NL2000514C2 - Dibenzylamine-verbindingen en -derivaten. - Google Patents

Description

]

Dibenzylamine-verbindingen en -derivaten Achtergrond van de uitvinding 5 De onderhavige uitvinding heeft betrekking op dibenzylamine-verbindingen en -derivaten, op farmaceutische samenstellingen die dergelijke verbindingen bevatten en op de toepassing daarvan voor het verhogen van bepaalde plasma-lipidegehaltes, waaronder hoge-dichtheid-lipoproteïne (HDL)-cholesterol, en voor het verlagen van bepaalde andere plasma-lipidegehaltes, zoals lage-dichtheid-lipoproteïne (LDL)-choleste-10 rol en triglyceriden, en het dienovereenkomstig behandelen van ziektes die worden beïnvloed door lage gehaltes aan HDL-cholesterol en/of hoge gehaltes aan LDL-cho-lesterol en triglyceriden, zoals atherosclerose en cardiovasculaire ziektes bij bepaalde zoogdieren (d.w.z., die met CETP in hun plasma), waaronder mensen.

Atherosclerose en de daarmee gepaard gaande kransslagaderziekte (CAD) is de 15 belangrijkste doodsoorzaak in de geïndustrialiseerde wereld. Ondanks pogingen tot het veranderen van secundaire risicofactoren (roken, zwaarlijvigheid, gebrek aan beweging) en de behandeling van dyslipidemie met een verandering van het dieet en een medicamentbehandeling, blijft coronaire hartziekte (CHD) de meest algemene doodsoorzaak in de VS, waar cardiovasculaire ziekte 44% van alle doodsoorzaken bedraagt, 20 met 53% hiervan geassocieerd met athersclerotische coronaire hartziekte.

Er is aangetoond dat het risico op het ontwikkelen van deze aandoening in hoge mate gecorreleerd is met bepaalde plasma-lipidegehaltes. Terwijl verhoogd LDL-C de bekendste vorm van dyslipidemie is, is dit zeker niet de enige significante, met lipide geassocieerde bijdrage aan CHD. Laag HDL-C is eveneens een bekende risicofactor 25 voor CHD (Gordon, D.J., et al.,: "High-density Lipoprotein Cholesterol and Cardiovascular Disease", Circulation, (1989), ]9: 8-15).

Hoge LDL-cholesterol- en triglyceride-gehaltes hebben een positieve correlatie, terwijl hoge gehaltes aan HDL-cholesterol een negatieve correlatie hebben met het risico op het ontwikkelen van cardiovasculaire ziektes. Aldus is dyslipidemie geen uni-30 tair risicoprofiel voor CHD maar kan dit bestaan uit een of meer lipide-afwijkingen.

Van de vele factoren die plasmagehaltes van deze van een ziekte afhankelijke principes regelen beïnvloedt de cholesterylester-overdracht-eiwit (CETP) activiteit alle drie. De rol van dit plasma-glycoproteïne van 70.000 dalton dat wordt gevonden in een 2 aantal dierlijke species, waaronder mensen, is het overbrengen van cholesterylester en -triglyceride tussen lipoproteïnedeeltjes, waaronder hoge-dichtheid-lipoproteïnen (HDL), lage-dichtheid-lipoproteïnen (LDL), zeer-lage-dichtheid-lipoproteïnen (VLDL) en chylomicronen. Het netto resultaat van de CETP-activiteit is een verlaging van 5 HDL-cholesterol en een verhoging van LDL-cholesterol. Er wordt aangenomen dat dit effect op het lipoproteïne-profiel pro-atherogeen is, in het bijzonder bij personen waarvan het lipide-profiel een verhoogd risico vormt voor CHD.

Tegenwoordig zijn niet geheel bevredigende HDL-verhogende behandelingen in de handel verkrijgbaar. Niacine kan HDL significant verhogen, maar heeft ernstige 10 verdraagzaamheidsproblemen die de compliantie verminderen. Fibraten en de HMG-CoA-reductase-inhibitoren verhogen HDL-C, maar bij sommige patiënten is het resultaat een gematigde toename (~10-12%). Als gevolg daarvan is er een onbevredigde medische behoefte aan een goedgekeurd therapeutisch middel dat plasma-HDL-gehal-tes verhoogt, waarbij de voortgang van atherosclerose wordt omgekeerd of vertraagd.

15 Dus hoewel er een verscheidenheid van anti-atherosclerose-behandelingen be staat is er een voortdurende behoefte en een voortdurende zoektocht op dit gebied naar andere behandelingen.

Samenvatting van de uitvinding 20

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op verbindingen met de formule I

R2

'\_......A

JT\ V^' ƒ R7

B

25 Formule I

of een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de verbinding; waarbij 3 A -COO(Ci-Chalky 1, cyaan, -CHO, -CONH2, -CO(Ci-ChalkyI of Q is, waarbij Q een vijf of zes leden tellende volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring is, waarbij ieder ringatoom, behalve het atoom dat is gebonden aan N van de formule I, kan zijn vervangen door een stikstof-, zuurstof- of zwavel-5 atoom, en waarbij ieder ringatoom eventueel gesubstitueerd kan zijn met cyaan, een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde rechte of vertakte keten met 1 tot 6 koolstofatomen, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring met 3 tot 8 koolstofatomen, waarbij ieder kool-stofatoom van de keten of ring eventueel is vervangen door een heteroatoom dat wordt 10 gekozen uit stikstof, zuurstof en zwavel, en waarbij het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met amino, halogeen, cyaan, hydroxy, oxo, carboxyl, (Ci-Cöjalkoxycarbonyl, ((Ci-Céjalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hy-droxylgroepen), ((Ci-Cöjalkoxy dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halo-15 geenatomen of een of twee hydroxylgroepen) of ((Ci-Cójalkylthio dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), en waarbij het stikstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met cyaan, oxo, (C1 -Cejalkoxycarbonyl of ((Ci-Cójalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), 20 waarbij het zwavelatoom van de keten of ring gesubstitueerd is met een of twee oxo, een tot vijf fluoratomen of aminogroepen, en de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met een groep V, waarbij V een drie tot zes leden tellende volledig verzadigde, gedeeltelijk verzadigde of volledig onverzadigde ring is die nul tot vier heteroatomen bevat die worden gekozen uit stikstof, zuurstof of 25 zwavel en eventueel gesubstitueerd is met een tot vijf groepen die worden gekozen uit waterstof, halogeen, cyaan, hydroxy, oxo, carboxyl, (C1 -Cöjalkoxycarbonyl, ((Ci-Cójalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), ((Ci-C6)alkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen) of ((Ci-C6)alkylthio dat even-30 tueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen); B -OR17 of-S(0)„R18 is; X C of N is, waarbij als X N is, R4 afwezig is; 4 Y -CRUR12 is; R1, R2, R3, R4, R5, R6 en R7 ieder onafhankelijk waterstof, halogeen, cyaan, hydroxy, nitro, ((Ci-Cfijalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halo-geenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een of twee (Ci-Céjalkoxygroepen, een of 5 twee amino-, cyaan-, oxo- of carboxygroepen), ((Ci-Cöjalkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen of cyaan) of ((Ci-C6)alkylthio dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen of cyaan) zijn of R1 en R2 of R2 en R3 samen een 5 tot 7 leden tellende, gedeeltelijk onverzadigde 10 of volledig onverzadigde ring vormen, waarbij ieder koolstofatoom van de ring eventueel is vervangen door een zuurstofatoom, waarbij de zuurstofatomen niet met elkaar verbonden zijn, waarbij de ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig, drievoudig of viervoudig gesubstitueerd is met halogeen, en eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met hydroxy, amino, nitro, cyaan, oxo, carboxy, ((Ci-Céjalkyl dat eventueel 15 is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een of twee (Ci-Cójalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitro-, cyaan-, oxo- of carboxygroepen) of ((Ci-C6)alkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen of cyaan); R8, R9, R10, R13 en R14 onafhankelijk waterstof, aryl of ((Ci-Chalky 1 dat even-20 tueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen) zijn; R11 en R12 ieder onafhankelijk waterstof, een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde keten met 1 tot 2 koolstofatomen, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde mono- of bicycli-sche ring met 3 tot 10 koolstofatomen zijn, waarbij de ring eventueel bicyclisch is, en 25 waarbij ieder koolstofatoom van de ring eventueel is vervangen door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof of zwavel, en het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met R19, en waarbij R11 en R12 niet gebonden zijn aan het koolstofatoom van Y aan een hetero-atoom, en waarbij R en R niet beide waterstof zijn, of 30 R11 en R12 samen een 3 tot 8 leden tellende, volledig verzadigde of gedeeltelijk onverzadigde mono- of bicyclische ring met eventueel een tot vier heteroatomen, gekozen uit zuurstof, stikstof en zwavel, vormen, waarbij de ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met R19; 5 R17 en R18 ieder onafhankelijk -(C,-C6)alkyi-NR8R9, -(C0-C6)alkyl-CO-NR8R9, -(C0-C6)alky 1-CO-OR1 °, -(C!-C6)alkyl-NR'3-(Co-C6)alkyl-CO-0-R10, -(Ci-C6)alkyl- NR13-(Co-C6)alkyl-CO-Rl4,-(Ci-C6)alkyl-NRl3-(Co-C6)alkyl-S02-R10, -(Ci-C6)alkyl-0-CO-NR8R9, -(C2-C6)alkenyl-CO-0-R10, -(C0-C6)alkyl-aryl, -(C0-C6)alkyl-heteroaryl, -5 (Ci-Cöjalkyl-O-aryl, -(Ci-Cejalkyl-O-heteroaryl, -(Co-Cöjalkyl-heterocyclische groep, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkyl, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkenyl, (C2-C6)alkynyl, (C2-C6)alkenyl, (Ci-Cö)alkyl of -CO-(Ci-C6)alkyl zijn, waarbij de aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkenyl-, cycloalkyl-, alkynyl-, alkenyl- en alkylgroepen ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen halogeenatomen, een of 10 twee hydroxygroepen, een tot drie (Ci-Cójalkylgrocpen, een tot drie (Ci-Céjhalogeenalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cé)alkoxygroepen, een tot drie (Ci-Cöjhalogeenalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitro-, cyaan-, oxo-of carboxygroepen, behalve dat R17 geen aryl of heteroaryl is; iedere R19 onafhankelijk -(C0-C6)alkyl-NR8R9, -(C0-C6)alkyl-CO-NR8R9, -(C0-15 C6)alkyl-CO-OR10, -(C0-C6)alkyI-NR13-(Co-C6)alkyl-CO-0-R10, -(Co-C6)alkyl-NR'3-(C0-C6)alkyl-CO-R14, -(Co-C6)alkyl-NR13-(Co-C6)alkyl-S02-R10, -(C0-C6)alkyl-O-CO-NR8R9, -0-(Ci-Cöjalky 1-CO-OR1 °, -(C2-C6)alkenyl-CO-0-R10, -(C0-C6)alkyl-aryl, -(Co-Céjalkyl-heteroaryl, -O-(C0-C6)alkyl-aryl, -0-(Co-Ce)alkyl-heteroaryl, -(Co-Cé)-alkyl-O-aryl, -(Co-Cöjalkyl-O-heteroaryl, -(Co-C6)alkyl-heterocyclische groep, -0-(Co-20 Cójalky-heterocyclische groep, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkyl, -0-(Co-C6)alkyl-(C3-Cójcycloalkyl, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkenyl, halogeen, (C2-C6)alkynyl, (C2-C6)alkenyl, (Ci-C6)alkyl, (C3-C6)cycloalkyl, hydroxy, (Ci-C6)alkoxy, (Ci-C4)alkylthio, nitro, cyaan, oxo of-CO-(Ci-C6)alkyl is, waarbij de aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkenyl-, cycloalkyl-, alkynyl-, alkenyl-, alkyl- en alkoxygroepen ieder eventueel 25 onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxygroepen, een tot drie (Ci-Cöjalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cöjhalogeenalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cöjalkoxygroepen, een tot drie (Ci-Céjhalogeenalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitro-, cyaan-, oxo-of carboxygroepen; en 30 n 0, 1 of 2 is.

Daarnaast verschaft de onderhavige uitvinding farmaceutische samenstellingen welke een therapeutisch werkzame hoeveelheid van een verbinding volgens de onder 6 havige uitvinding, of een farmaceutisch aanvaardbare vorm van de verbinding, en een farmaceutisch aanvaardbaar medium, verdunningsmiddel of drager omvatten.

Daarnaast verschaft de onderhavige uitvinding farmaceutische samenstellingen voor de behandeling van atherosclerose, kransslagaderziekte, coronaire hartziekte, co-5 ronaire vasculaire ziekte, periferale vasculaire ziekte, dyslipidemie, hyperbetalipopro-teinemie, hypoalfalipoproteinemie, hypercholesterolemie, hypertriglyceridemie, familiale hypercholesterolemie of hartinfarct bij een zoogdier welke een therapeutisch werkzame hoeveelheid van een verbinding volgens de onderhavige uitvinding, of een farmaceutisch aanvaardbare vorm van de verbinding, en een farmaceutisch aanvaard-10 baar medium, verdunningsmiddel of drager omvatten.

Verder verschaft de onderhavige uitvinding farmaceutische combinatiesamenstel-lingen welke omvatten: een eerste verbinding, waarbij de eerste verbinding een verbinding volgens de onderhavige uitvinding, of een farmaceutisch aanvaardbare vorm van de verbinding, is; 15 een tweede verbinding, waarbij de tweede verbinding een HMG-CoA-reductase- inhibitor, een MTP/Apo-B-secretie-inhibitor, een PPAR-modulator, een galzuur-herop-name-inhibitor, een cholesterol-absorptie-inhibitor, een cholesterol-synthese-inhibitor, een fibraat, niacine, een antihypertensiemiddel, een combinatie van niacine en lovasta-tine, een ionenuitwisselingshars, een antioxidans, een ACAT-inhibitor of een galzuur-20 sekwestreermiddel (bij voorkeur een HMG-CoA-reductase-inhibitor, een PPAR-modulator, fenofibraat, gemfibrozil, lovastatine, simvastatine, pravastatine, fluvastatine, atorvastatine, rivastatine, rosuvastatine of pitavastatine) is; en een farmaceutisch medium, verdunningsmiddel of drager. Deze samenstelling kan worden toegepast voor het behandelen van de hiervoor vermelde ziektes, waaron-25 der atherosclerose.

Tevens verschaft de onderhavige uitvinding een kit voor het bereiken van een therapeutisch effect bij een zoogdier, welke verpakt in verband daarmee een eerste therapeutisch middel, welke een therapeutisch werkzame hoeveelheid van een verbinding volgens de onderhavige uitvinding, een pro medicament daarvan of een farmaceutisch 30 aanvaardbaar zout van de verbinding of van het promedicament en een farmaceutisch aanvaardbare drager omvat, een tweede therapeutisch middel, dat een therapeutisch werkzame hoeveelheid van een HMG-CoA-reductase-inhibitor, een PPAR-modulator, een cholesterol-absorptie-inhibitor, een cholesterol-synthese-inhibitor, een fibraat, nia- 7 cine, een combinatie van niacine en lovastatine, een ionenuitwisselingshars, een anti-oxidans, een ACAT-inhibitor of een galzuur-sekwestreermiddel en een farmaceutisch aanvaardbare drager omvat, en aanwijzingen voor het toedienen van de eerste en twee middelen voor het bereiken van het therapeutische effect omvat.

5 Het zal duidelijk zijn dat zowel de voorgaande algemene beschrijving als de vol gende gedetailleerde beschrijving slechts bij wijze van voorbeeld en toelichting zijn en niet beperkend zijn voor de uitvinding zoals die wordt gegeven in de conclusies.

Gedetailleerde beschrijving van de uitvinding 10

De onderhavige uitvinding kan beter worden begrepen met betrekking tot de volgende gedetailleerde beschrijving van voorbeelden van uitvoeringsvormen van de uitvinding en de daarin opgenomen voorbeelden.

Voordat de onderhavige verbindingen, samenstellingen en werkwijzen worden 15 beschreven dient het duidelijk te zijn dat deze uitvinding niet beperkt is tot specifieke synthetische bereidingswijzen, die natuurlijk kunnen variëren. Het dient tevens duidelijk te zijn dat de terminologie die hierin wordt toegepast alleen dient voor het beschrijven van bepaalde uitvoeringsvormen en niet als beperking dient te worden opgevat.

De onderhavige uitvinding heeft tevens betrekking op de farmaceutisch aanvaard-20 bare zuur-additiezouten van verbindingen volgens de onderhavige uitvinding. De zuren die worden gebruikt voor het bereiden van de farmaceutisch aanvaardbare zuur-additiezouten van de hiervoor genoemde base-verbindingen volgens deze uitvinding zijn die welke niet-toxische zuur-additiezouten vormen (d.w.z. zouten die farmacologisch aanvaardbare anionen bevatten, zoals de hydrochloride-, hydrobromide-, hydrojodide-, 25 nitraat-, sulfaat-, waterstofsulfaat-, fosfaat-, zuurfosfaat-, acetaat-, lactaat-, citraat-, zuurcitraat-, tartraat-, waterstoftartraat-, succinaat-, maleaat-, fUmaraat-, gluconaat-, sacharaat-, benzoaat-, methaansulfonaat-, ethaansulfonaat-, benzeensulfonaat-, p-to-lueensulfonaaten pamoaat- (d.w.z. l,l'-methyleenbis(2-hydroxy-3-naftoaat)-) zouten).

De uitvinding heeft tevens betrekking op base-additiezouten van de verbindingen 30 volgens de onderhavige uitvinding. De chemische basen die als reagentia gebruikt kunnen worden voor het bereiden van farmaceutisch aanvaardbare base-zouten van die verbindingen volgens de onderhavige uitvinding die zuur van aard zijn, zijn die welke niet-toxische base-zouten vormen met dergelijke verbindingen. Dergelijke niet-toxische 8 base-zouten omvatten, maar zijn niet beperkt tot, die welke zijn verkregen uit farmacologisch aanvaardbare kationen zoals alkalimetaal-kationen (b.v. kalium en natrium) en aardalkalimetaal-kationen (b.v. calcium en magnesium), ammonium- of in water oplosbare amine-additiezouten zoals N-methylglucamine-(meglumine), en de kleine 5 alkanolammonium- en andere base-zouten van farmaceutisch aanvaardbare organische aminen.

Voor een chemicus zal het duidelijk zijn dat bepaalde verbindingen volgens deze uitvinding een of meer atomen bevatten die een bepaalde stereochemische of geometrische configuratie kunnen hebben, hetgeen aanleiding geeft tot stereoisomeren en confi-10 guratie-isomeren. Dergelijke isomeren en mengsels daarvan zijn opgenomen in deze uitvinding. Hydraten en solvaten van de verbindingen volgens deze uitvinding zijn eveneens opgenomen.

Als de verbindingen volgens de onderhavige uitvinding twee of meer stereogene centra hebben en de absolute of relatieve stereochemie wordt gegeven in de naam heb-15 ben de aanduidingen R en S respectievelijk betrekking op ieder stereogeen centmm in toenemende numerieke volgorde (1, 2, 3, enz.) volgens het gebruikelijke IUPAC-nummerschema voor iedere molecuul. Als de verbindingen volgens de onderhavige uitvinding een of meer stereogene centra bevatten en geen stereochemie wordt gegeven in de naam of structuur zal het duidelijk zijn dat het de bedoeling is dat de naam of 20 structuur alle vormen van de verbinding, waaronder de racemische vorm, omvat.

De verbindingen volgens deze uitvinding kunnen alkeen-achtige dubbele bindingen bevatten. Als dergelijke bindingen aanwezig zijn bestaan de verbindingen volgens de uitvinding als cis- en trans-configuraties en als mengsels daarvan. De uitdrukking "cis" heeft betrekking op de oriëntatie van de twee substituenten met betrekking tot 25 elkaar en het vlak van de ring (ofwel beide "naar boven" ofwel beide "naar beneden"). Op analoge wijze heeft de uitdrukking "trans" betrekking op de oriëntatie van twee substituenten met betrekking tot elkaar en het vlak van de ring (waarbij de substituenten zich aan tegengestelde kanten van de ring bevinden).

Deze uitvinding omvat tevens met isotopen gemerkte verbindingen, die identiek 30 zijn aan die welke worden beschreven met de formule I, behalve dat een of meer atomen zijn vervangen door een of meer atomen met een specifiek atoomgewicht of mas-sagetallen. Voorbeelden van isotopen die kunnen worden opgenomen in verbindingen volgens de uitvinding omvatten isotopen van waterstof, koolstof, stikstof, zuurstof, 9 zwavel, fluor en chloor, zoals 2H, 3H, 13C, HC, l5N, l80, 170, l8F respectievelijk 36CI. Verbindingen volgens de onderhavige uitvinding, promedicamenten daarvan en farmaceutisch aanvaardbare zouten van de verbindingen of van de premedicamenten die de hiervoor genoemde isotopen en/of andere isotopen van andere atomen bevatten vallen 5 binnen de omvang van deze uitvinding. Bepaalde met isotopen gemerkte verbindingen volgens de onderhavige uitvinding, bijvoorbeeld die waarin radioactieve isotopen zoals 3H en l4C zijn opgenomen, zijn bruikbaar bij medicament- en/of substraat-weefselver-delingsassays. Getritieerde (d.w.z. 3H) en koolstof-14 (d.w.z. I4C) isotopen hebben bijzondere voorkeur vanwege het gemak van bereiding en detecteerbaarheid daarvan. 10 Verder kan substitutie met zwaardere isotopen zoals deuterium (d.w.z. 2H) bepaalde therapeutische voordelen geven die het gevolg zijn van een grotere metabolisch stabiliteit, bijvoorbeeld een grotere in vivo halfwaardetijd of lagere dosis-eisen, en kan dus in sommige gevallen de voorkeur hebben. Met isotopen gemerkte verbindingen volgens deze uitvinding en promedicamenten daarvan kunnen in het algemeen worden bereid 15 door het uitvoeren van de werkwijzen die zijn beschreven in de onderstaande schema's en/of in de voorbeelden, door het substitueren van een algemeen verkrijgbaar, met isotopen gemerkt reagens voor een niet met isotopen gemerkt reagens.

In deze beschrijving en in de conclusies die volgen wordt verwezen naar een aantal uitdrukkingen die de volgende betekenissen hebben: 20 Zoals hierin in de beschrijving wordt gebruikt kan "een" een of meer betekenen.

Zoals hierin in de conclusie(s) wordt gebruikt, indien samen met het woord "omvat" gebruikt, kan het woord "een" een of meer dan een betekenen. Zoals hierin gebruikt kan "een ander" ten minste een tweede of meer betekenen.

De uitdrukking "ongeveer" heeft betrekking op een relatieve uitdrukking die een 25 benadering van plus of min 10% van de nominale waarde waarop deze betrekking heeft, in een uitvoeringsvorm, tot plus of min 5%, in een andere uitvoeringsvorm, tot plus of min 2% aangeeft. Voor het gebied van deze beschrijving is deze mate van benadering voldoende, tenzij specifiek wordt vermeld dat de waarde een nauwer traject vereist.

30 Zoals hierin gebruikt heeft de uitdrukking zoogdieren betrekking op alle zoogdie ren die CETP in hun plasma bevatten, zoals bijvoorbeeld konijnen en primaten zoals apen en mensen, waaronder mannen en vrouwen. Bepaalde andere zoogdieren, b.v.

10 honden, katten, vee, geiten, schapen en paarden, bevatten geen CETP in hun plasma en zijn dus niet hierin opgenomen.

De uitdrukking "behandelen", "behandel" of "behandeling" zoals hierin wordt gebruikt omvat preventieve (b.v. profylactische) en palliatieve behandeling.

5 Met "farmaceutisch aanvaardbaar" bedoelt men dat de drager, het verdunningsmiddel, de excipiëntia en/of het zout verenigbaar moeten zijn met de andere bestanddelen van de formulering en niet schadelijk voor de ontvanger daarvan.

"Verbindingen", indien hierin toegepast, omvat ieder farmaceutisch aanvaardbaar derivaat of variatie, waaronder conformatie-isomeren (b.v. cis- en trans-isomeren) en 10 alle optische isomeren (b.v. enantiomeren en diastereomeren), racemische, diastereo-mere en andere mengsels van dergelijke isomeren, alsook solvaten, hydraten, iso-morfen, polymorfen, tautomeren, esters, zoutvormen en promedicamenten. Met "tau-tomeren" bedoelt men chemische verbindingen die in twee of meer vormen met een verschillende structuur (isomeren) in evenwicht kunnen bestaan, waarbij de vormen 15 gewoonlijk verschillen qua positie van een waterstofatoom. Er kunnen verschillende soorten tautomerie voorkomen, waaronder keto-enol-, ring-keten- en ring-ring-tautome-rie. De uitdrukking "promedicament" heeft betrekking op verbindingen welke medicament-precursors zijn die na toediening het medicament in vivo via een chemisch of fysiologisch proces afgeven (b.v. een promedicament welke op de fysiologische pH 20 wordt gebracht of via enzym-werking wordt omgezet in de gewenste medicament-vorm). Voorbeelden van promedicamenten geven bij splitsing het overeenkomende vrije zuur af en dergelijke hydrolyseerbare, ester-vormende resten van de verbindingen volgens de onderhavige uitvinding omvatten, maar zijn niet beperkt tot, die met een carboxylrest waarbij de vrije waterstof is vervangen door (Cj-C4)alkyl, (C2-25 C7)alkanoyloxymethyl, l-(alkanoyloxy)ethyl met 4 tot 9 koolstofatomen, 1-methyl-1-(alkanoyloxy)ethyl met 5 tot 10 koolstofatomen, alkoxycarbonyloxymethyl met 3 tot 6 koolstofatomen, l-(alkoxycarbonyloxy)ethyl met 4 tot 7 koolstofatomen, 1-methyl-1-(alkoxycarbonyloxy)ethyl met 5 tot 8 koolstofatomen, N-(alkoxycarbonyl)aminomethyl met 3 tot 9 koolstofatomen, l-(N-(alkoxycarbonyl)amino)ethyl met 4 tot 10 koolstof-30 atomen, 3-ftalidyl, 4-crotonolactonyl, gamma-butyrolacton-4-yl, di-N,N-(Ci-C2)alkylamino(C2-C3)alkyl (zoals β-dimethylaminoethyl), carbamoyl-(C]-C2)alkyl, N,N-di(Ci-C2)alkylcarbamoyl-(Ci-C2)alkyl en piperidino-, pyrrolidino- of morfo-lino(C2-C3)alkyl.

11

De volgende paragrafen beschrijven (een) voorbeeld(en) van (een) ring(en) voor de generische beschrijving van ringen die hierin worden gegeven.

Met "halogeen" bedoelt men chloor, broom, jood of fluor.

Met "alkyl" bedoelt men rechte verzadigde koolwaterstof of vertakte vezadigde 5 koolwaterstof. Voorbeelden van dergelijke alkylgroepen (aangenomen dat de weergegeven lengte het desbetreffende voorbeeld omvat) zijn methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sec-butyl, tertiair butyl, isobutyl, pentyl, isopentyl, neopentyl, tertiair pentyl, 1-methylbutyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, hexyl, isohexyl, heptyl en octyl.

"Alkenyl" waarnaar hierin wordt verwezen kan lineair of vertakt zijn en ze kun-10 nen tevens cyclisch (b.v. cyclobutenyl, cyclopentenyl, cyclohexenyl) of bicyclisch zijn of cyclische groepen bevatten. Ze bevatten 1-3 dubbele koolstof-koolstof-bindingen, welke cis of trans kunnen zijn.

Met "alkoxy" bedoelt men recht verzadigd alkyl of vertakt verzadigd alkyl dat is gebonden via een oxy-groep. Voorbeelden van dergelijke alkoxygroepen (aangenomen 15 dat de weergegeven lengte het desbetreffende voorbeeld omvat) zijn methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, isobutoxy, tertiair butoxy, pentoxy, isopentoxy, neopen-toxy, tertiair pentoxy, hexoxy, isohexoxy, heptoxy en octoxy.

De uitdrukking "aryl" betekent een carbocyclisch aromatisch systeem dat een, twee of drie ringen bevat, waarbij dergelijke ringen geanelleerd kunnen zijn. Als de 20 ringen geanelleerd zijn moet een van de ringen volledig onverzadigd zijn en kan (kunnen) de geanelleerde ring(en) volledig verzadigd, gedeeltelijk onverzadigd of volledig onverzadigd zijn. De uitdrukking "geanelleerd" betekent dat een tweede ring aanwezig is (d.w.z. gebonden of gevormd) doordat deze twee naburige atomen gemeen hebben (d.w.z. delen) met de eerste ring. De uitdrukking "geanelleerd" is equivalent met de 25 uitdrukking "gecondenseerd". De uitdrukking "aryl" omvat aromatische resten zoals fenyl, naftyl, tetrahydronaftyl, indaan en bifenyl.

De uitdrukking "heteroaryl" betekent een carbocyclisch aromatisch systeem dat een, twee, drie of vier heteroatomen bevat welke onafhankelijk worden gekozen uit zuurstof, stikstof en zwavel en met een, twee of drie ringen, waarbij dergelijke ringen 30 geanelleerd kunnen zijn. De uitdrukking "geanelleerd" betekent dat een tweede ring aanwezig is (d.w.z. gebonden of gevormd) doordat deze twee naburige atomen gemeen hebben (d.w.z. delen) met de eerste ring. De uitdrukking "geanelleerd" is equivalent met de uitdrukking "gecondenseerd". De uitdrukking "heteroaryl" omvat aromatische 12 resten zoals chinolinyl, benzofuranyl, benzodioxanyl, piperazinyl, pyridinyl, isoxazolyl, imidazolyl, triazolyl, tetrazolyl, oxazolyl, oxadiazolyl, isoxazolyl, pyrazolyl, thiazolyl en thiadiazolyl.

De uitdrukking "heterocyclische groep" betekent een niet-aromatisch carbo-5 cyclisch systeem dat een, twee, drie of vier heteroatomen bevat die onafhankelijk worden gekozen uit zuurstof, stikstof en zwavel en met een, twee of drie ringen, waarbij dergelijke ringen geanelleerd kunnen zijn, waarbij geanelleerd hiervoor is gedefinieerd. De uitdrukking "heterocyclische groep" omvat, maar is niet beperkt tot, lactonen, lac-tamen, cyclische ethers en cyclische aminen, waaronder de volgende voorbeelden van 10 ringsystemen: epoxide, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, dioxaan, aziridinen, pyrrolidine, piperidine en morfoline.

Het zal duidelijk zijn dat als een carbocyclische of heterocyclische rest gebonden is of anderzijds bevestigd is aan een weergegeven substraat via verschillende ring-ato-men zonder dat een specifiek punt va bevestiging wordt aangegeven, dan alle mogelijke 15 punten worden beoogd, ofwel via een koolstofatoom ofwel, bijvoorbeeld, een driewaardig stikstofatoom. De uitdrukking "pyridyl" betekent bijvoorbeeld 2-, 3- of 4-pyri-dyl, de uitdrukking "thienyl" betekent 2- of 3-thienyl, enzovoort.

Zoals hierin gebruikt hebben de uitdrukkingen "bij een reactie inert oplosmiddel" en "inert oplosmiddel" betrekking op een oplosmiddel of een mengsel daarvan dat geen 20 interactie aangaat met uitgangsmaterialen, reagentia, tussenproducten of producten op een wijze die een nadelige invloed heeft op de opbrengst van het gewenste product.

In een uitvoeringsvorm van de verbindingen volgens de onderhavige uitvinding is XC.

In een andere uitvoeringsvorm is A -COO(Cj-C4)alkyl, -CO(C|-C4)alkyl of Q, 25 waarbij Q een vijf of zes leden tellende volledig onverzadigde ring is, waarbij ieder ring-atoom, behalve het atoom dat is gebonden aan N van de formule I, kan zijn vervangen door een stikstof-, zuurstof- of zwavelatoom, en waarbij ieder ring-atoom eventueel kan zijn gesubstitueerd met cyaan, een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde rechte of vertakte keten met 1 tot 6 koolstofato-30 men, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring met 3 tot 8 koolstofatomen, waarbij ieder koolstofatoom van de keten of ring eventueel is vervangen door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof en zwavel, en het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevou- 13 dig of drievoudig gesubstitueerd is met amino, halogeen, cyaan, hydroxy, 9x0, carboxyl, (Ci-C6)alkoxycarbonyl of ((Ci-Cö)alkoxy dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen) en het stikstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met water-5 stof, (Ci-Ce)alkoxycarbonyl of ((Ci-C6)alkyl dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), waarbij het zwavelatoom van de keten of ring gesubstitueerd is met een of twee oxo.

In een andere uitvoeringsvorm is Q

ft0 R° R° R® R3 fi Λ Λ] Λ n^n

N'y^ YJ

'v'Vj/V* ιΛΑΛΛ * ΛΛΛ/' * WVV > v/VW' * ψ R° R° ft0 R®

N

I J 11 I I 11 I

nx^n «λαλα " s/vw vfwv ’ jwvi ’ ,λλλλ * * I iti fY f^Y*

Ny^ KfJ

10 1 ’ r 1 1 r'Y"* ifY* rv rv "y" n\^n \^n 'Ιγί'· «λαλ/' λΛΛΛΟ ’ ΛΛΛ/· ’ «ΛΛΛ/Ι * s/VW* ’ 14 N NR° m M NN—rNR0 // \ / \ // \ // \ V/%. “ν/-«· *>—-\^n

<AW aW

| j AW

·* ' 1 » ’ s\ «! »1 R\ /\ ft r\ / t r-r*

n<^5^/nr0 /w*N

l/WX/» J^VW ^ ^ | > j [ -> ΛΛΛΛ * «ΛΛΛΛ τ

Rl R? Rl «3

Y~~9 ^)=N 7=N 77 9 >=N

Nv^N Nv^° vN As^n A/

1 *Xv> , vXv> >r0 > ** XX

} f I j ^ * R« R°.

Μ j=\ y-\ Νγ$ O n\^n *λ1ιΛΛ νΛΛΛΛ

1 ï I

waarbij iedere R° onafhankelijk waterstof, ((Ci-C3)alkyl dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of hydroxylgroepen), of ((Ci-C3)alkoxy dat 5 eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of hydroxylgroepen) is. In een andere uitvoeringsvorm is Q

15 o O ζΧ- "V Λ> ^jw> , ^ . . vjn. ^ ^ 'yp r? Vl V"\ V\ Ή

AA^ Y VN V VN

<vvw t 'vwv 'Ww Λ/|Γ'Λ’ 'vyw F?

Yn^N Y==ïN >s__/

/V° /Vs V

J Ύ if T T

ww , *ww ^ ^ ww

In een andere uitvoeringsvorm is Q

R°x Ro Rc rö iTX rT Y )=\ Ύ νύ^ν νΎ^ν %Y> WW WW -WW . *jjw > or <ww .

5 1 1 I *

In een andere uitvoeringsvorm is Q N——NRÖ n \ "Ύ ww ^ en is R° waterstof, (Ci-C3)alkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een 10 tot vijf halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen, of (C]-C3)alkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een tot vijf halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen.

16

In een andere uitvoeringsvorm is A -COO(Ci-Chalky 1, -CO(Cj-Chalky 1 of Q, waarbij Q een vijf of zes leden tellende volledig onverzadigde ring is, waarbij ieder ring-atoom, behalve het atoom dat is gebonden aan N van de formule I, kan zijn vervangen door een stikstof-, zuurstof- of zwavelatoom, en waarbij ieder ring-atoom 5 eventueel kan zijn gesubstitueerd met cyaan, een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde rechte of vertakte keten met 1 tot 6 koolstofato-men, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring met 3 tot 8 koolstofatomen, waarbij ieder koolstofatoom van de keten of ring eventueel is vervangen door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof 10 en zwavel, en het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met amino, halogeen, cyaan, hydroxy, oxo, carboxyl, (C i -Céjalkoxycarbony 1, of ((Ci-Cöjalkoxy dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen) en het stikstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met water-15 stof, (Ci-Cójalkoxycarbonyl of ((Ci-Cfi)alkyl dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), waarbij het zwavelatoom van de keten of ring gesubstitueerd is met een of twee oxo; R1 en R6 ieder waterstof zijn; R4 afwezig is of waterstof is; R geen waterstof is; R waterstof is; en R , R , R en R ieder onafhankelijk waterstof, cyaan, ((Ci-Cöjalkyl dat eventueel gesubstitueerd is met 20 een tot negen fluoratomen) of ((Ci-Cö) alkoxy dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen fluoratomen) zijn.

In een andere uitvoeringsvorm is X C; en zijn R2, R3, R5 en R7 ieder waterstof, methyl, cyaan of CF3,

In een andere uitvoeringsvorm is X C; zijn R1, R4 en R6 ieder waterstof; zijn R2, 25 R3, R5 en R7 ieder waterstof, methyl, cyaan of CF3; en is A -COOCH2CH3, -COOCH3, - COCH2CH3, -COCH3 of Q, waarbij Q triazolyl, tetrazolyl, oxadiazolyl, isoxazolyl of pyrazolyl is en waarbij Q eventueel gesubstitueerd is met halogeen, ((Ci-Ce)alkyl dat eventueel gesubstitueerd is met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen of een tot negen halogeenatomen), hydroxy, ((Ci-Cö)alkoxy dat eventueel gesubsti-30 tueerd is met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen of een tot negen halogeenatomen), cyaan, oxo, carboxy of (Ci-Ce)alkyloxycarbonyl.

In een andere uitvoeringsvorm is Q

17 R*v R\ X Rö irx Yr )r\ Υ\ )=λ Νγ·Ν γ γ <γ <Λ/νν WW -A, ! „ ! ' * 'if waarbij iedere R° onafhankelijk waterstof, halogeen ((Ci-Cö)alkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen en een tot negen halogeenatomen), hydroxy, ((Ci-Cö)alkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met 5 een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen en een tot negen halogeenatomen), amino, amido, cyaan, carboxy of ((Ci-Cöjalkyloxycarbonyl dat eventueel onafhankelijk is gesubstitueerd met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen en een tot negen halogeenatomen) is.

In een andere uitvoeringsvorm is Q

10 N — NR° // \

sA/W

^ en is R° waterstof, (C|-C3)alkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot vijf halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen of (Ci-C3)alkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een tot vijf halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen.

In een andere uitvoeringsvorm is B -OR of -SR , waarbij R en R ieder onaf-15 hankelijk -(C,-C6)alkyl-NR8R9, -(C0-C6)alkyl-CO-NR8R9, -(C0-C6)alkyl-CO-OR10, -(C,-C6)alkyl-NR13-(Co-C6)alkyl-CO-0-R10, -(Ci-C6)alkyl-NR13-(Co-C6)alkyl-CO-R14, -(C,-C6)alkyl-NR13-(Co-C6)alkyl-S02-R10, -(Ci-C6)alkyl-0-C0-NR8R9, -(C2-C6)alkenyl-CO-O-R10, -(Co-Céjalkyl-aryl, -(Co-Cójalkyl-heteroaryl, -(Ci-Cójalkyl-O-aryl, -(Ci-Cójalkyl-O-heteroaryl, -(Co-Cejalkyl-heterocyclische groep, -(Co-C6)alkyl-(C3-20 Cöjcycloalkyl, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)alkenyl, (C2-Ce)alkynyl, (C2-C6)alkenyl, (Ci-Céjalkyl, cyaan of -CO-(Ci-Ce)alkyl zijn, waarbij de aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkenyl-, cycloalkyl-, alkynyl-, alkenyl- en alkyl-substituenten ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een of twee (Ci-Cé)alkoxygroepen, een of twee (Ci-Cöjalkylgroepen, 18 een of twee aminogroepen, een of twee nitro-, cyaan-, oxo- of carboxygroepen, behalve dat R17 geen aryl of heteroaryl is.

In een andere uitvoeringsvorm is B -OR17 en is R17 -(Ci-C6)alkyl-aryl, -(Ci-C6)alkyl-heteroaryl, -(Co-C6)alkyl-heterocyclische groep, -(Co-Có)alkyl-(C3-C6)cyclo-5 alkyl, (Ci-Cójalkyl, waarbij de aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkyl- en alkyl-substituenten ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een tot drie (Ci-Cöjalky lgroepen, een tot drie (Ci-Cójhalogeenalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cöjalkoxygroepen, een tot drie (Ci-Cöjhalogeenalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitrogroepen, 10 cyaan, oxo of carboxy.

In een andere uitvoeringsvorm is R11 eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd met R19 en is R19 -(Co-Cójalkyl-aryl, -(Co-Cö)alkyl-heteroaryl, -(Co-C6)alkyl-heterocyclische groep, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkyl, halogeen, (C2-Cejalkynyl, (C2-Ce)alkenyl, (Ci-Cé)alkyl, hydroxy, (Ci-Cöjalkoxy, nitro, cyaan, oxo of 15 -CO-(Ci-Ce)alkyl, waarbij de aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkenyl-, cycloalkyl-, alkynyl-, alkenyl-, alkyl- en alkoxygroepen ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxy lgroepen, een tot drie (Ci-Cöjalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cö)halogeenalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cójalkoxygroepen, een tot drie (Ci-Cö)halogeenalkoxy groepen, een of twee amino-20 groepen, een of twee nitrogroepen, cyaan, oxo of carboxy.

In een andere uitvoeringsvorm vormen R11 en R12 samen een 3 tot 8 leden tellende, volledig verzadigde of gedeeltelijk onverzadigde mono- of bi-cyclische ring met eventueel een tot vier heteroatomen die worden gekozen uit zuurstof, stikstof en zwavel, waarbij de ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is 25 met R19.

In een uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de onderhavige uitvinding wordt atherosclerose behandeld.

In een andere uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de onderhavige uitvinding wordt periferale vasculaire ziekte behandeld.

30 In een andere uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de onderhavige uitvin ding wordt dyslipidemie behandeld.

In een andere uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de onderhavige uitvinding wordt hyperbetalipoproteïnemie behandeld.

19

In een andere uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de onderhavige uitvinding wordt hypoalfalipoproteïnemie behandeld.

In een andere uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de onderhavige uitvinding wordt familiale hypercholesterolemie behandeld.

5 In een andere uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de onderhavige uitvin ding wordt kransslagaderziekte behandeld.

In een andere uitvoeringsvorm van de werkwijze volgens de onderhavige uitvinding wordt een hartinfarct behandeld.

In een uitvoeringsvorm van de combinatie of kit volgens de onderhavige uitvin-10 ding is de tweede verbinding een HMG-CoA-reductase-inhibitor of een PPAR-modu-lator.

In een andere uitvoeringsvorm van de combinatie of kit volgens de onderhavige uitvinding is de tweede verbinding fenofibraat, gemfibrozil, lovastatine, simvastatine, pravastatine, fluvastatine, atorvastatine, rivastatine, rosuvastatine of pitavastatine.

15 In een andere uitvoeringsvorm van de combinatie of kit volgens de onderhavige uitvinding omvat de combinatie verder een cholesterol-absorptie-inhibitor, waarbij de cholesterol-absorptie-inhibitor ezetimibe kan zijn.

In het algemeen kunnen de verbindingen volgens deze uitvinding worden bereid volgens werkwijzen die werkwijzen omvatten die analoog zijn aan die welke bekend 20 zijn uit de chemische stand der techniek, in het bijzonder met betrekking tot de beschrijving die daarin wordt gegeven. Bepaalde werkwijzen voor de bereiding van de verbindingen volgens deze uitvinding worden verschaft als verdere kenmerken van de uitvinding en worden geïllustreerd met de volgens reactieschema's Andere werkwijzen kunnen worden beschreven in de experimentele sectie.

25 Analoge werkwijzen worden beschreven in de volgende Amerikaanse octrooi- schriften, die voor alle doeleinden in hun geheel als hierin ingelast dienen te worden beschouwd: het Amerikaanse octrooischrift 6140342; het Amerikaanse octrooischrift 6362198; het Amerikaanse octrooischrift 6147090; het Amerikaanse octrooischrift 6395751; het Amerikaanse octrooischrift 6147089; het Amerikaanse octrooischrift 30 6310075; het Amerikaanse octrooischrift 6197786; het Amerikaanse octrooischrift

6140343; het Amerikaanse octrooischrift 6489478; en de Internationale publicatie WO

00/17164 en de Internationale octrooiaanvrage PCT/IB2005/003500.

20

De reactieschema's die hierin worden beschreven zijn bedoeld voor het verschaffen van een algemene beschrijving van de methodologie die wordt toegepast bij de bereiding van veel van de voorbeelden die hierin worden gegeven. Het zal echter duidelijk zijn uit de gedetailleerde beschrijvingen die worden gegeven in de experimentele 5 sectie dat de bereidingswijzen die worden toegepast zich verder uitstrekken dan de algemene werkwijzen die hierin worden beschreven. In het bijzonder wordt opgemerkt dat de verbindingen die worden bereid volgens deze schema's verder kunnen worden gemodificeerd voor het verschaffen van nieuwe voorbeelden binnen de omvang van deze uitvinding. Bijvoorbeeld kan men een ester-functionaliteit verder laten reageren 10 onder toepassing van werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige, waarbij een andere ester, een amide, een carbinol of een keton wordt verkregen.

^

RlX ·*γΙγ«*Η ayL,-CH.OH

jYS -κ* "Hsl Hat ^ R* R* formula Λ FöWKtó.2 FürttttiisS Rrfrmia4 i ^ t ü ijl1 R* R* R^X^Hai )¾4 R4 R* f öfmafa 6 FofR iiifi S Formula 1

Schema 1 15

Volgens reactieschema 1 is Hal een halogeen en zijn X, R1, R2, R3 en R4 zoals hiervoor is beschreven. De gewenste tussenverbindingen met de formules 4, 6 en 7 kunnen worden bereid uit verbindingen met de formules 1, 2 en 5. Verbindingen met de formules 2 en 6 kunnen worden bereid uit verbindingen met de formule 1 volgens 20 werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige, zoals door gerichte metalleringschemie en invangen met een geschikte elektrofiel zoals kooldioxide, dimethylformamide (DMF) of N-formylmorfoline.

Meer in het bijzonder geeft de behandeling van verbindingen met de formule 1 met l-lithium-2,2,6,6-tetramethylpiperidine en afschrikken met kooldioxide (F. 25 Mongin, O. Desponds, M. Schlosser Tetrahedron Letters, 1996, 37, 2767-2770) of dimethylformamide bij lage temperatuur, bij voorkeur tussen -100°C en -78°C, in een bij 21 de reactie inert oplosmiddel zoals ether of tetrahydrofuran (THF), bij voorkeur THF bij -100°C, verbindingen met de formules 2 respectievelijk 6. Daarnaast kan de verbinding met de formule 2 worden bereid door zure of basische hydrolyse van een verbinding met de formule 5, bijvoorbeeld met een geschikt zuur zoals zwavelzuur. De verbinding 5 met de formule 6 kan ook door partiële reductie, bijvoorbeeld met een aluminiumhydride-reagens zoals diisobutylaluminiumhydride (DIBAL) in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF bij een temperatuur tussen -78°C en 25°C, uit verbindingen met de formule 5 worden bereid.

Zoals wordt getoond in schema 1 kunnen verbindingen met de formule 3 worden 10 bereid door reductie van de verbindingen met de formule 2 met een geschikt reductie- middel zoals lithiumaluminiumhydride (LAH), of een boraan-tetrahydrofuran-complex in een bij de reactie inert oplosmiddel zoals dioxaan, diethylether of THF. Een reduc-tiemiddel dat de voorkeur heeft voor de reductie van verbindingen met de formule 2 is een boraan-tetrahydrofuran-complex, en het oplosmiddel dat de voorkeur heeft is THF, 15 bij een temperatuur tussen -78 en 100°C, bij voorkeur bij 0-50°C. Daarnaast kunnen verbindingen met de formule 6 onder toepassing van natriumboorhydride, waarbij het voorkeursoplosmiddel ethanol is, bij een temperatuur tussen 0 en 100°C, bij voorkeur 0-50°C, tot verbindingen met de formule 3 worden gereduceerd.

Zoals wordt getoond in schema 1 kunnen verbindingen met de formule 4 worden 20 bereid door het laten reageren van verbindingen met de formule 3 onder toepassing van een geschikt reagens zoals fosfortribromide of een combinatie van koolstoftetrabromide en trifenylfosfien in een bij de reactie inert oplosmiddel zoals dichloormethaan, THF of dioxaan. Het voorkeursreagens is een combinatie van koolstoftetrabromide en trifenylfosfien, en het voorkeursoplosmiddel is dichloormethaan, bij een temperatuur tussen -25 78°C en 100°C, bij voorkeur -10°C-20°C.

Zoals wordt getoond in schema 1 kunnen verbindingen met de formule 7 worden bereid door reductie van verbindingen met de formule 5 onder toepassing van een geschikt reductiemiddel zoals LAH, of in het specifieke geval als Hal F of Cl is, door hy-drogenering bij aanwezigheid van een geschikte hydrogeneringskatalysator zoals palla-30 dium-op-koolstof of palladiumhydroxide in een bij de reactie inert oplosmiddel zoals methanol, ethanol of azijnzuur. Een reductiemiddel dat de voorkeur heeft is LAH in een geschikt oplosmiddel zoals THF, dichloormethaan of dioxaan. Een oplosmiddel dat de 22 voorkeur heeft is THF bij een temperatuur tussen -78°C en 68°C, bij voorkeur -78°C-40°C.

Αν ψ Hf* A.

«Avö» . „ ftï. ,A> A !** OHC.

γ Y f-cnaroas Y 'f ^ 1 1 Fomiuii 9 γ γ R* R1 ft7 ft7 Pónmri® 6 Konmte21 *«*in&no Aöfïiud&Ö

SrY^ I ^VX AX^CK,* X'*\ Vv«* \ / «Y-s- “4

Formula 11 ' R7 ' S*

Fnra)ul*12 A

, γγγ' r fYV* . r H-V1 v^'r« _______Κντγτ 'γ'Ν*· *V*Y"* *VS« * " ι*Ύ*. * AA* * m* Formula 13 Fnroiils 15 R* formula 18

Ha! x W-i / • YiP | /

j^T j ^ A

Fowsufa 12 » rf Ιί^γ^γ* «< γ^Υ* w V-

Ar» *ιν· ^Γ””'

Fomtito T Fomxda !7 Fwroiia 18 5

Schema 2

Volgens reactieschema 2 is Hal een halogeenatoom en zijn A, X, R], R2, R3, R4, R5, R6, R7, Rn en R12 zoals hiervoor beschreven. De gewenste verbindingen die worden 10 weergegeven als formule 15 in schema 2 kunnen worden bereid door alkylering van verbindingen met de formule 10 met verbindingen met de formule 4 met een geschikte base zoals natriumhydride, kalium-tert-butoxide of kaliumhexamethyldisilazine in een geschikt polair oplosmiddel zoals THF, dimethylformamide of N-methylpyrrolidinon. Een base die de voorkeur heeft is kalium-tert-butoxide en een voorkeursoplosmiddel is 15 THF bij een temperatuur tussen 0°C en 67°C, bij voorkeur 20°C-67°C.

Verbindingen met de formule 10 kunnen worden bereid door reductieve amine-ring van verbindingen van aldehyden met de formule 8 met aminen met de formule 9 en een geschikt reductiemiddel zoals natriumboorhydride, natrimtriacetoxyboorhydride of natrimcyanoboorhydride, in een geschikt oplosmiddel zoals THF, dichloormethaan, 23 dioxaan of tolueen. De werkwijze die de voorkeur heeft is de imine-vorming bij aanwezigheid van moleculaire zeven van 4A in tolueen bij een temperatuur tussen 20°C en 111°C, gevolgd door verwijdering van het oplosmiddel, oplossen van het residu in een polair oplosmiddel, bij voorkeur ethanol, vervolgens toevoegen van een geschikt re-5 ductiemiddel, bij voorkeur natriumboorhydride, bij een temperatuur tussen 0°C en 78°C, bij voorkeur 20°C-50°C.

Daarnaast kunnen verbindingen met de formule 15 worden bereid uit verbindingen met de formule 13 door een verscheidenheid van werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige. Bijvoorbeeld in het geval dat A een eventueel gesubstitueerde aromatische 10 ring is, is het vaak mogelijk om het desbetreffende halogeenderivaat van A te gebruiken en het halogeen te vervangen door het secundair amine van de verbinding met de formule 13, in het algemeen bij aanwezigheid van een base. Vaak worden deze reacties vereenvoudigd door de toepassing van een palladium-katalysator, zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5576460; de Internationale publicatie WO 15 98/15515; de Internationale publicatie WO 00/02887; de Internationale publicatie WO

04/052939; de Europese publicatie EP3009569.8; en de Europese publicatie EP99933785.0; die allen voor alle doeleinden als hierin ingelast dienen te worden beschouwd. In een ander voorbeeld, als A een eventueel gesubstitueerde 2-pyridyl-, 2- of 4-pyrimidinyl- of 2-pyrazinylgroep is, kan deze reactie worden uitgevoerd zonder de 20 toepassing van een katalysator door toepassing van het overeenkomende 2-halogeenpy-ridine, 2- of 4-halogeenpyrimidine respectievelijk 2-pyrazine in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals dimethylformamide (DMF), N-methylpyrrolidinon of Ν,Ν,Ν’,Ν'-tetramethylureum, onder toepassing van een geschikte base zoals triethyl-amine, diisopropylethylamine, kaliumcarbonaat of natriumcarbonaat. Een voorkeurs-25 base is diisopropylethylamine in een geschikt inert oplosmiddel zoals THF, dichloor-methaan of dioxaan. Een voorkeursoplosmiddel is dichloormethaan bij een temperatuur tussen -40°C en 160°C, bij voorkeur 20°C-140°C.

In een ander aspect van deze uitvinding kunnen de verbindingen met de formule 15 worden bereid uit verbindingen met de formule 13 via een reeks van reacties, die 30 bekend zijn bij de deskundige, waarbij de A-ring de novo wordt gevormd. Voorkeursvoorbeelden van dergelijke werkwijzen omvatten, maar zijn niet beperkt tot, de reactie van de verbindingen met de formule 13 met een cyaneringsmiddel, zoals cyanogeen-bromide of N-cyaanimidazool, voor het bereiden van een cyaanamide-tussenproduct.

24

Dit kan men verder laten reageren met een azide-bron, zoals natriumazide, ti-n-butyl-tinazide of trimethylsilylazide, voor het bereiden van een tetrazool. De tetrazool kan men desgewenst verder laten reageren, bijvoorbeeld door alkylering. In een ander aspect kan men het cyaanamide-tussenproduct laten reageren met hydroxylamine, ge-5 volgd door een alkanoyleringsmiddel zoals een acylchloride voor het bereiden van een oxadiazoolverbinding (Ried, W en Eichhom, T.A., Archiv der Pharmazie 1998, 321(9), 527). In nog een ander aspect kan men het cyaanamide-tussenproduct laten reageren met een acylhydrazide voor het bereiden van een triazoolring bevattende verbinding (Ried, W en Eichhom, T.A., Archiv der Pharmazie 1998, 321(9), 527).

10 In nog een ander alternatief kunnen verbindingen met de formule 15 worden be reid door de alkylering van verbindingen met de formule 21 met een alkylhalogenide met de formule 12 onder toepassing van een geschikte base zoals triethylamine, di-isopropylethylamine, kaliumcarbonaat, natriumhydride of kalium-tert-butoxide, bij voorkeur kalium-tert-butoxide in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals 15 THF, dichloormethaan of dioxaan, bij voorkeur THF, bij een temperatuur tussen -40°C en 40°C, bij voorkeur 0-30°C.

Verbindingen met de formule 21 kunnen worden bereid door reductieve amine-ring van aldehyden met de formule 6 met aminen met de formule 9 en een geschikt reductiemiddel zoals natriumboorhydride, natriumtriacetoxyboorhydride of natrium-20 cyaboboorhydride, in een geschikt oplosmiddel zoals THF, dichloormethaan, dioxaan of tolueen. De reactie verloopt via de vorming van een imine, hetgeen kan worden vereenvoudigd door een dehydratatiemiddel zoals moleculaire zeven van 4A in tolueen bij een temperatuur tussen 20°C en 111°C, bij voorkeur 100°C-111°C, gevolgd door verwijdering van het oplosmiddel. Daarnaast kan een titaniumverbinding, bij voorkeur 25 titaniumtetraisopropoxide, worden toegepast, bij voorkeur bij afwezigheid van een oplosmiddel bij kamertemperatuur. Het imine wordt vervolgens gereduceerd in een geschikt polair oplosmiddel, bij voorkeur ethanol, met een geschikt hydride-reductiemid-del, bij voorkeur natriumboorhydride, bij een temperatuur tussen 0°C en 80°C, bij voorkeur 20°C-50°C.

30 Verbindingen met de formule 13 kunnen worden bereid door reductieve amine- ring van verbindingen met de formule 6 en verbindingen met de formule 11 met een geschikt reductiemiddel zoals natriumboorhydride, natriumtriacetoxyboorhydride of natriumcyanoboorhydride. Het reductiemiddel dat de voorkeur heeft is natriumboor- 25 hydride in een geschikt oplosmiddel zoals ethanol, THF, dichloormethaan, dioxaan of tolueen. Het voorkeursoplosmiddel is ethanol bij een temperatuur van -78°C tot 67°C, bij voorkeur 0-50°C.

Daarnaast kunnen verbindingen met de formule 13 worden bereid door alkylering 5 van verbindingen met de formule 7 en verbindingen met de formule 12 onder toepassing van een geschikte base zoals triethylamine, diisopropylethylamine, kaliumcarbo-naat of natriumcarbonaat. De voorkeursbase is diisopropylethylamine in een geschikt inert oplosmiddel zoals THF, dichloormethaan of fioxaan. Het voorkeursoplosmiddel is dichloormethaan bij een temperatuur tussen -40°C en 40°C, bij voorkeur 0-20°C.

10 Verbindingen met de formule 18 kunnen worden bereid door reductie van de nitrillen met de formule 16 met DIBAL-H in een geschikt oplosmiddel zoals dichloormethaan bij een temperatuur tussen -40°C en 40°C, bij voorkeur -20°C.

Verbindingen met de formule 17 waarbij R12 H is en Rn is zoals hiervoor is beschreven kunnen worden bereid uit verbindingen met de formule 16 door de toevoeging 15 van een geschikt organometalliek reagens met de formule R1 'M, waarbij M gewoonlijk Li, MgCl, Mgr of Mgl is, in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF, diethylether of tolueen, bij een temperatuur tussen -78°C en 100°C, bij voorkeur -10°C tot 30°C. Na hydrolytisch opwerken wordt het keton-tussenproduct behandeld met een geschikt reductiemiddel zoals natriumboorhydride, natriumtriacetoxyboorhydride of 20 lithiumaluminiumhydride in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel, waarbij de gewenste alcohol met de formule 17 wordt verkregen. Bij voorkeursomstandigheden wordt natriumboorhydride in ethanol tussen 0°C en 40°C, bij voorkeur 20°C, toegepast.

Daarnaast kunnen verbindingen met de formule 17 worden bereid uit verbindingen met de formule 15 door het eerst omzetten van het arylhalogenide in een arylme-25 taal-derivaat, waarbij het metaal lithium, magnesium, boor of zink kan zijn, gevolgd door reactie met de desbetreffende carbonylverbinding met de formule RuR12CO, inclusief de carbonylverbindingen waarbij R11 en R12 verbonden zijn in de vorm van een ring. Werkwijzen voor het uitvoeren van deze reacties zijn bekend bij de deskundige en omvatten metaal-uitwisseling met een Grignard-reagens zoals isopropylmagnesium-30 chloride in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF, diethylether of tolueen, bij voorkeur THF, bij een temperatuur tussen -78°C en 40°C, bij voorkeur -10°C tot 30°C, gevolgd door reactie met de carbonylverbinding RnRl2CO bij een temperatuur tussen -78°C en 100°C, bij voorkeur -10°C tot 30°C. Een ander voorbeeld van 26 geschikte reactie-omstandigheden omvat activering met een diboraan zoals 4,4,5,5-te-tramethyl-2-(4,4,5,5-tetramethyl-l ,3,2-dioxaborolaan-2-yl)-l ,3,2-dioxaborolaan bij aanwezigheid van een palladium-katalysator zoals hiervoor is beschreven voor de bereiding van verbindingen met de formule 15 uit verbindingen met de formule 13. De 5 verkregen arylboorester of -zuur kan worden geactiveerd met betrekking tot additie aan de desbetreffende carbonylverbinding bij aanwezigheid van een rhodium-katalysator, zoals is beschreven door A. Fürstner en H. Krause, Adv. Synth. Catal. 2001 (4), 343.

