NO175826B - Mikrobiologisk fremgangsmåte ved fremstilling av agrarkjemisk anvendelige virkestoffer, fremstilte forbindelser, anvendelsen av disse og biologisk rene kulturer av sorangium cellulosum som anvendes i fremgangsmåten - Google Patents
Mikrobiologisk fremgangsmåte ved fremstilling av agrarkjemisk anvendelige virkestoffer, fremstilte forbindelser, anvendelsen av disse og biologisk rene kulturer av sorangium cellulosum som anvendes i fremgangsmåten Download PDFInfo
- Publication number
- NO175826B NO175826B NO893623A NO893623A NO175826B NO 175826 B NO175826 B NO 175826B NO 893623 A NO893623 A NO 893623A NO 893623 A NO893623 A NO 893623A NO 175826 B NO175826 B NO 175826B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- dsm
- sorangium cellulosum
- soraphen
- methanol
- column
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 33
- 241000862997 Sorangium cellulosum Species 0.000 title claims description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title description 6
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 title description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 70
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 55
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 27
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 27
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 24
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 22
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 22
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 12
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 4
- 239000003905 agrochemical Substances 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 3
- 150000002678 macrocyclic compounds Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims 3
- 230000008570 general process Effects 0.000 claims 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 249
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 61
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 53
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 48
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 32
- 101150041968 CDC13 gene Proteins 0.000 description 32
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 32
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 30
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 27
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 25
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 25
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 23
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 21
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 18
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 18
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 17
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 15
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 15
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000004026 adhesive bonding Methods 0.000 description 11
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 11
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000862998 Polyangium Species 0.000 description 10
- 241001532577 Sorangium Species 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 10
- WPMGNXPRKGXGBO-OFQQMTDKSA-N soraphen A Chemical compound C1([C@H]2OC(=O)[C@@H](C)[C@@]3(O)O[C@@H]([C@H](/C=C/[C@@H](OC)[C@@H](OC)CCCC2)C)[C@@H](C)[C@H](O)[C@H]3OC)=CC=CC=C1 WPMGNXPRKGXGBO-OFQQMTDKSA-N 0.000 description 10
- WPMGNXPRKGXGBO-UHFFFAOYSA-N soraphen A1alpha Natural products COC1C(O)C(C)C(C(C=CC(OC)C(OC)CCCC2)C)OC1(O)C(C)C(=O)OC2C1=CC=CC=C1 WPMGNXPRKGXGBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 9
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 8
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 8
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 8
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 7
- 239000007179 vy/2 agar Substances 0.000 description 7
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 7
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 6
- -1 acrylic ester Chemical class 0.000 description 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 6
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 6
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 6
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- WDYVUKGVKRZQNM-UHFFFAOYSA-N 6-phosphonohexylphosphonic acid Chemical compound OP(O)(=O)CCCCCCP(O)(O)=O WDYVUKGVKRZQNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 5
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 5
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000220225 Malus Species 0.000 description 4
- 241000863434 Myxococcales Species 0.000 description 4
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 4
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- JHIVVAPYMSGYDF-UHFFFAOYSA-N cyclohexanone Chemical compound O=C1CCCCC1 JHIVVAPYMSGYDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 4
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 3
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical group OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 3
- 241000036848 Porzana carolina Species 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 3
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-M hexanoate Chemical compound CCCCCC([O-])=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 3
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 2-METHOXYETHANOL Chemical group COCCO XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 2
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 2
- 241001465180 Botrytis Species 0.000 description 2
- 229910021532 Calcite Inorganic materials 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 2
- 241001157813 Cercospora Species 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N N-Pentanol Chemical compound CCCCCO AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 241000233614 Phytophthora Species 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 241000221300 Puccinia Species 0.000 description 2
- 241001361634 Rhizoctonia Species 0.000 description 2
- 241000813090 Rhizoctonia solani Species 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 2
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- MVPPADPHJFYWMZ-UHFFFAOYSA-N chlorobenzene Chemical compound ClC1=CC=CC=C1 MVPPADPHJFYWMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N hexan-1-ol Chemical compound CCCCCCO ZSIAUFGUXNUGDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000003641 microbiacidal effect Effects 0.000 description 2
- 229940124561 microbicide Drugs 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 2
- 238000013379 physicochemical characterization Methods 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000151 polyglycol Polymers 0.000 description 2
- 239000010695 polyglycol Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 2
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000004546 suspension concentrate Substances 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N (3-hexadecanoyloxy-2-hydroxypropyl) 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 description 1
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- OCJBOOLMMGQPQU-UHFFFAOYSA-N 1,4-dichlorobenzene Chemical compound ClC1=CC=C(Cl)C=C1 OCJBOOLMMGQPQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010063409 Acarodermatitis Diseases 0.000 description 1
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 description 1
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 description 1
- 241000223600 Alternaria Species 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 244000099147 Ananas comosus Species 0.000 description 1
- 235000007119 Ananas comosus Nutrition 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 241000235349 Ascomycota Species 0.000 description 1
- 244000003416 Asparagus officinalis Species 0.000 description 1
- 235000005340 Asparagus officinalis Nutrition 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 1
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 1
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000123650 Botrytis cinerea Species 0.000 description 1
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 description 1
- 244000056139 Brassica cretica Species 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 1
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 1
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 1
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 1
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 235000012766 Cannabis sativa ssp. sativa var. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000012765 Cannabis sativa ssp. sativa var. spontanea Nutrition 0.000 description 1
- 241000723346 Cinnamomum camphora Species 0.000 description 1
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- 241000675108 Citrus tangerina Species 0.000 description 1
- 240000000560 Citrus x paradisi Species 0.000 description 1
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 1
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 1
- 240000007154 Coffea arabica Species 0.000 description 1
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 1
- 240000000491 Corchorus aestuans Species 0.000 description 1
- 235000011777 Corchorus aestuans Nutrition 0.000 description 1
- 235000010862 Corchorus capsularis Nutrition 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- 241000219112 Cucumis Species 0.000 description 1
- 235000015510 Cucumis melo subsp melo Nutrition 0.000 description 1
- 235000009849 Cucumis sativus Nutrition 0.000 description 1
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 1
- 241000219122 Cucurbita Species 0.000 description 1
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 1
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 1
- 241000371644 Curvularia ravenelii Species 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 1
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 1
- 241001602880 Delos Species 0.000 description 1
- 241000221787 Erysiphe Species 0.000 description 1
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- 241001181537 Hemileia Species 0.000 description 1
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000043261 Hevea brasiliensis Species 0.000 description 1
- 235000008694 Humulus lupulus Nutrition 0.000 description 1
- 244000025221 Humulus lupulus Species 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000003228 Lactuca sativa Nutrition 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- 241000044443 Lasiacis Species 0.000 description 1
- 240000004322 Lens culinaris Species 0.000 description 1
- 235000014647 Lens culinaris subsp culinaris Nutrition 0.000 description 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 244000081841 Malus domestica Species 0.000 description 1
- 241000361919 Metaphire sieboldi Species 0.000 description 1
- 241001518729 Monilinia Species 0.000 description 1
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 description 1
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine Chemical compound O=NN(C)C(=N)N[N+]([O-])=O VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- IGFHQQFPSIBGKE-UHFFFAOYSA-N Nonylphenol Natural products CCCCCCCCCC1=CC=C(O)C=C1 IGFHQQFPSIBGKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 1
- 241000233654 Oomycetes Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 240000001090 Papaver somniferum Species 0.000 description 1
- 235000008753 Papaver somniferum Nutrition 0.000 description 1
- 241000315044 Passalora arachidicola Species 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 244000025272 Persea americana Species 0.000 description 1
- 235000008673 Persea americana Nutrition 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 240000003889 Piper guineense Species 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 241000758706 Piperaceae Species 0.000 description 1
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 1
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 1
- 241000233626 Plasmopara Species 0.000 description 1
- 241001281803 Plasmopara viticola Species 0.000 description 1
- 241000896242 Podosphaera Species 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 240000005809 Prunus persica Species 0.000 description 1
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 description 1
- 241000221301 Puccinia graminis Species 0.000 description 1
- 241000231139 Pyricularia Species 0.000 description 1
- 241000220324 Pyrus Species 0.000 description 1
- 235000004443 Ricinus communis Nutrition 0.000 description 1
- 240000007651 Rubus glaucus Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 description 1
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 description 1
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- 244000082988 Secale cereale Species 0.000 description 1
- 239000004113 Sepiolite Substances 0.000 description 1
- 241001533598 Septoria Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- OJOVKWRNDCVECM-SQNIBIBYSA-N Soraphen O Chemical compound CCC(=O)C[C@H](O)[C@@H](OC)CCCC[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 OJOVKWRNDCVECM-SQNIBIBYSA-N 0.000 description 1
- 239000004147 Sorbitan trioleate Substances 0.000 description 1
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 1
- 240000003829 Sorghum propinquum Species 0.000 description 1
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 1
- 235000009337 Spinacia oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 244000300264 Spinacia oleracea Species 0.000 description 1
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 1
- 244000125380 Terminalia tomentosa Species 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 241000510929 Uncinula Species 0.000 description 1
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000078534 Vaccinium myrtillus Species 0.000 description 1
- 241000317942 Venturia <ichneumonid wasp> Species 0.000 description 1
- 241000228452 Venturia inaequalis Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 239000012675 alcoholic extract Substances 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 description 1
- 229960000892 attapulgite Drugs 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003785 benzimidazolyl group Chemical class N1=C(NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021029 blackberry Nutrition 0.000 description 1
- 239000011449 brick Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 description 1
- 229960000846 camphor Drugs 0.000 description 1
- 229930008380 camphor Natural products 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000001364 causal effect Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000016213 coffee Nutrition 0.000 description 1
- 235000013353 coffee beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000001427 coherent effect Effects 0.000 description 1
- 229940125890 compound Ia Drugs 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001064 degrader Substances 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- GUJOJGAPFQRJSV-UHFFFAOYSA-N dialuminum;dioxosilane;oxygen(2-);hydrate Chemical compound O.[O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3].O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O GUJOJGAPFQRJSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940117389 dichlorobenzene Drugs 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical group OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000010459 dolomite Substances 0.000 description 1
- 229910000514 dolomite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 235000020774 essential nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 150000002168 ethanoic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000001640 fractional crystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 150000002373 hemiacetals Chemical group 0.000 description 1
- 239000011487 hemp Substances 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N iso-butyl acetate Natural products CC(C)COC(C)=O GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M isocaproate Chemical compound CC(C)CCC([O-])=O FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid methyl ester Natural products COC(=O)CC(C)C OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 description 1
- 235000020044 madeira Nutrition 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000002855 microbicide agent Substances 0.000 description 1
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003750 molluscacide Substances 0.000 description 1
- 230000002013 molluscicidal effect Effects 0.000 description 1
- 229910052901 montmorillonite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- YKYONYBAUNKHLG-UHFFFAOYSA-N n-Propyl acetate Natural products CCCOC(C)=O YKYONYBAUNKHLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005645 nematicide Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- SNQQPOLDUKLAAF-UHFFFAOYSA-N nonylphenol Chemical compound CCCCCCCCCC1=CC=CC=C1O SNQQPOLDUKLAAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 1
- UYDLBVPAAFVANX-UHFFFAOYSA-N octylphenoxy polyethoxyethanol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(OCCOCCOCCOCCO)C=C1 UYDLBVPAAFVANX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052625 palygorskite Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 235000021017 pears Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 1
- 235000021018 plums Nutrition 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 229940090181 propyl acetate Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000008262 pumice Substances 0.000 description 1
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- 235000021013 raspberries Nutrition 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229910052624 sepiolite Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019355 sepiolite Nutrition 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- RPACBEVZENYWOL-XFULWGLBSA-M sodium;(2r)-2-[6-(4-chlorophenoxy)hexyl]oxirane-2-carboxylate Chemical compound [Na+].C=1C=C(Cl)C=CC=1OCCCCCC[C@]1(C(=O)[O-])CO1 RPACBEVZENYWOL-XFULWGLBSA-M 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- WPMGNXPRKGXGBO-AKNGRICVSA-N soraphen a Chemical compound C1([C@H]2OC(=O)[C@@H](C)[C@]3(O)O[C@@H]([C@H](/C=C/[C@@H](OC)[C@@H](OC)CCCC2)C)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H]3OC)=CC=CC=C1 WPMGNXPRKGXGBO-AKNGRICVSA-N 0.000 description 1
- 235000019337 sorbitan trioleate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000391 sorbitan trioleate Drugs 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 235000020354 squash Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 235000021012 strawberries Nutrition 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 238000012982 x-ray structure analysis Methods 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/01—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing oxygen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/181—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system, e.g. Salinomycin, Septamycin
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/30—Fuel from waste, e.g. synthetic alcohol or diesel
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører agrarkjemisk anvendbare makro-cykliske virkestoffer med formel I, mikrobiologisk fremgangsmåte ved deres fremstilling, midler inneholdende virkestoffene, biologiske renkulturer og anvendelsen av virkestoffene ved bekjempelse og forebyggelse av plantesykdommer .
