NO300209B1 - Analogifremgangsmåte for fremstilling av sidekjede-homologe vitamin-D-derivater - Google Patents

Analogifremgangsmåte for fremstilling av sidekjede-homologe vitamin-D-derivater Download PDF

Info

Publication number
NO300209B1
NO300209B1 NO913913A NO913913A NO300209B1 NO 300209 B1 NO300209 B1 NO 300209B1 NO 913913 A NO913913 A NO 913913A NO 913913 A NO913913 A NO 913913A NO 300209 B1 NO300209 B1 NO 300209B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
denotes
hydroxy
compound
formula
bond
Prior art date
Application number
NO913913A
Other languages
English (en)
Other versions
NO913913L (no
NO913913D0 (no
Inventor
Guenter Neef
Gerald Kirsch
Andreas Steinmeyer
Katica Schwarz
Matthias Braeutigam
Ruth Thieroff-Ekerdt
Petra Rach
Original Assignee
Schering Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DE4003854A external-priority patent/DE4003854A1/de
Priority claimed from DE19904034730 external-priority patent/DE4034730A1/de
Application filed by Schering Ag filed Critical Schering Ag
Publication of NO913913D0 publication Critical patent/NO913913D0/no
Publication of NO913913L publication Critical patent/NO913913L/no
Publication of NO300209B1 publication Critical patent/NO300209B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C401/00—Irradiation products of cholesterol or its derivatives; Vitamin D derivatives, 9,10-seco cyclopenta[a]phenanthrene or analogues obtained by chemical preparation without irradiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Lubricants (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en analogifremgangsmåte for fremstilling av sidekjede-homologe vitamin-D-derivater med formel I
hvori
R<1> betegner et hydrogenatom, en hydroksy- eller
acyloksygruppe med 1 til 9 karbonatomer,
R<2> betegner et hydrogenatom eller en acylgruppe med 1
til 9 karbonatomer,
R<3> eller R4 betegner en hydroksy- eller acyloksygruppe med 1
til 9 karbonatomer og den andre substituenten betegner et hydrogenatom, eller R3 og R4 betegner sammen et oksygenatom,
R<5> og R6 betegner uavhengig av hverandre en lineær eller for-grenet alkylrest med inntil 5 karbonatomer, en tri-fluormetylgruppe eller danner med det tertiære karbonatom sammen en mettet, umettet eller aromatisk karbosyklisk, eller ved inkludering ved 1 eller 2 N-, 0- eller S-atomer, en heterosyklisk 3-, 4-, 5- eller 6-leddet ring,
B og D betegner enten et hydrogenatom eller sammen en andre
binding (E-konfigurert dobbeltbinding) og
A betegner enten en direkte binding mellom karbon-at omene 20 og 22 og
X betegner en alkylenoksyrest -(CH2)nO- hvor n = 1 til 3;
eller
A betegner en metylenbro (-CH2-) mellom karbonatomene
20 og 22 og
X betegner en alkylenrest -(CH2)n- eller en alkylenoksyrest -(CH2)n0- hvor n = 1 til 3;
eller;
når A betegner en direkte binding og B og D sammen be-
tegner en andre binding, betegner
en av restene kjennetegnet ved at en forbindelse med generell formel IV
hvori
R<1>' betegner et hydrogenatom eller en beskyttet hydroksygruppe og
R2 betegner en hydroksybeskyttelsesgruppe og
A, X, R<5> og R6 har betegnelsene angitt for formel I,
om ønskelig etter selektiv hydrering av dobbeltbindingen i sidekjeden, omdannes til en forbindelse med generell formel IVa
hvori R<1>', R<2>', A, X, R<5> og R6 har betegnelsen angitt i formel IV og om ønskelig, et reduksjon av karbonyl funksjonen og eventuelt etter atskillelse av blandingen av de ved reduksjonen dannede epimere hydroksyforbindelser med generell formel Illa og Illb
hvori
R<1>', R<2>', A, X, R<5> og R6 har betegnelsene angitt i formel IV, og B og D har betegnelsene angitt i formel I, ved bestråling med ultrafiolett lys under invertering av stereoisomerien ved 5,6-dobbeltbindingen, omdannes til en forbindelse med generell formel II
hvori
R<1>', R<2>', A, B, D, X, R<5> og R6 har betegnelsene angitt i formel Illa/IIIb,
og denne forbindelse deretter, ved avspalting av foreliggende hydroksybeskyttelsesgrupper og eventuelt ved delvis eller fullstendig forestring av hydroksygruppene, overføres til en forbindelse med generell formel I.
De for restene R<1>, R2, og innen restene R<3> eller R<4>, mulige acyloksygrupper, henholdsvis acylgrupper, er spesielt avledet fra mettede karboksylsyrer eller også benzosyre. Andre egnede acylrester i R<1>, R2, R3 og R<4> omfatter sykliske, asykliske, karbosykliske eller heterosykliske rester, hvilke alle eventuelt også kan være umettet. De foretrukne rester er avledet fra Cx- til C9-, fortrinnsvis C2- til C5-alkankarboksyl-syrer, som f.eks. eddiksyre, propionsyre og smørsyre.
Når R<5> og R6 sammen med det tertiære karbonatom danner en mettet karbosyklisk ring, kommer spesielt en syklopropylring eller sykloheksylring i betraktning. Som alkyl-grupper for R<5> og R<6> kommer spesielt slike med 1 til 5 karbonatomer i betraktning, hvilke kan være rettkjedede eller for-grenede. Eksempelvis nevnes metyl-, etyl-, propyl-, såvel som
t-butylgruppen.
Foretrukne forbindelser fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse er sidekjede-homologe vitamin-D-derivater med generell formel I, hvori
R<1>, R<3> eller R<4> betegner en hydroksygruppe eller,
R<5> og R<6> betegner en metylgruppe eller betegner sammen med det tertiære karbonatom en syklopropylring,
R<2> betegner et hydrogenatom og n er 1 eller 2.
Mellom karbonatomene 22 og 23 (når A betegner en direkte binding) eller mellom karbonatomene 23 og 24 (når A betegner en metylengruppe) befinner det seg fortrinnsvis en dobbeltbinding. Spesielt foretrukne er forbindelsene
24-(1(R)-hydroksy-4-metylpentyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R)-diol,
24-(1(S)-hydroksy-4-metylpentyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R)-diol,
24-(1(R)-hydroksy-3-metylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R)-diol,
24-(1(S)-hydroksy-3-metylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R)-diol,
24-(l(R)-hydroksy-3-metylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19)trien-1(S),3(R)-diol,
24-(1(S)-hydroksy-3-metylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19)trien-1(S),3(R)-diol,
24-(l(R)-hydroksy-3-isopropoksypropyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R)-diol,
24-(l(S)-hydroksy-3-isopropoksypropyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R)-diol,
24-isopropoksymetyl-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-l(S),3(R),24(R)-triol,
24-isopropoksymetyl-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-1(S),3(R),24(S)-triol,
24-(2-isopropoksyetyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-1(S),3(R),24(R)-triol, 2 4-(2-i sopropoksyety1)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),22E-tetraen-l(S),3(R),24(S)-triol,
26,27-syklo-24a,24b-dihomo-9,10-secocholesta-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R),24a(R)-triol,
26,27-syklo-24a,24b-dihomo-9,10-secocholesta-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-1(S),3(R),24a(S)-triol,
De naturlige vitaminer D2 og D3 (se generell formel IV) er i seg selv biologisk inaktive og omdannes først etter hydroksylering i 25-posisjonen i leveren, henholdsvis i 1-posisjonen i nyrene, til deres biologisk aktive metabolit-ter. Virkningen av vitamin D2 og D3 består i stabiliseringen av plasma-Ca<++->speilet og plasma-fosfatspeilet: de motvirker en senkning av plasma-Ca<++->speilet.
