NL194240C

NL194240C - Lincomycine en clindamycine-analoga.

Info

Publication number: NL194240C
Application number: NL8006229A
Authority: NL
Original assignee: Upjohn Co
Priority date: 1979-11-23
Filing date: 1980-11-14
Publication date: 2001-10-02
Also published as: CA1165315A; GB2063252A; FR2470134B1; FR2491072A1; NL300064I2; NL8006229A; FR2487358A1; ES496988A0; SE447260B; FR2470134A1; IL61245A0; HU187281B; NL300064I1; PL233258A1; HU190437B; DE3043502C2; PL228054A1; AU6344380A; ES8204442A1; IT8025607A0

Description

1 194240

llncomyclro©- cSlndamydne-amlo§B

De uitvinding heeft betrekking op een lincosaminidederivaat met werking tegen microparasieten zoals bacteriën, coccidia of mycoplasma in mens en dier, met de algemene formule 1, waarin Y 7(S)-hydraxy, 5 7(R)-hydroxy, 7(S)-halogeen, 7(R)-halogeen, 7(S)-methoxy, 7-desoxy-7(S)-(methylthio), 7-desoxy-7(S)-(2-hydroxyethylthio) of 7-desoxy-7(S)-(3-hydroxypropylthio) voorstelt en Z een heteroatoombevattende groep is.

Dergelijke lincosaminidederivaten worden beschreven in het Duitse ’’Offenlegungsschrift” 2.360.191. Volgens dit ’’Offenlegungsschrift” is in die derivaten een thiolincosaminidegroep gekoppeld aan een stikstofbevattende, niet-cyclische groep. De R, en R2 substituenten aan het stikstofatoom uit voomoemde 10 groep zijn een waterstofatoom of een alkylgroep met 1 tot 20 koolstofatomen (zie formule I van het ’’Offenlegungsschrift”).

Hef doel van de uitvinding is een lincosaminidederivaat te verschaffen dat een sterke werking tegen micro-parasieten zoals bacteriën, coccidia of mycoplasma in mens en dier heeft

Op verrassende wijze is gevonden dat bovengenoemd doel bereikt wordt met een lincosaminidederivaat 15 zoals omschreven in de aanhef, gekenmerkt doordat de heteroatoombevattende groep cyclisch is en voorgesteld wordt door de formule 2, waarin R1t die enkelvoudig of meervoudig gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstof· atoom dat niet aan de lincosaminidegroep gebonden is, gekozen wordt uit de groep bestaande uit waterstof, alkyl met 1-8 koolstofatomen, gesubstitueerde alkyl met 1-8 koolstofatomen, cydoalkyl, gesubstitueerde 20 cydoalkyl, gesubstitueerde zuurstof, gesubstitueerde stikstof, halogeen, fenyl, gesubstitueerde fenyl, -(CHaJn-OH en -(CH2)n-NR4R5, waarin n een geheel getal van 1-8 is en R4 en Re waterstof of alkyl met 1-8 koolstofatomen zijn, de formule 3, waarin n een geheel getal van 1-4 is, de stikstofbevattende ring gedeeltelijk onverzadigd kan zijn, R1 de bovengenoemde betekenis heeft en gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstofatoom dat 25 niet aan de lincosaminidegroep gebonden is en R3 gekozen wordt uit de groep bestaande uit waterstof, methyl, ethyl en -C^-CHa-OH, de formule 6, waarin A, B en E gekozen worden uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof, zwavel en CR^, R, de bovengenoemde betekenis heeft en gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstofatoom dat niet aan de lincosaminidegroep gebonden is, met dien verstande dat wanneer B stikstof is A en E niet 30 beide CR^., zijn, of de formule 7, waarin A, B, D en E worden gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof, zwavel en CR.,Ri, de heterocyclische ring gedeeltelijk onverzadigd kan zijn, R, de bovengenoemde betekenis heeften gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstofatoom dat niet aan de lincosaminidegroep gebonden is, of farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan.

35 Opgemerkt wordt dat in Chemical Abstracts, vol. 86, nr. 19, 9 mei 1977, pagina 599, nr. 140392e verbindingen beschreven worden waarin een thiolincosaminidegroep gekoppeld is aan een pyridinegroep door middel van een twee stikstofatomen bevattende koppelingsgroep met de formule -C(0)-NH-CH2-NH-.

Voorbeelden van hef lincosaminidederivaat volgens de uitvinding zijn analoga van lincomydne en clindamycins. Lincomycine heeft de formule 8 en clindamycine de formule 9. De eigenschappen en 40 bereiding van het antibioticum lincomycine zijn beschreven in het Amerikaanse octrooi schrift 3.086.912. Clindamycine is beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3.496.163. Deze antibiotica hebben uitgebreide toepassing gevonden als medicijnen voor mens en dier.

Bij voorkeur wordt het lincosaminidederivaat volgens de uitvinding gekozen uit de groep bestaande uit verbindingen met de formules 5,5A, 5B, 5C, 72 en 73.

45 Verder heeft de uitvinding betrekking op een therapeutisch preparaat voor het behandelen van mens en dier besmet met een microparasiet, zoals bacteriën, coccidia of mycoplasma, daardoor gekenmerkt dat het preparaat per doseringseenheid 15-500 mg van een verbinding volgens de uitvinding bevat

Belangrijke precursors voor verbindingen met de formule 1 waarin Z de formule 3 heeft waarin n 1 is zijn verbindingen met de formule 1 waarin Z de formule 2 heeft, waarbij R en R3 de bovengenoemde betekenis 50 hebben.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen worden bereid volgens reactieschema A. De golflijnen geven het D-ds- of L-ds-isomeer aan.

Een andere bereidingswijze is weergegeven in reactieschema B. De golflijn geeft de D-ds-, L-ds-, D-frans- of l-trans-structuur aan.

55 De L-cis-structuur met de formule 5 is 5 tot 10 maal werkzamer tegen S. aureus en S. hemolytlcua bij muizen.

Een isomeer van de verbinding met de formule 5 kan bij de bovengenoemde reactie worden afgezon- 194240 2 derd. Aangenomen wordt dat dit de D-cis-verbinding met de formule 5A is. De D-cis-structuur is niet zo’n krachtig antibacterieel middel als de L-cis-verbinding.

Uitgaande van het lincosaminidederivaat volgens de uitvinding kunnen 2-fosfaten en 2-palmitaten bereid worden, waarin de substituent gebonden is aan het zuurstofatoom op de 2-plaats van de suikem'ng van het 5 lincosaminidederivaat volgens de uitvinding.

Bij reactie van een aminozuur met de formule 11 waarin Rn de bovengenoemde betekenis heeft en gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstofatoom dat niet aan de carboxylgroep gebonden ie, met een suikeramineverbinding, zoals 7(S)-hydroxy-methyl 1 -thio-a-lincosaminide, 7(R)-hydroxy-methyl 1- thio-a-lincosaminide, 7(S)-halogeen-methyl 1-thio-a-lincosaminide, 7(R)-halogeen-methyl 1-thio-a-10 lincosaminide, 7(S)-methoxy-methyl 1-thio-a-lincosaminide, 7-desoxy-7(S)-(methylthio)-methyl 1-thio-a- lincosaminide, 7-desoxy-7(S)-(2-hydroxyethylthio)-methyl 1-thio-a-lincosaminide of 7-desoxy-7(S)-(3-hydroxypropylthiojmethyl 1-thio-a-lincosaminide verkrijgt men nuttige verbindingen met de formule 1.

Bij reactie van een aminozuur met de formule 12 waarin R, en R3 de bovengenoemde betekenis hebben en R1 gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstofatoom dat niet aan de carboxylgroep gebonden is, 15 met een suikeramineverbinding als hierboven aangegeven verkrijgt men nuttige verbindingen met de formule 1.

Bij reactie van een aminozuur met de formule 13 of 14, waarin R1f A, B, D en E de bovengenoemde betekenis hebben en R, gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstofatoom dat niet aan de carboxylgroep gebonden is, met een suikeramineverbinding als hierboven aangegeven verkrijgt men nuttige 20 verbindingen met de formule 1.

MTL is methyl 1-thio-a-lincosaminide met de formule 15.

epi-MTL is methyl 7(S)-7-deoxy-7-hydroxy-1-thio-a-lincosaminide met de formule 16.

7-CI-MTL is methyl 7(S)-7-deoxy-7-chloor-1-thio-a-lincosaminide met formule 17. epi-7-CI-MTL is methyl 7(R)-7-deoxy-7-chloor-1-thio-a-lincosaminide met de formule 18.

25 7(S)-methoxy-methyl 1-thio-a-lincosaminide kan worden weergegeven door de formule 19 (zie het Amerikaans octrooischrift 3.702.322, voorbeeld 1, deel B-1).

De formule 20 geeft 7-deoxy-7(S)-(methylthio)-methyl 1-thio-a-lincosaminide aan wanneer R CH3 is; 7-deoxy-7(S)-(2-hydroxyethylthio)-methyl 1-thio-a-lincosaminide wanneer R -CH2-CH2-0H is en 7-deoxy-7(S)-(3-hydroxypropylthio)-methyl 1-thio-a-lincosaminide wanneer R -CH2-CH2-CH2-OH is (zie het Ameri-30 kaans octrooischrift 3.915.954, voorbeelden 1,10 en 31).

