BR112017014733B1

BR112017014733B1 - Composto 3a-etinila, 3ss-hidróxi, 5a-pregnan-20-oxima e seu uso no tratamento de um distúrbio do cns

Info

Publication number: BR112017014733B1
Application number: BR112017014733-5A
Authority: BR
Inventors: Torbjõrn Bãckstrõm; Gianna Ragagnin
Original assignee: Umecrine Cognition Ab
Priority date: 2015-01-12
Filing date: 2016-01-11
Publication date: 2023-04-25
Also published as: RS59736B1; HUE046759T2; CA2971302A1; IL253037B; CN107207560A; AU2016207865A1; WO2016113549A1; MX2017008953A; JP2018501290A; US10351589B2; SI3245217T1; US20170369522A1; HK1244288A1; TWI748936B; PL3245217T3; IL253037A0; CY1122588T1; HRP20192341T1; AU2016207865B2; ZA201704287B

Abstract

A invenção se refere a 3a-etinila, 3β-hidr0xi, 5a-pregnan-20-oxima ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, cujos compostos e/ou sais são úteis como moduladores da excitabilidade cerebral de mamífero por meio do complexo ionóforo de cloreto de receptor de ácido gama-aminobutírico (GABAA-R) e no tratamento de distúrbios, como encefalopatia hepática, síndrome de Down e doença de Alzheimer.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] Esta invenção refere-se a um composto esteroidal inovador e seu uso em terapia, como no tratamento de encefalopatia hepática, síndrome de Down, doença Alzheimer e deficiência cognitiva, geralmente, assim como a composições farmacêuticas que compreendem aquele composto. A invenção também se refere ao uso de um composto esteroidal conhecido no tratamento de encefalopatia hepática, síndrome de Down e doença Alzheimer.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0002] A listagem ou discussão de um documento anterior e previamente aplicado neste relatório descritivo não deve ser necessariamente tomada como um reconhecimento de que o documento é parte do estado da técnica ou é de conhecimento geral comum.

[0003] Os metabólitos de hormônios esteroides endógenos, como as pregnanolonas (que incluem pregnenolona, progesterona, desoxicorticosterona, cortisona e cortisol), testosterona, androstenediona e desidroepiandrosterona, foram submetidos a vários estudos.

[0004] Muitos exemplos de 3-alfa-hidroxi-5- alfa/beta-esteroides são conhecidos por atuar no complexo ionóforo de cloreto de receptor de ácido gama-aminobutírico (GABAA-R) e são chamados, portanto, de esteroides de modulação de receptor de GABAA (GAMS). Os mecanismos de interação no sítio receptor não foram elucidados completamente, devido à complexidade estrutural do complexo de GABAA-R. Entretanto, a família de receptor de GABA inclui diversos componentes de subunidade, alguns dos quais são conhecidos por serem funções específicas relacionadas e distúrbios do CNS.

[0005] 3-alfa-hidroxi-5-alfa/beta-esteroides são produzidos em quantidades altas ao longo de diversos dias/semana, e podem causar diretamente inibição de funções CNS. Os exemplos de distúrbios e sintomas causados pela ação direta de 3-alfa-hidroxi-5-alfa/beta-esteroides incluem distúrbio disfórico pré-menstrual, síndrome pré-menstrual, demência, doença Alzheimer, síndrome de Down, sedação, cansaço, síndrome da fadiga crônica, perturbação de memória, perturbação de aprendizado, perturbação de função motora, fraturas, déficit de coordenação motora, apetite aumentado e fome seletiva, obesidade, recaída por abuso de álcool e substâncias, humor negativo como tensão, irritabilidade, depressão, audição e visão diminuídas, agravamento de pequeno mal epiléptico e síndrome de Burnout.

[0006] A exposição contínua e/ou a longo prazo a 3- alfa-hidroxi-5-alfa/beta-esteroides faz com que a tolerância se desenvolva no sistema receptor de GABAA. Essa tolerância é a primeira etapa em um processo que pode levar finalmente à sensibilidade ao estresse, dificuldades de concentração, e perda de controle de impulso e depressão. Adicionalmente, a ação de 3-alfa-hidroxi-5-alfa/beta-esteroides foi constatada como um fator que reforça a dependência de fármacos.

[0007] A exposição a curto prazo contínua resulta, por outro lado, em um efeito de retirada quando a exposição é terminada. Esse fenômeno ocorre, por exemplo, durante a menstruação, quando a produção de 3-alfa-hidroxi-5- alfa/beta-esteroides pelo corpus luteum do ovário é interrompida. Esse fenômeno de retirada também ocorre após o parto, quando sua produção pela placenta é interrompida, ou no fim de um período de estresse (glândulas adrenais produzem 3-alfa-hidroxi-5-alfa/beta-esteroides durante o estresse).

[0008] Exemplos de afecções que são influenciadas por tal retirada e/ou abstinência incluem epilepsia parcial, “epilepsia catamenial”, enxaqueca, mudanças de humor e dor de cabeça de “fim de semana”.

[0009] O receptor de GABAA é um canal de cloreto e exerce sua ação mudando-se o influxo de cloreto através do canal. Sabe-se na técnica que a atividade neuronal no cérebro é diminuída quando o receptor de GABAA é aberto e quantidades grandes de íon cloreto fluem para a célula. Sabe-se também que há uma relação entre a quantidade de cloreto que se move para dentro e o efeito clínico de um fármaco ativo de receptor de GABAA.

[0010] Benzodiazepinas, barbituratos e, até certo ponto, álcool exercem sua ação por meio desse mecanismo. Isso, entretanto, também é responsável por efeitos adversos desses fármacos.

[0011] Um problema com o receptor de GABAA é que o mesmo exerce sua ação na maioria das partes do cérebro. Em vista disso, os bloqueadores completos de ação de GABA são perigosos e podem causar sintomas psicóticos e convulsões. Dito isso, quando a ação de 3-alfa-hidroxi-5-alfa/beta- pregnan-esteroides for antagonizada, é desejável usar os compostos que antagonizam especificamente os efeitos de 3- alfa-hidroxi-5-alfa/beta-pregnan-esteroide, enquanto não é antagonizado o próprio efeito de GABA.

[0012] Consequentemente, a presente invenção se refere a resolver o problema de provisão de agentes específicos que têm capacidade para bloquear receptores de GABA, cujos compostos podem ser, desse modo, úteis no tratamento de anomalias na excitação de receptores de GABA ou outros neurotransmissores relacionados a receptores de GABA.

[0013] O pedido de patente internacional no WO 2008/063128 revela 3-alfa-hidroxi-esteroides e 3-beta- hidroxi-esteroides. O pedido de patente internacional no WO 99/45931 revela os efeitos antagonistas do esteroide 3-beta- OH-5alfa-pregnan-20-ona. O pedido de patente internacional no WO 03/059357 revela 3-beta—hidroxi—esteroides e seu efeito antagonista no receptor de GABAA.