Ergocalciferol: R<a>=R<b>=H, R<C>=CH3, Vitamin D2
dobbeltbinding C 22/23
Cholecalciferol: Ra=R<b>=R<c>=H Vitamin D3
25-hydroksycholecalciferol: R<a>=R<c>=H, R<b>=0H la-hydroksycholecalciferol: R<a>=0H, R<b>=Rc=H la,25-dihydroksycholecalciferol: R<a>=R<b>=0H, R<C>=H Calcitriol
Foruten deres markerte virkning på kalsiumstoff-skiftet og fosfatstoffskiftet besitter vitamin D2 og D3, og deres syntetiske derivater, også proliferasjonshemmende og celledifferensierende virkninger (H.F. De Luca, The Metabolism and Function of Vitamin D in Biochemistry of Steroid Hormones, Hrgs. H.L.J. Makin, 2nd Edition, Blackwell Scientific Publi-cations 1984, S. 71-116).
Ved anvendelse av vitamin D kan det imidlertid også forekomme overdoseringsfenomener (hypercalcemia).
la-cholecalciferol hydroksylert i 24-stilling er allerede beskrevet i DE-AS-25 26 981; denne forbindelse har en lavere toksisitet enn det tilsvarende ikke-hydroksylerte la-cholecalciferol. De hydroksylerte forbindelser oppviser en selektiv aktivering av den intestinale kalsiumabsorpsjon og en svakere knokkelabsorpsjonsvirkning enn la-cholecalciferol. Den i den internasjonale patentsøknad WO 87/00834 beskrevne 24-hydroksy-vitamin-D-analog kan anvendes til behandling av for-styrrelser hos mennesker og dyr som stammer fra abnorm celle-proliferasjon og/eller celledifferensiering.
For forskjellige 1,25-dihydroksy-homo-vitamin-D-derivater er en dissosiasjon med hensyn til egenskapene knokkelabsorpsjonsvirkning og HL-60-celledifferensiering allerede kort nevnt av De Luca. Knokkelabsorpsjonsvirkningen in vltro er derved et direkte mål for kalsiummobilisering in vivo.
Det er nå funnet at de sidekjede-homologe vitamin-D-derivater med generell formel I fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse overraskende oppviser et gunstigere virknings-spektrum sammenlignet med vitamin-D-derivatet calcitriol (la,25-dihydroksycholecalciferol). Mens effekten på kalsium-stoffskiftet og fosfatstoffskiftet betydelig svekkes (reduksjon av bivirkningene ved overdosering eller nødvendig høyere
dosering), forblir de proliferasjonshemmende og celledifferensierende virkninger tilnærmet opprettholdt (dissosiasjon).
Vitamin D-aktiviteten av forbindelsene fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse bestemmes ved hjelp av calcitriol-reseptortesten. Testen utføres ved anvendelse av et
spesifikt reseptorprotein fra tarmen hos rakittiske høner. Reseptorholdig bindingsprotein inkuberes med <3>H-calcitriol (0,5 ng/ml) i et reaksjonsvolum på 0,575 ml,i fravær og i nærvær av prøvematerialet, i en time i et lite testrør. For atskillelse av fritt og reseptorbundet calcitriol utføres en
adsorbsjon med aktivt karbon-dekstran. Dertil tilføres 200 ul av en aktivt kull-dekstransuspensjon til hvert testrør og det inkuberes ved 22 "C i 30 min. Deretter sentrifugeres prøvene ved 1500 x g i 10 min ved 4 °C. Supernatanten dekanteres og telles etter ca. en times ekvilibrering i "Atom-Light" i en (3-
teller.
De erholdte kompetitive kurver med forskjellige konsentrasjoner av prøvemateriale, såvel som refereranse-materiale, (umerket calcitriol) ved konstant konsentrasjon av referansematerialet (<3>H-calcitriol), ble sammenlignet med hverandre og en kompetitiv faktor (KF) ble bestemt.
Denne faktor er definert som det forholdstall mellom konsentrasjonen av det respektive prøvemateriale og referansematerialet som fordres for 50 % kompetitivitet:
Etter dette besitter
24-(l-hydroksy-3-metylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R)-diol (forbindelse A) en KF-verdi på 2,0 og
24-(l-hydroksy-3-metylbutyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(S)-diol (forbindelse B) en KF-verdi på 3,6.
For å bestemme den antiproliferative styrke av forbindelsene fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse utføres den etterfølgende beskrevne test med forbindelsene A og B som alternerende prøvematerialer: Keratinocytter fra nyfødte mus ble fremstilt og dyrket ved modifisering av metoden ifølge Yuspa, S. und Harris, CC, "Altered differentiation of mouse epidermal cells treated with retinyl acetat in vitro", Exp. Cell Res. 86:95-105, 1974.
Nyfødte NMRI-mus av begge kjønn ble avlivet ved dekapitering, huden ble dissekert fra, vasket i en anti-biotika-antimykotika-løsning og inkubert med den dermale side nederst i dispase II-løsning (1,2 U/ml i vevkulturmedium M199 + 25 mmol/1 HEPES + 15 % kalvefosterserum (FCS) + 50 U/ml penicillin/streptomycin (P/S) (prepareringsmedium, PM) ved 4 °C over natten. Epidermis ble fjernet og ved behandling med trypsin ble det fremstilt en éncellesuspensjon. Etter sentri-fugering ble cellebunnfallet resuspendert, antall levende, små, runde celler ble bestemt etter farging med trypanblått og cellene ble inokulert i en tykkelse av 4 x IO<5> celler/cm<2> i primaria-24 perforerte plater i vevkulturmedium (M199 + 15 % FCS + 50 U/ml P/S). Etter inkubasjon i 24 timer ved 37 °C ble
i cellene med fosfatbufret saltløsning (PBS) vasket og inkubert i ytterligere 24 timer i serumfritt vevkulturmedium (Ml99 + 50 U/ml P/S + 0,5 % etanol) med og uten testforbindelser. Deretter ble det tilsatt 0,4 uCi/50 ul <3>H-metyltymidin (40 Ci/mmol). Etter 4 timer ble mediet avsuget og reaksjonen ble stanset ved tilsetning av 500 ul iskald 10 % trikloreddik-syre (TCA). Cellene ble vasket med TCA og PBS, lysert ved inkubering i en proteinase K-løsning (10 mmol/1 tris-HCl,
10 mmol/1 EDTA, 10 mmol/1 NaCl, 0,2 % triton-X 100, pH 8,0,
50 ug/ml proteinkinase K), og lysatet ble klaret ved sentri-fugering. I supernatanten ble radioaktiviteten bestemt scintillasjonsfotometrisk og, etter spesifikk farging av DNA med diamidinofenylindol (DAPI), ble DNA-konsentrasjonen bestemt fluorescensfotometrisk.
Avhengig av dosen hemmer således både calcitriol og forbindelsene A og B inkorporeringen av <3>H-tymidin i DNA med de følgende IC50<->verdier:
De differensieringsstimulerende virkninger av både calcitriol og forbindelsene fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse 26,27-syklo-24a,24b-dihomo-9,10-secocholesta-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R),24a(R)-triol (forbindelse C) og 26,27-syklo-24a,24b-dihomo-9,10-secocholesta-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R),24a(S)-triol (forbindelse D) er praktisk talt ikke forskjellige.
Det er kjent i litteraturen (Mangelsdorf, D.J. et al, i J. Cell. Biol. 98: 391-398 (1984)), at behandlingen av humane leukemiceller (promyelozyttcellelinje HL 60) in vitro med calcitriol induserer differensieringen av cellene til makrofager.
For kvantifisering av den differensieringsstimulerende virkning av calcitriolanaloger ble den etterfølgende beskrevne test utført:
HL 60-celler ble dyrket i vevkulturmedium (RPMI -
10 % kalvefosterserum) ved 37 °C i en atmosfære av 5 % C02 i luft.
