NO20171916A1 - Fremgangsmåte for fremstilling av 2-[4-(3- og 2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamider - Google Patents

Fremgangsmåte for fremstilling av 2-[4-(3- og 2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamider Download PDF

Info

Publication number
NO20171916A1
NO20171916A1 NO20171916A NO20171916A NO20171916A1 NO 20171916 A1 NO20171916 A1 NO 20171916A1 NO 20171916 A NO20171916 A NO 20171916A NO 20171916 A NO20171916 A NO 20171916A NO 20171916 A1 NO20171916 A1 NO 20171916A1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
fluorobenzyloxy
benzylamino
propanamide
benzaldehyde
fluorobenzyl
Prior art date
Application number
NO20171916A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
NO342644B1 (no
Inventor
Patricia Salvati
Elena Barbanti
Carla Caccia
Tiziano Rufilli
Luigi Bogogna
Francesco Velardi
Original Assignee
Newron Pharm Spa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=37101658&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO20171916(A1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Publication of NO20171916A1 publication Critical patent/NO20171916A1/no
Application filed by Newron Pharm Spa filed Critical Newron Pharm Spa
Publication of NO342644B1 publication Critical patent/NO342644B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/02—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C07C233/08—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton containing rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/12—Preparation of carboxylic acid amides by reactions not involving the formation of carboxamide groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/12—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by halogen atoms or by nitro or nitroso groups
    • C07C233/13—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by halogen atoms or by nitro or nitroso groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/10—Preparation of carboxylic acid amides from compounds not provided for in groups C07C231/02 - C07C231/08
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/16—Preparation of optical isomers
    • C07C231/18—Preparation of optical isomers by stereospecific synthesis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

En fremgangsmåte for å oppnå terapeutisk aktive 2-[4-(3- og 2- (fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamider og deres salter med farmasøytisk akseptable syrer med høy renhetsgrad, særlig med et innhold avdibenzyl derivat urenheter lavere enn 0.03%, foretrukket lavere enn 0.01% i forhold til vekt. Fremgangsmåten utføres ved å underkaste Schiff base intermediatene 2-[4-(3-og 2- fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamider for katalytisk hydrogenering under nærvær av en heterogen katalysator i et protisk organisk løsemiddel.

