CZ299676B6 - 7-Hydroxyepiandrosteron s neuroprotektivním úcinkem - Google Patents
7-Hydroxyepiandrosteron s neuroprotektivním úcinkem Download PDFInfo
- Publication number
- CZ299676B6 CZ299676B6 CZ20030077A CZ200377A CZ299676B6 CZ 299676 B6 CZ299676 B6 CZ 299676B6 CZ 20030077 A CZ20030077 A CZ 20030077A CZ 200377 A CZ200377 A CZ 200377A CZ 299676 B6 CZ299676 B6 CZ 299676B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- hydroxyepiandrosterone
- brain
- hypoxia
- ischemia
- hydroxy
- Prior art date
Links
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 title description 12
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 title 1
- 208000007102 Chronic Brain Damage Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000004224 protection Effects 0.000 claims abstract description 5
- VFPMCLQMAUVEHD-KMQZSKAMSA-N (3beta,5alpha,7alpha)-3,7-dihydroxyandrostan-17-one Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](O)C[C@H]21 VFPMCLQMAUVEHD-KMQZSKAMSA-N 0.000 claims description 11
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 claims description 11
- VFPMCLQMAUVEHD-UHFFFAOYSA-N 7alpha hydroxy isoandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3C(O)CC21 VFPMCLQMAUVEHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- VFPMCLQMAUVEHD-UCPSWNCLSA-N 7beta-hydroxyepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3[C@@H](O)C[C@H]21 VFPMCLQMAUVEHD-UCPSWNCLSA-N 0.000 claims description 10
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 claims description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 3
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 claims description 2
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 claims description 2
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 claims description 2
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 claims 1
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 claims 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 21
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 20
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 19
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 19
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 19
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- UQNAFPHGVPVTAL-UHFFFAOYSA-N 2,3-Dihydroxy-6-nitro-7-sulfamoyl-benzo(f)quinoxaline Chemical compound N1C(=O)C(=O)NC2=C1C=C([N+]([O-])=O)C1=C2C=CC=C1S(=O)(=O)N UQNAFPHGVPVTAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 6
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 6
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 6
- -1 sodium hydride Chemical class 0.000 description 6
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 6
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N Nitrous Oxide Chemical compound [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010053648 Vascular occlusion Diseases 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000002763 pyramidal cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 208000021331 vascular occlusion disease Diseases 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019196 Head injury Diseases 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 238000010826 Nissl staining Methods 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N halothane Chemical compound FC(F)(F)C(Cl)Br BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003132 halothane Drugs 0.000 description 2
- 210000001879 hippocampal ca1 region Anatomy 0.000 description 2
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N isopentane Chemical compound CCC(C)C QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 2
- 239000001272 nitrous oxide Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N phenobarbital Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O DDBREPKUVSBGFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002695 phenobarbital Drugs 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 2
- NCMZQTLCXHGLOK-ZKHIMWLXSA-N prasterone acetate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)C(=O)CC[C@H]3[C@@H]1CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)C)C1 NCMZQTLCXHGLOK-ZKHIMWLXSA-N 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 2
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 210000002385 vertebral artery Anatomy 0.000 description 2
- OLPSAOWBSPXZEA-JIEICEMKSA-N 7alpha-hydroxydehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](O)C=C21 OLPSAOWBSPXZEA-JIEICEMKSA-N 0.000 description 1
- 208000002381 Brain Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 1
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017701 Endocrine disease Diseases 0.000 description 1
- QGXBDMJGAMFCBF-UHFFFAOYSA-N Etiocholanolone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC21 QGXBDMJGAMFCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019430 Motor disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000010886 Peripheral nerve injury Diseases 0.000 description 1
- 241000220304 Prunus dulcis Species 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032851 Subarachnoid Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 125000000746 allylic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 238000007630 basic procedure Methods 0.000 description 1
- SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N benzyl benzoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 201000004559 cerebral degeneration Diseases 0.000 description 1
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004081 cilia Anatomy 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 108050003126 conotoxin Proteins 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L copper(ii) acetate Chemical compound [Cu+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O OPQARKPSCNTWTJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N dimethyl butane Natural products CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000003438 effect on compound Effects 0.000 description 1
- QGXBDMJGAMFCBF-LUJOEAJASA-N epiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 QGXBDMJGAMFCBF-LUJOEAJASA-N 0.000 description 1
- 210000000918 epididymis Anatomy 0.000 description 1
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 1
- IIEWJVIFRVWJOD-UHFFFAOYSA-N ethyl cyclohexane Natural products CCC1CCCCC1 IIEWJVIFRVWJOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000013383 initial experiment Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 1
- 210000001853 liver microsome Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000002736 metal compounds Chemical class 0.000 description 1
- FJQXCDYVZAHXNS-UHFFFAOYSA-N methadone hydrochloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1C(CC(C)N(C)C)(C(=O)CC)C1=CC=CC=C1 FJQXCDYVZAHXNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 230000003961 neuronal insult Effects 0.000 description 1
- 239000004090 neuroprotective agent Substances 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000000506 psychotropic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 239000013643 reference control Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000003660 reticulum Anatomy 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000020431 spinal cord injury Diseases 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 description 1
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
- A61K31/568—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in positions 10 and 13 by a chain having at least one carbon atom, e.g. androstanes, e.g. testosterone
- A61K31/5685—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in positions 10 and 13 by a chain having at least one carbon atom, e.g. androstanes, e.g. testosterone having an oxo group in position 17, e.g. androsterone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Neurology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Psychology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
7-Hydroxyepiandrosteron lze použít pri ochrane pred akutním nebo chronickým mozkovým poškozením.
Description
7-Hydroxyepiandrosteron s neuroprotektivním účinkem
Oblast techniky
Vynález se týká použití řady 7-hydroxysteroidníeh sloučenin pro ochranu před smrtí mozkových buněk, které jsou tak užitečné při léčbě a prevenci stavů jako Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, zhoršení kogniee. které není demencí (CIND), mrtvice, mozkové trauma, poranění páteřní míchy a periferních nervů nebo následků těchto stavů; jsou též užitečné pro zlepšení kogniee.