De groepen op de plaats 7 van de bovengenoemde formules kunnen worden weergegeven door de formule 21 waarin Y de bovengenoemde betekenis heeft

Wanneer een pyridineacylgroep wordt gebruikt kan het verkregen analogon worden gereduceerd tot een mengsel van de overeenkomstige verzadigde verbindingen, waarvan er een het L-ds-isomeer is. Andere 35 verbindingen, die gevormd kunnen worden omvatten de L-trans-, D-cis- en D-trans-isomeren. In het algemeen is van elk van de hier beschreven verbindingen de gereduceerde vorm antibacterieel actiever dan de onverzadigde precursor. Het gebruik van een piperidineacylgroep levert op als D-cis-, L-ds-, D-trans- en L-trans-isomeren. Weer blijkt dat het L-cis-isomeer sterker antibaderieel werkzaam is.

De hier toegepaste algemene methode voor het bereiden van de nieuwe analogs berust op een bekende 40 reactie waarbij een geschikt zuur wordt gekoppeld met een geschikt suikeramine. (’’Mixed Carboxylic Add Anhydride Procedure”, Chemistry of The Amino Acids, deel 2, biz. 970, John Wiley and Sons, Inc. 1961.) Wanneer het zuur onverzadigd is, kan het verkregen onverzadigde analogon katalytisch onder standaardomstandigheden worden gereduceerd tot het verzadigde analogon. De reductie kan bijvoorbeeld worden uitgevoerd onder toepassing van de volgende omstandigheden: 45 H2 met een druk van ongeveer 35-350 kPa.

Katalysator platinaoxide (PtOa).

Oplosmiddel: H20 of H20 + MeOH of H20 + EtOH.

HCI: 10% overmaat Tijd: 24—48 uur.

50 Alkyl met 1 t/m 8 koolstofatomen omvat methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl, heptyl, octyl «1 isomeren met vertakte keten hiervan.

Gesubstitueerd alkyl wil hier zeggen de hoger genoemde alkylverbindingen waarin een of meer waterstofatomen zijn vervangen door halogeenatoom, dat wil zeggen Cl, Br, F en I, zuurstof, hydroxyl, amine (primair), amine (secundair- alkyl gesubstitueerd door alkyl als boven), amino (tertiair- alkyl gesubsti-55 tueerd door alkyl als boven), zwavel, -SH en fenyl. Voorbeelden zijn 1-fluorethyl, 1-chloorethyl, 2-fluorethyl, 2- chloorethyl, 1-broompropyi, 2-joodpropyl, 1-chloorbutyl, 4-fluorbutyl en 4-chloorbutyi.

Cycloalkyl omvat cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyi, cydoheptyl, en cydooctyi.

3 194240

Gesubstitueerd cycloalkyl wil zeggen een cycloalkyl gesubstitueerd als hoger beschreven voor gesubstitueerd alkyl. Voorbeelden zijn 2-cyclopropylethyl, 3-cyclobutylpropyl, 4-cyclopentylbutyl en 4-cyclohexylbutyl.

Gesubstitueerde fenyl wil zeggen fenyl waarin een of meer waterstofatomen zijn vervangen door een halogeenatoom als boven, hydroxyl, amine (primair, secundair en tertiair waarbij alkyl gesubstitueerd als 5 boven), -SH en fenyl. Voorbeelden zijn p-broomfenyl, m-joodfenyl, o-chloorfenyl, p-ethylfenyl, m-propylfenyl, o-methylfenyl en p-ethylfenyl.

Als hieronder nader beschreven, kunnen de verbindingen volgens de uitvinding worden gefosforyleerd tot het 2-fosfaat en geacyleerd tot het 2-palmitaat, die beide in vivo antibacterieel werkzaam zijn.

Gesubstitueerde zuurstof is zuurstof, die is gesubstitueerd door alkyl met 1 Vm Θ koolsfofatomen, aryl of 10 gesubstitueerd aryl.

Gesubstitueerde stikstof is stikstof, gesubstitueerd door acyl met 2-10 koolsfofatomen, mono-alky! met 1 t/m 8 koolstofatomen of een dialkyl, waarin de alkylgroep 1 t/m 8 koolsfofatomen bevat, mei inbegrip van de isomere vormen voor alle acyl en alkyigroepen.

Halogeen is chloor, broom, jood of fluor.

15 Voor de bereiding van de uitgangsaminozuren kan worden verwezen naar: 1. heterocyclic compounds, deel 1, John Wiley and Sons, Ine., 1950. Deze bron beschrijft de bereiding van door halogeen en alkyl gesubstitueerde aminozuren.

2. Chem. Abstracts: 81 -105223A: alkyt en cycloalkyl 20 81 - 152234D: alkyl en halogeen gesubstitueerd 82 -170746H: halogeen gesubstitueerd 85 - 463220: dihalogeen gesubstitueerd 85 - 177258W: dihalogeen gesubstitueerd 84 -116928X: dihalogeen gesubstitueerd 25 81 - 3737d: fenyl gesubstitueerd 78 - 58201t: fenyl gesubstitueerd 76 - 126800y: tetrahalogeen gesubstitueerd 82 -11036K: broom gesubstitueerd 83 - 27119W: broom gesubstitueerd 30 84 - 16613x: broom gesubstitueerd 78 - 123494G: broom gesubstitueerd 84 - 135488V: formule 22 81 -151951J: formule 23 81 - 77809a: formule 24 35 84 - 30918G : formule 25 81 - 33139C : formule 26 79 - 19109V : formule 27 81 -3737D: formule 28 81 - 135963K: formule 29 40 85 -177349B: formule 30 78 - 71865G : formule 31 81 -135964K: formule 32 83 - 147397G: formule 33 82 -11036K: formule 34 45 84 - 116928X: formule 35 81 - 33139C: formule 26 78 -126800Y: formule 36 79-115449b: formule 37 87 - 63229K: formule 38 50 68 - 104926b: formule 39 69 - 59048Z: formule 40 71 - 124907M: formule 41. formule 42 68 - 59465N: formule 43

Deze verbinding kan op bekende wijze worden gehydrolyseerd tot het zuur, dat dan eveneens op 55 bekende wijze kan worden gereduceerd.

86 - 106501e: formule 44

Deze verbinding kan op bekende wijze worden gehydrolyseerd tot het zuur, dat dan met in het Ameri 194240 4 kaans octrooischrift 3.583.972 beschreven methoden kan worden N-demethyleerd.

69 - 67282M : formule 45

Deze verbinding kan op bekende wijze tot het zuur worden gehydrolyseerd.

90 - 70297 -14-2; formule 46 5 Deze verbinding kan op bekende wijze worden gehydrolyseerd tot het zuur. Ook kan een of beide N-CH3 groepen uit het verkregen zuur worden verwijderd door toepassing van de in het Amerikaanse octrooischrift 3.583.972 beschreven methoden.

90 - 168488X: formule 47

Deze verbinding kan op bekende wijze worden gehydrolyseerd tot het zuur. dit kan met in het Ameri-10 kaanse Octrooischrift 3.583.972 beschreven methoden worden omgezet in de verbinding met de formule 48. 85 - 142995G: formule 49 81 - 152020S: formule 50 75-110156M: formule 51

In verbindingen met vrije NH2 of OH groepen moeten deze groepen worden beschermd voordat zij 15 worden gecondenseerd met de aminosuiker. Voor het beschermen van deze groepen kan worden verwezen naar ’’protective Groups in Organic Chemistry, J.F.W. McOmie, Plenum, Publishing Co., Ltd., 1973.

3. Jour. Chem. Soc. 1969 - 2134 - Verschillende door H-alkyl gesubstitueerde pyridinen kunnen worden bereid volgens reactieschema C waarin R alkyl, vertakt alkyl of cycloalkyl voorstelt 4. Jour. Chem. Soc. 1969 - 934 - volgens reactieschema D.

20 In onderstaande voorbeelden zijn de percentages gewichtspercentages en de verhoudingen in het oplosmiddelmengsel volumeverhoudingen, tenzij anders aangegeven.

Voorbeeld I

4-Cis-ethyl-L-pipecolinezuuramide van 7-CI-MTLHCI (U-57.930E-verblnding met de formule 5).