De makrocykliske virkestoffer er karakterisert ved formel I
hvor den makrocykliske ring enten er mettet eller valgfritt inneholder i 8,9-stilling eller i 9,10-stilling eller i 14,15-stilling en dobbeltbinding etter følgende substituentkombinasjon, og substituentene Ri-Rs, A, B, X og Y foreligger i følgende kombinerte betydninger:
Oppfinnelsen vedrører også fremgangsmåte ved fremstilling av forbindelser med formel I hvor den makrocykliske ring enten er mettet eller valgfritt inneholder i 8,9-stilling eller i 9,10-stilling eller i 14,15-stilling en dobbeltbinding etter følgende substituentkombinasjon, og substituentene Rx-R5, A, B, X og Y foreligger i følgende kombinerte betydninger: Disse 32 forbindelser fremstilles ved mikrobiologisk kultivering som angitt i krav 3's karakteriserende del av Myxo-bakterier fra Sorangium/Polyangium-gruppen av hvilke de alle eller delvis, avhengig av den aktuelle stamme, produseres i forskjellige forholdstall. Felles for alle stammer er produksjonen av forbindelse A som et av hovedproduktene. Forbindelsene med formel I benevnes her og i det følgende "Soraphener", altså benevnes forbindelsene i ovenstående tabell "Soraphen A" til "Soraphen a".
Oppfinnelsen vedrører især seks nye mikroorganismestammer av de cellulosespaltende Myxo-bakterier fra Sorangium/ Polyangium-gruppen som forekommer, som kjent, hyppig i jord-prøver, plantemateriale eller i dyregjødsel. Karakteristisk for denne taksonomisk ikke vanligvis oppdelte gruppe er dens evne til å utnytte cellulose eller cellulosespaltings-produkter som eneste karbonkilde. a-stammene ifølge foreliggende oppfinnelse, likegyldig om de strengt tatt tilhø-rer Sorangium/Polyangium-gruppen eller bare et taksonomisk beslektet område, er overfor de mest utbredte represen-tanter for denne gruppe ytterligere karakterisert ved at de produserer minst ett av de ovennevnte "Soraphener" med formel I og fortrinnsvis minst to "Soraphener", deriblant "Soraphen A".
De seks stammer har her og i det følgende samlenavnet Sorangium( Polyangium) cellulosum. De stammer fra jordprøver som ble samlet til forskjellige tider på forskjellige steder i Europa, Afrika hhv. USA. De ble deponert i Den tyske samling av mikroorganismer (DSM) i Braunschweig, Vest-Tyskland, ifølge Budapest-kontrakten. De er karakterisert som følger. 1) Sorangium( Polyangium) cellulosum stamme "So ce 139", isolert i mai 1986 fra en høsten 1982 ved Fort Huachaca, Arizona, USA, innsamlet jordprøve. Deponeringsnummer: DSM 5397. Deponeringsdag: 2. juni 1989. 2) Sorangium( Polyangium) cellulosum stamme "So ce 170", isolert i april 1987 fra en i mai 1981 innsamlet jordprøve fra øya Delos, Grekenland. Deponeringsnummer: DSM 4795. Deponeringsdag: 2. september 1988. 3) Sorangium( Polyangium) cellulosum stamme "So ce 191", isolert i august 1987 fra en i februar 1987 innsamlet jord-prøve fra øya Madeira, Portugal. Deponeringsnummer: DSM 4796. Deponeringsdag: 2. september 1988. 4) Sorangium( Polyangium) cellulosum stamme "So ce 192", isolert i august 1987 fra en i mars 1987 innsamlet jord-prøve fra Nigeria. Deponeringsnummer: DSM 4797. Deponeringsdag: 2. september 1988. 5) Sorangium( Polyangium) cellulosum stamme "So ce 231", isolert i april 1988 fra en i april 1987 ved Didyma, Tyrki-a, innsamlet jordprøve. Deponeringsnummer: DSM 5393. Deponeringsdag: 2. juni 1989. 6) Sorangium( Polyangium) cellulosum stamme "So ce 242", isolert i oktober 1988 fra en i april 1988 ved Pozzuoli, Italia, innsamlet jordprøve. Deponeringsnummer: DSM 5414. Deponeringsdag: 19. juni 1989.
I det følgende anvendes for disse stammer betegnelsen Sorangium cellulosum. =
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen ved fremstilling av et "Soraphen" med formel I er karakterisert ved aerobisk dyrking av en av stammene Sorangium cellulosum "So ce 139", "So ce 170", "So ce 191", "So ce 192", "So ce 231" eller "So ce 242" eller en derav avledningsbar klon, mutant etc. i et egnet næringsmedium og isolering av det dannede "Soraphen" .
I den europeiske patentsøknad EP-A-282.455 beskrives en annen Sorangium cellulosum-mikroorganisme "So ce 26", hvis fermentering gir de ovennevnte Soraphener A og B. Foreliggende oppfinnelse vedrører ikke disse to preparater og deres anvendelse for seg alene i midler.
Foreliggende oppfinnelse vedrører videre verdifulle plante-mikrobicide fermenteringsprodukter som produseres ved mikro-organismene "So ce 26" (deponeringsnummer NCIB 12 411) og/eller ved de her krevede mikroorganismer "So ce 139", "So ce 170", "So ce 191", "So ce 192", "So ce 231" eller "So ce 242".
Generelle produksjonsbetingelser for kultivering av de seks produksjonsstanser
Sorangium cellulosum-stammene lar seg kultivere i egnede næringsmedier etter vanlige biologiske metoder, f.eks. i ristekulturer eller i fermentorer. Fermenteringstempera-turen er vanligvis 10-40°C, fortrinnsvis 10-35°C, og særlig fore-
trukket ca. 30-32°C, pH-verdien er 6-8, fortrinnsvis 7,4. Prosessen forløper aerobt og under sterile betingelser.
Sammensetningen av næringsmediet kan variere i større områder. For essensielle næringsstoffer må det finnes en karbon- og en nitrogenkilde samt en kilde for uorganiske mineralsalter som omfatter P, S, Mg, K, Fe, Ca.
Fermenteringsprosessene benytter som C-kilde fortrinnsvis glukose, stivelse og cellulose samt deres spaltingspro-dukter (f.eks. cellobiose), dessuten også disakkarider, glyserin, eddiksyre og andre. Som N-kilde egner seg f.eks. NH4, N03 og også peptoner. En organisk forbindelse som N-kilde kan som regel ikke samtidig være den eneste C-kilde og energikilde ved fermenteringen.
Som mineralsalter kommer klorider, nitrater, sulfater, karbonater og fosfater av elementene Na, K, NH4, Mg, Fe og Ca i betraktning, dessuten kan Cu, Mn, Mo, Zn, Co og andre være til stede som sporelementer. Så vidt mulig kan slike salter også foreligge bundet til etylendiamintetraeddiksyre
(EDTA).
Mikroorganismekulturen innsettes i ristekulturen eller i fermentoren i en innpodningsmengde på 0,1-20%, fortrinnsvis 0,5-10%, særlig foretrukket 0,5-5% (v/v). Kulturvarigheten er ved ca. 30°C omkring 2-7 dager, for store volumer iblant inntil 10 dager eller lenger. For store volumer fermenteres med fordel innledningsvis mindre forkulturer. Anvendelsen av Sorangium cellulosum-stammer er også mulig i immobili-sert form, f.eks. i form av bærerfikserte celler på algi-nat.
Dyrkingen skjer aerobt, altså f.eks. i en stille overflate-kultur eller fortrinnsvis under overflaten, under risting eller omrøring med luft eller oksygen i ristekulturer eller i fermentorer. Fortrinnsvis kultiverer man trinnvis, dvs. man fremstiller først én eller flere forkulturer i et flytende næringsmedium som deretter innpodes i det egentli-ge produksjonsmedium, f.eks. i forholdet 1:20.
Isoleringen av "Soraphen" skjer på fysikokjemisk måte ved hjelp av i og for seg kjente isoleringsmetoder, som filtre-ring, men især løsningsmiddelekstraksjon og kromatografi, fremfor alt adsorpsjons- og fordelingskromatografi og like-ledes krystallisering.
Fra den vandige fermenteringsvæsken lar forbindelsene med formel I seg ekstrahere med lipofile organiske løsnings-midler, f.eks. med ketoner, som metyletylketon, cykloheksanon; med alkoholer med middels kjedelengde, som iso-butanol, pentanol, heksanol; med eddiksyre-Cj^-Cg-alkyl-estere (etylacetat, propylacetat, butylacetat, isobutyl-acetat osv.); med toluen, diklormetan, 1,2-dikloretan,
klorbenzen, diklorbenzen osv.
Fra den filtrerte cellekaken lar forbindelsene seg lett ekstrahere med alkoholer eller ketoner (f.eks. metanol, etanol, aceton, metyletylketon).
Av hvert ekstrakt kan deretter ved konsentrering og/eller utfelling forbindelsene med formel I fremstilles, og de lar seg atskille ved fraksjonert krystallisering eller andre kromatografiske separasjonsmåter i Soraphenene A til p (= ro) .
Med fordel avsluttes fermenteringsforløpet for fremstilling av forbindelsene med formel I ved å tilsette en adsorberingsharpiks, av hvilken de ønskede produkter opptas, eller fermenteringen gjennomføres fra begynnelsen av i nærvær av<* >en slik adsorberingsharpiks. Som adsorberingsharpiks kommer fremfor alt nøytrale, organiske polymerstoffer på tale, især ikke-ioniske, hydrofobe adsorberingsharpikser som er egnet for lipofil ekstraksjon. Til disse bindes forbindelsen med formel I nesten kvantitativt. Eksempler på slike harpikser er halvpolare akrylesterharpikser, upolare poly-styren-/divinylbenzenharpikser og især formettet poly-styren. Slike harpikser tilsettes i mengder på 0,1-5% (v/v) til fermenteringsvolumet, fortrinnsvis 0,5-2% (v/v). Også aktivt kull kommer på tale. Teknisk særlig fordelaktig er polystyrenharpikser, som f.eks. XAD-1180 eller XAD-16
(produsent: Rohm og Haas) som foreligger i filtrerbar form (korn eller granu-later). Etter avslutning av fermenteringen avfiltreres harpiksen, den vaskes med vann og behandles med metanol eller etanol. Det alkoholiske ekstrakt konsentreres. Ved tilsetning av dietyleter, etylacetat eller butylacetat kan den vidtgående utkrystalliserende forbindelse IA (= Soraphen A) isoleres. Filtratet renses kromatografisk for å fremstille det gjenværende Soraphen A, men fremfor alt for å fremstille de resterende Soraphener B til o (sigma).
Oppfinnelsen vedrører forbindelsene med formel I i ren form hhv. i krystallisert form. Oppfinnelsen vedrører imidlertid også biomasser, råekstrakter og adsorberingsharpikser fra fermenteringen som inneholder forbindelsen med formel I og som kan anvendes som sådanne eller i videreformulert form for å bekjempe plantesykdommer. Biomasser kan også anvendes videre som malte eller pressede tørrsubstanser ("cake") eller bringes i handelen.
De beskrevne fremstillingsmetoder inklusive alle deltrinn er en bestanddel av foreliggende oppfinnelse.
Især vedrører oppfinnelsen en fremgangsmåte ved fremstilling av Soraphen med formel I, karakterisert ved at man dyrker aerobt en av stammene Sorangium cellulosum "So ce 139", "So ce 170", "So ce 191", "So ce 192", "So ce 231" og "So ce 242", eller en mikroorganisme som inneholder de samme strukturgener som forårsaker dannelse av Soraphen, i et vandig næringsmedium som inneholder en karbon- og nitrogenkilde samt uorganiske salter, og isolerer Soraphenene med formel I.
I første linje vedrører oppfinnelsen en utførelsesform av ovennevnte fremgangsmåte som er karakterisert ved at man dyrker en Soraphen-dannende mikroorganisme fra gruppen cellulosespaltende Myxo-bakterier.
En foretrukket utførelsesform av ovennevnte fremgangsmåte er karakterisert ved at man dyrker en av stammene Sorangium cellulosum "So ce 139", "So ce 170", "So ce 191", "So ce 192", "So ce 231", "So ce 242" eller en Soraphen-dannende mutant av denne stamme.
En særlig foretrukket utførelsesform av ovennevnte fremgangsmåte er karakterisert ved at man dyrker en av de ifølge Budapest-kontrakten deponerte stammer "So ce 139", "So ce 170", "So ce 191", "So ce 192", "So ce 231", "So ce 242" .
Fortrinnsvis gjennomfører man fermenteringen under de betingelser som er beskrevet i eksempeldelen.
Mikroorganismer som inneholder de samme for dannelsen av Soraphen kausale strukturgener som de seks stammer, kan f.eks. fremstilles kunstig ved genmanipulasjon, idet man isolerer de tilsvarende strukturgener fra de seks stammene og innbygger dem på egnede steder i genmaterialet hos en annen egnet mikroorganisme. Egnede mikroorganismer er sådanne i hvilke man ikke bare kan innlegge de aktuelle strukturgener, men i hvilke disse strukturgener også ut-trykkes og i hvilke det dannede Soraphen ikke igjen nedbrytes, men fortrinnsvis utskilles i fermenteringsvæsken. Slike egnede mikroorganismer er i første rekke andre stam-<* >mer av Myxo-bakterier, især stammer av arten Sorangium cellulosum,. såfremt de ikke allerede har ovennevnte strukturgener .