[0014] As Patentes no U.S. 5.232.917, no U.S. 5.92 5 63 0, no U.S. 5.93 9.54 5, no U.S. 6.143.736 e no U.S. 6.277.838 revelam 3-alfa-hidroxi-esteroides e 3-beta- hidroxi-esteroides como moduladores antagonistas do receptor de GABAA com um foco específico em 3-alfa-hidroxi-esteroides e seu efeito semelhante à benzodiazepina. No pedido de patente no U.S. 2004/0242549, vários esteroides são revelados.

[0015] O efeito antagonista de 3-beta-OH-5-alfa- pregnan-20-ona e outros 3-beta-OH-5-alfa/beta pregnan- esteroides é discutido por Wang et al (Acta Physiol. Scand., 169, 334 (2000) e J. Neurosci., 22, 3366 (2002)).

[0016] Os compostos da técnica anterior que incluem aqueles mencionados acima não são específicos para certos subtipos de GABAA-R. Consequentemente, há uma necessidade por compostos que são mais seletivos para subtipos de receptor.

[0017] Adicionalmente, os esteroides da técnica anterior e de ocorrência natural são submetidos ao metabolismo, frequentemente não são adequados para administração oral, e têm tipicamente permeabilidade insatisfatória. Isso torna muito difícil a administração de tais compostos. Consequentemente, também há uma necessidade por compostos que são menos facilmente metabolizados/degradados no corpo, e/ou têm uma permeabilidade/biodisponibilidade melhorada.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

[0018] Foi constatado que o composto 3α-etinila, 3β- hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima pode atuar como um antagonista ao receptor de GABAA, e que pode fazer isso modulando-se a acentuação de esteroide do complexo de GABAA-R, por exemplo, modulando-se o efeito de sinalização de GAMS como um antagonista da subunidade alfa 5 de receptor de GABA.

[0019] De acordo com a invenção, é fornecido o composto 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima (Figura 1), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o composto e os sais são chamados mais adiante de “os compostos da invenção”.

[0020] Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de adição de ácido e sais de adição de base.

[0021] Tais sais de adição de ácido e sais de adição de base podem ser formados por meios convencionais, por exemplo, por reação de uma forma de ácido livre ou base livre de um composto de fórmula I com um ou mais equivalentes de um ácido ou base apropriado, opcionalmente em um solvente, ou em um meio o qual o sal é insolúvel, após remoção do dito solvente, ou dito meio, com uso de conjuntos de procedimentos padrão (por exemplo, in vacuo, por secagem por congelamento ou filtração). Os sais também podem ser preparados trocando- se um contraíon de um composto da invenção na forma de um sal por outro contraíon, por exemplo, com uso de uma resina de troca iônica adequada.

[0022] Exemplos de sais de adição de ácido que podem ser mencionados incluem sais de carboxilato (por exemplo, sais de formato, acetato, trifluoroacetato, propionato, isobutirato, heptanoato, decanoato, caprato, caprilato, estearato, acrilato, caproato, propiolato, ascorbato, citrato, glicuronato, glutamato, glicolato, α- hidroxibutirato, lactato, tartrato, fenilacetato, mandelato, fenilpropionato, fenilbutirato, benzoato, clorobenzoato, metilbenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, dinitrobenzoato, o-acetoxibenzoato, salicilato, nicotinato, isonicotinato, cinamato, oxalato, malonato, succinato, suberato, sebacato, fumarato, malato, maleato, hidroximaleato, hipurato, ftalato ou tereftalato), sais de haleto (por exemplo, sais de cloreto, brometo ou iodeto), sais de hidrohaleto (por exemplo, sais de cloridrato, hidrobrometo ou hidroiodeto), sais de sulfonato (por exemplo, sais de benzenossulfonato, metila, bromo ou cloro- benzenossulfonato, xilenossulfonato, metanossulfonato, etanossulfonato, propanossulfonato, hidroxietanossulfonato, 1- ou 2- naftaleno-sulfonato ou 1,5-naftalenodissulfonato) ou sais de sulfato, pirossulfato, bissulfato, sulfeto, bissulfeto, fosfato, monoidrogenofosfato, diidrogenofosfato, metafosfato, pirofosfato ou nitrato, e semelhantes.

[0023] Os exemplos de sais de adição de base que podem ser mencionados incluem sais formados com ácidos, como HCl, metais alcalinos (como sais de Na e K), metais alcalino- terrosos (como sais de Mg e Ca), bases orgânicas (como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina e lisina) e bases inorgânicas (como amônia e hidróxido de alumínio). Mais particularmente, os sais de adição de base que podem ser mencionados incluem sais de Mg, Ca e, mais particularmente, K, e, mais particularmente, Na.

[0024] De acordo com um aspecto da invenção, é fornecido um sal de cloridrato de 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima. De acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecido um sal sódico de 3α-etinila, 3β- hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima.

[0025] Os compostos da invenção podem ser preparados, por exemplo, conforme descrito mais adiante no presente documento.

USOS MÉDICOS E FARMACÊUTICOS

[0026] Os compostos da invenção são indicados como produtos farmacêuticos. Portanto, de acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecido um composto conforme definido antes no presente documento, para uso como um produto farmacêutico e/ou para uso em terapia, como em medicamento.

[0027] Conforme descrito mais adiante no presente documento, foi mostrado de modo surpreendente que os compostos da invenção podem acentuar o efeito de GABA em receptores de GABAA que contêm a composição de subunidade α1,β2,Y2, enquanto não tem efeito direto em si no fluxo de cloreto quando aplicado sozinho no receptor de GABAA que contém α1,β2,Y2.

[0028] Em particular, foi constatado que os compostos da invenção podem acentuar o efeito de GABA em receptores α1,β2,Y2 enquanto são ao mesmo tempo antagonistas aos receptores de α5,β3,Y2. De modo surpreendente, o tratamento simultâneo com 3-alfa-hidroxi-pregnan-esteroides e compostos da invenção inibe o fluxo de cloreto através do receptor de GABAA humano do tipo alfa 5 quando expressado de modo recombinante em células HEK (Rim embriônico humano, HEK) induzidas pelo 3-alfa-hidroxi-pregnan-esteroide, mas tem efeito baixo em fluxo de cloreto induzido somente por GABA.

[0029] Foi constatado adicionalmente que essa ação pode ser alcançada em concentrações farmacológica e fisiologicamente adequadas.

[0030] Consequentemente, devido ao fato de que os compostos da invenção podem bloquear a ação de 3-alfa- hidroxi-pregnan-esteroides no receptor de GABAA humano, os mesmos são potencialmente úteis no tratamento de distúrbios de CNS relacionados a esteroide, tipicamente em indivíduos humanos.