Dosavadní stav techniky i? Produkce 7a-hydroxylovaných metabolitů dehvdroepiandrosteronu (DHEA) in vivo je známa od roku 1959, kdy byl identifikován 7a-hydroxydehydroepiandrosteron v moči (Schneider. J. J.; Levvbart, M. L.: Recent Progr. Horm. Res. 15 (1959), 201-230; Starka. L. et al: Clin. Chim. Acta 7 (1961) 309-316). Dd té doby byla publikována řada zpráv o rozsáhlé 7a-hydroxvlaci 3βhydroxysleroidníeh substrátů (včetně DHEA a epiandrosteronu - ΕΡΙΑ) ve tkáňových preparátu těch mnoha lidských orgánů, včetně jater dospělých i plodu, varlat, nadvarlat, pokožky, savčí tkáně, prostaty, tukových stromálních buněk a mandlí. Hydroxylacc DHEA v poloze 7 byla též doložena v krysích játrech a v řade myších tkání a orgánů. Ve všech těchto studiích byl 7 ahydroxydehydroepiandrosteron zdaleka nejvíce produkovaným metabolitem - např. Doostzadeeh et al (Steroids 63 (1998) 608-614) uvedli, že rychlost produkce 7a hydroxydehydroepiandro25 steronu mikrosomy myších jater byla více než 15krát vyšší než rychlost produkce 7p-hydroxyanalogu.
Bylo též doloženo, že ΕΡΙΑ. DHEA a pregncnolon jsou v krysím mozku rychle a rozsáhle transformovány na odpovídající 7a-hydroxymetabolity (Guiraud. J. M. et al: Steroids 34 (1979) 241 248; Warner, M. et al: Endocrinology 124 (1989) 2699-2706; Akwa, Y. et al: Biochem. J. 288 (1992)959-964).
Dokument WO 97/37664 popisuje použití řady sloučenin včetně 7a hydroxysubstituovaných steroidů v léčbě neuropsychiatrických, imunitních nebo endokrinních poruch. Mezi poruchami, které lze podle dokumentu WO 97/37664 těmito sloučeninami léčit je Alzheimerova choroba. Mechanismus těchto poruch však podle dokumentu WO 97/37664 spočívá v nedostatku 7 ahydroxysubslituovaných steroidů v mozku, a léčba tedy zahrnuje podávání 7a- hydroxysubstituovaných steroidů, aby byl tento předpokládaný deficit doplněn. Postup popsaný v dokumentu WO 97/37664 léčí již existující stav, spíše než by se snažil předcházet jeho vzniku nebo zhoršení prevencí dalšího mozkového poškození. Dokument WO 97/37664 tedy nepopisuje ncuroprotektivní účinek. Nenaznačuje ani, že tyto sloučeniny lze použít pro prevenci poškození způsobených náhlými a traumatickými příhodami, jako je mrtvice.
S překvapením jsme zjistili, že 7-hydroxycpiandrosteron, ať liž α, β nebo jejich směs, lze použít při ochraně proti akutním a chronickým mozkovým poškozením způsobeným např. mrtvicí, mozkovým traumatem a mozkovou ischémií vyvolanými např. subarachnoidálním krvácením nebo vznikajícími při zavedení srdečního bypassu.
Při stavech jako prodloužená hypoxie nebo ischémie, které mohou a nemusejí souviset s hypogly50 kčlilií, dochází někdy k mozkovému poškození v různém rozsahu.
K isehémii dochází typicky při srdečních infarktech, avšak poškození, které v těchto případech vzniká, je omezeno v podstatě na srdeční tkáně; kromě toho byly již vyvinuty určité způsoby léčby. Tento vynález se týká spíše krátkodobé i dlouhodobé ischémie mozku, která vzniká jako
-1 CZ 299676 B6 důsledek mrtvice nebo poranění hlavy. Vážnost ischemickeho stavu závisí na charakteru mrtvice nebo poranění, jde však vždy o poškození mozku, kterého se tyká tento vynález.
V dosavadním stavu techniky jsou známa různá neuroprotektivní činidla, která mají zmírňovat problém mozkového poškození, jsou však většinou spojena s vážnými vedlejšími účinky. Např. MK.801 (maleát dizoeilpinu) je poměrně jednoduchá molekula, která prokazatelně poskytuje určitou úroveň neuroprotekce ischemickým pacientům. Je však spojena též s „alarmujícími psychotropními účinky (Martindale) a vážnými motorickými poruchami. Neuroprotektivní účinky jsou detailně popsány v Brain Research 755 (1997) 36—46 (Pringle. A. K. et cz/). citovaném zde tímto jako odkaz. Tíž autoři dříve popsali i neuroprotektivní účinky konotoxínu; také u této sloučeniny byly nicméně pozorovány vážné vedlejší účinky in vivo.
Podstata vynálezu
Vynález se týká použití 7-hydroxyepiandrosteronu (7-hydroxy-LPIA) pro přípravu léčiva pro ochranu před akutním nebo chronickým mozkovým poškozením.
Tato sloučenina je znázorněna vzorcem 1
a její 7a a 7β izomery jsou znázorněny vzorci la a Ib (v tomto pořadí)
Vynález též zahrnuje použití prekurzorů těchto sloučenin a sloučenin, které vznikají metabolizací těchto sloučenin in vivo.
CZ 299676 Bó
Izomcry a a β lze použít samostatně nebo ve směsi a v případě směsi v jakémkoli poměru. Izomer 7β má však. jak sc zdá. větší aktivitu, a proto je výhodnější.
Sloučeniny podle vynálezu lze připravit různými postupy, v podstatě známými, které vycházejí z příslušných steroidú. Lze např. použít postup popsaný v literatuře, který je uveden výše, kdy vznikne směs odpovídajících sloučenin 7β a 7a, dále separovatelnýeh známými technikami.
Např. 7a-hydroxyepiandrosteron a/nebo 7β-hydroxyepiandrosΐelΌn lze připravit zdehydroepiandrosteronu allylickou oxidací po protekci 3β-hydroxyskupiny a 17-ketoskupiny běžnými postupy. Produkt je pak zredukován rozpustnou kovovou sloučeninou, jako je hydríd sodný, a 3p-hydroxyskupina a 17-ketoskupina jsou deprotektovánv. 7a-Hydroxy- a 7|3-hydroxyepimery jsou pak podle potřeby separovány běžnými postupy, např. sloupcovou chromatografií, a lze jc krystalizovat za vzniku čistých látek.
