NO301765B1

NO301765B1 - 1-(pyridol[3,4-b]-1,4-oksazinyl-4-yl)-1H-indoler, farmasöytisk sammensetning, samt anvendelse derav

Info

Publication number: NO301765B1
Application number: NO921490A
Authority: NO
Inventors: Richard Charles Effland; Larry Davis; Gordon Edward Olsen
Original assignee: Hoechst Marion Roussel Inc
Priority date: 1991-04-15
Filing date: 1992-04-14
Publication date: 1997-12-08
Also published as: US5519131A; AU643135B2; DK0509400T3; PL168671B1; KR100201509B1; FI97544B; CA2065986A1; EP0509400A1; DE69211892D1; GR3020612T3; IL101589A; CZ282054B6; US5276156A; AU1485292A; CA2065986C; IL101589A0; FI97544C; NO921490D0; JPH05112572A; IE921190A1

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører l-(pyridol[3,4-b]-1,4-oksazinyl-4-yl)-lH-indoler, farmasøytisk sammensetning, samt anvendelse derav med formelen I

kjennetegnet ved at

R-^ er hydrogen eller laverealkyl;

1*2er hydrogen eller laverealkyl; og ;R3er hydrogen, hydroksy, benzyloksy eller ; ; der R4er hydrogen og R5;er laverealkyl, ;hvor laverealkyl betyr en lineær eller forgrenet alkylgruppe med fra 1 til 7 karbonatomer, eksempelvis metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl og lineær og forgrenet pentyl, heksyl og heptyl. ;Visse 2,3-dihydro-l-(pyridinylamino)-indoler er blitt beskrevet å kunne anvendes som smertestillende- og antidepressive midler samt for å fremme hukommelsen, og for behandling av Alzheimer's sykdom (se f.eks. NOC 176398). I tillegg er visse N-(pyrrol-l-yl)pyridinamider blitt beskrevet å kunne anvendes for å fremme hukommelsen (som eksempel, se NOC 168644). Visse N-(pyridinyl )-lH-indol-l-aminer er blitt beskrevet å kunne anvendes for å fremme hukommelsen og som smertestillende- og antidepressive midler (som eksempel, se NOC 168104). ;Forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen er nyttige for å lindre depresjon eller forskjellige hukommelsesforstyrrelser, kjennetegnet ved en cholinergisk eller adrenergisk mangel. Foreliggende oppfinnelse vedrører også forbindelser med formelen II ; ; kjennetegnet ved at ;R-^ er hydrogen eller laverealkyl; ;R2er hydrogen eller laverealkyl, ;R3er hydrogen, laverealkyl, halogen, nitro, amino, ;hydroksy, laverealkoksy, benzyloksy eller ; ; der R4er hydrogen eller laverealkyl og R5;er laverealkyl, ;X er halogen og R7er (CH2)2OE, CH2C02R8eller ; ; der Rg ;er hydrogen eller laverealkyl eller et farmasøytisk akseptabelt addisjonssalt derav. ;Det er også beskrevet farmasøytisk sammensetning som er kjennetegnet ved at den omfatter en forbindelse ifølge krav 1, som aktivt ingrediens og en egnet bærer derfor. ;Foreliggende oppfinnelse vedrører også anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1, for fremstilling av et medikament som har hukommelses-feilfunksjonslindrende og/eller antidepressiv aktivitet. ;Dersom ikke annet er angitt eller hevdet, vil følgende definisjoner gjelde i beskrivelsen og de vedlagte kravene. ;Betegnelsen halogen skal bety fluor, klor, brom eller jod. ;I beskrivelsen av vedlagte krav skal en gitt kjemisk formel eller et navn omfatter alle stereoisomerer, optiske isomerer, geometriske isomerer og tautomeriske isomerer, der hvor slike isomerer eksisterer. ;Forbindelsene ifølge oppfinnelsen blir fremstilt på følgende måte. Subst i tuen tene R^og R2skal ha de respektive be-tydningene angitt ovenfor, dersom ikke annet er hevdet eller indikert. ;Forbindelse Ila med formel ; blir omsatt med litiumaluminiumhydrid eller annet egnet reduksjonsmiddel i en standard reduksjon for å tilveiebringe forbindelse Ilb med formelen ; Denne reaksjonen blir vanligvis utført i et eterholdig oppløsningsmiddel så som tetrahydrofuran eller eter, ved en temperatur på mellom omtrent 0°C og 10°C i 1 til 4 timer. ;Forbindelse Ila blir fremstilt ved omsetning med en forbindelse med formel III ; ; med etylkloracetat i nærvær av en sterk base så som natriumhydrid. ;Forbindelse HB ble deretter cyklisert ved anvendelse av en sterk base så som natriumhydrid eller kalium t-butoksid for å fremstille forbindelse I der R3er hydrogen. ;Denne reaksjonen foregår vanligvis i et polart aprotisk oppløsningsmiddel så som dimetylformamid, dimetylacetamid, N-metyl-2-pyrrolidon, heksametylfosforamid eller dimetylsul-foksid ved en temperatur på mellom omtrent 25°C til 100°C i omtrent 1 til 10 timer. ;Forbindelser der 1*3= er forskjellig fra hydrogen, kan Mi fremstilt på følgende måte.