For testing av forbindelsene ble cellene frasentri-fugert og 2,8 x 10<5> celler/ml ble overført i et vevkulturmedium uten innhold av fenolrødt. Testforbindelsene ble løst i etanol og fortynnet til den ønskede konsentrasjon med vevkulturmedium uten innhold av fenolrødt. De forskjellige fortynnede løs-ninger ble blandet med cellesuspensjonen i et forhold på 1:10 og porsjoner å 100 ul av cellesuspensjonen tilsatt forbindelse ble pipettert over i fordypninger på en 96 brønners plate. Som kontroll ble det tilsatt en analog cellesuspensjon med kun løsningsmiddel.
Etter inkubasjon i 96 timer ved 37 °C i 5 % C02 i luft, ble det til hver cellesuspensjon i brønnene på den 96 brønners platen pipettert 100 pl av en NBT-TPA-løsning (nitro-blå tetrazolium (NBT), sluttkonsentrasjon i preparatet 1 mg/ml, tetradecanoylforbolmyristat-13-acetat (TPA), sluttkonsentrasjon i preparatet 2 x IO"<7> mol/l).
Ved inkubasjon i 2 timer ved 37 °C og 5 % C02 i luft ble, som følge av den intracellulære oksygenradikalfrigivelse, stimulert gjennom TPA i cellene differensiert til makrofager, NTB redusert til uløselig formazan.
For å avslutte reaksjonen ble brønnene på den 96 brønners plate avsuget og de vedhengende celler ble fiksert ved tilsetning av metanol og tørket etter fiksering.
For å oppløse de dannede intracellulære formazan-krystaller ble det til hver brønn pipettert 100 ul kalium-hydroksid (2 val/l) og 100 ul dimetylsulfoksid, etterfulgt av behandling med ultralyd i et minutt. Konsentrasjonen av formazan ble målt spektrofotometrisk ved 650 nm.
Som mål for differensieringsinduksjonen av HL 60-cellene til makrofager gjelder konsentrasjonen av dannet formazan. Den relative aktivitet av testforbindelsen er gitt fra kvotienten ED50 testforbindelse/ED50 calcitriol.
Ut fra dette har calcitriol, forbindelse C og forbindelse D ED50-verdiene 1,8 x IO"<9> mol/l, 2,2 x IO'<9>, henholdsvis 2,5 x IO"<9> mol/l.
På grunn av den reduserte risiko for hypercalcemia er forbindelsene fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse spesielt egnet til fremstilling av legemidler for behandling av sykdommer, hvilke er kjennetegnet ved en hyperproliferasjon, f.eks. hyperproliferative sykdommer i huden (psoriasis) og maligne tumorer (leukemi, tykktarmskreft, brystkreft). I en spesielt foretrukket utførelsesform påvises calcitriolresep-torer i målorganet før behandlingen.
Foreliggende oppfinnelse angår dessuten anvendelse av forbindelsene ifølge formel I til fremstilling av legemidler.
Fremstillingen av de sidekjede-homologe vitamin-D-derivater av formel I utføres ifølge foreliggende oppfinnelse ved at en forbindelse med generell formel IV
hvori
R<1>' betegner et hydrogenatom eller en beskyttet hydroksygruppe og
R2 betegner en hydroksybeskyttelsesgruppe og
A, X, R<5> og R6 har betegnelsene angitt for formel I,
om ønskelig etter selektiv hydrering av dobbeltbindingen i sidekjeden, omdannes til en forbindelse med generell formel IVa
hvori R<1>', R<2>', A, X, R<5> og R6 har betegnelsen angitt i formel IV og om ønskelig, et reduksjon av karbonylfunksjonen og eventuelt etter atskillelse av blandingen av de ved reduksjonen dannede epimere hydroksyforbindelser med generell formel Illa og Illb
hvori
R<1>, R<2>, A, X, R<5> og R6 har betegnelsene angitt i formel IV, og B og D har betegnelsene angitt i formel I,
ved bestråling med ultrafiolett lys under invertering av stereoisomerien ved 5,6-dobbeltbindingen, omdannes til en forbindelse med generell formel II
hvori
R<1>', R<2>', A, B, D, X, R<5> og R6 har betegnelsene angitt i formel Illa/IIIb,
og denne forbindelse deretter, ved avspalting av foreliggende hydroksybeskyttelsesgrupper og eventuelt ved delvis eller fullstendig forestring av hydroksygruppene, overføres til en forbindelse med generell formel I.
Reduksjon av sidekjede-karbonylfunksjonene i forbindelse med generell formel IV utføres fortrinnsvis med cerium-(III)klorid-natriumborhydrid i et polart løsningsmiddel. Ved reduksjonen dannes både R-hydroksyisomeren og S-hydroksyisomeren med generell formel Illa, henholdsvis Illb. Disse begge isomerer kan atskilles kromatografisk.
Om ønskelig kan dobbeltbindingen i sidekjeden selek-tivt hydreres før reduksjon av karbonylfunksjonen. Som hydrer-ingsmiddel er blant annet egnet litium-tri-tertiær-butoksy-aluminiumhydrid i et polart løsningsmiddel.
Den etterfølgende omdannelse av en forbindelse med generell formel Illa/IIIb til en forbindelse med generell formel II, utføres f.eks. ved bestråling med ultrafiolett lys i nærvær av en såkalt "triplett sensibilisator". Til dette anvendes innen rammen for foreliggende oppfinnelse anthracen. Ved spaltning av 5,6-dobbeltbindingens pi-binding, rotasjon av A-ringen 180 <0> rundt 5,6-enkeltbindingen og reetablering av 5,6-dobbeltbindingen, blir stereoisomerien ved 5,6-dobbeltbindingen invertert.
I forbindelse med dette avspaltes foreliggende hydroksybeskyttelsesgrupper, fortrinnsvis ved anvendelse av tetra-n-butyl-ammoniumfluorid, og om ønskelig forestres de frie hydroksygrupper delvis eller fullstendig med det tilsvarende karboksylsyrehalogenid (halogenid = klorid, bromid) eller karboksylsyreanhydrid, etter vanlige fremgangsmåter.
Fremstilling av utqanqsmaterialer
1. 1(S),3(R)-bis-(tert.-butylmetylsilyloksy)-20(S)-formyl-9,10-secopregna-5E,7E,10(19)-trien 1: Fremstillingen av 1. utføres etter M.J. Calverley, tetrahydron 43, 4609 (1987); se også internasjonal patent-søknad WO 87/00834. I denne publikasjon er også fremstillingen av utgangsforbindelsen, hvori R<1>' er et hydrogenatom, beskrevet . 2. 1(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-20(R)-metyl-9,10-secopregna-5E,7E,10(19)-trien-21-carbalde-hyd 2.
Aldehydet 2 fremstilles ifølge en ny fremgangsmåte. a. Til en suspensjon av 1,8 g natriumhydrid (80 % i olje) i 70 ml absolutt THF dryppes ved 25 "C en løs-ning av 15,57 g dietylfosfonoetoksyeddiksyreetylester (fremstilt etter W. Grell und H. Machleidt, Liebigs Ann. Chem. 699, 53 (1966)) i 200 ml THF. Etter til-setningen omrøres ytterligere i 90 min ved 60 °C. Deretter avkjøles til 25 °C og det tilsettes dråpevis en løsning av 6,2 g forbindelse 1 i 70 ml THF. Det omrøres i 2 timer under tilbakeløpskjøling, den av-kjølte reaksjonsløsning helles deretter ned i vann og ekstraheres med etylacetat. Etter tørking (Na2S04) og inndamping kromatograferes det erholdte råprodukt på kiselgel med heksan/etylacetat. Hovedfraksjonen gir 5,2 g 1(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-23-(etoksy-9,10-secochola-5E,7E,10(19)-tetraen-24-syre-etylester i form av en oljeaktig blanding av C-22-dobbeltbindingsi someren.
b. 5,2 g av produktet erholdt under punkt a. løses i 120 ml toluen og tilsettes ved 0 °C langsomt 20 ml
av en 20 % løsning av diisobutylaluminiumhydrid i toluen. Etter 30 min ved 0 °C helles reaksjonsløs-ningen forsiktig over i NH4Cl-løsning og ekstraheres med etylacetat. Etter vanlig opparbeidelse erholdes 4,88 g 1(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-23-etoksy-9,10-secochola-5E, 7E, 10( 19), 22-tetraen-24-ol i form av en fargeløs, oljeaktig isomerblanding som anvendes i de etterfølgende trinn uten ytterligere rensning. c. Forbindelsen fremstilt under punkt b. (4,88 g) om-røres i en blanding av 55 ml diklormetan og 55 ml 70 % vandig eddiksyre i 4 timer ved romtemperatur.
