KR101410291B1 - 2-［4-(3- 및 2-플루오로벤질옥시)벤질아미노)프로판 아미드의 제조방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 특히 디벤질 유도체 불순물의 함량이 0.03중량% 미만, 바람직하게는 0.01중량% 미만인 치료학적으로 활성인 2-[4-(3- 및 2-플루오로벤질옥시)벤질아미노)프로판아미드 및 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염을 고순도로 수득하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 쉬프 염기 중간체 2-[4-(3- 및 2-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노)프로판아미드를 불균질 촉매의 존재하에 양성자성 유기 용매 속에서 촉매적 수소화시켜 수행한다.
2-[4-(3- 및 2-플루오로벤질옥시)벤질아미노)프로판아미드, 고순도, 랄핀아미드, 사핀아미드, 쉬프 염기 중간체, 촉매적 수소화, 불균질 촉매.

Description

2-［4-(3- 및 2-플루오로벤질옥시)벤질아미노)프로판 아미드의 제조방법 {Process for the production of 2-［4-(3- and 2-fluorobenzyloxy)benzylamino］ propan amides}
발명의 배경
본 발명은 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드, 즉 화학식 Ia의 사핀아미드(3-F) 및 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드, 즉 화학식 Ib의 랄핀아미드(2-F) 및 이들의 염을 높은 수율 및 매우 높은 에난티오머적 순도 및 화학적 순도로 제조하기 위한 신규한 방법에 관한 것이다.
이러한 방법은 또한 다량 제조에 매우 유리하다.
Figure 112012045470029-pct00001
삭제
사핀아미드: 3-F
Figure 112009003352343-pct00002
랄핀아미드: 2-F
사핀아미드(NW-1015, FCE-26743A, PNU-151774E)는 나트륨 채널 차단제, 칼슘 채널 조절제, 모노아미노 옥사다아제 B(MAO-B) 억제제, 글루타메이트 방출 억제제 및 도파민 대사 조절제이다.
사핀아미드는 CNS 장애, 특히 간질, 파킨슨병, 알츠하이머병, 우울증, 하지불안 증후군(restless legs syndrome) 및 편두통의 치료에 유용하다(국제 공개공보 제WO 90/14334호, 제WO 04/089353호, 제WO 05/102300호, 제WO 04/062655호).
랄핀아미드(NW-1029, FCE-26742A, PNU-0154339E)는 만성 통증 및 신경병증성 통증, 편두통, 양극성 장애, 우울증, 심혈관 장애, 염증 장애, 비뇨생식 장애, 대사 장애 및 위장관 장애를 포함하는 통증 질환의 치료에 유용한 나트륨 채널 차단제이다(국제 공개공보 제WO 99/35125호, 제WO 03/020273호, 제WO 04/062655호, 제WO 05/018627호, 제WO 05/070405호, 제WO05/102300호, 제WO 06/027052호).
본 발명에 이르러, 선행 기술에 기재된 방법에 따른 사핀아미드 및 랄핀아미드의 대규모 제조는 바람직하지 않은 두 가지 불순물, 즉, 화학식 IIa의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 및 화학식 IIb의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 및 이들의 염, 특히 화학식 IIc 및 IId의 메탄설포네이트 각각을 함유하는 것으로 밝혀졌다.
Figure 112009003352343-pct00003
Figure 112009003352343-pct00004
이러한 사실은 앞서 언급한 두 가지 불순물의 매우 높은 독성으로 인해 특히 중요하다.
다수의 후보 약물들은 사람 대사에 미치는 예측하지 못한 영향, 또는 원치않는 불순물로 인한 독성 때문에 임상적 시도에 실패하였으며, 이에 따라 초기 전임상 단계(pre-clinical phase)에서의 이러한 불순물의 제거가 중요하며 강력히 요망되고 있다.
전임상 수준에서, 신규한 화합물의 "약물가능성(drugability)"은 매우 잘 확립된 일련의 시험관내 분석, 예를 들면, 약물-대사 효소와의 상호작용, 세포독성, 대사 안정성 및 프로파일링, 막 투과성, 고유 청소율(intrinsic clearance) 및 사람 HERG(human ether-a-go-go related gene) 채널 차단 등을 사용하여 평가할 수 있다.
시토크롬 P450(CYP 450) 시스템은 약물, 발암원 및 환경적 오염물을 포함한 친유성 생체이물(xenobiotics)의 대사를 위한 주요 효소 시스템이다. CYP 450은 여러 조직에 존재하지만 간에서 최고 수준으로 존재하는 헴-함유 막 결합된 다효소 시스템(heme-containing, membrane bound, multienzyme system)이다. 사람 간에는 15개 내지 20개의 상이한 생체이물-대사 CYP 450 형태가 있는 것으로 추정된다. 지금까지, 포유동물에서는 14개 이상의 CYP 유전자족이 확인되었다. 높은 상동성에도 불구하고, 광범위한 연구에서 각각의 CYP족 및 아족이 생체이물 대사에서 현저한 역할을 하는 것으로 나타났다. 세 가지 CYP족인 CYP1, CYP2 및 CYP3이 사람 간 마이크로좀 CYP의 약 70%를 차지하고, 이때 CYP3가 대략 30%를 차지한다. 이들 CYP가 대부분의 시판되는 약물의 대사를 주로 책임지고 있다.
CYP1족은 CYP1A1, CYP1A2 및 CYP1B1을 포함하는 몇 가지 구성원을 함유하며, 이들은 아세트아미노펜, 클로미프라민 및 이미프라민의 대사에 관여한다.
CYP2족은 CYP2A, CYP2B, CYP2C, CYP2D 및 CYP2E를 포함한 몇 가지 아족을 함유한다. CYP2C 아족은 적어도 7개의 구성원을 함유한다. CYP2C9는 이부프로펜, 디클로페낙, 톨부타미드 및 토르세미드의 대사를 책임진다. CYP2C19는 디아제팜 및 오메프라졸을 대사하는 주요 동종효소이다. CYP2D6는 항우울제 및 심혈관 및 항정신병 약물을 포함하여 시판중인 약물의 30% 이상의 대사를 책임지는 것으로 나타났다.
CYP3족에서, 세 개의 이종형(isoform)이 사람 간에서 동정되었다. 사람 CYP3A4는 약물 대사에서 가장 중요한 이종형으로 인지되었다. 지금까지, CYP3A4에 의해 촉매되는 대사가 시판 약물의 거의 50%에 대한 주요 제거 경로이다.
약물 대사에 있어서의 이들의 중요성으로 인해, CYP3A4 및 CYP2D6 둘 다가 약물-약물 상호작용에 종종 관여하며, 임상적으로 사용되는 몇 가지 화합물, 예를 들면, 케토코나졸, 테르페나딘, 에리트로마이신, 미코나졸 프로판올롤 및 퀴니딘 각각이 이들 CYP 450 이종형의 효력있는 억제제로서 확인되었다. 이는 이들 약제의 사용에 대해 명확한 제한을 부과한다.
비 항부정맥제(non antiarrhytmic drug)의 작용의 부작용으로서의 돌연사에 존재하는 추가의 문제점은 약제 산업 및 보건 관리국이 직면하고 있는 주요한 약리학적 안전성 문제이다. 최근, 적어도 5가지의 블록버스터 약물(blockbuster drug)(아스테미졸, 세르틴돌, 테르페나딘, 시사프리드, 그레파플록사신)이 돌연사의 보고로 인해 시장으로부터 회수되었다. 모든 경우에 있어서, 심전도에서의 QT 간격의 연장을 특징으로 하는 심근 재분극의 이상인 QT 간격 연장 증후군(long QT Syndrome; LQTS)이, 심실 세동을 자발적으로 저하시키고 돌연사를 야기할 수 있는 다형 심실빈맥인 "토르사드 드 포인트(torsades de pointes)"에 대한 소인성 요인으로서 연관되었다. 선천성 LQTS는 나트륨 채널 및 두 가지 상이한 칼륨 채널: 신속한 활성화 지연 정류기(rapidly activating delayed rectifier)(IKr) 및 느린 활성화 지연 정류기(IKs)에 있어서의 결함을 야기하는 몇 가지 가능한 돌연변이가 원인일 수 있다. 중요하게도, 약물 노출에 관련된 심장 작용의 연장된 지속 기간의 거의 모든 경우(후천성 LQTS)는 한 가지 특이 메카니즘: 심장에서의 IKr 전류의 차단이 원인일 수 있다. QT 간격의 말기에서의 3 단계 재분극에 대한 주요 기여인자인 이러한 전류는 테트라머 세공(tetrameric pore)에 의해 전달되며, 각각의 서브유니트는 HERG에 의해 암호화된다. HERG K+ 채널의 차단이 약물-유도된 QT 연장의 주요 원인으로서 널리 인지되고 있기 때문에, 이러한 바람직하지 않은 부작용을 갖는 화합물의 조기 검출이 약제 산업의 중요한 목표가 되고 있다.
약물-대사 효소, 특히 CYP 450 효소의 강한 억제 및 HERG 채널 차단 특성을 갖는 화합물은 독성일 가능성이 매우 높으며, 이들의 개발은 초기 단계에서 중단되어야만 했다.
표 1에 나타나 있는 바와 같이, 메탄설포네이트 염(화학식 IIc 및 IId) 형태로서의 불순물(화학식 IIa 및 IIb)은, 본 발명의 방법을 사용하여 합성되는, 높은 순도를 갖는 화학식 Ic의 사핀아미드 메탄설포네이트 및 화학식 Id의 랄핀아미드 메탄설포네이트와 비교하여, 마이크로몰 및 서브마이크로몰 범위에서 CYP3A4, CYP2D6, CYP2C19, CYP2C9 및 HERG 전류를 강력하게 억제하며 매우 세포독성이다.
Figure 112009049647148-pct00047
표 2는, 본 발명의 신규한 방법을 사용하여 합성된 매우 순수한 사핀아미드 및 랄핀아미드 메탄설포네이트를 사용한 시토크롬 CYP3A4의 억제에 대한 비교 결과(IC50)를 보여주는 것으로서, 각각 화학식 IIc 및 IId의 불순물 0.3%의 존재하에서 동일한 방법으로 수득한 사핀아미드 및 랄핀아미드와 비교한 것이다.
화학식 IIc 및 IId의 불순물 0.3%가 매우 순수한 사핀아미드 및 랄핀아미드 메탄설포네이트에 가해진 경우, 상기 두 가지 경우 모두에서 CYP3A4에 대한 IC50의 상당한 감소가 관찰되는데, 이것은 불순물이 효소 활성의 강한 억제에 기여한다는 것을 의미한다.
Figure 112009049647148-pct00048
표 3에 나타나 있는 바와 같이, 화학식 IIc의 불순물은, 마우스 최대 전기충격(Maximal Electroshock; MES) 시험에서, 3mg/kg 복강내 투여로부터 출발하여 사망률을 증가시키며, 약리학적 활성, 즉 경련으로부터의 보호를 전혀 제공하지 않는다.
Figure 112009049647148-pct00049
표 4는 화학식 IId의 불순물이, 10 및 20mg/kg으로 경구 투여하는 경우, 최대 전기충격 시험(MES)에서, 동일한 용량의 랄핀아미드 메탄설포네이트와 비교하여, 경련으로부터 마우스를 보호하지 않는 것을 나타낸다.
Figure 112009049647148-pct00050
이러한 모든 데이타에 근거하면, 문헌[참조; 제WO 90/14334호 및 Pevarello et al., J. Med. Chem, 1998, 41, 579-590]에 기재된 방법으로 합성된 사핀아미드 및 랄핀아미드에 각각 존재하는 화학식 IIc 및 IId의 불순물은 시험관내에서 몇 가지 바람직하지 않은 특성, 예를 들면, 세포독성, CYP 450의 몇 가지 이종형의 강한 억제, HERG 채널 차단을 나타내고, 간질의 "생체내" 모델에서 보호 활성을 나타내지 않는다.
CYP의 중요한 양태 중의 하나는 상이한 개체군 간의 변이이다. 약물 대사에 있어서의 변이는 임상 연구에 있어서 매우 중요하다. CYP3A4 및 CYP2D6의 효소 활성에 있어서의 상당한 변이가 상이한 인종 집단 사이에서, 심지어 동일한 인종 집단의 상이한 개인 사이에서 입증되었다. 개인들 간의 CYP 활성에 있어서의 차이는 상이한 동종효소에 따라 상당히 변한다. 상이한 개인의 CYP 발현 수준에 있어서의 변화는 약물 대사의 변이를 야기할 수 있다. 보다 중요하게는, 다형성(polymorphism)이 또한 약물 대사의 변이를 가져오는 보다 낮거나 보다 높은 효소 활성을 가진 CYP 효소 변형을 야기할 수 있다. CYP2D6 다형성은 약물 대사에서 널리 연구된 주제이다. 임상 연구에서, 개인들 간의 현저한 변이는 항고혈압 약물 및 항간질 약물의 대사에서 처음 발견되었다. CYP2D6 대사된 약물의 제거는 결손 CYP2D6 대립유전자(allele)를 갖는 개인에서 더 느리다. 대사가 느린 개인은 저대사능군(poor metabolizer: PM)으로 분류되는 반면, 촉매적 경쟁 개인(catalytically competent individual)은 고대사능군(extensive metabolizer: EM)이라 하고: 상이한 인종 기원의 개체군에서의 PM 표현형의 발생률은 다르며: 대략 5 내지 10%의 백인(Caucasians)은 PM 표현형을 나타내지만, 아시아 인구중에는 단지 1%만이 그러하다. CYP2C19는 임상적 의미를 갖는 또 다른 중요한 다형성 이종형이다.
이러한 관찰을 고려할 때, CYP450 이종형들을 방해하지 않는(억제하지도 유도하지도 않는) 화합물은, 임상 시험시 약물-약물 상호작용에 대한 위험이 매우 낮아 의사가 간단하고 안전하게 처방할 수 있다.
특히, CYP450 시스템의 시토크롬을 방해하지 않는 약물은, 저대사능군(PM)으로 분류되는 개인의 치료 또는 상기 시토크롬과 상호작용하는 것으로 공지된 다른 약물, 예를 들면, 케토코나졸, 테르페나딘, 에리트로마이신, 미코나졸, 프로판올롤 및 퀴니딘 및/또는 HERG 채널 차단성을 갖는 것으로 공지된 약물을 동시에 복용하고 있는 환자의 치료를 위해 특히 지시된다.
통상의 임상 시험에 따르면, 화학식 Ic 및 Id의 사핀아미드 및 랄핀아미드 메탄설포네이트는 통상적으로, 이를 필요로 하는 환자에게 다수의 1일 용량으로 분할되어 장기간 투여된다. 이것은 특히, 치료하고자 하는 질환이 파킨슨병, 알츠하이머병 및 하지 불안 증후군(사핀아미드의 사용의 경우) 또는 만성 또는 신경병증성 통증, 심혈관 장애 또는 염증 장애(랄핀아미드의 사용의 경우)인 치료학적 용도의 경우이다. 1일 투여량은 환자의 특정한 상태 및 요구에 따라 다를 수 있지만, 사핀아미드 메탄설포네이트 1일 투여량은 통상적으로 10mg/일 내지 800mg/일일 수 있는 반면, 랄핀아미드 메탄설포네이트 1일 투여량은 통상적으로 10mg/일 내지 1g/일일 수 있다. 이러한 조건하에서, 앞서 보고된 데이타를 고려하여, 사핀아미드 및 랄핀아미드 또는 이들의 염의 약제학적 투여 형태 중의 화학식 IIa 및 IIb의 불순물 또는 이들의 염, 특히 화학식 IIc 및 IId의 메탄설포네이트 염의 수준을 가능한 한 낮게, 어떠한 경우든 사핀아미드 및 랄핀아미드 또는 이들의 염, 특히 메탄설포네이트 염의 양을 기준으로 하여 0.03중량% 미만, 바람직하게는 0.01중량% 미만으로 유지하는 것이 매우 바람직하다.
