NO327959B1 - Anvendelse av 7-hydroksyepiandrosteron for fremstilling av et medikament for beskyttelse mot akutt eller kronisk nevronskade - Google Patents
Anvendelse av 7-hydroksyepiandrosteron for fremstilling av et medikament for beskyttelse mot akutt eller kronisk nevronskade Download PDFInfo
- Publication number
- NO327959B1 NO327959B1 NO20026243A NO20026243A NO327959B1 NO 327959 B1 NO327959 B1 NO 327959B1 NO 20026243 A NO20026243 A NO 20026243A NO 20026243 A NO20026243 A NO 20026243A NO 327959 B1 NO327959 B1 NO 327959B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- epia
- hydroxyepiandrosterone
- hydroxy
- dhea
- ischemia
- Prior art date
Links
- 230000004224 protection Effects 0.000 title claims abstract description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 title claims description 10
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 title claims description 7
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 title claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 5
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 title description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title description 4
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 title description 4
- 208000014674 injury Diseases 0.000 title description 3
- 230000003961 neuronal insult Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 claims description 3
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 claims description 2
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 claims description 2
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 claims description 2
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 claims description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 22
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 21
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 11
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 11
- VFPMCLQMAUVEHD-UHFFFAOYSA-N 7alpha hydroxy isoandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3C(O)CC21 VFPMCLQMAUVEHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- VFPMCLQMAUVEHD-KMQZSKAMSA-N (3beta,5alpha,7alpha)-3,7-dihydroxyandrostan-17-one Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](O)C[C@H]21 VFPMCLQMAUVEHD-KMQZSKAMSA-N 0.000 description 9
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical class C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 9
- UQNAFPHGVPVTAL-UHFFFAOYSA-N 2,3-Dihydroxy-6-nitro-7-sulfamoyl-benzo(f)quinoxaline Chemical compound N1C(=O)C(=O)NC2=C1C=C([N+]([O-])=O)C1=C2C=CC=C1S(=O)(=O)N UQNAFPHGVPVTAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 7
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 6
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 6
- 210000002763 pyramidal cell Anatomy 0.000 description 6
- -1 7-keto compound Chemical class 0.000 description 5
- VFPMCLQMAUVEHD-UCPSWNCLSA-N 7beta-hydroxyepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3[C@@H](O)C[C@H]21 VFPMCLQMAUVEHD-UCPSWNCLSA-N 0.000 description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 5
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 4
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 4
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 4
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N Nitrous Oxide Chemical compound [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 4
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 4
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 3
- 238000010826 Nissl staining Methods 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 3
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- OLPSAOWBSPXZEA-JIEICEMKSA-N 7alpha-hydroxydehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](O)C=C21 OLPSAOWBSPXZEA-JIEICEMKSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000795424 Epia Species 0.000 description 2
- 206010019196 Head injury Diseases 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 2
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N halothane Chemical compound FC(F)(F)C(Cl)Br BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003132 halothane Drugs 0.000 description 2
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N isopentane Chemical compound CCC(C)C QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 239000001272 nitrous oxide Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 2
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000002385 vertebral artery Anatomy 0.000 description 2
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- OLPSAOWBSPXZEA-GCNMQWDSSA-N 7beta-hydroxydehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3[C@@H](O)C=C21 OLPSAOWBSPXZEA-GCNMQWDSSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017701 Endocrine disease Diseases 0.000 description 1
- QGXBDMJGAMFCBF-UHFFFAOYSA-N Etiocholanolone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC21 QGXBDMJGAMFCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 206010056677 Nerve degeneration Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N Pregnenolone Natural products O=C(C)[C@@H]1[C@@]2(C)[C@H]([C@H]3[C@@H]([C@]4(C)C(=CC3)C[C@@H](O)CC4)CC2)CC1 ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 208000032851 Subarachnoid Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000003855 balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 108050003126 conotoxin Proteins 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L copper(ii) acetate Chemical compound [Cu+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052593 corundum Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N dimethyl butane Natural products CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QLTXKCWMEZIHBJ-PJGJYSAQSA-N dizocilpine maleate Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O.C12=CC=CC=C2[C@]2(C)C3=CC=CC=C3C[C@H]1N2 QLTXKCWMEZIHBJ-PJGJYSAQSA-N 0.000 description 1
- QGXBDMJGAMFCBF-LUJOEAJASA-N epiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 QGXBDMJGAMFCBF-LUJOEAJASA-N 0.000 description 1
- 210000000918 epididymis Anatomy 0.000 description 1
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000013383 initial experiment Methods 0.000 description 1
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 1
- 210000001853 liver microsome Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 150000002736 metal compounds Chemical class 0.000 description 1
- FJQXCDYVZAHXNS-UHFFFAOYSA-N methadone hydrochloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1C(CC(C)N(C)C)(C(=O)CC)C1=CC=CC=C1 FJQXCDYVZAHXNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001095 motoneuron effect Effects 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004090 neuroprotective agent Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- ORNBQBCIOKFOEO-QGVNFLHTSA-N pregnenolone Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 ORNBQBCIOKFOEO-QGVNFLHTSA-N 0.000 description 1
- 229960000249 pregnenolone Drugs 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000000506 psychotropic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 229930187593 rose bengal Natural products 0.000 description 1
- AZJPTIGZZTZIDR-UHFFFAOYSA-L rose bengal Chemical compound [K+].[K+].[O-]C(=O)C1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1C1=C2C=C(I)C(=O)C(I)=C2OC2=C(I)C([O-])=C(I)C=C21 AZJPTIGZZTZIDR-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940081623 rose bengal Drugs 0.000 description 1
- STRXNPAVPKGJQR-UHFFFAOYSA-N rose bengal A Natural products O1C(=O)C(C(=CC=C2Cl)Cl)=C2C21C1=CC(I)=C(O)C(I)=C1OC1=C(I)C(O)=C(I)C=C21 STRXNPAVPKGJQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003935 rough endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 229910001845 yogo sapphire Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
- A61K31/568—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in positions 10 and 13 by a chain having at least one carbon atom, e.g. androstanes, e.g. testosterone
- A61K31/5685—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in positions 10 and 13 by a chain having at least one carbon atom, e.g. androstanes, e.g. testosterone having an oxo group in position 17, e.g. androsterone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Psychology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse gjelder anvendelse av 7-hydroksyepiandrosteron for fremstilling av et medikament for beskyttelse mot akutt eller kronisk nevronskade. Forbindelsene er derfor anvendbare for behandling og forebyggelse av tilstander, eller følger av tilstander, som Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, kognitiv svekkelse uten dementia (CIND), slag, hjernetraume og skader på ryggmarg og perifere nerver og også anvendbare for å fremme den kognitive funksjon.