[0031] “distúrbios de CNS relacionados a esteroide” incluem epilepsia, epilepsia dependente de ciclo menstrual, depressão, depressão relacionada ao estresse, enxaqueca, cansaço e em particular cansaço relacionado ao estresse, síndrome pré-menstrual, distúrbio disfórico pré-menstrual, mudanças de humor ligadas ao ciclo menstrual, deficiência cognitiva (incluindo deficiência cognitiva mínima), mudanças de memória ligadas ao ciclo menstrual, mudanças de memória relacionadas ao estresse, dificuldades de aprendizado relacionadas ao estresse, encefalopatia hepática, síndrome de Down, doença Alzheimer, dificuldades em concentração ligadas ao ciclo menstrual, distúrbios do sono e cansaço ligados ao ciclo menstrual. Também há indicações fortes de que obesidades e apetite aumentado, assim como recaídas por abuso de álcool e/ou substâncias, algumas formas de equilibrar perturbações/distúrbios, distúrbios momentâneos e dificuldades de coordenação são relacionadas a esteroide ou induzidas por esteroide, e “distúrbios de CNS relacionados a esteroide” também incluem, desse modo, apetite aumentado, compulsão alimentar e obesidade, recaída por abuso de álcool e substâncias. A presente invenção oferece, desse modo, compostos e métodos para tratamento, amenização ou prevenção dessas afecções.

[0032] Os distúrbios que podem ser mencionados especificamente incluem síndrome de Down e doença Alzheimer e, especialmente, encefalopatia hepática.

[0033] Os distúrbios de encefalopatia hepática podem ser manifestados e/ou distinguidos por sintomas que incluem deficiência de um ou mais dentre o ciclo sono-vigília, capacidade cognitiva, memória, aprendizado, coordenação motora e/ou consciência, assim como níveis de energia diminuídos, mudança de personalidade, deficiência cognitiva, desorientação e/ou coma e incluem encefalopatia hepática do tipo A, encefalopatia hepática do tipo B, encefalopatia hepática do tipo C, encefalopatia hepática mínima, e encefalopatia hepática explícita.

[0034] “A encefalopatia hepática do tipo A” se refere tipicamente a uma encefalopatia hepática associada a falência hepática aguda, tipicamente associada ao edema cerebral.

[0035] “Encefalopatia hepática do tipo B” se refere tipicamente à encefalopatia hepática (desvio) causada por desvio portossistêmico sem doença do fígado intrínseca associada.

[0036] “Encefalopatia hepática do tipo C” se refere tipicamente à encefalopatia hepática que ocorre em pacientes com cirrose. Esse tipo é frequentemente subdividido em encefalopatia hepática “episódica”, “persistente” e “mínima”.

[0037] “Encefalopatia hepática mínima” se refere tipicamente à encefalopatia hepática que não leva à disfunção cognitiva clinicamente explícita, mas pode ser demonstrada com estudos neuropsicológicos.

[0038] “Encefalopatia hepática explícita” se refere tipicamente à encefalopatia hepática clinicamente aparente manifestada como síndrome neuropsiquiátrica com um espectro grande de distúrbios mentais e motores. A encefalopatia hepática explícita pode surgir de modo episódico, durante um período de horas ou dias em pacientes que eram anteriormente estáveis ou pacientes apresentados com anormalidades neuropsiquiátricas persistentes.

[0039] Além do mencionado acima, embora a maioria das operações de transplante de fígado use fígados de doadores falecidos saudáveis de outro modo, os fígados também podem ser provenientes de um doador vivo (uma porção de um fígado da pessoa saudável). Os pacientes com, por exemplo, cirrose, experimentam comumente a encefalopatia hepática e encefalopatia hepática pré-operativa, a qual é um previsor significante de complicações neurológicas pós-transplante. O tratamento de encefalopatia hepática em pacientes prestes a serem submetidos a um transplante de fígado são incluídos no escopo da invenção.

[0040] O termo “hiperamonemia” se refere tipicamente a uma perturbação metabólica distinguida por um acesso de amônia no sangue.

[0041] O termo “falência hepática aguda em crônica ("acute on chronic liver failure")” se refere tipicamente a uma descompensação de cirrose, pelo menos uma falência de órgão, ou pertence a um subgrupo com taxa de mortalidade a curto prazo alta.

[0042] O termo “cirrose descompensada” é tipicamente destinado a incluir a cirrose hepática avançada com uma faixa de evidência clínica, como icterícia, ascite, edema, encefalopatia hepática, hemorragia gastrointestinal, hipertensão portal, infecções bacterianas, ou qualquer combinação dos mesmos. Deve ter contraste com “cirrose compensada”, a qual se refere tipicamente à cirrose hepática sem evidência clínica, mas pode incluir esôfago assintótico ou varizes gástricas e sintomas precoces como fadiga e perda de energia, perda de apetite e perda de peso, náusea ou dor abdominal.

[0043] O termo “hipertensão portal” se refere tipicamente a um gradiente de pressão venosa hepática que segue cirrose hepática, com ou sem desvio portossistêmico intra-hepático transjugular associado (TIPS).

[0044] Os compostos da invenção são indicados no tratamento terapêutico e/ou profilático de todas as afecções mencionadas acima.

[0045] De acordo com um aspecto adicional da presente invenção, é fornecido um método de tratamento de um distúrbio de CNS relacionado a esteroide, conforme mencionado antes no presente documento, sendo que o método compreende administrar uma quantidade farmaceuticamente eficaz de um composto da invenção a um paciente que necessita de tal tratamento.

[0046] É fornecido adicionalmente um método para o tratamento e/ou prevenção de distúrbios de memória e aprendizado relacionados a esteroide ou induzidos por esteroide, deficiência cognitiva, demência e/ou distúrbios de humor, como aqueles descritos acima, administrando-se um composto da invenção a um paciente que necessita do mesmo.

[0047] Os compostos da invenção podem ter a vantagem de que podem prevenir desenvolvimento de tolerância e/ou regulação descendente do receptor de GABAA. Os compostos da invenção podem ter a vantagem de que podem impedir os efeitos de retirada, uma vez que o esteroide for retirado. Dessa maneira, os compostos da invenção podem ter a vantagem de que podem preservar a sensibilidade do sistema de GABAA e inibir o desenvolvimento de um estado menos sensível durante a fase lútea, por exemplo, do ciclo menstrual, impedindo sintomas, como enxaqueca e/ou convulsões epilépticas.

[0048] Outra modalidade da presente invenção é consequentemente um método para tratamento ou prevenção de afecções ou sintomas de desenvolvimento de tolerância de esteroide e/ou de afecções ou sintomas de retirada de esteroide, por administração de um composto da invenção a um paciente que necessita do mesmo.

[0049] Exemplos de tais sintomas e/ou afecções que podem ser mencionados incluem sedação, cansaço, distúrbio de memória, distúrbio de aprendizado, perturbação de função motora, déficit de coordenação motora, por exemplo, sintomas em encefalopatia hepática, apetite aumentado e fome seletiva, recaídas por abuso de álcool e substâncias, humor negativo, como tensão, irritabilidade e depressão, os quais são os sintomas cardinais na síndrome pré-menstrual e o agravamento de pequeno mal epiléptico.

