NL8000206A - Carbamaatderivaten van mercaptoacylhydroxyprolinen, alsmede werkwijzen voor het bereiden en toepassen van deze prolinen. - Google Patents

Description

s » , '-t * "Carbamaatderivaten van marcaptoacylhydroxyprolinen, alsmede werkwijzen voor het bereiden en toepassen van deze prolinen”.

De uitvinding heeft betrekking op nieuwe carbamaatderivaten van mercaptoacylhydroxyprolinen met formule 1, waarin R, Rj en R^f onafhankelijk van elkaar/ een waterstofatoom/ een lage alkylgroep of een trifluozmethylgroep en R en S., onafhankelijk o 1 5 van elkaar, een waterstofatoom/ een lage alkylgroep, een cyclo-lage alkylgroep, een allyl-, propargyl-, fenyl- of gesubstitueerde fenylgroep voorstsLlen, of waarin Rq en R^ tezamen met het stikstofatoom een heterocyclische 5- of 6-ring vormen, R^ een waterstofatoom of een hydrolyseerbare, organische, beschermende groep met 10 formule R^-CO- of met formule la weergeeft en R,. een lage alkylgroep, een fenyl-, gesubstitueerde fenyl-, fenyl-lage alkyl-, gesubstitueerde fenyl-lage alkyl-, cycloalkyl-, thienyl- of furylgroep is en n » 0, 1 of 2, alsmede de zouten daarvan, evenals nieuwe tussenpro-ducten daarvoor, alsmede op werkwijzen voor het bereiden en toepas-15 sen van deze derivaten.

De sterretjes in de formules geven centra van asymmetrie weer. Bet koolstofatoom in de niet-cyclische zijketen is asymmetrisch indien R2 en/of een andere betekenis heeft dan waterstof. Elk van de centra van asymmetrie geven D- en L-vormen die 20 volgens gebruikelijke methoden, die hierna worden beschreven, kunnen worden gescheiden. De carbamaatgroep met formule

>R

/0

-0C0N

\R

R1 25 geeft eveneens aanleiding tot cis-tranaisomerie.

De uitvinding is gericht op nieuwe verbindingen met formule 1 en de zouten daarvan, op werkwijzen voor het bereiden van 8000206 2 geneesmiddelen, die dergelijke verbindingen en/of de zouten daarvan bevatten en op een werkwijze voor het toepassen van deze verbindingen als anti-hypertensiva. De substituenten en symbolen hebben de hiervoor aangegeven betekenissen.

5 De door de substituenten of symbolen weergegeven lage alkylgroepen omvatten koolwaterstofgroepen met rechte of vertakte keten en ten hoogste 7 koolstofatomen, zoals bijvoorbeeld de methyl-, ethyl-, propyl-, isopropyl-, butyl-, isobutyl-, t-butyl-, pentyl- of isopentylgroep, enz. De lage alkylgroepen met ten hoogste 10 4 koolstof atomen en in het bijzonder die met 1 of 2 koolstofatomen worden aanbevolen.

De cyclo-lage alkylgroepen zijn de alicyclische groepen met ten hoogste 7 koolstofatomen, d.w.z. de cycloproyl-, cyclobutyl-, cyclopentyl-, cyclohexyl- en cycloheptylgroep. Hiervan 15 verdienen de cyclopentyl- en cyclohexylgroep aanbeveling.

Voorbeelden van gesubstitueerde fenylgroepen zijn monogesubstitueerde fenylringen waarin de fenylsubstituent halogeen, lage alkyl, lage alkoxy, lage alkylthio of trifluormethyl is. De lage alkoxy- en lage alkyïfcaptogroepen omvaten lege alkylgroepen 20 van het hiervoor beschreven type. Voorbeelden hiervan zijn de

V

methoxy-, ethoxy-, propoxy-, isopropoxy·, butoxy-, t-butoxy-, methyl-thio-, ethylthio-, propylthio- en isopropylthiogroep, enz. De hiervoor uitgedrukte voorkeuren voor groepen met 1 t/m 4 en 1 of 2 kool-stofatomen gelden hier eveneens. Halogeenatomen zijn de vier gebrui-25 kelijke halogenen, bij voorkeur chloor of broom, die groepen zoals o-, m- en p-chloorfenyl, o-, m- en p-brocmfenyl, enz. leveren.

De fenylgroep en gesubstitueerde fenylgroep kunnen eveneens beschreven worden als 30 ^ waarin Rg een waterstof- of halögeenatoom of een lage alkyl-, lage alkoxy-, lage alkylthio- of trifluormethylgroep weergeeft.

Voorbeelden van fenyl-lage alkylgroepen zijn lage alkylgroepen van de hiervoor beschreven type die aan de fenylring 35 zijn gehecht. Fenylmethyl en fenylethyl zijn de aanbevolen fenyl- 8000206 Α Ά 3 lag· alkylgroepen, waarvan In het bijzonder de fenylmethylgroep.

Groepen met fomnle Rg-CO-, die de voorkeur hebben, zijn die, waarin Rj. een lage alkyl-, fenyl-, of fenyl-lage alkyl-groep voorstelt.

5 De lage alkanoylgroepen, weergegeven door Rg-CO-, zijn die net de acylgroepen van de lage (C2-C7) vetzuren, zoals bijvoorbeeld acetyl, propionyl, fautyryl, isobutyryl, enz. De lage alkanoylgroepen net ten hoogste 4 koolstofatonen, in het bijzonder de acetylgroep, verdiénen aanbeveling. Dezelfde aanbevelingen gelden 10 voor de fenyl-lage alkanoylgroepen, waarin Rj. in de R^-CO-groep de fenyl-lage alkylgroep is. In het bijzonder wordt de benzoylgroep aanbevolen.

De carbamaatgzoep aan de pyrrolidinering kan nietr cyclisch zijn, waaronder bijvoorbeeld de carbamoylgroep, lage alkyl-15 carbamoylgroep, zoals de methylcarbamoylgroep, ethylcarbamoylgroep, propylcarbamoylgroep en isopropylcarbamoylgroep, di(lage alkyl)car-baaoylgroep, zoals de dimethylcarbaaoylgroep en diethylcarbamoyl-groep, propargylcarbamoylgroep of allylcarbamoylgroep vallen. Eveneens worden cycloalkylcarbamoylgroepen, zoals de cyclopentylcarba-20 maoyl-, dicyclopentylcarbamoyl-, cyclohexylcarbamoyl- en dicyclo- hexylcarbamoylgroep, enz. omvat. Bovendien nog de fenyl- en gesubstitueerde fenylcarbamoylgzoepen, zoals de fenylcarbamoyl-, 4-chloor-fenylcarbamoy1-, 3-ethylfenylcarbamoyl-, 4-methoxyfenylcarbamoyl-en 4-(trifluormethyl)fenylcarbamoylgroep, enz. Bij voorkeur is slechts 25 één van de substituenten R^ea R^ een cycloalkyl-, fenyl- of gesubstitueerde fenylgroep. _

De -N groep kan eveneens een heterocyclische

Sr 5- of 6-ring vormen van de 1 pyrrolidine-, piperidine- of morfoline-reeks.

30 Bij voorkeur heeft slechts een van de substitnenten R en R, een andere betekenis dan watentof, behalve indien beide o 1

Rq en R^-substituenten een lage alkylgroep voorstellen.

Verbindingen met formule 1, die de voorkeur hebben, zijn die waarin R een waterstofatoom of een lage alkylgroep, Rq en 35 , onafhankelijk van elkaar, een alkylgroep met ten hoogste 4 kool- 8000206 \ 4 stofatomen, en , onafhankelijk van elkaar, een waterstofatoom of een alkylgroep met eveneens ten hoogste 4 koolstofatomen, R^ een waterstofatoom, een lage alkanoyl-, of benzoylgroep en n 0 of 1 voorstellen. De carbamaatgroep bevindt zich pp de 3- of 4-plaats van 5 de pyrrolidinering, bij voorkeur op de 4-plaats.

Vooral aanbevolen zijn verbindingen met formule 1, waarin R een waterstofatoom, R en R,, onafhankelijk van elkaar, elk een alkylgroep met ten hoogste 4 koolstofatomen, in het bijzonder een alkylgroep met ten hoogste 3 koolstofatomen, een methylgroep, 10 R. een waterstofatoom, R. een waterstofatoom en η 1 voorstellen, 3 4 waarbij de carbamaatgroep zich op de 4-plaats bevindt.

Volgens de aanbevolen methode voor het synthetiseren van verbindingen met formule 1 gaat men uit van een hydroxyproline met formule 2.