Dannelse av 7o>hydroksylerte metabolitter av dehydroepiandrosteron (DHEA) in vivo er kjent siden 1959, med påvisning av 7o>hydroksy-DHEA i urin [J. J. Schneider, M. L. Lewbart, Recent Progr. Horm. Res. 15 (1959) 201 - 230, L. Starka et al., Clin. Chim. Acta. 7 (1961) 309 - 316]. Siden da har omfattende 7a-hydroksylering av 3P-hydroksy-steroidsubstrater (innbefattet DHEA og epiandrosteron - EPIA) blitt rapportert i vevspre-parater fra mange humane organer, innbefattet voksen og føtal lever, testis, bitestikkel, hud, brystvev, prostata, adipøse stromaceller og tonsiller. Hydroksylering av DHEA i 7-posisjon har også blitt påvist i rottelever og i en rekke vev og organer fra mus. I alle disse under-søkelsene var 7a-hydroksy-DHEA absolutt den metabolitt det ble dannet mest av. Faktisk rapporterte Doostzadeh et al. [Steroids 63 (1998) 608 - 614] at hastigheten for dannelse av 7a-hydroksy-DHEA i mikrosomer fra muselever var mer enn 15 ganger høyere enn hastigheten for dannelse av 7P-hydroksy-DHEA.
EPIA, DHEA og pregnenolon har også blitt vist å overføres hurtig og omfattende til de tilsvarende 7a-hydroksymetabolitter i rottehjerne [J. M. Guiraud et al., Steroids 34
(1979) 241 - 248, M. Warner et al., Endocrinology 124 (1989) 2699 - 2706, Y. Akwa et al., Biochem. J. 288 (1992) 959 - 964].
W097/37664 beskriver anvendelse av visse spesifikke forbindelser, innbefattet 7a-hydroksysubstituerte steroider, for behandling av nevropsykiatriske forstyrrelser, immunforstyrrelser og endokrine forstyrrelser. Blant forstyrrelsene, som det i W097/37664 foreslås at disse forbindelsene kan anvendes for å behandle, omfattes Alzheimers sykdom. Den foreslåtte mekanisme for denne virkningen er imidlertid at det antas at forstyrrelsen skyldes mangel på det 7a-hydroksysubstituerte steroid i hjernen, og behandlingen som foreslås i W097/37664 retter således opp denne mangelen ved tilførsel av et 7a-hydroksysubstituert steroid for å erstatte den manglende forbindelse. Fremgangsmåten som beskrives i W097/37664 behandler således en foreliggende tilstand, snarere enn å forebygge tilstanden, eller forebygge en forverring av tilstanden, ved å forhindre ytterligere nevronskader. W097/37664 beskriver følgelig ikke en nevrobeskyttende virkning. Patentskriftet foreslår heller ikke at forbindelsene kan anvendes for å forebygge skaden som oppstår ved plutselige og traumatiske begivenheter, for eksempel slag.
Oppfinnerne har nå overraskende oppdaget at 7-hydroksyepiandrosteron, både a, P eller blanding av disse, kan anvendes for å beskytte mot akutt og kronisk nevronskade grunnet begivenheter som slag, hjernetraume og cerebral iskemi, for eksempel indusert ved subaraknoid blødning eller opptredende under hjerte-"bypass"-operasjoner osv.
Under begivenheter som vedvarende hypoksi og iskemi, forbundet med hypoglykemi eller ikke, opptrer nevronskader i varierende grad.
Iskemi opptrer typisk under hjerteattakk, men skaden som opptrer i disse tilfeller er i det vesentlige begrenset til hjértevev, og visse behandlingsformer har blitt utviklet. Når det gjelder foreliggende oppfinnelse, er oppfinnerne opptatt av virkningene av iskemi over lengre tid på hjernen, for eksempel hos slagpasienter eller som en følge av hodeskader. Omfanget av iskemien avhenger av slaget eller skadens natur, men det vil uten unntak forekomme hjerneskade, og det er denne som er av særlig interesse.
Disse nevrobeskyttende midler som er kjente innen faget, prøver å lindre problemet med hjerneskade, men alle midlene som til nå er kjent, er forbundet med uheldige bivirkninger. For eksempel er MK801 (dizocilpinmaleat) et temmelig enkelt molekyl som vites å gi et visst nivå av nevrobeskyttelse hos iskemiske pasienter. MK801 er imidlertid også forbundet med "alarmerende psykotropiske virkninger" (Martindale), så vel som uheldige motoriske virkninger. De nevrobeskyttende virkninger beskrives i detalj i Brain Research 755 (1997) 36 - 46 (Pringle, A. K., et al.) som inkorporeres heri ved referanse. De samme forfattere beskriver også de nevrobeskyttende virkninger av konotoksin i en tidligere artikkel, men trass i de nevrobeskyttende virkninger av denne forbindelse, observeres uheldige bivirkninger in vivo.
Foreliggende oppfinnelse består således i anvendelse av 7-hydroksyepiandrosteron (7-hydroksy-EPIA) for fremstilling av et medikament for beskyttelse mot akutt eller kronisk nervecelleskade.