ψ R1 R1 N^YY'R5 W γΑΥ -A. R7 ^ R7 1 .X R'

R^ X' Hal R3 X CHO

R* ÖH R» R<

Formula 17 Formula 1S Formula 18 I ] \ * * ΎVsr» V VV aY—Yj ^ AA^ * r' AV^’ R4 R„ R4 R't1 R4 OR'7

Formula 21 Formida 20 Formula 19 VV Vy R4 StO^R^

Formula 21A

10

Schema 3

Volgens reactieschema 3 zijn A, η, X, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R11, R12, R17 en R18 zoals hiervoor is beschreven. De gewenste verbindingen met de formule 20 kunnen 15 worden bereid uit verbinding 15 door reactie met metalliek zink bij aanwezigheid van een kobaltzout, zoals wordt beschreven door H. Fillon, C. Gosmini en J. Périchon (J. Amer. Chem. Soc., 2003, 125, 3867). Het arylzink-tussenproduct kan men vervolgens laten reageren met de desbetreffende acetal of ketal met de formule RnR12C(OR17)2, 27 zoals wordt beschreven door E. Le Gall, C. Gosmini en M. Troupel (Tet. Lett., 2006, 47, 455), waarbij de ether met de formule 20 wordt verkregen.

De gewenste ether-verbindingen met de formule 20 kunnen ook worden bereid uit de overeenkomende alcohol met de formule 17 door een alkyleringsreactie die be-5 kend is bij de deskundige, zoals bijvoorbeeld wordt beschreven in L.A. Paquette (Ed), Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Chichester, Engeland, 1995. In een voorkeursaspect van deze uitvinding kan de alcohol worden behandeld met een base zoals natriumhexamethyldisilazide, kaliumhydride of natrium-hydride, bij voorkeur natriumhydride, in een bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF 10 en laat men deze reageren met het geschikte alkyleringsmiddel RI7L, waarbij L een uittredende groep zoals bromide, jodide, tosylaat, triflaat of tosylaat is, waarbij de gewenste verbinding met de formule 20 wordt verkregen.

Daarnaast kunnen de gewenste ether-verbindingen met de formule 20 worden bereid uit de overeenkomende acetal met de formule 19 door reactie met een geschikte 15 organometallieke verbinding die wordt weergegeven met R1 'M, waarbij M bij voorkeur

ZnHal is, in een bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF, bij een temperatuur tussen -10°C en 60°C. De bereiding van het RnZnHal-reagens uit de R11 Hal-verbinding door behandeling met metalliek zink is bekend bij de deskundige en wordt bijvoorbeeld beschreven in G. Wilkinson (Ed), Comprehensive Organometallic Chemistry, Pergamon, 20 Oxford, 1982.

De gewenste acetalen met de formule 19 kunnen worden bereid uit het overeenkomende aldehyde met de formule 18 door reactie met de alcohol Rl7OH bij aanwezigheid van een dehydratatiemiddel zoals moleculaire zeven of titaniumtetrachlo-ride. De voorkeursomstandigheden voor deze reactie worden beschreven door A. 25 Clerici, N. Pastori en O. Porta (Tetrahedron Letters, 1998, 54, 15679).

De gewenste verbindingen met de formule 21, waarbij A, X, R1, R2, R3, R4, R5, R , R , R , R en R zijn zoals hiervoor is beschreven, kunnen ook worden bereid uit de overeenkomende alcohol met de formule 17 door omzetting van de alcohol in een uittredende groep zoals een mesylaat, tosylaat, triflaat, chloride of bromide volgens 30 standaardwerkwijzen die bekend zijn bij de deskundige. Bijvoorbeeld kan een bromide worden bereid door het laten reageren van verbindingen met de formule 17 onder toepassing van een geschikt reagens zoals fosfortribromide of een combinatie van kool-stoftetrabromide en trifenylfosfien in een bij de reactie inert oplosmiddel zoals 28 dichloormethaan, THF of dioxaan. Het voorkeursreagens is een combinatie van kool-stoftetrabromide en trifenylfosfïen en het voorkeursoplosmiddel is dichloormethaan, bij een temperatuur tussen -78°C en 100°C, bij voorkeur -10°C tot 30°C. Dit tussenproduct laat men vervolgens reageren met het geschikte thiolaat R SM, waarbij M bij voorkeur 5 natrium of kalium is, waarbij de gewenste verbinding met de formule 21 wordt verkregen. Daarnaast kan het tussenproduct worden omgezet in een thiolether door reactie met natriumhydrosulfide of door reactie met natrium-, kalium- of ammoniumthiolace-taat, gevolgd door hydrolyse van de thiolacetaat met natriumhydroxide in een geschikt oplosmiddel, gewoonlijk in een alcohol zoals ethanol, bij omgevingstemperatuur. Deze 10 thiol wordt vervolgens gealkyleerd met het geschikte alkyleringsmiddel R1SL, waarbij L een uittredende groep zoals bromide, jodide, tosylaat, triflaat of tosylaat is, waarbij de gewenste verbinding met de formule 21 wordt verkregen.

De gewenste verbindingen met de formule 21A, waarbij η 1 of 2 is, kunnen worden bereid uit het overeenkomende sulfide met de formule 21 door behandeling met 15 een oxidatiemiddel zoals waterstofperoxide of m-chloorperbenzoëzuur in een bij de reactie inert oplosmiddel zoals dichloormethaan. De gewenste mate van oxidatie kan worden geregeld door de deskundige en wordt gewoonlijk bereikt door een geschikte keuze van de reactietemperatuur.

29 ψ ψ 9 r' Ο

Ri, Λ ΧΝ R? Α X R2 1 1 Υγ Υ I Η | | 0Η Ι^Π RAyA RAYr R4 Β R1 Β ^ é

Formula 28 Formula 25 \ Formula 24

I ν \ I

R1 NH* l R? R1 OH

r2 JL J RushiS» 11 p2 JL J

TV ---------- R' TV

^ Ct V-v«s "yV *i"r R 8 YT IT Ty r4 b

Formula 27 Tr ^ *** Y Y R Formula 23

K A» A

] Forosufee “ D

j I Formula 26 | , t * V \ “iV ,— «XTp; —,χχ.

'Χί W' -v, i Ίπ£ t » _ Υ" «δ R 8 t,i<o Formula 22

Formula 29 R2 3 4 5 6 7 8 9 10 Formula,

Formula 8

Schema 4

Volgens schema 4 kunnen de gewenste verbindingen met de formule I, waarbij 2 kregen door alkylering van een secundair amine met de formule 10 met een verbinding 3 met de formule 22 bij aanwezigheid van een geschikte base zoals triethylamine, di- 4 isopropylethylamine, kaliumcarbonaat, natriumhydride of kalium-tert-butoxide, bij 5 voorkeur kalium-tert-butoxide, in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals 6

THF, dichloormethaan of dioxaan, bij voorkeur THF, bij een temperatuur tussen -40°C

7 en 40°C, bij voorkeur 0-30°C.

8

De verbindingen met de formule 22 kunnen worden bereid uit de overeenko 9 mende verbinding met de formule 23 door omzetting van de alcohol in een uittredende 10 groep L zoals een mesylaat, tosylaat, triflaat, chloride of bromide volgens standaardwerkwijzen die bekend zijn bij de deskundige. Bijvoorbeeld kan een bromide worden bereid door het laten reageren van verbindingen met de formule 17 onder toepassing 30 van een geschikt reagens zoals fosfortribromide of een combinatie van koolstoftetra-bromide en trifenylfosfien in een bij de reactie inert oplosmiddel zoals dichloor-methaan, THF of dioxaan. Het voorkeursreagens is een combinatie van koolstoftetra-bromide en trifenylfosfien en het voorkeursoplosmiddel is dichloormethaan, bij een 5 temperatuur tussen -78°C en 100°C, bij voorkeur -10°C tot 30°C.

De verbindingen met de formule 23 kunnen worden bereid uit de overeenkomende verbindingen met ofwel de formule 24 ofwel de formule 25 met een geschikt reductiemiddel dat bekend is bij de deskundige, zoals lithiumaluminiumhydride, na-triumboorhydride of een boraan-THF-complex, zoal skan worden gevonden in L.A. 10 Paquette (Ed), Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Chichester, Engeland, 1995.

In een ander aspect van deze uitvinding kunnen de verbindingen met de formule I worden bereid uit verbindingen met de formule 26 volgens een verscheidenheid van werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige. Bijvoorbeeld in het geval dat A een 15 eventueel gesubstitueerde aromatische ring is, is het vaak mogelijk om het desbetreffende halogeen-derivaat van A te gebruiken en het halogeenatoom te vervangen door het secundaire amine van de verbinding met de formule 13, in het algemeen bij aanwezigheid van een base. Vaak worden deze reacties vereenvoudigd door de toepassing van een palladium-katalysator, zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 20 5576460; de Internationale publicatie WO 98/15515; de Internationale publicatie WO

00/02887; de Internationale publicatie WO 04/052939; de Europese publicatie EP3009560.8; en de Europese publicatie EP99933785.0; die voor alle doeleinden in hun geheel als hierin ingelast dienen te worden beschouwd. In een ander voorbeeld, als A een eventueel gesubstitueerde 2-pyridyl-, 2- of 4-pyrimidinyl- of 2-pyrazinylgroep is, 25 kan deze reactie worden uitgevoerd zonder de toepassing van een katalysator, onder toepassing van het overeenkomende 2-halogeenpyridine, 2- of 4-halogeenpyrimidin respectievelijk 2-pyrazine, in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals dime-thylformamide (DMF), N-methylpyrrolidinon of Ν,Ν,Ν',Ν'-tetramethylureum, onder toepassing van een geschikte base zoals triethylamine, diisopropylethylamine, kalium-30 carbonaat of natriumcarbonaat. De voorkeursbase is diisopropylethylamine in een geschikt inert oplosmiddel zoals THF, dichloormethaan, DMF of dioxaan. Het voorkeursoplosmiddel is DMF bij een temperatuur tussen -40°C en 160°C, bij voorkeur 20°C-140°C.

31

In een ander aspect van deze uitvinding kunnen de verbindingen met de formule 1 worden bereid uit verbindingen met de formule 26 door een reeks van reacties, die bekend zijn bij de deskundige, waarbij de A-ring de novo wordt gevormd. Voorkeursvoorbeelden van dergelijke werkwijzen omvatten, maar zijn niet beperkt tot, de reactie 5 van de verbindingen met de formule 26 met een cyaneringsmiddel, zoals cyanogeen-bromide of N-cyanoimidazool, voor het bereiden van een cyaanamide-tussenproduct. Dit kan men verder laten reageren met een azide-bron zoals natriumazide, tri-n-butyl-tinazide of trimethylsilylazide voor het vormen van een tetrazool. De tetrazool kan men desgewenst verder laten reageren, bijvoorbeeld door alkylering. In een ander aspect kan 10 men het cyaanamide-tussenproduct laten reageren met hydroxylamine, gevolgd door een alkanoyleringsmiddel zoals een acylchloride, voor het vormen van een oxadiazool-verbinding (Ried, W en Eichhom, T.A., Archiv der Pharmazie 1998, 321(9), 527). In nog een ander aspect kan men het cyaanamide-tussenproduct laten reageren met een acylhydrazide voor het vormen van een triazoolring bevattende verbinding (Ried, W en 15 Eichhom, T.A., Archiv der Pharmazie 1998, 321(9), 527).

De verbindingen met de formule 26 kunnen worde bereid uit de overeenkomende verbinding met de formule 27 door reductieve alkylering met een verbinding met de formule 8 met een geschikt reductiemiddel zoals natriumboorhydride, natrium-triacetoxyboorhydride of natriumcyanoboorhydride. Het reductiemiddel dat de voor-20 keur heeft is natriumboorhydride in een geschikt oplosmiddel zoals ethanol, THF, dichloormethaan, dioxaan of tolueen. Het voorkeursoplosmiddel is ethanol bij een temperatuur van -78°C tot 67°C, bij voorkeur 0-50°C.

In een ander aspect van deze uitvinding kunnen de verbindingen met de formule 26 worden bereid uit de overeenkomende verbinding met de formule 25 door reduc-25 tieve alkylering met een amine met de formule 11 met een geschikt reductiemiddel zoals natriumboorhydride, natriumtriacetoxyboorhydride of natriumcyanoboorhydride. Het reductiemiddel dat de voorkeur heeft is natriumboorhydride in een geschikt oplosmiddel zoals ethanol, THF, dichloormethaan, dioxaan of tolueen. Het voorkeursoplosmiddel is ethanol bij een temperatuur van -78°C tot 67°C, bij voorkeur 0-50°C.

30 De verbindingen met de formule 27 kunnen worden bereid uit de overeenko mende verbinding met de formule 28 door reductie met een geschikt reductiemiddel zoals lithiumaluminiumhydride, zoals kan worden gevonden in L.A. Paquette (Ed), 32

Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Chichester, Engeland, 1995.

In een ander aspect van deze uitvinding kunnen de verbindingen met de formule I worden bereid uit verbindingen met de formule 29 en de formule 12 onder toepassing 5 van een geschikte base zoals triethylamine, diisopropylethylamine, kaliumcarbonaat, natriumhydride of kalium-tert-butoxide, bij voorkeur kalium-tert-butoxide, in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF, dichloormethaan of dioaan, bij voorkeur THF, bij een temperatuur tussen -40°C en 40°C, bij voorkeur 0-30°C.

Verbindingen met de formule 29 kunnen worden bereid uit verbindingen met de 10 formule 27 volgens een verscheidenheid van werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige. Bijvoorbeeld in het geval dat A een eventueel gesubstitueerde aromatische ring is, is het vaak mogelijk om het desbetreffende halogeenderivaat van A te gebruiken en het halogeenatoom te vervangen door het primaire amine van de verbinding met de formule 27, in het algemeen bij aanwezigheid van een base. Vaak worden deze re-15 acties vereenvoudigd door de toepassing van een palladium-katalysator, zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5576460; de Internationale publicatie WO 98/15515; de Internationale publicatie WO 00/02887; de Internationale publicatie WO 04/052939; de Europese publicatie EP3009560.8; en de Europese publicatie EP99933785.0; die voor alle doeleinden in hun geheel als hierin ingelast dienen te 20 worden beschouwd. In een ander voorbeeld, als A een eventueel gesubstitueerde 2-py-ridyl-, 2- of 4-pyrimidinyl- of 2-pyrazinylgroep is, kan deze reactie worden uitgevoerd zonder de toepassing van een katalysator, onder toepassing van het overeenkomende 2-halogeenpyridine, 2- of 4-halogeenpyrimidin respectievelijk 2-pyrazine, in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals dimëthylformamide (DMF), N-methylpyr-25 rolidinon of Ν,Ν,Ν',Ν'-tetramethylureum, onder toepassing van een geschikte base zoals triethylamine, diisopropylethylamine, kaliumcarbonaat of natriumcarbonaat. De voorkeursbase is diisopropylethylamine in een geschikt inert oplosmiddel zoals THF, dichloormethaan, DMF of dioxaan. Het voorkeursoplosmiddel is DMF bij een temperatuur tussen -40°C en 160°C, bij voorkeur 20°C-140°C.

30 33 R1 R3 'Χ^'Ήδ! it

Formula 4

R’ R1 R1 OH

XJC Ï--xX/° -———- x X ,oh R^X- Hal R3 R5 R* ά4 R’,0H R4 R”

Formula 30 Formula 31 Formula 32

R1 OH R1 OP R1 OP

*V τ w "VV

JL - JL X^or!^-.A J^°h R3 X j R'> X ^T Rr X ] R4 R,t R4 «” R4 *"

Formula 35 Formula 34 Formula 33

Schema 5 1 Λ 1 5 Volgens schema 5 kan de verbinding met de formule 30, waarbij X, R , R , R , R4 en R11 zijn zoals hiervoor is beschreven en Hal chloor, broom of jood is, worden bereid uit de verbinding met de formule 4 door reactie met het desbetreffende carbon-zuur bij aanwezigheid van een geschikte base zoals triethylamine, diisopropylethyl-amine, kaliumcarbonaat, cesiumcarbonaat, natriumhydride of kalium-tert-butoxide, bij 10 voorkeur cesiumcarbonaat, in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF of DMF, bij voorkeur DMF, bij een temperatuur tussen -40°C en 40°C, bij voorkeur 0-30°C.

De verbinding met de formule 31 kan worden verkregen uit een verbinding met de formule 30 door behandeling met een geschikt organometalliek reagens zoals n-bu-15 tyllithium, sec-butyllithium of tert-butyllithium, bij voorkeur sec-butyllithium, in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF, bij een temperatuur tussen -98°C en 20°C, bij voorkeur -98°C en 0°C. Afhankelijk van de aard van de substituenten en 34 het oplosmiddel waarin deze is opgelost kan deze lactol in de gedeeltelijk of volledig ring-geopende, of hydroxyketon-vorm bestaan.

De verbinding met de formule 32 kan worden bereid uit de overeenkomende verbinding met de formule 31 door behandeling met een geschikt reductiemiddel zoals 5 natriumboorhydride, natrimtriacetoxyboorhydride of lithiurnaluminiumhydride in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel, waarbij de gewenste alcohol met de formule 32 wordt verkregen. Onder voorkeursomstandigheden wordt natriumboorhydride in ethanol tussen 0°C en 40°C, bij voorkeur 20°C, toegepast.

De verbinding met de formule 33, waarbij P een geschikte beschermende groep 10 zoals trityl, allyl, tert-butyldimethylsilyl of triisopropylsilyl is, kan worden bereid uit de verbinding met de formule 32 door een selectieve reactie bij de minder sterisch gehinderde alcoholgroep volgens werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige, zoals die welke worden beschreven in T.W. Greene en P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York, USA, 1991. Bijzondere voorkeur 15 heeft het triisopropylsilyl-derivaat, dat wordt bereid door behandeling van de alcohol met triisopropylsilylchloride bij aanwezigheid van een geschikte base zoals imidazool in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF of DMF, bij voorkeur DMF, bij een temperatuur tussen -40°C en 40°C, bij voorkeur 0-30°C.

De verbinding met de formule 34 kan worden bereid uit de overeenkomende 20 alcohol met de formule 33 door een alkyleringsreactie die bekend is bij de deskundige, zoals bijvoorbeeld wordt beschreven in L.A. Paquette (Ed), Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Chichester, Engeland, 1995. In een voorkeursaspect van deze uitvinding kan de alcohol worden behandeld met een base zoals natriumhexamethyldisilazide, kaliumhydride of natriumhydride, bij voorkeur natrium-25 hydride, in een bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF, en kan men deze laten reageren met het geschikte alkyleringsmiddel R17L, waarbij L een uittredende groep zoals bromide, jodide, tosylaat, triflaat of tosylaat is, waarbij de gewenste verbinding met de formule 34 wordt verkregen.

De verbinding met de formule 23, waarbij X, R1, R2, R3, R4 zijn zoals hiervoor is 30 beschreven, Y CHR11 is en B OR17 is, hierin aangeduid als formule 35, kan worden bereid uit de verbinding met de formule 34 door deprotectie volgens werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige, zoals die welke worden beschreven in T.W. Greene en P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New 35

York, USA, 1991. In het voorkeursgeval dat P de triisopropylsilylgroep is kan de beschermende groep worden verwijderd door behandeling met een fluoride-bron, bij voorkeur ettrabutylammoniumfluoride, in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF of DCM, bij voorkeur THF, bij een temperatuur tussen -40°C en 40°C, bij 5 voorkeur 0-30°C.

fjf ψ ft’ Rl

R? R* i^CH2OP

RA^Hai ιΛ/πκ rV'Y0" V^x^v b k R* έ* έ

Pon**^* 3 Formula 38 Formula 37 Formula 38 j R’

Rl^A^CHjOH

R^X^Y

Ff* 8

Formica 23

Schema 6 10

Volgens schema 6 kan de verbinding met de formule 36, waarbij X, R1, R2, R3 en R4 zijn zoals hiervoor is beschreven en Hal chloor, broom of jood, bij voorkeur broom of jood is en P een geschikte beschermende groep zoals trityl, allyl, tert-butyldimethyl-silyl of triisopropylsily is, worden bereid uit de verbinding met de formule 3 volgens 15 werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige, zoals die welke worden beschreven in T.W. Greene en P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York, USA, 1991. Bijzondere voorkeur heeft het geval dat P triisopropyl-silyl is, welke kan worden bereid door behandeling van de alcohol met triisopropyl-silylchloride bij aanwezigheid van een geschikte base zoals imidazool in een geschikt, 20 bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF of DMF, bij voorkeur DMF, bij een temperatuur tussen -40°C en 40°C, bij voorkeur 0-30°C.

De verbinding met de formule 37, waarbij Y CRnR12 is, kan worden bereid uit de verbinding met de formule 36 door behandeling met een geschikt organometalliek reagens zoals n-butyllithium, sec-butyllithium, tert-butyllithium of isopropylmagnesium-25 chloride, bij voorkeur n-butyllithium of isopropylmagnesiumchloride, in een geschikt, 36 bij de reactie inert oplosmiddel zoals THF of diethylether bij een temperatuur tussen -98°C en 20°C, bij voorkeur -78°C tot 0°C, na een geschikte interval gevolgd door behandeling met de carbonylverbinding YO.

De verbinding met de formule 38, waarbij B OR17 of SR18 is, kan worden bereid 5 uit de alcohol met de formule 37 volgens de werkwijzen die zijn beschreven bij schema 3.

Bij een alternatieve bereiding van de verbinding met de formule 23, waarbij X, Y, B, R1, R2, R3, R4 zijn zoals hiervoor is beschreven, kan de bescherming van de verbinding met de formule 34 worden verwijderd volgens werkwijzen die bekend zijn bij de 10 deskundige, zoals die welke worden beschreven in T.W. Greene en P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York, USA, 1991. In het geval dat P de triisopropylsilyl- of tert-butyldimethylsilylgroep is kan de beschermende groep worden verwijderd door behandeling met een fluoride-bron, bij voorkeur tetrabutylammoniumfluoride, in een geschikt, bij de reactie inert oplosmiddel 15 zoals THF of DCM, bij voorkeur THF, bij een temperatuur tussen -40°C en 40°C, bij voorkeur 0-30°C.

VY^h ♦ «tyV —— jljC ll δ

rM« 0 R lm ^RS

ft# ^ Formula 4·;

_ . - Fomuila*» I

FcfrnuJa7 | -_RyS^"'vv,s

*4 \ E

Fcrrmds 43 t formula 42 farnmfe, ^3 \ \ I ,ch3 I , r -v- T2 a2 ?’ tivUXvvii__«Λ„ rVV'm Y * IT N TT I s. i

I^Hai T^RS -sr'x'^Hal J ~N

£ "* R> R k, R' ! *4 formula 45 _j formula 46

Schema 7 37

Volgens reactieschema 7 is Hal een halogeenatoom, is X C en zijn R1, R2, R3, R4, R , R en R zoals hiervoor is beschreven. De gewenste verbindingen die in schema 5 als formule 41 worden weergegeven kunnen worden bereid uit verbindingen met de formules 7 en 40 door zure hydrolyse, bijvoorbeeld bij aanwezigheid van tolueen-5 sulfonzuur in een geschikt oplosmiddel zoals aceton, tolueen, THF of dichloormethaan, bij voorkeur tolueen, bij een temperatuur tussen 0°C en terugvloeitemperatuur, bij voorkeur kamertemperatuur.

Verbindingen met de formule 13 kunnen worden bereid door het hydrateren van de dubbele binding van de formule 41 door reactie met een reductiemiddel zoals na-10 triumboorhydride, natriumtriacetoxyboorhydride of natriumcyanoboorhydride in een geschikt oplosmiddel zoals ethanol. De reactie verloopt bij een temperatuur tussen 0°C en 78°C, bij voorkeur tussen 20°C en 50°C.

Verbindingen met de formule 42 kunnen worden bereid door het laten reageren van het amine met de formule 13 in een geschikte base zoals natriumacetaat en een 15 geschikt oplosmiddel zoals dichloormethaan, en/of ethanol met een cyaneringsmiddel, zoals cyanogeenbromide of N-cyaanimidazool, bij omgevingstemperatuur. Als de reactie als voltooid wordt beoordeeld wordt deze gezuiverd tot een olie.

Verbindingen met de formule 43 kunnen worden bereid door het laten reageren van de cyaanamine-verbinding met de formule 42 met een azide-bron zoals natrium-20 azide, tri-n-butyltinazide of trimethylsilylazide in een oplosmiddel zoals tolueen, THF of dichloormethaan, bij voorkeur tolueen, bij een temperatuur van 20°C tot 80°C.

Een mengsel van de gemethyleerde tetrazool-amine-verbindingen met de formules 44 en 45 wordt bereid door het alkyleren van de verbinding met de formule 43 met een alkyleringsmiddel zoals dimethylsulfaat in een oplosmiddel zoals 2-methyl-THF, 25 DMF en DM Ac bij een temperatuur van ongeveer 20°C tot 80°C.

Methyl-5-aminotetrazool kan worden bereid door het hydrogeneren van het mengsel van de verbindingen met de formules 44 en 45 onder toepassing van een hy-drogeneringskatalysator zoals palladium-op-koolstof of palladiumhydroxide onder een waterstofatmosfeer van 35 tot 70 psi, bij voorkeur 40 psi, in een bij de reactie inert op-30 losmiddel zoals methanol, ethanol of azijnzuur, bij een temperatuur van -78°C tot 38 70°C, bij voorkeur -78°C tot 40°C. Verdere werkwijzen voor het bereiden van deze verbinding worden gegeven in PCT octrooiaanvragen W02006/056854 en WP2006/03302, die als hierin ingelast dienen te worden beschouwd.

Als een aanvankelijke opmerking, bij de bereiding van de verbindingen, wordt 5 opgemerkt dat enkele van de bereidingswijzen die bruikbaar zijn voor de bereiding van de hierin beschreven verbindingen bescherming van afgelegen functionaliteiten (b.v. primair amine, secundair amine, carboxyl in tussenproducten) vereist. De noodzaak van een dergelijke bescherming varieert afhankelijk van de aard van de afgelegen functionaliteit en de omstandigheden van de bereidingswijzen. De noodzaak van een derge-10 lijke bescherming kan eenvoudig worden bepaald door de deskundige. De toepassing van dergelijke protectie/deprotectiewerkwijzen valt eveneens binnen de stand der techniek. Voor een algemene beschrijving van beschermende groepen en de toepassing daarvan zie T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991.

15 In de reactieschema's bevatten bepaalde verbindingen bijvoorbeeld primaire ami- nen of carbonzuur-fimctionaliteiten die reacties op andere plaatsen van de molecuul kunnen beïnvloeden als ze niet worden beschermd. Dienovereenkomstig kunnen dergelijke functionaliteiten worden beschermd met een geschikte beschermende groep die kan worden verwijderd in een volgende stap. Geschikte beschermende groepen voor de 20 bescherming van amine en carbonzuur omvatten die beschermende groepen, die gewoonlijk worden toegepast bij de synthese van peptide (zoals N-tert-butoxycarbonyl, benzyloxycarbonyl en 9-fluorenylmethyleenoxycrbonyl voor aminen en kleine alkyl- of benzylesters voor carbonzuren) welke in het algemeen niet chemisch reactief zijn onder de beschreven reactie-omstandigheden en gewoonlijk verwijderd kunnen worden zon-25 der dat een andere functionaliteit in de verbinding chemisch wordt veranderd.

Promedicamenten van de verbindingen volgens de onderhavige uitvinding kunnen worden bereid volgens werkwijzen die beken zijn bij de deskundige. Voorbeelden van werkwijzen worden hierna beschreven.

Promedicamenten volgens deze uitvinding waarbij een carboxylgroep in een car-30 bonzuur van de verbindingen wordt vervangen door een ester kunnen worden bereid door het combineren van het carbonzuur met het desbetreffende alkylhalogenide bij aanwezigheid van een base zoals kaliumcarbonaat in een inert oplosmiddel zoals di-methylformamide bij een temperatuur van ongeveer 0 tot 100°C gedurende ongeveer 1 39 tot ongeveer 24 uur. Als alternatief wordt het zuur gecombineerd met een geschikte alcohol als oplosmiddel bij aanwezigheid van een katalytische hoeveelheid zuur zoals geconcentreerd zwavelzuur bij een temperatuur van ongeveer 20 tot 100°C, bij voorkeur bij terugvloeitemperatuur, gedurende ongeveer 1 uur tot ongeveer 24 uur. Een 5 andere werkwijze is de reactie van het zuur met een stoichiometrische hoeveelheid van de alcohol bij aanwezigheid van een katalytische hoeveelheid zuur in een inert oplosmiddel zoals tolueen of tetrahydrofuran, met gelijktijdige verwijdering van het water dat wordt geproduceerd op fysieke (b.v. Dean-Stark val) of chemische (b.v. moleculaire zeven) wijze.

10 Promedicamenten van deze uitvinding waarbij een alcoholfunctie is gederivati- seerd als een ether kunnen worden bereid door het combineren van de alcohol met het desbetreffende alkylbromide of -jodide bij aanwezigheid van een base zoals kaliumcar-bonaat in een inert oplosmiddel zoals dimethylformamide bij een temperatuur van ongeveer 0 tot 100°C gedurende ongeveer 1 tot ongeveer 24 uur. Alkanoylaminome-15 thylethers kunnen worden verkregen door de reactie van de alcohol met een bis(alkanoylamino)methaan bij aanwezigheid van een katalytische hoeveelheid zuur in een inert oplosmiddel zoals tetrahydrofuran, volgens een werkwijze die wordt beschreven in US 4997984. Daarnaast kunnen deze verbindingen worden bereid volgens de werkwijzen die worden beschreven door Hoffman et al. in J. Org. Chem. 1994, 59, 20 3530.

Glycosiden worden bereid door de reactie van de alcohol en een koolhydraat in een inert oplosmiddel zoals tolueen bij aanwezigheid van een zuur. Gewoonlijk wordt het water dat wordt gevormd tijdens de reactie verwijderd terwijl het wordt gevormd, zoal hiervoor is beschreven. Een andere werkwijze is de reactie van de alcohol met een 25 geschikt beschermd glycosylhalogenide bij aanwezigheid van een base, gevolgd door deprotectie.

N-(l -hydroxyalkyl)amiden, N-( 1 -hydroxy-1 -(alkoxycarbonyl)methyl)amiden kunnen worden bereid door de reactie van het oorspronkelijke amide met de desbetreffende aldehyde onder neutrale of basische omstandigheden (b.v. natriumethoxide in 30 ethanol)bij temperaturen tussen 25 en 70°C. N-alkoxymethyl- of N-l-(alkoxy)alkyl-derivaten kunnen worden verkregen door de reactie van de N-ongesubstitueerde verbinding met het noodzakelijke alkylhalogenide bij aanwezigheid van een base in een inert oplosmiddel.

40

De verbindingen volgens deze uitvinding kunnen ook samen met andere farmaceutische middelen (b.v. LDL-cholesterol verlagende middelen, triglyceride verlagende middelen) worden toegepast voor de behandeling van de hierin beschreven ziekte/aandoeningen. Bijvoorbeeld kunnen ze in combinatie met een HMG-CoA-re-5 ductase-inhibitor, een cholesterol-synthese-inhibitor, een cholesterol-absorptie-inhibi-tor, een andere CETP-inhibitor, een MTP/Apo-B-secretie-inhibitor, een PPAR-modu-lator en andere cholesterol verlagende middelen zoals een fibraat, niacine, een ionen-uitwisselingshars, een antioxidans, een ACAT-inhibitor en een galzuur-sekwestreer-middel worden toegepast. Andere farmaceutische middelen omvatten tevens de vol-10 gende: een galzuur-heropname-inhibitor, een ileaal-galzuur-transport-inhibitor, een ACC-inhibitor, een antihypertensiemiddel (zoals NORVASC®), een selectieve estro-geen-receptor-modulator, een selectieve androgeen-receptor-modulator, een antibioticum, een antidiabeticum (zoals metformine, een PPARy-activator, een sulfonylureum, insuline, een aldose-reductase-inhibitor (ARI) en een sorbitol-dehydrogenase-inhibitor 15 (SDI)) en aspirine (acetylsalicylzuur of een stikstofoxide afgevende aspirine). Zoals hierin gebruikt omvat "niacine" alle beschikbare vormen zoals niacine met onmiddellijke afgifte, niacine met langzame afgifte, niacine met langdurige afgifte en niacine met weinig uitspoeling. Niacine kan ook worden gecombineerd met andere therapeutische middelen zoals prostaglandinen en/of statinen, d.w.z. lovastatine of simvastatine, 20 welke een HMG-CoA-reductase-inhibitor zijn en hierna worden beschreven. Deze combinatiebehandeling staat bekend als ADVICOR® (Kos Pharmaceuticals Inc.). Bij een combinatietherapiebehandeling worden beide verbindingen volgens deze uitvinding en de andere medicamentbehandelingen volgens gebruikelijke werkwijzen toegediend aan zoogdieren (b.v. mensen, mannelijk of vrouwelijk).

25 De omzetting van 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzym A (HMG-CoA) in mevalonaat is een vroege en snelheidsbeperkende stap in de biosynthetische route van cholesterol. Deze stap wordt gekatalyseerd door het enzym HMG-CoA-reductase. Statinen remmen HMG-CoA-reductase bij het katalyseren van deze omzetting. Voorbeelden van statinen omvatten lovastatine, simvaststine, pravastatine, fluvastatine, ator-30 vastatine, rivastatine, rosuvastatine, pitavastatine, (3R,5R)-7-(4-(benzylcarbamoyl)-2-(4-fluorfenyl)-5-isopropyl-lH-imidazool-l-yl)-3,5-dihydroxyheptaanzuur; (3R,5R)-7-(4-((4-methylbenzyl)carbamoyl)-2-(4-fluorfenyl)-5-isopropyl-lH-pyrazool-l-yl)-3,5-dihydroxyheptaanzur; en (3R,5R)-7-(4-((3-fluorbenzyl)carbamoyl)-5-cyclopropyl-2-(4- 41 fluorfenyl)-lH-imidazool-l-yl)-3,5-dihydroxyheptaanzuur, en farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan.

Atorvastatine-calcium (d.w.z. atorvastatine-hemicalcium), beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5273995, dat als hierin ingelast dient te worden beschouwd, 5 wordt thans in de handel gebracht als Lipitor® en heeft de formule >'· ωβ oh 9H { ο,**

Me—® ry^yy^

U

L J2

Atorvastatine-calcium is een selectieve, competitieve inhibitor van HMG-CoA. Als 10 zodanig is atorvastatine-calcium een krachtige lipide-verlagende verbinding. De vrije carbonzuurvorm van atorvastatine bestaat in hoofdzaak als de lacton met de formule

O

-J* Λ, 15 en wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4681893, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd.

Statinen omvatten verbindingen zoals rosuvastatine, dat wordt beschreven in US RE37314 E, pitivastatine, dat wordt beschreven in EP-B1-304063 en US 5011930, simvastatine, dat wordt beschreven in US 4444784, welke als hierin ingelast dient te 42 worden beschouwd; pravastatine, dat wordt beschreven in US 4346227, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd; cerivastatine, dat wordt beschreven in US 5502199, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd; mevastatine, dat wordt beschreven in US 3983140, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd; velo-5 statine, dat wordt beschreven in US 4448784 en US 4450171, welke beide als hierin ingelast dienen te worden beschouwd; fluvastatine, dat wordt beschreven in US 4739073, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd; compactine, dat wordt beschreven in US 4804770, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd; lo-vastatine, dat wordt beschreven in US 4231938, welke als hierin ingelast dient te wor-10 den beschouwd; dalvastatine, dat wordt beschreven in EP-A2-738510; fluindostatine, dat wordt beschreven in EP-A1-363934; atorvastatine, dat wordt beschreven in US 4681893, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd; atorvastatine-calcium (hetgeen het hemic laciumzout van atorvastatine is), dat wordt beschreven in US 5273995, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd; en dihydrocompactine, 15 dat wordt beschreven in US 4450171, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd.

Verdere HMG-CoA-reductase-inhibitoren worden beschreven in de Internationale publicaties WO 2005/105079; en PCT/IB2005/003461, ingediend op 14 november 2005 (waarvan de beschrijvingen als hierin ingelast dienen te worden beschouwd), 20 waaronder (3R,5R)-7-(4-(benzylcarbamoyl)-2-(4-fluorfenyl)-5-isopropyl-1 H-imida- zool-1 -yl)-3,5-dihydroxyheptaanzuur; (3R,5R)-7-(4-((3-fluorbenzyl)carbamoyl)-5-cy-clopropyl-2-(4-fluorfenyl)-lH-imidazool-l-yl)-3,5-dihydroxyheptaanzuur; en (3R,5R)- 7-(4-((4-methylbenzyl)carbamoyl)-2-(4-fluorfenyl)-5-isopropyl-lH-pyrazool-l-yl)-3,5-dihydroxyheptaanzur en farmaceutisch aanvaardbare zouten van de verbindingen.

25 Iedere PPAR-modulator kan worden toegepast in het combinatie-aspect van deze uitvinding. De uitdrukking PPAR-modulator heeft betrekking op verbindingen die de peroxisoom-proliferator-activator-receptor (PPAR) activiteit bij zoogdieren, in het bijzonder mensen, moduleren. Een dergelijke modulatie wordt eenvoudig aan de hand van standaard-assays die bekend zijn uit de literatuur bepaald door de deskundige. Er wordt 30 aangenomen dat dergelijke verbindingen, door het moduleren van de PPAR-receptor, de transcriptie van sleutelgenen reguleren die betrokken zijn bij lipide- en glucose-me-tabolisme, zoals die bij de vetzuuroxidatie en tevens die welke betrokken zijn bij het samenstellen van hoge-dichtheid-lipoproteïne (HDL) (bijvoorbeeld apolipoproteïne-Al- 43 gen-transcriptie), waarbij dienovereenkomstig totaal lichaamsvet wordt verminderd en HDL-cholesterol wordt verhoogd. Vanwege de activiteit daarvan verlagen deze verbindingen tevens plasmagehaltes van triglyceriden, VLDL-cholesterol, LDL-cholesterol en de daarmee geassocieerde componenten zoals apolipoproteïne B bij zoogdieren, in het 5 bijzonder mensen, en tevens verhogen ze HDL-cholesterol en apolipoproteïne Al. Aldus zijn deze verbindingen bruikbaar voor de behandeling en correctie van de verschillende dyslipidemia's die zijn geassocieerd met de ontwikkeling en het voorkomen van atherosclerose en cardiovasculaire ziekte, waaronder hypoalfalipoproteïnemie en hypertriglyceridemie. Een verscheidenheid van deze verbindingen wordt hierna be-10 schreven, echter anderen zijn bekend bij de deskundige. In de Internationale publicaties WO 2004/048334; WO 2005/092845; en WO 2006/003495 (waarvan de beschrijvingen als hierin ingelast dienen te worden beschouwd) worden bepaalde verbindingen beschreven welke PPARa-activatoren zijn, waaronder 3-[3-(l-carboxy-l-methyl-ethoxy)fenyl]piperidine-1 -carbonzuur-3-trifluormethy 1-benzylester; 3-[3-( 1 -carboxy-1 -15 methyl-ethoxy)fenyl]piperidine-l-carbonzuur-4-trifluormethyl-benzylester; 5-[4-(4-ethyl-benzylsulfanyl)fenylsulfamoyl]-2-methyl-benzoëzuur; en 5- (2-[4-(3,4-difluor-fenoxy)fenyl]ethylsulfamoyl}-2-methyl-benzoëzuur; en farmaceutisch aanvaardbare zouten van de verbindingen.

Iedere andere PPAR-modulator kan worden toegepast in het combinatie-aspect 20 van deze uitvinding. In het bijzonder kunnen modulatoren van PP ARP en/of PPARy bruikbaar zijn in combinatie met verbindingen volgens de onderhavige uitvinding. Voorbeelden van PPAR-inhibitoren worden in de Internationale publicatie WO 2003/084916 beschreven als {5-methoxy-2-methyl-4-[4-(4-trifluormethyl-benzyloxy)benzy lsulfanyljfenoxy } azijnzuur en (5-methoxy-2-methyl-4-[4-(5- 25 trifluormethyl-pyridine-2-yl)benzylsulfanyl]fenoxy} azijnzuur; en farmaceutisch aanvaardbare zouten van de verbindingen.

Iedere MTP/Apo B (microsomaal triglyceride-overdrachteiwit en/of apolipoproteïne B) secretie-inhibitor kan worden toegepast in het combinatie-aspect van deze uitvinding. De uitdrukking MTP/Apo B-secretie-inhibitor heeft betrekking op 30 verbindingen die de secretie van triglyceriden, cholesterylester en fosfolipiden remmen. Een dergelijke remming wordt eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. Wetterau, J.R. 1992; Science 258:999) bepaald door de deskundige. Een verscheidenheid van deze verbindingen wordt hierna beschreven, echter andere MTP/Apo B-secretie-inhibitoren 44 zijn bekend bij de deskundige, waaronder implitapide (Bayer) en extra verbindingen, zoals die welke worden beschreven in WO 96/40640 en WO 98/23593 (twee voorbeelden van publicaties).

Bijvoorbeeld de volgende MTP/Apo B-secretie-inhibitoren zijn bijzonder 5 bruikbaar: 4,-trifluormethyl-bifenyl-2-carbonzuur-[2-(lH-[l,2,4]triazool-3-ylmethyl)-1,2,3,4-tetrahydro-isochino line-6-yl] amide; 4'-trifluormethyl-bifenyl-2-carbonzuur-[2-(2-acetylamino-ethyl)-l,2,3,4- tetrahydro-isochinoline-6-yl]amide; 10 (2- {6-[(4'-trifluormethyl-bifenyl-2-carbonyl)amino]-3,4-dihydro-1H- isochinoline-2-yl}ethyl)carbamidezuur-methylester; 4'-tri fluormethyl-bifenyl-2-carbonzuur-[2-(lH-imidazool-2-ylmethyl)-l,2,3,4-tetrahydro-isochinoline-6-yl]amide; 4'-trifluormethyl-bifenyl-2-carbonzuur-[2-(2,2-difenyl-ethyl)-l,2,3,4-tetrahydro-15 isochinoline-6-yl]amide; 4'-trifluormethyl-bifenyl-2-carbonzuur-[2-(2-ethoxy-ethyl)-l,2,3,4-tetrahydro-isochino line-6-y ljamide; (S)-N- {2-[benzyl(methyl)amino]-2-oxo- 1-fenylethyl} -1 -methyl-5-[4'-(lrifluormethyl)[ 1,1 '-bifenyl]-2-carboxamido]-1 H-indool-2-carboxamide; 20 (S)-2-[(4'-trifluormethyl-bifenyl-2-carbonyl)amino]chinoline-6-carbonzuur- (pentylcarbamoyl-fenyl-methyl)amide; 1 H-indool-2-carboxamide, 1 -methyl-N-[( 1 S)-2-[methyl(fenylmethyl)amino]-2- oxo-1 -fenylethyl]-5-[[[4'-(trifluormethyl)[l, 1 ’-bifenyl]-2-yl]carbonyl]amino]; en N-[(l S)-2-(benzylmethylamino)-2-oxo-l -feiiylethyl]-1 -methyl-5-[[[4'-25 (trifluormethyl)bifenyl-2-yl]carbonyl]amino-1 H-indool-2-carboxamide.

Iedere HMG-CoA-synthase-inhibitor kan worden toegepast in het combinatie-aspect volgens deze uitvinding. De uitdrukking HMG-CoA-synthase-inhibitor heeft betrekking op verbindingen die de biosynthese van hydroxymethylglutaryl-coenzym A uit acetyl-coenzym A en acetoacetyl-coenzym A, gekatalyseerd door het enzym HMG-30 CoA-synthase, remmen. Een dergelijke remming wordt eenvoudig volgens standaard-assays (Meth Enzymol. 1975; 35: 155-160: Meth. Enzymol. 1985; 110: 19-26 en de daarin vermelde referenties) bepaald door de deskundige. Een verscheidenheid van deze verbindingen wordt hierna beschreven, echter andere HMG-CoA-synthase- 45 inhibitoren zijn bekend bij de deskundige. In het Amerikaanse octrooischrift 5120729 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden bepaalde beta-lactam-derivaten beschreven. In het Amerikaanse octrooischrift 5064856 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden 5 bepaalde spiro-lacton-derivaten beschreven die zijn bereid door het kweken van een micro-organisme (MF5253). In het Amerikaanse octrooischrift 4847271 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden bepaalde oxetaanverbindingen, zoals 1 l-(3-hydroxymethyl-4-oxo-2-oxetayl)-3,5,7-trimethyl-2,4-undeca-dieenzuur-derivaten, beschreven.

10 Iedere verbinding die de HMG-CoA-reductase-gen-expressie vermindert kan worden toegepast in het combinatie-aspect volgens deze uitvinding. Deze middelen kunnen HMG-CoA-reductase-transcriptie-inhibitoren die de transcriptie van DNA blokkeren of translatie-inhibitoren die de translatie van mRNA dat codeert voor HMG-CoA-reductase tot een eiwit voorkomen of verminderen zijn. Dergelijke verbindingen 15 kunnen ofwel direct een invloed hebben op de transcriptie of translatie, ofwel kunnen biologisch worden omgezet in verbindingen die de hiervoor genoemde activiteiten hebben door een of meer enzymen in de biosynthese-cascade van cholesterol of kan leiden tot de accumulatie van een isopreen-metaboliet die de hiervoor genoemde activiteiten heeft. Dergelijke verbindingen kunnen dit effect veroorzaken door het 20 verlagen van de gehaltes van SREBP (sterol-receptor-bindingseiwit) door het remmen van de activiteit van plaats-1-protease (SIP) of het agoniseren van de oxzgenale receptor of SCAP. Een dergelijke regulering kan eenvoudig volgens standaard-assays (Meth. Enzymol. 1985; 110: 9-19) worden bepaald door de deskundige. Hierna worden verscheidene verbindingen beschreven, echter andere inhibitoren van de HMG-CoA-25 reductase-gen-expressie zijn bekend bij de deskundige. In het Amerikaanse octrooischrift 5041432 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden bepaalde 15-gesubstitueerde lanosterol-derivaten beschreven. Andere geoxygeneerde sterolen die de synthese van HMG-CoA-reductase onderdrukken worden besproken door E.I. Mercer (Prog. Lip. Res. 1993; 32: 357-416). 30 Iedere extra verbinding met activiteit als een CETP-inhibitor kan dienen als de tweede verbindingen in het combinatiebehandelingsaspect volgens de onderhavige uitvinding. De uitdrukking CETP-inhibitor heeft betrekking op verbindingen die het door het cholesterylester-overdrachtseiwit (CETP) teweeggebrachte transport van 46 verschillende cholesterylesters en -triglyceriden van HDL tot LDL en VLDL remmen. Een dergelijke CETP-remmingsactiviteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. het Amerikaanse octrooischrift 614034) worden bepaald door de deskundige. Een verscheidenheid van CETP-inhibitoren is bekend bij de deskundige, zoals bijvoorbeeld 5 die welke worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 6140343 en het Amerikaanse octrooischrift 6197786. CETP-inhibitoren die worden beschreven in deze octrooischriften omvatten verbindingen zoals [2R,4S]-4-[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)methoxycarbonyl-amino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinoline-l-carbonzuur-ethylester, welke ook bekend staat als torcetrapib. CETP-inhibitoren 10 worden eveneens beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 6723752, welke een aantal CETP-inhibitoren omvat, waaronder (2R)-3-{[3-(4-chloor-3-ethyl-fenoxy)-fenyl]-[[3-( 1,1,2,2-tetrafluor-ethoxy)fenyl]methyl]amino}-1,1,1 -trifluor-2-propanol. Verder worden CETP-inhibitoren die hierin zijn opgenomen ook beschreven in de Amerikaanse octrooiaanvrage 10/807838, ingediend op 23 maart 2004. In het 15 Amerikaanse octrooischrift 5512548 worden bepaalde polypeptide-derivaten met een activiteit als CETP-inhibitoren beschreven, terwijl bepaalde CETP-remmende rosenonolacton-derivaten en fosfaat-bevattende analogen van cholesterylester worden beschreven in J. Antibiot., 49(8): 815-816 (1996) respectievelijk Bioorg. Med. Chem. Lett.; 6: 1951-1954(1996).

20 Voorbeelden van CETP-inhibitoren omvatten [2R,4S]-4-[(3,5-bis-trifluormethyl- benzyl)methoxycarbonyl-amino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinoline-l-carbonzuur-ethylester; cis-(2R,4S)-2-(4-{4-[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinoline-l-carbo-nyl} cyclohexyl)aceetamide; (2R)-3- {[3-(4-chloor-3-ethyl-fenoxy)fenyl]-[[3-( 1,1,2,2- 25 tetrafhior-ethoxy)fenyl]methyl]amino}-l,l,l-trifluor-2-propanol; en (2R,4R,4aS)-4-[amino-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)methyl]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinoline-l-carbonzuur-isopropylester of een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de verbindingen.

Iedere squaleen-synthetase-inhibitor kan worden toegepast in het combinatie-30 aspect volgens deze uitvinding. De uitdrukking squaleen-synthetase-inhibitor heeft betrekking op verbindingen die de condensatie van 2 moleculen famesylpyrofosfaat onder de vorming van squaleen, gekatalyseerd door het enzym squaleen-synthetase, remmen. Een dergelijke remming kan eenvoudig volgens standaard-assays (Meth.

47

Enzymol. 1969; 15: 393-454 en Meth. Enzymol. 1985; 110: 359-373 en daarin opgenomen referenties) worden bepaald door de deskundige. Een verscheidenheid van deze verbindingen wordt hierna beschreven, echter andere squaleen-synthetase-inhibitoren is bekend bij de deskundige. In het Amerikaanse octrooischrift 5026554 5 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden vergistingsproducten van het micro-organisme MF5465 (ATCC 74011), waaronder zaragozinezuur. Er is een samenvatting van andere geoctrooieerde squaleen-synthetase-inhibitoren samengesteld (Curr. Op. Ther. Patents (1993) 861-4).

Iedere squaleen-epoxidase-inhibitor kan worden toegepast in het combinatie-10 aspect volgens deze uitvinding. De uitdrukking squaleen-epoxidase-inhibitor heeft betrekking op verbindingen die de biologische omzetting van squaleen en moleculaire zuurstof in squaleen-2,3-epoxide, gekatalyseerd door het enzym squaleen-epoxidase, remmen. Een dergelijke remming kan eenvoudig volgens standaard-assays (Biochim. Biophys. Acta 1984; 794: 466-471) worden bepaald door de deskundige. Een ver-15 scheidenheid van deze verbindingen wordt hierna beschreven, echter andere squaleen- epoxidase- inhibitoren zijn bekend bij de deskundige. In de Amerikaanse octrooi-schriften 5011859 en 5064864 (waarvan de beschrijvingen als hierin ingelast dienen te worden beschouwd) worden bepaalde fluor-analogen van squaleen beschreven. In EP-A-395768 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) 20 worden bepaalde gesubstitueerde allylamine-derivaten beschreven. In PCT-publicatie WO-A-9312069 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden bepaalde aminoalcohol-derivaten beschreven. In het Amerikaanse octrooischrift 5051534 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden bepaalde cyclopropyloxy-sqauleen-derivaten beschreven.

25 Iedere squaleen-cyclase-inhibitor kan worden toegepast als de tweede component in het combinatie-aspect volgens deze uitvinding. De uitdrukking squaleen-cyclase-inhibitor heeft betrekking op verbindingen die de biologische omzetting van squaleen-2,3-epoxide in lanosterol, gekatalyseerd door het enzym squaleen-cyclase, remmen. Een dergelijke remming kan eenvoudig volgens standaard-assays (FEBS Lett. 1989: 30 244: 347-350) worden bepaald door de deskundige. Daarnaast zijn de verbindingen die hierna worden beschreven squaleen-cyclase-inhibitoren, er zijn echter ook andere squaleen-cyclase-inhibitoren bekend bij de deskundige. In PCT-publicatie W09410150 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden 48 bepaalde l,2,3,5,6,7,8,8a-octahydro-5,5,8(beta)-trimethyl-6-isochinolineamine-deriva-ten, zoals N-trifluoracetyl-l,2,3,5,6,7,8,8a-octahydro-2-allyl-5,5,8(beta)-trimethyl-6-(beta)-isochinolineamine, beschreven. In het Franse octrooischrift 2697250 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden bepaalde 5 beta,beta-dimethyl-4-piperidine-ethanol-derivaten zoals 1-(1,5,9-trimethyldecyl)-beta, beta-dimethyl-4-piperidine-ethanol beschreven.

Iedere gecombineerde squaleen-peroxidase/squaleen-cyclase-inhibitor kan worden toegepast als de tweede component in het combinatie-aspect volgens deze uitvinding. De uitdrukking gecombineerde squaleen-peroxidase/squaleen-cyclase-inhibitor 10 heeft betrekking op verbindingen die de biologische omzetting van squaleen in lanoste-rol via een squaleen-2,3-epoxide-tussenproduct remmen. Bij sommige assays is het niet mogelijk om onderscheid te maken tussen squaleen-epoxidase-inhibitoren en squaleen-cyclase-inhibitoren, deze assays zijn echter bekend bij de deskundige. Aldus kan de remming door gecombineerde squaleen-peroxidase/squaleen-cyclase-inhibitoren een-15 voudig worden bepaald door de deskundige met betrekking tot de hiervoor vermelde standaard-assays voor squaleen-cyclase- of squaleen-epoxidase-inhibitoren. Een verscheidenheid van deze verbindingen wordt hierna beschreven, echter andere squaleen-epoxidase/squaleen-cyclase-inhibitoren zijn bekend bij de deskundige. In de Amerikaanse octrooischriften 5084461 en 5278171 (waarvan de beschrijvingen als hierin 20 ingelast dienen te worden beschouwd) worden bepaalde azadecaline-derivaten beschreven. In EP-publicatie 468434 (waarvan de beschrijving al hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden bepaalde piperidylether- en thio-ether-derivaten zoals 2-(l-piperidyl)pentyl-isopentyl-sulfoxide en 2-(l-piperidyl)ethyl-ethyl-sulfide beschreven. In PCT-publicatie WO 9401404 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient 25 te worden beschouwd) worden bepaalde acyl-piperidinen zoals l-(l-oxopentyl-5-fenyl-thio)-4-(2-hydroxy-l-methyl)ethyl)piperidine beschreven. In het Amerikaanse octrooischrift 5102915 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd) worden bepaalde cyclopropyloxy-squaleen-derivaten beschreven.

De verbindingen volgens de onderhavige uitvinding kunnen ook worden 30 toegediend in combinatie met van nature voorkomende verbindingen voor het verlagen van plasma-cholesterol-gehaltes. Deze van nature voorkomende verbindingen worden gewoonlijk nutraceutische middelen genoemd en omvatten, bijvoorbeeld, knoflook-extract en niacine. Een vorm van niacine met langzame afgifte is beschikbaar en staat 49 bekend als Niaspan. Niacine kan ook worden gecombineerd met andere therapeutische middelen zoals lovstatine, of een andere is een HMG-CoA-reductase-inhibitor. Deze combinatiebehandeling met lovastatine staat bekend als ADVICOR™ (Kos Pharmaceuticals Ine.)· 5 Teder cholesterol-absorptie-inhibitor kan worden toegepast als een extra middel in het combinatie-aspect volgens de onderhavige uitvinding. De uitdrukking cholesterol-absorptie-inhibitie heeft betrekking op het vermogen van een verbinding om te voorkomen dat cholesterol dat aanwezig is in de lumen van de darm de intestinale cellen binnengaat en/of van de intestinale cellen naar het lymfesysteem en/of naar de 10 bloedstroom gaat. Een dergelijke cholesterol-absorptie-inhibitie-activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. J. Lipid Res. (1993) 34: 377-395) worden bepaald door de deskundige. Cholesterol-absorptie-inhibitoren zijn bekend bij de deskundige en worden bijvoorbeeld beschreven in PCT WO 94/00480. Een voorbeeld van een recent goedgekeurde cholesterol-absorptie-inhibitor is ZETIA™ (ezetimibe) 15 (Schering-Plough/Merck).

Iedere ACAT-inhibitor kan worden toegepast in het combinatiebehandelings-aspect volgens de onderhavige uitvinding. De uitdrukking ACAT-inhibitor heeft betrekking op verbindingen die de intracellulaire verestering van voedingscholesterol door het enzym acyl CoA: cholesterol acyltransferase remmen. Een dergelijke remming 20 kan eenvoudig volgens standaard-assays, zoals de werkwijze van Heider et al. die wordt beschreven in Journal of Lipid Research, 24: 1127 (1983), worden bepaald door de deskundige. Een verscheidenheid van deze verbindingen is bekend bij de deskundige en bijvoorbeeld in het Amerikaanse octrooischrift 5510379 worden bepaalde carboxysulfonaten beschreven, terwijl' in zowel WO 96/26948 als WO 25 96/10559 urea met ACAT remmende activiteit worden beschreven. Voorbeelden van ACAT-inhibitoren omvatten verbindingen zoals Avasimibe (Pfizer), CS-505 (Sankyo) en Eflucimibe (Eli Lilly en Pierre Fabre).

Een lipase-inhibitor kan worden toegepast in het combinatiebehandelingsaspect volgens de onderhavige uitvinding. Een lipase-inhibitor is een verbinding die de 30 metabolische splitsing van voedingstriglyceriden of plasma-fosfolipiden tot vrije vetzuren en de overeenkomende glyceriden (b.v. EL, HL, enz.) remt. Onder normale fysiologische omstandigheden vindt lipolyse plaats via een uit twee stappen bestaande werkwijze die acylering van een geactiveerde serine-rest van het lipase-enzym omvat.

50

Dit leidt tot de bereiding van een vetzuur-lipase-hemiacetaal-tussenproduct, dat vervolgens wordt gesplitst waarbij een diglyceride wordt afgegeven. Na verdere deacylering wordt het lipase-vetzuur-tussenproduct gesplitst, hetgeen resulteert in vrij lipase, een glyceride en vetzuur. In de darm worden de verkregen vrije vetzuren en 5 monoglyceriden opgenomen in galzuur-fosfolipide-micellen, die vervolgens worden geabsorbeerd op het niveau van de borstelgrens van de dunne darm. De micellen gaan de periferale circulatie uiteindelijk als chylomicronen binnen. Een dergelijke lipase-inhibitie-activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. Methods Enzymol. 286: 190-231) worden bepaald door de deskundige.

10 Pancreatisch lipase brengt de metabolische splitsing van vetzuren uit triglyceriden op de 1- en 3-koolstofplaatsen teweeg. De primaire plaats van het metabolisme van opgenomen vetten is in het duodenum en proximale jejunum door pancreatisch lipase, hetgeen gewoonlijk wordt afgescheiden in een grote overmaat ten opzichte van de hoeveelheden die noodzakelijk zijn voor de afbraak van vetten in de 15 bovenste dunne darm. Omdat pancreatisch lipase het primaire enzym is dat wordt vereist voor de absorptie van voedingstriglyceriden kunnen inhibitoren worden toegepast bij de behandeling van zwaarlijvigheid en andere verwante aandoeningen. Een dergelijke pancreatische lipase-inhibitie-activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. Methods Enzymol. 286: 190-231) worden bepaald door de 20 deskundige.

Maag-lipase is een immunologisch verschillend lipase dat verantwoordelijk is voor ongeveer 10 tot 40% van de vertering van voedingsvetten. Maag-lipase wordt uitgescheiden in respons op mechanische stimulatie, het opnemen van voedsel, de aanwezigheid van een vetmaaltijd of door sympathetische middelen. Maag-lipolyse van 25 opgenomen vetten is van fysiologisch belang bij het verschaffen van vetzuren die nodig zijn voor het op gang brengen van pancreatische lipase-activiteit in de darm en is tevens van belang voor de vetabsorptie bij een verscheidenheid van fysiologische en pathologische aandoeningen die zijn geassocieerd met pancreatische insuffïciëntie. Zie bijvoorbeeld C.K. Abrams et al., Gastroenterology, 92, 125 (1987). Een dergelijke 30 maag-lipase-inhibitie-activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. Methods Enzymol. 286: 190-231) worden bepaald door de deskundige.

Een verscheidenheid van maag- en/of pancreatische lipase-inhibitoren is bekend bij de deskundige. Lipase-inhibitoren die de voorkeur hebben zijn die inhibitoren, die 51 worden gekozen uit de groep die bestaat uit lipstatine, tetrahydrolipstatine (orlistat), vlilacton, esterastine, ebelacton A en ebelacton B. De verbinding tetrahydrolipstatine heeft bijzondere voorkeur. De lipase-inhibitor N-3-trifluormethylfenyl-N'-3-chloor-4'-trifluormethylfenylureum, en de verschillende daarmee verwante ureum-derivaten, 5 worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4405644. De lipase-inhibitor esteracine wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 4189438 en 4242453. De lipase-inhibitor cyclo-0,0'-[(l,6-hexaandiyl)-bis-(iminocarbonyl)]dioxim en de verschillende daarmee verwante bis(iminocarbonyl)dioxims kunnen worden bereid zoals is beschreven in Petersen et al., Liebig's Annalen, 562, 205-229 (1949).