15 Hierin wordt het stikstofatoom eerst beschermd met bijvoorbeeld een stikstofbeschermende groep van het type dat gewoonlijk bij de peptide-synthese wordt toegepast, zoals de carbomethoxy-, t-tolueensulfonyl- of acetylgroep, enz., waardoor men een beschermde verbinding, zoals de verbinding met formule 3, waarin CB de z 20 carbobenzyloxybeschermende groep voorstelt, verkrijgt.

De beschermende verbinding met formule 3 wordt daarna veresterd, bijvoorbeeld door reactie met een diazoalkaan, zoals diazomethaan, waardoor men een ester met formule 4 verkrijgt, waarin R een lage alkylgroep, zoals de methyl- .of isobutylgroep, bij 25 voorkeur de methylgroep, voorstelt.

/¾

Daarna kan de carbamaatgroep met formule -OCO-N

\r waarin R een waterstofatoom voorstelt en R, een andere betekenis 1 o 1 heeft dan waterstof, worden ingevoerd door reactie van een verbinding met formule 4 met een isocyanaat (R^-NCO) in een inert organisch 30 oplosmiddel, zoals benzeen, enz., waardoor men het volgende tussen-product met formule 5 verkrijgt.

Ter bereiding van het cis-isooeer wordt de hiervoor beschreven reactie uitgevoerd in aanwezigheid van een katalytische hoeveelheid van een base, zoals pyridine of triethylamine.

35 Het is ook aogelijk een verbinding met formule 5 te 8000206 t € 5 bereiden door de beschermende verbinding eet formule 4 met fosgeen te laten reageren tot een tussenproduct met formule 6 (dat niet noodzakelijkerwijze behoeft te worden geïsoleerd), dat men daarna met een geschikt amine yRq of NH^ (waarin beide substituenten

5 SN

\ R1

Rq en R^ een waterstofatoom voorstellen) tot een verbinding met de formule 5, laat reageren.

Indien R en R, (in formule 5) beide een andere be- O 1 10 tekenis hebben dan waterstof of tezamen een heterocyclische ring voltooien, laat men de beschermende verbinding met formule 4 reageren met het carbamoylhalogenide met formule 7, waarin hal een halo-geenatocm voorstelt, bij voorkeur chloor.

Alkalische hydrolyse van een verbinding met formule 15 5 met een base, zoals natriumhydroxyde, bariumhydroxyde of kalium- hydroxyde, enz., leidt tot een zuur met formule 8.

Deze verbinding met formule 8 in zuur- of ester-vorm kan daarna worden vrijgemaakt, bijvoorbeeld door de gebruikelijke hydrogenering in aanwezigheid van palladium op kool, waardoor 20 men een verbinding met formule 9 verkrijgt.

De volgende stap van de synthese omvat de koppeling van een prolinederivaat met formule 9 met een zuur met formule 10, het meest geschikt in de vorm van zuurchloride, waardoor men een product met formule 11 verkrijgt.

25 Het gevormde prolinederivaat met formule 11 wordt bij voorkeur door kristalliseren afgescheiden en gezuiverd, bijvoorbeeld door vorming van een zout, zoals dicyclohexylaminezout en vervolgens «zetting van dit zout in de vrije zuurvorm door behandeling met een oplossing van een zuur, zoals kaliumwaterstofsulfaat, 30 in water .

Het product met formule 11 dat de acylgroep R,--C0 bevat, kan desgewenst in het product met formule 1, waarin R^ een watextofatocm voorstelt, worden omgezet door hydrolyse met ammonia, natriumhydroxyde, enz.

35 Esters met formule 1, waarin R een lage alkylgroep 8000206 6 voorstelt, kunnen volgens gebruikelijke veresteringsmethoden, bijvoorbeeld door verestering met een diazoalkaan, zoals diazomethaan, l-alkyl-3-t-tolyltriazeen, zoals l-n-butyl-3-p-tolyltriazeen, enz., bij voorkeur na,het voltooien van de reeks hiervoor beschreven reac-5 ties, worden omgezet. Het is echter eveneens mogelijk eerder te ver-esteren en de alkalische hydrolyse weg te laten.

De verbindingen met formule 1 waarin de symmetrische bis-verbinding vormt, worden door directe oxydatie van een verbinding met formule 1, waarin R4 een waterstofatoom is, met jodium 10 verkregen.

Ter nadere informatie met betrekking toèhet bereiden van de uitgangsmaterialen en tussenproducten wordt verwezen naar de volgende publicaties: de Amerikaanse octrooischriften 4.046.889 en 4.105.776, J. Chem. Soc. (1945), 429-432, J. Amer. Chem. Soc., 79, 15 185-192 (1957) en J. Amer. Soc., 85_, 3863-3865 (1963). De daarin be schreven methoden kunnen als algemene methodieken voor de synthese en stereo-omzetting van verbindingen, die bij de uitvinding kunnen worden toegepast, worden benut.

Aanvullende experimentele gegevens zijn te vinden in 20 de voorbeelden, die aanbevolen uitvoeringsvormen weergeven en eveneens als richtlijnen voor het bereiden van andere leden van de groep dienen.

Zoals hiervoor vermeld, bezitten de verbindingen volgens de uitvinding een aantal centra van asymmetrie. Deze verbin-25 dingen kunnen dus in stereo-isomere vormen of in racemische mengsels daarvan voorkomen. Deze verschillende stereo-isomere vormen en mengsels daarvan vallen binnen het kader van de uitvinding. Bij de hiervoor beschreven synthese-methoden kunnen zowel het racemaat als één van de enantiomeren als uitgangsmateriaal worden gebruikt. Ver-30 krijgt men als product een mengsel van stereo-isomeren, dan kunnen deze stereo-isomeren desgewenst volgens gebruikelijke chromatogra-fische of gefractioneerde kristallisatiemethoden of door omzetting in een zout met een optisch actieve base gevolgd door gefractioneerde kristallisatie, of volgens overeenkomstige bekende methoden, 35 worden gescheiden. In het algemeen verdienen die verbindingen aan- 8000206 « 4 7 beveling, waarin het prolinegedeelte zich in de L-configuratie bevindt , de carbaaaatgroep cis is en de acylzijketen de D-configuratie heeft.

De verbindingen volgens de uitvinding vormen met 5 een groot aantal anorganische en anorganische basen basische zouten.

Het zoutvormende ion afgeleid van dergelijke basen kan een metaal-ion zijn, bijvoorbeeld aluminium, een alkalinetaalion, zoals natrium of kalium, een aardalkalimetaalion, zoals calcium of magnesium of een aminezoution, waarvan een aantal voor dit doel bekend is, bij-10 voorbeeld een ar^alkylamine, zoals dibenzylamine, N,N-dibenzyl-ethyleendiamine, een laag alkylamine, zoals methylamine, triethyl-amine, t-butylamine en procaine, een laag alkylpiperidine, zoals N-ethylpiperidine, een hydroalkylamine, zoals cyclohexylamine, di-cyclohexylamine, 1-adamantaanamine, en benzathine, of een zout, afge-15 leid van een aminozuur, zoals arginine, lysine, enz. De fysiologisch aanvaardbare zouten, zoals het natrium- of kaliumzout, kunnen op de hierna te beschrijven wijze in^geneeskunde worden toegepast en worden daarvoor aanbevolen. Deze en andere zouten die niet noodzakelijkerwijze uit fysiologisch oogpunt aanvaardbaar zijn, zijn bruikbaar 20 voor het afscheiden en zuiveren van een product voor de hierna beschreven doeleinden evenals wor het zuiveren of afscheiden van tussen-producten, zoals toegelicht in de voorbeelden. Deze zouten worden verkregen door de zuurvoxm van een verbinding te laten reageren met een equivalent van een base, dat in het milieu waarin het zout neer-25 slaat of in een waterig milieu het gewenste basische ion levert en daarna te vriesdrogen. De vrije zuurvorm kan volgens gebruikelijke neutniisatiemethoden, bijvoorbeeld met kaliumbisulfaat, zoutzuur, enz., uit het zout worden vrijgemaakt.

De verbindingen volgens de uitvinding remmen de om-30 zetting van het decapeptide angiotensins I in angiotensins II door het enzyme dat angiotensine omzet en kunnen daarom worden gebruikt voor het verminderen of verlichten van hypertensie bij verschillende zoogdieren, bijvoorbeeld katten, honden, muizen, ratten, enz. met een verhoogde bloeddruk, Zo zal dus door toediening van een doel-35 treffende hoeveelheid van een geneesmiddel dat één of een aantal 800020e 8 verbindingen met formule 1 en/of de fysiologisch aanvaardbare zouten daarvan bevat hypertensie in een zoogdier, dat daaraan lijdt, worden verminderd of verlicht.