Denne forbindelsen kan representeres ved formel (I):
og 7a- og 7p-isomeren er henholdsvis:
Også forløpere for disse forbindelser og forbindelser som in vivo metaboliseres slik at disse forbindelsene dannes, kan anvendes.
a- og P-isomerene kan anvendes hver for seg eller i blanding og kan, dersom de foreligger i en blanding, foreligge i hvilke som helst relative mengder. 7p-isomeren ser imidlertid ut til å ha høyere aktivitet og foretrekkes derfor for tiden.
Forbindelsene kan fremstilles ved en rekke fremgangsmåter som er velkjente i seg selv, med utgangspunkt i utgangsteroidene. De kan for eksempel fremstilles ved fremgangs-måtene som beskrives i litteraturen det vises til ovenfor, som vil gi en blanding av 7p-forbindelser og de tilsvarende 7a-forbindelser, som så kan separeres ved velkjente teknikker.
Som et eksempel kan 7a- og/eller 7p-hydroksy-EPIA erholdes fra DHEA ved allyloksidasjon etter beskyttelse av 3p-hydroksygruppen og 17-ketongruppen ved anvendelse av konvensjonelle fremgangsmåter. Produktet reduseres så med en egnet metallforbindelseskatalysator (slik som natriumhydrid), og 3p-hydroksygruppen og 17-ketongruppen avbeskyttes. 7a-hydroksy- og 7P-hydroksyepimerene kan så, om ønskelig, separeres ved konvensjonelle midler, for eksempel kolonnekromatografi, og 7a- og 7P-hydroksy-EPIA kan krystalliseres til renhet.
Alternativt kan 7a- og 7(3-hydroksy-EPIA fremstilles som illustrert i det påfølgende reaksjonsskjema:
I dette reaksjonsskjema acetyleres DHEA (II) for dannelse av det tilsvarende acetat med formel (III), som så får reagere med etylenglykol for dannelse av ketalet med formel ( TV). Ketalet (IV) oksideres så som beskrevet i eksempel 3 for dannelse av den tilsvarende 7-ketoforbindelse (V), som så deacetyleres for dannelse av forbindelsen med formel (VI). Denne reduseres for dannelse av 7-hydroksy-17-ketal-EPIA med formel (VII) som så behandles med en syre for fjerning av ketalgruppen og dannelse av 7-hydroksy-EPIA, som til slutt separeres i 7|3- og 7a-isomeren ved kromatografi for erholdelse av 7a-hydroksy-EPIA (IX) og 7p-hydroksy-EPIA (X).
Forbindelsene kan tilføres til pasienter som antas å være i fare for et iskemisk angrep, fortrinnsvis et slag eller en hodeskade, eller dersom de antas å utvikle en kronisk nevrodegenerativ sykdom, for eksempel Alzheimers sykdom, eller CIND, noe som kan fremmes ved kronisk hjerneiskemi under terskelverdien, eller ved redusert energiproduksjon i nervecellene, noe som hyppig observeres i hjernen hos eldre. Slik profylaktisk tilførsel kan være uhyre nyttig. Det har imidlertid også blitt vist at forbindelsene har anvendbar aktivitet også ved tilførsel etter en iskemisk hendelse, men det vil forstås at det foretrekkes å tilføre forbindelsene så snart som mulig for i størst mulig grad å unngå nevrondegenerering. Under noen omstendigheter kan det være ønskelig å tilføre gjentatte doser, særlig dersom pasienten forblir i fare for en iskemisk hendelse.
Egnede tilførselsfremgangsmåter er generelt ved injeksjon, for å oppnå det ønskede resultat så hurtig som mulig. Således foretrekkes spesielt intravenøs injeksjon, men det kan i noen tilfeller foretrekkes å tilføre forbindelsen direkte inn i cerebrospinalvæsken.
Dosen av forbindelsen vil variere avhengig av mange faktorer, innbefattet pasi-entens alder, kroppsvekt og generellé helsetilstand, så vel som tilførselsmåte, tilførsels-hyppighet og tilførselsvei. Imidlertid anbefales generelt en dose på mellom 0,01 og 50 mg/kg kroppsvekt, hvor en dose på mellom 0,05 og 20 mg/kg kroppsvekt foretrekkes ytterligere. Dette kan tilføres i en enkelt dose eller oppdelt på flere doser.
Oppfinnelsen illustreres ytterligere ved de påfølgende eksempler, hvorav eksemplene 1 til 7 illustrerer fremstilling av forbindelsene og eksemplene 8 og 9 illustrerer deres aktivitet. I eksemplene 1 til 7 viser romertallene til formlene i reaksjonsskjemaene vist ovenfor.
Eksempel 1
DHEA-3-acetat(IIl)
En løsning av 50 ml pyridin og 50 ml eddiksyreanhydrid tilsatt 10 g DHEA (II)
(34,72 mmol) ble oppvarmet til refluks i 4 timer. Reaksjonsløsningen ble avkjølt, uthelt i vann og ekstrahert med etylacetat. Den organiske fase ble tørket over vannfritt natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Det ble erholdt 11,0 g DHEA-3-acetat (III) (33,33 mmol, 96 %), som ble rekrystallisert fra etanol.
Eksempel 2
17-ketal-DHEA-3-acetat (IV)
En løsning av 100 ml toluen tilsatt 5 g DHEA-3-acetat (III) (15,15 mmol), 5 ml etylenglykol og en katalytisk mengde p-toluensulfonsyre ble oppvarmet til refluks under
dampdestillering ved anvendelse av et Dean-Stark-apparat i 24 timer. Reaksjonsløsningen ble uthelt i 100 ml 10 % (vekt/vol) vandig kaliumkarbonatløsning. Den organiske fase ble dekantert. Vannfasen ble ekstrahert med etylacetat. De organiske faser ble slått sammen og inndampet til tørrhet. Det ble erholdt 5,10 g 17-ketal-3-DHEA-acetat (TV) (13,64 mmol, 90 %) som ble rekrystallisert fra etanol.