Soraphen-dannende mutanter kan f.eks. fremstilles under innvirkning av ultrafiolette stråler eller røntgenstråler eller av kjemiske mutagener, f.eks. N-metyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidin, og isoleres ved seleksjon etter sine spesifikke egenskaper på i og for seg kjent måte. Ytterligere fremgangsmåtetrekk ved fremstilling av mutanter og rekombinanter av en mikroorganisme er kjent og rutinemessig for fagmannen.
Oppfinnelsen vedrører også en fremgangsmåte ved fremstilling av en fermenteringsvare som inneholder Soraphen i påvisbar mengde og som er karakterisert ved at man dyrker en av stammene Sorangium cellulosum "So ce 139", "So ce 170", "So ce 191", "So ce 192", "So ce 231", "So ce 242", eller en klon som er avledningsbar fra disse stammene i et næringsmedium, og utvinner Soraphen i egnet form. Slike kulturløsninger lar seg anvende som sådanne eller i konsen-trert form, eventuelt under tilsetning av ytterligere bærerstoffer og/eller fordelingsstoffer som middel mot plantepatogene mikroorganismer, og de er derfor en viktig del av foreliggende oppfinnelse.
I snevrere forstand er fremgangsmåten karakterisert ved at man kultiverer en av mikroorganismene Sorangium cellulosum "So ce 139", "So ce 170", "So ce 191", "So ce 192", "So ce 231" eller "So ce 242" i et kulturmedium som inneholder minst én assimilasjonsdyktig C-kilde og N-kilde, samt tilsvarende uorganiske salter, ved 10-40°C, fortrinnsvis ved 10-35°C, i nærvær eller fravær av en adsorberingsharpiks, deretter ekstraherer kulturløsningen hhv. den avfiltrerte adsorberingsharpiks med en egnet løsningsmiddelfase, kon-sen-trerer den erholdte løsning og renser det gjenværende residuum, om ønsket ved kromatografi og/eller omkrystalli-sering.
Stammekulturer og morfologisk beskrivelse
Stammekulturer erholdes som skålkulturer på VY/2-agar (0,5% bakegjær ifølge ferskvekt; 0,1% CaCl2; 1,5% agar; pH 7,2) eller på filterpapir (= cellulosekilde) over ST 21-agar (0,1% KN03; 0,1% MgS04-7 H20; 0,1% CaCl2; 0,1% K2HP04; 0,01% MnS04-7 H20; 0,02% FeCl3; 0,002% gjærekstrakt; standard sporelementløsning<1>; 1% agar). Platene inkuberes ved 30°C.
På begge medier danner organismene svermkolonier som lang-somt utbrer seg over substratet. Enkeltvis iakttar man tydelige forskjeller mellom a-stammene.
<1>0,02-0,5 mg Mn-, Mo-, Cu-, Co- og/eller Zn-salt pr. liter [R.Y. Stanier et al. "General Microbiology", 4. utg., s. 36
(1976)]; eller 500 mg EDTA, 300 mg FeS04-7 H20, 3 mg MnCl2-4
H20, 5 mg CoCl2- 6 H20, 1 mg CuCl2- 2 H20, 2 mg NiCl2- 6 H20, 3 mg Na2Mo04-2 H20, 5 mg ZnS04-7 H20, 2 mg H3B03 pr. liter destillert vann (ca. pH 4) [G. Drews "Mikrobiolog. Praktikum", 4. opplag, s. 11, Springer forlag, Berlin, Heidelberg, New York, Tokyo
(1983)].
1) " So ce 139" ( DSM 5397): På filterpapir over ST 21-agar forblir svermkolonien vesentlig begrenset på filterpapiret. I eldre kolonier blir filterkanten av agaren opprevet, og mikroorganismene og agaren ruller seg inn. Filterpapiret blir fullstendig nedbrutt, på sine steder finner man et tykt lag av svartbrune fruktlegemer. Disse er sammensatt av små sporangioler med 15-30 um tverrsnitt, som på sin side er sammenballet til små pakker eller langstrakte, uleddede masser. De vegetative celler er slanke, sylindriske små staver med stumpt avrundede ender og måler 0,7-0,9 x 2,5-4 um. I fasekontrastmikroskop fremkommer de mørke, ofte med lyse små polarkorn. På VY/2-agar dannes meget store svermkolonier med fargeløse til orange radiale årer og mange svartbrune fruktlegemer av lignende oppbygging som beskrevet ovenfor. Gjærcellene i næringsmediet blir nesten ikke angrepet. De vegetative celler fremkommer noe fastere og er ca. 1 um tykkere. 2) " So ce 170" ( DSM 4795): På filterpapir over ST 21-agar trenger svermen bredt frem over filteret på agaroverflaten. Agaren opprives senere dypt, og svermkolonien ruller seg inn. På filterpapiret kan det utvikle seg fruktlegemer: Disse består av små mørkebrune sporangioler med tykk vegg, med for det meste 20-30 um 0, er tett sammentrengt i for det meste skarpt avgrensede, langstrakte pakker med ca. 50-200 um 0. Stedvis kan det oppstå sammenhengende langstrakte aggregater av fruktlegemer. På VY/2-agar dannes det spar-somt med middels store, tykkslimede, intensivt orange svermkolonier med for det meste 1-2 cm 0. Gjærcellene nedbygges lang-somt. Også her opprives agaren stedvis dypt, slik at svermen kan falle helt ut av skålen. På agaroverflaten dannes ofte orange, lysebrune til mørkebrune fruktlegemer med lignende oppbygging som ovenfor. De vegetative celler er faste, i fasekontrastmikroskop mørke små staver med bredt avrundede ender og måler vanligvis 0,8-1,0 x 2-5 pm. Stammen nedbryter også kitin meget effektivt. 3) " So ce 191" ( DSM 4796) vokser på filterpapir over ST 21-agar uten å gå over på agaroverflaten. Også i dette fall kan agaren opprives dypt omkring filterpapiret, og svermkolonien kan rulle seg inn. På VY/2-agar utvikler det seg store svermer på 6-8 cm 0 med fine til kraftige radiale årer. Gjærcellene blir nesten ikke angrepet. De sylindriske, vegetative små staver har bredt avrundede ender, er i f ase-
kontrastmikroskop mørke, ofte temmelig lange og måler for det meste 0,7-0,9 x 3-8 um. Stammen danner i renkultur under de omtalte kulturbetingelser ingen fruktlegemer. Stammen nedbryter kitin effektivt. 4) " So ce 192" ( DSM 4797) utbrer seg ved dyrking på filter-papir over ST 21-agar bredt utover agaroverflaten. Agaren kan opprives dypt, svermkolonien kan rulle seg inn. På agar-overflaten, og især på filterpapiret, utvikler det seg mange lysende, orangefargede fruktlegemer som består av meget små sporangioler med for det meste 10-20 pm 0 i skarpt begrensede pakker med en utbredelse på for det meste 50-500 pm. På VY/2-agar utvikler det seg middels store, kraftige svermer på 2-3 cm 0 med radiale årer og mange intensivt brunorangefargede fruktlegemer i og på agaren av lignende oppbygging som beskrevet ovenfor. De vegetative celler er sylindriske, mørke små staver med brede ender og måler for det meste 0,7-0,9 x 3-5 pm. Gjærcellene blir ikke nedbrutt, men stammen nedbryter kitin meget effektivt. 5) " So ce 231" ( DSM 5393) går i kulturer på filterpapir over ST 21-agar ikke over på agarskålen. Agaren kan opp-rives ved filterkanten, men koloniene ruller seg ikke inn. Filter-papiret blir fullstendig ødelagt, på sine steder finner man senere et meget tykt lag med intensivt brun-orange fruktlegemer. Disse er lignende oppbygd som hos andre stammer, men sporangiolene er hyppig anordnet i bånd. På VY/2-agar utvikler det seg meget store svermer med radiale bunter av fine årer. Lokalt utvikler det seg lysen
de, orangebrune fruktlegemer. De slanke, vegetative små staver er meget sirlige og måler 0,6-0,8 x 2,5-6 jim. Gjærcellene i næringsmediet lyseres langsomt. Stammen nedbryter også kitin meget effektivt. 6) " So ce 242" ( DSM 5414) trenger seg frem på filter-papiret over ST 21-agar og danner der også fruktlegemer. Agaren opp-rives ved filterpapirkanten dypt. Filterpapiret blir fullstendig nedbrutt og erstattes med en tykk masse av svartbrune fruktlegemer. Sporangiolene er i disse ofte anordnet i kjeder. På VY/2-agar utvikler det seg store svermer med fine radiale årer. Agaren opprives kloaktig i svermområdet på flere steder. Videre oppstår det rikelig med fruktlegemer. Gjærcellene i substratet nedbrytes lang-somt. De vegetative celler måler 0,7-1,0 nm x 2-4 ym. Stammen er en meget effektiv kitinnedbryter.
Stammene produserer substanser som hemmer veksten av tallrike gjærceller og hyfesopper. Kjemisk dreier det seg ved hemmingsstoffene ikke bare om Soraphener, hvis struktur allerede er oppklart, som angitt nedenfor. Disse blandinger av makrocykliske forbindelser av Soraphen-typen fremkommer i flytende kulturer i kulturvæsken, men kan også isoleres fra cellene. Produksjonen av antibiotika skjer under den logaritmiske og også i den stasjonære vekstfase.
Alle seks stammer må adapteres til veksten i det flytende mediet. De vokser først i form av små, faste, orangefargede små knoller og danner først etter mange overførelsestrinn fra et flytende medium til et annet etter hvert mer eller mindre homogene cellesuspensjoner.
Biologisk karakterisering av stammene " So ce 139". " So ce 170". " So ce 191". " So ce 192", " So ce 231" og " So ce 242"
Cellulosenedbrytning: positiv
Glukosenedbrytning: positiv
Stivelsenedbrytning: positiv
NH4 som N-kilde: positiv
N03 som N-kilde: positiv
Oppfinnelsen vedrører Soraphenene C til o med formel I i ren form. Oppfinnelsen vedrører imidlertid også biomasser, rå-ekstrakter eller adsorberingsharpikser fra fermenteringen som inneholder Soraphenene C til o med formel I, og som sådanne eller i videreformulert form kan anvendes til bekjempelse av plantesykdommer. Biomasser kan videre anvendes også som malte eller pressede tørrsubstanser ("cake") og bringes i handelen.
De beskrevne fremstillingsmåter inklusive alle deltrinn er bestanddel av foreliggende oppfinnelse.
På overraskende måte ble det nå funnet at forbindelsene med formel I oppviser et meget gunstig biocid spektrum mot fyto-patogene mikroorganismer, især mot sopp. De har meget fordelaktige kurerende, systemiske og især preventive egenskaper og kan anvendes til vern av tallrike kulturplanter. Med virkestoffene med formel I kan de opptredende parasit-ter på planter eller plantedeler (frukter, blomster, løv-verk, stengler, knoller, røtter) på forskjellige nytte-vekster kontrolleres eller tilintetgjøres, hvorved også senere utvoksende plantedeler forblir forskånet for fyto-patogene mikroorganismer.
Som mikrobicider er virkestoffene med formel I virksomme f.eks. mot fytopatogene sopper som tilhører følgende klas-ser: Fungi imperfecti (f.eks. især Botrytis, videre Pyricu-laria, Helminthosporium, Fusarium, Septoria, Cercospora og Alternaria); Basidiomycetes (f.eks. Rhizoctonia, Hemileia, Puccinia). Videre virker de mot klassene Ascomycetes (f.-eks. især Venturia og Erysiphe, videre Podosphaera, Monili-nia, Uncinula) og Oomycetes (f.eks. Phytophthora, Plasmopara). Forbindelsene med formel I kan videre anvendes som beisemiddel ved behandling av sæd (frukter, knoller, korn) og plantestiklinger til vern mot soppinfeksjoner samt mot fytopatogene sopper som opptrer i jordbunnen.
Oppfinnelsen vedrører også midlene som inneholder som virke-stoffkomponent én eller flere av Soraphenene C til o med formel I, især plantevernmidler samt deres anvendelse på agrarsektoren eller beslektede områder.
Medregnet er også en fremgangsmåte ved behandling av planter, hvilken fremgangsmåte utmerker seg ved applikasjon av de nye forbindelser Soraphen C til a med formel I hhv. av de tilsvarende nye midler.
Som målkulturer for den her frembrakte plantebeskyttende anvendelse gjelder rammen for denne oppfinnelse f.eks. følgende plantearter: korn (hvete, bygg, rug, havre, ris, mais, sorghum og beslektede arter); roer (sukker- og for-roer); kjerne-, sten- og bærfrukter (epler, pærer, plommer, ferskner, mandler, kirsebær, jordbær, bringebær og bjørne-bær); belgfrukter (bønner, linser, erter, soya); oljekultu-rer (raps, sennep, valmue, oliven, solsikke, kokos, rici-nus, kakao, jordnøtt); agurkvekster (gresskar, agurker, meloner); fibervekster (bomull, lin, hamp, jute); citrus-frukter (appelsiner, sitroner, grapefrukt, mandariner); grønnsaksorter (spinat, hodesalat, asparges, kålsorter, gulrøtter, løk, tomater, poteter, paprika); laurbærplanter (avocado, kanel, kamfer) eller planter som tobakk, nøtter, kaffe, ananas, sukkerrør, te, pepper, vinranker, humle, banan- og naturkautsjukplanter samt prydplanter. Denne oppregning utgjør ingen begrensning.
