EA025326B1 - Применение сафинамида и ралфинамида высокой степени чистоты для лечения заболеваний и болезненных состояний в условиях, не препятствующих активности цитохромов системы cyp450 и не проявляющих блокирующих свойств в отношении herg канала - Google Patents

Применение сафинамида и ралфинамида высокой степени чистоты для лечения заболеваний и болезненных состояний в условиях, не препятствующих активности цитохромов системы cyp450 и не проявляющих блокирующих свойств в отношении herg канала Download PDF

Info

Publication number
EA025326B1
EA025326B1 EA201101308A EA201101308A EA025326B1 EA 025326 B1 EA025326 B1 EA 025326B1 EA 201101308 A EA201101308 A EA 201101308A EA 201101308 A EA201101308 A EA 201101308A EA 025326 B1 EA025326 B1 EA 025326B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
fluorobenzyloxy
pharmaceutically acceptable
acceptable acid
propanamide
benzylamino
Prior art date
Application number
EA201101308A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201101308A1 (ru
Inventor
Елена Барбанти
Карла Каччья
Патричия Сальвати
Франческо Веларди
Тициано Руффилли
Луиджи Богонья
Original Assignee
Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=37101658&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA025326(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А. filed Critical Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А.
Publication of EA201101308A1 publication Critical patent/EA201101308A1/ru
Publication of EA025326B1 publication Critical patent/EA025326B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/12—Preparation of carboxylic acid amides by reactions not involving the formation of carboxamide groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/02—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C07C233/08—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton containing rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/12—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by halogen atoms or by nitro or nitroso groups
    • C07C233/13—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by halogen atoms or by nitro or nitroso groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/10—Preparation of carboxylic acid amides from compounds not provided for in groups C07C231/02 - C07C231/08
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/16—Preparation of optical isomers
    • C07C231/18—Preparation of optical isomers by stereospecific synthesis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к области фармацевтики и касается применения сафинамида (a) или ралфинамида (b) высокой степени чистоты или их соли фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание соответствующей примеси (S)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (IIa) или (S)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (IIb) или их соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,03 мас.% для производства лекарственного препарата для лечения, соответственно: (a) эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, депрессии, синдрома усталых ног и мигрени или (b) болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическую боль, мигрени, биполярных расстройств, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений в условиях, которые не препятствуют активности цитохромов системы CYP450 и не проявляют блокирующих свойств в отношении HERG канала. Изобретение также относится к фармацевтическому составу, содержащему указанные соединения, предназначенному для лечения указанных состояний, а также способу лечения указанных состояний с использованием указанных сафинамида или ралфинамида высокой степени чистоты, или их соли фармацевтически приемлемой кислоты. Заявленное изобретение позволяет повысить безопасность лечения перечисленных состояний с использованием средств на основе сафинамида и ралфинамида, а также позволяет распространить саму возможность такого лечения на группы пациентов, которым оно ранее не было доступным.