Forbindelse IV med formel

blir redusert på en måte som ligner den som er diskutert ovenfor med litiumaluminiumhydrid eller annet egnet reduksjonsmiddel for å tilveiebringe forbindelse V med formelen

Forbindelse V blir cyklisert på en måte som ligner den som er beskrevet ovenfor, for å tilveiebringe forbindelse VI ifølge oppfinnelsen med formelen

Forbindelse VI blir utsatt for katalytisk hydrogenolyse for å tilveiebringe forbindelse VII ifølge oppfinnelsen med formelen

Hydrogenolysen blir vanligvis utført med en edelmetallkataly-sator, så som platina eller palladium på karbon, i et laverealkanol-oppløsningsmiddel så som etanol eller isopropanol ved en temperatur på mellom omtrent 25°C til 80°C.

Forbindelse VII blir omsatt med et isocyanat med formel R5-NCO hvori R5er laverealkyl, aryl eller aryllaverealkyl for å

tilveiebringe forbindelse I hvori R3er ■

Denne reaksjonen foregår vanligvis i nærvær av en base så som kaliumkarbonat i et oppløsningsmiddel så som tetrahydrofuran ved en temperatur på mellom omtrent 0°C til 50° C i 1 til 24 timer.

Forbindelsene med formel I ifølge foreliggende oppfinnelse, er nyttige for behandling av forskjellige hukommelses-feiltilstander, kjennetegnet ved en redusert cholinergisk eller adrenergisk funksjon, så som Alzheimer's sykdom og for lindring av depresjon.

Denne anvendelsen er manifestert ved evnen som disse forbindelsene har til å inhibere enzymet acetylcholinesterase og derved øke acetylnivåene i hjernen.

Cholinesterase inhibisjonsanalyse

Cholinesterase finnes i hele kroppen, både i hjernen og i serum. Men det er bare hjerne-acetylesterase (AChE) for-delingen som er korrelert med den sentrale cholinergiske innervasjonen. Denne samme innervasjonen foreslås å være svakere i Alzheimer-pasienter. Vi har bestemt in vitro-inhibisjon av acetylcholinesterase-aktiviteten i rotte-striatum, ifølge fremgangsmåten beskrevet nedenfor.

Tn vit. rn iTihihiR^ nn av acet<y>lcholinesterase-aktiviteten i rotte- striatum

Acetylcholinesterase (AChE), som noen ganger blir betegnet cholinesterase, finnes i nerveceller, skjelettmuskel, glattmuskel, forskjellige kjertler og i røde blodceller. AChE kan sjeldnes fra andre cholinesteraser ved substrat og inhibitorspesifisiteter og ved regional distribusjon. Dets distribusjon i hjernen korrelerer med den cholinergiske innervasjonen, og subfraksjonen viser det høyeste nivået i nerveterminalene.

Det er generelt akseptert at den fysiologiske rollen til AChE er den hurtige hydrolysen og inaktiveringen av acetylcholin. Inhibitorene av AChE viser markerte cholinominetiske virkninger i cholinergisk-innerverte effektor-organer, og er blitt anvendt terapeutisk ved behandling av glaukoma, myasthenia gravis og paralytisk ileus. Senere studier har derimot foreslått at AChE-inhibitorene også kan være fordelaktig for behandling av Alzheimer's dementia. Fremgangsmåten beskrevet nedenfor ble anvendt i foreliggende oppfinnelse for analysering av anticholinesterase-aktiviteten. Dette er en modifikasjon av metoden til Ellman et al., Biochem. Pharmacol. 7, 88 (1961).

Prosedyre:

A. Reagenser

1. 0,05 M Fosfatbuffer, pH 7,2

a) 6,85 g NaHP0H0/100 ml destillert H0 b) 13,40 g NaHP0-7H0/100 ml destillert H0 c) tilsett (a) til (b) helt til pH når 7,2 d) Fortynn 1:10

2. Substrat i buffer

a) 198 mg acetyltiocholinklorid (10 mM) b) q.s. til 100 ml med 0,05 M fosf atbuff er, pE 7,2 (reagens 1)

3. DTNB i buffer

a) 19,8 mg 5 ,5-ditiobisnitrobenzosyre (DTNB) (0,5 mM) b) q.s. til 100 ml med 0,05M fosfatbuffer, pH 7,2 (reagens 1)

4. En 2mM stamoppløsning av testmedikamentet blir dannet i et egnet oppløsningsmiddel og q.s. til volum med 0,5 mM DTNB (reagens 3). Medikamentene blir fortynnet i serie (1:10) slik at sluttkonsentrasjonen (i kuvette) er 10_<4>M og screenet for aktivitet. Dersom aktiv, blir IC5Q-verdiene bestemt fra inhibitoraktiviteten til påfølgende konsentrasjoner .