Een enkele dosis of bij voorkeur twee tot vier par-5 tiêle dagelijkse doses, verschaft óp een basis van ongeveer 0,1 tot 100 mg/kg/dag, bij voorkeur ongeveer 1 tot 15 mg/kg/dag, is geschikt voor het verlagen van de bloeddruk, zoals blijkt uit proeven op dieren beschreven door S.L. Engel, T.R, Schaeffer, M.H. Waugh en B. Rubin, Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 143, 483 (1973). De verbinding 10 (en) volgens de uitvinding worden bij voorkeur oraal toegediend, doch parenterale routen, zoals subcutaan, intramusculair, intraveneus of intraperitoneaal, kunnen eveneens worden aangewend.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen eveneens tezamen met een diureticum in een geneesmiddel worden opgenomen 15 ter behandeling van hypertensie. Een dergelijk geneesmiddel, dat een verbinding volgens de uitvinding en een diureticum bevat, kan in een doeltreffende hoeveelheid, die (voor een zoogdier van 70 kg) een totale dagelijkse dosis tussen ongeveer 30 en 600 mg, bij voorkeur ongeveer 30 tot 300 mg, van een verbinding volgens de uitvinding en 20 ongeveer 15 tot 300 mg, bij voorkeur ongeveer 15 tot 200 mg, van een diureticum bevat, aan een zoogdier dat daaraan behoefte heeft, worden toegediend. Voorbeelden van diuretica, die tezamen met een verbinding volgens de uitvinding kunnen worden toegepast, zijn de thiazidediuretica, bijvoorbeeld chloorthiazide, hydrochloorthiazide, 25 flumethiazide, hydroglumethiazide, bendroflumethiazide, methylchloor-thiazide, trichloormethiaizde, polythiazide en benzthiazide, evenals ethacrynzuur, tricrynafeen, chloorthalidon, furosemide, bumetanide, triamtereen, amiloride en spironolacton, alsmede de zouten van der-gelijke verbindingen.

30 De verbindingen volgens de uitvinding kunnen worden toegepast voor het verlagen van de bloeddruk door ze te verwerken in geneesmiddelen, zoals tabletten, capsules en elixers voor orale toediening of in steriele oplossingen of suspensies voor parenterale toediening en toediening van deze preparaten. Hiertoe kan men ongeT 35 veer 10 tot 500 mg van een verbinding of mengsel van verbindingen 8000206 9 volgens de uitvinding net formule 1, en/of de fysiologisch aanvaardbare zouten daarvan, tezamen net een fysiologisch aanvaardbare drager, excipiint, bindmiddel, verduurzaningsniddel, stabilisator, smaakstoffen en reukstoffen, enz., in een eenheidsdoseringsvozm, 5 zoals gebruikelijk is in de farmaceutische praktijk, opnemen. De hoeveelheid van het actieve bestanddeel(en) in deze geneesmiddelen is zodanig, dat een geschikte dosering in het aangegeven traject wordt verkregen.

Voorbeelden van toevoegsels, die in de tabletten, 10 capsules en overeenkomstige geneesmiddelen kunnen worden opgenomen, zijn de volgende, een bindmiddel, zoals gomtragacanth, acacia, maïszetmeel of gelatine, een excipiint, zoals dicalciumfosfaat of nicro-kristallijne cellulose, een middel dat het uiteenvallen bevordert, zoals maïszetmeel, aardappelzetmeel, alginezuur, enz., een smeermid-15 del, zoals magnesiumstearaat, een zoetmiddel, zoals sucrose, lactose of saccharine, een smaakmiddel, zoals pepermuntolie enz. Is de dose-ringsvorm een capsule, dan kan deze behalve de materialen van het hiervoor genoemde type een vloeibare drager, zoals eenbogemolie, bevatten. Eveneens kunnen verschillende andere materialen is be-20 kledingsmiddelen of middelen die op een andere wijze de fysische vormkan de doseringseenheid modificeren aanwezig zijn. Zo kunnen bijvoorbeeld tabletten met shellak, suiker of een mengsel hiervan zijn bekleed. Zo kan een siroop of elixer een actief bestanddeel, sucrose als zoetmiddel, methyl- en propylparabenen als varduurzamingsmidde-25 len, een kleurstof en een smaakmiddel, zoals een sinasappel- of kersensmaakstof, bevatten.

Steriele geneesmiddelen voor injectiedoeleinden volgens kunnen gebruikelijke farmaceutische methoden worden verkregen door een actief bestanddeel in een drager, zoals water voor injectie-30 doeleinden, een in de natuur voorkomende plantaardige olie, zoals sesamolie, kokosnootolie, aardnotenolie, katoenzaadolie, enz., of een synthetische olie, zoals ethyloleaat, op te lossen of te suspenderen.

8000206 10

Voorbeeld X

trans-1-/ D-(3-acetylthlo) -2-methyl-l-oxopropyl7-4-/"7~ (methylamlno) -carbonyl?-οχγ7-L-proline« 5 a) N-Carboben2yloxy-trans-4-hydroxy-L-prollne.

Men liet 26,5 g (0,20 mol) trams-4-hydroxy-L-proline en 32,8 ml (0,23 mol) benzylchloorformiaat in aanwezigheid van 20 g (0,20 mol) kaliumbicarbonaat en 69,2 g (0,50 mol) kaliumcarbonaat reageren in 200 ml water en 100 ml aceton, waarna men het verkregen 10 reactiemengsel met 90 ml geconcentreerd zoutzuur opwerkte op de wijze als beschreven in Can. J. Biochem. en Physiol. 32., 584 (1959).

Ter vorming van het cyclohexylaminezout. liet men het verkregen product reageren met cyclohexylamine, opbrengst: 69 g, smeltpunt: 193-195°C. Door 34 g van dit zout te neutraliseren met IN zoutzuur 15 verkreeg men 27 g van het vrije zuur als een kleurloze glas.

/ <*_7q - 70° (c, 1% in chloroform).

b) De methylester van N-carbobenzyloxy^trans-4-hydroxy-L-proline.

Men veresterde 12,4 g (0,047 mol) N-carbobenzyloxy-20 trans-4-hydroxy-L-proline op de wijze als beschreven in J.A.C.S. 79., 191 (1957) in dioxan-ether met diazomethaan. Ter vermijding van het vastworden van dioxan werd aangevangen met het toevoegen van diazomethaan bij 10°c en wend het toevoegen voltooid bij 0-2°c. De opbrengst van de methylester van N-carbobenzyloxy-trans-4-hydroxy-L-25 proline ate een vrijwel kleurloze, visceuze olie bedroeg 14,6 g (100 %).

/”α ?D * -62 (c, 1 % in chloroform).

c) De methylester van trans-N-carbdbenzyloxy-4-/~/“(methylamino)-30 carbonyl7-oxy7-L-prollne.

Men voegde aan een geroerde oplossing van 6,0 g (0,021 mol) van de methylester van N-carbobenzyloxy-trans-4-hydroxy-L-proline (J.A.C.S. 79 supra) in 120 ml benzeen 6 ml (0,10 mol) me-thylisocyanaat toe en liet dit reactiemengsel een nacht bij kamer-35 temperatuur staan. Nadat men het 1 uur onder terugvloeikoeling had 800020? „ -4 11 gekookt, verwijderde men het oplosmiddel met behulp van een roterende verdampingsinrichting, tenslotte bij 0,2 mm en 50°C. Vervolgens nam men het verkregen viskeuze residu op in 150 ml diethylether, waste het driemalen met 50 ml water en droogde het boven magnesium-5 sulfaat. Door afdestilleren van de ether verkreeg men 6,5 g (90 %) van een siroopachtig product, de aethylester van trans-N-carboben-zyloxy-4-//~ (methylamino)carbonyl/oxj?-L-proline.

d) Trans-N-carbobenzyloxy-4-// (methylamino) carbonyl7-oxy7-L-prollne.