Description

Настоящее изобретение относится к области фармацевтики, а именно к применению (8)-2-(4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, т.е. сафинамида (1а), и (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, т.е. ралфинамида (ГЬ), и их солей с очень высокой энантиомерной и химической чистотой для лечения различных заболеваний и болезненных состояний, в условиях, не препятствующих активности цитохромов системы СУР450 и не проявляющих блокирующих свойств в отношении НЕКС каната.
Сафинамид (ΝΑ-1015, РСЕ-26743А, ΡΝυ-151774Ε) представляет собой блокатор натриевых каналов, модулятор кальциевых каналов, ингибитор моноаминоксидазы В (МАО-В), ингибитор высвобождения глутамата и модулятор метаболизма дофамина.
Сафинамид применяется при лечении нарушений ЦНС, в частности, эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, депрессии, синдрома усталых ног и мигрени (АО 90/14334, АО 04/089353, АО 05/102330, АО 04/062655).
Ралфинамид (ΝΑ-1029, РСЕ-26742А, ΡΝυ-0154339Ε) представляет собой блокатор натриевых каналов, применяемый при лечении болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическую боль, мигрень, биполярные расстройства, депрессии, сердечно-сосудистые, воспалительные, мочеполовые, метаболические и желудочно-кишечные нарушения (АО 99/35125, АО 03/020273, АО 04/062655, АО 05/018627, АО 05/07С405, АО 05/102300, АО 06/02705).
В настоящее время было обнаружено, что широко распространенные препараты сафинамида и ралфинамида в соответствии со способами, описанными на предыдущем уровне техники, содержат две нежелательные примеси, т.е., соответственно, (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (11а) и (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (ГГЬ), и их соль, в частности, соответствующие метансульфонаты (11с) и (116)
Данный факт особенно важен из-за очень высокой токсичности двух приведенных выше примесей.
Многие потенциальные лекарственные средства не проходят клинические испытания из-за непредвиденного действия на метаболизм человека или токсичности, обусловленной нежелательными примесями, и, следовательно, удаление подобных примесей на ранней доклинической стадии является важным и чрезвычайно необходимым.
На доклинической стадии лекарственное действие новых соединений можно определить, пользуясь общепринятой совокупностью анализов ίη νίίτο, таких как, например, анализ на взаимодействие с ферментами, метаболизирующими лекарственные средства, цитотоксичность, метаболическую стабильность и профилирование, проницаемость мембраны, собственный клиренс и блокаду каналов гена специфических калиевых каналов сердца человека (НЕКС) и т.д.
Система цитохрома Ρ450 (СУР 450) является принципиальной ферментативной системой для метаболизма липофильных ксенобиотиков, включая лекарственные средства, канцерогены и загрязнители окружающей среды. СУР 450 представляет собой гемсодержащую, мембраносвязанную полиферментативную систему, которая присутствует во многих тканях, но в самой высокой концентрации присутствует в печени. Приблизительно оценивают, что в человеческой печени существуют от 15 до 20 различных форм СУР 450, метаболизирующих ксенобиотики. На данный момент у млекопитающих обнаружено более четырнадцати семейств генов СУР. Несмотря на существование высокой гомологии, обширные исследования раскрыли, что каждое СУР семейство и подсемейство играют различные роли в ксенобиотическом метаболизме. Три СУР семейства СУР1, СУР2 и СУР3 составляют около 70% человеческих печеночных микросом СУР, причем СУР3 составляет приблизительно 30%. Данные СУР главным образом ответственны за метаболизм большинства торговых лекарственных средств.
Семейство СУР1 содержит несколько составляющих, которые включают СУР1А1, СУР1А2 и СУР1В1, и они участвуют в метаболизме ацетаминофена, кломипрамина и имипрамина.
Семейство СУР2 содержит несколько подсемейств, включающих СУР2А, СУР2В, СУР2С, СУР2Ь и СУР2Е. Подсемейство СУР2С содержит по меньшей мере семь составляющих. СУР2С9 отвечает за
- 1 025326 метаболизм ибупрофена, диклофенака, толбутамида и торсемида. СУР2С19 представляет собой основной изофермент, метаболизирующий диазепам и омепразол. Было показано, что СУР2Э6 отвечает за метаболизирование свыше 30% лекарственных средств на рынке, включающих антидепрессанты и сердечно-сосудистые и антипсихотические лекарственные средства. Три изоформы семейства СУР3 были обнаружены в человеческой печени. Было установлено, что СУР3Л4 человека является самой важной изоформой в метаболизме лекарственного средства. На сегодняшний день метаболизм, катализируемый СУР3Л4, является основным способом выведения практически для 50% торговых лекарственных средств.
В силу своей важности для метаболизма лекарственных средств как СУР3Л4, так и СУР2Н6 часто вовлечены в лекарственные взаимодействия, и некоторые клинически применяемые соединения были идентифицированы в качестве мощного ингибитора данных СУР 450 изоформ, такие как кетоконазол, терфенадин, эритромицин, миконазол, пропанолол и хинидин соответственно. Этот факт налагает очевидное ограничение на применение таких лекарственных средств.
Дополнительная проблема, заключающаяся в скоропостижной смерти как побочном эффекте действия неантиаритмических средств, является основным фармацевтическим фактором опасности, с которым сталкивается фармацевтическая промышленность и органы здравоохранения. За последние годы по меньшей мере пять лекарственных средсть, лидирующих на рынке продаж (астемизол, сертиндол, терфенадин, цисаприда моногидрат, грепафлоксацин), были изъяты с рынка из-за сообщений о скоропостижной смерти. Во всех случаях, синдром удлинения интервала ОТ (Б-ОТ8). патология реполяризации сердечной мышцы, которая характеризуется удлинением интервала ОТ в электрокардиограмме, подразумевался в качестве предрасполагающего фактора трепетание-мерцание, полиморфной желудочковой пароксизмальной тахикардии, которая может спонтанно обращаться в фибрилляцию желудочков и приводить к скоропостижной смерти. Можно проследить связь врожденного Б-ОТ8 с некоторыми возможными мутациями, приводящими к повреждениям натриевых каналов и двух калиевых каналов: быстро активирующийся калиевый ток задержанного выпрямления (1кг) и медленно активирующийся калиевый ток задержанного выпрямления (Гк8). Важно отметить, что фактически в каждом случае увеличенной продолжительности стимулирующего сердечную деятельность эффекта, потенциально связанного с воздействием лекарственного средства (приобретенный ЬОТ8), можно проследить связь с одним специфическим механизмом: блокировкой Гкг тока в сердце. Этот ток, основной фактор 3 фазы реполяризации в конце интервала ОТ, проводится тетрамерными порами, причем отдельные субъединицы кодируются НЕКС. В связи с блокировкой НЕКС К+ каналов, которую считают доминирующей причиной удлинения ОТ, обусловленного действием лекарственного средства, важным объектом Е фармацевтической промышленности стало раннее обнаружение соединений с подобным побочным эффектом.
Соединения с усиленным ингибированием ферментов, метаболизирующих лекарственные средства, в частности, СУР 450 ферментов, и блокирующими изоформами НЕКС канала имеют высокую вероятность токсичности, и разработка таких соединений должна быть прекращена на ранней стадии.
Как показано в табл. 1, примеси (11а и 1ГЬ) в виде метансульфонатной сети (11с и ГИ) сильно ингибируют в микро-и субмикромолярном диапазоне СУР3Л4, СУР2Н6, СУР2С19, СУР2С9 и НЕКС токи, и являются высоко цитотоксичными по сразнению с метансульфонатом сафинамида (Гс) и метансульфонатом ралфинамида (И) высокой степени чистоты, синтезированных с применением способа, раскрытого в настоящей заявке.
Таблица 1
Соединвние НЕКО ГС501 мкМ Цитот оксич ность Щю, мкМ СТРЗА4 Юо, мкМ СТР2О6 1СЮ, мкМ СТР2С19 ГСзд, мкМ СХР2С9 1С50, мкМ СХР1А2 1Сю, мкМ
Примесь Нс 1,20 6, 70 0,05 0,77 0,42 7,29 >4 0
Метансульфонат сафинамида 27,0 248,0 >40 >4 0 23,85 >4 0 >4 0
Примесь ΙΙά 2,60 15,00 0,05 0,92 1,89 8,01 >4 0
Метансульфонат ралфинамида 18,0 >300 >40 >4 0 >4 0 >4 0 >4 0
В табл. 2 показаны сравнительные результаты ГС50) по ингибированию цитохрома СУР3Л4 с использованием метансульфонатов сафинамида и ралфинамида высокой чистоты, синтезированных при помощи нового способа данного изобретения, с сафинамидом и ралфинамидом, полученными при помощи того же способа, в присутствии 0,3% примеси ГГс и ГИ, соответственно. При добавлении 0,3% примеси ГГс и ГИ к метансульфонатам сафинамида и ралфинамида высокой чистоты в обоих случаях наблюдается значительное уменьшение ГС50 на СУР3Л4, которое означает, что примеси способствуют усиленному ингибированию ферментативной активности.
- 2 025326
Таблица 2
Соединение ΟΥΡ3Α4 1С50, мкМ
Метансульфонат сафинамида >4 0
Метансульфонат сафинамида плюс 0,3% примеси Пс 18
Метансульфонат ралфинамида >4 0
Метансульфон ат ралфинамида плюс 0,3% примеси ΙΙά 7,76
Как показано в табл. 3, примесь (Пс) повышает, начиная с 3 мг/кг в/б, смертность у мышей по тесту максимального электрошока (МЕ§) без какой-либо фармакологической активности, т.е. защиты от конвульсий.
Таблица 3
Соединение МЕЗ
3 мз’/кг в/«5 3 мг/кг в/б 3 мг/кг в/б
% зашиты Мертвые /живые % защиты Мертвые /живые % Защиты Мертвые /живые
тансульфонат сафинамида 50 0/10 100 0/10 100 0/10
Примесь 11с 0 5/1- 0 4/10 0 4/10
В табл. 4 показано, что примесь ΙΜ, при пероральном введении в концентрациях 10 и 20 мг/мг по тесту максимального электрошока (МЕ§) не защищает мышей от конвульсий в сравнении с такими же дозами метансульфоната ралфинамида.
Таблица 4
МЕЗ
Соединение 10 мг/кг1 п/о 20 мг/кг п/о
% защиты Мертвые/ живые % защиты Мертвые/ живые
Метансульфонат ралфинамида 60% 0/10 90% 0/10
Примесь ΙΜ 0% 0/10 0% 0/10
На основании приведенных данных примеси Пс и Пй, присутствующие в сафинамиде и ралфинамиде, соответственно, синтезированных при гомощи способа, описанного в XVО 90/14334 и Рс\агс11о е! а1. в 1. Мей. СЬет, 1998, 41, 579-590, показывают ίη νίίτο некоторые нежелательные свойства, такие как клеточная токсичность, усиленное ингибирование какой-либо изоформы СУР 450, блокировка каналов НЕКС и отсутствие защитной активности на ίη νίνο модели эпилепсии.
Одним из важных аспектов ΟΥΡ является изменение среди разных групп населения. Изменения в метаболизме лекарственных средств имеют большое значение в клинических исследованиях. Значительное изменение ферментативной активности СУРЗА4 и СУР2И6 было показано среди различных этнических групп и среди различных индивидов в одной и той же этнической группе. Различие в СУР активности среди индивидов существенно меняется в зависимости от различных изоферментов. Изменения в уровне экспрессии СУР различных индивидов могут вызвать изменения в метаболизме лекарственного средства. Что еще более важно, полиморфизм также может привести к модификациям СУР фермента с пониженной или повышенной ферментативной активностью, которая влечет за собой изменения в метаболизме лекарственного средства. Полиморфизм СУР2И6 является хорошо изученным вопросом в метаболизме лекарственного средства. В клинических испытаниях ярко выраженные изменения среди индивидов впервые были обнаружены в метаболизме антигипертензивных и противоэпилептических лекарственных средств. Выведение СУР2И6 метаболизированных лекарственных средств медленнее, чем у тех индивидов, которые несут дефектные СУР2И6 аллели. Индивиды с медленным метаболизмом классифицируются как медленные метаболизаторы (РМ), тогда как индивидов, обладающих ускоренным метаболизмом, называют экстенсивными метаболизаторами (ЕМ). Распространение РМ фенотипа у населения различного расового происхождения меняется: приблизительно от 5 до 10% европеоидов имеют РМ фенотип, но только 1% азиатского населения. СУР2С19 представляет собой другую важную полиморфную изоформу, которая имеет клинические проявления.
Принимая во внимание данные наблюдения, соединение, которое не препятствует изоформам СУР450 (ни ингибированием, ни индукцией), имеет очень малый риск лекарственных взаимодействий в клинической практике и может просто и безопасно прописываться врачами.
В частности, лекарственные средства, которые не препятствуют цитохромам системы СУР450, особенно требуются для терапевтического лечения индивидов, которые классифицируются как медленные метаболизаторы (РМ) или для терапевтического лечения пациентов, которые параллельно принимают другие лекарственные средства, о которых известно, что они взаимодействуют с указанными цитохромами, такие как кетоконазол, терфенадин, эритромицин, миконазол, пропанолол и хинидин, и/или известно, что они обладают свойствами блокировки НЕКС каналов.
-3 025326
В соответствии с распространенной клинической практикой, метансульфонаты сафинамида и ралфинамида (1с и Ы) обычно вводят пациенту, нуждающемуся в этом, в течение долгого периода времени, подразделяй на несколько суточных доз. Это, в частности, тот случай терапевтических применений, в котором заболевание, которое необходимо лечить, представляет собой: Болезнь Паркинсона, Болезнь Альцгеймера и синдром усталых ног (для применения Сафинамида) или хроническую или нейропатическую боль, сердечно-сосудистые или воспалительные нарушения (для применения Ралфинамида). Несмотря на то, что суточная доза может варьироваться в соответствии со специфическими условиями и нуждами пациентов, суточная доза метансульфоната сафинамида обычно может находиться в диапазоне от 10 до 800 мг/день, тогда как суточная доза метансульфонатов ралфинамида обычно может находиться в диапазоне от 10 мг/день до 1 г/день. При таких условиях и, принимая во внимание данные, о которых сообщалось выше, весьма целесообразно сохранять уровень примесей (Па) и (ПЬ) или их солей, в частности метансульфонатных солей (Пс) и (Пй), в фармацевтических дозированных формах сафинамида и ралфинамида или их солей как можно ниже, в любом случае ниже 0,03%, предпочтительно ниже 0,01 мас.% по отношению к количеству, соответственно, сафинамида и ралфинамида или их солей, в частности метансульфонатных солей.
Научные исследования и экспериментальные исследования, проведенные авторами, показали, что сафинамид и ралфинамид и соответствующие соли фармацевтически приемлемых кислот, полученные в соответствии со способами предшествующего уровня техники, содержат количество соответствующих примесей (Па) и (ПЬ) или соответствующих солей фармацевтически приемлемых кислот, таких как (Пс) и (Пй), которое больше 0,03 мас.%. Следовательно, указанные выше продукты не подходят для безопасных терапевтических применений. В частности, фармацевтические препараты, содержащие сафинамид или ралфинамид или их соли фармацевтически приемлемых кислот, где содержание примесей (Па), (ПЬ) и соответствующих солей фармацевтически приемлемых кислот не ниже 0,03%, предпочтительно 0,01 мас.% по отношению к указанным выше активным веществам, непригодны в качестве лекарственных препаратов.
В данном описании и формуле изобретения значения определенных выше ограничений, если не оговорено иное, предлагаются в качестве выражения процентного соотношения по массе активных веществ, т.е. эффективное содержание биологически активней примеси (Па, ПЬ) по отношению к эффективному содержанию терапевтически активного вещества (1а, 1Ь).
Способ, описанный в настоящей заявке, посредством значительного уменьшения примесей приводит к продуктам высокой химической чистоты и более безопасному биологическому профилю. Другие примеси, едва детектируемые, возникают из очень небольших количеств 2- и 4-фторбензилхлорида и 3- и 4-фторбензилхлорида, которые содержатся в коммерчески доступных 3-фторбензилхлориде и 2фторбензилхлориде, соответственно, используемых для синтеза 4 -(З-фторбензилокси)бензальдегидного (1Уа) и 4 -(2-фторбензилокси)бензальдегидного (IУЬ) промежуточных соединений для получения, соответственно, соединений (1а) и (1Ь).
В соответствии со способом, описанным в настоящей заявке, сафинамид и ралфинамид получают с высокими выходами и высокой чистоты, если содержание (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Па) и (§)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ПЬ) и их солей, в частности, метансульфоновой кислоты (обычно называемых дибензильными производными) в сафинамиде и ралфинамиде или их солях, в частности, метансульфоновой кислоты, ниже или равно 0,03%, предпочтительно 0,1% (по массе).
Способ, позволяощий получить ралфинамид и сафинамид, которые предлагается применять согласно настоящему изобретению, исходит из 4-гидроксибензальдегида и включает три следующие стадии:
a) О-бензилирование 4-гидроксибензальдегида производными следующей общей формулы 3- или 2Р-СбНд-СНг-У, где Υ представляет собой уходящую группу (С1, Вг, I, О8О2СН3 и т.д.); причем такое Обензилирование проводят в условиях, которые являются высоко селективными в отношении Оалкилирования и дают 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид высокой чистоты;
b) восстановительное алкилирование Ь-аланинамида, основания или соли, 4-(3фторбензилокси)бензальдегидом и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегидом, где восстанавливающая система представляет собой газообразный водород и гетерогенный катализатор, с получением после кристаллизации сафинамида и ралфинамида, соответственно, очень высокой энантиомерной и химической чистоты;
c) получение сафинамидных и ралфинамидных солей фармацевтически приемлемой кислоты путем солеобразования сафинамида и ралфинамида, соответственно, полученных на предыдущей стадии. Фармацевтически приемлемыми кислотами являются, например, выбранные из азотной, хлористоводородной, бромисто-водородной, серной, перхлорной, фосфорной, метансульфоновой, птолуолсульфоновой, уксусной, трифторуксусной, прогионовой, гликолевой, молочной, щавелевой, малоновой, яблочной, малеиновой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной и салициловой кислоты.
Целью данного изобретения является обеспечение сафинамида и ралфинамида или их солей фарма-4025326 цевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, с высокой степенью чистоты, в частности, с содержанием соответствующих дибензильных производных формулы (Па) или (ПЬ) или их солей фармацевтически приемлемой кислоты, например, метансульфоновой кислоты, ниже 0,03%, предпочтительно ниже 0,01% по массе (относительно активных веществ), которые пригодны для применения для произвоства лекарственного препарата, используемого для лечения, соответственно, (а) эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, депрессии, синдрома усталых ног и мигрени или (Ь) болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическую боль, мигрени, биполярных расстройств, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений в условиях, которые не препятствуют активности цитохромов системы €.ΎΡ450 и не проявляют блокирующих свойств в отношении НЕКС канала.
Кроме того, еще одной целью данного изобретения является обеспечение фармацевтических составов, содержащих сафинамид или ралфинамид или их соли фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, в качестве активных агентов, где содержание соответствующих дибензильных производных (Па) или (ПЬ) или их солей фармацевтически приемлемой кислоты, например, метансульфоновой кислоты ниже 0,03%, предпочтительно ниже 0,01% (по массе) по отношению к указанным выше активным агентам. Такие новые фармацевтические композиции ни предлагались, ни достигались, ни посредством использования фармако-токсикологического знания относительно сафинамида и ралфинамлда, ни используя данных активных агентов, полученных в соответствии со способами, доступными на современном уровне техники в данной области.
Следовательно, указанные выше фармацевтические составы, содержащие сафинамид или ралфинамид или их соли фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, имеющие указанную выше высокую степень чистсты, представляют собой дополнительную цель данного изобретения.
Указанные выше фармацевтические составы могут необязательно содержать один или более дополнительных активных агентов, кроме сафинамида или ралфинамида или их солей фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, имеющих указанную выше высокую степень чистоты. Например, новый фармацевтический состав, применяемый для дополнительного лечения болезни Паркинсона или синдрома усталых ног, может содержать один или более дополнительных активных агентов болезни Паркинсона, таких как агенты, описанные в XVО 04/089353 и XV О 05/102300, предпочтительно дофаминовый агонист и/или леводопа, и/или ингибитор катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ), в добавление к сафинамиду или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, имеющим указанную выше высокую степень чистоты.
В качестве дополнительного примера, новый фармацевтический состав в соответствии с данным изобретением полезен для лечения болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическую боль, и мигрень, может содержать дополнительный активный агент, такой как габапентин и прегабалин, как описано в ЕР 1423168, в добавление к ралфинамиду или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, имеющим указанную выше высокую степень чистоты.
Фармацевтические составы, содержащие сафинамид или ралфинамид высокой степени чистоты в соответствии с данным изобретением, могут быть получены общепринятыми сгособами, известными на данной области, например, путем смешивания активных соединений с фармацевтически, терапевтически инертными органическими и/или неорганическими веществами-носителями. Композиции данного изобретения могут быть в жидкой форме, например в форме раствора, суспензии, эмульсии; или в твердой форме, например таблеток, пастилок, капсул, пластырей.
Подходящие фармацевтически, терапевтически инертные органические и/или неорганические вещества-носители, применяемые для получения композиции настоящего изобретения, включают, например, воду, желатин, аравийскую камедь, лактозу, крахмал, целлюлозу, стеарат магния, тальк, растительные масла, полиалкиленгликоли, циклодекстрины и тому подобное.
Фармацевтические композиции данного изобретения могут быть стерилизованы и могут содержать, кроме активного ингредиента(ов), дополнительные компоненты, хорошо известные специалистам в данной области, такие как, например, консерванты, стабилизаторы, смачивающие или эмульгирующие агенты, например, парафиновое масло, моноолеат маннида, соли для регулирования осмотического давления, буферные вещества и тому подобное.
Дополнительной целью данного изобретения является обеспечение способа лечения нарушений ЦНС, в частности, эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, синдрома усталых ног и мигрени в условиях, которые не препятствуют активности цитохромов системы СУР450 и не проявляют блокирующих свойств в отношении НЕКС канала, включающего введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества сафинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, имеющего содержание дибензильного производного (Па) или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты ниже 0,03%, предпочтительно ниже 0,01 мас.% (по отношению к активным веществам). Указанный выше способ включает лечение болезни Паркинсона или синдрома усталых ног пу-5025326 тем введения пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества сафинамида высокой степени чистоты, описанного выше, необязательно вместе с одним или более активными агентами болезни Паркинсона, как описано в АО 2004/089353, таким как, например, дофаминовый агонист и/или леводопа, и/или ингибитор катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ).