본 발명의 발명자들에 의해 수행된 조사 및 실험적 연구에서는 선행 기술에 따라 제조된 사핀아미드 및 랄핀아미드 및 약제학적으로 허용되는 산과의 각각의 염은 각각의 화학식 IIa 및 IIb의 불순물 또는 약제학적으로 허용되는 산과의 각각의 염, 예를 들면, 화학식 IIc 및 IId의 염을 0.03%중량% 이상의 양으로 함유하는 것으로 나타났다. 따라서, 상기한 생성물은 안전한 치료학적 용도를 위해서는 부적합하다. 특히, 화학식 IIa 및 IIb의 불순물 및 약제학적으로 허용되는 산과의 각각의 염의 함량이 상기한 활성 성분에 대해 0.03중량% 이상, 바람직하게는 0.01중량% 이상인 사핀아미드 또는 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염을 함유하는 약제학적 제제는 약제로서 적합하지 않다.
본 명세서 및 청구의 범위에서, 앞서 나타낸 한계치는, 달리 언급하지 않는 한, "활성 성분"을 기준으로 한 중량비 %, 즉 치료학적 활성 성분(화학식 Ia, 화학식 Ib)의 유효 함량을 기준으로 한 생물학적 활성 불순물(화학식 IIa, 화학식 IIb)의 유효 함량을 표현하는 것으로 의도된다.
본 발명에 기재된 방법은 불순물을 매우 감소시킴으로써 높은 화학적 순도 및 보다 안전한 생물학적 프로파일을 갖는 생성물을 야기한다. 거의 검출되지 않는 다른 불순물은, 각각 화학식 Ia 및 Ib의 화합물을 제조하기 위한 중간체인 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 또는 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 합성하는 데 사용되는 각각 시판중인 3-플루오로벤질 클로라이드 및 2-클로로벤질 클로라이드에 함유되어 있는 매우 소량의 2- 및 4-플루오로벤질 클로라이드 및 3- 및 4-플루오로벤질 클로라이드로부터 유도된다.
본 발명에 기재된 방법에 따르면, 사핀아미드 및 랄핀아미드는 높은 수율과 높은 순도로 수득되며, 여기서 사핀아미드 및 랄핀아미드 또는 이들의 염, 특히 메탄설폰산과의 염 중의 화학식 IIa의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]-프로판아미드 및 화학식 IIb의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]-프로판아미드 및 이들의 염, 특히 메탄설폰산과의 염(총칭하여 "디벤질 유도체"라고 함)의 함량은 0.03중량% 미만, 바람직하게는 0.01중량% 미만이다.
본 발명의 방법의 목적은 4-하이드록시-벤즈알데히드로부터 출발하며, 다음의 단계들을 포함한다:
a) 화학식 3- 또는 2- F-C6H4-CH2-Y의 유도체[여기서, Y는 이탈 그룹(Cl, Br, I, OSO2CH3 등)이다]를 사용한 4-하이드록시벤즈알데히드의 O-벤질화(여기서, 당해 O-벤질화는 O-알킬화에 대해 매우 선택적이며 고순도의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 및 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 제공하는 조건하에서 수행된다);
b) 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 및 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 사용한 L-알라닌아미드, 염기 또는 염의 환원적 알킬화(여기서, 환원 시스템은, 결정화 후에 사핀아미드 및 랄핀아미드 각각을 매우 높은 에난티오머적 및 화학적 순도로 수득하기 위해, 수소 가스 및 불균질 촉매이다);
c) 선행 단계에서 수득된 사핀아미드 및 랄핀아미드 각각의 염화(salification)에 의한 약제학적으로 허용되는 산과의 사핀아미드 염 및 랄핀아미드 염의 제조.
약제학적으로 허용되는 산은, 예를 들면, 질산, 염산, 브롬화수소산, 황산, 과염소산, 인산, 메탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 락트산, 옥살산, 말론산, 말산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산 및 살리실산으로부터 선택된다.
본 발명의 추가의 목적은 약제로서 사용하기에 적합한, 사핀아미드 및 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염을 고순도로, 특히 각각의 화학식 IIa 또는 IIb의 디벤질 유도체 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염의 함량이 0.03중량% 미만, 바람직하게는 0.01중량% 미만("활성 성분"을 기준으로 하여)으로 되도록 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 또 다른 목적은 활성제로서 사핀아미드 또는 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염을 포함하고, 화학식 IIa 및 IIb의 디벤질 유도체 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염의 함량이, 상기 활성제를 기준으로 하여, 0.03중량% 미만, 바람직하게는 0.01중량% 미만인 약제학적 제형을 제공하는 것이다. 이러한 신규한 약제학적 제형은 제안된 바 없으며, 사핀아미드 및 랄핀아미드에 대한 약리-독성학적 지식을 적용하거나 최신 기술에서 이용 가능한 방법에 따라 제조된 이들 활성 제제를 사용하여 성취되지도 않는다.
따라서, 상기한 높은 순도를 갖는 사핀아미드 또는 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염을 포함하는 상기 약제학적 제형이 본 발명의 추가의 목적을 구성한다.
상기한 약제학적 제형은, 상기한 높은 순도를 갖는 사핀아미드 또는 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염 이외에, 하나 이상의 추가의 활성제를 임의로 포함할 수 있다.
예를 들면, 파킨슨병 또는 하지 불안 증후군의 보조 치료를 위해 유용한 신규한 약제학적 제형은, 상기한 높은 순도를 갖는 사핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염 이외에, 국제 공개공보 제WO 04/089353호 및 제WO 05/102300호에 기재된 것, 바람직하게는 도파민 작용제 및/또는 레보도파 및/또는 카테콜-O-메틸트랜스퍼라아제(COMT) 억제제와 같은 하나 이상의 보조적인 파킨슨병 활성제(들)를 포함할 수 있다.
추가의 예로서, 만성 통증 및 신경병증성 통증을 포함한 통증 질환 및 편두통의 치료에 유용한 본 발명에 따른 신규한 약제학적 제형은, 상기한 높은 순도를 갖는 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염 이외에, 유럽 특허 제1423168호에 기재된 것과 같은 가바펜틴 및 프레가발린 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염과 같은 추가의 활성제를 함유할 수 있다.
본 발명에 따른 고순도 사핀아미드 또는 랄핀아미드를 함유하는 약제학적 조성물은 당업계에 공지된 통상의 과정에 의해, 예를 들면, 활성 화합물을 약제학적, 치료학적 불활성 유기 및/또는 무기 담체 물질과 혼합하여 제조할 수 있다. 본 발명의 조성물은 액체 형태, 예를 들면, 용액, 현탁액, 에멀젼의 형태 또는 고체 형태, 예를 들면, 정제, 트로키제, 캡슐제, 패취제의 형태일 수 있다.
본 발명의 조성물을 제조하는 데 유용한 적합한 약제학적, 치료학적 불활성 유기 및/또는 무기 담체 물질은, 예를 들면, 물, 젤라틴, 아라비아 검, 락토즈, 전분, 셀룰로즈, 마그네슘 스테아레이트, 활석, 식물성 오일, 폴리알킬렌글리콜, 사이클로덱스트린 등을 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물은 멸균될 수 있으며, 활성 성분(들) 이외에, 당업자들에게 널리 공지된 추가의 성분, 예를 들면, 방부제, 안정제, 습윤제 또는 유화제, 예를 들면, 파라핀유, 만니드 모노올레에이트, 삼투압을 조절하는 염, 완충제 등을 함유할 수 있다.
본 발명의 추가의 목적은 화학식 IIa의 디벤질 유도체 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염의 함량이 0.03중량% 미만, 바람직하게는 0.01중량% 미만("활성 성분"을 기준으로 함)인 유효량의 고순도 사핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염을 CNS 장애, 특히 간질, 파킨슨병, 알츠하이머병 및 하지 불안 증후군의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하여, CNS 장애, 특히 간질, 파킨슨병, 알츠하이머병 및 하지 불안 증후군을 치료하는 방법을 제공하는 것이다. 상기 방법은 상기한 유효량의 고순도 사핀아미드를 임의로 국제 공개공보 제WO 2004/089353호에 기재된 바와 같은 하나 이상의 파킨슨병 활성제(들), 예를 들면, 도파민 작용제 및/또는 레보도파 및/또는 카테콜-O-메틸트랜스퍼라아제(COMT) 억제제와 함께 파킨슨병 또는 하지 불안 증후군의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하여, 파킨슨병 또는 하지 불안 증후군을 치료함을 포함한다.
또한, 본 발명의 추가의 목적은 화학식 IIb의 디벤질 유도체 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염의 함량이 0.03중량% 미만, 바람직하게는 0.01중량%("활성 성분"을 기준으로 함)인 유효량의 고순도 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염을 만성 통증 및 신경병증성 통증을 포함한 통증 질환, 편두통, 양극성 장애, 우울증, 심혈관 장애, 염증 장애, 비뇨생식 장애, 대사 장애 및 위장관 장애의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여함을 포함하여, 만성 통증 및 신경병증성 통증을 포함한 통증 질환, 편두통, 양극성 장애, 우울증, 심혈관 장애, 염증 장애, 비뇨생식 장애, 대사 장애 및 위장관 장애를 치료하는 방법을 제공하는 것이다.
상기한 방법은 고순도 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산, 바람직하게는 메탄설폰산과의 염을 임의로 가바펜틴 또는 프레가발린과 함께 투여하여 만성 통증 및 신경병증성 통증을 포함한 통증 질환 및 편두통을 치료함을 포함한다.
선행 기술
국제 공개공보 제WO 90/14334호 및 문헌[참조 논문: Pevarello et al., J. Med. Chem., 1998, 41, 579-590]에는 벤질옥시-벤질아미노-알칸아미드의 3단계 제조방법이 기재되어 있다:
a) 합성하고자 하는 중간체 4-벤질옥시벤즈알데히드에 상응하는 4-하이드록시벤즈알데히드를 적합한 벤질 클로라이드를 사용한 O-벤질화에 의해 중간체 4-벤질옥시벤즈알데히드를 합성하는 단계,
b) 아래 반응식으로 나타낸 바와 같이 환원제로서 수소화시아노붕소 나트륨을 사용한 α-아미노-아미드와 4-벤질옥시-벤즈알데히드의 환원적 알킬화 단계,
Figure 112009003352343-pct00009
상기 반응식에서, R은 다른 치환체들 중에서도, 3-F 및 2-F를 나타내고; R1은 다른 치환체들 중에서도, 수소를 나타내며; R2는 다른 치환체들 중에서도, 수소를 나타내고; R3은 다른 치환체들 중에서도, CH3을 나타내며; R4와 R5는 둘 다 다른 치환체들 중에서도, 수소를 나타낸다.
특히, 사핀아미드 및 랄핀아미드 제조에 관한 한, 환원적 알킬화는 아래에 제시된 바와 같이 각각 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 및 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 사용한 L-알라닌아미드의 환원적 알킬화이다:
Figure 112009003352343-pct00010
R = 3-F-벤질옥시 = 화학식 Ia의 사핀아미드
R = 2-F-벤질옥시 = 화학식 Ib의 랄핀아미드
문헌[참조; J. Med. Chem. (Pevarello et al.), 1998, 41, 579-590]에는, 상응하는 (플루오로벤질옥시)벤즈알데히드로부터 출발하는, 사핀아미드 및 랄핀아미드 메탄설포네이트의 제조에 대해 각각 45% 및 60%의 수율이 보고되어 있다.
국제 공개공보 제WO 90/14334호 및 앞서 인용된 논문에 기재된 방법은 동일하며, 이미노알킬화 및 환원이 동일한 반응기에서 수행되는 원-포트 시스템을 제공한다. 적합한 알데히드를 L-알라닌아미드 하이드로클로라이드, 수소화시아노붕소나트륨, 메탄올 및 분말상 분자체의 혼합물에 한번에 모두 가한다.
문헌[참조; Pevarello et al., Org. Prep. Proc. Int. 1996, 28, 179-183](여기에는 환원적 알킬화에 의한 몇가지 α-벤질아미노아미드 유도체의 합성이 기재되어 있다)에 따르면, 하이드로클로라이드로서의 α-아미노아미드의 사용은, 이미늄 이온이 알데히드 카보닐 그룹보다는 수소화시아노붕소나트륨과 보다 용이하게 반응하기 때문에, 상응하는 이민 대신에 이미늄 이온을 형성하는데 중요하다.
상기 저자에 따르면, 원-포트 과정은 쉬프 염기(Schiff base) 라세미화 문제를 피하는 것으로 보이며 분자체가 반응을 가속화시킨다(반면 수율은 불량함).
수소화시아노붕소는 사용되는 유일한 환원제이며, 이것의 선택은 이의 낮은 반응성과 이의 선택성 때문이며[문헌 참조; Review "Sodium Cyanoborohydride - A Highly Selective Reducing Agent for Organic Functional Groups" - CF. Lane, Synthesis 1975, 132-146], 이로 인해 양성자화된 쉬프 염기와 출발 알데히드를 구분할 수 있다.
페바렐로 등(Pevarello et al.)의 논문에 기재된 합성법은 컬럼크로마토그래피로 생성물을 분리한 다음 산으로 처리하여 상응하는 염으로 전환시킴을 제공한다. 사핀아미드 및 랄핀아미드 둘 다 및/또는 이들의 염의 에난티오머적 및/또는 화학적 순도에 대한 정보는 제공되어 있지 않다.
선행 기술에 기재된 방법은 여러가지 단점이 있어 대규모 사용이 제한되는데, 아래에 단점들 중의 일부 예를 열거한다:
- 시아나이드의 형성;
- 활성 성분들로부터 제거하기 어려운 붕소 유도체의 형성;
- 물리적으로 변할 수 있으며 고가인 분말상 분자체의 사용;
- 낮은 수율;
- 환원적 알킬화 반응 혼합물 중의 낮은 최종 생성물 농도(약 2 내지 3% 중량/용적);
- 화학적 합성을 통한 활성제의 대규모 제조가 필요한 경우, 번잡하고 고가인 정제방법으로 간주되는 컬럼 크로마토그래피에 의한 생성물의 분리.
또한, 상세한 설명부에 뒤따르는 실시예에 제시되어 있는 바와 같이, 선행 기술에 기재된 방법에 따라 수득된 생성물은 화학식 Ia, Ib, Ic 또는 Id의 각각의 활성 성분에 대해 0.03중량%보다 높은 양의 화학식 IIa, IIb, IIc 또는 IId의 불순물을 함유한다. 또한, 용매로부터의 결정화 또는 크로마토그래피와 같은 통상적으로 공지된 정제방법을 사용하여 최종 생성물 사핀아미드 및 랄핀아미드 또는 이들의 염으로부터 상기 불순물을 제거하는 것이 곤란한 것으로 나타나 있으며, 어떠한 경우든 이것은 수율의 감소를 의미한다.
4-( 플루오로벤질옥시 )- 벤즈알데히드 중간체의 합성
공지된 방법에 따르면, 사핀아미드 및 랄핀아미드를 합성하기 위한 플루오로벤질옥시-벤즈알데히드 중간체는 염기성 매질에서의 4-하이드록시벤즈알데히드의 벤질화, 즉 두 개의 상이한 생성물, 즉 목적하는 O-알킬화 유도체 및 바람직하지 않은 C-알킬화 유도체를 제공하는 양쪽자리성 친핵체(ambident nucleophile)인 페놀 염의 벤질화에 의해 수득된다.