Alternativní syntetický postup je popsán ve schématu 1
(Schéma 1)
(X)
V rcakčním schématu I jc dehydroepiandrosteron 11 acetylován za vzniku acetátu III, který dále reaguje s ethylenglykolem za vzniku ketalu IV. Ten je oxidován, jak je popsáno v příkladu 3. za vzniku 7-ketosIoučeniny V. která je deacetylována za vzniku sloučeniny VI, která dá redukcí vznik 7-hydroxy-17-ketaIepiandrosteronu VII. Ketal je odstraněn reakcí s kyselinou a vzniká Ί5 hydroxvepiandrosteron Vlil, který je následně chromatograficky separován na 7β- a 7a izomery za vzniku 7a-hydroxyepíandrosteronu IX a 73-hydroxyepiandrosteronu X.
Sloučeniny podle vynálezu lze podávat pacientům, u nichž je podezření na riziko vzniku isehemieké příhody, zvláště mrtvice nebo poranění hlavy, nebo u nichž je podezření na vývoj chronicii) kého degenerativního onemocnění, např. Alzheimerovy choroby nebo CIDN, jejichž vznik může být stimulován chronickými podp rabovým i hodnotami ischémie a/nebo sníženou produkcí energie neuronů - jevy často pozorovanými ve stárnoucím mozku. Taková profylaxe může mít velmi významné účinky. Bylo však doloženo, že sloučeniny podle vynálezu jsou účinné i při podání po isehemieké příhodě, je však výhodné podávat tyto sloučeniny eo nejdříve, aby se maximálně zabránilo mozkové degeneraci. Za některých okolností je žádoucí podávat sloučeniny opakovaně, zvláště pokud riziko isehemieké příhody u pacienta přetrvává.
Vhodným způsobem podávání jsou obecně injekce, které umožňují dosažení požadovaného účinku v nej kratší možné době. Zvláště výhodná je pak intravenózní injekce, v některých případech může být však vhodnější aplikace přímo do mozkomíšní tekutiny.
Dávka sloučeniny podle vynálezu závisí na mnoha faktorech, jako je věk, tělesná hmotnost a celkový stav pacienta, dále způsob, častost a forma podávání. Obecně se však doporučuje dávka 0,01 až 50 mg/kg tělesné hmotnosti, s výhodou dávka 0.05 až 20 mg/kg tělesné hmotnosti.
foto množství lze podávat najednou nebo v několika dávkách.
Vynález je dále ilustrován následujícími neomezujícími příklady, z nichž příklady 1 až 7 ilustrují přípravu sloučenin podle vynálezu a příklady 8 a 9 ilustrují jejich účinek. V příkladech 1 až 7 se římské číslice vztahují na vzorce v reakčních schématech uvedených výše.
5i i
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1: dehydroepiandrosteron-3-aeelál lil
Roztok 50 ml pyridinu a 50 ml acetanhydridu obsahující 10 g dehydroepiandrosteronu II (34,72 mmol) byl zahříván pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin. Reakční médium bylo ochlazeno, vlito do vody a extrahováno ethyl-acetátem. Organická fáze byla usušena nad bezvo40 dým síranem sodným a odpařena do sucha. Bylo získáno 11,0 g (33,33 mmol. 96 hmotn. %) dehydroepiandrosteron-3-aeetátu III, který byl rekrystalizován z ethanolu.
Příklad 2: I7-ketaldehydroepiandrosteron-3-acetát IV
Roztok 100 ml toluenu obsahující 5g dehydroepiandrosteron-3-acetátu III (15,15 mmol), 5 ml ethylenglykolu a katalytické množství /Moluensulfonové kyseliny byl zahříván pod zpětným chladičem při destilaci s vodní parou za použití Dean-Starkovy aparatury po dobu 24 hodin. Reakční médium bylo pak vlito do 100 ml lOobj. % roztoku uhličitanu draselného ve vodě.
Organická láze byla deka π to vána. Vodná fáze byla extrahována ethyl-acetátem. Organické fáze byly spojeny a odpařeny do sucha. Bylo získáno 5,10 g (13,64 mmol, 90 hmotn. %) !7-ketaldehydroepiandrosteron-3 -acetátu IV, který' byl rekrystalizován z ethanolu.
,1
Příklad 3: 7—keto—17-ketaldehydroepiandrosteron-3-acetát V
Roztok 70 ml pyridinu obsahující 5 g 17-ketaldehydroepiandrosteron-3-acetátu IV 5 (13.37 mmol) a katalytické množství bengálské červené byl ozařováno střednčtlakou rtuťovou výbojkou s kyslíkovým výsiřelkováním. Po 24 hodinách bylo do reakčního média přidáno katalytické množství acetátu měďnatého. Po 24 hodinách bylo reakční médium odpařeno do sucha.
Odparek byl purifí kován sloupcovou chromatografií na si likagelu (SiOi/cthyl-acetátxyklohexan 3/7). Bylo získáno 3,11 g (8,02 mmol, 60 hmotn. %) 7-keto-l 7-ketaldehydroepiandrosteron-3io acetátu V.
Příklad 4: 7 keto-17-ketaldehydroepiandrosteron VI
Roztok 50 ml methanolu obsahující 1 hmotn. % hydroxidu draselného a 1 g 7-keto-l 7-ketaldehydroepiandrosteron-3-acetátu V (2,58 mmol) byl zahříván pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin. Reakční medium bylo pak ochlazeno, neutralizováno a extrahováno ethyl-acctátem. Organická fáze byla usušena nad bezvodým síranem sodným a pak odpařena do sucha. Bylo získáno 802 mg (2.32 mmol. 90 hmotn. %) 7-keto-l 7-kelaldehvdroepiandrosteronu VI, který
2o byl rekrystalizován z methanolu.