Кроме того, дополнительной целью данного изобретения является обеспечение способа лечения болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическуо боль, мигрень, биполярное расстройство, депрессии, сердечно-сосудистые, воспалительные, мочеполовые, метаболические и желудочно-кишечные нарушения, в условиях, которые не препятствуют активности цитохромов системы СУР450 и не проявляют блокирующих свойств в отношении НЕКО канала, включающего введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества ралфинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, имеющего содержание дибензильного производного (1ГЬ) или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, ниже 0,03%, предпочтительно ниже 0,01 мас.% (по отношению к активным веществам).
Указанный выше способ включает лечение болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическую боль и мигрень, при помощи ралфинамида высокой степенл чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, предпочтительно метансульфоновой кислоты, необязательно вместе с габапентином или прегабалином.
Известный уровень техники
В АО 90/14334 и в статье Реуаге11о е! а1. в ΐ. Мей. СЬет., 1998, 41, 579-590, описан трехстадийный способ получения бензилоксибензиламиноалканамидов:
a) синтез промежуточных 4-бензилоксибензальдегидов путем О-бензилирования соответствующих 4-гидроксибензальдегидов подходящими бензилхлоридами,
b) восстановительное алкилирование α-аминоамидов 4-бензилоксибензальдегидами с использованием цианоборогидрида натрия в качестве восстановителя, как схематически показано ниже
где К представляет собой, среди других заместителей, 3-Р и 2-Р; К1 представляет собой, среди других заместителей, водород; К2 представляет собой, среди других заместителей, водород; К3 представляет собой, среди других заместителей, СН3; как К4, так и К5 представляют собой, среди других заместителей, водород. В частности, поскольку дело касается получения сафинамида и ралфинамида, то восстановительное алкилирование представляет собой восстановительное алкилирование Ь-аланинамида 4-(3фторбензилокси)бензальдегидом и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегидом, соответственно, как показано ниже
В ΐ. Мей. СЬет. (Реуаге11о е1 а1.), 1998, 41, 579-590 сообщаются выходы 45 и 60% при получении метансульфоната сафинамида и ралфинамида, соответственно, исходя из соответствующих (фторбензилокси)бензальдегидов.
Способ, описанный в АО 90/14334 и в приведенной выше статье, является аналогичным и обеспечивает однореакторную систему, в которой иминоалкилирование и восстановление осуществляют в одном и том же реакторе. К смеси гидрохлорида Ь-аланинамида, цианоборогидрида натрия, метанола и измельченных молекулярных сит одновременно добавляют подходящий альдегид.
В соответствии с Реуаге11о е1 а1., в Огд. Ргер. Ргос. Ιηΐ. 1996, 28, 179-183 (где описан синтез некоторых производных α-бензиламиноамида путем восстановительного алкилирования) использование ааминоамида в виде гидрохлорида является важным для образования иминиевого иона вместо соответствующего имина, так как иминиевый ион легче реагирует с цианоборогидридом натрия, чем с альдегидной карбонильной группой.
В соответствии с указанными выше авторами, оказывается, что однореакторный способ предотвращает проблемы рацемизации основания Шиффа, а молекулярные сита ускоряют эту реакцию (несмотря на то, что выходы плохие). Цианоборогидрид является лишь восстанавливающим агентом, который используется, и, как оказывается, такой выбор обусловлен его низкой реакционной способностью и селективностью (см. обзор 8ойшт СуапоЬогоЬуйпйе - А ШдЫу §е1есйуе Кейисшд Адеп! Гог Отдашс Рипсйопа1 Огоирз - С.Р. Ьапе, 8уп1Ье515 1975, 132-146), которая обусловливает его способность проводить различие между протонированным основанием Шиффа и исходным альдегидом.
- 6 025326
Синтез, описанный в статье РсуагсПо с1 а1., обеспечивает выделение продуктов колоночной хроматографией, с последующим преобразованием в соответствующие соли обработкой кислотами. Какойлибо информации об энантиомерной и/или химической чистоте как сафинамида, так и ралфинамида и/или их солей не обеспечивается.
Способ, описанный на предшествующем уровне техники, имеет множество недостатков, которые ограничивают его применение в крупном масштабе; ниже перечислены несколько примеров указанных выше недостатков:
образование цианидов;
образование производных бора, которые трудно отделять от активных компонентов; использование измельченных молекулярных сит, которые являются физически неустойчивыми и дорогими;
низкие выходы;
низкая концентрация конечного продукта в реакционной смеси восстановительного алкилирования (около 2-3% мас./об.);
выделение продуктов колоночной хроматографией, которая считается ненадежным и дорогим методом очистки при получении активных агентов в промышленном масштабе путем химического синтеза.
Кроме того, как показано в примерах, которые сопровождают данное описание, продукты, полученные в соответствии со способами, описанными на предшествующем уровне техники, содержат количество примесей (Па), (ПЬ) Не) или (Пф, которое выше 0,03 мас.% по отношению к соответствующему активному веществу (1а), (1Ь), (1с) или (1ф. Кроме того, было показано, что трудно отделить указанные выше примеси от конечного продукта сафинамида и ралфинамида или их солей, используя общеизвестные методы очистки, такие как кристаллизация из растворителей или хроматография, которые в любом случае влекут за собой уменьшение выходов.
Синтез 4-(фторбензилокси)бензальдегидных промежуточных соединений
В соответствии с известными способами фторбензилоксибензальдегидные промежуточные соединения для синтеза сафинамида и ралфинамида получают бензилированием 4-гидроксибензальдегида в основной среде, то есть бензилированием фенольных солей, которые, будучи амб:лдентными нуклеофилами, дают два различных продукта, а именно, желаемые О-алкилированные производные и нежелательные С-алкилированные производные.
Фактически было обнаружено, что фторбензилирование 4-гидроксибензальдегида 3фторбензилхлоридом, осуществляемое в соответствии с предшествующим уровнем технлки, дает 4-(3фторбензилокси)бензальдегид (1Уа) в качестве главного продукта вместе с 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегидом (Уа), который образуется из-за алкилирования как гидроксильной группы в положении 4, так и атома углерода в положении 3 4-гидроксибензальдегида. То же самое происходит при фторбензилировании 4-гидроксибензальдегида 2-фторбензилхлоридом в соответствии со следующей схемой:
(НИЩ: 2-Р |УЪ): 2-Р
Восстановительное алкилирование Ь-аланинамида альдегидом, который содержит диалкилированную примесь, дает сафинамидный или ралфинамидный конечный продукт, который также загрязнен соответствующим диалкилированным соединением, дибензильным производным, или в виде свободного основания (Па) или (ПЬ), или в виде солеобразных соединений, предпочтительно метансульфоновой кислоты (Не) или (Пф, как показано на следующей схеме:
Вместо предпочтительной метансульфоновой кислоты можно использовать и другие фармацевтически приемлемые кислоты, например азотную, хлористо-водородную, бромисто-водородную, серную, перхлорную, фосфорную, метансульфоновуо, п-толуолсульфоновую, уксусную, трифторуксусную, пропионовую, гликолевую, молочную, щавелевую, малоновую, яблочную, малеиновую, винную, лимонную, бензойную, коричную, миндальную и салициловую кислоту.
Моноалкилированное производное (сафинамид или ралфинамид) и соответствующие диалкилиро-7 025326 ванные примеси обладают похожими химически-физическими свойствами, и это делает трудной очистку сафинамида и ралфинамида традиционными способами.
Кроме того, известные способы имеют такие дополнительные недостатки:
1) применение низшего спирта в качестве растворителя; в основных условиях растворитель, например метанол, может сам действовать как нуклеофильный реагент и дает с 3- или 2-фторбензилхлоридом некоторое количество метилфторбензилэфира;
2) экстракция конечного продукта несмешивающимся с водой органическим растворителем возможна только после того, как растворитель спиртовой реакции удален из реакционной смеси.
В настоящее время было обнаружено, что при использовании указанных выше способов предшествующего уровня техники для получения конечного продукта формулы (1а) или (1Ь), где содержание соответствующей примеси (11а) или (11Ь) ниже 0,03% (по массе), необходимо существенно очищать промежуточный 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид (1Уа) или 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (IУЬ), для того чтобы уменьшить содержание соответствующей примеси формулы (Уа) и (УЬ). Указанную выше очистку предпочтительно осуществляют путем кристаллизации реакционных продуктов, более предпочтительно путем добавления к раствору неочищенного соединения (1Уа) или (1УЬ) в инертном органическом растворителе смешивающегося инертного органического нерастворителя (осадителя).
Органический инертный растворитель предпочтительно выбирают из ароматических углеводородов и более предпочтительно представляет собой толуол. Смешивающийся инертный органический осадитель предпочтительно выбирают из низших алифатических углеводородов, и более предпочтительно представляет собой н-гексан. Дополнительный процесс кристаллизации может заключаться в растворении указанных выше соединений (1Уа) или (1УЬ) в горячем растворителе, например циклогексане или простом ди(С3-С4)алкиловом эфире, таком как диизопропиловый эфир, при кипячении с обратным холодильником, и затем охлаждении раствора до комнатной температуры, предпочтительно до 10-15°С, наиболее предпочтительно индуцируя кристаллизацию добавлением чистых кристаллов чистого соединения (1Уа) или (1УЬ).
Авторами настоящего изобретения в настоящее время, неожиданно было обнаружено, что когда реакцию между алкилирующим агентом формулы (111а) или (111Ь) (см. схему ниже, где атом Р присутствует в положении 2 или 3, и Υ представляет собой уходящую группу, такую как, например, С1, Вг, I, О8О2СН3, О8О2СбН4-рСН3 и т.д.) и 4-гидроксибензальдегидом, проводят в условиях межфазового переноса, то соответствующие 4-(фторбензилокси)бензальдегиды получают с высокими выходами и с очень низким содержанием С,О-бисалкилированных примесей.
Такое новое фторбензилирование 4-гидроксибензальдегида в условиях межфазового переноса можно проводить как в системе твердое вещество/жидкость, причем в жидкой органической фазе реагенты и катализатор фазового переноса растворяют, и твердая фаза представляет собой неорганическое основание или 4-гидроксибензальдегидную соль (по возможности полученную ίη δίΐιι из 4гидроксибензальдегида и самого неорганического основания), так и в системе жидкость/жидкость органическая/водная, причем неорганическое основание растворено в водной фазе.
Предпочтительной системой является система твердое вещество/жидкость, в которой неорганическое основание предпочтительно выбирают из Иа2СО3, К2СО3, КОН, ИаОН.
Органические растворители, используемые в реакции, как в случае системы жидкость/жидкость, так и системы твердое вещество/жидкость, могут быть простыми диалкиловыми эфирами, такими как, например, ди-трет-бутиловый, этил-трет-бутиловый эфир, или ароматическими углеводородами, такими как, например, толуол, этилбензол, изопропилбензол и ксилолы. Все данные растворители можно легко регенерировать перегонкой.
Используемые катализаторы фазового переноса могут быть четвертичными солями аммония или фосфония, такими как, например, тетрабутиламмонийбромид, тетрадецилтриметиламмонийбромид, гексадецилтрибутилфосфонийбромид, трикаприлилметиламмонийхлорид (ΑΙίςυηΙ). метилтриалкил(С8С10)аммонийхлорид (АДодеп), причем предпочтительным является тетрадецилтриметиламмонийбромид. Также в качестве катализаторов фазового переноса можно использовать полиэтиленгликоли с низкой молекулярной массой, такие как, например, РЕО-200 (СА§ 25322-68-3) или РЕО-400 (СА§ 25322-68-3).
Количество используемого катализатора фазового переноса находится в диапазоне от 0,02 до 1 моль на моль 4-гидроксибензальдегида, предпочтительно от 0,1 до 1 моль на моль 4-гидроксибензальдегида, так как в данных условиях количество С,О-бис-фторбензилированных примесей может в результате составлять менее 0,03%, предпочтительно равно 0,01% или менее пс массе.
Соотношение между алкилирующими агентами формулы (Ша) или (111Ь) и 4-гидрокси- 8 025326 бензальдегидом находится в диапазоне от 0,6 до 1,5, причем предпочтительно оно находится в диапазоне от 0,9 до 1,1.
Температура реакции находится в диапазоне от 60 до 160°С, причем предпочтительный интервал составляет от 80 до 120°С.
Время реакции обычно составляет диапазон от 4 до 8 ч.
Реакционные выходы очень высокие, как правило, более 90%.
Эффективность реакции, т.е. концентрация реакционных продуктов в реакционной смеси очень высокая в описанных реакционных условиях, обычно больше или равна 25% (мас./об.).
Синтез сафинамида и ралфинамида путем восстановительного алкилирования а-аминоамидов
Современное состояние привело специалистов в данной области к мнению, что восстановительное алкилирование а-аминоамидов 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегидами с использованием водорода и гетерогенного катализатора в качестве восстанавливающего агента непригодно для получения сафинамида и ралфинамида из-за несовместимости между реагентами и конечными продуктами и восстановительными условиями.
Фактически, хорошо известно, как легко бензальдегиды восстанавливаются до бензиловых спиртов или даже до соответствующих углеводородов, а также известно, что условия, которые следует применять для осуществления восстановительного алкилирования при помощи водорода и гетерогенного катализатора, аналогичны условиям, применяемым для разрушения связей между бензильным атомом углерода и гетероатомами, такими как азот или кислород, тип связей, который присутствует как в сафинамиде, так и в ралфинамиде и в их предшественниках.
Фактически, бензильную группу обычно используют в качестве защитной группы фенолов или аминов (см. РгоЮсОус Стоирз ίη Отдашс §уи1йе515, Т.^. Огеепе апб Р.О.М. \Уи15. 3'1 Εάίΐίοη, 1999, ίοΐιη \УПеу & §опз, 1пс.) из-за легкости ее введения и последующего удаления каталитическим восстановлением.
При восстановительном алкилировании для получения сафинамида и ралфинамида можно было ожидать образования множества побочных продуктов, некоторые из которых представлены ниже:
Тот факт, что сафинамид и ралфинамид были получены с высокими выходами и чистотой путем восстановительного алкилирования Ь-аланинамида 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегидом с использованием водорода и гетерогенного катализатора в качестве восстанавливающей системы, является удивительным и прогрессивным аспектом данного синтетического способа.
Кроме того, условия реакции, которые используются в соответствии с данным способом, легко применимы и в крупномасштабном производстве.
Восстановительное алкилирование в соответствии со способом, который позволяет получить ралфинамид и сафинамид, применение которых предлагается в настоящей заявке, осудествляют в две стадии:
a) образование основания Шиффа,
b) каталитическое восстановление основания Шиффа.
Две стадии можно осуществлять последовательно в одном и том же реакторе (однореакторная реакция) либо с, либо без выделения основания Шиффа, в обоих случаях с высокими выходами.
В случае выделения основания Шиффа экспериментальные условия, применяемые для его образования, дают возможность получить выделенное основание Шиффа в виде осадка с высокими выходами и в очень чистом виде.
Получение основания Шиффа осуществляют надлежащим образом в органическом протонном растворителе, который должен быть инертным к реагентам и продуктам, а также инертным к восстановительным условиям иминной двойной связи, таком как, например, низший (С1-С5)алканол, предпочтительно метанол, этанол и изопропанол.
Образование основания Шиффа должно быть полным и это является важным фактором для получения высоких выходов на последующей стадии каталитического восстановления.
Следовательно, предпочтительным является выделение оснований Шиффа (У1а) и (У1Ь) перед осуществлением восстановления иминной двойной связи.
Выделенные иминосоединения (УТа) и (УТЬ) являются полезными промежуточными соединениями
- 9 025326 для получения сафинамида и ралфинамида, соответственно, согласно данному изобретению.
Альтернативно, способствовать завершению реакции иминоалкилирования можно путем ее проведения в таких условиях, чтобы вызвать осаждение иминосоединений (У1а) и (У1Ь) и подвергнуть каталитическому восстановлению суспензию, содержащую промежуточное иминопроизводное.
Соотношение между Ь-аланинамидом (основание или соль) и 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегидом может составлять 1:1, но также преимущественно можно использовать 10% избыток Ь-аланинамида.
Ь-аланинамид можно вводить или в качестве свободного основания, или в качестве его кислотноаддитивной соли. Предпочтительно его вводят в реакционную смесь в виде соли, наиболее предпочтительно в виде гидрохлоридной соли, вместе со стехиометрическим количеством основания, предпочтительно третичным амином, таким как, например, триэтиламин или диизопропилэтиламин.
Температура реакции при получении основания Шиффа находится в диапазоне от 0 до 60°С, предпочтительно от 20 до 30°С.
Время реакции находится в диапазоне от 1 до 15 ч, предпочтительно от 4 до 6 ч.
Восстановление основания Шиффа при помощи водорода и гетерогенного катализатора начинают только после того, как образование основания Шиффа завершено: если его начинают до этого, то побочные реакции становятся существенными, иногда преобладающими, с потерей в выходах и чистоте. Одна из данных побочных реакций, более существенная, вызывает образование бензиловых спиртов восстановлением карбонильной группы выбранного (фторбензилокси)бензальдегида.
Предпочтительными гетерогенными катализаторами являются никелевый, родиевый, палладиевый или платиновый катализаторы на инертной подложке, такой как, например, углеродная, алюмооксидная и кремниевая, предпочтительно углеродная и алюмооксидная, и его используют в количестве, составляющем диапазон от 2 до 20% 4-(3- или 2-фторбензилокси)бензальдегида, предпочтительно от 5 до 10%.
Платиновый и палладиевый катализаторы являются наиболее предпочтительными. Платина на активированном угле, в частности, дает отличные результаты как по показателю выходов, которые почти количественные, так и по показателю селективности, так как восстанавливается только иминная двойная связь, тогда как двойная связь между бензильным атомом углерода и гетероатомами остается неизменной. Было обнаружено, что сафинамид и ралфинамид являются неожиданно устойчивыми к условиям реакции восстановления, что является существенным фактором в промышленном получении больших количеств сафинамида или ралфинамида, так как случайное увеличение врэмени реакции не повредило бы конечным продуктам.
Наилучшие результаты были получены с влажным 5% Ρί/С (50% Н2О) и, в частности, с 5% Ρΐ на углеродном порошке ЕпдеШагй 8.Г.1., Коте, Йа1у. Реакцию гидрогенизации обычно осуществляют при давлении водорода, находящемся в диапазоне от 1 до 10 бар, предпочтительно от 3 до 6 бар и при температуре, находящейся в диапазоне от 10 до 70°С, предпочтительно от 25 до 40°С.
Время реакции восстановления может варьироваться от 1 до 20 ч в соответствии с температурой, давлением, концентрацией, турбулизацией и т.д., всеми факторами, хорошо известными специалистам в данной области техники.
Наилучшие результаты были получены при времени реакции 4-6 ч. По окончании реакции катализатор восстанавливают путем фильтрования и повторно используют или регенерируют: реакционный растворитель перегоняют при пониженном давлении, остаток растворяют в несмешивающемся с водой органическом растворителе и неорганические соли удаляют промыванием водой.
Из конечных неочищенных сафинамида или ралфинамида удаляют перегонкой органический растворитель, в котором они растворены. Затем неочищенные сафинамид или ралфинамид очищают кристаллизацией. Кристаллизацию предпочтительно осуществляют путем добавления к раствору соответствующего неочищенного соединения формулы (1а) или (1Ь) в инертном органическом растворителе смешивающегося инертного органического осадителя. Органический инертный растворитель предпочтительно выбирают из ароматических углеводородов, таких как бензол, толуол, диметилбензол и этилбензол, и низших алкилацетатов, и наиболее предпочтительно представляет собой этилацетат. Смешивающийся инертный органический осадитель предпочтительно выбирают из низших алифатических углеводородов, таких как гексан и гептан, и циклогексан, и наиболее предпочтительно представляет собой нгексан.
Затем основания преобразовывают в необходимые соли в соответствии с известными способами, в частности, их преобразовывают в метансульфонатную соль, которая имеет физические/химические свойства (стабильность,. гранулометрию, текучесть и т.д.), подходящие для последующего формулирования в фармацевтический препарат для применения в качестве лекарственного средства.
Пример 1. Получение очищенного 4-(2-фторбензилокси) бензальдегида (IУЬ) путем межфазового переноса
Смесь 2-фторбензилхлорида (5 кг, 34,58 моль), 4-гидроксибензальдегида (3,9 кг, 31,94 моль), карбоната калия (4,3 кг, 31,11 моль) и тетрадецилтриметиламмонийбромида (0,41 кг, 1,22 моль) в толуоле (9,5 кг) медленно доводят при перемешивании в атмосфере азота до температуры кипения с обратным
- 10 025326 холодильником и кипятят с обратным холодильником в течение 6 ч.
Затем раствор концентрируют при комнатном давлении, добавляют 3 кг толуола, отгоняют и повторяют эту процедуру еще раз.
Гетерогенную смесь затем охлаждают до комнатной температуры и твердое вещество выделяют фильтрованием. Оставшийся растворитель удаляют затем при пониженном давлении и к маслянистому остатку добавляют 1,2 кг толуола. Смесь нагревают до около 40°С и добавляют затравку в виде нескольких граммов чистого 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида.
Гетерогенную смесь перемешивают в течение 15 мин при 35-40°С и затем добавляют н-гексан (9 кг) при такой температуре в течение 30 мин. После охлаждения до 0-5°С и перемешивания в течение дополнительного часа при такой температуре твердое вещество отделяют фильтрованием и сушат при пониженном давлении, с получением 6,5 кг (87,6% выход) 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида; температура плавления 56,7°С (ДСК, 5°С/мин).
Вышеописанную реакцию повторяют в пропорции 1:100, используя 39 г (0,319 моль) 4гидроксибензальдегида в качестве исходного вещества и следуя описанной выше методике, за исключением того, что после удаления реакционного растворителя и добавления толуола к маслянистому остатку полученную смесь нагревают до около 30-35 (вместо 40°С) и после добавления затравки в виде небольшого количества чистого 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида гетерогенную смесь перемешивают в течение 15 мин при 30°С (вместо 35-40°С) перед добавлением н-гексана. Выход составляет 66,8 г (90%) 4-(2фторбензилокси)бензальдегида, температура плавления 56,7°С (ДСК, 5°С мин), имеющего ГХ чистоту
92,2 (% по площади, см. пример 1бА) и содержание 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида 0,01 мас.%, определенное ГХ (газовая хроматография) (см. пример 16В).
(*) Подразумевается, что выходы, представленные в данном и в следующих примерах, если специально не оговорено иное, представляют собой молярные выходы.