25 Deel I (zie reactieschema E)

Een oplossing van 67 g (0,357 mol) van het aminozuur.HCI (C.A. 51^, 1643a, 1957) en 71,5 g (0,714 mol) triëthylamine opgelost in 2,51 acetonitril wordt op 10°C gekoeld en 47,6 g (0,354 mol) isobutylchloorformiaat wordt ineens toegevoegd. Dit mengsel (oplossing A) wordt 1 uur bij 10°C geroerd. Oplossing B wordt bereid door oplossen van 97,7 g (0,357 mol) 7-CI-MTL (J. Med. Chem., 12-780,1969, B.J. Magerlein en F. Kagan) 30 in een warm mengsel van 1500 ml aceton en 1500 ml H20. De oplossing B wordt op 30°C gekoeld en ineens aan oplossing A toegevoegd. Het reactiemengsel wordt 18 uur bij 25°C geroerd en de aceton en het acetonitril worden onder vacuüm verwijderd. Het witte, brij-achtige residu wordt gefiltreerd en het kristallijne materiaal wordt verzameld en gedroogd waarbij men 95 g zuiver product verkrijgt Opwerken van het Altraat (chromatografie) geeft nog 10 g product De totale opbrengst is 73%.

35 Analyse berekend voor Ci7H25CIN205S: C 50,42; H 6,22; N 6,92; S 7,92; Cl 8,76%;

Gevonden: C 50,67; H 6,40; N 6,64; S 7,90; Cl 8,70%.

α CHO3(c1.0H295°.

Deel II (zie reactieschema F) 40 Een mengsel van 4,05 g (0,01 mol) uitgangsverbinding, 40 ml water, 60 ml methanol, 1,0 ml 37% HCI en 8,0 g PT02 katalysator werd 3 uur bij ± 35 kPa in een hydrogenator van Parr gereduceerd. Analyse van het reactiemengsel door DLC over silicagelplaten in een systeem bestaande uit CHda: methanol (verhouding 6:1) toonde aan, dat de uitgangsverbinding geheel was verdwenen en dat nog twee verdere polaire stoffen in een verhouding van circa 1:1 aanwezig waren. De katalysator werd uit de reactie afgefiltreerd en het 45 filtraat werd in vacuüm geconcentreerd waarbij men een witte kristallijne brij verkreeg. Deze werd gefiltreerd en het filtraat werd bewaard. De witte vaste stof, die de meest polaire was van de twee producten zoals bleek bij DLC van het reductiemengsel werd in water omgekristalliseerd waarbij men het gewenste product, U-57.930E, smpt 222-224°C, verkreeg in een opbrengst van 25-35%.

Analyse berekend voor C17H32CI2N205S: 50 C 45,63; H 7,21 ;N 6,26; S 7,17; Cl 15,85%;

Gevonden: C 45,77; H 7,44; N 6,39; S 7,21; α 16,17%. α HjAcI .0)+17^

De absolute configuratie en stereochemie van 5 werd bepaald door röntgendiffractie.

Bij onderzoek in vergelijking met clindamycine vertoont U-57.930E de volgende antimicrotnêle spectra: 5 19424©

TABEL A

De minimale inhlbitoire concentratie van U-57.930E en clindamycine versus aerobe bacteriën.

5 Organisme UC MIC (pg/ml)

Clindamycine U-57.930E

Staphylococcus aureus 6685 >25 >25 6686 0,05 0,20 10 6687 0,025 0,20 . 6888 >25 >25 6689 0,05 0,78 6690 0,025 0,20 6691 0,10 0,20 15 6692 >25 >25 6693 0,05 0,78 6694 >25 >25 6695 0,10 0,39 6696 0,10 0,39 20 6675 0,05 0,10 76 0,05 0,39 746 £ 0,05 0,05 571 0,20 0,78 570 0,20 0,39 25 Staphylococcus 719 0,10 0,20 epldermldls 3389 0,10 0,20

Streptococcus faecalis 694 26 6,25

Streptococcus pyogenes 152 <, 0,012 £ 0,012

Streptococcus vlridans 153 <, 0,012 0,05 30 871 £ 0,012 £ 0,012

Diplococcus pneumoniae I 41 £ 0,012 £ 0,012

Diplococcus pneumoniae II 3213 £ 0,012 £ 0,012

Escherichia coll 45 50 >50

Proteus vulgaris 93 >50 >50 35 Klebsiella pneumoniae 58 6,25 >50

Salmonella schottmuelleri 126 >50 >50

Pseudomonas aeruginosa 95 >50 >50 40 Het onderzoek wordt als volgt uitgevoerd:

De minimale remmende concentratie (MIC) van beide verbindingen versus aerobe bacteriën wordt bepaald volgéns de standaard microplaatbouillon-verdunningsmethode met hersen-hart infuus (BHI-Difco) bouillonmedium. De platen worden 20 uur bij 37°C geTncubeerd.

S. aureus UC 6685-6696 zijn klinische isolaten, die bestendig zijn tegen een of meer in de handel 45 verkrijgbare antibiotica.

”UC” is een ingeschreven handelsmerk van de Upjohn Company Culture Collection. Deze culturen kunnen op verzoek van de Upjohn Company in Kalamazoo, Michigan worden verkregen.

194240 6

TABEL B

Minimale remmende concentratie van clindamycine en U-57.930E versus Gram-positieve en Gram- negatieve anaërobe bacteriën 5 Organisme UC MIC (pg/ml)

Clindamycine U-57.930E

Bacteroides fragilis 6513 0,06 0,12 6428 0,06 0,25 10 6864 3,9 2,0 6862 7,8 15,6

Bacteroides thetaiotaomicron 6512 2,0 0,5

Bacteroides distasonls 6518 0,12 £0,03

Bacteroides melaninogenicus 6326 0,06 0,06 15 Clostridium perfringes 247 0,06 0,12

Clostridium novyl B 6329 0,06 0,12

Clostridium tertium 6508 7,8 7,8

Clostridium cadaveris 6510 £0,03 0,06

Ciostridium sordellil 6505 2,0 0,5 20 Clostridium tentani 6521 <0,03 £0,03

Clostridium botulinum A 65(½ 0,25 £0,03

Clostridium bifermentans 6507 0,50 0,(½

Clostridium difficile 6834 7,8 3,9 6857 250 125 25 a 6858 3,9 3.9 6860 500 500 6861 3,9 2,0

Propionibacterium 6564 0,06 0,12 acnes 6575 £0,03 0,06 30 Eubacterium llmosum 6515 2,0 2,0

Eubacterium lentum 6522 0,50 1,0

Actinomyces naeslundii 5920 0,25 0,25

Fusobacterium 6516 0,12 0,12 nudealum 6324 0,06 0,06 35 Fusobacterium varium 6052 15,6 3,9

Fusobacterium necrophofum 6568 0,06 0,06

Peptococcus asaccharolyticus 6214 0,50 0,25

Peptococcus magnus 6258 0,(½ 0,06

Peptococcus aerogenes 6319 £0,03 0,06 40 Peptostreptococcus anaerobius 6321 0,12 0,12

Het onderzoek wordt als volgt uitgevoerd: Series van tweevoudige verdunningen van het geneesmiddel worden bereid in 1,0 ml volumen Schaëdler Broth, en 9,0 ml gesmolten (47°C) Wilkens-Chalgren Agar 45 Medium, infra, wordt asui de antibioticum bevattende bouillon toegevoegd. Na mengen met het antibioticum wordt de agar uitgegoten in Petrischalen van 100 mm bij 20 mm. Men laat de schalen gedurende de nacht vóór het enten staan.

Culturen worden uitgestreken op Wilkens-Chalgren Agar en 48 uur bij 37°C gekweekt in een BBL Anaërobe Jar. De aangroei op de platen wordt geoogst en een celsuspensie wordt bereid in een Schaedler 50 bouillon tot een troebeling van een 0,5 McFarland Standard (108 cellen/ml). De suspensie wordt in de putjes van een Steers replicator gepipetteerd en circa 1-2 pi wordt op het oppervlak van de agarplaten gebracht Nadat men de ent een paar minuten heeft laten drogen, worden de platen in een BBL Anaërobe Jar (atmosfeer van 85% N, 10% H, 5% COJ gebracht en 72 uur bij 37°C geïncubeerd.

De minimale remmende concentratie (MIC) is de kleinste hoeveelheid geneesmiddel, die groei verhindert 55 Een zeer zwak laagje aangroeisel, of minder dan 3 kolonies, wordt als negatief beschouwd. Wilkens-Chalgren Agar Medium

Neem de volgende bestanddelen en los deze op in 1000 ml gedestilleerd water. De pH moet 7,0-7,2 zijn.

7 19424®

Trypücase 10 g

Gelysaat 10 g

Gistextract 5 g

Glucose 1 g 5 NaCI 5 g L-Arginine-vrije base 1 9

Dmivenzuur-natriumzcut 1 g

Agar 15 g 10 Voeg Heme en + Vitamine K1 oplossingen toe tot eindconcentraties van 5 pg/ml hemine en 0,5 g/ml SC, zijn verkregen.

Behandel 15 minuten aëroob in een autoclaaf bij 121°C. Heme Stock: 0,5 g Hemine + 10 ml 1 N WaOH + 9S0 ml Hj.

Behandel 12 minuten bij 121°C in een autoclaaf.

15 Voeg 10 ml uitgangsmateriaal per liter medium toe. + Vitamine K Stock: 0,05 m! vit. K, oplossing + 20 ml 95% ethanol.

Steriliseer op het filter.

Voeg 0,2 ml Stock per liter medium toe.