Virkestoffer med formel I anvendes vanligvis i form av sammensetninger og kan samtidig eller etter hverandre tilsettes med ytterligere virkestoffer på den flate eller de planter som skal behandles. Disse ytterligere virkestoffer kan være både gjødningsstoffer, sporelementformidlere eller andre preparater som har innvirkning på planteveksten. Også selektive herbicider samt insekticider, fungicider, bakte-ricider, nematicider, molluskicider eller blandinger av flere av disse preparater sammen med eventuelt ytterligere i formuleringsteknikken vanlige bærerstoffer, tensider eller andre applikasjonsfremmende tilsetninger finner derved anvendelse.
Egnede bærerstoffer og tilsetninger kan være faste eller flytende og tilsvarer de i formuleringsteknikken hensikts-messige stoffer, som f.eks. naturlige eller regenererte mineralske stoffer, løsnings-, dispergerings-, fornet-nings-, klebe-, fortyknings-, binde- eller gjødningsmidler.
En foretrukket fremgangsmåte for å anbringe et virkestoff med formel I hhv. et agrokjemisk middel som inneholder minst ett av disse virkestoffer, er å anbringe det på bladverket (bladapplikasjon). Applikasjonsfrekvens og mengde retter seg derved etter angrepstrykket fra den aktuelle parasitt. Virkestoffene med formel I kan imidlertid også trenge inn i rotverket i planten gjennom jordbunnen (systemisk virkning), idet man dynker plantens ståsted med en flytende tilberedning eller tilfører substansene i fast form på marken, f.eks. i form av et granulat (jordapplikasjon). Dette granu-lat eller et tilsvarende pulver kan også være tørrmasse fra biomassen som utfaller fra fermentoren eller adsorberingsharpiksen som siles ut av fermenteringsvæsken og inneholder virkestoffene med formel I. Forbindelser med formel I kan. også anbringes på frøkornene ("coating"), idet man dynker kornene enten i en flytende tilberedning av virkestoffet eller belegger dem med en fast tilberedning.
Forbindelsene med formel I anvendes derved i uforandret form eller fortrinnsvis sammen med hjelpemidler som er vanlige i formuleringsteknikken. Derved bearbeides de hensiktsmessig f.eks. til emulsjonskonsentrater, strykbare pastaer, direkte sprøytbare eller fortynnbare løsninger, fortynnede emulsjoner, sprøytepulvere, løselige pulvere, forstøvningsmidler, granulater, ved innkapsling i f.eks. polymere stoffer på kjent måte. Anvendelser som sprøyting, forstøvning, finfordeling, strøing, bestrykning eller vanning velges etter midlets art ifølge de tilstrebede mål og de gitte forhold. Gunstige anvendelsesmengder ligger vanligvis ved 10 g til 2 kg aktiv substans (AS) pr. hektar, fortrinnsvis ved 50-500 g AS/ha.
Formuleringene, dvs. midlene som inneholder virkestoffene med formel I og et fast eller flytende tilsetningsstoff, fremstilles på kjent måte.
Som løsningsmidler kommer på tale: aromatiske og alifatiske hydrokarboner, som f.eks. xylenblandinger, cykloheksan eller paraffiner; videre alkoholer og glykoler samt deres etere og estere, som etanol, etylenglykol, etylenglykol-monometyl- eller -etyleter, eddiksyreester; ketoner, som cykloheksanon, sterkt polare løsningsmidler, som N-metyl-2-pyrrolidon, dimetylsulfoksyd eller dimetylformamid, samt eventuelt epoksyderte planteoljer, som epoksydert kokos-nøttolje eller soyaolje; eller vann.
Som faste bærerstoffer, f.eks. for forstøvningsmidler og dispergerbare pulvere, anvendes vanligvis naturlige sten-mel, som kalsitt, talkum, kaolin, montmorillonitt eller attapulgitt. For å forbedre de fysikalske egenskaper, kan det også tilsettes høydispers kiselsyre eller høydisperse sugedyktige polymerisater. Som kornede, adsorptive granu-latbærere kommer på tale porøse typer som f.eks. pimpesten, teglbrudd, sepio-litt eller bentonitt, som ikke-sorptive bærermaterialer f.eks. kalsitt eller sand. Videre kan det anvendes et stort antall forgranulerte materialer av uorga-nisk natur, som især dolomitt eller finfordelte plante-rester.
Som overflateaktive forbindelser kommer i betraktning, alt etter arten av det virkestoff med formel I som skal formuleres, ikke-ionogene, kation- og/eller anionaktive tensider med gode emulgerings-, dispergerings- og fornetningsegen-skaper. Med tensider forstår man også tensidblandinger.
Egnede anioniske tensider kan være både såkalte vannløse-lige såper og også vannløselige, syntetiske overflateaktive forbindelser.
Hyppigere anvendes dog såkalte syntetiske tensider, især alkansulfonater, fettalkoholsulfater, sulfonerte benzimid-azolderivater eller alkylsulfonater.
Aktuelle som ikke-ioniske tensider er polyglykoleterderi-vater av alifatiske eller cykloalifatiske alkoholer, mette-de eller umettede fettsyrer og alkylfenoler, som kan inneholde 3-30 glykoletergrupper og 8-20 karbonatomer i (den alifatiske) hydrokarbonrest og 6-18 karbonatomer i alkyl-fenolenes alkylrest.
Som ytterligere eksempler på ikke-ioniske tensider kan nevnes nonylfenolpolyetoksyetanoler, ricinusoljepolyglykol-etere, polypropylen-polyetylenoksydaddukter, tributylfen-oksypolyetylenetanol, polyetylenglykol og oktylfenoksy-polyetoksyetanol.
Videre kommer også fettsyreestere av polyoksyetylensorbitan, som polyoksyetylensorbitan-trioleatet, i betraktning.
De tensider som er mest utbredt i formuleringsteknikken, er blant annet beskrevet i følgende publikasjoner: "Mc Cutche-on's Detergents and Emulsifiers Annual", MC Publishing Corp., Ridgewood New Jersey, 1980; Sisley og Wood, "Ency-clopedia of Surface Active Agents", Chemical Publishing Co., Inc. New York, 1980.
Særlige fordelaktige, applikasjonsfremmende tilsetnings-stoffer som kan føre til en sterk reduksjon av bruksmeng-den, er videre naturlige (dyriske eller planteaktige) eller syntetiske fosfolipider fra rekken kefaliner og lecitiner, som f.eks. fosfatidyletanolamin, fosfatidylserin, fosfat-idylglyserin eller lysolecitin.
De agrokjemiske tilberedelser inneholder vanligvis 0,1-95% virkestoff med formel I, 99,9-5% av et fast eller flytende tilsetningsstoff og 0-25% av et tensid.
Mens heller konsentrerte midler foretrekkes som handelsva-re, anvender sluttforbrukeren vanligvis fortynnede midler.
Midlene kan også inneholde ytterligere tilsetninger, som stabilisatorer, antiskummemiddel, viskositetsregulatorer, bindemidler, klebemidler samt gjødning og andre virkestoffer for å oppnå spesielle effekter.
1. Fremstillingseksempler
Eksempel H- l: Fremstilling av forbindelsene med formel I i nærvær av en adsorberingsharpiks
Fremgangsmåten gjennomføres i et fermenteringsvolum på 1000 1 under tilsetning av 0,5% (v/v) adsorberingsharpiks XAD-1180 (Rohm og Haas). Fremgangsmåtebetingelsene for denne sats tilsvarer de for det påfølgende eksempel H-2. I stedet for den her anvendte stamme So ce 26 fra EP-A-282.-455 kan også en av de andre seks nevnte stammer fra foreliggende oppfinnelse anvendes.
Etter avslutning av fermenteringen siles polymerbæreren, den spyles inn i en glassøyle, vaskes med 3 bedvolumer vann og elueres med 4 bedvolumer metanol. Eluatet konsentreres i vakuum til tørrhet. Råekstraktvekt: 165 g.
Den videre kromatografiske rensing følger skjemaet for vedlagte figur, hvor hvert enkelt separeringstrinn forløper under følgende betingelser. Utbyttene er angitt i parentes (h = time).
Se<p>areringsforløp for isolering av Soraphen A til 0
1. Kiselgelseparasjon; søyle: 100 mm 0; 45 cm lengde.
Adsorberende middel: Lichroprep Si 100; 40-63 pm (produsent: Merck).
Løpemiddel: diklormetan/aceton i trinnene 98/2, 95/5, 93/7, 90/10, 50/50; hvert trinn 2 1.
Det tas 5 fraksjoner. Fraksjon 3 inneholder Soraphen A, fraksjon 4 (25 g) renses videre. 2. Gelkromatografi; søyle: 60 mm 0; 100 cm lengde. Adsorberende middel: Sephadex LH-20 (produsent: Phar-macia LKB GmbH).
Løpemiddel: metanol.
Det tas 5 fraksjoner. Fraksjon 3 (17 g) renses videre. 3. Reversert faseseparasjon; søyle: 76 mm 0, 70 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-60-60 35-70 pm (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 40/60 lin. gradient i 2 h etter metanol.
Det tas 9 fraksjoner. Fraksjonene 3 (1,3 g), 4 (1,5
g), 5 (3,5 g) og 6 (1,6 g) renses videre.
4. Kiselgelseparasjon; søyle: 40 mm 0; 30 cm lengde.
Adsorberende middel: Lichrosorb Si 100; 7 pm (produsent : Merck).
Løpemiddel: diklormetan/heksan 1/1 + 2% metanol.
Det tas 6 fraksjoner. Fraksjonene 2 (500 mg) og 4 (88 mg) renses videre. 5. Kiselgelseparasjon; søyle: 40 mm 0; 30 cm lengde. Adsorberende middel: Lichroprep Si 100; 7 pm (produsent : Merck).
Løpemiddel: diklormetan/heksan 1/1 + 2% metanol.
Det tas 6 fraksjoner. Fraksjon 3 (500 mg) renses videre.
6. Kiselgelseparasjon; søyle: 35 mm 0; 45 cm lengde. Adsorberende middel: Lichroprep Si 60; 40-63 pm (pro-
dusent: Merck).
Løpemiddel: diklormetan/heksan lin. gradient i 1 h etter metanol.
Det tas 6 fraksjoner. Fraksjonene 1 (2,4 g) og 2 (400 mg) renses videre. 7. Reversert faseseparasjon; søyle: 35 mm 0, 45 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-30-60 25-40 pm (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 80/20.
Det tas 9 fraksjoner. Fraksjon 7 (1,4 g) renses videre. 8. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: Nucleosil 100-7 C18; 7 pm (produsent : Macherey Nagel).
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Det tas 7 fraksjoner. Fraksjon 3 (15 mg) renses videre. Fraksjon 7 inneholder Soraphen N (18 mg). 9. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: Nucleosil 100-7 C18; 7 pm (produsent : Macherey Nagel).
Løpemiddel: metanol/vann 65/35.
Det tas 7 fraksjoner. Fraksjon 3 inneholder Soraphen H (7 mg). 10. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL 100-C18; 10 pm (produsent:
Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 65/35.
Det tas 4 fraksjoner. Fraksjon 2 inneholder Soraphen D (108 mg). 11. Kiselgelseparasjon; søyle: 40 mm 0; 30 cm lengde. Adsorberende middel: Lichrosorb Si 100; 7 um (produsent : Merck).
Løpemiddel: diklormetan/heksan 1/1 + 1% metanol. Det tas 9 fraksjoner. Fraksjonene 4 (530 mg) og 6 (280 mg) renses videre. 12. Kiselgelseparasjon; søyle: 40 mm 0; 30 cm lengde. Adsorberende middel: Lichrosorb Si 100; 7 um (produsent : Merck).
Løpemiddel: diklormetan/heksan 1/1 + 1% metanol. Det tas 8 fraksjoner. Fraksjon 7 (290 mg) renses videre. 13. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Nucleosil 100-7; 7 um (produsent:
Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/heksan 1/2 + 1% metanol.
Det tas 2 fraksjoner. Fraksjon 1 (325 mg) inneholder Soraphen F. 14. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: Nucleosil 100-7 C18; 7 um (produsent : Macherey Nagel).
Løpemiddel: metanol/vann 68/32.
Det tas 2 fraksjoner. Fraksjon 1 inneholder Soraphen 0 (3 mg). 15. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: Nucleosil 100-7 C18; 7 um (produsent : Macherey Nagel).
Løpemiddel: metanol/vann 66/34.
Det tas 4 fraksjoner. Fraksjon 1 inneholder Soraphen C
(21 mg); fraksjon 2 inneholder Soraphen B (230 mg). 16. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: Nucleosil 100-7 C18; 7 um (produsent : Macherey Nagel).
Løpemiddel: metanol/vann 65/35.
Det tas 10 fraksjoner. Fraksjon 4 inneholder Soraphen J<_> (18 mg), fraksjon 9 inneholder Soraphen E (96 mg). 17. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: Nucleosil 100-7 C18; 7 um (produsent : Macherey Nagel).
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Det tas 10 fraksjoner. Fraksjon 6 inneholder Soraphen M (98 mg).