3-플루오로벤질 클로라이드를 사용한 4-하이드록시벤즈알데히드의 플루오로벤질화를 선행 기술에 따라 수행하여, 주 생성물로서의 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를, 4-하이드록시벤즈알데히드의 4위치의 하이드록시 그룹과 3위치의 탄소원자 둘 다의 알킬화로부터 유도된 화학식 Va의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드와 함께 수득하는 것이 효과적인 것으로 밝혀졌다. 이것은 다음 반응식 1에 따라 2-플루오로벤질 클로라이드를 사용하는 4-하이드록시벤즈알데히드의 플루오로벤질화에서 일어난다:
Figure 112009003352343-pct00011
아래 반응식 2에 나타난 바와 같이, 디-알킬화 불순물을 함유하는 알데히드를 사용하는 L-알라닌아미드의 환원적 알킬화는, 화학식 IIa 또는 IIb의 유리 염기 또는 염화된 화합물, 바람하게는 화학식 IIc 또는 IId의 메탄설폰산으로 염화된 화합물로서 이건 간에 각각의 디-알킬화 화합물, 디-벤질 유도체로 인해 오염된 사핀아미드 또는 랄핀아미드 최종 생성물을 제공한다:
Figure 112009003352343-pct00012
다른 약제학적으로 허용되는 산, 예를 들면, 질산, 염산, 브롬화수소산, 황산, 과염소산, 인산, 메탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 락트산, 옥살산, 말론산, 말산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산 및 살리실산이 바람직한 메탄설폰산 대신에 사용될 수 있다.
모노-알킬화 유도체(사핀아미드 또는 랄핀아미드) 및 상응하는 디-알킬화 불순물은 유사한 화학적-물리적 특성을 가지므로 통상의 방법으로 사핀아미드 및 랄핀아미드를 정제하기가 어렵다.
추가로, 공지된 방법은 다음의 추가의 단점이 있다:
1) 용매로서 저급 알킬을 사용; 염기성 조건하에서, 용매, 예를 들면, 메탄올은 자체로 친핵성 반응물로서 작용할 수 있으며, 3- 또는 2-플루오로벤질 클로라이드와 함께 특정량의 메틸-플루오로벤질-에테르를 제공할 수 있다;
2) 수-비혼화성 유기 용매를 사용한 최종 생성물의 추출은, 알콜성 반응 용매를 반응 혼합물로부터 제거한 후에만 가능하다.
본 발명에 이르러, 상기한 선행 기술 방법을 사용함으로써, 화학식 IIa 또는 IIb의 불순물의 함량이 0.03%(중량 기준) 미만인 화학식 Ia 또는 Ib의 최종 생성물을 수득하기 위해, 중간체인 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 또는 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 철저하게 정제하여 화학식 Va 및 Vb의 불순물의 함량을 감소시키는 것이 필요한 것으로 밝혀졌다. 상기 정제는 반응 생성물을, 바람직하게는 결정화함으로써, 보다 바람직하게는 불활성 유기 용매, 혼화성 불활성 유기 비용매 중의 화학식 IVa 또는 IVb의 조 화합물의 용액에 가함으로써 수행한다. 유기 불활성 용매는 바람직하게는 방향족 탄화수소로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 톨루엔이다. 혼화성 불활성 유기 비용매는 바람직하게는 저급 지방족 탄화수소로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 n-헥산이다. 추가의 결정화 과정은 상기 화학식 IVa 또는 IVb의 화합물을 환류하에 고온 용매, 예를 들면, 사이클로헥산 또는 디(C3-C4)알킬 에테르, 예를 들면, 디이소프로필 에테르에 용해시킨 후, 용액을 실온, 바람직하게는 10 내지 15℃로 냉각시키는 것으로 이루어지며, 가장 바람직하게는, 화학식 IVa 또는 IVb의 순수한 화합물의 순수한 결정을 첨가하여 결정화를 유도하는 것으로 이루어진다.
본 발명의 한 가지 양태에 따르면, 본 발명에 이르러, 놀랍게도, 화학식 IIIa 또는 IIIb의 알킬화제(아래 반응식 3 참조, 여기서, F원자는 2위치 및 3위치에 있고, Y는 이탈 그룹, 예를 들면, Cl, Br, I, OSO2CH3, OSO2C6H4-pCH3 등이다) 및 4-하이드록시벤즈알데히드 사이의 반응이 상-전이 조건하에서 수행되는 경우, 높은 수율 및 매우 낮은 수준의 C,O-비스-알킬화 불순물을 갖는 상응하는 4-(플루오로벤질옥시)벤즈알데히드가 수득되는 것으로 밝혀졌다.
Figure 112009003352343-pct00013
상-전이 조건하에서의 4-하이드록시벤즈알데히드의 이러한 신규한 플루오로벤질화는 고체/액체 시스템[여기서, 액체 유기 상에서 반응물 및 상-전이 촉매가 용해되고, 고체 상은 무기 염기 또는 4-하이드록시벤즈알데히드 염(가능하게는 동일 반응계내에서 4-하이드록시-벤즈알데히드 및 무기 염기 자체로부터 생성됨)으로 구성된다] 및 무기 염기가 수성 상에 용해되어 있는 액체/액체 유기/수성 시스템 둘 다에서 이루어질 수 있다.
바람직한 시스템은 무기 염기가 바람직하게는 Na2CO3, K2CO3, KOH 또는 NaOH로부터 선택되는 고체/액체 시스템이다.
액체/액체 시스템 및 액체/고체 시스템의 경우 둘 다에서, 반응에 사용되는 유기 용매는 디알킬 에테르, 예를 들면, 디-3급-부틸 에테르, 에틸-3급-부틸 에테르, 또는 방향족 탄화수소, 예를 들면, 톨루엔, 에틸벤젠, 이소프로필벤젠 및 크실렌일 수 있다. 이러한 모든 용매는 증류에 의해 용이하게 회수될 수 있다.
사용되는 상-전이 촉매는 4급 암모늄 또는 포스포늄 염, 예를 들면, 테트라부틸 암모늄 브로마이드, 테트라데실트리메틸 암모늄 브로마이드, 헥사데실트리부틸 포스포늄 브로마이드, 트리카프릴릴메틸 암모늄 클로라이드(앨리쿼트: Aliquat), 메틸트리알킬(C8-C10)암모늄 클로라이드(아도겐: Adogen)일 수 있으며, 테트라데실트리메틸 암모늄 브로마이드가 바람직한 것이다.
또한, PEG-200(CAS 25322-68-3) 또는 PEG-400(CAS 25322-68-3)과 같은 저분자량의 폴리에틸렌글리콜이 상-전이 촉매로서 사용될 수 있다.
사용되는 상-전이 촉매의 양은, 4-하이드록시벤즈알데히드 1몰당 0.02 내지 1몰, 바람직하게는 4-하이드록시벤즈알데히드 1몰당 0.1 내지 1몰이며, 그 이유는 이러한 조건에서는 C,O-비스-플루오로벤질화 불순물의 양을 0.03중량% 미만, 바람직하게는 0.01중량% 미만으로 할 수 있기 때문이다.
화학식 IIIa 또는 화학식 IIIb의 알킬화제와 4-하이드록시벤즈알데히드의 비는 0.6 내지 1.5이며, 바람직한 비는 0.9 내지 1.1이다.
반응 온도는 60 내지 160℃이며, 바람직한 간격은 80 내지 120℃이다.
반응 시간은 일반적으로 4 내지 8시간이다.
반응 수율은 매우 높으며, 대체로 90% 이상이다.
반응 생산도, 즉 반응 혼합물 중의 반응 생성물의 농도는 기재된 반응 조건 에서 매우 높으며, 통상적으로 25%(중량/용적) 이상이다.
α-아미노아미드의 환원적 알킬화에 의한 사핀아미드 및 랄핀아미드의 합성
최신 기술은 당업계의 전문가에게, 환원제로서 수소 및 불균질 촉매를 사용하여 α-아미노아미드를 4-(3- 또는 2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드로 환원적 알킬화하는 것은, 반응물과 최종 생성물 사이의 비상용성 및 환원 조건 때문에 사핀아미드 및 랄핀아미드의 제조에 적합하지 않음을 시사하였다.
사실상, 벤즈알데히드가 벤질 알콜 또는 심지어 상응하는 탄화수소로 얼마나 용이하게 환원되는지는 널리 공지되어 있을 뿐만 아니라 수소 및 불균질 촉매를 사용하여 환원적 알콜화를 수행하는 데 사용되어야 하는 조건이 통상적으로, 사핀아미드 및 랄핀아미드 둘 다 및 이들의 전구체에 존재하는 결합의 종류인 벤질성 탄소원자 및 질소 또는 산소와 같은 헤테로원자 사이의 결합을 파괴하는 데 사용되는 동일한 조건임은 공지되어 있다.
사실상, 벤질성 그룹은 통상적으로, 촉매적 환원에 의한 이의 도입 및 연속 제거의 용이성 때문에 페놀 또는 아민의 보호 그룹으로서 사용된다(문헌 참조; "Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Greene and P.G.M. Wuts, 3rd Edition, 1999, John Wiley & Sons, Inc.).
사핀아미드 및 랄핀아미드를 수득하기 위한 환원적 알킬화에서, 다수의 부산물이 형성됨을 예상할 수 있으며, 이들 중의 일부가 아래에 보고되어 있다:
Figure 112009003352343-pct00014
환원 시스템으로써 수소 및 불균질 촉매를 사용한 4-(3- 또는 2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드에 의한 L-알라닌아미드의 환원적 알킬화에 의해 사핀아미드 및 랄핀아미드가 매우 높은 수율 및 순도로 수득된다는 사실은 이러한 합성 과정의 놀랍고도 혁신적인 양태이다.
또한, 이러한 과정에 따라 사용되는 반응 조건은 다량 제조에 용이하게 적용 가능하다.
본 발명의 목적인 환원적 알킬화는 2단계로 실시된다:
a) 쉬프 염기의 형성,
b) 쉬프 염기의 촉매적 환원.
이들 2단계는 쉬프 염기를 분리하거나 분리하지 않고서 동일한 반응기(원 포트 반응)에서 연속적으로 수행할 수 있으며, 두 가지 경우 모두 수율이 높다.
쉬프 염기의 분리의 경우에, 이를 형성하는 데 적용되는 실험 조건은 분리된 쉬프 염기를 침전물 형태로 높은 수율 및 매우 순수한 형태로 수득할 수 있도록 한다.
쉬프 염기 제조는 적합하게는, 반응물 및 생성물에 대해 불활성이어야 하며 또한 이민계 이중 결합의 환원 조건에 대해서도 불활성이어야 하는 유기 양성자성 용매, 예를 들면, (C1-C5) 저급 알칸올, 바람직하게는 메탄올, 에탄올 및 이소프로판올 속에서 수행한다.
쉬프 염기의 형성은 완전해야 하며, 이것은 후속적인 촉매적 환원 단계에서 높은 수율을 갖도록 하는 관련 인자이다. 따라서, 이민계 이중 결합의 환원을 수행하기 전에 화학식 VIa 및 VIb의 쉬프 염기를 분리하는 것이 바람직할 수 있다.
Figure 112009003352343-pct00015
3-F
Figure 112009003352343-pct00016
2-F
화학식 VIa 및 VIb의 분리된 이미노 화합물은 본 발명에 따라 각각 사핀아미드 및 랄핀아미드를 제조하는데 유용한 중간체이다.
또는, 화학식 VIa 및 VIb의 이미노 화합물을 침전시키고 중간체 이미노 유도체를 함유하는 현탁액을 촉매적 환원시키도록 하는 조건하에서 수행함으로써 이미노알킬화 반응을 완료하는 것이 유리할 수 있다.
L-알라닌아미드(염기 또는 염)와 4-(3- 또는 2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 사이의 비는 1:1일 수 있지만, 또한 10% 초과의 L-알라닌아미드가 유리하게 사용될 수 있다.
L-알라닌아미드는 유리 염기 또는 이의 산 부가염으로서 도입될 수 있다. 바람직하게는, 이것은 화학양론적 양의 염기, 바람직하게는 3급 아민, 예를 들면, 트리에틸아민 또는 디이소프로필에틸아민과 함께, 염, 가장 바람직하게는 하이드로클로라이드 염으로서 반응 혼합물에 도입된다.
쉬프 염기의 제조시 반응 온도는 0℃ 내지 60℃, 바람직하게는 20℃ 내지 30℃이다.
반응 시간은 1시간 내지 15시간, 바람직하게는 4시간 내지 6시간이다.
수소 및 불균질 촉매에 의한 상기 쉬프 염기의 환원은 쉬프 염기의 형성이 완료된 경우에만 개시되며, 그 전에 개시되면, 부반응이 유력해지고, 때때로 수율 및 순도의 손상이 우세하게 된다. 보다 유력한 이러한 부반응 중의 하나는, 선택되는 (플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 카보닐 그룹의 환원에 의해 벤질성 알콜을 형성한다.
바람직한 불균질 촉매는 불활성 지지체, 예를 들면, 탄소, 알루미나 및 실리카, 바람직하게는 탄소 및 알루미나 상의 니켈, 로듐, 팔라듐 또는 백금 촉매이며, 4-(3- 또는 2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 2% 내지 20%, 바람직하게는 5% 내지 10%의 양으로 사용된다. 백금 및 팔라듐 촉매가 가장 바람직하다.
특히 활성탄 상의 백금이, 벤질성 탄소원자 및 헤테로원자 사이의 결합은 변하지 않은채로 단지 이민계 이중 결합만이 환원되기 때문에, 거의 정량적인 수율 및 선택성 측면 둘 다에서 탁월한 결과를 제공한다. 사핀아미드 및 랄핀아미드는 놀랍게도 환원 반응 조건에서 안정한 것으로 밝혀졌으며, 부수적인 반응 시간 연장이 최종 생성물을 손상시키기 않기 때문에 이것은 다량의 사핀아미드 또는 랄핀아미드의 공업적 제조에 있어서 중요한 요소이다.
최상의 결과는 함수(wet) 5% Pt/C(50% H2O), 특히 탄소 분말상 5% Pt(제조원; 이탈리아 로마 소재의 Engelhard S.r.l.)를 사용하여 수득되었다.
수소화 반응은 통상적으로 1bar 내지 10bar, 바람직하게는 3bar 내지 6bar의 수소압 및 10℃ 내지 70℃, 바람직하게는 25℃ 내지 40℃의 온도에서 수행한다.
환원 시간은 온도, 압력, 농도, 난류유동(turbulence) 등의 당업자들에게 널리 공지된 모든 인자에 따라 1시간 내지 20시간으로 다양할 수 있다.
최상의 결과는 4 내지 6시간의 반응 시간에서 수득되었다.
반응 말기에, 촉매를 여과에 의해 회수하고 재사용하거나 재생하고: 반응 용매를 감압하에서 증류시키며, 잔류물을 수-비혼화성 유기 용매에 용해시키고, 무기 염을 물로 세척하여 제거한다.
최종 미가공 사핀아미드 또는 랄핀아미드를 이들이 용해되어 있는 유기 용매를 증류하여 제거함으로써 회수한다.
이어서, 최종의 미가공 사핀아미드 또는 랄핀아미드를 결정화에 의해 정제한다. 결정화는 바람직하게는 불활성 유기 용매, 혼화성 불활성 유기 비용매 중의 화학식 Ia 또는 Ib의 각각의 조 화합물의 용액에 첨가하여 수행한다. 유기 불활성 용매는 바람직하게는 방향족 탄화수소, 예를 들면, 벤젠, 톨루엔, 디메틸 벤젠 및 에틸벤젠 및 저급 알킬 아세테이트로부터 선택되며, 보다 바람직하게는 에틸 아세테이트이다. 혼화성 불활성 유기 비용매는 바람직하게는 저급 지방족 탄화수소, 예를 들면, 헥산 및 헵탄, 및 사이클로헥산으로부터 선택되며, 보다 바람직하게는 n-헥산이다.
