NO177710B

NO177710B - Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive slektede analoger

Info

Publication number: NO177710B
Application number: NO911892A
Authority: NO
Inventors: Denise M Flanagan
Original assignee: Hoechst Roussel Pharma
Priority date: 1990-05-17
Filing date: 1991-05-15
Publication date: 1995-07-31
Also published as: NZ260210A; JPH0826024B2; NO177710C; DK0457318T3; GR3021043T3; EP0457318A1; MX25777A; IL98162A; CZ280922B6; IL98162A0; NZ238151A; AU634380B2; PT97688A; NO911892L; ZA913711B; IE911678A1; AU7618291A; ES2094768T3; DE69121299D1; CS142991A3

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en analogifremgangsmåte for fremstilling av en terapeutisk aktiv forbindelse med formel

(I):

der

X er -0-, N-laverealkyl eller N-fenyllaverealkyl eventuelt substituert med laverealkoksy eller halogen;

Ri er hydrogen, C^- Ciq alkyl, fenyllaverealkyl;

R2 er laverealkyl;

R3 er laverealkyl;

R4 er laverealkyl;

Y er hydrogen eller halogen eller de farmasøytiske aksepterbare syreaddisjonssaltene derav, og der de kan anvendes, kjennetegnet ved at den omfatter:

a) reagering av en forbindelse med formel (IV)

med et dialkyloksalat med formel (VII)

der R er laverealkyl 1 nærvær av N,N,N<*>,N<*->tetrametyletylendiamin og sek-butyllltium, for å oppnå en forbindelse med formel (I) der R^ har samme betydning som R over,

b) valgfri reagerlng av en forbindelse med formel (I) der er laverealkyl, med titanetoksid og en alkohol med formel

R5-OH, der R5 er C^-Cio alkyl, fenyllaverealkyl som eventuelt er substituert med laverealkoksy eller halogen, for å oppnå en forbindelse med formel (I), der Rj har samme betydning som R5 over,

c) reagering av en forbindelse med formel (IV)

der R£, R3 og R4 er som definert ovenfor

med et blandet oksalatesteramid med formel (VIII)

der R er hydrogen og R*> og R<7> uavhengig av hverandre er hydrogen, laverealkyl eller fenyllaverealkyl i nærvær av et alkyllitium og N,N,N',N'-tetrametyletylendiamin i et eterisk oppløsningsmiddel for å oppnå en forbindelse med formel (I) der X er N-laverealkyl eller N-fenyllaverealkyl og R^ er laverealkyl eller fenyllaverealkyl,

og eventuell reagering av en forbindelse med formel (I) som oppnådd i trinnene a) eller b), med et overskudd av en sterk base, for å gi en forbindelse med formel (I), der R^ er hydrogen.

I definisjonen over menes det med begrepet "lavere" at gruppen som beskrives inneholder fra 1 til 6 karbonatomer. Begrepet "alkyl" refererer til en rett- eller forgrenet-kjedet hydrokarbon med 1 til 22 karbonatomer som ikke inneholder noe umetting.

Forbindelsene i oppfinnelsen blir fremstilt på følgende måte. Substituentene Rj, R£t R3, R4, X og Y er som definert over derom annet ikke er angitt.

Forbindelse III med formel

blir fremstilt ved å utnytte generelt det syntetiske skjemaet som er beskrevet i Julian et al., J. Chem. Soc, 1935. 563-566 og 755-757, som vist under:

Forbindelse III får anledning til å reagere med pyridiniumhydrobromidperbromid med formelen: for å gi 5-bromforløperen med formelen:

Reaksjonen mellom forbindelse III og pyridiniumhydrobromidperbromid blir typisk gjennomført ved fremstilling av en oppløsning med forbindelse III i et passende oppløsnings-middel slik som metylenklorid, tilsetning av en base slik som pyridin og etterfølgende tilsetning av pyridiniumhydrobromidperbromid. Denne reaksjonen foregår typisk i en inert atmosfære, dvs. i nærvær av nitrogen, ved en temperatur fra

-20 til 5°C i fra 1 til 5 timer.

Til en oppløsning med N,N,N<*>,N'-tetrametyletylendiamin (TMEDA) med formelen: og sek-butyllitium blir tilsatt forbindelse IV. Denne oppløsningen blir omrørt ved meget lav temperatur, dvs. -78 til -50*C i 0,5 til 5 timer. Deretter blir denne oppløsningen tilsatt en oppløsning av en oksalat bis-ester med formel:

der R er alkyl, aryl eller aralkyl for å gi forbindelse I i oppfinnelsen. Denne reaksjonen foregår typisk i nærvær av et passende oppløsningsmiddel, slik som dietyleter.

Som et alternativ til syntesen over, kan titanat-mediert transforestring bli benyttet til syntese av disse forbindelsene. Denne metoden er beskrevet i D. Seebach et al., Synthesis 138 (1982). En forbindelse med formel:

blir reagert med et titan(IV)alkoksid, dvs. titan(IV)etoksid og en alkohol med formel R5-OH, der R5 er alkyl, aryl, cykloalkyl, aryllaverealkyl, laverealkylen, laverealkynyl, heteroaryl utvalgt fra gruppen som består av tienyl, furanyl, pyrrolyl, pyridinyl eller heterolaverealkyl. Denne type reaksjon foregår vanligvis ved romtemperatur til rett under tilbakestrømmlng i en inert atmosfære, dvs. under N2 i 0,5 til 12 timer.

For å fremstille forskjellige amider, blir forbindelse IV tilsatt en oppløsning TMEDA og sek-butyllitium. Oppløsningen blir omrørt ved en temperatur på -78°C til -50'C i 0,5 til 5 timer. Deretter blir dette tilsatt en oppløsning av et blandet oksalatesteramld med formelen:

der R, R*> og R<7> uavhengig av hverandre er hydrogen, laverealkyl, aryl eller aryllaverealkyl. Denne reaksjonen foregår typisk i et passende oppløsningsmiddel slik som dieltyleter.