Fysikokjemisk karakterisering av Soraphenene C til 0
Soraphen C
<C>28<H>42°8
MZ 506
IR (film):
3411; 2939; 2831; 1725; 1461; 1382; 1266; 1230; 1187;
1152; 1098; 1068; 1023; 988; 975.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
10,3; 11,7; 12,5; 23,0; 26,0; 29,4; 35,2; 35,6; 35,8;
46,2; 57,3; 57,6; 68,8; 72,5; 74,6; 74,9; 76,1; 83,7;
99,4; 125,0; 126,2; 126,2; 128,2; 128,6; 137,3; 141,0;
170,6.
HPLC Rt = 8,6 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen D
<C>27<H>42<0>8
Mz 494
IR (film):
3411; 2937; 2831; 1733; 1461; 1432; 1382; 1359; 1328;
1268; 1208; 1195; 1096; 1050; 988; 933.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
10,7; 14,4; 22,8; 24,3; 25,0; 27,5; 27,7; 31,6; 35,3;
35,6; 43,2; 57,5; 58,6; 69,1; 70,8; 71,2; 74,8; 80,7;
82,6; 97,7; 126,4; 126,4; 128,0; 128,6; 141,0; 168,6.
HPLC Rt = 7,4 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen E
<C>29<H>46°9
Mz 538
IR (film):
3398; 2939; 2829; 1725; 1461; 1430; 1380; 1266; 1235;
1191; 1154; 1102; 1044; 971.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
10,3; 10,5; 11,5; 23,0; 25,0; 29,5; 30,0; 35,3; 35,5;
40,2; 46,3; 56,4; 57,4; 58,0; 69,0; 71,3; 71,7; 75,0;
76,3; 80,2; 81,1; 99,9; 126,5; 126,5; 128,1; 128,6;
140,9; 170,9.
HPLC Rt = 11,8 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen F
<C>29<H>46<0>8
Mz 522
IR (film):
3394; 2937; 2827; 1729; 1710; 1461; 1382; 1326; 1314;
1266; 1253; 1232; 1189; 1154; 1104; 1075; 1048; 1021;
994; 971; 907.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
10,4; 11,7; 14,1; 23,0; 24,2; 28,3; 28,8; 33,3; 34,1;
35,2; 45,7; 57,4; 57,4; 57,9; 69,0; 70,1; 75,9; 76,3;
80,8; 82,1; 99,6; 126,6; 126,6; 128,2; 128,6; 128,6;
140,4; 171,8.
HPLC Rt = 8,6 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 75/25.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen H
<C>28<H>42°9
Mz 522
IR (film):
3444; 2935; 2867; 2833; 1723; 1459; 1409; 1382; 1334;
1270; 1230; 1179; 1156; 1104; 1069; 996; 971.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
10,9; 11,6; 14,4; 23,4; 25,0; 28,6; 35,6; 36,3; 45,6;
57,7; 57,8; 67,5; 68,7; 69,2; 73,9; 73,9; 76,1; 81,7;
100,1; 122,9; 126,0; 126,0; 128,2; 128,7; 128,7;
138,0; 140,6; 171,5.
HPLC Rt = 7,0 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 65/35.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen J
<C>28<H>44°8
Mz 508
IR (film):
3394; 2939; 2829; 1729; 1461; 1380; 1313; 1270; 1187;
1158; 1100; 1042; 987.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
11,5; 13,8; 14,3; 22,5; 24,1; 25,6; 25,8; 27,7; 31,6;
35,2; 36,3; 49,3; 57,3; 59,4; 69,6; 70,5; 72,6; 75,7;<* >81,0; 84,6; 98,2; 126,3; 126,3; 128,1; 128,7; 128,7;
141,3; 172,5.
HPLC Rt = 8,1 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen M
<C>28<H>44°9
Mz 524
IR (film):
3396; 2939; 2831; 1725; 1461; 1380; 1270; 1235; 1191;. 1154; 1075; 1048; 994; 971; 898; 850.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
9,0; 10,4; 11,5; 23,1; 25,3; 28,3; 29,3; 35,1; 35,7;
40,3; 46,5; 57,2; 57,9; 68,8; 68,8; 71,9; 72,9; 74,4;
76,3; 83,8; 99,6; 126,3; 126,3; 128,0; 128,5; 128,5;
141,2; 171,0.
HPLC Rt = 8,5 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen N
<C>29<H>44°9
Mz 536
IR (film):
3444; 2966; 2939; 1731; 1461; 1380; 1309; 1268; 1224;
1164; 1098.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
13,8; 13,9; 23,3; 23,4; 24,2; 26,3; 26,7; 29,5; 32,1;
36,3; 50,3; 54,5; 57,6; 68,1; 75,2; 78,4; 79,9; 105,7;
125,8; 125,8; 127,5; 128,4; 128,4.
<1>H-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
0,9 d; 1,05 d; 1,24 d; 5,23 d; 5,85 dd.
HPLC Rt = 13,4 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen O
^28^44^<8>
MZ 508
IR (film):
3448; 2939; 2831; 1733; 1459; 1382; 1330; 1270; 1203;
1098; 1048; 987.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
11,5; 14,5; 23,1; 24,9; 26,2; 27,1; 27,6; 31,7; 35,5;
35,9; 39,5; 50,7; 57,4; 58,7; 69,5; 71,3; 71,6; 74,6;
79,4; 81,9; 102,2; 126,6; 126,6; 127,9; 128,4; 128,4;
137,9; 168,0.
HPLC Rt = 7,7 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Eksempel H- 2: Fremstilling av forbindelsene med formel I
a) Forkultur:
Forkulturen dyrkes i 2 liters kolber med 500 ml av et
kulturmedium (inneholdende 0,1% pepton av kasein, 0,5% glukose, 0,05% CaCl2-H20, 0 , 05% MgS04-7 H20) ved pH 7,4 uten buffer (eller med 50 mM HEPES-buffer2) ved 160 rpm og 30°C på et ristebord. Det gunstigste tidspunkt for å over-føre til fermentorkulturen oppnås etter 2-3 dager (øvre log-fase). I stedet for den her anvendte stamme So ce 192 kan man også anvende en av de andre fem stammer i foreliggende oppfinnelse eller stammen So ce 26 ifølge EP-A-282.-455.
b) Fermentering:
En 70 liters fermentor fra firma Giovanola Fréres, Monthey,
Sveits, med 60 1 av det samme kulturmedium inokuleres med 10 1 forkultur. Fermenteringen skjer ved 30-32°C. Omrør-ingshastigheten er 500 rpm, beluftningshastigheten 0,12 1 pr. liter medium og time. Fermenteringsvarigheten er 7-14 dager. Man sørger for at pH-verdien ikke faller under 7,0, især ikke under 6,2. De dannede makrocykliske forbindelser med formel I befinner seg delvis i kulturvæsken, delvis i cellene. De kan ekstraheres fra cellene med alkoholer eller
<2>HEPES er K- og/eller Na-saltet av 4-(2-hydroksyetyl)-piperazin-l-etansulfonsyre.
ketoner (f.eks. aceton) fra kulturvæsken med etylacetat eller butylacetat. Fermenteringsvæsken ristes da f.eks. fem ganger med 2 1 etylacetat i 5 min. Disse forente ekstrakter vaskes to ganger med vann og konsentreres i vakuum. Den gjenværende mørke olje kan separeres etter den metode som er gjengitt i figur 2.
Mer fordelaktig er det å fjerne de dannede forbindelser med formel I etter avslutning av fermenteringen med adsorberingsharpiks fra fermenteringskolben. Herved tilsettes 0,5% v/v finkornet harpiks (f.eks. XAD-1180 eller XAD-16) i fermenteringsløsningen, og man rører i 4 timer, hvoretter forbindelsene med formel I er fullstendig bundet til harpiksen. Etter separering av fermentorløsningen ved siling spyles harpiksen inn i en glassøyle, vaskes med 3 bedvolumer vann og elueres med 4 bedvolumer metanol. Eluatet konsentreres til tørrhet i vakuum. Et slikt eluat eller et slikt råekstrakt kan formuleres med egnede dispergerings-og/eller bærermidler til yrkesmessig anvendbare plantevernmidler, men råekstraktet kan også som vist i det følgende, og i den ved-lagte figur 2, separeres for å isolere de enkelte Soraphener A til a. Den her beskrevne separasjon ble gjennomført med 65 g råekstrakt av til sammen 400 1 fermenteringsløsning.
Kromatografisk rensing ( se: separasjonsmåte II for isolering av Sora<p>hener) 1. Kiselgelseparasjon; søyle: 200 mm 0; 200 cm lengde. Adsorberende middel: Lichroprep Si 100; 25-40 um (produsent: Merck).
Løpemiddel: gradient i trinn; 1) diklormetan; 2-9) diklormetan/aceton 98/2, 96/4, 95/5, 90/10, 85/15, 80/20, 50/50, 25/75; 10-11) diklormetan/metanol 75/25, 50/50. trinn 2 1.
Det tas 14 fraksjoner. Fraksjonene 2, 3, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 renses videre. 2. Gelkromatografi; søyle: 60 mm 0; 100 cm lengde. Adsorberende middel: Sephadex LH-20 (produsent: Phar-macia LKB GmbH).
Løpemiddel: metanol.
Det tas 7 fraksjoner. Fraksjon 3 inneholder Soraphen A (2,5 g). 3. Gelkromatografi; søyle: 30 mm 0; 100 cm lengde. Adsorberende middel: Sephadex LH-20 (produsent: Phar-macia LKB GmbH).
Løpemiddel: metanol.
Det tas 5 fraksjoner. Fraksjon 2 inneholder Soraphen C (6,6 g). 4. Gelkromatografi; søyle: 30 mm 0; 100 cm lengde. Adsorberende middel: Sephadex LH-20 (produsent: Phar-<* >macia LKB GmbH).
Løpemiddel: metanol.
Det tas 6 fraksjoner. Fraksjon 2 (1 g) renses videre. 5. Reversert faseseparasjon; søyle: 37 mm 0, 34 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-20-60 15-25 pm (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 72/28.
Det tas 9 fraksjoner. Fraksjon 7 inneholder Soraphen V (1,1 g). 6. Gelkromatografi; søyle: 30 mm 0; 100 cm lengde. Adsorberende middel: Sephadex LH-20 (produsent: Phar-macia LKB GmbH).
Løpemiddel: metanol.
Det tas 4 fraksjoner. Fraksjon 2 (1,1 g) renses videre.
7. Gelkromatografi; søyle: 30 mm 0; 100 cm lengde. Adsorberende middel: Sephadex LH-20 (produsent: Phar-
macia LKB GmbH).
Løpemiddel: metanol.
Det tas 6 fraksjoner. Fraksjonene 2 (0,54 g) og 3 (0,18 g) renses videre. 8. Gelkromatografi; søyle: 30 mm 0; 100 cm lengde. Adsorberende middel: Sephadex LH-20 (produsent: Phar-macia LKB GmbH).
Løpemiddel: metanol.
Det tas 6 fraksjoner. Fraksjonene 2 (0,3 g) og 3 (1,3 g) renses videre. 9. Gelkromatografi; søyle: 60 mm 0; 100 cm lengde. Adsorberende middel: Sephadex LH-20 (produsent: Phar-macia LKB GmbH).
Løpemiddel: metanol.
Det tas 7 fraksjoner. Fraksjon 2 (3,3 g) renses videre. 10. Gelkromatografi; søyle: 60 mm 0; 100 cm lengde. Adsorberende middel: Sephadex LH-20 (produsent: Phar-macia LKB GmbH).
Løpemiddel: metanol.
Det tas 6 fraksjoner. Fraksjon 2 (6,1 g) renses videre. 11. Reversert faseseparasjon; søyle: 37 mm 0, 34 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-20-60 15-25 um (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 75/25.
Det tas 8 fraksjoner. Fraksjon 5 inneholder Soraphen D (40 mg), fraksjon 7 inneholder Soraphen B (0,5 g). 12. Reversert faseseparasjon; søyle: 35 mm 0, 45 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-30-60 25-40 um (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 80/20.
Det tas 10 fraksjoner. Fraksjon 8 inneholder Soraphen E (30 mg), fraksjon 4 renses videre. 13. Reversert faseseparasjon; søyle: 37 mm 0, 34 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-20-60 15-25 pm (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 75/25.
Det tas 10 fraksjoner. Fraksjon 6 (80 mg) renses videre, fraksjon 8 (20 mg) renses videre. 14. Reversert faseseparasjon; søyle: 37 mm 0, 34 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-20-60 15-25 pm (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 75/25.
Det tas 11 fraksjoner. Fraksjon 5 inneholder Soraphen X (16 mg). 15. Reversert faseseparasjon; søyle: 35 mm 0, 45 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-30-60 25-40 pm (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 70/30 lin. gradient i 2 h etter metanol.
Det tas 8 fraksjoner. Fraksjon 5 inneholder Soraphen U (150 mg). 16. Reversert faseseparasjon; søyle: 35 mm 0, 45 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-30-60 25-40 pm (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 70/30 lin. gradient i 1 h etter 90/10.
Det tas 8 fraksjoner. Fraksjon 8 inneholder Soraphen M
(0,93 g), fraksjon 7 (250 mg) renses videre.
17. Reversert faseseparasjon; søyle: 37 mm 0, 34 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-20-60 15-25 ym (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Det tas 8 fraksjoner. Fraksjon 4 (105 mg) renses videre, fraksjon 6 inneholder Soraphen R (20 mg), fraksjon 7 inneholder Soraphen S (490 mg), fraksjon 8 inneholder Soraphen T (80 mg), fraksjon 9 (80 mg) renses videre. 18. Reversert faseseparasjon; søyle: 37 mm 0, 34 cm lengde.