1.1 Дополнительная очистка 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида путем кристаллизации
Один килограмм продукта, полученного в соответствии с методикой, описанной в примере 1, растворяют в 2 кг диизопропилового эфира при кипячении с обратным холодильником и при перемешивании. Раствор охлаждают до 50-55°С в течение 10-15 мин и добавляют затравку в виде нескольких граммов чистого 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида. Суспензию охлаждают до 10-15°С в течение 45-60 мин и перемешивают дополнительно в течение часа. Осадок окончательно отделяют фильтрованием, промывают холодным диизопропиловым эфиром (0,2 кг) и сушат при пониженном давлении с получением 0,93 кг 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида ГХ чистоты 99,8 (% по площади, см. пример 16А) и содержания 3-(2-оторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (УЬ) 0,005 мас.%, определенного ГХ, в соответствии с примером 16В.
1.2 Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (ГУЬ) путем межфазового переноса (РТС) с использованием различных катализаторов.
4-(2-Фторбензилокси)бензальдегид получают алкилированием 4-гидроксибензальдегида (0,39 г) 2фторбензилхлоридом, следуя аналогичной методике примера 1, но используя три различных катализатора фазового переноса.
Результаты представлены в следующей табл. 4
Таблица 4
Эксперимент Катализатора фазового переноса (КФП) % УЪ % Выход
1,2 (а) Тетрабутилфосфонийбромид 0,03 65,0
1,2 (а) АНфтаС 336 0,03 68,8
1,2 (а) РЁ6 400 0,14 96,0
*: А1к|иа1 336: трикаприлилметиламмониихлорид ** %УЬ: содержание 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (мас.%)
Содержание соединения УЬ определяют ГХ, в соответствии с примером 16В.
1.3 Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (ГУЬ) путем межфазового переноса (РТС) в ксилоле.
4-(2-фторбензилоху)бензальдегид получают с 86,6% выходом и содержанием 3-(2-фторбензил)-4(2-фторбензилокси)бензальдегида 0,02 мас.%, определенным ГХ (см. пример 16В), взаимодействием 4гидроксибензальдегида (0,39 г) с 2-фторбензилхлоридом в соответствии с аналогичной методикой примера 1, но заменяя толуол ксилолом в качестве растворителя.
1.4 Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (ГУЬ) путем межфазового переноса с использованием гидроксида калия в качестве основания
4-(2-фторбензилокси)бензальдегид получают с 86,7% выходом и содержанием 3-(2-фторбензил)-4(2-фторбензилокси)бензальдегида 0,51 мас.%, определенным ГХ (см. пример 16В), взаимодействием 4гидроксибензальдегида (0,39 г) с 2-фторбензилхлоридом в соответствии с аналогичной методикой примера 1, но используя гидроксид калия (0,35 моль) вместо карбоната калия.
Полученный продукт можно дополнительно очистить кристаллизацией, в соответствии с примером 1.1.
- 11 025326
1.5 Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (IУЬ) путем межфазового переноса с использованием 2-фторбензилбромида
4-(2-фторбензилокси)бензальдегид получают с 88,6% выходом и содержанием 3- (2-фторбензил)-4(2-фторбензилокси)бензальдегида 0,07 мас.%, определенным ГХ (см. пример 16В), взаимодействием 4гидроксибензальдегида (15,6 г) с 2-фторбензилбромидом вместо 2-фторбензилхлорида, в соответствии с аналогичной методикой примера 1.
Пример 2. Получение (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамида, 1Ь) высокой степени чистоты (однореакторная реакция)
В автоклав загружают 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (2,0 кг, 8,69 моль), полученный в соответствии с примером 1, и затем добавляют полученный отдельно раствор гидрохлорида Е-аланинамида (1,2 кг, 9,63 моль) и триэтиламина (0,97 кг, 9,63 моль) в метаноле (9,5 кг). Смесь перемеливают при 20-25°С в течение около 1 ч и затем после добавления в затравки в виде нескольких граммов (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамида продолжают перемешивание дополнительно в течение 15 мин. Затем к перемешанной гетерогенной смеси при 20-25°С добавляют метанол (1,6 кг) и влажный (50% Н2О) Ρί/С 5% (ЕпдеШатй сой. Екса! 22, ЕпдеШатй 8.Т.1., Коше, Па1у) (0,28 кг).
Воздух удаляют из автоклава при помощи азота, затем вводят водород при 5,0 бар и давление поддерживают на данном значении в течение хода гидрогенизации.
Спустя 5 ч при 30-35°С реакционную смесь охлаждают до 15°С, после добавления метанола (4,8 кг) и нагревания до 40-45°С суспензию фильтруют и твердое вещество промывают метанолом (1,6 кг).
Растворитель удаляют при пониженном давлении при около 30°С, к остатку добавляют воду (5 л) при 20-25°С при охлаждении и при перемешивании, так как добавление воды является экзотермическим процессом. Гетерогенную смесь дополнительно охлаждают до 15-20°С, оставляют при такой температуре на 1 ч и затем фильтруют. Собранное твердое вешество промывают холодной водой (4 л) и сушат при пониженном давлении, с получением 2,23 кг (85,0% выход) ралфинамида с ВЭЖХ чистотой 98,8 (% по площади), определенной в соответствии со способом примера 17А, и содержанием С,Одиалкилированного (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида 0,01 мас.%, определенным ВЭЖХ, в соответствии со способом примера 17В.
2.1 Получение (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1Ь) высокой степени чистоты с использованием палладиевого катализатора
Смесь 5 г 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида, полученного в соответствии с примером 1, и соответствующее количество гидрохлорида Е-аланинамида и триэтиламина гидрогенизируют в соответствии с аналогичной методикой примера 2, но с использованием влажного (50% Н2О) Рй/С 10% вместо влажного (50% Н2О) Ρί/С 5%, с получением (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1Ь) с 70% выходом.
Пример 3. Получение метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (метансульфонат ралфинамида, 1й) высокой степени чистоты
Ралфинамид (2,8 кг, 9,26 моль), полученный как описано в примере 2, растворяют в изопропаноле (19,5 кг) и выдерживают при 65-70°С и при перемешивании в инертной атмосфере.
После обработки активированным углем (150 г) и фильтрования в раствор добавляют затравку чистого метансульфоната ралфинамида и добавляют метансульфоновую кислоту (900 г, 9,36 моль) в течение 30 мин при перемешивании и при температуре 50-55°С. Затем суспензию охлаждают до 15-20°С в течение 2 ч и продолжают перемешивание в течение дополнительного часа. Твердое веществе окончательно отделяют фильтрованием и сушат при пониженном давлении с получением 3,59 кг (97,3% выход) метансульфоната ралфинамида.
ВЭЖХ чистота полученного продукта составляет 99,3 (% по площади, см. пример 17А), и содержание С,О-диалкилированного метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,005 мас.% (см. пример 17В); температура плавления 240,6°С посредством ДСК (5°С/мин). Энантиомерная чистота метансульфоната ралфинамида, определенная при помощи хиральной колонки ВЭЖХ, выше 99,8 (% по площади, см. пример 18).
Пример 4. Получение очищенного 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа) в растворе этанола
К смеси 4-гидроксибензальдегида (1,52 кг, 12,45 моль), карбоната калия (1,72 кг, 12,45 моль), йодида калия (0,2 кг, 1,20 моль) в этаноле (13,0 кг) добавляют 1,8 кг 3-фторбензилхлорида (1,80 кг, 12,45 моль) при перемешивании при комнатной температуре.
Смесь постепенно нагревают до кипения с обратным холодильником и поддерживают при такой температуре в течение 6 ч.
Затем реакционной смеси дают охладиться до 25°С, суспензию фильтруют и твердое вещество промывают этанолом (1,0 кг); растворы этанола объединяют и затем концентрируют при пониженном давлении до получения остатка приблизительно 3,5 кг.
К полученному остатку добавляют толуол (5,0 кг) и воду (1,7 кг), смесь растворителей интенсивно перемешивают в течение 30 мин и после отделения водной фазы органический слой упаривают досуха при пониженном давлении, с получением неочищенного 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида.
- 12 025326
К полученному продукту, растворенному в 2 кг толуола, добавляют затравку 4-(3фторбензилокси)бензальдегида при перемешивании при 20-25°С, затем в течение 30 мин добавляют нгексан (3,8 кг) и смесь охлаждают до 0°С при перемешивании.
Через 2 ч твердое вещество фильтруют и промывают н-гексаном (1,3 кг). После сушки получают 2,6 кг (90,7% выход) желаемого продукта газохроматографической чистоты 99,9 (% по площади, см. пример 16А) и содержанием 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида 0,005 мас.%, определенным ГХ (% по площади, см. пример 16В); температура плавления 43,1°С посредством ДСК 5°С/мин.
Пример 5. Получение 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа) путем межфазового переноса
Смесь 3-фторбензилхлорида (5 кг, 34,58 моль), 4-гидроксибензальдегида (3,9 кг, 31,94 моль), карбоната калия (4,3 кг, 31,11 моль) и тетрадецилтриметиламмонийбромида (0,41 кг, 1,22 моль) в толуоле (13,5 кг) медленно доводят до температуры кипения с обратным холодильником при перемешивании и в атмосфере азота и затем кипятят с обратным холодильником в течение 6 ч.
Раствор концентрируют при комнатном давлении, затем добавляют 3 кг толуола и отгоняют. Эту процедуру повторяют еще раз. Затем гетерогенную смесь охлаждают до комнатной температуры и твердое вещество выделяют фильтрованием. Оставшийся растворитель удаляют при пониженном давлении и затем добавляют 1,2 кг толуола к маслянистому остатку. Смесь перемешивают при 20-25°С, добавляют затравку з виде нескольких граммов чистого 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида и затем добавляют нгексан (9 кг) при этой температуре в течение 30 мин.
После охлаждения до 0-5°С и перемешивания дополнительно в течение часа при этой температуре, твердое вещество отделяют фильтрованием и сушат при пониженном давлении, с получением 6,5 кг (85% выход) с ГХ чистотой 99,9 (% по площади, см. пример 16А) и содержанием 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегида 0,008 мас.% (см. пример 16В).
5.1 Дополнительная очистка 4-(3-фторбензилокси]бензальдегида (1Уа) путем кристаллизации
Один килограмм 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида, полученного в соответствии с примером 5, растворяют в 2 кг диизопропилового эфира при кипячении с обратным холодильником при перемешивании.
Раствор охлаждают до 50-55°С в течение 10-15 мин и добавляют затравку в виде нескольких граммов чистого 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида.
Суспензию охлаждают до 10-15°С в течение 45-60 мин и перемешивают дополнительно в течение часа. Осадок окончательно отделяют фильтрованием, промывают холодным диизопропиловым эфиром (0,2 кг) и сушат при пониженном давлении, с получением 0,95 кг 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида с ГХ чистотой 99,9 (% по площади, см. пример 16А) и содержанием 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегида ниже 0,005 мас.%, определенным ГХ (см. пример 16В).
5.2 Получение 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (Iνα) путем межфазового переноса с использованием 3-фторбензилбромида
4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид голучают с 86,1% выходом и содержанием 3-(3-фторбензил)-4(3-фторбензилокси)бензальдегида 0,07% по массе, определенным ГХ (см. пример 16В), взаимодействием 4-гидроксибензальдегида (15,6 г) с 3-фторбензилбромидом, в соответствии с аналогичной методикой примера 5, но используя 3-фторбензилбромид вместо 3-фторбензилхлорида.
Полученный таким образом 4-(3-фторбензигокси)бензальдегид очищают в соответствии с примером 5.1, с получением указанного продукта с 97,3% выходом и содержанием 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегида 0,07 мас.%, определенным ГХ (см. пример 16В).
5.3 Получение 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (Iνα) путем межфазового переноса с использованием 3-фторбензилметансульфоната
4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид получают с 97,5% выходом и содержанием 3-(3-фторбензил)-4(3-фторбензилокси)бензальдегида 0,45 мас.%, определенным ГХ (см. пример 16В), взаимодействием 4гидроксибензальдегида (15,6 г) с 3-фторбензилметансульфонатом вместо 3-фторбензилхлорида, в соответствии с аналогичной методикой примера 5. Полученный продукт дополнительно очищают в соответствии с методикой примера 5.1.
Пример 6. Получение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (сафинамид, 1а) высокой степени чистоты (однореакторная реакция)
В автоклав загружают 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид (2,0 кг, 8,69 моль), полученный как в примере 4, и затем добавляют отдельно полученный раствор гидрохлорида Ь-аланинамида (1,2 кг, 9,63 моль) и триэтиламина (0,97 кг, 9,63 моль) в метаноле (7,1 кг).
Смесь перемешивают при 20-25°С в течение 1 ч и после добавления затравки в виде нескольких граммов (8)-2-[4-(-3-фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамида продолжают перемешивание дополнительно в течение 15 мин. Затем к перемешанной гетерогенной смеси добавляют метанол (1,8 кг) и влажный (50% Н2О) Р1/С 5% (ЕидеШагй сой. Икса! 22)(0,3 кг) при 20-25°С. Воздух удаляют из автоклава при помощи азота и затем вводят водород при 5,0 бар.
Спустя 5 ч при 30-35°С смесь охлаждают до 15°С, добавляют метанол (4,8 кг) и смесь нагревают до 40-45°С; твердое вещество окончательно отфильтровывают и промывают метанолом (1,6 кг).
- 13 025326
Растворитель удаляют при пониженном давлении приблизительно при 30°С и затем добавляют к остатку смесь этилацетата (23,0 кг) и воды (18,0 кг). После перемешивания в течение 15 мин водную фазу отделяют и экстрагируют этилацетатом (7,0 кг). Собранные органические фазы концентрируют до получения остатка приблизительно 6,0 кг. К полученному остатку добавляют н-гептан (10,8 кг) и смесь перемешивают при 20°С в течение около 2 ч. Затем твердое вещество отделяют фильтрованием и промывают н-гептаном.
После сушки твердого вещества при пониженном давлении получают 2,41 кг (91,8% выход) указанного соединения с ВЭЖХ чистотой 98,4 (% по площади, см. пример 17А) и содержанием С,Одибензилированного (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида 0,005 мас.% (см. пример 17В).
6.1 Получение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1а) высокой степени чистоты, используя Рй катализатор (8)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид (5 г) гидрогенизировали в присутствии соответствующих количеств гидрохлорида Ь-аланинамида и триэтиламина, в соответствии с аналогичной методикой примера 6, используя влажный (50% Н2О) Рй/С 10%, вместо влажного (50% Н2О) Р1/С 5%, с получением 1а с 72% выходом.
6.2 Получение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1а) высокой степени чистоты путем гидрогенизации при давлении 1 бар
Смесь (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензальдегида, гидрохлорида Ь-аланинамида и триэтиламина гидрогенизируют в соответствии с аналогичной методикой примера 6, но при 1 бар/Н2 вместо 5 бар/Н2. Выход (8)-2-[4-(3- фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 90% с ВЭЖХ чистотой 98,7 (% по площади, см. пример 17А) и содержанием (§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]протанамида 0,005 мас.%, определенного ВЭЖХ (см. пример 17В).
6.3 Получение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1а) высокой степени чистоты (однореакторная реакция) путем использования Ь-аланинамидного основания (8)-2-[4-(3-фторбензилокси]бензальдегид (10 г) подвергают взаимодействию в соответствии с аналогичной методикой примера 6, но с использованием Ь-аланинамидного основания вместо его гидрохлорида и триэтиламина. Выход (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 92% с ВЭЖХ чистотой 99,7 (% по площади, см. пример 17А) и содержанием (§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида ниже 0,005 мас.%, определенным ВЭЖХ (см. пример 17В).
Пример 7. Получение метансульфоната (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (метансульфонат сафинамида, 1с) высокой степени чистоты
Сафинамид (2,41 кг, 7,97 моль), полученный, как описано в примере 6, растворяют в этилацетате (56,5 кг) при 65°С и обесцвечивают углем (100 г).
После фильтрации раствор перемешивают, добавляют затравку в виде нескольких граммов метансульфоната сафинамида и через 15 мин добавляют метансульфоновую кислоту (850 г, 8,84 моль) в течение 30 мин при температуре 50-55°С. Суспензию охлаждают при перемешивании до 20-25°С в течение 2 ч и перемешивают дополнительно в течение часа. Осадок окончательно отделяют фильтрованием и сушат при пониженном давлении с получением 2,83 кг (89,1% выход) метансульфоната сафинамида.
Содержание примесного метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино] пропанамида (По), измеренное ВЭЖХ (см. пример 17В), составляет 0,005 мас.%.
Указанное соединение имеет температуру плавления 216,8°С по ДСК (5°С/мин).
Энантиомерная чистота, измеренная на хиральной колонке ВЭЖХ, свыше 99,9 (% по площади, см. пример 19).
Ή-ЯМР: (Э2О) (Вгикег А У300) δ (м.д., относительно Н2О на 4,7 м.д.): 1,43 (3Н, Д, 1=7 Гц, СН3); 2,66 (3Н, с, СН38О3Н); 3,87 (1Н, кв, 1=7 Гц, Н-2); 3,97 (2Н, ушир.с, СН2ЫК); 4,89 (2Н, с, СН2ОК); 6,88 и 7,23 (4Н, АА'ХХ' ароматическая п-дизамещенная система; 6,90-7,22 (4Н, ароматический Н).
13С-ЯМР: (О2О) (Вгикег АУ300) δ м.д.: 15,68 (СН3); 38,27 (СН38О3Н); 48,99 (СН2ЫК); 54,81 (СН); 69,00 (ОСН2); 114,15 (д, 1С-Р=21 Гц, ароматический СН); 114,76 (д, 1С-Р=20 Гц, ароматический СН); 115,38 (ароматический СН); 123,06 (д, 1С-Р=24 Гц, ароматический СН); 123,24; 130,29 (д, 1С-Р=6 Гц, ароматический СН); 131,54 (ароматический СН); 138,76 (д, 1С-Р=7 Гц, ароматический СН); 158.52; 162.89 (д, 1С-Р=245 Гц, С-Р); 171,92 (СО).
Пример 8. Получение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (сафинамид, 1а) высокой степени чистоты с выделением промежуточного основания Шиффа (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензилиденамино] пропанамида (У1а)
а) (8)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамид (У1а)
К суспензии 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (60,0 г 0,26 моль), полученного как в примере 5, и гидрохлсрида Ь-аланинамида (35,7 г, 0,29 моль) в метаноле (280 мл) добавляют триэтиламин (29,1 г, 0,29 моль) при комнатной температуре при перемешивании в атмосфере азота. Перемешивание поддерживают дополнительно в течение одного часа.
Затем в раствор добавляют затравку в виде нескольких мг (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамида, температуру понижают до 5-10°С и перемешивание продолжа- 14 025326 ют в течение 2 ч.
Твердое вещество отделяют фильтрованием и промывают метанолом при 0°С.
После сушки при пониженном давлении получают 57,3 г (73,2% выход) указанного в заголовке соединения с температурой плавления 112,0°С по ДСК (5°С/мин).
1Н-ЯМР: (ДМСО-Дб) (Вгикег АУ300) δ (м.д., относительно ТМ8 на 2,55 м.д.; растворитель ДМСО на 3,35 м.д.): 1,31 (3Н, д, I ' Гц, СН3); 3,86 (1Н, кв, I ' Гц, Н-2); 5,18 (2Н, с, СН2ОК); 7,08 и 7,79 (4Н, АА'ХХ' п-дизамещенная ароматическая система); 7,10-7,50 (4Н, м, ароматический Н); 8,27 (1Н, с, С11ХК).
13С-ЯМР: (ДМСО-Д6) (Вгикеп АУ300) δ (м.д.): 20,5 (СН3); 67,6 (СН); 68,4 (ОСН2); 114,1 е 114,4 (д, ЭС_Р=21 ГЦ, ароматический СН); 114,5 и 114,8 (д, 1С-|=21 Гц; ароматический СН); 114,8 (ароматический СН); 123,5 (д, 1С-1=2 Гц, ароматический СН); 129,0 и 129,9 (ароматический СН); 130,4 и 130,5 (д, Т;-|=7 Гц, ароматический СН); 139,6 и 139,7 (д, 1С-|=6 Гц ароматический четвертичный С); 160,2; 160,5 и 163,8 (д, Т·· =245 Гц С-Р); 160,6 (СН=Ц); 174,8 (СО).
Ь) (8)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1а)
В автоклав загружают (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамид (16,0 г; 0,053 моль), полученный, как описано выше, и влажный (50% Н2О) Ρί/С 5% (1,7 кг: Епде1йагД 8.Г.1., Коше, Йа1у) и добавляют метанол (90 мл). Из автоклава удаляют воздух при помощи азота и затем вводят водород при 5,0 бар. Реакцию выдерживают при 5,0 бар и при 35°С в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры и удаления катализатора фильтрованием растворитель отгоняют при пониженном давлении до получения остатка приблизительно 30 г. К полученному остатку добавляют смесь этилацетата (150 мл) и Н2О (110 м) и гетерогенную смесь нагревают до 40°С до получения двух отчетливых фаз. Две фазы разделяют и водный слой экстрагируют 50 мл этилацетата при 40°С. Органические фазы собирают и упаривают досуха. Процедуру повторяют дважды путем добавления каждый раз 90 мл этилацетата, для обезвоживания продукта. Затем к остатку медленно и при перемешивании добавляют 95 мл н-гептана. Затем смесь выдерживают при перемешивании в течение 3 ч при 20°С. Образовавшееся твердое вещество отделяют фильтрованием, промывают н-гептаном (15 мл) и сушат при пониженном давлении, с получением 15,2 г (94,8% выход) сафинамида с ВЭЖХ чистотой 99,8 (% по площади, см. пример 17А) и содержанием (8)-2-[3-(3-фторбензкл)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида ниже 0,005 мас.%, измеренным ВЭЖХ (см. пример 17В).
Пример 9. Получение (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамид, 1Ь) высокой степени чистоты с выделением промежуточного основания Шиффа (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензилиденамино] пропанамида (У1Ь)
a) (8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамид (У1Ь) (8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамид получают с 88% выходом, температура плавления 121°С (в капилляре), следуя аналогичной методике примера 8, стадия а), но используя 4-(2фторбензилокси)бензальдегид вместо 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида.
!Н-ЯМР: (СИС13, 300 МГц, 298К) δ (м.д., относительно ТМ8): 1,46 (3Н, д, 3 7.0 Гц, СН3); 3,91 (1Н, кв, >=7,0 Гц, СН-СО); 5,17 (2Н, с, О-СН2); 7,02 (2Н, д, 1=8,9 Гц ароматический Н орто по отношению к О-СН2); 7,09 (1Н, ддд, ^Н-Р=9,78 Гц Ц,,, =8,55 Гц 1,,е.|н=1/23 Гц Н орто по отношению к Р); 7,15 (1Н, дт, 3,р,|о=7,35 Гц 1,,,.,,,= 1/23 Гц ароматический Н пара по отношению к |) ; 7,27-7,40 (1Н, м, ароматический Н пара по отношению к СН2) ; 7,48 (1Н, дт, ^Ορ1^=^Н-Р=7,35 Гц Эмета=1,53 Гц ароматический Н орто по отношению к СН2); 7,71 (2Н, д, 1=8,9 Гц ароматический Н орто по отношению к СН=Ы); 8,17 (1Н, с, С=Ы) 13С-ЯМР: (СИС13, 75,4 МГц, 298К) δ (м.д.): 21,4 (СН3); 63,8 (ОСН2); 68,4 (Н2ЫСОСН); 115,0 (д, ^С-Р=22,4 Гц, ароматический СН), 115,5 (д, .1-1·'=20,7 Гц, ароматический СН) ; 123,7 (д, ^с-Р=14,4 Гц, четвертичный ароматический С); 124,5 (ушир.д, ароматический СН) ; 129,0 (четвертичный ароматический С); 129,8 (ушир.д, ароматический СН); 130,1 (ушир.д, 2 ароматический СН) ; 160,5 (д, 1,.4=246,4 Гц, четвертичный ароматический С); 161,1 (ароматический С-О); 161,1 (С=Ы); 176,9 (СОИН2)
b) (8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензмламино]пропанамид (1Ь) (8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид получают с 93% выходом из (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензилиденамино]пропанамида, следуя аналогичной методике примера 8, стадия Ь). Содержание (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,02% по массе, определенное ВЭЖХ (см. пример 17В).
Пример 10. Получение метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино] пропанамида (11с)
а) 3-(3-Фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегид (Уа)
В 4 л круглодонную колбу, выдержанную в атмосфере азота, последовательно добавляют 4гидроксибензальдепид (400 г, 3,28 моль), карбонат калия (453 г, 3,28 моль), толуол (2 л) и 3фторбензилхлорид (1400 г, 9,68 моль) и смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 5 дней. На данном этапе ГХ анализ показывает, что реакционная смесь содержит 4-(3фторбензилокси)бензальдегид и 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегид в соотношении 91,4:8,6 (площадь/площадь, см. пример 16А).