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en ny fremgangsmåte for fremstilling av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid, det vil si safinamid (Ia) og (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid, det vil si ralfinamid (Ib) og deres salter, i høye utbytter og svært høy enantiomerisk og kjemisk renhet.
Denne fremgangsmåten er også svært anvendelig for fremstilling i store mengder.
safinamid (Ia): 3-F
ralfinamid (Ib): 2-F
Safinamid (NW-1015, FCE-26743A, PNU-151774E) er en natrium kanal blokkerer, en kalsium kanal modulator, en monoamino oksidase B (MAO-B) inhibitor, en glutamat frigivende inhibitor og en dopamin metabolisme modulator.
Salfinamid er anvendelig ved behandling av CNS forstyrrelser, særlig epilepsi, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom, depresjon, rastløs ben syndrom og migrene (WO 90/14334, WO 04/089353, WO 05/102300, WO 04/062655).
Ralfinamid (NW-1029, FCE-26742A, PNU-0154339E) er en natrium kanal blokkerer anvendelig ved behandling av smertetilstander, som inkluderer kronisk smerte og neuropatisk smerte, migrene, bipolare forstyrrelser, depresjoner, kardiovaskulære, inflammatoriske, urogenitale, metabolitiske og gastrointestinale forstyrrelser (WO 99/35125, WO 03/020273, WO 04/062655, WO 05/018627, WO 05/070405, WO05/102300, WO 06/027052).
Det har nå blitt funnet at storskala fremstillingene av safinamid og ralfinamid i følge fremgangsmåtene beskrevet i litteraturen inneholder to uønskede urenheter, det vil si respektivt (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (IIa) og (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (IIb), og deres salter, særlig de respektive metansulfonatene (IIc) og (IId)
(IIa) (IIb)
Dette faktum er av særlig relevans på grunn av den svært høye toksisiteten til de to urenhetene navngitt ovenfor.
Mange av legemiddelkandidatene tilfredsstiller ikke kliniske forsøk på grunn av de ikke forutsette effektene på human metabolisme, eller toksisitet, på grunn av uønskede urenheter og derfor er eliminering av slike urenheter i tidlig preklinisk fase viktig og sterkt ønskelig.
Ved preklinisk nivå kan “legemiddelevnen” til nye forbindelser bestemmes ved anvendelse av et godt etablert batteri av in vitro undersøkelser, slik som interaksjon med legemiddel-metaboliserende enzymer, cytotoksisitet, metabolitisk stabilitet og profilering, membran permeabilitet, iboende klarering og human ”eter-a-go-go” relatert gen (HERG) kanal blokkade etc.
Cytokrom P450 (CYP 450) systemet er det perifere enzymsystemet for metabolisme av lipofile xenobiotiske midler, som inkluderer legemidler, karsinogener og miljø forurensninger. CYP 450 er et heme-inneholdende, membran bundet, multienzym system som er tilstede i mange vev, men er tilstede ved høyest nivå i leveren. I den humane leveren er det estimert at det er 15 til 20 forskjellig xenobiotiskemetaboliserende CYP 450 former. Så langt har mer enn fjorten CYP gen familier blitt identifisert hos pattedyr. Til tross for den eksisterende høye homologien har omfattende studier avdekket at hver CYP familie og underfamilie har bestemte roller i xenobiotisk metabolisme. Tre CYP familier, CYP1, CYP2 og CYP3 utgjør cirka 70% av humane hepatiske mikrosomer CYPer med CYP3 utgjørende cirka 30%. Disse CYPer er hovedansvarlig for metabolismen for de fleste markedsførte legemidler.
CYP1 familien inneholder flere medlemmer som inkluderer CYP1A1, CYP1A2 og CYP1B1 og de er involvert i metabolismen av acetaminofen, clomipramin og imipramin.
CYP2 familien inneholder flere underfamilier som inkluderer CYP2A, CYP2B, CYP2C, CYP2D og CYP2E. CYP2C underfamilien inneholder minst syv medlemmer. CYP2C9 er ansvarlig for metabolismen av ibuprofen, diclofenac, tolbutamid og torsemid. CYP2C19 er hoved isoenzymet som metaboliserer diazepam og omeprazol. CYP2D6 har vist seg å være ansvarlig for å metabolisere over 30% av legemidlene på markedet, som inkluderer antidepressive midler og kardiovaskulære og anti-psykotiske midler.
I CYP3 familien har tre isorformer blitt identifisert i human lever. Human CYP3A4 har blitt anerkjent for å være den viktigste isoformen i legemiddel metabolisme. Per i da er metabolisme katalysert ved CYP3A4 hoved elimineringsruten for nær 50% av markedsførte legemidler.
På grunn av deres viktighet når det gjelder legemiddel metabolisme er CYP3A4 og CYP2D6 ogte involvert i legemiddel-legemiddel interaksjoner og flere klinisk anvendte forbindelser har blitt identifisert som potente inhibitorer av disse CYP 450 isoformene slik som ketoconazol, terfenadin, erytromycin, miconazol propanolol og kinidin, respektivt. Dette gir en klar begrensning når det gjelder anvendelsen av disse legemidlene.
Et ytterligere problem består i plutselig død som en bivirkning ved virkningen til ikke antiarrytmiske legemidler som er en viktig farmakologisk sikkerhetsbekymring som den farmasøytiske industrien og helseregulerende myndigheter møter. I senere år har minst fem blokkforsterkende legemidler (astemizol, sertindol, terfenadin, cisaprid, grepafloksacin) blitt tatt bort fra markedet på grunn av rapporter vedrørende plutselig død. I alle tilfeller var lang QT Syndrom (LQTS), en abnormalitet vedrørende hjertemuskel repolarisering, som er kjennetegnet ved forlengelse av QT intervallet i elektrodiagrammet, implisert som en forhåndsdisponerende faktor for ”torsades de pointes”, en polymorf ventrikulær tachykardi som spontant degenererer til ventrikulær fibrillering og forårsaker plutselig død. Kongenital LQTS har blitt sporet tilbake til flere mulige mutasjoner som resulterer i defekter i natrium kanaler, og to forskjellige kalium kanaler: den raskt aktiverende forsinkede rektifisereren (IKr) og den langsomt aktiverende forsinkede rektifisereren (IKs). Viktig her er at i virkeligheten hvert tilfelle av en forlenget varighet av hjertevirkningspotensialet relatert til legemiddel eksponering (oppnådd LQTS) kan sporet til en spesifikk mekanisme: blokkering av IKrstrøm i hjertet. Denne strømmen, en hovedbidragsyter til fase 3 repolarisering ved slutten av QT intervallet, utføres ved tetrameriske porer, med de individuelle underenhetene kodet av HERG. Med blokkering av HERG K<+>kanaler i stor grad ansett som den dominerende årsaken til legemiddel-indusert QT forlengelse, har tidlig deteksjon av forbindelser med denne uønskede bivirkningen blitt et viktig formål innen farmasøytisk industri.
Forbindelser med sterk inhibering av legemiddel-metaboliserende enzymer, særlig CYP 450 enzymer, og HERG kanal blokkerende egenskaper, vil med stor sannsynlighet være toksiske og deres utvikling har blitt stoppet i et tidlig stadium.
Slik det er vist i Tabell 1 inhiberer urenhetene (IIa og IIb), som metansulfonat saltet (IIc og IId), sterkt i de mikro- og undermikro-mol område CYP3A4, CYP2D6, CYP2C19, CYP2C9 og HERG strømmene og er svært cytotoksiske, sammenlignet med safinamid metansulfonat (Ic) og ralfinamid metansulfonat (Id) med høye renhetsgrader, syntetisert ved anvendelse av fremgangsmåten i følge oppfinnelsen.
Tabell 1
Tabell 2 viser sammenlignende resultater (IC50) vedrørende inhiberingen av cytokrom CYP3A4 ved anvendelse av høy renhet safinamid og ralfinamid metansulfonat, syntetisert ved anvendelse av den nye fremgangsmåten i følge oppfinnelsen, med safinamid og ralfinamid oppnådd med samme fremgangsmåte under nærvær av 0.3% av urenhetene IIc og IId, respektivt.
Når 0.3% av urenhetene IIc og IId tilsettes til svært ren safinamid og ralfinamid metansulfonat, blir en signifikant reduksjon i IC50på CYP3A4 observert i begge tilfeller som betyr at urenhetene bidrar til en sterk inhibering av enzym aktivitet.
Tabell 2
Slik det er vist i Tabell 3 øker urenheten (IIc), som starter fra 3 mg/kg ip, dødeligheten i muse maksimal elektrosjokk (MES) testen uten noen farmakologisk aktivitet, det vil si beskyttelse fra konvulsjoner.
Tabell 3
Tabell 4 rapporterer at urenheten IId, når den gis p.o. ved 10 og 20 mg/kg, i maksimal elektrosjokk testen (MES) beskytter ikke mus fra konvulsjoner sammenlignet med de samme dosene av ralfinamid metansulfonat.
Tabell 4
Basert på alle disse dataene viser urenhetene IIc og IId, tilstede i safinamid og ralfinamid respektivt, syntetisert med fremgangsmåten beskrevet i WO 90/14334 og av Pevarello et al i J. Med. Chem, 1998, 41, 579-590 in vitro noen uønskede trekk, slik som cellulær toksisitet, sterk inhibering av noen isoformer av CYP 450, HERG kanal blokkering og ingen beskyttende aktivitet i en “in vivo” modell for epilepsi.
Et av de viktigste askeptene ved CYP er variasjonen blant forskjellige populasjonsgrupper. Variasjoner i legemiddel metabolisme er svært viktig i kliniske studier. Betydelig variasjon i den enzymatiske aktiviteten til CYP3A4 og CYP2D6 har blitt demonstrert mellom forskjellige etniske grupper og selv blant forskjellige individer i samme etniske gruppe. Forskjellen i CYP aktiviteten blant individer varierer signifikant, avhengig av de forskjellige isoenzymene. Forandringer i CYP ekspresjonsnivået til forskjellige individer kan forårsake variasjoner i legemiddel metabolisme. Mer viktig kan polymorfisme også resultere i CYP enzym varianter med lavere eller høyere enzymatisk aktivitet som fører til variasjoner i legemiddel metabolisme. CYP2D6 polymorfisme er et godt studert emne innen legemiddel metabolisme. I kliniske studier ble uttalte variasjoner mellom individer først funnet i metabolismen av antihypertensive og antiepileptiske legemidler. Eliminering av CYP2D6 metaboliserte legemidler er langsom hos de individer som bærer defekte CYP2D6 alleler. Individer med langsom metabolisme klassifiseres som dårlige metaboliserere (PM), mens katalytisk kompetente individer kalles ekstensive metaboliserere (EM): tilfellet av PM fenotypen i populasjonen til forskjellige rase regioner varierer: cirka 5 til 10% av kaukasiere er PM fenotypen, men kun 1% i asiatisk populasjon. CYP2C19 er en annen viktig polymorf isoform som har kliniske implikasjoner.
Tatt hensyn til disse observasjonene har en forbindelse som ikke interfererer med CYP450 isoformene (verken inhibering eller induksjon) en svært lav risiko for legemiddel-legemiddel interaksjoner i klinisk praksis og kan enkelt og sikkert foreskrives av legen.
Særlig legemidler som ikke interfererer med cytokromene til CYP450 systemet er særlig indikert for den terapeutiske behandlingen av individer som er klassifisert som dårlige metaboliserere (PM) eller for den terapeutiske behandlingen av pasienter som samtidig tar andre legemidler som er kjente for å reagere innbyrdes med nevnte cytokromer, slike som ketoconazol, terfenadin, erytromycin, miconazol, propanolol og kinidin og/eller er kjente for å ha HERG kanal blokkerende egenskaper.
I henhold til vanlig klinisk praksis blir safinamid og ralfinamid metansulfonater (Ic og Id) vanligvis administrert til pasienten som trenger det i en lang tidsperiode, underoppdelt i flere daglige doser. Dette er særlig tilfelle med terapeutiske applikasjoner hvori sykdommen som behandles er: Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom og rastløs ben syndrom (for anvendelse av safinamid) eller kronisk eller neuropatisk smerte, kardiovaskulære eller inflammatoriske forstyrrelser (for anvendelse av ralfinamid). Selv om den daglige dosen kan variere i henhold til de spesifikke betingelsene og behovene til pasientene kan den safinamid metansulfonat daglige dosen vanligvis variere fra 10 mg/dag til 800 mg/dag, mens ralfinamid metansulfonat daglige dose kan vanligvis variere fra 10 mg/dag til 1 g/dag. Under disse betingelsene, og med hensyn til data rapportert ovenfor, er det svært anbefalelsesverdig å holde nivået av urenheter (IIa) og (IIb) eller saltene derav, særlig metansulfonat saltene (IIc) og (IId) i de farmasøytiske doseringsformene av safinamid og ralfinamid eller saltene derav så lave som mulig, i et hvilket som helst tilfelle lavere enn 0.03%, foretrukket lavere enn 0.01% i forhold til vekt med hensyn til mengden av, respektivt, safinamid og ralfinamid eller saltene derav, særlig metansulfonat saltene.
Undersøkelser og eksperimentelle studier utført av oppfinnerne har vist at safinamid og ralfinamid og deres respektive salter med farmasøytisk akseptable syrer fremstilt i henhold til fremgangsmåter i litteraturen inneholder en mengde av de respektive urenhetene (IIa) og (IIb) eller de respektive saltene med farmasøytisk akseptable syrer, slike som (IIc) og (IId), som er høyere enn 0.03 vekt%. Derfor er de ovenfor nevnte produktene uegnet for sikre terapeutiske anvendelser. Særlig er farmasøytiske preparater som inneholder safinamid eller ralfinamid eller saltet derav med farmasøytisk akseptable syrer, hvori innholdet av urenheter (IIa), (IIb) og de respektive saltene med farmasøytisk akseptable syrer er ikke lavere enn 0.03%, foretrukket enn 0.01% i forhold til vekt med hensyn til de ovenfor nevnte aktive substansene, ikke egnet som medikamenter.
I denne beskrivelsen og kravene er verdiene til de ovenfor indikerte grensene, med mindre annet er spesifisert, tiltenkt til å uttrykke prosentandelen i forhold til vekt av de “aktive substansene”, det vil si det effektive innholdet av biologisk aktiv urenhet (IIa, IIb) med hensyn til det effektive innholdet av den terapeutisk aktive substansen (Ia, Ib).
Fremgangsmåten beskrevet i følge oppfinnelsen ved sterkt å redusere urenhetene fører til produkter med høy kjemisk renhet og sikrere biologisk profil.
Andre urenheter, nesten ikke detekterbare, er avledet fra de svært små mengdene av 2-og 4-fluorbenzyl klorid og 3- og 4-fluorbenzyl klorid som er innbefattet i det kommersielt tilgjengelige 3-fluorbenzyl kloridet og 2-fluorbenzyl kloridet respektivt, anvendt for syntese av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) og 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb) intermediater for fremstilling av, respektivt, forbindelsene (Ia) og (Ib).
I følge fremgangsmåten beskrevet i foreliggende oppfinnelse blir safinamid og ralfinamid oppnådd med høye utbytter og høy renhet hvor innholdet av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]-propanamid (IIa) og (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]-propanamid (IIb), og deres salt, særlig med metansulfonsyre (generisk navngitt “dibenzyl derivater”) i safinamid og ralfinamid eller saltet derav, særlig med metansulfonsyre, er lavere enn eller lik 0.03%, foretrukket 0.01% (i forhold til vekt).
Fremgangsmåten i følge oppfinnelsen starter fra 4-hydroksy-benzaldehyd og innbefatter følgende tre trinn:
a) O-benzylering av 4-hydroksybenzaldehyd med derivater med følgende generelle formel 3- eller 2-F-C6H4-CH2-Y, hvor Y er en utgående gruppe (Cl, Br, I, OSO2CH3 etc.); denne O-benzyleringen utføres under betingelser som er svært selektive for O-alkylering og gir 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd og 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd med høy renhet;
b) reduktiv alkylering av L-alaninamid, base eller salt, med 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd og 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd, hvor det reduserende systemet er hydrogengass og en heterogen katalysator, for å oppnå, etter krystallisering, safinamid og ralfinamid respektivt i svært høy enantiomerisk og kjemisk renhet;
c) fremstilling av safinamid og ralfinamid salter med en farmasøytisk akseptabel syre ved saltdannelse av safinamid og ralfinamid respektivt, oppnådd i foregående trinn. Farmasøytisk akseptable syrer er for eksempel valgt fra salpetersyre, saltsyre, hydrobromsyre, svovelsyre, perklorsyre, fosforsyre, metansulfonsyre, ptoluensulfonsyre, eddiksyre, trifluoreddiksyre, propionsyre, glykolsyre, melkesyre, oksalsyre, malonsyre, eplesyre, maleinsyre, vinsyre, sitronsyre, benzosyre, kanelsyre, mandelsyre og salicylsyre.
Et ytterligere formål med foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe safinamid og ralfinamid eller deres salter med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, med en høy renhetsgrad, særlig med et innhold av de respektive dibenzyl derivatene med formel (IIa) eller (IIb) eller saltene derav med en farmasøytisk akseptabel syre, for eksempel metansulfonsyre, lavere enn 0.03%, foretrukket lavere enn 0.01% i forhold til vekt (referert til som de “aktive substansene”), som er egnet for deres anvendelse som medikamenter.
Videre er et annet formål med oppfinnelsen å tilveiebringe farmasøytiske formuleringer som innbefatter safinamid eller ralfinamid eller et salt derav med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, som de aktive midlene hvori innholdet av de respektive dibenzyl derivatene (IIa) og (IIb) eller saltet derav med en farmasøytisk akseptabel syre, for eksempel metansulfonsyre, er lavere enn 0.03%, foretrukket lavere enn 0.01% (i forhold til vekt) med hensyn til de ovenfor nevnte aktive midlene. Disse nye farmasøytiske formuleringene er verken foreslått eller oppnådd ved å anvende den farmakotoksikologiske kunnskapen med hensyn til safinamid og ralfinamid heller ikke ved anvendelse av disse aktive midlene fremstilt i henhold til fremgangsmåter tilgjengelige i litteraturen.
Derfor utgjør nevnte farmasøytiske formuleringer som innbefatter safinamid eller ralfinamid eller saltene derav med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, som har den ovenfor nevnte høye renhetsgraden, et ytterligere formål ved foreliggende oppfinnelse.
De ovenfor nevnte farmasøytiske formuleringene kan eventuelt innbefatte et eller flere ytterligere aktive midler, i tillegg til safinamid eller ralfinamid eller saltene derav med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, som har den ovenfor beskrevne renhetsgraden.
For eksempel kan en ny farmasøytisk formulering anvendelig for hjelpende behandling av Parkinsons sykdom eller rastløs ben syndrom innbefatte et eller flere hjelpende Parkinsons sykdom aktive midler slik som de som er beskrevet i WO 04/089353 og WO 05/102300, foretrukket en dopamin agonist og/eller levodopa og/eller en katekol-O-metyltransferase (COMT) inhibitor, i tillegg til safinamid eller et salt derav med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, som har den ovenfor nevnte høye graden av renhet.
Som et ytterligere eksempel kan en ny farmasøytisk formulering i følge oppfinnelsen anvendelig for behandling av smertetilstander, som inkluderer kronisk smerte og neuropatisk smerte, og migrene inneholde et ytterligere aktivt middel slik som gabapentin og pregabalin eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav som beskrevet i EP 1423168, i tillegg til ralfinamid eller et salt derav med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, som har den ovenfor nevnte høye grad av renhet.
