NO335780B1 - Dyrkningssystem for å dyrke primate embryonale stamceller - Google Patents

Dyrkningssystem for å dyrke primate embryonale stamceller Download PDF

Info

Publication number
NO335780B1
NO335780B1 NO20024200A NO20024200A NO335780B1 NO 335780 B1 NO335780 B1 NO 335780B1 NO 20024200 A NO20024200 A NO 20024200A NO 20024200 A NO20024200 A NO 20024200A NO 335780 B1 NO335780 B1 NO 335780B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
serum
cells
stem cells
embryonic stem
growth factor
Prior art date
Application number
NO20024200A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20024200L (no
NO20024200D0 (no
Inventor
James A Thomson
Original Assignee
Wisconsin Alumni Res Found
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=24079156&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO335780(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Wisconsin Alumni Res Found filed Critical Wisconsin Alumni Res Found
Publication of NO20024200L publication Critical patent/NO20024200L/no
Publication of NO20024200D0 publication Critical patent/NO20024200D0/no
Publication of NO335780B1 publication Critical patent/NO335780B1/no

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602Vertebrate cells
    • C12N5/0603Embryonic cells ; Embryoid bodies
    • C12N5/0606Pluripotent embryonic cells, e.g. embryonic stem cells [ES]
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/90Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10Growth factors
    • C12N2501/115Basic fibroblast growth factor (bFGF, FGF-2)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

Fremgangsmåte for å dyrke primate embryonale stamceller. Disse celler dyrkes på en langtids og stabil basis i nærvær av eksogent tilført fibroblast vektfaktor og i fravær av dyreserum. Fortrinnsvis er det også et fibroblastnæringslag. Det beskrives også et dyrkingsmedium inneholdende fibroblastnæringslag og fibroblastvekstfaktor.