De I.P. LD» van U-57.930E bij de muis bleek 592 mg/kg te zijn. Deze waarde is het gemiddelde 20 verkregen uit twee afzonderlijke en identieke LD^, bepalingen en is circa 2 maal de LDgo voor dindamydne HCI. De LDg, betekent hier dat de acute I.P. giftigheid van U-57.930E ongeveer de helft van die van clindamycine HCI is.

In vivo: muizen-beschermingsproef 25 Organisme & toediening Clindamycine U-57.930E Verhouding S. aureus

Subcut. 5,7 (4,2-7,8)* «5 oraal 12,3(8,8-17,3) 1-5 circa 10 30 S. heroolytfcus

Subcut 2,3(1,6-3,3) 0,25 circa 10

Subcut. 3,3 (2,6-4,2) 0,25 (0,2-0,33) circa 13

Oraal 12,3(10,2-14,8) 2,9 (2,0-4,1) circa 4,2 tCPneumoniae >320 > 320 - 35 ---- ° COqo's als mg/kg.

Deze proef werd als volgt uitgevoerd:

Groepen van 10 standaard laboratoriummuizen (CF-1 muizen) met een gewicht van 18-20 g werden 40 geïnfecteerd met circa 100 LD^ gestandaardiseerde bacteriêle celsuspensies, die bij -170°C bevroren waren gehouden. Onmiddetlijk vóór gebruik werden de suspensies snel ontdooid en verdund. De infectie vond plaats via intraperitoneale weg.

De behandeling van de besmette groepen werden onmiddellijk begonnen en 4 dagen eenmaal daags voortgezet Groepen onbehandelde besmette muizen dienden als controledieren voor de virulentie van de 45 kweek.

7 Dagen na het begin van de behandeling werden de overlevende dieren gedood en de gemiddelde beschermende dosis van het antibioticum bepaald op basis van de mortallteitsverhoudingen In de behandelde groepen. De gemiddelde beschermende dosis en het betrouwbaarheidsinterval van 95% werden berekend met de methode van Spearmen & Karber op een 360 digitaalcomputer.

50 Uit voorbeeld I, deel II wordt ook de verbinding met de formule 5A afgescheiden na als volgt te zijn verkregen:

Het filtraat, dat uit deel II was verkregen, werd in vacuüm tot droog geconcentreerd en het residu werd in de vrije base omgezet en over silicagel gechromatografeerd onder toepassing van een mengsel van CHCI3 en methanol (6:1) als eluerend oplosmiddel. Op deze wijze werd de minst polaire verbinding, genoemd in 55 deel II, verkregen. Deze werd omgezet in het HCI zout en omgekristalliseerd in aceton en water. Aan dit isomeer wordt de structuur van de formule 5A toegeschreven.

Epimerisatie van de aan de piperadinering van de verbindingen met de formules 5 en 5A gebonden 194240 8 carbonylfunctie kan op bekende wijzen worden uitgevoerd (zie reactieschema G). De door deze epimerisa-ties verkregen trans-isomeren met de formules 5B en 5C kunnen op gebruikelijke wijzen worden afgescheiden, bijvoorbeeld door kristallisatie of chromatografie.

De verbindingen met de formules 5 en 5A kunnen ook worden gehydrolyseerd waarbij men de aminozu-5 ren met de formules 5D en 5E verkrijgt, die vervolgens op bekende wijzen kunnen worden geêpimeriseerd tot de verbindingen met respectievelijk de formule 5F en 5G. De aminozuren met de formules 5F en 5G kunnen met elk van de hoger beschreven lincosaminiden worden gekoppeld. Zie reactieschema H.

Het D-cis isomeer (formule 5A) van U-57.930E vertoont een antibacterieel spectrum bij testen op BHT bouillon zoals hierboven beschreven voor tabel A: 10 ---

Organisme UC nr. MIC (g/ml) S. aureus 76 250 570 1000 15 746 125 S. fecalls 694 > 1000 S. pyogenes 152 62,5 D. pneumoniae 41 62,5 E. coll 45 > 1000 20 K. pneumoniae 58 > 1000 S. schottmuelleri 126 > 1000

Ps. aeruginosa 95 >1000

25 Voorbeeld II

Andere analoga van 7-Ct-MTL

Te werk gaande volgens voorbeeld I, maar onder vervanging van het aminozuur door de onderstaande aminozuren, verkrijgt men de overeenkomstige nieuwe antibacterieel werkzame analoga als de vrije basen 30 of zuuradditiezouten ervan.

Aminozuur Analogon 35 -

Formule 52 U-45.863

Formule 53 U-46.138

Formule 54 U-46.137

Formule 55 U-46.337 (snel isomeer bij DLC met een mengsel van MeOH en CHCI3 (95:5) op 40 silicagelplaten)

Formule 55 U-46.465 (langzaam isomeer bij DLC)

Formule 56 U-46.699 (langzaam isomeer bij DLC bereid uit U-46.465)

Formule 57 U-45.656

Formule 58 U-45.652 45 Formule 59 U-46.701

Formule 60 U-60.481

Formule 61 U-44.469

Formule 62 U-45.657 50

Voorbeeld III Analoga van MTL

Te werk gaande volgens voorbeeld I maar onder vervanging van het aminozuur door de onderstaande 55 aminozuren en vervanging van 7-CI-MTL door MTL (J. Am. Chem. Soc., 89,2448,1987, W. Schroeder, B. Bannister en H. Hoeksema) verkrijgt men de overeenkomstige nieuwe anti-bacterieel werkzame analoga: 9 194240

Aminozuur Analogon 5 Formule 52 U-46.136

Formule 63 U-45.653

Formule 64 U-60.493 (snel Isomeer bij DLC)

Formule 65 U-60.492 (langzaam isomeer bij DLC) 10 --——-----

Voorbeeld IV Analoge van epi-MTL

15 Te werk gaande volgens voorbeeld I, maar onder vervanging van het aminozuur door de onderstaande aminozuren en vervanging van het 7-CI-MTL door epi-MTL (J. Chem. See., Perkin 11974, blz. 360-8, Bannister) verkrijgt men de overeenkomstige nieuwe antibacterieel werkzame analogs:

Aminozuur Analogon 20 -

Formule 52 IM6.135

Formule 63 U-45.659

Formule 65 Verbinding A

Formule 66 Verbinding B

25 ---—-—-

Voorbeeld V

Analogs van api-7-CI-MTl 30 Te werk gaande volgens voorbeeld I, maar onder vervanging van het aminozuur door de volgende aminozuren en toepassing van epi-7-CI-MTL in plaats van 7-CI-MTL verkrijgt men de overeenkomstige nieuwe antibacterieel werkzame analogs:

Aminozuur Analogon 35 ----

Formule 52 Verbinding C

Formule 63 Verbinding D

Formule 65 Verbinding F

Formule 66 Verbinding F

40 -—--

Epi-7-CI-MTL kan worden bereid met dezelfde methoden als 7-CI-MTL met als uitgangsmateriaal epi-MTL in plaats van MTL

Chemische en fysische eigenschappen van verbindingen uit voorbeeld II—V: 45 .........— .......

C Η N S Cl aD Smpt.

U-45.863 1 47,80 5.62 7,44 8,51 9,41 CHCi3 2 47,76 5,54 7,35 8,76 9,34 +286° 96-100*0 50 U-46.138 1 47,80 5,62 7,44 8,51 9,41 2 47,30 5,74 6,91 8,51 9,44

U-46.137 1 47,80 5,62 7,44 8,51 9,41 EtOH

2 47,58 5,74 7,56 8,53 9,49 +216° 189-

190°C

55 U-46.136 1 50,26 6,19 7,82 8,95 MeOH

194240 10 C H N S Q αΟ Smpt 5 2 49,16 5,86 8,01 9,15 +194° 199-

201 °C

U-46.135 1 50,26 6,19 7,82 8,95 ΜθΟΗ

2 50,50 6,19 7,98 9,27 +269° 97-100°C

U-46.337A 1 42,96 6,73 6,68 7,65 16,91 EtOH

10 2 42,73 6,86 6,52 7,73 16,68 +206° 220-

230°C

U-46.465E 1 47,05 7,11 7,32 8,38 9,26 EtOH

2 46,63 7,37 7,12 8,47 9,33 +231° 180-

183°C

15 U-46.699E 1 44,34 6,98 6,47 7,40 16,36 HaO

2 44,79 7,24 6,25 7,36 16,42 +172° 229-

234°C

U-45.656 1 50,42 6,22 6,92 7,92 8,76 CHClg 2 50,85 6,39 6,72 7,54 8,93 +250° 20 U-45.652 1 50,42 6,22 6,92 7,92 8,76 CHCI3 2 51,03 6,40 6,65 7,56 8,02 +273° U-45.653 1 52,83 6,78 7,25 8,30 - ΜθΟΗ 2 53,83 7,08 7,39 8,14 - +203° - U-45.659 1 52,83 6,78 7,25 8,30 - CHClg 25 2 52,77 6,70 7,34 8,55 - +295“ U-46.701A 1 46,85 7,43 6,07 6,95 15,73 U-44.469E 1 44,06 6,96 6,05 6,92 15,30 2 44,83 6,68 6,07 6,72 15,49 30 U-45.657 1 43,80 4,90 6,81 7,80 17,24 ΜθΟΗ 2 43,52 4,93 6,82 7,82 17,41 +181° 105-

130°C

35 1 - Berekend 2 - Gevonden

Voorbeeld VI

Fusaarzuuramide van 7-chloor-MTL (Reactieschema I) 40 . Te werk gaande volgens voorbeeld I maar onder vervanging van het aminozuur door fusaarzuur verkrijgt men U-55.581.