Andre velkjente metoder for amidsyntese kan bli benyttet.

For å fremstille syreanalogene til forbindelse I, blir forbindelse I behandlet med et overskudd sterk base, f.eks. vandig kaliumhydroksid ved en temperatur fra 0 til 5°C i et laverealkanoloppløsningsmiddel slik som etanol, metanol, 1-propanol, etc. Etter omrøring i 30 min. blir blandingen tilbakestrømmet i 3 timer. Etter avkjøling blir blandingen nøytralisert med IN HCl-oppløsning.

Forbindelsene med formel I som blir fremstilt i foreliggende oppfinnelse er nyttige I behandling av forskjellige hukom-melsesdisfunksjoner som er kjennetegnet ved nedsatt cholinerg funksjon, slik som Alzheimer's sykdom.

Utnyttelsen blir bekreftet ved evnen til disse forbindelse å hemme enzymet acetylcholinesterase og dermed øke acetyl-cholinnivåene i hjernen.

Cholinesterasehemmingsanalvse

Cholinesteraser blir funnet i hele kroppen, både i hjerne og i serum. Bare hjerneacetylcholinesterase (AChE)-fordelingen er imidlertid korrelert med sentralt cholinerg innervasjon. Den samme innervasjonen er antatt å være svekket i Alz-heimer^ pasienter. Det er nå bestemt in vitro-hemming av acetylcholinesteraseaktivitet i rotte-striatum i henhold til metoden som er beskrevet under.

In vitro- hemming av acetylcholinesteraseaktivitet i rotte-striatum

Acetylcholinestertase (AChE), som ofte blir kalt virkelig eller spesifikk cholinesterase, finnes i nerveceller, skjelettmuskel, glatt muskel, forskjellige kjertler og røde blodceller. AChE kan bli atskilt fra andre cholinesteraser ved substrat og hemmingsspesifisiteter og ved regional utbredelse. Dens utbredelse i hjernen korrelerer med cholinerg innervasjon og subfraksjonering viser det høyeste nivået i nerveterminaler.

Det er generelt akseptert at den fysiologiske rollen til AChE er rask hydrolyse og inaktivering av acetylcholin. Hemmere av AChE viste markerte cholinominetiske effekter i cholinerg-innerverte effektororganer og har blitt anvendt terapeutisk i behandling av glaukoma, myasthenia gravis og paralytisk ileus. Senere studier har imidlertid antydet at AChE-hemmere også kan være fordelaktig i behandling av Alzheimers demens.

Fremgangsmåten som er beskrevet under blir anvendt i oppfinnelsen for å analysere anticholinesteraseaktivitet. Denne er en modifikasjon av metoden til Ellman et al., Biochem. Pharmacol. 7, 88 (1961).

Fremgangsmåte:

A. Reagenser

1. 0,05 M fosfatbuffer, pH 7,2

(a) 6,85 g NaH2P04-H2=/100 ml destillert H2<0>

(b) 13,40 g Na2HP04'7H20/100 ml destillert H20 (c) tilsett (a) til (b) inntil pH når 7,2

(d) fortynn 1:10

2. Substrat i buffer (a) 198 mg acetyltiocholinklorid (10 mM)

(b) q.s. til 100 ml med 0,05 M NaP04, pH 7,2

(reagens 1)

3. DTNB i buffer

(a) 19,8 mg 5,5-ditiobisnitrobenzosyre (DTNB) (0,5

mM)

(b) q.s. til 100 ml med 0.05M NaP04, pH 7,2 (reagens 1) 4. En 2mM forrådsoppløsning med testmedikament blir laget opp i et passende oppløsningsmiddel og q.s. til volum med 0,5 mM DTNB (reagens 3). Medikamenter blir fortynnet i serie (1:10) slik at den endelige konsentrasjonen (i kuvetten) er 10~<4>M og screenet for aktivitet. Hvis det er aktivitet blir IC50-verdier bestemt fra den hemmende aktiviteten til etterfølg-ende konsentrasjoner.

B. Vevsfremstilllng

Hannlige Wistar-rotter blir kappet hodet av, hjernene blir raskt fjernet, korpora striata dissekert fri, oppveid og homogenisert i 19 volumer (tilnærmet 7 mg protein/ml) med 0,05 M fosfatbuffer, pH 7,2 ved å anvende en Potter-Elvehjem-homogenisator. En 25 mikroliter prøve av homogenatet blir tilsatt 1 ml bærer av forskjellige konsentrasjoner med testmedikament og forinkubert i 10 minutter ved 37°C.

C. Analyse

Enz<y>maktivitet blir målt i Beckman DU-50-spektrofotometer. Denne metoden kan bli anvendt for ICsQ-bestemmelser og for måling av kinetiske konstanter.

Instrumentinnsti11 inger

Kinetikk Soft-Pac-modul #598273 (10)

Program #6 Kindata:

Kilde - Synlig

Bølgelengde - 412 nm

Sipper - ingen

Kuvetter - 2 ml kuvetter som anvender auto 6-samler Blindprøve - 1 for hver substratkonsentrasjon Intervalltid - 15 sekunder (15 eller 30 sekunder for kinetikk)

Samlet tid - 5 minutter (5 eller 10 minutter for kinetikk)

Plot - ja

Bredde - autoskala

Helling - økning

Resultater - ja (gir helling)

Faktor - 1

Reagensene blir tilsatt blindprøven og prøvekuvettene som følger:

Blindprøve: 0,8 ml fosfatbuffer/DTNB

0,8 ml buffer/substrat

Kontroll: 0,8 ml fosfatbuffer/DTNB/enzym

0,8 ml fosfatbuffer/substrat

Medikament: 0,8 ml fosfatbuffer/DTNB/medikamentenzym 0,8 ml fosfatbuffer/substrat

Blindverdiene blir bestemt for hver kjøring for å kontrollere ikke-enzymatisk hydrolyse av substrat og disse verdiene blir automatisk subtrahert av kindata-programmet s.om er til-gjengelig på kinetikk soft-pac-modulen. Dette programmet beregner også hastigheten på absorbansendringen til hver kuvette.