[0050] As afecções e os sintomas causados por desenvolvimento de tolerância após exposição por tempos mais longos (por exemplo, diversos dias) a 3-alfa-hidroxi-5- alfa/beta-esteroides são, por exemplo, sensibilidade ao estresse, dificuldades de concentração, estresse ou dificuldades em concentração ligadas ao ciclo menstrual, distúrbios do sono, cansaço, perda de controle de impulso e perturbação de depressão, memória e de aprendizado. 3-alfa- hidroxi-5-alfa/beta-esteroides também reforçam a dependência de fármacos. De acordo com a presente invenção, essas afecções ou sintomas podem ser prevenidas, amenizadas ou tratadas pela administração de um composto da invenção a um paciente que necessita do mesmo.

[0051] Uma exposição mais curta e contínua a 3-alfa- hidroxi-5-alfa/beta-esteroides fornece um efeito de retirada quando a exposição é finalizada. Esse fenômeno ocorre durante a menstruação, quando a produção de 3-alfa-hidroxi-5- alfa/beta-esteroides pelo corpus luteum do ovário é interrompida. Esse fenômeno de retirada também ocorre após o parto (post partum) quando a produção de 3-alfa-hidroxi- 5-alfa/beta-esteroide pela placenta é interrompido. O mesmo fenômeno também é notado quando um período de estresse é finalizado e os 3-alfa-hidroxi-5-alfa/beta-esteroides produzidos pela glândula adrenal durante o estresse são interrompidos. Os exemplos de afecções que são influenciadas por esse fenômeno de retirada/abstinência são as epilepsias parciais, em que o paciente tem um foco epiléptico no córtex cerebral, em que um agravamento ocorre na retirada período durante menstruação. Esse fenômeno é chamado “epilepsia catamenial”. Outros exemplos são enxaqueca relacionada à menstruação e enxaqueca relacionada ao estresse e mudanças de humor post partum. O fenômeno de retirada é um sinal de tolerância precoce desenvolvida.

[0052] Uma modalidade da invenção, que aborda o problema que aflige diversas mulheres, é um método para o tratamento e/ou prevenção de efeitos colaterais de esteroide anti-inflamatório e terapia pós-menopausa em pacientes humanos. De acordo com a invenção, essas afecções ou sintomas podem ser prevenidas, amenizadas ou tratadas pela administração de um composto da invenção a um paciente que necessita do mesmo.

[0053] Outra modalidade da invenção é o tratamento e/ou prevenção de efeitos colaterais de contraceptivos orais em pacientes humanos. De acordo com a invenção, essas afecções ou sintomas podem ser prevenidas, amenizadas ou tratadas pela administração de um composto da invenção a um paciente que necessita do mesmo. Nesse contexto, os compostos da invenção podem ser administrados juntos com o contraceptivo oral, que já podem ser ingeridos pelo paciente. As administrações nasais e percutâneas também são rotas adequadas de administração.

[0054] Em outras palavras, os compostos da invenção podem atuar para tratar afecções relacionadas ao estresse e/ou induzidas por estresse colocadas em um ou mais dentre os três mecanismos possíveis pelos quais os esteroides atuam no sistema nervoso central, a saber, por meio de:

[0055] (a) ação direta,

[0056] (b) indução à tolerância, e/ou

[0057] (c) efeito de retirada.

[0058] Adicionalmente, dentro do escopo da modalidade acima, as doses de compostos da invenção podem ser ajustadas aos níveis de esteroides endógenos durante o estresse ou o período menstrual.

[0059] “Pacientes” incluem pacientes mamíferos (e especialmente humanos).

[0060] O termo “quantidade eficaz” se refere a uma quantidade de um composto, a qual confere um efeito terapêutico no paciente tratado. O efeito pode ser objetivo (isto é, mensurável por algum teste ou marcador) ou subjetivo (isto é, o indivíduo fornece uma indicação ou sente um efeito).

[0061] Os compostos da invenção serão normalmente administrados de modo oral, intravenoso, subcutâneo, bucal, retal, dérmico (por exemplo, percutâneo), nasal, traqueal, bronquial, sublingual ou por qualquer outra rota parenteral ou por meio de inalação, em uma forma de dosagem farmaceuticamente aceitável.

[0062] Os compostos da invenção podem ser administrados na forma de pastilhas, cápsulas ou elixires para administração oral, supositórios para administração retal, soluções estéreis ou suspensões para administração parenteral, incluindo intravenosa ou intramuscular, e semelhantes.

[0063] A formulação de composições que compreendem compostos da invenção pode ser adaptada ou ajustada de acordo com procedimentos farmacológicos normais, em uma forma química adequada para a rota escolhida, junto com adjuvantes, carreadores, diluentes e veículos adequados, convencionalmente usados e bem conhecidos por uma pessoa versada na técnica. Tais formulações podem ser, desse modo, preparadas de acordo com a prática farmacêutica padrão e/ou aceita.

[0064] De acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecida, desse modo, uma formulação farmacêutica que inclui um composto da invenção, conforme definido antes no presente documento, em mistura por adição com um adjuvante, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável.

[0065] Dependendo, por exemplo, das características de potência e físicas do composto da invenção (isto é, ingrediente ativo), as formulações farmacêuticas que podem ser mencionadas incluem aquelas nas quais o ingrediente ativo está presente em pelo menos 1% (ou pelo menos 10%, pelo menos 30% ou pelo menos 50%) em peso. Isto é, a razão entre o ingrediente ativo e os outros componentes (isto é, a adição de adjuvante, diluente e carreador) da composição farmacêutica é pelo menos 1:99 (ou pelo menos 10:90, pelo menos 30:70 ou pelo menos 50:50) em peso.

[0066] A invenção fornece adicionalmente um processo para a preparação de uma formulação farmacêutica, conforme definido antes no presente documento, sendo que o processo compreende colocar um composto da invenção, conforme definido antes no presente documento, em associação com um adjuvante, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável.

[0067] Os compostos da invenção também podem ser combinados com outros agentes terapêuticos que são úteis em um ou mais dentre:

[0068] (a) o tratamento de um distúrbio de CNS relacionado a esteroide;

[0069] (b) o tratamento de uma afecção ou sintomas causados por desenvolvimento de tolerância após exposição a 3-alfa-hidroxi-5-alfa/beta-esteroides;

[0070] (c) o tratamento de uma afecção que é influenciada por retirada/abstinência de exposição a 3-alfa- hidroxi-5-alfa/beta-esteroides;

[0071] (d) o tratamento de um ou mais efeitos colaterais de um esteroide anti-inflamatório;

[0072] (e) o tratamento de um ou mais efeitos colaterais de terapia pós-menopausa; e/ou

[0073] (f) o tratamento de um ou mais efeitos colaterais de um contraceptivo oral,

[0074] ou com um contraceptivo oral per se. Tais agentes terapêuticos, ou contraceptivos orais, são chamados mais adiante no presente documento juntos como outro ou um outro “agente (ou agentes) terapêutico conforme definido antes no presente documento”.