Analyse berekend voor CieH2eCIN205S: ,C 52,70; H 6,75; N 6,47; S 7,41; Cl 8,19%;

Gevonden: C 52,15; H 6,65; N 6,36; S 7,21; Cl 7,94%.

45

Voorbeeld VII

4-Cis-n-butyl-L-pipecolinezuuramlde van 7-CI-MTL of U-60.970E (reactieschema J)

Een mengsel van 4,0 g (0,0093 mol) uitgangsverbinding, 40 ml water, 40 ml methanol, 2 ml 37% HCI en 8,0 g Pt02 katalysator werd 18 uur in een Parr hydrogenator bij ± 35 kPa gereduceerd. Na afloop werd de 50 katalysator door filtreren verwijderd waarna het fikraat in vacuüm werd geconcentreerd waarbij men een bamsteenkleurige olie verkreeg. Deze werd opgelost in 20 ml van een oplossing van CHCIg en methanol (2:1) en voldoende triêthylamine werd toegevoegd om het aanwezige HCI te neutraliseren. Deze oplossing werd vervolgens gechromatografeerd over silicagel onder toepassing van een oplosmiddelsysteem bestaande uit CHClg en methanol (2:1). Twee hoofdproductfracties worden verkregen. De fracties, die de 55 sneller bewegende verbinding bevatten, werden samengevoegd en in vacuüm ingedampt waarbij men een witte vaste stof, fractie A, verkreeg. De fracties, die het langzamer bewegende verbinding bevatten, werden samengevoegd en in vacuüm ingedampt waarbij men een witte vaste stof, fractie B, verkreeg. Fractie B

11 19424§ werd opgelost in een kleine hoeveelheid M20 en 37% HCI werd toegevoegd tot pH 2, waarbij kristallisatie optrad. De vaste stof werd verzameld en omgekristalliseerd in water waarbij men witte kristallen verkreeg van het gewenste product, U-60.970E, smpt. 224-226°C in een opbrengst van 25-35%.

Analyse berekend voor C17H32CI2N2OaS: 5 C 47,99; H 7,63; N 5,89; S 6,75; Cl 14,92%;

Gevonden: C 47,97; H 7,42; N 6,23; S 6,90; Cl 14,87.

_ MeOHs-178°(e1,0) ö D

De structuur werd bevestigd door KMR.

De minimale remmende concentratie (MIC) in pg/ml van U-60.970E tegen verschillende bacteriën is als 10 volgt:

Organisme UC MIC

S. aureus 76 0,125 IS 570 0,25 746 0,062 S. faecalis 694 0,25 S. pyogenes 152 0,008 D. pneumoniae 41 0,016 20 E. Cdi , 45 31,2 K. pneumoniae 58 7,8 S. schottmuelleri 126 31,2

Ps. aeruginosa 95 >125 25

De testmethode is dezelfde als in voorbeeld I.

U-60.970E werd ook in vivo beproefd aan muizen die opzettelijk waren besmet met bacteriën. De proef werd uitgevoerd in vergelijking met U-57.930E. De volgende resultaten tonen aan, dat U-60.970E aanzienlijk werkzamer is in vivo tegen D. pneumoniae hemolyticus I en III dan U-57.930E. Ten opzichte van S. aureus 30 en S. hemolyticus vertoont U-60.970E hoofdzakelijk dezelfde werking als U-57.930E.

Gemiddelde beschermende werking (CD^, in mg/kg)

U-57.930E.HCI U-60.970E.HCL

35 Organisme Stam Subcutaan Oraal Subcutaan Oraal S. hemolyticus C203 0,38(0,28-0,51) 3,79(2,74-5,29) 0,35 2,18 (1,5-3,16) S. aureus UC76 1,07(0,72-1,59) 8,12(5,78-11,41) 1,32(1,05-1,66) 8,12(6,75-9,77) D. pneumoniae I Felton! 1,54(1,12-2,11) 15,39(10,57-22,4)0,67(0,52-0,86) 4,42(3,15-6,21) 40 D. pneumoniae III MPI HI 2,68(1,88-3,81) 14,36(9,68-21,31)0,44(0,36-0,54) 3,13(2,26-4,32) 2,5(1,69-3,69) 16,49(10,51- 0,29(0,21-0,41) 4,12(2,93-5,81) 25,88)

45 Voorbeeld VIII

4-Cis-n-butyl-D-pipecolinezuuramide van 7-CI-MTL of U-61.734E (zie schema K)

Fractie A uit voorbeeld VII werd op dezelfde wijze als beschreven voor fractie 8 in het HCI zout omgezet.

De opbrengst bedroeg 25-35%. Het KMR spectrum was in hoofdzaak gelijk aan dat van fractie B.

50 Voorbeeld IX

Bereiding van een verbinding waarin het aminozuurgehalte een heteroatoom in een ring met 5 leden bevat (reactieschema L)

De aminozuurester (zie C.A. 69 - 67282M) kan op bekende wijzen tot het vrije zuur worden gehydrolyseerd (zure of basische hydrolyse kan worden toegepast). Het kan worden verkregen in de vorm van het HCI zout 55 of het Zwitterion. De koppeling van het aminozuur.HCI met 7-CI-MTL wordt op dezelfde wijze uitgevoerd als beschreven in voorbeeld I met 67,7 g (0,357 mol) van het aminozuur. Na opwerken op de in voorbeeld I beschreven wijze kan het ruwe product worden gezuiverd door chromatografie over silicagel. De product- 194240 12

fracties kunnen worden samengevoegd en in het HCI zout worden omgezet Voorbeeld X

Bereiding van een verbinding waarin het aminozuurgedeelte een heteroatoom in een ring met S leden bevat 5 (reactieschema M)

De aminozuurester (zie C.A. 68 - 59465N) kan op bekende wijzen worden gehydrolyseerd tot het vrije zuur (zure of basische hydrolyse kan worden toegepast). Het kan worden verkregen in de vorm van het HCI zout of Zwitterion. De koppeling van het aminozuur.HCI met 7-CI-MTL wordt op de in voorbeeld I beschreven wijze uitgevoerd met 103,6 g (0,357 mol) van het aminozuur. Na opwerken op de in voorbeeld I beschreven 10 wijze kan het ruwe product worden gezuiverd door chromatografie over silicagel en kunnen de product-fracties worden samengevoegd en in het HCI zout worden omgezet

Voorbeeld XI

2-Fosfaatanaloga 15 Het 2-fosfaatanalogon van de in de voorbeelden l-X bereide verbindingen kan met bekende methoden worden bereid, bijvoorbeeld door modificatie kan de in het Amerikaanse octrooischrift 3.487.068 beschreven methode. Daarbij moeten de groepen die niet mogen reageren, eerst worden beschermd. De beschermende groepen worden na afloop van de fosforylering verwijderd.

20 Voorbeeld XII

2-Palmitaatanaloga

Het 2-palmitaatanalogon van de in de voorbeelden l-X bereide verbindingen kan op bekende wijze worden bereid, bijvoorbeeld door modificatie van de in het Amerikaans octrooischrift 3.580.904 beschreven methode. Daarbij moeten de groepen, die niet mogen reageren, eerst worden beschermd. De bescher· 25 mende groepen worden na afloop van de acylering (met palmitoylchloride) verwijderd. De minimale remmende concentratie (MIC) van een aantal verbindingen uit voorbeelden II—VIII is als volgt (de testmethode is dezelfde als boven beschreven).