Příklad 5: 7-hydroxy-l 7-kctalepíandrosleron Vil lOg 7-keto-l 7-ketaldehydroepiandrosteronu VI (28,90 mmol) bylo při -33 °C přidáno ke kapalnému roztoku amoniaku obsahujícímu 2,65 g sodíku. Po 4 hodinách byl přidán chlorid amonný, dokud nezmizelo modré zabarvení roztoku. Pak bylo přidáno 2,65 g sodíku a po 4 hodinách byl opět přidáván chlorid amonný, dokud nezmizelo modré zabarvení roztoku. Pak byla přidána voda a amoniak byl odpařen. Reakční médium bylo extrahováno ethyl acetátem. Organická fáze byla usušena nad bezvodým síranem sodným a pak odpařena do sucha. Bylo získáno 6,07 g (17.34 mmol, 60 hmotn. %) 7-hydroxy-l 7-kctalepiandrosteronu Vil.
Příklad 6: 7-hydroxyepiandrosteron Vlil
Roztok 100 ml acetonu obsahující 5 ml vody. 10 g 7-hydroxy-l 7-ketalepiandrostcronu Vlil (28.57 mmol. 50 hmotn. %) a katalytické množství /Moluensulfonové kyseliny byl zahříván pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin. Reakční médium bylo pak ochlazeno, vlito do 100 ml 10 obj. % roztoku uhličitanu sodného ve vodě a extrahováno ethyl acetátem. Organická fáze byla
-to usušena nad bezvodým síranem sodným a pak odpařena do sucha. Odparek byl purifíkován sloupcovou chromatografií na sílikagelu (SiCfi/clhyi acetát). Bylo získáno 5.24 g (17,14 mmol, 60 hmotn. %) 7-hydroxycpiandrosteronu VIII.
Příklad 7: 7a-hydroxyepiandrosteron IX a 7p-hydroxyepiandrosleron X
7-hydroxyepiandrosleron Vlil (5 g) obsahující epimery 7a a 7β v poměru 65/35 bvl purifíkován sloupcovou chromatografií na sílikagelu (AhOVCTICI;), Nejdříve byl získán 7p-hydroxyepiandrosteron X (2,5 g), pak 7a-hydroxyepiandrostcron IX (1.34 g). 7a Hydroxyepiandrosteron X a 7p-hydroxyepiandrosteron IX byly rekrystalizovány z ethyl-acctátu.
Příklad 8: Protokol pro studium hypoxickcho mozkového poškození
Organotypické kultury' řezů híppocampu byly připraveny základním postupem podle Príngle et al (1996, 1997) a modifikovány následujícím způsobem:
Mláďata krysy kmene W i stár (8-11 dní stará) byla zabita a hippoeampus byl rychle oddělen do ledového Geyova rovnovážného solného roztoku obsahujícího glukózu v množství 4,5 mg/ml. Řezy byly separovány, vloženy do insertů kultury Mi Ulice II CM (4 na misku) a udržovány po ío dobu 14 dní za podmínek 37 °C/5 % COi. Médium mělo složení 25 % tepelně inaktivovaného koňského séra, 25 % Hankova rovnovážného solného roztoku (HBSS) a 50 % minimálního základního média s přídavkem Harfových solí (MEM) s 1 mM glu tam inu a 4,5 mg/ml glukózy.
Médium bylo vyměňováno každé 3-4 dny.
i5 Experimentální hypoxie byla provedena, jak bylo dříve popsáno (Príngle et al, 1996. 1997). Stručně shrnuto, kultury by ly převedeny do média neobsahujícího sérum (SFM 75 % MEM, 25% HBSS s 1 mM glutaminu a 4.5 mg/ml glukózy) obsahujícího 5 pg/ml fluorescenčního exkluzního barvava propidiumjodidu (Pl). Kultury byly před měřením fluorescence ekvilibrovány v tomto médiu po dobu 60 minut. Fluorescence Pl byla stanovena invertovaným mikroskopem
2o Leica se sadou rhodaminových filtrů. Všechny kultury, u nichž byla v tomto stadiu naměřena fluorescence Pl, byly z dalších experimentů vyloučeny. Hypoxie byla indukována převedením kultur do SEM (+PI), které bylo nasyceno 95% Ni/5 % CO2. Misky s kulturami byly pak umístěny do vzduchotěsné komory, v níž byla atmosféra nasycena 95% N2/5 % CO2 kontinuálním profukováním plynem rychlostí 10 1/min po dobu 10 minut před uzavřením, a ínkubovány po dobu 170 minut (celková doba hypoxie byla tedy 180 minut). Nakonec by ly hvpoxické kultury vráceny do SFM s Pl v normální atmosféře a ínkubovány po dobu dalších 24 hodin.
Mozkové poškození bylo stanoveno, jak bylo popsáno dříve (Príngle et u/. 1996, 1997), za použití buď NIH Image 1.60 na počítači Apple lisí, nebo OpenLab 2.1 (Improvision) na počítači
3o Macintosh G4/400. K zobrazení byla použita monochromní kamera a zobrazení byla uložena na optický disk pro pozdější analýzu. Zobrazení přenosu světla byla zachycena bezprostředně před přídavkem léčiv a zobrazení fluorescence Pl byla naměřena na konci dvacctičtyřhodinového posthypoxického zotavovacího období. Oblast buněčné vrstvy CA! byla určena ze zobrazení přenosu světla. Oblast fluorescence Pl v CA1 byla změřena za použití funkce hustoty řezu. která (5 je součástí NIH Image nebo OpenLab, a mozkové poškození bylo stanoveno jak podíl CA1, kde byla fluorescence Fl detekována vyšší než pozadí. Stero id ní sloučeniny byly připraveny tak, že výchozí roztok v cthanolu o koncentraci 1 mg/ml by l dále rozředěn SMF. Sloučeniny byly přidány ke kulturám 45 minut před hypoxií, během hypoxie a posthypoxického zotavovacího období. Kontrolní pokusy představovaly kultury ošetřené pouze vehikulem.