10 Een verscheidenheid van pancreatische lipase-inhibitoren wordt hierna beschreven. De pancreatische lipase-inhibitoren lipstatine, (2S,3S,5S,7Z,10Z)-5-[(S)-2-formamido-4-methyl-valeryloxy]-2-hexyl-3-hydroxy-7,10-hexadecaanzuurlacton, en tetrahydrolipstatine (orlistat), (2S,3S,5S)-5-[(S)-2-formamido-4-methyl-valeryloxy]-2-hexyl-3-hydroxy-hexadecaan-l,3-zuurlacton, en de verschillend gesubstitueerde N-15 formylleucine-derivaten en stereoisomeren daarvan, worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4598089. Bijvoorbeeld wordt tetrahydrolipstatine bereid zoals b.v. is beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 5274143; 5420305; 5540917; en 5643874. De pancreatische lipase-inhibitor FL-386, l-[4-(2- methylpropyl)cyclohexyl]-2-[(fenylsulfonyl)oxy]ethanon, en de verschillend gesubsti-20 tueerde, daaraan verwante sulfonaat-derivaten, worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4452813. De pancreatische lipase-inhibitor WAY-121898, 4- fenoxyfenyl-4-methylpiperidine-l-yl-carboxylaat, en de verschillende daaraan verwante carbamaatesters en farmaceutisch aanvaardbare zouten, worden beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 5512565; 5391571 en 5602151. De pancreatische lipase-25 inhibitor valilacton en een werkwijze voor de bereiding daarvan door het microbieel kweken van Actinomycetes-stam MG147-CF2 worden beschreven in Kitahara et al., J. Antibiotics, 40 (11), 1647-1650 (1987). De pancreatische lipase-inhibitoren ebelacton A en ebelacton B en een werkwijze voor de bereiding daarvan door het microbieel kweken van Actinomycetes-stam MG7-G1 worden beschreven in Umezawa et al., J. 30 Antibiotics, 33, 1594-1596 (1980). De toepassing van ebelactonen A en B bij de onderdrukking van de monoglyceride-vorming wordt beschreven in het Japanse octrooischrift Kokai 08-143457, gepubliceerd op 4 juni 1996.

52

Andere verbindingen die in de handel worden gebracht voor hyperlipidemie, waaronder hypercholesterolemie, en die bedoeld zijn om atherosclerose te helpen voorkomen of behandelen omvatten galzuur-sekwestreermiddelen, zoals Welchol®, Colestid®, LoCholest® en Questran®; en fibeinezuur-derivaten, zoals Atromid®, Lopid® 5 en Tricor®.

Diabetes kan worden behandeld door het toedienen aan een patiënt met diabetes (in het bijzonder type II), insuline-resistentie, verminderde glucose-tolerantie, metabolisch syndroom of dergelijke, of een van de diabetische complicaties zoals neuropathie, nefropathie, retinopathie of cataracten, van een therapeutisch werkzame 10 hoeveelheid van een verbinding volgens de onderhavige uitvinding in combinatie met andere middelen (b.v. insuline) die gebruikt kunnen worden voor het behandelen van diabetes. Dit omvat de klassen van anti-diabetische middelen (en specifieke middelen) die hierin worden beschreven.

Iedere glycogeen-fosforylase-inhibitor kan worden toegepast als het tweede 15 middel in combinatie met een verbinding volgens de onderhavige uitvinding. De uitdrukking glycogeen-fosforylase-inhibitor heeft betrekking op verbindingen die de biologische omzetting van glycogeen in glucose-1-fosfaat, welke wordt gekatalyseerd door het enzym glycogeen-fosforylase, remmen. Een dergelijke glycogeen-fosforylase-inhibitie-activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. J. Med. Chem. 41 20 (1998) 2934-2938) worden bepaald door de deskundige. Een verscheidenheid van glycogeen-fosforylase-inhibitoren is bekend bij de deskundige, waaronder die welke worden beschreven in WO 96/39384 en WO 96/39385.

Iedere aldose-reductase-inhibitor kan worden toegepast in combinatie met een verbinding volgens de onderhavige uitvinding. De uitdrukking aldose-reductase-25 inhibitor heeft betrekking op verbindingen die de biologische omzetting van glucose in sorbitol, welke wordt gekatalyseerd door het enzym aldose-reductase, remmen. Aldose-reductase-inhibitie kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. J. Malone, Diabetes, 29: 861-864 (1980). "Red Cell Sorbitol, an Indicator of Diabetic Control") worden bepaald door de deskundige. Een verscheidenheid van aldose-reductase-inhibitoren is 30 bekend bij de deskundige, zoals die welke worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 6579879, waaronder 6-(5-chloor-3-methyl-benzofuran-2-sulfonyl)-2H-pyridazine-3-on.

53

Iedere sorbitol-dehydrogenase-inhibitor kan worden toegepast in combinatie met een verbinding volgens de onderhavige uitvinding. De uitdrukking sorbitol-dehydrogenase-inhibitor heeft betrekking op verbindingen die de biologische omzetting van sorbitol in fructose, welke wordt gekatalyseerd door het enzym sorbitol-5 dehydrogenase, remmen. Een dergelijke sorbitol-dehydrogenase-inhibitor-activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. Analyt. Biochem (2000) 280: 329-331) worden bepaald door de deskundige. Een verscheidenheid van sorbitol-dehydrogenase-inhibitoren is bekend en bijvoorbeeld worden in de Amerikaanse octrooischriften 5728704 en 5866578 verbindingen en een werkwijze voor het behandelen of 10 voorkomen van diabetische complicaties door het remmen van het enzym sorbitol-dehydrogenase beschreven.

Iedere glucosidase-inhibitor kan worden toegepast in combinatie met een verbinding volgens de onderhavige uitvinding. Een glucosidase-inhibitor remt de enzymatische hydrolyse van complexe koolhydraten door glycoside-hydrolasen, 15 bijvoorbeeld amylase of maltase, tot biologisch beschikbare eenvoudige suikers, zoals bijvoorbeeld glucose. De snelle metabolische werking van glucosidasen, in het bijzonder na de opname van hoge gehaltes aan koolhydraten, resulteert in een toestand van alimentaire hyperglycemie die, bij adipose of diabetische personen, leidt tot een toegenomen secretie van insuline, een toegenomen vetsynthese en een afname van de 20 vetafbraak. Na dergelijke hyperglycemieën treedt vaak hypoglycemie op, vanwege de hogere gehaltes aan insuline die aanwezig zijn. Bovendien is bekend dat spijspap die resteert in de maag de productie van maagsap bevordert, hetgeen de ontwikkeling van gastritis of zweren van de twaalfvingerige darm initieert of begunstigt. Dienovereenkomstig is bekend dat glucosidase-inhibitoren toegepast kunnen worden 25 bij het versnellen van het passeren van koolhydraten door de maag en het remmen van de absorptie van glucose uit de darm. Verder wordt de omzetting van koolhydraten in lipiden van het vetweefsel en de erop volgende opname van alimentair vet in vetweefselafzettingen dienovereenkomstig verminderd of vertraagd, met het bijkomende voordeel van het verminderen of voorkomen van de schadelijke 30 afwijkingen die het gevolg daarvan zijn. Een dergelijke glucosidase-inhibitie-activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. Biochemistry (1969) 8: 4214) worden bepaald door de deskundige.

54

Een glucosidase-inhibitor die in het algemeen de voorkeur heeft omvat een amylase-inhibitor. Een amylase-inhibitor is een glucosidase-inhibitor welke de enzymatische afbraak van zetmeel of glycogeen tot maltose remt. Een dergelijke amylase-inhibitie-activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. Methods 5 Enzymol. (1955) 1: 149) worden bepaald door de deskundige. De remming van een dergelijke enzymatische afbraak is voordelig bij het verlagen van de hoeveelheden biologisch beschikbare suikers, waaronder glucose en maltose, en de bijbehorende schadelijke toestanden die het gevolg daarvan zijn.

Een verscheidenheid van glucosidase-inhibitoren is bekend bij de deskundige en 10 voorbeelden worden hierna gegeven. Glucosidase-inhibitoren die de voorkeur hebben zijn die inhibitoren, die worden gekozen uit de groep die bestaat uit acarbose, adiposine, voglibose, miglitol, emiglitaat, camiglibose, tendamistaat, trestatine, pradimicine-Q en salbostatine. De glucosidase-inhibitor acarbose en de verschillende daaraan verwante aminosuiker-derivaten worden beschreven in de Amerikaanse 15 octrooischriften 4062950 respectievelijk 4174439. De glucosidase-inhibitor adiposine wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4254256. De glucosidase-inhibitor voglibose, 3,4-dideoxy-4-[[2-hydroxy-1 -(hydroxymethyl)ethyl]amino]-2-C-(hydroxy-methyl)-D-epi-inositol, en de verschillende daaraan verwante N-gesubstitueerde pseudo-aminosuikers worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4701559. 20 De glucosidase-inhibitor miglitol, (2R,3R,4R,5S)-l-(2-hydroxyethyl)-2-(hydroxy- methyl)-3,4,5-piperidinetriol, en de verschillende daaraan verwante 34,5-trihydroxy-piperidinen worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4639436. De glucosidase-inhibitor emiglitaat, p-[2-[(2R,3R,4R,5S)-3,4,5-trihydroxy-2-(hydroxy-ethyl)piperidino]ethoxy]benzoaat, de verschillende daaraan verwante derivaten en 25 farmaceutisch aanvaardbare zuur-additiezouten daarvan worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5192772. De glucosidase-inhibitor MDL-25637, 2,6-dideoxy-7-0-P-D-glucopyranosyl-2,6-imino-D-glycero-L-gluco-heptitol, de verschillende daaraan verwante homodisachariden en de farmaceutisch aanvaardbare zuur-additiezouten daarvan worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4634765. 30 De glucosidase-inhibitor camiglibose, methyl-6-deoxy-6-[(2R,3R,4R,5S)-3,4,5- trihydroxy-2-(hydroxymethyl)piperidino]-a-D-glucopyranoside-sesquihydraat, de daaraan verwante deoxy-nojirimycine, de verschillende farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan en synthesewerkwijzen voro de bereiding daarvan worden beschreven in de 55

Amerikaanse octrooischriften 5157116 en 5504078. De glucosidase-inhibitor salbosta-tine en de verschillende daaraan verwante pseudosachariden worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5091524.

Een verscheidenheid van amylase-inhibitoren is bekend bij de deskundige. De 5 amylase-inhibitor tendamistaat en de verschillende daaraan verwante cyclische peptiden worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4451455. De amylase-inhibitor Al-3688 en de verschillende daaraan verwante cyclische polypeptiden worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4623714. De amylase-inhibitor trestatine, welke bestaat uit een mengsel van trestatine A, trestatine B en trestatine C, en de 10 verschillende daaraan verwante, trehalose bevattende aminosuikers worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4273765.

Extra anti-diabetische verbindingen, die toegepast kunnen worden als het tweede middel in combinatie met een verbinding volgens de onderhavige uitvinding, omvatten bijvoorbeeld de volgende: biguaniden (b.v. metformine), insuline-secretagogen (b.v. 15 sulfonylurea en gliniden), glitazonen, non-glitazon PPARy-agonisten, PPARp-agonisten, inhibitoren van DPP-IV, inhibitoren van PDE5, inhibitoren van GSK-3, glucagon-antagonisten, inhibitoren van f-l,6-BPase(Metabasis/Sankyo), GLP-1/analogen (AC 2993, ook bekend als exendine-4), insuline en insuline-nabootsende middelen (Merck natuurproducten). Andere voorbeelden omvatten PKC-P-inhibitoren 20 en AGE-brekers.

De verbindingen volgens de onderhavige uitvinding kunnen worden toegepast in combinatie met anti-zwaarlijvigheidmiddelen. leder anti-zwaarlijvigheidmiddel kan worden toegepast als het tweede middel in dergelijke combinaties en voorbeelden worden hierin verschaft. Een dergelijke anti-zwaarlijvigheid-activiteit kan eenvoudig 25 volgens standaard-assays die bekend zijn uit de stand der techniek worden bepaald door de deskundige.

Geschikte anti-zwaarlijvigheidmiddelen omvatten fenylpropanolamine, efedrine, pseudo-efedrine, fentermine, p3-adrenerge receptor-agonisten, apolipoproteïne-B secretie/microsomale triglyceride-overdrachtseiwit (apo-B/MTP) inhibitoren, MCR-4-30 agonisten, cholecystokinine-A (CCK-A) agonisten, monoamine-heropname-inhibitoren (b.v. sibutramine), sympathomimetische middelen, serotoninerge middelen, cannabinoide-receptor (CB-1) antagonisten (b.v. rimonabant dat wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5624941 (SR-141716A), purine-verbindingen, zoals die 56 welke worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 2004/0092520; pyrazool[l,5-a][l,3,5]triazine-verbindingen, zoals die welke worden beschreven in de Amerikaanse octrooiaanvrage 10/763105, ingediend op 21 januari 2004; en bicyclische pyrazolyl- en imidazolylverbindingen, zoals die welke worden beschreven in de 5 Amerikaanse octrooiaanvrage 60/518280, ingediend op 7 november 2003), dopamine-agonisten (b.v. broomcriptine), melanocyt-stimulerende hormoonreceptor-analogen, 5HT2c-agonisten, melanine concentrerende hormoon-antagonisten, leptine (het OB-eiwit), leptine-analogen, leptine-receptor-agonisten, galanine-antagonisten, lipase-inhibitoren (b.v. tetrahydrolipstatine, d.w.z. orlistat), bombesine-agonisten, 10 anorectische middelen (b.v. een bombesine-agonist), Neuropeptide-Y-antagonisten, thyroxine, thyromimetische middelen, dehydro-epiandrosteronen of analogen daarvan, glucocorticoide-receptor-agonisten of -antagonisten, orexine-receptor-antagonisten, urocortine-bindende eiwit-antagonisten, glucagon-achtige peptide-1-receptor-agonisten, ciliaire neurotrofe factoren (b.v. Axokine™), menselijke aan agouti verwante eiwitten 15 (AGRP), ghreline-receptor-antagonisten, histamine-3-receptor-antagonisten of omgekeerde-agonisten, neuromedine-U-receptor-agonisten en dergelijke.

Rimonabant (SR141716A, ook bekend onder de handelsnaam Accomplia™, verkrijgbaar bij Sanofi-Synthelabo) kan worden bereid zoals is beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5624941. Andere geschikte CB-1-antagonisten omvatten 20 die welke worden beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 5747524, 6432984 en 6518264; de Amerikaanse octrooipublicaties US2004/0092520, US2004/0157839, US2004/0214855 en US2004/0214838; de Amerikaanse octrooiaanvrage 10/971599, ingediend op 22 oktober 2004; en PCT octrooipublicaties WO 02/076949, WO 03/075660, WO 04/048317, WO 04/013120 en WO 04/012671.

25 Apolipoproteïne-B secretie/microsomale triglyceride-overdrachtseiwit (apo- B/MTP) inhibitoren die de voorkeur hebben voor toepassing als anti-zwaarlijvigheidmiddelen zijn voor de maag selectieve MTP-inhibitoren, zoals dirlotapide dat wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 6720351; 4-(4-(4-(4-((2-((4-methyl-4H-l,2,4-triazool-3-ylthio)methyl)-2-(4-chloorfenyl)-l,3-dioxolaan-30 4-yl)methoxy)fenyl)piperazine-l-yl)fenyl)-2-sec-butyl-2H-l,2,4-triazool-3(4H)-on (R103757), dat wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 5521186 en 5929075; en implitapide (BAY 13-9952), dat wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 6265431. Zoals hierin wordt gebruikt betekent de uitdrukking "voor de 57 maag selectief' dat de MTP-inhibitor een hogere blootstelling heeft voor de maag-darm-weefsels versus systemische blootstelling.

leder thyromimeticum kan worden toegepast als het tweede middel in combinatie met een verbinding volgens de onderhavige uitvinding. Een dergelijke thyromimetische 5 activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. Atherosclerosis (1996) 126: 53-63) worden bepaald door de deskundige. Een verscheidenheid van thyromimetische middelen is bekend bij de deskundige, zoals bijvoorbeeld die welke worden beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 4766121; 4826876; 4910305; 5061798; 5284971; 5401772; 5654468 en 5569674. Andere anti-zwaarlijvigheidmiddelen omvatten 10 sibutramine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4929629, en broomcriptine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 3752814 en 3752888.

De verbindingen volgens de onderhavige uitvinding kunnen ook worden toegepast in combinatie met andere antihypertensiemiddelen. Ieder anti-15 hypertensiemiddel kan worden toegepast als het tweede middel in dergelijke combinaties en voorbeelden worden hierin verschaft. Een dergelijke antihypertensie-activiteit kan eenvoudig volgens standaard-assays (b.v. bloeddrukmetingen) worden bepaald door de deskundige.

Voorbeelden van momenteel in de handel verkrijgbare producten die 20 antihypertensiemiddelen bevatten omvatten claciumkanaalblokkers, zoals Cardizem®, Adalat®, Calan®, Cardene®, Covera®, Dilacor®, DynaCirc®, Procardia XL®, Sular®, Tiazac®, Vascor®, Verelan®, Isoptin®, Nimotop®, Norvasc® en Plendil®; angiotensine omzettend enzym (ACE) inhibitoren, zoals Accupril®, Altace®, Captopril®, Lotensin®, Mavik®, Monopril®, Prinivil®, Univasc®, Vasotec® en Zestril®.

25 Amlodipine en verwante dihydropyridine-verbindingen worden in het

Amerikaanse octrooischrift 4572909, dat als hierin ingelast dient te worden beschouwd, beschreven als krachtige anti-ischemie- en antihypertensiemiddelen. In het Amerikaanse octrooischrift 4879303, dat als hierin ingelast dient te worden beschouwd, wordt amlodipinebenzeensulfonaatzout (ook amlodipinebesylaat genoemd) beschreven. 30 Amlodipine en amlodipinebesylaat zijn krachtige en langdurige claciumkanaalblokkers. Als zodanig kunnen amlodipine, amlodipinebesylaat, amlodipinemaleaat en andere farmaceutisch aanvaardbare zuur-additiezouten van amlodipine worden toegepast als 58 antihypertensiemiddelen en als anti-ischemiemiddelen. Amlodipinebesylaat wordt thans verkocht als Norvasc® Amlodipine heeft de formule

H

ch3 .n^,ch2och2ch2nh2

Cngö^^ltiL^cOgCHjCHg ° Λτα 5

Calciumkanaalblokkers die binnen de omvang van deze uitvinding vallen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: bepridil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3962238 of U.S. Reissue 30577; clentiazem, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4567175; 10 diltiazem, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3562, fendiline, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3262977; gallopamil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift3261859; mibefradil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4808605; prenylamine, dat kan 15 worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3152173; semotiadil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4786635; terodiline, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3371014; verapamil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3261859; aranipine, dat kan worden bereid 20 zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4572909; bamidipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4220649; benidipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Europese octrooiaanvrage 106275; cilnidipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4672068; efonidipine, dat kan worden bereid zoals wordt be-25 schreven in het Amerikaanse octrooischrift 4885284; elgodipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4952592; felodipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4264611; is- 59 radipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooi-schrift 4466972; lacidipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4801599; lercanidipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4705797; manidipine, dat kan worden be-5 reid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4892875; nicardipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3985758; nifedipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3485847; nilvadipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4338322; nimodipine, dat kan worden bereid zoals 10 wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3799934; nisoldipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4154839; nitrendipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3799934; cinnarizine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 2882271; flunarizine, dat kan worden bereid zoals wordt 15 beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3773939; lidoflazine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3267104; lomerizine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4663325; bencyclaan, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Hongaarse octrooischrift 151865; etafenon, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het 20 Duitse octrooischrift 1265758; en perhexiline, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 1025578. De beschrijvingen van alle Amerikaanse octrooischriften dienen als hierin ingelast te worden beschouwd.

Angiotensine-omzettend-enzym-inhibitoren (ACE-inhibitoren) die binnen de omvang van deze uitvinding vallen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: alacepril, dat 25 kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4248883; benazepril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4410520; captopril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 4046889 en 4105776; ceronapril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4452790; delapril, dat kan worden 30 bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4385051; enalapril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4374829; fosinopril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4337201; imadapril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het 60

Amerikaanse octrooischrift 4508727; lisinopril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 455550; moveltopril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Belgische octrooischrift 893553; perindopril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4508729; chi-5 napril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4344949; ramipril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4587258; spirapril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4470972; temocapril, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4699905; en trandolapril, dat kan worden 10 bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4933361. De beschrijving van alle Amerikaanse octrooischriften dient als hierin ingelast te worden beschouwd.

Angiotensine-II-receptor-antagonisten (A-II-antagonisten) die binnen de omvang van deze uitvinding vallen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: candesartan, dat kan 15 worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5196444; eprosartan, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5185351; irbesartan, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5270317; losartan, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5138069; en valsartan, dat kan worden bereid 20 zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5399578. De beschrijvingen van alle Amerikaanse octrooischriften dienen als hierin ingelast te worden beschouwd.

Beta-adrenerge receptor-blokkers (beta- of β-blokkers) die binnen de omvang van deze uitvinding vallen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: acebutolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3857952; alprenolol, 25 dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Nederlandse octrooiaanvrage 6605692; amosulalol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4217305; arotinolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3663607 of 3836671; befunolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3853923; betaxolol, 30 dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4252984; bevantolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3857981; bisoprolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4171370; bopindolol, dat kan worden bereid zo- 61 als wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrifl 4340541; bucumolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrifl 3663570; bufetolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrifl 3723476; bufuralol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Ame-5 rikaanse octrooischrifl 3929836; bunitrolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 3940489 en 3961071; buprandolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrifl 3309406; butiridine-hydrochloride, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Franse octrooischrifl 1390056; butofilolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in 10 het Amerikaanse octrooischrift 4252825; carazolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 2240599; carteolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3910924; carvedilol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrifl 4503067; celi-prolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrifl 15 4034009; cetamolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4059622; cloranolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrifl 2213044; dilevalol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Clifton et al., Journal of Medicinal Chemistry, 1982, 25, 670; epanolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Europese octrooiaanvrage 41491; in-20 denolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4045482; labetalol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4012444; levobunolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4463176, mepindolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Seeman et al., Helv. Chim. Acta, 1971, 54, 241; me-25 tipranolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Tsjechoslowaakse octrooiaanvrage 128471; metoprolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3873600; moprolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3501769; nadolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3935267, nadoxolol, dat kan 30 worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3819702; ne-bivalol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4654362; nipradilol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrifl 4394382; oxprenolol, dat kan worden bereid zoals wordt be- 62 schreven in het Britse octrooischrift 1077603; perbutolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3551493; pindolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Zwitserse octrooischriften 469002 en 472404; practolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooi-5 schrift 3408387; pronethalol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 909357; propanolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 3337628 en 3520919; sotalol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Uloth et al., Journal of medicinal Chemistry, 1966, 9, 88; sufinalol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 10 2728641; talindol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 3935359 en 4038313; tertatolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3960891; tilisolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4129565; timolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3655663; toli-15 prolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3432545; e xibenolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4018824. De beschrijving van alle Amerikaanse octrooischriften dient als hierin ingelast te worden beschouwd.

Alfa-adrenerge receptor-blokkers (alfa- of α-blokkers) die binnen de omvang van 20 deze uitvinding vallen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: amosulalol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4217307; arotinolol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3932400; dapiprazool, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4252721; doxazosine, dat kan worden bereid zoals wordt be-25 schreven in het Amerikaanse octrooischrift 4188390; fenspiride, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3399192; indoramine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3527761; labetolol; naftopidil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3997666; nicergoline, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in 30 het Amerikaanse octrooischrift 3228943; prazosine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3511836; tamsulosine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4703063; tolazoline, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 63 2161938; trimazosine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3669968; en yohimbine, dat volgens werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige kan worden geïsoleerd uit natuurlijke bronnen. De beschrijvingen van alle Amerikaanse octrooischriften dienen als hierin ingelast te worden beschouwd.

5 De uitdrukking "vasodilator", waar deze hierin wordt toegepast, omvat cerebrale vasodilatoren, coronaire vasodilatoren en periferale vasodilatoren. Cerebrale vasodila-toren binnen de omvang van deze uitvinding omvatten, maar zijn niet beperkt tot: ben-cyclaan; cinnarizine; citicoline, dat kan worden geïsoleerd uit natuurlijke bronnen zoals wordt beschreven in Kennedy et al., Journal of the American Chemical Society, 1955, 10 77, 250, of kan worden gesynthetiseerd zoals wordt beschreven in Kennedy, Journal of

Biological Chemistry, 1956, 222, 185; cyclandelaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3663597; ciclonicaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 1910481; diisopropylamine-dichlooracetaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooi-15 schrift 862248; ebumamonine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Hermann et al., Journal of the American Chemical Society, 1979, 101, 1540; fasudil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4678783; fenoxedil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3818021; flunarizine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in 20 het Amerikaanse octrooischrift 3773939; ibudilast, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3850941; ifenprodil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3509164; lomerizine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4663325; nafronyl, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooi-25 schrift 3334096; nicametaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Blicke et al., Journal of the American Chemical Society, 1942, 64, 1722; nicergoline, dat kan worden bereid zoals hiervoor is beschreven; nimodipine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3799934; papaverine, dat kan worden bereid zoals wordt gegeven in Goldberg, Chem. Prod. Chem. News, 1954, 17, 371; 30 pentifylline, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 860217; tinofedrine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3563997; vincamine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3770724; vinpocetine, dat kan worden bereid zoals 64 wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4035750; en viquidil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 2500444. De beschrijvingen van alle Amerikaanse octrooischriften dienen als hierin ingelast te worden beschouwd.

5 Coronaire vasodilatoren binnen de omvang van deze uitvinding omvatten, maar zijn niet beperkt tot: amotrifeen, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3010965; bendazol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in J. Chem. Soc. 1958, 2426; benfurodil-hemisuccinaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3355463; benziodaron, 10 dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3012042; chloracizine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 740932; chromonar, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3282938; clobenfural, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 1160925; clonitraat, dat volgens werkwijzen die 15 bekend zijn bij de deskundige kan worden bereid uit propaandiol, zie b.v. Annalen, 1870, 155, 165; cloricromen, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4452811; dilazep, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3532685; dipyridamool, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 807826; droprenilamine, dat 20 kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 2521113; efloxaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Britse octrooischriften 803372 en 824547; erythrityl-tetranitraat, dat bereid kan worden door de nitrering van erythritol volgens werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige; etafenon, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 1265758; fendiline, 25 dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3262977; floredil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 2020464; ganglefen, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Russische octrooischrift 115905; hexestrol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 2357985; hexobendine, dat kan worden bereid zoals 30 wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3267103; itramine-tosylaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Zweedse octrooischrift 168308; khelline, dat bereid kan worden zoals wordt beschreven in Baxter et al., Journal of the Chemical Society, 1949, S 30; lidoflazine, dat kan worden bereid zoals wordt beschre- 65 ven in het Amerikaanse octrooischrift 3267104; mannitol-hexanitraat, dat kan worden bereid door de nitering van mannitol volgens werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige; medibazine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3119826; nitroglycerine; pentaerythritol-tetranitraat, dat bereid 5 kan worden door de nitrering van pentaerythritol volgens werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige; pentrinitrol, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 638422-3; perhexilline, dat bereid kan worden zoals hiervoor is beschreven; pimefylline, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3350400; prenylamine, dat kan worden bereid zoals wordt be-10 schreven in het Amerikaanse octrooischrift 3152173; propatylnitraat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Franse octrooischrift 1103113; trapidil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Oost-Duitse octrooischrift 55956; tri-cromyl, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 2769015; trimetazidine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het 15 Amerikaanse octrooischrift 3262852; trolnitraat-fosfaat, dat bereid kan worden door de nitrering van triethanolamine, gevolgd door precipitatie met fosforzuur, volgens werkwijzen die bekend zijn bij de deskundige; visnadine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 2816118 en 2980699. De beschrijvingen van alle Amerikaanse octrooischriften dienen als hierin ingelast te worden be-20 schouwd.

Periferale vasodilatoren binnen de omvang van deze uitvinding omvatten, maar zijn niet beperkt tot: aluminiumnicotinaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 2970082; bamethan, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Corrigan et al., Journal of the American Chemical Society, 1945, 25 67, 1894; bencyclaan, at kan worden bereid zoals hiervoor is beschreven; betahistine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Walter et al., Journal of the American Chemical Society, 1941, 63, 2771; bradykinine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Hamburg et al., Arch. Biochem. Biophys., 1958, 76, 252; brovincamine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 30 4146643; bufeniode, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3542870; buflomedil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3895030; butalamine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3338899; cetiedil, dat kan worden 66 bereid zoals wordt beschreven in het Franse octrooischrift 146571; ciclonicaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 1910481; cinepazide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Belgische octrooischrift 730345; cinnarizine, dat kan worden bereid zoals hiervoor is beschreven; cyclandelaat, dat kan 5 worden bereid zoals hiervoor is beschreven; diisopropylamine-dichlooracetaat, dat kan worden bereid zoals hiervoor is beschreven; eledoisine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 984810; fenoxedil, dat kan worden bereid zoals hiervoor is beschreven; flunarizine, dat kan worden bereid zoals hiervoor is beschreven; hepronicaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Ameri-10 kaanse octrooischrift 3384642; ifenprodil, dat kan worden bereid zoals hiervoor is beschreven; iloprost, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4692464; inositol-niacinaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Badgett et al., Journal of the American Chemical Society, 1947, 69, 2907; isoxsuprine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooi-15 schrift 3056836; kallidine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Biocem. Biophys. Res. Commun., 1961, 6, 210; kallikreïne, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 1102973; moxisylyt, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 905738; nafronyl, dat kan worden bereid zoals hiervoor wordt beschreven; nicametaat, dat kan worden bereid zoals hier-20 voor wordt beschreven; nicergoline, dat kan worden bereid zoals hiervoor wordt beschreven; nicofuranose, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Zwitserse octrooischrift 366523; nylidrine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 2661372 en 2661373; pentifylline, dat kan worden bereid zoals hiervoor is beschreven; pentoxifylline, dat kan worden bereid zoals wordt be-25 schreven in het Amerikaanse octrooischrift 3422107; piribedil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3299067; prostaglandine-Ei, dat kan worden bereid volgens een van de werkwijzen die worden gegeven in de Merck Index, twaalfde druk, Budaveri, Ed., New Jersey, 1996, blz. 1353; suloctidil, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 2334404; tolazoline, 30 dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 2161938; en xanthinol-niacinaat, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Duitse octrooischrift 1102750 of Korbonits et al., Acta. Pharm. Hung., 1968, 38, 98. De 67 beschrijvingen van alle Amerikaanse octrooi schriften dienen als hierin ingelast te worden beschouwd.

De uitdrukking "diuretisch", binnen de omvang van deze uitvinding, omvat diuretische benzothiadiazine-derivaten, diuretische organokwikverbindingen, diureti-5 sche purinen, diuretische steroiden, diuretische sulfonamide-derivaten, diuretische ura-cillen en andere diuretica zoals amanozine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Oostenrijkse octrooischrift 168063; amiloride, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Belgische octrooischrift 639386; arbutin, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Tschitschibabin, Annalen, 1930, 479, 303; chlorazanil, 10 dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Oostenrijkse octrooischrift 168063; ethacrynzuur, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3255241; etozoline, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3072653; hydracarbazine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 856409; isosorbide, dat kan worden 15 bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3160641; mannitol; metochalcon, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Freudenberg et al., Ber., 1957, 90, 957; muzolimine, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4018890; perhexiline, dat kan worden bereid zoals hiervoor is beschreven; ticrynafen, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Ameri-20 kaanse octrooischrift 3758506; triamtereen, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3081230; en ureum. De beschrijvingen van alle Amerikaanse octrooischriften dienen als hierin ingelast te worden beschouwd.

Diuretische benzothiadiazine-derivaten binnen de omvang van deze uitvinding omvatten, maar zijn niet beperkt tot: al thiazide, dat kan worden bereid zoals wordt be-25 schreven in het Britse octrooischrift 902658; bendroflumethiazide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3265573; benzthiazide, MacManus et al., 136th Am. Soc. Meeting (Atlantic City, September 1959), Abstract op papers, blz. 13-0; benzylhydrochloorthiazide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3108097; buthiazide, dat kan worden 30 bereid zoals wordt beschreven in de Britse octrooischriften 861367 en 885078; chloorthiazide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 2809194 en 2937169; chloorthalidon, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3055904; cyclopenthiazide, dat kan wor- 68 den bereid zoals wordt beschreven in het Belgische octrooischrift 587225; cyclothia-zide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Whitehead et al., Journal of Organic Chemistry, 1961, 26, 2814; epithiazide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3009911; ethiazide, dat kan worden be-5 reid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 861367; fenquizon, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3870720; in-dapamide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3565911; hydrochloorthiazide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3164588; hydroflumethiazide, dat kan worden bereid 10 zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3254076; methyclothiazide, dat wordt bereid zoals wordt beschreven in Close et al., Journal of the American Chemical Society, 1960, 82, 1132; meticraan, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Franse octrooischriften M2790 en 1365504; metolazon, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3360518; parafluti-15 zide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Belgische octrooischrift 620829; polythiazide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3009911; quinethazon, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 2976289; teclothiazide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Close et al., Journal of the American Chemical 20 Society, 1960, 82, 1132; en trichloormethiazide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in deStevens et al., Experientia, 1960, 16, 113. De beschrijvingen van alle Amerikaanse octrooischriften dienen als hierin ingelast te worden beschouwd.

Diuretische sulfonamide-derivaten binnen de omvang van deze uitvinding omvatten, maar zijn niet beperkt tot: acetazolamide, dat kan worden bereid zoals wordt be-25 schreven in het Amerikaanse octrooischrift 2980679; ambuside, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3188329; azosemide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3665002; bu-metanide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3634583; butazolamide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het 30 Britse octrooischrift 79757; chlooraminofenamide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in de Amerikaanse octrooischriften 2809194, 2965655 en 2965656; clofe-namide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in Olivier, Ree. Trav. Chim., 1918, 37, 307; clopamide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Ameri- 69 kaanse octrooischrift 3459756; clorexolon, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3183243; dislfamide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 851287; ethoxolamide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Britse octrooischrift 795174; furosemide, dat kan 5 worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3058882; mefruside, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3356692; methazolamide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 2783241; piretanide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4010273; torasemide, dat kan worden 10 bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4018929; tripamide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Japanse octrooischrift 73 05585; en xipamide, dat kan worden bereid zoals wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3567777. De beschrijvingen van alle Amerikaanse octrooischriften dienen als hierin inglast te worden beschouwd.

15 Osteroporose is een systemische skeletziekte, gekenmerkt door een lage botmassa en achteruitgang van het botweefsel, met als gevolg daarvan een toename van de breekbaarheid van het bot en gevoeligheid voor breken. In de Verenigde Staten treft de aandoening meer dan 25 miljoen mensen en veroorzaakt deze ieder jaar meer dan 1,3 miljoen breuken, waaronder 500.000 ruggengraat-, 250.000 heup- en 240.000 pols-20 breuken per jaar. Heupbreuken zijn het ernstigste gevolg van osteoporose, waarbij 5-20% van de patiënten binnen een jaar sterft en meer dan 50% van de overlevenden gehandicapt is.

Ouderen lopen het grootste risico op osteoporose en er is derhalve voorspeld dat het probleem significant toeneemt met het ouder worden van de bevolking. Er is voor-25 speld dat het optreden van breuken wereldwijd in drievoud toeneemt in de volgende 60 jaar en een onderzoek heeft geschat dat er in 2050 wereldwijd 4,5 miljoen heupfractu-ren zijn.

Vrouwen lopen een groter risico op osteoporose dan mannen. Vrouwen ondergaan een grote versnelling van het botverlies gedurende de eerste vijf jaar na de 30 menopauze. Andere factoren die het risico vergroten omvatten roken, alcoholmisbruik, een sedentaire levensstijl en een lage calciumopname.

Voor de deskundige zal het duidelijk zijn dat anti-resorptiemiddelen (bijvoorbeeld progestinen, polyfosfonaten, bisfosfonaat(fosfonaten), esterogeen-agonis- 70 ten/antagonisten, estrogeen, esterogeen/progestine-combinaties, Premarin®, estron, estriol of 17a- of 17p-ethynyl-estradiol) samen met de verbindingen volgens de onderhavige uitvinding toegepast kunnen worden.

Voorbeelden van progestinen zijn verkrijgbaar uit commerciële bronnen en 5 omvatten: algestonacetofenide, altrenogest, amadinonacetaat, anagestonacetaat, chloormadinonacetaat, cingestol, clogestonacetaat, clomegestonacetaat, delmadinon-acetaat, desogestrel, dimethisteron, dydrogesteron, ethyneron, ethynodioldiacetaat, etonogestrel, flurogestonacetaat, gestacloon, gestodeen, gestonoroncaproaat, gestrinon, haloprogesteron, hydroxyprogesteroncaproaat, levonorgestrel, lynestrenol, medro-10 geston, medroxyprogesteronacetaat, melengestrolacetaat, methynodioldiacetaat, no-rethindron, norethindronacetaat, norethynodrel, norgestimaat, norgestomet, norgestrel, oxogestonfenpropionaat, progesteron, quingestanolacetaat, quingestron en tigestol.

Progestinen die de voorkeur hebben zijn medroxyprogestron, norethindron en norethynodrel.

15 Voorbeelden van botresorptie remmende polyfosfonaten omvatten polyfosfonaten van het type dat wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3683080, waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd. Polyfosfonaten die de voorkeur hebben zijn geminale difosfonaten (ook aangeduid als bis-fosfonaten). Tiludronaat-dinatrium is een polyfosfonaat welke bijzondere voorkeur heeft. Ibandron-20 zuur is een polyfosfonaat welke bijzondere voorkeur heeft. Alendronaat en resindronaat zijn polyfosfonaten die bijzondere voorkeur hebben. Zoledronzuur is een polyfosfonaat welke bijzondere voorkeur heeft. Andere polyfosfonaten die de voorkeur hebben zijn 6-amino-1 -hydroxyhexylideen-bisfosfonzuur en 1 -hydroxy-3-(methylpentyl-aminojpropylideen-bisfosfonzuur. De polyfosfonaten kunnen worden toegediend in de 25 vorm van het zuur, of van een oplosbaar alkalimetaalzout of aardalkalimetaalzout. Hy-drolyseerbare esters van de polyfosfonaten worden eveneens omvat. Specifieke voorbeelden omvatten ethaan-1 -hydroxy- 1,1-difosfonzuur, methaandifosfonzuur, pentaan-1 -hydroxy-1,1 -difosfonzuur, methaandichloordifosfonzuur, methaanhydroxydifosfon-zuur, ethaan-1-amino-1,1-difosfonzuur, ethaan-2-amino-1,1-difosfonzuur, propaan-3-3 0 amino-1 -hydroxy-1,1 -difosfonzuur, propaan-N ,N-dimethy 1-3-amino-1 -hydroxy- 1,1- difosfonzuur, propaan-3,3-dimethyl-3-amino-1 -hydroxy-1,1 -difosfonzuur, fenylami-nomethaandifosfonzuur, Ν,Ν-dimethylaminomethaandifosfonzuur, N-(2-hydroxy-ethyljaminomethaandi fosfonzuur, butaan-4-amino-1 -hydroxy-1,1 -difosfonzuur, pen- 71 taan-5-amino-1 -hydroxy-1,1 -difosfonzuur, hexaan-6-amino-1 -hydroxy-1,1 -difosfon- zuur en farmaceutisch aanvaardbare esters en zouten daarvan.

In het bijzonder kunnen de verbindingen volgens deze uitvinding worden gecombineerd met een estrogeen-agonist/antagonist van een zoogdier. Iedere estro-5 geen-agonist/antagonist kan worden toegepast in het combinatie-aspect van deze uitvinding. De uitdrukking estrogeen-agonist/antagonist heeft betrekking op verbindingen die binden met de estrogeenreceptor, het botherstel remmen en/of botverlies voorkomen. In het bijzonder worden estrogeen-agonisten hierin gedefinieerd als chemische verbindingen die in staat zijn tot binden aan de estrogeen-receptorplaatsen in zoogdier-10 weefsel en het nabootsen van de werking van estrogeen in een of meer weefsels. Estro-geen-antagonisten worden hierin gedefinieerd als chemische verbindingen die in staat zijn tot binden aan de estrogeen-receptorplaatsen in zoogdierweefsel en die de werking van estrogeen in een of meer weefsels blokkeren. Een dergelijke werking kan eenvoudig worden bepaald door de deskundige door middel van standaard-assays, waaronder 15 estrogeen-recepto-bindingsassays, standaard bot-histomorfometrische en densitometer- werkwijzen en Eriksen E.F. et al., Bone Histomorphometry, Raven Press, New York, 1994, bladzijden 1-74; Grier S.J. et al., The Use of Dual-Energy X-Ray Absorptiometry In Animals, Inv. Radiol., 1996, 31(1): 50-62; Wahner H.W. en Fogelman I., The Evaluation of Osteoporosis: Dual Energy X-Ray Absorptiometry in Clinical Practice., 20 Martin Dunitz Ltd., London 1994, bladzijden 1-296). Een verscheidenheid van deze verbindingen wordt hierna beschreven.

Een andere estrogeen-agonist/antagonist die de voorkeur heeft is 3-(4-(l,2-dife-nyl-but-l-enyl)fenyl)acrylzuur, dat wordt beschreven in Wilson et al., Endocrinology, 1997, 138, 3901-3911.

25 Een andere estrogeen-agonist/antagonist die de voorkeur heeft is tamoxifen: (ethaanamine, 2-(4-(l,2-difenyl-l-butenyl)fenoxy)-N,N-dimethyl, (Z)-2-, 2-hydroxy-l,2,3-propaantricarboxylaat(l:l)) en verwante verbindingen, die worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4536516, waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd.

30 Een andere verwante verbinding is 4-hydroxy-tamoxifen, dat wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4623660, waarvan de beschrijving als hierin ingelast deint te worden beschouwd.

72

Een estrogeen-agonist/antagonist die de voorkeur heeft is raloxifen: (methanon, (6-hydroxy-2-(4-hydroxyfenyl)benzo[b]thicen-3-yl)(4-(2-(l-piperidi-nyl)ethoxy)fenyl)hydrochloride), welke wordt beschreven in het Amerikaanse octrooi-schrift 4418068, waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden be-5 schouwd.

Een andere estrogeen-agonist/antagonist die de voorkeur heeft is toremifeen: (ethaanamine, 2-(4-(4-chloor-l,2-difenyl-l-butenyl)fenoxy)-N,N-dimethyl-, (Z)-, 2-hydroxy-l,2,3-propaantricarboxylaat (1:1)), welke wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4996225, waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te 10 worden beschouwd.

Een andere estrogeen-agonist/antagonist die de voorkeur heeft is centchroman: 1-(2-((4-(-methoxy-2,2, dimethyl-3-fenyl-chromaan-4-yl)fenoxy)ethyl)pyrrolidine, welke wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3822287, waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd. Levormeloxifen heeft eveneens de voor-15 keur.

Een andere estrogeen-agonist/antagonist die de voorkeur heeft is idoxifen: (E)-l-(2-(4-(l-(4-jood-fenyl)-2-fenyl-but-l-enyl)fenoxy)ethyl)pyrrolidinon, welke wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4839155, waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd.

20 Een andere estrogeen-agonist/antagonist die de voorkeur heeft is 2-(4-methoxy- fenyl)-3-[4-(2-pperidine-l-yl-ethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofeen-6-ol, welke wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5488058, waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd.

Een andere estrogeen-agonist/antagonist die de voorkeur heeft is 6-(4-hydroxy-25 fenyl)-5-(4-(2-piperidine-l-yl-ethoxy)benzyl)naftaleen-2-ol, welke wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5484795, waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd.

Een andere estrogeen-agonist/antagonist die de voorkeur heeft is (4-(2-(2-aza-bicyclo[2.2.1]hept-2-yl)ethoxy)fenyl)-(6-hydroxy-2-(4-hydroxy-fe-30 nyl)benzo[b]thiofeen-3-yl)methanon, welke wordt beschreven, samen met bereidingswijzen, in PCT-publicatie WO 95/10513 van Pfizer Ine.

Andere estrogeen-agonist/antagonisten die de voorkeur hebben omvatten de verbindingen TSE-424 (Wyeth-Ayerst Laboratories) en arazoxifen.

73

Andere estrogeen-agonist/antagonisten die de voorkeur hebben omvatten de verbindingen die worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 5552412, waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden beschouwd. Verbindingen die bijzondere voorkeur ebben die daarin worden beschreven zijn: 5 cis-6-(4-fluor-fenyl)-5-(4-(2-piperidine-1-yl-ethoxy)fenyl)-5,6,7,8-tetrahydro- naftaleen-2-ol; (-)-cis-6-fenyl-5-(4-(2-pyrrolidine-l-yl-ethoxy)fenyl)-5,6,7,8-tetrahydro-nafta-leen-2-ol (ook bekend als lasofoxifen; cis-6-fenyl-5-(4-(2-pyrrolidine-l-yl-ethoxy)fenyl)-5,6,7,8-tetrahydro-naftaleen-2- 10 ol; cis-l-(6'-pyrrolodinoethoxy-3'-pyridyl)-2-fenyl-6-hydroxy-l,2,3,4-tetrahydronaftaleen; l-(4'-pyrrolidinoethoxyfenyl)-2-(4"-fluorfenyl)-6-hydroxy-l,2,3,4-tetrahydroisochino line; 15 cis-6-(4-hydroxyfenyl)-5-(4-(2-piperidine-l-yl-ethoxy)fenyl)-5,6,7,8-tetrahydro- naftaleen-2-ol; en 1 -(4'-pyrrolidinolethoxyfenyl)-2-fenyl-6-hydroxy-1,2,3,4-tetrahydroisochinoline.

Andere estrogeen-agonist/antagonisten worden beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4133814 (waarvan de beschrijving als hierin ingelast dient te worden 20 beschouwd). In het Amerikaanse octrooischrift 4133814 worden derivaten van 2-fenyl-3-aroyl-benzothiofeen en 2-fenyl-3-aroylbenzothiofeen-l-oxide beschreven.

Andere anti-osteoporosemiddelen, die als het tweede middel toegepast kunnen worden in combinatie met een verbinding volgens de onderhavige uitvinding, omvatten, bijvoorbeeld, de volgende: parathyroide hormoon (PTH) (een bot-anabolisch mid-25 del); parathyroide hormoon (PTH) secretagogen (zie b.v. het Amerikaanse octrooischrift 6132774), in het bijzonder calciumreceptor-antagonisten; calcitonine; en vitamine D en vitamine D-analogen.

Iedere selectieve androgeen-receptor-modulator (SARM) kan worden toegepast in combinatie met een verbinding volgens de onderhavige uitvinding. Een selectieve 30 androgeen-receptor-modulator (SARM) is een verbinding die androgene activiteit bezit en die voor weefsel selectieve effecten uitoefent. SARM-verbindingen kunnen werkzaam zijn als androgeen-receptor-agonisten, partiële agonisten, partiële antagonisten of antagonisten. Voorbeelden van geschikte SARM's omvatten verbindingen zoals cypro- 74 teronacetaat, chloormadinon, flutamide, hydroxyflutamide, bicalutamide, nilutamide, spironolacton, 4-(trifluormethyl)-2( 1 H)-pyrrolidino[3,2-g]chinoline-derivaten, 1,2-di-hydropyridino[5,6-g]chinoline-derivaten en piperidino[3,2-g]chinolinon-derivaten.

Cypteron, ook bekend als (1 b,2b)-6-chloor-1,2-dihydro-17-hydroxy-3 'H-cy-5 clopropa[l,2]pregna-1,4,6-trieen-3,20-dion wordt beschreven in het Amerikaanse oc-trooischrift 3234093. Chloormadinon, ook bekend als 17-(acetyloxy)-6-chloorpregna-4,6-dieen-3,20-dion, in zijn acetaatvorm, is werkzaam als een anti-androgeen en wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3485852. Nilutamide, ook bekend als 5,5-dimethyl-3-[4-nito-3-(trifluormethyl)fenyl]-2,4-imidazolidinedion en onder de han-10 delsnaam Nilandron® wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4097578. Flutamide, ook bekend als 2-methyl-N-[4-nitro-3-(trifluormethyl)fenyl]propanamide en onder de handelsnaam Eulexin®, wordt beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3847988. Bicalutamide, ook bekend als 4'-cyaan-a’,a',a'-trifluor-3-(4-fluorfenylsulfo-nyl)-2-hydroxy-2-methylpropion-m-toluidide en onder de handelsnaam Casodex®, 15 wordt beschreven in EP-100172. De enantiomeren van biclutamide worden besproken door Tucker en Chesterton, J. Med. Chem. 1988, 31, 885-887. Er is gesuggereerd dat hydroxyflutamide, een bekende androgeen-receptor-antagonist in de meeste weefsels, werkzaam is als een SARM voor effecten op de IL-6-productie door osteoblasten, zoals wordt beschreven in Hofbauer et al., J. Bone Miner. Res. 1999, 14, 1330-1337. Extra 20 SARM's zijn beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 6017924; WO 01/16108, WO 01/16133, WO 01/16139, WO 02/00617, WO 02/16310, de Amerikaanse octrooiaanvrage US 2002/0099096, de Amerikaanse octrooiaanvrage 2003/0022868, WO 03/011302 en WO 03/011824. Alle voorgaande referenties dienen als hierin ingelast te worden beschouwd.

25 De uitgangsmaterialen en reagentia voor de hiervoor beschreven verbindingen zijn eveneens algemeen verkrijgbaar of kunnen eenvoudig worden gesynthetiseerd door de deskundige onder toepassing van gebruikelijke organische synthese werkwijzen. Bijvoorbeeld zijn veel van de verbindingen die hierin worden toegepast verwant aan, of afgeleid van verbindingen waarin een groot wetenschappelijk interesse en commerciële 30 behoefte bestaat en dienovereenkomstig zijn veel van dergelijke verbindingen in de handel verkrijgbaar of worden in de literatuur vermeld of worden eenvoudig bereid uit andere algemeen beschikbare stoffen volgens werkwijzen die worden vermeld in de literatuur.

75

Enkele van de verbindingen volgens deze uitvinding of tussenproducten hebben bij de synthese asymmetrische koolstofatomen en zijn derhalve enantiomeren of diaste-reomeren. Diastereomere mengsels kunnen worden gescheiden in hun afzonderlijke diastereomeren op basis van hun fysieke chemische verschillen volgens werkwijzen die 5 als zodanig bekend zijn, zoals bijvoorbeeld door chromatografie en/of ffactionele kristallisatie. Enantiomeren kunnen bijvoorbeeld worden gescheiden door chirale HPLC-werkwijzen of het omzetten van het enantiomere mengsel in een diastereomeer mengsel door reactie met een geschikte optisch actieve verbinding (b.v. alcohol), het scheiden van de diastereomeren en het omzetten (b.v. hydrolyseren) van de afzonderlijke diaste-10 reomeren in de overeenkomende zuivere enantiomeren. Tevens kan een enantiomeer mengsel van de verbindingen of een tussenproduct van de synthese daarvan dat een zure of basische rest bevat worden gescheiden in de overeenkomende zuivere enantiomeren daarvan door het vormen van een diastereomeer zout met een optisch zuivere chirale bas of zuur (b.v. 1-fenyl-ethylamine, dibenzyltartraat of wijnsteenzuur) en het 15 scheiden van de diastereomeren door ffactionele kristallisatie gevolgd door neutralisatie voor het breken van het zout, waarbij aldus de overeenkomende zuivere enantiomeren worden verschaft. Alle dergelijke isomeren, inclusief diastereomeren, enantiomeren en mengsels daarvan, worden als een onderdeel van deze uitvinding beschouwd voor alle verbindingen volgens de onderhavige uitvinding, inclusief de verbindingen volgens de 20 onderhavige uitvinding. Tevens zijn enkele van de verbindingen volgens deze uitvinding atropisomeren (b.v. gesubstitueerde biarylen) en worden als een onderdeel van deze uitvinding beschouwd.

Meer in het bijzonder kunnen de verbindingen volgens deze uitvinding worden verkregen in een qua enantiomeren verrijkte vorm door het scheiden van het racemaat 25 van de uiteindelijke verbinding of een tussenproduct van de synthese daarvan, onder toepassing van chromatografie (bij voorkeur hoge-druk-vloeistofchromatografie [HPLC]) over een asymmetrische hars (bij voorkeur Chiralcel™ AD of OD (verkregen bij Chiral Technologies, Exton, Pennsylvania)) met een mobiele fase die bestaat uit een koolwaterstof (bij voorkeur heptaan of hexaan) welke tussen 0 en 50% isopropanol (bij 30 voorkeur tussen 2 en 20%) en tussen 0 en 5% van een alkylamine (bij voorkeur 0,1% diethylamine) bevat. Concentratie van het product dat fracties bevat geeft de gewenste materialen.

76

Enkele van de verbindingen volgens deze uitvinding zijn zuur en ze vormen een zout met een farmaceutisch aanvaardbaar kation. Enkele van de verbindingen volgens deze uitvinding zijn basisch en ze vormen een zout met een farmaceutisch aanvaardbaar anion. Alle zouten vallen binnen de omvang van deze uitvinding en ze kunnen 5 worden bereid volgens gebruikelijke werkwijzen, zoals het samenvoegen van de zure en basische entiteiten, gewoonlijk in een stoichiometrische verhouding, desgewenst in ofwel een waterig, niet-waterig ofwel een gedeeltelijk waterig medium. De zouten worden gewonnen door ofwel filtratie, door precipitatie met een niet-oplosmiddel gevolgd door filtratie, door verdampen van het oplosmiddel, ofwel, in het geval van wate-10 rige oplossingen, door lyofilisatie. De verbindingen kunnen in kristallijne vorm worden verkregen door oplossen in (een) geschikt(e) oplosmiddel(en) zoals ethanol, hexanen of water/ethanol-mengsels.

Als de verbindingen volgens deze uitvinding hydraten of solvaten vormen vallen deze eveneens binnen de omvang van de uitvinding.

15 De verbindingen volgens deze uitvinding, de promedicamenten daarvan en de zouten van dergelijke verbindingen en promedicamenten zijn alle geschikt voor therapeutische toepassing als middelen die de activiteit van het cholesterolester-overdrachts-eiwit bij zoogdieren, in het bijzonder mensen, remmen. Aldus verhogen de verbindingen volgens deze uitvinding plasma-HDL-cholesterol, de daarmee 20 geassocieerde componenten en de functies die daardoor worden uitgevoerd in zoogdieren, in het bijzonder mensen. Vanwege de activiteit daarvan verlagen deze middelen tevens plasma-gehaltes van triglyceriden, VLDL-cholesterol, Apo-B, LDL-cholesterol en de daarmee geassocieerde componenten in zoogdieren, in het bijzonder mensen. Verder zijn deze verbindingen bruikbaar bij het egaliseren van LDL-25 cholesterol en HDL-cholesterol. Aldus zijn deze verbindingen bruikbaar voor de behandeling en correctie van de verschillende dyslipidemieën waarvan is waargenomen dat deze geassocieerd zijn met de ontwikkeling en het optreden van atherosclerose en cardiovasculaire ziekte, waaronder kransslagaderziekte, coronaire hartziekte, coronaire vasculaire ziekte, periferale vasculaire ziekte, hypoalfalipoproteinemie, 30 hyperbetalipoproteinemie, hypertriglyceridemie, hypercholesterolemie, familiale hypercholesterolemie, lage HDL en geassocieerde componenten, verhoogd LDL en geassocieerde componenten, verhoogd Lp(a), verhoogd klein-dicht LDL, verhoogd VLDL en geassocieerde componenten en post-prandiale lipemie.

77

Verder resulteert de introductie van een functioneel CETP-gen in een dier waarbij CETP (muis) ontbreekt in verlaagde HDL-gehaltes (Agellon, L.B., et al., J. Biol. Chem.

(1991) 266: 10796-10801) en een toegenomen gevoeligheid voor atherosclerose (Marotti, K.R., et al., Nature (1993) 364: 73-75). Tevens verhoogt de remming van de 5 CETP-activiteit met een remmend antilichaam HDL-cholesterol bij een hamster (Evans, G.F., et al., J. of Lipid Research (1994) 35: 1634-1645) en een konijn (Whitlock, M.E., et al., J. Clin. Invest. (1989) 84: 129-137). Onderdrukking van toegenomen plasma-CETP door intraveneuze injectie met antisense-oligonucleotiden tegen CETP mRNA verminderde atherosclerose bij ratten die werden gevoegd met choleste-10 rol (Sugano, M., et al., J. of Biol. Chem. (1998) 273: 5033-5036). Mensen met een deficiëntie aan plasma-CETP, vanwege een genetische mutatie, hebben duidelijk verhoogde plasma-HDL-cholesterol-gehaltes en apolipoproteïne A-I, de belangrijkste apoproteïne-component van HDL. Verder demonstreren de meeste duidelijk afgenomen plasma-LDL-cholesterol en apolipoproteïne B (de belangrijkste apolipoproteïne-15 component van LDL) (Inazu, A., Brown, M.L., Hesler, C.B., et al., N. Engl. J. Med. (1990) 323: 1234-1238).

Gezien de negatieve correlatie tussen de gehaltes aan HDL-cholesterol en met HDL geassocieerde lipoproteïnen en de positieve correlatie tussen triglyceriden, LDL-cholesterol en de daarmee geassocieerde apolipoproteïnen in bloed met de ontwikke-20 ling van cardiovasculaire, cerebrale vasculaire en periferale vasculaire ziektes zijn de verbindingen volgens deze uitvinding, de promedicamenten daarvan en de zouten van dergelijke verbindingen en promedicamenten, vanwege de farmacologische werking daarvan, bruikbaar voor het voorkomen, stoppen en/of terugdringen van atherosclerose en de daarmee geassocieerde ziekte-toestanden. Deze omvatten cardiovasculaire aan-25 doeningen (b.v. angina, ischemie, hart-ischemie en hartinfarct), complicaties als gevolg van behandelingen van een cardiovasculaire ziekte (b.v. reperfusie-verwonding en an-gioplastische restenose), hypertensie, verhoogd cardiovasculair risico dat is geassocieerd met hypertensie, beroerte, atherosclerose welke is geassocieerd met orgaantrans-plantatie, cerebrovasculaire ziekte, cognitieve dysfimctie (waaronder, maar niet beperkt 30 tot, dementie als gevolg van atherosclerose, tijdelijke cerebrale ischemie-aanvallen, neurodegeneratie, neuronale deficiëntie en vertraagd begin of voortgang van de ziekte van Alzheimer), verhoogde gehaltes aan oxidatieve spanning, verhoogde gehaltes aan C-reactief eiwit, metabolisch syndroom en verhoogde gehaltes aan HbAlC.

78

Vanwege de voordelige effecten die in het algemeen zijn geassocieerd met verhoogde HDL-gehaltes verschaft een middel dat de CETP-activiteit bij mensen remt, vanwege het HDL-verhogende vermogen daarvan, tevens waardevolle wegen voor behandeling op een aantal andere ziekte-gebieden.

5 Gezien het vermogen van de verbindingen volgens deze uitvinding, de promedicamenten daarvan en de zouten van dergelijke verbindingen promedicamenten tot het veranderen van de lipoproteïne-samenstelling via de remming van de choleste-rolester-overdracht kunnen deze dus worden toegepast bij de behandeling van vasculaire complicaties die zijn geassocieerd met diabetes, lipoproteme-afwijkingen die zijn 10 geassocieerd met diabetes en sexueel dysfunctioneren dat is geassocieerd met diabetes en vasculaire ziekte. Hyperlipidemie is aanwezig bij de meeste personen met diabetes mellitus (Howard, B.V., 1987, J. Lipid Res. 28, 613). Zelfs bij aanwezigheid van normale lipide-gehaltes hebben diabetische personen een groter risico op cardiovasculaire ziekte (Kannel, W.B. en McGee, D.L., 1979, Diabetes Care 2, 120). Het is bekend dat 15 door CETP teweeggebrachte cholesterylester-overdracht abnormaal wordt verhoogd bij zowel van insuline afhankelijke (Bagdale, J.D., Subbaiah, P.V. en Ritter, M.C., 1991, Eur. J. Clin. Invest. 21, 161) als niet van insuline afhankelijke diabetes (Bagdade, J.D., Ritter, M.C., Lane, J. en Subbaiah, 1993, Atherosclerosis 104, 69). Er is gesuggereerd dat de abnormale toename van cholesterol-overdracht resulteert in veranderingen van 20 de lipoproteïne-samenstelling, in het bijzonder voor VLDL en LDL, welke meer atherogeen zijn (Bagdade, J.D., Wagner, J.D., Rudel, L.L., en Clarkson, T.B., 1995, J. Lipid Res., 36, 759). Deze veranderingen worden niet noodzakelijkerwijze waargenomen tijdens routinematig lipide-onderzoek. Aldus is de onderhavige uitvinding bruikbaar bij het verlagen van het risico op vasculaire complicaties als gevolg van de diabe-25 tische toestand.