Til IC5Q- bestemmelser:

Substratkonsentrasjonen er 10 mM fortynnet 1:2 i analysen som gir endelig konsentrasjon på 5 mM. DTNB-konsentrasjonen er 0,5 mM og det gir 0,25 mM endelig konsentrasjon.

IC5Q-verdiene blir beregnet fra log-probit-analyse.

Resultater fra noen av forbindelsene i denne oppfinnelsen og fysostigmin (referanse) er presentert i tabell 1.

Hemming av h. lerneacetvlcholinesteraseaktlvitet

Denne utnyttelsen blir videre demonstrert ved evnen til disse forbindelsene å gjenopprette cholinerg manglende hukommelse i mørkeunngåelsesanalysen som blir beskrevet under.

Mørkeunngåelsesanalyse

I denne analysen blir mus undersøkt for deres evne til å huske en ubehagelig stimulus i løpet av en periode på 24 timer. En mus blir plassert i et kammer som inneholder en mørk avdeling; et sterkt skinnende lys driver musen til den mørke avdelingen der et elektrisk sjokk blir administrert gjennom metallplatene på gulvet. Dyret blir fjernet fra testapparatet og testet igjen 24 timer senere, for evnen til å huske det elektriske sjokket.

Hvis skopolamin, en anticholinerg som er kjent å forårsake hukommelsessvekkelse, blir administrert før dyrets begynnende eksponering til testkammeret, går dyret igjen inn i den mørke avdelingen kort etter at det blir plassert i testkammeret 24 timer senere. Denne effekten av skopolamin blir blokkert ved en aktiv testforbindelse, og resulterer i et større intervall før gjeninntreden inn i den mørke avdelingen.

Resultatene for den aktive forbindelsen er uttrykt som prosent av en gruppe dyr der effekten av skopolamin blir blokkert, som fastslått ved et øket intervall mellom dyret blir plassert i testkammeret og gjeninntreden i den mørke avdelingen.

Resultatene fra denne analysen og noen av forbindelsene i oppfinnelsen og de til tacrin og pilocarpin (referansefor-bindelser) er presentert i tabell 2.

Effektive mengder av forbindelsene fremstilt i foreliggende oppfinnelse kan bli administrert til et subjekt ved en hvilken som helst av en lang rekke metoder, f.eks. oralt som i kapsler eller tabletter, parenteralt i form av sterile oppløsninger eller suspensjoner, og i noen tilfeller intravenøst i form av sterile oppløsninger. Forbindelsene fremstilt i foreliggende oppfinnelse, selv om de er effektive i seg selv, kan bli formulert og administrert i form av deres farmasøytisk aksepterbare addisjonssalter når formålet er stabilitet, krystallisering, øket oppløselighet og lignende.

Foretrukkede farmasøytisk aksepterbare addisjonssalter inkluderer salter av uorganiske syrer slik som saltsyre, bromsyre, svovelsyre, salpetersyre, fosforsyre og perklor-syre; så vel som organiske syrer slik som maleinsyre, vinsyre, sitronsyre, eddiksyre, ravsyre, furmarsyre, oksalsyre og salisylsyre.

De aktive forbindelsene fremstilt i foreliggende oppfinnelse kan bli administrert oralt, f.eks. med et inert fortynningsmiddel eller en spiselig bærer. De kan bli innelukket i gelatinkapsler eller presset i tabletter. Når formålet er oral terapeutisk administrering, kan forbindelsene bli inkorporert'med eksipienter og anvendt i form av tabletter, trokeer, kapsler, eliksirer, suspensjoner, sirup, kjeks, tyggegummi o.l. Disse preparatene bør inneholde minst 0, 5% aktiv forbindelse, men kan variere avhengig av den spesielle form og kan passende være mellom 4Sé til ca. 75# av vekten til enheten. Mengden forbindelse som er tilstede i en slik sammensetning er slik at en passende dosering vil bli oppnådd. Foretrukkede sammensetninger og preparater blir fremstilt slik at en oral doseringsenhetsform inneholder mellom 1,0-300 mg aktiv forbindelse.

Tablettene, pillene, kapslene, trokeene o.l. kan også inneholde følgende ingredienser: et bindemiddel slik som mikrokrystallinsk cellulose, gummitragakant eller gelatin; en eksipient slik som stivelse eller laktose, et disinte-greringsmiddel slik som alginsyre, Primogel, maisstivelse og lignende; et smøremiddel slik som magnesiumstearat eller Sterotex; et glidemiddel slik som kolloidal silisiumdioksid; og et søtningsmiddel slik som sukrose eller sakkarin eller et aromamiddel slik som peppermynte, metylsalisylat eller appelsinaroma kan bli tilsatt. Når doseringsenhetsformen er en kapsel, kan den inneholde i tillegg til materialene av ovenfor nevnte type, en flytende bærer slik som fettolje. Andre doseringsenhetsformer kan inneholde andre forskjellige materialer som modifiserer den fysikalske formen til doseringsenheten, f.eks. som belegg. Således kan tabletter eller piller bli dekket med sukker, skjellakk eller andre enteriske beleggmidler. En sirup kan inneholde i tillegg til de aktive forbindelsene, sukrose som et søtningsmiddel og visse preservativer, farger og fargestoffer og aromaer. Materialer som blir anvendt i å fremstille disse forskjellige sammensetningene må være farmasøytisk rene og ikke-toksiske i de mengdene som blir anvendt.

De aktive forbindelsene kan bli inkorporert i en oppløsning eller suspensjon. Disse fremstillingene bør inneholde minst 0,156 av den forannevnte forbindelsen, men kan variere mellom 0,5 og ca. 30S£ av vekten derav. Mengden aktiv forbindelse i slike sammensetninger er slik at en passende dosering vil bli oppnådd. Foretrukkede sammensetninger blir fremstilt slik at en parenteral doseringsenhet inneholder mellom 0,5 til 100 mg aktiv forbindelse.