MIC In mcg/rnl 30 U-Nummer en structuur 45,656 45,652 45,653 45,659 46,701 44,469 45,657 35 6-y (L ^ 9:x £Ha _ OH_ 40 S. aureus UC 76 62,5 1000 >1000 >1000 62,5 250 125 S. aureus UC 570 62,5 >1000 >1000 >1000 125 250 250 S. aureus UC 746 62,5 1000 >1000 1000 625 >1000 250 45 ---—-- S. hemolyticus UC 3,9 500 >1000 500 - 31,3 7,8 152

St. faecalis UC 694 1000 >1000 >1000 >1000 500 1000 >1000 50 ----—-;- ... j S. luteaUC130 1000 E. coli UC 45 >1000 >1000 >1000 >1000 >1000 >1000 >1000 55 P. vulgaris UC 93 >1000 >1000 >1000 >1000 >1000 >1000 >1000 13 194246 MIC in mcg/ml U-Nummer en structuur 45,656 45,652 45,653 45,659 46,701 44,409 45,657

CH» CHa OH

K. pneumoniae UC 1000500 >1000 1000 >10061000 <1000 58 S. schottmuelleri UC 1000000 >1000 >1000 >10061000 >1000 15 126 _

Ps. aeruginosa UC >1000000 >1000 100Ó >10081000 >1000 95 D. pneumoniae UC -500 >1000 500 - 31.3 41 0 0 0

II II II

X=C-7-CI-MTL Y=C-MTL Z=C-epi-MTL R=C2H8- 25 MIC in mcg/ml U-Nummer an structuur 45,863 46,138 46,137 46,136 46,135 46,337 46,465 46,699 O-Jt QrX O-γ O-Z φ-χ φ-χ φ^χ 35 S. aureus UC 76 62,5 >1000 >1000 >1000 1000 3.9 3,9 S. aureus UC 570 >1000 >1000 >1000 1000 31.2 7,8 S. aureus UC 746 >1000 >1000 >1000 1000 3,9 7,8 40 -'------ 7Γ S. hemolyticus UC 2,0 Qual. 1000 1000 1000 250 <1.0 3.9 152

St. faecalis UC 694 >1000 Assay >1000 >1000 >1000 <1000 3.9 15.6 45 Inactive E. coll UC 45 >1000 vs. 1000 >1000 >1000 >1000 >1000 1000 P. vulgaris UC 93 >1000 S. >1000 >1000 >1000 >1000 10(H) 1000 50 lutea K. pneumoniae UC >1000 1000 >1000 >1000 >1000 500 250 58 55 S. schottmuelleri >1000 1000 >1000 >1000 >1000 >1000 >1000 UC 126 194240 14 MIC in mcg/ml U-Nummer en stmctuur 45,863 46,138 46,137 46,136 46,135 46,337 46,465 46,699

0“x 0"X O-Y Q-Z O-X G-X

10 Ps. aeruginosa UC >1000 1000 >1000 >1000 >1000 >1000 >1000 95 D. pneumoniae UC 62,5 500 >1000 >100 250 <1,0 <1,0 »5 41 _ O O Snel Langzaam N-methyl II II isomeer isomeer van X=C-7-CI-MTL Y=C-MTL bij bij langzaam _ O DLC DLC isomeer

20 II

Z=C-epi-MTL

MIC In mcg/ml 25 U-Nummer en structuur U-60,493 U-60,492 U-60,481 _φ-Υ φ-r "tp-x S aureus UC 76 1000 1000 2,0 35 S. aureus UC 570 1000 >1000 3,9 S aureus UC 746 250 250 2,0 S. hemolyticus UC 152 7,8 15,6 >1,0 40 -

St faecalis UC 694 1000 >1000 31,2 S. luteaUC130 45 E. coli UC 45 >1000 >1000 500 P. vulgaris UC 93 >1000 >1000 1000 K. pneumoniae UC 58 >1000 >1000 250 50 S. Schottmuelleri UC 126 >1000 >1000 1000

Ps. aeruginosa UC 95 >1000 >1000 >1000 D. pneumoniae UC 41 15,6 31,2 55 -- 15 194240 MIC in mcg/ml U-Nummer en structuur U-60,493 U-60,492 U-60,481

Snel Isomeer Langzaam 1R & NMR OK

bij DLC isomeer bij DLC

O O

II II

X=G-7-CI-MTL Y=C-MTL

R=C2H3

Daar de verbindingen volgens de uitvinding werkzaam zijn tegen verschillende Gram-positieve en Gram-negatieve microben kunnen zij in verschillende omgevingen worden gebruikt voor het bestrijden van 15 dergelijke microben. Zij kunnen bijvoorbeeld worden gebruikt als ontsmettingsmiddel voor het bestrijden van S. aureus op afgewassen en opgestapeld vaatwerk. Zij kunnen ook worden gebruikt als ontsmettingsmiddel van door S. aureus besmette apparatuur van tandartsen en medici. Verder kunnen de verbindingen volgens de uitvinding worden gebruikt als bacteriostatische spoeling voor gewassen kleding en voor het impregneren van papier en weefsels en zij zijn tevens nuttig voor het onderdrukken van de groei van gevoelige 20 organismen bij plaatproeven en andere microbiologische media.

De verbindingen volgens de uitvinding komen voor in de geprotoneerde of niet-geprotoneerde vorm, afhankelijk van de pH van het milieu. Wanneer de geprotoneerde vorm bedoeld wordt, komen de verbindingen voor als farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten en wanneer de niet-geprotoneerde vorm wordt bedoeld, komen de verbindingen voor als de vrije base. De vrije basen kunnen in stabiele zuuradditiezouten 25 worden omgezet door de vrije base te neutraliseren met het geschikte zuur, pH circa 7,0 en met voordeel tot pH circa 2-6. Geschikte zuren voor dit doel zijn onder andere zoutzuur, zwavelzuur, fosforzuur, thiocyaanzuur, kiezelfluorwaterstofzuur, hexafluorarseenzuur, hexafluorfosforzuur, azijnzuur, bamsteenzuur, citroenzuur, melkzuur, maleïnezuur, fumaarzuur, appelzuur, cholinezuur, palmitinezuur, mudnezuur, kamferzuur, glutaarzuur, glycolzuur, ftaalzuur, wijnsteenzuur, jaurinezuur, stearinezuur, salicylzuur, 30 3-fenylsalicylzuur, 5-fenylsalicylzuur, 3-methylglutaarzuur, orthosulfobenzoëzuur, cydohexaansulfaminezuur, cyclopentaanpropionzuur, 1,2-cydohexaandicarbonzuur, 4-cyclohexaancarbonzuur, octadecenylbamsteen-zuur, octenylbamsteenzuur, methaansulfonzuur, helianthinezuur, Reinecke’s zuur, dimethyldithiocarbamine-zuur, hexadecyisulfaminezuur, octadecylsulfaminezuur, sorbinezuur, monochloorazijnzuur, udecyleenzuur, 4-hydroxyazobenzeen-4-sulfonzuur, octadecylzwavelzuur, picrinezuur, benzoêzuur, kaneelzuur en dergelijke. 35 De zuuradditiezouten kunnen voor dezelfde doeleinden worden gebruikt als de vrije base of worden gebruikt voor het verbeteren van de kwaliteit van de vrije base. De vrije base kan bijvoorbeeld worden omgezet in een in water onoplosbaar zout, zoals het pricraat dat kan worden gezuiverd door bijvoorbeeld oplosmiddelextractie en wassen, chromatografie, gefractioneerde vloeistof-vloeistofextracties en kristallisatie en daarna worden gebruikt voor het regenereren van de vrije basevorm door behandeling met alkali of voor 40 het bereiden van een ander zout door metathese. De vrije base kan ook worden omgezet in een in water oplosbaar zout, zoals het hydrochloride of sulfaat en de waterige oplossing van het zout kan met verschillende niet met water mengbare oplosmiddelen worden geëxtraheerd voordat de vrije basevorm wordt geregeneerd door behandeling van de aldus geëxtraheerde zuuroplossing of door metathese in een ander zout worden omgezet.

45 Naast de hoger genoemde toepassing als antibacterieel middel kunnen de vrije basen worden gebruikt als buffers of neutraliseermiddel. Bij condensatie met formaldehyd vormt het thiocyaanzuuradditiezout harsachtige stoffen, die van nut zijn als inleg-inhibitoren volgens de Amerikaanse octrooischriften 2.425.320 en 2.606.155. De vrije basen vormen ook goede dragers voor giftige zuren. De klezelfluorwaterstofzuren zijn bijvoorbeeld nuttig als motwerende middelen volgens de Amerikaanse octrooischriften 1.915.334 en 50 2.075.359 en de hexafluorarseenzuur- en hexafiuorfosforzuuradditiezouten zijn van nut als middelen tegen parasieten volgens de Amerikaanse octrooischriften 3.122.536 en 3.122.552.

De verbindingen volgens de uitvinding zijn nuttig als antibacteriële middelen in geschikte preparaten.

Deze worden bij voorkeur gebruikt voor toediening aan mens en dier in eenheidsdoseringsvormen, zoals tabletten, capsules, pillen, poeders, korrels, steriele parenterale oplossingen of suspensies en orale 55 oplossingen of suspensies en als olie-water emulsies, die geschikte hoeveelheden van de werkzame verbinding bevatten in de vorm van de vrije base of de farmacologisch aanvaardbare zouten ervan.

Voor orale toediening kunnen hetzij vaste, hetzij vloeibare eenheidsdoseringsvormen worden bereid.

194240 16

Voor het bereiden van vaste preparaten wordt het voornaamste werkzame bestanddeel gemengd met gebruikelijke bestanddelen, zoals talk, magnesiumstearaat, dicalciumfosfaat, magnesiumaluminiumsilicaat, calciumsulfaat, zetmeel, lactose, acaciagom, methylcellulose en functioneel overeenstemmende stoffen als farmaceutische verdunningsmiddelen of dragers. De tabletten kunnen gelamineerd zijn of op andere wijze 5 samengesteld voor het bereiken van een doseringsvorm, die het voordeel geeft van verlengde of vertraagde werking of een vooraf bepaalde achtereenvolgende werking van het daarin opgesloten medicament Het tablet kan bijvoorbeeld een inwendig doserings- en een uitwendig doseringsbestanddeel bevatten, waarbij het laatste in de vorm is van een bedekking over het eerste. De twee componenten kunnen zijn gescheiden door een enterische laag, die dient om desintegratie in de maag tegen te gaan en het voor het inwendige 10 bestanddeel mogelijk maakt intact in de twaalfvingerige darm te geraken of vertraagd vrij te komen.