10 Hen loste 7,6 g (0,023 mol) van de ruwe ester van deel c op in 60 ml methanol, druppelde aan deze oplossing bij een temperatuur tussen -1 en 4°C 14 ml (0,028 mol) 2N-natriumhydroxyde toe en hield dit reactiemengsel eerst 1 uur op 0°c en daarna een nacht op kamertemperatuur. Na verwijderen van ongeveer de helft van 15 het oplosmiddel met behulp van een roterende verdampingsinrichting verdunde men de verkregen oplossing met 160 ml water, waste met diethylether uit (deed de wasvloeistoffen weg), zuurde onder koelen aan met 5,5 ml van 1:1 zoutzuur tot pH 2 en extraheerde viermalen met 75 ml ethylacetaat. De gecombineerde extracten werden uitgewas-20 sen met 50 ml van een verzadigde oplossing van natriumchloride in water en gedroogd boven magnesiumsulfaat, waarna men door af destilleren van het oplosmiddel 7,2 g van een zeer viskeuze siroop verkreeg. Men loste deze siroop op in 30 ml ethanol, behandelde deze oplossing met 2,3 g cyclohexylamine in 5 ml ethanol en verdunde met 25 600 ml diethylether. Door enten en wrijven scheidde het kristallijne cyclohexylaminezout zLch af. De opbrengst bedroeg na een nacht koelen 8,5 g, smeltpunt: 172-174°c. / * -20° (c, 1 % in ethanol).

Na kristalliseren uit 25 ml isopropanol woog het kleurloze, vaste trans-N-carbobenzyloxy-4-/7** (methylamino)carbonyl7oxy7-L-proline.

30 cyclohexylaminezout 7,8 g, smeltpunt: 174-176oc.

/~a 725 - -18° (c, 1 % in ethanol).

- - D

Men suspendeerde het verkregen cyclohexylaminezout in 60 ml ethylacetaat, roerde deze suspensie en behandelde haar met 40 ml lN-zoutzuur. Zodra twee heldere lagen waren verkregen werden 35 deze gescheiden, werd de verkregen waterlaag driemalen geëxtraheerd 8000206 12 met 60 ml extra ethylacetaat en werden de samengevoegde organische lagen boven magnesiumsulfaat gedroogd. Door af destilleren van het oplosmiddel verkreeg men 5,5 g (81 %) van het glasachtige vrije zuur.

5 e) trans-4-// (methylamino)carbonyl/-oxy/-L-prollne.

Hen behandelde een oplossing van 2,7 g (0,0084 mol) trans-N-carbobenzyloxy7-4-//~ (methylamino)carbonyl7oxy7-L-proline in 100 ml van een mengsel van methanol en water (2:1) met 1 g 5 % palladium op kool en 45 lb. waterstof en schudde dit mengsel 6 uren 10 in een hydrogeneringsinrichting volgens Parr. Daarna filtreerde men de katalysator af in een stikstof atmosfeer, waste met methanol en dampte de samengevoegde filtraten, tenslotte bij een druk tussen 0,1-0,2 nm, in, eaardoor men 1,5 g (96 %) van een residu verkreeg, dat langzamerhand uitkristalliseerde, waardoor men trans-4-/7 (me-15 thylamino)carbonyl7oxy7-L-proline als een grijsachtig vast product verkreeg. Smeltpunt: 213-215°c (ontl.), voorafgegaan door geleidelijk donker worden en sinteren. /”α 7β * ”12° (c, 0,25 % in 1:3 ethanol-methanol).

20 f) Trans-l-/~D-(3-acety1thio)-2-methy1-1-oxopropyl7-4-//~(methy 1-amino)carbonyl7oxy7-L-proline.

Men koelde een geroerde oplossing van 2,9 g (0,0154 mol) trans-4-/ (methylamino)carbonyl7oxy7-L-proline in 45 ml water af tot 5°C en voegde hieraan in porties vast natriumcarbonaat 25 tot pB 8,5 (ongeveer 0,4 g nodig) toe. Terwijl men het roeren en koelen voortzette, voegde men met behulp van een pipet een oplossing van 3,1 g (0,017 mol) D-3-acetylthio-2-methylpropanoylchloride in 4 ml diethylether in porties toe, waarbij men door toedruppelen van 25 % (gew./vol.) natriumcarbonaat de pH tussen 7,0 en 8,0 hield, 30 Na ongeveer 10 min. stabiliseert de pH zich tussen 8,1 en 8,3 (waarbij ongeveer 14 ml van de natriumcarbonaatoplossing waren toegevoegd). Na het voortzetten van het roeren en koelen gedurende in totaal 1,25 uren waste men de oplossing met 50 ml ethylacetaat, bracht een laag van 50 ml ethylacetaat aan, roerde, koelde en zuurde zorgvuldig met 35 1:1 zoutzuur aan tot pH: 2,0. Na verzadigen met natriumchloride 8000206 13 scheidde men de lagen af, extraheerde de waterfase driemalen met 50 ml extra ethylacetaat, droogde de samengevoegde organische lagen boven magnesiuasulf aat en destilleerde het oplosmiddel af, tenslotte bij een druk van 0,2 mm, waardoor men 5,3 g van een glasachtig resi-5 du verkreeg. Men loste dit op in 40 ml ethylacetaat en behandelde deze oplossing met een oplossing van 2,8 g dicyclohexylamine in 15 mi ethylacetaat» Door enten en wrijven scheidde het kristallijne trans-l-/~D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxypropyl/-4»·// (methylamino)-carbonyl7axy7-I»-proline. dicyclohexylamine zich af, dat, na een 10 nacht koelen, 5,8 g woog. Bet kleurloze product smolt tussen 187 en 189°C (s. 183°C), /"a_7p6- -64° (c, 1 % in MeOH). Na herkristalli-seren uit een mengsel van 15 ml methanol en 100 ml diethylether woog het kleurloze, vaste product 4,5 g. smeltpunt: 190-192°C, /"a_/^5 - -67° (c, 1 1 in MeOH).

15 Men maakte uit het dicyciohexylaminezout het zuur vrij door het zout te suspenderen in 50 ml ethylacetaat, de suspensie af te koelen en te behandelen met 50 ml van een 10 % kaliua-bisulfaatoplossing en te»eren totdat twee heldere lagen waren gevormd. Na afscheiden extraheerde men de waterlaag driemalen met 50 ml 20 ethylacetaat, droogde de samengevoeg-de organischelagen boven magne-siumsulfaat en destilleerde het oplosmiddel af, waardoor men 2,8 g (55 %) trans-l-/”b-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxypropyl7-4-/7”(methyl-amino) carbonyl7oxy7-L-proline als een schuimachtig, hygroscopisch residu verkreeg.

23

Voorbeeld IX

trans-1-(D-3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-/7“ (methylamino)carbo-nyl7oxy/-L-proline.

Men leidde argon gedurende 10 min. door een koude 30 oplossing van 6 ml geconcentreerde ammoniumhydroxyde in 4 ml water. Daarna voegde men deze oplossing onder koelen en een atmosfeer van argon toe aan het product van voorbeeld 1 en schudde het verkregen mengsel in een ijsbad (ongeveer 3 min.) totdat men een lichtgele oplossing verkreeg. Men zette het roeren in een argonatmosfeer en 35 bij kamertemperatuur gedurende in totaal 2 uren voort/ waarna men de 8000206 14 oplossing extraheerde met 20 ml ethylacetaat (deze en de daarna volgende behandelingen werden zoveel mogelijk in een argonatmosfeer uitgevoerd). Daarna koelde men de waterlaag, roerde, bedekte deze met 20 ml ethylacetaat en aiurde in porties aan met ongeveer 13 ml 5 1:1 zoutzuur. Vervolgens scheidde men de lagen, extraheerde water fase driemalen met 20 ml extra ethylacetaat, droogde de samengevoegde ethylacetaatlagen boven magnesiumsulfaat en destilleerde het oplosmiddel af, waardoor men trans-l-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopro-pyl)-4-// (methylaminó)carbonyl/ox^Z-L-proline als een kleverig, 10 schuimachtig residu verkreeg. Hen wrèéf dit met diethylether en herhaalde de verdampingsbehandeling, tenslotte bij een druk tussen 0,1 en 0,2 mm, waardoor men 2,2 g (90 % van het product als een kleurloos, enigszins hygroscopisch, amorf product, smeltpunt: 54-57°c, (S, 45°) verkreeg. / a · -53° (c, 1 % in ethanol).

15 De racemische vormen van de eindproducten verkregen bij elk van de voorgaande voorbeelden werden verkregen door toepassing van de DL-vorm van het amino-uitgangsmateriaal in plaats van de L-vorm.

Op overeenkomstige wijze werden de D-vormen van de 20 eindproducten in elk van de voorgaandevoorbeelden verkregen door uit te gaan van de D-vorm van het amino-uitgangsmateriaal in plaats van de L-vorm.

Voorbeeld III

25 a) De methylester van N-carbobenzyloxy-cls-4-hydroxy-L-proline.