[0075] Por exemplo, os compostos da invenção podem ser incluídos em uma formulação ou regime de tratamento juntamente com um contraceptivo oral a fim de amenizar e/ou remover:

[0076] (i) os efeitos colaterais de contraceptivos orais; e/ou

[0077] (ii) qualquer efeito indesejado das mudanças periódicas em esteroides endógenos.

[0078] Os aspectos adicionais da invenção fornecem composições farmacêuticas e kits de partes que compreendem doses terapeuticamente adequadas de outros agentes terapêuticos, conforme definido antes no presente documento, em combinação com uma dose terapeuticamente adequada de um composto da invenção.

[0079] De acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecido um produto de combinação que compreende:

[0080] (A) um composto da invenção, conforme definido antes no presente documento; e

[0081] (B) pelo menos um outro agente terapêutico, conforme definido antes no presente documento,

[0082] em que cada um dos componentes (A) e (B) é formulado na mistura por adição com um adjuvante, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável.

[0083] Tais produtos de combinação fornecem a administração de um composto da invenção em combinação com o outro agente terapêutico, e podem ser apresentados, desse modo, como formulações separadas, em que pelo menos uma dessas formulações compreende um composto da invenção, e pelo menos uma compreende o outro agente terapêutico, ou podem ser apresentados (isto é, formulados) como uma preparação combinada (isto é, apresentada como uma formulação única que inclui um composto da invenção e o outro agente terapêutico).

[0084] Desse modo, é adicionalmente fornecido:

[0085] (1) uma formulação farmacêutica que inclui um composto da invenção, conforme definido antes no presente documento, pelo menos um outro agente terapêutico, conforme definido antes no presente documento, e um adjuvante, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável; e

[0086] (2) um kit de partes que compreende componentes:

[0087] (a) uma formulação farmacêutica que inclui um composto da invenção, conforme definido antes no presente documento, em mistura por adição com um adjuvante, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável; e

[0088] (b) uma formulação farmacêutica que inclui pelo menos um outro agente terapêutico, conforme definido antes no presente documento, em mistura por adição com um adjuvante, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável,

[0089] cujos componentes (a) e (b) são fornecidos, cada um, em uma forma que é adequada para administração em combinação com o outro.

[0090] A invenção fornece adicionalmente um processo para a preparação de um produto de combinação, conforme definido antes no presente documento, sendo que o processo compreende colocar um composto da invenção, conforme definido antes no presente documento, em associação com o pelo menos um outro agente terapêutico, conforme definido antes no presente documento, e pelo menos um adjuvante, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável.

[0091] Por “colocar em associação”, significa que os dois componentes são tornados adequados para administração em combinação entre si. Os compostos da invenção podem ser empregados como parte de ”terapia adjuvante” em tratamento que envolve o pelo menos um outro agente terapêutico, conforme definido antes no presente documento.

[0092] Desse modo, em relação ao processo para a preparação de um kit de partes, conforme definido antes no presente documento, ao colocar os dois componentes “em associação” entre si, é incluído o fato de que os dois componentes do kit de partes podem ser:

[0093] (i) fornecidos como formulações separadas (isto é, independentemente entre si), que são subsequentemente colocadas juntas para uso em combinação com entre si em terapia de combinação; ou

[0094] (ii) empacotados e apresentados juntos como componentes separados de um “pacote de combinação” para uso em combinação entre si em terapia de combinação.

[0095] Os compostos da invenção podem ser administrados em doses variáveis. Para, por exemplo, doses parenterais (por exemplo, intravenosas), um intervalo adequado é de cerca de 0,2 a 200 mg por kg de peso corporal, como cerca de 20 a 100 mg por kg de peso corporal. As doses podem ser dadas de modo contínuo ou em doses divididas uma, duas, três ou quatro vezes ou mais diariamente.

[0096] Em qualquer caso, o médico, ou a pessoa versada na técnica, poderá determinar a dosagem real que deverá ser a mais adequada para um paciente individual, que é propensa a variar com a rota de administração, o tipo e a severidade da afecção que deve ser tratada, assim como a espécie, idade, peso, sexo, função renal, função hepática e resposta do paciente particular a ser tratado. As dosagens mencionadas acima são exemplificativas do caso normal; pode haver, obviamente, casos individuais em que faixas de dosagem superiores ou inferiores são recomendadas, e as mesmas estão dentro do escopo dessa invenção.

[0097] Os compostos da invenção têm a vantagem de que têm capacidade de bloquear a ação de 3-alfa-hidroxi- pregnan-esteroides no receptor de GABAA humano.

[0098] O termo “bloquear” é empregado nesse contexto para definir um efeito em que os 3-alfa-hidroxi-5-alfa/beta- esteroides são prevenidos por um composto da invenção de atuar no receptor de GABA-R. “Bloquear” é, desse modo, um termo diferente ao que é normalmente entendido por “modulação” ou “repressão” ou termos similares, o que sugere que a ação farmacológica ainda ocorre, mas até um ponto inferior ou em uma taxa mais lenta. Dessa maneira, um “antagonista” significa uma substância que impede outra substância, por exemplo, um agonista, para induzir seu efeito. Nessa aplicação, os termos “antagonista” e “bloqueador” podem ser usados de modo intercambiável.

[0099] Conforme discutido antes no presente documento, os compostos da invenção também têm a vantagem de que bloqueiam seletivamente a ação de 3-alfa-hidroxi- 5alfa/beta-pregnan-esteroides no receptor de GABAA por administração simultânea, apenas com efeitos limitados no efeito de GABA (na maioria dos antagonistas parciais do mesmo).

[00100] Além das vantagens mencionadas acima no presente documento, os compostos da invenção podem ter adicionalmente a vantagem de que podem ser mais eficazes, menos tóxicos, de atuação mais longa, mais potentes, produzir menos efeitos colaterais, ser mais facilmente absorvidos e/ou ter um perfil farmacocinético melhor (por exemplo biodisponibilidade superior, resultante, por exemplo, de uma solubilidade melhorada em solventes aquosos, e/ou depuração reduzida), e/ou ter outras propriedades farmacológicas, físicas ou químicas úteis em comparação aos compostos conhecidos na técnica anterior, para uso nas indicações declaradas acima ou de outro modo.

[00101] Quando o termo “cerca de” for empregado no presente documento, por exemplo, no contexto de quantidades (por exemplo, doses de ingredientes ativos), ou períodos de tempo, será notado que tais variáveis são aproximadas e que podem variar em ± 10%, por exemplo, ± 5% e preferencialmente ± 2% (por exemplo, ± 1%) a partir dos números especificados no presente documento.