- 15 025326
Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и затем добавляют 2 л воды при перемешивании. Органическую фазу отделяют и растворитель перегоняют при пониженном давлении (20 мм рт. ст.) при 35°С до удаления всех растворителей. Затем давление понижают до 3 мм рт. ст., внешнюю температуру повышают до 300°С и отделяют фракцию, которая отгоняется от 255 до 265°С (40, 6 г).
ГХ анализ показывает соотношение площадей С,О-дибензилированного производного (Уа) указанного соединения к моноалкилированному производному (1Уа) 99,6:0,4 (площадь/площадь, см. пример 16А).
Ή-ЯМР (СБС13) (Вгикег АУ300) δ (м.д., относительно ТМ§): 4,05 (2Н, с, СН2); 5,13 (2Н, с, ОСН2); 6,85-7,40 (9Н, м, ароматический Н); 7,73-7,79 (2Н, м, ароматический Н орто по отношению к С=О); 9,88 (с, СНО).
13С-ЯМР (СОС13) (Вгикег АУ300) δ (м.д.): 36,1 (СН2); 69,4 (СН2О); 111,4 (ароматический СН); 112,9 и 113,2 (д, 1с Р=20 Гц, ароматический СН), 113,9 и 114,2 (д, 1С.Г=22 Гц, ароматический СН); 114,9 и 115,0 (д, 1С-|=21 Гц, ароматический СН; 115,7 и 115,9 (д, 1С-|=25 Гц ароматический СН); 122,6 (д, 1С-Г=3 Гц, ароматический СН); 124,4 (д, 1С-|=3 Гц, ароматический СН); 129,6 и 129,8 (д, 1С-|=8 Гц, ароматический СН); (д, 1С-|=7 Гц, четвертичный ароматический С); 129,9 (С четвертичный ароматический С); 130,0 (четвертичный ароматический С); 130,1 и 130,2 (д, 1С-|=7 Гц, СН ароматический); 131,2 (ароматический СН) ;
131,5 (ароматический СН); 138,3 (д, 1С-|=7 Гц, четвертичный ароматический С); 142,3 (д, 1С-|=7 Гц, четвертичный ароматический С); 161,0, 161,2 и 164,4 (д, ί;-|=240. 2 С-Р наложение); 190,8 (СНО).
b) (3)-2-[3-(3-Фторбензил)-4-(3-фторбензилокси) бензиламино] пропанамид (11а)
К 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегиду (35,6 г, 0,105 моль) в 500 мл колбе добавляют при комнатной температуре раствор, предварительно полученный путем осторожного добавления при перемешивании триэтиламина (12 г, 0,1) 9 моль) к 170 мл метанольного раствора гидрохлорида Ьаланинамида (14,8 г, 0,119 моль).
Полученную реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре, затем переносят в 1,8 л автоклав и добавляют 3,4 г влажного (50% Н2О) Ρί/С 5%. Воздух удаляют из автоклава при помощи азота и затем вводят водород при 5,0 бар.
Реакцию осуществляют при температуре 35°С в течение 3-5 ч. После охлаждения до комнатной температуры и удаления катализатора фильтрованием растворитель отгоняют при пониженном давлении, до получения приблизительно 65 г остатка. К полученному остатку добавляют смесь этилацетата (340 мл) и воду (250 мл), гетерогенную смесь нагревают до 40°С и выдерживают при этой температуре без перемешивания до получения двух отчетливых фаз. Две фазы разделяют и органическую фазу перегоняют при пониженном давлении до получения приблизительно 50 г остатка.
Полученный остаток растворяют в 220 мл этилацетата и растворителя, отогнанного при пониженном давлении при внешней температуре 40°С. Эту операцию повторяют дважды и получают указанное соединение в виде остатка твердого вещества.
c) Метансульфонат (§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси]бензиламино]пропанамида (11с)
В 2 л стеклянном реакторе растворяют 42,4 г (0,103 моль) основания (§)-3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 950 мл этилацетата.
Раствор нагревают при перемешивании при 50-55°С и выдерживают при такой температуре в течение одного часа. К полученному раствору в течение 20 минут добавляют 14,5 г (0,15 моль) метансульфоновой кислоты и температуру понижают до 20°С в течение 90 мин. Через 30 мин твердое вещество отделяют фильтрованием, сушат при 50°С при пониженном давлении и затем кристаллизуют из метанола (метанол:продукт 1:5 по массе) с получением 25,1 г метансульфоната (§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида, температура плавления 181°С (в капилляре).
Ή-ΗΜΡ (ДМСО-а6) (Вгикег АУ300) δ (м.д., относительно ТМ§): 1,44 (3Н, д, 1=7 Гц, СН3); 2,35 (3Н, с, СН3§03); 3,81 (1Н, кв, 1=7 Гц, Н-2), 3,99 (2Н, ушир.с, СН2 бензильный); 4,02 (2Н, АВ система, СН2Ы-); 5,17 (2Н, с, СН20К); 6,98-7,63 (11Н, м, ароматический Н); 7,62 и 7,75 (2Н, ушир.с, ΝΗ2 амид); 9,02 (2Н, широкий, ΝΗ2+).
13С-ЯМР (ДМСО-а6) (Вгикег АУ300) δ (м.д.): 15,9 (СН3); 35,5 (СН2); 39,7 (СН3§03Н); 48,1 (СН2]\1К); 54,4(СН); 68,4 (ОСН2); 112,2 (ароматический СН); 112,7 (д, 1С-|=22 Гц, ароматический СН); 113,8 (д, 1..,-22 Гц, ароматический СН) 114,5 (д, 1С-|=22 Гц, ароматический СН) ; 115,2 (д, 1С-|=22 Гц, ароматический СН); 123,2 (ароматический СН); 123,8; 124,6 (ароматический СН); 128,7 и 130,0 (д, 1НС-|=6 Гц, ароматический СН); 130,04 (ароматический СН); 130,3 (д, 1С-|=6 Гц, ароматический СН); 132,6 (ароматический СН); 139,8 (д, А-Г 7 Гц); 143,4 (д, 1С-|=7 Гц); 158,1, 160,5 и 163,7 (д, 1С-|=240, С-|); 160,6 и 363,8 (д, 240, С-|); 170,5 Ή0Ν).
Образец (90 мг) (§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11а) также выделяют препаративной ВЭЖХ из 200 г метансульфоната сафинамида (1с), полученного в соответствии с 1. Меа. СЬет., 1998, 41, 579, способ А, который содержит его в виде метансульфоната (11с) 0,12 мас.%.
Разделение осуществляют в две стадии (стадия 1 и стадия 2), в соответствии со следующей схемой:
- 16 025326
Выделение 11а путем препаративной ВЭЖХ метансульфоната сафинамида (1с), загрязненного
Стадия 1.
Назначением первой стадии является выделение неочищенного продукта, обогащенного 11а/ТФУК (трифторуксусная кислота).
Условия препаративной ВЭЖХ представлены ниже:
Условия препаративной ВЭЖХ:
Оборудование:
Аа1егк Эека Ргер 4000 (поршневой насос, устройство для создания градиента со смесителем низкого давления)
Радиальный компрессионный модуль Ргер ЬС Ваке (Аа1егк)
1аксо 7125 УФ-переменный детектор, о.р. 0,2 мм Мегк Ό2000 графический принтер
Колонка: Эека Рак С18, 15 мкм, 40x100 мм (Аа1егк)
Элюент А: 70/30, вода/ацетонитрил+0,1% ТФУК Элюент В: 30/70, вода/ацетонитрил+0,1% ТФУК Скорость потока: 27,0 мл/мин
Градиент: 40 мин, изократический 100% А, затем до 100% В в течение 1 мин Детекция: УФ 227 нм
Инъекция: 5 г в 50 мл воды (по впускному трубопроводу насоса И)
Стадия 2.
На данной стадии необходимо удалить ТФУК из 11а/ТФУК и дополнительно очистить соединение 11а.
11а/ТФУК хроматографируют, используя условия препаративной ВЭЖХ, приведенные ниже. Фракцию 4 и 5 объединяют вместе и упаривают при 40°С в вакууме до полного удаления ацетонитрила. Оставшийся водный раствор выдерживают в холодильнике при 4°С. Нерастворимое вешество отделяют фильтрованием и сушат в вакууме при комнатной температуре, с получением соединения 11а (90 мг; ВЭЖХ чистота 100%).
Условия препаративной ВЭЖХ:
Оборудование:
Аа1егк ИеЬа Ргер 4000 (поршневой насос, устройство для создания градиента со смесителем низкого давления)
1аксо 7125 УФ-переменный детектор, о.р. 0,2 мм
Мегк Ό2000 графический принтер
Колонка: 8уттеРу С 18,7 мкм, 20x250 мм (Аа1егк)
Элюент А: 70/30, вода/ацетонитрил Элюент В: 30/70, вода/ацетонитрил Скорость потока: 15,0 мл/мин
Градиент: 20 мин, изократический 100% А, затем до 100% В в течение 10 мин Детекция: УФ 227 нм
Инъекция: 50 мл примесного раствора 11а/ТФУК (по впускному трубопроводу насоса И)
Пример 11. Получение метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11й)
- 17 025326
a) 3-(2-Фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (УЬ)
3-(2-Фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегид получают, следуя аналогичной методике примера 10, стадия а), в пропорции 1:10, но используя 2-фторбензилхлорид вместо 3-фторбензилхлорида. Молярный выход составляет 3% с 98,1 чистотой, определенной ГХ анализом (% по площади, см. пример 16 А). Продукт имеет температуру плавления 71 °С (в капилляре).
Ή-ЯМР: (СПС13, 300 МГц, 298К) δ (м.д., относительно ТМЗ): 4,06 (2Н, с, СН2); 5,23 (2Н, с, ОСН2); 6,95-7,40 (9Н, м, ароматический Н); 7,67 (1Н, ушир.д, 1=0.9 Гц, ароматический Н орто по отношению к С=О и СН2); 7,76 (1Н, дд, ^1=2,1 Гц, Ь = 8,3 Гц, ароматический Н орто по отношению к С=О и арома.тический СН); 9, 84 (1Н, с, СНО).
13С-ЯМР: (СОС13, 75,4 МГц, 298К) δ (м.д.): 29,2 (СН2); 64,1 (ОСН2); 111,4 (ароматический СН); 115,4 (д, ^С-ρ=22,0 Гц, ароматический СН), 115,5 (д, 1С.Р=21,1 Гц, ароматический СН); 123,3 (д, 1;-| =14,2 Гц, четвертичный ароматический С); 124,1 (д, Гц, ароматический СН); 124,5 (д, 1С-Г=3,2 Гц, ароматический СН) ; 126,6 (д, ^С-ρ=15,5 Гц, четвертичный ароматический С); 128,2 (д, 1С.р=8,1 Гц, ароматичесрсий СН); 129,6 (д, Гц, ароматический СН); 129,6 (четвертичный ароматический С); 130,0 (четвертичный ароматический С); 130,2 (д, ^С-Γ=8,3 Гц, ароматический СН); 131,1 (ароматический СН);
131.3 (д, 1С.Р=4,1 Гц, ароматический СН); 131,8 (ароматический СН); 160,5 (д, ^С-ρ=246,8 Гц, четвертичный ароматический С); 161,2 (д, 1С-|.-=245„1 Гц, четвертичный ароматический С); 161,3 (четвертичный ароматический С); 191,1 (СНО).
b) (3)-2-[3-(2-Фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (11Ь) (З)-2-[3-(2-Фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид получают, следуя аналогичной методике примера 10, стадия Ь), но используя 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегид вместо 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида . Выход составляет 83%; температура плавления 161°С (в капилляре).
Ή-ЯМР: (СОСк 300 МГц, 298К) δ (м.д., относительно ТМЗ): 1,32 (3Н, д, .16,7 Гц, СН3); 1,97 (1Н, ушир.с, ΝΗ); 3,22 (1Н, кв, 16,7 Гц, СН-СО); 3,67 (2Н, АВц, 1=12,8 Гц, диастереотопный Н ЫСН2); 4,03 (2Н, с, СН2); 5,12 (2Н, с, ОСН2); 5,98 (1Н, ушир.с, ΝΗ2); 6,8 9 (1Н, д, ^орто=8,3 Гц, ароматический Н орто по отношению к ί'.Ή2ΝΗ и ароматический СН); 6,95-7,40 (10Н, м, ароматический Н).
13С-ЯМР: (СПС13, 75,4 МГц, 298К) δ (м.д.): 19,6 (СН3); 29,2 (СН2); 52,0 (ЫНСН2); 57,7 (Н^СОСН); 63,8 (ОСН2); 111,7 (ароматический СН); 115,2 (д, 9 Гц, ароматический СН), 115,3 (д, Гц, ароматический СН); 124,0 (д, ^С-ρ=3,5 Гц, ароматический СН); 124,3 (д, 1С-|=2,9 Гц, ароматический СН);
124.3 (д, Гц, четвертичный ароматический С); 127,5 (ароматический СН); 127,6 (д, Ι^Μ^^Ι) Гц, четвертичный ароматический С); 127,8 (д, Ιρ^^Ύ^ Гц, ароматический СН); 128,8 (четвертичный ароматический С); 129,0-130,0 (м, 2 ароматический СН); 130,5 (ароматический СН); 131,3 (д, ^С-|=4.6 Гц, ароматический СН); 131,8 (четвертичный ароматический С); 155,6 (четвертичный ароматический С); 160,4 (д, ^С-|=245.8 Гц, четвертичный ароматический С); 161,2 (д, 1,^=244,6 Гц, четвертичный ароматический С); 178,2 ΉΟΝ^) .
c) метансульфонат (З)-2-[3-(2-фторбензил-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (Пф
Метансульфонат (З)-2- [3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида получают, следуя аналогичной методике примера 10, стадия с), но используя (З)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамид в качестве исходного вещества. Выход составляет 89%; температура плавления 190°С (в капилляре).
Ή-ЯМР: (ДМСО-ф, 300 МГц, 298К) δ (м.д., относительно ТМЗ): 1,42 (3Н, д, ^=6,8 Гц, СН3СН); 2,33 (3Н, с, СН3ЗО3); 3,50-4,20 (5Н, м, СН-СО, СН2, диастереотопный Н ^Н2,); 5,19 (2Н, с, ОСН2); 6,95-8,00 (11Н, м, ароматический Н); 9,02 (2Н, ушир.с, NΗ2 +).
13С-ЯМР: (ДМСО-ф, 75,4 МГц, 298К) δ (м.д.): 16,5 (СН3); 28,8 (СН2); 48,6 (ЫНСН2); 54,9 (Н^СОСН); 64,3 (ОСН2); 112,8 (ароматический СН); 115,0-117,0 (2 ароматический СН); 124,2 (д, 1С_ |=14,4 Гц, четвертичный ароматический С); 124,4 (четвертичный ароматический С); 124,8 (ароматический СН); 125,0 (ароматический СН); 127,3 (д, ^С.|=16„1 Гц, четвертичный ароматический С); 128,6 (четвертичный ароматический С); 128,8 (ароматический СН); 129,0-133,0 (м, 5 ароматический СН); 156,9 (четвертичный ароматический С); 160,8 (д, ^С-|=245.2 Гц, четвертичный ароматический С); 160,9 (д, 1С-|=243,5 Гц, четвертичный ароматический С); 171,1 ΉΟΝ^).
Пример 12.
Получение метансульфоната (З)-2-[4-3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (сафинамид) (1с) из 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (1Уа), загрязненного 1 мас.% примесным 3-(3-фторбензил)-4(3 -фторбензилокси)бензальдегидом (Уа)
К 4-(3-фторбензилокси)бензальдегиду (10 г; ГХ чистота 98,8% по площади) добавляют 1% 3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида и смесь преобразуют в (З)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидное сафинамидное основание, следуя аналогичной методике примера 6. Выход составляет 84% с содержанием примеси (11а) 0,84 мас.% (см. пример 17В).
Свободное основание (З)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1а) преобразуют в соответствующий метансульфонат, следуя аналогичной методике примера 7 для получения метансульфо- 18 025326 ната (1с), с 98% выходом и содержанием примеси метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11с) 0,62 мас.%, определенным ВЭЖХ (см. пример 17В).
Пример 13. Кристаллизация метансульфоната сафинамида (1с), загрязненного примесью (11с) Метансульфонат сафинамида, загрязненный метансульфонатом (§)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамидом (11с) 0,62 мас.%, определенным ВЭЖХ (см. пример 17В), полученный в соответствии с примером 12, кристаллизуют, используя пять различных систем растворителей, путем растворения при температуре кипения с обратным холодильником и охлаждения при комнатной температуре. Результаты представлены в следующей табл. 5
Таблица 5
Теет № Система растворителей и количество (мл/г) % масс. 11с в 1с после кристаллизации (*) % молярный выход
13а 2-РгОН/МеОН 2:1, 45 0,28 44, Э
13Ь ЕЬОАс/МеОН 4:1, 50 0,15 29,6
13с ЕРОН, 10 0,30 73,2
1за Ацетон/НгО -27:1, 40,5 0,08 20,6
13е Ацетснитрил/що 60:1, 30,5 0, 09 69,3
(*) мас.%, определяют, в соответствии с примером 17в.
Пример 14. Получение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (сафинамид, 1а), метансульфоната (1с) в соответствии со способами, описанными на предшествующем уровне технике
14.1 Получение 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид (1Уа)
14.1. а) Методика примера 1а И8 6335354 В2
4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид (1Уа) получают по методике, описанной в примере 1а И8 6335354 В2.
Соответственно, смесь 3-фторбензилхлорида (2,86 г, 19,80 ммоль), 4-гидроксибензальдегида (3,03 г, 24,80 ммоль), К2СО3 (10,30 г, 74,50 ммоль), Ыа1 (137,1 мг, 0,91 ммоль) и этанола (40 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 70 мин и выдерживают при температуре кипения в течение 4 ч и 15 мин.
После обработки реакционной смеси 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид выделяют в виде желтого масла с 95% выходом.
Продукт имеет ГХ чистоту 97,6 (% по площади, см. пример 16А) и содержание 3-(3-фторбензил)-4(3-фторбензилокси)бензальдегида (Уа) 0,14 мас.%, определенное ГХ (см. пример 16В).
14.1. Ь) Методика 1. Лдпс. Ροοά СЕсаЕ, 27, 4. 1979
4-(3-Фторбензилокси)бензальдегид (1Уа) получают по методике, представленной в 1. Лдпс. Ροοά СЕет, 27, 4, 1979.
Соответственно к раствору 4-гидроксибензальдегида (12,2 г, 100 ммоль) и ЫаОН (4,0 г, 100 ммоль) в этаноле (100 мл) добавляют 3-фторбензилхлорид (14,5 г, 100 ммоль) при перемешивании и в атмосфере азота.
Смесь постепенно нагревают в течение 25 мин пру кипении с обратным холодильником и перемешивают при температуре кипения в течение 6 ч и 20 мин. Реакционную смесь фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении, с получением 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (23,43 г) в виде желтого твердого остатка. К остатку добавляют дихлорметан (250 мл), нерастворимое вещество отфильтровывают, полученный раствор концентрируют при пониженном давлении, с получением 4-(3фторбензилокси)бензальдегида в виде желтого твердого вещества с 80,4% выходом. Продукт имеет ГХ чистоту 91,6 (% по площади, см. пример 16А) и содержание 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегида (Уа) 0,13 мас.%, определенное ГХ (см. пример 16В).
14.2 Получение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1а) и его метансульфонатной соли (1с)
14.2. а) Методика 1. Меб. СЕет., 1998. 41. 579. способ А (8)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1а) получают взаимодействием 4 -(3фторбензилокси)бензальдегида (10 ммоль), полученного, как описано в примере 14.1.а., и гидрохлорида Ь-аланинамида (1,37 г, 11 ммоль), с последующим восстановлением ЫаВН3СЫ (0,50 г, 8 ммоль). После обработки реакционной смеси и очистки флэш-хроматографией, (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид выделяют в виде белого твердого вещества с 68,7% выходом. Продукт имеет ВЭЖХ чистоту 96,2 (% по площади, см. пример 17А) и содержание (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11а) 0,15% по массе (см. пример 17В).
Смесь (§)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1,50 г, 4,96 ммоль) и этилацетата (40,2 мл) нагревают до 50°С, с получением прозрачного раствора. К полученному раствору добавляют метансульфоновую кислоту (0,53 г, 5,51 ммоль) при перемешивании в течение 15 мин и полученную гетерогенную смесь охлаждают при перемешивании до 20°С в течение 90 мин. Спустя 30 мин при 20°С твердое вещество отделяют фильтрованием, промывают этилацетатом (6 мл) и сушат при 50°С при пониженном давлении в течение 15 ч с получением метансульфоната (8)-2-[4-(3-фторбензил- 19 025326 окси)бензиламино] пропанамида (1с) в виде белого твердого вещества с 96,1% выходом. Продукт имеет ВЭЖХ чистоту 98,6 (% по площади, см. пример 17А) и содержание метансульфоната (8)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11с) 0,10 мас.%, определенное ВЭЖХ (см. пример 17В).
14.2Ь) Методика ΐ. Мей. СЬет., 1998. 41. 579. способ А (8)-2-[4-(3-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1а) получают, в соответствии с примером
14.2.а, из 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (10 ммоль), полученного, как описано в примере 14.1.Ь., и гидрохлорида Ь-аланинамида (1,37 г, 11 ммоль), с последующим восстановлением №1ВН3,СХ (0,50 г, 8 ммоль).
(8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1а) получают в виде белого твердого вещества с 66,5% выходом. Продукт имеет ВЭЖХ чистоту 88,5 (% по площади, см. пример 17А) и содержание (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11а) 0,064 мас.%, определенное ВЭЖХ (см. пример 17В). (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1а) преобразовывают в соответствующий метансульфонат (1с) с 88,9% выходом обработкой метансульфоновой кислотой, в соответствии с примером 14.2.а. Продукт имеет ВЭЖХ чистоту 97,7 (% по площади, см. пример 17А) и содержание метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11с) 0,05 мас.%, определенное ВЭЖХ (см. пример 17В).
Пример 15. Получение (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамид, ГЬ), метансульфоната (Гй), в соответствии со способами, описанными на предшествующем уровне техники
15.1 Получение 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (ГУЬ)
15.1. а) Методика примера 1а И8 6335354 В2
4-(2-Фторбензилокси)бензальдегид (ГУЬ) получают в соответствии с примером 14.1.а) из 2фторбензилхлорида (14,3 г, 98 ммоль), 4-гидроксибензальдегида (15,1 г, 123 ммоль), К2СО3 (51 г, 369 ммоль), Νη1 (500 мг, 3,3 ммоль) и этанола 75 мл.
Смесь выдерживают при кипячении с обратным холодильником в течение 12 ч. После обработки реакционной смеси получают 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид с 75% выходом в виде желтого масла. Продукт имеет ГХ чистоту 92,1 (% по площади, см. пример 16А) и содержание 3-(2-фторбензил) 4-(2фторбензилокси)бензальдегида 0,25 мас.%, определенное ГХ (см. пример 16В).
15.1. Ь) Методика ΐ. Адпс. Роой СЬет, 27, 4, 1979
4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (ГУЬ) получают в соответствии с примером 14.1.Ь из 2фторбензилхлорида (18,0 г, 123 ммоль), 4-гидроксибензальдегида (15,3 г, 125 ммоль), ЫаОН (5,0 г, 12 ммоль) и этанола (125 мл).
Смесь нагревают в течение 25 мин при кипении с обратным холодильником и выдерживают при температуре кипения при перемешивании в течение 12 ч. После обработки реакционной смеси в соответствии с примером 14.1.Ь 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид получают в виде желтого твердого вещества с 90,0% выходом. Продукт имеет ГХ чистоту 90,4 (% по площади, см. пример 16А) и содержание 3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (УЬ) 0,14 мас.%, определенное ГХ (см. пример 16В).
15.2 Получение (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ГЬ) и его метансульфонатной соли (Гй)
15.2. а) Методика ΐ. Мей. СЬет, 1996, 41, 579, способ А (8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (ГЬ) получают, следуя методике примера
14.2.а, используя 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (10 ммоль, полученный в примере 15.1а) вместо 4(3 -фторбензилокси)бензальдегида.
(8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид получают с 67,3% выходом в виде белого твердого вещества. Продукт имеет ВЭЖХ чистоту 86,7 (% по площади, см. пример 17А) и содержание (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ГГЬ) 0,22 мас.%, определенное ВЭЖХ (см. пример 17В).
Смесь (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (1,50 г, 4,96 ммоль) и пропан-2-ола (10,5 мл) нагревают до 50°С и выдерживают при этой температуре, с получением прозрачного раствора. При перемешивании в течение 15 мин добавляют метансульфоновую кислоту (0,48 г, 5,01 ммоль).
Затем гетерогенную смесь охлаждают при перемешивании до 20°С в течение 2 ч. Спустя 1 ч при 20°С твердое вещество отделяют фильтрованием, сушат при пониженном давлении, с получением метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в виде белого твердого вещества с 89,1% выходом. Продукт имеет ВЭЖХ чистоту 96,9 (% по площади, см. пример 17А) и содержание метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ГГй) 0,14 мас.%, определенное ВЭЖХ (см. пример 17В).
15.2. Ь) Методика ЬМей. СЬет. 1998, 41. 579.
Способ А (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (ГЬ) получают в соответствии с примером 14.2.Ь, используя 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (10 ммоль, полученный в соответствии с примером 15.1.Ь), вместо 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида.
(8)-2-[4-(2-Фторбензилокси)бензиламино]пропанамид получают в виде белого твердого вещества с
- 20 025326
58,8% выходом. Продукт имеет ВЭЖХ чистоту 83,8 (% го площади, см. пример 17А) и содержание (8)-2[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11Ь) 0,15 мас.%, определенное ВЭЖХ (см. пример 17В).
(8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (1Ь) преобразовывают в соответствующий метансульфонат (И) с 89,4% выходом в виде белого твердого вещества. Продукт имеет ВЭЖХ чистоту 95,2 (% по площади, см. пример 17А) и содержание метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида 0,11 мас.%, определенное ВЭЖХ (см. пример 17В).
Пример 16А. ГХ определение чистоты 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида.
Исследуемый препарат.
Растворяют около 100 мг образца в 10 мл метиленхлорида.
Хроматографические условия
Хроматографическую процедуру осуществляют используя:
капиллярную колонку из кварцевого стекла 60 м в длину и внутренним диаметром 0,32 мм.
КТХ 35 (35% дифенил-65% диметилполисилоксан).
Толщина пленки=0,25 мкм;
гелий в качестве газа-носителя при давлении 150 кПа; разделенный поток 25 мл/мин; инжекторную температуру 290°С;
температуру детектора (РГО) 290°С при следующей температурной программе:
Время (мин) Температура (°С) Скорость (°С/мин, Комментарий
0-5 150 - изотермический