이어서, 염기를 공지된 방법에 따라 목적하는 염으로 전환시키며, 특히 이들은 약제로서 사용하기 위한 약제학적 제제로 이후에 제형화하기에 적합한 물리적/화학적 특성(안정성, 입도분석(granulometry), 유동성 등)을 갖는 메탄설포네이트 염으로 전환시킨다.
실시예 1
상 전이 촉매 작용에 의한 화학식 IVb의 정제된 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
톨루엔(9.5kg) 중의 2-플루오로벤질 클로라이드(5kg, 34.58mol), 4-하이드록시-벤즈알데히드(3.9kg, 31.94mol), 탄산칼륨(4.3kg, 31.11mol) 및 테트라데실 트리메틸암모늄 브로마이드(0.41kg, 1.22mol)의 혼합물을 교반하에 질소하에서 서서 히 환류 온도로 되게 한 다음 6시간 동안 환류시킨다.
이어서, 용액을 상압에서 농축시키고, 톨루엔 3kg을 가하여 증류 제거시키며, 이 과정을 한번 더 반복한다.
이어서, 불균질 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 고체를 여과에 의해 제거한다. 이어서, 잔류 용매를 감압하에 제거하고, 유성 잔류물에 톨루엔 1.2kg을 가한다.
혼합물을 약 40℃로 가열하고, 몇 그램의 순수한 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드로 시딩한다.
불균질 혼합물을 35-40℃에서 15분간 교반한 다음 이 온도에서 30분내에 n-헥산(9kg)을 가한다. 0-5℃로 냉각하고 이 온도에서 추가의 시간 동안 교반한 후, 고체를 여과에 의해 수집하고 감압하에 건조시켜 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 6.5kg(87.6% 수율)을 수득한다; 융점 56.7℃(DSC, 5℃/분).
상기 반응을 반응 용매를 제거하고 톨루엔을 유성 잔류물에 가한 후에 수득된 혼합물을 약 30-35℃(40℃ 대신)로 가열하고, 소량의 순수한 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드로 시딩한 후, n-헥산을 가하기 전에 불균질 혼합물을 30℃(35-40℃ 대신)에서 15분간 교반하는 것을 제외하고는 상기한 과정에 따라 출발 물질로서 4-하이드록시벤즈알데히드 39g(0.319mol)을 사용하여 1:100 스케일로 반복한다.
수율은 GC 순도가 92.2(면적%, 실시예 16A 참조)이고 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 함량이 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.01중량%인 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(융점 56.7℃(DSC, 5℃/분) 66.8g(90%)이다.
(*) 당해 실시예 및 하기 실시예에 보고된 수율은, 달리 언급하지 않는 한, 몰 수율로서 의도된다.
1.1 결정화에 의한 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 추가의 정제
실시예 1에 기재된 과정에 따라 제조한 생성물 1kg을 교반하에 환류시키면서 디이소프로필 에테르 2kg에 용해시킨다.
용액을 10-15분내에 50-55℃로 냉각시키고, 몇 그램의 순수한 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드로 시딩한다.
현탁액을 45-60분 동안 10-15℃로 냉각시키고 추가의 시간 동안 교반한다.
침전물을 최종적으로 여과에 의해 수집하고, 냉각된 디이소프로필 에테르(0.2Kg)로 세척하며, 감압하에 건조시켜 GC 순도가 99.8(면적%, 실시예 16A 참조)이고 화학식 Vb의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 함량이 실시예 16B에 따라 GC로 측정하여 0.005중량%인 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 0.93kg을 수득한다.
1.2 상이한 촉매를 사용한 상 전이 촉매 작용(PTC)에 의한 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드는 실시예 1의 동일한 과정을 따르되, 3개의 상이한 상 전이 촉매를 사용하여 4-하이드록시벤즈알데히드(0.39g)를 2-플루 오로벤질 클로라이드로 알킬화하여 제조한다.
결과가 아래 표 5에 보고되어 있다.
Figure 112009049647148-pct00051
* 앨리쿼트(Aliquat) 336: 트리카프릴릴메틸암모늄 클로라이드
** %Vb: 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량(중량%)
Vb의 함량은 실시예 16B에 따라 GC로 측정한다.
1.3 크실렌 속에서 상 전이 촉매 작용(PTC)에 의한 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
실시예 1의 동일한 과정을 따르되, 용매로서 톨루엔을 크실렌으로 대체하여 4-하이드록시벤즈알데히드(0.39g)를 2-플루오로벤질 클로라이드와 반응시킴으로써 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.02중량%의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 함량을 갖는 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 86.6% 수율로 제조한다.
1.4 염기로서 수산화칼륨을 사용한 상 전이 촉매 작용에 의한 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
실시예 1의 동일한 과정을 따르되, 탄산칼륨 대신에 수산화칼륨(0.35mol)을 사용하여 4-하이드록시벤즈알데히드(0.39g)를 2-플루오로벤질 클로라이드와 반응시킴으로써 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.51중량%의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 함량을 갖는 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 86.7% 수율로 제조한다.
상기 생성물은 실시예 1.1에 따라 결정화하여 추가로 정제할 수 있다.
1.5 2-플루오로벤질 브로마이드를 사용한 상 전이 촉매 작용에 의한 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
실시예 1의 동일한 과정에 따라 4-하이드록시벤즈알데히드(15.6g)를 2-플루오로벤질 클로라이드 대신에 2-플루오로벤질 브로마이드와 반응시켜 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.07중량%의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 함량을 갖는 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 88.6% 수율로 제조한다.
실시예 2
화학식 Ib의 고순도 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(랄핀아미드)의 제조(원 포트 반응)
오토클레이브에 실시예 1에 따라 제조한 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(2.0kg, 8.69mol)를 충전한 다음, 메탄올(9.5kg) 중의 L-알라닌아미드 하이드로클로라이드(1.2kg, 9.63mol) 및 트리에틸아민(0.97kg, 9.63mol)의 별도로 제조된 용액을 이에 가한다.
혼합물을 20-25℃에서 약 1시간 동안 교반한 다음, 이를 몇 그램의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드로 시딩한 후, 추가로 15분 동안 계속 교반한다. 교반된 불균질 혼합물에, 메탄올(1.6kg) 및 함수(50% H2O) Pt/C 5%(제품명; Engelhard cod.Escat 22, 제조원; 이탈리아 로마 소재의 Engelhard S.r.l.)(0.28kg)를 20-25℃에서 가한다.
공기를 오토클레이브로부터 질소로 퍼징시킨 다음, 수소를 5.0bar에서 도입하고, 수소화 과정 동안 압력을 상기한 값으로 유지시킨다.
30-35℃에서 5시간 후, 반응 혼합물을 15℃로 냉각시키고, 메탄올(4.8kg)을 첨가하여 40-45℃로 가열한 후, 현탁액을 여과하고, 고체를 메탄올(1.6kg)로 세척한다.
용매를 감압하에 약 30℃에서 제거하고, 물 첨가는 발열 공정이기 때문에 잔류물을 냉각하면서 교반하에 20-25℃에서 물(5L)을 첨가한다. 불균질 혼합물을 추가로 15-20℃로 냉각시키고, 이 온도에서 1시간 동안 유지시킨 다음 여과한다. 수집한 고체를 냉수(4L)로 세척하고 감압하에 건조시켜 실시예 17A의 방법에 따라 측정한 HPLC 순도가 98.8(면적%)이고 C,O-디알킬화 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 함량이 실시예 17B의 방법에 따라 HPLC로 측정하여 0.01중량%인 랄핀아미드 2.23kg(85.0% 수율)을 수득한다.
2.1 팔라듐 촉매를 사용한 화학식 Ib의 고순도 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 제조
실시예 1에 따라 제조한 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 5g 및 상응하는 양의 L-알라닌아미드 하이드로클로라이드 및 트리에틸아민의 혼합물을 실시예 2의 동일한 과정에 따르되, 함수(50% H2O) Pt/C 5% 대신에 함수(50% H2O) Pd/C 10%를 사용하여 수소화시켜 화학식 Ib의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드를 70% 수율로 수득한다.
실시예 3
화학식 Id의 고순도 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트(랄핀아미드 메탄설포네이트)의 제조
실시예 2에 기재된 바와 같이 제조한 랄핀아미드(2.8kg, 9.26mol)를 이소-프로판올(19.5kg)에 용해시키고 교반하에 불활성 대기하에서 65-70℃에서 유지시킨다.
목탄(150g)으로 처리하고 여과한 후, 용액을 순수한 랄핀아미드 메탄설포네이트로 시딩하고, 메탄설폰산(900g, 9.36mol)을 교반하에 50-55℃의 온도에서 30분내에 가한다. 이어서, 현탁액을 2시간내에 15-20℃로 냉각시키고, 추가의 시간 동안 교반을 계속한다. 고체를 최종적으로 여과에 의해 수집하고 감압하에 건조시켜 랄핀아미드 메탄설포네이트 3.59kg(97.3% 수율)을 수득한다.
수득된 생성물의 HPLC 순도는 99.8(면적%, 실시예 17A 참조)이고, C,O-디알킬화 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 함량은 0.005중량%(실시예 17B 참조)였다; DSC(5℃/분)에 의한 융점 240.6℃.
키랄성 HPLC 컬럼으로 측정한 랄핀아미드 메탄설포네이트의 에난티오머적 순도는 99.8 이상이다(면적%, 실시예 18 참조).
실시예 4
에탄올 용액 속에서의 화학식 IVa의 정제된 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
에탄올(13.0kg) 중의 4-하이드록시벤즈알데히드(1.52kg, 12.45mol), 탄산칼륨(1.72kg, 12.45mol), 요오드화칼륨(0.2kg, 1.20mol)의 혼합물에 3-플루오로벤질 클로라이드(1.80kg, 12.45mol)를 교반하에 실온에서 가한다.
혼합물을 서서히 환류되도록 가열한 다음 이 온도에서 6시간 동안 유지시킨다.
이어서, 반응 혼합물을 25℃로 냉각시키고, 현탁액을 여과하고 고체를 에탄올(1.0kg)로 세척하며; 에탄올 용액을 합한 다음 대략 3.5kg의 잔류물이 수득될 때까지 감압하에 농축시킨다.
이러한 잔류물에, 톨루엔(5.0kg) 및 물(1.7kg)을 가하고, 용매 혼합물을 30분 동안 격렬하게 교반하며, 수성 상을 분리한 후, 유기 층을 감압하에 건조될 때까지 증발시켜 조 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 수득한다.
톨루엔 2kg에 용해된 상기 생성물에 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 시드를 20-25℃에서 교반하에 가한 다음, n-헥산(3.8kg)을 30분내에 가하고 혼합물을 교반하에 0℃로 냉각시킨다.
2시간 후, 고체를 여과하고 n-헥산(1.3kg)으로 세척한다. 건조시킨 후, 가스-크로마토그래피적 순도가 99.9(면적%, 실시예 16A 참조)이고 G.C.(면적%, 실시예 16B 참조)로 측정한 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 함량이 0.005중량%인 목적하는 생성물 2.6kg(90.7% 수율)을 수득한다; DSC 5℃/분에 의한 융점 43.1℃.
실시예 5
상 전이 촉매 작용에 의한 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
톨루엔(13.5kg) 중의 3-플루오로벤질 클로라이드(5kg, 34.58mol), 4-하이드록시-벤즈알데히드(3.9kg, 31.94mol), 탄산칼륨(4.3kg, 31.11mol) 및 테트라데실 트리메틸암모늄 브로마이드(0.41kg, 1.22mol)의 혼합물을 교반하에 질소 대기하에서 서서히 환류 온도로 되게 한 다음 6시간 동안 환류시킨다.
용액을 상압에서 농축시킨 다음 톨루엔 3kg을 가하여 증류 제거한다. 이 과정을 한번 더 반복한다.
이어서, 불균질 혼합물을 실온으로 냉각시키고 고체를 여과에 의해 제거한다. 잔류 용매를 감압하에 제거한 다음 톨루엔 1.2kg을 유성 잔류물에 가한다.
혼합물을 20-25℃에서 교반하고 몇 그램의 순수한 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드로 시딩한 다음 이 온도에서 30분내에 n-헥산(9kg)을 가한다.
0-5℃로 냉각시키고 이 온도에서 추가의 시간 동안 교반한 후, 고체를 여과에 의해 수집하고 감압하에 건조시켜, GC 순도가 99.9(면적%, 실시예 16A 참조)이고 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 함량이 0.008중량%(실시예 16B 참조)인 생성물 6.5kg(85% 수율)을 수득한다.
5.1 결정화에 의한 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 추가의 정제
실시예 5에 따라 제조한 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 1kg을 교반하에 환류시키면서 디이소프로필 에테르 2kg에 용해시킨다.
용액을 10-15분내에 50-55℃로 냉각시키고 몇 그램의 순수한 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드로 시딩한다.
현탁액을 45-60분 동안 10-15℃로 냉각시키고 추가의 시간 동안 교반한다.
침전물을 최종적으로 여과에 의해 수집하고, 냉각 디이소프로필 에테르(0.2kg)로 세척하며, 감압하에 건조시켜 GC 순도가 99.9(면적%, 실시예 16A 참조)이고 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량이 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.005중량% 미만인 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 0.95kg을 수득한다.
5.2 3-플루오로벤질 브로마이드를 사용한 상 전이 촉매 작용에 의한 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
실시예 5의 동일한 과정에 따르되 3-플루오로벤질 클로라이드 대신에 3-플루오로벤질 브로마이드를 사용하여 4-하이드록시벤즈알데히드(15.6g)를 3-플루오로벤질 브로마이드와 반응시킴으로써, 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 함량이 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.07중량%인 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 86.1% 수율로 제조된다.
이렇게 하여 수득된 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 실시예 5.1에 따라 정제하여 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량이 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.07중량%인 표제 생성물을 97.3% 수율로 수득한다.
5.3 3-플루오로벤질 메탄설포네이트를 사용한 상 전이 촉매 작용에 의한 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
실시예 5의 동일한 과정에 따라 4-하이드록시벤즈알데히드(15.6g)를 3-플루오로벤질 클로라이드 대신에 3-플루오로벤질 메탄설포네이트와 반응시킴으로써, 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 함량이 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.45중량%인 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 97.5% 수율로 제조한다.
상기 생성물을 실시예 5.1의 과정에 따라 추가로 정제한다.
실시예 6
화학식 Ia의 고순도 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(사핀아미드)의 제조(원 포트 반응)
오토클레이브를 실시예 4에서 제조한 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(2.0kg, 8.69mol)로 충전한 다음, 메탄올(7.1kg) 중의 L-알라닌아미드 하이드로클로라이드(1.2kg, 9.63mol) 및 트리에틸아민(0.97kg, 9.63mol)의 별도로 제조한 용액을 이에 가한다.
혼합물을 20-25℃에서 1시간 동안 교반하고, 몇 그램의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드로 시딩한 후, 추가로 15분간 계속 교반한다. 이어서, 교반된 불균질 혼합물에, 메탄올(1.8kg) 및 함수(50% H2O) Pt/C 5%(제품명; Engelhard cod. Escat 22)(0.3kg)를 20-25℃에서 가한다.
공기를 오토클레이브로부터 질소로 퍼징시킨 다음, 수소를 5.0bar에서 도입한다.
30-35℃에서 5시간 후, 혼합물을 15℃로 냉각시키고, 메탄올(4.8kg)을 가하며, 혼합물을 40-45℃로 가열하고; 최종적으로 고체를 여과하고 메탄올(1.6kg)로 세척한다.