Hen loste 6,5 'g (0,024 mol) N-carbobenzyloxy-cis-4-hydroxy-L-proline /"j.A.C.S., TSj 189 (1957)./ op in 65 ml methanol, roerde deze oplossing en voegde hieraan 0,65 ml geconcentreerd zwavelzuur toe. Na 30 min. roeren bij kamertemperatuur liet men de op-30 lossing een nacht staan. Daarna verwijderde men hiervan het grootste gedeelte van het oplosmiddel met behulp van een roterende verdampings-inrichting, nam het verkregen, olieachtige residu (13 g) op in 70 ml diethylether en waste met 35 ml van een 10 % natriumbicarbonaatop-lossing. De wasvloeistof werd weer geextraheerd met 35 ml diethyl-35 ether, tezamen gevoegde organische lagen werden gedroogd boven mag- 80 0 0 2 0 5 15 nesiumsdfaat en de diethylather werd afgedestilleerd, waardoor sen 6,5 g (96 %) van het product als een lichtgele viskeuze olie ver--25 o kreeg. / ct_/D * "24 (c, 1 % in chloroform), 5 b) De methylester van cis-N-carbobenzyloxy-4-/7~ (methylamlno)carbo-nyl7-oxy7-L-prollne.

Men voegde aan een g£oerde oplossing van 5,4 g (0,019 mol) van de methylester van N-carbobenzyloxy-cis-4-hydroxy-L-proline in 120 ml acetonitril eerst 5,4 ml triethylamine en daarna 10 5,4 ml methylisocyanaat toe. Nadat men het reactiemengsel een nacht bij kamertemperatuur had gehouden en 2 uren onder terugvloeikoeling had gekookt, werkte men het reactiemengsel op op de wijze als beschreven in voorbeeld 1c, waardoor men 5,6 g (86 %) van een lichtgele viskeuze olie verkreeg.

15 c) cis-N-(Carbobenzyloxy-4-/7 (methylamlno)carbonyl7-oxy7-L-prollne.

Men verzeepte 5,6 g (0,017 mol) van de ruwe ester van deel b met 11 ml (0,022 mol) 2N-natriumhydroxyde in 45 ml methanol, zoals beschreven in voorbeeld ld, waardoor men 5,1 g van een 20 schuimachtig residu verkreeg. Het kleurloze cyclohexylaminezout, bereid in 25 ml ethanol en 400 ml dLethylether onder toepassing van 1,7 g cyclohexylamine, woog 4,8 g; smeltpunt: 171-173°C.

- -25 o / q/D “ -16 (c, 1 % in ethanol). Een monster herkristalliseerd uit een mengsel van ethanol en diethylether vertoonde geen verandering in 25 smeltpunt of optische rotatie.

Het cyclohexylaminezout gaf 3,5 g (65 %) van het vrije zuur als een kleurloos, schuimachtig residu.

d) cis-4-/7~(methylamlno)carbonyl7oxy7-L-proline, 30 Men hydrogeneerde 3,5 g (0,011 mol) cis-N-carbobenzyl- oxy-4-// (methylamlno)carbonyl/oxy7-L-proline in 130 ml van een mengsel van methanol en water (2:1) onder toepassing van 1,3 g van een mengsel van methanol en water (2:1) en 1,3 g 5 t palladium op kool, zoals beschreven in voorbeeld Ie, waardoor men 1,9 g (95 %) 35 van het product als een grijsachtig, vast product verkreeg. Smelt- 8000206 16 punt: 232-234°c (ontl.), voorafgegaan door geleidelijk donker worden ** -25 o en sinteren. / α / -42 (c, 0,5 % in 1:1 methanol-water).

e) cis-1-/ D-(3-acetylthlo)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-1/7 (methylamino) - mm mm 5 carbonyl/oxy/-L-proline.

De reactie van 1,85 g (0,0098 mol) cis-4-// (methylamino) carbonyl7oxy7“L-proline en 2,0 g (0,011 mol) D-3-acetylthio-2-methylpropanoylchloride in 30 ml water in aanwezigheid van natrium-carbonaat, joals in voorbeeld If, gaf 3,35 g van een gomachtig pro-10 duet. Het dicyclohexylaminozout, bereid in 35 ml ethylacetaat onder toepassing van 1,8 g dicyclohexylamine, woog 4,0 g; smeltpunt: 177-179°C. / e * -54° (c, 1 * in methanol).

Na behandeling met 20 ml acetonitril en afkoelen woog het kleurloze, vaste product 3,6 g, smeltpunt:179-181°C.

15 / a_/^5 * -54° (c, 1 % in methanol).

Behandeling met een 10 % oplossing van kaliumbisul-faat en extraheren in ethylacetaat gaf 2,5 g (76 %) van het vrije zuur als een kleurloos, schuimachtig residu.

20 Voorbeeld IV

cis-1-(D-3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-/7 (methylamino)carbo-nyl7oxy7-L-proline.

Door behandeling van het materiaal van voorbeeld III met 5,5 ml geconcentreerde ammoniumhydroxyde in 12,5 ml water volgens 25 de werkwijze beschreven in voorbeeld II verkreeg men 1,8 g (82 %) van het product als een kleurloze, hygroscopische, kleverige schuim.

/ a_7^ ~ “59° (c, 1 * in ethanol).

Voorbeeld V

30 cis-1-/ D-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7~(athylamino)carbo- nyl7oxy7-L-prollne.

Onder toepassing van de werkwijze vein voorbeeld III, echter onder toepassing van ethylisocyanaat voor het methylisocya-naat van deel b, verkreeg men cis-1-/~D-(3-acetylthio)-3-methyl-l-35 oxopropyl7-4-//~ (ethyl amino) carbonyl7oxy7-I<-proline.

800020e » 17

Voorbeeld VI

cis-l-(D-3-Mercapto-2-ciethyl-l-oxopropyl)-4-// (ethylamino)carbonyl/-oxy/-L-proll.ne,

Door behandeling van het materiaal van voorbeeld V 5 met ammonia volgens de werkwijze beschreven in voorbeeld IV verkreeg men cis-1-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-/7 (ethylamino)- carbonyl/oxy7-L-proline.

Voorbeeld VII

10 cis-l-/ D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7 (propylamino)-carbonyl7oxy7-L-prollne.

Onder toepassing van de werkwijze beschreven in voorbeeld lllr waarbij echter n-propylisocyanaat in plaats van het methyl!socyanaat van deel b wordt toegepast, verkreeg men cis-1-/ D-15 (3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-// (propylamino)carbonyl7-oxy7-L-proline.

Voorbeeld VIII

cis—1—(P-3-Mercapto—2—methyl—1-oxopropyl)-4-/7 (propylamino)carbonyl/-20 oxy7-L-prollne.

Door behandeling van het materiaal van voorbeeld VII met ammonia volgens de werkwijze beschreven in voorbeeld IV verkreeg men cis-1-(D-3-mercapto-2-methyl~l-oxopropyl)-4-/7 (propylamino)-carbonyl7oxy7-L-proline.

25

Voorbeeld IX

cis-1-/ D-(3-Acetylthlo)-2-methyl-l-CTopropyl7-4-//‘~ (fenylamlno)-carbonyl7oxy7-L-prolIne.

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld III, 30 echter onder vervanging van het methylisocyanaat in deel b door fenylisocyanaat verkreeg men cis-l-/“D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-//"(fenylamino)-carbonyl7oxy7-L-proline.

8000206 18

Voorbeeld X

cis-l-(D-3-Mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-4-// (fenylamino)carbonyl7-oxy7-L-proIine.

Door behandeling van het materiaal van voorbeeld IX 5 met ammonia volgens de werkwijze beschreven in voorbeeld IV heeft men cis-l-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-//”(fenylamino)-carbonyl/ox^/-L-proline verkregen.

Voorbeeld XI

10 cis-1-/ D-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7 (4-chloorfenyl)- carbonyl7oxy7-Ii-proline,

Onder toepassing van de werkwijze beschreven in voorbeeld III, echter onder vervanging van het methylisocyanaat van deel b door 4-chloorfenylisocyanaat, heeft men cis-1-/~d-(3-acetyl-lS thio)-2-methyl-l-oxopropyl)-4-/7"(4-chloorfenyl)carbony l7oxy7-l*- proline bereid.

Voorbeeld XII

cis-1-(D-3-Mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-/7 (4-chloorfenyl)car-20 bonyl7oxy7-L-prollne.

Door behandeling van het materiaal van voorbeeld XI met ammonia volgens de werkwijze beschreven in voorbeeld IV, heeft men cis-1-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-/7 (4-chloorfenyl)-carbonyl7 oxy7-L-proline bereid.