Adsorberende middel: HDSIL RP-18; 18-20-60 15-25 ym (produsent: Labomatic).
Løpemiddel: metanol/vann 7 0/30.
Det tas 14 fraksjoner. Fraksjon 7 (700 mg) renses videre, fraksjon 8 (570 mg) renses videre, fraksjon 9 inneholder Soraphen 6 (120 mg). 19. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: RP-18 Nucleosil 100-7 C18; 7 \ im (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: metanol/vann 67/33.
Det tas 6 fraksjoner. Fraksjon 5 inneholder Soraphen y (11 mg). 20. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 jim (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 1%.
Det tas 3 fraksjoner. Fraksjon 2 inneholder Soraphen v (8 mg). 21. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 nm (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 1%.
Det tas 2 fraksjoner. Fraksjon 2 inneholder Soraphen £>
(8 mg) .
22. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 ym (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 5%.
Det tas 7 fraksjoner. Fraksjon 1 inneholder Soraphen Y (64 mg), fraksjon 4 inneholder Soraphen o (5 mg), fraksjon 6 inneholder Soraphen £ (7 mg). 23. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: RP-18 Nucleosil 100-7 C18; 7 jim (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: metanol/vann 60/40.
Det tas 6 fraksjoner. Fraksjon 2 (35 mg) renses videre. 24. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 ym (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 10%.
Det tas 5 fraksjoner. Fraksjon 2 inneholder Soraphen o (20 mg) . 25. Reversert faseseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde.
Adsorberende middel: RP-18 Nucleosil 100-7 C18; 7 nm (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: metanol/vann 60/40.
Det tas 9 fraksjoner. Fraksjon 4 (194 mg) renses videre, fraksjon 5 (130 mg) renses videre, fraksjon 6 (50 mg) renses videre. 26. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm©, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 ym (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 5%.
Det tas 9 fraksjoner. Fraksjon 4 inneholder Soraphen p (45 mg). 27. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 \ im (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 10%.
Det tas 4 fraksjoner. Fraksjon 2 inneholder Soraphen
(26 mg) .
28. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 jim (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 5%.
Det tas 4 fraksjoner. Fraksjon 2 inneholder Soraphen \ i (18 mg), fraksjon 3 inneholder Soraphen ti (69 mg). 29. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 nm (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 5%.
Det tas 5 fraksjoner. Fraksjon 4 inneholder Soraphen k (5,5 mg). 30. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 ym (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 5%.
Det tas 4 fraksjoner. Fraksjon 4 (10 mg) renses videre. 31. Kiselgelseparasjon; søyle: 20,5 mm 0, 25 cm lengde. Adsorberende middel: Si 100 Nucleosil 100-7; 7 jim (produsent: Macherey Nagel).
Løpemiddel: tert.-butylmetyleter/n-heksan/+ metanol 1/2/ + 5%.
Det tas 2 fraksjoner. Fraksjon 1 inneholder Soraphen rc (2,2 mg), fraksjon 2 inneholder Soraphen Z (6,5 mg).
Fysikokiemisk karakterisering av de ytterligere fremstilte Soraphenene R til o
Soraphen V
<C>28<H>42°8
Mz 506
IR (film, v i cm'1) :
3394; 2942; 2900; 2829; 1723; 1461; 1380; 1270; 1233;
1189; 1068; 988; 898; 851.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
10,3; 11,7; 12,6; 23,2; 26,0; 32,7; 35,3; 35,6; 36,2;
46,3; 55,8; 57,3; 68,9; 72,5; 72,9; 74,6; 76,3; 84,5;
99,5; 122,1; 126,2; 126,2; 128,1; 128,5; 128,5; 139,9;
141,2; 170,9.
HPLC Rt = 9,2 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen X
<C>28<H>42°8
Mz 522
IR (film, v i cm"1) :
3404; 2941; 1716; 1598; 1461; 1380; 1272; 1233; 1189;
1156; 1100; 1069; 988.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; i ppm) :
10,3; 11,7; 12,5; 23,1; 25,9; 29,4; 35,2; 35,6; 35,7;
46,2; 57,3; 57,6; 68,9; 72,5; 74,5; 75,0; 76,1; 83,8;
99,5; 113,4; 115,2; 118,0; 124,9; 129,8; 137,4; 142,7;
156,2; 170,9.
HPLC Rt = 4,4 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen U
<C>29<H>44°9
Mz 536
IR (film, v i cm"1) :
3386; 3361; 2977; 2939; 2892; 2823; 1698; 1461; 1380;
1268; 1185; 1152; 1096; 1064; 1023; 975; 900; 840.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,1; 11,4; 12,2; 31,8; 32,9; 35,2; 35,2; 38,6; 46,3;
56,0; 57,2; 57,9; 68,7; 72,2; 73,3; 76,2; 80,0; 84,5;
99,3; 122,2; 126,1; 126,1; 127,9; 128,4; 128,4; 140,6;
141,4; 171,7.
HPLC Rt = 5,2 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen R
<C>26<H>40°8
Mz 480
IR (film, v i cm'1) :
3404; 2937; 1731; 1459; 1430; 1384; 1355; 1330; 1270;
1212; 1110; 1083; 1033; 988.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 5 i ppm) :
10,7; 14,5; 22,7; 23,3; 24,8; 27,9; 30,9; 31,8; 35,5;
43,4; 58,6; 68,9; 71,0; 72,9; 73,3; 74,6; 80,5; 97,6;
126,5; 128,0; 128,6; 128,6; 141,1; 168,8.
HPLC Rt = 5,1 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel.<* >Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen S
<C>27<H>40°8
Mz 492
IR (film, v i cm"1) :
3431; 2941; 1720; 1604; 1459; 1426; 1380; 1264; 1187;
1150; 1104; 1062; 977.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,5; 11,9; 12,7; 24,9; 26,2; 35,5; 36,2; 36,3; 37,9;
47,5; 57,6; 69,5; 73,5; 74,1; 75,8; 76,3; 77,9; 100,6;
125,1; 127,1; 128,7; 129,4; 129,4; 138,8; 143,3;
173,8.
HPLC Rt = 5,9 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen T
<C>27<H>42°8
Mz 494
IR (film, v i cm'<1>) :
3427; 2941; 1720; 1461; 1382; 1268; 1191; 1154; 1106;
1068; 994; 971.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,4; 11,7; 14,2; 22,7; 24,8; 25,3; 28,3; 3 0,6; 34,6;
35,2; 45,8; 57,3; 69,1; 69,8; 73,0; 73,3; 76,0; 76,4;
99,6; 126,5; 126,5; 128,1; 128,5; 128,5; 140,6; 171,9.
HPLC Rt = 6,5 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen 6 (delta)
<C>27<H>42°8
Mz 506
IR (film, v i cm'1) :
3440; 3311; 2937; 1731; 1600; 1461; 1380; 1340; 1185;
1096; 988; 850.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,2; 12,0; 12,7; 23,2; 25,6; 29,6; 34,9; 36,0; 37,3;
45,3; 56,2; 57,6; 70,3; 72,1; 72,6; 74,3; 74,9; 84,2;
99,5; 124,9; 126,3; 126,3; 128,0; 128,6; 128,6; 131,6;
141,2; 171,2.
HPLC Rt = 7,1 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/3 0.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen y (gamma)
<C>28<H>42°9
Mz 522
IR (film, v i cm'1) :
3398; 2939; 1723; 1461; 1382; 1264; 1189; 1152; 1102;
1066; 975; 894.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
8,6; 10,3; 11,5; 23,6; 25,8; 28,8; 33,9; 35,4; 36,3;
46,6; 54,7; 57,3; 58,1; 59,2; 68,8; 69,3; 73,5; 74,3;
76,2; 83,5; 99,7; 126,1; 126,1; 128,0; 128,6; 128,6;
141,4; 170,4.
HPLC Rt = 8,4 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Sora<p>hen v (ny)
<C>28<H>42°9
Mz 522
IR (film, v i cm'1) :
3402; 2971; 2935; 2827; 1733; 1459; 1367; 1181; 1095;
1050; 990; 860.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
8,7; 10,3; 11,5; 26,3; 33,4; 35,2; 40,2; 40,8; 46,2;
57,4; 58,1; 67,8; 68,9; 71,5; 73,5; 76,3; 78,9; 82,6;
99,4; 125,9; 128,3; 128,7; 128,7; 128,8; 129,5; 140,7;
170,3.
HPLC Rt = 8,5 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel.
Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen R (beta)
<C>29<H>44°8
Mz 520
IR (film, v i cm'1) :
3408; 2971; 2935; 2825; 1733; 1459; 1365; 1343; 1181;
1095; 1050; 990; 958; 738.
13C-NMR-f orskyvninger (CDC13; 5 i ppm) :
10,1; 12,1; 12,6; 23,4; 25,5; 30,4; 35,0; 35,9; 37,2;
45,3; 56,2; 56,3; 57,9; 70,3; 72,1; 72,7; 74,2; 83,1;
84,8; 99,4; 122,6; 126,3; 126,3; 128,0; 128,6; 128,6;
140,0; 141,3; 171,3.
HPLC Rt = 16,8 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen Y
<C>27<H>40°9
Mz 508
IR (film, v i cm"1) :
3436; 2937; 1721; 1459; 1376; 1268; 1199; 1114; 1048;
988; 961.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; i ppm) :
10,8; 11,2; 18,8; 23,0; 23,5; 31,7; 33,4; 36,2; 40,6;
41,1; 51,1; 61,1; 70,8; 74,6; 76,4; 77,1; 78,7; 86,4;
99,9; 125,5; 125,5; 127,4; 128,4; 128,4; 142,5; 171,1;
212,4.
HPLC Rt = 6,1 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen o (omikron)
<C>29<H>44°9
Mz 536
IR (film, v i cm"1) :
3402; 3361; 2933; 2894; 1708; 1457; 1360; 1269; 1187;
1150; 1096; 1062; 975; 898; 838; 765.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,4; 11,6; 12,6; 31,7; 33,4; 35,3; 35,7; 38,7; 46,3;
56,3; 57,4; 58,3; 65,7; 69,0; 72,3; 74,2; 76,2; 80,0;
84,8; 99,5; 122,9; 126,3; 126,3; 128,2; 128,6; 128,6;
140,1; 170,8.
HPLC Rt = 4,8 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen C (ksi)
<C>27<H>40°8
Mz 492
IR (film, v i cm'<1>) :
3402; 2969; 2933; 1731; 1459; 1367; 1179; 1095; 1050;
990.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,4; 11,7; 12,5; 20,1; 26,2; 31,8; 35,2; 35,7; 36,2;
46,4; 57,4; 68,9; 72,3; 73,5; 75,0; 76,1; 76,3; 99,6;
126,2; 126,2; 127,0; 128,1; 128,6; 128,6; 138,3;
141,2; 170,7.
HPLC Rt = 4,1 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Sora<p>hen o (sigma)
<C>29<H>44°9
Mz 536
IR (film, v i cm"1) :
3398; 3363; 3301; 2971; 2933; 2894; 1702; 1453; 1378;
1262; 1167; 1150; 1100; 979; 838.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,3; 11,5; 12,4; 31,6; 34,2; 35,0; 35,5; 38,9; 46,2;
56,1; 57,5; 58,5; 64,3; 69,1; 73,1; 76,1; 77,2; 79,8;
85,2; 99,7; 121,8; 126,0; 126,0; 128,0; 128,5; 128,5;
141,9; 142,0; 171,4.
HPLC Rt = 6,2 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen p (ro)
<C>27<H>42°9
Mz 510
IR (film, v i cm"1) :
3398; 3363; 3301; 2971; 2933; 2894; 1700; 1453; 1378;
1262; 1187; 1150; 1100; 1064; 979; 898; 838; 765.
13C-NMR-f orskyvninger (CDC13; 6 i ppm):
8,7; 10,3; 11,4; 23,1; 25,5; 26,4; 32,3; 35,0; 36,1;
40,5; 46,6; 57,2; 68,5; 68,8; 71,8; 73,1; 73,7; 74,3;
76,4; 99,7; 126,3; 127,9; 128,5; 128,5; 141,4; 171,4.
HPLC Rt = 4,7 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen S (zeta)
<C>28<H>42°9
Mz 522
IR (film, v i cm'1) :
3398; 2937; 1718; 1457; 1378; 1332; 1272; 1203; 1102;
978.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; i ppm) :
11,8; 21,9; 25,9; 25,9; 28,7; 36,3; 39,9; 43,0; 45,7;
56,7; 57,4; 58,6; 70,6; 75,5; 76,2; 78,2; 78,2; 84,3;<* >98,9; 125,9; 128,0; 128,4; 128,7; 133,1; 141,2; 171,6.
HPLC Rt = 3,5 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen \ i (my)
<C>28<H>44°9
Mz 524
IR (film, v i cm"1) :
3423; 2939; 1725; 1459; 1380; 1264; 1191; 1154; 1102;
1052; 992; 971.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,4; 11,7; 14,1; 21,3; 27,7; 28,2; 30,9; 32,9; 34,1;
35,2; 45,6; 57,4; 60,7; 69,1; 70,0; 70,4; 72,1; 76,2;
76,3; 85,4; 99,6; 126,6; 126,6; 128,2; 128,6; 128,6;
140,2; 172,0.