De beschreven middelen zijn bruikbaar bij de behandeling van zwaarlijvigheid en verhoogd cardiovasculair risico dat is geassocieerd met zwaarlijvigheid. Bij zowel mensen (Radeau, T., Lau, P., Robb, M., McDonnell, M., Ailhaud, G. en McPherson, R., 1995, Journal of Lipid Research, 36 (12): 2552-61) als niet-menselijke primaten 30 (Quintet, E., Tall, A., Ramakrishnan, R. en Rudel, L., 1991, Journal of Clinical Investigation, 87 (5): 1559-66) wordt mRNA voor CETP in hoge gehaltes in adipose-weefsel tot expressie gebracht. Het adipose-bericht neemt toe met het voeren van vet (Martin, L.J., Connelly, P.W., Nancoo, D., Wood, N., Zhang, Z.J., Maguire, G., Quinet, 79 E., Tall, A.R., Marcel, Y.L. en McPherson, R., 1993, Journal of Lipid Research, 34 (3): 437-46) en wordt vertaald in functioneel overdrachtseiwit en draagt via secretie significant bij aan plasma-CETP-gehaltes. Bij menselijke adipocyten wordt het grootste gedeelte van de cholesterol verschaft door plasma-LDL en -HDL (Fong, B.S. en Angel, 5 A., 1989, Biochimica et Biophysica Acta, 1004 (1): 53-60). De opname van HDL- cholesterylester is voor een groot gedeelte afhankelijk van CETP (Benoist, F., Lau, P., McDonnell, M., Doelle, H., Milne, R. en McPherson, R., 1997, Journal of Biological Chemistry, 272 (38): 23572-7). Dit vermogen van CETP tot het stimuleren van de HDL-cholesteryl-opname, gekoppeld aan het verbeterd binden van HDL aan adipocy-10 ten bij zwaarlijvige personen (Jimenez, J.G., Fong, B., Julien, P., Despres, J.P., Rotstein, L., en Angel, A., 1989, International Journal of Obesity, 13 (5): 699-709), suggereert een rol voor CETP, niet alleen bij het genereren van het lage HDL-fenotype bij deze personen, maar bij de ontwikkeling van zwaarlijvigheid zelf door het bevorderen van de accumulatie van cholesterol. Inhibitoren van de CETP-activiteit die dit pro-15 ces blokkeren dienen derhalve als bruikbare adjuvantia voor een dieetbehandeling doordat deze een gewichtsafname veroorzaken.

CETP-inhibitoren zijn bruikbaar bij de behandeling van een ontsteking als gevolg van Gram-negatieve sepsis en septische schok. Bijvoorbeeld is de systemische toxiciteit van Gram-negatieve sepsis voor een groot gedeelte het gevolg van endotoxine, een li-20 popolysacharide (LPS) dat wordt afgegeven van het buitenoppervlak van de bacteriën, dat een uitgebreide ontstekingsrespons veroorzaakt. Lipopolysacharide kan complexen vormen met lipoproteïnen (Ulevitch, R.J., Johnston, A.R., en Weinstein, D.B., 1981, J. Clin. Invest. 67, 827-37). In vitro onderzoeken hebben gedemonstreerd dat door het binden van LPS aan HDL de productie en afgifte van mediatoren van een ontsteking in 25 aanzienlijke mate wordt verminderd (Ulevitch, R.J., Johnston, A.R., 1978, J. Clin. Invest. 62, 1313-24). In vivo onderzoeken tonen dat transgene muizen die menselijk apo-AI tot expressie brengen en met verhoogde HDL-gehaltes worden beschermd tegen septische schok (Levine, D.M., Parker, T.S., Donnelly, T.M., Walsh, A.M., en Rubin, A.L., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci., 90, 12040-44). Belangrijker is dat de toediening van 30 gereconstitueerd HDL aan mensen die zijn uitgedaagd met endotoxine resulteerde in een verminderde ontstekingsrespons (Pajkrt, D., Doran, J.E., Koster, F., Lerch, P.G., Amet, B., van der Poll, T., ten Cate, J.W., en van Deventer, S.J.H., 1996, J. Exp. Med. 184, 1601-08). De CETP-inhibitoren, vanwege het feit dat deze de HDL-gehaltes ver- 80 hogen, verminderen de ontwikkeling van een ontsteking en septische schok. Deze verbindingen zijn eveneens bruikbaar bij de behandeling van endotoxemie, autoimmuun-ziektes en andere systemische ziekte-indicaties, orgaan- of weefseltransplantaat-afsto-ting en kanker.

5 De toepasbaarheid van de verbindingen volgens de uitvinding, de promedicamen- ten daarvan en de zouten van dergelijke verbindingen en promedicamenten als medische middelen bij de behandeling van de hiervoor beschreven ziektes/aandoeningen bij zoogdieren (b.v. mensen, mannelijk of vrouwelijk) wordt gedemonstreerd door de activiteit van de verbindingen volgens deze uitvinding bij gebruikelijke assays en de in 10 vitro assay welke hierna wordt beschreven. De in vivo assay (met desbetreffende modificaties binnen de stand der techniek) kan worden toegepast voor het bepalen van de activiteit van andere lipide- of triglyceride-controlerende middelen alsook de verbindingen volgens deze uitvinding. Dergelijke assays verschaffen tevens een wijze waarop de activiteiten van de verbindingen volgens deze uitvinding, de promedicamenten daar-15 van en de zouten van dergelijke verbindingen en promedicamenten (of de andere mid delen die hierin worden beschreven) vergeleken kunnen worden met elkaar en met de activiteiten van andere bekende verbindingen. De resultaten van deze vergelijkingen zijn bruikbaar voor het bepalen van toedieningsgehaltes bij zoogdieren, waaronder mensen, voor de behandeling van dergelijke ziektes.

20 De volgende protocols kunnen natuurlijk worden gevarieerd door de deskundige.

De hyperalfacholesterolemie-activiteit van de verbindingen kan worden bepaald door het bepalen van het effect van deze verbindingen op de werking van cholesteryl-ester-overdrachtseiwit door het meten van de relatieve overdrachtsverhouding van radioactief gemerkte lipiden tussen lipoproteïne-fracties, in wezen zoals hiervoor is 25 beschreven door Morton in J. Biol. Chem. 256, 11992, 1981 en door Dias in Clin. Chem. 34, 2322, 1988.

CETP-in-vitro-assay 30 Hierna volgt een korte beschrijving van assays van de cholesterylester-overdracht in 97% (geheel) of verdund menselijk plasma (in vitro) en dierlijk plasma (ex vivo): de CETP-activiteit bij aanwezigheid of afwezigheid van medicament wordt onderzocht door het bepalen van de overdracht van met 3H gemerkt cholesteryloleaat (CO) uit exo- 81 geen tracer-HDL of -LDL naar de non-HDL- respectievelijk HDL-lipoproteïne-fractie in menselijk plasma, of uit met 3H gemerkt LDL naar de HDL-fractie in dierlijk plasma. Gemerkte menselijke lipoproteïnesubstraten worden overeenkomstig de werkwijze die is beschreven door Morton, waarbij de endogene CETP-activiteit in plasma 5 wordt toegepast voor het overdragen van 3H-CO uit fosfolipide-liposomen naar alle lipoproteïne-fracties in plasma, bereid. Met 3H gemerkt LDL en HDL worden vervolgens geïsoleerd door opeenvolgende ultracentrifugatie bij dichtheid-afsneden van 1,019-1,063 respectievelijk 1,10-1,21 g/ml.

Voor de 97%- of geheel-plasma-activiteit-assay wordt met 3H gemerkt HDL in 10 een hoeveelheid van 10-25 nmol CO/ml aan plasma toegevoegd en worden de monsters 2,5-3 uur bij 37°C geïncubeerd. Non-HDL-lipoproteïnen worden vervolgens geprecipiteerd door de toevoeging van een zelfde hoeveelheid 20% (gew/vol) polyethyleen-glycol 8000 (Dias). De monsters worden 20 minuten bij 750 g gecentrifugeerd en de·, radioactiviteit die aanwezig is in de HDL bevattende supematans wordt bepaald door 15 vloeistofscintillatietellen. Door het toevoegen van verschillende hoeveelheden van de verbindingen volgens deze uitvinding als een oplossing in dimethylsulfoxide aan menselijk plasma, voor het toevoegen van het radioactief gemerkte cholesteryloleaat, en het vergelijken van de hoeveelheden radioactief merkmiddel welke zijn overgedragen in vergelijking met incubaties die geen inhibitor-verbindingen bevatten kunnen de rem-20 mende activiteiten van de cholesterylester-overdracht worden bepaald.

Als een gevoeliger assay wordt gewenst wordt een in vitro assay waarbij verdund menselijk plasma wordt gebruikt toegepast. Voor deze assay wordt met 3H gemerkt LDL in een hoeveelheid van 50 nmol CO/ml aan plasma toegevoegd en worden de monsters 7 uur bij 37°C geïncubeerd. Non-HDL-lipoproteïnen worden vervolgens ge-25 precipiteerd door de toevoeging van kaliumfosfaat tot een uiteindelijke concentratie van 100 mM, gevolgd door mangaanchloride tot een uiteindelijke concentratie van 20 mM. Na vortexen worden de monsters 20 minuten bij 750 g gecentrifugeerd en wordt de radioactiviteit die aanwezig is in de HDL bevattende supematans bepaald door vloeistofscintillatietellen. Door het toevoegen van verschillende hoeveelheden van de 30 verbindingen volgens deze uitvinding als een oplossing in dimethylsulfoxide aan verdund menselijk plasma, voor het toevoegen van het radioactief gemerkte cholesteryloleaat, en het vergelijken van de hoeveelheden radioactief merkmiddel welke zijn overgedragen in vergelijking met incubaties die geen inhibitor-verbindingen 82 bevatten kunnen de remmende activiteiten van de cholesterylester-overdracht worden bepaald. Deze assay is aangepast om te worden uitgevoerd in microtiterplaat-formaat, waarbij het vloeistofscintillatietellen wordt uitgevoerd met behulp van een Wallac-plaatlezer.

5 Daarnaast kan de CETP-remmende activiteit van verbindingen worden bepaald onder toepassing van op microtiterplaat gebaseerde fluorescentie-overdrachtsassays, waarbij de van CETP afhankelijke overdracht van een auto-afschrikkend cholesteryl-ester-analoog (Bodipy-CE) uit menselijke ApoAJ bevattende emulsiedeeltjes naar de endogene lipoproteïnen in plasma wordt gevolgd.

10 Fluorescerende Bodipy-CE-donoren worden bereid door het drogen van 14 mg PC, 1,6 mg trioleïne en 3,5 mg BODIPY-CE bij 60°C in een vacuümoven en het vervolgens hydrateren van de lipiden bij 80°C in 12 ml PBS door sonde-sonificatie (bij een instelling van 25% van het volledige vermogen) gedurende 2 min onder een stroom N2. Het lipide-mengsel wordt vervolgens afgekoeld tot 45°C en er wordt 5 mg (0,125 15 M) menselijk apolipoproteïne AI (van Biodesign, Saco ME) toegevoegd en er wordt opnieuw 20 min bij 45°C gesonificeerd (bij 25% van het volledige vermogen), waarbij na iedere minuut wordt gepauzeerd om de sonde te laten afkoelen. De verkregen emulsie wordt 30 min bij 3000 x g gesponnen om metalen sonde-fragmenten te verwijderen en vervolgens met natriumbromide op 1,12 g/ml ingesteld en als laag aangebracht on-20 der een oplossing van NaBr 1,10 g/ml (16 ml) en daarna 24 uur bij 50.000 g aan ultra-centrifiigatie met een dichtheidsgradiënt onderworpen voor het verwijderen van niet opgenomen apolipoproteïne AI en kleine dichte deeltjes die achterblijven op de bodem van de gradiënt. De beter drijvende emulsiedeeltjes worden verzameld via de bovenkant van de gradiënt en gedialyseerd in 6 liter (2 veranderingen) PBS/0,02% azide en 25 voor gebruik tot de desbetreffende concentraties verdund.

De van CETP afhankelijke overdracht van fluorescerend CE-analoog wordt gevolgd in incubaties die de fluorescerende menselijke-apolipoproteïne Al bevattende donodeeltjes en een bron van CETP en acceptor-lipoproteïnen, die in deze gevallen aanwezig zijn in verdund menselijk plasma, bevatten. Bodipy-CE-fluorescentie in de 30 donordeeljes in de niet-geïncubeerde donordeeltjes wordt afgeschrikt en de van CETP afhankelijke overdracht van Bodipy-CE naar acceptordeeltjes resulteert in een toename van de fluorescentie.

83

Als een assay met een hoge gevoeligheid wordt gewenst worden verbindingen in 100% dimethylsulfoxide getest in een 2,5% plasma-assay met een microtiterplaat met 384 putjes. Een microliter van de verbinding in 100% dimethylsulfoxide wordt onder toepassing van een clonemaster-oplossing-overdracht-inrichting toegevoegd aan putjes 5 die 20 μΙ 3,75% menselijk plasma (verdund met PBS) bevatten. De overdracht wordt geïnitieerd via de toevoeging van 10 μΐ 7,5% donoren (eveneens verdund met PBS). Na het mengen wordt iedere plaat ingepakt of in een Matripress plaatstapelaar geplaatst om verdampen te voorkomen en een nacht (16-20 uur) bij kamertemperatuur geïncubeerd. De fluorescentie wordt bepaald met een fluorescentie-plaatlezer, 485/530 nm filters, 10 505 nm dichroomfilter. Merk op dat afhankelijk van de vloeistofhanteringsvermogens de tussentijdse verdunningen van plasma en fluorescerende donoren en de grootte van de verdunningen indien noodzakelijk kan worden aangepast.

Als een assay met een lagere gevoeligheid wordt gewenst worden verbindingen getest in een 20% plasma-assay die qua concept overeenkomt met de 2,5% assay. Twee 15 microliter van de verbinding wordt toegevoegd aan droge microtiterplaten met 96 put jes met een half oppervlak, gevolgd door 48 μΐ 40% menselijk plasma (verdund in PBS) en 50 μΐ 40% donor-oplossing. De fluorescentie-intensiteit wordt gevolgd na 3 uur incuberen bij kamertemperatuur. In het geval van ofwel de 2,5% ofwel de 20% assay wordt het percentage remming van de CE-overdracht door de verbinding 20 berekend door vergelijken met putjes die fluorescentie-donoren en plasma maar geen verbinding bevatten.

CETP-in-vivo-assav 25 De in vivo activiteit van deze verbindingen kan worden bepaald door de hoeveel heid middel die moet worden toegediend, ten opzichte van een controle, voor het remmen van de cholesterylester-overdrachtsactiviteit met 50% op verschillende tijdstippen ex vivo of voor het verhogen van HDL-cholesterol met een gegeven percentage in een CETP bevattend dierlijke species. Transgene muizen die zowel menselijk CETP als 30 menselijk apolipoproteïne Al (Charles River, Boston, MA) tot expressie brengen kunnen worden toegepast voor het in vivo onderzoeken van de verbindingen. De te onderzoeken verbindingen worden toegediend door orale sondevoeding in een emulsieme-dium dat 20% (v:v) olijfolie en 80% natriumtaurocholaat (0,5%) bevat. Bloed wordt 84 retro-orbitaal voor de toediening bij de muizen afgenomen, als een pre-toediening-bloedmonster wordt gewenst. Op verschillende tijdstippen na het toedienen, variërend van 4 uur tot 24 uur, worden de dieren gedood, wordt bloed verkregen via een hart-punctuur en worden de lipide-parameters gemeten, waaronder totaal cholesterol, HDL-5 en LDL-cholesterol en triglyceriden. De CETP-activiteit wordt bepaald volgens een werkwijze die overeenkomt met de werkwijze die hiervoor is beschreven, behalve dat 3H-cholesteryloleaat bevattend LDL wordt gebruikt als de donorbron in tegenstelling tot HDL. De waarden die zijn verkregen voor lipiden en overdrachtsactiviteit worden vergeleken met die welke zijn verkregen voor het toedienen en/of met die van muizen 10 die alleen medium krijgen.

Plasma-lipiden-assay

De activiteit van deze verbindingen kan ook worden gedemonstreerd door het 15 bepalen van de hoeveelheid middel die wordt vereist voor het veranderen van plasma-lipide-gehaltes, bijvoorbeeld HDL-cholesterol-gehaltes, LDL-cholesterol-gehaltes, VLDL-cholesterol-gehaltes of triglyceriden, in het plasma van bepaalde zoogdieren, bijvoorbeeld marmosets, die CETP-activiteit bezitten en een plasma-lipoproteïne-pro-fïel hebben dat overeenkomt met dat van mensen (Crook et al. Arteriosclerosis 10, 625, 20 1990). Volwassen marmosets worden zodanig ingedeeld in behandelgroepen, dat iedere groep een overeenkomende gemiddelde ±SD voor totale, HDL- en/of LDL-plasma-cholesterol-concentraties heeft. Na het indelen in een groep krijgen de marmosets dagelijks een verbinding toegediend welke is gemengd met het voer of door intubatie in de maag gedurende een tot acht dagen. Controle-marmosets krijgen alleen het toedie-25 ningsmedium. Plasma-totaal-, LDL-, VLDL- en HDL-cholesterol-waarden kunnen op ieder moment tijdens het onderzoek worden bepaald door het afnemen van bloed uit een antecubitale ader en het scheiden van plasma-lipoproteïnen in hun afzonderlijke subklassen door centrifugatie met een dichtheidsgradiënt, en door het meten van de cholesterolconcentratie zoals hiervoor is beschreven (Crook et al. Arteriosclerose 10, 30 625,1990).

In vivo-atherosclerose-assay 85

Anti-atherosclerose-effecten van de verbindingen kunnen worden bepaald door de hoeveelheid verbinding die wordt vereist voor het verminderen van de lipide-afzet-ting in de aorta van een konijn. Mannelijke Nieuw-Zeeland witte konijnen krijgen gedurende 4 dagen (maaltijd een keer per dag gegeven) een dieet te eten dat 0,2% cho-5 lesterol en 10% kokosnootolie bevat. Bloed van de konijnen wordt afgenomen uit de marginale oor-ader en de totale plasma-cholesterol-waarden worden bepaald uit deze monsters. De konijnen worden vervolgens zodanig ingedeeld in behandelgroepen, dat iedere groep een overeenkomende gemiddelde ±SD voor de totale plasma-cholesterol-concentratie, HDL-cholesterol-concentratie, triglyceride-concentratie en/of choles-10 terylester-overdrachteiwit-activiteit heeft. Na het indelen in groepen krijgen de konijnen dagelijks een verbinding toegediend welke is gemengd met het voer of op een klein stukje van op gelatine gebaseerd snoepgoed. Controle-konijnen krijgen alleen het toe-dieningsmedium, dat wil zeggen het voedsel of het gelatine-snoepgoed. Het choleste-rol/kokosnoot-dieet wordt samen met de toediening van de verbinding tijdens het on-15 derzoek voortgezet. Plasma-cholesterol-waarden en cholesterylester-overdrachtseiwit-activiteit kan op ieder moment tijdens het onderzoek worden bepaald door het afnemen van bloed uit de marginale oor-ader. Na 3-5 maanden worden de konijnen gedood en worden de aortae verwijderd vanaf de thoraxboog tot de vertakking van de iliac-aders. De aortae worden gereinigd van adventitia, in de lengterichting geopend en vervolgens 20 ongekleurd of gekleurd met Sudan IV geanalyseerd, zoals is beschreven door Holman et al. (Lab. Invest. 1958, 7, 42-47). Het percentage laesie-oppervlak wordt bepaald door densitometrie onder toepassing van een Optimas Image Analyzing System (Image Processing Systems). Een verminderde lipide-afzetting wordt weergegeven door een afname van het percentage laesie-oppervlak van de groep die de verbinding kreeg in 25 vergelijking met de controle-konijnen.

Antizwaarliivigheid-protocol

Het vermogen van CETP-inhibitoren tot het veroorzaken van gewichtsverlies kan 30 worden bepaald bij zwaarlijvige mensen met een lichaamsmassaindex ("body mass index" (BM1)) > 30 kg/m2. Doses van de inhibitor worden toegediend die voldoende zijn om te resulteren in een toename > 25% van de HDL-cholesterol-gehaltes. BMI en lichaamsvetverdeling, gedefinieerd als verhouding van taille (W) tot heup (H) (WHR), 86 worden gevolgd in de loop van de 3-6 maanden durende onderzoeken en de resultaten voor de behandelgroepen werden vergeleken met die welke een placebo kregen.

In vivo-sepsis-assav 5

In vivo onderzoeken laten zien dat transgene muizen die menselijk apo-AI tot expressie brengen en verhoogde HDL-gehaltes hebben worden beschermd tegen septische schok. Aldus kan het vermogen van CETP-inhibitoren om te beschermen tegen septische schok worden gedemonstreerd bij transgene muizen die zowel menselijk apo-10 AI als menselijke CETP-transgenen tot expressie brengen (Levine, D.M., Parker, T.S., Donnelly, T.M., Walsh, A.M. en Rubin, A.I., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. 90, 12040-44). LPS dat is verkregen uit E. coli wordt in een hoeveelheid van 30 mg/kg door i.p. injectie toegediend aan dieren waaraan een CETP-inhibitor in een geschikte dosis, welke resulteert in een verhoging van HDL, is toegediend. Het aantal overlevende mui-15 zen wordt bepaald op tijdstippen tot 48 uur na de LPS-injectie en wordt vergeleken met die muizen, waaraan alleen medium (min CETP-inhibitor) is toegediend.

In vivo-bloeddruk-assav 20 In vivo-koniin-model

Werkwijzen: Mannelijke Nieuw Zeeland witte konijnen (3-4 kg) worden verdoofd met natriumpentobarbital (30 mg/kg, i.v.) en een chirurgisch vlak van verdoving wordt in stand gehouden door een continue infusie van natriumpentobarbital (16 mg/kg/uur) via 25 een katheter in een oor-ader. Er wordt een tracheotomie uitgevoerd door een ventrale cervicale middenlijn-incisie en de konijnen worden beademd met 100% zuurstof onder toepassing van een positieve-druk-ventilator. De lichaamstemperatuur wordt op 38,5°C gehouden met behulp van een verwarmingsdeken die is verbonden met een YSI tempe-ratuurregelaar model 72 (Yellow Springs Instruments, Yellow Springs, MD). Met 30 vloeistof gevulde katheters worden aangebracht in de rechter halsader (voor intraveneuze toediening van medicament) en in de rechter halsslagader voor het volgen van de arteriële druk en voor bloedgasanalyse onder toepassing van een model 248 bloedgas-analyseerinrichting (Bayer Diagnostics, Norwood, MA). De ventilator wordt naar be- 87 hoefte ingesteld om de pH van het bloed en de pCC>2 in de normale fysiologische trajecten voor konijnen te houden. De arteriële druk wordt gemeten met behulp van een spanningsdrukopnemer (Spectromed, Oxnard, CA), die eerst is gekalibreerd met behulp van een kwikmanometer, welke i aangebracht op het niveau van het hart en is verbon-5 den met de arteriële katheter. De arteriële druksignalen worden gedigitaliseerd bij 500 Hz en geanalyseerd onder toepassing van een Po-Ne-Mah gegevensopneemsysteem (Gould Instrument Systems, Valley View, OH) voor het verkrijgen van de gemiddelde arteriële druk en hartslagwaarden. De basislijnwaarden worden verzameld als de gemiddelde arteriële druk en de hartslag zijn gestabiliseerd. De testverbinding wordt ver-10 volgens als ofwel een subcutane (SC) bolus ofwel als een intraveneuze (IV) infusie toegediend. Voor subcutane (SC) toediening kan de testverbinding worden opgelost in een geschikt medium zoals 5% ethanol in water (5% EtOH : 95% H2O), terwijl de testverbinding voor intraveneuze toediening kan worden opgelost in een geschikt medium zoals 0,9% normale zoutoplossing. De arteriële druk en de hartslag worden continu 15 gedurende 4 uur na het toedienen van de testverbinding of gedurende de duur van een continue 4 uur durende infusie van de testverbinding gevolgd. Bloed wordt bemonsterd na het toedienen of tijdens de infusie van de testverbinding teneinde de plasma-con-centraties van de testverbindingen te bepalen.

20 In vivo-primaat-model

Werkwijzen: Volwassen M. fascicularis primaten (608 kg) die eerst met behulp van instrumenten zijn voorzien van subcutane vasculaire toegangsopeningen in de afdalende thorax-aorta en die zijn geconditioneerd om stil te zitten in speciaal ontworpen 25 primaat-beperkende stoelen worden toegepast. Alle primaten krijgen 12-18 uur voor het experiment niets te eten. Op de dag van het experiment, waarbij de primaten vastzitten in de stoelen, wordt een spanningsdrukopnemer (Spectromed, Oxnard, CA), die eerst is gekalibreerd met een kwikmano meter, aangebracht op het niveau van het hart en verbonden met de vasculaire toegangsopening voor het meten van de arteriële druk. Men 30 laat de primaten ten minste een uur aan de stoel wennen. De arteriële druksignalen worden gedigitaliseerd bij 500 Hz en continu opgetekend tijdens het experiment en geanalyseerd met behulp van een Po-Ne-Mah gegevensopneemsysteem (Gould Instrument Systems, Valley View, OH) voor het verkrijgen van de metingen van de gemid- 88 delde arteriële druk en hartslag. De basislijnwaarden worden verzameld als de primaten rustig zitten en als de gemiddelde arteriële druk en de hartslag zijn gestabiliseerd. De testverbinding wordt vervolgens als een subcutane (SC) bolus van een oplossing van de testverbinding in een geschikt medium zoals 5% ethanol in water (5% EtOH : 95% 5 H2O) toegediend. De oplossing van de testverbinding of medium wordt voor de injectie gefiltreerd door een filter van 0,22 micron en een gebruikelijk toedieningsvolume bedraagt 0,2 ml/kg. De arteriële druk en de hartslag worden continu gedurende 4 uur na het toedienen van de testverbinding gevolgd en worden opgetekend met geselecteerde tijdsintervallen voor gegevensvergelijking (medium versus testverbinding). Bloedmon-10 sters (1,5 ml) worden genomen voor het bepalen van de plasma-concentraties van de testverbinding en het verwijderde bloed wordt onmiddellijk vervangen door 0,9% steriele zoutoplossing om het bloedvolume in stand te houden.

De toediening van de verbindingen volgens deze uitvinding kan plaatsvinden via iedere werkwijze volgens welke een verbinding volgens deze uitvinding systemisch 15 en/of lokaal wordt afgegeven. Deze werkwijzen omvatten orale routes, parenterale, intraduodenale routes, enz. In het algemeen worden de verbindingen volgens deze oraal toegediend, maar parenterale toediening (b.v. intraveneus, intramusculair, subcutaan of intramedullair) kan bijvoorbeeld worden toegepast als orale toediening ongeschikt is voor het doel of als de patiënt niet in staat is om het medicament door te slikken.

20 In het algemeen wordt een hoeveelheid van een verbinding volgens deze uitvin ding toegepast die voldoende is voor het bereiken van het therapeutische effect dat wordt gewenst (b.v. HDL-toename).

In het algemeen bedraagt een werkzame dosis voor de verbindingen volgens deze uitvinding ongeveer 0,001 tot 100 mg/kg/dag van de verbinding, een promedicament 25 daarvan of een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de verbinding of het promedicament. Een dosis die bijzondere voorkeur heeft bedraagt ongeveer 0,01 tot 10 mg/kg/dag van de verbinding, een promedicament daarvan of een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de verbinding of het promedicament.

Er wordt een dosis van de combinatie van toe te passen farmaceutische middelen 30 samen met de CETP-inhibitoren toegepast welke werkzaam is voor de indicatie die wordt behandeld.

89

Bijvoorbeeld ligt een werkzame dosis voor HMG-CoA reductase-inhibitoren gewoonlijk in het traject van 0,01 tot 100 mg/kg/dag. In het algemeen ligt een werkzame dosis voor een PPAR modulator in het traject van 0,01 tot 100 mg/kg/dag.

De verbindingen volgens de onderhavige uitvinding worden in het algemeen 5 toegediend in de vorm van een farmaceutische samenstelling welke ten minste een van de verbindingen volgens deze uitvinding samen met een farmaceutisch aanvaardbaar medium, verdunningsmiddel of drager, zoals hierna wordt beschreven, omvat. Aldus kunnen de verbindingen volgens deze uitvinding afzonderlijk of samen in iedere gebruikelijke orale, parenterale, rectale of transdermale toedieningsvorm worden toege-10 diend.

Voor orale toediening kan een farmaceutische samenstelling de vorm hebben van oplossingen, suspensies, tabletten, pillen, capsules, poeders en dergelijke. Tabletten die verschillende excipiëntia zoals natriumcitraat, calciumcarbonaat en calciumfosfaat bevatten worden samen met verschillende desintegreermiddelen zoals zetmeel en bij 15 voorkeur aardappelzetmeel of tapiocazetmeel en bepaalde complexe silicaten, samen met bindmiddelen zoals polyvinylpyrrolidon, sucrose, gelatine en acacia toegepast. Bovendien zijn smeermiddelen zoals magnesiumstearaat, natriumlaurylsulfaat en talk vaak uitermate bruikbaar voor tabletteringsdoeleinden. Vaste samenstellingen van een overeenkomend type worden eveneens toegepast als vulmiddelen in zachte en harde 20 gevulde gelatine-capsules; voorkeursmaterialen in dit verband omvatten tevens lactose of melksuiker alsook polyethyleenglycolen met een hoog molecuulgewicht. Een voorkeursformulering is een oplossing of suspensie in een olie, bijvoorbeeld een plantaardige olie, zoals olijfolie; triglyceriden zoals die welke in de handel verkrijgbaar zijn onder de naam Miglyol™; of mono- of diglyceriden zoals die welke in de handel ver-25 krijgbaar zijn onder de naam Capmul™, bijvoorbeeld in een zachte gelatine-capsule. Antioxidantia kunnen indien noodzakelijk worden toegevoegd om afbraak op de lange duur te voorkomen. Als waterige suspensies en/of elixers worden gewenst voor orale toediening kunnen de verbindingen volgens deze uitvinding worden gecombineerd met verschillende zoutstoffen, smaakstoffen, kleurstoffen, emulgatoren en/of suspendeer-30 middelen, alsook verdunningsmiddelen zoals water, ethanol, propyleenglycol, glycerine en verschillende combinaties daarvan.

Farmaceutische samenstellingen die een vaste amorfe dispersie van een choles-terylester-overdrachtseiwit (CETP) inhibitor en een concentratie bevorderend polymeer 90 omvatten worden beschreven in de Internationale publicaties WO 02/11710 en WO 03/000238, die als hierin ingelast dienen te worden beschouwd. Auto-emulgerende formuleringen van cholesterylester-overdrachtseiwit (CETP) inhibitoren worden beschreven in de Internationale publicatie WO 03/000296, welke als hierin ingelast dient 5 te worden beschouwd. Werkwijzen voor het afzetten van kleine medicamentkristallen op excipiëntia worden beschreven in de literatuur, zoals in J. Pharm. Pharmacol. 1987, 39: 769-773, welke als hierin ingelast dient te worden beschouwd.

Voor de doeleinden van parenterale toediening kunnen oplossingen in sesam- of pinda-olie of in waterige propyleenglycol worden toegepast, alsook steriele waterige 10 oplossingen van de overeenkomende, in water oplosbare zouten. Dergelijke waterige oplossingen kunnen geschikt worden gebufferd, indien noodzakelijk, en het vloeibare verdunningsmiddel kan eerst isotoon worden gemaakt met voldoende zoutoplossing of glucose. Deze waterige oplossingen zijn in het bijzonder geschikt voor intraveneuze, intramusculaire, subcutane en intraperitoneale injectie-doeleinden. In dit verband zijn 15 de steriele waterige media die worden toegepast allemaal eenvoudig verkrijgbaar volgens standaardtechnieken die bekend zijn bij de deskundige.

Voor de doeleinden van transdermale (b.v. topikale) toediening worden verdunde steriele, waterige of gedeeltelijk waterige oplossingen (gewoonlijk in een concentratie van ongeveer 0,1% tot 5%), verder overeenkomend met de voorgaande parenterale op-20 lossingen, bereid.

Werkwijzen voor het bereiden van verschillende farmaceutische samenstellingen met een bepaalde hoeveelheid werkzaam bestanddeel zijn bekend, of zijn duidelijk in het kader van deze beschrijving, bij de deskundige. Voor voorbeelden van werkwijzen voor het bereiden van farmaceutische samenstellingen zie Remington's Pharmaceutical 25 Sciences, Mack Publishing Company, Easter, Pa., 15e druk (1975).

Farmaceutische samenstellingen volgens de uitvinding kunnen 0,l%-95% van de verbinding(en) volgens deze uitvinding, bij voorkeur l%-70%, bevatten. In ieder geval bevat de toe te dienen samenstelling of formulering een hoeveelheid van een verbindingen) volgens de uitvinding in een hoeveelheid die werkzaam is voor het behandelen 30 van de ziekte/aandoening van het onderwerp dat wordt behandeld, b.v. atherosclerose.

Daar de onderhavige uitvinding een aspect heeft dat betrekking heeft op de behandeling van de ziekte/aandoeningen die hierin zijn beschreven met een combinatie van werkzame bestanddelen die afzonderlijk toegediend kunnen worden heeft de uit- 91 vinding ook betrekking op het combineren van afzonderlijke farmaceutische samenstellingen in kit-vorm. De kit omvat twee afzonderlijke farmaceutische samenstellingen: een verbinding volgens de onderhavige uitvinding, een promedicament daarvan of een zout van een dergelijke verbinding of promedicament en een tweede verbinding 5 zoals hiervoor wordt beschreven. De kit omvat middelen voor het bewaren van de afzonderlijke samenstellingen zoals een houder, een verdeelde fles of een verdeelde foe-lieverpakking. Gewoonlijk omvat de kit aanwijzingen voor de toediening van de afzonderlijke componenten. De kit-vorm is bijzonder voordelig als de afzonderlijke componenten bij voorkeur worden toegediend in verschillende toedieningsvormen (b.v. oraal 10 en peranteraal), worden toegediend met verschillende toedieningsintervallen of als titratie van de afzonderlijke componenten van de combinatie wordt gewenst door de behandelende arts.

Een voorbeeld van een dergelijke kit is een zogenaamde doordrukverpakking. Doordrukverpakkingen zijn bekend in de verpakkingsindustrie en worden algemeen 15 toegepast voor het verpakken van farmaceutische eenheidstoedieningsvormen (tabletten, capsules en dergelijke). Doordrukverpakkingen bestaan in het algemeen uit een vel van een betrekkelijk stijf materiaal dat is bedekt met een foelie van een bij voorkeur transparant kunststoffnateriaal. Tijdens het verpakkingsproces worden uitsparingen in de kunststoffoelie gevormd. De uitsparingen hebben de grootte en vorm 20 van de te verpakken tabletten of capsules. Vervolgens worden de tabletten of capsules in de uitsparingen geplaatst en wordt het vel van het betrekkelijk stijve materiaal verzegeld tegen de kunststoffoelie op het oppervlak van de foelie tegenover de richting waarin de uitsparingen zijn gevormd. Als gevolg daarvan worden de tabletten of capsules ingesloten in de uitsparingen tussen de kunststoffoelie en het vel. Bij voorkeur 25 is de sterkte van het vel zodanig, dat de tabletten of capsules uit de doordrukverpakking verwijderd kunnen worden door het manueel uitoefenen van druk op de uitsparingen waarbij een opening wordt gevormd in het vel op de plaats van de uitsparing. De tablet of capsule kan worden verwijderd via de opening.

Het kan wenselijk zijn om een geheugensteun op de kit te verschaffen, b.v. in de 30 vorm van getallen naast de tabletten of capsules, waarbij de getallen overeenkomen met de dagen van het regime waarop de aldus gespecificeerde tabletten of capsules dienen te worden ingenomen. Een ander voorbeeld van een dergelijke geheugensteun is een kalender die b.v. als volgt is gedrukt op de kaart: "Eerste week, Maandag, Dinsdag, ...

92 enz... Tweede week, Maandag, Dinsdag,..." enz. Andere variaties van geheugensteunen zullen duidelijk zijn. Een "dagelijkse dosis" kan een enkele tablet of capsule of verscheidene pillen of capsules zijn die op een gegeven dag dienen te worden ingenomen. Tevens kan een dagelijkse dosis van verbindingen volgens de onderhavige uitvinding 5 bestaan uit een tablet of capsule terwijl een dagelijkse dosis van de tweede verbinding kan bestaan uit verscheidene tabletten of capsules en omgekeerd. De geheugensteun dient dit te reflecteren.

In een andere specifieke uitvoeringsvorm van de uitvinding wordt een afgeefinrichting welke is ontworpen voor het een voor een afgeven van de dagelijkse 10 doses in de volgorde van de beoogde toepassing daarvan verschaft. Bij voorkeur is de afgeefinrichting voorzien van een geheugensteun, teneinde compliantie met het regime verder te vereenvoudigen. Een voorbeeld van een dergelijke geheugensteun is een mechanische teller die het aantal dagelijkse doses welke zijn afgegeven aangeeft. Een ander voorbeeld van een dergelijke geheugensteun is een op batterijen werkend micro-15 chip-geheugen welke is gekoppeld aan een vloeibaar-kristallijn afleesvenster, of een hoorbaar herinneringssignaal dat, bijvoorbeeld, de dag aangeeft waarop de laatste dagelijkse dosis is ingenomen en/of iemand eraan herinnert wanneer de volgende dosis dient te worden ingenomen.

De verbindingen volgens deze uitvinding, ofwel alleen ofwel in combinatie met 20 elkaar of andere verbindingen, worden in het algemeen in een geschikte formulering toegediend. De volgende formuleringsvoorbeelden zijn alleen ter illustratie en dienen niet te worden opgevat als een beperking voor de omvang van de onderhavige uitvinding.

In de volgende formuleringen betekent "werkzaam bestanddeel" een verbinding 25 volgens deze uitvinding.

93

Formulering 1: Gelatine-capsules

Harde gelatine-capsules worden bereid onder toepassing van het volgende: Bestanddeel Hoeveelheid (mg/capsule) W erkzaam bestanddeel 0,25-100

Zetmeel, NF 0-650

Zetmeel, vloeiend poeder 0-50

Siliconenvloeistof 350 centistokes 0-15

Een tabletformulering wordt bereid onder toepassing van de volgende bestanddelen:

Formulering 2: Tabletten

Bestanddeel Hoeveelheid (mg/tablet)

Werkzaam bestanddeel 0,25-100

Cellulose, microkristallijn 200-650

Siliciumdioxide, pyrogeen 10-650

Stearaatzuur 5-15

De componenten worden gemengd en gecomprimeerd voor het vormen van tabletten.

Daarnaast hebben tabletten die ieder 0,25-100 mg werkzame bestanddelen bevatten de volgende samenstelling:

Formulering 3: Tabletten

Bestanddeel Hoeveelheid (mg/tablet)

Werkzaam bestanddeel 0,25-100

Zetmeel 45

Cellulose, microkristallijn 35

Polyvinylpyrrolidon (als 10% oplossing in water) 4 Natriumcarboxymethylcellulose 4,5

Magnesiumstearaat 0,5

Talk ï

De werkzame bestanddelen, zetmeel en cellulose worden door een nr. 45 mesh U.S. zeef gevoerd en grondig gemengd. De oplossing van polyvinylpyrrolidon wordt 5 gemengd met de verkregen poeders, welke vervolgens door een nr. 14 mesh U.S. zeef 94 worden gevoerd. De aldus bereide granules worden gedroogd bij 50°-60°C en door een nr. 18 mesh U.S. zeef gevoerd. Natriumcarboxymethylzetmeel, magnesiumstearaat en talk, welke eerst door een nr. 60 U.S. zeef zijn gevoerd, worden vervolgens toegevoegd aan de granules, die, na mengen, worden gecomprimeerd met een tabletteringsmachine 5 voor het geven van tabletten.

Suspensies die ieder 0,25-100 mg werkzaam bestanddeel per dosis van 5 ml bevatten worden als volgt bereid:

Formulering 4: Suspensies

Bestanddeel Hoeveelheid (mg/5 ml)

Werkzaam bestanddeel 0,25-100 mg

Natriumcarboxymethylcellulose 50 mg

Siroop 1,25 mg

Benzoëzuur-oplossing 0,10 ml

Smaakstof q.v.

Kleurstof q.v.

Gezuiverd water tot 5 ml 10 Het werkzame bestanddeel wordt door een nr. 45 mesh U.S. zeef gevoerd en gemengd met natriumcarboxymethylcellulose en siroop voor het vormen van een gladde pasta. De benzoëzuur-oplossing, smaakstof en kleurstof worden verdund met een gedeelte van het water en onder roeren toegevoegd. Vervolgens wordt voldoende water toegevoegd voor het geven van het vereiste volume.

15 Er wordt een aerosol-oplossing bereid die de volgende bestanddelen bevat:

Formulering 5: Aerosol

Bestanddeel Hoeveelheid (gew.%)

Werkzaam bestanddeel 0,25

Ethanol 25,75

Stuwstof 22 (chloordifluormethaan) 70,00

Het werkzame bestanddeel wordt gemengd met ethanol en het mengsel wordt toegevoegd aan een portie van de stuwstof 22, afgekoeld tot 30°C en overgebracht in 95 een afvul inrichting. De vereiste hoeveelheid wordt vervolgens toegevoerd aan een houder van roestvast staal en verdund met de resterende stuwstof. Vervolgens worden de klep-eenheden aangebracht op de houder.

Zetpillen worden als volgt bereid: 5

Formulering 6: Zetpillen

Bestanddeel Hoeveelheid (mg/zetpil)

Werkzaam bestanddeel 250

Verzadigde vetzuurglyceriden 2000

Het werkzame bestanddeel wordt door een nr. 60 mesh U.S. zeef gevoerd en gesuspendeerd in de verzadigde vetzuurglyceriden die men eerst heeft laten smelten onder toepassing van de minimaal noodzakelijke warmte. Het mengsel wordt 10 vervolgens uitgegoten in een zetpilmal met een nominale capaciteit van 2 g en men laat het afkoelen.

Een intraveneuze formulering wordt als volgt bereid:

Formulering 7: Intraveneuze oplossing

Bestanddeel Hoeveelheid

Werkzaam bestanddeel opgelost in ethanol 1% 20 mg

Intralipide1M emulsie 1000 ml 15 De oplossing van de voorgaande bestanddelen wordt intraveneus met een snelheid van ongeveer 1 ml per minuut aan een patiënt toegediend.

Zachte gelatine-capsules worden bereid onder toepassing van het volgende:

Formulering 8: Zachte gelatine-capsule-met-olie-formulering

Bestanddeel Hoeveelheid (mg/capsule)

Werkzaam bestanddeel 10-500

Olijfolie of Miglyol1M olie 500-1000 20 Het voorgaande werkzame bestanddeel kan ook een combinatie van middelen zijn.

96

Algemene experimentele werkwijzen

De volgende voorbeelden worden gegeven teneinde de deskundige te voorzien 5 van een beschrijving hoe de onderhavige verbindingen, samenstellingen en werkwijzen worden bereid en geëvalueerd, en zijn slechts voorbeelden van de uitvinding en het is niet de bedoeling dat deze de omvang van de uitvinding beperken. Tenzij anders aangegeven is het percentage het gewichtspercentage met betrekking tot de component en het totale gewicht van de samenstelling, is de temperatuur in °C of is deze omgevings-10 temperatuur en is de druk atmosferische of vrijwel atmosferische druk. In de handel verkrijgbare reagentia werden toegepast zonder verdere zuivering. Kamer- of omgevingstemperatuur heeft betrekking op 20-25°C. Alle niet-waterige reacties werden voor het gemak en voor het vergroten van de opbrengst uitgevoerd onder een stikstof-atmos-feer. Concentreren onder vacuüm betekent dat een rotatieverdamper werd toegepast. De 15 namen voor de verbindingen volgens de uitvinding werden gecreëerd met de Autonom 2.0 PC-batch versie van Beilstein Informationssysteme GmbH (ISBN 3-89536-976-4) of met Chemdraw® Ultra, CambridgeSoft Corporation, Cambridge MA. De weergegeven chemische structuren kunnen slechts voorbeelden zijn van de algemene structuur of van beperkte isomeren en omvat geen specifieke stereochemie zoals wordt vermeld in 20 de chemische naam. Enkele van de voorbeelden worden bereid in een racemische vorm en een werkwijze voor het scheiden van de racemaat in afzonderlijke enantiomeren wordt beschreven. In bepaalde gevallen wordt de absolute stereochemie van deze enantiomeren niet bepaald, maar beide vallen echter binnen de omvang van deze uitvinding. In deze gevallen houdt de volgorde van weergave van de enantiomere structu-25 ren geen verband in met de chromatografische volgorde van scheiding daarvan.

NMR-spectra werden bij omgevingstemperatuur met een Yarian Unity 400 (Vartan Co., Palo Alto, CA) NMR-spectrometer openomen. Chemische verschuivingen worden weergegeven in delen per miljoen (6) ten opzichte van een externe standaard (tetramethylsilaan). De piek-vormen worden als volgt aangeduid: s, singlet; d, doublet; 30 t, triplet; q, quartet; m, multiplet, waarbij het voorvoegsel br een verbreed signaal aangeeft. De gegeven gegevens van de koppelingsconstante (J) hebben een maximale fout van ±0,41 Hz als gevolg van de digitalisatie van de opgenomen spectra. Massaspectra werden verkregen door (1) atmosferische-druk-chemische-ionisatie 97 (APCI) op afwisselend positieve en negatieve ion-wijze onder toepassing van een Fisons Platform II spectrometer of een Micromass MZD spectrometer (Micromass, Manchester, UK) of (2) elektrospray-ionisatie op afwisselend positieve en negatieve ion-wijze onder toepassing van een Micromass MZD spectrometer (Micromass, 5 Manchester, UK) met een Gilson LC-MS-koppeling (Gilson Instruments, Middleton, WI), (3) een QP-8000 massaspectrometer (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japan) die wordt bedreven op een positieve of negatieve enkele-ion-volg-wijze, onder toepassing van elektrospray-ionisatie of atmosferische-druk-chemische-ionisatie of (4) een Hewlett Packard HP6890 gaschromatograaf (Agilent Technologies Ine., Santa Clara, 10 CA) gekoppeld aan een Hewlett-Packard HP5973 elektronen-inslag-viervoudige-massaspectrometer. Waar de intensiteit van chloor en broom bevattende ionen wordt beschreven werd de verwachte intensiteitsverhouding geobserveerd (ongeveer 3:1 voor Cl/ Cl bevattende ionen en 1:1 voor Br/ Br bevattende ionen) en wordt de positie van alleen het ion met de lagere massa gegeven, tenzij anders vermeld.

15 Kolomchromatografie werd uitgevoerd met ofwel Baker Silica Gel (40 pm) (J.T.

Baker, Phillipsburg, N.J.) ofwel Silica Gel 60 (40-63 pm) (EM Sciences, Gibbstown, N.J.). Verdampingschromatografie werd uitgevoerd onder toepassing van een Flash 12 of Flash 40 kolom (Biotage, Dyar Corp., Charlottesville, VA) of een CombiFlash Companion systeem onder toepassing van RediSep siliciumdioxide-kolommen 20 (Teledyne Isco, Teledyne Technologies Company, Lincoln, NE). Radiale chromatografie werd uitgevoerd onder toepassing van een chromatotron Model 7924T (Harrison Research, Palo Alto, CA). Preparatieve HPLC-zuivering werd uitgevoerd met een Shimadzu 10A preparatief HPLC-systeem (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japan) onder toepassing van een model SIL-10A autosampler en model 8A HPLC-25 pompen.

Preparatieve HPLC-zuivering werd uitgevoerd met een Waters Fractionlynx LC/MS/UV-systeem (Waters Corporation; Milford, MA, USA) dat is voorzien van een model 2767 injector/collecto, model 2525 binaire pomp met een hoog debiet welke is gemodificeerd met een model 515 pomp met laag debiet, een model 515 pomp met laag 30 debiet voor een aanvullingsstroom, model GS-splitter, model ZQ single-quad- massaspectrometer aan de kant met laag debiet, model 996 fotodiode-array UV-detector aan de kant met hoog debiet in pre-collector-configuratie en een model 2487 tweevoudige UV-detector aan de kant met hoog debiet in post-collector-configuratie.

98

Fractie-trigger wordt uitgevoerd met de ZQ-detector op elektrospray-positieve (ESI+) ionisatie-wijze welke wordt bedreven op enkelvoudige massa-triggering. Chromatografiewerkwijzen zijn ofwel met 0,05% trifluorazijnzuur ofwel met 0,1% ammoniak gemodificeerde acetonitril-water-gradiënten. In het geval van met zuur 5 gemodificeerde gradiënten wordt gewoonlijk Waters Symmetry C8 of Cl 8 (19 x 50 mm; 5 pm) toegepast en onder basisomstandigheden Waters Xterra MS C8 of MS Cl 8 (19 x 50 mm; 5 pm).

Met een magnetron ondersteunde reacties werden uitgevoerd in een Ermys Optimizer van Personal Chemistry (Uppsala, Zweden) of een Biotage Initiator van 10 Biotage (Uppsala, Zweden).

Optische rotaties werden bepaald met behulp van een Jasco P-1020 Polarimeter (Jasco Inc., Easton, MD).

Dimethylformamide ("DMF"), tetrahydrofuran ("THF"), tolueen en dichloormethaan ("DCM") waren van watervrije kwaliteit, geleverd door Aldrich 15 Chemical Company (Milwaukee, WI). Tenzij anders gespecificeerd werden reagentia gebruikt zoals deze zijn verkregen uit commerciële bronnen. De uitdrukkingen "geconcentreerd" en "verdampt" hebben betrekking op de verwijdering van oplosmiddel bij 1-200 mm kwikdruk met een rotatieverdamper met een badtemperatuur lager dan 45°C. De afkorting "min" betekent "minuten" en "h" of "hr" betekent "uur". 20 De afkorting "gm" of "g" betekent gram. De afkorting "pi" of "pL" betekent microliter.

Bereiding 1: 2-broom-5-(trifluormethyl)benzoëzuur

O

25

Aan een oplossing van n-BuLi (26,7 ml van een 2,5 M oplossing in tetrahydrofuran (THF), 66,7 mmol) in THF (130 ml) van -78°C werd 2,2,6,6-tetramethylpiperidine (22,5 ml, 133,4 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij -78°C geroerd en vervolgens werd de temperatuur voorzichtig met 30 vloeibare stikstof verlaagd tot -100°C. Er werd onverdund l-broom-4-(trifluormethyl)benzeen (15 g, 66,7 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 6 uur op 99 -100°C gehouden en uitgegoten op vers gemalen droogijs. Het verkregen mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het resterende oplosmiddel werd verwijderd door verdampen. Er werd water (150 ml) toegevoegd en het mengsel werd geëxtraheerd met diethylether (3 x 50 ml). De waterige laag werd aangezuurd met behulp van 5 geconcentreerd zoutzuur (HC1) en geëxtraheerd met dichloormethaan (3 x 50 ml). De samengevoegde organische lagen werden gewassen met verzadigd natriumchloride (NaCl) (75 ml), gedroogd met magnesiumsulfaat (MgS04), gefiltreerd en geconcentreerd, waarbij de titelverbinding als een witt vaste stof (5,41 g) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,7 (dd, J=8,4, 2,3 Hz, 1H), 7,9 (d, J=8,4 Hz, 10 1H), 8,3 (d, J=2,0 Hz, 1H). MS (ES+) Berekend: 267,93, gevonden: 266,7 (M-l).

Bereiding 2: ('2-broom-5-ttrifluormethvnfenvl)methanol F3CYY"oh 15

Aan een met ijs gekoelde oplossing van 2-broom-5-(trifluormethyl)benzoëzuur (5,16 g, 19 mmol) in THF (50 ml) werd een boraan-tetrahydrofuran-complex (70 ml van een 1 M oplossing in THF, 70 mmol) toegevoegd. Het verkregen mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het reactiemengsel werd afgeschrikt met methanol. 20 Het oplosmiddel werd verwijderd. Het residu werd verdeeld tussen ethylacetaat (3 x 40 ml) en 1 M natriumwaterstofcarbonaat (50 ml). De samengevoegde organische lagen werden gewassen met verzadigd NaCl (50 ml), gedroogd (MgS04) en geconcentreerd, waarbij de titelverbinding als een olie (4,85 g) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ 4,8 (s, 2H), 7,5 (m, 1H), 7,7 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,8 (d, J=l,6 Hz, 1H).

25

Bereiding 3: l-broom-2-(broommethvl)-4-(trifluormethyl)benzeen 30 100

Aan een oplossing van (2-broom-5-(trifluormethyl)fenyl)methanol (4,7 g, 18 mmol) in dichloormethaan (50 ml) van -10°C werd koolstoftetrabromide (CBr4) (7,17 g, 21,6 mmol) toegevoegd. Het verkregen mengsel werd 15 minuten bij -10°c geroerd. Vervolgens werd langzaam portiegewijs trifenylfosfien (5,61 g, 21,4 mmol) 5 toegevoegd. Dit mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het mengsel werd verdeeld tussen verzadigd ammoniumchloride (NH4C1) (50 ml) en dichloormethaan (2 x 50 ml), e samengevoegde organische lagen werden gewassen met verzadigd NaCl (50 ml), gedroogd (MgS04) en geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door verdampingschromatografïe (silikagel) (geëlueerd met 3:1 hexanen-ethylacetaat), 10 waarbij de titelverbinding als een witte vaste stof (4,01 g) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 4,6 (s, 2H), 7,5 (dd, J=8,3, 1,6 Hz, 1H), 7,8 (m, 2H).

Bereiding 4: 2-methvl-2H-tetrazol-5-amine \ 15 V^NH,

De titelverbinding werd bereid volgens de werkwijzen die zijn beschreven in J. Am. Chem. Soc. 1954, 76, 923.

20 Bereiding 5: N-f3.5-bisitrifluormethvObenzvr)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine \ X ,CF3 H 1/1 CF3

Een mengsel van 3,5-bis(trifluormethyl)benzaldehyde (4 g, 16,5 mmol), 2-25 methyl-2H-tetrazool-5-amine (1,96 g, 19,8 mmol) en moleculaire zeven (korrels van 5-ÏOA) in tolueen (50 ml) werd 4 uur onder terugvloeikoeling gekookt, waarna het oplosmiddel werd verwijderd. Er werden ethanol (50 ml) en natriumboorhydride (1,25 101 g, 33 mmol) toegevoegd. Het verkregen mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens verdeeld tussen verzadigde NH4CI (50 ml) en ethylacetaat (2 x 50 ml). De samengevoegde organische lagen werden gewassen met verzadigde NaCl (50 ml), gedroogd (MgS04), gefiltreerd en geconcentreerd, waarbij de 5 titelverbinding als een witte vaste stof (4,7 g) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 4,2 (s, 3H), 4,7 (s, 1H), 4,7 (s, 1H), 5,0 (t, J=6,0 Hz, 1H), 7,8 (s, 1H), 7,9 (s, 2H). MS (ES+) Berekend: 325,08, gevonden: 325,8 (M+l).

Bereiding 6: t3.5-bis-trifluormethvl-benzvlV(2-broom-5-trifluormethvl-benzvlV(2- 10 methvl-2H-tetrazool-5 - vDamine \ n-n vVvv* 1 Jx Ch

Br 3

Aan een oplossing van N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-15 5-amine 93,9 g, 12 mmol) in THF (50 ml) van kamertemperatuur werd kalium-tert-butoxide (KOtBu) (13,2 ml van een 1 M oplossing, 13,2 mmol) gevolgd door 1-broom- 2-(broommethyl)-4-(trifluormethyl)benzeen (4 g, 12,6 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd extra KOtBu in THF (13,2 ml van een 1 M oplossing, 13,2 mmol) toegevoegd en het mengsel werd 2 uur bij 20 kamertemperatuur geroerd. Het reactiemengsel werd verdeeld tussen water (50 ml) en ethylacetaat (3 x 50 ml). De samengevoegde organische lagen werden gewassen met verzadigde NaCl (50 ml), gedroogd (MgS04) en geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door verdampingschromatografie (silikagel) (geëlueerd met 3:1 hexaan-ethylacetaat), waarbij de titelverbinding (4,72 g) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, 25 CDCI3) δ 4,2 (s, 3H), 4,8 (s, 2H), 4,9 (s, 2H), 7,4 (dd, J=8,2, 1,7 Hz, 1H), 7,5 (d, J=1,7 Hz, 1H), 7,7 (m, 3H), 7,8 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 561,02, gevonden: 561,7 (M+l).

102

Bereiding 7: 2-iT(3.5-bis-trifluormethvl-benzyD-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vl)aminol-methvl 1 -4-tri fluormethvl-benzonitril \

p-H

\acn <*.

5

Een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-broom-5-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine (6 g, 10,6 mmol) in DMF (20 ml) van kamertemperatuur werd gedeoxygeneerd door gedurende 10 minuten stikstofgas door de oplossing te borrelen. Er werd kopercyanide (CuCN) (1,14 g, 12,8 mmol) aan het 10 reactiemengsel toegevoegd en dit werd 16 uur op 170°C verhit. De reactie werd afgekoeld tot kamertemperatuur en verdund met ethylacetaat. De organische laag werd twee keer gewassen met een verzadigde waterige ammoniumchloride-oplossing en werd vervolgens met een zoutoplossing gewassen. Deze werd gedroogd boven natriumsulfaat en geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door 15 verdampingschromatografie (silikagel, 320 g) (geëlueerd over een gradiënt van 5-25% ethylacetaat en hexaan), waarbij 2,59 g (95%) van de titelverbinding als een gele olie werd verkregen. ’H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 4,2 (s, 3H), 4,82 (s, 2H), 4,9 (s, 2H), 7,6 (dd, 1H), 7,7 (s, 2H), 7,8 (s, 2H), 7,8 (dd, 1H). MS (ES4) Berekend: 508,1, gevonden: 509,2 (M+l).

20

Bereiding 8: 2- (Γ(3.5-bis-trifluormethvl-benzvlV(2-methvl-2H-tetrazool-5-vBaminol-methyl I -4-tri fluormethyl-benzaldehvde 103 \ N~n cf3 o

Een oplossing van 2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-benzonitril (5,45 g, 10,7 mmol) in dichloormethaan 5 werd met een aceton/droogijs-bad afgekoeld tot -20°C. Aan deze oplossing werd druppelsgewijs 7,5 ml van een 1,5 M oplossing van diisobutylaluminiumhydride (D1BAL-H) (11,25 mmol) in tolueen toegevoegd. Het reactiemengsel werd 4 uur geroerd, terwijl het ijsbad opwarmde tot kamertemperatuur. De reactie werd afgekoeld tot 0°C in een ijsbad en er werd voorzichtig vast ijs (ongeveer 8 g) aan het 10 reactiemengsel toegevoegd, dat vervolgens 12 uur onder opwarmen tot kamertemperatuur heftig werd geroerd. Er werd dichloormethaan aan het mengsel toegevoegd. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat en vervolgens geconcentreerd, waarbij een gele olie werd verkregen. Het ruwe product werd geabsorbeerd op silikagel (120 g) en gezuiverd door normale-fase-15 verdampingschromatografie (ISCO gradiënt 5-25% ethylacetaat/hexaan), waarbij 4,4 g (80%) van de titelverbinding als een gele olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ 4,2 (s, 3H), 4,8 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 7,5 (s, 1H), 7,7 (s, 2H), 7,78 (m, 1H), 7,9 (dd, 1H). MS (ES+) Berekend: 511,1, gevonden: 512,2 (M+l).

20 Voorbeeld 1: (3,5-bis-trifluormethvl-benzvl)-r2-(cvclohexvl-methoxv-methvn-5-tri-fluormethvl-benzvn-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vDamine 104 \ Ij n-n Sr

N., ï J

O

Stap A: Bereiding van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanol 5

\ YJ

N-N

N, ft J ir^N

<=oC

o

Aan een oplossing van 2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra-zool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-benzaldehyde (244 mg, 0,48 mmol) in THF 10 (3 ml) werd bij 0°C cyclohexylmagnesiumbromide (18% oplossing in THF, 0,6 ml, 0,57 mmol) toegevoegd en men liet de reactie opwarmen tot kamertemperatuur en er werd een nacht geroerd. Het reactiemengsel werd afgeschrikt met waterig NH4C1 en geëxtraheerd met ethylacetaat. De organische laag werd gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het 15 residu werd gezuiverd over een 25+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexaan), waarbij 110 mg (39%) van de titelverbinding werd verkregen. ‘H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 1,0 (m, 6H), 1,6 (m, 3H), 1,8 (m, 1H), 1,9 (d, J=12,4 Hz, 1H), 2,2 (s, 1H), 4,2 (s, 3H), 4,6 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,8 (m, 4H), 7,3 (s, 1H), 105 7,5 (m, 2H), 7,6 (s, 2H), 7,8 (s, 1H)). MS (ES4) Berekend: 595,2, gevonden: 596,4 (M+l).

Stap B: Bereiding van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy- 5 methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine F3CY^YCF3

V-N

N, j( I

O

Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-10 tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanol (35,5 mg, 0,059 mmol) in THF (0,3 ml) werd bij 0°C onder stikstof natriumhydride (4,8 mg, 0,12 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. De reactie werd 30 min geroerd, waarbij men deze liet opwarmen tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd vervolgens druppelsgewijs bij 0°C behandeld met methyljodide (11 μΐ, 0,179 15 mmol). Het ijsbad werd verwijderd na het toevoegen en de reactie werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd gezuiverd onder toepassing van silikagel-chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding (30,1 mg, 83%) als een kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 20 MHz, CDCb) 6 ppm 1,1 (m, 6H), 1,5 (m, 1H), 1,6 (m, 2H), 1,7 (m, 1H), 1,9 (d, J=12,9 Hz, 1H), 3,1 (s, 3H), 4,1 (d, J=7,l Hz, 1H), 4,2 (s, 3H), 4,7 (d, J=15,8 Hz, 1H), 4,9 (d, J=16,2 Hz, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,5 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,6 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,7 (s, 2H), 7,8 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 609,2, gevonden: 610,4 (M+l).