25

Voorbeeld XIII

cls-1-/ D-(3-Acetylthlo)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-//'~(3-trifluor-methylfenyl)carbonyl7oxy7-L-proline♦

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld III, 30 echter onder vervanging van het methylisocyanaat in deel b door 3-trifluormethylfenylisocyanaat, heeft men cis-1-/"d-(3-acetylthio)- 2-methyl-l-oxoprqpyl7-4-/7~(3-trifluormethylfenyl)carbonyl7oxy7-L-proline bereid.

8000206 S. ;# 19

Voorbeeld XIV

cis-l-/~D- (Acetylthlo) -2-iae~thyl-l-oxopropyl7~4-/7~(2-methoxyfenyl) -carbonyl/oxy7-L-proline.

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld III, 5 echter onder vervanging van het methylisocyanaat van deel b door 2-methoxyfenylisocyanaat, heeft men cis-l-/"*D-(acetylthio)-2-methyl- 1- oxopropy1/-4-// (2-oethoxyfenyl)carbonyl7ox^/-L-proline bereid.

Voorbeeld XV

10 trans-l-/~D-(Benzoylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7~(2-ethylfenyl)-carbonyl7oxy7-L-prollna,

Onder toepassing vu de werkwijze van voorbeeld I, echter onder vervanging van het methylisocyanaat in deel c door 2- ethylfenylisocyanaat en het D-3-acetylthio-2-®ethylpropanoylchlo-15 ride in deel f door D-3-benzoylthio~2-methylpropanoylchlorida, heeft men trans-l-/~D-(benzoylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7 (2-ethyl-fenyl)carbonyl7oxy7-L-proline bereid.

Voorbeeld XVI

20 trans-l-/~D-(Fenacetylthlo)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7~(4-methyl-thlofenyl)carbonyl/oxy7-L-proline.

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld I, echter onder vervanging van het methylisocyanaat in deel c door 4-methylthiofenylisocyanaat en het D-(3-acetylthio)-2-methylpropa-25 noylchloride in deel f door D-fenylacetylthio-2-methylpropanoyl-chloride, heeft men trans-1-/”d-{fenacetylthlo)-2-oethy1-1-oxopropy 1 7-4-// (4-methylthiofeny 1)carbonyl7oxy7-L-pAine verkregen.

Voorbeeld XVII

30 trans-1-/ D-(3-Fenylpropionylthlo)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7~(3- broomf enyl) carbony ΐ7οχγ7-Ι»-ρ:το11ηο,

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld I, echter onder vervanging van het methylisocyanaat in deel c door 3- broomfenyllsocyanaat en het D-(3-acetylthio)-2-methylpropanoyl-35 chloride in deel f door D-(3-fenylpropionylthio)-2-methylpropanoyl- 8000206 20 chloride heeft men trans-1-/ D-(3-fenylpropionylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4 -//"* (3 -broomfenyl) carbonyl7oxy7-L-proline bereid.

Voorbeeld XVIII

5 trans-1-/~D-(3-Acetylthlo)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7~(cyclopentyl- amino)carbonyl7oxy7-L-prollne.

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld I, echter onder vervanging van het methylisocyanaat in deel c door cyclopentylisocyanaat, heeft men trans-1 -/ ~D- (3-acetylthio)-2-methyΙ-

ΙΟ l-oxopropyl7-4-// (cyclopentylamino)carbonyl7oxy/-L-proline bereid. Voorbeeld XIX

trans-1-/ D-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7~(cyclohexyl-amino)carbonyl7oxy7-L-proline.

15 Onder toepassing van de werkwijze beschreven in voorbeeld I, echter onder vervanging van het methylisocyanaat in deel c door cyclohexylisocyanaat, heeft men trans-1-/~D-(3-acetylthio) -2-methyl-l-oxopropyl7-4-// (cyclohexylamino)-carbonyl7oxy7-L-proline bereid.

20

Voorbeeld XX

cis—1—/*~Ρ—(3—Acetylthio) -2-methyl-l-oxopropy3.7-4-/7 <allylamlno) -carbonyl7oxy7-L-proline.

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld lil, 25 echter onder vervanging van het methylisocyanaat in deel b door allylisocyanaat, heeft men cis-1-/ D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropy 17-4-/7”(allylamino)carbonyl7oxy7-L-proline verkregen.

Voorbeeld XXI

30 cis-1- Tb-(3-Mercapto-2-methy1-1-oxopropyl)-4-/7** (allylamino)carbo-nyl7oxy7-L-proline,

Door behandeling van het materiaal van voorbeeld XX met ammonia volgens de werkwijze beschreven in voorbeeld IV heeft men cis-1-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-// (allylamino)-35 carbonyl/oxy7-L-proline bereid.

8000206 i * 21

Voorbeeld XXII

trans-1 -/"b-P-Acetylthlo) -2-methyl-l -oxopropyl/-4-/7~(diethylamlno) -earbonyl/oxy7-I.-prollne, 4.

5 a) De nethylester van trana-N-carbobenzyloxy-// (dimethylamino)-carbonyl7oxy7-L-proline«

Men druppelde aan een oplossing van de nethylester van N-carbobenzyloxy-trans-4-hydroxy-L-proline (voorbeeld ï, deel b) in chloroform een equivalente hoeveelheid dimethylcarbamylchloride 10 toe. Daarna roerde men het verkregen mengsel nog 2 uren, waste het met water en droogde de organische fase boven magnesiumsulfaat.

Door filtreren van de oplossing en afdestilleren van het oplosmiddel verkreeg men de methylester van trans-N-carbobenzyloxy-4-//"" {dimethylamino) carbonyl7oxjj/-L-proline.

15 b) trans-N-Carbobenzyloxy-4-/7~ (dimethylamino) carbonyl7oxy7-L-proline,

Door hydrolyse van de methylester van deel a met een natriumhydroxydeoplossing op de wijze beschreven in voorbeeld I, deel d, heeft men trans-N-carbobenzyloxy-4-// (dimethylamino)-20 carbonyl7ox^7-L-proline verkregen.

c) trans-4-/7~(Dimethylamino)-carbony1/οχγ7-L-proline.

Door hydr ogenering van het materiaal van deel b volgens de werkwijze beschreven in voorbeeld I, deel e, verkreeg 25 men trans-4-//~(dimethylamino)carbony1/οχγ/-L-proline.

d) trans-l-/~D-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-// (dimethyl-amino ) carbonyl7-οχγ/-L-proline.

Door behandeling van het materiaal van deel c met 30 een equivalente hoeveelheid D-3-acetylthio-2-methylpropanoylchlo-ride volgens de werkwijze beschreven in voorbeeld I, deel f, heeft men trans-1-/ D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl/-4-/7 (dimethylamino )carbonyl7ox^7-L-proline verkregen.

8000206 22

Voorbeeld XXIII

trans-1-/ D-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7~(pyrrolldino)-carbonyl7oxy7-L-proline,

Onder toepassing van de werkwijze beschreven bij de 5 bereiding van voorbeeld XXII, echter onder vervanging van het di-methylaminocarbamylchloride in deel a door pyrrolidinocarbamoyl-chloride, heeft men trans-1-/ D-{3-acety1thio)-2-methy1-1-oxopropyV- 4-/7 (pyrrolidine)carbonyl7oxy7-L-proline verkregen.

10 Voorbeeld XXIV

trans-l-/~p-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7™ (piperidino)-carbonyl7oxy7-L-proline.

Onder toepassing van de werkwijze beschreven bij de bereiding van voorbeeld XXII, echter onder vervanging van het di-15 methylaminocarbamoylchloride in deel a door piperidinocarbamylchlo-ride, heeft men trans-1-/ p-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7- 4-/7™(piperidino)carbonyl7oxy7-L-proline bereid.

Voorbeeld XXV

20 trans-l-/~p-(3-Acetylthio)-2-methyl-1-oxopropy1?-4-^/~(morfollno)- carbonyl7oxy7-L-próline.

Onder toepassing van de werkwijzer toege-past bij de bereiding van voorbeeld XXII, echter onder vervanging van het dimethylaminocarbamoylchloride in deel a door morfolinocarbamyl-25 chloride, heeft men trans-1-/"d-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7- 4-//-(morfolino)carbonyl7oxy7-L-proline bereid.

Voorbeeld XXVI

trans-1-(2-Acetylthio-l-oxoethyl)-4-/7™(methylamino)carbonyl7oxy7-30 L-proline.

Onder toepassing van de werkwijze beschreven bij de bereiding van voorbeeld I, echter onder vervanging van het D-(3- acetylthio)-2-methylpropanoylchloride in deel f door 2-acetylthio- acetylchloride, heeft men trans-1-(2-acetylthio-1-oxoethyl)-4-// (rae- 35 thylamino)carbonyl7oxy7-L-proline bereid.