Blandingen nøytraliseres ved tilsetning av NH3-løs-ning og ekstraheres med diklormetan. Råproduktet kromatograferes på kiselgel med heksan/etylacetat. På denne måte erholdes 2,02 g l(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-24-hydroksy-9,10-secochola-5E,7E,10(19)-trien-23-on 5 i form av en fargeløs olje.
<1>H-NMR (CDC13): Y = 0,01 ppm (s, 12H, Si-CH3), 0,52 (s,3H,H-18), 0,81 og 0,84 (s,9H-Si-t-butyl), 0,90 (d,J=7Hz,3H,H-21), 3,09 (t,J=5Hz,1H,OH), 4,10 (dd,lH,H-24), 4,16 (m,lH,H-3), 4,21 (dd,1H,H-24), 4,39 (m,lH,H-l), 4,88, 4,93 (s,je 1H,H-19), 5,77, 6,39 (d,J=HHz, lH,H-6,H-7). d. Produktet erholdt under punkt c. (2,02 g) oppløses i 25 ml metanol og 25 ml THF og tilsettes 300 mg natriumborhydrid ved 0 °C. Det omrøres i 1,5 time ved 0 °C, reaksjonsblandingen helles deretter over i NH4Cl-løsning og ekstraheres med etylacetat. Det erholdes 1,75 g l(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyl-oksy ) -9, 10-secochola-5E, 7E,10(19)-trien-23,24-diol 6. 1 form av fargeløs, oljeaktig blanding av 23-epimerene, som tilsettes som sådan i den etterfølg-ende reaksjon.
e. 1,75 g av det erholdte produkt under punkt d. opp-løses i 40 ml toluen og 1,23 g blytetraacetat tilsettes porsjonsvis under avkjøling med isvann. Det omrøres i 30 min, tilsettes ytterligere 1,0 g
Pb(0Ac)4 og omrøres i ytterligere 15 min ved + 5 til + 10 °C.
Blandingen tilsettes NaHC03-løsning, den dannede suspensjon filtreres over celitt og filtratet ekstraheres med etylacetat. Råproduktet kromatograferes på kiselgel med heksan/etylacetat. Etter krystallisering av hovedfraksjonen fra etanol erholdes 560 mg 1(S),-3 (R) -bis- (tert. -butyldimetylsilyloksy) -20 (R) -metyl-9,10-secopregna-5E,7E, 10( 19)-trien-21-karbaldehyd med smeltepunkt 101-104 °C. Omsetningen av aldehydet 1, henholdsvis 2, med et fosforan med formel
gir forbindelser med generell formel IV (Wittig-reaksjon).
Fremstilling av de anvendte fosforylider:
1. Isobutylkarbonylmetylentrifenylfosforan a. Brommety1isobutylketon 50 ml isobutyImetylketon i 240 ml metanol tilsettes 20 ml brom ved 0 °C og omrøres i 1,5 timer ved 10 °C.
Deretter tilsettes 360 ml vann og det omrøres ytterligere i 16 timer ved romtemperatur.
Reaksjonsblandingen tilsettes mettet koksaltoppløs-ning, den utskilte organiske fase frasepareres og den vandige fase ekstraheres med etere. De sammenslåtte organiske faser vaskes med 10 % Na2C03-løsning og tørkes over Na2S04. Etter filtrering avsuges løs-ningsmidlet i vannstrålevakuum og bunnfallet destil-leres. Hovedfraksjonen inneholder 53,7 g brommetyl-isobutylketon med Kp<15>'<20> 67-69 <6>C.
b. Isobutylkarbonylmetyltrifenylfosfoniumbromid Bronunetylisobutylketon (53,6 g) og tri f enylf osf in (78,5 g) blandes grundig i en 500 ml rundkolbe og etter at den innledende sterke reaksjonsvarmeutvik-ling har opphørt hensettes blandingen i 12 timer under nitrogenatmosfære ved romtemperatur. Deretter ekstraheres den faste reaksjonsmasse med 330 ml metylenklorid og oppvarmes i 30 min under tilbake-løpskjøling. Etter tilsetning av 500 ml eter avkjøles til romtemperatur og produktet isoleres ved filtrering. Etter tørking erholdes 111,7 g av fosfoniumsaltet med smeltepunkt 244-245 °C. c. Isobutylkarbonylmetylentrifenylfosforan 111,6 g av fosfoniumbromidet erholdt under punkt b. tilsettes suksessivt 1500 ml metylenklorid og 1500 ml 2N-NaOH og omrøres i 30 min ved romtemperatur. Den organiske fase adskilles, vaskes med vann og tørkes over Na2S04. Det faste bunnfall erholdt etter inndamping omkrystalliseres fra tertiært butylmetyleter og gir 72,2 g av ylidet med smeltepunkt 120-121 °C. 2. Isoamylkarbonylmetylentrifenylfosforan Fremstillingen av tittelforbindelsen utføres analogt med fremgangsmåten beskrevet under punkt 1, ved bromering av isoamylmetylketon, omsetning av bromidet med trifenylfosfin til fosfoniumsalt og dannelse av ylidet med 2N NaOH.
Fra 50,0 ml isoamylmetylketon og 18,2 ml brom erholdes etter rensing ved destillering 54,68 g 1-brom-5-metyl-heksan-on med Kp<15>"<20> 80-86 °C.
Fra 54,58 g av bromidet og 74,14 g difenylfosfin erholdes 91,6 g av fosfoniumsalt med smeltepunkt 230-233 °C.
Fra 91,6 g av fosfoniumsaltet erholdes etter behandling med NaOH og omkrystallisering av råproduktet fra metylenklorid/ester, 69,8 g av tittelforbindelsen med smeltepunkt 64-67 °C. 3. Isopropoksymetylkarbonylmetylentrifenylfosforan 2,43 g natrium oppløst i 150 ml isopropanol. Etter tilsetning av 20,0 g klormetylkarbonylmetylentri-fenylfosforan (R.F. Hudson et al., J. Org. Chem. 24 2446, 1963), løst i 200 ml isopropanol, oppvarmes i 8 timer under tilbakeløpskjøling.
Den avkjølte reaksjonsblanding helles over i kok-salt løsning og ekstraheres med etylacetat. Den olje-aktige rest erholdt etter inndamping kromatograferes på kiselgel med etylacetat. Det erholdes 9,53 g av tittelforbindelsen med smeltepunkt 134 °C.