De farmasøytiske sammensetningene som inneholder høy renhetsgrad safinamid eller ralfinamid i følge oppfinnelsen kan fremstilles ved vanlige fremgangsmåter kjent i litteraturen, for eksempel ved å blande de aktive forbindelsene med farmasøytiske, terapeutisk inerte organiske og/eller uorganiske bærer materialer. Sammensetningene i følge oppfinnelsen kan være i flytende form, for eksempel i form av en løsning, suspensjon, emulsjon; eller i fast form, for eksempel tabletter, troches, kapsler, plastere.
Egnede farmasøytiske, terapeutisk inerte organiske og/eller uorganiske bærer materialer anvendelige ved fremstilling av sammensetningene i følge oppfinnelsen inkluderer for eksempel vann, gelatin, arabisk gummi, laktose, stivelse, cellulose, magnesium steareat, talkum, vegetabilske oljer, polyalkylenglykoler, cyklodekstriner og lignende. De farmasøytiske sammensetningene i følge oppfinnelsen kan steriliseres og kan inneholde, i tillegg til de aktive ingrediensene, ytterligere komponenter godt kjent i litteraturen, slik som for eksempel konserveringsmidler, stabilisatorer, fukte- eller emulgeringsmidler, for eksempel parafinolje, mannid monooleat, salter for å justere osmotisk trykk, buffere og lignende.
Et ytterligere formål med foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe en fremgangsmåte for behandling av CNS forstyrrelser, særlig epilepsi, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom og rastløs ben syndrom, som innbefatter administrering til en pasient som trenger det en effektiv mengde av safinamid eller et salt derav med høy grad av renhet med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, som har et innhold av dibenzyl derivat (IIa) eller et salt derav med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, lavere enn 0.03%, foretrukket lavere enn 0.01% i forhold til vekt (referert til som de “aktive substansene”). Nevnte fremgangsmåte inkluderer behandling av Parkinsons sykdom eller rastløs ben syndrom ved å administrere til en pasient som trenger det en effektiv mengde av safinamid med høy grad av renhet beskrevet ovenfor, eventuelt sammen med et eller flere Parkinsons sykdom aktive midler slik det er beskrevet i WO 2004/089353, slik som for eksempel en dopamin agonist og/eller levodopa og/eller en katekol-O-metyltransferase (COMT) inhibitor.
Videre er et ytterligere formål med foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe en fremgangsmåte for behandling av smertetilstander som inkluderer kronisk smerte og neuropatisk smerte, migrene, bipolare forstyrrelser, depresjoner, kardiovaskulære, inflammatoriske, urogenitale, metabolitiske og gastrointestinale forstyrrelser som innbefatter administrering til en pasient som trenger det en effektiv mengde av ralfinamid med høy grad av renhet eller et salt derav med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, som har et innhold av dibenzyl derivat (IIb) eller et salt derav med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, lavere enn 0.03%, foretrukket lavere enn 0.01% i forhold til vekt (referert til som de “aktive substansene”).
Ovenfor nevnte fremgangsmåte inkluderer behandling av smertetilstander, som inkluderer kronisk smerte og neuropatisk smerte, og migrene med ralfinamid med høy grad av renhet eller et salt derav med en farmasøytisk akseptabel syre, foretrukket metansulfonsyre, eventuelt sammen med gabapentin eller pregabalin.
I WO 90/14334, og i publikasjonen til Pevarello et al. i J. Med. Chem., 1998, 41, 579-590, er en tretrinns fremgangsmåte for fremstilling av benzyloksy-benzylaminoalkanamider beskrevet:
a) syntese av intermediatet 4-benzyloksybenzaldehyder med O-benzylering av de korresponderende 4-hydroksybenzaldehydene med de passende benzyl kloridene, b) reduktiv alkylering av α-amino-amider med 4-benzyloksy-benzaldehyder ved anvendelse av natriumcyanoborhydrid som et reduksjonsmiddel slik det skjematisk er vist nedenfor
hvor R representerer, blant andre substituenter, 3-F og 2-F; R<1>representerer, blant andre substituenter, hydrogen; R<2>representerer, blant andre substituenter, hydrogen; R<3>representerer, blant andre substituenter, CH3; både R<4>og R<5>representerer, blant andre substituenter, hydrogen.
Særlig, når det gjelder safinamid og ralfinamid fremstilling er den reduktive alkyleringen den reduktive alkyleringen av L-alaninamid med 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd og 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd respektivt slik det er vist her nedenfor
R = 3-F-benzyloksy = safinamid (Ia)
R = 2-F-benzyloksy = ralfinamid (Ib)
I J. Med. Chem. (Pevarello et al.), 1998, 41, 579-590 er utbytter på 45% og 60% for fremstilling av safinamid og ralfinamid metansulfonat respektivt, rapportert, med utgangspunkt i de korresponderende (fluorbenzyloksy)benzaldehydene.
Fremgangsmåten beskrevet i WO 90/14334 og i den ovenfor siterte publikasjonen er de samme og tilveiebringer et en-kolbe system hvor iminoalkyleringen og reduksjonen gjøres i samme reaktor. Det passende aldehydet tilsettes i en porsjon til en blanding av L-alaninamid hydroklorid, natrium cyanoborhydrid, metanol og pulveriserte molekylsikter.
I henhold til Pevarello et al., i Org. Prep. Proc. Int.1996, 28, 179-183 (hvor syntesen av noen α-benzylaminoamid derivater ved reduktiv alkylering er beskrevet) er anvendelse av et α-aminoamid som hydroklorid viktig for dannelse av iminium ion i stedet for det korresponderende iminet, i det iminium ionet reagerer enklere med natrium cyanoborhydrid enn med aldehyd karbonyl gruppen.
I følge forfatterne ovenfor synes en-kolbe fremgangsmåten å unngå Schiff-base rasemiseringsproblemer og molekylsikten setter opp hastighetn på reaksjonen (selv om utbyttene er dårlige).
Cyanoborhydridet er det eneste reduksjonsmiddelet som anvendes, og det synes som at dette valget er på grunn av dets lave reaktivitet og dets selektivitet (se Review “Sodium Cyanoborohydride- A Highly Selective Reducing Agent for Organisk Functional Groups” - C.F. Lane, Synthesis 1975, 132-146 ), som gjør det mulig å skille mellom den protonerte Schiff basen og utgangs aldehydet.
Syntesen beskrevet i publikasjonen av Pevarello et al. tilveiebringer isolering av produktene ved kolonne kromatografi, fulgt av omdanning til de korresponderende saltene ved behandling med syrer. Ingen informasjon er tilveiebrakt om den enantiomeriske og/eller kjemiske renheten til både safinamid og ralfinamid og/eller deres salter.
Fremgangsmåten beskrevet i litteraturen har mange ulemper, som begrenser dens anvendelse i stor skala; nedenfor er eksempler på nevnte ulemper listet:
- dannelse av cyanider;
- dannelse av bor derivater, vanskelige å fjerne fra de aktive hovedbestanddelene; - anvendelse av pulveriserte molekylsikter som er fysisk forandelige og kostbare; - lave utbytter;
- lav sluttprodukt konsentrasjon i den reduktive alkyleringsreaksjonsblandingen (cirka 2-3% vekt/volum);
- isolering av produktene ved kolonne kromatografi, som ansees å være en problematisk og kostbar rensefremgangsmåte når stor skala fremstillinger av aktive midler gjennom kjemisk syntese er involvert.
Videre, slik det er vist i eksemplene som følger denne beskrivelsen, inneholder produktene oppnådd i henhold til fremgangsmåtene beskrevet i litteraturen en mengde urenheter (IIa), (IIb), (IIc) eller (IId) som er høyere enn 0.03 vekt% med hensyn til den respektive aktive substansen (Ia), (Ib), (Ic) eller (Id). I tillegg har det vist seg at det er vanskelig å eliminere nevnte urenheter fra sluttprodukt safinamidet og ralfinamidet eller deres salter, ved anvendelse av vanlige kjente rense fremgangsmåter slik som krystallisering fra løsninger eller kromatografi, som i et hvilket som helst tilfelle gir en reduksjon i utbytter.
SYNTESE AV 4-(FLUORBENZYLOKSY)-BENZALDEHYD INTERMEDIATENE
I henhold til de kjente fremgangsmåtene blir fluorbenzyloksy-benzaldehyd intermediatene for syntesen av safinamid og ralfinamid oppnådd ved benzylering av 4-hydroksybenzaldehyd i et basisk medium, som er ved benzylering av fenol salter som, værende naturlige nukleofiler, som gir to forskjellige produkter, det vil si de ønskede O-alkylerte derivatene og de ikke ønskede C-alkylerte derivatene.
Det har effektivt blitt funnet at fluorbenzyleringen av 4-hydroksybenzaldehyd med 3-fluorbenzylklorid, utført i henhold til litteraturen, gir 4-(3-fluorbenzyloksy)-benzaldehydet (IVa) som hovedprodukt sammen med 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (Va) som stammer fra alkyleringen av både hydroksy gruppen i posisjon 4 og karbonatomet i posisjon 3 til 4-hydroksybenzaldehydet. Det samme skjer ved fluorbenzyleringen av 4-hydroksybenzaldehyd med 2-fluorbenzylklorid i henhold til følgende skjema:
(IIIa1): 3-F (Va): 3-F (IIIb1): 2-F (Vb): 2-F
Den reduktive alkyleringen av L-alaninamid med et aldehyd som inneholder den dialkylerte urenheten gir et safinamid eller ralfinamid sluttprodukt som også er urent med den respektive di-alkylerte forbindelsen, di-benzyl derivatet, om den er som en fri base (IIa) eller (IIb) eller som saltdannede produkter, foretrukket med metansulfonsyre (IIc) eller (IId), som vist i følgende skjema:
(Va): 3-F (IIc): 3-F
(Vb): 2-F (IId): 2-F
Andre farmasøytisk akseptable syrer, for eksempel salpetersyre, saltsyre, hydrobromsyre, svovelsyre, perklorsyre, fosforsyre, metansulfonsyre, ptoluensulfonsyre, eddiksyre, trifluoreddiksyre, propionsyre, glykolsyre, melkesyre, oksalsyre, malonsyre, eplesyre, maleinsyre, vinsyre, sitronsyre, benzosyre, kanelsyre, mandelsyre og salicylsyre kan anvendes i stedet for den foretrukne metansulfonsyren.
Det mono-alkylerte derivatet (safinamid eller ralfinamid) og de korresponderende dialkylerte urenhetene har tilsvarende kjemisk-fysiske egenskaper og dette gjør det vanskelig å rense safinamid og ralfinamid med tradisjonelle metoder.
Videre har kjente fremgangsmåter disse ytterligere ulempene:
1) anvendelsen av en lavere alkohol som et løsemiddel; under basiske betingelser, kan løsemiddelet, for eksempel metanol, virke som et nukleofilt reagens og gir, med 3- eller 2-fluorbenzylklorid en viss mengde av metyl-fluorbenzyl-eter;
2) ekstraksjonen av sluttproduktet med et vann-blandbart organisk løsemiddel er kun mulig etter at det alkoholiske reaksjonsløsemiddelet har blitt eliminert fra reaksjonsblandingen.
Det har nå blitt funnet at ved anvendelse av ovenfor beskrevne litteraturfremgangsmåter, for å oppnå et sluttprodukt med formel (Ia) eller (Ib) hvori innholdet av den respektive urenheten (IIa) eller (IIb) er lavere enn 0.03% (i forhold til vekt) er det nødvendig drastisk å rense intermediatet 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) eller 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb) for å redusere innholdet av de respektive urenhetene med formel (Va) og (Vb).
Nevnte rensing blir foretrukket utført ved å underkaste reaksjonsproduktene for krystallisering, mer foretrukket ved tilsetning til en løsning av den urene forbindelsen (IVa) eller (IVb) i et inert organisk løsemiddel et blandbart inert organisk ikkeløsemiddel. Det organisk inerte løsemiddelet er foretrukket valgt fra de aromatiske hydrokarbonene og, mer foretrukket, toluen. Det blandbare inerte organiske ikkeløsemiddelet er foretrukket valgt fra lavere alifatiske hydrokarboner, mer foretrukket nheksan. En ytterligere krystalliseringsfremgangsmåte kan bestå i å løse opp de ovenfor nevnte forbindelsene (IVa) eller (IVb) i et varmt løsemiddel, for eksempel cykloheksan eller en di(C3-C4)alkyleter, slik som diisopropyleter til refluks, og deretter avkjøle løsningen ved romtemperatur, foretrukket ved 10-15°C, mest foretrukket, med induksjon av krystallisering ved tilsetning av rene krystaller av den rene forbindelsen (IVa) eller (IVb).
I følge et aspekt i følge oppfinnelsen har det nå overraskende blitt funnet at når reaksjonen mellom et alkyleringsmiddel med formel (IIIa) eller (IIIb) (se skjema nedenfor hvor F atomet er i posisjon 2 eller 3 og Y er en utgående gruppe slik som for eksempel Cl, Br, I, OSO2CH3, OSO2C6H4-pCH3, etc.) og 4-hydroksybenzaldehyd, utføres under fase-overføringsbetingelser blir de korresponderende 4-(fluorbenzyloksy)benzaldehydene oppnådd i høye utbytter og med svært lavt nivå av C,O-bis-alkylerte urenheter.
(IIIa): 3-F (IVa): 3-F (IIIb): 2-F (IVb): 2-F
Denne nye fluorbenzyleringen av 4-hydroksybenzaldehyd under faseoverføringsbetingelser kan gjøres både i et faststoff/væskesystem, hvori reagensene og fase-overføringskatalysatorene er løst opp i den flytende organiske fasen og faststoff fasen utgjøres av den uorganiske basen eller 4-hydroksybenzaldehyd saltet (eventuelt generert in situ fra 4-hydroksy-benzaldehyd og den uorganiske basen i seg selv), og i et væske/væske organisk/vandig system hvor den uorganiske basen er løst opp i vannfasen.
Et foretrukket system er faststoff/væskesystemet hvori den uorganiske basen foretrukket er valgt fra Na2CO3,K2CO3, KOH, NaOH.
De organiske løsemidlene anvendt i reaksjonen, både i tilfellet væske/væske systemet og faststoff/væskesystemet kan være dialkyl etere slik som for eksempel di-tert-butyl eter, etyl-tert-butyl eter eller aromatiske hydrokarboner slik som for eksempel toluen, etylbenzen, isopropylbenzen og xylener. Alle disse løsemidlene kan enkelt utvinnes ved destillasjon.
Fase-overføringskatalysatorene som anvendes kan være kvaternære ammonium eller fosfonium salter slik som for eksempel tetrabutyl ammonium bromid, tetradecyltrimetyl ammonium bromid, heksadecyltributyl fosfonium bromid, tricaprilylmetyl ammonium klorid (aliquat), metyltrialkyl (C8-C10)ammonium klorid (adogen), tetradecyltrimetyl ammonium bromidet er foretrukket.
I tillegg kan polyetylenglykoler med lav molekylvekt anvendes som faseoverføringskatalysatorer slike som for eksempel PEG-200 (CAS 25322-68-3) eller PEG-400 (CAS 25322-68-3).
Mengden fase-overføringskatalysator som anvendes er mellom 0.02-1 mol per mol 4-hydroksybenzaldehyd, foretrukket mellom 0.1-1 mol per mol 4-hydroksybenzaldehyd hvor, under disse betingelsene, mengden av de C,O-bis-fluorbenzylerte urenhetene kan som resultat være mindre enn 0.03%, foretrukket lik med 0.01% eller mindre i forhold til vekt.
Forholdet mellom alkyleringsmidlene med formel (IIIa) eller (IIIb) og 4-hydroksybenzaldehyd er mellom 0.6 og 1.5, hvor mellom 0.9 og 1.1 er foretrukket.
Reaksjonstemperaturen er mellom 60°C og 160°C, hvor det foretrukne intervallet er mellom 80°C og 120°C.
Reaksjonstiden er generelt mellom 4 og 8 timer.
Reaksjonsutbyttene er svært høye, som regel mer enn 90%.
Reaksjonsproduktiviteten, det vil si konsentrasjonen av reaksjonsproduktene i reaksjonsblandingen er svært høy under de beskrevne reaksjonsbetingelsene, normalt mer eller lik med 25% (vekt/volum).
SYNTESE AV SAFINAMID OG RALFINAMID VED REDUKTIV ALKYLERING AV α-AMINOAMIDER
Teknikkens stand vil foreslå for fagmannen at den reduktive alkyleringen av α-aminoamider med 4-(3- eller 2- fluorbenzyloksy)benzaldehyder ved anvendelse av hydrogen og en heterogen katalysator som et reduksjonsmiddel ikke er egnet for fremstilling av safinamid og ralfinamid på grunn av inkompatibiliteten blant reagensene og sluttproduktene og reduksjonsbetingelsene.
I virkeligheten er det godt kjent hvor enkelt benzaldehyder reduseres til benzyl alkoholer eller til og med til de korresponderende hydrokarbonene, så vel som at det er kjent at betingelsene som anvendes for utføring av en reduktiv alkylering med hydrogen og en heterogen katalysator normalt er de samme betingelsene som anvendes for å bryte bindingene mellom et benzylisk karbonatom og heteroatomer som nitrogen eller oksygen, typen bindinger som er tilstede både i safinamid og ralfinamid og i deres forløpere.
I virkeligheten blir den benzyliske gruppen normalt anvendt som en beskyttende gruppe for fenoler eller aminer (se “Protective Groups in Organisk Synthesis”, T.W.
Greene og P.G.M. Wuts, 3. utg., 1999, John Wiley & Sons, Inc.) på grunn av enkelheten ved deres introduksjon og etterfølgende fjerning ved katalytisk reduksjon.
I den reduktive alkyleringen for å oppnå safinamid og ralfinamid kan man forvente dannelse av mange biprodukter, hvor noen av disse er angitt nedenfor:
Det faktum at safinamid og ralfinamid har blitt oppnådd i svært høye utbytter og renhet ved reduktiv alkylering av L-alaninamid, med 4-(3- eller 2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd, er anvendelsen av hydrogen og en heterogen katalysator som et reduksjonssystem overraskende og et oppfinnerisk aspekt ved denne syntesefremgangsmåten.
Videre er reaksjonsbetingelsene som anvendes i henhold til denne fremgangsmåten enkelt oppnåelige for fremstilling i bulkform.
Den reduktive alkyleringen, gjenstand for foreliggende oppfinnelse, utføres i to trinn: a) dannelse av Schiff base
b) katalytisk reduksjon av Schiff basen.
De to trinnene kan utføres etter hverandre i samme reaktor (en-kolbe reaksjon) enten med eller uten isolering av Schiff basen, i begge tilfeller med høye utbytter.
I tilfellet isolering av Schiff basen muliggjør de eksperimentelle betingelsene som anvendes for dens dannelse å oppnå den isolerte Schiff basen i form av et presipitat i høye utbytter og svært ren form.
Schiff base fremstillingen blir egnet fremstilt i et organisk protisk løsemiddel, som må være inert ovenfor reagensene og produktene og også inert ovenfor reaksjonsbetingelsene til den iminiske dobbeltbindingen, slik som for eksempel en (C1-C5) lavere alkanol, foretrukket metanol, etanol og isopropanol.
Dannelsen av Schiff base må være fullstendig og dette er en relevant faktor for å ha høye utbytter i det etterfølgende katalytiske reduksjonstrinnet. Det er derfor foretrukket å isolere Schiff basene (VIa) og (VIb) før utføring av reduksjonen av den iminiske dobbeltbindingen.
De isolerte imino forbindelsene (VIa) og (VIb) er anvendelige intermediater for fremstilling av safinamid og ralfinamid, respektivt, i henhold til foreliggende oppfinnelse.
Alternativt kan man favorisere iminoalkyleringsreaksjonen fullstendig, ved å operere under slike betingelser som forårsaker presipitasjonen av imino forbindelsene (VIa) og (VIb) og underkaste suspensjonen som inneholder intermediat imino derivatet den katalystiske reduksjonen.
Forholdet mellom L-alaninamid (base eller salt) og 4-(3- eller 2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd kan være 1:1, men også et 10% overskudd av L-alaninamid kan fordelaktig anvendes.