Oppløsningene eller suspensjonene kan også inkludere følgende komponenter; et sterilt fortynningsmiddel slik som vann til injeksjon, saltvannoppløsning, fikserte oljer, polyetylen-glykoler, glyserin, propylenglykol eller andre syntetiske oppløsningsmidler; antibakterielle midler slik som benzylalkohol eller metylparabener; antioksidanter slik som ascorbinsyre eller natriumbisulfItt; chelaterende midler slik som etylendiamintetraeddiksyre; bufferer slik som acetater, citrater eller fosfater og midler for justering av tonisitet slik som natriumklorid eller dekstrose.

Eksempler på forbindelsene i oppfinnelsen inkluderer: 1,2 ,3,3a,8,8a-heksahydro-cx-okso-l ,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, etylester; 1,2 ,3 ,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l ,3a,8-trimetyl-5-pyrrol [2 ,3-b]indoleddiksyre, n-butylester; 1,2 ,3 ,3a, 8,8a-heksahydro-oc-okso-l ,3a, 8-tr ime tyl-5-pyr roi [2,3-b]indoleddiksyre, fenylmetylester; 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, fenyletylester; 1,2 ,3,3a,8,8a-heksahydro-oc-okso-l ,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, isopropylester: 1,2 ,3,3a,8,8a-heksahydro-cx-okso-l ,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2 ,3-b]indoleddiksyre, 4-metoksyfenylmetylester;

1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, 4-klorfenyletylester;

1,2 ,3,3a,8,8a-heksahydro-cx-okso-l ,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2 ,3-b]indoleddiksyre, n-pentylester;

1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimety1-5-pyrroi[2,3-b]indoleddiksyre, n-heksylester;

1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimety1-5-pyrroi[2,3-b]indoleddiksyre, n-heptylester;

1,2,3 ,3a,8,8a-heksahydro-0(-okso-l ,3a,8-trimetyl-5-pyrrol [2,3-b]indoleddiksyre, n-oktylester;

1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, diisopropylamid;

1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, dietylamid; og

1,2,3 ,3a,8,8a-heksahydro-cx-okso-l ,3a,8-trimetyl-5-pyrrol [2,3-b]indoleddiksyre, N-etyl-N-fenylmetylamid.

Alle temperaturer er gitt celsius-grader ('C) dersom annet ikke er angitt.

Eksempel 1

5- brom- l. 2. 3. 3a. 8. 8a- heksahydro- l. 3a. 8- trimeltvlpvrrolf2. 3-blindol

Til en avkjølt (0°C) oppløsning med 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-l,3a,8-trimeltylpyrrol[2,3-b]indol (1,41 g) i metylenklorid (20 ml) ble tilsatt pyridin (1,41 ml) under en atmosfære med N2. Fast pyridiniumhydrobromidperbromid (2,23 g) ble tilsatt under omrøring til blandingen og den resulterende oppløs-ningen ble opprettholdt ved 0°C i 1 time. Blandingen ble tømt i vann (100 ml) og den vandige og organiske fasen ble separert. Den organiske fasen ble vasket to ganger med 50 ml porsjoner saltvann og 50 ml porsjoner med mettet natriumbi-karbonat og deretter med 50 ml saltvann. Etter tørking av den organiske fasen over Na2S04 og filtrering, ble oppløsnings-midlet fjernet under redusert trykk. Den resulterende oljen ble renset ved å anvende kolonnekronratografi på silikagel med 10% metanol i etylacetat som elueringsmiddel. Passende fraksjoner ble kombinert, inndampet og renset på nytt ved å anvende kolonnekromatografi på silikagel med 5% metanol i etylacetat som elueringsmiddel og ga 1,5 g 5-brom-l,2,3,3a,-8,8a-heksahydro-l,3a,8-trimeltylpyrrol[2,3-b]indol som en olje.

Analyse:

Eksempel 2

1. 2. 3. 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l, 3a. 8- trlmetyl- 5- pyrrolf 2. 3-blindoleddiksyre. etylester

Tetrametyletylendiamin (TMEDA) (2,3 ml) og s-butyllitium (1,3 M i cykloheksan, 11,7 ml) ble tilsatt til vannfri eter (8,0 ml) ved -78°C under nitrogen. En oppløsning med 5-brom-1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-l,3a,8-trimetylpyrrol[2,3-b]indol (3,57 g) i vannfri eter (10 ml) ble tilsatt den resulterende reaksjonsblandingen ved —78°C via kanyle og omrørt ved denne temperaturen i 1 time og ved -20°C i 1 time. Oppløsningen ble deretter tilsatt via kanyle til en -78°C oppløsning dietyl-oksalat (5,2 ml) i vannfri eter (30 ml) under N2. Den resulterende blandingen ble holdt ved -78°C i 30 min, -20°C i 2 timer og romtemperatur i 30 min. Mettet ammoniumklorid-oppløsning (10 ml) ble tilsatt og den organiske og vandige fasen separert. Den organiske fasen ble vasket to ganger med saltvann, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert under vakuum. Den rå resten ble renset ved å anvende preparativ høyeffektvæskekromatografi (EPLC), (silikagel, prøven påsatt og eluert med 2% metanol i etylacetat). Konsentrasjon av passende fraksjoner ga 1,6 g med 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, etylester, som en olje.