Description

OPPFINNELSENS BAKGRUNN
Foreliggende oppfinnelse angår et dyrkningssystem for å dyrke primate embyonale stamceller.
Primate (for eksempel ape og menneske) pluripotente embryonale stamceller er avledet fra preimplantasjonsembryoer. Se U.S. patent 5 843 780 og J. Thomson et aL, 282 Science 1145-1147 (1998). Til tross for langvarig dyrking opprettholder disse celler et stabilt utviklingspotensiale for å danne utviklede derivater av alle de tre embryonale kimlag.
Primate (i særdeleshet humane) ES-cellelinjer har bred anvendelse i forbindelse med human utviklingsbiologi, nye medikamenter, medikamentutprøving og transplantasjonsmedisin. Nåtidens kunnskap om det humane post-implantasjonsembryo er hovedsakelig basert på et begrenset antall av statiske histologiske snitt. På grunn av etiske betraktninger er fortsatt de underliggende mekanismer som kontrollerer utviklingsmessige beslutningsprosesser hos et humant embryo i tidlig stadium i hovedsak ikke utforsket.
Selv om mus er støttespiller ved eksperimentell pattedyrutviklingsbiologi, og selv om mange av de fundamentale mekanismer som kontrollerer utviklingen er konservert mellom mus og menneske, finnes det betydelig forskjeller mellom den tidlige utviklingen hos mus og menneske. Primate/humane ES-celler bør derfor gi viktig ny innsikt i deres differensiering og funksjon.
Differensierte derivater av primate ES-celler kan anvendes for å identifisere genmål for nye medikamenter, til å teste toksikologi eller teratogenisitet av nye forbindelser, og ved transplantasjon for å erstatte cellepopulasjoner ved sykdom. Potensielle tilstander som kan behandles ved transplantasjon av ES-cellederiverte celler inkluderer Parkinsons sykdom, hjerteinfarkt, juvenil diabetes mellitus og leukemi. Se for eksempel J. Rossant et al 17 Nature Biotechnology 23-4 (1999) og J. Gearhart, 282 Science 1061-2 (1998).
Langtids proliferativ kapasitet, utviklingspotensiale etter langvarig dyrkning og karyotyp stabilitet er nøkkeltrekk med hensyn på anvendbarheten av primate embryonale stamcellekulturer. Kulturer av slike celler (spesielt på fibroblast næringslag) har typisk blitt tilsatt dyreserum (spesielt føtalt bovint serum) for å muliggjøre den ønskede proliferering under slik dyrking.
I U.S. patent 5 453 357, 5 670 372 og 5 690 296 ble for eksempel ulike dyrkingsbetingelser beskrevet, inkludert noen som anvender en type av basiske fibroblastvekstfaktorer sammen med dyreserum. Dessverre har serum tendens til å ha varierende egenskaper fra produksjonsserie til produksjonsserie, som følgelig påvirker dyrkingsegenskapene.
I WO 98/30679 ble det diskutert å frembringe et serumfritt tilskudd som skulle erstatte dyreserum, for å understøtte vekst av visse embryonale stamceller i kulturen. Serumerstatningen inkluderte albuminer eller albuminerstatninger, en eller flere aminosyrer, en eller flere vitaminer, en eller flere transferiner eller transferinerstattere, en eller flere antioksidanter, en eller flere insuliner eller insulinerstattere, en eller flere kollagenfor løpere, og et eller flere sporelementer. Det ble bemerket at denne erstatning ytterligere kunne tilføres leukemiinhiberende faktor, herdefaktor eller ciliar neurotrof faktor. Innen området primate embryonale stamcellekulturer (spesielt de dyrket på fibroblastnæringslag) viste disse kulturmediene dessverre ikke tilfredsstillende resultat.
Innen området nærende serumdyringsmedier (for eksempel føtalt bovint serum) diskuterer WO 99/20741 fordelen ved anvendelse av ulike vekstfaktorer slik som bFGF, ved dyrking av primate stamceller. Dyrkingsmedier uten nærende serum er imidlertid ikke beskrevet.
I U.S. patent 5 405 772 beskrives vekstmedier for hematopoetiske celler og benmargstromaceller. Der antydes anvendelse av fibroblastvekstfaktor i et serumfattig medium for denne hensikt. Betingelsene for vekst av primate embryonale stamceller er imidlertid ikke beskrevet.
Det er derfor fortsatt et behov for teknikker for stabil dyrking av primate embryonale stamceller uten behov for anvendelse av dyreserum.
KORT OPPSUMMERING AV OPPFINNELSEN
Oppfinnelsen tilveiebringer et dyrkningssystem for å dyrke primate embryonale stamceller omfattende: et fibroblastnæringslag; og fra 0,1 ng/ml til 500 ng/ml basisk fibroblastvekstfaktor tilført fra annet enn kun fibroblastnæringslaget; der dyrkniningssystemet er fritt for animalsk serum.
Heri beskrevet er en fremgangsmåte for å dyrke primate embryonale stamceller. Stamcellene dyrkes i en kultur hovedsakelig fri for pattedyr føtalt serum (fortrinnsvis også hovedsakelig fritt for et hvilket som helst serum) og i nærvær av fibroblastvekstfaktor som er fremskaffet fra en kilde forskjellig fra bare et fibroblastnæringslagKulturen har også et fibroblastnæringslag.
Fibroblastvekstfaktorer er essensielle molekyler for pattedyrutvikling. Det finnes for tiden ni kjente fibroblast vektfaktorligander og fire signalfibroblast vektfaktorreseptorer for disse (og deres spleisevarianter). Se generelt D. Ornitz et aL, 25 J. Biol. Chem. 15292-7 (1996); U.S. patent 5 453 357. Små variasjoner i disse faktorer er forventet å eksistere mellom arter, og følgelig er betegnelsen fibroblast vekstorfaktor ikke artsbegrenset. Det anvendes allikevel fortrinnsvis human basisk fibroblastvekstfaktor, helst human basisk fibroblastvekstfaktor fremstilt fra et rekombinant gen. Denne forbindelse er lett tilgjengelig i mengder fra Gibco BRL-Life Technologies og andre.
Det bør bemerkes at for hensikter ifølge dette patent er kulturen fri for det spesifiserte serum. Poenget er at når serum selv tilsettes oppstår problemer rundt variasjon.
De primate embryonale stamceller som kan dyrkes ved anvendelse av denne fremgangsmåte er humane embryonale stamceller som er sanne ES-cellelinjer ved at de: (i) er i stand til uendelig proliferering in vitro i en udifferensiert tilstand; (ii) er i stand til differensiering til derivater av alle tre embryonale kimlag (endoderm, mesoderm og ektoderm) selv etter lagvarig dyrking; og (iii) opprettholder en normal karyotype gjennom langvarig dyrkning. De betegnes derfor pluripotente.
Dyrkingen tillater de embryonale stamceller å proliferere stabilt i kultur i over en måned (fortrinnsvis over seks måneder; mer foretrukket over tolv måneder) samtidig som stamcellenes potensiale til å differensiere til derivater av endoderm-, mesoderm- og ektodermvev opprettholdes, og stamcellenes karyotype opprettholdes.
En annen fremgangsmåte for å dyrke primate embryonale stamceller er også beskrevet. Stamcellene dyrkes i en kultur hovedsakelig fri for føtalt pattedyr serum (fortrinnsvis også hovedsakelig fritt for et hvilket som helst dyreserum) og i nærvær av en vekstfaktor som er i stand til å aktivere en fibroblast vektfaktors signalreseptor, der vekstfaktoren er tilført fra en kilde forskjellig fra kun et fibroblastnæringslag. Mens vekstfaktoren fortrinnsvis er en fibroblastvekstfaktor kan den også være andre substanser slik som visse syntetiske små peptider (for eksempel fremstilt ved rekombinante DNA-varianter eller mutanter) utformet for å aktivere fibroblastvekstfaktorreseptorer. Se generelt T.Yamaguchi et al., 152 Dev. Biol. 75-88
(1992) (signalreseptorer).
Oppfinnelsen tilveiebringer et kultursystem for dyrking av primate embryonale stamceller. Det har et fibroblast nærlingslag og human basisk fibroblastvekstfaktor i en konsentrasjon på fra 0,1 ng/ml til 500 ng/ml tilsatt fra annet enn kun fibroblastnæringslaget. Dyrkingssystemet er fritt for dyreserum.
Det er også beskrevet cellelinjer (fortrinnsvis klonede cellelinjer) derivert ved anvendelse av fremgangsmåten ovenfor. "Derivert" anvendes i sin bredeste betydning for å dekke direkte eller indirekte deriverte linjer.