B. Vevspreparering

Hann-Wistar-rotter blir avlivet, hjernene blir hurtig fjernet, corpora striata dissekert fritt, veid og homogenisert i 19 volum (omtrent 7 mg protein/ml) 0,05 M fosfatbuffer, pH 7,2, ved anvendelse av en Potter-Elvehjem homogenisator. En 25 mikroliter aliquot av homogenatet blir tilsatt til 1 ml bærer eller forskjellige konsentrasjoner av testmedikamentet og preinkubert i 10 minutter

ved 37 °C.

C. Analyse

Enzymaktiviteten blir målt med Beckman DU-50 spektrofoto-meter. Denne metoden kan bli anvendt for ICsQ-bestemmelser og for måling av kinetiske konstanter.

Instrumentoppsett

Kinetics Soft-Pac Modul #598273 (10) Program # b Kindata: Kilde - Vis Bølgelengde - 412 nm Sipper - ingen Kuvet ter - 2 ml kuvetter ved anvendelse av auto 6-prøve Blank - 1 for hver substratkonsentrasjon Intervaltid - 15 sekunder (15 eller 30 sekunder for kinetikk) Totaltid - 5 minutter (5 eller 10 minutter for kinetikk) Plot - ja Span - autoskala Stigning - økende Resultater - ja (angir stigning) Faktor - 1

Reagensene blir tilsatt til blank og prøvekuvettene som følger: Blank: 0,8 ml fosfatbuffer/DTNB0,8 ml buffer/substrat Kontroll: 0,8 ml fosfatbuffer/DTNB/enzym0,8 ml fosfatbuffer/substrat Medikament: 0,8 ml fosfatbuffer/DTNB/medikament/enzym0,8 ml fosfatbuffer/substrat

Blank-verdiene blir bestemt for hver prøving for å kontrol-lere ikke-enzymatisk hydrolyse av substratet, og disse verdiene blir automatisk substrahert av kinadataprogrammet tilgjengelig på kinetikk soft-pac-modulen. Dette programmet beregner også absorbsjonsrateforandringen for hver kuvette.

For l<o>vbestemmelser:

Substratkonsentrasjonen er 10 mM fortynnet 1:2 i analyse som tilveiebringer sluttkonsentrasjon på 5 mM. DTNB-konsentra-sjonen er 0,5 mM som gir en 0,25 mM sluttkonsentrasjon.

stigning kontroll - stigning medikament (100) stigning kontroll

Resultatene av denne analysen for noen av forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen og fysostigmin (referanseforbind-else) er presentert i tabell 1.

Denne anvendelsen blir videre demonstrert ved evnen som disse forbindelsene har til å gjenopprette cholinergisk manglende hukommelse i Dark Åvoidance-analysen som beskrevet nedenfor.

Dark Avoidance- analyse

I denne analysen blir musene testet for deres evne til å huske et ubehagelig stimuli i en periode på 24 timer. En mus blir plassert i et kammer som inneholder en mørk avdeling, og et sterkt hvitglødende lys driver den til den mørke avdelingen, deretter elektrisk sjokk blir administrert til metallplatene på gulvet. Dyret blir fjernet fra testappara-turen og testet på nytt 24 timer senere for evnen til å huske det elektriske sjokket.

Dersom scopalamin, et anticholinergisk middel som er kjent for å forårsake hukommelsesskade, blir administrert før dyrets første utsetting for forsøksrommet, går dyret på nytt inn i den mørke avdelingen kort etter å ha blitt plassert i forsøksrommet 24 timer senere. Denne virkningen av scopolamin er blokkert av en aktiv testforbindelse som resulterer i et større intervall før den går påny inn i den mørke avdelingen.

Resultatene for en aktiv forbindelse blir uttrykt som prosent av en gruppe dyr der virkningen av skopolamin er blokkert, manifestert ved et øket intervall mellom å bli plassert i testrommet og entring av den mørke avdelingen.

Resultatene av denne analysen for noen av forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen, og de for tacrin og pilocarpin (referanseforbindelser), er presentert i tabell 2.

Disse forbindelsene blir administrert til et individ som krever forsterking av hukommelsen som en effektiv oral, parenteral eller intravenøs dose på fra omtrent 1 til 100 mg/kg kroppsvekt pr. dag. En spesielt effektiv mengde er omtrent 10 mg/kg kroppsvekt pr. dag. Det er å bemerke at for et hvilket som helst bestemt individ bør spesifikke do-seringsregimer bli justert ifølge individets behov og profesjonelle vurdering av personen som administrerer eller overvåker administrasjonen av ovennevnte forbindelse. Det er videre å bemerke at doseringene angitt heri bare er eksemp ler, og skal ikke på noen måte begrense rammen eller utførelsen av oppfinnelsen.

- norepinefrin- opptaket i

hele hjerne-synaptosomer fra rotte

Denne analysen blir anvendt som en biologisk screening for forbindelser som forsterker den adrenergiske mekanismen ved blokkering av norepinefrinopptaket.