Analyse:

Eksempel 3

1. 2. 3, 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l, 3a. 8- trimetyl- 5- pyrroi f 2. 3-p1indoleddiksyre. n- butylester

Til en nitrogenrenset 100 ml 3 halset, rundbunnet flaske ble det tilsatt vannfri tetrahydrofuran (THF) (7,0 ml). Sek-butyllitium (1,3 M i cykloheksan, 8,9 ml) ble deretter tilsatt, oppløsningen avkjølt til —78°C og behandlet med TMEDA (1,6 ml; 11,0 mmol). En oppløsning av 5-brom-l,2,3,3a,-8,8a-heksahydro-l,3a,8-trimetylpyrrol[2,3-b]indol (2,50 g) i vannfri THF (6,0 ml) ble tilsatt via kanyle og blandingen omrørt ved -78°C i 1 1/2 time og -20°C i 1 time. Den resulterende oppløsningen ble deretter tilsatt via kanyle Til en oppløsning med nylig destillert dibutyloksalat (5,5 ml) i THF (9,0 ml) ved -78°C og beholdt ved denne temperaturen under omrøring i 1 time. Etter at oppløsningen får anledning til langsomt å komme til romtemperatur, blir mettet ammonium-kloridoppløsning (10 ml) tilsatt og oppløsningsmidlet fjernet under redusert trykk. Produktet ble renset ved preparativ HPLC (silikagel, eluert med 10Sé metanol i etylacetat). Passende fraksjoner ble kombinert og inndampet og ga 0,51 g av en olje, som ved triturering med heksan ga 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-oc-okso-1,3a, 8-tr ime tyl-5-pyr r ol [2 ,3-b] indol-eddiksyre, n-butylester, som et faststoff, smp. 56-61°C.

Analyse:

Eksempel 4

1. 2 . 3 . 3a. 8. 8a- heksahydro- Q(- okso- l . 3a. 8- trimetyl- 5- pyrrol f2 . 3-blindoleddiksyre. fenylmetylester

Til en avkjølt (0°C), omrørt oppløsning av 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indol-eddiksyre, etylester (0,5 g) i vannfri benzylalkohol (10 ml) ble det tilsatt, via sprøyte, titan(IV)etoksid (0,15 ml). Oppløsningen ble oppvarmet til romtemperatur og deretter tilbakestrømmet under N2 i 2 1/2 time. Reaksjonen syntes å være fullstendig ved tynnsjiktkromatografi (heretter kalt TLC) (silikagel, 10% metanol i etylacetat). Benzylalkoholen ble fjernet ved destillering under høyvakuum. Resten ble oppløst I etylacetat (80 ml) og vasket suksessivt med to 50 ml porsjoner med mettet vandig NH4CI, to 50 ml porsjoner mettet vandig N2LHCO3 og to 50 ml porsjoner saltvann. Den organiske fasen ble tørket (Na2S04), filtrert og oppløsnings-midlet fjernet under vakuum i en rotasjonsinndamper. Resten, en olje, ble renset ved å anvende preparativ HPLC (silikagel, 5Sé metanol i etylacetat som det påsatte oppløsningsmidlet og elueringsmidlet). De passende fraksjonene ble kombinert og oppløsningsmidlene ble fjernet under redusert trykk og ga 0,52 g av en olje, som størknet ved henstand og ga 1,2,3,3a,-8,8a-heksahydro-cx-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indol-eddiksyre, fenylmetylester, smp. 53-57°C.

Analyse:

Eksempel 5

1. 2. 3, 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l. 3a. 8- trlmetyl- 5- pyrrolf2. 3-blIndoleddiksyre. fenyletylester

Til en avkjølt (0°C) oppløsning 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, etylester (0,76 g) i vannfri fenyletylalkohol (18,1 ml) ble det tilsatt titan(IV)etoksid (0,22 ml) via sprøyte under nitrogenatmosfære. Oppløsningen ble oppvarmet til romtemperatur og varmet til rett under tilbakestrømming i 3 timer. Oppløsningen ble deretter avkjølt til 0°C og mettet NH4CI-oppløsning ble tilsatt langsomt inntil en utfelling hadde dannet seg. Metylenklorid (200 ml) ble deretter tilsatt og blandingen ekstrahert to ganger med 100 ml porsjoner mettet vandig NH4CI-oppløsning, to ganger med 100 ml mettet vandig NaHC03 og en gang med 100 ml saltvann. De organiske ekstraktene ble tørket (Na2SC<4), filtret og oppløsningsmidlet fjernet på rotasjonsinndamperen. Fenyletylalkohol ble deretter fjernet ved destillasjon under høyvakuum. Den resulterende resten ble renset ved å anvende preparativ HPLC (silikagel, 4# metanol i etylacetat som det pålagte oppløsningsmidlet og elueringsmidlet). Passende fraksjoner ble kombinert, og oppløsnings-midlet fjernet og ga 0,72 g med 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrroi[2,3-b]indoleddiksyre, fenyletylester, som en olje.

Analyse:

Eksempel 6

1. 2. 3. 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l. 3a. 8- trimetyl- 5- pyrroi f2. 3-blindoleddiksyre. isopropylester

Til en avkjølt (0°C), omrørt oppløsning 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-ot-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol [2,3-b] indoleddik-syre, etylester (0,68 g) i vannfri isopropylalkohol (10,2 ml) ble det tilsatt titan(IV)etoksid (0,17 ml) via sprøyte under en nitrogenatmosfære. Oppløsningen ble oppvarmet til romtemperatur og tilbakestrømmet i 6,5 timer. Isopropylalko-holen ble fjernet under redusert trykk og resten oppløst i etylacetat (100 ml). Oppløsningen ble vasket to ganger med 50 ml porsjoner mettet vandig NH4C1-oppløsning, to ganger med 50 ml porsjoner mettet vandig NaHCOs-oppløsning og en gang med 50 ml saltvann. De organiske og vandige fasene ble separert og den organiske fasen tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert til en olje. Den rå blandingen ble renset ved å anvende preparativ HPLC (silikagel, 35Sé etylacetat i diklormetan som det påførte oppløsningsmidlet og elueringsmidlet). Passende fraksjoner ble kombinert og oppløsningsmidlene fjernet under redusert trykk og det ga 0,54 g 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, isopropylester, som en olje.