5-11 150^-240 15 линейный градиент
11-19 240 - изотермический
19-20,7 240-4290 30 линейный градиент
20,7-40 290 - изотермический
Методика
Вводят 1 мкл исследуемого препарата. Записывают хроматограмму и вычисляют чистоту продукта путем вычисления процента по площади.
Определение примесей
4-(3 -фторбензилокси)бензальдегид (1Уа):
Время удерживания:
Время удерживания 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 17.
Относительное время удерживания 4-гидроксибензальдегида составляет около 0,52.
Относительное время удерживания 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 0,98.
Относительное время удерживания 4-(4-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 1,01.
Относительное время удерживания 4-бензилоксибензальдегида составляет около 1,02.
Относительное время удерживания 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 1,78.
4-(2-фторбензилокси)бензальдегид (1УЬ):
Время удерживания:
Время удерживания 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 17.
Относительное время удерживания 4-гидроксибензальдегида составляет около 0,53.
Относительное время удерживания 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 1,02.
Относительное время удерживания 4-(4-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 1,03.
Относительное время удерживания 4-бензилоксибензгльдегида составляет около 1,04.
Относительное время удерживания 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 1,81.
Пример 16В. ГХ определение содержания 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида (УЬ) в 4-(2-фторбензилокси)бензальдегиде (1УЬ) и 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида (Уа) в 4-(3-фторбензилокси)бензальдегиде (1Уа)
Известным сопутствующим веществом, учитываемым для 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида, является 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегид, для 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида является 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегид. Определение осуществляют в соответствии со следующими условиями.
Раствор внутреннего стандарта.
Готовят 3,4,5-триметоксибензальдегидный раствор с концентрацией 1,5 мг/мл в метиленхлориде (18).
Стандартный раствор для определения 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида в 4-(2фторбензилокси)бензальдегиде:
Аккуратно взвешивают около 20 мг стандартного раствора 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилок- 21 025326 си)бензальдегида и 20 мг стандартного раствора 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида в 20 мл пикнометре, растворяют и разбавляют до объема разбавителем; перемещают 500 мкл полученного раствора в 5 мл пикнометр, добавляют 500 мкл 18 раствора и разбавляют до объема разбавителем с получением раствора, содержащего 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегид и 4-(2-фторбензилокси)бензальдегид в концентрации около 100 мкг/мл (соответствующий около 0,10%).
Стандартный раствор для определения 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида в 4-(3фторбензилокси)бензальдегиде:
Аккуратно взвешивают около 20 мг стандартного раствора 3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензальдегида и 20 мг стандартного раствора 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида в 20 мл пикнометре, растворяют и разбавляют до объема разбавителем; перемещают 500 мкл полученного раствора в 5 мл пикнометр, добавляют 500 мкл 18 раствора и разбавляют до объема разбавителем с получением раствора, содержащего 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегид и 4-(3-фторбензилокси)бензальдегид в концентрации около 100 мкг/мл (соответствующий около 0,10%).
Исследуемый раствор:
Аккуратно взвешивают около 500 мг исследуемого продукта в 5 мл пикнометре, добавляют 500 мл 18 раствора, растворяют и разбавляют до объема разбавителем, с получением раствора, имеющего известную концентрацию около 100 мг/мл.
Хроматографические условия:
Хроматографическую процедуру осуществляют используя:
Колонку: капиллярная колонка из кварцевого стекла КТХ 35 (35% дифенил-65% диметилполисилоксана) 60 м в длину, 0,32 мм ВД, толщина пленки=0,25 мкм;
Носитель (гелий) при давлении 150 кПа;
Разделенный поток 25 мл/мин;
Инжекторную температуру 290°С;
Температуру детектора (РГО) 290°С;
Температурную программу: 0-5 мин изотермический при 150°С, 5-11 мин линейный от 150 до 240°С при скорости 15°С/мин, 11-19 мин изотермический при 240°С, 19-21 мин линейный от 240 до 290°С при скорости 30°С/мин, 21-40 мин изотермический при 290°С;
разбавитель: метиленхлорид; вводимый объем 1 мкл.
Методика:
Вводят холостую пробу (разбавитель), стандартный раствор, исследуемый раствор и записывают хроматограммы. В стандартной хроматограмме устанавливается, что время удерживания 4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 18 мин; относительное время удерживания 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 1,7 или время удерживания 4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 18 мин; относительное время удерживания 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет около 1,7.
Относительное время удерживания 3,4,5-триметоксибензальдегида (18) составляет около 0,7.
Вычисляют процентное содержание 3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензальдегида в исследуемом 4-(2-фторбензилокси)бензальдегиде или 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида в исследуемом 4-(3-фторбензилокси)бензальдегиде путем вычисления внутреннего стандарта.
Значение предела количественного определения РОО) для (3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензальдегида и 3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензальдегида составляет 0,005 мас.%. Значение предела обнаружения РОЭ) для обеих рассматриваемых примесей составляет 0,0025 мас.%.
Пример 17А. ВЭЖХ определение чистоты (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидат (сафинамид) (1а), его метансульфоната (1с), (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамид) (ГЬ) и его метансульфоната (И)
Следующая хроматографическая методика пригодна как для формы свободного основания (1а, ГЬ), так и для метансульфонатной соли (Гс, М) данных продуктов.
Разбавитель:
Подвижная фаза.
Исследуемый раствор:
Аккуратно взвешивают около 25 мг продукта 25 мл пикнометре, растворяют и разбавляют до объема разбавителем с получением раствора, имеющего известную концентрацию около 1,0 мг/мл.
Хроматографические условия:
Хроматографическую процедуру осуществляют используя
Колонку: ^а1ег8 8ушше1гу С8, 150x4,6 мм, 5 мк; детекцию: УФ 220 нм;
- 22 025326 температуру колонки: 30°С подвижную фазу: 40% растворителя А+10% растворителя В+50% растворителя С, содержащую 1,0 г/л октансульфоната натрия;
растворитель А: буферный раствор=КН2РО4 0,05М; растворитель В: ацетонитрил; растворитель С: метанол;
изократическое элюирование, время прогона 60 мин; скорость потока: 1,0 мл/мин; вводимый объем: 10 мкл.
Методика:
Вводят исследуемый раствор, записывают хроматограмму и вычисляют чистоту продукта путем вычисления процента по площади.
Определение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (сафинамид) и сопутствующих примесей
Время удерживания:
Время удерживания (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 5,5 мин.
Относительное время удерживания (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропионовой кислоты составляет около 0,73.
Относительное время удерживания (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 4,08.
Определение (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамид) и сопутствующих примесей
Время удерживания:
Время удерживания (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 5,5 мин.
Относительное время удерживания (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропионовой кислоты составляет около 0,73.
Относительное время удерживания (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 4,08.
Пример 17В. ВЭЖХ определение (8)-2-[3-(2-фторбензил-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободное основание 1ГЬ и метансульфонат ГГй) в (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде (свободное основание ГЬ и метансульфонат И) и (8)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободное основание ГГа и метансульфонат, ГГс) в (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде (свободное основание Га и метансульфонат Гс)
Определение (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободное основание и метансульфонат) в (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидных образцах (свободное основание и метансульфонат) и (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида свободное основание и метансульфонат) в (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидных образцах (свободное основание и метансульфонат) осуществляют в соответствии со следующими условиями:
Стандартный раствор для определения (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде
Аккуратно взвешивают около 30 мг стандартного образца метансульфоната (8)-2-[3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 20 мг стандартного образца (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 50 мл пикнометре, растворяют и разбавляют до объема разбавителем; разбавляют 1,0 мл полученного раствора до 20 мл разбавителем (1е разбавление); разбавляют 1,0 мл последний раствор цо 20 мл разбавителем (2е разбавление), с получением раствора, содержащего 2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (около 0,12%) в концентрации около 1,20 мкг/мл и метансульфонат (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в концентрации около 1,00 мкг/мл (около 0,10%).
Стандартный раствор для определения метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в метансульфонате (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида:
Аккуратно взвешивают около 30 мг стандартного образца метансульфоната (8)-2-[3-(2фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 20 мг стандартного образца метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 50 мл пикнометре, растворяют и разбавляют до объема разбавителем; разбавляют 1,0 мл полученного раствора до 20 мл разбавителем (1е разбавление); разбавляют 1,0 мл последнего раствора до 20 мл разбавителя (2е разбавление), с получением раствора, содержащего 2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (около 0,15% в виде метансульфоновой соли) в концентрации около 1,20 мкг/мл и метансульфонат (8)-2-[4-(2- 23 025326 фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в концентрации около 1,00 мкг/мл (около 0,10%).
Стандартный раствор для определения (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде:
Аккуратно взвешивают около 24 мг стандартного образца (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 20 мг стандартного образца (8)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 50 мл пикнометре, растворяют и разбавляют до объема разбавителя; разбавляют 1,0 мл полученного раствора до 20 мл разбавителем (1е разбавление); разбавляют 1,0 мл последнего раствора до 20 мл разбавителем (2е разбавление) с получением раствора, содержащего 2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (около 0,12%) в концентрации около 1,20 мкг/мл и метансульфонат (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в концентрации около 1,00 мкг/мл (около 0,10%).
Стандартный раствор для определения метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в метансульфонате (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида:
Аккуратно взвешивают около 24 мг стандартного образца (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 20 мг стандартного образца метансульфоната (8)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 50 мл пикнометре, растворяют и разбавляют до объема разбавителем; разбавляют 1,0 мл полученного раствора до 20 мл разбавителем (1е разбавление); разбавляют 1,0 мл последнего раствора до 20 мл разбавителем (2е разбавление), с получением раствора, содержащего 2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамид (около 0,15% в виде метансульфоновой соли) в концентрации около 1,20 мкг/мл и метансульфонат (8)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в концентрации около 1,00 мкг/мл (около 0,10%).
Исследуемый раствор:
Аккуратно взвешивают около 25 мг исследуемого продукта в 25 мл пикнометре, растворяют и разбавляют до объема разбавителем, с получением раствора, имеющего известную концентрацию около 1,0 мг/мл.
Хроматографические условия:
Хроматографическую процедуру осуществляют используя:
Колонку: Аа1сг5 8йптс1гу С8 150x4,6 мм, 5 мк, или эквивалентную; температуру колонки: 30°С;
подвижную фазу: смесь 40% растворителя А:10% растворителя В:50% растворителя С, содержащую 1 г/л октансульфоната натрия;
растворитель А: буферный раствор 0,05М КН2РО4;
растворитель В: ацетонитрил;
растворитель С: метанол;
изократическое элюирование;
время прогона: 60 мин;
скорость потока: 1,0 мл/мин;
детекцию: УФ 220 нм;
вводимый объем: 100 мкл;
разбавитель: подвижная фаза.
Методика:
Вводят холостую пробу (разбавитель), стандартный раствор, исследуемый раствор и записывают хроматограммы.
В стандартной хроматограмме устанавливают следующие параметры пригодности системы: время удерживания (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 5,2 мин;
и8Р расширение пика (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида находится в диапазоне от 0,8 до 1,5;
относительное время удерживания (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 5,1 или время удерживания (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 5,5 мин;
и8Р расширение пика (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида находится в диапазоне от 0,8 до 1,5;
относительное время удерживания (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамица составляет около 4,1.
Подбирают подвижную фазу таким образом, чтобы достичь пригодности системы.
Вычисляют процентное содержание (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободное основание и метансульфонат) в исследуемых образцах (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободное основание и метансульфонат) и (8)-2-[3-(3- 24 025326 фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободное основание и метансульфонат) в исследуемых образцах (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (свободное основание и метансульфонат) путем вычисления внешнего стандарта.
Значение предела количественного определения (ЬОО) для (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2фтсрбензилокси)бензиламино]пропанамида и для (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]прэпанамида в соответствующих (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде и (8)-2[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде составляет 0,004 мас.%. Значение предела количественного определения (ТОО) для метансульфоната (8)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и для метансульфоната (8)-2-[3-(3-фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в соответствующих метансульфонате (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамиде и метансульфонате (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет 0,005 мас.%. Значение предела обнаружения всех рассматриваемых примесей составляет 0,001 мас.%.
Пример 18. ВЭЖХ определение энантиомерной чистоты метансульфоната (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамид) (М)
Энантиомерную чистоту образца определяют ВЭЖХ. Определение осуществляют, в соответствии со следующим:
Стандартный раствор 1:
Растворяют около 5,3 мг стандартного образца метансульфоната (К)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в 25 мл подвижной фазы.
Стандартный раствор 2:
Растворяют около 8,0 мг стандартного образца метансульфоната (8)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида и 0,2 мл стандартного раствора 1 в 50 мл подвижной фазы.
Концентрация метансульфоната (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 0,5%, вычисленная относительно концентрации метансульфоната (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида.
Исследуемые растворы 1 и 2:
В двух экземплярах растворяют около 8,0 мг исследуемого продукта в 50 мл подвижной фазы.
Хроматографические условия:
Колонка: СЫга1рак АН 250 ммх4,6 мм, В.Д. 5 мкм; температура колонки: 45°С;
подвижная фаза: 0,25 мМ Си8О4 (аккуратно взвешивают около 40 мг Си8О4 в 1000 мл воды)/МеОН 60/40;
изократическое элюирование; скорость потока: 1,0 мл/мин; детекция: УФ 230 нм; вводимый объем: 10 мкл; время прогона: 15 мин.
Методика:
Анализируют один раз холостую пробу (подвижная фаза), стандартный раствор 2 дважды, исследуемые растворы 1 и 2 один раз и устанавливают, что для стандартных введений, ОСО% (относительное стандартное отклонение %) для процента по площади метансульфоната (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида меньше 2,0%;
как для стандартных растворов, так и для растворов образцов, для каждого введения процент по площади главного пика находится в диапазоне между средним значением ±0,1%.
Вычисляют содержание (процент по площади) метансульфоната (К)-2-[4-(2фторбензилокси)бензиламино]пропанамида в качестве среднего значения двух определений.
Время удерживания:
Время удерживания (8)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 5,7 мин.
Относительное время удерживания (К)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 1,7.
Пример 19. ВЭЖХ определение энантиомерной чистоты метансульфоната (8)-2-[4-(3фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (сафинамид) (Гс)
Энантиомерную чистоту образца определяют ВЭЖХ. Определение осуществляют в соответствии со следующими условиями:
Исследуемый раствор:
Растворяют около 10 мг исследуемого образца в 10 мл подвижной фазы.
Хроматографические условия:
Колонка: СЫга1рак АН 250 ммх4,6 мм, В.Д. 10 мкм; температура колонки: 50°С;
- 25 025326 подвижная фаза: 0,25 мМ Си8О4 изократическое элюирование; скорость потока: 1,0 мл/мин; детекция: УФ 200 нм; вводимый объем: 10 мкл; время прогона: 30 мин.
Методика:
Вводят исследуемый раствор и вычисляют максимальный ответ энантиомеров в виде процента по площади.
Время удерживания (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 9,2 мин.
Относительное время удерживания (К)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида составляет около 1,9.
Пример 20. Анализ цитохрома Р450
Ингибирование пяти самых важных изоформ цитохрома Р450 (СУР1Л2, СУР2С9. СУР2С19. ί'.ΎΡ2Ό6 и СУР3Л4), связанное с лекарственным метаболизмом, измеряли, используя специфические субстраты, которые становятся флуоресцирующими в результате СУР метаболизма (Оейек! Κίΐ анализ).
Соединения исследовали в 96-луночном планшете, содержащем инкубационный/ΝΆΌΡΗ регенерирующий буфер. Добавляли специфические человеческие рекомбинантные изоферменты и субстраты и выдерживали при 37°С в течение 15 мин для СУР1Л2/СЕС, 40 мин для СУР2Е1/МРС, 45 мин для СУР2С9/МРС и 30 мин для других СУР450.
Специфические субстраты представляли собой следующие: 3-циано-7-этоксикумарин (СУР2С19 и СУР1Л2), 7-метокси-4-трифторметилкумарин (СУР2С9), 3-|2-(КХдиэтилХ-метиламино)этил|-7метокси-4-метилкумарин (СУР2П6), бензилфенилкумарин (СУР3Л4).
Планшеты считывали на планшет-ридере νΠΐΟΓ (Регкш Е1тег) при подходящих длинах волн испускания/возбуждения, и определяли 1С50 (концентрацию, ингибирующую до 50% ферментативной активности). Результаты представлены в табл. 1 и 2.
Пример 21. Анализ на цитотоксичность в клеточной линии человеческих нейробластом 8Η-8Υ-5Υ
В момент времени ноль клетки высевали на 1,104/см2 в 96-луночный планшет в питательной среде ОМЕМ+10% подогретого инактивированного РВ8+2 мМ 1-глутамина+100 Ед/мл-100 мкг/мл пенициллин/стрептомицина.
Через 72 ч на субконфлюентной фазе роста среду удаляли и клетки инкубировали в течение 24 ч при 37°С в 180 мкл нейробазальной среды +2 мМ 1-глутамин (Ы£е Теспоио1од1ек) с или без исследуемых соединений (20 мкл по меньшей мере 5 концентраций в трех экземплярах).
В конце инкубации к клеточной среде непосредственно добавляли 20 мкл красителя А1атаг В1ие (А1атагВ1ие™ Аккау Κίΐ, Рготеда).
Четыре часа спустя определяли цитотоксичность путем измерения флуоресценции при длине волны возбуждения 530 нм и длине волны испускания 595 нм, используя планшет-ридер Тесап.
Перед и по окончании обработки культуры изучали под микроскопом, используя О1утрик 1x70 инвертированный световой микроскоп, подсоединенный к анализатору изображений (1таде Рго Р1ик, 5.1), для определения клеточной морфологии.
Результаты представлены в табл. 1 в виде концентрации, показывающей 50% смертность.
Пример 22. НЕКО ток в трансфицированных клеточных линиях СНО
Ингибирование НЕКО тока исследовали в СНО клетках, стабильно экспрессирующих рекомбинантный НЕКО канал.
Для определения эффекта исследуемых соединений на НЕКО токи клетки фиксировали на -80 мВ, деполяризовали до 0 мВ в течение 5 с, давая возможность активации НЕКО тока, и реполяризовали до -50 мВ в течение 5 с, давая возможность деактивироваться остаточному току НЕКО. Эту процедуру повторяли с частотой 0,06 Гц. Амплитуду тока при реполяризации (НЕКО остаточный ток) измеряли перед и после воздействия исследуемого соединения.
Ингибирование тока вычисляли как разницу между амплитудой НЕКО остаточного тока, измеренной по окончании периода перфузии холостого раствора, и НЕКО остаточным током, измеренным по окончании периода перфузии исследуемого соединения (когда достигается эффект стационарного состояния), поделенной на контрольный НЕКО остаточный ток.
Кривые концентрации лекарственного средства-ингибирование были получены путем нанесения на график тонированных блоков в зависимости от концентраций лекарственного средства. Кривые зависимости доза-ответ строили по данным тонических блоков в соответствии с логистическим уравнением: у=А2+(А1-А2)/[1+(х/1С50)Р]. А1 и А2 представляют собой фиксированные значения 0 и 1, соответствующие 0 и 100% ингибирования тока, х является концентрацией лекарственного средства, 1С50 представляет собой концентрацию лекарственного средства, приводящую к 50% ингибированию тока, и р является соответствующим угловым коэффициентом. Результаты представлены в табл. 1.
- 26 025326
Пример 23. Тест максимального электрошока (МЕ§) у мышей
Тест максимального электрошока (МЕ§) применяется обычно в исследовании противоэпилептических лекарственных средств на грызунах.
Животные и оборудование:
Использовали мужских особей мышей СИ1, массой 25 г. Следовали методике, описанной А1Шек е! а1. (АЬЪе Н.8., АоойЬеай !Н.. РгапкНп М.К., 5>\\тпуагй Е.А. апй Ао1Г Н.Н. АпНерПерНс Игидк (1995) 4'1' ей.: 99-110, Кауеп Ргекк, Ый., Ыете Уогк). Чтобы подать электрический стимул, достаточный для получения реакции тонической разгибающей мышцы задней конечности по меньшей мере 97% контрольных животных, использовали электрошоковый генератор Идо ВакПе (Мойе1 ЕСТ υΝΙΤ 7801). Стимулы подавали внутриушным способом посредством зажимных электродов у мышей (0,7 с 40 мА шока с последовательностью импульсов 80 Гц, имеющей длительность импульсов 0,4 мс). Сильный эффект соединений, введенных внутрибрюшинно или перорально за 15-60 мин до индукции МЕ§, исследовали и сравнивали с контрольной плацебо-группой. Изучали десять мышей на группу. Полное подавление функции тонической разгибающей мышцы задней конечности, вызывающей судороги, было принято в качестве доказательства противосудорожной актлвности.
Соединения данного изобретения вводили перорально или внутрибрюшинно в дозах 3-30 мг/кг.
Результаты представлены в табл. 3 и 4 как % защиты.