Variasjoner i resultater på grunn av forskjeller mellom produksjonsseriene av dyreserum unngås således. Videre er det funnet at ved å unngå anvendelse av dyreserum mens det anvendes fibroblastvekstfaktor kan effektiviteten av kloningen økes.
Det er derfor en fordel ifølge foreliggende oppfinnelse å frembringe dyrkingsbetingelser for primate embryonale stamcellelinjer, der betingelsene er mindre variable og tillater mer effektiv kloning. Andre fordeler ifølge foreliggende oppfinnelse vil bli tydelige etter studering av beskrivelsen og kravene.
DETALJERT BESKRIVELSE AV FORETRUKNE UTFØRELSESFORMER
I de følgende referanseeksperimenter anvendes fremgangsmåtene beskrevet heri og dyrkingssystemene ifølge oppfinnelsen for å dyrke humane ES-cellelinjer. To klonalt avledete humane ES-cellelinjer prolifererte i over åtte måneder etter klonal derivering og opprettholdt evnen til å differensiere til utviklede derivater av alle tre embryonale kimlag.
Teknikker for initial derivering, dyrking og karakterisering av den humane ES-cellelinje H9 ble beskrevet i J. Thomson et aL, Scoemce 1145-1147 (1998). Ved eksperimentene her i dokumentet ble humane ES-celler deretter sådd ut på bestrålte (35 gray gamma-bestråling) museembryonale fibroblaster. Dyrkingsmediet for det foreliggende arbeid bestod av 80% "KnockOut" Dulbeco's modifiserte Eagle's medium (DMEM) (Gibco BRL, Rockville, MD), 1 mM L-Glutamin, =,1 mM p-merkaptoetanol, og 1% stamløsning av ikke-essensielle aminosyrer (Gibco BRL, Rockville, MD), tilsatt enten 20% føtalt bovint serum (HyClone, Logan, UT) eller 20% KnockOut SR, en serumfri erstatning opprinnelig optimalisert for muse ES-celler (Gibco BRL, Rockville, MD). Bestanddelene i KnockOut SR er de beskrevet for serumerstatningene i WO 98/306789.
I alternative eksperimenter ble medium tilsatt enten serum eller den tidligere nevnte serumerstatter KnockOut SR, og enten med eller uten human rekombinant basisk fibroblastvekstfaktor (bFGF, 4 ng/ml). Det foretrukne konsentrasjonsområde til bFGF i kulturen er mellom 0,1 ng/ml til 500 ng/ml.
For å bestemme kloningseffektiviteten under varierende dyrkingsbetingelser ble Fin-kulturer skilt til enkeltceller i 7 minutter ved 0,05% trypsin/0,25% EDTA, vasket ved sentrifugering og sådd ut på mitotisk inaktiverte museembryonale fibroblaster (IO<5>ES-celler per brønn av en 6-brønns plate). For å bekrefte vekst fra enkeltceller for derivering av klonale ES-cellelinjer, ble individuelle celler utvalgt ved direkte observasjon under stereomikroskop og overført ved mikropipette til individuelle brønner av en 96-brønns plate inneholdende museembryonale fibroblastceller med medium inneholdende 20% serumerstatter og 4 ng/ml bFGF.
Kloner ble ekspandert ved rutinemessig passasje hver 5-7 dag med 1 mg/ml kollagenase type IV (Gibco BRL, Rockville, MD). Seks måneder etter derivering hadde H9-cellene en normal XX-karyotype ved standard G-båndteknikker (20 kromosomale påføringer analysert). Syv måneder etter derivering hadde imidlertid, i en enkelt karyotype tilberedning, 16/20 kromosomale påføringer en normal XX-karyotype, men 4/20 påføringer viste tilfeldige unormaliteter, inkludert en med en translokasjon til den korte armen av kromosom 13, en med et invertert kromosom 20, en med en translokasjon til den korte armen av nr. 4 og en med multippel fragmentering. Deretter ved 8,10 og 12,75 måneder etter derivering hadde H9-cellene normale karyotyper i alle de 20 undersøkte kromosomale påføringer.
Det ble observert at kloningseffektiviteten til humane ES-celler ved tidligere beskrevne dyrkingsbetingelser som inkluderte dyreserum var dårlig (uavhengig av tilstedeværelse eller fravær av bFGF). Det ble også observert at ved fravær av dyreserum økte kloningseffektiviteten, og økte enda mer med bFGF.
Dataene uttrykt nedenfor er det totale antall kolonier som resulterte fra 10<5>enkeltcellede ES-celler utsådd, +/- standardfeil (prosent kolonikloningseffektivitet). Med 20% føtalt serum og uten bFGF var et resultat 240 +/- 28. Med 20% serum og bFGF var resultatet omtrent det samme, 260 +/- 12.1 fravær av serum (med 20% serumerstatter) var resultatet uten bFGF 633 +/- 43 og resultatet med bFGF 826 +/- 61. Følgelig påvirket serum kloningseffektiviteten på en skadelig måte, og tilstedeværelse av bFGF i fravær av serum hadde en tilleggsvis synergistisk fordel med hensyn på kloningseffektivitet.
Langtidsdyrking av humane ES-celler i nærvær av serum krever ikke tilsetting av eksogent tilført bFGF, og (som bemerket ovenfor) tilsetting av bFGF til seruminneholdende medium øker ikke betydelig human ES-cellekloningseffektivitet. I serumfritt medium økte imidlertid bFGF den initsielle kloningseffektiviteten til humane ES-celler.
Videre er det funnet at tilførsel av eksogent bFGF er svært viktig for vedvarende udifferensiert proliferering av primate embryonale stamceller i fravær av dyreserum. I serumfritt medium som mangler eksogent bFGF var humane ES-celler enhetlig differensiert ved 2 ukers dyrkning. Tilsetting av andre faktorer slik som LIF (i fravær av bFGF) forhindret ikke differensiering.
De oppnådde resultater er særlig anvendelige for klonede linjer. I denne sammenheng ble kloner for ekspansjon utvalgt ved å plassere celler enkeltvis i brønner av en 96-brønns plate under direkte mikroskopisk observering. Av 192 H-9-celler utsådd til brønner av 96 brønns plater ble to kloner ekspandert med godt resultat (H-9.1 og H-9.2). Begge disse kloner ble deretter dyrket kontinuerlig i mediet tilsatt serumerstatter og bFGF.
H9.1- og H9.2-celler bibeholdt begge en normal XX-karyotype selv etter mer enn 8 måneder kontinuerlig dyrking etter kloning. H-9.1- og H-9.2-klonene bibeholdt potensialet til å danne derivater av alle tre embryonale kimlag selv etter langtids dyrking i serumfritt medium. Etter 6 måneders dyrking ble det bekreftet at H9.1- og H9.2-klonene hadde normale karyotyper og ble deretter injisert til SCID-beige mus.
Både H9.1- og H9.2-celler dannet teratomer som inneholdt derivater av alle tre embryonale kimlag inkludert tarmepitel (endoderm) embyonal nyre, tverrstripet muskel, glatt muskel, ben, brusk (mesoderm) og nervevev (ektoderm). Differensieringsspekteret observert i teratomene av de høyeste passasjene av H9.1- og H9.2-celler var sammenliknbare med de observert i teratomer dannet ved lavere passasjer av opprinnelige H9-celler.
Det bør forstås av beskrivelsen ovenfor at mens dyreserum understøtter vekst er den en sammensatt blanding som kan inneholde forbindelser både gunstige og ugunstige for humane ES-cellekultur. Videre varierer de ulike serumproduksjonsseriene mye i deres evne til å understøtte kraftig udifferensiert proliferering av humane ES-celler. Erstatning av serum med en klart definert komponent reduserer variasjonen av resultatene forbundet med dette serums batch-variasjoner, og bør muliggjøre mer omhyggelig definerte differensieringsstudier.
Videre antyder den lavere kloningseffektivitet i medium inneholdende serum nærvær av forbindelser i konvensjonelt anvendt serum som er skadelig for stamcelleoverlevelse, spesielt når cellene er dispergert til enkeltceller. Det å unngå anvendelse av disse forbindelser er derfor svært ønskelig.
Foreliggende oppfinnelse er blitt beskrevet ovenfor med hensyn på dens foretrukne utførelsesformer. For eksempel, selv om rekombinant fremstilt human basisk fibroblastvekstfaktor ble anvendt i ovennevnte eksperimenter bør naturlig isolert fibroblastvekstfaktor også være egnet. Videre bør også disse teknikker vise seg å være egnet for anvendelse på ape og andre primatcellekulturer.
Følgelig bør kravene ses på for å vurdere den fullstendige ramme av foreliggende oppfinnelse.