Den neuronale reopptaksmekanismen for norepinefrin (NE) er den mest viktige fysiologiske måten for inaktivering av NE ved fjerning av transmitteren fra den synaptiske kløften. NE-opptaket blir oppnådd ved et mettbart, stereospesifikt, høyaffinitet, natriumavhengig aktivt transportsystem, og dette er blitt vist å eksistere i både perifer- og sentral-nervesystemvev. NE-opptaket blir potensielt inhibert av kokain, fenetylaminer og tricykliske, antidepressive midler. Det blir også inhibert av ouabain, metaboliske inhibitorer og fenoksybenzamin. Inhibisjon av NE-opptaket ved klinisk effektive tricykliske antidepressive midler, er et viktig punkt i katecholaminhypotesen for virkende forstyrrelser og omfattende strukturaktivitetsforhold for NE-opptaket som er blitt dannet.

Det er store regionale variasjoner i NE-opptaket som korrelerer med de endogene nivåene av NE. Hypotalamusen viser det høyeste nivået av NE og det største opptaket. Synaptoso-malt -NE-opptak er en nyttig markør for integriteten til noreadrenergiske neuroner etter lesjonseksperimenter, samt en hvilken som helst analyse for forbindelser som potensierer virkningen av NE ved blokkering av gjenopptakelsesmekanismen.

F r emgang små t e

A. Dyr: Hann-CR Wistar-rotter (100-125 g)

B. Reagenser

1. Krebs-Henseleit bikarbonatbuffer , pH 7,4 (KHBB)

Dann en 1 liters batch, inneholdende følgende salter:

Aerer i 60 min. med 95% 02/5# C02, undersøk pH (7,4 ± 0,1).

2. 0,32 Sukrose; 21,9 g sukrose, Q.S. til 200 ml.

3. En 0,1 mM stamoppløsning av L(-)-norepinefrin-bitartrat blir dannet i 0,01 N HC1. Dette blir anvendt for å fortynne den spesifikke aktiviteten av radiomerket NE.

4. Levo-[Ring-2,5,6-<3>H]-norepinefrin (40-50 Ci/mmol) blir oppnådd fra New England Nuclear.

Den ønskede sluttkonsentrasjonen av<3>h_ne i analysen er 50 nM. Fortynningsfaktoren er 0,8; KHBB inneholder derfor 62,5 nM [3H]-NE.

Tilsett til 100 ml KHBB:

"Beregn volum tilsatt fra den spesifikke aktiviteten til<3>H-NE. 5. For de fleste analysene blir 1 mM stamoppløsning av testforbindelsen dannet i egnet oppløsningsmiddel og fortynnet i serie, slik at sluttkonsentrasjonen i analysen varierer fra 2 x IO"<8>til 2 x 10~<5>M. Syv konsentrasjoner blir anvendt i hver analyse. Høyere eller lavere konsentrasjoner kan bli anvendt avhengig av potentheten til testforbindelsen.

C. Vevspreparering

Hann-Wistar-rotter blir avlivet, og hjernene blir hurtig fjernet. Enten blir hele hjernen minus cerebella eller hypothalamus veid og homogenisert i 9 volum iskald 0,32 M sukrose ved anvendelse av en Potter-Elvehjern homogenisator. Homogeniseringen bør bli utført med 4-5 opp og ned tak ved middels hastighet, for å minske synaptosom-lysering. Homogenatet blir sentrifugert ved 1000 g i 10 min. ved 0-4°C. Supernatanten (S^) blir dekantert og anvendt for opptakseksperimenter.

D. Analyse

Rørene blir inkubert ved 37° C under en 95% 02/55É C02-atmosfaere i 5 minutter. For hver analyse blir 3 rør inkubert med 20 jjI bærer ved 0°C i et isbad. Etter inkubasjonen blir alle rørene øyeblikkelig sentrifugert ved 4000 g i 10 minutter. Supernatantfluidet blir utluftet og pelletene løst opp ved tilsetning av 1 ml solubiliseringsmiddel (Triton X-100 + 50% EtOH, 1:4 v/v). Rørene blir hurtig ristet, dekantert i scintillasjonsbeholdere og tellet i 10 ml Liquiscint scintillasjonstellevæske. Aktivt opptak er forskjellen mellom cpm ved 37°C og 0°C. Prosent inhibisjon ved hver medikamentkonsentrasjon er gjennomsnittet av de tre bestemmelsene. Inhibitoriske konsentrasjonsverdier (IC5Q) blir oppnådd fra log-probit-analyse.

Resultater av denne analysen er presentert 1 tabell 3.

Effektive mengder av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, kan bli administrert til et individ ved en hvilken som helst av de forskjellige metodene, for eksempel oralt, som i kapsler eller tabletter, parenteralt i form av sterile oppløsninger eller suspensjoner, og i noen tilfeller intravenøst i form av sterile oppløsninger. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, som i seg selv er effektive, kan bli formulert og administrert i form av deres farma-søytisk akseptable addisjonssalter for oppnåelse av stabili-tet, hensiktsmessig krystallisering, øket solubilitet o.l.

Syrer som er nyttige for fremstilling av farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter ifølge oppfinnelsen, omfatter uorganiske syrer så som saltsyre, hydrobromsyre, svovelsyre, salpetersyre, fosforsyre og perklorsyre samt organiske syrer så som vinsyre, sitronsyre, eddiksyre, ravsyre, maleinsyre, fumarsyre og oksalsyrer.