Claims (32)

1. Применение (8)-2-[4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (сафинамида (а)) высокой степени чистоты или (§)-2-[4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (ралфинамида (Ь)) высокой степени чистоты или их соли фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание соответствующей или (§)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11Ь) или их соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,03 мас.% для производства лекарственного препарата для лечения соответственно:
(a) эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, депрессии, синдрома усталых ног и мигрени или (b) болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическую боль, мигрени, биполярных расстройств, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений в условиях, которые не препятствуют активности цитохромов системы СУР450 и не проявляют блокирующих свойств в отношении НЕКО канала.
2. Применение сафинамида высокой степени чистоты или ралфинамида высокой степени чистоты или их соли фармацевтически приемлемой кислоты по п.1 для производства лекарственного препарата для лечения нарушений у пациентов, которые классифицируются как медленные метаболизаторы (РМ), или у пациентов, которые параллельно принимают другие лекарственные препараты, о которых известно, что они препятствуют активности цитохромов системы СУР450, и/или для которых известно, что они проявляют свойства блокировки НЕКО каналов.
3. Применение по любому из пп.1 и 2, отличающееся тем, что цитохромы системы СУР450 выбирают из группы, состоящей из СУР3А4, СУР2И6, СУР2С19 и СУР2С9.
4. Применение по любому из пп.1-3, где фармацевтически приемлемой кислотой является метансульфоновая кислота и где содержание соответствующей примеси формулы (11а) или (11Ь) в виде соли метансульфоновой кислоты ниже 0,01 мас.%.
5. Применение ралфинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание соответствующей примеси (§)-2-[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида (11Ь) или ее соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,03 мас.% по любому из пп.1-4 для производства лекарственного препарата для лечения биполярного расстройства.
- 27 025326
6. Применение ралфинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты по п.5, где содержание примеси (11Ь) или ее соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,01 мас.%.
7. Применение соли фармацевтически приемлемой кислоты ралфинамида высокой степени чистоты, где содержание соли фармацевтически приемлемой кислоты примеси (11Ь) ниже 0,03 мас.% по п.5, где фармацевтически приемлемой кислотой является метансульфоновая кислота.
8. Применение соли метансульфоновой кислоты ралфинамида высокой степени чистоты по п.7, где содержание соли метансульфоновой кислоты примеси (11Ь) ниже 0,01 мас.%.
9. Применение ралфинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты по любому из пп.5-8 для производства лекарственного препарата для лечения биполярного расстройтсва у пациентов, которые классифицируются как медленные метаболизаторы (РМ) или параллельно принимают другие лекарственные средства, о которых известно, что они препятствуют активности цитохромов системы СУР450, и/или для которых известно, что они проявляют свойства блокировки НЕКС каналов.
10. Применение сафинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты по любому из пп.1-4 в сочетании с одним или несколькими активными агентами для лечения болезни Паркинсона, выбранными из группы, состоящей из агониста дофамина, леводопы и ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ), для производства лекарственного препарата для лечения болезни Паркинсона.
11. Применение ралфинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты по любому из пп.1-4 в сочетании с габапентином или прегабалином для производства лекарственного препарата для лечения болезненных состояний.
12. Фармацевтический состав, содержащий (а) сафинамид высокой степени чистоты или (Ь) ралфинамид высокой степени чистоты или их соль фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание соответствующей примеси формулы (11а) или (11Ь), определенной в п.1, или их соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,03 мас.%, для лечения соответственно:
(a) эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, депрессии, синдрома усталых ног и мигрени или (b) болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическую боль, мигрени, биполярных расстройств, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений в условиях, которые не препятствуют активности цитохромов системы СУР450 и не проявляют блокирующих свойств в отношении НЕКС канала.
13. Фармацевтический состав по п.12, отличающийся тем, что цитохромы системы СУР450 выбирают из группы, состоящей из СУР3Л4, СУР2Э6. СУР2С19 и СУР2С9.
14. Фармацевтический состав по любому из пп.12 и 13, где фармацевтически приемлемой кислотой является метансульфоновая кислота и содержание соответствующей примеси формулы (11а) или (11Ь) в виде соли метансульфоновой кислоты ниже 0,01 мас.%.
15. Фармацевтический состав по любому из пп.12 и 13, содержащий сафинамид высокой степени чистоты или его соль фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание примеси формулы (11а) или ее соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,03 мас.%, и один или несколько дополнительных активных агентов для лечения болезни Паркинсона, выбранных из группы, состоящей из агониста дофамина, леводопы и ингибитора катехол-О-метилтрансферазы (СОМТ).
16. Фармацевтический состав по п.15, где фармацевтически приемлемой кислотой является метансульфоновая кислота и содержание примеси формулы (11а) в виде соли метансульфоновой кислоты ниже 0,01 мас.%.
17. Фармацевтический состав по любому из пп.12 и 13, содержащий ралфинамид высокой степени чистоты или его соль фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание примеси формулы (11Ь) или ее соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,03 мас.%, и дополнительный агент, активный в отношении болезненных состояний, который является габапентином или прегабалином.
18. Способ лечения нарушений ЦНС, выбранных из эпилепсии, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, депрессии, синдрома усталых ног и мигрени в условиях, которые не препятствуют активности цитохромов системы СУР450 и не проявляют блокирующих свойств в отношении НЕКС канала, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества сафинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание примеси (§)-2-[3-(3фторбензил)-4-(3-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида формулы (11а) .ΝΗ, |П«) или его соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,03 мас.%.
- 28 025326
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что цитохромы системы СУР450 выбирают из группы, состоящей из СУР3Л4, СУР21Ж СУР2С19 и СУР2С9.
20. Способ по любому из пп.18 и 19 для лечения болезни Паркинсона или синдрома усталых ног, включающий введение пациенту, нуждающемуся в указанном лечении, эффективного количества сафинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание примеси формулы (11а) или ее соли фармацевтически приемлемой кислоты меньше 0,03 мас.%, необязательно в сочетании с одним или несколькими активными агентами для лечения болезни Паркинсона, выбранными из группы, состоящей из агониста дофамина, леводопы и ингибитора катехол-Ометилтрансферазы (СОМТ).
21. Способ по любому из пп.18-20, где фармацевтически приемлемой кислотой является метансульфоновая кислота и содержание примеси формулы (11а) в виде соли метансульфоновой кислоты ниже 0,01 мас.%.
22. Способ по любому из пп.18 и 19, в котором пациент, нуждающийся в лечении, классифицируется как медленный метаболизатор (РМ) или параллельно принимает другие лекарственные средства, о которых известно, что они препятствуют активности цитохромов системы СУР450, и/или для которых известно, что они проявляют свойства блокировки НЕКС каналов.
23. Способ лечения болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическую боль, мигрени, биполярных расстройств, депрессий, сердечно-сосудистых, воспалительных, мочеполовых, метаболических и желудочно-кишечных нарушений, в условиях, которые не препятствуют активности цитохромов системы СУР450 и не проявляют блокирующих свойств в отношении НЕКС канала, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества ралфинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание примеси 2-[3(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида формулы (11Ь) или его соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,03 мас.%.
24. Способ по п.23, отличающийся тем, что цитохромы системы СУР450 выбирают из группы, состоящей из СУР3Л4, СУР2П6, СУР2С19 и СУР2С9.
25. Способ по любому из пп.23 и 24 для лечения болезненных состояний, включающих хроническую боль и нейропатическую боль, и мигрени, необязательно в сочетании с габапентином или прегабалином.
26. Способ по любому из пп.23-25, где солью ралфинамида и фармацевтически приемлемой кислоты является соль метансульфоновой кислоты и где содержание соответствующей примеси формулы (11Ь) в виде соли метансульфоновой кислоты ниже 0,01 мас.%.
27. Способ по любому из пп.23 и 24, в котором пациент, нуждающийся в лечении, классифицируется как медленный метаболизатор (РМ) или параллельно принимает другие лекарственные средства, о которых известно, что они препятствуют активности цитохромов системы СУР450, и/или для которых известно, что они проявляют свойства блокировки НЕКС каналов.
28. Способ лечения биполярного расстройства в условиях, которые не препятствуют активности цитохромов системы СУР450 и не проявляют блокирующих свойств в отношении НЕКС канала, по любому из пп.23 и 24, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества ралфинамида высокой степени чистоты или его соли фармацевтически приемлемой кислоты, где содержание примеси 2 -[3-(2-фторбензил)-4-(2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамида формулы (11Ь) или его соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,03 мас.%.
29. Способ по п.28, отличающийся тем, что цитохромы системы СУР450 выбирают из группы, состоящей из СУР3Л4, СУР2Э6. СУР2С19 и СУР2С9.
30. Способ по любому из пп.28 и 29, где содержание примеси (11Ь) или ее соли фармацевтически приемлемой кислоты ниже 0,01 мас.%.
31. Способ по любому из пп.28-30, где соль ралфинамида фармацевтически приемлемой кислоты, водимая пациенту для лечения биполярного расстройства, представляет собой соль метансульфоновой кислоты.
- 29 025326
32. Способ по любому из пп.28-31, где пациент, нуждающийся в лечении, классифицируется как медленный метаболизатор (РМ) или параллельно принимает другие лекарственные средства, о которых известно, что они препятствуют активности цитохромов системы СУР450, и/или известно, что они проявляют свойства блокировки НЕКС канала.
EA201101308A 2006-06-19 2007-06-08 Применение сафинамида и ралфинамида высокой степени чистоты для лечения заболеваний и болезненных состояний в условиях, не препятствующих активности цитохромов системы cyp450 и не проявляющих блокирующих свойств в отношении herg канала EA025326B1 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06012565 2006-06-19