Claims (3)

1. Dyrkningssystem for å dyrke primate embryonale stamceller,karakterisert vedat det omfatter: et fibroblastnæringslag; og fra 0,1 ng/ml til 500 ng/ml basisk fibroblastvekstfaktor tilført fra annet enn kun fibroblastnæringslaget; der dyrkniningssystemet er fritt for animalsk serum.
2. Dyrkningssystem ifølge krav 1, der den basiske fibroblastvekstfaktoren er human basisk fibroblastvekstfaktor som er fremstilt fra et rekombinant gen.
3. Dyrkningssystem ifølge krav 1 eller 2, der de primate embryonale stamcellene er humane embryonale stamceller.
NO20024200A 2000-03-09 2002-09-03 Dyrkningssystem for å dyrke primate embryonale stamceller NO335780B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/522,030 US7005252B1 (en) 2000-03-09 2000-03-09 Serum free cultivation of primate embryonic stem cells
PCT/US2001/006912 WO2001066697A2 (en) 2000-03-09 2001-03-02 Serum free cultivation of primate embryonic stem cells

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20024200L NO20024200L (no) 2002-09-03
NO20024200D0 NO20024200D0 (no) 2002-09-03
NO335780B1 true NO335780B1 (no) 2015-02-16

Family

ID=24079156

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20024200A NO335780B1 (no) 2000-03-09 2002-09-03 Dyrkningssystem for å dyrke primate embryonale stamceller

Country Status (15)

Country Link
US (4) US7005252B1 (no)
EP (1) EP1261691B1 (no)
JP (3) JP5717311B2 (no)
KR (1) KR100795760B1 (no)
CN (1) CN100372928C (no)
AU (2) AU4197301A (no)
BR (1) BR0108507A (no)
CA (1) CA2402299C (no)
HK (1) HK1053616A1 (no)
IL (2) IL151270A0 (no)
IS (1) IS6515A (no)
MX (1) MXPA02008698A (no)
NO (1) NO335780B1 (no)
NZ (1) NZ520701A (no)
WO (1) WO2001066697A2 (no)