4. (2-isopropoksyetyl)-karbonylmetylentrifenylfosforan a. l-brom-4-isopropoksy-butan-2-on
En oppløsning av 68,2 g 4-isopropoksy-2-butanon (F.B. Hassan et al., J. Biolog. Chem. 256. 7781, 1981) i 315 ml metanol tilsettes 26,9 ml brom dråpevis ved 0 °C og omrøres deretter i 1,5 time ved + 10 °C. Deretter dryppes 470 ml vann til reaksjonsløsningen og det omrøres i 16 timer ved romtemperatur. Det tilsettes mettet koksaltløsning og ekstraheres med eter. Destillering av råproduktet gir 78,07 g av brom-derivatet med Kp<15>'<20> 95 °C.
b. 4-isopropoksy-2-okso-butyl-trifenylfosfoniumbromid Fra 78,0 g av bromidet erholdt under punkt a. og 97,85 g trifenylfosfin erholdes etter fremgangsmåten beskrevet under punkt 1 133,35 g av fosfoniumsaltet med smeltepunkt 183 °C.
c. (2-isopropoksyetyl)-karbonylmetylentrifenylfosforan Fosfoniumbromidet (133,2 g) erholdt under punkt b. behandles med 2N-NaOH i metylenklorid som beskrevet under punkt 1. Etter omkrystallisering av råproduktet fra etylacetat erholdes 64,38 g av tittelforbindelsen med smeltepunkt 97 °C. 5. (1-etylpropoksymetyl) -karbonylmetylentrif enylf osf oran En løsning av 3,04 g natrium i 100 ml 3-pentanol omsettes med 25,0 g klormetylkarbonylmetylentrifenyl-fosforan analogt med fremstilling av isopropoksy-metylkarbonylmetylentri feny1fos foran. Tittelforbindelsen erholdes som krystallisert olje med smeltepunkt 66-70 °C. 6. Syklopropylmetoksymetylkarbonylmetylentrif enylf os-foran
En løsning av 5,58 g natrium i 25,0 g syklopropyl-metanol og 200 ml toluen, omsettes med 30,0 g klor-metylkarbonylmetylentrifenylfosforan analogt med fremstilling av isopropoksymetylkarbonylmetylentrifenylfosforan. Tittelforbindelsen erholdes som fast stoff med smeltepunkt 121 °C.
7. (3-butinyl)-karbonylmetylentrifenylfosforan 20,0 g metylkarbonylmetylentrifenylfosforan oppløses i 628 ml tetrahydrofuran og tilsettes dråpevis 41,3 ml butyllitium (1,6 molar løsning heksan) ved -78 °C. Reaksjonsblandingen tilføres etter oppvarming til romtemperatur is/koksaltløsning og blandingen ekstraheres med eddikester. Etter tørking av den organiske fase med natriumsulfat erholdes 23,4 g fast stoff. Søylekromatografisk rensing (kiselgel/eddikester) gir 15,4 g av tittelforbindelsen med smeltepunkt 135-136 °C.
8. (3-butenyl)-karbonylmetylentrifenylfosf oran
Ved reaksjon av 15,0 g metylkarbonylmetylentrifenyl-f osf oran i 471 ml tetrahydrofuran med 31,0 ml butyllitium og 4,28 ml allylbromid erholdes analogt med punkt 7. Tittelforbindelsen som krystallisert olje med smeltepunkt 92-93 °C.
Ved variasjon av de anvendte keto-bestanddeler for fremstilling av Wittig-reagensene kan det, som beskrevet i det etterfølgende, fremstilles ytterligere fosforaner, som med aldehyd 1 eller 2 kan omsettes til ytterligere forbindelser med generell formel IV.
Eksempel 1
En løsning av 1,6 g 1(S),3(R)-bis-(tert.-butyl-dimetylsilyloksy )-20(R)-metyl-9,10-secopregna-5E,7E,10(19)-trien-21-karbaldehyd i 50 ml toluen omrøres etter tilsetning av 3,02 g isoamylkarbonylmetylentrifenylfosforan i 16 timer ved 80 °C under argon. Deretter avsuges løsningsmidlet under redusert trykk og residuet kromatograferes på kiselgel med heksan/etylacetat. Hovedfraksjonen gir 1,15 g [1(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-9,10-secochola-5E,7E,10(19),-23(E)-tetraen-24-yl]-4-metyl-pentan-l-on som fargeløs olje.
<1>H-NMR (CDC13); 6 = 0,01 ppm (s, 12H, Si-CH3); 0,56 (s,3H,H-18); 0,87 (s,18H.Sit.-butyl); 0,88 (d,J=7Hz,6H,C-(CH3)2); 0,95 (d,J=7Hz,3H,H-21); 4,25 (m, lH,H-3); 4,55 (m,lH,H-l); 4,94 og 5,00 (s,lH,H-19), 5,82 og 6,46 (d,J=llHz, lH,H-6,H-7); 6,10 (d,J=16Hz,lH,H-24); 6,80 (m,lH,H-23).
' Eksempel 2
572 mg cerium(III)-klorid-heptahydrat oppløses i
10 ml metanol og forbindelsen fremstilt ifølge eksempel 1
(1,10 g) oppløst i 5 ml metanol, tilsettes. Etter tilsetning
av 61 mg natriumborhydrid omrøres i 30 min ved 0 °C. Det til-< settes vann, ekstraheres med diklormetan, tørkes (Na2S04) og inndampes. Den således erholdte blanding av diastereomere alkoholer adskilles ved kromatografering på kiselgel med heksan/etylacetat. Det erholdes i elueringsrekkefølge 290 mg 1(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-24-(l-hydroksy-4-1 metylfenyl)-9,10-seco-5E,7E,10(19),23(E)-cholatetraen (epimer A) og 120 mg epimer B. Epimerene oppviser identiske NMR-spektre.
<4>I-NMR (CDC13): 6 = 0,01 ppm (s, 12H, Si-CH3), 0,49 (s,3H,H-18), 0,86 (s,18H.Si-t.-butyl), 0,86 (d,J=7Hz,6H,C-(CH3)2), 0,88 (d,J=7Hz, 3H,H-21); 4,16 (m, lH,H-3); 4,48
(m,lH,H-l), 4,88 og 4,93 (s,lH,H-19), 5,40 (dd,J=15,5 og 7Hz, lH,H-24); 5,55 (m,1H,H-23); 5,77 og 6,40 (d,J=llHz,lH,H-6, H-7).
Eksempel 3
En løsning av 290 mg av det erholdte produkt ifølge eksempel 2 (epimer A) i 80 ml toluen blir etter tilsetning av 44 mg anthracen og 0,01 ml trietylamin bestrålt i en pyrex-immersjonsreaktor ved hjelp av en kvikksølv-høytrykkslampe (Philips HPK 125). Bestrålingstiden er 3,5 min, en grundig blanding av løsningen sikres ved tilførsel av en nitrogen-strøm. Etter inndamping og kromatografering på kiselgel med heksan/etylacetat erholdes 241 mg 1(S),3(R)-bis-(tert.-butyl-dimetylsilyloksy )-24-(l-hydroksy-4-metylpentyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23(E)-tetraen i form av en fargeløs olje.
[o]?° + 49,6 0 (CHC13, o = 0,425.
Analog behandling av 120 mg av den polare isomere (epimer B), erholdt ifølge eksempel 2, gir 113 mg i form av fargeløs olje.
[a]2° + 41,4 <0> (CHC13, o = 0,285.
Eksempel 4
En løsning av 225 mg av det erholdte produkt fra epimer A ifølge eksempel 3 i 5 ml THF omrøres etter tilsetning av 1,31 ml av en 1M-Iøsning av tetrabutylammoniumfluorid i THF, i 60 min ved 60 °C. Etter avkjøling tilsettes mettet kok-saltløsning og det ekstraheres med etylacetat. Råproduktet kromatograferes på kiselgel med heksan/etylacetat og gir 85 mg 24-(l-hydroksy-4-metylpentyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R)-diol i form av et hvitt skum.
<1>H-NMR (CDCI3): 6 = 0,57 ppm (s, 3H,H-18); 0,84 (d,J=7Hz,3H,H-21); 0,92 (d,J=7Hz 6H,C-(CH3)2; 4,03 (m,lH,H-25); 4,23 (m,lH,H-3); 4,43 (m,lH,H-l); 5,00 og 5,33 (s,1H,H-19 ) ; 5,45 (dd,J=15,5 og 7Hz,1H,H-24); 5,60 (m,1H,H-23); 6,02 og 6,38 (d,J=lH,llH,H-6,H-7).
En analog behandling av produktet erholdt fra epimer B ifølge eksempel 3 (95 mg) gir 35 mg av de epimere trioler som fargeløs olje. NMR-spektrene av epimerene er identiske.