[00102] A invenção é ilustrada, mas sem limitação, pelos exemplos a seguir.

EXEMPLO 1 SÍNTESE DE 3α-ETINILA, 3β-HIDR0XI, 5α-PREGNAN—20—OXIMA

[00103] Foi identificado que uma reação do reagente de Grignard de etinila com 3, 20/17 esteroides de dicetona é, na maioria dos casos, seletiva para a posição 3 e não precisa de proteção/desproteção para a outra funcionalidade de cetona é exigida. Tanto os isômeros alfa quanto beta são formados, que podem ser separados por métodos cromatográficos e recristalizados.

[00104] Os materiais iniciais para sintetizar 3α- etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima são os esteroides correspondentes com o substituinte 3-hidroxila e grupo ceto nas posições 20. Os mesmos podem ser convertidos para as respectivas dionas por oxidação com o reagente IBX. A reação procede de modo suave e com conversão completa. Outros esteroides oportunos podem ser empregados como material inicial quando exigido. As reações foram executadas em solventes oportunos, como metanol, etanol, água, THF, éter dietílico, diclorometano ou outros solventes que uma pessoa versada na técnica pode reconhecer como oportuno. Os reagentes são escolhidos a fim de evitar, quando possível, o uso de reagentes, como metais pesados, os quais são tóxicos mesmo em traços ou são difíceis de serem completamente removidos no procedimento de desenvolvimento.

[00105] As reações que envolvem reagentes ou produtos sensíveis a ar ou umidificação foram executadas sob atmosfera inerte, como gás nitrogênio ou argônio, na presença de solventes secos. O éter dietílico e tetraidrofurano foram secados com Na na presença de benzofenona. As seringas purgadas com gás inerte foram usadas para a transferência de reagentes e solventes secos. O tempo e a temperatura otimizados das reações foram determinados monitorando-se a formação de produtos e a perda de material inicial com uso de um conjunto de procedimentos cromatográfico adequado como TLC ou GC/MS.

[00106] As purificações foram executadas usando-se conjuntos de procedimentos cromatográficos, como cromatografia flash com sílica ou cromatografia líquida de alto desempenho preparativa (HPLC) usando-se um aparelho de HPLC. Aqueles versados na técnica podem reconhecer que os métodos de purificação alternativos podem ser empregados, e conjuntos de procedimentos cromatográficos de laboratório podem ser adaptados para a escala industrial usando-se colunas cromatográficas para preparações escalonadas. A identificação dos produtos é executada usando-se conjuntos de procedimentos analíticos adequados, como RMN de 1H, RMN de 13C, espectrometria de massa, espectroscopia de IR, espectroscopia por raios X e qualquer outro ensaio que uma pessoa versada na técnica pode reconhecer como oportuna para identificação estrutural e determinação de pureza de 3α- etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima. Uma pessoa versada na técnica reconhecerá que reagentes, solventes, afecções e parâmetros similares podem ser usados nas reações, dependendo do substrato. Os dados de RMN são registrados com uso de um espectrômetro de 400 MHz Bruker. 3α-etinila, 3β-hidróxi, 5α-pregnan-20-ona

[00107] 3,20-5α-pregnandiona (1,580 g, 5,0 mmol) foi dissolvida em 50 ml de THF seco à temperatura ambiente (rt) sob nitrogênio. Brometo de etinil magnésio (1,1 equivalentes) foi adicionado por gotejamento à rt sob agitação e a solução permaneceu em agitação de um dia para o outro à rt sob fluxo de nitrogênio.

[00108] A solução amarelada foi, então, arrefecida com NH4Cl(aq) saturado e a fase aquosa extraída com diclorometano (3 x 30 ml). As fases orgânicas coletadas foram evaporadas sob pressão reduzida, o óleo amarelo resultante foi dissolvido em diclorometano, lavado com salmoura e secado com MgSO4. A solução foi reduzida sob vácuo, e o resíduo purificado por cromatografia de coluna flash com sílica (1:4 dietiléter:diclorometano). Os rendimentos típicos foram de 72%. Os traços eventuais de subprodutos podem ser eliminados por recristalização adicional de dietiléter.

[00109] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d6): δ 2,51 (t, 1H); 2,47 (s, 3H); 2,14 (m, 1H); 2,11 (s, 3H); 0,81(s, 1H); 0,60 (s, 3H). 3α-etinila, 3β-hidróxi, 5α-pregnan-20-ona

[00110] Esse composto foi obtido como um subproduto a partir da reação descrita acima e separado por cromatografia de coluna flash com sílica. O rendimento típico foi de 13%.

[00111] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d6): δ 2,52 (t, 1H); 2,43 (s, 1H); 2,11 (s, 3H); 0,80 (s, 3H), 0,60 (s, 3H). 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima

[00112] 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-ona (10 mmol) foi dissolvido em 5 ml de diclorometano e 50 ml de etanol à rt e atmosfera de ar, em um frasco de fundo redondo de 250 ml. 4 equivalentes de cloridrato de NH2OH e 4 equivalentes de acetato de sódio foram dissolvidos em 5 ml de H2O e, então, adicionados à solução de esteroide. 20 ml de etanol foram adicionados e a mistura colocada em refluxo de um dia para o outro. A mistura foi, então, resfriada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo branco foi, então, tratado com 50 ml de H2O e 50 ml de diclorometano, a fase aquosa extraída com 3 x 30 ml de diclorometano. As fases orgânicas coletadas foram, então, secadas com MgSO4, filtradas e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo final foi purificado por cromatografia de coluna flash com sílica com diclorometano:éter dietílico 4:1, com rendimentos típicos de 95 a 100%.

[00113] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d6): δ 2,47 (s, 1H); 2,22 (t, 1H); 2,05 (m, 1H); 1,88 (s, 3H); 1,86 (m, 1H); 0,81 (s, 3H), 0,62 (s, 3H). EXEMPLO 2 EFEITOS DE 3A-ETINILA, 3B-HIDRÓXI, 5A—PREGNAN—20—OXIMA NO SUBTIPO ALFA 5 E ALFA 1 DE RECEPTOR DE GABAA