Families Citing this family (151)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7410798B2 (en) * 2001-01-10 2008-08-12 Geron Corporation Culture system for rapid expansion of human embryonic stem cells
US7413904B2 (en) * 1998-10-23 2008-08-19 Geron Corporation Human embryonic stem cells having genetic modifications
US10638734B2 (en) 2004-01-05 2020-05-05 Abt Holding Company Multipotent adult stem cells, sources thereof, methods of obtaining and maintaining same, methods of differentiation thereof, methods of use thereof and cells derived thereof
US8252280B1 (en) 1999-08-05 2012-08-28 Regents Of The University Of Minnesota MAPC generation of muscle
US7015037B1 (en) 1999-08-05 2006-03-21 Regents Of The University Of Minnesota Multiponent adult stem cells and methods for isolation
US7455983B2 (en) * 2000-01-11 2008-11-25 Geron Corporation Medium for growing human embryonic stem cells
US20100173410A1 (en) * 2000-03-09 2010-07-08 Wicell Research Institute, Inc. Cultivation of Primate Embryonic Stem Cells
US7514260B2 (en) * 2004-05-21 2009-04-07 Wicell Research Institute, Inc. Feeder independent extended culture of embryonic stem cells
US7439064B2 (en) * 2000-03-09 2008-10-21 Wicell Research Institute, Inc. Cultivation of human embryonic stem cells in the absence of feeder cells or without conditioned medium
JP2004529621A (ja) 2001-02-14 2004-09-30 ティー ファークト,レオ 多能性成体幹細胞、その起源、それを得る方法および維持する方法、それを分化させる方法、その使用法、ならびにそれ由来の細胞
IL159895A0 (en) * 2001-07-20 2004-06-20 Technion Res & Dev Foundation Methods of generating human cardiac cells and tissues and uses thereof
US7704736B2 (en) * 2001-11-09 2010-04-27 Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions for the derivation of germ cells from stem cells and methods of use thereof
GB0202149D0 (en) 2002-01-30 2002-03-20 Univ Edinburgh Pluripotency determining factors and uses thereof
US20040111285A1 (en) * 2002-04-09 2004-06-10 Mark Germain Method for human pluripotent stem cells
US20050244961A1 (en) * 2002-08-22 2005-11-03 Robert Short Cell culture surface
WO2004038012A1 (fr) * 2002-10-25 2004-05-06 Hunan Hui-Lin Life Technology Co. Ltd Couche de cellules nourricieres pour la culture in vitro de cellules souches embryonnaires humaines et methode de culture de cellules souches embryonnaires
GB0304918D0 (en) * 2003-03-05 2003-04-09 Celltran Ltd Cell culture
US7820439B2 (en) 2003-09-03 2010-10-26 Reliance Life Sciences Pvt Ltd. In vitro generation of GABAergic neurons from pluripotent stem cells
US20070269412A1 (en) * 2003-12-02 2007-11-22 Celavie Biosciences, Llc Pluripotent cells
ES2579804T3 (es) 2003-12-02 2016-08-16 Celavie Biosciences, Llc Composiciones y métodos para la propagación de células progenitoras neurales
US8647873B2 (en) 2004-04-27 2014-02-11 Viacyte, Inc. PDX1 expressing endoderm
US7985585B2 (en) 2004-07-09 2011-07-26 Viacyte, Inc. Preprimitive streak and mesendoderm cells
US7541185B2 (en) * 2003-12-23 2009-06-02 Cythera, Inc. Methods for identifying factors for differentiating definitive endoderm
US8586357B2 (en) * 2003-12-23 2013-11-19 Viacyte, Inc. Markers of definitive endoderm
US7625753B2 (en) * 2003-12-23 2009-12-01 Cythera, Inc. Expansion of definitive endoderm cells
DK1709159T3 (da) 2003-12-23 2019-07-29 Viacyte Inc Definitiv endoderm
US20050266554A1 (en) * 2004-04-27 2005-12-01 D Amour Kevin A PDX1 expressing endoderm
US20050233446A1 (en) * 2003-12-31 2005-10-20 Parsons Xuejun H Defined media for stem cell culture
CN1914313A (zh) * 2004-02-13 2007-02-14 旭科技玻璃股份有限公司 胚胎干细胞用喂食细胞培育培养基及喂食细胞
WO2005090557A1 (ja) * 2004-03-23 2005-09-29 Daiichi Asubio Pharma Co., Ltd. 多能性幹細胞の増殖方法
EP2377922B1 (en) 2004-04-27 2020-04-08 Viacyte, Inc. PDX1 expressing endoderm
ES2716827T3 (es) 2004-07-09 2019-06-17 Viacyte Inc Células mesendodérmicas y células de línea pre-primitiva
US8187878B2 (en) * 2004-08-13 2012-05-29 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods for increasing definitive endoderm differentiation of pluripotent human embryonic stem cells with PI-3 kinase inhibitors
KR101264940B1 (ko) * 2004-09-08 2013-05-15 위스콘신 얼럼나이 리서어치 화운데이션 배아 줄기 세포용 배지 및 이의 배양물
ES2800973T3 (es) * 2004-09-28 2021-01-07 Wisconsin Alumni Res Found Cultivo de células madre embrionarias de primates
US8017395B2 (en) 2004-12-17 2011-09-13 Lifescan, Inc. Seeding cells on porous supports
EP1841857A1 (en) * 2004-12-30 2007-10-10 Stemlifeline, Inc. Methods and compositions relating to embryonic stem cell lines
EP1844139A1 (en) * 2004-12-30 2007-10-17 Stemlifeline, Inc. Methods and systems relating to embryonic stem cell lines
CN1298843C (zh) * 2005-02-07 2007-02-07 十堰市太和医院 不依赖饲养细胞的人胚干细胞培养基
AU2006202209B2 (en) * 2005-05-27 2011-04-14 Lifescan, Inc. Amniotic fluid derived cells
CN101484575B (zh) * 2005-06-08 2013-10-02 森托科尔公司 用于眼变性的细胞疗法
EP1910516B1 (en) * 2005-06-22 2019-06-19 Asterias Biotherapeutics, Inc. Suspension culture of human embryonic stem cells
WO2007016366A2 (en) * 2005-07-29 2007-02-08 Yale University Defined culture conditions of human embryonic stem cells
KR100670616B1 (ko) * 2005-08-25 2007-01-17 주식회사 메디아나전자 상피세포 또는 섬유아세포를 이용한 세포 배양용 인공 배아 및 세포 배양 장치
JP2009506770A (ja) * 2005-09-02 2009-02-19 エージェンシー フォー サイエンス,テクノロジー アンド リサーチ 前駆細胞株の誘導法
EP1931795A4 (en) 2005-10-06 2009-11-04 Univ Massachusetts CELL DIVISION MARKER
CA2624728A1 (en) * 2005-10-07 2007-04-19 Cellartis Ab A method for obtaining a xeno-free hbs cell line
DK2674485T3 (da) 2005-10-27 2019-08-26 Viacyte Inc Pdx-1 udtrykkende dorsal og ventral fortarm endoderm
US7413900B2 (en) * 2005-10-31 2008-08-19 President And Fellows Of Harvard College Immortalized fibroblasts
US7695965B2 (en) * 2006-03-02 2010-04-13 Cythera, Inc. Methods of producing pancreatic hormones
EP2650360B1 (en) 2006-03-02 2019-07-24 Viacyte, Inc. Endocrine precursor cells, pancreatic hormone-expressing cells and methods of production
US11254916B2 (en) 2006-03-02 2022-02-22 Viacyte, Inc. Methods of making and using PDX1-positive pancreatic endoderm cells
US8741643B2 (en) * 2006-04-28 2014-06-03 Lifescan, Inc. Differentiation of pluripotent stem cells to definitive endoderm lineage
WO2007127454A2 (en) 2006-04-28 2007-11-08 Cythera, Inc. Hepatocyte lineage cells
AU2007244675A1 (en) 2006-04-28 2007-11-08 Lifescan, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
CN100465268C (zh) * 2006-05-17 2009-03-04 北京大学 人胚胎干细胞的培养方法及其专用培养基
WO2007139929A2 (en) 2006-05-25 2007-12-06 The Burnham Institute For Medical Research Methods for culture and production of single cell populations of human embryonic stem cells
JP2009540826A (ja) * 2006-06-20 2009-11-26 ジェンザイム・コーポレーション 軟骨細胞増幅のための無血清培地およびその使用
WO2008018684A1 (en) * 2006-08-11 2008-02-14 Modern Cell & Tissue Technologies Inc. Culture medium for co-culturing of human stem cells and their feeder cells
WO2008048647A1 (en) * 2006-10-17 2008-04-24 Cythera, Inc. Modulation of the phosphatidylinositol-3-kinase pathway in the differentiation of human embryonic stem cells
US9005964B2 (en) 2006-11-24 2015-04-14 Regents Of The University Of Minnesota Endodermal progenitor cells
US10829733B2 (en) * 2007-01-04 2020-11-10 Biolamina Ab Composition and method for enabling proliferation of pluripotent human stem cells
US7883698B2 (en) * 2007-01-17 2011-02-08 Maria Michejda Isolation and preservation of fetal hematopoietic and mesencymal system cells from non-controversial materials and/or tissues resulting from miscarriages and methods of therapeutic use
EP2126045A4 (en) * 2007-01-30 2010-05-26 Univ Georgia EARLY MESODERM CELLS, STABLE POPULATION OF MESENDODERM CELLS WITH THE ABILITY TO GENERATE ENDODERM AND MESODERM CELL LINES AND MULTIPOTENTIAL MIGRATION CELLS
US7951593B2 (en) * 2007-03-20 2011-05-31 Universite Rene Descartes-Paris V Culture medium for gingival fibroblasts
BRPI0813787A2 (pt) 2007-07-01 2014-10-07 Lifescan Inc Cultura de célula-tronco pluripotente isolada
US9080145B2 (en) * 2007-07-01 2015-07-14 Lifescan Corporation Single pluripotent stem cell culture
CA2693156C (en) 2007-07-18 2018-03-06 Alireza Rezania Differentiation of human embryonic stem cells
KR101592180B1 (ko) 2007-07-31 2016-02-05 라이프스캔, 인코포레이티드 인간 영양 세포를 이용한 만능 줄기 세포 분화
RU2473685C2 (ru) 2007-07-31 2013-01-27 Лайфскен, Инк. Дифференцировка человеческих эмбриональных стволовых клеток
US7695963B2 (en) 2007-09-24 2010-04-13 Cythera, Inc. Methods for increasing definitive endoderm production
ATE523585T1 (de) * 2007-11-27 2011-09-15 Lifescan Inc Differenzierung menschlicher embryonaler stammzellen
US20100087002A1 (en) * 2008-02-21 2010-04-08 Benjamin Fryer Methods, Surface Modified Plates and Compositions for Cell Attachment, Cultivation and Detachment
KR20190057164A (ko) 2008-02-21 2019-05-27 얀센 바이오테크 인코포레이티드 세포 부착, 배양 및 탈리를 위한 방법, 표면 개질 플레이트 및 조성물
US8338170B2 (en) 2008-04-21 2012-12-25 Viacyte, Inc. Methods for purifying endoderm and pancreatic endoderm cells derived from human embryonic stem cells
AU2008355123B2 (en) 2008-04-21 2014-12-04 Viacyte, Inc. Methods for purifying endoderm and pancreatic endoderm cells derived from human embryonic stem cells
US8623648B2 (en) 2008-04-24 2014-01-07 Janssen Biotech, Inc. Treatment of pluripotent cells
US7939322B2 (en) 2008-04-24 2011-05-10 Centocor Ortho Biotech Inc. Cells expressing pluripotency markers and expressing markers characteristic of the definitive endoderm