Analyse:

Eksempel 7

1. 2. 3. 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l. 3a. 8- trimety1- 5- pyrrol f2. 3-b~ l indoleddiksyre. diisopropylamid

Til en oppløsning av TMEDA (2,85 ml) i vannfri eter (5,0 ml) ble det tilsatt ved —78°C under Ng-atmosfære, sek-butyllitium (14,5 ml). Den resulterende oppløsningen ble deretter behandlet med en oppløsning av 5-brom-l,2,3,3a,8,8a-heksahydro-l,3a,8-trimetylpyrrol[2,3-b]indol (3,80 g) i vannfri eter (10 ml). Blandingen ble holdt ved denne temperaturen i 3 timer og deretter tilsatt en oppløsning diisopropylamino-oksoeddiksyre, etylester (7,5 g) i vannfri eter (15 ml). Etter omrøring ved -78°C i 4 timer, ble reaksjonsblandingen brått avkjølt med 50 ml vandig NB^Cl-oppløsning. De organiske og vandige fasene ble separert og den organiske fasen ble vasket suksessivt med mettet vandig naHC03 og saltvann. Den organiske fasen ble tørket (NagSO^, filtrert og konsentrert til en olje som ble renset ved HPCL (silikagel, 1056 MeOH i etylacetat som elueringsmiddel). 2,8 g 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-cx-okso-l ,3a,8-trimetyl-5-pyrrol [2 ,3-b] indoleddik-syre, diisopropylamid ble oppnådd som et skum. Triturering med heksan og tørking under redusert trykk ga en analytisk ren prøve.

Analyse:

Eksempel 8

1. 2. 3, 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l. 3a. 8- trimetvi- 5- pyrrol f2. 3-blIndoleddiks<y>re

Til en 0°C oppløsning med 1,2 , 3,3a,8,8a-heksahydro-oc-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrroi[2,3-b]indoleddiksyre, etylester (0,25 g) i 95SÉ etanol (1,0 ml) ble det tilsatt en oppløsning med 0,14 g KOH i vann (1,0 ml). Blandingen ble omrørt ved 0°C i 30 min og deretter tilbakestrømmet i 4 timer. Oppløsningen ble avkjølt, etanol ble fjernet under redusert trykk og den gjenværende vandige resten ble fortynnet med vann (3,0 ml), avkjølt til 0"C og nøytralisert med en 1,0 N vandig HC1-oppløsning. Vannet ble deretter fjernet og resten ble tatt opp i diklormetan og vasket med vann for å fjerne et hvert ureagert utgangsmateriale. Den vandige vasken ble deretter konsentrert og ga 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, som et faststoff.

Eksempel 9

1. 2. 3. 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l. 3a. 8- trimetyl- 5- pyrrol[ 2 . 3-blindoleddiksyre. 4- metoksyfenylmetylester

Til en avkjølt (0°C) oppløsning 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, etylester (2,07 g) i vannfri 4-metoksyfenylmetylalkohol (40 ml) ble det tilsatt titan(IV)etoksid (0,54 ml) med omrøring under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet med tilbakestrømming i 8 timer. 4-metoksyfenylmetylalkohol ble fjernet ved destillering under høyvakuum og resten ble oppløst i diklormetan (200 ml). Resten ble vasket suksessivt med to 100 ml porsjoner mettet vandig NB^Cl-oppløsning, to 100 ml porsjoner metter vandig NaHCOs-oppløsning og med saltvann, tørket (NagSO^, filtrert og inndampet for å gi en olje. Oljen ble renset ved preparativ HPCL (silikagel, 3% metanol i etylacetat som det påsatte oppløsningsmidlet og elueringsmidlet). En annen preparativ HPLC-rensing ved å anvende 3% metanol i diklormetan, ga 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, 4-metoksyfenylmetylester (0,84 g) som en olje.

Analyse:

Eksempel 10

1. 2 . 3, 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l . 3a. 8- trimetyl- 5- pyrrol [ 2 . 3 - blindoleddiksyre. 4- klorfenyletylester

Til en avkjølt (0°C) oppløsning med 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, etylester (1,18 g) i 4-klorfenyletylalkohol (31 ml) ble det tilsatt titan(IV)etoksid (0,30 ml) under en nitrogenatmosfære med omrøring. Blandingen ble forsiktig oppvarmet uten tilbakestrømmlng I 4 timer. 4-klorfenyletylalkohol ble fjernet ved destillering under høyvakuum og den rå resten ble oppløst i diklormetan (20 ml) og vasket suksessivt med to 100 ml porsjoner mettet ammoniumkloridoppløsning, to 100 ml porsjoner mettet natriumbikarbonatoppløsning og 100 ml saltvann. Den organiske fasen ble tørket (NagSC^), filtrert, og renset ved å anvende preparativ HPLC (silikagel, 3% metanol i diklormetan som det påsatte oppløsningsmiddel og elueringsmiddel). De passende fraksjonene ble kombinert og oppløsningsmidlet fjernet under vakuum. Konsentrasjonen av passende fraksjoner ga 0,87 g av 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-cx-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, 4-klorfenyletylester som en olje.

Analyse:

Eksempel 11

1. 2. 3, 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l. 3a. 8- trimetyl- 5- pyrroir2. 3-blindoleddiksyre. n- pentylester

En oppløsning av 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, etylester (2,89 g) i 1-pentanol (61 ml) "ble oppvarmet ved 0°C under en nitrogenatmosfære med titan(IV)etoksid (0,80 ml). Oppløsningen ble oppvarmet til romtemperatur og deretter langsomt oppvarmet i 2,5 timer ved å beholde temperaturen mellom 60-80°C. Overskudd 1-pentanol ble fjernet ved destillering under høyvakuum. Resten ble vasket suksessivt med 50 ml mettet vandig NH4CI-oppløsning, to 100 ml porsjoner mettet vandig NaHC03-oppløsning og 50 ml saltvann. Den organiske fasen ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert for å gi en olje som ble renset ved kromatografi ved å anvende preparativ HPLC (silikagel, 5# metanol i etylacetat). De passende fraksjonene ble kombinert og konsentrert under vakuum og ga 2,2 g 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, n-pentylester som en olje.