L-alaninamidet kan introduseres enten som en fri base eller som et syreaddisjonssalt derav. Foretrukket blir det introdusert til reaksjonsblandingen som et salt, mest foretrukket som hydroklorid salt, sammen med den støkkiometriske mengden av en base, foretrukket et tertiært amin slik som for eksempel trietylamin eller diisopropyletylamin.
Reaksjonstemperaturen ved fremstilling av Schiff basen er mellom 0°C og 60°C, foretrukket mellom 20°C og 30°C.
Reaksjonstiden er mellom 1 time og 15 timer, foretrukket mellom 4 timer og 6 timer.
Reduksjonen av Schiff base med hydrogen og en heterogen katalysator startes kun når Schiff’s base dannelsen er fullstendig: hvis den starter før blir sekundære reaksjoner viktige, til tider dominerende, med tap i utbytter og renhet. En av disse sekundære reaksjonene, den mer viktige, forårsaker dannelse av benzyliske alkoholer ved reduksjon av karbonyl gruppen til (fluorbenzyloksy)benzaldehydet som velges.
De foretrukne heterogene katalysatorene er nikkel, rhodium, palladium eller platina katalysatorer, på et inert bærermateriale slik som for eksempel karbon, alumina og silica, foretrukket karbon og alumina, og anvendes i en mengde på mellom 2% og 20% av 4-(3- eller 2-fluorbenzyloksy)benzaldehydet, foretrukket mellom 5% og 10%.
Platina og palladium katalysatorene er de mest foretrukne.
Platina på aktivt karbon gir særlig svært gode resultater både når det gjelder utbytter, som er nær kvantitative, og selektivitet, i det kun den iminiske dobbeltbindingen blir redusert mens bindingen mellom det benzyliske karbonatomet og heteroatomene er uforandret. Det ble funnet at safinamid og ralfinamid er overraskende stabile under reduksjonsreaksjonsbetingelsene og dette er et viktig element i industriell fremstilling av store mengder av safinamid eller ralfinamid, i det en uheldig reaksjonstid forlengelse vil ikke skade sluttproduktene.
De beste resultatene oppnås med våt 5% Pt/C (50% H2O) og særlig med 5% Pt på karbonpulver fra Engelhard S.r.l., Roma, Italia.
Hydrogeneringsreaksjonen blir normalt utført under et hydrogentrykk på mellom 1 bar og 10 bar, foretrukket mellom 3 bar og 6 bar og ved temperatur på mellom 10°C og 70°C, foretrukket mellom 25°C og 40°C.
Reduksjonstidene kan variere fra 1 time til 20 timer, i henhold til temperatur, trykk, konsentrasjon, turbulens, etc., hvor alle disse faktorene er godt kjente for fagmannen.
De beste resultatene oppnås med reaksjonstider på 4-6 timer.
Ved slutten av reaksjonen blir katalysatoren utvunnet ved filtrering og gjenanvendt eller regenerert: reaksjonsløsemiddelet destilleres under redusert trykk, residuet løses i vann ikke-blandbart organisk løsemiddel og de uorganiske saltene fjernes ved vasking med vann.
Det endelige safinamidet eller ralfinamidet utvinnes ved fjerning ved destillasjon av det organiske løsemiddelet hvori de er oppløst.
Rå safinamidet eller ralfinamidet blir deretter renset ved krystallisering.
Krystalliseringen blir foretrukket utført ved tilsetning til en løsning av den respektive urene forbindelsen med formel (Ia) eller (Ib) i inert organisk løsemiddel et blandbart inert organisk ikke-løsemiddel. Det organiske inerte løsemiddelet er foretrukket valgt fra aromatiske hydrokarboner slik som benzen, toluen, dimetyl benzen og etylbenzen og lavere alkyl acetater og, mer foretrukket, er det etylacetat. Det blandbare inerte organiske ikke-løsemiddelet er foretrukket valgt fra de lavere alifatiske hydrokarbonene, slik som heksan og heptan, og cykloheksan, mere foretrukket n-heksan.
Basene blir deretter omdannet til de ønskede saltene i henhold til kjente fremgangsmåter, særlig blir de omdannet til metansulfonat salt, som har de fysiske/kjemiske egenskapene (stabilitet, granulometri, strømbarbet etc.) egnet for den etterfølgende formuleringen til et farmasøytisk preparat for anvendelse som medikament.
EKSEMPEL 1
Fremstilling av renset 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb) ved fase overføringskatalyse
En blanding av 2-fluorbenzyl klorid (5 kg, 34.58 mol), 4-hydroksy-benzaldehyd (3.9 kg, 31.94 mol), kalium karbonat (4.3 kg, 31.11 mol) og tetradecyl trimetylammonium bromid (0.41 kg, 1.22 mol) i toluen (9.5 kg) blir sakte brakt, under røring og under nitrogen, til refluks temperatur og reflukseres i 6 timer.
Løsningen blir deretter konsentrert ved rom trykk, 3 kg toluen tilsettes og destilleres av og denne fremgangsmåten gjentas ytterligere en gang.
Den heterogene blandingen blir deretter avkjølt til romtemperatur og det faste stoffet elimineres ved filtrering. Rest løsemiddelet blir deretter eliminert under redusert trykk og til det oljeaktige residuet blir 1.2 kg toluen tilsatt. Blandingen blir varmet opp til cirka 40°C og såes med noen få gram ren 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd.
Den heterogene blandingen røres i 15 minutter ved 35-40°C og deretter følger tilsetning av n-heksan (9 kg) ved denne temperaturen, i løpet av 30 minutter. Etter avkjøling til 0-5°C og røring i ytterligere en time ved denne temperaturen blir det faste stoffet samlet opp ved filtrering og tørket under redusert trykk som gir 6.5 kg (87.6% utbytte) av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd; s.m.p. 56.7°C (DSC, 5°C/min).
Den ovenfor angitte reaksjonen gjentas på en 1:100 skala ved anvendelse av 39 g (0.319 mol) 4-hydroksybenzaldehyd som utgangsmateriale og ved å følge den ovenfor beskrevne fremgangsmåten, med unntak av at, etter eliminering av reaksjonsløsemiddelet og tilsetning av toluen til det oljeaktige residuet, blir den oppnådde blandingen varmet opp til cirka 30-35 (istedenfor 40°C) og, etter såing med en liten mengde ren 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd, blir den heterogene blandingen rørt i 15 minutter ved 30°C (istedenfor 35-40°C) før tilsetning av n-heksan.
Utbyttet er 66,8 g (90%) av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd, s.m.p. 56.7ºC (DSC, 5ºC/min), som har en GC renhet på 92.2 (areal %, se Eksempel 16A) og et 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd innhold på 0.01% i forhold til vekt bestemt med GC (se Eksempel 16B).
(*) Utbyttene som rapporteres i dette og i etterfølgende Eksempler, når ikke annet er spesifisert, er tiltenkt som molare utbytter.
1.1 Ytterligere rensing av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd ved krystallisasjon
Et kilogram av produktet fremstilt i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 1 løses i 2 kg diisopropyl eter ved refluks under røring.
Løsningen avkjøles til 50-55°C i løpet av 10-15 minutter og såes med noen få gram ren 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd.
Suspensjonen avkjøles til 10-15°C i løpet av 45-60 minutter og røres i ytterligere en time.
Presipitatet blir til slutt samlet opp ved filtrering, vasket med kald diisopropyl eter (0.2 kg) og tørkes under redusert trykk som gir 0.93 kg 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd med GC renhet på 99.8 (areal %, se Eksempel 16A) og et innhold av 3-(2-fluorbenzyl) 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (Vb) på 0.005 vekt% bestemt med GC i henhold til Eksempel 16B.
1.2 Fremstilling av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb) ved fase overføringskatalyse (PTC) ved anvendelse av forskjellige katalysatorer.
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd fremstilles ved alkylering av 4-hydroksybenzaldehyd (0.39 g) med 2-fluorbenzylklorid ved å følge samme fremgangsmåte som i Eksempel 1, men ved anvendelse av tre forskjellige fase overføringskatalysatorer.
Resultatene er rapportert i følgende Tabell 4
TABELL 4
* Aliquat 336:
tricaprylylmetylammonium klorid
** %Vb: innhold av 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (vekt%).
Innholdet av Vb bestemmes med GC i henhold til Eksempel 16B.
1.3 Fremstilling av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb) ved fase overføringskatalyse (PTC) i xylen.
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd fremstilles i 86.6% utbytte med et innhold av 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd på 0.02% i forhold til vekt bestemt med GC (se Eksempel 16B) ved omsetning av 4-hydroksybenzaldehyd (0.39 g) med 2-fluorbenzylklorid i henhold til samme fremgangsmåte som i Eksempel 1, men ved å erstatte toluen med xylen som løsemiddelet.
1.4 Fremstilling av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb) ved fase overføringskatalyse ved anvendelse av kalium hydroksid som en base
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd fremstilles i 86.7% utbytte med et innhold av 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd på 0.51% i forhold til vekt bestemt med GC (se Eksempel 16B) ved omsetning av 4-hydroksybenzaldehyd (0.39 g) med 2-fluorbenzylklorid, i henhold til samme fremgangsmåte som i Eksempel 1, med ved anvendelse av kalium hydroksid (0.35 mol) istedenfor kalium karbonat.
Dette produktet kan ytterligere renses ved krystallisering i henhold til Eksempel 1.1.
1.5 Fremstilling av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb) ved fase overføringskatalyse ved anvendelse av 2-fluorbenzyl bromid
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd fremstilles i 88.6% utbytte med et innhold av 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd på 0.07% i forhold til vekt bestemt med GC (se Eksempel 16B) ved omsetning av 4-hydroksybenzaldehyd (15.6 g) med 2-fluorbenzylbromid istedenfor 2-fluorbenzylklorid i henhold til samme fremgangsmåte som i Eksempel 1.
EKSEMPEL 2
Fremstilling av (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (ralfinamid, Ib) med høy renhetsgrad (en-kolbe reaksjon)
En autoklav tilsettes 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (2.0 kg, 8.69 mol) fremstilt i henhold til Eksempel 1, og deretter blir en løsning fremstilt ved siden av L-alaninamid hydroklorid (1.2 kg, 9.63 mol) og trietylamin (0.97 kg, 9.63 mol) i metanol (9.5 kg) tilsatt til blandingen.
Blandingen røres ved 20-25°C i cirka 1 time og deretter, etter såing med noen få gram (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid, blir røringen fortsatt i ytterligere 15 minutter. Til denne rørte heterogene blandingen blir metanol (1.6 kg) og våt (50% H2O) Pt/C 5% (Engelhard cod.Escat 22, Engelhard S.r.l., Roma, Italia) (0.28 kg) deretter tilsatt ved 20-25°C.
Luften fjernes fra autoklaven med nitrogen og deretter blir hydrogen introdusert ved 5.0 bar og trykket holdes ved denne verdien i løpet av hydrogeneringsforløpet.
Etter 5 timer ved 30-35°C blir reaksjonsblandingen avkjølt til 15°C og, etter tilsetning av metanol (4.8 kg) og oppvarming til 40-45°C blir suspensjonen filtrert og det faste stoffet vasket med metanol (1.6 kg).
Løsemiddelet elimineres under redusert trykk ved cirka 30°C og residuet tilsettes vann (5L) ved 20-25°C med avkjøling og under røring, i det vann tilsetningen er en eksoterm prosess. Den heterogene blandingen blir ytterligere avkjølt til 15-20°C, holdes ved denne temperaturen i 1 time og filtreres deretter. Det oppsamlede faste stoffet vaskes med avkjølt vann (4L) og tørkes under redusert trykk som gir 2.23 kg (85.0% utbytte) av ralfinamid med en HPLC renhet på 98.8 (areal %) bestemt i henhold til fremgangsmåten i Eksempel 17A og et C,O-dialkylert (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid innhold på 0.01 vekt% bestemt med HPLC, i henhold til fremgangsmåten i Eksempel 17B.
2.1 Fremstilling av (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino] propanamid (Ib) med høy renhetsgrad ved anvendelse av en palladium katalysator
En blanding av 5 g 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd, fremstilt i henhold til Eksempel 1 og den korresponderende mengden L-alaninamid hydroklorid og trietylamin hydrogeneres i henhold til samme fremgangsmåte som i Eksempel 2, med ved anvendelse av våt (50% H2O) Pd/C 10% istedenfor våt (50% H2O) Pt/C 5% som gir (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ib) i 70% utbytte.
EKSEMPEL 3
Fremstilling av (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat (ralfinamid metansulfonat, Id) med høy renhetsgrad
Ralfinamid (2.8 kg, 9.26 mol), fremstilt som beskrevet i Eksempel 2, løses i isopropanol (19.5 kg) og holdes ved 65-70°C og røres under inert atmosfære.
Etter behandling med kull (150 g) og filtrering blir løsningen sådd med ren ralfinamid metansulfonat og metansulfonsyre (900 g, 9.36 mol) tilsettes i løpet av 30 minutter, under røring, og ved en temperatur på 50-55°C. Suspensjonen avkjøles deretter til 15-20°C i løpet av 2 timer og røring fortsetter i ytterligere en time. Det faste stoffet blir til slutt samlet opp ved filtrering og tørkes under redusert trykk som gir 3.59 kg (97.3% utbytte) av ralfinamid metansulfonat.
HPLC renheten til det oppnådde produktet er 99.8 (areal %, se Eksempel 17A) og innholdet av C,O-dialkylert (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat er 0.005% i forhold til (se Eksempel 17B); s.m.p. 240.6°C med DSC (5°C/min).
Den enantiomeriske renheten til ralfinamid metansulfonatet bestemt med en kiral HPLC kolonne er høyere enn 99.8 (areal %, se Eksempel 18).
EKSEMPEL 4
Fremstilling av renset 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) i etanol løsning
Til en blanding av 4-hydroksybenzaldehyd (1.52 kg, 12.45 mol), kalium karbonat (1.72 kg, 12.45 mol), kalium jodid (0.2 kg, 1.20 mol) i etanol (13.0 kg) blir 1.8 kg 3-fluorbenzylklorid (1.80 kg, 12.45 mol) tilsatt under røring ved romtemperatur.
Blandingen blir gradvis varmet opp til refluks og holdes deretter ved den temperaturen i 6 timer.
Reaksjonsblandingen blir deretter avkjølt til 25°C, suspensjonen filtreres og det faste stoffet vaskes med etanol (1.0 kg); etanol løsningene kombineres og deretter konsentreres ved redusert trykk til et residue på cirka 3.5 kg oppnås.
Til dette residuet blir toluen (5.0 kg) og vann (1.7 kg) tilsatt, løsemiddelblandingen blir rørt kraftig i 30 minutter og, etter separasjon av vannfasen, blir det organiske sjiktet fordampet til tørrhet under redusert trykk som gir uren 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd.
Til dette produktet løst i 2 kg toluen blir et frø av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd tilsatt under røring ved 20-25°C og deretter blir n-heksan (3.8 kg) tilsatt i løpet av 30 minutter og blandingen avkjøles til 0°C under røring.
Etter 2 timer blir det faste stoffet filtrert og vasket med n-heksan (1.3 kg). Etter tørking blir 2.6 kg (90.7% utbytte) av det ønskede produktet oppnådd, med en gass kromatografisk renhet på 99.9 (areal %, se Eksempel 16A) og et 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd innhold på 0.005 vekt% bestemt med G.C. (areal %, se Eksempel 16B); s.m.p. 43.1°C med DSC 5°C/min.
EKSEMPEL 5
Fremstilling av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) ved fase overføringskatalyse
En blanding av 3-fluorbenzylklorid (5 kg, 34.58 mol), 4-hydroksy-benzaldehyd (3.9 kg, 31.94 mol), kalium karbonat (4.3 kg, 31.11 mol) og tetradecyl trimetylammonium bromid (0.41 kg, 1.22 mol) i toluen (13.5 kg) bringes langsomt til refluks temperatur under røring og under nitrogen atmosfære og reflukseres deretter i 6 timer.
Løsningen konsentreres ved romtemperatur og deretter blir 3 kg toluen tilsatt og destilleres fra. Denne fremgangsmåten gjentas ytterligere en gang.
Den heterogene blandingen blir deretter avkjølt til romtemperatur og det faste stoffet elimineres ved filtrering. Rest løsemiddelet elimineres under redusert trykk og deretter blir 1.2 kg toluen tilsatt til det oljeaktige residuet. Blandingen røres ved 20-25°C og såes med noen få gram ren 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd, og deretter følger tilsetning av n-heksan (9 kg) ved denne temperaturen, i løpet av 30 minutter.
Etter avkjøling til 0-5°C og røring i ytterligere en time ved denne temperaturen blir det faste stoffet samlet opp ved filtrering og tørket under redusert trykk som gir 6.5 kg (85% utbytte, GC renhet 99.9 (areal %, se Eksempel 16A) og et 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd innhold på 0.008% i forhold til vekt (se Eksempel 16B).
5.1 Ytterligere rensing av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) ved
krystallisering
Et kilogram 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd fremstilt i henhold til Eksempel 5, løses i 2 kg diisopropyl eter ved refluks under røring.
Løsningen avkjøles til 50-55°C i løpet av 10-15 minutter og såes med noen få gram ren 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd.
Suspensjonen avkjøles til 10-15°C i løpet av 45-60 minutter og røres i ytterligere en time.
Presipitatet blir til slutt samlet opp ved filtrering, vasket med kald diisopropyl eter (0.2 kg) og tørkes under redusert trykk som gir 0.95 kg 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd med GC renhet på 99.9 (areal %, se Eksempel 16A) og et innhold av 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd lavere enn 0.005% i forhold til vekt bestemt med GC (se Eksempel 16B).
5.2 Fremstilling av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) ved fase overføringskatalyse ved anvendelse av 3-fluorbenzyl bromid
4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd fremstilles i 86.1% utbytte med et innhold av 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd på 0.07% i forhold til vekt bestemt med GC (se Eksempel 16B) ved omsetning av 4-hydroksybenzaldehyd (15.6 g) med 3-fluorbenzyl bromid i henhold til samme fremgangsmåte som i Eksempel 5, men ved anvendelse av 3-fluorbenzyl bromid istedenfor 3-fluorbenzylklorid.
Det således oppnådde 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehydet renses i henhold til Eksempel 5.1 for å gi tittelproduktet i 97.3% utbytte med et innhold av 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd på 0.07 vekt% bestemt med GC (se Eksempel 16B).
5.3 Fremstilling av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) ved fase overføringskatalyse ved anvendelse av 3-fluorbenzyl metansulfonat
4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd fremstilles i 97.5% utbytte med et innhold av 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd på 0.45% i forhold til vekt, bestemt med GC (se Eksempel 16B), ved omsetning av 4-hydroksybenzaldehyd (15.6 g) med 3-fluorbenzyl metansulfonat istedenfor 3-fluorbenzylklorid i henhold til samme fremgangsmåte som i Eksempel 5. Dette produktet blir ytterligere renset i henhold til fremgangsmåten i Eksempel 5.1.
EKSEMPEL 6
Fremstilling av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (safinamid, Ia) med høy renhetsgrad (en-kolbe reaksjon)
En autoklav tilsettes 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (2.0 kg, 8.69 mol) fremstilt som i Eksempel 4, og deretter blir en løsning, fremstilt annet sted, av L-alaninamid hydroklorid (1.2 kg, 9.63 mol) og trietylamin (0.97 kg, 9.63 mol) i metanol (7.1 kg) tilsatt til blandingen.