Verscheidene stoffen kunnen voor dergelijke enterische lagen of bekledingen worden gebruikt, met inbegrip van een aantal polymere zuren of mengsels daarvan met stoffen zoals schellak, cetylaloohol, cellulose-acetaat, ftalaat, styreenmaleïnezuurcopolymeer en dergelijke. Ook kan het twee-componenten systeem worden gebruikt voor het bereiden van tabletten, die twee of meer elkaar niet verdragende werkzame 15 bestanddelen bevatten. Wafels worden op dezelfde wijze bereid als tabletten; zij verschillen alleen In de vorm en bevatten sucrose of een ander zoet- of smaakmiddel. In hun eenvoudigste uitvoering worden capsules, net als tabletten, bereid door mengen van de verbinding volgens het recept met een Inert farmaceutisch verdunningsmiddel en het brengen van het mengsel in een capsule van harde gelatine van geschikte afmeting. Bij een andere uitvoeringsvorm worden capsules bereid door harde gelatinecapsules te 20 vullen met korrels, bedekt met polymeer zuur, die de werkzame verbinding bevatten. Zachte gelatinecapsules worden bereid door encapsuleren op de machine van een suspensie van de werkzame verbinding met een aanvaardbare plantaardige olie, lichte vloeibare vaseline of een andere inerte olie.

Vloeibare eenheidsdoseringsvormen voor orale toediening, zoals stropen, elixirs, en suspensies kunnen worden bereid. De in water oplosbare vormen van een werkzame verbinding kunnen worden opgelost in 25 een waterige drager, samen met suiker, aromatische smaakmiddelen en verduurzamingsmiddelen, waarbij een stroop wordt gevormd. Een elixir wordt bereid door toepassing van een hydro-aicoholische (ethanol) drager met geschikte zoetmiddelen, zoals sucrose, samen met een aromatisch smaakmiddel. Suspensies kunnen worden bereid uit de onoplosbare vormen met een stroopdrager, met behulp van een suspendeer-middel, zoals acaciagom, tragacanth, methylcellulose en dergelijke.

30 Topicale smeersels kunnen worden bereid door de werkzame verbinding te dispergeren in een geschikte smeerselbase, zoals petrolactum, lanoline, polyethyleenglycolen, mengsels daarvan en dergelijke. Met voordeel wordt de verbinding fijn verdeeld met behulp vein een colloïdmolen onder lichte vloeibare petrolatum vóór het dispergeren in de smeerselbasis. Topicale crèmes en lotions worden bereid door de verbinding vóór het emulgeren van de oliefase in water, In de oliefase te dispergeren.

35 Voor parenterale toediening worden vloeibare eenheidsdoseringsvormen bereid onder toepassing van de werkzame verbinding en een steriele drager, waarvoor aan water de voorkeur wordt gegeven. De werkzame verbinding, kan afhankelijk van de gebruikte vorm en concentratie, hetzij gesuspendeerd, hetzij opgetost worden in de drager. Bij het bereiden van oplossingen kan een in water oplosbare vorm van de werkzame verbinding worden opgelost in water voor injectie en op het filter worden gesteriliseerd voordat zij in een 40 gebruikelijk flesje of ampul wordt gebracht en afgedicht Met voordeel kunnen hulpmiddelen, zoals een plaatseljjk verdovingsmiddel, verduurzamingsmiddel en buffers, in de drager worden opgelost Om de stabiliteit te verhogen kan het preparaat na in het flesje te zijn gebracht en het water onder vacuüm is ingevoerd, worden bevroren. Het droge gelyofiliseerde poeder wordt daarna in het flesje afgedicht en een begeleidend flesje met water voor injectie wordt bijgeleverd om het poeder vóór gebruik te herconstifueren. 45 Parenterale suspensies worden op praktisch dezelfde wijze bereid maar de werkzame verbinding wordt in de drager gesuspendeerd in plaats van opgelost en sterilisatie door filtreren is niet mogelijk. De werkzame verbinding kan worden gesteriliseerd door blootstellen van ethyleenoxide vóór het suspenderen in de steriele drager. Met voordeel wordt een oppervlakte-actief middel of bevochtigingsmiddel in het preparaat opgenomen om gelijkmatige verdeling van de werkzame verbinding te vergemakkelijken.

50 Onder eenheidsdoseringsvorm worden hier verstaan fysisch afzonderlijke eenheden, die geschikt zijn als eenheidsdosering voor mens en dier, waarbij elke eenheid een vooraf bepaalde hoeveelheid werkzaam bestanddeel bevat berekend op het opleveren van de gewenste therapeutische werking, tezamen met heit benodigde farmaceutische verdunningsmiddel of drager. De specificaties oor de nieuwe eenheidsdoseringsvormen volgens de uitvinding worden voorgeschreven door en zijn rechtstreeks afhankelijk van (a) de 55 unieke eigenschappen van het werkzame materiaal en het bepaalde te bereiken therapeutische effect en (b) de beperkingen die Inherent zijn aan het bereiden van een dergelijk werkzaam materiaal voor therapeutische toepassing bij mens en dier als hier in bijzonderheden beschreven, die kenmeiken van de onderhavige 17 19424Ö uitvinding vormen. Voorbeelden van geschilde eenheidsdoseringsvormen volgens de uitvinding zijn tabletten, capsules, pillen, zuigtabletjes, zetpillen, poederpakjes, korrels, wafels, cachets, theelepels, eetlepels, druppelaars, ampullen, flesjes, afzonderlijke veelvouden van de bovengenoemde en andere hier beschreven vormen.

5 Naast de toediening van de werkwijze verbinding als het voornaamste werkzame bestanddeel van preparaten voor behandeling van de hier beschreven aandoeningen, kan de verbinding worden opgenomen in andere soorten verbindingen voor het bereiken van voordelige combinaties van eigenschappen.

Dergelijke combinaties omvatten de werkzame verbinding met antibiotica, zoals spectinomycine, chfooramfe-nicol, novobiocins, dihydronovobiocine en tetracyclinen (bijvoorbeeld tetracycline, oxytetracydine en 10 chloortetracycline), penicillinen, erythromycins, kanamycine, streptomycins, neomydne, polymbdne, bacitracine, nystatine, filipine, fumagilline, en endomycine voor het verruimen van het bacterièie spectrum van het preparaat en voor synergistische werking tegen bepaalde bacteriën; steroTden met een ontsteking tegengaande werking, zoals hydrocortison, prednisolon, 6oc-methylprednisoion, 6a-fluorprednisclcn en dergelijke, analgetica, zoals aspirine, natriumsalicylaat (acetylsalicylzuurj-anhydride, N-acetyl-p-aminofenyl 15 en sllicylamide; antihistaminen, zoals chloorfeniraminemaleaat, difenylhydramine, promethazine, pyrathiazine en dergelijke, sulfasoorten, zoals sulfadiazine, sulfamethazine, sulfamerazine, sulfaceetamide, sulfatdimethy-loxazool, sulftamethizool en dergelijke, antischimmelmiddelen, zoals undecyleenzuur, natriumpropionaat, silicylanilide, natriumcaprylaat en hexetidine en de vitaminen.

De dosering van de werkzame verbinding voor behandeling hangt af van de wijze van toediening, de 20 leeftijd, het gewicht en de toestand van de patiënt en de bepaalde te behandelen ziekte. Een doserings-schema van circa 15-500 mg, 1 tot 4 maal daags (elke 6 uur) omvat het werkzame traject voor het behandelen van de meeste aandoeningen waartegen de preparaten werkzaam zijn. Voor kinderen wordt de dosering berekend op basis van 15-30 mg/kg/dag, elke 6 uur toegediend.

De werkzame verbinding wordt samengevoegd met een geschikte farmaceutische drager in eenheids-25 doseringsvorm voor gemakkelijke en werkzame toediening. Bij de uitvoeringsvormen volgens de uitvinding, die de voorkeur verdienen, bevatten de doseringseenheden de verbinding in hoeveelheden van 15, 30, 50, 125, 250 en 500 mg voor systemische behandeling, in hoeveelheden van 0,25, 0,5,1, 2 en 5% voor topicale of gelokaliseerde behandeling en van 5-65 gew./vol.% voor parenterale behandeling. De dosering van preparaten die de werkzame verbinding en een of meer andere werkzame bestanddelen bevatten, 30 wordt bepaald in. samenhang met de gebruikelijke dosering van elk dezer bestanddelen.

De beste methoden voor het toepassen van de uitvinding zijn beschreven in de onderstaande voorbeelden.