용매를 감압하에 대략 30℃에서 제거한 다음, 에틸 아세테이트(23.0kg)와 물(18.0kg)의 혼합물을 잔류물에 가한다. 15분간 교반한 후, 수성 상을 분리하고 에틸 아세테이트(7.0kg)로 추출한다. 수집한 유기 상을, 대략 6.0kg의 잔류물이 수득될 때까지 농축시킨다. 이들 잔류물에 n-헵탄(10.8kg)을 가하고, 혼합물을 20℃에서 약 2시간 동안 교반한다. 이어서, 고체를 여과에 의해 수집하고 n-헵탄으로 세척한다.
고체를 감압하에 건조시킨 후, HPLC 순도가 98.4(면적%, 실시예 17A 참조)이고 C,O-디벤질화 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드)의 함량이 0.005중량%(실시예 17B 참조)인 표제 화합물 2.41kg(91.8% 수율)을 수득한다.
6.1 Pd 촉매를 사용한 화학식 Ia의 고순도 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 제조
상응하는 양의 L-알라닌아미드 하이드로클로라이드 및 트리에틸아민의 존재하에 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(5g)를 함수(50% H2O) Pt/C 5% 대신에 함수(50% H2O) Pd/C 10%를 사용하여 실시예 6의 동일한 과정에 따라 수소화하여 화학식 Ia의 화합물을 72% 수율로 제조한다.
6.2 1bar에서의 수소화에 의한 화학식 Ia의 고순도 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 제조
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드, L-알라닌아미드 하이드로클로라이드 및 트리에틸아민의 혼합물을 실시예 6의 동일한 과정에 따르되, 5bar/ H2 대신에 1bar/H2에서 수소화한다.
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 수율은 90%이고, HPLC 순도는 98.7(면적%, 실시예 17A 참조)이며, (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 함량은 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.005중량%이다.
6.3 L-알라닌아미드 염기를 사용한 화학식 Ia의 고순도 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 제조(원 포트 반응)
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)]벤즈알데히드(1Og)를 실시예 6의 동일한 반응에 따르되, L-알라닌아미드 하이드로클로라이드 및 트리에틸아민 대신에 L-알라닌아미드 염기를 사용하여 반응시킨다. (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 수율은 92%이고, HPLC 순도는 99.7(면적%, 실시예 17A 참조)이며, (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 함량은 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.005중량% 미만이다.
실시예 7
화학식 Ic의 고순도 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트(사핀아미드 메탄설포네이트)의 제조
실시예 6에 기재된 바와 같이 제조된 사핀아미드(2.41kg, 7.97mol)를 65℃에서 에틸 아세테이트(56.5kg)에 용해시키고 목탄(100g)으로 탈색시킨다.
여과한 후, 용액을 교반하고 몇 그램의 사핀아미드 메탄설포네이트로 시딩하며, 15분 후, 메탄설폰산(850g, 8.84mol)을 50-55℃에서 30분내에 가한다. 현탁액을 교반하에 2시간 동안 20-25℃로 냉각시키고 추가의 시간 동안 교반한다. 침전물을 최종적으로 여과에 의해 수집하고 감압하에 건조시켜 사핀아미드 메탄설포네이트 2.83kg(89.1% 수율)을 수득한다.
HPLC(실시예 17B 참조)로 측정한 불순물 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트(화학식 IIc)의 함량은 0.005중량%이다. 표제 화합물은 DSC(5℃/분)에 의해 융점 216.8℃를 갖는다.
키랄성 HPLC 컬럼으로 측정한 에난티오머적 순도는 99.9 이상이다(면적%, 실시예 19 참조).
Figure 112009003352343-pct00018
실시예 8
화학식 VIa의 중간체 쉬프 염기 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드의 분리에 의한 화학식 Ia의 고순도 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(사핀아미드)의 제조
a) 화학식 VIa의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드
메탄올(280mL) 중의 실시예 5에서와 같이 제조된 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(60.0g, 0.26mol) 및 L-알라닌아미드 하이드로클로라이드(35.7g 0.29mol)의 현탁액에 트리에틸아민(29.1g, 0.29mol)을 교반하면서 질소 대기하에 실온에서 가한다. 추가로 1시간 동안 교반을 유지한다.
이어서, 용액을 몇 mg의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드로 시딩하고, 온도를 5-10℃로 낮추며, 2시간 동안 교반을 계속한다.
고체를 여과에 의해 수집하고 0℃에서 메탄올로 세척한다.
감압하에 건조시킨 후, 표제 화합물 57.3g(73.2% 수율)이 수득된다: DSC(5℃/분)에 의한 융점 112.0℃.
Figure 112009003352343-pct00019
b) 화학식 Ia의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드
오토클레이브에 상기한 바와 같이 제조한 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드(16.0g; 0.053mol) 및 함수(50% H2O) Pt/C 5%(1.7kg: 제조원; 이탈리아 로마 소재의 Engelhard S.r.l.)을 충전하고 메탄올(90mL)을 이에 가한다. 오토클레이브를 공기로부터 질소로 퍼징시킨 다음 수소를 5.0bar에서 도입한다. 반응을 5.0bar 및 35℃에서 1시간 동안 유지시킨다. 실온으로 냉각시키고, 여과에 의해 촉매를 제거한 후, 대략 30g의 잔류물이 수득될 때까지 용매를 감압하에 증류 제거한다. 이러한 잔류물에 에틸 아세테이트(150mL)와 H2O(110mL)의 혼합물을 가하고, 두 개의 투명한 상이 수득될 때까지 불균질 혼합물을 40℃로 가열한다. 이러한 두 개의 상을 분리하고, 수성 층을 40℃에서 에틸 아세테이트 50mL로 추출한다. 유기 상을 수집하고 건조될 때까지 증발시킨다. 매번 에틸 아세테이트 90mL를 가하는 과정을 2회 반복함으로써 생성물을 무수물로 만든다. 이어서, n-헵탄 95mL를 교반하에 잔류물에 서서히 가한다. 이어서, 혼합물을 교반하에 3시간 동안 20℃에서 유지시킨다. 형성된 고체를 여과에 의해 수집하고, n-헵탄(15mL)으로 세척하고 감압하에 건조시켜, HPLC 순도가 99.8(면적%, 실시예 17A 참조)이고 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 함량이 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.005중량% 미만인 사핀아미드 15.2g(94.8% 수율)을 수득한다.
실시예 9
화학식 VIb의 중간체 쉬프 염기 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드의 분리에 의한 화학식 Ib의 고순도 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(랄핀아미드)의 제조
a) 화학식 VIb의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드는 실시예 8, 단계 a)의 동일한 과정을 따르되, 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 대신에 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 사용하여 88% 수율(융점 121℃(모세관))로 제조한다.
Figure 112009003352343-pct00020
b) 화학식 Ib의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드는 실시예 8, 단계 b)의 동일한 과정에 따라 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질리덴아미노]프로판아미드로부터 93% 수율로 제조한다. (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 함량은 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.02중량%이다.
실시예 10
화학식 IIc의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 제조
a) 화학식 Va의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드
질소 대기하에 유지된 4L 둥근바닥 플라스크에서, 4-하이드록시-벤즈알데히드(400g, 3.28mol), 탄산칼륨(453g, 3.28mol), 톨루엔(2L) 및 3-플루오로벤질클로라이드(1400g, 9.68mol)를 연속해서 가하고, 혼합물을 5일간 교반하에 환류시킨다. 이 시점에서, GC 분석 결과, 반응 혼합물이 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드와 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 91.4:8.6(면적/면적, 실시예 16A 참조)의 비로 함유하는 것으로 나타났다.
반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 2L를 교반하에 가한다. 유기 상을 분리하고, 용매가 더 이상 통과하지 않을 때까지 용매를 감압(20mmHg)하에 35℃에서 증류시킨다. 이어서, 압력을 3mmHg로 낮추고, 외부 온도를 300℃까지 높이며, 255℃ 내지 265℃ 사이에서 증류하는 분획(40.6g)을 수집한다.
GC 분석 결과, 표제 화합물의 화학식 Va의 C,O-디벤질화 유도체 대 화학식 IVa의 모노알킬화 유도체의 면적/면적 비는 99.6:0.4인 것으로 나타났다(면적/면적, 실시예 16A 참조).
Figure 112009003352343-pct00021
b) 화학식 IIa의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드
500mL 플라스크 중의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(35.6g, 0.105mol)에, 교반하에 트리에틸아민(12g, 0.119mol)을 L-알라닌아미드 하이드로클로라이드(14.8g, 0.119mol)의 메탄올 용액 170mL에 조심스럽게 가하여 앞서 제조한 용액을 실온에서 가한다.
상기 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음 1.8L 오토클레이브에 옮겨 함수(50% H2O) Pt/C 5% 3.4g을 가한다.
공기를 오토클레이브로부터 질소로 퍼징시킨 다음 수소를 5.0bar에서 도입한다.
반응은 35℃의 온도에서 3 내지 5시간 동안 수행한다.
실온으로 냉각시키고 여과에 의해 촉매를 제거한 후, 약 65g의 잔류물이 수득될 때까지 용매를 감압하에 증류 제거한다. 이 잔류물에 에틸아세테이트(340mL)와 물(250mL)의 혼합물을 가하고, 불균질 혼합물을 40℃로 가온시키며, 2개의 투명 상이 수득될 때까지 이 온도에서 교반하지 않고 유지시킨다. 2개의 상을 분리하고, 약 50g의 잔류물이 수득될 때까지 유기 상을 감압하에 증류시킨다.
상기 잔류물을 에틸 아세테이트 220mL에 용해시키고, 감압하에 외부 온도 40℃에서 용매를 증류 제거한다. 상기 공정을 2회 반복하여 표제 화합물을 고체 잔류물로서 수득한다.
c) 화학식 IIc의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트
2L 유리 반응기에서, (S)-3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질)-벤질아미노]프로판아미드 염기 42.4g(0.103mol)을 에틸 아세테이트 950mL에 용해시킨다.
용액을 교반하에 50-55℃에서 가열하고, 이 온도에서 1시간 동안 유지시킨다. 상기 용액에 메탄설폰산 14.5g(0.15mol)을 20분내에 가하고, 90분내에 온도를 20℃로 낮춘다. 30분 후, 고체를 여과에 의해 수집하고 감압하에 50℃에서 건조시킨 다음, 메탄올(메탄올:생성물 1:5 중량비)로부터 결정화하여 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트(융점 l81℃(모세관)) 25.1g을 수득한다.
Figure 112009003352343-pct00022
또한, 화학식 Ic의 사핀아미드 메탄설포네이트를 화학식 IIc의 메탄설포네이트로서 0.12중량% 함유하는, 문헌[참조; J. Med. Chem., 1998, 41, 579, method A]에 따라 제조된 화학식 Ic의 사핀아미드 메탄설포네이트 200g으로부터, 제조용 HPLC에 의해, 화학식 IIa의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 샘플(90mg)을 분리한다.
분리는 다음의 반응식 4에 따라 2단계(단계 1 및 단계 2)로 수행한다:
Figure 112009003352343-pct00023
단계 1
제1 단계의 범위는 화학식 IIa의 화합물/TFA(트리플루오로아세트산)이 풍부한 조 생성물을 분리하는 것이다.
제조용 HPLC 조건은 다음과 같다:
제조용 HPLC 조건:
기기: 워터스(Waters) 델타 Prep 4000(왕복성 펌프, 저압 혼합기가 있는 구 배 조절기)
방사상 압축 모듈 Prep LC 베이스(워터스)
제스코(Jasco) 7125 UV-가변성 검출기, o.p. 0.2mm
머크(Merk) D2000 프린터-플롯터
컬럼: Delta Pak C18, 15㎛, 40xl00mm(워터스)
용출제 A: 70/30, 물/아세토니트릴 + 0.1% TFA
용출제 B: 30/70, 물/아세토니트릴 + 0.1% TFA
유량: 27.0ml/분
구배: 40분, 등용매(isocratic solvent) 100% A에 이어 1분내에 100% B
검출: UV 227nm
주입: 물 50ml 중의 5g(펌프 유입구 라인 D에 의해)
단계 2
이 단계는 화학식 IIa의 화합물/TFA로부터 TFA를 제거하고 IIa를 추가로 정제하기 위해 필요하다.
화학식 IIa의 화합물/TFA를 아래에 기재된 제조용 HPLC 조건을 사용하여 크로마토그래피한다.
분획 4 및 5를 함께 배합하고, 아세토니트릴이 완전히 제거될 때까지 진공하에 40℃에서 증발시킨다. 잔류성 수용액을 냉장고에서 4℃로 유지시킨다. 불용성 물질을 여과에 의해 분리하고, 실온에서 진공하에 건조시켜, 화학식 IIa의 화합물(90mg; HPLC 순도 100%)을 수득하였다.
제조용 HPLC 조건:
기기: 워터스 델타 Prep 4000(왕복성 펌프, 저압 혼합기가 있는 구배 조절기)
제스코 7125 UV-가변성 검출기, o.p. 0.2mm
머크 D2000 프린터-플롯터
컬럼: 대칭 C 18, 7㎛, 20x250mm(워터스)
용출제 A: 70/30, 물/아세토니트릴
용출제 B: 30/70, 물/아세토니트릴
유량: 15.0ml/분
구배: 20분, 등용매 100% A에 이어 10분내에 100% B
검출: UV 227nm
주입: 불순물 "화학식 IIa의 화합물/TFA" 용액 50ml(펌프 유입구 라인 D에 의해)
실시예 11
화학식 IId의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 제조
a) 화학식 Vb의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드
3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드는 실시예 10, 단계 a)의 동일한 과정을 1:10 스케일로 따르되, 3-플루오로벤질 클로라이드 대신에 2-플루오로벤질 클로라이드를 사용하여 제조한다. 몰 수율은 3%이고, 순도는 GC 분석으로 측정하여 98.1이다(면적%, 실시예 16A 참조). 생성물은 융점 71℃(모세관)를 갖는다.
Figure 112009003352343-pct00024
b) 화학식 IIb의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드
(S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]-프로판아미드는 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 대신에 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 사용하여 실시예 10, 단계 b)의 동 일한 과정에 따라 제조한다. 수율은 83%이다; 융점 161℃(모세관).
Figure 112009003352343-pct00025
c) 화학식 IId의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트
(S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트는 실시예 10, 단계 c)의 동일한 과정을 따르되, 출발 물질로서 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드를 사용하여 제조한다. 수율은 89%이다; 융점 190℃(모세관).
Figure 112009003352343-pct00026
실시예 12
불순물인 화학식 Va의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 1중량%로 오염된 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드로부터의 화학식 Ic의 (S)-2-[4-3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(사핀아미드) 메탄설포네이트의 제조
4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(10g; GC 순도 98.8, 면적%)에 1%의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 가하고, 혼합물을 실시예 6의 동일한 과정에 따라 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 사핀아미드 염기로 전환시킨다. 수율은 84%이고, 화학식 IIa의 불순물의 함량은 0.84중량%(실시예 17B 참조)이다.
유리 염기인 화학식 Ia의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판 아미드를 실시예 7의 동일한 과정에 따라 상응하는 메탄설포네이트로 전환시켜 불순물인 화학식 IIc의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 함량이 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.62중량%인 화학식 Ic의 메탄설포네이트를 98% 수율로 수득한다.
실시예 13
화학식 IIc의 불순물로 오염된 화학식 Ic의 사핀아미드 메탄설포네이트의 결정화
실시예 12에 따라 수득된, HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.62중량%인 화학식 IIc의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트로 오염된 사핀아미드 메탄설포네이트를 5개의 상이한 용매 시스템을 사용하여 환류 온도에서 용해시키고 실온에서 냉각시킴으로써 결정화한다.