De aktive forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli administrert oralt, for eksempel med et inert fortynningsmiddel eller med en spiselig bærer. De kan bli innesluttet i gelatinkapsler eller komprimert i tabletter. For oral, terapeutisk administrering kan forbindelsene bli inkorporert med eksipienter og anvendt i form av tabletter, trochéer, kapsler, eliksirer, suspensjoner, siruper, vafler, tyggegummi o.l. Disse preparatene bør inneholde minst 0,59é aktiv forbindelse, men kan bli variert, avhengig av den bestemte formen, og kan hensiktsmessig være mellom 4$ til omtrent 75$ av vekten av enheten. Mengden av forbindelse tilstede i en slik sammensetning er slik at en egnet dosering vil bli oppnådd. Foretrukne sammensetninger og preparater ifølge foreliggende oppfinnelse, blir fremstilt slik at en oral doseringsenhetsform inneholder mellom 1,0-300 mg aktiv forbindelse.

Tabletter, piller, kapsler, trochéer o.l. kan også inneholde følgende ingredienser: Et bindemiddel så som mikrokrystal-linsk cellulose, gummitragakant eller gelatin; en eksipient så som stivelse eller laktose, et desintegreringsmiddel så som alginsyre, Primogel^, maisstivelse o.l.; et smøremiddel så som magnesiumstearat eller Sterotex<®>; et glidemiddel så som kolloidal silisiumdioksyd; og et søtningsmiddel så som sukrose eller sakkarin eller et smaksmiddel så som peppermyn-te, metylsalisylat eller appelsinsmak, kan bli tilsatt. Når doseringsenhetsformen er en kapsel, kan den inneholde, i tillegg til materialene av ovennevnte type, en flytende bærer så som fettolje. Andre doseringsenhetsformer kan inneholde andre forskjellige materialer som modifiserer den fysiske formen av doseringsenhetene, f.eks. som belegg. Tabletter eller piller kan bli belagt med sukker, shellac eller andre enteriske beleggsmidler. En sirup kan inneholde, i tillegg til de aktive forbindelsene, sukrose som et søtningsmiddel, og visse konserveringsmidler, farvestoffer og smaksstoffer. Materialer anvendt for fremstilling av disse forskjellige sammensetningen, bør være farmasøytisk rene og ikke-toksiske i mengdene som blir anvendt.

For parenteral, terapeutisk administrering kan de aktive forbindelsene ifølge oppfinnelsen bli inkorporert inn i en oppløsning eller suspensjon. Disse preparatene bør inneholde minst 0,1$ av ovennevnte forbindelse, men kan bli variert mellom 0,5 og omtrent 30 vekt-# derav. Mengden av aktiv forbindelse i slike sammensetninger, er slik at en egnet dosering vil bli oppnådd. Foretrukne sammensetninger og preparater ifølge foreliggende oppfinnelse, blir fremstilt slik at en parenteral doseringsenhet inneholder mellom 0,5 til 100 mg aktiv forbindelse.

Oppløsningene eller suspensjonene kan også innbefatte følgende komponenter; et sterilt fortynningsmiddel så som vann for injeksjon, saltoppløsning, fikserte oljer, polyety-lenglykoler, glyserin, propylenglykol eller andre syntetiske oppløsningsmidler; antibakterielle midler så som benzylalko-hol eller metylparabener; antioksyderingsmidler så som askorbinsyre eller natriumbisulfitt; chelateringsmidler så som etylendiamintetraeddiksyre; buffere så som acetater, citrater eller fosfater og midler for å justere tonisiteten så som natriumklorid eller dekstrose, Det parenterale preparatet kan bli innesluttet i ampuller, engangssprøyter eller flerdosebeholdere fremstilt av glass eller plast.

Eksempler på forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen omfatter: N-( 3-f luropyridin-4-yl )-N-( 3-metyl-lE-indol-l-yl )-2-amino-etanol; N-(3-fluorpyridin-4-yl)-N-(lH-indol-l-yl)-2-aminoetanol; (4-(3-metyl-lH-indol-l-yl)-pyrido[3,4-b]-1,4-oksazin; N - (3-f luor-4-pyr idinyl )-N-( 5-benzyloksy-lH-indol-l-yl )-2-aminoetanol; 4-(5-benzyloksy-lH-indol-l-yl)-pyrido[3,4-b]-1,4-oksazin; l-(pyrido-[3,4-b]-1,4-oksazin-4-yl)-lH-indol-5-ol; l-(pyrido-[3,4-b]-1,4-oksazin-4-yl)-lE-indol-5-yl metylkarbamat;

N-(3-fluor-4-pyridinyl)-N-(lH-indol-l-yl)glycin etylester; N-(3-fluorpyridin-4-yl)-N-(lE-indol-l-yl)-2-aminoetanol; 4-(lH-indol-l-yl)-pyrido[3,4-b]-1,4-oksazin;

Følgende eksempler er gitt for å illustrere oppfinnelsen. Alle temperaturer er gitt i °C dersom ikke annet er angitt.