25 Voorbeeld 2 en 3: (R)- en rS)-(3.5-bis-trifluormethvl-benzylVr2-(cvclohexvl-methoxv-methvO-5-trifluormethvl-benzvH-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vDamine 106

FjC^^CF, fjCs^wCFa n-n ^n-n w %-v FA J FjCy^

De enantiomeren van voorbeeld 1 werden als volgt bereid. Het racemische 5 mengsel van de alcohol van stap A van voorbeeld 1 (110 mg) werd opgelost in methanol, geïnjecteerd in een Chiralpak AD kolom (2,1 cm x 25 cm) (Chiral Tech Ine. Westchester, PA, USA) en geëlueerd onder toepassing van heptaan / 2-propanol (90:10, 20 ml/min). Enantiomeer 1 (37 mg, 97,5% ee) elueerde na 7,364 min en enantiomeer 2 (18,8 mg, 85% ee) elueerde na 8,948 min uit de Chiralpak AD-H kolom. Ieder 10 enantiomeer werd omgezet in de titelverbinding volgens de werkwijze die is beschreven in stap B van voorbeeld 1. MS gevonden voor ieder enantiomeer: 610,4 (M+l).

Voorbeeld 4: (S!-(3.5-bis-trifluormethvl-benzvB-!2-icvclohexvl-methoxv-methvlV5-15 trifluormethvl-benzyl1-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vl)amine

N* X J

ι-τττ TXo.

o 107

Stap A: Bereiding van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanol \ Tj ,n"n

N* x J

n^n f3c 5

Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-broom-5-trifluorme-thyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine (van bereiding 6, 6,08 g, 10,8 mmol) in THF werd bij 0°C isopropylmagnesiumchloride/lithiumchloride (21 ml, 27 mmol) in THF toegevoegd. Het isopropylmagnesiumchloride/lithiumchloride-reagens werd be-10 reid volgens de werkwijze die is beschreven in Angew. Chem. Int. Ed. 2004, 43, 3333. Het mengsel werd 3,5 uur bij 0°C geroerd. Er werd cyclohexaancarboxaldehyde (3,3 g, 29 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 3,5 uur bij 0°C geroerd, afgeschrikt met verzadigd waterig ammoniumchloride en geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen (200 ml) werden gewassen met waterig natriumwaterstofcar-15 bonaat en een zoutoplossing, gedroogd met natriumsulfaat en onder vacuüm geconcen treerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 65i silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan) waarbij de titelverbinding als gele olie (2,98 g, 46%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,92-1,17 (m, 5H), 1,24 (d, J=15,77 Hz, 1H), 1,54-1,60 (m, 1H), 1,61-1,67 (m, J=2,07 Hz, 2H), 20 1,73-1,79 (m, 1H), 1,93 (d, J= 12,86 Hz, 1H), 2,25 (s, 1H), 4,20 (s, 3H), 4,65 (d, J=7,05

Hz, 1H), 4,70 (d, J= 15,77 Hz, 1H), 4,76 (t, J=15,35 Hz, 2H), 4,86 (d, J=15,77 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,50-7,59 (m, 2H), 7,65 (s, 2H), 7,77 (s, 1H). MS (ES4) Berekend: 595,2, gevonden: 596,5 (M+l).

25 Stap B: Bereiding van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanon 108 \ ij N-n

Η. X J

uCo

Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra-zool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanol (5,46 g, 9,17 5 mmol) in dichloormethaan (150 ml) werd bij kamertemperatuur Dess-Martin per-jodinaan (4,36 g, 10,3 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 2 uur bij kamertemperatuur geroerd, verdund met ether (50 ml) en er werd 1 N natriumhydroxide (40 ml) toegevoegd. Het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat (2 x 100 ml). De samengevoegde organische lagen werden gewassen met 1 N natriumhydroxide (2 x 40 ml) en 10 een zoutoplossing (50 ml), gedroogd met natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het ruwe product werd gezuiverd door chromatografie over een 40+M silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelver-binding als een lichtgele olie (5,2 g, 96%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 1,16-1,42 (m, 5H), 1,70 (d, J=12,03 Hz, 1H), 1,80 (d, J=9,54 Hz, 4H), 15 2,96-3,05 (m, 1H), 4,18 (s, 3H), 4,79 (s, 2H), 4,82 (s, 2H), 7,53 (s, 1H), 7,57 (d, J=8,30

Hz, 1H), 7,64 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,66 (s, 2H), 7,72 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 593,2, gevonden 594,5 (M+l).

Stap C: Bereiding van (S)-(2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-20 5-yl)amino]methyl} -4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanol 109 \ T y

n-n Y

N^N

F3cyyJ

KjX^OH

Een mengsel van [IrHCl2(COD)]2 (54,4 mg, 0,073 mmol) en (lR,2R)-N,N'-bis[2-(difenylfosfino)benzyl]cyclohexaan-l,2-diamine (44,8 mg, 0,067 mmol) in isopropanol 5 werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd. Er werd een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethy 1-benzy l)-(2-methyl-2 H-tetrazool-5 -y l)amino] methyl} -4-trifluorme-thyl-fenyl)cyclohexyl-methanon in isopropanol toegevoegd aan het mengsel, gevolgd door kaliumhydroxide (44,8 mg, 0,799 mmol), en er werd 18 uur bij kamertemperatuur geroerd. Isopropanol werd onder vacuüm verwijderd en het ruwe product werd gezui-10 verd over een 40+M silika-kolom van Biotage, geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan, waarbij 3,7 g (92%) van de titel verbinding werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 0,92-1,17 (m, 5H), 1,24 (d, =15,77 Hz, 1H), 1,54-1,60 (m, 1H), 1,61-1,67 (m, J=2,07 Hz, 2H), 1,73-1,79 (m, 1H), 1,93 (d, J= 12,86 Hz, 1H), 2,25 (s, 1H), 4,20 (s, 3H), 4,65 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,70 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,76 (t, J=15,35 15 Hz, 2H), 4,86 (d, J=15,77 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,50-7,59 (m, 2H), 7,65 (s, 2H), 7,77 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 595,2, gevonden: 596,5 (M+l). 95,9% ee, bepaald door chirale HPLC over Chiralpak AD-H (4,6 mm x 25 cm), elueerde na 6,912 min onder toepassing van 90/10 heptaan/IPO (1 ml/min).

20 Stap D: Bereiding van (S)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine 110

Vn

N* X J

n^ijT

ó

Aan een oplossing van (S)-2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanol (1,81 g, 3,04 5 mmol) in THF (20 ml) werd bij 0°C natriumhydride (60% dispersie in anorganische olie, 254,4 mg, 6,4 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, afgekoeld tot 0°C en er werd methyljodide (1,31 g, 9,2 mmol) toegevoegd. het mengsel werd 5 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd water (10 ml) toegevoegd en het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde or-10 ganische lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd met natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+M silika-kolom van Biotage (geelueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan) waarbij de titelverbinding als een kleurloze olie (1,77 g, 96%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 0,93-1,14 (m, 5H), 1,18 (d, J=10,79 Hz, 1H), 1,43-15 1,54 (m, 1H), 1,59-1,65 (m, J=4,56 Hz, 2H), 1,68-1,74 (m, J=2,49 Hz, 1H), 1,90 (d, J=12,03 Hz, 1H), 3,06 (s, 3H), 4,08 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,71 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,88 (d, J=16,18 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,49 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,55 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,66 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 609,2, gevonden: 610,5 (M+l). [<x]20d = -36,49° (c = 10,05 mg/ml, aceton).

20

Bepaling van de absolute configuratie van (S)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cy- clohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5- yl)amine 25 Stap A: Bereiding van (2-broom-5-trifluormethyl-benzyloxy)-tert-butyl-dimethyl-silaan

Ill o v ^Br

Aan een oplossing van (2-broom-5-(trifluormethyl)fenyl)methanol (van bereiding 2, 10 g, 39 mmol) in DMF (20 ml) werd imidazool (5,87 g, 86,3 mmol) gevolgd door 5 tert-butyldimethylsilylchloride (7,11 g, 47,2 mmol) toegevoegd en de reactie werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het mengsel werd verdeeld tussen ethylacetaat en water. De organische laag werd gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+M silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-20% 10 ethylacetaat in heptaan) (5CV), 20% (1CV), waarbij een kleurloze olie (14 g, 97%) van de titelverbinding werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,15 (s, 6H), 0,98 (s, 9H), 4,75 (s, 2H), 7,36 (m, 1H), 7,60 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H)). GCMS: 311 (M-57, t-bu).

15 Stap B: Bereiding van [2-(tert-butyl-dimethyl-silanyloxymethyl)-4-trifluormethyl-fe-nyljcyclohexyl-methanon I J< 9*0 20 Aan een oplossing van (2-broom-5-trifluomethyl-benzyloxy)-tert-butyl-dimethyl- silaan (3,69 g, 10 mmol) in THF (35 ml) werd bij kamertemperatuur isopropylmagne-siumchloride/lithiumchloride (21 ml, 1,5 M, 30,5 mmol) in THF toegevoegd. Het mengsel werd 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. Transmetallering werd gevolgd door GC-MS. Het reactiemengsel werd afgekoeld tot -78°C, er werd CuCN.2LiCl (10 112 ml, 1 Μ, 10,0 mmol) toegevoegd en er werd 30 minuten geroerd. Er werd cyclohexaan-carbonylchloride (2,93 g, 20,0 mmol) in 3 ml THF aan het reactiemengsel toegevoegd. Men liet het reactiemengsel opwarmen tot kamertemperatuur en het werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt door uitgieten in een verza-5 digde waterige oplossing van ammoniumchloride in ammoniumhydroxide en er werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen (200 ml) werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het ruwe product werd gezuiverd over een kolom van Biotage (40+M), onder elutie met ethylacetaat in heptaan, beginnend met 0-20% (10CV), 20% (2CV), 10 waarbij de titelverbinding (4,5 g, 41,5%) als kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCh) 5 ppm 0,09 (s, 6H), 0,9 (s, 9H), 1,2 (m, 4H), 1,7 (m, 4H), 2,4 (m, 2H), 3,1 (m, 1H), 4,8 (s, 2H), 7,5 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,7 (d, J=8,3 Hz, 1H), 8,0 (s, 1H). GCMS: Berekend: 400, gevonden: 343 (M-57, t-bu).

15 Stap C: Bereiding van (S)-[2-(tert-butyl-dimethyl-silanyloxymethyl)-4-trifluormethyl-fenyljcyclo hexyl- methano 1 cr ^

T

20 Een mengsel van [IrHCl2(COD)]2 (33 mg, 0,044 mmol) en (lR,2R)-N,N'-bis[2- (difenylfosfino)benzyl]cyclohexaan-l,2-diamine (29 mg, 0,044 mmol) in isopropanol (37 ml) werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd. Er werd een oplossing van [2-(tcrt-butyl-dimcthyl-silanyloxymcthyl)-4-trifluormcthyl-fcnyl]-cyclohcxyl-mcthanon (1,6 g, 4 mmol) in isopropanol (5 ml) aan het mengsel toegevoegd, gevolgd door kali-25 umhydroxide (28 mg, 0,5 mmol) en er werd 16 uur geroerd. Isopropanol werd onder vacuüm verwijderd en het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+M silika-kolom van Biotage, geëlueerd met ethylacetaat in heptanen 0% (1CV), 2-20% 113 (IOCV), 20% (2CV), waarbij de titelverbinding (1,4 g, 87%) als kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 0,09 (s, 6H), 0,9 (s, 9H), 1,2 (m, 3H), 1.6 (d, J=7,4 Hz, 1H), 1,7 (m, 4H), 2,0 (m, 1H), 2,2 (m, 1H), 2,4 (m, 1H), 4,5 (m, 1H), 4.7 (d, J=13,7 Hz, 1H), 4,8 (d, J=13,7 Hz, 1H), 7,5 (d, J=l,2 Hz, 2H), 7,6 (s, 1H). Chi-5 rale SFC, retentietijd = 1,93 min, geeft aan dat het product 95,0% ee is. [a]2°D = -12,99° (c = 9,5 mg/ml, aceton).

Stap D: Bereiding van (S)-tert-butyl-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyloxyjdimethyl-silaan 10 1 Jk tysi-

Aan een oplossing van (S)-[2-(tert-butyl-dimethyl-silanyloxymethyl)-4-trifluor-methyl-fenyljcyclohexyl-methanol (1,4 g, 3,5 mmol) in THF (3 ml) werd bij 0°C onder 15 stikstof natriumhydride (278 mg, 7,0 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. De reactie werd 30 minuten geroerd, waarbij men deze liet opwarmen tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd vervolgens druppelsgewijs bij 0°C behandeld met methyljodide (1,5 g, 650 μΐ, 10,4 mmol). Het ijsbad werd verwijderd na het toevoegen en de reactie werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Er werd 20 ethylether toegevoegd en de reactie werd gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven magnesiumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+S kolom van Biotage, onder elutie met ethylacetaat in heptaan 2-30% (10CV) en 30% (3CV), waarbij de titelverbinding (1,0 g, 88%) als kleurloze olie werd verkregen. ’H-NMR (400 MHz, CDCft) δ ppm 0,08 (s, 6H), 0,9 (s, 25 9H), 1,2 (m, 3H), 1,6 (m, 2H), 1,7 (m, 4H), 2,0 (d, J=12,8, 1H), 2,2 (m, 1H), 3,1 (s, 3H), 4,0 (d, J=7,5, 1H), 4,0 (d, J=13,7, 1H), 4,7 (d, J=13,7 Hz, 1H), 7,4 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,5 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,7 (s, 1H).

114

Stap E: Bereiding van (S)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-fenyl]-methanol

OH

5

Aan een oplossing van (S)-tert-butyl-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyloxy]dimethyl-silaan (1,13 g, 2,4 mmol) in THF (5 ml) werd bij kamertemperatuur een oplossing van tetrabutylammoniumfluoride (4,8 ml, 1 M, 4,8 mmol) toegevoegd en er werd een nacht geroerd. Het reactiemengsel werd onder 10 vacuüm geconcentreerd en gezuiverd over een 25+M kolom van Biotage, onder elutie met 0-30% ethylacetaat in heptaan (10 CY), 30% (2 CV), waarbij de titelverbinding (0,6 g, 73%) als een kleurloze olie werd verkregen. ’H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,8 (m, 2H), 1,1 (m, 4H), 1,3 (m, 1H), 1,5 (m, 2H), 1,6 (m, 1H), 2,0 (d, J=12,9, 1H), 2,3 (m, 1H), 3,1 (s, 3H), 4,0 (d, J=7,9, 1H), 4,7 dd, J=13,7 & 7,5 Hz, 2H), 7,3 (d, J=8,3 hz, 15 1H), 7,4 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,7 (s, 1H).

Stap F: Bereiding van (S)-2-broommethyl-l-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-4-trifluor-methyl-benzeen

Br 20

Aan een oplossing van (S)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-fenyljmethanol (340 mg, 1,2 mmol) in dichloormethaan (10 ml) werd bij 0°C koolstofletrabromide (485 mg, 1,46 mmol) toegevoegd en er werd 10 minuten geroerd, 25 waarna trifenylfosfien (383 mg, 1,46 mmol) werd toegevoegd. De reactie werd 1 uur 115 bij 0°C geroerd en opgewarmd tot kamertemperatuur en 16 uur geroerd. De reactie werd onder vacuüm geconcentreerd en gezuiverd over een 25+S kolom van Biotage onder elutie met 0-20% ethylacetaat in heptaan (10 CV), 20% (2CV), waarbij de titelverbinding (270 mg, 66%) als een kleurloze olie werd verkregen. De olie stolde bij 5 bewaren en werd herkristalliseerd uit hexaan, waarbij kristallen (smp. = 43-45°C) werden verkregen die werden onderworpen aan röntgenkristallografie voor het vaststellen van de absolute configuratie. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,1 (m, 4H), 1,3 (m, 2H), 1,6 (m, 3H), 1,7 (m, 1H), 2,0 (d, J=12,6, 1H), 3,2 (s, 3H), 4,2 (d, J=7,9, 1H), 4,5 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,6 (d, J=10,3 Hz, 1H), 7,4 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,5 10 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,6 (s, 1H). [a]20D = -50° (c = 11,5 mg/ml, aceton).

Stap G: Bereiding van (S)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine XF3

Vn t 15

Aan een oplossing van N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool- 5-amine (26,7 mg, 0,082 mmol) in DMF (1 ml) werd bij 0°C onder stikstof natriumhydride (6 mg, 0,1 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. De 20 reactie werd 30 minuten geroerd, waarbij men deze liet opwarmen tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd vervolgens bij 0°C met (S)-2-broommethyI-l-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-4-trifluormethyl-benzeen (25 mg, 0,068 mmol) behandeld. Het ijsbad werd verwijderd na het toevoegen en de reactie werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Er werd water toegevoegd en het mengsel werd 25 geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen werden gewassen met water en een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika- 116 kolom van Biotage, onder elutie met ethylacetaat in heptaan 0-30% (10CV) en 30% (3CV), waarbij de titelverbinding (20 mg, 48%) als kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,07 (m, 4H), 1,2 (m, 2H), 1,46 (m, 1H), 1,57 (m, 2H), 1,61 (m, 1H), 1,90 (d, J=12,4, 1H), 3,06 (s, 3H), 4,08 (d, J=7,l, 1H), 4,2 (s, 3H), 4,70 5 (d, J=15,7, 1H), 4,89 (d, J=15,7, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,50 (d, 7,9, 1H), 7,55 (d, J=7,9, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,77 (s, 1H). [a]20D = -26,6° (c = 13 mg/ml, aceton).

Voorbeeld 5: f3.5-bis-trifhiormethvl-henzvl)-12-rmethoxv-(l-methyl-piperidine-4-yl)-methvll-5-trifluormethvl-benzvl>-('2-methvl-2H-tetrazool-5-vl)amine 10

\ δ J N, X J

O

\

Aan een oplossing van het aldehyde van bereiding 8 (0,230 g, 0,45 mmol) in THF (3 ml) werd bij -78°C een oplossing in THF van l-methylpiperidine-4-magnesiumchlo-15 ride (0,21 g, 1,35 mmol) (Collection of Czechoslovak Chemical Communications, 47(11), 3077-93, 1982) toegevoegd en de oplossing werd 3 uur geroerd terwijl deze opwarmde tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd afgeschrikt met verzadigd NH4CI en geëxtraheerd met CHCI3. Het extract werd gedroogd, geconcentreerd en gezuiverd over silikagel, waarbij de gewenset alcohol werd verkregen. MS (ES+) Bere-20 kend: 610,53, gevonden: 611,5 (M+l).

Aan een oplossing in THF (1 ml) van de voorgaande alcohol (0,024 g, 0,038 mmol) werd NaH (0,0017 g, 0,042 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd en de verkregen suspensie werd 30 min geroerd. Er werd een oplossing in THF (1 ml) van methyl-4-tolueensulfonaat (0,008 g, 0,042 mmol) toegevoegd en het meng-25 sel werd 12 uur onder terugvloeikoeling gekookt. De oplossing werd afgekoeld tot ka- 117 mertemperatuur en werd afgeschrikt met verzadigd NH4CI en geëxtraheerd met CH2CI2. Het extract werd gedroogd, geconcentreerd en gezuiverd, waarbij de titelver-binding werd verkregen. MS (ES+) Berekend: 624,55, gevonden: 625,3 (M+l). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,8 (s, 1H), 7,63 (s, J=8,3 Hz, 2H), 7,57 (d, J=8,3 Hz, 5 2H), 7,50 (d, 2H), 7,38 (s, 1H), 4,90 (d, J=16,2 Hz, 1H), 4,70 (g, .1=14 Hz, 4H), 4,20 (s, 3H), 4,12 (d, J=7 Hz, 1H), 3,05 (s, 3H), 2,80 (d van d, J=16 Hz, 2H), 2,2 (s, 3H), 1,92 (d, J= 12 Hz, 1H), 1,77 (d van t, J=21, 12 Hz, 4H), 1,5 (m, 1H), 1,38 (m, 2H), 1,05 (m, 1H).

Volgens de werkwijze die is beschreven in voorbeeld 1, en onder toepassing van 10 de desbetreffende Grignard- en alkyleringsreagentia, werden de voorbeelden 6 tot en met 15 bereid:

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 6 (3,5-bis-trifluormethyl- ^ 555,2 556,1 benzyl)-[2-( 1 -methoxy- ^ ^ propyl)-5-trifluormethyl- N 3 benzyl]-(2-methyl-2H- tetrazool-5-yl)amine 0 q J*p 7 [2-(l-benzyloxy-propyl)- 631,2 632,1 5-trifluormethyl-benzyl]- ^ ^ (3,5-bis-trifluormethyl- N 3 benzyl)-(2-methyl-2H- tetrazool-5-yl)amine CF3 118

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 8 (3,5-bis-trifluormethyl- 567,2 568,3 N-n benzyl)-[2-(cyclopropyl- *ί u

methoxy-methyl)-5- N N γΓ 'iT

trifluormethyl-benzyl]-(2- F methyl-2H-tetrazool-5- i{^ χΐ^ q yl)amine j 9 (3,5-bis-trifluormethyl- ^ 603,2 604,3 N'-jvj benzyl)-[2-(methoxy- jg h fenyl-methyl)-5- N ^

trifluormethyl-benzyl]-(2- F

methyl-2H-tetrazool-5- O CFjj yl)amine 10 (3,5-bis-trifluormethyl- X 617,2 618,1 N—jg benzyl)-[2-(l-methoxy-2- jg \\

fenyl-ethyl)-5- N N

trifluormethyl-benzyl]-(2- ^3^'nx''>^;~x' methyl-2H-tetrazool-5- xJ. O ^ CFg yl)amine | 11 (3,5-bis-trifluormethyl- \ 623,2 624,4 N~[g benzyl)-[2-(cyclohexyl- K/ u N«S 3s. χ·*. ,CFi ethoxy-methyl)-5- N N jj trifluormethyl-benzyl]-(2- χ^>. χ-*

methyl-2H-tetrazool-5- | ! - LK

yl)amine j j 119

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 12* (R)- (3,5-bis-trifluor- 623,2 624,1 methyl-benzyl)-[2- \ 11 j (cyclohexyl-ethoxy-

methyl)-5-trifluormethyl- VU

benzyl]-(2-methyl-2H- | tetrazool-5-yl)amine ' (Γ o 13** (S)-(3,5-bis-trifluor- CF3 623,2 624,1 methyl-benzyl)-[2- \ jj (cyclohexyl-ethoxy- N | methyl)-5-trifluormethyl-

benzyl]-(2-methyl-2H- c _ J

tetrazool-5-yl)amine || l 14 (3,5-bis-trifluormethyl- V 581,2 582,3

N—M

benzyl)-[2-(cyclopropyl- ^ o

Xv yCFi ethoxy-methyl)-5- N N jj

trifluormethyl-benzyl]-(2- F 3C

methyl-2H-tetrazool-5- j|^ Q

yl)amine ^ 15 (3,5-bis-trifluoimethyl- \ 611,2 612,3 benzyl)-{2-[methoxy- ^ (tetrahydro-pyran-4-yl)- N f4 methyl]-5-trifluormethyl- F benzyl}-(2-methyl-2H-

tetrazool-5-yl)amine T

kr 120 *Voor voorbeeld 12: 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 0,94-1,19 (m, 6H), 1,07 (t, J=7,05 Hz, 3H), 1,43-1,53 (m, 1H), 1,57-1,64 (m, 2H), 1,66-1,75 (m, 1H), 1,94 (d, J=12,86 Hz, 1H), 3,04-3,22 (m, 2H), 4,16 (d, J=7,47 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,71 (s, 5 2H), 4,72 (d, J=16,18 Hz, 1H), 4,88 (d, J= 16,18 Hz, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,49-7,57 (m, 2H), 7,65 (s, 2H), 7,77 (s, 1H).

**Voor voorbeeld 13: 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,94-1,19 (m, 6H), 1,07 (t, J=7,05 Hz, 3H), 1,42-1,53 (m, 1H), 1,59-1,65 (m, 2H), 1,67-1,75 (m, 1H), 1,94 (d, J= 12,86 Hz, 1H), 3,03-3,21 (m, 2H), 4,16 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,71 (s, 10 2H), 4,72 (d, 1=16,18 Hz, 1H), 4,88 (d, J=16,18 Hz, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,50-7,58 (m, 2H), 7,65 (s, 2H), 7,77 (s, 1H).

Voorbeelden 16 en 17: (RV en (Sy(3.5-bis-trifluormethvl-benzvD-l2-rmethoxv-(tetrahvdro-pvran-4-v0methvll-5-trifluormethvl-benzvH-(2-methvl-2H-tetrazool-5-15 vDamine \ X J λ ΊΓΤ

N-N K'f ,n~n T

N. X J Ν,,χ J

N^'N n n 6 6

Stap A: Bereiding van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-20 yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)-(tetrahydro-pyran-4-yl)methanol 121 F3C. .-wCF3 n~n

κχ J

N

f3c

Sr

Aan een suspensie van magnesium in THF werd bij 65°C jood, gevolgd door 4-chloortetrahydropyran in THF toegevoegd. Er werd een kleine hoeveelheid 5 methylmagnesiumbromide (3 druppels) toegevoegd om de reactie te initiëren. Het mengsel werd 1,5 uur bij 65°C geroerd en afgekoeld tot kamertemperatuur. 2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluor-methyl-benzaldehyde in THF werd behandeld met trimethylsilylchloride en 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Vervolgens werd het Grignard-reagens bij 0°C via een spuit 10 aan het aldehyde in THF toegevoegd. Het mengsel werd 1,5 uur bij 0°C geroerd, afgeschrikt met verzadigd waterig ammoniumchloride en geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+S silika-kolom van Biotage 15 (geëlueerd met 0-50% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding als een lichtgele schuim (91,6 mg, 52%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 1,07 (d, J= 13,28 Hz, 1H), 1,27-1,37 (m, 1H), 1,40-1,52 (m, 1H), 1,77-1,89 (m, 2H), 2,5 (s, 1H), 3,19-3,34 (m, 2H), 3,86 (dd, J=ll,41, 3,53 Hz, 1H), 3,99 (dd, J=11,62, 3,73 Hz, 1H), 4,18 (s, 3H), 4,68-4,83 (m, 4H), 4,88 (d, J=15,35 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,55 20 (s, 2H), 7,64 (s, 2H), 7,77 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 597,2, gevonden: 598,4 (M+l).

Het racemische alcoholmengsel werd gescheiden door chirale chromatografie onder toepassing van preparatieve HPLC (kolom: Chiralcel OJ; afmeting: 5 cm x 50 cm; mobiele fase: 95/5 heptaan/ethanol met 0,1% DEA, debiet: 120 ml/minuut). De verwachte preparatieve retentietijden voor de twee enantiomeren bedragen 26 minuten 25 (enantiomeer 1) en 36 minuten (enantiomeer 2). Enantiomeer 1: MS berekend: 597,2, 122 gevonden: 598,4; 100%ee. Enantiomeer 2: MS berekend: 597,2, gevonden: 598,4; 100%ee.

Stap B: (R)-en (S)-(3,5-bis-trifluomethyl-benzyl)-{2-[methoxy-(tetrahydro-pyran-4-yl)-5 methyl]-5-trifluormethyl-benzyl}-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine

?$C

VM

N, £j Ν,-i J

inr n'^-n 6 v

Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra-10 zool-5-yl)amino]methyl} -4-trifluomethyl-fenyl)-(tetrahydro-pyran-4-yl)methanol (enantiomeer 1 van de chirale scheiding van de racemische alcohol (stap A) onder toepassing van preparatieve HPLC, 29,5 mg, 0,049 mmol) in THF (0,2 ml) werd bij 0°C natriumhydride (60% dispersie in anorganische olie, 12 mg, 0,3 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, afgekoeld tot 0°C en er werd 15 methyljodide (70 mg, 30 μΐ, 0,5 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens gezuiverd door chromatografie over een 12+S kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelver-binding als een kleurloze olie (22 mg, 73%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,02 (d, J= 12,45 Hz, 1H), 1,32-1,51 (m, 2H), 1,69-1,83 (m, 2H), 3,06 (s, 20 3H), 3,15-3,31 (m, 2H), 3,86 (dd, J=11,41, 3,53 Hz, 1H), 3,97 (dd, J=ll,62, 4,15 Hz, 1H), 4,15 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,70 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,71 (d, J=5,39 Hz, 2H), 4,91 (d, J=15,77 Hz, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,51 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,58 (d, J=9,13 Hz, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 611,2, gevonden: 612,5 (M+l).

25 Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra- zool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluomethyl-fenyl)-(tetrahydro-pyran-4-yl)methanol (en- 123 antiomeer 2 van de chirale scheiding van de racemische alcohol (stap A) onder toepassing van preparatieve HPLC, 26,4 mg, 0,044 mmol) in THF (0,2 ml) werd bij 0°C natriumhydride (60% dispersie in anorganische olie, 12 mg, 0,3 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, afgekoeld tot 0°C en er werd 5 methyljodide (70 mg, 30 μΙ, 0,5 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens gezuiverd door chromatografie over een 12+S kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelver-binding als een kleurloze olie (20,2 mg, 75%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 1,02 (d, J=12,86 Hz, 1H), 1,33-1,49 (m, 2H), 1,70-1,83 (m, 2H), 3,06 (s, 10 3H), 3,16-3,30 (m, 2H), 3,86 (dd, J=11,41, 3,53 Hz, 1H), 3,97 (dd, J=11,62, 3,73 Hz, 1H), 4,15 (d, J-7,05 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,66-4,77 (m, 3H), 4,91 (d, J=15,77 Hz, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,51 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,58 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 611,2, gevonden: 612,5 (M+l).

15 Voorbeeld 18: 0.5-bis-trifluormethvl-benzy 0-Γ2-( 1 -cvclopentvl-1 -methoxy-ethylV 5-trifluormethvl-benzvll-(,2-methvl-2H-tetrazool-5-vBamine

\ X J

N* X J

tXo.

20 Stap A: Bereiding van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclopentyl-methanol 124

v, V

w

Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-broom-5-trifluonne-thyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine (117,4 mg, 0,21 mmol) in THF (0,5 5 ml) werd bij 0°C iPrMgCl/LiCl in THF (0,35 ml, 0,7 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 3 uur bij 0°C geroerd. Er werd cyclopentaancarboxaldehyde (41 mg, 0,42 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 3 uur bij 0°C geroerd, afgeschrikt met verzadigd waterig ammoniumchloride en geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en 10 onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding als een kleurloze olie (55,5 mg, 46%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 0,97-1,10 (m, 1H), 1,33-1,42 (m, 1H), 1,43-1,70 (m, 5H), 1,76-1,86 (m, 1H), 2,17-2,32 (m, 1H), 2,56 (s, 1H), 4,17-4,20 (m, 3H), 4,69-4,79 15 (m, 3H), 4,81 (s, 1H), 4,90 (d, J=15,77 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,52 (d, J=8,71 Hz, 1H), 7,58 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,66 (s, 2H), 7,77 (s, 1H). NS (ES+) Berekend: 581,2, gevonden: 582,4 (M+l).

Stap B: Bereiding van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-20 yl)amino]methyl} -4-trifluormethyl-fenyl)cyclopentyl-methanon 125

V-N

w

fW

Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra-zool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclopentyl-methanol (44,5 mg, 0,077 5 mmol) in dichloormethaan (1,0 ml) werd bij kamertemperatuur Dess-Martin per-jodinaan-reagens (35,7 mg, 0,084 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 1,5 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werden ether en 1 N natriumhydroxide toegevoegd. Het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder va- 10 cuüm geconcentreerd, waarbij een lichtgele olie (41,6 mg, 94%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,58-1,72 (m, 4H), 1,75-1,88 (m, 4H), 3,48-3,58 (m, 1H), 4,18 (s, 3H), 4,81 (s, 2H), 4,88 (s, 2H), 7,53 (s, 1H), 7,57 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,66 (s, 2H), 7,71 (d, 1H), 7,73 (s, 1H). MS (ES*) Berekend: 579,2, gevonden: 580,4 (M+l).

15 Stap C: Bereiding van l-(2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluomethyl-fenyl)-l-cyclopentyl-ethanol

\ x J

n J

20 Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra- zool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclopentyl-methanon (112,5 mg, 126 0,194 mmol) in THF (2 ml) werd bij kamertemperatuur cerium(III)chloride (71,8 mg, 0,29 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten gesonificecrd en 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het mengsel werd afgekoeld tot 0°C en er werd methylmag-nesiumbromide (0,2 ml van een 3 M oplossing in THF, 0,6 mmol) toegevoegd. Het 5 mengsel werd 1,5 uur bij 0°C geroerd, afgeschrikt met verzadigd waterig ammonium-chloride en geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en geconcentreerd, waarbij een lichtgele olie (115,2 mg, 100%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ ppm 1,30-1,44 (m, 2H), 1,45-1,69 (m, 6H), 1,54 (s, 3H), 2,37-2,48 (m, 10 J=7,88, 7,88 Hz, 1H), 2,90 (s, 1H), 4,16 (s, 3H), 4,83 (s, 2H), 5,08 (d, 1=16,18 Hz, 1H), 5,32 (d, J=16,18 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,41 (s, 2H), 7,71 (s, 2H), 7,76 (s, 1H). MS (ES*) Berekend: 595,2, gevonden: 596,5 (M+l).

Stap D: Bereiding van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(l-cyclopentyl-l-methoxy-15 ethyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine f3«VvCF3

VhV

N* X j 6

Aan een oplossing van l-(2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra-20 zool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)-l-cyclopentyl-ethanol (24,8 mg, 0,041 mmol) in THF (0,2 ml) werd bij 0°C natriumhydride (60% dispersie in anorganische olie, 8 mg, 0,2 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, afgekoeld tot 0°C en er werd methyljodide (30 μΐ, 0,5 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het 25 reactiemengsel werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-20% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding 917 mg, 67%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,07 (t, J=8,09 Hz, 2H), 127 1,3M,65 (m, 6H), 1,55 (s, 3H), 2,26-2,38 (m, 1H), 3,03 (s, 3H), 4,18 (s, 3H), 4,68-4,75 (m, 3= 16,18 Hz, 1H), 4,84 (d, J=16,18 Hz, 1H), 5,08 (d, 3=17,84 Hz, 1H), 5,22 (d, J=17,43 Hz, 1H), 7,31 (d, 3=8,71 Hz, 1H), 7,42-7,47 (m, 2H), 7,71 (s, 2H), 7,76 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 609,2, gevonden: 610,5 (M+l).

5

Voorbeelden 19 en 10: (RV en (51-(3.5-bis-trifluormethvl-benzvn-r2-(l-cyclopentyl-l- methoxv-ethyD-5-trifluormethvl-benzvH-f2-methyl-2H-tetrazool-5-vBamine

Nv 1 J N,, t J

ν-'ΝνΓ 10

De enantiomeren van voorbeeld 18 werden als volgt bereid. Het racemische mengsel van de alcohol van stap C van voorbeeld 18 werd gescheiden door chirale chromatografie onder toepassing van preparatieve HPLC (kolom: ChiralPak AD; afmeting: 5 cm x 50 cm; mobiele fase 98/2 heptaan/lPA; debiet: 120 ml/minuut). De 15 verwachte preparatieve retentietijden voor de twee enantiomeren bedragen 19 minuten (enantiomeer 1) en 25 minuten (enantiomeer 2). Enantiomeer 1: MS berekend: 595,2, gevonden: 100%ee. Enantiomeer 2: MS berekend: 595,2, gevonden: 93,7%ee.

Ieder enantiomeer werd omgezet in de titelverbinding volgens de werkwijze die is beschreven in stap D van voorbeeld 18.

20 Enantiomeer 1: 1H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 1,07 (t, J=8,09 Hz, 2H), 1,31- 1.65 (m, 6H), 1,55 (s, 3H), 2,26-2,38 (m, 1H), 3,03 (s, 3H), 4,18 (s, 3H), 4,68-4,75 (m, J=16,18 Hz, 1H), 4,84 (d, J=16,18 Hz, 1H), 5,08 (d, J=17,84 Hz, 1H), 5,22 (d, J=17,43 Hz, 1H), 7,31 (d, 3=8,71 Hz, 1H), 7,42-7,47 (m, 2H), 7,71 (s, 2H), 7,76 (s, 1H). MS (ES4) Berekend: 609,2, gevonden: 610,5 (M+l).

25 Enantiomeer 2: 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 1,07 (t, 3=8,09 Hz, 2H), 1,31- 1.65 (m, 6H), 1,55 (s, 3H), 2,26-2,38 (m, 1H), 3,03 (s, 3H), 4,18 (s, 3H), 4,68-4,75 (m, 3=16,18 Hz, 1H), 4,84 (d, 3=16,18 Hz, 1H), 5,08 (d, 3=17,84 Hz, 1H), 5,22 (d, 3=17,43 128

Hz, 1H), 7,31 (d, J=8,71 Hz, 1H), 7,42-7,47 (m, 2H), 7,71 (s, 2H), 7,76 (s,.lH). MS (ES^ Berekend: 609,2, gevonden: 610,5 (M+l).

Voorbeeld 21 en 22: (RV en (SV(3.5-bis-trifluormethvl-benzvn-r2-(cvcloDentvl-me-5 thoxv-methvlV5-trifluormethvl-benzvll-f2-methvl-2H-tetrazool-5-vlamine ^cvVcf3 \ Ij \ si j ,n-n Ύ n-n y

N, IJ J

N-^N N^'N

Stap A: Bereiding van (2-((tert-butyldimethylsilyloxy)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)-10 (cyclopcntyl)mcthanol

Aan een oplossing van (2-((tert-butyldimethylsilyloxy)methyl)-4-(trifluorme-15 thyl)fenyl)-(cyclopentyl)methanon (138 mg, 0,35 mmol) in methanol (0,5 ml) werd bij kamertemperatuur natriumboorhydride (40,5 mg, 1,07 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. De methanol werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd verdeeld tussen ethylacetaat en water. De organische laag werd gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder 20 vacuüm geconcentreerd, waarbij de titelverbinding (126,8 mg, 91%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 0,13 (s, 3H), 0,14 (s, 3H), 0,94 (s, 9H), 1,04-1,12 129 (m, 1H), 1,43-1,74 (m, 6H), 1,87-1,97 (m, 1H), 2,30-2,44 (m, 1H), 2,62-2,75 (m, J= 1,66 Hz, 1H), 4,64 (d, J=8,71 Hz, 1H), 4,77 (d, J=12,86 Hz, 1H), 4,92 (d, J=12,86 Hz, 1H), 7,55 (s, 2H), 7,66 (s, 1H).

5 Stap B: Bereiding van (2-(cyclopentyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)benzyloxy)-(tert-butyl)dimethylsilaan i 0'Si- o 10 Aan een oplossing van (2-((tert-butyldimethylsilyloxy)methyl)-4-(trifluorme- thyl)fenyl)-(cyclopentyl)methanol (126,8 mg, 0,33 mmol) in THF werd bij 0°C natri-umhydride (39,2 mg, 0,98 mml) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, afgekoeld tot 0°C en er werd methyljodide (100 μΐ, 1,6 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het 15 oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-20% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding als een kleurloze olie (120 mg, 91%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 0,13 (s, 6H), 0,96 (s, 9H), 1,11-1,21 (m, 1H), 1,30-1,40 (m, 1H), 1,44-1,70 (m, 5H), 1,77-1,86 (m, 1H), 2,13-2,23 (m, 1H), 3,15 (s, 3H), 20 4,20 (d, J=7,88 Hz, 1H), 4,77 (d, J=13,69 Hz, 1H), 4,89 (d, 1=13,28 Hz, 1H), 7,46-7,55 (m, 2H), 7,77 (s, 1H).

Stap C: Bereiding van (2-(cyclopentyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)fenyl)-methanol 25 130

OH

OU

Aan een oplossing van (2-(cyclopentyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)-benzyloxy)(tert-butyl)dimethylsilaan (120 mg, 0,298 mmol) in THF werd bij 5 kamertemperatuur TBAF in THF (1,0 M, 0,45 ml, 0,45 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-20% ethylacetaat in hexaan), waarbij de titelverbinding als een kleurloze olie (70 mg, 81%) werd verkregen. 'H-NMR (400 10 MHz, CDCh) δ ppm 1,05-1,16 (m, 1H), 1,23-1,35 (m, 1H), 1,38-1,69 (m, 5H), 1,81-1,91 (m, 1H), 2,19-2,33 (m, 1H), 2,92-2,99 (m, 1H), 3,17 (s, 3H), 4,21 (d, J=8,71 Hz, 1H), 4,80 (s, 2H), 7,47 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,54 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,69 (s, 1H).

Het racemische mengsel werd gescheiden door chirale chromatografie onder toepassing van preparatieve HPLC (kolom: ChiralPak AD; afmeting: 5 cm x 50 cm; 15 mobiele fase: 98/2 heptaan/ethanol, debiet: 120 ml/minuut). De verwachte preparatieve retentietijden voor de twee enantiomeren bedroegen 15 minuten (enantiomeer 1) en 20 minuten (enantiomeer 2). Enantiomeer 1: 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,05-1,17 (m, 1H), 1,26-1,37 (m, 1H), 1,42-1,72 (m, 5H), 1,83-1,92 (m, 1H), 2,23-2,33 (m, 1H), 2,38-2,47 (m, 1H), 3,18 (s, 3H), 4,20 (d, J=8,30 Hz, 1H), 4,82 (d, J=3,73 Hz, 2H), 7,47 20 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,55 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,69 (s, 1H). Enantiomeer 2: ‘H-NMR

(400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,05-1,17 (m, 1H), 1,28-1,36 (m, 1H), 1,42-1,71 (m, 5H), 1,81-1,93 (m, 1H), 2,22-2,35 (m, 1H), 2,36-2,48 (m, 1H), 3,18 (s, 3H), 4,20 (d, J=8,71 Hz, 1H), 4,82 (d, J=3,73 Hz, 2H), 7,47 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,55 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,69 (s, 1H).

25

Stap D: Bereiding van (R)- en (S)-2-(broommethyl)-l-(cyclopentyl(methoxy)methyl)- 4-(trifluor-methyl)benzeen 131

Br Br

Aan een oplossing van (2-(cyclopentyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)-fenyl)methanol (enantiomeer 2 van de chirale scheiding van het racemaat in stap C, 5 23,1 mg, 0,080 mmol) en koolstoftetrabromide (34,5 mg, 0,10 mmol) in dichloormethaan (0,5 ml) werd bij kamertemperatuur trifenylfosfien (27,3 mg, 0,10 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd gezuiverd door chromatografïe over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-20-30% ethylacetaat in heptaan), 10 waarbij de titelverbinding (23,1 mg, 82%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm 1,15-1,27 (m, 1H), 1,34-1,44 (m, 1H), 1,44-1,72 (m, 5H), 1,78-1,87 (m, 1H), 2,16-2,26 (m, 1H), 3,21 (s, 3H), 4,32 (d, J=7,88 Hz, 1H), 4,57 (d, J= 10,37 Hz, 1H), 4,67 (d, J=10,37 Hz, 1H), 7,49-7,59 (m, 2H), 7,61 (s, 1H).

Het andere enantiomeer van de titelverbinding werd op dezelfde wijze onder 15 toepassing van enantiomeer 1 van de chirale scheiding van het racemaat in stap C bereid.

Stap E: Bereiding van (R)- en (S)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclopentyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine 20 F3O^XF3

V*N

N* X J Η* X J

132

Aan een oplossing van N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool- 5-amine (25,7 mg, 0,078 mmol) in DMF (0,1 ml) werd bij kamertemperatuur natriumhydride (6 mg, 0,2 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd 2-(broommethyl)-l-(cyclopentyl(methoxy)-5 methyl)-4-(trifluormethyl)benzeen (enantiomeer 1 van stap D, 23,1 mg, 0,066 mmol) in DMF (0,2 ml) toegevoegd. Het mengsel werd 2 dagen bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-25% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (7,5 mg, 19%) werd verkregen. 'H-10 NMR (400 MHz, CDC13) 6 ppm 1,04-1,16 (m, 1H), 1,22-1,33 (m, 1H), 1,38-1,50 (m, 3H), 1,51-1,63 (m, 2H), 1,65-1,76 (m, 1H), 2,02-2,14 (m, 1H), 3,07 (s, 3H), 4,19 (d, J=7,88 Hz, 1H), 4,20-4,23 (m, 3H), 4,72 (d, J=2,49 Hz, 2H), 4,76 (d, J=16,18 Hz, 1H), 4,90 (d, J= 16,18 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,51-7,58 (m, 2H), 7,66 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 595,2, gevonden: 596,5 (M+l).

15 Aan een oplossing van N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool- 5-amine (27,2 mg, 0,084 mmol) in DMF (0,1 ml) werd bij kamertemperatuur natriumhydride (6 mg, 0,2 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd 2-(broommethyl)-l-(cyclopentyl(methoxy)-methyl)-4-(trifluormethyl)benzeen (enantiomeer 2 van stap D, 24,5 mg, 0,070 mmol) in 20 DMF (0,2 ml) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (18,6 mg, 45%) werd verkregen. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van 25 Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexanen), waarbij een kleurloze olie (18,6 mg, 45%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,04-1,15 (m, 1H), 1,23-1,33 (m, 1H), 1,38-1,63 (m, 5H), 1,66-1,75 (m, 1H), 2,03-2,11 (m, 1H), 3,07 (s, 3H), 4,19 (d, J=7,88 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,72 (d, J=2,90 Hz, 2H), 4,76 (d, J=16,18 Hz, 1H), 4,90 (d, J=16,18 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,51-7,58 (m, 2H), 7,66 (s, 2H), 7,77 30 (s, 1H). MS (ES4) Berekend: 595,2, gevonden: 596,5 (M+l).

Bereiding 9: 2-(2-broom-5-iood-4-methvlbenzvBisoindoline-l .3-dion 133

Aan een oplossing van 5-broom-2-joodtolueen (512 mg, 1,72 mmol) in trifluor-azijnzuur (5 ml) werd N-(hydroxymethyl)ftaalimide (305 mg, 1,72 mmol) toegevoegd.

5 Het mengsel ontwikkelde een roze kleur. De oplossing werd 22 uur bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens werd geconcentreerd zwavelzuur (1 ml) toegevoegd. De homogene oplossing werd 18 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd water toegevoegd en de geprecipiteerde vaste stof werd verzameld door filtratie en gedroogd in een stroom lucht (0,776 g). Dit materiaal, dat volgens proton-NMR-analyse ongeveer 15% 10 van een isomeer product bevatte, werd zonder verdere zuivering naar de volgende werkwijze gevoerd. ‘H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,85 (m, 2H), 7,76 (m, 2H), 7,5 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 4,84 (s, 2H), 2,31 (s, 3H).

GC-MS berekend 455, gevonden 455.

15 Bereiding 10: 2-(2-broom-4-methvl-5-(trifluormethvnbenzvDisoindoline-1.3-dion

oSL

Aan een oplossing van 2-(2-broom-5-jood-4-methylbenzyl)isoindoline-l,3-dion 20 (560 mg, 1,22 mmol) in N,N-dimethylformamide (10 ml) werd koperjodide (467,6 mg, 2,45 mmol) en kaliumfluoride (291,1 mg, 4,91 mmol) toegevoegd. De oplossing werd verhit op 120°C. Na 20 minuten werd methyl-2-chloor-2,2-difluoracetaat (709,71 mg, 4,91 mmol) toegevoegd aan de oranje suspensie en er werd nog 8 uur verhit. Na ongeveer 30 minuten werd gasontwikkeling waargenomen en werd de oplossing geel. Na 134 afkoelen werd het mengsel uitgegoten in water (50 ml), waarbij een emulsie werd gevormd, waaraan dichloormethaan (300 ml) werd toegevoegd. Het mengsel werd 20 minuten geroerd en vervolgens door een laag Celite® gefiltreerd, waarbij wordt gespoeld met dichloormethaan. De organische laag werd gewassen met 25 ml 2 N HC1, 5 gedroogd met watervrij natrium sulfaat en onder verlaagde druk tot een gele vaste stof (510 mg) geconcentreerd. Dit materiaal werd herkristalliseerd uit hete ethanol (30 ml) en daarna 72 uur bij kamertemperatuur bewaard. De kristallen werden verzameld door filtratie en gespoeld met ethanol, waarbij een witte kristallijne vaste stof (314 mg) werd verkregen. Uiteindelijke zuivering werd bereikt door herkristallisatie uit hete acetoni-10 tril, waarbij de titelverbinding (200 mg, 40%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 7,86 (m, 2H), 7,74 (m, 2H), 7,50 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 4,84 (s, 2H), 2,32 (s, 3H). GC-MS berekend 398, gevonden 376 (M-F).

Bereiding 11: f2-broom-4-methvl-5-ftrifluormethvOfenvl)methaanamine 15 NM2

Ρ3Ογ^ J

Een mengsel van 2-(2-broom-5-jood-4-methylbenzyl)isoindoline-l,3-dion (460 mg, 1,15 mmol) en hydrazine-hydraat (148,1 mg, 4,62 mmol) werd 1 uur onder terug-20 vloeikoeling gekookt en de vluchtige bestanddelen werden onder verlaagde druk verwijderd. Aan het residu werd 1 M natriumhydroxide (50 ml) en dichloormethaan (40 ml) toegevoegd. Het mengsel werd 20 minuten geroerd en vervolgens onder spoelen met dichloormethaan door een trechter van gesinterd glas gefiltreerd. De organische laag werd afgescheiden, de waterige laag werd geëxtraheerd met dichloormethaan 2 x 25 75 ml) en de samengevoegde organische lagen werden gedroogd met watervrij magne- siumsulfaat en onder verlaagde druk tot droogte geconcentreerd. Dit materiaal werd gezuiverd door verdampingschromatografie over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met ethylacetaat), waarbij de titelverbinding (0,189 g, 84,6%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCfi) δ 7,62 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 30 3,93 (s,2H), 2,51 (s,3H).

135

Bereiding 12: N-fë-broom^-methvl-S-rtrifluomethvObenzvlVS.S-bisftrifluornethvn-fenvOmethaanamine F-A xf3 y

HU

iX

' ^ Br 5

Een mengsel van (2-broom-4-methyl-5-(trifluormethyl)fenyl)methaanamine (189 mg, 0,705 mmol) en 3,5-bistrifluormethylbenzaldehyde (170 mg, 0,705 mmol) in wa-tervrij tolueen (10 ml) werd 3 uur onder terugvloeikoeling gekookt. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verwijderd en het residu werd opgelost in dichloormethaan 10 (25 ml). Er werd natriumtriacetoxyboorhydride (373,5 mg, 1,76 mmol) toegevoegd en het mengsel werd 18 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het mengsel werd uitgegoten in een mengsel van verzadigde NaHCCE (50 ml) en ethylacetaat (50 ml) en 30 minuten geroerd. De lagen werden gescheiden en de waterige laag werd geëxtraheerd met ethylacetaat (2 x 50 ml). De samengevoegde organische laag werd gedroogd met wa-15 tervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en geconcentreerd, waarbij de titelverbinding (98,4%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,83 (s, 2H), 7,76 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 3,92 (s, 2H), 3,89 (s, 2H), 2,44 (s, 3H).

Bereiding 13: C2-broom-4-methvl-5-ftrifluormethvObenzvO(3.5-bis('trifluormethvO- 20 benzyBcvaanamide

V

NaNJ

' Bf 136 N-(2-broom-4-methy 1- 5 -(tri fluormethy l)benzy 1)(3,5 -bis(trifluormethy l)feny 1)-methaanamine (89 mg, 0,180 mmol) werd opgelost in methanol (10 ml). Aan deze oplossing werd natriumcarbonaat (53,9 mg, 0,396 mmol) gevolgd door cyanogeen-bromide (5,0 M oplossing in acetonitril, 21,9 mg, 0,041 ml, 0,207 mmol) toegevoegd.

5 De oplossing werd 20 uur bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens onder verlaagde druk tot droogte geconcentreerd. Het residu werd verdeeld tussen water (10 ml) en ethylacetaat (50 ml). De waterige laag werd geëxtraheerd met ethylacetaat (2 x 20 ml), de organische lagen werden samengevoegd en gedroogd met watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en onder verlaagde druk geconcentreerd, waarbij de titelverbinding (97,5%) 10 werd verkregen. ]H-NMR (400 MHz, CDCf) 5 7,85 (s, 1H), 7,72 (s, 2H), 7,54 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 4,34 (s, 4H), 2,45 (s, 3H). LC-MS berekend 519, gevonden 520 (M+H).

Bereidine 14: N-(2-broom-4-methvl-5-ltrifluormethvl)benzyl)-N-(3.5-bis(trifluor- methvBbenzvlV2H-tetrazool-5-amine 15 HN ί w'-Sr

Br

Aan een oplossing van (2-broom-4-methyl-5-(trifluormethyl)benzyl)(3,5-bis-(trifluormethyl)benzyl)cyaanamide (80 mg, 0,154 mmol) in tolueen (10 ml) werd 20 triethylamine-hydrochloride (63,62 mg, 0,462 mmol) en natriumazide (30,05 mg, 0,462 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 18 uur op 115°C verhit, afgekoeld en vervolgens werd 0,1 N zoutzuur (30 ml) aan het mengsel toegevoegd en werd 30 minuten geroerd. De waterige laag werd geëxtraheerd met ethylacetaat (2 x 30 ml) en de samengevoegde organische lagen werden gedroogd met watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en onder 25 verlaagde druk tot droogte geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door verdam-pingschromatografie over een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 25-100% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (66%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,71 (s, 1H), 7,59 (s, 2H), 7,43 (s, 1H), 137 7,34 (s, 1H), 4,80 (s, 2H), 4,77 (s, 2H), 2,37 (s, 3H). LC-MS berekend 562, gevonden 563 (M+H).

Bereiding 15: N-fë-broom^-methyl-S-flxifluormethvnbenzvn-N-G.S-bisftrifluor- 5 methvnbenzvD-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine

N U

"""H !

Aan een oplossing van N-(2-broom-4-methyl-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-10 bis(trifluormethyl)benzyl)-2H-tetrazool-5-amine (76 mg, 0,135 mmol) in watervrij THF (5 ml) werd natriumcarbonaat (28 mg, 0,270 mmol) en N,N-dimethylformamide (1 ml) gevolgd door dimethylsulfaat (34 mg, 0,270 mmol) toegevoegd. De oplossing werd 18 uur op 70°C verwarmd en vervolgens werd het oplosmiddel onder verlaagde druk verwijderd. Het residu werd verdeeld tussen ethylacetaat (20 ml) en water (10 ml). 15 De waterige laag werd geëxtraheerd met ethylacetaat (3 x 20 ml) en de samengevoegde organische lagen werden gewassen met water (3 x 20 ml). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd met watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en onder verlaagde druk geconcentreerd, waarbij de titelverbinding (76 mg, 97,5%) werd verkregen. ‘H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,71 (s, 1H), 7,62 (s, 2H), 7,44 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 20 4,79 (s, 2H), 4,76 (s, 2H), 4,20 (s, 3H), 2,39 (s, 3H). LC-MS berekend 576, gevonden 577 (M+H).

Voorbeeld 23: (3.5-bis-trifluormethv 1-benzvlVF2-(cvclohexvl-methoxv-methyl)-4-me-thvl-5-trifluormethvl-benzvn-(2-methyl-2H-tetrazool-5-vDamine 25 138 F3Cv^W-CF3

yX

N, X J

FaC. ^ J

o

Stap 1: Bereiding van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-5-methyl-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanol 5 \ T j

M, JL J

Aan een oplossing van N-(2-broom-4-methyl-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluoraiethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (20 mg, 0,035 mmol) in 10 THF (0,2 ml) werd bij 0°C iPrMgCl/LiCl (0,075 ml, 0,11 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 3 uur bij 0°C geroerd en er werd cyclohexaancarboxaldehyde (9,3 mg, 0,083 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 2 uur bij 0°C-kamertemperatuur geroerd, afgeschrikt met waterig ammoniumchloride en verdund met ethylacetaat. De organische laag werd gefiltreerd door een dunne laag natriumsulfaat en onder vacuüm gecon-15 centreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (8,6 mg, 41%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,91-1,32 (m, 6H), 1,52-1,60 (m, 1H), 1,61-1,67 (m, 2H), 1,77 (d, 1H), 1,95 (d, J= 12,86 Hz, 1H), 2,19 (d, J=3,32 Hz, 1H), 2,45 (s, 3H), 4,19 (s, 3H), 4,61 (dd, J=7,47, 2,90 Hz, 1H), 4,67 (d, 139 J=15,77 Hz, 1H), 4,64-4,79 (m, 2H), 4,82 (d, J=15,35 Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,63 (s, 2H), 7,76 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 609,2, gevonden: 610,56 (M+l).

Stap 2: Bereiding van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5 4-methyl-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine /Hl

h> X J

Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra-10 zool-5-yl)amino]methyl}-5-methyl-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanol (8 mg, 0,01 mmol) in THF (0,15 ml) werd bij 0°C natriumhydride (4,2 mg, 0,11 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd. Methyljodide (10 μΐ, 0,2 mmol) werd bij 0°C toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het mengsel werd afgeschrikt met methanol en gezuiverd door chro-15 matografie over en 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (3,6 mg, 40%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,92-1,20 (m, 6H), 1,41-1,51 (m, 1H), 1,61 (d, J=8,71 Hz, 2H), 1,67-1,74 (m, 1H), 1,93 (d, J=11,62 Hz, 1H), 2,46 (s, 3H), 3,04 (s, 3H), 4,04 (d, J=7,05 Hz, IH), 4,21 (s, 3H), 4,63-4,72 (m, 3H), 4,84 (d, J=16,18 Hz, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,30 20 (s, 1H), 7,63 (s, 2H), 7,77 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 623,2, gevonden: 624,6 (M+l).

Volgens de werkwijze die is beschreven in voorbeeld 23 en onder toepassing van het desbetreffende arylbromide en aldehyde-reagens werd voorbeeld 24 bereid.

140

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 24 (3,5-biS'trifluormethyl- F3C-N^^,CF3 532,2 533,6 benzyl)-[2-(l-methoxy-3- ^ pyridine-3-yl-propyl)-5- N, j trifluormethyl-benzyl]-(2- j

methyl-2H-tetrazool-5- Tj T

yl)amine ^ f'i

Bereiding 16: (2-(((3.5-bisftrifluormethyObenzvl¥2-methvl-2H-tetrazool-5-vr)aminoy methvD-5-methvl-4-(trifluormethvnfenvl¥cvclohexvOmethanon 5

"•'VV

F3CyV

Aan een oplossing van (2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetra-zool-5-yl)amino)methyl)-5-methyl-4-(trifluormethyl)fenyl)(cyclohexyl)methanol (53 10 mg, 0,086 mmol) in dichloormethaan (3 ml) werd Dess-Martin perjodinaan (47,9 mg, 0,113 mmol) toegevoegd en het mengsel werd 1,5 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd diethylether (20 ml) aan de oplossing toegevoegd, gevolgd door 2 M NaOH (5 ml). De lagen werden gescheiden, de organische laag werd gedroogd met watervrij na-triumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd, waarbij de titelverbinding al een 15 gele gom (52,2 mg) werd verkregen. ‘H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,70 (s, 1H), 7,62 141 (s, 2Η), 7,48 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 4,76 (s, 4H), 4,18 (s, 3H), 2,47 (s, 3H), 1,80 (d, J=10,0 Hz, 4H), 1,22 (m, 7H). LC-MS berekend 607,5, gevonden 608,6 (M+H).

Bereiding 17: 1 -(2-(((3,5-bis(trifluormethvr)benzvr)(2-methvl-2H-tetrazool-5-vD- 5 aminoVnethvn-5-methvl-4-(trifluormethv0fenviy 1-cvclohexvlethanol

F3C_^XF3 N'n V

Μθ-Ν I } N' aX?” ó

Aan een oplossing van (2-(((3,5-bis(trifluomethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetra-10 zool-5-yl)amino)methyl)-5-methyl-4-(trifluormethyl)fenyl)(cyclohexyl)methanon (52 mg, 0,085 mmol) in watervrij THF (10 ml) werd bij 0°C onder stikstof methylmagnesi-umbromide (3,0 M oplossing in THF, 25,6 mg, 0,114 ml, 0,342 mmol) toegevoegd. De oplossing werd 30 minuten bij 0°C geroerd en daarna opgewarmd tot kamertemperatuur en 1,5 uur geroerd. De oplossing werd vervolgens uitgegoten in een mengsel van 2 15 N zoutzuur (10 ml) en ethylacetaat (20 ml). De oplossing werd 10 minuten bij kamertemperatuur geroerd en daarna werden de lagen gescheiden en werd de waterige laag geëxtraheerd met ethylacetaat (3 x 15 ml). De samengevoegde organische laag werd gedroogd met watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het ruwe product werd gezuiverd door verdampingschromatografie over een 20 RediSep kolom va 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 1-50% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (97,2%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ 7,73 (s, 1H), 7,68 (s, 2H), 7,33 (s, 1H), 7,17 (s, 1H), 5,39 (d, J=16,17 Hz, 1H), 4,82 (d, J=15,76 Hz, 1H), 4,77 (s, 2H), 4,15 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 1,62 (m, 6H), 1,24 (s, 3H), 1,04 (m, 5H). LC-MS berekend 623,5, gevonden 624,6 (M+H).