Blandingen røres ved 20-25°C i 1 time og, etter såing med få gram (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid, fortsetter røring i ytterligere 15 minutter. Til den rørte heterogene blandingen blir metanol (1.8 kg) og våt (50% H2O) Pt/C 5% (Engelhard cod. Escat 22)(0.3 kg) deretter tilsatt ved 20-25°C.
Luften fjernes fra autoklaven med nitrogen og deretter blir hydrogen introdusert ved 5.0 bar.
Etter 5 timer ved 30-35°C blir blandingen avkjølt til 15°C, metanol (4.8 kg) tilsettes og blandingen varmes opp til 40-45°C; til slutt blir det faste stoffet filtrert ut og vasket med metanol (1.6 kg).
Løsemiddelet elimineres under redusert trykk ved cirka 30°C og deretter blir en blanding av etylacetat (23.0 kg) og vann (18.0 kg) tilsatt til residuet. Etter røring i 15 minutter blir vannfasen separert og ekstrahert med etylacetat (7.0 kg). De oppsamlede organiske fasene konsentreres til et residue på cirka 6.0 kg oppnås. Til dette residuet blir n-heptan (10.8 kg) tilsatt og blandingen røres ved 20°C i cirka 2 timer. Det faste stoffet blir deretter samlet opp ved filtrering og vasket med n-heptan.
Etter tørking av det faste stoffet under redusert trykk blir 2.41 kg (91.8% utbytte) av tittelforbindelsen oppnådd med en HPLC renhet på 98.4 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av C,O-dibenzylert (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid) på 0.005 vekt% (se Eksempel 17B).
6.1 Fremstilling av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia) med høy grad av renhet ved anvendelse av en Pd katalysator
(S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (5 g) under nærvær av de korresponderende mengdene L-alaninamid hydroklorid og trietylamin hydrogeneres i henhold til samme fremgangsmåte som i Eksempel 6, med ved anvendelse av våt (50% H2O) Pd/C 10%, istedenfor våt (50% H2O) Pt/C 5%, som gir Ia i 72% utbytte.
6.2 Fremstilling av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia) med høy grad av renhet ved hydrogenering ved 1 bar
En blanding av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd, L-alaninamid hydroklorid og trietylamin hydrogeneres i henhold til samme fremgangsmåte som i Eksempel 6, men ved 1 bar/H2istedenfor 5 bar/H2.
Utbyttet av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid er 90% med en HPLC renhet på 98.7 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid på 0.005 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
6.3 Fremstilling av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia) med høy renhetsgrad (en-kolbe reaksjon) ved anvendelse av L-alaninamid base
(S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy]benzaldehyd (10 g) omsettes i henhold til samme fremgangsmåte som i Eksempel 6, med ved anvendelse av L-alaninamid base, istedenfor dets hydroklorid og trietylamin. Utbyttet av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid er 92% med HPLC renhet på 99.7 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid lavere enn 0.005% i forhold til vekt bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
EKSEMPEL 7
Fremstilling av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat (safinamid metansulfonat, Ic) med høy grad av renhet
Safinamid (2.41 kg, 7.97 mol), fremstilt som beskrevet i Eksempel 6, løses i etylacetat (56.5 kg) ved 65°C og avfarges med kull (100 g).
Etter filtrering blir løsningen rørt og sådd med noen få gram safinamid metansulfonat og, etter 15 minutter, blir metansulfonsyre (850 g, 8.84 mol) tilsatt i løpet av 30 minutter, ved en temperatur på 50-55°C. Suspensjonen avkjøles under røring til 20-25°C i løpet av 2 timer og røres i ytterligere en time. Presipitatet blir til slutt samlet opp ved filtrering og tørket under redusert trykk som gir 2.83 kg (89.1% utbytte) av safinamid metansulfonat.
Innholdet av urenhet (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat (IIc) målt med HPLC (se Eksempel 17B) er på 0.005 vekt%. Tittelforbindelsen har s.m.p.216.8°C med DSC (5°C/min).
Den enantiomere renheten, målt med en kiral HPLC kolonne, er over 99.9 (areal %, se Eksempel 19).
<1>H-NMR (D2O) (Bruker AV300) δ (ppm, med hensyn til H2O ved 4.7 ppm): 1.43 (3H, d, J = 7 Hz, CH3); 2.66 (3H, s, CH3SO3H); 3.87 (1H, q, J = 7 Hz, H-2); 3.97 (2H, bs, CH2NR); 4.89 (2H, s, CH2OR); 6.88 og 7.23 (4H, AA’XX’ aromatisk p-disubstituert system; 6.90 -7.22 (4H, aromatisk H).
<13>C-NMR (D2O) (Bruker AV300) δppm:� 15.68 (CH3); 38.27 (CH3SO3H); 48.99 (CH2NR); 54.81 (CH); 69.00 (OCH2); 114.15 (d, JC-F= 21 Hz, aromatisk CH); 114.76 (d, JC-F= 20 Hz, aromatisk CH); 115.38 (aromatisk CH); 123.06 (d, JC-F= 24 Hz, aromatisk CH); 123.24; 130.29 (d, JC-F= 6 Hz, aromatisk CH); 131.54 (aromatisk CH); 138.76 (d, JC-F= 7 Hz, aromatisk CH); 158.52; 162.89 (d, JC-F= 245 Hz, C-F); 171.92 (CO).
EKSEMPEL 8
Fremstilling av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (safinamid, Ia) med høy renhetsgrad, med isolering av intermediat Schiff basen (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid (VIa)
a) (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid (VIa)
Til en suspensjon av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (60.0 g 0.26 mol), fremstilt som i Eksempel 5 og L-alaninamid hydroklorid (35.7 g 0.29 mol) i metanol (280 mL) ble trietylamin (29.1 g, 0.29 mol) tilsatt ved romtemperatur med røring under nitrogen atmosfære. Røring opprettholdes i en ytterligere time.
Løsningen blir deretter sådd med noen få gram (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid, temperaturen reduseres til 5-10°C og røring fortsetter i 2 timer.
Det faste stoffet samles opp ved filtrering og vaskes med metanol ved 0°C. Etter tørking av det ved redusert trykk blir 57.3 g (73.2% utbytte) av tittelforbindelsen oppnådd med s.m.p. 112.0°C med DSC (5°C/min).
<1>H-NMR (DMSO-d6) (Bruker AV300) δ (ppm, med hensyn til TMS ved 2.55 ppm; DMSO løsemiddel ved 3.35 ppm): 1.31 (3H, d, J = 7 Hz, CH3 ); 3.86 (1H, q, J = 7 Hz, H-2); 5.18 (2H, s, CH2OR); 7.08 og 7.79 (4H, AA’XX’ p-disubstituert aromatisk system); 7.10-7.50 (4H, m, aromatisk H ); 8.27 (1H, s, CH=NR).
<13>C-NMR (DMSO-d6) (Bruker AV300) δ (ppm): 20.5 (CH3); 67.6 (CH); 68.4 (OCH2); 114.1 e 114.4 (d, JC-F = 21 Hz, aromatisk) CH;114.5 e 114.8 (d, JC-F = 21 Hz; aromatisk CH; 114.8 (aromatisk CH); 123.5 (d, JC-F = 2 Hz, aromatisk CH); 129.0 og 129.9 (aromatisk CH ); 130.4 og 130.5 (d, JCF = 7 Hz, aromatisk CH ); 139.6 og 139.7 (d, JC-F = 6 Hz aromatisk kvarternær C ); 160.2; 160.5 og 163.8 (d, JC-F = 245 Hz C-F); 160.6 (CH=N); 174.8 (CO).
b) (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia)
En autoklav tilsettes (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid (16.0 g; 0.053 mol), fremstilt som beskrevet ovenfor, og våt (50% H2O) Pt/C 5% (1.7 kg:
Engelhard S.r.l., Roma, Italia) og metanol (90 mL) tilsettes til blandingen. Luft blir fjernet fra autoklaven med nitrogen og deretter blir hydrogen introdusert ved 5.0 bar. Reaksjonsblandingen holdes ved 5.0 bar og ved 35°C i 1 time. Etter avkjøling til romtemperatur og eliminering av katalysatoren ved filtrering ble løsemiddelet destillert av under redusert trykk til et residue på cirka 30 g oppnådd. Til dette residuet ble en blanding av etylacetat (150 mL) og H2O (110 mL) tilsatt og den heterogene blandingen ble varmet opp til 40°C, til to klare faser ble oppnådd. Disse to fasene ble separert og vannsjiktet ble ekstrahert med 50 mL etylacetat ved 40°C. De organiske fasene ble samlet opp og fordampet til tørrhet. Fremgangsmåten ble gjentatt to ganger ved tilsetning hver gang av 90 mL etylacetat for å gjøre produktet vannfritt. 95 mL n-heptan ble deretter tilsatt sakte og under røring til residuet. Blandingen ble deretter rørt i 3 timer ved 20°C. Det faste stoffet som ble dannet ble samlet opp ved filtrering, vasket med n-hetpan (15 mL) og tørket under redusert trykk som ga 15.2 g (94.8% utbytte) av safinamid med en HPLC renhet på 99.8 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid lavere enn 0.005% i forhold til vekt målt med HPLC (se Eksempel 17B).
EKSEMPEL 9
Fremstilling av (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (ralfinamid, Ib) med høy grad av renhet, med isolering av intermediat Schiff basen (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid (VIb)
a) (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid (VIb)
(S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid fremstilles i 88% utbytte, s.m.p. 121°C (kapillær), ved å følge samme fremgangsmåte som Eksempel 8, trinn a), men ved anvendelse av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd istedenfor 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd.
<1>H-NMR: (CDCl3, 300 MHz, 298K) δ (ppm, med hensyn til TMS): 1.46 (3H, d, J= 7.0 Hz, CH3); 3.91 (1H, q, J= 7.0 Hz, CH-CO); 5,17 (2H, s, O-CH2); 7,02 (2H, d, J=8,9 Hz aromatisk H orto til O-CH2); 7.09 (1H, ddd, JH-F= 9,78 Hz Jorto= 8,55 Hz Jmeta= 1,23 Hz aromatisk H orto til F); 7,15 (1H, dt, Jorto= 7,35 Hz Jmeta= 1,23 Hz aromatisk H para til F); 7,27-7,40 (1H, m, aromatisk H para til CH2); 7,48 (1H, dt, Jorto= JH-F= 7,35 Hz Jmeta= 1,53 Hz aromatisk H orto til CH2); 7,71 (2H, d, J=8,9 Hz aromatisk H orto til CH=N); 8,17 (1H, s, C=N).
<13>C-NMR: (CDC13, 75.4 MHz, 298K) δ (ppm): 21.4 (CH3); 63.8 (OCH2); 68.4 (H2NCOCH); 115.0 (d, JC-F= 22.4 Hz, aromatisk CH), 115.5 (d, JC-F= 20.7 Hz, aromatisk CH); 123.7 (d, JC-F= 14.4 Hz, kvarternær aromatisk C); 124.5 (bd, aromatisk CH ); 129.0 (kvarternær aromatisk C); 129.8 (bd, aromatisk CH); 130.1 (bd, 2 aromatisk CH); 160.5 (d, JC-F= 246.4 Hz, kvarternær aromatisk C); 161.1 (aromatisk C-O); 161.1 (C=N); 176.9 (CONH2).
b) (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ib) (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid fremstilles i et 93% utbytte fra (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylidenamino]propanamid ved å følge samme fremgangsmåte som i Eksempel 8, trinn b). Innholdet av (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid er 0.02% i forhold til vekt bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
EKSEMPEL 10
Fremstilling av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat (IIc)
a) 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (Va)
I en 4L rundkolbe holdt under nitrogen atmosfære, ble 4-hydroksybenzaldehyd (400 g, 3.28 mol), kalium karbonat (453 g, 3.28 mol), toluen (2L) og 3-fluorbenzylklorid (1400 g, 9.68 mol) tilsatt i sekvens og blandingen ble refluksert under røring i 5 dager. På dette tidspunktet avdekket en GC analyse at reaksjonsblandingen inneholdt 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd og 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd i et forhold på 91.4:8.6 (areal/areal, se Eksempel 16A).
Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og deretter ble 2L vann tilsatt under røring. Den organiske fasen ble separert og løsemiddelet destillert under redusert trykk (20 mmHg) ved 35°C til ikke mer løsemiddel passerer over. Trykket blir deretter redusert til 3 mmHg og ekstern temperaturen heves opp til 300°C og fraksjonen som destillerer mellom 255°C og 265°C, (40.6 g), samlet opp.
En GC analyse viser et areal/areal forhold av C,O-dibenzylert derivat (Va) av tittelforbindelsen vs. det monoalkylerte (IVa) på 99.6:0.4 (areal/areal, se Eksempel 16A).
<1>H-NMR (CDCl3) (Bruker AV300) δ (ppm, med hensyn til TMS): 4.05 (2H, s, CH2); 5.13 (2H, s, OCH2); 6.85-7.40 (9H, m, aromatisk H); 7.73-7.79 (2H, m, aromatisk H orto til C=O); 9.88 (s, CHO).
<13>C-NMR (CDCl3) (Bruker AV300) δ (ppm): 36.1 (CH2); 69.4 (CH2O); 111.4 (aromatisk CH );112.9 og 113.2 (d, JC-F = 20 Hz, aromatisk CH ), 113.9 og 114.2 (d, JC-F = 22 Hz, aromatisk CH ); 114.9 og 115.0 (d, JC-F = 21 Hz, aromatisk CH ; 115.7 e 115.9 (d, JC-F = 25 Hz aromatisk CH ); 122.6 (d, JC-F = 3 Hz, aromatisk CH ); 124.4 (d, JC-F = 3 Hz, aromatisk CH ); 129.6 og 129.8 (d, JC-F = 8 Hz, aromatisk CH); (d, JC-F = 7 Hz, kvarternær aromatisk C); 129.9 (C kvarternær aromatisk C); 130.0 (kvarternær aromatisk C); 130.1 og 130.2 (d, JC-F 7Hz, CH aromatisk); 131.2 (aromatisk CH); 131.5 ( aromatisk CH); 138.3 (d, JC-F = 7 Hz, kvarternær aromatisk C); 142.3 (d, JC-F = 7 Hz, kvarternær aromatisk C); 161.0, 161.2 og 164.4 (d, JC-F = 240, 2 C-F overlappende); 190.8 (CHO).
b) (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (IIa) Til 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (35.6 g, 0.105 mol) i en 500 mL kolbe ble det tilsatt en løsning på forhånd fremstilt ved forsiktig tilsetning under røring av trietylamin (12 g, 0.119 mol) til en 170 mL metanol løsning av L-alaninamid hydroklorid (14.8 g, 0.119 mol) ved romtemperatur.
Denne reaksjonsblandingen røres i 1 time ved romtemperatur og blir deretter overført til en 1.8L autoklav og tilsettes 3.4 g våt (50% H2O) Pt/C 5%.
Luften fjernes fra autoklaven med nitrogen og deretter blir hydrogen introdusert ved 5.0 bar.
Reaksjonen utføres ved en temperatur på 35°C i 3-5 timer.
Etter avkjøling til romtemperatur og eliminering av katalysatoren ved filtrering blir løsemiddelet destillert fra under redusert trykk til et residue på cirka 65 g oppnås. Til dette residuet blir en blanding av etylacetat (340 mL) og vann (250 mL) tilsatt og den heterogene blandingen varmes opp til 40°C og holdes ved denne temperaturen uten røring, til to klare faser oppnås. De to fasene separeres og den organiske destilleres under redusert trykk, til et residue på cirka 50 g oppnås.
Dette residue løses opp i 220 mL etylacetat og løsemiddelet destilleres fra under redusert trykk med en ekstern temperatur på 40°C. Denne operasjonen gjentas to ganger og tittelforbindelsen oppnås som fast residue.
c) (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat (IIc)
I en 2L glass reaktor blir 42.4 g (0.103 mol) (S)-3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid base løst i 950 mL etylacetat.
Løsningen varmes opp under røring til 50-55°C og holdes ved denne temperaturen i en time. Til denne løsningen blir 14.5 g (0.15 mol) metansulfonsyre tilsatt i løpet av 20 minutter og temperaturen reduseres til 20°C i løpet av 90 minutter. Etter 30 minutter blir det faste stoffet samlet opp ved filtrering, tørket ved 50°C under redusert trykk og deretter krystallisert fra metanol (metanol:produkt 1:5 i forhold til vekt) som gir 25.1 g (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat, s.m.p.181°C (kapillær).
<1>H-NMR (DMSO-d6) (Bruker AV300) δ (ppm, med hensyn til TMS): 1.44 (3H, d, J = 7Hz, CH3); 2,35 (3H, s, CH3SO3); 3,81 (1H, q, J = 7 Hz, H-2), 3.99 (2H, bs, CH2benzylic); 4.02 (2H, AB system, CH2N-); 5.17 (2H, s, CH2OR); 6.98-7.63 (11H, m, aromatisk H); 7.62 og 7.75 (2H, bs, NH2amid ); 9.02 (2H, bred, NH2<+>).
<13>C-NMR (DMSO-d6) (Bruker AV300) δ (ppm): 15.9 (CH3); 35.5 (CH2); 39.7 (CH3SO3H); 48.1 (CH2NR); 54.4(CH); 68.4(OCH2); 112.2 (aromatisk CH); 112.7 (d, JC-F= 22Hz, aromatisk CH); 113.8 (d, JC-F= 22Hz, aromatisk CH); 114.5 (d, JC-F= 22 Hz, aromatisk CH); 115.2 (d, JC-F= 22Hz, aromatisk CH); 123.2 (aromatisk CH); 123.8; 124.6 (aromatisk CH); 128.7 og 130.0 (d, JHC-F= 6Hz, aromatisk CH); 130.04 (aromatisk CH); 130.3 (d, JC-F= 6Hz, aromatisk CH); 132.6 (aromatisk CH); 139.8 (d, JC-F= 7Hz); 143.4 (d, JC-F= 7 Hz); 158.1, 160.5 og 163.7 (d, JC-F= 240, C-F); 160.6 og 163.8 (d, JC-F= 240, C-F); 170.5 (CON).
En prøve (90 mg) av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (IIa) isoleres også ved preparativ HPLC fra 200 g safinamid metansulfonat (Ic) fremstilt i henhold til J. Med. Chem., 1998, 41, 579, fremgangsmåte A, som inneholder den, som metansulfonat (IIc), i 0.12 vekt%.
Separasjonen utføres, i to trinn (Trinn 1 og Trinn 2), i henhold til følgende skjema: Isolering av IIa ved preparativ HPLC av safinamid metansulfonat (Ic) kontaminert med 0.12 vekt% IIc
Trinn 1
Formålet med det første trinnet er å isolere et urent produkt anriket i IIa/TFA (trifluoreddiksyre syre). Preparativ HPLC betingelser er rapportert nedenfor:
Preparative HPLC betingelser:
Instrument: Waters Delta Prep 4000 (resiprok pumpe, gradient kontrollerer med lavtrykksblander)
Radial kompresjon modul prep LC base (Waters)
Jasco 7125 UV-variabel detektor, o.p.0.2 mm
Merk D2000 printer-plotter
Kolonne: Delta Pak C18, 15 μm, 40x100mm (Waters)
Eluent A: 70/30, vann/acetonitril 0.1% TFA
Eluent B: 30/70, vann/acetonitril 0.1% TFA
Strømningshastighet: 27.0 ml/min
Gradient: 40 min, isokratisk 100% A, deretter til 100% B i løpet av 1 minutt Deteksjon: UV 227 nm
Injeksjon: 5 g i 50 ml vann (med pumpe innløpsledning D).
Trinn 2
Dette trinnet er nødvendig for å eluminere TFA fra IIa/TFA og for ytterligere å rense IIa.
IIa/TFA kromatograferes ved anvendelse av de preparative HPLC betingelsene gitt nedenfor.
Fraksjon 4 og 5 kombineres sammen og fordampes ved 40°C under vakuum til fullstendig fjerning av acetonitril. Rest vann løsningen holdes i kjøleskap ved 4°C. Det uløselige materialet isoleres ved filtrering og tørkes under vakuum ved romtemperatur som gir IIa (90 mg; HPLC renhet 100%).
Preparative HPLC betingelser:
Instrument: Waters Delta Prep 4000 (resiprok pumpe, gradient kontrollerer med lavtrykksblander)
Jasco 7125 UV-variabel detektor, o.p.0.2 mm
Merk D2000 printer-plotter
Kolonne: Symmetry C18, 7 μm, 20x250mm (Waters)
Eluent A: 70/30, vann/acetonitril
Eluent B: 30/70, vann/acetonitril
Strømningshastighet: 15.0 ml/min
Gradient: 20 min, isokratisk 100% A, deretter til 100% B i løpet av 10 minutter Deteksjon: UV 227 nm
Injeksjon: 50 ml urenhet “IIa/TFA” løsning (ved pumpe innløpsledning D).
EKSEMPEL 11
Fremstilling av (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat (IId)
a) 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (Vb)
3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd fremstilles ved å følge samme fremgangsmåte som i Eksempel 10, trinn a) i en 1:10 skala, men ved anvendelse av 2-fluorbenzylklorid istedenfor 3-fluorbenzylklorid. Molar utbyttet er 3% med en 98.1% renhet bestemt ved GC analyse (areal %, se Eksempel 16A). Produktet har s.m.p. 71°C (kapillær).
<1>H-NMR: (CDCl3, 300 MHz, 298K) δ (ppm, med hensyn til TMS): 4.06 (2H, s, CH2); 5.23 (2H, s, OCH2); 6.95-7.40 (9H, m, aromatisk H); 7.67 (1H, bd, J= 0.9 Hz, aromatisk H orto til C=O og CH2); 7.76 (1H, dd, J1= 2.1 Hz, J2= 8.3 Hz, aromatisk H orto til C=O og aromatisk CH); 9.84 (1 H, s, CHO).