[00114] As células HEK-293, permanentemente transfectadas com o GABAA α1β2Y2 humano e o receptor de GABAA α5β3Y2 que expressa receptores de GABAA α1β2Y2L e α5β3Y2L foram usadas. As linhagens celulares que expressam permanentemente um receptor de GABAA humano funcional foram feitas nas etapas a seguir. As subunidades de receptor de GABAA α1 (308-1727 NM_000806), β2 (214-1679 NM_000813), e Y2L (290-1785 NM_198904) que incluem sequências Kozac introduzidas logo antes dos códons iniciais foram subclonados em vetores de expressão de mamífero que contêm resistência à Geneticina, Hidromicina B, e Zeocina, respectivamente. Uma linhagem celular HEK-293 que expressa de modo estável as três subunidades de receptor de GABAA foi produzida por transfecção das subunidades uma por vez. A transfecção foi seguida por seleção com os antibióticos apropriados, separação de célula com o uso de anticorpos específicos de subunidade (β2 e Y2), e produção de colônias de célula únicas. As linhagens celulares produzidas foram analisadas com imunocitoquímica para as três subunidades de receptor de GABAA, seguida por seleção de uma linhagem celular adequada que mostra para o receptor de GABAA uma reatividade normal e satisfatória em uma análise de patch-clamp (consultar abaixo) para GABA e a tetraidrodesoxicorticosterona de GAMS (THDOC). MÉTODOS PARA TESTAR EFEITOS DE RECEPTOR DE GABAA DE 3α-etinila, 3β-hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima

[00115] Os experimentos foram executados para investigar o efeito de 3α-etinila, 3e-hidróxi, 5α-pregnan- 20-oxima na função de receptor de GABAA na ausência e na presença da tetraidrodesoxicorticosterona de GAMS (THDOC) pelo sistema Dynaflow™ em células HEK-293. Nesses testes, o protocolo foi otimizado para ser similar às afecções fisiológicas na fenda sináptica.

[00116] Cultura de célula: As células HEK-293, permanentemente transfectadas com GABAA α1β2Y2 humano e subtipos de receptor de GABAA α5β3Y2, foram semeadas em uma densidade de 3 x 104/25 cm2 em frasco de cultura cellbind. As células transfectadas foram usadas para experimentos de patch-clamp 3 dias após semeadura. Durante o uso de células para experimentos de patch-clamp, as células foram lavadas duas vezes com solução de EC com bolhas de O2 (consultar abaixo). Cerca de 5 ml de EC foi, então, adicionado, e as células foram mantidas na incubadora durante cerca de 15 minutos. Após 15 minutos, as células se soltaram do fundo do frasco e foram separadas aspirando-se as mesmas cuidadosamente algumas vezes com uma pipeta de Pasteur.

[00117] Sistema Dynaflow™: O sistema Dynaflow™ com chips de resolução foi usado para todos os experimentos de patch-clamp. Os chips de resolução são feitos de materiais não pegajosos. A largura de canal é de 150 μm e a altura é de 50 μm. O volume de poço é 280 μl. O tempo de execução na taxa de fluxo de 26 μl/min é de 180 min. As definições de bomba foram conforme o seguinte: A seringa de 2 ml Omnifix com diâmetro interno de 9,65 mm foi usada. A taxa de fluxo de bomba de seringa de chip foi 26 μl/min.

[00118] Esteroides e GABA: GABA foi dissolvido em solução de EC por ultrassom durante cerca de 40 minutos até a concentração de 10 mM à temperatura ambiente. Todos os esteroides foram dissolvidos para a concentração de 6 mM em etanol. A concentração de etanol foi 0,1% em todas as soluções finais, incluindo a solução de lavagem (EC) e a solução com somente com GABA. As soluções finais são as soluções adicionadas aos poços do chip.

[00119] Eletrofisiologia: Os eletrodos de emplastro foram puxados de 1,5 mm O.D., 0,86 mm I.D. de vidro capilar de borossilicato sem filamento. Os eletrodos típicos tinham uma resistência de 2 a 5 M: quando enchidos com soluções intracelulares. A solução intracelular consistiu em (em mM): 140 de Cs-gluconato, 3,0 de NaCl, 1,2 de MgCl2, 1,0 de EGTA, 10 de HEPES. O pH foi ajustado para 7,2 com CsOH. A solução extracelular (EC) usada durante os registros conteve (em mM): 137 de NaCl, 5,0 de KCl, 1,0 de CaCl2, 1,2 de MgCl2, 10 de HEPES, 10 de glicose. O pH foi ajustado com NaOH até 7,4. Após compensar pelo potencial de junção líquida, um potencial de retenção estável de -17 mV foi usado em todos os experimentos. Em afecções fisiológicas, o HEK-293 teve um potencial restante em -40 mV e uma concentração baixa de íons cloreto dentro da célula. Usando-se o potencial de retenção de -17 mV e a solução intracelular com concentração de íon cloreto baixa, os íons cloreto fluem para a célula quando os receptores são ativados. Todos os experimentos foram realizados à temperatura ambiente (21 a 23 °C). Um protocolo padrão foi usado para todos os experimentos.

PROTOCOLO

[00120] Aplicações GABA: Usando-se o equipamento Dynaflow, é possível estudar o HEK-293 transfectado durante afecções quase fisiológicas. O sistema Dynaflow permite a aplicação de soluções de 40 ms até minutos em tempo. De modo fisiológico, na fenda sináptica, GABA é liberado na faixa de mM durante cerca de 2 ms, o que é válido para receptores alfa 1. Em sítios sinápticos extra, os níveis de GABA são mais baixos, mas permanecem durante mais tempo, o que é válido para os receptores alfa 5. Em experimentos com α1β2Y2L, foi aplicado GABA ± esteroide durante 40 ms; em experimentos com α5β3Y2L, GABA ± esteroide foi aplicado durante 6 s. Foi constatado que, em quase todas as células, a primeira aplicação de GABA forneceu uma resposta menor que a segunda aplicação de GABA. Não houve diferença em resposta entre a segunda e a terceira aplicação de GABA. Portanto, a primeira aplicação de GABA é sempre repetida duas vezes e a segunda resposta é usada na análise.

[00121] Eliminação: GABA é solúvel em água e fácil de eliminar do receptor. O tempo de eliminação foi definido para 1 minuto após a aplicação somente com GABA. Os esteroides, por outro lado, são difíceis de dissolver em água e também são difíceis de eliminar do receptor. Em ouros experimentos, foi usado THDOC como o agonista de GABA. Com 2 minutos de tempo de eliminação, 200 nM de THDOC foram completamente eliminados, conforme não mostrado por um efeito acumulativo ou de dessensibilização.

[00122] Incubação: Para verificar o efeito dos esteroides e alcançar resultados estáveis, foi constatado que os esteroides devem ser incubados no receptor antes de aplicação de GABA. Essa constatação é sustentada pela sugestão de que o sítio de ligação para THDOC está localizado de modo intracelular no receptor (Hosie et al 2006). Os tempos de incubação diferentes foram estudados para alcançar o tempo ótimo para alcançar resultados estáveis e minimizar o tempo de remoção. O tempo de incubação de 20 segundos se demonstrou como o tempo ótimo para o tempo de eliminação de 2 minutos.