EKSEMPEL la

N-( 3- fluor- 4- pyridinyl)- 3- metyl- lH- indol- amin

Til 200 ml isopropanol ble det tilsatt 4-klor-3-fluorpyridin-hydroklorid (10 g) og 3-metyl-lH-indol-l-amin (5,9 g). Blandingen ble omrørt ved 90°C i fire timer, avkjølt; deretter helt inn i 500 ml isvann, pH justert til 10 med Na2C03~oppløsning, deretter ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann, deretter tørket (mettet NaCl, vannfri MgS04). Etter filtrering ble oppløsningsmidlet avdampet til en olje, som ble eluert på en silikagelkolonne med CH2CI2(DCM) deretter med eterrpetroleumeter (1:1) via flammekromatografi. De ønskede fraksjonene ble deretter kombinert og avdampet for tilveiebringing av 6,2 g av et fast stoff, 45°C. En prøve av dette materialet ble omkrystallisert fra isopropyl eter/heksaner (1:1) for å tilveiebringe et fast stoff, sm.pkt. 141-142°C.

Analyse:

Beregnet for C14<H>12FN3: 69,69#C 5,02#H 17,42#N Funnet: 69,52#C 5,01#H 17 ,575ÉN

EKSEMPEL lb

N-( 3- fluor- 4- pyridinyl)- N-( 3- metyl- lH- indol-1- yl ) glycin etylester

Til en suspensjon av NaE (60$ i olje, 1,48 g) i 10 ml dimetylformamid (DMF) ved isbadtemperatur, ble det dråpevis tilsatt en oppløsning av N-(3-fluor-4-pyridinyl)-3-metyl-lH-indol-l-amin (8,5 g) i 40 ml DMF. Da tilsetningen var fullført, ble blandingen omrørt i 15 minutter ved isbadtemperatur og deretter avkjølt til -20°C. Etylkloracetat (3,95 ml) ble dråpevis tilsatt i 10 ml DMF. Blandingen ble omrørt ved -20°C i en time. Blandingen ble deretter helt inn i vann og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann og tørket (mettet NaCl, vannfri MgS04). Etter filtrering ble oppløsningsmidlet avdampet for å tilveiebringe en olje (12,2 g) som ble eluert med 10$ etylacetat/DCM på en silikagelkolonne via HPLC. De ønskede fraksjoner ble avdampet for å tilveiebringe 6,9 g av et fast stoff, sm.pkt. 105-108°C.

Analyse:

Beregnet for C18<H>18<F>N302: 66,04#C 5,54#E 12,84#N Funnet: 66,00#C 5.53&B 12,81#N

EKSEMPEL lc

N-( 3- fluorpyridin- 4- yl)- N-( 3- metyl-lH- indol- l- yl )- 2- aminoetanol

Til N-(3-fluor-4-pyridinyl)-N-(3-metyl-lH-indol-l-yl)glycin etylester (5,0 g) i 100 ml tetrahydrofuran avkjølt til isbadtemperatur, ble det tilsatt litiumaluminiumhydrid (IM oppløsning i tetrahydrofuran, 30 ml) via sprøyte. Reaksjonen ble omrørt i 0,5 time. Blandingen ble stoppet med NH4CI og ekstrahert tre ganger med etylacetat. De organiske stoffene ble kombinert, vasket med mettet NaCl og tørket (MgSC^). Etter filtrering ble oppløsningsmidlet avdampet for å tilveiebringe et fast stoff (3,9 g) som ble eluert med 50% etyl acetat/diklormetan på en silikagelkolonne via høytrykks-vaeskekromatografi (HPLC). De ønskede fraksjonene ble avdampet for å tilveiebringe 3,7 g av et fast stoff, sm. pkt. 123-125°C.

Analyse:

Beregnet for C16<E>16<F>N30: 67,35#C 5,65#E 14 .735ÉN Funnet: 67,45#C 5, 67% E 14,72#N

EKSEMPEL ld

4-( 3- metyl- 1- H- indol- 1- y1)- pyrido f 3. 4- bl- 1. 4- oksazin

Til en suspensjon av NaH (0,34 g) i 5 ml dimetylformamid ble det tilsatt N-(3-fluor-pyridin-4-yl)-N-(3-metyl-lE-indol-l-yl )-2-aminoetanol (2,0 g) i 50 ml dimetylformamid. Reaksjonen ble oppvarmet til 70°C og omrørt i fire timer. Blandingen ble helt inn i vann og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann og tørket (mettet NaCl, MgS04). Etter filtrering ble oppløsningsmidlet avdampet for å tilveiebringe en olje (2,8 g), som ble eluert med 50$ etylacetat/diklormetan på en silika-gelkolonne via HPLC. De ønskede fraksjonene ble avdampet for å tilveiebringe 1,0 g av et fast stoff, sm.p. 139-141',C.