Eksempel 5
Analogt med fremgangsmåten beskrevet i eksempel 1 omsettes 2,05 g 1(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-20- (R) -metyl-9,10-secopregna-5E, 7E, 10 (19) -trien-21 -karbaldehyd i 53 ml toluen med 3,4 g isobutylkarbonylmetylentrifenylfosforan. Etter kromatografisk rensning erholdes [1(S),3(R)-bis-(tert. -butyldimetylsilyloksy)-9,10-secochola-5E, 7E, 10(19 ), - 23(E)-tetraen-24-yl]-3-metyl-butan-l-on med smeltepunkt 79-81 °C (fra etanol),
[a]2,<0>+ 52,6 ° (CHC13, o = 0,500).
Eksempel 6
Ved reduksjon av 1,75 g av produktet erholdt fra eksempel 5, under betingelsene ifølge eksempel 2, erholdes 1 (S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-24-(1(R,S)-hydroksy-3-metylbutyl )-9,10-secopregna-5E, 7E, 10(19),23E-tetraen i form av en oljeaktig blanding av epimerene. Ved kromatografi på kiselgel med heksan/etylacetat erholdes i elueringsrekkefølge 780 mg epimer A og 600 mg epimer B, i form av fargeløse oljer som ikke kan sjeldnes NMR-spektroskopisk.
Eksempel 7
Ved triplettsensibilisert fotoisomerisering analogt med eksempel 3, og etterfølgende silyleterspaltning analogt med eksempel 4, erholdes fra 700 mg av den ifølge eksempel 6 fremstilte epimer A 240 mg 24-(l-hydroksy-3-metylbutyl)9-10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(R)-diol (forbindelse A) med dekomponeringstemperatur i området 119-125 °C,
[a]<2>,<0> + 38,8 0 (metanol, o = 0,505).
Analog behandling av 330 mg epimer B gir 129 mg 24-(l-hydroksy-3-metylbutyl )9-10-secochola-5Z,7E,10(19),23E-tetraen-l(S),3(S)-diol (forbindelse B) med dekomponeringstemperatur i området 139-145 °C, [a]<2>,<0> + 54,8 (metanol,
o = 0,505).
Eksempel 8
En løsning av 170 mg av produktet erholdt ifølge
i eksempel 5 i 5 ml THF omrøres etter tilsetning av 200 mg litium-tri-tertiær-butoksy-aluminiumhydrid i 90 min ved romtemperatur. Det tilsettes 0,8 ml mettet NH4C1-løsning, filtreres og filtratet inndampes. Kromatografering av råproduktet på A1203 (Merck, nøytral, trinn III) gir 108 mg
1-[1(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-9,10-secochola-5E,7E,10(19)-trien-24-yl]-3-metyl-butan-l-on i form av farge-løs olje.
^-NMR (CDCI3): 6 = 0,53 ppm (s, 3H, H-18); 4,22 (m,lH,H-3); 4,54 (m,lH,H-l); 4,93 og 4,98 (m,1H,H-19); 5,82 og 6,46 (d,J=llHz,lH,H-6,H-7).
Eksempel 9
Fotokjemisk dobbeltbindingsisomerisering analogt med eksempel 3 og silyleterspaltning analogt med eksempel 4, gir fra 100 mg av produktet fra eksempel 8 50 mg 1-[1(S),3(R)-di-hydroksy-9,10-secochola-5Z,7E,10(19)-trien-24-yl]-3-metyl-butan-l-on.
UV (metanol): = 212 nm (e = 14 300), 265 (15 860).
Eksempel 10
Omsetning av 1,6 g 1(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetyl-silyloksy )-20(R)-metyl-9, 10-secopregna-5E, 7E, 10(19)-trien-21-karbaldehyd med (2-isopropoksyetyl)-karbonylmetylentrifenyl-fosforan analogt med eksempel 1, gir 1,15 g l-[l(S),3(R)-bis-(tert. -butyldimetylsilyloksy)-9,10-secochola-5E,7E,10(19 )-23(E)-tetraen-24-yl]-3-isopropoksy-propan-l-on i form av fargeløs olje.
^-NMR (CDCI3): 6 = 0,01 ppm ( s, 12H, Si-CH3); 0,55 (s,3H,H-18); 0,86 og 0,90 (s,9H,Si-t.-butyl); 0,96 (d,J=7Hz, 3H,H-21); 1,15 (d,J=7Hz,6H,C-(CH3)2); 3,60 (m,1H,CH-0); 3,73 (t, J=7Hz,2H,CH2-0); 4,23 (m,lH,H-3); 4,55 (m,lH,H-l), 4,95 og 5,00 (m,lH,H-19); 5,83 og 6,46 (d,J=llHz,lH,H-6,H-7); 6,11 (d,J=15,5Hz,lH,H-24); 6,87 (m,lH,H-23).
Eksempel 11
Ved redusering analogt med eksempel 2, fotoisomerisering analogt med eksempel 3, og silyleterspaltning analogt med eksempel 4, erholdes fra 1,05 g av produktet fremstilt ifølge eksempel 10 143 mg 24-(l(R,S)-hydroksy-3-isopropoksy-propyl)-9,10-secochola-5Z,7E,10(19),23-tetraen-l(S),3(R)-diol i form av en l:l-blanding av diastereomerer som kan adskilles ved høytrykks-væskekromatografi. Isomerene oppviser identiske NMR-spektre.
^-NMR (CDCI3): 6 = 0,57 ppm (s,3H,H-18), 0,94 (d,J=7Hz,3H,H-21); 1,15 (d. J=7Hz, 6H,C(CH3)2), 4,17 (m,lH,H-3);
4,21 (m,lH,H-25); 4,38 (m,lH,H-l); 4,98 og 5,29 (m,1H,H-19);
5,45 (dd, J=15,5 og 7Hz,lH,H-24); 5,63 (m,1H,H-23); 6,02 og
i 6,38 (d,J=llHz,lH,H-6,H-7).
Eksempel 12
Med utgangspunkt i aldehyd 1 og isopropoksymetylkarbonylmetylentrifenylfosforan erholdes analogt med rekke-
> følgen ifølge eksempel 1-4 isomer B (5Z,7E,22E-1(S),3(R),-24(S)-9,10-seco-24a,24b-dihomo-24b-oksacholestra-5,7,10(19)22-tetraen-l,3,24-triol) med smeltepunkt 131-132 "C.
Eksempel 13
> Med utgangspunkt i aldehyd 1 og (2-isopropoksyetyl)-karbonylmetylentrifenylfosforan erholdes analogt med rekke-følgen ifølge eksempel 1-4 isomer B (5Z,7E,22E-1(S),3(R),-24(S)-9,10-seco-24a,24b,24c-trihomo-24c-oksacholestra-5,7,10-(19)22-tetraen-l,3,24-triol) med smeltepunkt 125-126 °C.
Eksempel 14
Analogt med eksempel 1 omsettes 0,85 g l(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-20(R)-metyl-9,10-secopregna-5E,7E,10(19)-trien-21-karbaldehyd med 4,5 g syklopropylmetyl-5 karbonyltrifenylfosforan. Etter kromatografisk rensning på kiselgel med heksan/eddikester erholdes 500 mg 1(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-26,27-syklo-24a, 24b-dihomo-9,10-secocholesta-5E,7E,10(19)-23E-tetraen-24a-on i form av et
fargeløst skum.
3<X>H-NMR (CDCI3): 6 = 0,01 ppm (s, 12H, Si-CH3); 0,09 og 0,50 (m,2H,H-26 og H-27); 0,50 (s,3H,H-18); 0,83 og 0,85 (s, 9H,Si-t.-butyl); 0,91 (d,J=7,3Hz,3H,H-21; 0,96 (m,lH,H-25);
2,47 (d,J=6Hz,2H,H-24b); 4,16 (m,lH,H-3); 4,47 (m,lH,H-l);
4,89 og 4,93 (s. 1H,H-19); 5,77 og 6,40 (d. J=llHz,1H,H-6 og
5 H-7); 6,08 (d. J=15,5Hz,H-24); 6,75 (ddd. J=15,5, 9, 6,5Hz, lH,H-23).
Eksempel 15
Redusering av det erholdte produkt ifølge eksempel 14, analogt med eksempel 2, gir 200 mg l(S),3(R)-bis-(tert.-butyldimetylsilyloksy)-26,27-syklo-24a,24b-dihomo-9,10-secocholesta-5E,7E,10(19),23E-tetraen-24a(R,S)-ol i form av en oljeaktig blanding av epimerer, som ikke kan sjeldnes NMR-spektroskopisk.