HPLC Rt = 4,7 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen n (eta)
<C>28<H>42°9
Mz 522
IR (film, v i cm'1) :
3411; 2935; 1718; 1459; 1382; 1266; 1189; 1152; 1104;
1066; 981.
13C-NMR-f orskyvninger (CDC13; 5 i ppm) :
10,2; 11,4; 12,3; 31,6; 32,9; 35,1; 35,4; 38,1; 46,2;
57,2; 57,7; 64,0; 68,8; 72,2; 73,7; 74,7; 76,2; 81,2;
99,3; 124,8; 126,1; 126,1; 127,9; 128,4; 128,4; 137,8;
141,1; 171,4.
HPLC Rt = 4,6 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/3 0.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen k (kappa)
<C>27<H>40°8
Mz 492
IR (film, v i cm'1) :
3411; 2935; 1731; 1461; 1382; 1347; 1270; 1189; 1104;
1048; 990.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,1; 12,1; 12,8; 23,4; 25,4; 33,5; 35,0; 36,1; 37,2;
45,4; 56,1; 70,3; 72,0; 72,7; 74,2; 74,2; 75,6; 99,4;
124,1; 126,2; 126,2; 127,9; 128,5; 128,5; 138,6;
141,3; 171,5.
HPLC Rt = 4,7 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen ti (pi)
<C>27<H>40°8
Mz 492
IR (film, v i cm'1) :
3396; 3363; 3299; 2933; 2694; 1702; 1451; 1378; 1262;
1167; 1150; 1100; 979.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 6 i ppm) :
10,3; 12,3; 14,6; 23,4; 25,0; 32,2; 35,6; 36,0; 36,8;
50,4; 55,9; 70,2; 71,2; 73,9; 75,0; 75,5; 98,3; 125,2;
126,2; 126,2; 128,1; 128,6; 128,6; 137,8; 141,0;
171,5.
HPLC Rt = 4,9 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
Soraphen Z
<C>28<H>42°9
Mz 522
IR (film, v i cm'1) :
3405; 2937; 1718; 1459; 1380; 1266; 1189; 1152; 1104;
1069; 987; 902; 850; 813; 738.
<13>C-NMR-forskyvninger (CDC13; 5 i ppm) :
10,5; 11,7; 12,6; 31,8; 33,5; 35,3; 35,7; 41,1; 46,3;
56,0; 57,3; 66,0; 69,0; 70,5; 72,5; 74,3; 76,2; 84,3;
99,5; 122,4; 126,2; 126,2; 128,2; 128,6; 128,6; 140,4;
140,9; 170,9.
HPLC Rt = 7,7 min.
Søyle: 4 x 250 mm Nucleosil 100-7 C18, Macherey Nagel. Strømningshastighet: 1,5 ml/min.
Løpemiddel: metanol/vann 70/30.
Detektor: UV 210 nm.
På grunnlag av røntgenstrukturanalyse av Soraphen A og de ovenfor erholdte data antas at Soraphenene C til Q har følgende romlige strukturer IC til IQ<1>. Man antar at de resterende forbindelser IR<1>, IS<1>, IT<1>, IU<1>, IV, IX', IY', IZ<1>, IB1 , ly', I5<1>, IC<1>, ItT, Ik • , I|i'f 1$' og lp<1> har lignende strukturer.
For Soraphen Iv 1 er følgende struktur sannsynlig:
For Soraphenene o, u og o er strukturen ikke sikker. Videre er det tydelig at enkelte Soraphener er innbyrdes epimere. Soraphen 6 er epimer med Soraphen C; Soraphenene k og £ er innbyrdes epimere og med Soraphen S, det samme er Soraphenene U, o og o. Forbindtlig er i hvert tilfelle de måle-verdier som er erholdt for en bestemt forbindelse med formel I, som under tiden ikke tillater noen streng til-ordning til en bestemt struktur, hvilket fagmannen vet.
Som nevnt omfatter oppfinnelsen samtlige stereoisomere former av de enkelte oppførte forbindelser med formel I samt deres fremstilling og deres anvendelse for bekjempelse hhv. forebyggelse av plantesykdommer. Videre omfatter oppfinnelsen imidlertid især også forbindelsene IC<*> til Io<1> på grunnlag av deres fysikokjemiske data, for hvilke man antar den ovenfor angitte struktur.
Det er verdt å merke seg at de makrocykliske Soraphener med formel I vanligvis foreligger i den angitte hemiacetalform, denne form kan imidlertid gjennomgå en reversibel ring-åpning etter skjemaet
alt etter fremstillings- hhv. bearbeidingsmetodikk forekommer, avhengig av pH-verdi og løsningsmiddel, Soraphenene i den ene eller annen form eller som blanding av begge former. Karakteristisk for ringåpningen er forskyvningen av <13>C-NMR-signalet i 3-stilling og forskyvningen av <1>H-NMR-signalene i bestemte andre posisjoner. Hos Soraphen A iakttas f .eks. følgende forandringer: <13>C-NMR (CDC13, 6 i ppm) : 99,5-203,1 (3-C). <1>H-NMR (CDCl3, 6 i ppm): 3,14-3,72 (2-H); 3,18-4,5 (4-H); 3,83-3,16 (7-H); 5,86-5,7 (17-H). Lignende forskyvninger iakttas også hos Soraphenene B til p. Formel I i foreliggende oppfinnelse omfatter i prinsipp både den ved lavere pH-verdier foretrukne 3-hemiacetalform og også den åpnede 3-keto-7-hydroksyform.
2. Formuleringseksempler for ett eller flere av virkestoffene- med formel I (% = vektprosent)
Virkestoff betyr i det følgende et av Soraphenene i ren form eller flere av Soraphenene C til o eller et eluat som er utvunnet av den mikrobiologiske fremstilling, i flytende form eller som tørt konsentrat som inneholder den usepa-rerte totalmengde av Soraphener.
2.1 Emuls j onskonsentråter
Av slike konsentrater kan det ved fortynning med vann fremstilles emulsjoner av enhver ønsket konsentrasjon.
2.2 Løsninger
Løsningene er egnet for anvendelse i form av meget små dråper.
2.3 Granulater
Virkestoffet oppløses i metylenklorid, sprøytes på bærer-stoffet, og løsningsmidlet inndampes deretter i vakuum.
2.4 Forstøvningsmiddel
Ved grundig blanding av bærerstoffene med virkestoffet erholder man bruksferdige forstøvningsmidler. Disse lar seg ved ytterligere tilsetning av de tre bærerstoffene male til bruksferdig støv med 0,001% virkestoff.
2.5 S prøytepulver
Virkestoffet blandes godt med tilsetningsstoffene og males i en egnet mølle. Man erholder sprøytepulver som lar seg fortynne med vann til suspensjoner av enhver ønsket konsen-
trasjon.
2.6 Innkapslinqsqranulat
Det finmalte virkestoff påføres jevnt fordelt i en mikser på kaolinet som er fuktet med polyetylenglykol. På denne måte erholder man støvfrie innkapslingsgranulater.
2.7 Suspensi onskonsentrat
Det finmalte virkestoff blandes godt med tilsetningsstoffene. Man erholder således et suspensjonskonsentrat av hvilket det ved fortynning med vann kan fremstilles suspensjoner av enhver ønsket konsentrasjon.
2.8 Biomassekonsentrat
Biomassen som faller ut i produksjonskulturen, tørkes, males og blandes i vektforholdet 80:20 med etylenglykol-monometyleter. Et slikt konsentrat lar seg vilkårlig fortynne med vann til sprøytesuspensjoner. 3. Biologiske eksempler på planter (I det følgende betyr "virkestoff" et av Soraphenene C til a ifølge foreliggende oppfinnelse).
Eksempel 3. 1: Virkning mot Puccinia graminis på hvete
a) Etterbeskyttende virkning
Hveteplanter besprøytes 6 dager etter utsåingen med en
sprøyteløsning som er fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,02% aktiv substans). Etter 24 timer infiseres de behandlede planter med en uredosporesuspensjon av soppen. Etter inkubasjon i 48 timer ved 95-100% relativ luftfuktighet og ca. 20°C settes de infiserte plantene i et veksthus ved ca. 22°C. Bedømmelsen av rustblæreutvikiingen skjer 12 dager etter infeksjonen.
b) Systemisk virkning
Til hveteplanter helles det 5 dager etter utsåingen en
sprøyteløsning som er fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,002% aktiv substans med hensyn på jordvolumet). Etter 48 timer infiseres de behandlede planter med en uredosporesuspensjon av soppen. Etter inkubasjon i 48 timer ved 95-100% relativ luftfuktighet og ca. 20°C stilles de infiserte planter i et veksthus ved ca. 22°C. Bedømmelsen av rustblæreutviklingen skjer 12 dager etter infeksjonen.
Soppangrepet ble i begge forsøk fullstendig hemmet av virke-stoffet.
Ubehandlede, men infiserte kontrollplanter viste derimot et Puccinia-angrep på 100%.
Eksempel 3. 2: Virkning mot Phytophthora på tomatplanter
a) Etterbeskyttende virkning
Tomatplanter ble sprøytet etter dyrking i 3 uker med en
sprøyteløsning som var fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,02% aktiv substans). Etter 24 timer ble de behand-lede planter infisert med en sporangiesuspensjon av soppen. Bedømmelsen av soppangrepet skjedde etter inkubasjon av de infiserte planter i 5 dager ved 90-100% relativ luftfuktighet og 20°C.
b) Systemisk virkning
Til tomatplanter ble det helt etter 3 ukers dyrking en
sprøyteløsning som var fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,006% aktiv substans med hensyn på jordvolumet). Man sørget derved for at sprøyteløsningen ikke kom i berøring med de plantedeler som var over jorden. Etter 48 - timer ble de behandlede planter infisert med en sporangiesuspensjon av soppen. Bedømmelsen av soppangrepet skjedde etter inkubasjon av de infiserte planter i 5 dager ved 90-100% relativ luftfuktighet og 20°C.
I begge forsøk ble det ved bedømmelsen ikke iakttatt noe soppangrep, mens de infiserte kontrollplanter var fullstendig angrepet.
Eksempel 3. 3: Virkning mot Plasmopara viticola på vinranker Etterbeskyttende virkning
På 4-5-bladstadiet sprøytes vinrankeplanter med en sprøyte-løsning som er fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,006% aktiv substans). Etter 24 timer infiseres de behandlede planter med en sporangiesuspensjon av soppen. Etter inkubasjon i 6 dager ved 95-100% relativ luftfuktighet og 20°C bedømmes soppangrepet.
I motsetning til de ubehandlede, men infiserte kontrollplanter med 100% soppangrep var plantene som var behandlet med virkestoff I angrepsfrie.
Eksempel 3. 4: Virkning mot Cercospora arachidicola på j ordnottplanter
Etterbeskyttende virkning
10-15 cm høye jordnøttplanter sprøytes med en sprøyteløs-ning som er fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,006% aktiv substans) og infiseres 48 timer senere med en konidiesuspensjon av soppen. De infiserte planter inkuberes i 72 timer ved ca. 21°C og høy luftfuktighet og stilles deretter i et veksthus til det oppstår typiske bladflekker. Bedømmelsen av den fungicide virkning skjer 12 dager etter infeksjonen på grunnlag av antall og størrelse på de opptredende flekker.
De planter som var behandlet med virkestoff I, var uten angrep. De planter som var behandlet med Soraphen A, viste også ved anvendelse av en sprøytekonsentrasjon på 0,002% ved slutten av bedømmelsen ikke noe angrep. Ubehandlede, men infiserte kontrollplanter oppviste derimot et Cercospora-angrep på 100%.
Eksempel 3. 5: Virkning mot Venturia inaequalis på epleskudd Etterbeskyttende virkning
Eplestiklinger med 10-20 cm lange friske skudd sprøytes med en sprøyteløsning som er fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,02% aktiv substans). Etter 24 timer infiseres de behandlede planter med en konidiesuspensjon av soppen. Plantene inkuberes deretter i 5 dager ved 90-100% relativ luftfuktighet og stilles i ytterligere 10 dager i et veksthus ved 20-24°C. Skurvangrepet bedømmes 15 dager etter infeksjonen.
De stiklinger som var behandlet med virkestoff I, var angrepsfrie, kontrollplantene var derimot fullstendig angrepet.
Eksempel 3. 6: Virkning mot Botrytis cinerea på eplefrukter Etterbeskyttende virkning
Kunstig skadede epler behandles idet en sprøyteløsning som er fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,02% aktiv substans), tilsettes dråpevis på de skadede steder. De behandlede frukter inokuleres deretter med en sporesuspen-sjon av soppen og inkuberes i 1 uke ved høy luftfuktighet og ca. 20°C. Ved bedømmelsen telles de råtnede skadesteder, og derav avledes den fungicide virkning av forsøkssubstan-sen.
Virkestoffet hemmet soppveksten fullstendig. Ubehandlede, men infiserte kontrollplanter oppviste derimot 100% Botrytis-angrep.