Analyse:

Beregnet for C16H15N30: 72,43#C 5,70#H 15,48#N Funnet: 72.3756C 5.745ÉH 15,76#N

EKSEMPEL 2a

N-( 3- fluor- 4- pyridinyl)- N-( 5- benzyloksy-lH- indol- l- yl)- 2- aminoetanol

Til en oppløsning av N-(3-fluor-4-pyridinyl)-N-(5-benzyloksy-lH-indol-l-yl)glycin etylester (18,7 g) i 100 ml tetrahydrofuran avkjølt til isbadtemperatur, ble det tilsatt dråpevis litiumaluminiumhydrid (89,16 ml) til den kalde oppløsningen. Oppløsningen ble omrørt i 0,5 timer, deretter stoppet med ammoniumklorid og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann og tørket (mettet NaCl, MgS04). Etter filtrering ble oppløsningsmidlet avdampet for å tilveiebringe et fast stoff (12,5 g) som ble eluert med 50$ etylacetat/diklormetan på en silikagelkolonne via HPLC. De ønskede fraksjonene ble avdampet for å tilveiebringe 9,65 g av et fast stoff, sm.p. 130-132°C.

Analyse;

Beregnet for C22<H>20<F>N3°2: 70.015ÉC 5 .345ÉH 11,13#N Funnet: 69,98#C 5.285&H 11,04#N

EKSEMPEL 2b

4-( 5- benzyloksy- lH- indol- l- yl)- pyrido- r3. 4- b1- 1, 4- oksazin Natriumhydrid (1,0 g) ble suspendert i dimetylformamid (10 ml) og denne blandingen ble avkjølt til isbadtemperatur. En oppløsning av N-(3-fluor-4-pyridinyl)-N-(5-benzyloksy-lH-indol-l-yl)-2-amminoetanol (8,25 g) i 100 ml dimetylformamid ble dråpevis tilsatt, og reaksjonsblandingen ble deretter oppvarmet til 70°C og omrørt i tre timer. Blandingen ble avkjølt, helt inn i vann og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann og tørket (mettet NaCl,

vannfri MgS04). Etter filtrering ble oppløsningsmidlet avdampet for å tilveiebringe et fast stoff (12,2 g) som ble eluert med 50$ etylacetat/diklormetan på en silikagelkolonne via HPLC. Ønskede fraksjoner ble avdampet for å tilveiebringe 7,4 g av et fast stoff, som ble triturert med eter for å tilveiebringe 4,04 g av et fast stoff, sm.pkt. 181-183°C.

Analyse:

Beregnet for C22H1gN302<:>73,93#C 5,36#H 11 ,755ÉN Funnet: 73,67#C 5,39#H 11,68£N

EKSEMPEL 3

1-( pyrido- r 3. 4- bl- 1. 4- oksazin- 4- vll- lH- indol- 5- ol 4-(5-benzyloksy-lH-indol-l-yl)-pyrido-[3,4-b]-1,4-oksazin (5,0 g) i 240 ml etanol ble tilsatt til en suspensjon av 10$ Pd/C (0,6 g) i 10 ml etanol. Denne blandingen ble hydrert på en Parr-apparatur i to timer ved 50°C. Blandingen ble deretter avkjølt, filtrert og filtratet avdampet for å tilveiebringe et fast stoff (3,5 g). Dette materialet ble eluert med 5$ metanol/diklormetan på en silikagelkolonne via HPLC. De ønskede fraksjonene ble avdampet for å tilveiebringe 2,7 g av et fast stoff. Av dette materialet ble 0,9 omkrystallisert fra acetonitril for å tilveiebringe 0,62 g av et fast stoff, sm.pkt. 221-222°C.

Analyse:

Beregnet for C15<H>13<N>302<:>67,40#C 4,90#H 15,725ÉN Funnet: 67,38#C 4,85#H 15,68#N

EKSEMPEL 4

1-( pyrido- f 3. 4- bl- 1. 4- oksazin- 4- yl)- lH-indol- 5- yl metylkarbamat

Kaliumkarbonat (1,3 g) ble tilsatt til en oppløsning av 1-(pyrido-[3,4-b]-l,4-oksazin-4-yl)-lH-indol-5-ol (2,0 g) i 100 ml tetrahydrofuran. Etter omrøring ved romtemperatur i 10 minutter, ble metylisocyanat (0,46 g) dråpevis tilsatt. Reaksjonen ble fortsatt i 1 time ved romtemperatur. Blandingen ble deretter filtrert, og filtratet avdampet for å tilveiebringe et fast stoff (2,8 g). Dette materialet ble eluert med 5$ metanol/diklormetan på en silikagelkolonne via HPLC. De ønskede fraksjonene ble avdampet for å tilveiebringe 3,2 av et fast stoff som ble omkrystallisert fra acetonitril for å tilveiebringe 1,5 g av et fast stoff, sm.pkt. 196-198°C.

Analyse:

Beregnet for C17<H>16<N>403: 62,95#C 4.975ÉH 17.285ÉN Funnet: 62,95#C 4,915ÉH 17 .3056N

EKSEMPEL 5a

N-( 3- fluor- 4- pyridinyl)- N-( lH- indol- l- yl) glycin etylester

Til en suspensjon av natriumhydrid (3,6 g) i 20 ml dimetylformamid ved 0°C ble det tilsatt en oppløsning av N-(3-fluor-4-pyridinyl )-lH-indol-l-amin (19 g) i 120 ml dimetylformamid i løpet v 15 minutter, og den resulterende blandingen ble omrørt ved 0'C i tyve minutter. Etter avkjøling av blandingen til -20°C, ble en oppløsning av etylkloracetat (9,6 ml) i 25 ml dimetylformamid tilsatt i løpet av femten minutter, og den resulterende blandingen ble omrørt ved -20°C i en time.