25 142

Voorbeeld 25: N-('2-n-cvclohexyl-l-methoxvethvlV4-methvl-5-(trifluormethvn- benzviyN-(3.5-bisftrifluormethvl)benzvI)-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine

,n=n KJ

Me-"K 1 J

OMe (5 5

Aan een oplossing van 1-(2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetra-zool-5-yl)amino)methyl)-5-methyl-4-(trifluormethyl)fenyl)-1 -cyclohexylethanol (18 mg, 0,028 mmol) in THF (3 ml) werd bij kamertemperatuur natriumhydride (60% dispersie in anorganische olie, 8 mg, 0,202 mmol) toegevoegd. Na 5 minuten roeren werd 10 methyljodide (12,2 mg, 0,086 mmol) toegevoegd en de oplossing werd 18 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd water (5 ml) toegevoegd en het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat (3 x 20 ml). De organische lagen werden samengevoegd, gedroogd met watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en geconcentreerd, waarbij een olie (17 mg) werd verkregen. Dit materiaal werd gezuiverd door verdampingschromatografie 15 over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (11 mg, 59%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,75 (s, 1H), 7,70 (s, 2H), 7,39 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 5,19 (d, J=17,42 Hz, 1H), 5,0 (d, J=17,42 Hz, 1H), 4,74 (g, 1=16,72 Hz, J=16,18 hz, 2H), 4,17 (s, 3H), 3,0 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 1,99 (d, J=12,40 Hz, 1H), 1,72 (m, 2H), 1,58 (s, 20 3H), 0,99 (m, 8H). MS berekend 637,5, gevonden 638,5 (M+H).

Voorbeeld 26: 4-ri2-irr3.5-bis-trifluormethvl-benzvr)-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vl)-aminolmethvH -4-trifluormethvl-fenvllmethoxv-methvllpiperidine-1 -carbonzuur-me-thvlester 25 cf3 143

Vn

N" X J

o qXq'^

Stap A: Bereiding van tert-butyl-4-((2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl-4-(trifluormethyl)fenyl)(hydroxy)methyl)piperidine-l-car-5 boxylaat

Vn V

Ns' x J

Va. .oh

„AA

Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-broom-5-trifluorme-10 thyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine (115 mg, 0,21 mmol) in THF (0,5 ml) werd bij 0°C i-PrMgCl/LiCl (0,3 ml, 0,39 mmol) toegevoegd, het mengsel werd 3 uur bij 0°C geroerd en er werd tert-butyl-4-formylpiperidine-l-carboxylaat (70,7 mg, 0,33 mmol) in THF (0,1 ml) toegevoegd. Het mengsel werd 3 uur bij 0°C tot kamertemperatuur geroerd en afgeschrikt met verzadigd waterig ammoniumchloride. Het mengsel 15 werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+S silika- 144 kolom van Biotage (geëlueerd met 0-50% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelver-binding (62,2 mg, 44%) werd verkregen. ‘H-NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm 1,12-1,19 (m, 1H), 1,20-1,32 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,69-1,78 (m, 1H), 1,89 (dd, J=13,07, 1,87 Hz, 1H), 2,46-2,67 (m, 2H), 3,99-4,15 (m, 2H), 4,18 (s, 3H), 4,66-4,73 (m, 2H), 4,68-5 4,83 (m, 4H), 4,87 (d, J=15,77 Hz, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,55 (s, 2H), 7,64 (s, 2H), 7,77 (s, 1H). MS (ES4) Berekend: 696,2, gevonden: 697,6 (M+l).

Stap B: Bereiding van tert-butyl-4-((2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)(methoxy)methyl)piperidine-l-10 carboxylaat F3Cv^XF3

\ IJ

N-n

H> jL J

N'V'* o

N I

0A0J<

Aan een oplossing van tert-butyl-4-((2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-me-15 thyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)(hydroxy)methyl)piperi-dine-1-carboxylaat (62,2 mg, 0,089 mmol) in THF werd bij 0°C natriumhydride (10,7 mg, 0,27 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, afgekoeld tot 0°C en er werd methyljodide (30 μΐ, 0,5 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met 20 methanol. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding (45,9 mg, 72%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,09-1,16 (m, 1H), 1,17-1,29 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,58-1,69 (m, 1H), 1,84 (d, J=13,28 Hz, 1H), 2,44-2,58 (m, 2H), 3,04 (s, 3H), 4,04 (d, 25 J=12,45 Hz, 1H), 4,11 (d, J=7,47 Hz, 1H), 4,15 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,20 (s, 3H), 4,68 145 (d, 3=15,77 Hz, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,88 (d, 3=16,18 Hz, JH), 7,36 (s, 1H), 7,50 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,57 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES4) Berekend: 710,3, gevonden 711,6 (M+l).

5 Stap C: Bereiding van N-(2-(methoxy(piperidine-4-yl)methyl)-5-(trifluormethyl)-benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine

\ TT

N'N Sr

η, i J

6

H

10 Aan een oplossing van tert-butyl-4-((2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-me- thyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)(methoxy)methyl)piperi-dine-l-carboxylaat (36,3 mg, 0,051 mmol) in dioxaan (0,3 ml) werd bij kamertemperatuur 4 N HC1 in dioxaan (0,15 ml, 0,6 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 2 uur bij kamertemperatuur geroerd en er werd extra HC1 (0,05 ml) toegevoegd. Het mengsel 15 werd 2 uur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Er werd ethyl-acetaat toegevoegd en verwijderd. Er werd isopropylether toegevoegd en verwijderd, waarbij een dikke olie werd verkregen. Het HCl-zout werd opgelost in methanol en gefiltreerd door een SCX-patroon (afgegeven met ammoniak in methanol), waarbij de titelverbinding (23,5 mg, 75%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 20 1,07-1,15 (m, 1H), 1,16-1,31 (m, 2H), 1,56-1,69 (m, 1H), 1,83-1,92 (m, 3=7,05 Hz, 2H), 2,37-2,52 (m, 2H), 2,98 (d, J=12,45 Hz, 1H), 3,05 (s, 3H), 3,09 (s, 1H), 4,13 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,69 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,71 (d, 3=3,73 Hz, 2H), 4,90 (d, J=16,18 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,50 (d, 3=8,30 Hz, 1H), 7,56 (d, 3=9,13 Hz, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,77 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 610,2, gevonden: 611,4 (M+l).

25 146

Stap D: Bereiding van 4-[(2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool- 5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)methoxy-methyl]piperidine-l-carbonzuur- methylester

n-n Y

N, X J

5

Aan een oplossing van N-(2-(methoxy(piperidine-4-yl)methyl)-5-(trifluorme-thyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (21,5 mg, 0,035 mmol) in dichloormethaan werd bij kamertemperatuur Hunig’s base (11 mg, 10 15 μΐ, 0,084 mmol) gevolgd door methylchloorformiaat (10 μΐ) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd en het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding (18,6 mg, 79%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 15 1,11-1,18 (m, 1H), 1,18-1,31 (m, 2H), 1,62-1,71 (m, 1H), 1,85 (d, J=13,28 Hz, 1H), 2,50-2,64 (m, 2H), 3,04 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 3,99-4,20 (m, 2H), 4,16 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,68 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,88 (d, 1=15,77 Hz, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,50 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,58 (d, J=9,13 Hz, 1H), 7,64 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 668,2, gevonden: 669,6 (M+l).

20

Voorbeeld 27: 4-r(2-{f(3.5-bis-trifluormethvl-benzvlV12-methvl-2H-tetrazool-5-vl)-aminolmethvl)-4-trifluomethvl-fenvnmethoxv-methvllpiperidine-l-carbonzuur-amide 147

FjCyyCFj

VN

n* x j CC», 0 Λ

Cr^NHa

Aan een oplossing van N-(2-(rnethoxy(piperidine-4-yl)methyl)-5-(trifluorme-thyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (19,5 5 mg, 0,030 mmol) in dichloormethaan (0,2 ml) werd bij kamertemperatuur Hunig's base (7 mg, 10 μΐ, 0,06 mmol) gevolgd door fosgeen in tolueen (20%, 25 μΐ, 0,048 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd waterige ammoniak (0,2 ml) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd gezuiverd 10 door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 1-7% methanol in dichloormethaan), waarbij de titelverbinding (13 mg, 62%) werd verkregen. ]H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,15-1,21 (m, 1H), 1,23-1,37 (m, 2H), 1,61-1,76 (m, 3H), 1,88 (d, J=12,45 Hz, 1H), 2,57-2,73 (m, 2H), 3,04 (s, 3H), 3,86-3,97 (m, 2H), 4,18 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,66-4,73 (m, 3H), 4,87 (d, J=16,18 Hz, 15 1H), 7,36 (s, 1H), 7,50 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,58 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,64 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 653,2, gevonden: 654,6 (M+l).

Voorbeeld 28: 2-(4-IY2-IY3.5-bis-trifluormethvl-benzyr)-('2-methvl-2H-tetrazool-5- vl)aminolmethvn-4-trifluormethvl-fenyl)methoxv-methvllpiperidine-l-vHaceetamide 20 148 F3e^>-''^ÏV,'CP3

**^NT

XX^ k^NH2

D

Aan een oplossing van N-(2-(methoxy(piperidine-4-yl)methyl)-5-(trifluorme-thyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (19,1 5 mg, 0,030 mmol) en 2-broomaceetamide (5,0 mg, 0,036 mmol) in acetonitril (0,2 ml) werd bij kamertemperatuur natriumcarbonaat (6,5 mg, 0,061 mmol) toegevoegd. De suspensie werd een nacht bij 50°C geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd verdeeld tussen ethylacetaat en water. De organische laag werd gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder 10 vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografïe over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 1-7% methanol in dichloormethaan), waarbij een kleurloze olie (9,2 mg, 47%) werd verkregen. ’H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,14-1,30 (m, 1H), 1,34-1,56 (m, 4H), 1,85 (d, J=14,52 Hz, 1H), 1,97-2,10 (m, 2H), 2,81-3,01 (m, 4H), 3,05-3,07 (m, 3H), 4,19 (d, J=6,22 Hz, 1H), 4,20-4,23 (m, 3H), 4,69 15 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,89 (d, J=15,77 Hz, 1H), 5,44 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,50 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,58 (d, J=9,13 Hz, 1H), 7,64 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 667,2, gevonden: 668,6 (M+l).

Voorbeeld 29: l-(4-iï2-([Y3.5-bis-trifluormethvl-benzvD-(2-methvl-2H-tetrazool-5- 20 vnaminolmethvH -4-trifluormethvl-fenvDmethoxy-methvllpiperidine-1 -vil ethanon 149 \ ij

n* K J

N

XX,».

6

cA

Aan een oplossing van N-(2-(methoxy(piperidine-4-yl)methyl)-5-(trifluorme-thyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (20,5 5 mg, 0,034 mmol) in dichloormethaan (0,5 ml) werd bij kamertemperatuur pyridine (10 μΐ, 0,1 mmol) gevolgd door acetylchloride (5 μΐ, 0,07 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom (geëlueerd met 10-100% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding (14 mg, 10 64%) werd verkregen. ’H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,17-1,34 (m, 3H), 1,69- 1,78 (m, 1H), 1,87 (t, J= 12,65 Hz, 1H), 2,04 (s, 1,5H), 2,06 (s, 1,5H), 2,27-2,41 (m, 1H), 2,82-2,93 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 3,72 (d, J=15,77 Hz, 0,5H), 3,81 (d, J=12,45 Hz, 0,5H), 4,18 (d, J=6,64 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 4,54-4,65 (m, 1H), 4,65-4,73 (m, 3H), 4,87 (d, J= 16,60 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,50 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,59 (d, J=7,88 Hz, 15 1H), 7,64 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 652,2, gevonden: 653,5 (M+l).

Voorbeeld 30: 4-lY2-HY3.5-bis-trifluormethyl-benzvlW2-methvl-2H-tetrazool-5-vD-aminolmethvl 1 -4-trifluormethvl-fenvOmethoxv-methvllpiperidine-1 -carbonzuur-ethvl-ester 20 150 F3Cy-yCF3 \ Ij N* 1 J >rNr Ö^O*^

Aan een oplossing van N-(2-(methoxy(piperidine-4-yl)methyl)-5-(trifluorme-thyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (19,4 5 mg, 0,032 mmol) in dichloormethaan (0,5 ml) werd bij kamertemperatuur Hunig's base (8,9 mg, 12 μΐ, 0,069 mmol) gevolgd doro fosgeen in tolueen (20%, 25 μΐ, 0,048 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd ammoniak in ethanol (1 ml) toegevoegd en het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd gezuiverd 10 door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-50% ethylacetaat in hexaan), waarbij de titelverbinding (7,4 mg, 34%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,11-1,18 (m, 1H), 1,20-1,31 (m, 2H), 1,24 (t, J=7,05 Hz, 3H), 1,61-1,71 (m, 1H), 1,85 (d, J=12,86 Hz, 1H), 2,56 (q, J=14,94 Hz, 2H), 3,04 (s, 3H), 4,05-4,19 (m, 2H), 4,10 (q, J=7,05 Hz, 2H), 4,16 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,21 (s, 15 3H), 4,68 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,88 (d, J=15,77 Hz, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,50 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,58 (d, J=8,71 Hz, 1H), 7,64 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 682,6, gevonden: 683,6 (M+l).

Voorbeeld 31: f3.5-bis-trifluormethvl-benzvr)-r2-n-niethoxy-cvclobutvl)-5-trifluor- 20 methvl-benzvll-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vQamine 151

VhXX

w

f*cyV

Stap A: Bereiding van l-(2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclobutanol 5

\ I J

n-n

VV

F*yy

Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-broom-5-trifluorme-thyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine (114,3 mg, 0,20 mmol) in THF werd 10 bij 0°C iPrMgCl/LiCl (0,25 ml, 0,32 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 3 uur bij 0°C geroerd. Cyclobutanon (21,4 mg, 0,31 mmol) werd 1 uur bij kamertemperatuur met CeCh (50,1 mg, 0,20 mmol) geroerd, afgekoeld tot 0°C en het Grignard-reagens werd toegevoegd. Het mengsel werd 2 uur bij 0°C geroerd en afgeschrikt met ammoni-umchloride. Het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde or-15 ganische lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsul-faat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexaan), waarbij de titelverbinding (34,6 mg, 31%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 1,62-1,75 (m, 1H), 2,08-2,21 (m, 1H), 2,34-2,45 (m, 2H), 2,56-2,68 (m, 20 2H), 3,59 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,16 s, 3H), 4,84 (s, 2H), 4,86 (s, 2H), 7,38 (s, 1H), 7,42- 152 7,51 (m, 2H), 7,76 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 553,2, gevonden: 554,4 (M+l).

Stap B: Bereiding van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(l-methoxy-cyclobutyl)-5-5 trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine ^CF3

VV

Aan een oplossing van l-(2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra-10 zool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclobutanol (17,3 mg, 0,031 mmol) in THF (0,2 ml) werd bij 0°C natriumhydride (5 mg, 0,1 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd en methyljodide (20 μΐ, 0,3 mmol) werd bij 0°C toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd gezuiverd door 15 chromatografïe over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-20% ethyl-acetaat in hexaan), waarbij de titelverbinding (11,1 mg, 63%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 1,64-1,76 (m, 1H), 1,98-2,10 (m, 1H), 2,33-2,43 (m, 2H), 2,43-2,53 (m, 2H), 2,85 (s, 3H), 4,17-4,21 (m, 3H), 4,75 (s, 2H), 4,86 (s, 2H), 7,41-7,46 (m, 2H), 7,50 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,73 (s, 2H), 7,76 (s, 1H). MS (ES+) Bere-20 kend: 567,2, gevonden: 568,4 (M+l).

Volgens de werkwijze die is beschreven in voorbeeld 31 en onder toepassing van het desbetreffende keton-reagens werd voorbeeld 32 bereid.

153

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 32 (3,5-bis-trifluormethyl- 607,2 576,5 (M- benzyl)-|2-(dicyclopro- ^ OMe)

pyl-methoxy-methyl)-5- N, ^ J

trifluormethyl-benzyl]-(2- ^ methyl-2H-tetrazool-5- “ i!

yl)amine >r N

Voorbeeld 33: (3.5-bis-trifluormethvl-benzvl)-(2-rethoxv(tetrahvdro-pyran-4-vD- methvn-5-trifluormethyl-benzvll-('2-methvl-2H-tetrazool-5-vnamine 5

FsC^^CF3

N-m ''Y

Nr

Aan een oplossing van (2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetra-zool-5-yl)amino)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)methanol 10 (20,4 mg, 0,034 mmol) in THF (0,15 ml) werd bij 0°C natriumhydride (60% dispersie in anorganische olie, 4,1 mg, 0,10 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, opnieuw tot 0°C afgekoeld en er werd DMF (5 druppels) gevolgd door joodethaan (8 μΐ, 0,10 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het 15 residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding (11,5 mg, 54%) werd verkregen. ‘H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,0 (m, 1H), 1,1 (t, J=7,l Hz, 3H), 1,4 (m, 2H), 1,7 (m, 1H), 1,8 (d, J=13,3 Hz, 1H), 3,2 (m, 4H), 3,9 (dd, J=11,6, 154 3,3 Hz, 1H), 4,0 (dd, J=ll,4, 3,9 Hz, 1H), 4,2 (s, 3H), 4,2 (d, J=7,l Hz, 1H), 4,7 (d, J=13,3 Hz, 1H), 4,7 (s, 2H), 4,9 (d, J=15,8 Hz, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,6 (m, 2H), 7,6 (s, 2H), 7,8 (s, 1H). MS (ES*) Berekend: 625,2, gevonden: 626,4 (M+l).

Volgens de werkwijze die is beschreven in voorbeeld 33 en onder toepassing van 5 de desbetreffende secundaire alcohol en alkyleringsreagens werden de voorbeelden 34-40 bereid.

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 34 (3,5-bis-trifluormethyl- 637,2 638,6 benzyl)-[2-(cyclohexyl- *1..^ t N jj propoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5- 11 I _

yl)amine I

35 3-[(2-{[(3,5-bis-trifluor- 648,2 649,6 methyl-benzyl)-(2-me- ^ thyl-2H-tetrazool-5- N, \\ j yl)amino]methyl}-4-tri- j

fluormethyl-fenyl)-cyclo- T[ T

hexyl-methoxy]-pro- j pionitril 36 (3,5-bis-trifluormethyl- 653,2 654,6 benzyl)-{2-[cyclohexyl- 'n-n u

(2-methoxy-ethoxy)-me- ^ JL* J

N 19' thyl] -5 -trifluormethyl- benzyl}-(2-methyl-2H- ^ tetrazool-5-yl)amine 1

1 | o M

155

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 37 [2-(allyloxy-cyclohexyl- 635,2 636,5 methyl)-5-trifluormethyl- ^

benzyl]-( 3,5-bis-tri- JK. J

N 'N

fluormethyl-benzyl)-(2- methyl-2H-tetrazool-5- (X^ yl)amine j Π

'"-•A

38 (3,5-bis-trifluoimethyl- 651,3 652,4 benzyl)- {2-[(4,4-di-me-

N U

thyl-cyclohexyl)-ethoxy- methyl]-5-tri-fluormethyl- benzyl }-(2-methyl-2H- uw tetrazool-5-yl)amine ^-S.

A

39 (3,5-bis-trifluormethyl- b 3^ F3 637,2 638,4 benzyl)-{2-[ethoxy(4- methyl-cyclohexyl)-me-thyl]-5-trifluormethyl-benzyl}-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine i 0 i 40 (3,5-bis-trifluormethyl- 632,3 benzyl)-[2-(ethoxy-o- tolyl-methyl)-5-trifluor- ^

methyl-benzyl]-(2-me- F3CV

thyl-2H-tetrazool-5- X

yl)amine

Voorbeeld 41: 2-(5-((3.5-bis-trifluormethvl-benzyD-r2-(cvclohexvl-methoxv-methvO-5-trifluormethvl-benzvllaminoltetra2ool-2-vnethanol 5 156 H1 ^C^^CF, s,-„y X )

O

Stap A: Bereiding van (2-((tert-butyldimethylsilyloxy)methyl)-4-(trifluor-methyl)-fe-nyl)(cycl°hexyl)methano 1 5 lie crs':

Aan een oplossing van (2-broom-5-(trifluormethyl)benzyloxy)(tert-butyl)-dimethylsilaan (1,3 g, 3,5 mmol) in THF weer bij 0°C i-PrMgCl/LiCl in THF (3,5 ml, 10 4,5 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 4 uur bij 0°C geroerd en er werd cyclo- hexaancarboxaldehyde (0,1 g, 0,65 ml, 5,4 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 1 uur bij 0°C-kamertemperatuur geroerd, afgeschrikt met verzadigd waterig ammoniumchlo-ride en geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen werden gewassen met een zoutoplossing gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm ge-15 concentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+M silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-20% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelver-binding (1,27 g, 90%) werd verkregen. ]H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,13 (s, 6H), 0,94 (s, 9H), 0,96-1,38 (m, 7H), 1,63-1,73 (m, 2H), 1,77-1,83 (m, 1H), 2,06 (d, J= 13,28 Hz, 1H), 2,28 (d, J=3,73 Hz, 1H), 4,58 (dd, J=7,68, 3,94 Hz, 1H), 4,75 (d, 20 J=13,28 Hz, 1H), 4,85 (d, J=13,28 Hz, 1H), 7,53 (s, 2H), 7,68 (s, 1H).

157

Stap B: Bereiding van (2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)benzyl-oxy)(tert-butyl)dimethylsilaan ij< o-sC"

F3CtV

Vytk

O

5

Aan een oplossing van (2-((tert-butyldimethylsilyloxy)methyl)-4-(trifluorme-thyl)fenyl)-(cyclohexyl)methanol (1,25 g, 3,11 mmol) in THF (5 ml) werd bij 0°C na-triumhydride (385 mg, 9,6 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 1 uur bij kamertemperatuur geroerd, afgekoeld tot 0°C en er werd methyljodide (1,0 ml, 16 mmol) toege-10 voegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Er werd water toegevoegd en het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De organische laag werd gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografïe over een 25+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-5% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelver-15 binding als een kleurloze olie (1,14 g, 88%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ ppm 0,12 (s, 6H), 0,94-0,96 (m, 9H), 0,98-1,29 (m, 6H), 1,54-1,59 (m, 1H), 1,61-1,67 (m, 2H), 1,71-1,79 (m, 1H), 2,00 (d, J=12,03 Hz, 1H), 3,13 (s, 3H), 4,08 (d, J=7,47 Hz, 1H), 4,71 (d, 1=13,69 Hz, 1H), 4,85 (d, J=13,69 Hz, 1H), 7,44 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,52 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H).

20

Stap C: Bereiding van (2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)fenyl)- methanol 158

OH

o

Aan een oplossing van (2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)-benzyloxy)(tert-butyl)dimethylsilaan (1,13 g, 2,4 mmol) in THF (5 ml) werd bij 5 kamertemperatuur TB AF in THF (1,0 M, 4,8 ml, 4,8 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Er werd water toegevoegd en het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+M silika-kolom 10 van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (633,9 mg, 88%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 0,91-1,27 (m, 6H), 1,63-1,70 (m, 3H), 1,72-1,81 (m, 1H), 2,07 (d, J=12,86 Hz, 1H), 2,33-2,42 (m, 1H), 3,18 (s, 3H), 4,10 (d, J=7,88 Hz, 1H), 4,78 (dd, J=5,81, 3,32 Hz, 2H), 7,43 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,55 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,69 s, 1H).

15

Stap D: Bereiding van 2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)benzaldehyde

O

20 Aan een oplossing van (2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)- fenyl)methanol (113,1 mg, 0,37 mmol) in dichloormethaan (2 ml) werd bij kamertemperatuur Dess-Martin peijodinaan-reagens (175 mg, 0,41 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd 1 N NaOH toegevoegd en het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische 25 lagen werden gewassen met 1 N NaOH en een zoutoplossing, gedroogd boven natrium- 159 sulfaat en onder vacuüm geconcentreerd, waarbij de titelverbinding (107,2 mg, 95%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,07-1,18 (m, 4H), 1,36 (d, J=5,81 Hz, 1H), 1,53-1,69 (m, 4H), 1,71-1,76 (m, J=2,49 Hz, 1H), 1,83-1,90 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 4,73 (d, J=6,22 Hz, 1H), 7,66 (s, J=8,30 Hz, 1H), 7,81 (dd, >8,30, 1,66 Hz, 1H), 5 8,14 (s, 1H), 10,41 (s, 1H).

Stap E: Bereiding van N-(2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)- benzyl)(3,5-bis(trifluormethyl)fenyl)methaanamine

HbT

,Λ€6_ ó 10

Een mengsel van 2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)benzal-dehyde (107 mg, 0,36 mmol) en 3,5-bistrifluormethylbenzylamine (113,8 mg, 0,37 mmol) in ethanol werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Er werd na-15 triumboorhydride (16,5 mg, 0,44 mmol) toegevoegd en het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd verdeeld tussen ethylacetaat en water. De organische laag werd gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 25+S silika-kolom van Biotage (geëlu-20 eerd met 0-15% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (150 mg, 80%) werd verkregen. 1 H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,94-1,23 (m, 6H), 1,51-1,59 (m, 1H), 1,62 (d, >7,05 Hz, 2H), 1,69-1,78 (m, 1H), 1,99 (d, >12,45 Hz, 1H), 3,17 (s, 3H), 3,83 (d, >12,86 Hz, 1H), 3,92 (d, >12,86 Hz, 1H), 4,00 (d, >6,64 Hz, 2H), 4,22 (d, >7,05 Hz, 1H), 7,50 (d, >8,30 Hz, 1H), 7,55 (d, >7,88 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,80 25 (s, 1H), 7,86 (s, 2H). MS (ES+) Berekend: 527,2, gevonden: 528,5 (M+l).

160

Stap F: Bereiding van (2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)cyaanamide F3CwC|:3 y 5

Aan een oplossing van N-(2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)-benzyl)(3,5-bis(trifluormethyl)fenyl)methaanamine (150 mg, 0,28 mmol) en Na0Ac.3H20 (77,6 mg, 0,57 mmol) in methanol werd cyanogeenbromide in acetonitril (5,0 M, 0,1 ml, 0,5 mmol) toegevoegd. De suspensie werd een nacht bij kamertempe-10 ratuur geroerd. Het mengsel werd toegevoerd aan een samplet en gezuiverd door chro-matografie over een 25+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (144,1 mg, 92%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,91-1,19 (m, 6H), 1,41-1,53 (m, 1H), 1,62 (d, J=7,88 Η, 2H), 1,71-1,79 (m, 1H), 1,96 (d, J= 12,45 Hz, 1H), 3,16 (s, 3H), 4,00 (d, J=7,47 Hz, 1H), 15 4,32 (d, J=14,l 1 Hz, 1H), 4,32 (s, 2H), 4,40 (d, J=14,ll Hz, 1H), 7,50 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,63 (s, J=8,30 Hz, 1H), 7,78 (s, 2H), 7,91 (s, 1H). MS (ES') Berekend: 552,2, gevonden: 551,5 (M-l).

Stap G: Bereiding van N-(2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-20 N-(3,5 -bis(trifluormethy l)benzy l)-2H-tetrazoo 1- 5 -amine 161

FgC^/^CF-, HN-n

X J

Κ^γ<Κ

Aan een oplossing van (2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)-benzyl)(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)cyaanamide (144 mg, 0,26 mmol) in tolueen 5 werd natriumazide (84,9 mg, 1,31 mmol) gevolgd door TEA.HC1 (178,8 mg, 1,3 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij 115°C geroerd. Er werd water toegevoegd en het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De samengevoegde organische lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 10 25+S silika-kolom van Biotage (geelueerd met 5-50% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (90,9 mg, 59%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,90-1,16 (m, 5H), 1,23-1,32 (m, 1H), 1,49-1,61 (m, 3H), 1,69 (s, 1H), 1,97 (d, J=12,45 Hz, 1H), 3,21 (s, 3H), 4,05 (d, J=7,88 Hz, 1H), 4,74-4,93 (m, 4H), 7,31 (s, 1H), 7,41 (d, J-7,88 Hz, 1H), 7,52 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,69 (s, 2H), 7,78 (s, 1H). MS (ES*) Bere-15 kend: 595,2, gevonden: 596,5 (M+l).

Stap H: Bereiding van N-(2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)- N-(3,5-bis(trifluormethylbenzyl)-2-(2-(tert-butyldimethylsilyloxy)ethyl)-2H-tetrazool- 5-amine 20 162 ~~y—Sr-O CF3 - 1 ^ Ij

h» x J

rrSr

Aan een mengsel van N-(2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)-benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2H-tetrazool-5-amine (40,4 mg, 0,068 5 mmol) en (2-broomethoxy)(tert-butyl)dimethylsilaan (25 mg, 22 μΐ, 0,10 mmol) in 2-MeTHF/DMF werd natriumcarbonaat (29,1 mg, 0,275 mmol) toegevoeg. De suspensie werd een nacht bij 60°C geroerd. De reactie werd verdund en gefiltreerd. Het filtraat werd geconcentreerd en het residu werd gezuiverd door chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-20% ethylacetaat in heptaan), waarbij de 10 titelverbinding (39,3 mg, 77%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 0,08 (s, 6H), 0,80 (s, 9H), 0,92-1,12 (m, 5H), 1,15-1,21 (m, 1H), 1,42-1,52 (m, 1H), 1,57-1,62 (m, 2H), 1,68-1,72 (m, J=2,90 Hz, 1H), 1,89 (d, J=12,44 Hz, 1H), 3,03 (s, 3H), 4,05-4,09 (m, 3H), 4,54 (t, J=5,60 Hz, 2H), 4,64-4,76 (m, 3H), 4,89 (d, J=16,17 hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,47 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,54 (d, J=9,12 Hz, 1H), 7,65 (s, 2H), 15 7,75 (s, 1H). MS (ES*) Berekend: 753,3, gevonden: 754,6 (M+l).

Stap I: Bereiding van 2-(5-{(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]amino}tetrazool-2-yl)ethanol 163 H0\ S T j

/Hi V

h» jf j

O

Aan N-(2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(tri-fluormethyl)benzyl)-2-(2-(tert-butyldimethylsilyloxy)ethyl)-2H-tetrazool-5-amine 5 (39,3 mg, 0,052 mmol) in THF (0,3 ml) werd bij kamertemperatuur TB AF in THF (1,0 M, 0,1 ml, 0,1 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd gezuiverd door chromatografïe over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-50% ethylacetaat in heptaan), waarbij een kleurloze olie (29,5 mg, 89%) werd verkregen. 10 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 0,94-1,13 (m, 5H), 1,17 (d, J=11,20 hz, 1H), 1,43-1,53 (m, 1H), 1,60 (s, 2H), 1,67-1,74 (m, J=2,90 Hz, 1H), 1,91 (d, J=12,86 Hz, 1H), 2,35-2,42 (m, 1H), 3,06 (s, 3H), 4,08 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,12-4,16 (m, J=5,39 Hz, 2H), 4,62 (t, J=4,98 Hz, 2H), 4,72 (s, 2H), 4,75 (d, J=16,18 Hz, 1H), 4,88 (d, J=16,18 Hz, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,49 (d, J=7,88 hz, 1H), 7,56 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,67 (s, 2H), 7,78 15 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 639,2, gevonden: 640,5 (M+l).

Voorbeeld 42: (3.5-bis-trifluormethvl-benzvD-r2-(cvclohexvl-methoxv-methvl)-5-tri-fluormethvl-benzvllcarbamidezuur-methvlester 164

FscV^V'CFa O V

F3C^-^J

Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]amine (voorbeeld 41, stap E, 22 mg, 0,042 mmol) in 5 dichloormethaan (1 ml) werd bij kamertemperatuur diisopropylethylamine (8,09 mg, 0,063 mmol) gevolgd door methylchloorformiaat (3,94 mg, 0,042 mmol) toegevoegd en er werd een nacht geroerd. Het reactiemengsel werd vervolgens onder vacuüm geconcentreerd en het product werd gezuiverd over een kolom (12+S) van Biotage, onder elutie met 2% ethylacetaat in heptaan (1CV), 2-20% (10CV), 20% (2CV), waarbij de 10 titelverbinding (7 mg, 30%) als een kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 1,0 (m, 6H), 1,4 (m, 1H), 1,5 (m, 2H), 1,7 (s, 1H), 1,9 (d, J=11,2 Hz, 1H), 3,0 (s, 3H), 3,8 (s, 3H), 4,0 (d, J=17,9 Hz, 1H), 4,6 (m, 4H), 7,25 (d, J=10,4 Hz, 1H), 7,45 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,53 (m, 3H), 7,7 (s, 1H), 7,8 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 585,2, gevonden: 630,3 (M+45).

15

Voorbeeld 43: N-(3.5-bis-trifluormethvl-benzvr)-N-r2-(cvclohexvl-methoxv-methvD-5-trifluormethvl-benzvll aceetamide

O

Λ/ XXo.

u 165

Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]amine (voorbeeld 41, stap E, 20 mg, 0,038 mmol) in dichloormethaan (1 ml) werd bij kamertemperatuur pyridine (9,0 mg, 0,114 mmol) gevolgd door acetylchloride (2,98 mg, 0,038 mmol) toegevoegd en er werd een nacht 5 geroerd. Het reactiemengsel werd verdund met dichloormethaan en gewassen met water. De organische laag werd gedroogd boven watervrij magnesiumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het product werd gezuiverd over een kolom (12+S) van Biotage, onder elutie met 2% ethylacetaat in heptaan (1CV), 2-20% (10CV), 20% (2CV), waarbij de titelverbinding (8 mg, 37%) als kleurloze olie werd verkregen. 'H-10 NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 0,9 (m, 6H), 1,2 (m, 3H), 1,7 (m, 1H), 1,9 (m, 1H), 2,2 (s, 3H), 3,1 (s, 3H), 3,9 (m, 1H), 4,6 (m, 4H), 7,4 (m, 1H), 7,5 (m, 2H), 7,6 (m, 2H), 7,8 (s, 1H). MS (ES+) Berekend: 569,2, gevonden: 614,2 (M+45).

Voorbeeld 44: l-G.5-bis-trifluormethvl-benzvO-l-r2-('cvclohexvl-methoxv-methvlV5-15 trifluormethvl-benzyllureum

Λ J

HaN N

xx°.

Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluomethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-20 methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]amine (voorbeeld 41, stap E, 20 mg, 0,038 mmol) in dichloormethaan (1 ml) werd bij kamertemperatuur diisopropylethylamine (6 mg, 0,045 mmol) gevolgd door fosgeen (18,8 mg, 0,038 mmol) toegevoegd en er werd 1 uur geroerd. Het reactiemengsel werd vervolgens met geconcentreerd ammoniumhydroxide (0,5 ml) behandeld en een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het reactiemengsel 25 werd verdund met dichloormethaan, gewassen met water, gedroogd boven watervrij magnesiumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het product werd gezuiverd over een kolom (12+S) van Biotage, onder elutie met 2% ethylacetaat in heptaan (1CV), 2- 166 20% (ÏOCV), 20% (2CV), waarbij de titelverbinding (7 mg, 30%) als kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,0 (m, 6H), 1,4 (m, 1H), 1,59 (m, 4H), 1,67 (s, 1H), 1,94 (d, J=12,4 Hz, 1H), 3,1 (s, 3H), 3,92 (d, J=7,8 Hz, 1H), 4,6 (m, 4H), 7,36 (s, 1H), 7,45 (d, J-7,9 Hz, 1H), 7,53 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,68 (s, 2H), 7,78 (s, 5 1H). MS (ES+) Berekend: 570,2, gevonden: 615,6 (M+45).

Bereiding 18: (3-broom-5-(trifluormethvl)fenvBmethanol

T

Br- 10

Stap A: 3-amino-5-(trifluormethvnbenzoëzuur f3c.^^.co2h NHjj 15 Aan een oplossing van 3-nitro-5-(trifluormethyl)benzoëzuur (9,8 g, 41,7 mmol) in methanol (100 ml) werd 10% palladium-op-koolstof (50% watergehalte, 1,5 g) toegevoegd en de suspensie werd onder een waterstofatmosfeer (40 psi) in een Pair® hydrogeneringsinrichting (Parr Instrument Company, Moline, IL) geschud. Na 2 uur werd de katalysator verwijderd door filtratie door een laag Celite, de laag werd ge-20 spoeld met methanol en het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verdampt, waarbij de titelverbinding als een gele vaste stof (7,90 g, 92%) werd verkregen.

LC-MS (ES-) Berekend: 205, gevonden: 204 (M-H). 'H-NMR (CD3OD) δ ppm 7,51 (brs, 1H), 7,47 (brs, 1H), 7,10 (brs, 1H).

25 Stap B: 3-broom-5-(trifluormethvDbenzoëzuur

F3C^^.C02H

Br 167

Aan een geroerde suspensie van 3-amino-5-(trifIuormethyI)benzoëzuur (7,90 g, 38,5 mmol) in een mengsel van waterstofbromide (48% w/v, 100 ml) en water (100 ml) werd bij 0°C langzaam een oplossing van natriumnitriet (7,97 g, 0,116 mol) in water (50 ml) toegevoegd. Na 1 uur werd de inhomogene gele vloeistof aan een oplossing van 5 koper(IT)bromide (16,44 g, 0,115 mol) in water (100 ml) toegevoegd en het mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het mengsel werd geëxtraheerd met diethylether (250 ml) en de waterige laag werd afgescheiden en geëxtraheerd met diethylether (3 x 75 ml). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd met watervrij natriumsulfaat en het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd, waarbij de 10 titelverbinding als een gele vaste stof (9,0 g, 87%) werd verkregen die zonder verdere zuivering bij de volgende reactie werd toegepast.

LC-MS (ES-) Berekend: 269, gevonden: 268 (M-H). 'H-NMR (CD3OD) δ ppm 8,38 (brs, 1H), 8,23 (brs, 1H), 8,09 (brs, 1H).

15 Stap C: (3-broom-5-(trifluormethvnfenvBmethanol FW°h

V

Br

Aan een oplossing van 3-broom-5-(trifluormethyl)benzoëzuur (2,13 g, 7,92 20 mmol) in watervrij THF werd onder stikstof een boraan-dimethylsulfoxide-complex (15,83 mmol, 7,91 ml) toegevoegd en het mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Vervolgens werd nog een kleine hoeveelheid boraan-dimethylsulfoxide-com-plex (15,83 mmol 7,91 ml) toegevoegd en er werd nog 4 uur bij kamertemperatuur geroerd. LC-MS gaf een volledig verbruik van het uitgangsmateriaal aan. Er werd voor-25 zichtig methanol toegevoegd totdat het bruisen stopte en vervolgens werd 2 N zoutzuur (20 ml) toegevoegd. Het mengsel werd 20 uur bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens onder verlaagde druk tot droogte geconcentreerd. Het residu werd geëxtraheerd met diethylether en de oplossing werd gewassen met water. De organische laag werd gedroogd met watervrij natriumsulfaat en het oplosmiddel werd onder vacuüm verwij-30 derd. Het residu werd opgelost in een mengsel van dichloormethaan en methanol, er werd silikagel toegevoegd en het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. De vaste 168 stof werd in een silikagel-kolom (50 g) gebracht en geëlueerd met hexaan-ethylacetaat (85:15), waarbij de titelverbinding als een gele olie (1,16 g, 57%) werd verkregen die kristalliseerde bij bewaren.

LC-MS (ES-) Berekend: 255, gevonden: 254 (M-H). 'H-NMR (CDCb) δ ppm 7,72 5 (brs, 1H), 7,69 (brs, 1H), 7,57 (brs, 1H), 4,77 (s, 2H), 1,86 (brs, 1H).

Voorbeeld 45: 3-jrF2-(cvclohexyl-methoxv-methvD-5-trifluormethvl-benzvH-(2-me-thvl-2H-tetrazool-5-vnaminolmethvB-5-trifluormethvl-benzonitril NC.

\ IJ

n* X ) 10

Stap A: Bereiding van 3-hydroxymethyl-5-trifluormethyl-benzonitril NCs^yCFa

^OH

15

Een mengsel van (3-broom-5-trifluormethyl-fenyl)methanol (500 mg, 1,96 mmol), zinkcyanide (230 mg, 1,96 mmol) en tetrakis(trifenylfosfien)palladium (68 mg, 0,059 mmol) in DMF (2 ml) werd 20 minuten in een magnetron op 160°C verhit. Het mengsel werd verdeeld tussen ethylether (20 ml) en water (10 ml). De waterige laag 20 werd geëxtraheerd met ether en de samengevoegde organisch lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd (MgSC>4) en onder vacuüm geconcentreerd. Het product werd gezuiverd over een kolom (12+M) van Biotage, onder elutie met 2% ethyl-acetaat in heptaan (1CV), 2-20% (10CV), 20% (2CV), waarbij de titelverbinding (240 169 mg, 61%) als een kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 2,05 (s, 1H), 4,8 (s, 2H), 7,82 (s, 1H), 7,86 (s, 2H).

Stap B: Bereiding van 3-broommethyl-5-trifluormethyl-benzonitril 5 nc^^cf, w

Een oplossing van 3-hydroxymethyl-5-trifluormethyl-benzonitril (100 mg, 0,497 mmol) in dichloormethaan (1 ml) van 0°C werd 1 uur bij 0°C druppelsgewijs met een 10 oplossing van fosfortribromide (0,3 ml, 1 M, 0,3 mmol) in dichloormethaan bereid. Het ijsbad werd verwijderd en de reactie werd 2 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met een verzadigde NaHCC>3-oplossing totdat de reactie niet langer geel-oranje van kleur was. De reactie werd geëxtraheerd met dichloormethaan en de organische laag werd gedroogd boven watervrij magnesiumsulfaat en onder va-15 cuüm geconcentreerd. Het ruwe residu werd gezuiverd door chromatografie over een kolom (12+M) van Biotage, onder elutie met ethylacetaat in heptaan 0-30% (10CV), 30% (2CV), waarbij de titelverbinding (56 mg, 43%) als een kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 4,46 (s, 2H), 7,80 (s, 1H), 7,84 (s, 2H).

20 Stap C: Bereiding van 3-azidomethyl-5-trifluormethyl-benzonitril

TT

l N3

Een oplossing van 3-hydroxymethyl-5-trifluormethyl-benzonitril (200 mg, 0,994 25 mmol) in tolueen (1 ml) van 0°C werd behandeld met difenylfosforylazide (328 mg, 1,19 mmol), gevolgd door DBU (182 mg, 1,19 mmol) en werd 2 uur bij 0°C geroerd. Het ijsbad werd verwijderd en de reactie werd een nacht bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd verdund met ethylacetaat en gewassen met een 10% HCl-oplossing, 170 gedroogd boven watervrij magnesiumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door silikagel-chromatografie over een 12+S silika-kolom van Biotage (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in hexanen), waarbij de titelverbinding (150 g, 67%) als een kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 4,54 5 (s, 2H), 7,82 (s, 2H), 7,88 (s, 1H).

Stap D: Bereiding van 3-aminomethyl-5-trifluormethyl-benzonitril ^NH2 10

Een oplossing van 3-azidomethyl-5-trifluormethyl-benzonitril (140 mg, 0,619 mmol) in THF (1 ml) werd bij kamertemperatuur behandeld met trimethylfosfien (94,2 mg, 1,24 mmol) en werd 2 uur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met water en 30 minuten geroerd. De reactie werd geëxtraheerd met ethylether en de organische laag 15 werd gedroogd boven watervrij magnesiumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het ruwe product (70 mg, 56%) werd zonder verdere zuivering toegepast. 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ ppm 1,64 (s, 2H), 3,98 (s, 2H), 7,74 (s, 1H), 7,83 (s, 2H).

Stap E: Bereiding van [2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-20 methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine \ ,N~N IM, jf n^nh 171

Een oplossing van 2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzalde-hyde (90 mg, 0,30 mmol) en 2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (35,6 mg, 0,36 mol) in tolueen (1,5 ml) werd een nacht op 50°C verwarmd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd en het reactiemengsel werd verdund met ethanol (2 ml) en behandeld 5 met natriumboorhydride (21,8 mg, 0,577 mmol) en een nacht bij kamertemperatuur geroerd. Het reactiemengsel werd onder vacuüm geconcentreerd en verdund met ethylacetaat (100 ml) en gewassen met water (30 ml). De organische laag werd gedroogd boven watervrij magnesiumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het ruwe product werd gezuiverd over een kolom (12+M) van Biotage, onder elutie met 7% 10 ethylacetaat in heptaan (1CV), 7-60% (10CV), 60% (2CV), waarbij de titelverbinding (65 mg, 58%) als een kleurloze olie werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,1 (m, 4H), 1,25 (s, 2H), 1,62 (m, 3H), 1,76 (m, 1H), 1,99 (d, J=14,l Hz, 1H), 3,16 (s, 3H), 4,13 (s, 3H), 4,2 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,48 (dd, J=5,4 Hz, 1H), 4,65 (dd, J=6,6 Hz, 1H), 4,93 (m, 1H), 7,47 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,54 (d, J=8,3 hz, 1H), 7,67 (s, 15 1H). MS (ES+) Berekend: 383,4, gevonden: 349,3 (M-34).

Stap F: Bereiding van 3-{[[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-5-trifluormethyl-benzonitril

\ I X

n-n V

vv

F3CyV

20

Aan een oplossing van [2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-ben-zyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine (28 mg, 0,073 mmol) in DMF (2 ml) werd bij 0°C onder stikstof natriumhydride (4,4 mg, 0,11 mmol, 60% dispersie in anorganische 25 olie) toegevoegd. De reactie werd 30 minuten geroerd, waarbij men deze liet opwarmen tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd vervolgens bij kamertemperatuur met 3-(broommethyl)-5-(trifluormethyl)benzonitril (19,3 mg, 0,073 mmol) behandeld en 172 een nacht geroerd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd. Het residu werd verdund met ethylacetaat en gewassen met een verzadigde natriumwaterstofcarbonaat-oplossing, water en een zoutoplossing, gedroogd boven watervrij magnesiumsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het product werd gezuiverd over een kolom (12+S) van 5 Biotage, onder elutie met 2% ethylacetaat in heptaan (1CV), 2-20% (10CV), 20% (2CV), waarbij de titelverbinding (21 mg, 49%) als een kleurloze olie werd verkregen. JH-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,07 (m, 4H), 1,2 (m, 3H), 1,65 (m, 3H), 1,73 (m, 1H), 3,18 (s, 3H), 4,06 (s, 3H), 4,2 (m, 1H), 4,67-5,04 (m, 2H), 5,4 (m, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,50 (m, 3H), 7,5 (m, 2H). MS (ES") Berekend: 566,2, gevonden: 567,5 (M+l).

10 Volgens de werkwijzen die zijn beschreven in de voorbeelden 42-45 en onder toepassing van het desbetreffende amine werden de voorbeelden 46-50 bereid.

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 46 N-(3-cyaan-5-trifluorme- 526,2 571,6 thyl-benzyl)-N-[2-(cyclo- q (M+45)

hexyl-methoxy-methyl)- -V

5-trifluormethyl-ben- zyljaceetamide

O

47 N-[2-(cyclohexyl-me- 501,1 470,3 thoxy-methyl)-5-trifluor- lij/J (M-31) methyl-benzyl]-N-(3,5- 11 1 dichloor-benzyl)-aceeta- 1 mide |i _

U

48 [2-(cyclohexyl-methoxy- 5T7~7^7~^ül 541,2 542,5 \ 1 1 methyl)-5-trifluormethyl- V, Λ benzyl]-(3,5-dichloor- hf, Ü 1

Ν' N

benzyl)-(2-methyl-2H- _ _ j tetrazool-5-yl)amine

1_ o II

173

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 49 [2-(cyclohexyl-methoxy- 517,2 486,4 methyl)-5-trifluormethyl- (M-31)

benzyl]-(3,5-dichloor- W

benzyl)-carbamidezuur-

methylester | JL

Ó 50 (3-cyaan-5-trifluorme- NC^^^CF3 542,2 587,6 thyl-benzyl)-[2-(cyclo- (M+45) hexyl-methoxy-methyl)- ' 5-trifluormethyl-benzyl]-carbamidezuur-methyl- :! J ~ ester ί | o Μ

Bereiding 19: f2-broom-5-itrifluormethvObenzvloxvltriisopropvlsilaan

Ai O v^-*·

FgCs^J / ^^"Br 5

Aan een oplossing van (2-broom-5-(trifluormethyl)fenyl)methanol (10 g, 39 mmol) in N,N-dimethylformamide (100 ml) werd onder N? imidazool (6,82 g, 100,1 mmol) en triisopropylsilylchloride (9,6 ml, 55,2 mmol) toegevoegd. De reactie werd 48 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd verdund met ethylacetaat en gewas-10 sen met water (4X) e een zoutoplossing, e organische laag werd gedroogd boven natri-umsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 80 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-10% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (16,47 g, 100%) als een kleurloze olie werd verkregen. MS (GC) Berekend: 410,0, gevonden: 391 (M-F). 'H-NMR (400 174 MHz, CDCh) δ ppm 7,94 (s, 1H), 7,62 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,39 (d, J=8,30 Hz, 1H), 4,84 (s, 2H), 1,25 (m, 3H), 1,12 (d, 18H).

Bereiding 20: 1 -(4-(trifluormethvD-2-((triisopropvlsilvloxV)methvBfenvncvcloheptanol 5

^sA

o V"

Aan een oplossing van (2-broom-5-(trifluormethyl)benzyloxy)triisopropylsilaan (604 mg, 1,47 mmol) in tetrahydrofuran (4 ml) werd bij -78°C onder N2 in 10 minuten 10 druppelsgewijs n-butyllithium (0,9 ml, 2,25 mmol, 2,5 M in hexanen) toegevoegd. De reactie werd 5 minuten geroerd. In 6 minuten werd druppelsgewijs een oplossing van cycloheptanon (0,21 ml, 1,78 mmol) in hexanen (1,0 ml) toegevoegd. Na 1 uur roeren bij -78°C werd het bad verwijderd en werd 1 uur geroerd. Het reactiemengsel werd afgeschrikt met waterige verzadigde ammoniumchloride en geëxtraheerd met ethyl-15 acetaat. De organische laag werd twee keer met water en vervolgens met een zoutoplossing gewassen. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-10% ethylacetaat in hep-taan), waarbij 387 mg (59,3%) van de titelverbinding als een kleurloze olie werd ver-20 kregen. MS-GC (EI): Berekend: 444,6, gevonden: 426 (M-H2O). 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ ppm 7,62 (s, 1H), 7,49 (dd, J=8,30, 7,88 Hz, 1H), 7,44 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 4,03 (s, 1H), 2,07-1,98 (m, 4H), 1,94-1,82 (m, 2H), 1,79-1,69 (m, 2H), 1,67-1,5 (m, 4H), 1,19 (m, 3H), 1,08 (s, 18H).

25 Bereiding 21: (2-( 1 -methoxvcvcloheptvD-5-(trifluormethvnbenzyloxvKriisopropyl- silaan 175 r IX°.

o

Aan een oplossing van l-(4-(trifluormethyl)-2-((triisopropylsiIyloxy)methyl)-fenyl)cycloheptanol (284 mg, 0,639 mmol) in tetrahydrofuran (3,5 ml) werd bij 5 kamertemperatuur natriumhydride (40 mg, 1 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. Na 15 minuten roeren bij kamertemperatuur werd methyljodide (80 μΐ, 1,28 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur geroerd. Er werd meer natriumhydride (20 mg, 0,5 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. Na 5 minuten werd methyljodide (0,1 ml, 1,6 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur 10 geroerd. De reactie werd afgeschrikt met water en geëxtraheerd met ethylacetaat. De organische laag werd gewassen met water (2x) en een zoutoplossing. De organische laag werd gedroogd boven natriuinsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-15% ethylacetaat in heptanen), waarbij 279 mg (95,2%) van de 15 titelverbinding als een kleurloze olie werd verkregen. MS-GC (EI): Berekend: 458,6, gevonden: 439 (M-F). ‘H-NMR (400 MHz, CDCh) δ ppm 8,22 (d, J=l,24 Hz, 1H), 7,44 (dd, J=8,30,1,24 Hz, 1H), 7,34 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,16 (m, 2H), 2,01 (m, 2H), 2,0 (dd, J=14,94, 14,52 Hz, 1H), 1,97 (dd, 1=14,94, 14,52 Hz, 1H), 1,83-1,58 (m, 6H), 1,3-1,16 (m, 2H), 1,13 (s, 12H), 1,11 (s, 6H).

20

Bereiding 22: (2-( 1 -methoxvcvcloheptvD-5-(trifluormethvl)fenvOmethanol

OH

176

Aan een oplossing van (2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(trifluomethyl)benzyloxy)-triisopropylsilaan (276 mg, 0,602 mmol) in tetrahydrofiiran (3,5 ml) werd tetrabutyl-ammoniumfluoride (0,62 ml, 0,62 mmol, 1,0 M oplossing in tetrahydrofiiran) toegevoegd. De reactie werd 1,5 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel 5 werd onder verlaagde druk verdampt. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincon NE) (geëlueerd met 10-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij 169 mg (92,9%) van de titelverbinding als een kleurloze gom werd verkregen. MS-GC (EI): Berekend: 302,3, gevonden: 302 (M). 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 7,89 (s, 1H), 7,49 (dd, J=8,30 Hz, 1H), 7,40 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,03 (s, 10 2H), 3,00 (s, 3H), 2,54 (bs, 1H), 2,23 (m, 2H), 2,04 (m, 2H), 1,88-1,55 (m, 8H).

Bereiding 23: 2-(l-methoxycvcloheptvl>5-(trifluonnethvDbenzaldehvde

O

15

Aan een oplossing van (2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(rifluormethyl)fenyl)-methanol (167 mg, 0,552 mmol) in dichloormethaan (3,0 ml) werd Dess-Martin reagens (290 mg, 0,683 mmol) toegevoegd. De reactie werd 5 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd verdund met ethylacetaat en afgeschrikt met wa-20 terig 1 N natriumhydroxide. Na het afscheiden van de waterige laag werd de organische laag gewassen met water en een zoutoplossing. Deze werd gedroogd boven natriumsul-faat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een si-lika-patroon van 1 g van Bakerbond (Mallinkrodt Baker Ine. Phillipsburg, NJ) (geëlueerd met 0-5% heptaan) waarbij 167 mg van een troebele olie werd verkregen. 'H-25 NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 10,91 (s, 1H), 8,11 (d, J=2,07 Hz, 1H), 7,73 (dd, J=8,71, 8,30 Hz, 1H), 7,48 (d, J=7,88 Hz, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,25 (m, 2H), 2,09 (m, 2H), 1,94-1,57 (m, 8H).

177

Bereiding 24: N-(2-( 1 -methoxycvclohept vD-5-(trifluorrnethvnbenzvlV3.S-bisftrifluor-methvDfenvDmethaanamine y

HN

5

Een mengsel van 2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzaldehyde (167 mg, 0,556 mmol) en 3,5-bistrifluormethylbenzylamine (150 mg, 0,616 mmol) in tolueen (4 ml) werd 16 uur onder terugvloeikoeling gekookt, waarna het oplosmiddel werd verwijderd. Er werd ethanol (4 ml) en natriumboorhydride (31 mg, 0,819 mmol) aan 10 het residu toegevoegd. Het verkregen mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verdampt. Het residu werd opgenomen in ethylacetaat en twee keer met water gewassen en gedroogd boven natriumsul-faat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-25% 15 ethylacetaat in heptaan), waarbij 194 mg (66,1% voor 2 stappen) van de titelverbinding als een gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 527,4, gevonden: 528,4 (M+H).

Voorbeeld 51: N-t2-( 1 -methoxvcvcloheptvl)-5-ttrifluormethvl)benzyl)-N-f3.5-bisitri-fluormeth vnbenzvlV2H-tetrazoo 1-5 -amine 20 178

FsCw^CFa

HN~N

H' X J

TXo.

Aan een oplossing van N-(2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-(3,5-bis(trifluormethyl)fenyl)methaanamine (181 mg, 0,343 mmol) en natriumacetaat-5 trihydraat (100 mg, 0,734 mmol) in methanol (2 ml) werd cyanogeenbromide (0,9 ml, 4,5 mmol, 5,0 M oplossing in acetonitril) toegevoegd. De reactie werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verdampt. Het residu werd opgelost in ethylacetaat en twee keer met water en vervolgens met een zoutoplossing gewassen. Dit werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde 10 druk geconcentreerd, waarbij 199 mg (68%) ruwe gom werd verkregen. MS (ES-): Berekend: 552,4, gevonden: 551,5 (M-H).

Een mengsel van amino-nitril (197 mg, 0,357 mmol), natriumazide (120 mg, 1,84 mmol) en triethylamine-hydrochloride (247 mg, 1,79 mmol) in tolueen (3 ml) werd 16 uur onder terugvloeikoeling gekookt. De reactie werd verdund met ethylacetaat en twee 15 keer met water en vervolgens een zoutoplossing gewassen. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 20-75% ethylacetaat), waarbij 145 mg (70% opbrengst voor 2 stappen) kleurloze gom werd verkregen. MS (ES*): Berekend: 595,5, gevonden: 596,5 (M+H). 20 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 7,79 (s, 1H), 7,72 (s, 2H), 7,52 (m, 2H), 7,35 (s, 1H), 4,92 (s, 4H), 3,15 (bm, 3H), 2,17 m, 2H), 1,98 (m, 2H), 1,86-1,47 (m, 8H).

Voorbeeld 52: N-f2-n-methoxvcvcloheptviy5-(trifluormethvnbenzvD-N-(3.5-bis(tri-fluormethvnbenzvP)-2-methyl-2H-tetrazool-5-aminc 25 179 F3C.

VN v

n* it J

isr^rr

Aan een oplossing van N-(2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2H-tetrazool-5-amine (145 mg, 0,243 mmol) in 2-5 methyltetrahydrofuran (2,5 ml) werd natriumcarbonaat (110 mg, 1,03 mmol), ,N-di-methylformamide (1,0 ml) en dimethylsulfaat (70 μΐ, 0,739 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur bij 60°C geroerd. De reactie werd verdund met ethylacetaat en twee keer met water en vervolgens een zoutoplossing gewassen. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu 10 werd gezuiverd met een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij 120 mg (opbrengst 80,9%) van een kleurloze gom werd verkregen die bij bewaren kristalliseerde tot een witte vaste stof. Smeltpunt: 103-104°C. MS (ES+): Berekend: 609,5, gevonden: 610,5 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDCf) δ ppm 7,77 (s, 1H), 7,72 (s, 2H), 7,47 (d, J=7,47 15 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,41 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,79 (s, 2H), 4,20 (s, 3H), 2,94 (s, 3H), 2,12 (m, 2H), 1,97 (m, 2H), 1,8-1,46 (m, 8H).

Bereiding 25: N-(2-('l-methoxvcvcloheptvn-5-ttrifluormethvnbenzvn-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine 20 /

N~H

X 'J*

HN^N

FaCs^J

O' 180

Een mengsel van 2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzaldehyde (118 mg, 0,393 mmol) en 2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (148 mg, 1,49 mmol) in tolueen (3 ml) werd 16 uur onder terugvloeikoeling gekookt, waarna het oplosmiddel werd verwijderd waarbij een gom-achtige vaste stof werd verkregen. Er werden ethanol (3 5 ml) en natriumboorhydride (25 mg, 0,660 mmol) aan het residu toegevoegd. Het verkregen mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verdampt. Het residu werd opgenomen in ethylacetaat en twee keer met water gewassen en gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het ruwe product werd gezuiverd over 4 g RediSep (geëlueerd met 20-10 60% ethylacetaat in heptaan), waarbij 83 mg (opbrengst 55%) van de titelverbinding werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 383,4, gevonden: 352,3 (M-OMe). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,84 (s, 1H), 7,48 (dd, J=8,77 Hz, 1H), 7,42 (d, J=8,30 Hz, 1H), 4,92 (d, J=6,22 Hz, 2H), 4,75 (t, J=6,22 Hz, 1H), 4,16 (s, 3H), 3,03 (s, 3H), 2,26 (m, 2H), 2,07 (m, 2H), 1,88-1,77 (m, 2H), 1,75-1,65 (m, 2H), 1,64-1,52 (m, 4H).