Eksempel 3. 7: Virkning mot Erysiphae graminis på bygg
a) Etterbeskyttende virkning
Cirka 8 cm høye byggplanter sprøytes med en sprøyteløsning
som er fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,006% aktiv substans). Etter 3-4 timer bestøves de behandlede planter med konidier fra soppen. De infiserte byggplanter stilles i et veksthus ved ca. 22°C, og soppangrepet bedøm-mes etter 10 dager.
b) Systemisk virkning
Til ca. 8 cm høye byggplanter helles en sprøyteløsning som
er fremstilt av sprøytepulver med virkestoff (0,002% aktiv substans med hensyn på j ordvolumet). Man sørget derved for at sprøyteløsningen ikke kom i berøring med de plantedeler som var over jorden. Etter 48 timer bestøves de behandlede planter med konidier fra soppen. De infiserte byggplanter stilles i et veksthus ved ca. 22°C, og soppangrepet bedøm-mes etter 10 dager.
Plantene var i begge forsøk angrepsfrie, kontrollplantene fullstendig angrepet.
Eksempel 3. 8: Virkning mot Rhizoctonia solani ( jordsopp på ris<p>lanter)
Lokalb eskyttende jordapplikasjon
12 dager gamle risplanter vannes med en sprøyteløsning som er fremstilt av en formulering av virkestoffet (0,02% aktiv substans), uten å kontaminere plantedeler som er over jorden. For å infisere de behandlede planter, tilsettes en suspensjon av mycelium og sklerotier av R. solani på jord-overflaten. Etter 6 dagers inkubasjon ved 27"C (dag) hhv. 23°C (natt) og 100% relativ luftfuktighet (fuktighetskasse) i klimakammeret bedømmes soppangrepet på bladslire, blad og stengel.
Etter behandling med virkestoffet opptrådte det ikke noe angrep, mens de infiserte kontrollplanter viste fullstendig Rhizoctonia-angrep.
Claims (9)
1. Makrocyklisk forbindelse karakterisert ved formel I
hvor den makrocykliske ring enten er mettet eller valgfritt inneholder i 8,9-stilling eller i 9,10-stilling eller i 14,15-stilling en dobbeltbinding etter følgende substituentkombinasjon, og substituentene R!-R5, A, B, X og Y foreligger i følgende kombinerte betydninger:
2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er forbindelse IY og forbindelsen lp (=ro) i ren form.
3. Fremgangsmåte ved fremstilling av forbindelser med formel I
hvor den makrocykliske ring enten er mettet eller valgfritt inneholder i 8,9-stilling eller i 9,10-stilling eller i 14,15-stilling en dobbeltbinding etter følgende substituentkombinasjon, og substituentene R!-R5, A, B, X og Y foreligger i følgende kombinerte betydninger:
inklusive deres stereoisomerer, karakterisert ved aerob dyrking av en av stammene etter valg: Sorangium cellulosum "So ce 26" (NCIB 12411), Sorangium cellulosum "So ce 139" (DSM 5397), Sorangium cellulosum "So ce 170" (DSM 4795), Sorangium cellulosum "So ce 191" (DSM 4796), Sorangium cellulosum "So ce 192" (DSM 4797), Sorangium cellulosum "So ce 231" (DSM 5393) eller Sorangium cellulosum "So ce 242" (DSM 5414) i et egnet næringsmedium innholdende minst en assimilasjonsdyktig C-kilde og N-kilde samt tilsvarende uorganiske salter, ved 10-40°C i nærvær eller fravær av en absorb-sjonsharpiks, påfølgende absorpsjon av kulturløsningen hhv. den avfiltrerte absorpsjonsharpiks med en egnet løsnings-middelfase, konsentrasjon av den erholdte løsning, om ønsket rensing ved kromatografi eller omkrystallisasjon og om ønsket påfølgende separasjon av de erholdte forbindelser med formel I, med det forbehold at stammen "So ce 26" (NCIB 12411) ikke anvendes for fremstilling av forbindelsene IA og IB.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 3, karakterisert ved at fermenteringen utføres ved 10-35°C med en av stammene
"So ce 170" (DSM 4795),
"So ce 191" (DSM 4796),
"So ce 192" (DSM 4797).
5. Midler for bekjempelse hhv. forebyggelse av plantesykdommer karakterisert ved at de består av kulturmedier for agrarkjemiske formål inneholdende prosessprodukter ifølge fremgangsmåten i krav 3.
6. Midler for bekjempelse hhv. forebyggelse av plantesykdommer, karakterisert ved at de består av agrarkjemisk anvendelige råekstrakter fra prosessen
ifølge krav 3.
7. Middel for bekjempelse hhv. forebyggelse av plantesykdommer, karakterisert ved at det som virkestoff inneholder et prosessprodukt med formel I fra fremgangsmåten ifølge krav 3, med unntak av forbindelsene IA og IB.
8. Biologisk renkultur karakterisert ved at den er valgt blant
Sorangium cellulosum "So ce 139" (DSM 5397),
Sorangium cellulosum "So ce 170" (DSM 4795),
Sorangium cellulosum "So ce 191" (DSM 4796),
Sorangium cellulosum "So ce 192" (DSM 4797),
Sorangium cellulosum "So ce 231" (DSM 5393) og Sorangium cellulosum "So ce 242" (DSM 5414), som er istand til å fremstille minst én forbindelse med formel I ifølge krav 1.
9. Anvendelse av de etter fremgangsmåten ifølge krav 3 erholdte generelle prosessprodukter eller deres stereoisomerer for bekjempelse hhv. forebyggelse av plantesykdommer, med unntak av forbindelsene IA og IB.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH337888 | 1988-09-09 | ||
| CH339588 | 1988-09-12 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO893623D0 NO893623D0 (no) | 1989-09-08 |
| NO893623L NO893623L (no) | 1990-03-12 |
| NO175826B true NO175826B (no) | 1994-09-05 |
| NO175826C NO175826C (no) | 1994-12-14 |
Family
ID=25692864
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO893623A NO175826C (no) | 1988-09-09 | 1989-09-08 | Mikrobiologisk fremgangsmåte ved fremstilling av agrarkjemisk anvendelige virkestoffer, fremstilte forbindelser, anvendelsen av disse og biologisk rene kulturer av sorangium cellulosum som anvendes i fremgangsmåten |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0358606A3 (no) |
| JP (1) | JPH02200197A (no) |
| KR (1) | KR900004939A (no) |
| AU (1) | AU629568B2 (no) |
| BR (1) | BR8904506A (no) |
| CA (1) | CA1330203C (no) |
| CZ (1) | CZ517789A3 (no) |
| DK (1) | DK444589A (no) |
| FI (1) | FI894211A (no) |
| HU (1) | HU209950B (no) |
| IL (1) | IL91557A0 (no) |
| NO (1) | NO175826C (no) |
| NZ (1) | NZ230596A (no) |
| PL (1) | PL163447B1 (no) |
| PT (1) | PT91661B (no) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0358608A3 (de) * | 1988-09-09 | 1990-10-31 | Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH (GBF) | Mikrobizide makrozyklische Laktonderivate |
| ATE203275T1 (de) * | 1991-03-01 | 2001-08-15 | Syngenta Participations Ag | Verfahren zur genetischen manipulation von myxobakterien |
| EP0540469A1 (de) * | 1991-10-31 | 1993-05-05 | Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH (GBF) | Sopharen c Markolid-Derivate und ihre Verwendung als Mikrobizide |
| US5693774A (en) * | 1992-08-31 | 1997-12-02 | Novartis Finance Corporation | DNA sequences involved in soraphen biosynthesis by myxobacteria |
| US5716849A (en) * | 1994-06-08 | 1998-02-10 | Novartis Finance Corporation | Genes for the biosynthesis of soraphen |
| HU229833B1 (en) | 1996-11-18 | 2014-09-29 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Epothilone d production process, and its use as cytostatic as well as phytosanitary agents |
| US20030144345A1 (en) * | 2001-07-27 | 2003-07-31 | Marcel Gubler | Treatment of metabolic diseases with soraphen derivatives |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3669515D1 (de) * | 1985-09-13 | 1990-04-19 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Makrozyklische antibiotika. |
| EP0282455A3 (de) * | 1987-03-12 | 1990-10-31 | Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH (GBF) | Verfahren zur Herstellung einer macrocyclischen Verbindung |
-
1989
- 1989-09-01 EP EP19890810647 patent/EP0358606A3/de not_active Withdrawn
- 1989-09-06 BR BR898904506A patent/BR8904506A/pt not_active Application Discontinuation
- 1989-09-06 FI FI894211A patent/FI894211A/fi not_active IP Right Cessation
- 1989-09-07 NZ NZ230596A patent/NZ230596A/en unknown
- 1989-09-07 IL IL91557A patent/IL91557A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1989-09-07 CA CA000610526A patent/CA1330203C/en not_active Expired - Fee Related
- 1989-09-08 AU AU41194/89A patent/AU629568B2/en not_active Ceased
- 1989-09-08 PT PT91661A patent/PT91661B/pt not_active IP Right Cessation
- 1989-09-08 DK DK444589A patent/DK444589A/da not_active Application Discontinuation
- 1989-09-08 HU HU894801A patent/HU209950B/hu not_active IP Right Cessation
- 1989-09-08 NO NO893623A patent/NO175826C/no unknown
- 1989-09-08 CZ CS895177A patent/CZ517789A3/cs unknown
- 1989-09-08 PL PL89281336A patent/PL163447B1/pl unknown
- 1989-09-09 KR KR1019890013133A patent/KR900004939A/ko not_active Application Discontinuation
- 1989-09-11 JP JP1235491A patent/JPH02200197A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0358606A2 (de) | 1990-03-14 |
| DK444589A (da) | 1990-03-10 |
| CZ517789A3 (en) | 1993-03-17 |
| PT91661A (pt) | 1990-03-30 |
| IL91557A0 (en) | 1990-04-29 |
| HU209950B (en) | 1994-12-28 |
| EP0358606A3 (de) | 1990-10-31 |
| AU629568B2 (en) | 1992-10-08 |
| CA1330203C (en) | 1994-06-14 |
| NO893623D0 (no) | 1989-09-08 |
| BR8904506A (pt) | 1990-04-24 |
| PT91661B (pt) | 1995-05-31 |
| KR900004939A (ko) | 1990-04-13 |
| AU4119489A (en) | 1990-03-15 |
| DK444589D0 (da) | 1989-09-08 |
| NZ230596A (en) | 1992-02-25 |
| PL163447B1 (pl) | 1994-03-31 |
| NO893623L (no) | 1990-03-12 |
| NO175826C (no) | 1994-12-14 |
| FI894211A0 (fi) | 1989-09-06 |
| JPH02200197A (ja) | 1990-08-08 |
| FI894211A (fi) | 1990-03-10 |
| HUT53792A (en) | 1990-12-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR940004098B1 (ko) | 신규 항생제 화합물의 제조 방법 | |
| CN103261398B (zh) | 伯克霍尔德氏菌属的分离细菌菌株及其农药代谢物 | |
| TW201322924A (zh) | 伯克氏菌屬隔離菌株以及農藥代謝產物的配方和用途 | |
| EP0438461B1 (en) | Nematocidal preparations | |
| US4990178A (en) | Herbicide, its preparation and use | |
| NO175826B (no) | Mikrobiologisk fremgangsmåte ved fremstilling av agrarkjemisk anvendelige virkestoffer, fremstilte forbindelser, anvendelsen av disse og biologisk rene kulturer av sorangium cellulosum som anvendes i fremgangsmåten | |
| KR940010036B1 (ko) | 마크로사이클릭 화합물의 제조방법 | |
| KR20170054894A (ko) | 코지산을 유효성분으로 함유하는 뿌리혹선충 방제용 조성물 및 이의 용도 | |
| JP2005245450A (ja) | 作物抗真菌剤として使用されるソルダリンおよびその誘導体 | |
| US20030130121A1 (en) | Novel bacterial isolate and the preparation and use of its active metabolites | |
| KR100477890B1 (ko) | 신균주 스트렙토마이세스 속 ８ｅ１２ 및 이를 이용한 제초제 | |
| JP2005176684A (ja) | Ｏｃ４５１５９物質生産菌、該物質の製造方法及び農園芸用殺虫剤 | |
| DE3632168A1 (de) | Galbonolide und ihr einsatz als botrytizide | |
| CN102482695B (zh) | A-87774化合物或其盐、它们的制法及含有它们作为有效成分的农药 | |
| JPWO2004044214A1 (ja) | 新規ｆｋｉ−１０３３物質およびその製造法 | |
| KR102598551B1 (ko) | 아스퍼질러스 몬테네그로이 sfc20200425-m27 균주로부터 유래된 화합물을 포함하는 식물병 방제용 조성물 및 이의 제조방법 | |
| CA3002123A1 (en) | Natural broad-spectrum biocides | |
| KR101478410B1 (ko) | 방선균 추출물을 포함하는 잔토모나스속 병원균에 대한 억제용 조성물 | |
| DD287644A5 (de) | Mikrobiologisches verfahren zur herstellung agrarchemisch verwendbarer wirkstoffe | |
| JPH0398593A (ja) | 抗生物質５’―ｏ―スルファモイルツベルサイジンの製造法およびその用途 | |
| JP2000239269A (ja) | 新規化合物ｆ−１５５０７及びその製造方法 | |
| JPH06321710A (ja) | 農園芸用殺菌剤及びその製造方法 | |
| JPH01197488A (ja) | 生理活性物質ｋｓｂ−１９３９化合物及びその製造法 | |
| JPS6261001B2 (no) | ||
| JPH0246001B2 (no) |