Blandingen ble helt inn i 400 ml vann, omrørt i fem minutter, deretter ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann og mettet NaCl-oppløsning, deretter tørket over vannfri MgS04.

Etter filtrering ble oppløsningsmidlet avdampet til en olje (26 g) som ble eluert på en silikagelkolonne med 1056 etylacetat/diklormetan via HPLC. De ønskede fraksjonene ble kombinert, deretter avdampet for å tilveiebringe 13,3 g N-(3-fluor-4-pyridinyl )-N-(lH-indol-l-yl)glycin etylester som et fast stoff, sm.pkt. 86-7°C.

Analyse:

Beregnet for C17<H>16FN302: 65.1656C 5,155éH 13.4156N Funnet: 65,00#C 5,145éH 13,19#N

EKSEMPEL 5b

N-( 3- fluorpyrldin- 4- yl)- N ( lH- lndol- l- yl)- 2- amlnoetanol

Til en oppløsning av litiumaluminiumhydrid (IM oppløsning, 70 ml) avkjølt til 0°C, ble det tilsatt en oppløsning av N-(3-fluor-4-pyridinyl)-N-(lH-indol-l-yl)glycin etylester (11,4 g) i 125 ml tetrahydrofuran i tredve minutter. Etter omrøring ved 0°C i én time, ble en oppløsning av ammoniumklorid tilsatt, etterfulgt av 300 ml etyleter. Blandingen ble filtrert og filtratet avdampet til et fast stoff 10 g; som ble eluert på en silikagelkolonne med etylacetat/diklormetan (1:1) via HPLC. De ønskede fraksjonene ble kombinert, deretter avdampet for å tilveiebringe 6,1 g N-(3-fluorpyridin--4-yl)-N-(lH-indol-l-yl)-2-aminoetanol, som et fast stoff, sm.pkt. 133-5°C.

Analyse:

Beregnet for C15<H>14FN30: 66,41#C 5,20#H 15 .495&N Funnet: 66,33#C 5,22#H 15,41%N

EKSEMPEL 5c

4-( lH- indol- lvl)- pyridof3. 4- bl- 1. 4- oksazin

Til en suspensjon av natriumhydrid (0,8 g) i 10 ml dimetylformamid, ble det tilsatt en oppløsning av N-(3-fluorpyridin-4-yl )-N-(lH-indol-l-yl)-2-aminoetanol (4,8 g) i 100 ml dimetylformamid. Etter omrøring ved 70°C i fire timer, ble blandingen helt inn i 300 ml isvann, omrørt i fem minutter, deretter ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann, deretter mettet NaCl-oppløsning og deretter tørket over vannfri MgS04.

Etter filtrering ble oppløsningsmidlet avdampet til en olje som ble eluert på en silikagelkolonne med etylacetat/- diklormetan (1:2) via HPLC. De ønskede fraksjonene ble kombinert og deretter avdampet til en tykk olje, som stivnet ved henstand for tilveiebringing av 3,4 g 4-(lH-indol-l-yl)-pyrido[3,4-b]-1,4-oksazin, som et fast stoff, sm.pkt. 108-110°C.

Analyse:

Beregnet for C15H13<N>30: 71,70#C 5,215éH 16.725ÉN Funnet: 71,38#C 4,91#H 16 .525&N

Claims

1. Forbindelse med formelen I

karakterisert vedat Ri er hydrogen, R2er hydrogen eller laverealkyl; og R3er hydrogen, hydroksy, benzyloksy eller

der R4er hydrogen og R5 er laverealkyl, hvor laverealkyl betyr en lineær eller forgrenet alkylgruppe med fra 1 til 7 karbonatomer, eksempelvis metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl og lineær og forgrenet pentyl, heksyl og heptyl.

2. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisertved at den er l-(pyrido[3,4-b]-l,4-oksazin-4-yl)-lH-indol-5-yl metylkarbamat.

3. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisertved at den er 4-(3-metyl-lH-indol-l-yl )-pyrido[3,4-b]-1,4-oksazin.

4. Farmasøytisk sammensetning,karakterisertved at den omfatter en forbindelse ifølge krav 1, som aktivt ingrediens og en egnet bærer derfor.

5. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1, for fremstilling av et medikament som har hukommelses-feilfunksjonslindrende og/eller antidepressiv aktivitet.

6- Forbindelse med formel II

karakterisert vedat Ri er hydrogen eller laverealkyl; R2er hydrogen eller laverealkyl, R3er hydrogen, laverealkyl, halogen, nitro, amino, hydroksy, laverealkoksy, benzyloksy eller

der R4er hydrogen eller laverealkyl og R5 er laverealkyl, X er halogen og R7er (CH2)2°H, CH2C02R8eller

der R8er hydrogen eller laverealkyl eller et farmasøytisk akseptabelt addisjonssalt derav.