WO2009134409A2 (en) 2008-04-30 2009-11-05 Sanbio, Inc. Neural regenerating cells with alterations in dna methylation
EP2993226B1 (en) 2008-06-03 2020-12-16 Viacyte, Inc. Growth factors for production of definitive endoderm
US20090298178A1 (en) * 2008-06-03 2009-12-03 D Amour Kevin Allen Growth factors for production of definitive endoderm
JP5734183B2 (ja) * 2008-06-30 2015-06-17 ヤンセン バイオテツク,インコーポレーテツド 多能性幹細胞の分化
AU2009267167A1 (en) * 2008-06-30 2010-01-07 Centocor Ortho Biotech Inc. Differentiation of pluripotent stem cells
CN102165058B (zh) 2008-07-25 2015-07-01 佐治亚大学研究基金会 中胚层来源的ISL 1+多潜能细胞(IMPs)的组合物、心外膜祖细胞(EPCs)和多潜能CXCR4+CD56+细胞(C56Cs)及其使用方法
US20110305672A1 (en) 2008-07-25 2011-12-15 University Of Georgia Research Foundation, Inc. COMPOSITIONS FOR MESODERM DERIVED ISL1+ MULTIPOTENT CELLS (IMPs), EPICARDIAL PROGENITOR CELLS (EPCs) AND MULTIPOTENT CD56C CELLS (C56Cs) AND METHODS OF PRODUCING AND USING SAME
US20100028307A1 (en) * 2008-07-31 2010-02-04 O'neil John J Pluripotent stem cell differentiation
RU2528861C2 (ru) * 2008-10-31 2014-09-20 Сентокор Орто Байотек Инк. Дифференцирование человеческих эмбриональных стволовых клеток в линию панкреатических эндокринных клеток
CN102272291B (zh) * 2008-10-31 2018-01-16 詹森生物科技公司 人胚胎干细胞向胰腺内分泌谱系的分化
DK2356213T3 (da) 2008-11-04 2019-09-09 Viacyte Inc Stamcelleaggregatsuspensionssammensætninger og fremgangsmåder til differentiering deraf
EP2356227B1 (en) 2008-11-14 2018-03-28 Viacyte, Inc. Encapsulation of pancreatic cells derived from human pluripotent stem cells
RU2547925C2 (ru) * 2008-11-20 2015-04-10 Сентокор Орто Байотек Инк. Способы и композиции для закрепления и культивирования клеток на плоских носителях
BRPI0920956A2 (pt) 2008-11-20 2015-08-18 Centocor Ortho Biotech Inc Cultura de células-tronco pluripotentes em microveículos
US20100209399A1 (en) * 2009-02-13 2010-08-19 Celavie Biosciences, Llc Brain-derived stem cells for repair of musculoskeletal system in vertebrate subjects
WO2010096496A2 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Methods of neural conversion of human embryonic stem cells
WO2010124142A2 (en) 2009-04-22 2010-10-28 Cythera, Inc. Cell compositions derived from dedifferentiated reprogrammed cells
US9109245B2 (en) 2009-04-22 2015-08-18 Viacyte, Inc. Cell compositions derived from dedifferentiated reprogrammed cells
SG177416A1 (en) 2009-07-20 2012-02-28 Janssen Biotech Inc Differentiation of human embryonic stem cells
WO2011011300A2 (en) 2009-07-20 2011-01-27 Centocor Ortho Biotech Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
GB2485112B (en) 2009-07-20 2014-02-26 Janssen Biotech Inc Differentiation of human embryonic stem cells
EP2462230B1 (en) * 2009-08-03 2015-07-15 Recombinetics, Inc. Methods and compositions for targeted gene modification
AR078805A1 (es) * 2009-10-29 2011-12-07 Centocor Ortho Biotech Inc Celulas madre pluripotentes
KR20120102709A (ko) 2009-11-17 2012-09-18 어드밴스드 셀 테크놀로지, 인코포레이티드 인간 rpe 세포의 생산 방법 및 인간 rpe 세포의 제약 제제
RU2701335C2 (ru) 2009-12-23 2019-09-25 Янссен Байотек, Инк. Способ получения популяции панкреатических эндокринных клеток, соэкспрессирующих nkx6.1 и инсулин, и способ лечения диабета
ES2633648T3 (es) * 2009-12-23 2017-09-22 Janssen Biotech, Inc. Diferenciación de células madre embrionarias humanas
CA2791476C (en) 2010-03-01 2020-06-30 Janssen Biotech, Inc. Methods for purifying cells derived from pluripotent stem cells
RU2663339C1 (ru) 2010-05-12 2018-08-03 Янссен Байотек, Инк. Дифференцирование эмбриональных стволовых клеток человека
ES2963295T3 (es) 2010-07-12 2024-03-26 Univ Southern California Sustrato biocompatible para facilitar las interconexiones entre células madre y tejidos diana y métodos para implantarlo
WO2012021698A2 (en) 2010-08-12 2012-02-16 Janssen Biotech, Inc. Treatment of diabetes with pancreatic endocrine precursor cells
PL2611910T3 (pl) 2010-08-31 2018-06-29 Janssen Biotech, Inc Różnicowanie ludzkich embrionalnych komórek macierzystych
CN103221536B (zh) 2010-08-31 2016-08-31 詹森生物科技公司 人胚胎干细胞的分化
EP2611907B1 (en) 2010-08-31 2016-05-04 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of pluripotent stem cells
EP2630232A4 (en) 2010-10-22 2014-04-02 Biotime Inc METHOD FOR MODIFYING TRANSCRIPTIONAL REGULATORY NETWORKS IN STEM CELLS
WO2012080842A1 (en) * 2010-12-17 2012-06-21 Biolamina Ab Recombinant laminin-521
EP2701727B1 (en) 2011-03-04 2019-05-08 The Regents of The University of California Locally released growth factors to mediate motor recovery after stroke
EP2694080B1 (en) 2011-04-06 2018-03-14 SanBio, Inc. Methods and compositions for modulating peripheral immune function
US10478206B2 (en) 2011-04-29 2019-11-19 University Of Southern California Instruments and methods for the implantation of cell-seeded substrates
US8877489B2 (en) 2011-12-05 2014-11-04 California Institute Of Technology Ultrathin parylene-C semipermeable membranes for biomedical applications
WO2012170853A1 (en) 2011-06-10 2012-12-13 Wisconsin Alumni Research Foundation ("Warf") Methods and devices for differentiating pluripotent stem cells into cells of the pancreatic lineage
WO2013010045A1 (en) 2011-07-12 2013-01-17 Biotime Inc. Novel methods and formulations for orthopedic cell therapy
ES2779453T3 (es) 2011-11-04 2020-08-17 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Neuronas de dopamina (DA) del mesencéfalo para injerto
US9248013B2 (en) 2011-12-05 2016-02-02 California Institute Of Technology 3-Dimensional parylene scaffold cage
EP2794857A4 (en) 2011-12-22 2015-07-08 Janssen Biotech Inc DIFFERENTIATION OF HUMAN EMBRYONIC STEM CELLS IN SINGLE INSULIN POSITIVE CELLS
CA2866590A1 (en) 2012-03-07 2013-09-12 Janssen Biotech, Inc. Defined media for expansion and maintenance of pluripotent stem cells
RU2014149145A (ru) 2012-05-23 2016-07-20 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Композиции и способы получения и применения эндодермальных клеток и гепатоцитов
EP3450542B1 (en) 2012-06-08 2021-09-01 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells into pancreatic endocrine cells
CN102732477B (zh) * 2012-06-15 2013-06-19 江苏瑞思坦生物科技有限公司 人脂肪干细胞无血清基础培养基
WO2014022423A2 (en) 2012-07-31 2014-02-06 Hantash Basil M Hla g-modified cells and methods
US20140178988A1 (en) 2012-10-08 2014-06-26 Biotime, Inc. Differentiated Progeny of Clonal Progenitor Cell Lines
AU2013248265B2 (en) 2012-11-08 2018-11-01 Viacyte, Inc. Scalable primate pluripotent stem cell aggregate suspension culture and differentiation thereof
RU2658488C2 (ru) 2012-12-31 2018-06-21 Янссен Байотек, Инк. Способ получения клеток, экспрессирующих маркеры, характерные для панкреатических эндокринных клеток
WO2014106141A1 (en) 2012-12-31 2014-07-03 Janssen Biotech, Inc. Suspension and clustering of human pluripotent cells for differentiation into pancreatic endocrine cells
CA2896658C (en) 2012-12-31 2021-06-22 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells into pancreatic endocrine cells using hb9 regulators
US10370644B2 (en) 2012-12-31 2019-08-06 Janssen Biotech, Inc. Method for making human pluripotent suspension cultures and cells derived therefrom
US8859286B2 (en) 2013-03-14 2014-10-14 Viacyte, Inc. In vitro differentiation of pluripotent stem cells to pancreatic endoderm cells (PEC) and endocrine cells
WO2014176606A1 (en) 2013-04-26 2014-10-30 Memorial Sloan-Kettering Center Center Cortical interneurons and other neuronal cells produced by the directed differentiation of pluripotent and multipotent cells
WO2014197421A1 (en) 2013-06-05 2014-12-11 Biotime, Inc. Compositions and methods for induced tissue regeneration in mammalian species
JP2016527878A (ja) 2013-06-14 2016-09-15 ザ ユニバーシティー オブ クイーンズランド 腎臓前駆細胞
AU2014352773B2 (en) 2013-11-21 2021-04-29 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Specification of functional cranial placode derivatives from human pluripotent stem cells
US11078462B2 (en) 2014-02-18 2021-08-03 ReCyte Therapeutics, Inc. Perivascular stromal cells from primate pluripotent stem cells
KR102162138B1 (ko) 2014-05-16 2020-10-06 얀센 바이오테크 인코포레이티드 췌장 내분비 세포에서 mafa 발현을 향상시키기 위한 소분자의 용도
US10240127B2 (en) 2014-07-03 2019-03-26 ReCyte Therapeutics, Inc. Exosomes from clonal progenitor cells
CN104357379B (zh) * 2014-09-30 2017-08-08 刘兴宇 干细胞培养基
CN108779435B (zh) 2015-12-07 2022-05-03 再生疗法有限公司 用于重新衍生不同的多能干细胞衍生的褐色脂肪细胞的方法
US11674952B2 (en) 2016-02-24 2023-06-13 The Rockefeller University Embryonic cell-based therapeutic candidate screening systems, models for Huntington's Disease and uses thereof
MA45479A (fr) 2016-04-14 2019-02-20 Janssen Biotech Inc Différenciation de cellules souches pluripotentes en cellules de l'endoderme de l'intestin moyen
KR101877793B1 (ko) * 2016-07-15 2018-07-13 주식회사 엔바이오텍 줄기세포 배양용 무혈청 배지 조성물 및 이를 이용한 줄기세포의 배양 방법
WO2018064323A1 (en) 2016-09-28 2018-04-05 Organovo, Inc. Use of engineered renal tissues in assays
CN106754652B (zh) * 2017-03-06 2019-04-02 广州润虹医药科技股份有限公司 iPS细胞分化成外胚层祖细胞的无血清诱导培养基及诱导方法
CN106754657B (zh) * 2017-03-28 2022-07-22 北京赛斯达生物技术有限公司 一种猴胚胎干细胞的无血清培养基
EP3788138A1 (en) 2018-05-02 2021-03-10 Novartis AG Regulators of human pluripotent stem cells and uses thereof
CN114109294A (zh) * 2020-08-26 2022-03-01 中石化胜利石油工程有限公司管具技术服务中心 闸板拆装装置及其控制系统