Výsledky
Pokus 1
Účelem výchozího pokusu bylo určit, zda jsou 7a-hydroxyepiandrosteron a 7β- hydroxyepiandrosleron neuroprotektivní při vysoké koncentraci 100 nM. Hypoxií vznikla léze ve 25,5^6,4 % CAI, Toto poškození bylo značně sníženo 7a-hydroxyepiandrosteronem i 7p-hydroxyepiandrosteronem podávanými před hypoxií, během ní i po ní (viz tab. I).
CZ. 299676 B6
Tabulka 1
| Sloučenina | N | Podíl poškození CA1 (%) |
| Kontrolní hypoxie | 17 | 25,5+6,4 |
| Hypoxie 100 nM 7a-hydroxyepiandrosteronu | 16 | 4,0+2t9** |
| Hypoxie + 100 nM 7p-hydroxyepiandrosteronu | 16 | 9,0±4,7* |
Pokus 2
Po potvrzení neuroprotektivního účinku 7a-hydroxyepiandrosteronu i 7p-hydroxycpiandrostcronu byla stanovena závislost tohoto účinku na koncentraci sloučenin. Kontrolní hypoxie způsobila io mozkové poškození 31,9+4.7% CA i, 7ti-Hydroxyepiandrosteron byl významně neuroprotektivní při koncentraci 100 nM. Malé, ale nestát islieky významné snížení poškození neuronů bylo pozorováno při koncentraci lOnM a při koncentraci 1 nM nebyl pozorován žádný účinek.
Naproti tomu 7[3-hydroxyepiandrosteron byl významně neuroprotektivní při koncentraci 10 nM a 100 nM. ale jeho účinek se ztratil, pokud koncentrace klesla na 1 nM, jak dokládá tabulka 2.
Tabulka 2
| Sloučenina | N | Podíl poškození CA1 (%) |
| Kontrolní hypoxie | 29 | 31,9+4,7 |
| Hypoxie ·+ 1 nM 7a-hydroxycpiandrosteronu | 14 | 28,8+5,8 |
| Hypoxie + 10 nM 7a-hydroxyepiandrosteronLi | 15 | 21,9±8,1 |
| Hypoxie + 100 nM 7a-hydroxyepiandrosteronu | 16 | 11,8±2,8 |
| Hypoxie + 1 nM 7p-hydroxyepiandrostcronu | 15 | 20,6±7,2 |
| Hypoxie + 10 nM 7p-hydroxyepiandrosteronu | 12 | 11,9+4,7* |
| Hypoxie + 100 nM 7p-hydroxycpiandrosteronu | 13 | 14,3+5,0* |
Příklad 9: Celková mozková isehémie krys (4 cévní ok luze)
Mozková isehémie byla vyvolána 4 cévními okluzemi (4VO) u samec krysy kmene Wistar (25025 280 g). Vertebrální arlérie byly uzavřeny elektrokauterizaeí při fenobarbitální anestézii (60 mg/kg intraperitoneálně). Zvířata byla ponechána 24 hodin se zotavit, přičemž měla volný přístup k vodě, ne však k potravě. Další den byly krční artérie vystaveny anestézii 2% halotanu v 30% kyslíku/70 % oxidu dusného a uzavřeny na dobu 10 minut pomocí mikrovaskulárních svorek.
Pak byly svorky odstraněny a u artérií byla zkoumána okamžitá reperťuze. Během operace a 3 hodiny po ní byla normální tělesná teplota zvířat (37,5+0.5 °C) udržována termostaticky kontrolovanou vyhřívanou přikrývkou připojenou k rektálnímu teploměru. IJ jedné skupiny kontrolních zvířat byly vertebrální artérie též kauterizovány při fenobarbitální anestézii a pak byly následující den vystaveny anestézii 2% halotanu v 30 % kyslíku/70 % oxidu dusného, ovšem bez uzavřené svorkami. Zranění bylo ošetřeno lidokainovým gelem a sešito. Zvířata byla umístěna pod zahřívací lampou při 30 °C, dokud nenabyla vědomí.
Bylo studováno 7 skupin zvířat;
1. (8 zvířat) steroidní sloučenina, 7fi-hydroxyepiandrosteron (0,1 mg/kg intravenóziiě ocasní
4(i žilou, 3 injekce; 15 minut před vyvoláním isehémie, během isehémie a 5 minut po reperfuzi) . 7 .
2. (8 zvířat) steroidní sloučenina, 7p-hydroxyepiandrosteron (0,3 mg/kg intravenózně ocasní žilou, 3 injekce: 15 minul před vyvoláním ischémie, během ischcmic a 5 minut po reperfuzi)
3. (8 zvířat) steroidní sloučenina. 7p-hydroxyepiandrosteron (1 mg/kg intravenózně ocasní žilou. 3 injekce: 15 minut před vyvoláním ischémie, během ischémie a 5 minut po reperfuzi)
4. (8 zvířat) NBQX (disodná sůl z důvodu lepší rozpustnosti ve vodě) jako referenční látka a pozitivní kontrola (TOCRIS, SRN, 30 mg/kg intraperitoneálně. 3 injekce, jak je popsáno výše)
5. (8 zvířat) vehikulum (0,9% NaCl s obsahem 100 μΙ ethanolu), 3 injekce, jak je popsáno výše
6. (8 zvířat) pouze ischémie
7. (8 zvířat) operovaná kontrolní zvířata.
NBQX je 2.3-dihydroxy-6-nitro-7-sulfamoylbenzo(F)chinoxalin. což je látka s prokázanou neuro protekl i vní aktivitou {Gi 11, R.; Nordholm. L.: l.odge, D.: The neuro protéct i ve act ion of 2.3dihydroxy-6-nitro-7 sulfamoylbenzo(F)quinoxaline (NBQX) in a rat focal ischaemia model.
BrainRes. 580, 35 43. 1992)/
Látky byly rozpuštěny ve 100 μΙ ethanolu a pak zředěny 0,9% NaCl.