• * 8000206 ΐ 23

Voorbeeld XXVII

trans-1-(4-Acetylthlo-1-oxobutyl)-4-//** (mathylamlno)carbonyl/oxy7-D-proline.

Onder toepassing van de werkwijze beschreven bij de 5 bereiding van voorbeeld I, echter onder vervanging van het trans-4-hydroxy-L-proline in deel a door trans-4-hydroxy-D-proline en het D-(3-acetylthio) -2-methylpropanoylchloride in deel f door 4-acetyl-thiobutyroylchloride heeft men trans-l-(4-acetylthio-l-oxobutyl)-4-//** (methylaaino)carbonyl7oxg7-D-proline verkregen.

10

Voorbeeld XXVIII

cls-l»(4~Acetylthlo-4-mathyl-l-oxdbutyl)-3-//~ (methylaaino)carbonyl7-oxy7-L-prollne.

Onder toepassing van de werkwijze beschreven bij de 15 bereiding van voorbeeld III, echter onder vervanging van het D-3-(acetyl thic>-3-methylpropionylchloride in deel e door 4-ecetylthio-valeroylchloride heeft men cis-l-(4-acetylthio-4-methyl-l-oxobutyl)- 3-// (methylaaino)carbonyl7oxy7-L-proline verkregen.

20 Voorbeeld XXIX

trans-l-/~L-(3-Acetylthlo)-2- ethyl-l-oocopropyl7-3-/7 (methylamino)-carbonyl7oxy7-L-prollne.

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld I, echter onder vervanging Van het trans-4-hydroxy-L-proline in deel a 25 door trans-3-hydroxy-L-proline en het D-3- (acetylthio) -3-methylpro-pionylchloride in deel f door L-(3-acetylthio)-2-ethylpropionyl-chloride, heeft men trams-1-/~L-(3-acetylthio)-2-ethyl-l-oxopropyl7- 3-//~(methylaaino)carbonyl7oxy7-L-proline verkregen.

30

Voorbeeld XXX

trans-l-/~D-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/"(ainlnocarbonyl)-oxy7-L-prollne.

a) De methylester van trans-M-carfaobenzyloxy-4-/ (aminocarbonyl)-oxy7-L-prollne« 8000206 ·> 24

Men behandelde een oplossing van equivalente hoeveelheden van de methylester van N-carbobenzyloxy-trans-4-hydroxy-L-proline van voorbeeld I, deel b, en dinethylaniline met een oplossing van fosgeen in tolueen, Nadat men het reactiemengsel een nacht 5 heeft laten staan, leictfemen een equivalente hoeveelheid ammoniak door de oplossing van de methylester van trans-N-carbobenzyloxy-4-/”(chloorcarbonyl)oxy/-L-proline. Na 12 uren staan bij kamertemperatuur wastemen de verkregen oplossing met water, droogfe haar boven magnesiumsulfaat, filtreeide haar en destilleerde het oplosmiddel af, 10 waardoor men de methylester van trans-N-carbobenzyloxy-4-/”(amino-carbonyl)oxy7-L-proline verkreeg.

b) trans-N-carbobenzyloxy-4-/’*(aminocarbonyl)-oxy/-L-proline.

Door hydrolyse van de methylester van deel a met 15 een oplossing van natriumhydroxyde op de wijze als beschreven in voorbeeld I, deel c, verkreeg men trans-N-carbobenzyloxy-4-/”(amino- mm carbonyl)oxy?-L-proline.

c) trans-4-/~(Aminocarbonyl)oxyZ-L-proline.

20 Door hydrogenering van het materiaal van deel b volgens de werkwijze beschreven in voorbeeld I, deel e, heeft men trans-4-/~(aminocarbonyl)oxy7-L-proline verkregen.

mm · d) trans-1-/ D-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/~(aminocarbo- 25 nyl)oxy7-L-proline.

Door behandeling van het materiaal van deel c met een equivalente hoeveelheid D-3-acetylthio~2-methylpropanoylchloride volgens de werkwijze beschreven in voorbeeld I, deel f, heeft men trans-l-/~D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl/-4-/ (aminocarbonyl)-30 oxy7-L-proline verkregen.

Voorbeeld XXXI

trans-1-/’p-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl/-4-// (dilsgpropyl-amino) carbonyVoxy?-!*-pro line.

35 Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld XXX, 8000206 25 echter onder vervanging van het ammoniak in deel a door d±isopropyl-amine heeft men trans-1-/ D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-//“(diisopropylamino)carbonyl7oxj7-I—proline verkregen·

5 Voorbeeld XXXII

trans-1-/ D-(3-Acetylthlo)-2-aethyl-l-oxopropyl/-4-/7~(cycloprftfl-amino) carbonyl/oxy7-L-proline ♦

Onder toepassing van de werkwijze beschreven in voorbeeld XXX, echter onder vervanging van het ammoniak in deel a 10 door cyclopropylamine heeft men trans-l-/~D-(3-acetylthio)-2-methyl- •m

1-oxopropyV-4-//**(cyclopropylamino)carbonyl7oxy7-L-proline bereid. Voorbeeld XXXIII

trans-l-Z^D-(3-Acetylthio)-2-methyl-1-oxopropy1/-4-// (n-butylamino)- 15 carbonyl7oxy7-L-proline.

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld XXX, echter onder vervanging van het ammoniak in deel a door n-butylamine heeft men trans-1-/ D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-// (n-butylamino)carbonyl7oxy7-l-proline verkregen.

20

Voorbeeld XXXIV

trans-1-/ D-(3-Acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7 (propargylamino)- cagbonyVoxy/-L-prollne.

Onder toepassing van de werkwijze van voorbeeld XXX, 25 echter onder vervanging van het ammoniak in deel a door propargyl-amine, heeft men trans-l-/”o-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7- 4-// (propargylamino)carbonyl7oxy7-L-proline verkregen.

Voorbeeld XXXV

30 De methylester van trans-l-/"p-(3-acetylthio)-2-oethyl-l-oxopropyl7- 4-/7 (methylamlno)czurbonyl7oxy7-1-proline.

Men voegde aan het oplossing van het materiaal van voorbeeld I in diethylether een geringe overmaat diazonethaan toe.

Nadat men het reactiemengsel 2 uren bij kamertemperatuur had geroerd, 35 destilleerde men het oplosmiddel af, waardoor men de methylester van 8000206 26 trans-1-/ d-(3-acetylthio) -2-methyl-l-oxopropyl7-4-//” (methylamino) carbonyl7ox^/-L-proline verkreeg.

Voorbeeld XXXVI

5 Het S,S-dimeer van trans-l-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-/7 (methylamino) carbony l7oxy/-I.-proline.

Hen behandelde een geroerde oplossing van het materiaal van voorbeeld II in ethanol met een oplossing van één equivalent jodium in ethanol. Door toevoeging van een IN-natriumhydroxyde-10 oplossing hield men de pH van deze oplossing tussen 6 en 7. Daarna verdampte men het oplosmiddel en extraheerdehet verkregen residu met ethylacetaat. Na drogen boven magnesiumsulfaat filtreerde men de oplossing en verwijderde het oplosmiddel, waardoor men het S,S-dimeer van trans-1-(D-3-mercapto-2-methyl-1-oxopropy1)-4-/7”(methylamino)-15 carbony l7oxy7-I»-proline verkreeg.

Voorbeeld XXXVII

Het S,S-dimeer van cis-l-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-/7"(methylamino )carbonyl7oxo7-L-proline.

20 Door oxydatie van het materiaal van voorbeeld IV met een oplossing van jodium volgens de methode toegepast in voorbeeld XXXVI verkreeg men het S,S-dimeer van cis-l-(D-3-mercapto-2-methyl- 1-oxopropyl)-4-/7”(methylamino)carbonyl7oxo7-I*. proline.

25 Voorbeeld XXXVIII

Het natriumzout van trans-1-/ D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7- 4-/7 (methylamino)carbonyl7oxy7-L-prollne.

Hen behandelde een oplossing van 2,9 g van het materiaal van voorbeeld I in 25 ml water met 0,84 g natriumbicarbonaat.

30 Door vriesdrogen van de verkregen oplossing verkreeg men het natriumzout van trans-1-/ D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl7-4-/7 (methylamino) c arbony17-ox^7-L-proline.