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US670372A (en) * 1898-01-13 1901-03-19 William D Carpenter Process of producing casein products.
US5612211A (en) * 1990-06-08 1997-03-18 New York University Stimulation, production and culturing of hematopoietic progenitor cells by fibroblast growth factors
US5750376A (en) * 1991-07-08 1998-05-12 Neurospheres Holdings Ltd. In vitro growth and proliferation of genetically modified multipotent neural stem cells and their progeny
US5639046A (en) * 1992-07-21 1997-06-17 Fabio Perini S.P.A. Machine and method for the formation of coreless logs of web material
US5690926A (en) 1992-10-08 1997-11-25 Vanderbilt University Pluripotential embryonic cells and methods of making same
US5453357A (en) 1992-10-08 1995-09-26 Vanderbilt University Pluripotential embryonic stem cells and methods of making same
US5405772A (en) 1993-06-18 1995-04-11 Amgen Inc. Medium for long-term proliferation and development of cells
US5843780A (en) * 1995-01-20 1998-12-01 Wisconsin Alumni Research Foundation Primate embryonic stem cells
AU3392697A (en) 1996-06-14 1998-01-07 Regents Of The University Of California, The (in vitro) derivation and culture of primate pluripotent stem cells and therapeutic uses thereof
JP2001508302A (ja) 1997-01-10 2001-06-26 ライフ テクノロジーズ,インコーポレイテッド 胚性幹細胞血清置換
US6331406B1 (en) * 1997-03-31 2001-12-18 The John Hopkins University School Of Medicine Human enbryonic germ cell and methods of use
GB9722370D0 (en) * 1997-10-22 1997-12-17 Ici Plc Dye sheet cassette and printing apparatus
AU729377B2 (en) 1997-10-23 2001-02-01 Asterias Biotherapeutics, Inc. Methods and materials for the growth of primate-derived primordial stem cells in feeder-free culture
DE19756864C5 (de) 1997-12-19 2014-07-10 Oliver Brüstle Neurale Vorläuferzellen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Therapie von neuralen Defekten
US6667176B1 (en) 2000-01-11 2003-12-23 Geron Corporation cDNA libraries reflecting gene expression during growth and differentiation of human pluripotent stem cells
US7410798B2 (en) 2001-01-10 2008-08-12 Geron Corporation Culture system for rapid expansion of human embryonic stem cells
EP1179046B1 (en) 1999-05-07 2006-03-08 University Of Utah Research Foundation Lineage-restricted precursor cells isolated from mouse neural tube and mouse embryonic stem cells
IL129966A (en) * 1999-05-14 2009-12-24 Technion Res & Dev Foundation ISOLATED HUMAN EMBRYOID BODIES (hEB) DERIVED FROM HUMAN EMBRYONIC STEM CELLS
US6750581B2 (en) * 2002-01-24 2004-06-15 Visteon Global Technologies, Inc. Automotive alternator stator assembly with rectangular continuous wire