Eksempel 3
7-keto-17-ketal-DHEA-3-acetat (V)
En løsning av 70 ml pyridin tilsatt 5 g 17-ketal-DHEA-3-acetat (IV) (13,37 mmol) og en katalytisk mengde bengalrosa ble bestrålt med en kvikksølvdamplampe med middels trykk ved gjennombobling med oksygen. En katalytisk mengde kopperacetat ble tilsatt til reaksjonsblandingen etter 24 timer. Etter 24 timer ble reaksjonsløsningen inndampet til tørrhet. Restmaterialet ble renset ved "flash"-kromatografi (Si02/etylacetat: sykloheksan 3/7). 3,11 g 7-keto-17-ketal-DHEA-3-acetat (V) (8,02 mmol, 60 %) ble erholdt Eksempel 4
7-keto-17-ketal-DHEA (VI)
En løsning av 50 ml metanol tilsatt 1 % kaliumhydroksid og 1 g 7-keto-17-ketal-DHEA-3-acetat (V) (2,58 mmol) ble oppvarmet til refluks i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble så avkjølt og nøytralisert, og så ekstrahert med etylacetat. Den organiske fase ble tørket over vannfritt natriumsulfat og så inndampet til tørrhet. Det ble erholdt 802 mg 7-keto-17-ketal-DHEA 5 (2,32 mmol, 90 %) som ble rekrystallisert fra metanol.
Eksempel 5
7-hydroksy-17-ketal-EPIA (VII)
10 g 7-keto-17-ketal-DHEA (VI) (28,90 mmol) ble tilsatt til en flytende ammoniakkløsning ved - 33 °C tilsatt 2,65 g natrium. Etter 4 timer ble ammoniumklorid tilsatt inntil blåfargen forsvant. 2,65 g natrium ble så tilsatt. Etter 4 timer ble ammoniumklorid igjen tilsatt inntil blåfargen forsvant. Vann ble tilsatt og ammoniakken avdampet. Reaksjonsblandingen ble ekstrahert med etylacetat. Den organiske fase ble tørket over vannfritt natriumsulfat og så inndampet til tørrhet. 6,07 g 7-hydroksy-17-ketal-EPIA (VII)
(17,34 mmol, 60 %) ble erholdt.
Eksempel 6
7-hydroksy-EPIA (VIII)
En løsning av 100 ml aceton tilsatt 5 ml vann, 10 g 7-hydroksy-17-ketal-EPIA (VIII) (28,57 mmol, 50 %) og en katalytisk mengde p-toluensulfonsyre ble oppvarmet til refluks i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt, uthelt i 100 ml 10 % (vekt/vol) vandig natriumkarbonatløsning og så ekstrahert med etylacetat. Den organiske fase ble tørket over vannfritt natriumsulfat og så inndampet til tørrhet. Restmaterialet ble renset ved "flash"-kromatografi (Si02/etylacetat). 5,24 g 7-hydroksy-EPIA (VIII) (17,14 mmol, 60 %) ble erholdt.
Eksempel 7
7a-hydroksy-EPIA (IX) & 7P-hydroksy-EPIA (X)
7-hydroksy-EPIA (VIII) (5 g) tilsatt 7a- og 7p-epimer i forholdet 65/35 ble renset ved "flash"-kromatografi (A1203/CHC13). 7P-hydroksy-EPIA (X) (2,5 g) ble erholdt først, foran 7a-hydroksy-EPIA (IX) (1,34 g). 7p-hydroksy-EPIA (X) og 7a-hydroksy-EPIA (IX) ble rekrystallisert fra etylacetat.
Eksempel 8
Fremgangsmåte for undersøkelse av hypoksisk nevronskade
Organotypiske snittkulturer fra hippocampus ble fremstilt ved anvendelse av fremgangsmåten til Pringle et al. (1996,1997), modifisert som følger: Wistar-rotteunger (8-11 dager gamle) ble dekapitert, og hippocampus ble hurtig dissekert ut i iskald Geys balanserte saltløsning tilsatt 4,5 mg/ml glukose. Snitt ble fremstilt og utsådd i Millicell CM dyrkningsholdere (4 pr brønn) og inkubert ved 37 °CV 5 % C02 i 14 dager. Vedlikeholdsmediet besto av 25 % varmeinaktivert hesteserum, 25 % Hanks balanserte saltløsning (HBSS) og 50 % minimalt essensielt medium med Earls salter (MEM) tilsatt 1 mM glutamin og 4,5 mg/ml glukose. Mediet ble byttet hver 3-4 dag. Eksperimentell hypoksi ble utført som beskrevet tidligere (Pringle et al. 1996, 1997). Kort beskrevet ble kulturene overført til semmfritt medium (SFM - 75 % MEM, 25 % HBSS tilsatt 1 mM glutamin og 4,5 mg/ml glukose) tilsatt 5 jig/ml av det fluorescer-ende eksklusjonsfargestoff propidiumjodid (PI). Kulturene ble ekvilibrert i SFM i 60 minutter før billeddannelsen. PI-fluorescens ble påvist ved anvendelse av et invertert Leica-mikroskop utstyrt med et rhodaminifltersett. Kulturer hvori PI-fluorescens ble påvist i dette stadium ble ikke undersøkt videre. Hypoksi ble indusert ved å overføre kulturer til SFM (+PI) som på forhånd var mettet med 95 % N2/5 % C02. Dyrkningsskåler (uten lokk) ble så forseglet i et lufttett kammer hvori atmosfæren var mettet med 95 % N2/5 % C02 ved kontinuerlig gjennomblåsing av gass ved 10 l/min i 10 minutter før forseglingen, og plassert i inkubatoren i 170 minutter (den totale hypoksitid var derfor 180 minutter). Etter dette tidsrom med hypoksi ble kulturene overført til SFM tilsatt PI med normalt oksygeninnhold og plassert i inkubatoren i 24 timer.