<1>H-NMR (CDC13): 6 = 0,01 ppm (s, 12H, Si-CH3), 0,09 og 0,40 (m,2H,H-26 og H-27); 0,50 (s,3H,H-18); 0,68 (m,1H,H-25); 0,81 og 0,86 (s,9H,Si-t.-butyl); 0,88 (d,J=7Hz,3H,H-21); 1,40 (t,J=7Hz,H-24b); 4,13 (m,lH,H-24a); 4,17 (m,lH,H-3); 4,49 (m, 1H,H-1); 4,88 og 4,93 (s. 1H,H-19); 5,45 (dd. J=15,5, 6,5Hz, lH,H-24); 5,59 (ddd. J=15,5, 7, 6,5Hz,lH,H-23); 5,77 og 6,40 (d. J=llHz,lH,H-6 og H-7).
Eksempel 16
Analogt med eksempel 3 erholdes det, ved triplettsensibilisert fotoisomerisering og avspalting av beskyttelses-gruppene analogt med eksempel 4, fra 190 mg av forbindelsen beskrevet under eksempel 15, 85 mg 26,27-syklo-24a,24b-dihomo-9,10-secocholesta-5Z,7E,10(19),23(E)-tetraen-1(S),3(R),24a-(R,S)-triol i form av en l:l-blanding av diastereomerer, som adskilles ved høytrykks-væskekromatografering. NMR-spektrene av begge diastereomerer er identiske.
^-NMR (CDCI3): 6 = 0,09 og 0,49 (m,2H,H-26 og H-27); 0,53 (s,3H,H-18); 0,70 (m,lH,H-25); 0,93 (d,J=7Hz,3H, H-21); 4,18 (m,lH,H-24a); 4,22 (m,lH,H-3); 4,43 (m,lH,H-l); 5,00 og 5,32 (s,lH,H-19); 5,50 (dd,J=15,5, 6,5Hz,H-24); 5,64 (ddd. J=15,5, 7, 6,5Hz,lH,H-23); 6,02 og 6,38 (d. J=llHz,lH, H-6 og H-7).
Eksempel 17
Med utgangspunkt i aldehyd 1. og (1-etylpropoksymetyl)-karbonylmetylentrifenylfosforan erholdes analogt med rekkefølgen ifølge eksemplene 1-4 isomer B (5Z,7E,22E-1(S),3(R),24(S)-26,27-dimetyl-24a,24b-dihomo-24b-oksa-9,10-secocholesta-5,7,10(19)22-tetraen-l,3,24-triol) med smeltepunkt 103-105 °C.
Eksempel 18
Med utgangspunkt i aldehyd 1 og syklopropylmetoksy-metylkarbonylmetylentrifenylfosforan erholdes analogt med rekkefølgen ifølge eksempel 1-4 isomer B (5Z,7E,22E-1(S),-3(R),24(S)-26,27-syklo-24a,24b,24c-trihomo-24b-oksa-9,10-secocholesta-5,7,10(19)22-tetraen-1,3,24-triol).
<X>H-NMR (DMS0-d3): S=0,16 ppm (m,2H); 0,43 (m,2H); 0,53 (S,3H); 1,00 (d,J=6Hz,3H); 3,21 (m,4H); 4,00 (m,2H); 4,19 (m,lH); 4,51 (d,J=5Hz,1H); 4,70 (d,J=5Hz,1H); 4,75 (m,lH); 4,82 (d,J=5Hz,1H); 5,21(m,lH); 5,39 (m,2H); 5,98 (d, J=llHz,-1H); 6,18 (d,J=llHz,lH).
Eksempel 19
Med utgangspunkt i aldehyd 1 og (3-butinyl)-karbonyl-metylentrifenylfosforan erholdes analogt med rekkefølgen ifølge eksempler 1-4 isomer B (5Z,7E,22E-l(S),3(R),24(S)-24-(3-butinyl)-9,10-secochola-5,7,10(19)22-tetraen-l,3,24-triol) med smeltepunkt 115-118 °C.
Eksempel 20
Med utgangspunkt i aldehyd 1 og (3-butenyl)-karbonyl-metylentrifenylfosforan erholdes analogt med rekkefølgen ifølge eksempel 1-4 isomer B (5Z,7E,22E-l(S),3(R),24(S)-24-(3-butenyl)-9,10-secochola-5,7,10(19)22-tetraen-l,3,24-triol) med smeltepunkt 146-147 °C.

Claims (1)

  1. Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk
    aktive sidekjede-homologe vitamin D-derivater med formel I
    hvori
    R<1> betegner et hydrogenatom, en hydroksy- eller
    acyloksygruppe med 1 til 9 karbonatomer,
    R<2> betegner et hydrogenatom eller en acylgruppe med 1
    til 9 karbonatomer,
    R3 eller R4 betegner en hydroksy- eller acyloksygruppe med 1
    til 9 karbonatomer og den andre substituenten betegner et hydrogenatom, eller R3 og R<4> betegner sammen et oksygenatom,
    R5 og R<6> betegner uavhengig av hverandre en lineær eller for-
    grenet alkylrest med inntil 5 karbonatomer, en tri-fluormetylgruppe eller danner med det tertiære karbonatom sammen en mettet, umettet eller aromatisk karbosyklisk, eller ved inkludering ved 1 eller 2 N-, 0- eller S-atomer, en heterosyklisk 3-, 4-, 5- eller
    6-leddet ring,
    B og D betegner enten et hydrogenatom eller sammen en andre
    binding (E-konfigurert dobbeltbinding) og A betegner enten en direkte binding mellom karbon
    atomene 20 og 22 og
    X betegner en alkylenoksyrest -(CH2)n0- hvor n = 1 til 3;
    eller
    A betegner en metylenbro (-CH2-) mellom karbonatomene 20 og 22 og
    X betegner en alkylenrest -(CH2)n- eller en alkylen
    oksyrest -(CH2)n0- hvor n = 1 til 3;
    eller;
    når A betegner en direkte binding og B og D sammen be
    tegner en andre binding, betegner
    en av restene -CH2-0-CH2-<J , -(CH2)2-h eller -(CH2)2-<=,>
    karakterisert ved at en forbindelse med generell formel IV
    hvori
    R<1>' betegner et hydrogenatom eller en beskyttet hydroksy
    gruppe og
    R<2>' betegner en hydroksybeskyttelsesgruppe og A, X, R<5> og R<6> har betegnelsene angitt for formel I,
    om ønskelig etter selektiv hydrering av dobbeltbindingen i sidekjeden, omdannes til en forbindelse med generell formel IVa
    hvori R<1>', R<2>', A, X, R5 og R6 har betegnelsen angitt i formel IV og
    om ønskelig, et reduksjon av karbonylfunksjonen og eventuelt etter atskillelse av blandingen av de ved reduksjonen dannede epimere hydroksyforbindelser med generell formel Illa og Illb
    hvori
    R<1>', R<2>', A, X, R<5> og R6 har betegnelsene angitt i formel IV, og B og D har betegnelsene angitt i formel I,
    ved bestråling med ultrafiolett lys under invertering av
    stereoisomerien ved 5,6-dobbeltbindingen, omdannes til en forbindelse med generell formel II
    hvori
    R<1>', R<2>', A, B, D, X, R5 og R6 har betegnelsene angitt i formel Illa/IIIb,
    og denne forbindelse deretter, ved avspalting av foreliggende hydroksybeskyttelsesgrupper og eventuelt ved delvis eller fullstendig forestring av hydroksygruppene, overføres til en forbindelse med generell formel I.