Po přežití 7 dní po ischémii byla zvířatům fixována per fuze 4% parafonnaldehydem do srdce. 25 Mozky byly opatrně vyjmuty a fixovány v témž médiu po dobu 2 hodin. Po kryoprotekci v 30% sacharóze byly mozky rychle zmraženy v ísopentanu a uchovávány při -80 °C. Dvacet i mikrometrové kryoslalieké řezy obsahující útvar hippocampu byly obarveny Nisslovou metodou toluidinovou modří nebo fluorescencí Neuro Trace.
id Analýza dat
Vážnost mozkového poškození v oblastí CA1 hippocampu po ischémii byla vyhodnocena počtem přeživších neuronů detekovaných Nisslovým barvením. Pro každou skupinu byl v CAl oblasti stanoven střední počet morfologicky nepoškozených neuronů na délku 400 μηι. Spočítání buněk bylo provedeno v 3 5 sériových řezech u každého zvířete a v šesti 400μιη oblastech CA1 v každém řezu pomocí světelného mikroskopu s objektivem 20x. Dala byla statisticky vyhodnocena Studentovým Ί -testem a udána jako střední hodnota ± odchylka.
Výsledky a diskuse
Výsledky znázorňují obrázky 1A až IC.
Morfologicky nepoškozené neurony CAl hyppoeampu byly charakterizovány Nisslovým barvením (toluidínová modř nebo fluorescence NeuroTraec) podle následujících kriterií: jasný tvar perikarya neuronu, vclkc jádro s pozitivně obarveným jadérkem, malá oblast cytoplasmy okolo jádra s pozitivním Nisslovým obarvením, označující přítomnost neporušeného hrubého endoplasmaiického retikula s ribosomy, což signalizuje neporušenou schopnost syntézy proteinů.
minut celkové ischémie (mírná ischémie) a doba přežití 7 dní vedou k neurodegeneraci pyra50 midálnícb buněk výlučně v oblasti CAl hippocampu (obr. 1 A—1C). Střední počet pyramidálních buněk v CAl kontrolních operovaných zvířat byl 121,5±4,3 (uvažováno jako 100%). Po 10 minutách celkové ischémie zahynulo 60 % neuronů CAl (obr. 1 B). Počet neuronů u zvířat ve skupině vystavené ischémii a intravenózní injekci vehikula (NaCl + 100 μΐ ethanolu) aplikované, jak je popsáno výše, bylo srovnatelné se skupinou vystavenou pouze ischémii (obr. 1A, . ϋ .
1B). NBQX (30 mg/kg, 3 intravenózní injekce, jak je popsáno výše) vykazoval signifikantní neuroprotekcí (p=0,03) pyramidálních buněk CA1 ve srovnání s ischemiekou skupinou. V porovnání s čisté ischemiekou skupinou vyvolává NBQX 47,5% neuroprotekcí, zatímco ve srovnání s operovanými kontrolními zvířaty byl jeho neuroprotektivní účinek 68.5 %. Neuroprotekce vyvolaná NBQX byla v souladu s (iill et liL 1992, a GilI, 1994, kde byla demonstrována platnost modelu celkové ischémie použitého v našich experimentech. 7[3-Hydroxyepiandrosteron má neuroprotektivní účinek na pyramidální buňky CA1 hippocampu po 10 minutách celkové ischcmie a 7 dnech přežití, který je závislý na koncentraci (obr. I A). Analýza T testem odhalila vysoce signifikantní neuroprotektivní účinek 7p-hydroxyepiandrosteronu v koncentracích 0,1 mg/kg (p=(),01) a 0,3 mg/kg (p-0,0008). Ve srovnání s operovanými kontrolními zvířaty byl neuroprotektivní účinek 7(3-hydroxyepiandrosteronu na pyramidální buňky CAl 74,8 % (pro OJ mg/kg) a 83,9 % (pro 0,3 mg/kg) (obr, IC), 7p-Hydroxyepiandrosteron v koncentraci 1.0 mg/kg vykazoval pouze tendencí neuroprotekce, ale jeho účinek nebyl signifikantní.
V žádném /.experimentu s 7f3-hydroxyepiandrosteronem injikováném před ischémií, během ní i po ní nebyly pozorovány žádné abnormality v chování zvířat.
Vysvětlivky k obrázkům:
Počet morfologicky nepoškozených pyramidálních buněk CA1 hippocampu u krys po 7 dnech po celkové mozkové isehémii při vlivu různých sloučenin.
Data byla uvedena jako střední počet ± odchylka nepoškozených neuronu na 400 μιη délky oblasti CAl.
Data jsou vyjádřena jako podíl nepoškozených neuronů na 400 μηι délky oblasti CAl ve srovnání s operovanými kontrolními zvířaty (100 %).
Data byla vyhodnocena jako absolutní procento neuroprotekce, když byl počet přeživších neuronů v tschemické skupině považován za 0 % a počet přeživších neuronů ve skupině operovaných kontrolních zvířat považován za 100 %.
Průmyslová využité 1 nost
Vynález se týká použití 7-hydroxyepiandrosteronu (7-hydroxy-EPIA) pro přípravu léčiva pro ochranu před akutním nebo chronickým mozkovým poškozením.
Claims (6)
- PATENTOVÉ NÁROKY5 1. Použití 7 hydroxyepiandrosteronu pro přípravu léčiva pro ochranu před akutním nebo chronickým mozkovým poškozením.
- 2. Použití podle nároku 1, kde 7-hydroxyepiandrosteron je 7ct-hvdroxyepiandrosteron.ío
- 3. Použití podle nároku 1. kde 7-hydroxyepiandrostcron je 7[3-hydroxyepiandrosleron.
- 4. Použití podle nároku 1. kde 7-hydroxyepiandrosteron je směs 7oÍ-hydroxyepiandrosteronu a 7[3-hydro\yepiandrosteronu.15
- 5. Použití podle kteréhokoli z nároků 1 až 4. kde je mozkové poškození způsobeno mrtvicí nebo mozkovým traumatem.