Analyse:

Eksempel 12

1. 2. 3. 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l. 3a. 8- trlmetyl- 5- pyrrolf2 .3-blindoleddiksyre. n- heksylester

Til en omrørt oppløsning med 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, etylester (3,0

g) i n-heksylalkohol (73,6 ml) ble det ved 0°C tilsatt under en nitrogenatmosfære, titan(IV)etoksid (0,83 ml). Blandingen

ble oppvarmet til romtemperatur og oppvarmet i 2 timer og temperaturen ble beholdt mellom 60-80°C. Overskudd n-heksylalkohol ble fjernet ved destillering under høyvakuum. Resten ble tatt opp i etylacetat, vasket to ganger med 100 ml

porsjoner mettet vandig NB^Cl-oppløsning, to ganger med 100 ml porsjoner mettet vandig NaHCC^-oppløsning og en gang med 100 ml saltvann. Den organiske fasen ble tørket (NaS04), filtrert, og konsentrert for å gi en olje som ble renset ved å anvende preparativ HPLC (silikagel, 3% metanol i diklormetan som det påførte oppløsningsmiddel og elueringsmiddel). De passende fraksjonene ble kombinert og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og ga 2,93 g 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddik-syre, n-heksylester, som en olje.

Analyse:

Eksempel 13

1. 2 . 3. 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l. 3a. 8- trimetyl- 5- pyrrolf2. 3-blindoleddiksyre. dietylamid

Til en omrørt (-78°C) oppløsning med sek-butyllitium (1,3 M i cykloheksan, 6,6 ml) og TMEDA (1,3 ml) 1 vannfri eter (4,0 ml) ble det tilsatt via kanyle under en Ng-atmosfaere en oppløsning 5-brom-l,2,3,3a,8,8a-heksahydro-l,3a,8-trimetyl-pyrrol[2,3-b]indol (1,69 g), i vannfri eter (4,0 ml). Oppløsningen ble omrørt ved -78°C i 2,5 timer og deretter tilsatt via kanyle, under N2, til en omrørt (-78°C) oppløs-ning med N,N-dietylamino-oksoeddlksyre, etylester (3,6 g) i dietyleter (8,0 ml). Oppløsningen ble omrørt ved -78°C i 3 timer og fikk gradvis anledning til å oppvarmes til romtemperatur i løpet av 2 timer. Blandingen ble brått avkjølt ved tilsetning av en vandig oppløsning mettet NH4CI. Den organiske fasen ble separert og vasket med to 50 ml porsjoner av en vandig oppløsning mettet NaHC03, med saltvann og tørket (Na2S04). Den rå resten ble renset ved å anvende preparativ HPLC (silikagel, påført og eluert med 3% metanol i diklormetan). De passende fraksjonene ble kombinert og konsentrert til et skum som størknet ved triturering med heksan, og det ga 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, dietylamid.

Analyse:

Eksempel 14

1. 2. 3. 3a. 8. 8a- heksahydro- ot- okso- l , 3a. 8- tr ime tyl- 5- pyr r ol f 2 . 3-b" I indoleddiksyre. n- oktylester. citratsalt

Til en oppløsning 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, etylester (1,57 g) i vannfri n-oktanol (41 ml) ble behandlet ved 0°C under nitrogenatmosfære med titan(IV)etoksid (0,58 ml). Oppløs-ningen ble tilbakestrømmet i 2,5 timer. Overskudd n-oktanol ble fjernet ved destillering under vakuum, resten ble oppløst i etylacetat og vasket suksessivt med 50 ml mettet vandig ammoniumklorldoppløsning, to 50 ml porsjoner mettet vandig natriumbikarbonatoppløsning og 50 ml saltvann. Den organiske fasen ble tørket (NagSo^, filtrert og konsentrert, forbindelsen ble renset ved preparativ HPLC (silikagel, ved å anvende 3% metanol i etylacetat som påføringsoppløsnlngs-middel og elueringsmiddel). De passende fraksjonene ble kombinert og konsentrert til en olje. Oljen (0,65 mg) ble oppløst i vannfri eter (10 ml) og behandlet under nitrogen med en ekvivalent av en 0,1 M eterisk sitronsyreoppløsning. Det faste stoffet ble filtrert, triturert med heksan og tørket I vakuumovn i 12 timer og ga 0,45 g 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trlmetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddik-syre, n-oktylester, citratsalt, smp. 96-103°C.

Analyse:

Eksempel 15

1, 2 . 3 , 3a. 8. 8a- heksahydro- a- okso- l, 3a. 8- trlmetyl- 5- pyrroir2,3-blindoleddiksyre. n- heptylestercitratsalt

Til en omrørt 0°C oppløsning med 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, etylester (2,64 g) i n-heptanol (73 ml) ble det tilsatt under nitrogenatmosfære, titan(IV)etoksid (1,0 ml). Oppløsningen ble oppvarmet (60-100°C) under Ng i 2 timer. Reaksjonen synes å være fullstendig ved TLC og overskudd n-heptanol ble fjernet ved destillering under høyvakuum. Resten ble oppløst i etylacetat, vasket en gang med 50 ml mettet vandig NH4CI, to ganger med 50 ml porsjoner mettet vandig natriumbikarbonat-oppløsning og en gang med 50 ml saltvann. Den organiske fasen ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert til en olje som ble renset ved preparativ HPLC (ved å anvende silikagel, 3% metanol i etylacetat som påført elueringsmiddel og oppløs-ningsmiddel). En olje (2,98 g) ble oppnådd. Dannelse av et analytisk rent citratsalt ble gjennomført ved å behandle 0,65 g av oljen i vannfri eter (10 ml) med en 0,1 M eteroppløsning av sitronsyre (1,0 ekvivalenter). Det faste stoffet ble filtrert under en nltrogenatmosfære og tørket i en vakuumovn i nærvær av NaOH-pellets. Det faste stoffet ble deretter triturert med heksan, filtrert og tørket under høyvakuum i 12 timer og ga 0,63 g 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indoleddiksyre, n-heptylestercitratsalt, smp. 93-100°C.