결과가 아래 표 6에 보고되어 있다.
Figure 112009003352343-pct00027
실시예 14
선행 기술에 기재된 방법에 따른 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(사핀아미드, 화학식 Ia) 메탄설포네이트(화학식 Ic)의 제조
14.1 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
14.1. a) 미국 특허 제6,335,354 B2호의 실시예 1a의 과정
화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 미국 특허 제6,335,354 B2호의 실시예 1a에 기재된 과정으로 제조한다.
따라서, 3-플루오로벤질 클로라이드(2.86g, 19.80mmol), 4-하이드록시벤즈알데히드(3.03g, 24.80mmol), K2CO3(10.30g, 74.50mmol), NaI(137.1mg, 0.91mmol) 및 에탄올(40mL)의 혼합물을 70분 동안 환류하에 가열하고 환류 온도에서 4시간 15분 동안 유지시킨다.
반응 혼합물을 후처리한 후, 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 황색 오일로서 95% 수율로 분리한다.
생성물은 GC 순도가 97.6(면적%, 실시예 16A 참조)이고, 화학식 Va의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량이 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.14중량%이다.
14.1.b) 문헌[참조; J. Agric. Food Chem, 27, 4, 1979]의 과정
화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 문헌[참조; J. Agric. Food Chem, 27, 4, 1979]에 보고된 과정으로 제조한다.
따라서, 3-플루오로벤질 클로라이드(14.5g, 100mmol)를 질소 대기하에 교반하에 에탄올(100mL) 중의 4-하이드록시벤즈알데히드(12.2g, 100mmol) 및 NaOH(4.Og, 100mmol)의 용액에 가한다.
혼합물을 환류되도록 25분내에 서서히 가열하고 환류 온도에서 6시간 20분 동안 교반한다. 반응 혼합물을 여과한 다음, 감압하에 농축시켜 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(23.43g)를 황색 고체 잔류물로서 수득한다. 디클로로메탄(25OmL)을 잔류물에 가하고, 불용성 물질을 여과하며, 생성된 용액을 감압하에 농축시켜 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 황색 고체로서 80.4% 수율로 수득한다. 생성물은 GC 순도가 91.6(면적%, 실시예 16A 참조)이고, 화학식 Va의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량이 GC(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.13중량%이다.
14.2 화학식 Ia의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 및 이의 화학식 Ic의 메탄설포네이트 염의 제조
14.2. a) 문헌[참조; J. Med. Chem., 1998, 41, 579], 방법 A의 과정
화학식 Ia의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드는 실시예 14.1.a에 기재된 바와 같이 제조한 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(10mmol)를 L-알라닌아미드 하이드로클로라이드(1.37g, 11mmol)와 반응시킨 다음 NaBH3CN(0.5Og, 8mmol)으로 환원시켜 제조한다. 반응 혼합물을 후처리하고 섬광 크로마토그래피로 정제한 후, (S)-2[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드를 백색 고체로서 68.7% 수율로 분리한다. 생성물은 HPLC 순도가 96.2(면적%, 실시예 17A 참조)이고, (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(화학식 IIa)의 함량이 0.15중량%(실시예 17B 참조)이다.
(S)-2[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(1.50g, 4.96mmol) 및 에틸 아세테이트(40.2mL)의 혼합물을 투명한 용액이 수득될 때까지 50℃로 가열한다. 메탄설폰산(0.53g, 5.51mmol)을 15분내에 교반하에 용액에 가하고, 생성된 불균질 혼합물을 교반하에 90분내에 20℃로 냉각시킨다. 20℃에서 30분 후, 고체를 여과에 의해 수집하고, 에틸 아세테이트(6mL)로 세척하며, 감압하에 50℃에서 15시간 동안 건조시켜 화학식 Ic의 (S)-2[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트를 백색 고체로서 96.1% 수율로 수득한다. 생성물은 HPLC 순도가 98.6(면적%, 실시예 17A 참조)이고, 화학식 IIc의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 함량이 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.10중량%이다.
14.2.b) 문헌[참조; J. Med. Chem., 1998, 41, 579], 방법 A의 과정
화학식 Ia의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드는 실시예 14.1.b에 기재된 바와 같이 제조한 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(10mmol) 및 L-알라닌아미드 하이드로클로라이드(1.37g, 11mmol)로부터 실시예 14.2a에 따라 제조한 다음 NaBH3CN(0.50g, 8mmol)로 환원시킨다.
화학식 Ia의 (S)-2[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드를 백색 고체로서 66.5% 수율로 수득한다. 생성물은 HPLC 순도가 88.5(면적%, 실시예 17A 참조)이고 화학식 IIa의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 함량이 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.064중량%이다. 화학식 Ia의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드를 실시예 14.2.a에 따라 메탄설폰산으로 처리하여 상응하는 화학식 Ic의 메탄설포네이트로 88.9% 수율로 전환시킨다. 생성물은 HPLC 순도가 97.7(면적%, 실시예 17A 참조)이고, 화학식 IIc의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 함량이 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.05중량%이다.
실시예 15
선행 기술에 기재된 방법에 따른 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(랄핀아미드, 화학식 Ib) 메탄설포네이트(화학식 Id)의 제조
15.1 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 제조
15.1.a) 미국 특허 제6,335,354 B2호의 실시예 1a의 과정
화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 2-플루오로벤질 클로라이드(14.3g, 98mmol), 4-하이드록시벤즈알데히드(15.1g, 123mmol), K2CO3(51g, 369mmol), NaI(500mg, 3.3mmol) 및 에탄올 75mL로부터 실시예 14.1.a)에 따라 제조한다.
혼합물을 환류하에 12시간 동안 유지시킨다. 반응 혼합물을 후처리한 후, 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 황색 오일로서 75% 수율로 수득한다. 생성물은 GC 순도가 92.1(면적%, 실시예 16A 참조)이고, 3-(2-플루오로벤질)4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량이 G.C.(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.25중량%이다.
15.1.b) 문헌[참조; J. Agric. Food Chem, 27, 4, 1979]의 과정
화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 2-플루오로벤질 클로라이드(18.0g, 123mmol), 4-하이드록시-벤즈알데히드(15.3g, 125mmol), NaOH(5.0g, 12mmol) 및 에탄올(125mL)로부터 실시예 14.1.b에 따라 제조한다.
혼합물을 25분내에 환류되도록 가열하고, 환류 온도에서 교반하에 12시간 동안 유지시킨다.
실시예 14.1.b에 따라 반응 혼합물을 후처리한 후, 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 황색 고체로서 90.0% 수율로 수득한다. 생성물은 GC 순도가 90.4(면적%, 실시예 16A 참조)이고, 화학식 Vb의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량이 G.C.(실시예 16B 참조)로 측정하여 0.14중량%이다.
15.2 화학식 Ib의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 및 이의 화학식 Id의 메탄설포네이트 염의 제조
15.2.a) 문헌[참조; J. Med. Chem, 1998, 41, 579], 방법 A의 과정
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(화학식 Ib)는 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 대신에 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(10mmol, 실시예 15.1a에서와 같이 제조함)를 사용하여 실시예 14.2.a의 과정에 따라 제조한다.
(S)-2[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드를 백색 고체로서 67.3% 수율로 수득한다. 생성물은 HPLC 순도가 86.7(면적%, 실시예 17A 참조)이고, 화학식 IIb의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 함량이 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.22중량%이다.
(S)-2[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(1.50g, 4.96mmol) 및 프로판-2-올(10.5mL)의 혼합물을 50℃로 가열하고, 투명 용액이 수득될 때까지 이 온도에서 유지시킨다. 메탄설폰산(0.48g, 5.01mmol)을 15분내에 교반하에 가한다.
이어서, 불균질 혼합물을 교반하에 2시간내에 20℃로 냉각시킨다. 20℃에서 1시간 후, 고체를 여과에 의해 수집하고, 감압에서 건조시켜 (S)-2[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트를 백색 고체로서 89.1% 수율로 수득한다. 생성물은 HPLC 순도가 96.9(면적%, 실시예 17A 참조)이고, 화학식 IId의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 함량이 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.14중량%이다.
15.2.b) 문헌[J.Med. Chem. 1998, 41, 579], 방법 A의 과정
화학식 Ib의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드는 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 대신에 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(10mmol, 실시예 15.1.b에 따라 제조함)를 사용하여 실시예 14.2.b에 따라 제조한다.
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드를 백색 고체로서 58.8% 수율로 수득한다. 생성물은 HPLC 순도가 83.8(면적%, 실시예 17A 참조)이고, 화학식 IIb의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드의 함량이 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.15중량%이다.
화학식 Ib의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드를 화학식 Id의 상응하는 메탄설포네이트로 백색 고체로서 89.4% 수율로 전환시킨다. 생성물은 HPLC 순도가 95.2(면적%, 실시예 17A 참조)이고, (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 함량이 HPLC(실시예 17B 참조)로 측정하여 0.11중량%이다.
실시예 16A
4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 및 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 순도의 GC 측정
시험 제제
샘플 약 100mg을 메틸렌 클로라이드 10ml에 용해시킨다.
크로마토그래피 조건
크로마토그래피 과정은 다음을 사용하여 수행한다:
- 융합된 실리카 모세관 컬럼 길이 60m 및 내부 직경 0.32mm. RTX 35(35% 디페닐 - 65% 디메틸 폴리실록산) 필름 두께 = 0.25㎛;
- 150kPa의 압력에서 캐리어 가스로서의 헬륨;
- 분할 유동 25ml/분;
- 주입기 온도 290℃;
- 검출기(FID) 온도 290℃;
온도 프로그램은 다음과 같다:
Figure 112009003352343-pct00028
과정
시험 제제 1㎕를 주입한다. 크로마토그램을 기록하고, 면적% 계산에 의해 생성물 순도를 계산한다.
불순물 확인
4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(화학식 IVa):
체류 시간:
4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 체류 시간은 약 17이다.
4-하이드록시벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 0.52이다.
4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 0.98이다.
4-(4-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 1.01이다.
4-벤질옥시벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 1.02이다.
3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 1.78이다.
4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드(화학식 IVb):
체류 시간:
4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 체류 시간은 약 17이다.
4-하이드록시벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 0.53이다.
4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 1.02이다.
4-(4-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 1.03이다.
4-벤질옥시벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 1.04이다.
3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 1.81이다.
실시예 16B
화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 중의 화학식 Vb의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량 및 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 중의 화학식 Va의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량의 GC 측정
4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드에 대해 고려되는 공지된 관련 물질은 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드이고, 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드에 대해서는 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드이다. 측정은 다음의 조건에 따라 수행한다:
내부 표준 용액
3,4,5-트리메톡시벤즈알데히드 용액을 메틸렌 클로라이드 속에서 1.5mg/ml의 농도로 제조한다(IS).
4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 중의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 측정을 위한 참조 용액:
3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 기준 표물 약 20mg 및 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 참조 표준물 20mg을 20mL 용적 플라스크에 정확하게 칭량부가하고, 희석제로 용해시키고 일정 용적으로 되도록 희석시키며; 상기 용액 500㎕를 5mL 용적 플라스크에 옮기며, IS 용액 500㎕를 가하고 희석제로 일정 용적으로 되도록 희석시켜 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 및 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 약 100㎍/mL(약 0.10%에 상응함)로 함유하는 용액을 수득한다.
4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 중의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 측정을 위한 참조 용액:
3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 참조 표준물 약 20mg 및 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 참조 표준물 20mg을 20mL 용적 플라스크에 정확하게 칭량부가하고, 희석제로 용해시키고 일정 용적으로 되도록 희석시키며; 상기 용액 500㎕를 5mL 용적 플라스크에 옮기며, IS 용액 500㎕를 가하고 희석제로 일정 용적으로 되도록 희석시켜 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 및 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 약 100㎍/mL(약 0.10%에 상응함)로 함유하는 용액을 수득한다.
시험 용액:
시험 생성물 약 500mg을 5mL 용적 플라스크에 정확하게 칭량부가하고, IS 용액 500㎕를 가하고 희석제로 용해시키고 일정 용적으로 되도록 희석시켜 약 100mg/mL의 기지의 농도를 갖는 용액을 수득한다.
크로마토그래피 조건:
크로마토그래피 과정은 다음을 사용하여 수행한다:
- 컬럼 : 융합된 실리카 모세관 컬럼 RTX 35(35% 디페닐 - 65% 디메틸 폴리실록산) 길이 60m, I.D. 0.32mm, 필름 두께 0.25㎛;
- 150kPa의 압력에서의 캐리어(헬륨);
- 분할 유동 25ml/분;
- 주입기 온도 290℃;
- 검출기(FID) 온도 290℃;
- 온도 프로그램 : 150℃에서 0-5분간 등온, 15℃/분의 속도로 150℃ 내지 240℃로 5-11분간 선형 구배, 24O℃에서 11-19분간 등온, 30℃/분의 속도로 240℃ 내지 290℃로 19-21분간 선형 구배, 290℃에서 21-40분간 등온;
- 희석제 : 메틸렌 클로라이드
- 주입 용적 1㎕.
과정:
블랭크(희석제), 참조 용액, 시험 용액을 주입하고, 크로마토그램을 기록한다.
참조 크로마토그램에서 다음이 입증된다:
4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 체류 시간은 약 18분이고;
3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 1.7이며, 또는
4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 체류 시간은 약 18분이고;
3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 상대적 체류 시간은 약 1.7이며;
3,4,5-트리메톡시벤즈알데히드(IS) 상대적 체류 시간은 약 0.7이다.
내부 표준 계산으로 실험된 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 중의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 또는 내부 표준 계산으로 실험된 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 중의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 함량(%)을 계산한다.
(3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 및 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드에 대한 정량 한계치(LOQ)는 0.005중량%이다. 불순물로 간주되는 둘 다에 대한 검출 한계치(LOD)는 0.0025중량%이다.
실시예 17A
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(살핀아미드, Ia), 이의 메탄설포네이트(Ic) , (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(랄핀아미드, Ib) 및 이의 메탄설포네이트(Id)의 순도의 HPLC 측정
다음의 크로마토그래피 과정이 생성물의 유리 염기 형태(화학식 Ia, 화학식 Ib) 및 메탄설포네이트 염(화학식 Ic, 화학식 Id) 둘 다에 적합하다.
희석제
이동상
시험 용액
생성물 약 25mg을 25ml 용적 플라스크에 정확하게 칭량부가하고, 희석제에 용해시키고 일정 용적으로 되도록 희석제로 희석시켜 약 1.0mg/ml의 기지의 농도를 갖는 용액을 수득한다.
크로마토그래피 조건
크로마토그래피 과정은 다음을 사용하여 수행한다:
- 컬럼: 워터스 대칭 C8, 150x4.6mm, 5μ;
- 검출: UV 220nm;
- 컬럼 온도: 30℃;
- 이동상: 40% 용매 A + 10% 용매 B + 50% 용매 C, 1.0g/l 나트륨 옥탄설포네이트 함유;
용매 A: 완충 용액 = KH2PO4 0.05M;
용매 B: 아세토니트릴;
용매 C: 메탄올;
- 등용매 용출, 수행 시간: 60분;
- 유량: 1.0ml/분;
- 주입 용적: 10㎕.
과정
시험 용액을 주입하고, 크로마토그램을 기록하며, 면적% 계산에 의해 생성물 순도를 계산한다.
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(사핀아미드) 및 관련 불순물 확인
체류 시간:
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 체류 시간은 약 5.5분이다.
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로피온산 상대적 체류 시간은 약 0.73이다.
(S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 상대적 체류 시간은 약 4.08이다.
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(랄핀아미드) 및 관련 불순물 확인
체류 시간:
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 체류 시간은 약 5.5분이다.