NO913913A 1990-02-06 1991-10-04 Analogifremgangsmåte for fremstilling av sidekjede-homologe vitamin-D-derivater NO300209B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4003854A DE4003854A1 (de) 1990-02-06 1990-02-06 Seitenketten-homologe vitamin d-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese derivate enthaltende pharmazeutische praeparate sowie deren verwendung als arzneimittel
DE19904034730 DE4034730A1 (de) 1990-10-30 1990-10-30 Seitenketten-homologe vitamin-d-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese derivate enthaltende pharmazeutische praeparate sowie deren verwendung als arzneimittel
PCT/DE1991/000104 WO1991012238A1 (de) 1990-02-06 1991-02-06 Seitenketten-homologe vitamin-d-derivative, verfahren zu ihrer herstellung, diese derivate enthaltende pharmazeutische präparate sowie deren verwendung als arzneimittel

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO913913D0 NO913913D0 (no) 1991-10-04
NO913913L NO913913L (no) 1991-12-05
NO300209B1 true NO300209B1 (no) 1997-04-28

Family

ID=25889898

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO913913A NO300209B1 (no) 1990-02-06 1991-10-04 Analogifremgangsmåte for fremstilling av sidekjede-homologe vitamin-D-derivater

Country Status (17)

Country Link
EP (1) EP0441467B1 (no)
JP (1) JPH05501718A (no)
CN (1) CN1029400C (no)
AT (1) ATE106391T1 (no)
AU (1) AU652739B2 (no)
CA (1) CA2058637A1 (no)
CZ (1) CZ280203B6 (no)
DE (1) DE59101738D1 (no)
DK (1) DK0441467T3 (no)
ES (1) ES2055521T3 (no)
FI (1) FI100598B (no)
HU (1) HUT59665A (no)
IE (1) IE70239B1 (no)
IL (1) IL97158A (no)
NO (1) NO300209B1 (no)
PT (1) PT96679B (no)
WO (1) WO1991012238A1 (no)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5532228A (en) * 1990-02-06 1996-07-02 Schering Aktiengesellschaft Side-chain homologous vitamin D derivatives, process for their production, pharmaceutical preparations containing these derivatives and their use as pharmaceutical agents
DE4221961A1 (de) * 1992-06-30 1994-01-05 Schering Ag 22-En-25-oxa-Derivate in der Vitamin D-Reihe, Verfahren zu ihrer Herstellung, diese Derivate enthaltenen pharmazeutische Präparate sowie deren Verwendung als Arzneimittel
GB9223061D0 (en) * 1992-11-04 1992-12-16 Leo Pharm Prod Ltd Chemical compounds
TW267161B (no) * 1992-11-20 1996-01-01 Hoffmann La Roche
DE4343694C2 (de) * 1993-12-16 1997-02-13 Schering Ag Verfahren zur Homologisierung von geschützten C-22-Vitamin D-Aldehyden und Zwischenprodukte des Verfahrens
GB9524812D0 (en) * 1995-12-05 1996-02-07 Leo Pharm Prod Ltd Chemical compounds
JP2001510183A (ja) * 1997-07-17 2001-07-31 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 側鎖に２つの不飽和結合を有するジホモ−セコ−コレスタン
DE19935771A1 (de) 1999-07-23 2001-02-01 Schering Ag Neue Vitamin D-Derivate mit cyclischen Substrukturen in den Seitenketten, Verfahren und Zwischenprodukte zu ihrer Herstellung und die Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln
JP2005257271A (ja) * 2002-02-25 2005-09-22 Chugai Pharmaceut Co Ltd ビタミンｄ３誘導体とビタミンｄ３受容体の結合の検出方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4225596A (en) * 1978-10-13 1980-09-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Method for treating calcium imbalance and improving calcium absorption in mammals
US4588528A (en) * 1984-05-31 1986-05-13 Wisconsin Alumni Research Foundation 1,24-dihydroxy-Δ22 -vitamin D3 and process for preparing same
WO1987000834A1 (en) * 1985-08-02 1987-02-12 Leo Pharmaceutical Products Ltd. A/S Novel vitamin d analogues

Also Published As

Publication number Publication date
JPH05501718A (ja) 1993-04-02
FI100598B (fi) 1998-01-15
IL97158A (en) 1994-12-29
IE70239B1 (en) 1996-11-13
DK0441467T3 (da) 1994-10-03
HU913475D0 (en) 1992-05-28
PT96679B (pt) 1998-07-31
NO913913L (no) 1991-12-05
WO1991012238A1 (de) 1991-08-22
CS28191A3 (en) 1992-04-15
AU652739B2 (en) 1994-09-08
CN1054588A (zh) 1991-09-18
IE910389A1 (en) 1991-08-14
ATE106391T1 (de) 1994-06-15
PT96679A (pt) 1991-10-31
EP0441467A1 (de) 1991-08-14
HUT59665A (en) 1992-06-29
FI914677A0 (fi) 1991-10-04
IL97158A0 (en) 1992-05-25
EP0441467B1 (de) 1994-06-01
ES2055521T3 (es) 1994-08-16
CZ280203B6 (cs) 1995-11-15
NO913913D0 (no) 1991-10-04
CN1029400C (zh) 1995-08-02
AU7216191A (en) 1991-09-03
DE59101738D1 (de) 1994-07-07
CA2058637A1 (en) 1991-08-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5447924A (en) Vitamin D analogues
US5583125A (en) 25-Carboxylic acid derivatives in the vitamin D series, process for their production, intermediate products for these processes, pharmaceutical preparations containing these derivatives as well as their use for the production of pharmaceutical agents
US5532228A (en) Side-chain homologous vitamin D derivatives, process for their production, pharmaceutical preparations containing these derivatives and their use as pharmaceutical agents
EP0460032B1 (en) Novel vitamin d analogues
JP2505713B2 (ja) ビタミンｄ−２２−フェニルスルホン誘導体
EP0667856B1 (en) Novel vitamin d analogues
IE920156A1 (en) 23-oxa derivatives in the vitamin D series, process for the preparation thereof, pharmaceutical products containing these derivatives, and the use thereof as medicaments
NO178923B (no) Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive 24-homo-vitamin-D-derivater
NO972258L (no) 18, 19-dinor-vitamin D-forbindelser
JP3589664B2 (ja) ビタミンｄ系列の２２−エン−２５−オキサ−誘導体，該化合物の製造法，該誘導体を含有する薬学的調剤ならびに薬剤としての該調剤の使用
NO300209B1 (no) Analogifremgangsmåte for fremstilling av sidekjede-homologe vitamin-D-derivater
KR20050123185A (ko) 16-엔-비타민 ｄ 유도체
US5278155A (en) Fluorine-containing vitamin D3 analogues and cell differentiation-inducing agent containing the same
NZ256386A (en) 20-(substituted alkoxy)-9,10-seco-pregnatriene derivatives and medicaments
EP0374219A1 (en) SIDE CHAIN UNSATURATED 1$g(a)-HYDROXYVITAMIN D HOMOLOGS
US5354744A (en) Side chain unsaturated 1 alpha-hydroxyvitamin D analogs
KR20050055784A (ko) 비타민 디 유사체, 이 유사체를 포함하는 조성물 및 이들의용도
NO972257L (no) 18-nor-vitamin D-forbindelser
DE4003854A1 (de) Seitenketten-homologe vitamin d-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese derivate enthaltende pharmazeutische praeparate sowie deren verwendung als arzneimittel
JPH05339230A (ja) 活性型ビタミンｄ２及びその誘導体の製造法
DE4034730A1 (de) Seitenketten-homologe vitamin-d-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese derivate enthaltende pharmazeutische praeparate sowie deren verwendung als arzneimittel