15

Voorbeeld 53: 3-(ï(2-(l-methoxvcvcloheptvl)-5-('trifluormethvnbenzvn(2-methvl-2H-tetrazool-5-vr)amino)methvn-5-rtrifluormethvnbenzonitril

Λ sO N

\ | J

V" Η* X j 20

Een mengsel van N-(2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (75 mg, 0,2 mmol) werd geroerd in N,n-dimethylformamide (1 ml). Hieraan werd natriumhydride (16 mg, 0,4 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. Na 20 minuten roeren bij kamertemperatuur 25 werd een oplossing van 3-(broommethyl)-5-(trifluormethyl)benzonitril (60 mg, 0,227 mmol) in N,N-dimethylformamide (0,1 ml) toegevoegd. De reactie werd 5 uur bij 181 kamertemperatuur geroerd. Er werd meer natriumhydride (5 mg, 0,125 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. De reactie werd 15 minuten geroerd. De reactie werd afgeschrikt met water, verdund met ethylacetaat en gewassen met water (2x) en een zoutoplossing. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat en 5 onder verlaagde druk geconcentreerd. Het ruwe product werd gezuiverd over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij 86 mg (opbrengst 78%) van de titelverbinding als een gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 566,5, gevonden: 567,3 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,81 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,48 (d, J=8,30 Hz, 10 1H), 7,45 (s, 1H), 7,42 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,75 (s, 2H), 4,21 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 2,13 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 1,82-1,62 (m, 4H), 1,62-1,47 (m, 4H).

Bereiding 26: t2-([ï3.5-bis-trifluormethvl-benzvlV('2-methvl-2H-tetrazool-5-vl)aminol-methvH-4-trifÏuormethvl-fenvncvclohexvl-methanon 15

\ TT

N-N

n" x J

TXo

Een mengsel van 2-{[(3,5-bis-trifluoimethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-benzonitril (445 mg, 0,875 mmol) en cyclo-20 hexylmagnesiumchloride (1,8 ml, 3,6 mmol, 2,0 M in diethylether) in tolueen (7 ml) werd 50 minuten op 66°C verwarmd in een magnetron-reactor. De reactie werd toegevoegd aan waterig 2N zoutzuur (30 ml) en 42 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De organische laag werd gewassen met water en een zoutoplossing. Deze werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder 25 verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een ediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-35 ethylacetaat in heptaan), 182 waarbij 235 mg (45,2%) van een lichte geel-oranje gom werd verkregen. MS (ES*): Berekend: 593,4, gevonden: 594,4 (M+H). ‘H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,74 (s, 1H), 7,67 (s, 2H), 7,64 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,58 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 4,83 (s, 2H), 4,80 (s, 2H), 4,19 (s, 3H), 3,02 (m, 1H), 1,81 (d, J=9,96 Hz, 3H), 1,71 (d, 5 .1=12,86 Hz, 1H), 1,42-1,18 (m,6H).

Bereiding 27: (2-(r(3.5-bis-trifluormethvl-benzvl)-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vnaminol-methvü-4-trifluormethvl-fenvBcvclohexvl-methanol

Vn vv

O

Een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanon (152 mg, 0,256 mmol) en natriumboorhydride (22 mg, 0,582 mmol) in methanol (1,5 ml) werd 16 uur bij 15 kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verdampt. Het residu werd opgenomen in ethylacetaat en twee keer met water en vervolgens met een zoutoplossing gewassen. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 20-50% ethylacetaat 20 in heptaan), waarbij 152 mg (opbrengst 99,7%) van de titelverbinding als een kleurloze gom werd verkregen. MS (ES*): Berekend: 595,5, gevonden: 596,1 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 778 (s, 1H), 7,66 (s, 2H), 7,57 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,55 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,36 (s, 1H), 4,88 (d, 1=15,77 Hz, 1H), 4,79 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,76 (d, 1=15,77 Hz, 1H), 4,70 (d, J=16,18 Hz, 1H), 4,66 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 25 2,20 (bs, 1H), 1,94 (d, J= 12,45 Hz, 1H), 1,78 (m, 1H), 1,69-1,51 (m, 4H), 1,2-0,88 (m, 4H).

183

Bereiding 28: (3.5-bis-trifluormethvl-benzvO-r2-(broom-cvclohexvl-methvl)-5-trifluor-methyl-benzvH-(2-methvl-2H-tetrazool-5-yr)amine F3cyV^ CF3

n* X J

n^nt’ XXbt 5

Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra-zool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanol (51 mg, 0,086 mmol) in dichloormethaan (1,2 ml) werd N-broomsuccinimide (63 mg, 0,354 mmol) en 10 trifenylfosfien (97 mg, 0,369 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd rechtstreeks gezuiverd over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-45% ethylacetaat in heptaan), waarbij 27 mg (opbrengst 48%) van de titelverbinding als een kleurloze gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 657,1, gevonden: 658,3 (M+H). 'H-NMR (400 15 MHz, CDCh) δ ppm 7,78 (s, 1H), 7,71 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,59 (d, J=8,30 hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 4,99 (d, J=9,96 Hz, 1H), 4,91 (d, J=15,35 Hz, 1H), 4,68 (q, J=15,77 Hz, 2H), 4,68 (d, J=16,26 Hz, 1H), 4,24 (s, 3H), 2,34 (d, J=12,86, 1H), 2,00 (m, 1H), 1,80 (d, 13,28 Hz, 1H), 1,63 (t, J= 10,35 Hz, 2H), 1,39-1,22 (m, 2H), 1,14 (m, 2H), 0,98 (m, 1H), 0,76 (m, 1H).

20

Voorbeeld 54: (3.5-bis-trifluormethvl-benzvlVr2-(cvclohexvl-methvlsulfanvl-methyll- 5-trifluormethvl-benzvll-('2-methvl-2H-tetrazool-5-vl)amine 184 ^cwcf3 V, cr

Η.- X J

sr'nx

Ti 1

T

Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(broom-cyclohexyl-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine (26 mg, 0,039 5 mmol) in THF (1 ml) werd natriumthiomethoxide (8 mg, 0,114 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd verdund met ethylacetaat en twee keer met water gewassen. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat en geconcentreerd, waarbij 23 mg (opbrengst 93%) van de titelverbinding als een gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 625,6, gevonden: 10 626,0 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,79 (s, 1H), 7,67 (s, 2H), 7,57 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,75-7,56 (bs, 1H), 7,27 (s, 1H), 4,79 (t, J=15,35 Hz, 2H), 4,69 (t, J= 15,77 Hz, 2H), 4,23 (s, 3H), 3,81 (bs, 1H), 2,21 (d, J=12,86 Hz, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,76-1,57 (m, 4H), 1,36 (d, J=12,45 Hz, 1H), 1,25-1,03 (m, 3H), 1,0-0,76 (m, 2H).

15 Voorbeeld 55: ('3.5-bis-trifluormethvl-benzvlVr2-rcvclohexvl-methaansulfonvl- methvl)-5-trifluormethvl-benzvll-(2-methyl-2H-tetrazool-5-vl)amine F3C_^XF3

\ IJ

N-n Xf

K- i J

ur'ttr TX> ó° 185

Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methyl-sulfanyl-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine (27 mg, 0,043 mmol) in dichloormethaan (1,0 ml) werd meta-chloorperbenzoëzuur (17 mg, 0,098 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Na het 5 toevoegen van verzadigd waterig natriumwaterstofcarbonaat (2 druppels) werd de reactie 15 minuten geroerd. Het verkregen mengsel werd gefiltreerd over natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-40% ethylacetaat in heptaan), waarbij 16,5 mg (opbrengst 58%) van de titelverbinding als 10 een gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 657,6, gevonden: 658,5 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,89 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,70 (s, 2H), 7,67 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,91 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,83 (d, J=16,18 Hz, 1H), 4,62 (d, J=14,ll Hz, 1H), 4,58 (d, J=15,77 Hz, 1H), 4,52 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,24 (s, 3H), 2,58 (s, 3H), 2,39 (m, 2H), 1,78 (d, J=14,ll Hz, 1H), 1,63 (t, J=12,86, 12,03 Hz, 15 2H), 1,4-1,05 (m, 5H), 0,79 (m, 1H).

Bereiding 29: Cvclobutvlmagnesiumbromide ,Br

Mg

Cf 20

Aan een suspensie van magnesium-granules (210 mg, 8,64 mmol) en jood (54 mg, 0,212 mmol) in dimethoxyethaan (3,5 ml) werd onder roeren in een oliebad bij 50°C cyclobutylbromide (0,2 ml, 2,12 mmol) toegevoegd. Er werd joodmethaan (0,05 ml, 0,8 mmol), gevolgd door cyclobutylbromide (0,2 ml, 2,12 mmol) toegevoegd. Er 25 werd een extra hoeveelheid joodmethaan (0,1 ml, 1,6 mmol) toegevoegd en vervolgens werd de reactie 1,5 uur bij 50°C geroerd voordat men deze liet afkoelen tot kamertemperatuur. De cyclobutylmagnesiumbromide-concentratie werd als volgt bepaald onder toepassing van de werkwijze die is beschreven door Love, B.E. en Jones, E.G., Journal of Organic Chemistry, 1999, 64, 3755.

30 Aan een oplossing van salicylaldehyde-fenylhydrazon (80 mg, 0,376 mmol) in tetrahydrofuran (10 ml) werd bij kamertemperatuur druppelsgewijs de cyclobutyl- 186 magnesiumbromide-oplossing toegevoegd. Het eindpunt, aangegeven door een kleurverandering van geel naar oranje, werd bereikt na de toevoeging van 0,62 ml van de cyclobutylmagnesiumbromide-oplossing, hetgeen duidt op een molariteit van 0,6 M.

5 Bereiding 30: f2-(((3'5-bis(trifluormethv0benzvn(2-rnethvl-2H-tetrazool-5-vDaminoV methvD-4-('trifluormethvlfenvP('cvclobutvl)methanon p3<^wCF3

VhX?

K' i. J

IXo 10 Aan een oplossing van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-broom-5-trifluor- methyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-ylamine (bereiding 6, 0,5 mmol, 281 mg) in watervrij THF werd isopropylmagnesiumchloride/lithiumchloride in THF (0,72 M, 1,5 mmol, 2,1 ml, bereid volgens de werkwijze die is beschreven in Angew. Chem. Int. Ed. 2004, 43, 3333) toegevoegd. Het mengsel werd afgekoeld tot 0°C en 3 uur geroerd 15 voordat het werd afgekoeld tot -78°C. Hieraan werd een oplossing van CuCN.2LiCl in THF (1 M, 0,5 mmol, 0,5 ml, oplossing bereid door het roeren van 1 equivalent CuCN met 2 equivalent vers gedroogd LiCl in watervrij THF (1 ml per equivalent) totdat alle vaste stof was opgelost) toegevoegd. Na 30 minuten bij -78°C werd een oplossing van cyclobutylcarbonylchloride (1,5 mmol, 178 mg) in watervrij THF (2 ml) toegevoegd en 20 liet men het mengsel opwarmen tot kamertemperatuur voordat het werd uitgegoten in een waterige oplossing van ammoniumchloride waaraan een weinig ammoniumhydroxide was toegevoegd. Dit mengsel werd gefiltreerd door Celite® en geëxtraheerd met dichloormethaan (2x). De organische laag werd gedroogd met watervrij natriumsulfaat en onder verlaagde druk tot droogte ingedampt. Het residu 25 werd gezuiverd door silika-chromatografïe onder toepassing van een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 0-65% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding (81,7 mg, 29%) werd verkregen. MS (ES+): 565,4, gevonden; 566,4 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm 7,75 (s, 1H), 7,68 (s, 2H), 7,66 (d, J=8,71 Hz, 1H), 7,56 (d, J=9,54 Hz, 2H), 5,00 (s, 2H), 4,84 (s, 2H), 4,19 (s, 3H), 3,88 (m, 1H), 2,4-1,21 (m, 4H), 2,1-1,20 (m, 1H), 1,96-1,8 (m, 1H).

187 5 Bereiding 31: (2-(iï3.5-bis-trifluomethvl-benzv0-i2-methvl-2H-tetrazool-5-vnamino1-methyli-4-trifluormethvl-fenvDcyclobutvl-methanol XF3

\ IJ

N, 1 J

f3c 10 Aan een oplossing van 2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H- tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-benzaldehyde (1,5 g, 2,9 mmol) in tetrahydrofuran (14 ml) werd bij -10°C druppelsgewijs cyclobutylmagnesiumbromide (9 ml, 5,4 mmol, 0,6 M oplossing in tetrahydrofuran) toegevoegd. De reactie werd 1,5 uur bij -10°C geroerd. Voor het afschrikken van de reactie werd bij 0°C waterig 2 N 15 zoutzuur toegevoegd. De reactie werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De organische laag werd gewassen met waterig 2 N zoutzuur, water en een zoutoplossing. Deze werd gedroogd met natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 15-70% ethylacetaat in heptaan), waarbij 420 mg (opbrengst 25%) als 20 een gom werd verkregen. MS (ES-): Berekend: 567,4, gevonden: 612,6 (M+HCO2 ). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,78 (s, 1H), 7,66 (s, 2H), 7,52 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,49 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 4,86 (q, J=15,77 Hz, 2H), 4,86 (s, 1H), 4,77 (q, J=15,77, 16,18 Hz, 2H), 4,20 (s, 3H), 2,68 (m, 1H), 2,05-1,96 (m, 2H), 1,93-1,76 (m, 3H), 1,70 (m, 1H).

188

Voorbeeld 56: f3.5-bis-trifluormethvl-benzvlVr2-(cvclobutvl-ethoxy-ethvn-5-trifluor-methvl-benzvH-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vDamine \ 1 j

Η,» ί J

5 '

Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclobutyl-methanol (23 mg, 0,041 mmol) in THF (1,5 ml) werd bij 0°C natriumhydride (15 mg, 0,375 mmol, 60% 10 dispersie in anorganische olie) toegevoegd. Na 30 minuten roeren bij kamertemperatuur werd ethyljodide (0,05 ml, 0,625 mmol) toegevoegd. De reactie werd 2 uur geroerd. Er werd meer natriumhydride (15 mg, 0,375 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) en joodethaan (0,05 ml, 0,625 mmol) toegevoegd. De reactie werd 72 uur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met 2 druppels water. De reactie werd gefiltreerd over een 15 Bakerbond silika-patroon van 1 g (Mallinkrodt Baker Inc. Phillipsburg, NJ) (geëlueerd met ethylacetaat). Het ruwe product werd gezuiverd met een RediSep kolom (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij 21 mg (opbrengst 87%) van een gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 595,5, gevonden: 596,4 (M+H). ’H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,78 (s, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,53 (s, 20 2H), 7,33 (s, 1H), 4,83 (q, J=16,18 Hz, 2H), 4,73 (q, J=16,18, 14,11 Hz, 2H), 4,42 (d, J=6,64 Hz, 1H), 4,22 (s, 3H), 3,20 (m, J=7,05, 6,64 Hz, 2H), 2,49 (m, J=7,88, 7,05 Hz, 1H), 2,07-1,57 (m, 6H), 1,11 (t, J=7,05 Hz, 3H).

Voorbeeld 57: N-(2-(l-methoxv-2.2-dimethvlDropvn-5-(,trifluormethvnbenzvn-N-(3.5-25 bisftrifluormethvnbenzvB-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine 189

*-n V

J

De titelverbinding werd bereid op een wijze die analoog is aan de werkwijze die is beschreven voor de bereiding van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclobutyl-5 ethoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine uit 2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-benzaldehyde door de toevoeging van tert-butylmagnesiumchloride gevolgd door O-methylering met methyljodide.

LC-MS (ES-): Berekend: 583,4, gevonden: 628 (M+HCCY) 10

Voorbeelden 58 en 59: (R)-N-t2-(cvclobutvl(methoxv)methvlV5-(trifluormethvlV benzvn-N-(3.5-bisrtrifluormethvBbenzvB-2-methvl-2H-tetrazoo-5-amine en fSVN-fë-(cvclobutvl(methoxvlmethvlV5-(trifluormethvDbenzvO-N-(3,.5-bisftrifluormethvD-benzvlV2-methvl-2H-tetrazoo-5-amine 15 f3cv^cf3 p3c. ,^cf3 \ I J \ 1 ! JN-n V WN V"

De enantiomeren van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetra-zool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclobutyl-methanol werden als volgt 20 gescheiden. Het racemische mengsel van de alcohol (431 mg) werd opgelost in 190 methanol, geïnjecteerd in een Chiralpak AD kolom (10 cm x 50 cm) (Chiral Tech Inc. Westchester, PA, USA) en geëlueerd onder toepassing van heptaan/2-propanol (96:4, 475 ml/minuut). Enantiomeer 1 (170 mg, 100% ee) elueerde na 9,880 minuten en enantiomeer 2 (163 mg, 95,8% ee) elueerde na 11,200 minuten over de Chiralpak AD-5 H- kolom. Teder anentiomeer werd omgezet in de titelverbinding onder toepassing van een O-methyleringswerkwijze die analoog is aan de werkwijze die wordt gebruikt voor de bereiding van (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-4-methyl-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine.

Enantiomeer 1 (van de piek bij 9,88 minuten): [<x]20d = +38,02° (c 0,0142 g/ml, 10 methanol). Enantiomeer 2 (van de piek bij 11,2 minuten): [a]2°o = -35,88° (c 0,0119 g/ml, methanol). MS (ES+): Berekend: 581,4, gevonden: 582,5 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 ppm 7,79 (s, 1H), 7,66 (s, 2H), 7,55 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,50 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 4,82 (q, J-16,18 Hz, 2H), 4,73 (s, 2H), 4,34 (d, J=7,05 Hz, 1H), 4,23 (s, 3H), 3,12 (s, 3H), 2,50 (m, 1H), 2,04-1,85 (m, 2H), 1,83-1,61 (m, 4H).

15

Bereiding 32: 1-(2-(((3.5-bis(trifluormethvDbenzviy2-methvl-2H-tetrazool-5-vB- aminoTmethvlV4-(trifluormethvBfenvlV 1 -cvclobutvlethanol F5C .^.CF* \ Ij n-n V5*

W

<!> 20

Aan een oplossing van (2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)(cyclobutyl)methanon (bereiding 29, 28 mg, 0,050 mmol) in tetrahydrofuran (0,5 ml) werd methylmagnesiumbromide (50 μΐ, 0,15 mmol, 3,0 M in diethylether) toegevoegd. De reactie werd 2 uur bij 25 kamertemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met 2 druppels water en 1 druppel waterig 2 N zoutzuur. Het mengsel werd verdund met ethylacetaat en gefiltreerd over een kolom die silikagel en natriumsulfaat bevat. Het ruwe product werd 191 gezuiverd over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Inc., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-50% ethylacetaat in heptaan), waarbij 22 mg (opbrengst 76%) van de titelverbinding als een kleurloze gom werd verkregen. MS (ES-): Berekend: 581,4, gevonden: 580,6 (M-H). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 ppm 7,78 (s, 1H), 7,74 (s, 2H), 5 7,42 (d, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,33 (d, .1=9,13 Hz, 1H), 5,27 (d, J=16,60 Hz, 1H), 5,15 (d, J= 16,18 Hz, 1H), 4,85 (s, 2H), 4,18 (s, 3H), 2,97 (m, 1H), 2,12-1,69 (m, 6H), 1,43 (s, 3H).

Voorbeeld 60: N-(2-n-cvclobutvl-l-methoxvethvn-5-(,trifluormethvnbenzvlVN-(3.5-10 bis(trifluormethvnbenzvB-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine f3Vvcf3

)'N V

^ Jl J

P3 £

Aan een oplossing van 1 -(2-(((3,5-bis( trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-15 tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)-l-cyclobutylethanol (22 mg, 0,038 mmol) in tetrahydrofuran (1,5 ml) werd natriumhydride (10 mg, 0,25 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. De reactie werd 10 minuten geroerd. Er werd joodmethaan (0,05 ml, 0,80 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met water. Het mengsel werd 20 verdund met ethylacetaat en gefiltreerd over een natriumsulfaat- en silikagel-kolom. Na concentreren onder verlaagde druk werd het residu opgenomen in ethylacetaat en gewassen met water (2x) en een zoutoplossing. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een Redisep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd 25 met 10-50% ethylacetaat in hexanen), waarbij 18 mg (opbrengst 80%) van de titelverbinding als een kleurloze gom werd verkregen. MS (ES4): Berekend: 595,5, gevonden: 596,5 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDCh) 5 ppm 7,78 (s, 1H), 7,73 (s, 2H), 7,45 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,3 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,09 (s, 2H), 4,8 (q, J=16,18

Hz, 2H), 4,2 (s, 3H), 3,04 (s, 3H), 2,83 (m, 1H), 1,99 (m, 1H), 1,89-1,6 (m, 6H), 1,59 (s, 3H).

192 5 Bereiding 33: 1 -(2-jT(3.5-bis-trifluormethvl-benzvΠ-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vly arnino^methvl) -4-trifluormethvl-fenvD- 1 -cvclohexyl-ethanol

FaVvCFa \ \j

N, vl J

f3c^J

10 Aan een oplossing van (2-{[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H- tetrazool-5-yl)amino]methyl}-4-trifluormethyl-fenyl)cyclohexyl-methanon (143 mg, 0,241 mmol) in tetrahydrofuran (2,5 ml) werd bij 0°C 3,0 M methylmagnesiumbromide in tetrahydrofuran (0,25 ml, 0,75 mmol) toegevoegd. Na 15 minuten werd het bad verwijderd en werd de reactie 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd 15 afgeschrikt met 2 druppels water. De reactie werd verdund met ethylacetaat en gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-50% ethylacetaat in heptaan), waarbij 158 mg (opbrengst 108%) van een kleurloze olie werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 609,5, gevonden: 610,4 20 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,77 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,42 (m, 2H), 7,34 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,46 (d, J=16,18 Hz, 1H), 4,93 (d, 1=16,60 Hz, 1H), 4,82 (q, J= 16,18 Hz, 2H), 4,18 (s, 3H), 1,78-1,6 (m, 6H), 1,58 (s, 3H), 1,40 (m, 1H), 1,13-0,94 m, 4H).

25 Voorbeeld 61: (3,5-bis-trifluormethvl-benzvl)-r2-n-cvclohexvl-l-methoxv-ethvD-5-trifluormethvl-benzvll-(2-methvl-2H-tetrazool-5-vDamine 193 F3C.XF3

Kn

n·· ik J

N 'hT

\Xo.

Aan een oplossing van 1-(2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)arnino)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)-l -cyclohexylethanol (26 mg, 5 0,043 mmol) in tetrahydrofuran (0,7 ml) werd natriumhydride (11 mg, 0,275 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. Na 30 minuten roeren bij kamertemperatuur werd joodmethaan (30 μΐ, 0,485 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur geroerd. Er werd meer natriumhydride (12 mg, 0,3 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) en joodmethaan (30 μΐ, 0,485 mmol) toegevoegd. Na 1 uur werd 10 meer natriumhydride (12 mg, 0,3 mmol, 60% dispersie in anorganische olie) toegevoegd. Na 30 minuten werd joodmethaan (30 μΐ, 0,485 mmol) toegevoegd. De reactie werd 2 uur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met waterig 2 N zoutzuur (6 druppels). Het mengsel werd verdund met ethylacetaat en gefiltreerd over een prop natriumsulfaat/silika. Vervolgens werd de oplossing geconcentreerd. Het residu werd 15 gezuiverd met een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-25% ethylacetaat in heptaan), waarbij 19 mg (opbrengst 71%) van een kleurloze gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 623,5, gevonden: 592,5 (M-OCH3). ’H-NMR (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,78 (s, 1H), 7,73 (s, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,45 (d, J=7,47 Hz, 1H), 7,27 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,25 (d, J-17,43 Hz, 1H), 5,07 (d, J=17,43 Hz, 1H), 20 4,79 (q, J=16,60, 16,18 Hz, 2H), 4,19 (s, 3H), 3,02 (s, 3H), 2,01 (d, J=11,2 Hz, 1H), 1,78-1,67 (m, 2H), 1,66-1,55 (m, 2H), 1,53 (s, 3H), 1,11-0,83 (m, 6H).

Voorbeelden 62 en 63: Scheiding van de isomeren (SVN-f2-n-cvclohexvl-l-methoxvethvO-5-('trifluormethvnbenzvO-N-(3.5-bis(trifluormethvDbenzvn-2-methvl-25 2H-tetrazool-5-amine en rRVN-(2-n-cvclohexvl-l-methoxvethvll-5-('trifluormethvlV benzvn-N-(3.5-bis(trifluormethvnbenzvlV2-methvl-2H-tetrazool-5-amine 194

,n~n n-m O

h» X J m. £ T

N f

*^Ρνγ f3c^J

ö ö

De enantiomeren van voorbeeld 61 werden als volgt bereid. Het racemische 5 mengsel van de alcohol (bereiding 33, 154 mg) werd opgelost in methanol, geïnjecteerd in een Chiralpak AD kolom (10 cm x 50 cm) (Chiral Tech Inc. Westchester, PA, USA) en geëlueerd onder toepassing van heptaan/2-propanol (96:4, 475 ml/minuut). Enantiomeer 1 (91 mg, 100% ee) elueerde na 4,429 minuten en enantiomeer 2 (85 mg, 100% ee) elueerde na 5,513 minuten over een Chiralpak AD-H kolom. Ieder 10 enentiomeer werd omgezet in de titelverbinding volgens een werkwijze die analoog is aan de werkwijze die wordt gebruikt voor de bereiding van voorbeeld 61. Enantiomeer 1 (van de eerder eluerende alcohol): [a]2°D = +17,56° (c 0,00705 g/ml, methanol). Enantiomeer 2 (van de later eluerende alcohol): [a]1D = -17,41° (c 0,0065 g/ml, methanol). MS (ES+): Berekend: 623,5, gevonden: 592,5 (M-OCH3). 'H-NMR (400 15 MHz, CDCh) δ ppm 7,78 (s, 1H), 7,73 (s, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,45 (d, J=7,47 Hz, 1H), 7,27 (d, J=7,88 Hz, 1H), 5,25 (d, 1=17,43 Hz, 1H), 5,07 (d, 1=17,84 Hz, 1H), 4,84 (d, J=16,18 Hz, 1H), 4,73 (d, J=16,6 Hz, 1H), 4,19 (s, 3H), 3,02 (s, 3H), 2,01 (d, J=ll,62 Hz, 1H), 1,78-1,67 (m, 2H), 1,66-1,55 (m, 2H), 1,53 (s, 3H), 1,11-0,89 (m, 3H).

Bereiding 34: tert-butvl-4-(2-(Ytert-butvldimethvlsilvloxvlmethvB-4-( trifluormethvl-fenvn-4-hvdroxvpiperidine-1 -carboxvlaat 195 O \

P3C

V

N 1 0^0^

Aan een oplossing van (2-broom-5-(trifluormethyl)benzyloxy)(tert-butyl)-dimethylsilaan (904 mg, 2,45 mmol) in tetrahydrofüran (6,0 ml) werd bij -78°C 5 druppelsgewijs n-butyllithium (1,5 ml, 3,75 mmol, 2,5 M in hexanen) toegevoegd. De reactie werd 5 minuten bj -78°C geroerd. Vervolgens werd druppelsgewijs een oplossing van Boc-piperidon (831 mg, 4,17 mmol) in tetrahydrofüran (3 ml) aan de reactie toegevoegd. Tijdens het toevoegen werd de reactie geel van kleur. De reactie werd bij -78°C geroerd en binnen 1 uur tot -40°C opgewarmd. De reactie werd 10 afgeschrikt met water en geëxtraheerd met ethylacetaat. De organische laag werd gewassen met verzadigd waterig ammoniumchloride, water en een zoutoplossing. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een RediSep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-15% ethylacetaat in heptaan) 15 waarbij 526 mg (opbrengst 43,9%) van een witte vaste stof werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 489,6, gevonden: 534,6 (M+HCO2). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,54 (dd, J=8,30, 8,71 Hz, 1H), 7,49 (d, J=l,66 Hz, 1H), 7,40 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,02 (s, 2H), 4,78 (s, 1H), 4,04 (d, J=16,18 Hz, 2H), 3,28 (dt, J=12,86, 2,90,13,28, 2H), 2,00 (dt, J=12,86, 13,28, 4,98, 4,56, 2H), 1,84 (d, J=12,45 Hz, 2H), 1,50 (s, 9H), 0,92 (s, 20 9H), 0,13 (s, 6H).

Bereiding 35: tert-butvl-4-f2-(Ytert-butvldimethvlsilyloxv)methv0-4-ftrifluormethv0-fenvlV4-methoxypiperidine-1 -carboxvlaat 196 'Λ CT\

F3Cy-^J

O' 0AG/k

Aan een oplossing van tert-butyl-4-(2-((tert-butyldimethylsilyloxy)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)-4-hydroxypiperidine-l-carboxylaat (526 mg, 1,07 mmol) in 5 tetrahydrofuran (6 ml) werd bij 0°C natriumhydride (75 mg, 60% dispersie in anorganisch olie) toegevoegd. De reactie werd 10 minuten geroerd. Vervolgens werd joodmethaan (0,10 ml, 1,61 mmol) toegevoegd. De reactie werd 72 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met water en 2 N zoutzuur. De reactie werd geëxtraheerd met ethylacetaat. De organische laag werd gewassen met 10 water en een zoutoplossing. Deze werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-20% ethylacetaat in heptaan), waarbij 540 mg (opbrengst 99,8%) van een kleurloze gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 503,6, gevonden: 445,4 (M-‘BuH). ‘H-NMR (400 MHz, CDCh) 6 ppm 8,08 15 (s, 1H), 7,49 (dd, J=7,88, 8,30 Hz, 1H), 7,31 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H), 4,03 (bs, 2H), 3,16 (bs, 2H), 2,97 (s, 3H), 2,15 (d, J=12,86 Hz, 2H), 1,85 (bs, 2H), 1,48 (s, 9H), 0,98 (s, 9H), 0,14 (s, 6H).

Bereiding 36: tert-butvl-4-(2-(hvdroxvmethvB-4-(trifluormethvl)fenvlV4-methoxv- 20 piperidine-1 -carboxvlaat 197

OH

ö

AA

Een oplossing van tert-butyl-4-(2-((tert-butyldimethylsilyloy)methyl)-4-(trifluor-methyl)fenyl)-4-methoxypiperidine-1 -carboxylaat (540 mg, 1,07 mmol) en 5 tetrabutylammoniumfluoride (1,7 ml, 1,7 mmol, 1,0 M in tetrahydrofijran) in tetrahydroiuran (6 ml) werd 2 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder verlaagde temperatuur verdampt. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-90% ethylacetaat in heptaan), waarbij 414 mg (opbrengst 99,2%) als een kleurloze gom werd verkregen.

10 MS (ES+): Berekend 389,4, gevonden: 390,3 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 6 ppm 7,92 (s, 1H), 7,53 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,36 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,04 (s, 2H), 4,02 (d, J= 12,45 Hz, 2H), 3,19 (t, J=12,45 Hz, 2H), 3,00 (s, 3H), 2,39 (bs, 1H), 2,24 (d, J= 14,11 Hz, 2H), 1,86 (dt, J=13,28,4,15, 4,56 Hz, 2H), 1,48 (s, 9H).

15 Bereiding 37: tert-butvl-4-('2-('broommethvlV4-(trifluormethvnfenvn-4-methoxypiperi-dine-1 -carboxylaat

Br cAo"^ 20 Aan een oplossing van tert-butyl-4-(2-(hydroxymethyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)- 4-methoxypiperidine-l-carboxylaat (410 mg, 1,05 mmol) in dichloormethaan (7 ml) werd N-broomsuccinimide (342 mg, 1,92 mmol) en rifenylfosfien (516 mg, 1,96 mmol) toegevoegd. De reactie werd 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd vervolgens gezuiverd over een RediSep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln 198 NE) (geëlueerd met 5-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij 433 mg (opbrengst 90%) van een kleurloze olie werd verkregen. MS (ES4): Berekend: 452,3 (81Br), gevonden: 407,2 (M(8,Br)-HC02\ 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,82 (d, J=l,66 Hz, 1H, 7,52 (dd, J=8,30, 1,66 Hz, 1H), 7,34 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,04 (d, J=12,86 5 Hz, 2H), 3,21 (t, J=12,86, 13,28 Hz, 2H), 3,02 (s, 3H), 2,26 (d, J=14,l 1 Hz, 2H), 1,86 (t, J=12,86, 14,11 Hz, 2H), 1,48 (s, 9H).

Voorbeeld 64: tert-butvl-4-(2-rf(3.5-bis('trifluormethvnbenzvl¥2-methvl-2H-tetrazool- 5-vnamino")methvlV4-('trifluormethvnfenvB-4-methoxypiperidine-l-carboxvlaat 10

\ TT

,n-n Y

vv

FjC ^ J

0

Aan een oplossing van N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (432 mg, 1,32 mmol) in tetrahydrofuran (5,0 ml) werd druppelsgewijs 1,0 M 15 kalium-tert-butoxide in tetrahydrofuran (1,1 ml) toegevoegd. De reactie werd 5 minuten geroerd. Een oplossing van tert-butyl-4-(2-(broommethyl)-4-(trifluor-methyl)fenyl)-4-methoxypiperidine-l-carboxylaat (432 mg, 0,955 mmol) in tetrahydrofuran (0,7 ml) werd druppelsgewijs aan de reactie toegevoegd. De reactie werd bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met water en geëxtraheerd met 20 ethylacetaat. De organische laag werd gewassen met water en een zoutoplossing. Deze werd vervolgens gedroogd met natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd over een Redisep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-50% ethylacetaat in heptaan), waarbij 371 mg (opbrengst 55,8%) van een kleurloze gom werd verkregen. MS (ES4): Berekend: 696,6, 25 gevonden: 697,4 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,79 (s, 1H), 7,73 (s, 2H), 199 7,51 (m, 2Η), 7,37 (d, J=8,71 z, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,81 (s, 2H), 4,20 s, 3H), 4,0 (bs, 2H), 3,12 (bs, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,12 (bs, 2H), 1,82 (bs, 2H), 1,47 (s, 9H).

Voorbeeld 65: N-(2-(4-methoxvpiperidine-4-vl-5-('trifluormethvDbenzvD-N-(3.5-bis-5 (trifluormethvObenzvO-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine

VN KJ

w j

H

Aan een oplossing van tert-butyl-4-(2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-10 2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)-4-methoxypiperidine-1 -car-boxylaat (321 mg, 0,461 mmol) in 1,4-dioxaan (2,5 ml) werd 4,0 M zoutzuur in 1,4-dioxaan (0,5 ml, 2 mmol) toegevoegd. De reactie werd 2 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd 4,0 M zoutzuur in 1,4-dioxaan (1,5 ml, 6 mmol) toegevoegd en er werd 1 uur geroerd. Er werd 4,0 M zoutzuur in 1,4-dioxaan (1,5 ml, 6 mmol) 15 toegevoegd en er werd 1 uur geroerd. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verdampt. Er werd ethylacetaat aan het residu toegevoegd en er werd onder verlaagde druk geconcentreerd. Er werd isopropylether toegevoegd en 16 uur bewaard. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verdampt, waarbij een witte vaste stof werd verkregen. De witte vaste stof werd getritureerd met isopropylether en afgefiltreerd, 20 waarbij 254 mg (opbrengst 87,1%) van een witte vaste stof werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 596,4, gevonden: 597,4 (M+H). ‘H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,92 (s, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,59 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,54 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H), 5,14 (s, 2H), 4,96 (s, 2H), 4,19 (s, 3H), 3,35 (m, 4H), 3,03 (s, 3H), 2,56 (d, J=12,86 Hz, 2H), 2,14 (m,2H).

25

Voorbeeld 66: Methvl-4-(2-(Y(3.5-bisitrifluormethvDbenzvD(2-methvl-2H-tetrazool-5-v0amino')methyQ-4-(' trifluormethvl)ienvl)-4-methoxvpiDeridine-1 -carboxvlaat 200 Ρ3Ργ^γ0Ρ3 Ν~Ν γτ Ό cYo^

Aan een suspensie van N-(2-(4-methoxypiperidine-4-yl)-5-(trifluormethyl)-benzyl)-N-(3,5-bis9trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (31 mg, 5 0,049 mmol) in dichloormethaan (0,5 ml) werd diisopropylethylamine (0,05 ml, 0,287 mmol) toegevoegd. Vervolgens werd methylchloorformiaat (10 μΐ, 0,129 mmol) toegevoegd. De verkregen reactie werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd gefiltreerd over een kolom van silika/natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 4 g 10 (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (5-80% ethylacetaat in heptaan), waarbij 32 mg (100%) van een gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 654,5, gevonden: 655,5 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ ppm 7,79 (s, 1H), 7,73 (s, 2H), 7,50 (d, J=7,05 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,36 (d, J=8,71 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,82 (s, 2H), 4,2 (s, 3H), 4,02 (bm, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,17 (t, 1=12,45, 12,03 Hz, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,14 (m, 2H), 15 1,9-1,75 (m,2H).

Voorbeeld 67: Ethvl-4-(2-(((3.5-bis(trifluormethv0benzvB(2-methvl-2H-tetrazool-5-v0amino)methyl)-4-( trifluormethvl)fenyD-4-methoxvpiperidine-1 -carboxylaat 201 F3<V"WCF3

\ TT

«-N Y

ί j

VV°N

Ό,

Aan een suspensie van N-(2-(4-methoxypiperidine-4-yl)-5(trifluomethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (31 mg, 0,049 mmol) 5 in dichloorethaan (0,5 ml) werd diisopropylethylamine (0,05 ml, 0,287 mmol) toegevoegd. Vervolgens werd ethylchloorformiaat (10 μΐ, 0,104 mmol) toegevoegd. De vekregen reactie werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd gefiltreerd over een kolom van silika/natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln 10 NE) (30-85% ethylacetat in heptaan), waarbij 32 mg (98%) van een gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 668,5, gevonden: 669,6 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 7,79 (s, 1H), 7,73 (s, 2H), 7,51 (d, J=6,64 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,36 (d, J=8,71 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,82 (s, 2H), 4,2 (s, 3H), 4,14 (q, J=7,05, 2H, 4,02 (bm, 2H), 3,16 (t, J=12,45 Hz, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,14 (m, 2H), 1,9-1,63 (m, 2H), 1,27 (t, 15 J=7,05 Hz, 3H).

Bereiding 38: l-(2-(ttert-butyldimethvlsilvloxv)methvl)-4-ftriΠuormethvDfenvl )cvclo-hexanol o \ ö 20 202

Aan een oplossing van (2-broom-5-(trifluormethyl)benzyloxy)(tert-butyl)-dimethylsilaan (140 mg, 0,379 mmol) in tetrahydrofuran (0,5 ml) werd bij -78°C druppelsgewijs n-butyllithium (0,4 ml, 0,64 mmol, 1,6 M in hexanen) toegevoegd. De reactie werd 15 minuten bij -78°C geroerd. Er werd cyclohexanon (0,8 ml, 7,7 mmol) 5 toegevoegd en er werd 10 minuten bij -78°C geroerd. De reactie werd vervolgens 15 minuten bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met 2 dmppels water. Deze werd verdund met ethylacetaat en gefiltreerd door een kolom die silikagel en nariumsulfaat bevat. Het ruwe product werd vervolgens gezuiverd over een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-40% ethylacetaat 10 in heptaan), waarbij 112 mg (76%) als een vloeistof werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 388,5, gevonden: 433,2 (M+HC02')· 'H-NMR (400 MHz, CDCfi) δ ppm 7,58 (s, 1H), 7,51 (s, J=8,30 Hz, 1H), 7,45 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,05 (s, 2H), 3,92 (s, 1H), 1,94-1,73 (m, 6H), 1,68-1,6 (m, 2H), 1,31 (m, 2H), 0,93 (s, 9H), 0,12 (s, 6H).

15 Bereiding 39: (2-( 1 -methoxvcvclohexvn-5-(trifluormethvBbenzvloxv)(tert-butyfidi-methvlsilaan

sK

0'av 20

Aan een oplossing van l-(2-((tert-butyldimethylsilyloxy)methyl)-4-(trifluor-methyl)fenyl)cyclohexanol (108 mg, 0,278 mmol) in tetrahydrofuran (2 ml) werd bij 0°C natriumhydride (22 mg, 0,55 mmol) toegevoegd. De reactie werd 30 minuten bij 0°C geroerd. Vervolgens werd joodmethaan (50 μΐ, 0,80 mmol) toegevoegd. De reactie 25 werd 30 minuten bij 0°C en vervolgens 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. Er werd meer joodmethaan (20 μΐ, 0,32 mmol) toegevoegd en er werd 4 uur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met water en geëxtraheerd met ethylacetaat. e organische laag werd gewassen met water, gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk 203 geconcentreerd. Het ruwe product werd gezuiverd over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-15% ethylacetaat in heptaan), waarbij 63 mg (55%) van de titelverbinding als een kleurloze olie werd verkregen. MS-GC (EI): Berekend: 402,5, gevonden: 383 (M-F). 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 5 7,51 (d, J=7,88 Hz, 1H), 7,46 (d, .1=7,47 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,05 (s, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,16 (d, J-12,45 Hz, 2H), 1,8-1,56 (m, 8H), 0,98 (s, 9H), 0,13 (s, 6H).

Bereiding 40: (2-( 1 -methoxvcvclohexvlV5-(trifluormethvnfenvBmethanol

OH

XX*.

ίο

Een oplossing van (2-(l-methoxycyclohexyl)-5-(trifluormethyl)benzyloxy)(tert-butyl)dimethylsilaan (61 mg, 0,15 mmol) en tetrabutylammoniumfluoride (0,2 ml, 0,2 mmol, 1,0 M in tetrahydrofuran) werd geroerd in tetrahydrofuran (1 ml). De reactie 15 werd 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verdampt. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-40% ethylacetaat in heptaan), waarbij 30 mg (opbrengst 69%) van een kleurloze gom werd verkregen. MS-GC (EI): Berekend: 288,3, gevonden: 288 (M). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,87 (s, 1H), 7,50 (d, 20 J=8,30 Hz, 1H), 7,41 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H), 2,99 (s, 3H), 2,24 (d, J=13,28

Hz, 2H), 1,8-1,57 (m, 7H), 1,28 (m, 1H).

Bereiding 41: 2-(broommethvn-1 -(1 -methoxvcvclohexvD-4-ftri fluormethvDbenzeen

Br VVOn 25 204

Aan een oplossing van (2-(l-methoxycyclohexyl)-5-(trifluormethyl)fenyl)-methanol (27 mg, 0,094 mmol) in dichloormethaan (1 ml) werd N-broomsuccinimide (28 mg, 0,157 mmol) gevolgd door trifenylfosfien (40 mg, 0,152 mmol) toegevoegd. De reactie werd 4 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd direct toegevoerd 5 aan silika en gezuiverd over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Tsco Tnc., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-40% ethylacetaat in heptaan), waarbij 26 mg (79%) van een gom werd verkregen. MS-GC (EI): Berekend: 351,2, gevonden: 352 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,81 (d, J=l,66 Hz, 1H), 7,48 (td, J=8,30, 1,66 Hz, 1H), 7,39 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 3,00 (s, 3H), 2,25 (d, 1=12,45 Hz, 2H), 1,84-1,71 (m, 10 3H), 1,65 (m, 4H), 1,27 (m, 1H).

Voorbeeld 68: N-(2-(l-methoxvcvclohexvn-5-(trifluormethvBbenzvlVN-(3.5-bis(tri-fluormethvnbenzvO-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine N - n

N, X J

XJ^.

15

Aan een oplossing van N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (26 mg, 0,079 mmol) in tetrahydrofuran (0,3 ml) werd kalium-tert-butoxide (80 μΐ, 0,08 mmol, 1,0 M in tetrahydrofuran) toegevoegd. Er werd een oplossing van 2-20 (broommethyl)-l-(l-methoxycyclohexyl)-4-(trifluormethyl)benzeen (25 mg, 0,071 mmol) in tetrahydrofuran (0,2 ml) toegevoegd. De reactie werd 3 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met 2 druppels water. Het mengsel werd verdund met ethylacetaat en gefiltreerd door een kolom die silika en natriumsulfaat bevat en geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd met een RediSep 25 kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE’ )geëlueerd met 10/45% ethylacetaat in heptaan’, waarbij 25 mg )59%’ van een kleurloze gom werd verkregen. MS (ES4): Berekend: 595,5, gevonden: 596 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ ppm 7,77 (s, 205 1H), 7,73 (s, 2H), 7,48 (d, J=7,47 Hz, 2H), 7,42 (d, J-8,30 Hz, 1H), 5,14 (s, 2H), 4,79 (s, 2H), 4,20 (s, 3H), 2,92 (s, 3H), 2,12 (d, J=11,62 Hz, 2H), 1,77-1,52 (m, 8H).

Bereiding 42: 2-(((3,5-bis(trifluoiTOethvnbenzvl¥2-methvl-2H-tetrazool-5-vr)aminoV 5 methvB-4-ftrifluormethvBbenzonitril

Vm V

>r>r

Een mengsel van N-(2-broom-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluor-10 methyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (10,4 g, 18,5 mmol), kaliumhexa-cyanoferraat-trihydraat (1,9 g, 4,49 mmol) en natriumcarbonaat (2,4 g, 22,6 mmol) werd geroerd in N,N-dimethylaceetamide (32 ml). Er werd palladiumacetaat (0,48 g, 2,13 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur bij 120°C geroerd. De reactie werd verdund met diethylether en gefiltreerd over een laag silikagel en celite. De 15 moedervloeistof werd gewassen met water (3X) en een zoutoplossing. Deze werd gedroogd boven natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd. Het ruwe product werd gezuiverd over een RediSep kolom van 330 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij 8,45 g (89,9%) van de titelverbinding als een geelbruine baste stof werd verkregen. MS (ES+): 20 Berekend: 508,3, gevonden: 509,2 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,76 (s, 1H), 7,75 (d, J=8,30 Hz, 1H), 7,68 (s, 3H), 7,62 (dd, J=8,30 Hz, 1H), 4,96 (s, 2H), 4,89 (s, 2H), 4,22 (s, 3H).

Voorbeeld 69: N-(2-(methoxvn-methvlcvclohexvHmethvB-5-ftrifluormethvnbenzvB-25 N-(3.5-bis(trifluormethvDbenzvB-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine 206 F3CX^WCF3 w 6

Stap A: 2-broom-5-ttrifluormethvnbenzvl-1 -methvlcvclohexaancarboxvlaat

O

f»Y^saAU

5

Aan een mengsel van l-broom-2-(broommethyl)-4-(trifluormethyl)benzeen (bereiding 3, 0,97 g, 3,05 mmol) en 1-methylcyclohexaancarbonzuur (0,512 g, 3,6 mmol) in N,N-dimethylformamide (5 ml) werd cesiumcarbonaat (1,96 g, 6 mmol) en 10 natriumjodide (90 mg, 0,6 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 5 uur op 60°C verwarmd, verdund met water en geëxtraheerd met dichloormethaan (3x). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm tot droogte geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door verdampingschromatografie over een RediSep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., 15 Lincoln NE) (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titel verbinding als een gele olie (0,65 g) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ ppm 7,71 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,65 (d, J=l,2 Hz, 1H), 7,45 (dd, J=8,3, 1,2 Hz, 1H), 5,23 (s, 2H), 2,10 (m, 2H), 1,64-1,48 (m, 2H), 1,46-1,21 (m, 6H), 1,24 (s, 3H).

GC-MS (EI) Berekend: 380 (81Br), gevonden: 380 (81Br) 20

Stap B: l-tl-methvlcvclohexvn-5-(trifluormethvl)-1.3-dihvdroisobenzofuran-l-ol en i2-ihvdroxvmethviy4-(trifluormethvDfenvn(l-methvlcvclohexvl)methanon 207

OH

Aan een oplossing van 2-broom-5-(trifluormethyl)benzyl-l-methylcyclo-hexaancarboxylaat (0,432 g, 1,14 mmol) in tetrahydrofuran (5 ml) werd bij -98°C onder 5 N2 langzaam sec-butyllithium (1,4 M in cyclohexaan, 1,37 mmol, 0,98 ml) toegevoegd. Na 90 minuten roeren bij -98°C werd het mengsel 10 minuten opgewarmd tot -78°C, waarna men het liet opwarmen tot 0°C. Het mengsel werd vervolgens onmiddellijk uitgegoten in een waterige ammoniumchloride-oplossing en geëxtraheerd met dichloormethaan (3x). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd boven 10 natriumsulfaat en onder vacuüm tot droogte geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door verdampingschromatografie over een RediSep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 0-30% ethylacetaat in heptaan), waarbij een witte vaste stof werd verkregen, die in een deulerochloroform-oplossing bestond als een mengsel van de titelverbindingen in een verhouding van ongeveer 12:1, respectievelijk.

15 'H-NMR (400 MHz, CDCl3)(belangrijkste component) δ 7,61 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,58 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 5,18 (d, J=13,l Hz, 1H), 5,03 (d, J=13,l Hz, 1H), 2,77 (s, 1H), 1,7-1,49 (m, 6H), 1,49-1,31 (m, 4H), 1,08 (s, 3H). GC-MS (EI) Berekend: 300, gevonden: 300.

20 Stap C: f2-((tert-butvldimethvlsilvloxvImethvn-4-(trifluormethyDfenvDn-methvl- cvclohexvOmethanol \ / 0'Si<

O

208

Het product van stap B (0,343 g, 1,14 mmol) werd opgelost in ethanol (10 ml) en natriumboorhydride (50 mg, 1,32 mmol) werd in een portie toegevoegd. Het mengsel werd 2 uur bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens werd een tweede hoeveelheid natriumboorhydride (50 mg, 1,32 mmol) toegevoegd. Na 30 minuten werd aceton 5 toegevoegd om de overmaat reductiemiddel te vernietigen, werd het oplosmiddel tot droogte afgedampt, werd een verdunde natriumwaterstofcarbonaat-oplossing toegevoegd en werd het mengsel geëxtraheerd met dichloormethaan (3x). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm tot droogte geconcentreerd, waarbij een witte vaste stof werd verkregen. Deze 10 werd opgelost in watervrij N,N-dimethylformamide (3 ml) en er werden tert-butyldimethylchloorsilaan (0,345 mg, 2,29 mmol) en imidazool (0,156 mg, 2,28 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd, verdund met water dat een weinig zoutzuur bevat voor het geven van een zure oplossing en het mengsel werd geëxtraheerd met dichloormethaan (3x). De samengevoegde organische 15 lagen werden gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm tot droogte geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door verdampingschromatografïe over een RediSep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 0-20% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding als een kleurloze viskeuze olie (0,38 g) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,78 (br s, 1H), 7,61 (d, J=8,3 Hz, 20 1H), 7,51 (br d, J=8,3 Hz, 1H), 4,90 (d, J=13,4 Hz, 1H), 4,76 (d, J=13,4 Hz, 1H), 4,63 (d, J=2,9 Hz, 1H), 1,96 (d, J=2,9 Hz, 1H), 1,68-1,08 (m, 10H), 0,95 (s, 9H), 0,13 (s, 3H), 0,12 (s, 3H).

MS (ES') Berekend: 416,59, gevonden: 461,5 (M+HCCV).

25 Stap D: (2-(methoxv( 1 -methylcvclohexvBmethvB-5-(trifluormethvBfenvBmethanol

OH

209 -

Aan een oplossing van het product van stap C (0,38 g, 0,787 mmol) in watervrij tetrahydrofuran (3 ml) werd natriumhydride (60% dispersie in anorganische olie, 47 mg, 1,18 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 10 minuten bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens werd joodmethaan (1,574 mmol, 0,097 ml) toegevoegd. Na 60 5 uur werd het mengsel verdund met water en geëxtraheerd met heptaan (3x). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd boven natriumsulfaat, onder vacuüm tot droogte geconcentreerd, het residu werd opgelost in tolueen en onder hoog vacuüm tot droogte geconcentreerd. Het residu werd onder stikstof opgelost in watervrij tetrahydrofuran (4 ml) en bij kamertemperatuur werd een oplossing van 10 tetrabutylammoniumfluoride in tetrahydrofuran (1 M, 1,5 ml, 1,5 mmol) toegevoegd. Na 90 minuten werd het mengsel verdund met water en geëxtraheerd met dichloormethaan (3x). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd boven natriumsulfaat, onder vacuüm tot droogte geconcentreerd, het residu werd opgelost in xylenen en onder hoog vacuüm tot droogte geconcentreerd, waarbij de titelverbinding 15 als een olie (0,218 g) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCb) δ ppm 7,77 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 4,97 (dd, J=13,3, 5,4 Hz, 1H), 4,73 (dd, J=13,3, 3,5 Hz, 1H), 4,15 (s, 1H), 3,15 (s, 3H), 1,78 (m, 1H), 1,68-1,21 (m, 8H), 1,2-1,02 (m, 2H), 0,90 (s, 3H). MS (ES ) Berekend: 316,17, gevonden: 361,3 (M+HCCV).

20 Stap E: N-(2-(methoxvn-methvlcvclohexvnmethvlV5-(trifluormethvllbenzvB-N-f3.5-bis(trifluormethvnbenzvlV2-methvl-2H-tetrazool-5-amine

J J

25 Aan een mengsel van het product van stap D (210 mg, 0,665 mmol) en tetrabroommethaan (231 mg, 0,7 mmol) in watervrij dichloormethaan (5 ml) werd bij 0°C onder N2 poedervormig trifenylfosfien (192 mg, 0,73 mmol) toegevoegd. Na 90 210 minuten werden verdere hoeveelheden tetrabroommethaan (23 mg, 0,07 mmol) en poedervormig trifenylfosfien (19 mg, 0,073 mmol) toegevoegd en het mengsel werd 6 uur geroerd. Het oplosmiddel werd vervolgens onder vacuüm verwijderd en het residu werd gezuiverd door verdampingschromatografie over een RediSep kolom van 12 g 5 (Teledyne ïsco Tnc., Lincoln NE) (geëlueerd met 0-50% ethylacetaat in heptaan), waarbij 2-(broommethyl)-1 -(methoxy( 1 -methylcyclohexyl)methyl)-4-(trifluormethyl)-benzeen (194 mg) werd verkregen. Aan N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (bereiding 5, 216 mg, 0,66 mmol) werd natriumhydride (60% dispersie in anorganische olie, 40 mg, 1 mmol) toegevoegd, de lucht in de kolf werd 10 vervangen door stikstof en er werd watervrij N,N-dimethylformamide (4 ml) toegevoegd. Er vond een levendige waterstof-ontwikkeling plaats en er werd een gele oplossing gevormd, welke in 1 uur donkerder werd tot oranje-bruin. Er werd een oplossing van 2-(broommethyl)-l-(methoxy(l-methylcyclohexyl)methyl)-4-(trifluor-methyl)benzeen (194 mg, 0,51 mmol) in watervrij N,N-dimethylformamide (2x1 ml) 15 toegevoegd. Het mengsel werd 16 uur bij kamertemperatuur geroerd, verdund met water dat lithiumchloride en een weinig zoutzuur bevat voor het geven van een zure oplossing en het mengsel werd geëxtraheerd met dichloormethaan (3x). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd boven natriumsulfaat en onder vacuüm tot droogte geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door 20 verdampingschromatografie over een RediSep kolom van 12 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 0-60% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding als een kleurloze viskeuze olie (0,24 g) werd verkregen. ’H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7,79 (s, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,65-7,51 (m, 2H), 7,37 (s, 1H), 5,06 (d, J=16 Hz, 1H), 4,79 (d, J=16,3 Hz, 1H), 4,61 (d, J=16,3 Hz, 1H), 4,61-4,51 (m, 1H), 4,22 (s, 3H), 4,10 (s, 25 1H), 2,98 (s, 3H), 1,65-1,56 (m, 1H), 1,56-1,18 (m, 7H), 1,17-0,98 (m, 2H), 0,88 (s, 3H).

MS (ES*) Berekend: 623,56, gevonden: 624,5 (M + H+).

Voorbeeld 70: (3.5 -bis-trifluormethvl-benzvD- Γ2-('2-cvclopentvl-1 -methoxv-ethvn-5-30 trifluormethvl-benzvll-f2-methvl-2H-tetrazool-5-vnamine 211 f3c^^cf3 /½ Μ

Me—N { I

<y

Stap A: 1-(2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)- methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl-2-cyclopentylethanon 5 F3C^.^x,CF3 Μβ“Ν }

'N*V

cr (Cyclopentylmethyl)magnesiumbromide werd bereid door de reactie van magnesiumgaas (2,61 mol, 63,5 mg) met (broommethyl)cyclopentaan (2,61 mmol, 426 10 mg, portiegewijs toegevoegd totdat de reactie begon) in diethylether (1 ml). Deze oplossing werd met een spuit toegevoegd aan een oplossing van 2-((3,5-bis(trifluormethyl)benzyI)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(trifluormethyl)benzonitril (0,653 mmol, 332 mg) in tolueen (10 ml), welke onder stikstof aanwezig is in een magnetronflesje van Smith. Het magnetronflesje werd 45 15 minuten op 65°C verwarmd in magnetron van Biotage. Het mengsel werd uitgegoten in 25 ml 2 N zoutzuur en 50 ml ethylacetaat en 16 uur bij kamertemperatuur geroerd. De waterige laag werd geëxtraheerd met ethylacetaat (2 x 25 ml), de samengevoegde organische laag werd gedroogd met watervrij natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd, waarbij een gele olie (160 mg) werd verkregen. Het residu werd 20 gezuiverd door verdampingschromatografie over een RediSep kolom van 12 g 212 (Teledyne Isco Inc., Lincoln NE) (geëlueerd met 0-50% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding als een gele olie (0,185 g, 48%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 7,69 (s, 1H), 7,67 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,62 (s, 2H), 7,54 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 4,89 (s, 2H), 4,78 (s, 2H), 4,14 (s, 3H), 2,86 (d, J=7,l Hz, 2H), 5 2,25-2,21 (m, 1H), 1,82-1,76 (m, 2H), 1,6-1,57 (m, 2H), 1,31-1,30 (m, 2H), 1,1-1,03 (m, 2H). LC-MS berekend 593,4, gevonden 594,5 (M+H).

Stap B: 1-(2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)- methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)-2-cyclopentylethanol 10

Me-"N s

V J

^ίγ-ΟΗ cr

Aan een oplossing van 1-(2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(trilluormethyl)fenyl-2-cyclopentylethanon (123 mg, 15 0,207 mmol) in methanol (15 ml) werd bij kamertemperatuur natriumboorhydride (7,8 mg, 0,207 mmol) toegevoegd. Na 1 uur werd het oplosmiddel onder verlaagde druk verwijderd en werd het residu opgelost in 20 ml ethylacetaat (20 ml) en gewassen met water 910 ml). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd met watervrij natriumsulfaat en onder verlaagde druk tot droogte geconcentreerd. Het residu werd 20 opgelost in dichloormethaan en gezuiverd door verdampingschromatografie over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 0-60% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding als een heldere olie (0,025 g) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 5 7,76 (s, 1H), 7,62 (s, 2H), 7,56 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,96-4,92 (m, 1H), 4,85 (s, 2H), 4,81 (q, J=15,3 Hz, J=16,l Hz, 2H), 25 4,2 (s, 3H), 1,9-1,4 (m, 11H).

LC-MS berekend 595,5, gevonden 596,5 (M+H).

213

Stap C: (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(2-cyclopentyl-1 -methoxy-ethyl)-5-trifluor-methyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine

V

5 1-(2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)-methyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)-2-cyclopentylethanol werd onder toepassing van een werkwijze die analoog is aan de werkwijze die werd toegepast voor de bereiding van N-(2-(cyclohexyl(methoxy)methyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluor-10 methyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine met methyljodide omgezet in de methylester. LC-MS Berekend 609,5, gevonden 610,5 (M+H).

Voorbeelden 71-73 werden volgens een analoge reeks van reacties onder toepassing van het desbetreffende Grignard-reagens en alkyleringsmiddel uit 2-((3,5-bis( tri fluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(tri fluor-15 methyljbenzonitril bereid.

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

# Ber Gevonden M+l 71 N-(2-(2-cyclopentyl-l- 623,5 624,6 ethoxyethyl)-5-(trifluor- ^ ij^^j methyl)benzyl)-N-(3,5- Μθ—N j j bis(trifluoimethyl)- v* benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine 1_1 <y 11 214

Voorbeeld Chemische naam Structuur TmS TmS

ΛΛ w Ber Gevonden M+l 72* N-(2-(2-ethyl-1 -methoxy- _,CF3 597,5 598,5

butyl)-5-(trifluormethyl)- J J

benzyl)-N-(3,5-bis(tri- N. Ü 1 fluormethyl)benzyl)-2- _ _ < methyl-2H-tetrazool-5- ji j j amine y i i 73 N-(2-(l-ethoxy-2-ethyl- 611,5 612,5 butyl)-5-(trifluormethyl)- ^

benzyl)-N-(3,5-bis- N* Ji. T

N 'N'

(trifluormethyl)benzyl)-2- ρς I

methyl-2H-tetrazool-5- I T

amine ] *Voor voorbeeld 72: 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7,79 (s, 1H), 7,67 (s, 2H), 7,57 (dd, J=l,24, 8,3 Hz, 1H), 7,53 (d, J=8,3, 1H), 7,38 (s, 1H), 4,85 (d, J=16,18 Hz, 5 1H), 4,73 (s, J=16,18 Hz, 1H), 4,74 (s, 2H), 4,28 (d, J=6,22, 1H), 4,22 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 1,5-1,34 (m, 3H), 1,23 (m, 1H), 1,11 (m, 1H), 0,75 (t, J=7,47, 3H), 0,74 (t, J=7,47 Hz, 3H).