[00123] Conclusão de otimização: O protocolo otimizado é conforme a seguir: Incubação de 20 segundos de esteroides, 40 ms ou 6 s. Aplicação de GABA ± esteroides, eliminação de 2 minutos. A primeira aplicação de GABA é repetida duas vezes com um tempo de eliminação de 1 min. entre a primeira e a segunda aplicação. RESULTADOS DE TESTE DE 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α- pregnan-20-oxima em α1β2Y2L e α5β3Y2 de receptor de GABAA

[00124] Os resultados de teste de patch-clamp de 3α- etinila, 3e-hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima nos dois subtipos α1β2Y2L e α5β3Y2L de receptor de GABAA diferentes fornecem um resultado inesperado e surpreendente. Conforme mostrado na Tabela 2, 3α-etinila, 3e-hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima não tiveram, no receptor α1β2Y2L, um efeito antagonista contra o efeito de acentuação de THDOC, os GAMS usados nos experimentos. 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima independentemente não teve efeito de acentuação ou antagonizante em fluxo de cloreto. 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α--pregnan-20-oxima teve um efeito antagonista leve na abertura do GABA do receptor de GABAA α1β2Y2L. Esse efeito antagonista é tão pequeno que não tem relevância e está na faixa do veículo.

[00125] De modo surpreendente, no subtipo de receptor α5β3Y2L, 3α-etinila, 3e-hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima é um antagonista em todas as situações testadas com GAMS e GABA (Tabela 2). 3α-etinila, 3e-hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima, mostra, desse modo, a especificidade dependendo do subtipo de receptor. 3α-etinila, 3e-hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima mostra, portanto, a seletividade em sua ação e, portanto, é adequado como um medicamento. Visto que 3α-etinila, 3β- hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima é específico e não se ativa no receptor α1β2Y2L, 3α-etinila, 3e-hidróxi, 5α-pregnan-20- oxima terá menos efeitos colaterais devido a um receptor alfa 1 mais geral. A inibição do efeito como um antagonista fornece um impacto maior que uma mudança positiva similar como um agonista.

[00126] Tabela 2. Estudos na resposta atual mediados por fluxo de íon cloreto através dos receptores de GABAA que expressam a subunidade α1 e α5. O conjunto de procedimentos de patch-clamp combinado com o sistema de aplicação Dynaflow™, que fornece aplicações rápidas e remoção de substâncias, foi usado nesse estudo. “Composto” se refere a uma 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima. “GAMS” se refere a “esteroides de modulação de receptor de GABAA”, nesse caso, tetraidrodesoxicorticosterona (THDOC).

Receptores de GABAA α1β2Y2

[00127] 1 μM de 3α-etinila, 3e-hidróxi, 5α-pregnan- 20-oxima aumentou a resposta de corrente mediada por GABA em receptores de GABAA α1β2Y2L em aproximadamente 10% (Tabela 2). 1 μM de 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima não ativou o receptor de GABAA diretamente, na ausência de GABA. Os resultados desse estudo mostram que 3α-etinila, 3β- hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima não modula as correntes evocadas de GABA negativamente em receptores de GABAA α1β2Y2. Adicionalmente, o aumento de 10% observado das correntes evocadas de GABA no tipo de subunidade α1 deve ser considerado um efeito menor. Em suma, 3α-etinila, 3β- hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima não tem os efeitos maiores em correntes evocadas de GABA nos receptores de GABAA α1β2Y2L.

Receptores de GABAA α5β3Y2

[00128] Um efeito antagonista dependente de concentração clara foi detectado por 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima nos 200 nM de GAMS (THDOC) e 0,3 μM de correntes evocadas de GABA (Tabela 3). 3α-etinila, 3β- hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima também teve um efeito antagonista nos 200 nM de corrente evocada de THDOC, isto é, a ativação direta do receptor de GABAA por GAMS. Esse antagonismo teve a mesma magnitude que o mesmo em 200 nM de THDOC e 0,3 μM de corrente evocada de GABA.

[00129] Tabela 3. 0,1 a 3 μM de 3α-etinila, 3β- hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima (“Composto”) na presença de 200 nM de THDOC + 0,3 μM de GABA. O efeito relativo para controlar 200 nM de THDOC + 0,3 μM de GABA foi definido para 0.

EXEMPLO 3 EFEITOS COMPARATIVOS DE 3α-ETINIL, 3β-HIDR0XI, 5α- PREGNAN-20-OXIMA E SEU EPÍMERO NO SUBTIPO ALFA 5 DE RECEPTOR DE GABAA

[00130] Empregando-se os procedimentos descritos no Exemplo 2 acima, 3α-etinila, 3e-hidróxi,5a-pregnan-20-oxima e seu epímero, 3β-etinila, 3a-hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima foram testados no subtipo alfa 5 de receptor de GABAA.

[00131] A única diferença metodológica nos procedimentos empregados em comparação ao Exemplo 2 foi a de que os esteroides foram dissolvidos em etanol até uma concentração de 2 mM na solução de estoque, com uma concentração de etanol final de 0,1% em todas as soluções. Os resultados estão tabulados na Tabela 4 abaixo.

[00132] Tabela 4. Efeitos dos esteroides UC testados 3α-etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima (“Composto”) e 3β-etinila, 3a-hidróxi, 5α-pregnan-20-oxima (“Comparador”) em concentrações de 1 μM testado contra THDOC de esteroide de GABA medido como mudança em fluxo de cloreto através do receptor de GABAA α5β3Y2L.

[00133] Os resultados mostram que o composto da invenção atua como um antagonista da subunidade alfa 5 de receptor de GABA, enquanto o epímero atua como um agonista.

Claims

1. Composto caracterizado pelo fato de que é 3α- etinila, 3β-hidr0xi, 5α-pregnan-20-oxima ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Uso de um composto conforme definido na reivindicação 1 caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento de um distúrbio de CNS relacionado a esteroide selecionado a partir do grupo epilepsia, epilepsia dependente de ciclo menstrual, depressão, depressão relacionada ao estresse, enxaqueca, cansaço e, em particular, cansaço relacionado ao estresse, síndrome pré-menstrual, distúrbio disfórico pré-menstrual, mudanças de humor ligadas ao ciclo menstrual, deficiência cognitiva mínima, deficiência cognitiva, mudanças de memória ligadas ao ciclo menstrual, mudanças de memória relacionadas ao estresse, dificuldades de aprendizado relacionadas ao estresse, encefalopatia hepática, síndrome de Down, doença de Alzheimer, dificuldades em concentração ligadas ao ciclo menstrual, distúrbios do sono e cansaço ligados ao ciclo menstrual, apetite aumentado, compulsão alimentar e obesidade, recaída por abuso de álcool e substâncias, distúrbios de equilíbrio, distúrbios momentâneos e dificuldades de coordenação.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é encefalopatia hepática.

4. Uso, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a encefalopatia hepática é encefalopatia hepática do tipo A, encefalopatia hepática do tipo B, encefalopatia hepática do tipo C, encefalopatia hepática mínima, ou encefalopatia hepática explícita.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é síndrome de Down ou doença de Alzheimer.