Analyse:

Eksempel 16

1. 2. 3. 3a. 8. 8a- heksahydro- cx- okso- l. 3a. 8- trimetyl- 5- pyrrol f 2 . 3-blIndoleddiksyre. N- etyl- N- fenylmetylamidcitratsaltmonohydrat

Til en omrørt (-78°C) oppløsning vannfri dietyleter (5,0 ml); TMEDA (1,8 ml) og sek-butyllitium (11,8 ml) ble det tilsatt

under en nitrogenatmosfære en oppløsning med 5-brom-l,2,3,-3a,8,8a-heksahydro-cx-okso-l ,3a,8-trimetyl-5-pyrrol [2,3-b]indol (2,30 g) i vannfri eter (5,0 ml). Oppløsningen ble omrørt ved —78°C i 2,5 timer og tilsatt via kanyle til en oppløsning N-etyl-N-fenylmetylamino-oksoeddiksyre, etylester (5,8 g) i vannfri eter (10 ml) ved -78°C under nitrogen. Den resulterende blandingen ble omrørt ved denne temperaturen i 4,5 timer og fikk deretter gradvis anledning til å oppvarmes til romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble brått avkjølt ved tilsetning av en mettet vandig oppløsning ammoniumklorid (100 ml). Den organiske fasen ble separert, vasket med mettet vandig natriumbikarbonatoppløsning (2 x 50 ml) og saltvann (50 ml), tørket (NagSO^, filtrert og konsentrert til en olje. Materialet ble renset ved preparativ HPLC (silikagel, 5% metanol i diklormetan som påført oppløsningsmiddel og elueringsmiddel).

Citratsaltet av dette materialet ble fremstilt ved å oppløse oljen (1,15 g) i eter (10 ml) og tilsetning av 1,0 ekvivalent sitronsyre i form av en 0,1 M oppløsning eterisk sitronsyre. Et faststoff ble dannet, som ble filtrert og tørket i 2 timer i en vakuumovn i nærvær av natriumhydroksidpellets. Det faste stoffet ble triturert med dietyleter og tørket i en tørke-pistol under vakuum i 12 timer og det ga 1,1 g 1,2,3,3a,8,8a-heksahydro-a-okso-1,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indol-eddiksyre, N-etyl-N-fenylmetylamidcltratsaltmonohydrat, som et faststoff, smp. 94-120°C.

Analyse:

Claims

1. Analogifremgangsmåte for fremstilling av en terapeutisk aktiv forbindelse med formel (I): der X er -0—, N-laverealkyl eller N-fenyllaverealkyl eventuelt substituert med laverealkoksy eller halogen; Rj er hydrogen, C^- C^ q alkyl, fenyllaverealkyl; R2 er laverealkyl; R3 er laverealkyl; R4 er laverealkyl; Y er hydrogen eller halogen eller de farmasøytiske aksepterbare syreaddisjonssaltene derav, og der de kan anvendes, karakterisert ved at den omfatter: a) reagering av en forbindelse med formel (IV) med et dialkyloksalat med formel (VII) der R er laverealkyl i nærvær av N,N,N',N'-tetrametyletylendiamin og sek-butyllitium, for å oppnå en forbindelse med formel (I) der R^ har samme betydning som R over, b) valgfri reagering av en forbindelse med formel (I) der Ri er laverealkyl, med titanetoksid og en alkohol med formel R5-OH, der R5 er C^-Cjo alkyl, fenyllaverealkyl som eventuelt er substituert med laverealkoksy eller halogen, for å oppnå en forbindelse med formel (I), der R^ har samme betydning som R5 over, c) reagering av en forbindelse med formel (IV) der R2, R3 og R4 er som definert ovenfor med et blandet oksalatesteramid med formel (VIII) der R er hydrogen og R<6> og R<7> uavhengig av hverandre er hydrogen, laverealkyl eller fenyllaverealkyl i nærvær av et alkyllitium og N,N,N',N<*->tetrametyletylendiamin i et eterisk oppløsningsmiddel for å oppnå en forbindelse med formel (I) der X er N-laverealkyl eller N-fenyllaverealkyl og R^ er laverealkyl eller fenyllaverealkyl, og eventuell reagering av en forbindelse med formel (I) som oppnådd i trinnene a) eller b), med et overskudd av en sterk base, for å gi en forbindelse med formel (I), der er hydrogen.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1 der R2, R3 og R4 er laverealkyl og Y er hydrogen, i fri form eller i saltform, karakterisert ved at man går ut fra tilsvarende utgangsmaterialer.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 2 der X er -0- og R^ er alkyl eller fenyllaverealkyl, eventuelt substituert med laverealkoksy eller halogen, i fri form eller i saltform, karakterisert ved at man går ut fra tilsvarende utgangsmaterialer.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 3 der R2, R3 og R4 hver er metyl, i fri form eller i saltform, karakterisert ved at man går ut fra tilsvarende utgangsmaterialer.

5- Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av 1,2,3,3a,8,-8a-heksahydro-oc-okso-l, 3a ,8-trimetyl-5-pyrrol [2 ,3-b] indol-eddiksyre-n-butylester, karakterisert ved at man går ut fra tilsvarende utgangsmaterialer.

6. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av 1,2,3,3a,8,-8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b] indol-eddiksyre-n-pentylester, karakterisert ved at man går ut fra tilsvarende utgangsmaterialer.

7. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av 1,2,3,3a,8,-8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrrol[2,3-b]indol-eddiksyre-fenylmetylester, karakterisert ved at man går ut fra tilsvarende utgangsmaterialer.

8. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av 1,2,3,3a,8,-8a-heksahydro-a-okso-l,3a,8-trimetyl-5-pyrroi[2,3-b]indol-eddiksyre-fenyletylester, karakterisert ved at man går ut fra tilsvarende utgangsmaterialer.