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로피온산 상대적 체류 시간은 약 0.73이다.
(S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 상대적 체류 시간은 약 4.08이다.
실시예 17B
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기, 화학식 Ib 및 메탄설포네이트, 화학식 Id) 중의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기, 화학식 IIb 및 메탄설포네이트, 화학식 IId)의 HPLC 측정 및 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기, 화학식 Ia 및 메탄설포네이트, 화학식 Ic) 중의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시l벤질아미노]프로판아미드(유리 염기, 화학식 IIa 및 메탄설포네이트, 화학식 IIc)의 HPLC 측정
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기 및 메탄설포네이트) 샘플 중의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기 및 메탄설포네이트)의 측정 및 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기 및 메탄설포네이트) 샘플 중의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기 및 메탄설포네이트)의 측정은 다음 조건에 따라 수행한다:
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 중의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 측정을 위한 참조 용액:
(S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 참조 표준물 약 30mg 및 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노] 프로판아미드 참조 표준물 20mg을 50mL 용적 플라스크에 정확하게 칭량부가하고, 희석제로 용해시키고 일정 용적으로 되도록 희석시키며; 상기 용액 1.0mL를 희석제를 사용하여 20mL로 되도록 희석시키고(1차 희석); 최종 용액 1.0mL를 희석제를 사용하여 20mL로 되도록 희석시켜(2차 희석), 약 1.20㎍/mL의 2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(약 0.12%) 및 약 1.00㎍/mL(약 0.10%)의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트를 함유하는 용액을 수득한다.
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 중의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 측정을 위한 참조 용액:
(S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 참조 표준물 약 30mg 및 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 참조 표준물 20mg을 50mL 용적 플라스크에 정확하게 칭량부가하고, 희석제로 용해시키고 일정 용적으로 되도록 희석시키며; 상기 용액 1.0mL를 희석제를 사용하여 20mL로 되도록 희석시키고(1차 희석); 최종 용액 1.0mL를 희석제를 사용하여 20mL로 되도록 희석시켜(2차 희석), 약 1.20㎍/mL의 2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(메탄설폰산 염으로서 약 0.15%) 및 약 1.00㎍/mL(약 0.10%)의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트를 함유하는 용액을 수득한다.
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 중의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드를 위한 참조 용액:
(S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 참조 표준물 약 24mg 및 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 참조 표준물 20mg을 50mL 용적 플라스크에 정확하게 칭량부가하고, 희석제로 용해시키고 일정 용적으로 되도록 희석시키며; 상기 용액 1.0mL를 희석제를 사용하여 20mL로 되도록 희석시키고(1차 희석); 최종 용액 1.0mL를 희석제를 사용하여 20mL로 되도록 희석시켜(2차 희석), 약 1.20㎍/mL의 2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(약 0.12%) 및 약 1.00㎍/mL(약 0.10%)의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트를 함유하는 용액을 수득한다.
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 중의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트를 위한 참조 용액:
(S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 참조 표준물 약 24mg 및 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 참조 표준물 20mg을 50mL 용적 플라스크에 정확하게 칭량부가하고, 희석제로 용해시키고 일정 용적으로 되도록 희석시키며; 상기 용액 1.0mL를 희석제를 사용하여 20mL로 되도록 희석시키고(1차 희석); 최종 용액 1.0mL를 희석제를 사용하여 20mL로 되도록 희석시켜(2차 희석), 약 1.20㎍/mL의 2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(메탄설폰산 염으로서 약 0.15%) 및 약 1.00㎍/mL(약 0.10%)의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트를 함유하는 용액을 수득한다.
시험 용액
시험 생성물 약 25mg을 25ml 용적 플라스크에 정확하게 칭량부가하고, 희석제에 용해시키고 일정 용적으로 되도록 희석제로 희석시켜 약 1.0mg/ml의 기지의 농도를 갖는 용액을 수득한다.
크로마토그래피 조건
크로마토그래피 과정은 다음을 사용하여 수행한다:
- 컬럼: 워터스 대칭 C8, 150x4.6mm, 5μ, 또는 등가물;
- 컬럼 온도: 30℃;
- 이동상: 40% 용매 A : 10% 용매 B : 50% 용매 C의 혼합물, 1.0g/lt 나트륨 옥탄설포네이트 함유;
용매 A: 완충 용액 = 0.05M KH2PO4;
용매 B: 아세토니트릴;
용매 C: 메탄올;
- 등용매 용출;
- 수행 시간: 60분;
- 유량: 1.0ml/분;
- 검출: UV 220nm;
- 주입 용적: 100㎕;
- 희석제: 이동상.
과정
블랭크(희석제), 참조 용액, 시험 용액을 주입하고, 크로마토그램을 기록한다.
참조 크로마토그램에서, 다음의 시스템 적합도 파라미터가 입증된다:
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 체류 시간은 약 5.2분이고;
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 피크의 USP 테일링(tailing)은 0.8 내지 1.5이며;
(S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 상대적 체류 시간은 약 5.1이다.
또는
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 체류 시간은 약 5.5분이고;
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 피크의 USP 테일링은 0.8 내지 1.5이며;
(S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 상대적 체류 시간은 약 4.1이다.
시스템 적합도를 수득하기 위해 이동상을 조정한다.
외부 표준 계산에 의해 실험된 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기 및 메탄설포네이트) 샘플 중의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기 및 메탄설포네이트) 및 외부 표준 계산에 의해 실험된 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기 및 메탄설포네이트) 샘플 중의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(유리 염기 및 메탄설포네이트) 함량 %를 계산한다.
상응하는 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 및 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 중의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 및 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드에 대한 정량 한계치(LOQ)는 0.004중량%이다. 상응하는 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 및 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 중의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 및 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트에 대한 정량 한계치(LOQ)는 0.005중량%이다. 모든 고려되는 불순물에 대한 검출 한계치는 0.001중량%이다.
실시예 18
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(랄핀아미드) 메탄설포네이트(Id) 에난티오머적 순도의 HPLC 측정
샘플의 에난티오머적 순도는 HPLC로 평가한다. 측정은 다음에 따라 수행한다:
표준 용액 1:
(R)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 참조 표준물 약 5.3mg을 이동상 25mL에 용해시킨다.
표준 용액 2:
약 8.0mg의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 참조 표준물 및 0.2mL의 표준 용액 1을 이동상 50mL에 용해시킨다.
(R)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 농도는 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트의 농도를 기준으로 계산하여 약 0.5%이다.
시험 용액 1 및 2:
이중으로, 시험 생성물 약 8.0mg을 이동상 50mL에 용해시킨다.
크로마토그래피 조건:
- 컬럼: 키랄팩 WH 250mm x 4.6mm, I.D. 5㎛;
- 컬럼 온도: 45℃;
- 이동상: 0.25mM CuSO4(물 1000mL에 CuSO4 약 40mg을 정확하게 칭량부가함)/MeOH 60/40;
- 등용매 용출;
- 유량: 1.0mL/분;
- 검출: UV 230nm;
- 주입 용적: 10㎕;
- 수행 시간: 15분.
과정:
블랭크(이동상)를 1회, 표준 용액을 2회, 시험 용액 1 및 2를 1회 분석하여 다음과 같이 입증된다:
- 표준 용액 주입의 경우, (R)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 면적%에 대한 RSD%는 2.0% 미만이다;
- 표준 용액 및 샘플 용액 둘 다의 경우, 각각의 주입에 대해 주 피크 면적%는 평균값±0.1%에 포함된다.
(R)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 메탄설포네이트 함량(면적%)을 2회 측정치의 평균으로서 계산한다.
체류 시간:
(S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 체류 시간은 약 5.7분이다.
(R)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노] 프로판아미드 상대적 체류 시간은 약 1.7이다.
실시예 19
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(사핀아미드) 메탄설포네이트(Ic) 에난티오머적 순도의 HPLC 측정
샘플의 에난티오머적 순도는 HPLC로 평가한다. 측정은 다음 조건에 따라 실시한다:
시험 용액:
시험 샘플 약 10mg을 이동상 10mL에 용해시킨다.
크로마토그래피 조건:
- 컬럼: 키랄팩 WH 250mm x 4.6mm, I.D. 10㎛;
- 컬럼 온도: 50℃;
- 이동상: 0.25mM CuSO4;
- 등용매 용출;
- 유량: 1.0mL/분;
- 검출: UV 200nm;
- 주입 용적: 10㎕;
- 수행 시간: 30분.
과정:
시험 용액을 주입하고 에난티오머 피크 반응을 면적%로서 계산한다.
(S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 체류 시간은 약 9.2분이다.
(R)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 상대적 체류 시간은 약 1.9이다.
실시예 20
시토크롬 P450 분석
약물 대사에 관여하는 5개의 가장 중요한 시토크롬 P450 이종형(CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 및 CYP3A4)의 억제는 CYP 대사시 형광으로 되는 특정 기질을 사용하여 측정하였다[젠테스트 키트 분석(Gentest Kit assay)].
화합물을 배양물/NADPH 재생 완충액을 함유하는 96-웰 플레이트에서 시험하였다. 특이 사람 재조합 동종효소 및 기질을 가하고 37℃에서 CYP1A2/CEC의 경우 15분, CYP2E1/MFC의 경우 40분, CYP2C9/MFC의 경우 45분 및 기타 CYP450의 경우 30분 동안 항온배양하였다.
특이 기질은 다음과 같다: 3-시아노-7-에톡시쿠마린(CYP2C19 및 CYP1A2),
7-메톡시-4-트리플루오로메틸쿠마린(CYP2C9),
3[2(N,N-디에틸-N-메틸아미노)에틸]-7-메톡시-4-메틸쿠마린(CYP2D6)
벤질페닐쿠마린(CYP3A4)
플레이트는 적당한 방출/여기 파장에서 빅터 플레이트 판독기(Victor plate reader, 제조원; Perkin Elmer)에서 판독하고, IC50(효소 활성을 50% 억제하는 농도)을 결정한다. 결과는 표 1 및 2에 보고되어 있다.
실시예 21
사람 신경모세포종 세포주 SH-SY-5Y에서의 세포독성 분석
0시간에서, 세포를 DMEM 성장 배지 + 10% 열 불활성화된 FBS + 2mM 1-글루타민 + 100U/mL - 100㎍/mL 페니실린/스트렙토마이신 속에서 96웰 플레이트에 1.104/cm2로 접종하였다.
성장의 덜융합된 단계(subconfluent phase)에서 72시간후에, 배지를 제거하고 세포를 시험 화합물(20㎕, 삼중으로 적어도 5개 농도)의 존재 또는 부재하에 180㎕의 배양 배지(neurobasal medium) + 2mM 1-글루타민(제조원; Life Techonologies) 속에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다.
배양 말기에, 알라마 블루(Alamar Blue) 염료[알라마블루 분석 키트(AlamarBlueTM Assay Kit), 제조원; Promega) 20㎕를 세포 배지에 직접 가하였다.
4시간 후, 테칸 스펙트라플루어 플레이트 판독기(Tecan Spectrafluor plate reader)를 사용하여 530nm 여기 및 595nm 방출에서 형광을 측정함으로써 세포독성을 평가하였다.
처리하기 전 및 처리 말기에, 배양물을 이미지 분석기(Image Analyzer, 제품명; Image Pro Plus, 5.1)에 매칭된 현미경(제품명; Olympus 1X70 inverted light microscope)에 의해 현미경분석으로 모니터링하여 세포 형태를 평가하였다.
결과를 50% 사망률을 유도하는 농도로서 표 1에 나타내었다.
실시예 22
형질감염된 CHO 세포주에서의 HERG 전류
HERG 전류의 억제는 재조합 HERG 채널을 안정적으로 발현하는 CHO 세포에서 시험하였다.
HERG 전류에 미치는 시험 화합물의 효과를 평가하기 위해, 세포를 -80Mv에서 클램핑시키고, 5초 동안 0mV로 감극시켜 HERG 전류를 활성화시키고, 5초 동안 -50mV로 재분극시켜 HERG 꼬리 전류(tail current)를 불활성화시켰다. 이 과정을 0.06Hz의 주파수에서 반복하였다. 재분극시의 전류 진폭(HERG 꼬리 전류)을, 시험 화합물에 노출시키기 전과 후에 측정하였다.
전류의 억제는 외부 욕 관류 기간의 말기에 측정한 HERG 꼬리 전류의 진폭과 시험 화합물 관류 기간의 말기(정상 상태 효과(steady-state effect)에 도달한 때)에 측정한 HERG 꼬리 전류의 사이의 차이를 대조 HERG 꼬리 전류로 나누어 계산하였다.
약물 농도-억제 곡선은 긴장성 블록(tonic block) 대 약물 농도를 플롯팅하여 수득하였다. 용량-반응 곡선은 다음 로지스틱 방정식(logistic difference equation)에 따라 긴장성 블럭에 피팅시켰다: y = A2+(A1-A2)/[1+(x/IC5O)P]. A1 및 A2는 0 및 100% 전류 억제도에 상응하는 0 및 1의 고정 값이고, x는 약물 농도이며, IC50은 50% 전류 억제를 야기하는 약물 농도이고, p는 상응하는 기울기 인자이다. 결과가 표 1에 보고되어 있다.
실시예 23
마우스에서의 최대 전기충격 시험(MES)
최대 전기충격 시험(maximal electroshock test; MES)은 설치류 모델에서 항-간질 약물(anti-epileptic drug)을 선별하는 데 통상적으로 사용된다.
동물 및 장치: 체중 25g의 수컷 CD1 마우스를 사용하였다. 화이트 등의 문헌[참조; White H. S., Woodhead J. H., Franklin M. R., Swinyard E. A., and Wolf H. H. Antiepileptic Drugs(1995) 4th ed.: 99-110, Raven Press, Ltd., New York]에 기재된 과정을 따랐다. 유고 베이질 전기경련 발생기(Ugo Basile electroconvulsive generator, Model ECT UNIT 7801)를 사용하여, 적어도 97%의 대조 동물에서 뒷다리 긴장성 신근 반응을 생성하기에 충분한 전기 자극을 전달하였다. 자극은 마우스에서 집게 전극을 통해 귀내로(intra-aurally) 전달하였다(0.7초의 40mA 충격, 0.4ms의 펄스 지속시간을 갖는 80Hz의 펄스 트레인). MES 유도하기 15-60분 전에 복강내 또는 경구 투여된 화합물의 급성 효과를 실험하고 부형제 대조군과 비교하였다. 그룹당 10마리 마우스를 연구하였다. 발작의 뒷다리 긴장성 신근 성분의 완전 억제를 항경련 활성의 증거로서 취하였다.
본 발명의 화합물은 3 내지 30mg/kg의 용량으로 경구 또는 복강내 투여하였다.
결과를 보호 %로서 표 3 및 4에 나타내었다.

Claims (52)

  1. 고순도의 화학식 Ia의 (S)-2-[4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(사핀아미드) 또는 화학식 Ib의 (S)-2-[4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드(랄핀아미드), 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염의 제조방법으로서,
    화학식 VIa 또는 화학식 VIb의 각각의 쉬프 염기(Schiff base) 중간체를 양성자성 유기 용매 속에서 불균질 촉매의 존재하에 수소 가스로 촉매적 수소화하여 상기 사핀아미드 또는 랄핀아미드를 수득하거나, 상기 사핀아미드 또는 랄핀아미드가 유리 염기 형태로 수득되는 경우에, 상기 유리 염기 형태를 이의 약제학적으로 허용되는 산과의 염으로 전환시키는 것을 특징으로 하고,
    상기 사핀아미드 또는 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염이, 각각의 불순물인 화학식 IIa의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 및 화학식 IIb의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염을 0.03중량% 미만의 함량으로 갖는, 방법.