Nevronskaden ble målt som beskrevet tidligere (Pringle et al., 1996,1997) ved anvendelse av enten NTH Image 1,60 og en Apple Ilsi-datamaskin eller OpenLab 2,1 (Improvision) og en Macintosh G4/400. Bilder ble innfanget ved anvendelse av et mono-kromt kamera og lagret i et optisk platelager for senere analyse. Lystransmisjonsbilder ble innfanget før tilsetning av medikamenter, og Pl-fluorescensbilder ble lagret etter gjenvinningstiden på 24 timer etter hypoksien. Arealet av CAl-cellelaget ble bestemt ut fra transmisjonsbildet. Pl-fluorescensarealet i CA1 ble målt ved anvendelse av tetthetssnitt-funksjonen i NIH Image eller OpenLab, og nevronskaden uttrykt som prosentandelen av CA1 hvori PI-fluorescens ble påvist over bakgrunnsnivå.
Steroide forbindelser ble fremstilt ved å lage en 1 mg/ml løsning i etanol og videre fortynning med SFM. Forbindelsene ble tilsatt kulturene 45 minutter før hypoksibehand-lingen, under den hypoksiske periode og under gjenvinningstiden etter hypoksien. Kontroll-eksperimentene besto av kulturer som kun ble behandlet med bærerstoff.
Resultater
Eksperiment 1:
Et innledende eksperiment ble utført for å fastslå hvorvidt 7aOH-EPIA og 7POH-EPIA var nevrobeskyttende ved en høy konsentrasjon på 100 nM. Hypoksien ga en skade i 25,5 ± 6,4 % av CA1. Denne skaden ble i signifikant grad redusert ved nærvær av både 7aOH-EPIA og 7POH-EPIA før, under og etter hypoksien, som vist i tabell I nedenfor.
Eksperiment 2:
Etter å ha fastslått at både a- og P-isomeren av 70H-EPIA var nevrobeskyttende, anslo vi konsentrasjonsavhengigheten av denne virkingen. Kontroll-hypoksi førte til en nevronskade på 31,9 ± 4,7 % i CA1. 7aOH-EPIA var signifikant beskyttende ved 100 nM. En liten, men ikke statistisk signifikant, reduksjon av nevronskaden ble observert ved 10 nM, og det var ingen virkning ved 1 nM. I motsetning til dette var 7POH-EPIA signifikant nevrobeskyttende ved 10 nM og 100 nM, men aktiviteten forsvant dersom konsentrasjonen ble redusert til 1 nM (Se tabell 2).
Eksempel 9
Global cerebral iskemi hos rotter (okklusjon av 4 kar)
Cerebral iskemi ble indusert ved okklusjon av 4 kar (4VO) hos Wistar-hannrotter (250 - 280 g). Begge vertebralarterier ble okkludert ved elektrokauterisering under bedøvelse med pentobarbital (60 mg/kg intraperitonealt). Dyrene fikk gjenvinne seg i 24 timer med fri tilgang på vann, men uten f6r. Neste dag ble halsarteriene eksponert under bedøvelse med 2 % halotan i 30 % oksygen/70 % dinitrogenoksid og okkludert i 10 minutter ved anvendelse av mikrovaskulære klyper. Deretter ble de to klypene fjernet, og begge arterier ble inspisert for umiddelbar reperfusjon. Under operasjonen, og i de påfølgende 3 timer, ble normal temperatur (37,5 ± 0,5 °C) opprettholdt hos dyrene ved anvendelse av et termostatkontrollert varmeteppe koblet til et rektalt termometer. Som kontroll ble begge vertebralarteriene kauterisert hos narreopererte dyr under pentobarbital-bedøvelse, og de to halsarteriene ble eksponert, men ikke sammenkløpet, under bedøvelse med 2 % halotan i 30 % oksygen/70 % dinitrogenoksid neste dag. Såret ble behandlet med lidokaingel og så gjensydd. Dyrene ble holdt under en varmelampe ved en temperatur på 30 °C i omgivelsene inntil de ble bevisste.
Syv grupper av dyr ble undersøkt:
1. (n = 8) steroidforbindelse: 7P-OH-EPIA (0,1 mg/kg intravenøst via halevenen, tre injeksjoner: 15 minutter før indusert iskemi, under iskemien og 5 minutter etter reperfusjon), 2. (n = 8) steroidforbindelse: 7(J-OH-EPIA (0,3 mg/kg intravenøst, tre injeksjoner som beskrevet i 1.), 3. (n = 8) steroidforbindelse: 7P-OH-EPIA (1 mg/kg intravenøst, tre injeksjoner som beskrevet i 1.), 4. (n = 8) NBQX (dinatriumsaltet, siden dette er mer vannløselig) som referanse-forbindelse og positiv kontroll (TOCRIS, Tyskland, 30 mg/kg intrapeirtonealt, tre injeksjoner som beskrevet i 1.), 5. (n = 8) ble tilført bærerstoff (0,9 % NaCl tilsatt 100 ul etanol), tre injeksjoner som beskrevet i 1.)
6. (n = 8) kun iskemi,
7. (n = 8) narreopererte kontrolldyr.
NBQX er 2,3-dihydroksy-6-nitro-7-sulfamoyl-benzo(F)kinoksalin og vites å ha nevrobeskyttende aktivitet. [Gill, R. Nordholm, L., Lodge D.: The neuroprotective action of 2,3-dihydroxy-6-nitro-7-sulfamoyl-benzo(F)quinoxaline (NBQX) in a rat focal ischaemia model. BrainRes. 580,35-43,1992].
7P-OH-EPIA er 7P-hydroksyepiandrosteron, en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse.
Forbindelsene ble løst i 100 ul etanol og så fortynnet med 0,9 % NaCl.
Etter en overlevelsestid på 7 dager etter iskemien ble alle dyr perfusjonsfiksert transkardialt med 4 % paraformaldehyd. Hjernen ble forsiktig fjernet og postfiksert i samme fikseringsmiddel i 2 timer. Etter kryobeskyttelse i 30 % sukrose ble hjernen hurtig nedfrosset i isopentan og lagret ved - 80 °C. Kryostatsnitt på 20 mikrometer, som omfattet hippo-campusstrukturen, var Nissl-farget med toluidin blue eller Neuro Trace-fluorescens.