Voorbeeld XXXIX

35 Men vervaardigde 1000 tabletten die elk 100 mg actief 8000206 27 bestanddeel bevatten uit de volgende bestanddelen; cis-1 - (D-3-mercapto-2-methyl-l -oxopropyl) - 4-/7 (aethy laai nol carbonyl7ox^7”L'-proline 100 mg 5 maïszetmeel 50 g gelatine 7,5 g

Avicel (microkristallijne cellulose) 25 g magneslusstearaat 2,5 g 10 Men mengde het cis-1 - (D-3-mercapto-2-methyl-l -oxo- propyl) -4-// (methylamino) carbonyl/oxy/-L-proline en maïszetmeel met een waterige oplossing van het gelatine. Men droogde dit mengsel en maalde het tot een fijn poeder. Daarna mengde men de Avicel en vervolgens het magnesiumstearaat met het verkorrelde product. Dit wordt 15 daarna in een tabletpers geperst onder vorming van 1000 tabletten, die elk 100 mg actief bestanddeel bevatten.

Voorbeeld XL

Men vervaardigde 1000 tabletten, die elk 200 mg 20 trans-1-(D-3-mercapto-l-oxopropyl)-4-// (methylamino)carbonyl/ox^?- L-proline bevatten uit de volgende bestanddelen: trans-1-(D-3-mercapto-l-oxopropyl)-4- /7 (methylamino) carbonyl7oxy7-I*-proline 200 g 25 lactose 100 g

Avicel 150 g maïszetmeel 50 g magnesiumstearaat 5 g 30 Men mengde het trans-l-(D-3-mercapto-l-oxopropyl)- 4-// (methylamino)carbonyl/ox^/-L-proline, de lactose en het Avicel en mengde het aldus verkregen mengsel daarna met maïszetmeel. Vervolgens voegde men magnesiumstearaat toe. Men perste het verkregen droge mengsel in een tablettenpers tot 1000 tabletten van 505 mg, 35 die elk 200 mg actief bestanddeel bevatten. De tabletten werden be- 8000206 28 kleed met een oplossing van Methocel £ 15 (ethylcellulose) die als kleurstof een lak met geel #6 bevatte.

Voorbeeld XL·! 5 Uit twee delen bestaande φφΐ gelatinecapsules, die elk 250 mg trans-1-(D-3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-4-/7 (methyl-amino)carbonyl7oxy7-L-proline bevatten, werden gevuld met een mengsel van de volgende bestanddelen: 1o trans-1-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)- 4-/7 (methylamino)carbonyl7ox^7-L-proline 125 mg magnesiumstearaat 3 mg USP lactose 100 mg

15 Voorbeeld XLII

Men bereidde op de volgende wijze een injecteerbare oplossing uit de volgende bestanddelen: trans-1-(D-3-mercapto-2-methyH-oxopropyl)-20 4-//”(methylamino)carbonyl7oxy7“I*-proline 500 g methylparabeen 5 g propylparabeen 1 g natriumchloride 25 g water voor injectiedoeleinden q.s. 51 25

Men loste het actieve bestanddeel, de verduurzamings-middelen en het natriumchloride op in 3 1 water voor injectiedoeleinden en bracht vervolgens het volume op 5 1. Daarna filtreerde men deze oplossing door een stereofilter en bracht haar op aseptische 30 wijze in van te voren gesteriliseerde flesjes, die vervolgens met gesteriliseerde rubberdoppen werden afgesloten. Elk flesje bevatte 5 ml oplossing in een concentratie van 100 mg actief bestanddeel per ml oplossing, 6000206

Claims (24)

1. 2. Verbindingen volgens conclusie 1, waarin R een waterstofatoom voorstelt.
2. 3. Verbindingen volgens een der voorgaande conclusies, waarin n 1.
3. 4. Verbindingen volgens een der voorgaande conclusies, waarin R^ een waterstofatoom weergeeft.
4. 5. Verbindingen volgens een der voorgaande conclusies, waarin R2 een lage alkylgroep voorstelt.
5. 6. Verbindingen volgens een der voorgaande conclusies, 25 waarin R& een lage alkylgroep voorstelt.
6. 7. Verbindingen volgens een der voorgaande conclusies, waarin R4 een groep met formule la weergeeft.
7. 8. Verbindingen volgens een der voorgaande conclusies, waarin de amidegroep zich op de metaplaats ten opzichte van zowel de
8. 30 COOR-groep als het stikstofatoom van de pyrrolidinering bevindt, waarin R, R , R., R_, R_, R. en n dezelfde betekenissen hebben als 0 12 3 4 in conclusie 1.
9. 9. Verbindingen volgens conclusie 8, waarin R een waterstofatoom of een lage alkylgroep, R en R., onafhankelijk van o 1 35 elkaar, een alkylgroep met ten hoogste 4 koolstof atomen, R^ en R^, 8000206 ζ· onafhankelijk van elkaar, een waterstofatoom of een alkylgroep met ten hoogste 4 koolstofatomen, R^ een waterstofatoom, een lage alka-noyl of benzylgroep en n 0 of 1 voorstellen,
10. 10. Verbindingen volgens conclusie 8, waarin R en 5 elk een waterstofatoom, Rq en , onafhankelijk van elkaar, een alkylgroep met ten hoogste 4 koolstofatomen, R^ en R^, onafhankelijk van elkaar, een waterstofatoom of een methylgroep en η 1 voorstellen,
11. 11. Verbindingen volgens conclusie 8, waarin R, R^, R. en R. elk een waterstofatoom, R en R„ elk de methylgroep en n 10. voorstellen.
12. 12. Verbindingen volgens conclusie 8, waarin R, R^ en R^ elk een waterstofatoom, Rq en R^ elk de methylgroep, R^ een acetylgroep en η 1 voorstellen.
13. 13. Trans-1-/ D-(3-acetylthio)2-methyl-l-oxopropyl/- 15 4-//~ (methylamino) carbonyl/oxy/-L-proline volgens conclusie 8.
14. 14. Trans-l-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4-/7 (methylamino)carbonyl7oxy/-L-proline volgens conclusie 8.
15. 15. Cis-1-/ D-(3-acetylthio)-2-methyl-l-oxopropyl/- 4-/7” (methylamino) carbonyl7oxy7-l»-proline volgens conclusie 8.
16. 16. Cis-l-(D-3-mercapto-2-methyl-l-oxopropyl)-4- /7 (methylamino)carbonyl7oxy7“I»-proline volgens conclusie 8.
17. 17. De verbinding met formule 9, waarin R en R. de- o 1 zelfde betekenissen hebben als in conclusie 1.
18. 18. Verbinding volgens conclusie 17, waarin R^ een 25 lage alkylgroep is. 19. < Verbinding volgens conclusie 17, waarin R de O methylgroep en R^ een waterstofatoom voorstellen.
19. 20. Werkwijze voor het bereiden van een geneesmiddel voor het verlagen van de bloeddruk, met het kenmerk, dat men één of 30 een aantal verbindingen volgens conclusie 1, waarin de substituenten en symbolen de in conclusie 1 aangegeven betekenissen hebben, en/of een zout daarvan, in een voor een dergelijke toepassing geschikte toedieningsvorm brengt,
20. 21. Werkwijze volgens conclusie 20, met het kenmerk, 35 dat men in het geneesmiddel tevens een farmaceutisch aanvaardbare 8000206 '·*·>· drager opneemt,
21. 22, Werkwijze volgens conclusie 20 of 21, met het kenmerk, dat men één van de verbindingen volgens conclusie 2-19, en/of een zout daarvan, toepast,
22. 23. Werkwijze voor het verlagen van de bloeddruk in hyperténsieve zoogdieren, wet het kenmerk, dat men aan deze zoogdieren een geneesmiddel volgens conclusie 20-22 toedient.
23. 24. Werkwijzen, als beschreven in de beschrijving en/of de voorbeelden. 10 25, Gevormde geneesmiddelen, verkregen onder toe passing van een werkwijze volgens conclusies 20, 21, 22 en 24. / 8000206 /v^-OCO-N f. «. r^T xr, i —S-(ChI -CH— CO — N-L- CO OR y'R· OCO-N \ 'x R1 1a s—Mh| -CH—CO— N-1—COOR 1 Λ1 * * * r°f0H r°fH 3 HN-L COOH - Cbz — N-1— COOH y Re OH OCOtY l^xT fX \r, 5 Cbz-N-—COOR Cbz—N-L COOR 4 ^ OCOCl D r^x / ö I haL — CO — N Cbz — N-1—COOR -. \ -
24. 0 R1 7 /Ro ^ OCON 0°° Nx • rx \ rx Ri Cbz — N-L COOH g HN--C00H R> * Rs _co — s — (ch)w— CH-COOH Ί0 R. OCO-NC Rj Rz XX x-Ri Rs CO —S — (CH^ CH-CO —N-LCOOH 11 8000206 E.R. SQUIBB & SONS, INC., te Princeton, New Jersey, Ver.St.v.Amerika