<13>C-NMR: (CDC13, 75.4 MHz, 298K) δ (ppm): 29.2 (CH2); 64.1 (OCH2); 111.4 (aromatisk CH); 115.4 (d, JC-F= 22.0 Hz, aromatisk CH), 115.5 (d, JC-F= 21.1 Hz, aromatisk CH); 123.3 (d, JC-F= 14.2 Hz, kvarternær aromatisk C); 124.1 (d, JC-F= 2.6 Hz, aromatisk CH ); 124.5 (d, JC-F= 3.2 Hz, aromatisk CH); 126.6 (d, JC-F= 15.5 Hz, kvarternær aromatisk C); 128.2 (d, JC-F= 8.1 Hz, aromatisk CH); 129.6 (d, JC-F= 6.2 Hz, aromatisk CH); 129.6 (kvarternær aromatisk C); 130.0 (kvarternær aromatisk C); 130.2 (d, JC-F= 8.3 Hz, aromatisk CH); 131.1 (aromatisk CH); 131.3 (d, JC-F= 4.1 Hz, aromatisk CH); 131.8 (aromatisk CH); 160.5 (d, JC-F= 246.8 Hz, kvarternær aromatisk C); 161.2 (d, JC-F= 245.1 Hz, kvarternær aromatisk C); 161.3 (kvarternær aromatisk C); 191.1 (CHO).
b) (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (IIb)
(S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]-propanamid fremstilles ved å følge samme fremgangsmåte som i Eksempel 10, trinn b) ved anvendelse av 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd istedenfor 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd. Utbyttet er 83%; s.m.p. 161°C (kapillær).
<1>H-NMR: (CDCl3, 300 MHz, 298K) δ (ppm, med hensyn til TMS): 1.32 (3H, d, J= 6.7 Hz, CH3); 1.97 (1H, bs, NH); 3.22 (1H, q, J= 6.7 Hz, CH-CO); 3.67 (2H, ABq, J= 12.8 Hz, diastereotopisk H of NCH2); 4.03 (2H, s, CH2); 5.12 (2H, s, OCH2); 5.98 (1H, bs, NH2); 6.89 (1H, d, Jorto= 8.3 Hz, aromatisk H orto til CH2NH og aromatisk CH); 6.95-7.40 (10H, m, aromatisk H).
<13>C-NMR: (CDC13, 75.4 MHz, 298K) δ (ppm): 19.6 (CH3); 29.2 (CH2); 52.0 (NHCH2); 57.7 (H2NCOCH); 63.8 (OCH2); 111.7 (aromatisk CH); 115.2 (d, JC-F= 21.9 Hz, aromatisk CH), 115.3 (d, JC-F= 21.3 Hz, aromatisk CH); 124.0 (d, JC-F= 3.5 Hz, aromatisk CH); 124.3 (d, JC-F= 2.9 Hz, aromatisk CH); 124.3 (d, JC-F= 14.4 Hz, kvarternær aromatisk C); 127.5 (aromatisk CH); 127.6 (d, JC-F= 15.0 Hz, kvarternær aromatisk C); 127.8 (d, JC-F= 7.5 Hz, aromatisk CH); 128.8 (kvarternær aromatisk C); 129.0-130.0 (m, 2 aromatisk CH); 130.5 (aromatisk CH); 131.3 (d, JC-F= 4.6 Hz, aromatisk CH); 131.8 (kvarternær aromatisk C); 155.6 (kvarternær aromatisk C); 160.4 (d, JC-F= 245.8 Hz, kvarternær aromatisk C); 161.2 (d, JC-F= 244.6 Hz, kvarternær aromatisk C); 178.2 (CONH2).
c) (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat (IId)
(S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat fremstilles ved å følge samme fremgangsmåte som i Eksempel 10, trinn c), men ved anvendelse av (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid som utgangsmaterialet. Utbyttet er 89%; s.m.p.190°C (kapillær).
<1>H-NMR: (DMSO-d6, 300 MHz, 298K) δ (ppm, med hensyn til TMS): 1.42 (3H, d, J= 6.8 Hz, CH3CH); 2.33 (3H, s, CH3SO3); 3.50-4.20 (5H, m, CH-CO, CH2, diastereotopisk H av NCH2,); 5.19 (2H, s, OCH2); 6.95-8.00 (11H, m, aromatisk H); 9.02 (2H, bs, NH2<+>).
<13>C-NMR: (DMSO-d6, 75.4 MHz, 298K) δ (ppm): 16.5 (CH3); 28.8 (CH2); 48.6 (NHCH2); 54.9 (H2NCOCH); 64.3 (OCH2); 112.8 (aromatisk CH); 115.0-117.0 (2 aromatisk CH); 124.2 (d, JC-F= 14.4 Hz, kvarternær aromatisk C); 124.4 (kvarternær aromatisk C); 124.8 (aromatisk CH); 125.0 (aromatisk CH); 127.3 (d, JC-F= 16.1 Hz, kvarternær aromatisk C); 128.6 (kvarternær aromatisk C); 128.8 (aromatisk CH); 129.0-133.0 (m, 5 aromatisk CH); 156.9 (kvarternær aromatisk C); 160.8 (d, JC-F= 245.2 Hz, kvarternær aromatisk C); 160.9 (d, JC-F= 243.5 Hz, kvarternær aromatisk C); 171.1 (CONH2).
EKSEMPEL 12
Fremstilling av (S)-2-[4-3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (safinamid) metansulfonat (Ic) fra 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) kontaminert med 1 vekt% urenhet 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (Va)
Til 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (10 g; GC renhet 98.8, areal %) blir 1% 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd tilsatt og blandingen omdannes til (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid safinamid base ved å følge samme fremgangsmåte som i Eksempel 6. Utbyttet er 84% med et innhold av urenhet (IIa) på 0.84% (se Eksempel 17B) i forhold til vekt.
Den frie basen (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia) omdannes til det korresponderende metansulfonatet ved å følge samme fremgangsmåte som i Eksempel 7 for å gi metansulfonatet (Ic) i 98% utbytte med innhold av urenhet (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat (IIc) på 0.62 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
EKSEMPEL 13
Krystallisering av safinamid metansulfonat (Ic) kontaminert med urenhet (IIc)
Safinamid metansulfonatet kontaminert med (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat (IIc) med 0.62 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B) oppnådd i henhold til Eksempel 12 krystalliseres ved anvendelse av fem forskjellige løsemiddelsystemer ved å løse opp ved refluks temperatur og avkjøling til romtemperatur.
Resultatet er rapportert i følgende Tabell 5
TABELL 5
(*) % (vekt/vekt) evalueres i henhold til Eksempel 17B.
EKSEMPEL 14
Fremstilling av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (safinamid, Ia) metansulfonat (Ic) i henhold til fremgangsmåtene beskrevet i litteraturen
14.1 Fremstilling av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa)
14.1.a) Fremgangsmåte i Eksempel 1a i US 6,335,354 B2
4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) fremstilles ved fremgangsmåten beskrevet i Eksempel 1a i US 6,335,354 B2.
Følgelig ble en blanding av 3-fluorbenzylklorid (2.86 g,19.80 mmol) 4-hydroksybenzaldehyd (3.03 g, 24.80 mmol), K2CO3(10.30 g, 74.50 mmol), NaI (137.1 mg, 0.91 mmol) og etanol (40 mL) varmet opp til refluks i 70 minutter og holdt ved refluks temperatur i 4 timer og 15 minutter. Etter opparbeiding av reaksjonsblandingen ble 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd isolert som en gul olje i 95% utbytte.
Produktet har GC renhet på 97.6 (areal %, se Eksempel 16A) og et innhold av 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (Va) på 0.14 vekt% bestemt med GC (se Eksempel 16B).
14.1.b) Fremgangsmåte i J. Agric. Food Chem, 27, 4, 1979
4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa) fremstilles ved fremgangsmåten rapportert i J. Agric. Food Chem, 27, 4, 1979.
Følgelig ble 3-fluorbenzylklorid (14.5 g, 100 mmol) tilsatt under røring og under nitrogen atmosfære til en løsning av 4-hydroksybenzaldehyd (12.2 g, 100 mmol) og NaOH (4.0 g, 100 mmol) i etanol (100 mL).
Blandingen ble gradvis varmet opp i 25 minutter til refluks og rørt ved refluks temperatur i 6 timer og 20 minutter. Reaksjonsblandingen ble filtrert og deretter konsentrert ved redusert trykk som ga 4-(3-fluor-benzyloksy)benzaldehyd (23.43 g) som et gult fast residue. Diklormetan (250 mL) ble tilsatt til residuet, det uløselige materialet filtrert og den resulterende løsningen konsentrert under redusert trykk som ga 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd som et gult faststoff, i 80.4% utbytte. Produktet har GC renhet på 91.6 (areal %, se Eksempel 16A) og et innhold av 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (Va) på 0.13 vekt% bestemt med GC (se Eksempel 16B).
14.2 Fremstilling av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia) og dens metansulfonat salt (Ic)
14.2.a) Fremgangsmåte i J. Med. Chem., 1998, 41, 579, fremgangsmåte A
(S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia) fremstilles ved omsetning av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (10 mmol), fremstilt som beskrevet i Eksempel 14.1.a., og L-alaninamid hydroklorid (1.37 g, 11 mmol) fulgt av reduksjon med NaBH3CN (0.50 g, 8 mmol). Etter opparbeiding av reaksjonsblandingen og rensing med flash kromatografi ble (S)-2[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid isolert som hvitt faststoff i 68.7% utbytte. Produktet har HPLC renhet på 96.2 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (IIa) på 0.15 vekt% (se Eksempel 17B).
En blanding av (S)-2[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (1.50 g, 4.96 mmol) og etylacetat (40.2 mL) ble varmet opp til 50°C til en klar løsning ble oppnådd. Metansulfonsyre (0.53 g, 5.51 mmol) ble tilsatt under røring i 15 minutter til løsningen og den resulterende heterogene blandingen ble avkjølt under røring til 20°C i løpet av 90 minutter. Etter 30 minutter ved 20°C ble det faste stoffet samlet opp ved filtrering, vasket med etylacetat (6 mL) og tørket ved 50°C ved redusert trykk i 15 timer som ga (S)-2[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat (Ic) som et hvitt faststoff i et 96.1% utbytte. Produktet har HPLC renhet 98.6 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat (IIc) på 0.10 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
14.2.b) Fremgangsmåte i J. Med. Chem., 1998, 41, 579, fremgangsmåte A
(S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia) fremstilles i henhold til eksempel 14.2.a fra 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (10 mmol), fremstilt som beskrevet i eksempel 14.1.b., og L-alaninamid hydroklorid (1.37 g, 11 mmol) fulgt av reduksjon med NaBH3CN(0.50 g, 8 mmol).
(S)-2[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia), oppnås som hvitt faststoff i 66.5% utbytte. Produktet har HPLC renhet på 88.5 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (IIa) på 0.064 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B). (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ia) omdannes til det korresponderende metansulfonatet (Ic) i et 88.9% utbytte ved behandling med metansulfonsyre i henhold Eksempel 14.2.a. Produktet har en HPLC renhet på 97.7 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat (IIc) på 0.05 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
EKSEMPEL 15
Fremstilling av (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (ralfinamid, Ib) metansulfonat (Id) i henhold til fremgangsmåtene beskrevet i litteraturen
15.1 Fremstilling av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb)
15.1.a) Fremgangsmåte i Eksempel 1a i US 6,335,354 B2
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb) fremstilles i henhold til Eksempel 14.1.a) fra 2-fluorbenzylklorid (14.3 g, 98 mmol), 4-hydroksybenzaldehyd (15.1 g, 123 mmol), K2CO3(51 g, 369 mmol), NaI (500 mg, 3.3 mmol), etanol, 75 mL.
Blandingen holdes ved refluks i 12 timer. Etter opparbeiding av reaksjonsblandingen blir 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd oppnådd i 75% utbytte som en gul olje.
Produktet har GC renhet på 92.1 (areal %, se Eksempel 16A) og et innhold av 3-(2-fluorbenzyl)4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd på 0.25 vekt% bestemt med G.C. (se Eksempel 16B).
15.1.b) Fremgangsmåte i J. Agric. Food Chem, 27, 4, 1979
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb) fremstilles i henhold til Eksempel 14.1.b fra 2-fluorbenzylklorid (18.0 g, 123 mmol), 4-hydroksy-benzaldehyd (15.3 g, 125 mmol), NaOH (5.0 g, 12 mmol) og etanol (125 mL).
Blandingen varmes opp i 25 minutter til refluks og holdes ved refluks temperatur under røring i 12 timer.
Etter opparbeiding av reaksjonsblandingen i henhold til Eksempel 14.1.b blir 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd oppnådd som et gult faststoff, i 90.0% utbytte. Produktet har GC renhet på 90.4 (areal %, se Eksempel 16A) og et innhold av 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (Vb) på 0.14 vekt% bestemt med G.C. (se Eksempel 16B).
15.2 Fremstilling av (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ib) og dens metansulfonat salt (Id)
15.2.a) Fremgangsmåte i J. Med. Chem, 1998, 41, 579, fremgangsmåte A
(S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ib) fremstilles ved å følge fremgangsmåten i Eksempel 14.2.a ved anvendelse av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (10 mmol, fremstilt som i Eksempel 15.1a) istedenfor 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd.
(S)-2[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid oppnås i 67.3% utbytte som et hvitt faststoff. Produktet har en HPLC renhet på 86.7 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (IIb) på 0.22 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
En blanding av (S)-2[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (1.50 g, 4.96 mmol) og propan-2-ol (10.5 mL) varmes opp til 50°C og holdes ved denne temperaturen til en klar løsning oppnås. Metansulfonsyre (0.48 g, 5.01 mmol) tilsettes under røring i løpet av 15 minutter.
Den heterogene blandingen blir deretter avkjølt under røring til 20°C i løpet av 2 timer. Etter 1 time ved 20°C blir det faste stoffet oppnådd ved filtrering, tørket ved redusert trykk som gir (S)-2[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat som hvitt faststoff i 89.1% utbytte. Produktet har en HPLC renhet på 96.9 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat (IId) på 0.14 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
15.2.b) Fremgangsmåte i J.Med. Chem. 1998, 41, 579, Fremgangsmåte A
(S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ib) fremstilles i henhold til Eksempel 14.2.b ved anvendelse av 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (10 mmol, fremstilt i henhold til Eksempel 15.1.b) istedenfor 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd.
(S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid oppnås som et hvitt faststoff i 58.8% utbytte. Produktet har en HPLC renhet på 83.8 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (IIb) på 0.15 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
(S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (Ib) omdannes til det korresponderende metansulfonatet (Id) i et 89.4% utbytte som et hvitt faststoff.
Produktet har en HPLC renhet på 95.2 (areal %, se Eksempel 17A) og et innhold av (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat på 0.11 vekt% bestemt med HPLC (se Eksempel 17B).
EKSEMPEL 16A
GC bestemmelse av 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd og 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd renhet.
Testfremstilling
Løs opp cirka 100 mg av prøven i 10 ml metylenklorid.
Kromatografiske betingelser
Den kromatografiske fremgangsmåten utføres ved anvendelse av:
- en damputfelt silica kapillær kolonne 60 m lang og 0.32 mm indre diameter.
RTX 35 (35% difenyl-65% dimetyl polysiloksan) Film tykkelse= 0.25 µm; - helium som bærer gass ved et trykk på 150 kPa;
- en splitt strøm på 25 ml/min;
- injektor temp.290°C;
- detektor (FID) temp.290°C;
med følgende temperatur program:
Fremgangsmåte
Injiser 1 μl av testpreparatet. Avles kromatogrammet og beregn produktrenhet ved areal prosent beregning.
Urenhet identifikasjon
4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa):
Retensjonstider:
4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd retensjonstid er cirka 17.
4-hydroksybenzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 0.52.
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 0.98.
4-(4-fluorbenzyloksy)benzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 1.01.
4-benzyloksybenzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 1.02.
3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 1.78.
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVb):
Retensjonstider:
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd retensjonstid er cirka 17.
4-hydroksybenzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 0.53.
4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 1.02.
4-(4-fluorbenzyloksy)benzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 1.03.
4-benzyloksybenzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 1.04.
3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 1.81.
EKSEMPEL 16B
GC bestemmelse av innholdet av 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzaldehyd (Vb) i 4-(2-fluorbenzyloksy) benzaldehyd (IVb) og 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (Va) i 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd (IVa)
Den kjente relaterte substansen i forbindelse med 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd er 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehydet og for 4-(3-fluorbenzyloksy)-benzaldehydet er 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehydet. Bestemmelsen utføres i henhold til følgende betingelser:
Indre standard løsning
Fremstill en 3,4,5-trimetoksybenzaldehyd løsning med konsentrasjon 1.5 mg/ml i metylenklorid (IS).
Referanseløsning for 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd bestemmelsen i 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehydet:
Vei inn nøyaktig cirka 20 mg av 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd referansestandarden og 20 mg 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd referansestandarden i en 20 mL volumetrisk kolbe, løs opp og fortynn til volum med fortynningsmiddel; overfør 500 μL av denne løsningen til en 5 mL volumetrisk kolbe, tilsett 500 μL av IS løsning og fortynn til volum med fortynningsmiddel som gir en løsning som inneholder 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd og 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd ved cirka 100 μg/mL (som korresponderer til cirka 0.10%).
Referanseløsning for 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd bestemmelse i 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehydet:
Innvei nøyaktig cirka 20 mg 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd referansestandarden og 20 mg 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd referansestandarden i en 20 mL volumetrisk kolbe, løs opp og fortynn til volum med fortynningsmiddel; overfør 500 μL av denne løsningen til en 5 mL volumetrisk kolbe, tilsett 500 μL IS løsning og fortynn til volum med fortynningsmiddel som gir en løsning som inneholder 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd og 4-(3-fluorbenzyloksy)-benzaldehyd ved cirka 100 μg/mL ( som korresponderer til cirka 0.10%).
Testløsning:
Innvei nøyaktig cirka 500 mg av testprodukt i en 5 mL volumetrisk kolbe, tilsett 500 μL IS løsning, løs opp og fortynn til volum med fortynningsmiddel som gir en løsning som har kjent konsentrasjon på cirka 100 mg/mL.
Kromatografiske betingelser:
Den kromatografiske fremgangsmåten utføres ved anvendelse av:
- Kolonne: en damputfelt silica kapillær kolonne RTX 35 (35% difenyl-65% dimetyl polysiloksan) 60 m lang, 0.32 mm I.D., filmtykkelse 0.25 μm;
- Bærer (helium) ved trykk på 150 kPa;
- Splitt strøm 25 mL/min;
- Injektor temp.290°C;
- Detektor (FID) temp.290°C;
- Temperatur program: 0-5 min isoterm ved 150°C, 5-11 min lineær fra 150°C til 240°C ved en hastighet på 15°C/min, 11-19 min isoterm ved 240°C, 19-21 min lineær fra 240°C til 290°C ved en hastighet på 30°C/min, 21-40 min isoterm ved 290°C;
- Fortynningsmiddel: metylenklorid
- Injeksjonsvolum 1 μL.
Fremgangsmåte:
Injiser blindprøve (fortynningsmiddel), referanseløsning, testløsning og avles kromatogrammene.
I referansekromatogrammet verifiser at:
4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd retensjonstid er cirka 18 min;
3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 1.7 eller
4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd retensjonstid er cirka 18 min;
3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd relativ retensjonstid er cirka 1.7
3,4,5-trimetoksybenzaldehyd (IS) relativ retensjonstid er cirka 0.7
Beregn prosentinnhold av 3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd i 4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehydet som undersøkes eller til 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehydet i 4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehydet undersøkt ved indre standard beregning.
Verdien for kvantifiseringsgrensen (LOQ) for (3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzaldehyd og til 3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzaldehyd er 0.005 vekt%. Verdien til deteksjonsgrensen (LOD) for begge vurderte urenheter er 0.0025 vekt%.
EKSEMPEL 17A
HPLC bestemmelse av renhet av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]-propanamid (safinamid, Ia), dens metansulfonat (Ic), (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid (ralfinamid, Ib) og dens metansulfonat (Id).
Følgende kromatografisk fremgangsmåte er egnet for både den frie formen (Ia, Ib) og metansulfonat saltet (Ic, Id) til produktene.
Fortynningsmiddel
Mobilfase.
Testløsning
Vei inn nøyaktig cirka 25 mg produkt i en 25 ml volumetrisk kolbe, løs opp i og fortynn til volum med fortynningsmiddel for å gi en løsning som har kjent konsentrasjon på cirka 1.0 mg/ml.
Kromatografisk betingelse
Den kromatografiske fremgangsmåten ble utført ved anvendelse av:
- Kolonne: Waters Symmetry C8, 150x4.6 mm, 5 μ;
- Deteksjon: UV 220 nm;
- Kolonne temperatur: 30°C
- mobilfase: 40% løsemiddel A 10% løsemiddel B 50% løsemiddel C, som inneholder 1.0 g/l natrium oktansulfonat;
løsemiddel A: buffer løsning = KH2PO40.05M;
løsemiddel B: acetonitril;
løsemiddel C: metanol;
- isokratisk eluering, kjøretid: 60 minutter;
- strømningshastighet: 1.0 ml/min;
- injeksjonsvolum: 10 μl.
Fremgangsmåte
Injiser testløsningen, avles kromatogrammet og beregn produktrenhet ved areal prosent beregning.
(S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (safinamid) og identifikasjon av relaterte urenheter
Retensjonstid:
(S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid retensjonstid er cirka 5.5 min. (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propionsyre relativ retensjonstid er cirka 0.73.
(S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid relativ retensjonstid er cirka 4.08.
(S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (ralfinamid) og identifisering av relatert urenhet
Retensjonstid:
(S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid retensjonstid er cirka 5.5 min. (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propionsyre relativ retensjonstid er cirka 0.73.
(S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid relativ retensjonstid er cirka 4.08.
EKSEMPEL 17B
HPLC bestemmelse av (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy) benzylamino]propanamid (fri base, IIb og metansulfonat, IId) i (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (fri base, Ib og metansulfonat, Id) og av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (fri base, IIa og metansulfonat, IIc) i (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (fri base, Ia og metansulfonat, Ic)
Bestemmelse av (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]-propanamidet (fri base og metansulfonat) i (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino] propanamid (fri base og metansulfonat) prøver og av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (fri base og metansulfonat) i (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (fri base og metansulfonat) prøver utføres i henhold til følgende betingelser:
Referanseløsning for (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]-propanamid bestemmelsen i (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamidet: Vei inn nøyaktig cirka 30 mg (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat referansestandard og 20 mg (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid referansestandard i en 50 mL volumetrisk kolbe, løs opp og fortynn til volum med fortynningsmiddel; fortynn 1.0 mL av denne løsningen til 20 mL med fortynningsmiddel (1. fortynning); fortynn 1.0 mL av den siste løsningen til 20 mL med fortynningsmiddel (2. fortynning) som gir en løsning som inneholder 2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (cirka 0.12%) ved cirka 1.20 μg/mL og (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat ved cirka 1.00 μg/mL (cirka 0.10%).
Referanseløsning for (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]-propanamid metansulfonat bestemmelsen i (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino] propanamid metansulfonatet:
Vei nøyaktig inn cirka 30 mg (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat referansestandard og 20 mg (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat referansestandard i en 50 mL volumetrisk kolbe, løs opp og fortynn til volum med fortynningsmiddel; fortynn 1.0 mL av denne løsningen til 20 mL med fortynningsmiddel (1. fortynning); fortynn 1.0 mL av den siste løsningen til 20 mL med fortynningsmiddel (2. fortynning) for å gi en løsning som inneholder 2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (cirka 0.15% som metansulfonsyre salt) ved cirka 1.20 μg/mL og (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat ved cirka 1.00 μg/mL (cirka 0.10%).
Referanseløsning for (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]-propanamidet i (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamidet:
Vei inn nøyaktig cirka 24 mg av (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid referansestandard og 20 mg (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid referansestandard i en 50 mL volumetrisk kolbe, løs opp og fortynn til volum med fortynningsmiddel; fortynn 1.0 mL av denne løsningen til 20 mL med fortynningsmiddel (1. fortynning); fortynn 1.0 mL av den siste løsningen til 20 mL med fortynningsmiddel (2. fortynning) som gir en løsning som inneholder 2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (cirka 0.12%) ved cirka 1.20 μg/mL og (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino] propanamid metansulfonat ved cirka 1.00 μg/mL (cirka 0.10%).
Referanseløsning for (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]-propanamid metansulfonatet i (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonatet:
Vei inn nøyaktig cirka 24 mg (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid referansestandard og 20 mg (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamid metansulfonat referansestandard i en 50 mL volumetrisk kolbe, løs opp og fortynn til volum med fortynningsmiddel; fortynn 1.0 mL av denne løsningen til 20 mL med fortynningsmiddel (1. fortynning); fortynn 1.0 mL av den siste løsningen til 20 mL med fortynningsmiddel (2. fortynning) som gir en løsning som inneholder 2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (cirka 0.15% as metansulfonsyre salt) ved cirka 1.20 μg/mL og (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat ved cirka 1.00 μg/mL (cirka 0.10%).
Testløsning:
Vei inn nøyaktig cirka 25 mg av testproduktet i en 25 mL volumetrisk kolbe, løs opp og fortynn til volum med fortynningsmiddel som gir en løsning som har kjent konsentrasjon på cirka 1.0 mg/mL.
Kromatografiske betingelser:
Den kromatografiske fremgangsmåten utføres ved anvendelse av:
- Kolonne: Waters Simmetry C8150 x 4.6 mm, 5μ, eller ekvivalent
- Kolonnetemperatur: 30°C
- Mobilfase: blanding av 40% løsemiddel A: 10% løsemiddel B: 50% løsemiddel C, som inneholder 1 g/l natrium oktansulfonat
løsemiddel A: buffer løsning 0.05M KH2PO4;
løsemiddel B: acetonitril;
løsemiddel C: metanol;
- isokratisk eluering;
- kjøretid: 60 min;
- strømningshastighet: 1.0 mL/min;
- deteksjon: UV 220 nm;
- injeksjonsvolum: 100 μl;
- fortynningsmiddel: mobilfase.
Fremgangsmåte:
Injiser blindprøve (fortynningsmiddel), referanseløsning, testløsning og avles kromatogrammene.
I referansekromatogrammet verifiser følgende system eghethets parametere:
(S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid retensjonstid er cirka 5.2 minutter;
USP kjennemerke for (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid toppen er i området mellom 0.8 og 1.5;
(S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid relativ retensjonstid er cirka 5.1.
eller
(S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid retensjonstid er cirka 5.5 minutter;
USP kjennemerke for (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid toppen er i området mellom 0.8 og 1.5;
(S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid relativ retensjonstid er cirka 4.1.
Juster mobilfasen for å oppnå system egnethet.
Beregn prosent innholdet (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino] propanamid (fri base og metansulfonat) i det undersøkte (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamidet (fri base og metansulfonat) prøvene og til (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (fri base og metansulfonat) i det undersøkte (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (fri base og metansulfonat) prøvene ved ekstern standard beregning.
Verdien til kvantifiseringsgrensen (LOQ) for (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid og for (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid i det korresponderende (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamidet og (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)-benzylamino]propanamidet er 0.004 vekt%.
Verdien for kvantifiseringsgrensen (LOQ) for (S)-2-[3-(2-fluorbenzyl)-4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonatet og for (S)-2-[3-(3-fluorbenzyl)-4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonatet i det korresponderende (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonatet og (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonatet er 0.005% i forhold til vekt. Verdien til deteksjonsgrensen for alle de vurderte urenhetene er 0.001 vekt%.
EKSEMPEL 18
HPLC bestemmelse av (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (ralfinamid) metansulfonat (Id) enantiomerisk renhet
Den enantiomeriske renhet til prøven evalueres med HPLC. Bestemmelsen utføres i henhold til følgende:
Standard løsning 1:
Løs opp cirka 5.3 mg (R)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat referansestandard i 25 mL mobilfase.
Standard løsning 2:
Løs opp cirka 8.0 mg (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat referansestandard og 0.2 mL standard løsning 1 i 50 mL mobilfase.
Konsentrasjonen av (R)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonatet er cirka 0.5% beregnet med hensyn til konsentrasjonen av (S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonatet.
Testløsninger 1 og 2:
I duplikat, løs opp cirka 8.0 mg av testproduktet i 50 mL av mobilfasen.
Kromatografiske betingelser:
- Kolonne: Chiralpak WH 250mm x 4.6mm, I.D.5 μm;
- kolonne temperatur: 45°C;
- mobilfase: 0.25 mM CuSO4(nøyaktig vekt cirka 40 mg CuSO4i 1000 mL vann)/MeOH 60/40;
- isokratisk eluering;
- strømningshastighet: 1.0 mL/min;
- deteksjon: UV 230 nm;
- injeksjonsvolum: 10 μl;
- kjøretid: 15 minutter.
Fremgangsmåte:
Analyser blinprøve (mobilfase) en gang, standard løsning 2 ganger, testløsninger 1 og 2 en gang og verifiser at:
- for standard injeksjonene er RSD% for (R)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino] propanamid metansulfonat tilstede mindre enn 2.0%;
- både for standard og prøveløsninger er for hver injeksjon hovedtopp prosent arealet mellom gjennomsnittsverdien ± 0.1%.
Beregn (R)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid metansulfonat innholdet (prosent areal) som middelverdi av de to bestemmelsene.
Retensjonstider:
(S)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid retensjonstid er cirka 5.7 min. (R)-2-[4-(2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid relativ retensjonstid er cirka 1.7.
EKSEMPEL 19
HPLC bestemmelse av (S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid (safinamid) metansulfonat (Ia) enantiomerisk renhet
Den enantiomeriske renheten av prøven evalueres med HPLC. Bestemmelsen finner sted i henhold til følgende betingelser:
Test løsning:
Løs opp cirka 10 mg av testprøve i 10 mL mobilfase.
Kromatografiske betingelser:
- Kolonne: Chiralpak WH 250mm x 4.6mm, I.D.10 μm;
- kolonne temperatur: 50°C;
- mobilfase: 0.25 mM CuSO4;
- isokratisk eluering;
- strømningshastighet: 1.0 mL/min;
- deteksjon: UV 200 nm;
- injeksjonsvolum: 10 μl;
- kjøretid: 30 minutter.
Fremgangsmåte:
Injiser testløsningen og beregn enantiomer topp responsene som areal prosent.
(S)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid retensjonstid er cirka 9.2 min. (R)-2-[4-(3-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamid relativ retensjonstid er cirka 1.9 min.
EKSEMPEL 20
Cytokrom P450 undersøkelse
Inhibering av de fem viktigste Cytokrom P450 isoformene (CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 og CYP3A4), involvert i legemiddel metabolisme, ble målt ved anvendelse av spesifikke substrater som blir fluorescente etter CYP metabolisme (Gentest Kit undersøkelse).
Forbindelser ble testet i en 96-brønns plate som inneholdet inkubering/NADPH regenereringsbuffer. Spesifikke humane rekombinante isoenzymer og substrater ble tilsatt og inkubert ved 37°C i 15 minutter for CYP1A2/CEC, 40 minutter for CYP2E1/MFC, 45 minutter for CYP2C9/MFC og 30 minutter for de andre CYP450.
De spesifikke substratene var følgende: 3-cyano-7-etoksycoumarin (CYP2C19 og CYP1A2), 7-metoksy-4-trifluormetylcoumarin (CYP2C9), 3[2(N,N-dietyl-N-metylamino)etyl]-7-metoksy-4-metylcoumarin (CYP2D6), benzylfenylcoumarin (CYP3A4).
Platene ble avlest på en Victor plateavleser (Perkin Elmer) ved passende emisjon/eksitasjon bølgelengder, og IC50(konsentrasjon inhibering ved 50% enzym aktivitet) bestemt. Resultatene er rapportert i Tabell 1 og 2.
EKSEMPEL 21
Cytotoksisitetsundersøkelse i human neuroblastom cellelinje SH-SY-5Y
Ved tid null ble cellene sådd ved 1.10<4>/cm<2>i 96-brønns plater i DMEM vekstmedium 10% varme inaktivert FBS 2 mM l-glutamin 100 U/mL – 100 μg/mL penicillin/streptomycin.
Etter 72 timer ved underkonfluent vekstfase blir mediet fjernet og cellene inkubert i 24 timer ved 37°C i 180 μl neurobasal medium 2 mM l-glutamin (Life Techonologies) med eller uten testforbindelser (20 μl, minst 5 konsentrasjoner i triplikat).
Ved slutten av inkuberingen blir 20 μl Alamar Blue fargestoff (AlamarBlue ™ Assay Kit, Promega) direkte tilsatt til cellemediet.
Fire timer senere blir cytotoksisiteten bestemt ved å måle fluorescensen ved 530 nm eksitasjon og 595 nm emisjon ved anvendelse av Tecan Spectrafluor plateavleser.
Før og ved slutten av behandlingen blir kulturene overvåket mikroskopisk med et Olympus IX70 invertert lys mikroskop tilpasset en Image Analyzer (Image Pro Plus, 5.1) for å evaluere den cellulære morfologien.
Resultatene er angitt i Tabell 1 som konsentrasjon som induserer 50% dødelighet.
EKSEMPEL 22
HERG strøm i transfekterte CHO cellelinjer
Inhiberingen av HERG strøm ble testet i CHO celler som stabilt uttrykker rekombinant HERG kanal.
For å evaluere effekten av testforbindelsene på HERG strømmer ble cellene satt klemmer på ved -80 Mv, depolarisert til 0 mV i 5 sekunder som muliggjør aktivering av HERG strøm og repolariseres til -50 mV i løpet av 5 sekunder som muliggjør HERG halestrøm og deaktivere. Denne fremgangsmåten gjentas ved en frekvens på 0.06 Hz. Strøm amplituden etter repolarisering (HERG halestrøm) måles før og etter eksponering for testforbindelsen.
Inhibering av strøm beregnes som forskjell mellom amplituden til HERG halestrøm amplitude målt ved slutten av ekstern bad perfusjon periode og HERG halestrøm målt ved slutten av testforbindelse perfusjon periode (når likevekt effekt nås) delt med kontroll HERG halestrøm.
Legemiddel konsentrasjon-inhibering kurver oppnås ved å plotte toniske blokkeringer versus legemiddel konsentrasjoner. Dose-respons kurver tilpasses de toniske blokkeringsdata, i henhold til den logistiske ligningen: y = A2+(A1-A2)/[1+(x/IC50)<p>]. A1 og A2 er fikserte verdier på 0 og 1 som korresponderer til 0 og 100% strøm inhibering, x er legemiddel konsentrasjon, IC50er legemiddel konsentrasjonen som resulterer i 50% strøm inhibering og p er den korresponderende helningsfaktoren.
Resultatene er rapportert i Tabell 1.
EKSEMPEL 23
Maksimal elektrosjokk test (MES) på mus
Maksimal elektrosjokk testen (MES) anvendes ofte ved screening av anti-epileptiske legemidler i gnager modeller.
Dyr og apparatur: Hannkjønn CD1 mus som veier 25 g ble anvendt. Fremgangsmåten beskrevet av White et al. (White H.S., Woodhead J.H., Franklin M.R., Swinyard E.A. og Wolf H.H. Antiepileptic Drugs (1995) 4. utg.: 99-110, Raven Press, Ltd., New York) ble fulgt. En Ugo Basile elektrokonvulsiv generator (Model ECT UNIT 7801) ble anvendt for å levere en elektrisk stimulus tilstrekkelig til å gi en baklem tonisk ekstensor respons hos minst 97% av kontrolldyr. Stimulusen ble levert intra-auralt gjennom klemme elektroder på mus (0.7 sekunder av et 40 mA sjokk, med en puls tog på 80 Hz som har en puls varighet på 0.4 ms). Den akutte effekten til forbindelsene administrert intraperitonealt eller oralt 15-60 minutter før MES induksjon ble undersøkt og sammenlignet med en vehikkel kontrollgruppe. Ti mus ble studert per gruppe.
Fullstendig suppresjon av baklem tonisk ekstensor komponent av anfall ble tatt som tegn på antikonvulsant aktivitet.
Forbindelsene i følge oppfinnelsen ble administrert oralt eller intraperitonealt ved doser på 3–30 mg/kg.
Resultatene er uttrykt i Tabell 3 og 4 som % beskyttelse.
NO20171916A 2006-06-19 2017-11-30 Høy renhetsgrad 2-[4-(3- og 2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamider for bruk som medikamenter og farmasøytiske formuleringer inneholdende slike. NO342644B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06012565 2006-06-19
PCT/EP2007/005105 WO2007147491A1 (en) 2006-06-19 2007-06-08 Process for the production of 2- [4 - ( 3- and 2-flu0r0benzyl0xy) benzylamin0] propan amides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20171916A1 true NO20171916A1 (no) 2009-01-16
NO342644B1 NO342644B1 (no) 2018-06-25