Analyse av måleverdiene:
Omfanget av nevronskade i hippocampusområdet CA1 etter iskemien ble evaluert ut fra antall overlevende nevroner ved anvendelse av Nissl-farging. Det gjennomsnittlige antall morfologisk intakte nevroner pr 400 um lengde ble beregnet i CA 1-området for hver gruppe. Celletellingen ble utført i 3 - 5 seriesnitt pr dyr og 6 ganger 400 (im CA 1-område pr snitt ved anvendelse av et lysmikroskop utstyrt med 20x objektiv. Resultatene ble analysert statistisk ved paret Students t-test. Resultatene ble angitt som middelverdi ± standard målefeil.
Resultater og diskusjon
Resultatene vises i figurene IA til 1C av de vedlagte figurer.
Morfologisk intakte nevroner i hippocampus CA1 ble kjennetegnet ved Nissl-farging (toluidinblått og Neuro Trace) ut fra følgende kriterier: tydelig form av en nevronal perikarya, stor kjerne med positivt farget nukleolus, en liten cytoplasmatisk sone rundt kjernen med positiv nissl-farging, som viser det intakte rough endoplasmatiske retikulum med ribosomer og derfor et intakt proteinsyntesemaskineri. 10 minutter med global iskemi (mild iskemi) og en overlevelsestid på 7 dager fører til nevrodegenerering av pyramideceller selektivt i hippocampus CAl-området (fig. 1A-1C). Gjennomsnittlig antall pyramideceller i CA1 hos narreoprererte dyr var 121,5 ± 4,3 (satt til 100 %). Følgelig døde 60 % av CA 1-nevronene etter 10 minutter med global iskemi (fig. IB) . Antall nevroner hos dyregruppen med iskemi og intravenøs injeksjon av bærerstoff (NaCl plus 100 ul etanol), tilført som beskrevet i eksperimentet, tilsvarte antallet hos gruppen med iskemi alene (fig. IA, IB). NBQX (30 mg/kg intravenøst, tre injeksjoner som beskrevet i eksperimentet) viste signifikant (p = 0,03) nevrobeskyttelse av CA1-pyramideceller, sammenlignet med iskemigruppen. Sammenlignet med iskemi alene fører NBQX til 47,5 % nevrobeskyttelse, mens den beskyttende virkning var 68,5 % sammenlignet med de narreopererte dyr. Nevrobeskyttelsen oppnådd med NBQX var i samsvar med Gill et al., 1992 og Gill, 1994, noe som viste gyldigheten av den globale iskemimodell oppfinnerne anvendte i sine eksperimenter. 7P-OH-EPIA fører til en konsentrasjonsavhengig nevrobeskyttelse av pyramideceller i hippocampus CA1 etter 10 minutter med global iskemi og en overlevelsestid på 7 dager (fig. IA). T-testanalyse viste en svært signifikant nevrobeskyttende virkning av 7P-OH-EPIA i konsentrasjoner på 0,1 mg/kg (p = 0,01) og 0,3 mg/kg (p = 0,0008). Sammenlignet med den narreopererte gruppe, viste 7P-OH-EPIA en nevrobeskyttende virkning på 74,8 % (0,1 mg/kg) og 83,9 % (0,3 mg/kg) på CA 1-pyramideceller (fig. IC) . 7P-OH-EPIA i en konsentrasjon på 1,0 mg/kg viste kun en tendens til nevrobeskyttelse, men virkningen var ikke signifikant.
I eksperimentene med 7P-OH-EPIA injisert intravenøst, før, under og etter iskemien observerte vi aldri atferdsmessige unormaliteter hos dyrene.
Figurtekst:
Antall morfologisk intakte pyramideceller i hippocampus CA1 hos rotter 7 dager etter global cerebral iskemi og under påvirkning av forskjellige forbindelser.
Resultatene ble angitt som gjennomsnittsantall intakte nevroner ± SEM pr 400 um lengde av CAl-området.
Resultatene ble uttrykt som prosentantall intakte nevroner pr 400 um lengde av CAl-området, sammenlignet med narreopererte dyr satt til 100 %.
Resultatene ble angitt som absolutt prosent nevrobeskyttelse hvor antall overlevende nevroner i iskemi-gruppen ble satt til null og antall overlevende nevroner i den narreopererte gruppe til 100 %.
Claims (6)
1. Anvendelse av 7-hydroksyepiandrosteron for fremstilling av et medikament for beskyttelse mot akutt eller kronisk nevronskade.
2. Anvendelse ifølge krav 1, hvori 7-hydroksyepiandrosteronet er 7a-hydroksyepiandrosteron.
3. Anvendelse ifølge krav 1, hvori 7-hydroksyepiandrosteronet er 7P-hydroksyepiandrosteron.
4. Anvendelse ifølge krav 1, hvori 7-hydroksyepiandrosteronet er en blanding av 7a-hydroksyepiandrosteron og 7P-hydroksyepiandrosteron.