Voorbeeld 74: N-r2-n-cvclopontYl-7-methoxvPfOPaan-2-yn-5-(trifluormethyl)benzvn- 10 N-G.5-bis(trifluormethvDbenzvlV2-methyj-2H-tetrazool-5-amine

Me-N, A J

|| ] OMe <y 215

Stap A: 2-(2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)me-thyl-4-(trifluormethyl)fenyl)-1 -cyclopentylpropaan-2-ol

Me~N ? } N'^N' 5

Aan een oplossing van 1 -(2-(((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)methyl)-4-(trifluormethy l)fenyl-2-cyclopentylethanon (160 g, 0,269 mmol) in watervrij THF (10 ml) werd bij 0°C methylmagnesiumbromide (3,0 M oplossing in THF, 0,359 ml, 1,07 mmol) toegevoegd. Na 30 minuten roeren werd de 10 oplossing opgewarmd tot kamertemperatuur en 1,5 uur geroerd. Na 1,5 uur werd de oplossing verdeeld tussen 2 N HC1 (10 ml) en ethylacetaat (20 ml). Het mengsel werd 10 minuten bij kamertemperatuur geroerd voordat de lagen werden gescheiden. De waterige laag werd geëxtraheerd met ethylacetaat (3 x 15 ml). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd met watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en onder 15 verlaagde druk geconcentreerd, waarbij een gele olie (160 mg, 97%) werd verkregen. ]H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,72 (s, 1H), 7,67 (s, 2H), 7,38 (m, 3H), 5,32 (d, J=16,6 Hz, 1H), 5,01 (d, J=16,6 Hz, 1H), 4,78 (s, 2H), 4,13 (s, 3H), 1,92 (dd, J=5,4 Hz, J=5,4 Hz), 1,80 (dd, J=5,81 Hz, J=6,24 Hz), 1,64 (m, 2H), 1,59 (s, 3H), 1,54 (m, 3H), 1,35 (m, 2H), 0,88 (m, 2H). LC-MS Berekend 609,5, gevonden 610,5 (M+H).

20

Stap B: N-(2-(l-cyclopentyl-2-methoxypropaan-2-yl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine 216

/tN kJ

Μβ“Ν 1 1 I OMe ^Ncl

Cr

Aan een oplossing van N-(2-(l-cyclopentyl-2-methoxypropaan-2-yl)-5-(tri-fluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine 5 (20 mg, 0,032 mmol) in watervrij THF (3 ml) werd bij kamertemperatuur natriumbishexamethyldisilylamide (1,0 M oplossing in THF, 0,082 mmol, 0,082 ml) toegevoegd. Na 10 minuten werd methyljodide (0,164 mmol, 23 mg) toegevoegd en de oplossing werd 72 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het mengsel werd verdund met water, geëxtraheerd met ethylacetaat (3 x 15 ml) en de samengevoegde organische 10 lagen werden gedroogd met watervrij natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd, waarbij een gele olie (40 mg) werd verkregen. Het residu werd gezuiverd door verdampingschromatografie over een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 0-40% ethylacetaat in heptaan), waarbij de titelverbinding als een heldere olie (0,015 g, 73%) werd verkregen. ’H-NMR (400 15 MHz, CDCI3) δ 7,76 (s, 1H), 7,62 (s, 2H), 7,58 (s, 2H), 7,34 (s, 1H), 4,8 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 4,34 (dd, J=3,5 Hz, J=9,l Hz, 1H), 4,21 (s, 3H), 3,1 (s, 3H), 1,91 (m, 1H), 1,75 (m, 2H), 1,52 (m, 4H), 1,21 (m, 2H), 1,0 (m, 1H), 0,84 (m, 1H). LC-MS berekend 623,5, gevonden 624,5 (M+l).

20 Voorbeeld 75: N-(2-('l-cvcloheDtvl-l-methoxvethvn-5-('trifluormethvnbenzvlVN-(3.5-bis(4rifluormethvObenzvO-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine 217

Μβ-Ν I I

\'Jom

Deze verbinding werd bereid volgens een analoge reeks van reacties als werd toegepast voor de bereiding van N-(2-(l-cyclopentyl-2-methoxypropaan-2-yl)-5-(tri-5 fluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine uit 2-((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)-methyl)-4- (trifluormethyl)benzonitril door de toevoeging van cycloheptylmagnesiumbromide gevolgd door methylmagnesiumbromide en vervolgens alkylering met methyljodide. LC-MS berekend 637,5, gevonden 606 (M-OCH3).

10

Voorbeeld 76: N-('2-('l-cvclohexvl-l-methoxvDropvn-5-('trifluormethvl)benzvn-N-(3,5-bisitrifluomethvnbenzvO-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine X j

F3C._^J

ó' 15

Deze verbinding werd bereid volgens een analoge reeks van reacties als werd toegepast voor de bereiding van N-(2-(l-cyclopentyl-2-methoxypropaan-2-yl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine uit 2-((3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amino)- 218 methyl)-4-(trifluormethyl)benzonitril door de toevoeging van cyclohexylmagnesium-bromide gevolgd door ethylmagnesiumbromide en vervolgens alkylering met methyljodide. LC-MS berekend 637,5, gevonden 638,5 (M+H).

5 Bereiding 43: 4.4-dimethvlcvclohexanon

O

4,4-dimethylcyclohexanon werd bereid volgens een werkwijze die overeenkomt 10 met de werkwijze die wordt beschreven in de Internationale PCT-octrooiaanvrage 2005005456 20, Jan 2005. 4,4-dimethylcyclohex-2-enon (3,5 g, 28,18 mmol) werd opgelost in ethylacetaat (50 ml). De oplossing werd 45 minuten onder een waterstof-atmosfeer (10 psi) geschud. De voltooiing van de reactie werd vastgesteld door GC-MS en vervolgens werd de oplossing gefiltreerd door een laag celite en doorgespoeld met 15 ethylacetaat. Het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verwijderd, waarbij een heldere kleurloze olie werd verkregen die kristalliseerde bij bewaren (3,45 g, 97%). 'H-NMR (400 MHz, CDC13) δ 2,29 (m, 4H), 1,61 (m, 4H), 1,04 (s, 6H). MS berekend 126,5, gevonden 127,1 (M+H).

20 Bereiding 44: 2-(broommethvl)-l-( l-methoxvcvclopentvD-4-(trifluormethvl)benzeen

Br

Aan een oplossing van (2-(l-methoxycyclopentyl)-5-(trifluormethyl)-25 fenyl)methanol (10 mg, 0,036 mmol) in watervrije dichloormethaan (5 ml) werd koolstoftetrabromide (14,5 mg, 0,043 mmol) gevolgd door trifenylfosfien (11,47 mg, 0,043 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 72 uur bij kamertemperatuur geroerd en 219 vervolgens werd het oplosmiddel onder verlaagde druk verwijderd. Het residu werd verdund met dichloormethaan en hexanen, op 1 g silikagel (Bakerbond spe wegwerp-extractiekolommen, Mallinkrodt Baker Ine. Phillipsburg, NJ) gebracht en geëlueerd met hexanen, waarbij de titelverbinding (12 mg, 97,6%) werd verkregen. 'H-NMR (400 5 MHz, CDCIj) δ 7,78 (s, 1H), 7,46 (d, J=9,l Hz, 1H), 7,40 (d, J=8,3 Hz, IH), 4,97 (s, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,30 (m, 2H), 2,0 (m, 2H), 1,85 (m, 2H), 1,74 (m, 2H).

GC-MS (EI) berekend 337, gevonden 337.

Bereiding 45: 4-r2-rbroommethvlV4-('trifluormethvnfenvlV4-methoxvcvclohexaan- 10 carbonitril

Br

PsCyvJ

P

CN

Deze verbinding werd volgens een volgorde van stappen die analoog is aan de 15 bereiding van tert-butyl-4-(2-(broommethyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)-4-methoxypiperi- dine-l-carboxylaat bereid uit 4-cyaancyclohexanon en (2-broom-5-(trifluormethyl)-benzyloxy)(tert-butyl)dimethylsilaan.

Voorbeeld 77: 4-(2-(((3,5-bis(trifluormethvl)benzvl)(2-methvl-2H-tetrazool-5-vn- 20 amino)methvl)-4-(trifluormethvllfenvlV4-methoxvcvclohexaancarbonitril 220

\ 1 J

,n-n Y

* X J

XXo.

CN

Aan een oplossing van N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (285 mg, 0,877 mmol) in watervrije THF (5 ml) werd natriumhydride (60% 5 dispersie in anorganische olie, 105 mg, 2,63 mol) toegevoegd en het mengsel werd 5 minuten geroerd en vervolgens werd een oplossing van 4-(2-(broommethyl)-4-(trifluormethyl)fenyl)-4-methoxycyclohexaancarbonitril (330 mg, 0,877 mmolO in watervrije THF (5 ml) toegevoegd. Er werd nog een hoeveelheid natriumhydride (52 mg, 1,3 mmol) toegevoegd. De oplossing werd 72 uur bij kamertemperatuur geroerd. 10 Er werden water en 2 N HC1 (5 ml) toegevoegd en het mengsel werd geëxtraheerd met ethylacetaat (3 X 20 ml). De samengevoegde organische lagen werden gedroogd met watervrij natriumsulfaat en onder verlaagde druk geconcentreerd, waarbij een gele olie (0,65 g) werd verkregen. Dit materiaal werd aanvankelijk gezuiverd door verdampingschromatografie over een RediSep kolom van 40 g (Teledyne Isco Ine., 15 Lincoln NE) (geëlueerd met 5-75% ethylacetaat in heptaan) en uiteindelijk gezuiverd over een silikagel-rotor van 1 mm (Chromatotron, Harrison Research) (geëlueerd met 20-70% dichloormethaan in heptaan), waarbij de titelverbinding als een kleurloze schuim (134 mg, 24,6%) werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7,74 (s, 1H), 7,67 (s, 2H), 7,44 (d, J=5,81 Hz, 2H), 7,29 (d, J=8,72 Hz, 1H), 5,01 (s, 2H), 4,76 (s, 20 2H), 4,15 (s, 3H), 2,87 (s, 3H), 2,43 (m, 1H), 2,20 (d, J=12,45 Hz, 2H), 1,99 (m, 2H), 1,55 (m, 4H). LC-MS berekend 620, gevonden 621,5 (M+H).

Voorbeeld 78: N-(2-fl-methoxvcvclopentvlV5-ftrifluormethvnbenzvl)-N-f3.5-bisitri-fluormethvr)benzvD-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine 25 221 yN.>N W" Μβ™·Ν 1

f3Cy^J

l^L^OMe

De titelverbinding werd op een analoge wijze zoals hiervoor is beschreven uit 2-(broommethyl)-l-(l-methoxycyclopentyl)-4-(trifluormethyl)benzeen bereid. LC-MS 5 (ES4) berekend 581,4, gevonden 582,4 (M+H).

Voorbeelden 79-80 werden volgens een analoge volgorde van reacties, uitgaande van (2-broom-5-(trifluormethyl)benzyloxy)(tert-butyl)dimethylsilaan en de desbetreffende cyclische keton, bereid.

Voorbeeld Chemische naam Structuur MS MS

ff Ber Gevonden M+l 79 N-(2-(l-methoxy-4,4- 623,5 624,5

dimethylcyclohexyl)-5- N

(trifluormethyl)benzyl)- N-(3,5-bis(trifluor- methyl)benzyl)-2-methyl- (1 Q|v|e 2H-tetrazool-5-amine ______ 80 methyl-4-(2-(((3,5-bis- 653,5 654,5 trifluormethyl)benzyl)(2- methyl-2H-tetrazool-5- Mö™N j yl)amino)methyl)-4- _ 1

(trifluormethyl)fenyl)-4- T{ T

methoxycyclohexaan-carboxylaat COjMe 10 222

Bereiding 46: N-(2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(tri-fluormethyl)benzyl)-2-(2-(tert-butyldimethylsilyloxy)ethyl)-2H-tetrazool-5-amine Λι 'l'K ffi^**/** n, i j

O

5

Aan een oplossing van N-(2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluomethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine (51 mg; 0,086 mmol) in 2-methyltetrahydrofuran (1,0 ml) werd natriumcarbonaat (38 mg, 0,358 mmol), N,N-dimethylformamide (0,4 ml) en (2-broomethoxy)-tert-butyldimethylsilaan (100 mg, 10 0,418 mmol) toegevoegd. De reactie werd 16 uur bij 60°C geroerd. De reactie werd verdund met ethylacetaat en twee keer met water en vervolgens met een zoutoplossing gewassen. De organische laag werd gedroogd boven natrimsulfaat en onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 5-35% ethylacetaat in heptaan), waarbij 45 mg 15 (opbrengst 70%) van een kleurloze gom werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 6 ppm 7,77 (s, 1H), 7,73 (s, 2H), 7,47 (d, J=9,96 Hz, 2H), 7,41 (d, J=8,30 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 4,80 (s, 2H), 4,55 (t, J=5,39 Hz, 2H), 4,08 (t, J=5,39 Hz, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,12 (m, 2H), 1,98 (m, 2H), 1,8-1,45 (m, 8H), 0,82 (s, 9H), -0,07 (s, 6H).

20 Voorbeeld 81: 2-(5-((2-(1 -methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)(3,5-bis(tri-fluormethyl)benzyl)amino)-2H-tetrazool-2-yl)ethanol 223 ^3CV .^.CF3

f J

KvX j

O

Aan een oplossing van N-(2-(l-methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-(2-(tert-butyldimethylsilyloxy)ethyl)-2H-tetrazool-5 5-amine (42 mg, 0,056 mmol) in 2-methyltetrahydrofuran (1,5 ml) werd tetrabutylammoniumfluoride (0,1 ml, 0,1 mmol, 1,0 M in tetrahydrofuran) toegevoegd. De reactie werd 1,5 uur bij kamertemperatuur geroerd. De reactie werd onder vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd met een RediSep kolom van 4 g (Teledyne Isco Ine., Lincoln NE) (geëlueerd met 10-40% ethylacetaat in heptaan), waarbij 34 mg 10 (opbrengst 95%) van een gom werd verkregen. MS (ES+): Berekend: 639,5, gevonden: 640,5 (M+H). 'H-NMR (400 MHz, CDCh) δ ppm 7,78 (s, 1H), 7,74 (s, 2H), 7,45 (m, 3H), 5,10 (s, 2H), 4,81 (s, 2H), 4,61 (t, J=4,98 Hz, 2H), 4,11 (q, J=6,22, 5,8 Hz, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,44 (t, J=6,64, 6,22 Hz, 1H), 2,11 (m, 2H), 2,19 (m, 2H), 1,82-1,45 (m, 8H).

15

Bereiding 47: (3.5-bis-trifluormethvl-benzvlV(2-broom-5-trifluormethvl-benzvlV(2- methvl-2H-tetrazool-5-vnamine l

Λ T

F e N M

Stap A: Bereiding van 2: 2-broom-5-trifluormethvl-benzvlamine-methaansulfonzuur-zout 20 224 ÏÏ ΊΓ NH2 fl

U J —S~OH

Vi^8r 4

Natriumboorhydride (NaBH4) (225 g, 5,96 mol) werd in een kolf van 22 1 5 gebracht, gevolgd door THF (6,8 1, watervrij). Het mengsel werd afgekoeld in een ijs-water-bad. Trifluorazijnzuur (TFA) (518 ml) werd toegevoegd aan THF (1,4 1) en deze oplossing werd eveneens afgekoeld in een ijs-water-bad. De TFA-oplossing werd in 2,5 uur toegevoegd aan de NaBH4-suspensie. Het ijs-water-bad werd verwijderd en het verkregen mengsel werd 2 uur bij omgevingstemperatuur geroerd. 2-broom-5-10 trifluormethyl-benzonitril (678 g, 2,71 mol) werd opgelost in THF (1,2 1). Het TFA/NaBH4-mengsel werd opnieuw afgekoeld in een ijs-water-bad en de nitril-oplossing werd in 1,5 uur toegevoegd. Men liet het mengsel opwarmen tot omgevingstemperatuur terwijl 16 uur werd geroerd. LC-analyse van een kleine hoeveelheid liet zien dat de reactie was voltooid. Het mengsel werd afgekoeld in een 15 ijsbad en in 1 uur werd methanol (2 1) toegevoegd. De vluchtige componenten werden onder vacuüm verwijderd en er werd ethylacetaat (4 1) toegevoegd. Dit mengsel werd gewassen met water (3 1) dat natrium-kaliumtartraat (1 kg) bevat. De waterige laag werd gewassen met ethylacetaat (2 1) en de samengevoegde organische lagen werden gewassen met een zoutoplossing (2 1), gedroogd boven natriumsulfaat, gefiltreerd en 20 geconcentreerd. Het residu werd opgelost in THF (3 1) en afgekoeld in een ijswater-bad. Er werd methaansulfonzuur (195 ml) toegevoegd en het mengsel werd 2 uur geroerd. De verkregen vaste stof werd gefiltreerd en onder vacuüm gedroogd (676 g, opbrengst 71%). 'H-NMR (CD3OD) δ 7,92 (d, 8,3 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,65 (d, 8,3 Hz, 1H), 4,34 (s, 2H), 2,66 (s, 3H). Massaspectrometrie (ESI): M+l=255,9.

25

Stap B: Bereiding van (3.5-bis-trifluormethvl-benzvlV(2-broom-5-trifluormethyl-benzvDamine

Uv v cf3 225

Aan het product van stap A (640 g) in methyl-tert-butylether (4,3 1) werd 1 N natriumhydroxide (3,4 1) toegevoegd. Het mengsel werd geroerd totdat 2 heldere lagen waren gevormd. De organische laag werd gewassen met een zoutoplossing, gedroogd 5 boven natriumsulfaat, gefiltreerd en geconcentreerd tot het vrije amine 460 g). Het vrije amine (460 g, 1,81 mol) werd opgenomen in 1,1-dichlooretheen (4,3 1) en er werd 3,5-bis(trifluormethyl)benzaldehyde (438 g, 1,81 mol) toegevoegd. Het mengsel werd afgekoeld in een ijs-water-bad en er werd NaBH(CH3C02)3 (767 g, 3,62 mol) toegevoegd. Het mengsel werd 16 uur geroerd, waarna LC-analyse liet zien dat de 10 reactie was voltooid. Er werd verzadigd waterig kaliumcarbonaat toegevoegd totdat pH 8 werd bereikt. Er werd water (1 1) toegevoegd en de niet-opgeloste zouten werden afgefiltreerd. De lagen werden gescheiden en de waterige laag werd gewassen met 1,1-dichlooretheen (2 1). De samengevoegde organische lagen werden gewassen met een zoutoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat, gefiltreerd en geconcentreerd (880 g 15 product, opbrengst >95%). 'H-NMR van HCl-zout (CD3OD) δ 8,23 (s, 2H), 8,09 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,93 (d, 8,3 Hz, 1H), 7,67 (d, 8,3 Hz, 1H), 4,61 (s, 2H), 4,56 (s, 2H). Massaspectrometrie (ESI): M+1=480,1.

Stap C: Bereiding van f2-broom-5-(trifluormethv0benzvl)(3.5-bis('trifluormethvD-20 benzvDcvaanamide cf3

Aan het product van stap B (873 g, 1,82 mol) in ethanol (4,6 1) werd 25 natriumacetaat (452 g, 5,46 mol) toegevoegd. Het verkregen mengsel werd 20 minuten geroerd en vervolgens werd cyanogeenbromide (386 g, 3,64 mol) toegevoegd. Dit mengsel werd 2 uur geroerd, waarna de reactie was voltooid, zoals bleek uit LC-analyse. Er werd water (4 1) toegevoegd en de vluchtige componenten werden onder vacuüm verwijderd. Er werd tolueen (4 1) toegevoegd en het mengsel werd geroerd 30 totdat 2 heldere lagen waren gevormd. De lagen werden gescheiden en de waterige laag werd gewassen met tolueen (2 1). De samengevoegde organische lagen werden 226 gewassen met een zoutoplossing (1 1), gedroogd boven natriumsulfaat, gefiltreerd en geconcentreerd (opbrengst 90 g). 'H-NMR (CDCb) δ 7,83 (s, 1H), 7,71 (m, 3H), 7,54 (d, 1,7 Hz, 1H), 7,46 (dd, 2,1 Hz, 8,3 Hz, 1H), 4,38 (s, 2H), 4,34 (s, 2H). Massaspectrometrie (ESI): M+1=505,0.

5

Stap D: Bereiding van N-(2-broom-5-(trifluormethvObenzvD-N-f3.5-bis(trifluor-methv0benzvD-2H-tetrazool-5-amine

Fr ^ Λ L ,NH

CFZ ö ' Br 10

Aan het product van stap C (909 g, 1,80 mol) in methyl-tert-butylether 99 1) werd triethylamine (2,5 1, 18 mol) gevolgd door trimethylsilylazide (415 g, 3,60 mol) toegevoegd. Het verkregen mengsel werd 8 uur op 50°C verwarmd. Een kleine hoeveelheid werd gecontroleerd door middel van HPLC en er was nog steeds 15 uitgangsmateriaal aanwezig. Het mengsel werd afgekoeld en er werd trimethylsilylazide (50 g) toegevoegd. Het mengsel werd opnieuw op 50°C verwarmd en 3 uur geroerd. Na afkoelen werd 1 N natriumhydroxide (9 1) toegevoegd. De lagen werden gescheiden (er werd 150 ml ethanol toegevoegd om de scheiding te vereenvoudigen). De organische laag werd gewassen met een waterige 10% 20 citroenzuur-oplossing (8 1, vervolgens 2 1) totdat de wasvloeistoffen zuur waren. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat, gefiltreerd en geconcentreerd, e verkregen vaste stof werd wit bij bewaren (976 g, opbrengst 99%). ‘H-NMR (CD3OD) 6 7,47 (m, 3H), 7,64 (d, 8,3 Hz, 1H), 7,44 (d, 2,1 Hz, 1H), 7,38 (dd, 2,1 Hz, 8,3 Hz, 1H), 4,88 (s, 2H), 4,86 (s, 2H). Massaspectrometrie (ESI): M+l =548,0.

25

Stap E: Bereiding van N-(2-broom-5-(trifluormethvDbenzvn-N-(3.5-bis(trifluor- methvr)benzvlV2-methvl-2H-tetrazool-5-amine 227 ^YY'nV'' Μ^Βγ kQj.CF3 cf3

Aan het product van stap D (500 g, 0,912 mol) in 2-methylTHF (9 1) werd natriumcarbonaat (386 g, 3,65 mol), dimethylformamide (4 1) en dimethylsulfaat (156 5 ml, 1,7 eq) toegevoegd. Het verkregen mengsel werd 16 uur op 50°C verwarmd, waarna LC-analyse voltooiing liet zien. Na afkoelen werd water (9 1) toegevoegd e werden de lagen gescheiden. De organische laag werd gewassen met geconcentreerd ammoniumhydroxide (6,5 1). Er werd een zoutoplossing toegevoegd om de laagscheiding te vereenvoudigen. De organische laag werd gedroogd boven 10 natriumsulfaat, gefiltreerd en geconcentreerd. Het residu werd verwarmd in hexanen en heet gefiltreerd, waarbij een witte vaste stof (229 g) werd verkregen. De moedervloeistof werd samengevoegd met de moedervloeistof van een andere charge (460 g tetrazool) en gezuiverd over een Biotage® 150M systeem (Uppsale, Zweden) (geëlueerd met 5-10% ethylacetaat in hexanen). De titelverbinding werd geïsoleerd als 15 een witte vaste stof (729 g, opbrengst 74%). 'H-NMR (CDCI3) δ 7,71 (s, 1H), 7,62 (m, 3H), 7,41 (d, 1,7 Hz, 1H), 7,34 (dd, 2,1 Hz, 8,3 Hz, 1H), 4,80 (s, 2H), 4,78 (s, 2H), 4,18 (s, 3H). Massaspectrometrie (ESI): M+1=562,0.

Bereiding 48: rr.S-hi^ni.omietM-benzvl^IJoor-5-trini^rthy1-beilzYlH2- 20 methvl-2H-tctrazool-5-vliamine

Ir 1

V

) Ψ fi' >1' 1/ j ut.

228

Stap A: N-(3.5-bis('trifluormethvObenzvlideen¥2-chloor-5-(trifluormethvnfenvlV

methaanamine 5 Aan een kolf met ronde bodem van 100 ml, die is voorzien van een Dean-Stark- val, werd 50 ml tolueen, 5,0 g 2-chloor-5-trifluormethylbenzylamine en 5,8 g 3,5-bis(trifluormethyl)benzaldehyde en 50 mg para-tolueensulfonamide toegevoegd. De reactie werd verwarmd totdat geen water meer afdestilleerde, ongeveer 3 uur, daarna afgekoeld tot omgevingstemperatuur en het oplosmiddel werd onder vacuüm 10 verwijderd. Het ruwe product werd direct zonder verdere zuivering in de volgende stap toegepast. 10,0 g.

Stap B: N-(2-chloor-5-(trifluormethvDbenzvD(3.5-bis(trifluormethvOfenvDmethaan- amine 15

Aan een oplossing van de verbinding van stap A in ethanol werd 4 g natriumboorhydride toegevoegd en de reactie werd een nacht bij omgevingstemperatuur geroerd. De reactie werd afgeschrikt met 50 ml methanol en verdund met 100 ml water en 100 ml methyl-tert-butylether. De lagen werden 20 gescheiden en de organisch laag werd gedroogd boven magnesiumsulfaat, gefiltreerd en tot een olie geconcentreerd. Er werd 10 g van het gewenste amine verzameld, dat zonder verdere zuivering in de volgende stap werd toegepast. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 7,84 (s, 2H), 7,77 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,48 (s, 2H), 7,47 (s, 4H). 13C-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 142,6, 183,3, 130,4, 128,4, 127,1, 127,0, 125,6, 121,4, 52,4.

25

Stap C: (2-chloor-5-(trifhiormethvnbenzvr)(3.5-bis(trifluormethvDbenzvDcyaanamide

Aan het mengsel van de verbinding van stap B 910 g), 5,6 g natriumacetaat en 100 ml ethanol werd in 15 minuten 15,5 ml 3 M cyanogeenbromide in dichloormethaan 30 toegevoegd. Het reactiemengsel werd bij omgevingstemperatuur geroerd totdat de reactie was voltooid. Toen de reactie als voltooid werd beoordeeld werd deze verdund met 200 ml tolueen en 200 ml natriumhydroxide. De lagen werden gescheiden en de organische laag werd gedroogd met magnesiumsulfaat, gefiltreerd en tot een olie 229 geconcentreerd. 7,8 g (opbrengst 74%). Het product werd zonder verdere zuivering in de volgende stap toegepast. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 7,84 (s, 2H), 7,56 (s, 3H), 7,66 (ηι, 4H), 7,48 (s, 2H), 4,39 (s, 2H), 4,36 (s, 2H).

5 Stan D: N-(2-chloor-5-(trifluormethvnbenzviyN-(3.5-bis(trifluormethvnbenzvlVlH-tetrazool-5-amine

Een oplossing van 5 g van de verbinding van stap C, 50 ml 2-methylTHF, 5 ml triethanolamine en 2,5 ml trimethylsilylazide werd op 50°C verwarmd totdat de reactie 10 was voltooid. Toen de reactie als voltooid werd beoordeeld werd het reactiemengsel afgekoeld en werd 50 ml 1 N natriumhydroxide toegevoegd. De lagen werden gescheiden en de organische laag werd gewassen met 50 ml 10% citroenzuur. De organische laag werd geconcentreerd en getritureerd met hexaan, waarbij 4,6 g van de gewenste verbinding werd verkregen. Opbrengst 85%. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 15 7,84 (s, 2H), 7,74 (m, 3H), 4,90 (s, 4H). C, Η, N, berekend, (gevonden) 42,92 (42,98), 2,20(1,97), 13,90(13,54).

Stap E: N-f2-chloor-5-(trifluormethvnbenzvO-N-(3.5-bis(trifluormethvObenzvl)-2- methyl-2H-tetrazool-5-amine 20

Aan een suspensie van 2,5 g van de verbinding van stap D, 2,0 g natriumcarbonaat, 50 ml 2-methylTHF en 2,5 ml DMF werd 1,0 g dimethyl sulfaat toegevoegd. Het reactiemengsel werd op 40°c verwarmd totdat de reactie als voltooid werd beoordeeld. Toen de reactie als voltooid werd beoordeeld werd het 25 reactiemengsel afgekoeld tot kamertemperatuur en werd 12,4 ml 5% ammoniumhydroxide toegevoegd. Het mengsel werd 30 minuten bij omgevingstemperatuur geroerd. De organische laag werd verwijderd, boven magnesiumsulfaat gedroogd, gefiltreerd en tot een olie geconcentreerd, waarbij 2,2 g van de gewenste gemethyleerde tetrazool werd verkregen. Opbrengst 88%. 'H-NMR 30 (400 MHz, CDCI3) 7,64 (s, 2H), 7,25 (s, 1H), 7,24 (2, 2H), 4,21 (s, 2H), 4,20 (s, 2H).

C, Η, N, berekend (gevonden), 44,07 (44,10), 2,53 (2,13), 13,53 (13,41).

Bereiding 49: 5-amino-2-methvl-2H-tetrazool 230 <y

|sh~N

CH3

Stap A: Dibenzylcvaanamide 5 Aan een droge kol met ronde bodem van 2 1, die is voorzien van een bovenroerder, werd natriumacetaat (120 g), 1 dibenzylamine (100 g) en 600 ml ethanol toegevoegd. Aan deze suspensie werd bij kamertemperatuur in 30 minuten een 3 M oplossing van cyanogeenbromide in dichloormethaan toegevoegd (340 ml). De suspensie werd bij omgevingstemperatuur geroerd totdat door middel van HPLC werd 10 waargenomen dat d ereactie was voltooid. Het reactiemengsel werd verdund met 1 1 tolueen en in 15 minuten werd 1 N natriumhydroxide toegevoegd. Het reactiemengsel werd 1 uur geroerd en de lagen werden gescheiden. De organische laag werd gedroogd boven natriumsulfaat, gefiltreerd en tot een olie geconcentreerd, welke stolde bij bewaren. Herkristallisatie uit 2 1 van een l:l-mengsel van IPE/heptanen gaf 101 g 15 (89%) product. 'H-NMR (400 MHz, CD3OD) 7,42-7,15 (m, 10H), 1,31 (s, 4H). 13C- NMR (400 MHz, CD3OD) 6 135,1, 128,8, 128,7, 128,5, 118,0, 54,6. C, Η, N, berekend (gevonden), 81,05 (80,71), 6,35 (6,52), 12,60 (12,65).

Stap B: N.N-dibenzvl-lH-tetrazool-5-amine 20

Het product van stap A (50 g) werd opgelost in 500 ml tolueen en 150 ml triethylamine en in 15 minuten werd druppelsgewijs trimethylsilylazide (60 ml) toegevoegd. Het reactiemengsel werd verwarmd op 50°C en op deze temperatuur gehouden totdat de reactie was voltooid, zoals bleek uit HPLC. Na afkoelen tot 25 kamertemperatuur werd 500 ml 1 M natriumhydroxide en 500 ml dichloormethaan toegevoegd. De uit twee fasen bestaande oplossing werd 1 uur geroerd en de lagen werden gescheiden. De onderste organische laag werd geconcentreerd en opnieuw opgelost in ethylacetaat. De ethylacetaat-laag werd vervolgens behandeld met 200 ml 10% citroenzuur en 30-60 minuten geroerd. De lagen werden gescheiden en de 30 productlaag werd gedroogd boven natriumsulfaat, gefiltreerd en tot een olie geconcentreerd. De olie werd gekristalliseerd uit IPE, waarbij 46 g (77%) product werd 231 verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDC13) 7,38-7,24 (m, 10H), 4,60 (s, 4H). 13C-NMR (400 MHz, CDCI3) 5 159,2, 136,3, 129,1, 128,4, 55,0. C, Η, N, bereken (gevonden), 67,90 (67,73), 5,70 (5,53), 26,40 (26,01).

5 Stap C: N.N-dihenzvl-2-methvl-2H-tetrazool-5-amine

Het product van stap B (25 g) werd opgelost in 250 ml 2-methylTHF en 25 ml DMF. Hieraan werd in 15 minuten natriumcarbonaat (40 g) en dimethylsulfaat (18 ml) toegevoegd. Het reactiemengsel werd verwarmd op 45°C en op deze temperatuur 10 gehouden totdat de reactie was voltooid, zoals bleek uit HPLC. Na afkoelen tot kamertemperatuur werd 250 ml 5% ammoniumchloride toegevoegd en werd de uit twee fasen bestaande oplossing ten minste 30 minuten geroerd. De lagen werden vervolgen gescheiden, gedroogd boven natriumsulfaat, gefiltreerd en tot een olie (26 g) geconcentreerd. HPLC-analyse van de olie liet een 9:1-mengsel van 2-methyl- tot 1-15 methyl-regioisomeren zien. De twee isomeren werden gescheiden door verdampingschromatografie, onder elutie met 9:1 hexaan/EtOAc, waarbij 21,2 g (77%) van het gewenste 2-methyl-derivaat, N,N-dibenzyl-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine, werd verkregen. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 7,34-7,22 (m, 10H), 4,61 (s, 4H). I3C-NMR (400 MHz, CDC13) δ 159,2, 136,3, 129,1, 128,4, 55,0. 'H-NMR (400 MHz, 20 CDCI3) 7,34-7,22 (m, 10H), 4,63 (s, 4H), 4,15 (s, 3H). 13C-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 170, 137,6, 128,7, 128,2, 127,6, 51,3, 39,6, en 1,6 g (10%) van het 1-methyl-derivaat, N,N-dibenzyl-l-methyl-lH-tetrazool-5-amine. Herkristallisatie door langzame verdamping uit diethylether gaf kristallen van goede röntgenkwaliteit. 'H-NMR (400 MHz, CDCI3) 7,34-7,22 (m, 10H), 4,47 (s, 4H), 3,74 (s, 3H). I3C-NMR (400 MHz, 25 CDCb) δ 159,2,136,3, 129,1,128,4, 55,0.

Stap D: 2-methvl-2H-tetrazool-5-amine

Aan een schone reactor van roestvast staal werd palladiumhydroxide (1 g), 10 g 30 N,N-dibenzyl-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine uit stap C (10 g) en ethanol (100 ml) toegevoegd. Aan de reactie werd waterstof toegevoerd en de reactie werd verwarmd op 50°C en de druk werd gedurende 16 uur op 15 psi waterstof gehouden. Toen de opname van waterstof was gestopt werd de reactie gespoeld met stikstof en werd de 232 katalysator verwijderd door filtratie. De laag werd gewassen met 25 ml ethanol en samengevoegd met het filtraat en geconcentreerd tot een gebroken witte vaste stof, waarbij 2,7 g (73%) product werd verkregen. Een analytisch monster werd bereid door herkristallisatie uit isopropanol. 'H-NMR (400 MHz, DMSO-dö) 5,94 (s, 2H), 4,03 (s, 5 3H). 13C-NMR (400 MHz, DMSO-d*) δ 167,8, 40,52. C, Η, N, berekend (gevonden), 68,79 (68,54), 6,13 (6,41), 25,07 (24,83).

Als alternatief, onder toepassing van een mengsel van regioisomeren: aan een schone reactor van roestvast staal werd palladiumhydroxide (1,4 g), 14 g van een 9:1-mengsel van N,N-dibenzyl-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine en N,N-dibenzyl-l-methyl-10 lH-tetrazool-5-amine van stap C en ethanol (140 ml) toegevoegd. Aan de reactie werd waterstof toegevoerd en de reactie werd verwarmd op 50°C en de druk werd gedurende 16 uur op 15 psi waterstof gehouden. Toen de opname van waterstof stopte werd de reactie gespoeld met stikstof en werd de katalysator verwijderd door filtratie. De laag werd gewassen met 50 ml ethanol en samengevoegd met het filtraat en geconcentreerd 15 tot een gebroken witte vaste stof, waarbij 5,1 g (kwantitatief mengsel van l-methyl-2H-tetrazool-5-amine en 2-methyl-2H-tetrazool-5-amine) werd verkregen. Het ruwe reactiemengsel werd opgenomen in dichloormethaan en het niet-omgezette isomeer werd weggefiltreerd. De dichloormethaan-laag werd vervangen door isopropanol, waarbij 3,8 g van het gewenste product werd verkregen.

20 In deze aanvrage wordt verwezen naar verschillende publicaties. De beschrijvingen van deze publicaties dienen in hun geheel voor alle doeleinden als hierin ingelast te worden beschouwd.

Het zal duidelijk zijn voor de deskundige dat verschillende modificaties en variaties kunnen worden uitgevoerd in de onderhavige uitvinding zonder af te wijken 25 van de omvang of geest van de uitvinding. Andere uitvoeringsvormen van de uitvinding zullen duidelijk zijn voor de deskundige na een beschouwing van de beschrijving en de uitvoering van de daarin beschreven uitvinding. Het is de bedoeling dat de beschrijving en voorbeelden alleen als voorbeelden worden beschouwd, waarbij de werkelijke omvang en geest van de uitvinding worden weergegeven in de conclusies 30 die volgen.

Claims (20)

1. Verbinding met de formule 1 R2 R5 r3\ .'R1 II A i ll r4 Jf 5 * Formule I of een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de verbinding; waarbij A -COO(Ci-Chalky 1, cyaan, -CHO, -CONH2, -CO(Ci-C4)alkyl of Q is, waarbij 10 Q een vijf of zes leden tellende volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring is, waarbij ieder ringatoom, behalve het atoom dat is gebonden aan N van de formule I, kan zijn vervangen door een stikstof-, zuurstof- of zwavelatoom, en waarbij ieder ringatoom eventueel gesubstitueerd kan zijn met cyaan, een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde rechte of 15 vertakte keten met 1 tot 6 koolstofatomen, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring met 3 tot 8 koolstofatomen, waarbij ieder koolstofatoom van de keten of ring eventueel is vervangen door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof en zwavel, en waarbij het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met 20 amino, halogeen, cyaan, hydroxy, oxo, carboxyl, (Ci-C6)alkoxycarbonyl, ((Ci-C6)alkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), ((Ci-Céjalkoxy dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen) of ((Ci-Cöjalkylthio dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), en 25 waarbij het stikstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met cyaan, oxo, (Cj-Cójalkoxycarbonyl of ((Ci-Cöjalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), waarbij het zwavelatoom van de keten of ring gesubstitueerd is met een of twee oxo, een tot vijf fluoratomen of aminogroepen, en de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met een groep V, waarbij V een drie tot zes leden tellende volledig verzadigde, gedeeltelijk verzadigde of volledig onverzadigde ring is die nul tot vier heteroatomen bevat die worden gekozen uit stikstof, zuurstof of 5 zwavel en eventueel gesubstitueerd is met een tot vijf groepen die worden gekozen uit waterstof, halogeen, cyaan, hydroxy, oxo, carboxyl, (Ci-Céjalkoxycarbonyl, ((Ci-Cöjalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), ((Ci-Cöjalkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen) of ((Ci-Cöjalkylthio dat 10 eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen); B -OR17 of -S(0)nR18 is; X C of N is, waarbij als X N is, R4 afwezig is; Y -CRnR12 is;

15 R1, R2, R3, R4, R5, R6 en R7 ieder onafhankelijk waterstof, halogeen, cyaan, hydroxy, nitro, ((Ci-Cé)alkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een of twee (Ci-Céjalkoxygroepen, een of twee amino-, cyaan-, oxo- of carboxygroepen), ((Ci-Cejalkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen of 20 cyaan) of ((Ci-C6)alkylthio dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen of cyaan) zijn of R1 en R2 of R2 en R3 samen een 5 tot 7 leden tellende, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring vormen, waarbij ieder koolstofatoom van de ring eventueel is vervangen door een zuurstofatoom, waarbij de zuurstofatomen niet met 25 elkaar verbonden zijn, waarbij de ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig, drievoudig of viervoudig gesubstitueerd is met halogeen, en eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met hydroxy, amino, nitro, cyaan, oxo, carboxy, ((Ci-Cöjalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een of twee (C i -CöjaLkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of 30 twee nitro-, cyaan-, oxo- of carboxygroepen) of ((C|-C6)alkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen of cyaan); R8, R9, R10, R13 en R14 onafhankelijk waterstof, aryl of ((Ci-Cejalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen halogeenatomen) zijn; R11 en R12 ieder onafhankelijk waterstof, een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde keten met 1 tot 2 koolstofatomen, of een 5 volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde mono- of bicyclische ring met 3 tot 10 koolstofatomen zijn, waarbij de ring eventueel bicyclisch is, en waarbij ieder koolstofatoom van de ring eventueel is vervangen door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof of zwavel, en het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is 10 met R19, en waarbij R11 en R12 niet gebonden zijn aan het koolstofatoom van Y aan een heteroatoom, en waarbij R en R niet beide waterstof zijn, of R11 en R12 samen een 3 tot 8 leden tellende, volledig verzadigde of gedeeltelijk onverzadigde mono- of bicyclische ring met eventueel een tot vier heteroatomen, gekozen uit zuurstof, stikstof en zwavel, vormen, waarbij de ring eventueel 15 enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met R19; R17 en R18 ieder onafhankelijk -(Ci-C6)alkyl-NR8R9, -(Co-C6)alkyl-CO-NR8R9, -(C0-C6)alkyl-CO-OR' °, -(C, -C6)alky 1-NR13-(C0-C6)alky 1-CO-O-R10, -(Ci -C6)alkyl- NR,3-(C0-C6)alkyl-CO-R14, -(C,-C6)alkyl-NR13-(Co-C6)alkyl-S02-R10, -(Ci-C6)alkyl-0-CO-NR8R9, -(C2-C6)alkenyl-CO-0-R10, -(Co-Cójalkyl-aryl, -(Co-Cö)alkyl-heteroaryl, -20 (Ci-Cöjalkyl-O-aryl, -(Ci-Cójalkyl-O-heteroaryl, -(Co-Cöjalkyl-heterocyclische groep, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkyl, -(C0-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkenyl, (C2-C6)alkynyl, (C2-C6)alkenyl, (Ci-Cöjalkyl of -CO-(C)-Ce)alkyl zijn, waarbij de R17 en R18 aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkenyl-, cycloalkyl-, alkynyl-, alkenyl- en alkylgroepen ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen 25 halogeenatomen, een of twee hydroxygroepen, een tot drie (C i -Cejalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cójhalogeenalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cójalkoxygroepen, een tot drie (Ci-Cöjhalogeenalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitro-, cyaan-, oxo-of carboxygroepen, behalve dat R17 geen aryl of heteroaryl is; iedere R19 onafhankelijk -(C0-C6)alkyl-NR8R9, -(C0-C6)alkyl-CO-NR8R9, -(C0-30 C6)alkyl-CO-OR10, -(Co-C6)alkyl-NR13-(Co-C6)alkyl-CO-0-R10, -(Co-Cejalkyl-NR13-(C0-C6)alkyl-CO-R14, -(Co-C6)alkyl-NR13-(Co-C6)alkyl-S02-R10, -(C0-C6)alkyl-O-CO-NR8R9, -0-(C,-C6)alkyl-CO-OR10, -(C2-C6)alkenyl-CO-0-R10, -(C0-C6)alkyl-aryl, -(C0-C6)alkyl-heteroaryl, -O-(C0-C6)alkyl-aryl, -O-(C0-C6)alkyl-heteroaryl, -(C0-C6)-alkyl- O-aryl, -(C0-C6)alkyl-O-heteroaryl, -(C0-C6)alkyl-heterocyclische groep, -O-(C0-C6)alky-heterocyclische groep, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkyl, -0-(Co-Cö)alkyl-(C3-C6)cycloalkyl, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkenyl, halogeen, (C2-C6)alkynyl, (C2-Ce)alkenyl, (C|-C6)alkyl, (C3-C6)cycloalkyl, hydroxy, (C)-C6)alkoxy, (Ci-C4)alkylthio, 5 nitro, cyaan, oxo of -CO-(Ci-C6)alkyl is, waarbij de aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkenyl-, cycloalkyl-, alkynyl-, alkenyl-, alkyl- en alkoxygroepen ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxygroepen, een tot drie (Ci-Céjalkylgroepen, een tot drie (Ci-Céjhalogeenalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cé)alkoxygroepen, een tot drie (Ci-10 Cöjhalogeenalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitro-, cyaan-, oxo-of carboxygroepen; en n 0,1 of 2 is.

2. Verbinding volgens conclusie 1, waarbij

15 A -COO(Ci-C4)alkyl, -CO(Ci-C4)alkyl of Q is, waarbij Q een vijf of zes leden tellende volledig onverzadigde ring is, waarbij ieder ring-atoom, behalve het atoom dat is gebonden aan N van de formule I, kan zijn vervangen door een stikstof-, zuurstof- of zwavelatoom, en waarbij ieder ring-atoom eventueel kan zijn gesubstitueerd met cyaan, een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde rechte of 20 vertakte keten met 1 tot 6 koolstofatomen, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring met 3 tot 8 koolstofatomen, waarbij ieder koolstofatoom van de keten of ring eventueel is vervangen door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof of zwavel, en het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met amino, 25 halogeen, cyaan, hydroxy, oxo, carboxyl, (Ci-Cójalkoxycarbonyl, of ((Ci-Cö)alkoxy dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen) en het stikstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met (C1 -Cójalkoxycarbony 1 of ((Ci-Cé)alkyl dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), 30 waarbij het zwavelatoom van de keten of ring gesubstitueerd is met een of twee oxo; R1 en R6 ieder waterstof zijn; R4 afwezig is of waterstof is; R11 een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde keten met 1 tot 2 koolstofatomen is, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde mono- of bicyclische ring met 3 tot 10 koolstofatomen is, waarbij de ring eventueel bicyclisch is, en waarbij ieder 5 koolstofatoom van de ring eventueel vervangen is door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof of zwavel, en het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met R19, en waarbij R11 en R12 niet gebonden zijn aan het koolstofatoom van Y aan een heteroatoom, en waarbij R11 en R12 niet beide waterstof zijn;

10 R12 waterstof is; en R2, R3, R5 en R7 ieder onafhankelijk waterstof, cyaan, ((Ci-Cejalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen fluoratomen) of ((Ci-Cö) alkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een tot negen fluoratomen) zijn.

3. Verbinding volgens conclusie 2, waarbij X C is; en R2, R3, R5 en R7 ieder waterstof, methyl, cyaan of CF3 zijn.

4. Verbinding volgens conclusie 3, waarbij R11 een 6 leden tellende volledig verzadigde ring is die eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met R19 20 en R19 -(Co-Cöjalkyl-aryl, -(Co-Cójalkyl-heteroaryl, -(Co-C6)alkyl-heterocyclische groep, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkyl, halogeen, (C2-C6)alkynyl, (C2-Ce)alkenyl, (Ci-Cé)alkyl, hydroxy, (Ci-Cöjalkoxy, nitro, cyaan, oxo of -CO-(Ci-C6)alkyl is, waarbij de aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkyl-, alkynyl-, alkenyl-, alkyl- en alkoxygroepen ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen 25 halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een tot drie (C1 -Céjalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cójhalogeenalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cö)alkoxygroepen, een tot drie (Ci-Cöjhalogeenalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitro-, cyaan-, oxo- of carboxygroepen.

5. Verbinding volgens conclusie 1, waarbij A -COO(Ci-C4)alkyl, -CO(Ci-Chalky 1 of Q is, waarbij Q een vijf of zes leden tellende volledig onverzadigde ring is, waarbij ieder ring-atoom, behalve het atoom dat is gebonden aan N van de formule I, kan zijn vervangen door een stikstof-, zuurstof- of zwavelatoom, en waarbij ieder ring-atoom eventueel kan zijn gesubstitueerd met cyaan, een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde rechte of vertakte keten met 1 tot 6 koolstofatomen, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring met 3 tot 8 koolstofatomen, waarbij ieder 5 koolstofatoom van de keten of ring eventueel is vervangen door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof of zwavel, en het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met amino, halogeen, cyaan, hydroxy, oxo, carboxyl, (Ci-Cójalkoxycarbonyl, of ((Ci-Cójalkoxy dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee 10 hydroxylgroepen) en het stikstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met (Ci-Cöjalkoxycarbonyl of ((Ci-Cejalkyl dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), waarbij het zwavelatoom van de keten of ring gesubstitueerd is met een of twee oxo; X C is;

15 R1, R2, R3, R5, R6 en R7 ieder waterstof, methyl, cyaan of CF3 zijn; R4 afwezig is of waterstof is; R11 een 6 leden tellende volledig verzadigde ring is die eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met R19 en R19 -(Co-Cójalkyl-aryl, -(Co-Cöjalkyl-heteroaryl, -(Co-Céjalkyl-heterocyclische groep, -(Co-C6)alkyl-(C3-C6)cycloalkyl, 20 halogeen, (C2-Ce)alkynyl, (C2-Ce)alkcnyl, (Ci-Cójalkyl, hydroxy, (Ci-Cójalkoxy, nitro, cyaan, oxo of -CO-(Ci-Cö)alkyl is, waarbij de aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkyl-, alkynyl-, alkenyl-, alkyl- en alkoxygroepen ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een tot drie (C1 -Cöjalkylgroepen, een tot drie (C1 -Cójhalogeenalkyl groepen, een tot drie 25 (Ci-Céjalkoxygroepen, een tot drie (Ci-Cé)halogeenalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitrogroepen, cyaan, oxo of carboxy; en R12 een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde keten met 1 of 2 koolstofatomen is, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde mono- of bicyclische ring met 3 tot 10 30 koolstofatomen is, waarbij de ring eventueel bicyclisch is, en waarbij ieder koolstofatoom van de ring eventueel vervangen is door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof of zwavel en waarbij het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met R19, waarbij R11 en R12 niet gebonden zijn aan het koolstofatoom van Y aan een heteroatoom en waarbij R11 en R12 niet beide waterstof zijn.

6. Verbinding volgens conclusie 1, waarbij

5 A -COO(Ci-C4)alkyl, -CO(Ci-Chalky 1 of Q is, waarbij Q een vijf of zes leden tellende volledig onverzadigde ring is, waarbij ieder ring-atoom, behalve het atoom dat is gebonden aan N van de formule I, kan zijn vervangen door een stikstof-, zuurstof- of zwavelatoom, en waarbij ieder ring-atoom eventueel kan zijn gesubstitueerd met cyaan, een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde rechte of 10 vertakte keten met 1 tot 6 koolstofatomen, of een volledig verzadigde, gedeeltelijk onverzadigde of volledig onverzadigde ring met 3 tot 8 koolstofatomen, waarbij ieder koolstofatoom van de keten of ring eventueel is vervangen door een heteroatoom dat wordt gekozen uit stikstof, zuurstof of zwavel, en het koolstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met amino, 15 halogeen, cyaan, hydroxy, oxo, carboxyl, (Ci-Cójalkoxycarbonyl, of ((Ci-Có)alkoxy dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen) en het stikstofatoom van de keten of ring eventueel enkelvoudig of tweevoudig gesubstitueerd is met (Ci-Céjalkoxycarbonyl of ((Ci-Cö)alkyl dat eventueel gesubstitueerd is met een tot negen halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen), 20 waarbij het zwavelatoom van de keten of ring gesubstitueerd is met een of twee oxo; X C is; R1, R2, R3, R5, R6 en R7 ieder waterstof, methyl, cyaan of CF3 zijn; R4 afwezig is of waterstof is; en R11 en R12 samen een 6 of 7 leden tellende volledig verzadigde of gedeeltelijk 25 onverzadigde monocyclische ring vormen, waarbij de ring eventueel enkelvoudig, tweevoudig of drievoudig gesubstitueerd is met R19 en R19 -(Co-Cöjalkyl-aryl, -(Co-Cöjalkyl-heteroaryl, -(Co-Cójalkyl-heterocyclische groep, -(Co-C6)alkyl-(C3-Cöjcycloalkyl, halogeen, (C2-Ce)alkynyl, (C2-Ce)alkenyl, (Ci-Cójalkyl, hydroxy, (Ci-Céjalkoxy, nitro, cyaan, oxo of -CO-(Ci-C6)alkyl is, waarbij de aryl-, heteroaryl-, 30 heterocyclische, cycloalkenyl-, cycloalkyl-, alkynyl-, alkenyl-, alkyl- en alkoxygroepen ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een tot drie (Ci -Cöjalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cójhalogeenalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cöjalkoxygroepen, een tot drie (Ci- C6)halogeenalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitro-, cyaan-, oxo-of carboxygroepen.

7. Verbinding volgens conclusie 1, 4, 5 of 6, waarbij X C is; R1, R4 en R6 ieder 5 waterstof zijn; R2, R3, R5 en R7 ieder waterstof, methyl, cyaan of CF3 zijn; en A -COOCH2CH3, -COOCH3, -COCH2CH3, -COCH3 of Q is, waarbij Q triazolyl, tetrazolyl, oxadiazolyl, isoxazolyl of pyrazolyl is en waarbij Q eventueel gesubstitueerd is met halogeen, ((Ci-Cójalkyl dat eventueel gesubstitueerd is met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen of een tot negen halogeenatomen), hydroxy, 10 ((Ci-Cójalkoxy dat eventueel gesubstitueerd is met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen of een tot negen halogeenatomen), amino, amido, oxo, cyaan, carboxy of ((Ci-Cójalkyloxycarbonyl dat eventueel gesubstitueerd is met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen en een tot negen halogeenatomen).

8. Verbinding volgens conclusie 7, waarbij Q rt Vt in H Y" γ O» «Λ/W WW mL·, I I * j > , Jvyy i of R6 H °'^fn ΛΛΛ/ i 20 is, waarbij iedere R° onafhankelijk waterstof, halogeen ((Ci-Cöjalkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen en een tot negen halogeenatomen), hydroxy, ((Ci-C6)alkoxy dat eventueel is gesubstitueerd met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen en een tot negen 25 halogeenatomen), cyaan, carboxy of ((Ci-C6)alkyloxycarbonyl dat eventueel is gesubstitueerd met een of twee oxo-groepen, een of twee hydroxylgroepen en een tot negen halogeenatomen) is.

9. Verbinding volgens conclusie 8, waarbij Q tt—— NR9 // \ "γβ WW 5 '1 is en R° waterstof, (Ci-C3)alkyl dat eventueel is gesubstitueerd met een tot vijf halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen of (Ci-C3)alkoxy is dat eventueel is gesubstitueerd met een tot vijf halogeenatomen of een of twee hydroxylgroepen.

10. Verbinding volgens conclusie 9, waarbij B -OR1 2 3 4 5 6 7 is en R7 -(Ci-Cöjalkyl-aryl, -(C i -Cójalkyl-heteroary 1, -(Co-Cójalkyl-heterocyclische groep, -(C0-C6)alkyl-(C3- Cöjcycloalkyl, (Cj-Céjalkyl is, waarbij de aryl-, heteroaryl-, heterocyclische, cycloalkyl- en alkyl-substituenten ieder eventueel onafhankelijk gesubstitueerd zijn met een tot negen halogeenatomen, een of twee hydroxylgroepen, een tot drie (Ci-15 Cöjalkylgroepcn, een tot drie (Ci-C6)halogeenalkylgroepen, een tot drie (Ci-Cójalkoxygroepen, een tot drie (Ci-Cójhalogeenalkoxygroepen, een of twee aminogroepen, een of twee nitro-, cyaan-, oxo- of carboxygroepen. Verbinding die wordt gekozen uit de groep die bestaat uit: 20 (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5- 2 trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; 3 (R) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; 4 (S) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-methoxy-methyl)-5-25 trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; 5 (3,5-bis-trifluormethyI-benzyl)-{2-[methoxy-(l-methyl-piperidine-4-yl)methyI]- 6 5-trifluormethyl-benzyl}-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; 7 (R)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)- {2-[methoxy-( 1 -methyl-piperidine-4-yl)methyl]-5-trifluormethyl-benzyl}-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (S)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)- {2-[methoxy-( 1 -methyl-piperidine-4-yl)methyl]-5-trifluormethyl-benzyl}-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (3,5-bis-trifluormethyl-ben2yl)-[2-(l-methoxy-propyl)-5-trifluormethyl-benzyl]- (2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; 5 (R)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(1-methoxy-propyl)-5-trifluormethyl- benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (S)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(l-methoxy-propyl)-5-trifluormethyl- benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; [2-(l-benzyloxy-propyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(3,5-bis-trifluormethyl-10 benzyl)-(2-methy l-2H-tetrazool-5-yl)amine; (R) -[2-(l-benzyloxy-propyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (S) -[2-(l-benzyloxy-propyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; 15 (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclopropyl-methoxy-methyl)-5- trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (R) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclopropyl-methoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (S) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclopropyl-methoxy-methyl)-5-20 trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(methoxy-fenyl-methyl)-5-trifluormethyl- benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (R)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(methoxy-fenyl-methyl)-5-trifluormethyl- benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; 25 (S)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(methoxy-fenyl-methyl)-5-trifluormethyl- benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (3,5-bis-trifluormethy l-benzyl)-[2-( 1 -methoxy-2-fenyl-ethyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (R) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-( 1 -methoxy-2-fenyl-ethyl)-5- 30 tri fluormethy 1-benzyl]-(2-methyl-2 H-tetrazool-5 -y l)amine; (S) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-( 1 -methoxy-2-feny l-ethyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-ethoxy-methyl)-5-trifluormethyl- benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (R)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-ethoxy-methyl)-5- trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; 5 (S)-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclohexyl-ethoxy-methyl)-5- trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclopropyl-ethoxy-methyl)-5-trifluormethyl- benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (R) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclopropyl-ethoxy-methyl)-5-10 trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (S) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(cyclopropyl-ethoxy-methyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; N-(2-( 1 -methoxycyc loheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine; 15 (R)-N-(2-( 1 -methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5- bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine; (S)-N-(2-( 1 -methoxycycloheptyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine; N-(2-(l-cyclohexyl-l-methoxyethyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-20 bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine; (R) -N-(2-( 1 -cyclohexyl-1 -methoxyethyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine; (S) -N-(2-(l-cyclohexyl-l-methoxyethyl)-5-(trifluormethyl)benzyl)-N-(3,5-bis(trifluormethyl)benzyl)-2-methyl-2H-tetrazool-5-amine; 25 (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-{2-[methoxy-(tetrahydro-pyran-4-yl)methyl]-5- trifluormethyl-benzyl}-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (R) -(3,5-bis-trifluormethyl-beazyl)-{2-[methoxy-(tetrahydro-pyran-4-yl)methyl]-5-trifluormethyl-benzyl}-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (S) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-{2-[methoxy-(tetrahydro-pyran-4-yl)methyl]-30 5-trifluormethyl-benzyl}-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(l-methoxy-propyl)-5-trifluormethyl-benzyl]- (2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; (R) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(l-methoxy-propyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; en (S) -(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-[2-(l-methoxy-propyl)-5-trifluormethyl-benzyl]-(2-methyl-2H-tetrazool-5-yl)amine; 5 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de verbinding.

12. Gebruik van een verbinding volgens conclusie 1 of 11 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de verbinding voor het produceren van een geneesmiddel voor het behandelen van atherosclerose, kransslagaderziekte, coronaire hartziekte, coronaire 10 vasculaire ziekte, periferale vasculaire ziekte, dyslipidemie, hyperbetalipoproteinemie, hypoalfalipoproteinemie, hypercholesterolemie, hypertriglyceridemie, familiale hypercholesterolemie of hartinfarct.

13. Farmaceutische samenstelling die een therapeutisch werkzame hoeveelheid 15 van een verbinding volgens conclusie 1 of 11, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de verbinding, en een farmaceutisch aanvaardbaar medium, verdunningsmiddel of drager omvat.

14. Farmaceutische combinatie-samenstelling welke omvat: een therapeutisch 20 werkzame hoeveelheid van een samenstelling welke omvat, een eerste verbinding, waarbij de eerste verbinding een verbinding volgens conclusie 1 of 11, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout van de verbinding, is; een tweede verbinding, waarbij de tweede verbinding een HMG-CoA-reductase-inhibitor, een MTP/Apo-B-secretie-inhibitor, een PPAR-modulator, een galzuur-25 heropname-inhibitor, een cholesterol-absorptie-inhibitor, een cholesterol-synthese-inhibitor, een fibraat, niacine, een combinatie van niacine en lovastatine, een combinatie van niacine en simvastatine, een combinatie van niacine en atorvastatine, een combinatie van amlodipine en atorvastatine, een ionenuitwisselingshars, een antioxidans, een ACAT-inhibitor of een galzuur-sekwestreermiddel is; en 30 een farmaceutisch medium, verdunningsmiddel of drager.

15. Farmaceutische combinatie-samenstelling volgens conclusie 14, waarbij de tweede verbinding een HMG-CoA-reductase-inhibitor, een PPAR-modulator of nicine is.

16. Farmaceutische combinatie-samenstelling volgens conclusie 15, waarbij de tweede verbinding fenofibraat, gemfibrozil, lovastatine, simvastatine, pravastatine, fluvastatine, atorvastatine, rivastatine, rosuvastatine of pitavastatine is.