- 6. Použití podle kteréhokoli z nároků I až 5, kde je mozkové poškození způsobeno Alzheimerovou chorobou, Parkinsonovou chorobou, zhoršením kognice. které není demencí. poraněním2o páteřní míchy nebo periferních nervů.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB0016022A GB2363983A (en) | 2000-06-29 | 2000-06-29 | Protection against neuronal damage using 7-hydroxyepiandrosterone |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ200377A3 CZ200377A3 (cs) | 2003-06-18 |
| CZ299676B6 true CZ299676B6 (cs) | 2008-10-15 |
Family
ID=9894707
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20030077A CZ299676B6 (cs) | 2000-06-29 | 2001-06-29 | 7-Hydroxyepiandrosteron s neuroprotektivním úcinkem |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7718639B2 (cs) |
| EP (1) | EP1294382B1 (cs) |
| JP (1) | JP4942905B2 (cs) |
| KR (1) | KR100786284B1 (cs) |
| CN (1) | CN100459980C (cs) |
| AT (1) | ATE401897T1 (cs) |
| AU (2) | AU2001267709B2 (cs) |
| CA (1) | CA2414584C (cs) |
| CY (1) | CY1108773T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ299676B6 (cs) |
| DE (1) | DE60134979D1 (cs) |
| DK (1) | DK1294382T3 (cs) |
| ES (1) | ES2310182T3 (cs) |
| GB (1) | GB2363983A (cs) |
| HK (1) | HK1052300B (cs) |
| HU (1) | HU227152B1 (cs) |
| IL (2) | IL153541A0 (cs) |
| NO (1) | NO327959B1 (cs) |
| PL (1) | PL200699B1 (cs) |
| PT (1) | PT1294382E (cs) |
| RU (1) | RU2307654C2 (cs) |
| SI (1) | SI1294382T1 (cs) |
| WO (1) | WO2002000225A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA200300085B (cs) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2363984A (en) * | 2000-06-29 | 2002-01-16 | Hunter Fleming Ltd | Protection against neuronal damage using 3-hydroxy-7 -hydroxy steroids and 3-oxo-7 -hydroxy steroids |
| GB2378898A (en) * | 2001-08-14 | 2003-02-26 | Hunter Fleming Ltd | Prophylactic and therapeutic use of hydroxysteroids |
| WO2004019953A1 (en) * | 2002-08-28 | 2004-03-11 | Hollis-Eden Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutic treatment methods |
| US20070231373A1 (en) * | 2004-04-28 | 2007-10-04 | Hunter-Fleming Limited | Transdermal Steriod for Formulation |
| BR122013033954B8 (pt) | 2006-11-21 | 2021-05-25 | Umecrine Ab | novos esteróides apresentando solubilidade em água e resistência contra metabolismo aumentadas, e métodos para sua produção |
| GB0623971D0 (en) * | 2006-11-30 | 2007-01-10 | Hunter Fleming Ltd | Modulation of prostaglandin/cyclooxygenase metabolic pathways |
| AU2007327011A1 (en) | 2006-11-30 | 2008-06-05 | Hunter-Fleming Limited | Modulation of prostaglandin/cyclooxygenase metabolic pathways |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1994003176A1 (en) * | 1992-07-31 | 1994-02-17 | Humanetics Corporation | Treatment of alzheimer's disease and modulation of immune system with δ5-androstenes |
| US5554601A (en) * | 1993-11-05 | 1996-09-10 | University Of Florida | Methods for neuroprotection |
| US5556847A (en) * | 1994-10-27 | 1996-09-17 | Duquesne University Of The Holy Ghost | Methods of effecting memory enhancement mediated by steroid sulfatase inhibitors |
| WO1997037664A2 (en) * | 1996-04-09 | 1997-10-16 | British Technology Group Ltd. | Use of 7 alpha-substituted steroids to treat neuropsychiatric, immune or endocrine disorders |
| WO1998043647A1 (en) * | 1997-03-28 | 1998-10-08 | Massachusetts Institute Of Technology, Inc. | Regulation of amyloid precursor protein (app) expression by estrogenic compounds |
| WO1999026630A1 (en) * | 1997-11-24 | 1999-06-03 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Testosterone inhibitors and use for the protection of neurons |
| WO1999052532A1 (en) * | 1998-04-14 | 1999-10-21 | Pharmadigm, Inc. | Method for reducing central nervous system impairment |
Family Cites Families (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| YU243975A (en) | 1974-10-14 | 1982-06-30 | Schering Ag | Process for obtaining 7-hydroxyestradiols |
| US5707983A (en) | 1990-08-29 | 1998-01-13 | Humanetics Corporation | Treatment of alzheimer's disease and modulation of immune system with Δ5-androstenes |
| US5212167A (en) * | 1991-09-12 | 1993-05-18 | Trustees Of Boston University | Modulation of receptor-mediated ion transport |
| FR2696934B1 (fr) * | 1992-10-20 | 1995-06-02 | Conservatoire Nal Arts Metiers | Dérivés de stéroïdes naturels 3B hydroxyles ayant des propriétés de déclenchement et de stimulation de l'immunité, composition les contenant et procédé pour les obtenir. |
| ES2229215T3 (es) | 1993-03-09 | 2005-04-16 | University Of Utah Research Foundation | Uso de dhea y derivados de la misma para la preparacion de un medicamento para la prevencion de necrosis progresiva, lesion por reperfusion , transpoosicion bacteriana y sindrome de insuficiencia respiratoria del adulto. |
| US5846963A (en) | 1995-06-07 | 1998-12-08 | University Of Utah Research Foundation | Methods for preventing progressive tissue necrosis, reperfusion injury, bacterial translocation and adult respiratory distress syndrome |
| US5387583A (en) * | 1993-04-20 | 1995-02-07 | Loria; Roger M. | Compositions containing corticosteroids or analogues thereof and corticosteroid buffering effective amounts of 5-androstene 3B, 17B or 5-androstene 3B, 7B, 17B triol or analogues thereof |
| US5877169A (en) | 1993-11-05 | 1999-03-02 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Methods of treatment of ischemic damage |
| US5976850A (en) | 1994-10-19 | 1999-11-02 | University Of Edinburgh | Hippocampus-associated proteins; DNA sequences coding therefor and uses thereof |
| EP0837874B1 (en) | 1995-06-06 | 2004-12-15 | Euro-Celtique S.A. | Neuroactive steroids of the androstane and pregnane series |
| WO1997003677A1 (en) | 1995-07-24 | 1997-02-06 | Trustees Of Boston University | Inhibition of nmda receptor activity by pregnenolone sulfate derivatives |