5. Anvendelse ifølge ethvert av de foregående krav, hvori nevronskaden skyldes slag eller hjernetraume.
6. Anvendelse ifølge ethvert av de foregående krav, hvori nevronskaden skyldes Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, kognitiv svekkelse uten dementia eller skader på ryggmarg eller perifere nerver.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB0016022A GB2363983A (en) | 2000-06-29 | 2000-06-29 | Protection against neuronal damage using 7-hydroxyepiandrosterone |
| PCT/GB2001/002937 WO2002000225A1 (en) | 2000-06-29 | 2001-06-29 | 7-hydroxyepiandrosterone having neuroprotective activity |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20026243D0 NO20026243D0 (no) | 2002-12-27 |
| NO20026243L NO20026243L (no) | 2003-02-27 |
| NO327959B1 true NO327959B1 (no) | 2009-10-26 |
Family
ID=9894707
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20026243A NO327959B1 (no) | 2000-06-29 | 2002-12-27 | Anvendelse av 7-hydroksyepiandrosteron for fremstilling av et medikament for beskyttelse mot akutt eller kronisk nevronskade |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7718639B2 (no) |
| EP (1) | EP1294382B1 (no) |
| JP (1) | JP4942905B2 (no) |
| KR (1) | KR100786284B1 (no) |
| CN (1) | CN100459980C (no) |
| AT (1) | ATE401897T1 (no) |
| AU (2) | AU6770901A (no) |
| CA (1) | CA2414584C (no) |
| CY (1) | CY1108773T1 (no) |
| CZ (1) | CZ299676B6 (no) |
| DE (1) | DE60134979D1 (no) |
| DK (1) | DK1294382T3 (no) |
| ES (1) | ES2310182T3 (no) |
| GB (1) | GB2363983A (no) |
| HK (1) | HK1052300B (no) |
| HU (1) | HU227152B1 (no) |
| IL (2) | IL153541A0 (no) |
| NO (1) | NO327959B1 (no) |
| PL (1) | PL200699B1 (no) |
| PT (1) | PT1294382E (no) |
| RU (1) | RU2307654C2 (no) |
| SI (1) | SI1294382T1 (no) |
| WO (1) | WO2002000225A1 (no) |
| ZA (1) | ZA200300085B (no) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2363984A (en) * | 2000-06-29 | 2002-01-16 | Hunter Fleming Ltd | Protection against neuronal damage using 3-hydroxy-7 -hydroxy steroids and 3-oxo-7 -hydroxy steroids |
| GB2378898A (en) * | 2001-08-14 | 2003-02-26 | Hunter Fleming Ltd | Prophylactic and therapeutic use of hydroxysteroids |
| AU2003278744B2 (en) * | 2002-08-28 | 2010-07-29 | Harbor Biosciences, Inc. | Therapeutic treatment methods |
| US20070231373A1 (en) * | 2004-04-28 | 2007-10-04 | Hunter-Fleming Limited | Transdermal Steriod for Formulation |
| US8580983B2 (en) | 2006-11-21 | 2013-11-12 | Umecrine Ab | Steroids having increased water solubility and resistance against metabolism, and methods for their production |
| GB0623971D0 (en) * | 2006-11-30 | 2007-01-10 | Hunter Fleming Ltd | Modulation of prostaglandin/cyclooxygenase metabolic pathways |
| KR20090086272A (ko) | 2006-11-30 | 2009-08-11 | 헌터-플레밍 리미티드 | 프로스타글란딘／시클로옥시게나제 대사 경로의 조절 |
Family Cites Families (33)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| YU243975A (en) | 1974-10-14 | 1982-06-30 | Schering Ag | Process for obtaining 7-hydroxyestradiols |
| US5707983A (en) * | 1990-08-29 | 1998-01-13 | Humanetics Corporation | Treatment of alzheimer's disease and modulation of immune system with Δ5-androstenes |
| US5292730A (en) * | 1990-08-29 | 1994-03-08 | Humanetics Corporation | Modulation of immune system with Δ5-androstenes |
| US5212167A (en) * | 1991-09-12 | 1993-05-18 | Trustees Of Boston University | Modulation of receptor-mediated ion transport |
| FR2696934B1 (fr) * | 1992-10-20 | 1995-06-02 | Conservatoire Nal Arts Metiers | Dérivés de stéroïdes naturels 3B hydroxyles ayant des propriétés de déclenchement et de stimulation de l'immunité, composition les contenant et procédé pour les obtenir. |
| US5846963A (en) | 1995-06-07 | 1998-12-08 | University Of Utah Research Foundation | Methods for preventing progressive tissue necrosis, reperfusion injury, bacterial translocation and adult respiratory distress syndrome |
| SK103195A3 (en) | 1993-03-09 | 1996-12-04 | Univ Utah Res Found | Use of dehydroepiandrosterone derivative for pharmaceutical compositions production and pharmaceutical composition containing dehydroepiandrosterone derivative |
| US5387583A (en) * | 1993-04-20 | 1995-02-07 | Loria; Roger M. | Compositions containing corticosteroids or analogues thereof and corticosteroid buffering effective amounts of 5-androstene 3B, 17B or 5-androstene 3B, 7B, 17B triol or analogues thereof |
| US5554601A (en) | 1993-11-05 | 1996-09-10 | University Of Florida | Methods for neuroprotection |
| US5877169A (en) | 1993-11-05 | 1999-03-02 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Methods of treatment of ischemic damage |
| US5976850A (en) * | 1994-10-19 | 1999-11-02 | University Of Edinburgh | Hippocampus-associated proteins; DNA sequences coding therefor and uses thereof |
| US5556847A (en) * | 1994-10-27 | 1996-09-17 | Duquesne University Of The Holy Ghost | Methods of effecting memory enhancement mediated by steroid sulfatase inhibitors |
| HUP9901138A3 (en) | 1995-06-06 | 1999-11-29 | Cocensys Inc Irvine | Neuroactive steroids of the androstane and pregnane series |
| EP0840612A1 (en) | 1995-07-24 | 1998-05-13 | Trustees Of Boston University | Inhibition of nmda receptor activity by pregnenolone sulfate derivatives |
| GB2317826B (en) * | 1995-08-29 | 1999-12-15 | Univ Edinburgh | Regulation of intracellular glucocorticoid concentrations |
| US5985242A (en) | 1995-10-27 | 1999-11-16 | Praecis Pharmaceuticals, Inc. | Modulators of β-amyloid peptide aggregation comprising D-amino acids |
| JP2000511404A (ja) | 1996-04-09 | 2000-09-05 | ビー・テイー・ジー・インターナシヨナル・リミテツド | 神経精神、免疫又は内分泌障害を治療するための７α置換ステロイドの使用 |