    화학식 Ia
    Figure 112014014819305-pct00029
    사핀아미드: 3-F
    화학식 Ib
    Figure 112014014819305-pct00030
    랄핀아미드: 2-F
    화학식 VIa
    Figure 112014014819305-pct00031
    3-F
    화학식 VIb
    Figure 112014014819305-pct00032
    2-F
    화학식 IIa
    Figure 112014014819305-pct00052
    화학식 IIb
    Figure 112014014819305-pct00053
  2. 제1항에 있어서, 촉매적 수소화가 저급 지방족 (C1-C5)알칸올로부터 선택된 용매의 존재하에 불활성 지지체 상의 니켈, 로듐, 백금 및 팔라듐 촉매로부터 선택된 불균질 촉매를 사용하여 수행되는, 방법.
  3. 제1항에 있어서, 촉매가 팔라듐 또는 백금 촉매인, 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 촉매가 함수(wet) 5% Pt/C(50% H2O) 또는 함수 10% Pd/C(50% H2O)인 것인, 방법.
  5. 제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 산이 메탄설폰산인 것인, 방법.
  6. 제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 수소압이 1 내지 10bar이고, 온도가 10℃ 내지 70℃인, 방법.
  7. 제6항에 있어서, 수소압이 3 내지 6bar이고, 온도가 25℃ 내지 40℃인, 방법.
  8. 제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 촉매적 수소화가, 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 또는 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 양성자성 유기 용매의 존재하에 L-알라닌아미드를 사용한 이미노알킬화를 통해 제조한 화학식 VIa 또는 VIb의 쉬프 염기 중간체에 대해 수행되는 , 방법.
    화학식 IVa
    Figure 112014014819305-pct00033
    3-F
    화학식 IVb
    Figure 112014014819305-pct00034
    2-F
  9. 제8항에 있어서, L-알라닌아미드가, 이의 염으로부터 L-알라닌아미드를 해리시키위한 양의 염기의 존재하에서 이의 산 부가염으로서 사용되는, 방법.
  10. 제8항에 있어서, 쉬프 염기 중간체의 촉매적 수소화가, 상기 쉬프 염기 중간체를 침전시켜 동일한 반응 용매 중의 상기 쉬프 염기 중간체의 현탁액을 수득하는 조건하에서, 이미노알킬화 반응의 완료로부터 생성된 동일한 반응 혼합물에 대해 수행되는, 방법.
  11. 제8항에 있어서, 이미노알킬화 반응의 완료로부터 생성된 쉬프 염기 중간체가, 촉매적 수소화 단계를 수행하기 전에 분리되는, 방법.
  12. 제8항에 있어서, 화학식 VIa 또는 VIb의 쉬프 염기 중간체를 수득하기 위한 출발 물질로서 사용되는 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 또는 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드가, 각각의 불순물인 화학식 Va의 3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 및 화학식 Vb의 3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 0.03중량% 미만으로 함유하는, 방법.
    화학식 Va
    Figure 112014014819305-pct00035
    3-F
    화학식 Vb
    Figure 112014014819305-pct00036
    2-F
  13. 제12항에 있어서, 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 또는 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드가, 4-하이드록시벤즈알데히드를 염기의 존재하에 각각 화학식 IIIa의 3-플루오로벤질 유도체 또는 화학식 IIIb의 2-플루오로벤질 유도체로 알킬화하여 수득되고, 후속 반응 단계에 사용하기 전에 결정화되는, 방법.
    화학식 IIIa
    Figure 112014014819305-pct00037
    3-F
    화학식 IIIb
    Figure 112014014819305-pct00038
    2-F
    위의 화학식 IIIa 및 IIIb에서,
    Y는 Cl, Br, I, OSO2CH3 및 OSO2-C6H4-pCH3을 포함하는 이탈 그룹이다.
  14. 제13항에 있어서, Y가 Cl인, 방법.
  15. 제13항에 있어서, 결정화가, 불활성 유기 용매 중의 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 또는 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드의 용액에 불활성 유기 비용매를 가하여 수행되는, 방법.
  16. 제15항에 있어서, 불활성 유기 비용매가 n-헥산이고, 불활성 유기 용매가 방향족 탄화수소로부터 선택되는 것인, 방법.
  17. 제16항에 있어서, 방향족 탄화수소가 톨루엔인 것인, 방법.
  18. 제13항에 있어서, 결정화가, 화학식 IVa의 4-(3-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드 또는 화학식 IVb의 4-(2-플루오로벤질옥시)벤즈알데히드를 환류하에 고온 용매에 용해시킨 후, 상기 용액을 실온에서 냉각시킴으로써 수행되는, 방법.
  19. 제18항에 있어서, 상기 용매가 사이클로헥산 또는 디(C3-C4)알킬 에테르이고, 상기 용액이 10 내지 15℃에서 냉각되는, 방법.
  20. 제13항에 있어서, 알킬화 반응이 상 전이 조건하에 수행되는, 방법.
  21. 제20항에 있어서, 상 전이 조건하에서의 알킬화가 고체/액체 시스템에서 수행되며, 반응물 및 상 전이 촉매는 액체 유기 상에 용해되고, 고체 상은 무기 염기 또는 상기 무기 염기와의 4-하이드록시 벤즈알데히드의 염으로 구성되는, 방법.
  22. 제20항에 있어서, 상 전이 조건하에서의 알킬화가 액체/액체 시스템에서 수행되며, 알킬화제인 화학식 IIIa의 3-플루오로벤질 유도체 또는 화학식 IIIb의 2-플루오로벤질 유도체는 액체 유기 상에 용해되고, 4-하이드록시벤즈알데히드는 무기 염기와의 염으로서 수성 상에 용해되는 것인, 방법.
  23. 제20항에 있어서, 상 전이 촉매가 4급 암모늄염 또는 포스포늄염 또는 저분자량 폴리에틸렌글리콜로부터 선택되는 것인, 방법.
  24. 제23항에 있어서, 사용되는 상 전이 촉매의 양이 4-하이드록시벤즈알데히드 1몰당 0.02 내지 1몰인, 방법.
  25. 제24항에 있어서, 상 전이 촉매의 양이 4-하이드록시벤즈알데히드 1몰당 0.1 내지 1몰인, 방법.
  26. 제21항에 있어서, 액체 유기 상의 유기 용매가 디알킬 에테르 및 방향족 탄화수소로부터 선택되는 것인, 방법.
  27. 제21항에 있어서, 화학식 IIIa 또는 IIIb의 알킬화제와 4-하이드록시벤즈알데히드 간의 몰 비가 0.6 내지 1.5인, 방법.
  28. 제21항에 있어서, 온도가 60℃ 내지 160℃인, 방법.
  29. 제21항에 있어서, 무기 염기가 Na2CO3, K2CO3, NaOH 및 KOH로부터 선택되고, 온도가 80℃ 내지 120℃이며, 화학식 IIIa 또는 IIIb의 알킬화제와 4-하이드록시벤즈알데히드 간의 비가 0.9 내지 1.1인, 방법.
  30. 제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 사핀아미드 또는 랄핀아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염이, 각각의 불순물인 화학식 IIa의 (S)-2-[3-(3-플루오로벤질)-4-(3-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 및 화학식 IIb의 (S)-2-[3-(2-플루오로벤질)-4-(2-플루오로벤질옥시)벤질아미노]프로판아미드 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산과의 염을 0.01중량% 미만의 함량으로 갖는, 방법.
    화학식 IIa
    Figure 112014014819305-pct00039
    화학식 IIb
    Figure 112014014819305-pct00040
  31. 제30항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 산이 메탄설폰산이고, 메탄설폰산과의 염으로서의 화학식 IIa 및 IIb의 각각의 불순물의 함량이 0.01중량% 미만인, 방법.
  32. 화학식 VIa 또는 화학식 VIb의 분리된 쉬프 염기.
    화학식 VIa
    Figure 112009049647148-pct00041
    3-F
    화학식 VIb
    Figure 112009049647148-pct00042
    2-F
  33. 삭제
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  35. 삭제
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Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1658062B1 (en) * 2003-08-25 2010-02-17 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful as anti-inflammatory agents
EA017123B1 (ru) * 2006-06-19 2012-10-30 Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А. Способ получения 2-[4-(3- и 2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидов
HUE036232T2 (hu) * 2007-12-11 2018-06-28 Newron Pharm Spa Eljárás nagy tisztasági fokú 2-[4-(3- vagy 2-fluorbenziloxi)-benzilamino]- propánamidok elõállítására
EP2314569A1 (en) 2009-10-22 2011-04-27 Merck Patent GmbH Novel polymorphic forms of (S)-2-[4-(3-Fluoro-benzyloxy)-benzylamino]-propionamide mesylate salt and processes of manufacturing thereof
EA021389B1 (ru) * 2010-04-27 2015-06-30 Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А. Способ получения метансульфонатных солей ралфинамида или их r-энантиомеров
WO2014086704A1 (en) 2012-12-03 2014-06-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Substituted isoxazole amide compounds as inhibitors of stearoyl-coa desaturase 1 (scd1)
US9475757B2 (en) 2013-05-03 2016-10-25 Council Of Scientific & Industrial Research Synthesis of anti-Parkinson agent
CN104292128A (zh) * 2014-07-01 2015-01-21 南京正科制药有限公司 一种沙芬酰胺晶型a
JP6466109B2 (ja) * 2014-09-09 2019-02-06 東ソー・ファインケム株式会社 ２−ベンジルオキシ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン誘導体及びその製造方法
CN105017060B (zh) * 2015-07-03 2017-06-16 南京正大天晴制药有限公司 一种沙芬酰胺新晶型及其制备方法
CN113072436A (zh) * 2015-07-24 2021-07-06 上海医药集团股份有限公司 一种苄基芳基醚的制备方法
CN105061245A (zh) * 2015-08-25 2015-11-18 成都维恒医药科技有限公司 一种高纯度沙芬酰胺的制备方法
CN106220525A (zh) * 2016-07-31 2016-12-14 合肥远志医药科技开发有限公司 一种工业化沙芬酰胺甲磺酸盐的制备方法
CN106336363B (zh) * 2016-08-22 2018-10-30 上海医药集团股份有限公司 一种沙芬酰胺甲磺酸盐晶型c及其制备方法
CN106565521B (zh) * 2016-08-24 2019-03-08 浙江美诺华药物化学有限公司 (s)-2-[3-(3-氟苄基)-4-(3-氟苄氧基)苄氨基]丙酰胺及其盐的制备方法
CN106596828B (zh) * 2016-12-15 2018-09-25 扬子江药业集团有限公司 一种甲磺酸沙芬酰胺有关物质的检测方法
CN107271600B (zh) * 2017-07-28 2019-01-25 成都百裕制药股份有限公司 一种4-(3-氟苄氧基)苯甲醛中异构体杂质含量的检测方法
CN107857713A (zh) * 2017-11-23 2018-03-30 江苏恒盛药业有限公司 一种沙芬酰胺氢溴酸盐及其一种晶型
CN107759487A (zh) * 2017-11-23 2018-03-06 江苏恒盛药业有限公司 一种沙芬酰胺盐酸盐及其一种晶型以及制备方法
WO2019167085A1 (en) * 2018-03-01 2019-09-06 Msn Laboratories Private Limited, R&D Center Process for the preparation of (s)-2-[[4-[(3-fluorophenyl)methoxy]phenyl]methyl]amino propanamide methanesulfonate
US11111208B2 (en) 2019-06-17 2021-09-07 RK Pharma Solutions LLC Process for the preparation of safinamide mesylate intermediate
US11225457B2 (en) 2019-08-06 2022-01-18 Medichem, S.A. Process for preparing safinamide
CN111122736B (zh) * 2019-12-30 2021-03-12 北京鑫开元医药科技有限公司海南分公司 一种用于检测布瓦西坦中间体中对映异构体的方法
CN113214097B (zh) * 2020-01-21 2022-08-30 厦门大学 治疗阿尔茨海默病的化合物
CN112028754A (zh) * 2020-06-17 2020-12-04 浙江美诺华药物化学有限公司 一种甲磺酸沙芬酰胺中间体的制备方法
CN114088830B (zh) * 2021-11-10 2022-09-23 石家庄四药有限公司 一种4-(3-氟苄氧基)苯甲醛中异构体的检测方法
CN116008439B (zh) * 2023-02-20 2023-10-27 山东绿叶制药有限公司 一种检测2,6-二氧杂螺[4,5]癸烷类化合物或其盐中杂质的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005102300A1 (en) * 2004-04-22 2005-11-03 Newron Pharmaceuticals S.P.A. α-AMINOAMIDE DERIVATIVES USEFUL IN THE TREATMENT OF RESTLESS LEGS SYNDROME AND ADDICTIVE DISORDERS

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL94466A (en) * 1989-05-25 1995-01-24 Erba Carlo Spa Pharmaceutical preparations containing the history of A-amino carboxamide N-phenylalkyl are converted into such new compounds and their preparation
GB9727523D0 (en) 1997-12-31 1998-02-25 Pharmacia & Upjohn Spa Alpha-aminoamide derivatives useful as analgesic agents
EP0974351A3 (en) * 1998-04-24 2000-12-13 Jouveinal Medicament for preventing and treating gastrointestinal damage
BR0109706A (pt) 2000-03-31 2003-02-04 Euro Celtique Sa Aminopiridinas e seus usos como anticonvulsivantes e bloqueadores dos canais de sódio
PT1423168E (pt) 2001-09-03 2006-05-31 Newron Pharm Spa Composicao farmaceutica que compreende gabapentina ou um seu analogo e uma x-aminoamida e a sua utilizacao como analgesico
EP1438956A1 (en) 2003-01-16 2004-07-21 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful as antimigraine agents
CA2514574A1 (en) * 2003-01-30 2004-08-12 Dynogen Pharmaceuticals, Inc. Use of sodium channel modulators for treating gastrointestinal tract disorders
US20040209960A1 (en) * 2003-01-30 2004-10-21 Dynogen Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating lower urinary tract disorders using sodium channell modulators
AR044007A1 (es) 2003-04-11 2005-08-24 Newron Pharmaceuticals Inc Metodos para el tratamiento de la enfermedad de parkinson
TW200507850A (en) * 2003-07-25 2005-03-01 Kyowa Hakko Kogyo Kk Pharmaceutical composition
EP1658062B1 (en) 2003-08-25 2010-02-17 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful as anti-inflammatory agents
EP1524267A1 (en) 2003-10-15 2005-04-20 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Substituted benzylaminoalkylene heterocycles
EP1557166A1 (en) * 2004-01-21 2005-07-27 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of lower urinary tract disorders
CN101018546B (zh) 2004-09-10 2013-06-12 纽朗制药有限公司 作为钠和/或钙通道选择性调节剂的(卤代苄氧基)苄氨基-丙酰胺类
EP1870097A1 (en) 2006-06-15 2007-12-26 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of cognitive disorders
EA017123B1 (ru) * 2006-06-19 2012-10-30 Ньюрон Фармасьютикалс С.П.А. Способ получения 2-[4-(3- и 2-фторбензилокси)бензиламино]пропанамидов
HUE036232T2 (hu) 2007-12-11 2018-06-28 Newron Pharm Spa Eljárás nagy tisztasági fokú 2-[4-(3- vagy 2-fluorbenziloxi)-benzilamino]- propánamidok elõállítására
CN101903021B (zh) 2007-12-19 2012-11-14 纽朗制药有限公司 用于治疗精神病的α-氨基酰胺衍生物

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005102300A1 (en) * 2004-04-22 2005-11-03 Newron Pharmaceuticals S.P.A. α-AMINOAMIDE DERIVATIVES USEFUL IN THE TREATMENT OF RESTLESS LEGS SYNDROME AND ADDICTIVE DISORDERS

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