| GB2317826B (en) * | 1995-08-29 | 1999-12-15 | Univ Edinburgh | Regulation of intracellular glucocorticoid concentrations |
| US5985242A (en) | 1995-10-27 | 1999-11-16 | Praecis Pharmaceuticals, Inc. | Modulators of β-amyloid peptide aggregation comprising D-amino acids |
| JP2001500852A (ja) | 1996-08-27 | 2001-01-23 | プレーシス ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド | Ｄ―アミノ酸を含むβ―アミロイドペプチド凝集のモジュレーター |
| FR2760362B1 (fr) | 1997-03-10 | 2000-08-11 | Vitasterol | Utilisation cosmetique ou dermatologique de steroides 7-hydroxyles |
| GB9708716D0 (en) * | 1997-04-29 | 1997-06-18 | Imperial College | Chronic heart failure |
| WO1999015179A1 (en) * | 1997-09-25 | 1999-04-01 | Regents Of The University Of Minnesota | Methods of limiting apoptosis of cells |
| AU1387399A (en) | 1997-11-10 | 1999-05-31 | Vyrex Corporation | Probucol esters and uses thereof |
| GB9726569D0 (en) | 1997-12-16 | 1998-02-11 | Univ Southampton | Neuroprotective agents |
| FR2786102B1 (fr) | 1998-11-20 | 2001-02-16 | Monique Vincens | Utilisation de sulfate de dehydroepiandrosterone pour augmenter le nombre de recepteurs nmda chez un mammifere |
| US20030083231A1 (en) | 1998-11-24 | 2003-05-01 | Ahlem Clarence N. | Blood cell deficiency treatment method |
| US6667299B1 (en) | 2000-03-16 | 2003-12-23 | Hollis-Eden Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical compositions and treatment methods |
| ATE361309T1 (de) | 1999-11-02 | 2007-05-15 | Bayer Schering Pharma Ag | 18-nor-steroide als selektiv wirksame estrogene |
| GB0003524D0 (en) | 2000-02-15 | 2000-04-05 | Btg Int Ltd | Cytoprotective steroids (II) |
| GB2363984A (en) * | 2000-06-29 | 2002-01-16 | Hunter Fleming Ltd | Protection against neuronal damage using 3-hydroxy-7 -hydroxy steroids and 3-oxo-7 -hydroxy steroids |
| EP1557166A1 (en) * | 2004-01-21 | 2005-07-27 | Newron Pharmaceuticals S.p.A. | Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of lower urinary tract disorders |
-
2000
- 2000-06-29 GB GB0016022A patent/GB2363983A/en not_active Withdrawn
-
2001
- 2001-06-29 RU RU2003102437/15A patent/RU2307654C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 US US10/312,533 patent/US7718639B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-29 SI SI200130866T patent/SI1294382T1/sl unknown
- 2001-06-29 AU AU2001267709A patent/AU2001267709B2/en not_active Ceased
- 2001-06-29 EP EP01945494A patent/EP1294382B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-29 AT AT01945494T patent/ATE401897T1/de active
- 2001-06-29 WO PCT/GB2001/002937 patent/WO2002000225A1/en active IP Right Grant
- 2001-06-29 IL IL15354101A patent/IL153541A0/xx active IP Right Grant
- 2001-06-29 PL PL359108A patent/PL200699B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 HK HK03104578.9A patent/HK1052300B/en not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 KR KR1020027017898A patent/KR100786284B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-29 AU AU6770901A patent/AU6770901A/xx active Pending
- 2001-06-29 DE DE60134979T patent/DE60134979D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-29 JP JP2002505007A patent/JP4942905B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-29 CZ CZ20030077A patent/CZ299676B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 CN CNB018121098A patent/CN100459980C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-29 HU HU0301134A patent/HU227152B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2001-06-29 DK DK01945494T patent/DK1294382T3/da active
- 2001-06-29 ES ES01945494T patent/ES2310182T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-29 CA CA002414584A patent/CA2414584C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-06-29 PT PT01945494T patent/PT1294382E/pt unknown
-
2002
- 2002-12-19 IL IL153541A patent/IL153541A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-12-27 NO NO20026243A patent/NO327959B1/no not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-01-03 ZA ZA200300085A patent/ZA200300085B/en unknown
-
2008
- 2008-10-20 CY CY20081101165T patent/CY1108773T1/el unknown
-
2009
- 2009-12-16 US US12/639,708 patent/US20100173883A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1994003176A1 (en) * | 1992-07-31 | 1994-02-17 | Humanetics Corporation | Treatment of alzheimer's disease and modulation of immune system with δ5-androstenes |
| US5554601A (en) * | 1993-11-05 | 1996-09-10 | University Of Florida | Methods for neuroprotection |
| US5556847A (en) * | 1994-10-27 | 1996-09-17 | Duquesne University Of The Holy Ghost | Methods of effecting memory enhancement mediated by steroid sulfatase inhibitors |
| WO1997037664A2 (en) * | 1996-04-09 | 1997-10-16 | British Technology Group Ltd. | Use of 7 alpha-substituted steroids to treat neuropsychiatric, immune or endocrine disorders |
| WO1998043647A1 (en) * | 1997-03-28 | 1998-10-08 | Massachusetts Institute Of Technology, Inc. | Regulation of amyloid precursor protein (app) expression by estrogenic compounds |
| WO1999026630A1 (en) * | 1997-11-24 | 1999-06-03 | University Of Florida Research Foundation, Incorporated | Testosterone inhibitors and use for the protection of neurons |
| WO1999052532A1 (en) * | 1998-04-14 | 1999-10-21 | Pharmadigm, Inc. | Method for reducing central nervous system impairment |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20100130459A1 (en) | Neuroprotective 7-beta-hydroxysteroids | |
| CA2842177A1 (en) | Formulations of deoxycholic acid and salts thereof | |
| US20100173883A1 (en) | 7-hydroxyepiandrosterone having neuroprotective activity | |
| AU2001267705A1 (en) | Neuroprotective 7-beta-hydroxysteroids | |
| AU2001267709A1 (en) | 7-hydroxyepiandrosterone having neuroprotective activity | |
| JP6594486B2 (ja) | デオキシコール酸およびその塩類の製剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20090629 |