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201101308A1 EA201101308A1 (ru) 2012-02-28
EA025326B1 true EA025326B1 (ru) 2016-12-30

Family

ID=37101658

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201101308A EA025326B1 (ru) 2006-06-19 2007-06-08 Применение сафинамида и ралфинамида высокой степени чистоты для лечения заболеваний и болезненных состояний в условиях, не препятствующих активности цитохромов системы cyp450 и не проявляющих блокирующих свойств в отношении herg канала
EA200970028A EA017123B1 (ru) 2006-06-19 2007-06-08 Способ получения 2-[4-(3- и 2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидов

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200970028A EA017123B1 (ru) 2006-06-19 2007-06-08 Способ получения 2-[4-(3- и 2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидов

Country Status (27)

Country Link
US (2) US8076515B2 (ru)
EP (2) EP2474521B1 (ru)
JP (2) JP5240476B2 (ru)
KR (2) KR101491541B1 (ru)
CN (2) CN103284984B (ru)
AR (1) AR061510A1 (ru)
AU (1) AU2007263328C1 (ru)
BR (1) BRPI0712936B8 (ru)
CA (1) CA2653012C (ru)
CY (2) CY1115951T1 (ru)
DK (2) DK2029524T3 (ru)
EA (2) EA025326B1 (ru)
ES (2) ES2602069T3 (ru)
HK (1) HK1130245A1 (ru)
HR (2) HRP20150136T1 (ru)
HU (1) HUE030233T2 (ru)
IL (1) IL195294A (ru)
LT (1) LT2474521T (ru)
MX (2) MX2008015704A (ru)
NO (2) NO342018B1 (ru)
NZ (2) NZ595737A (ru)
PL (2) PL2029524T3 (ru)
PT (2) PT2029524E (ru)
RS (2) RS53824B1 (ru)
SI (2) SI2029524T1 (ru)
TW (2) TWI393700B (ru)
WO (1) WO2007147491A1 (ru)

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1658062B1 (en) * 2003-08-25 2010-02-17 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful as anti-inflammatory agents
RS53824B1 (en) * 2006-06-19 2015-06-30 Newron Pharmaceuticals S.P.A. PROCESS FOR OBTAINING 2- [4- (3-AND 2-FLUOROBENZYLOXY) BENZYLAMINO] PROPANAMIDE
DK2229351T3 (en) * 2007-12-11 2018-01-22 Newron Pharm Spa PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF 2- [4- (3- OR 2-FLUORBENZYLOXY) BENZYLAMINO] PROPANAMIDS WITH HIGH PURITY
EP2314569A1 (en) * 2009-10-22 2011-04-27 Merck Patent GmbH Novel polymorphic forms of (S)-2-[4-(3-Fluoro-benzyloxy)-benzylamino]-propionamide mesylate salt and processes of manufacturing thereof
LT2563355T (lt) * 2010-04-27 2016-09-26 Newron Pharmaceuticals S.P.A. Ralfinamido metansulfonato druskų arba jų r-enentiomerų gavimo būdas
RU2015122615A (ru) 2012-12-03 2017-01-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Замещенные соединения амида изоксазола в качестве ингибиторов стеароил-коа-десатуразы 1 (скд1)
WO2014178083A1 (en) 2013-05-03 2014-11-06 Council Of Scientific & Industrial Research An improved synthesis of anti-parkinson agent
CN104292128A (zh) * 2014-07-01 2015-01-21 南京正科制药有限公司 一种沙芬酰胺晶型a
JP6466109B2 (ja) * 2014-09-09 2019-02-06 東ソー・ファインケム株式会社 ２−ベンジルオキシ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン誘導体及びその製造方法
CN105017060B (zh) * 2015-07-03 2017-06-16 南京正大天晴制药有限公司 一种沙芬酰胺新晶型及其制备方法
CN113072436A (zh) * 2015-07-24 2021-07-06 上海医药集团股份有限公司 一种苄基芳基醚的制备方法
CN105061245A (zh) * 2015-08-25 2015-11-18 成都维恒医药科技有限公司 一种高纯度沙芬酰胺的制备方法
CN106220525A (zh) * 2016-07-31 2016-12-14 合肥远志医药科技开发有限公司 一种工业化沙芬酰胺甲磺酸盐的制备方法
CN106336363B (zh) * 2016-08-22 2018-10-30 上海医药集团股份有限公司 一种沙芬酰胺甲磺酸盐晶型c及其制备方法
CN106565521B (zh) * 2016-08-24 2019-03-08 浙江美诺华药物化学有限公司 (s)-2-[3-(3-氟苄基)-4-(3-氟苄氧基)苄氨基]丙酰胺及其盐的制备方法
CN106596828B (zh) * 2016-12-15 2018-09-25 扬子江药业集团有限公司 一种甲磺酸沙芬酰胺有关物质的检测方法
CN107271600B (zh) * 2017-07-28 2019-01-25 成都百裕制药股份有限公司 一种4-(3-氟苄氧基)苯甲醛中异构体杂质含量的检测方法
CN107857713A (zh) * 2017-11-23 2018-03-30 江苏恒盛药业有限公司 一种沙芬酰胺氢溴酸盐及其一种晶型
CN107759487A (zh) * 2017-11-23 2018-03-06 江苏恒盛药业有限公司 一种沙芬酰胺盐酸盐及其一种晶型以及制备方法
WO2019167085A1 (en) * 2018-03-01 2019-09-06 Msn Laboratories Private Limited, R&D Center Process for the preparation of (s)-2-[[4-[(3-fluorophenyl)methoxy]phenyl]methyl]amino propanamide methanesulfonate
US11111208B2 (en) 2019-06-17 2021-09-07 RK Pharma Solutions LLC Process for the preparation of safinamide mesylate intermediate
ES2977486T3 (es) * 2019-08-06 2024-08-26 Medichem Sa Proceso para preparar safinamida
CN111122736B (zh) * 2019-12-30 2021-03-12 北京鑫开元医药科技有限公司海南分公司 一种用于检测布瓦西坦中间体中对映异构体的方法
CN113214097B (zh) * 2020-01-21 2022-08-30 厦门大学 治疗阿尔茨海默病的化合物
CN112028754A (zh) * 2020-06-17 2020-12-04 浙江美诺华药物化学有限公司 一种甲磺酸沙芬酰胺中间体的制备方法
CN114088830B (zh) * 2021-11-10 2022-09-23 石家庄四药有限公司 一种4-(3-氟苄氧基)苯甲醛中异构体的检测方法
CN116008439B (zh) * 2023-02-20 2023-10-27 山东绿叶制药有限公司 一种检测2,6-二氧杂螺[4,5]癸烷类化合物或其盐中杂质的方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0400495A1 (en) * 1989-05-25 1990-12-05 FARMITALIA CARLO ERBA S.r.l. N-phenylalkyl substituted alfa-amino carboxamide derivatives and process for their preparation
EP0974351A2 (en) * 1998-04-24 2000-01-26 Jouveinal Medicament for preventing and treating gastrointestinal damage
WO2004066987A2 (en) * 2003-01-30 2004-08-12 Dynogen Pharmaceuticals, Inc. Use of sodium channel modulators for treating gastrointestinal tract disorders
WO2004066990A2 (en) * 2003-01-30 2004-08-12 Dynogen Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating lower urinary tract disorders using sodium channel modulators
WO2005102300A1 (en) * 2004-04-22 2005-11-03 Newron Pharmaceuticals S.P.A. α-AMINOAMIDE DERIVATIVES USEFUL IN THE TREATMENT OF RESTLESS LEGS SYNDROME AND ADDICTIVE DISORDERS
EP1655029A1 (en) * 2003-07-25 2006-05-10 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Medicinal compositions

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9727523D0 (en) 1997-12-31 1998-02-25 Pharmacia & Upjohn Spa Alpha-aminoamide derivatives useful as analgesic agents
AU2001249610B2 (en) 2000-03-31 2005-03-24 Euro-Celtique S.A. Aminopyridines and their use as anticonvulsants and sodium channel blockers
AU2002333374B2 (en) 2001-09-03 2007-03-22 Newron Pharmaceuticals S.P.A. Pharmaceutical composition comprising gabapentin or an analogue thereof and an (alpha)- aminoamide and its analgesic use
EP1438956A1 (en) * 2003-01-16 2004-07-21 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful as antimigraine agents
AR044007A1 (es) 2003-04-11 2005-08-24 Newron Pharmaceuticals Inc Metodos para el tratamiento de la enfermedad de parkinson
EP1658062B1 (en) * 2003-08-25 2010-02-17 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful as anti-inflammatory agents
EP1524267A1 (en) 2003-10-15 2005-04-20 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Substituted benzylaminoalkylene heterocycles
EP1557166A1 (en) * 2004-01-21 2005-07-27 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of lower urinary tract disorders
SI1809271T1 (sl) * 2004-09-10 2010-10-29 Newron Pharm Spa Uporaba (R)-(halobenziloksi) benzilamino propanamidov kot selektivnih modulatorjev natrijevih in/ali kalcijevih kanalov
EP1870097A1 (en) * 2006-06-15 2007-12-26 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of cognitive disorders
RS53824B1 (en) * 2006-06-19 2015-06-30 Newron Pharmaceuticals S.P.A. PROCESS FOR OBTAINING 2- [4- (3-AND 2-FLUOROBENZYLOXY) BENZYLAMINO] PROPANAMIDE
DK2229351T3 (en) * 2007-12-11 2018-01-22 Newron Pharm Spa PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF 2- [4- (3- OR 2-FLUORBENZYLOXY) BENZYLAMINO] PROPANAMIDS WITH HIGH PURITY
JP5736175B2 (ja) * 2007-12-19 2015-06-17 ニユーロン・フアーマシユーテイカルズ・エツセ・ピー・アー 精神障害の治療に有用なα−アミノアミド誘導体

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0400495A1 (en) * 1989-05-25 1990-12-05 FARMITALIA CARLO ERBA S.r.l. N-phenylalkyl substituted alfa-amino carboxamide derivatives and process for their preparation
US5391577A (en) * 1989-05-25 1995-02-21 Farmitalia Carlo Erba S R L N-phenylalkyl substituted α-amino carboxamide derivatives and process for their preparation
EP0974351A2 (en) * 1998-04-24 2000-01-26 Jouveinal Medicament for preventing and treating gastrointestinal damage
WO2004066987A2 (en) * 2003-01-30 2004-08-12 Dynogen Pharmaceuticals, Inc. Use of sodium channel modulators for treating gastrointestinal tract disorders
WO2004066990A2 (en) * 2003-01-30 2004-08-12 Dynogen Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating lower urinary tract disorders using sodium channel modulators
EP1655029A1 (en) * 2003-07-25 2006-05-10 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Medicinal compositions
WO2005102300A1 (en) * 2004-04-22 2005-11-03 Newron Pharmaceuticals S.P.A. α-AMINOAMIDE DERIVATIVES USEFUL IN THE TREATMENT OF RESTLESS LEGS SYNDROME AND ADDICTIVE DISORDERS

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CATTABENI F: "RALFINAMIDE", IDRUGS, vol. 07, no. 10, 1 October 2004 (2004-10-01), pages 935 - 939, XP008042612, ISSN: 1369-7056 *
MEALY N E, ET AL.: "NEUROLOGIC DRUGS", DRUGS OF THE FUTURE, PROUS SCIENCE, ES, vol. 27, no. 09, 1 January 2000 (2000-01-01), ES, pages 879 - 915, XP009073548, ISSN: 0377-8282 *
STUMMANN, T.C. SALVATI, P. FARIELLO, R.G. FARAVELLI, L.: "The anti-nociceptive agent ralfinamide inhibits tetrodotoxin-resistant and tetrodotoxin-sensitive Na^+ currents in dorsal root ganglion neurons", EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACOLOGY, ELSEVIER SCIENCE, NL, vol. 510, no. 3, 14 March 2005 (2005-03-14), NL, pages 197 - 208, XP004781069, ISSN: 0014-2999, DOI: 10.1016/j.ejphar.2005.01.030 *
МУРАВЬЕВ И.А. Технология лекарств. Том 1, Москва, "Медицина", 1980, с. 19, абз.5, c. 20, абз. 2 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN103284984B (zh) 2016-08-03
LT2474521T (lt) 2016-11-25
NO20171916A1 (no) 2009-01-16
US20090156678A1 (en) 2009-06-18
NO342644B1 (no) 2018-06-25
US20120157712A1 (en) 2012-06-21
SI2474521T1 (sl) 2016-12-30
TWI412512B (zh) 2013-10-21
US8278485B2 (en) 2012-10-02
RS55464B1 (sr) 2017-04-28
NZ572798A (en) 2011-11-25
CN103284984A (zh) 2013-09-11
PL2474521T3 (pl) 2017-01-31
AU2007263328B2 (en) 2012-03-22
KR20140027563A (ko) 2014-03-06
TWI393700B (zh) 2013-04-21
MX2008015704A (es) 2009-01-09
PT2029524E (pt) 2015-03-09
NO342018B1 (no) 2018-03-12
AU2007263328C1 (en) 2012-09-06
HUE030233T2 (en) 2017-04-28
MX342698B (es) 2016-10-10
DK2474521T3 (en) 2016-10-31
SI2029524T1 (sl) 2015-03-31
PT2474521T (pt) 2016-11-10
JP5795342B2 (ja) 2015-10-14
EP2029524B1 (en) 2014-11-26
BRPI0712936B8 (pt) 2021-05-25
AU2007263328A1 (en) 2007-12-27
BRPI0712936B1 (pt) 2021-02-23
JP2013139446A (ja) 2013-07-18
JP5240476B2 (ja) 2013-07-17
IL195294A (en) 2015-03-31
ES2527437T3 (es) 2015-01-26
JP2009541232A (ja) 2009-11-26
TW201313662A (zh) 2013-04-01
TW200815322A (en) 2008-04-01
KR101410291B1 (ko) 2014-06-20
CN101472880A (zh) 2009-07-01
US8076515B2 (en) 2011-12-13
AR061510A1 (es) 2008-09-03
CN101472880B (zh) 2013-04-24
EP2474521B1 (en) 2016-08-10
CA2653012C (en) 2014-08-05
AU2007263328A2 (en) 2009-02-19
CA2653012A1 (en) 2007-12-27
HRP20150136T1 (en) 2015-03-13
EA200970028A1 (ru) 2009-06-30
PL2029524T3 (pl) 2015-04-30
WO2007147491A1 (en) 2007-12-27
EA017123B1 (ru) 2012-10-30
KR20090021392A (ko) 2009-03-03
KR101491541B1 (ko) 2015-02-09
HK1130245A1 (en) 2009-12-24
CY1115951T1 (el) 2017-01-25
EA201101308A1 (ru) 2012-02-28
ES2602069T3 (es) 2017-02-17
NZ595737A (en) 2013-04-26
HRP20161456T1 (hr) 2016-12-16
BRPI0712936A2 (pt) 2012-12-18
IL195294A0 (en) 2009-08-03
DK2029524T3 (da) 2015-02-23
EP2029524A1 (en) 2009-03-04
EP2474521A1 (en) 2012-07-11
NO20090231L (no) 2009-01-16
CY1118113T1 (el) 2017-06-28
RS53824B1 (en) 2015-06-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA025326B1 (ru) Применение сафинамида и ралфинамида высокой степени чистоты для лечения заболеваний и болезненных состояний в условиях, не препятствующих активности цитохромов системы cyp450 и не проявляющих блокирующих свойств в отношении herg канала
EA019898B1 (ru) Способ получения 2-[4-(3- или 2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидов с высокой степенью чистоты
JP2009541232A5 (ru)