Also Published As

Publication number Publication date
US20050148070A1 (en) 2005-07-07
CA2402299A1 (en) 2001-09-13
IL151270A0 (en) 2003-04-10
NO20024200L (no) 2002-09-03
IS6515A (is) 2002-08-20
AU4197301A (en) 2001-09-17
CN1416345A (zh) 2003-05-07
JP5839666B2 (ja) 2016-01-06
EP1261691B1 (en) 2013-07-31
MXPA02008698A (es) 2003-04-14
CA2402299C (en) 2012-12-18
JP2012005489A (ja) 2012-01-12
KR100795760B1 (ko) 2008-01-21
WO2001066697A2 (en) 2001-09-13
US7005252B1 (en) 2006-02-28
NZ520701A (en) 2004-03-26
US20060040384A1 (en) 2006-02-23
JP5717311B2 (ja) 2015-05-13
JP2003525625A (ja) 2003-09-02
EP1261691A2 (en) 2002-12-04
US7217569B2 (en) 2007-05-15
WO2001066697A3 (en) 2002-03-07
BR0108507A (pt) 2002-12-17
CN100372928C (zh) 2008-03-05
AU2001241973B2 (en) 2006-11-09
KR20030032926A (ko) 2003-04-26
JP2011234735A (ja) 2011-11-24
HK1053616A1 (en) 2003-10-31
NO20024200D0 (no) 2002-09-03
IL151270A (en) 2008-07-08
US20030190748A1 (en) 2003-10-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO335780B1 (no) Dyrkningssystem for å dyrke primate embryonale stamceller
AU2001241973A1 (en) Serum free cultivation of primate embryonic stem cells
US7439064B2 (en) Cultivation of human embryonic stem cells in the absence of feeder cells or without conditioned medium
US20100173410A1 (en) Cultivation of Primate Embryonic Stem Cells
JP2023550549A (ja) 初期胚様細胞の樹立と維持のための培地と方法
AU2007200575B2 (en) Serum free cultivation of primate embryonic stem cells
JP6446496B2 (ja) 霊長類胚性幹細胞の培養
EP1715033A1 (en) Medium for preparing feeder cells for embryonic stem cells and feeder cells

Legal Events

Date Code Title Description
MK1K Patent expired