| JP2001500852A (ja) | 1996-08-27 | 2001-01-23 | プレーシス ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド | Ｄ―アミノ酸を含むβ―アミロイドペプチド凝集のモジュレーター |
| FR2760362B1 (fr) * | 1997-03-10 | 2000-08-11 | Vitasterol | Utilisation cosmetique ou dermatologique de steroides 7-hydroxyles |
| WO1998043647A1 (en) * | 1997-03-28 | 1998-10-08 | Massachusetts Institute Of Technology, Inc. | Regulation of amyloid precursor protein (app) expression by estrogenic compounds |
| GB9708716D0 (en) * | 1997-04-29 | 1997-06-18 | Imperial College | Chronic heart failure |
| WO1999015179A1 (en) | 1997-09-25 | 1999-04-01 | Regents Of The University Of Minnesota | Methods of limiting apoptosis of cells |
| WO1999024400A1 (en) | 1997-11-10 | 1999-05-20 | Vyrex Corporation | Probucol esters and uses thereof |
| EP1032397A1 (en) * | 1997-11-24 | 2000-09-06 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Testosterone inhibitors and use for the protection of neurons |
| GB9726569D0 (en) | 1997-12-16 | 1998-02-11 | Univ Southampton | Neuroprotective agents |
| AU3467699A (en) * | 1998-04-14 | 1999-11-01 | Pharmadigm, Inc. | Method for reducing central nervous system impairment |
| FR2786102B1 (fr) * | 1998-11-20 | 2001-02-16 | Monique Vincens | Utilisation de sulfate de dehydroepiandrosterone pour augmenter le nombre de recepteurs nmda chez un mammifere |
| US6667299B1 (en) | 2000-03-16 | 2003-12-23 | Hollis-Eden Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical compositions and treatment methods |
| US20030083231A1 (en) | 1998-11-24 | 2003-05-01 | Ahlem Clarence N. | Blood cell deficiency treatment method |
| JP2003513102A (ja) | 1999-11-02 | 2003-04-08 | シエーリング アクチエンゲゼルシャフト | 選択的な作用を有するエストロゲンとしての１８−ノル−ステロイド |
| GB0003524D0 (en) | 2000-02-15 | 2000-04-05 | Btg Int Ltd | Cytoprotective steroids (II) |
| GB2363984A (en) * | 2000-06-29 | 2002-01-16 | Hunter Fleming Ltd | Protection against neuronal damage using 3-hydroxy-7 -hydroxy steroids and 3-oxo-7 -hydroxy steroids |
| EP1557166A1 (en) * | 2004-01-21 | 2005-07-27 | Newron Pharmaceuticals S.p.A. | Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of lower urinary tract disorders |
-
2000
- 2000-06-29 GB GB0016022A patent/GB2363983A/en not_active Withdrawn
-
2001
- 2001-06-29 WO PCT/GB2001/002937 patent/WO2002000225A1/en active IP Right Grant
- 2001-06-29 AU AU6770901A patent/AU6770901A/xx active Pending
- 2001-06-29 IL IL15354101A patent/IL153541A0/xx active IP Right Grant
- 2001-06-29 US US10/312,533 patent/US7718639B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-29 JP JP2002505007A patent/JP4942905B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-29 SI SI200130866T patent/SI1294382T1/sl unknown
- 2001-06-29 CA CA002414584A patent/CA2414584C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-29 EP EP01945494A patent/EP1294382B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-29 PT PT01945494T patent/PT1294382E/pt unknown
- 2001-06-29 HU HU0301134A patent/HU227152B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 DK DK01945494T patent/DK1294382T3/da active
- 2001-06-29 AT AT01945494T patent/ATE401897T1/de active
- 2001-06-29 CZ CZ20030077A patent/CZ299676B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 KR KR1020027017898A patent/KR100786284B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 AU AU2001267709A patent/AU2001267709B2/en not_active Ceased
- 2001-06-29 PL PL359108A patent/PL200699B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 RU RU2003102437/15A patent/RU2307654C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 ES ES01945494T patent/ES2310182T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-29 DE DE60134979T patent/DE60134979D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-29 CN CNB018121098A patent/CN100459980C/zh not_active Expired - Fee Related
-
2002
- 2002-12-19 IL IL153541A patent/IL153541A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-12-27 NO NO20026243A patent/NO327959B1/no not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-01-03 ZA ZA200300085A patent/ZA200300085B/en unknown
- 2003-06-26 HK HK03104578.9A patent/HK1052300B/zh not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-10-20 CY CY20081101165T patent/CY1108773T1/el unknown
-
2009
- 2009-12-16 US US12/639,708 patent/US20100173883A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20100173883A1 (en) | 7-hydroxyepiandrosterone having neuroprotective activity | |
| PH12014501079B1 (en) | 4-pregenen-11-17-21-triol-3,20-dione derivatives for the treatment of ocular conditions | |
| NO332089B1 (no) | Anvendelse av et 7ß-hydroksysteroid eller en farmasoytisk aksepterbar ester eller et annet derivat for fremstilling av et medikament for beskyttelse mot neuronskade | |
| Liu et al. | Dose dependence and therapeutic window for the neuroprotective effects of 17β-estradiol when administered after cerebral ischemia | |
| AU2001267705A1 (en) | Neuroprotective 7-beta-hydroxysteroids | |
| AU2001267709A1 (en) | 7-hydroxyepiandrosterone having neuroprotective activity | |
| Eadie et al. | Neurological clinical pharmacology | |
| KR20010012157A (ko) | 프레그난-3-올-20-온 | |
| WO2003015791A1 (en) | Phophylactic and therapeutic use of hydroxysteroids | |
| KR101357980B1 (ko) | 유제놀을 포함하는 기계적 이질통 치료용 약학적 조성물 | |
| EP2156862A1 (en) | Use of digitalis-like compounds in the treatment of affective disorders | |
| BR112017014733B1 (pt) | Composto 3a-etinila, 3ss-hidróxi, 5a-pregnan-20-oxima e seu uso no tratamento de um distúrbio do cns | |
| FR2680108A1 (fr) | Nouvelles compositions pharmaceutiques a base de sterouides 6-hydroxymethyles et leur procede d'obtention. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |