30的浸膏，冷冻干燥；

步骤4、将步骤3中的柳芽乙醇提取物的冷冻干燥粉末进行抗氧化试验。

实例2  本发明的制备工艺

步骤1、取干燥柳芽，粉碎后过筛，加入12倍体积量70％乙醇，室温下先浸提2小时，然后超声1小时，温度为30℃，功率为120W；

步骤2、将步骤1中的70％的乙醇提取液抽滤，滤渣再分别用10倍体积量和8倍体积量70％的乙醇按步骤1中超声方法各重复一次；

步骤3、将步骤2中的70％的乙醇滤液合并，减压回收乙醇，在温度70℃下浓缩至相对密度为1.30的浸膏，冷冻干燥；

1.4将步骤1.3中的柳芽乙醇提取物的冷冻干燥粉末进行抗氧化试验。

实例3柳芽乙醇提取物抗氧化活性试验

1.DPPH自由基清除试验

吸取不同浓柳芽乙醇提取物和Vc各2mL，分别加入0.2mmol/L DPPH无水乙醇溶液2mL，摇匀后于40℃恒温避光净置30min，以无水乙醇作空白对照于517nm波长处测定各反应的吸光度A_s。同时测定0.2mmol/LDPPH无水乙醇溶液2mL与无水乙醇2mL混合液的吸光度A₀，以及待测液2mL与无水乙醇2mL混合液的吸光度A_r。按以下公式计算样品对DPPH自由基的清除率：清除率(％)＝[1-(A_s-A_r)/A₀]×100。结果见表1所示。

表1柳芽乙醇提取物与Vc对DPPH的清除率结果(n＝3)

由表1可以看出，柳芽乙醇提取物对DPPH具有很强自由基的清除能力，且随着提取物浓度的增加而增加，浓度为200μg/mL时对DPPH清除率达到90.12％，基本相当于Vc浓度为120μg/mL的清除率。

2.对H₂O₂诱导小鼠红细胞溶血的抑制作用试验

小鼠摘眼球取血，加入肝素制成抗凝血样品，以3000rpm离心5min得红细胞，用冰冷生理盐水洗3次，用生理盐水制成0.5％的红细胞悬浮液。取红细胞悬浮液1ml，加入阳性对照药Vc及不同浓度的柳芽乙醇提取物样品溶液0.2ml，最后加0.1ml H₂O₂(100mmol/L)溶液，混匀，于37℃水浴中反应60min，用生理盐水稀释6倍，3000rpm离心5min，取上清液于415nm处测定吸收度，设正常红细胞组(即不加入H₂O₂，其他条件相同)，以对照组为100％溶血，按下式计算抑制率：抑制率(％)＝(A_对照-A_样品)/(A_对照-A_{空 白})×100。结果见表2所示。

表2柳芽乙醇提取物对H₂O₂诱导小鼠红细胞溶血的抑制作用(n＝5)

由表2可以看出，小鼠红细胞经H₂O₂诱导后A值增加，溶血度明显高于正常组，说明H₂O₂氧化红细胞膜，致胞内物质外流。柳芽乙醇提取物各剂量组的溶血度均低于对照组，表明柳芽乙醇提取物可抑制红细胞的氧化损伤，使红细胞膜稳定。

Claims (2)

1.一种以柳芽为原料制备柳芽乙醇提取物的制备工艺，其特征在于经过以下步骤：

步骤1、取干燥柳芽，粉碎后过筛，加入8-12倍体积量70％乙醇，室温下先浸提2-4小时，然后超声1小时，温度为30℃，功率为120W；

步骤2、将步骤1中的70％的乙醇提取液抽滤，滤渣再分别用10倍体积量和8倍体积量70％的乙醇按步骤1中超声方法各重复一次；

步骤3、将步骤2中的70％的乙醇滤液合并，减压回收乙醇，在温度70℃下浓缩至相对密度为1.30的浸膏，冷冻干燥；

步骤4、将步骤3中的柳芽乙醇提取物干燥粉末进行抗氧化试验，表明柳芽提取物具有很强的抗氧化活性。

2.根据权利要求1所述的制备工艺，所述原料为杨柳科(Salicaceae)柳属(Salix)植物的干燥嫩芽。