Family

ID=37101658

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20090231A NO342018B1 (no) 2006-06-19 2009-01-14 Fremgangsmåte for fremstilling av 2-[4-(3- og 2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamider
NO20171916A NO342644B1 (no) 2006-06-19 2017-11-30 Høy renhetsgrad 2-[4-(3- og 2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamider for bruk som medikamenter og farmasøytiske formuleringer inneholdende slike.

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20090231A NO342018B1 (no) 2006-06-19 2009-01-14 Fremgangsmåte for fremstilling av 2-[4-(3- og 2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamider

Country Status (27)

Country Link
US (2) US8076515B2 (no)
EP (2) EP2029524B1 (no)
JP (2) JP5240476B2 (no)
KR (2) KR101410291B1 (no)
CN (2) CN101472880B (no)
AR (1) AR061510A1 (no)
AU (1) AU2007263328C1 (no)
BR (1) BRPI0712936B8 (no)
CA (1) CA2653012C (no)
CY (2) CY1115951T1 (no)
DK (2) DK2029524T3 (no)
EA (2) EA025326B1 (no)
ES (2) ES2602069T3 (no)
HK (1) HK1130245A1 (no)
HR (2) HRP20150136T1 (no)
HU (1) HUE030233T2 (no)
IL (1) IL195294A (no)
LT (1) LT2474521T (no)
MX (2) MX342698B (no)
NO (2) NO342018B1 (no)
NZ (2) NZ595737A (no)
PL (2) PL2029524T3 (no)
PT (2) PT2474521T (no)
RS (2) RS55464B1 (no)
SI (2) SI2029524T1 (no)
TW (2) TWI393700B (no)
WO (1) WO2007147491A1 (no)

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE457724T1 (de) * 2003-08-25 2010-03-15 Newron Pharm Spa Alpha-aminoamid derivate zur verwendung als anti- inflammatorische wirkstoffe
CN101472880B (zh) * 2006-06-19 2013-04-24 纽朗制药有限公司 生产2-[4-(3-和2-氟苄氧基)苄氨基]丙酰胺类的方法
DK2229351T3 (en) * 2007-12-11 2018-01-22 Newron Pharm Spa PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF 2- [4- (3- OR 2-FLUORBENZYLOXY) BENZYLAMINO] PROPANAMIDS WITH HIGH PURITY
EP2314569A1 (en) 2009-10-22 2011-04-27 Merck Patent GmbH Novel polymorphic forms of (S)-2-[4-(3-Fluoro-benzyloxy)-benzylamino]-propionamide mesylate salt and processes of manufacturing thereof
DK2563355T3 (en) * 2010-04-27 2016-09-12 Newron Pharm Spa A process for the preparation of ralfinamide-methanesulphonate or R-enantiomers thereof.
WO2014086704A1 (en) 2012-12-03 2014-06-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Substituted isoxazole amide compounds as inhibitors of stearoyl-coa desaturase 1 (scd1)
US9475757B2 (en) 2013-05-03 2016-10-25 Council Of Scientific & Industrial Research Synthesis of anti-Parkinson agent
CN104292128A (zh) * 2014-07-01 2015-01-21 南京正科制药有限公司 一种沙芬酰胺晶型a
JP6466109B2 (ja) * 2014-09-09 2019-02-06 東ソー・ファインケム株式会社 ２−ベンジルオキシ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン誘導体及びその製造方法
CN105017060B (zh) * 2015-07-03 2017-06-16 南京正大天晴制药有限公司 一种沙芬酰胺新晶型及其制备方法
CN113072436A (zh) * 2015-07-24 2021-07-06 上海医药集团股份有限公司 一种苄基芳基醚的制备方法
CN105061245A (zh) * 2015-08-25 2015-11-18 成都维恒医药科技有限公司 一种高纯度沙芬酰胺的制备方法
CN106220525A (zh) * 2016-07-31 2016-12-14 合肥远志医药科技开发有限公司 一种工业化沙芬酰胺甲磺酸盐的制备方法
CN106336363B (zh) * 2016-08-22 2018-10-30 上海医药集团股份有限公司 一种沙芬酰胺甲磺酸盐晶型c及其制备方法
CN106565521B (zh) * 2016-08-24 2019-03-08 浙江美诺华药物化学有限公司 (s)-2-[3-(3-氟苄基)-4-(3-氟苄氧基)苄氨基]丙酰胺及其盐的制备方法
CN106596828B (zh) * 2016-12-15 2018-09-25 扬子江药业集团有限公司 一种甲磺酸沙芬酰胺有关物质的检测方法
CN107271600B (zh) * 2017-07-28 2019-01-25 成都百裕制药股份有限公司 一种4-(3-氟苄氧基)苯甲醛中异构体杂质含量的检测方法
CN107857713A (zh) * 2017-11-23 2018-03-30 江苏恒盛药业有限公司 一种沙芬酰胺氢溴酸盐及其一种晶型
CN107759487A (zh) * 2017-11-23 2018-03-06 江苏恒盛药业有限公司 一种沙芬酰胺盐酸盐及其一种晶型以及制备方法
WO2019167085A1 (en) * 2018-03-01 2019-09-06 Msn Laboratories Private Limited, R&D Center Process for the preparation of (s)-2-[[4-[(3-fluorophenyl)methoxy]phenyl]methyl]amino propanamide methanesulfonate
US11111208B2 (en) 2019-06-17 2021-09-07 RK Pharma Solutions LLC Process for the preparation of safinamide mesylate intermediate
ES2977486T3 (es) * 2019-08-06 2024-08-26 Medichem Sa Proceso para preparar safinamida
CN111122736B (zh) * 2019-12-30 2021-03-12 北京鑫开元医药科技有限公司海南分公司 一种用于检测布瓦西坦中间体中对映异构体的方法
CN113214097B (zh) * 2020-01-21 2022-08-30 厦门大学 治疗阿尔茨海默病的化合物
CN112028754A (zh) * 2020-06-17 2020-12-04 浙江美诺华药物化学有限公司 一种甲磺酸沙芬酰胺中间体的制备方法
CN114088830B (zh) * 2021-11-10 2022-09-23 石家庄四药有限公司 一种4-(3-氟苄氧基)苯甲醛中异构体的检测方法
CN116008439B (zh) * 2023-02-20 2023-10-27 山东绿叶制药有限公司 一种检测2,6-二氧杂螺[4,5]癸烷类化合物或其盐中杂质的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1990014334A1 (en) * 1989-05-25 1990-11-29 Farmitalia Carlo Erba S.R.L. N-PHENYLALKYL SUBSTITUTED α-AMINO CARBOXAMIDE DERIVATIVES AND PROCESS FOR THEIR PREPARATION
WO2004066987A2 (en) * 2003-01-30 2004-08-12 Dynogen Pharmaceuticals, Inc. Use of sodium channel modulators for treating gastrointestinal tract disorders
WO2005102300A1 (en) * 2004-04-22 2005-11-03 Newron Pharmaceuticals S.P.A. α-AMINOAMIDE DERIVATIVES USEFUL IN THE TREATMENT OF RESTLESS LEGS SYNDROME AND ADDICTIVE DISORDERS

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9727523D0 (en) 1997-12-31 1998-02-25 Pharmacia & Upjohn Spa Alpha-aminoamide derivatives useful as analgesic agents
EP0974351A3 (en) * 1998-04-24 2000-12-13 Jouveinal Medicament for preventing and treating gastrointestinal damage
CN1426397A (zh) 2000-03-31 2003-06-25 欧洲凯尔特股份有限公司 氨基吡啶类化合物及其作为抗惊厥剂和钠通道阻滞剂的应用
PT1423168E (pt) 2001-09-03 2006-05-31 Newron Pharm Spa Composicao farmaceutica que compreende gabapentina ou um seu analogo e uma x-aminoamida e a sua utilizacao como analgesico
EP1438956A1 (en) 2003-01-16 2004-07-21 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful as antimigraine agents
JP2006515327A (ja) * 2003-01-30 2006-05-25 ダイノジェン ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ナトリウムチャネル調節因子を用いた下部尿路障害を処置するための方法
AR044007A1 (es) * 2003-04-11 2005-08-24 Newron Pharmaceuticals Inc Metodos para el tratamiento de la enfermedad de parkinson
TW200507850A (en) * 2003-07-25 2005-03-01 Kyowa Hakko Kogyo Kk Pharmaceutical composition
ATE457724T1 (de) 2003-08-25 2010-03-15 Newron Pharm Spa Alpha-aminoamid derivate zur verwendung als anti- inflammatorische wirkstoffe
EP1524267A1 (en) 2003-10-15 2005-04-20 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Substituted benzylaminoalkylene heterocycles
EP1557166A1 (en) 2004-01-21 2005-07-27 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of lower urinary tract disorders
KR101277520B1 (ko) 2004-09-10 2013-06-21 뉴론 파마슈티칼즈 에스. 피. 에이. （할로벤질옥시）벤질아미노－프로판아미드를 포함하는 선택적 나트륨 및／또는 칼슘 채널 조절제로서 유용한 약제학적 조성물
EP1870097A1 (en) 2006-06-15 2007-12-26 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of cognitive disorders
CN101472880B (zh) * 2006-06-19 2013-04-24 纽朗制药有限公司 生产2-[4-(3-和2-氟苄氧基)苄氨基]丙酰胺类的方法
DK2229351T3 (en) 2007-12-11 2018-01-22 Newron Pharm Spa PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF 2- [4- (3- OR 2-FLUORBENZYLOXY) BENZYLAMINO] PROPANAMIDS WITH HIGH PURITY
BRPI0821026A2 (pt) 2007-12-19 2015-06-16 Newron Pharmaceutical S P A Derivados de alfa-minoamidas úteis no tratamento de transtornos psiquiátricos

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1990014334A1 (en) * 1989-05-25 1990-11-29 Farmitalia Carlo Erba S.R.L. N-PHENYLALKYL SUBSTITUTED α-AMINO CARBOXAMIDE DERIVATIVES AND PROCESS FOR THEIR PREPARATION
WO2004066987A2 (en) * 2003-01-30 2004-08-12 Dynogen Pharmaceuticals, Inc. Use of sodium channel modulators for treating gastrointestinal tract disorders
WO2005102300A1 (en) * 2004-04-22 2005-11-03 Newron Pharmaceuticals S.P.A. α-AMINOAMIDE DERIVATIVES USEFUL IN THE TREATMENT OF RESTLESS LEGS SYNDROME AND ADDICTIVE DISORDERS

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CATTABENI F, "RALFINAMIDE", IDRUGS, CURRENT DRUGS LTD, GB, PAGE(S) 935-939 (2004-10), ISSN 1369-7056, Dated: 01.01.0001 *
N.E.MEALY ET AL, "Neurologic Drugs", DRUGS OF THE FUTURE, (2002), vol. 27, no. 9, pages 879 - 915, Dated: 01.01.0001 *
STUMMANN T C ET AL, "The anti-nociceptive agent ralfinamide inhibits tetrodotoxin-resistant and tetrodotoxin-sensitive Na<+> currents in dorsal root ganglion neurons", EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACOLOGY, AMSTERDAM, NL, (20050314), vol. 510, no. 3, ISSN 0014-2999, pages 197 - 208, Dated: 01.01.0001 *

Also Published As

Publication number Publication date
BRPI0712936A2 (pt) 2012-12-18
HK1130245A1 (en) 2009-12-24
RS55464B1 (sr) 2017-04-28
NO20090231L (no) 2009-01-16
CN103284984B (zh) 2016-08-03
NZ595737A (en) 2013-04-26
TWI412512B (zh) 2013-10-21
PL2474521T3 (pl) 2017-01-31
LT2474521T (lt) 2016-11-25
AU2007263328A1 (en) 2007-12-27
HRP20150136T1 (en) 2015-03-13
CN101472880A (zh) 2009-07-01
EA017123B1 (ru) 2012-10-30
ES2602069T3 (es) 2017-02-17
EP2474521B1 (en) 2016-08-10
PT2474521T (pt) 2016-11-10
EA200970028A1 (ru) 2009-06-30
CA2653012C (en) 2014-08-05
US20120157712A1 (en) 2012-06-21
AU2007263328C1 (en) 2012-09-06
CN103284984A (zh) 2013-09-11
NO342644B1 (no) 2018-06-25
KR20090021392A (ko) 2009-03-03
IL195294A (en) 2015-03-31
TW201313662A (zh) 2013-04-01
HRP20161456T1 (hr) 2016-12-16
CY1118113T1 (el) 2017-06-28
BRPI0712936B8 (pt) 2021-05-25
AR061510A1 (es) 2008-09-03
US20090156678A1 (en) 2009-06-18
EA201101308A1 (ru) 2012-02-28
EP2474521A1 (en) 2012-07-11
SI2474521T1 (sl) 2016-12-30
AU2007263328B2 (en) 2012-03-22
AU2007263328A2 (en) 2009-02-19
KR101491541B1 (ko) 2015-02-09
SI2029524T1 (sl) 2015-03-31
PT2029524E (pt) 2015-03-09
JP2009541232A (ja) 2009-11-26
EA025326B1 (ru) 2016-12-30
RS53824B1 (en) 2015-06-30
PL2029524T3 (pl) 2015-04-30
CN101472880B (zh) 2013-04-24
TWI393700B (zh) 2013-04-21
NO342018B1 (no) 2018-03-12
JP5795342B2 (ja) 2015-10-14
NZ572798A (en) 2011-11-25
WO2007147491A1 (en) 2007-12-27
JP5240476B2 (ja) 2013-07-17
CY1115951T1 (el) 2017-01-25
TW200815322A (en) 2008-04-01
CA2653012A1 (en) 2007-12-27
BRPI0712936B1 (pt) 2021-02-23
IL195294A0 (en) 2009-08-03
DK2474521T3 (en) 2016-10-31
JP2013139446A (ja) 2013-07-18
EP2029524B1 (en) 2014-11-26
HUE030233T2 (en) 2017-04-28
US8278485B2 (en) 2012-10-02
MX342698B (es) 2016-10-10
MX2008015704A (es) 2009-01-09
KR20140027563A (ko) 2014-03-06
US8076515B2 (en) 2011-12-13
DK2029524T3 (da) 2015-02-23
EP2029524A1 (en) 2009-03-04
KR101410291B1 (ko) 2014-06-20
ES2527437T3 (es) 2015-01-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO20171916A1 (no) Fremgangsmåte for fremstilling av 2-[4-(3- og 2-fluorbenzyloksy)benzylamino]propanamider
CA2706789C (en) Process for the production of 2-[4-(3- or 2-fluorobenzyloxy)benzylamino]propanamides with high purity degree
JP2009541232A5 (no)