In de onderstaande preparaatvoorbeelden worden U-57.930E en U-60.970E als werkzame verbinding gebruikt, maar het spreekt vanzelf, dat ook andere werkzame verbindingen volgens de uitvinding in 35 aanmerking komen.

Voorbeeld XIII Capsules 1000 Harde gelatinecapsules in twee stukken voor oraal gebruik, die elk 250 mg U-57.930E of 40 U-60.970E bevatten, worden uit de volgende soorten en hoeveelheden stoffen bereid: 9 U-57.930E of U-60.970E 250

Maïszetmeel 100

Talk 75 45 Magnesiumstearaat 25

De stoffen worden eenvoudig gemengd en daarna op gebruikelijke wijze in de capsule gebracht

Deze capsules zijn nuttig voor de systemische behandeling van injectie bij volwassenen door orale toediening van 1 capsule per 4 uur.

50 Onder toepassing van deze methode worden op dezelfde wijze capsules bereid, die U-57.930E of U-60.970E bevatten in hoeveelheden van 15,30, 50,125 en 500 mg in plaats van de hoger toegepaste hoeveelheden van 250 g U-57.930E of U-60.70E.

Voorbeeld XIV 55 Capsules 1000 Harde gelatinecapsules in twee stukken voor oraal gebruik, die elk 200 mg U-57.930E of U-60.970E en 250 mg tetracyclinehydrochloride bevatten, worden uit de volgende soorten en hoeveelheden 194240 18 bestanddelen bereid: g U-57.930E of U-60.970E 200

Tetracydinehydrochloride 250 5 Talk 75

Magnesiumstearaat 25

De bestanddelen worden grondig gemengd en op gebruikelijke wijze in de capsule gebracht

Deze capsules zijn nuttig voor de systemische behandeling van infectie bij volwassenen door orale 10 toediening van 1 capsule per 6 uur.

Onder toepassing van deze methode worden op dezelfde wijze capsules bereid die U-57.93QE of U-60.970E bevatten en elk van de onderstaande antibiotica in plaats van tetracycline door gebruik van 250 g van dit andere antibioticum in plaats van tetracycline: chlooramfenicol, oxytetracydine, chloortetracydine, fumagilline, erythromycine, streptomycins, dihydronovobiocine en novobiocine. Wanneer een penicilline, 15 zoals kaliumpenicilline G in plaats van tetracycline moet worden gebruikt, worden 250.000 eenheden per capsule toegepast

Dergelijke combinatieproducten zijn nuttig voor de systemische behandeling van gemengde infecties bij volwassenen door orale toediening van 1 capsule per 6 uur.

20 Voorbeeld XV

Tabletten 1000 Tabletten voor oraal gebruik, die elk 500 mg U-57.930E of U-60.970E bevatten, worden uit de volgende soorten en hoeveelheden stoffen bereid: 9 25 U-57.930E Of U-60.970E 500

Lactose 125

Maïszetmeel 65

Magnesiumstearaat 25

Lichte vloeibare petrolatum 3 30

De stoffen worden grondig gemengd en tot brokken gevormd. Deze worden gebroken door hen door een zeef te persen met mazen van 1,19 mm. De verkregen korrels worden vervolgens tot tabletten geperst, waarbij elke tablet 500 mg U-57.930E of U-60.970E bevat.

Deze tabletten zijn nuttig voor de systemische behandeling van infecties bij volwassenen door orale 35 toediening van 1 tablet per 4 uur.

Met dezelfde methode kunnen tabletten worden bereid, die 250 mg U-57.930E of U-60.970E bevatten.

Voorbeeld XVI Tabletten 40 1000 Orale tabletten, die elk 250 mg U-57.930E of U-60.970E en een totaal van 250 mg (elk 83,3 mg) sulfadizine, sulfameriazine en sulfamethazine bevatten, worden uit de volgende soorten en hoeveelheden stoffen bereid: g U-57.930E of U-60.970E 250

Sulfadiazine 83,3 45 Sulfamerazine 83,3

Sulfamethazine 83,3

Lactose 50

Maïszetmeel 50

Caldumstearaat 25 50 Lichte vloeibare petrolatum 5

De bestanddelen worden grondig gemengd en tot brokken gevormd. Deze worden gebroken door hen door een zeef te persen met mazen van 1,19 m. De verkregen korrels worden vervolgens tot tabletten geperst, die elk 250 mg U-57.930E of U-60.970E en een totaal van 250 mg (elk 83,3 mg) sulfadiazine, sulfamerazine 55 en sulfamethazine bevatten.

Deze tabletten zijn nuttig voor de systemische behandeling van infecties door orale toediening van eerst 4 tabletten en daarna 1 tablet per 6 uur.

19 19424®

Voor de behandeling van urinaire infecties worden de drie sulfa's in het hoger gegeven recept met voordeel vervangen door 250 g sulfamethylthiadiazool of 250 g sulfaceefamide.

5 Voorbeeld XVII

Orale stroop 1000 cc Waterige suspensie voor oraal gebruik, die per dosis van 5 cc 0,5 g totale sulfa's en 250 mg U-57.930E of U-60.970E bevat, wordt uit de volgende soorten en hoeveelheden bestanddelen bereid: 9 10 U-57.930E of U-60.970E 50

Sulfadiazine 33,3

Sulfamerazine 33,3

Sulfamethazine 33,3

Citroenzuur 2 15 Benzoèzuur 1

Sucrose 700

Tragacanth 5

Umoenolie 2 cc

Ont-ioniseerd water, q.s. 1000 cc.

20

Het citroenzuur, benzoèzuur, sucrose, tragacanth en limoenolie worden in voldoende water gedispergeerd voor het verkrijgen van 850 cc oplossing. Het U-57.930E of U-60.970E en fijn verpoederde sulfa’s worden in de stroop geroerd totdat zij gelijkmatig zijn verdeeld. Voldoende water voor hef bereiken van 1000 cc wordt foegevoegd.

25 Het aldus bereide preparaat is nuttig voor de systemische behandeling van pneumaniae bij volwassenen in een dosis van 1 theelepel 4 maal daags.

Voorbeeld XVIII Parenterale oplossing 30 Een steriele waterige oplossing voor intramusculair gebruik, die per 1 cc 200 mg U-57.930E of U-60.97C© bevat wordt uit de volgende soorten en hoeveelheden stoffen bereid: 9 U-57.930E of U-60.970E 200

Udocaïnehydrochloride 4 35 Methylparabeen 2,5

Water voor injectie, q.s. 1000 cc

De bestanddelen worden in water opgelosf en de oplossing wordt door filtreren gesteriliseerd. De steriele oplossing wordt in flesjes gebracht en deze worden afgedicht 40

Voorbeeld XIX Parenterale preparaten

Een steriele waterige oplossing voor intramusculair gebruik, die per 1 cc 200 mg U-57.930E of U-60.970E en 400 mg spectinomycinesulfaat bevat, wordt uit de volgende soorten en hoeveelheden 45 bestanddelen bereid: 9 U-57.930E of U-60.970E 200

Spectinomycinesulfaat 400

Lactose 50 50 Water voor injectie, q.s. 1000 cc

Het U-57.930E of U-60.970E, spectinomycinesulfaat en lactose worden in het water opgelost en de oplossing wordt door filtreren gesteriliseerd. De steriele oplossing wordt in de hoeveelheid van 2 cc aseptisch in steriele flesjes gebracht en bevroren. Het water wordt onder hoog vacuüm verwijderd en de 55 flesjes, die het gelyofiliseerde poeder bevatten, worden afgedicht. Net vóór gebruik wordt voldoende steriel water voor injectie voor het bereiken van 2 cc oplossing aan het flesje toegevoegd.

194240 20

Voorbeeld XX Topicaal smeersel 1000 g 0,25% Smeersel wordt uit de volgende soorten en hoeveelheden bestanddelen bereid: g 5 O57.930E Of U-60.970E 2,5

Zlnkoxide 50

Calamine 50

Vloeibare petrolatum (zwaar) 250

Wolvet 200 10 Witte petrolatum, q.s. 1000 g

De witte petrolatum en het wolvet worden gesmolten en 100 g vloeibare petrolatum wordt eraan toege* voegd. Het U-57.930E of U-60.970E, zinkoxide en calamine worden aan de overblijvende vloeibare petrolatum toegevoegd en het mengsel wordt gemalen totdat de poeders zijn verdeeld en gelijkmatig 15 gedispergeerd zijn. Het poedermengsel wordt in het witte petrolatummengsel geroerd en het roeren wordt voortgezet totdat het smeersel stolt

Dit smeersel wordt doorgaans topicaal op de huid van zoogdieren toegepast voor de behandeling van infectie.

Dit preparaat kan ook worden bereid onder weglating van het zinkoxide en calamine.

20 Met deze methode worden op dezelfde wijze smeersels bereid, die U*57.930E of U-60.970E in hoeveelheden van 0,5,1, 2 en 5% bevatten door de hoger gebruikte 2,5 g U-57.930E of U-60.970E te vervangen door 5,10,20 en 50 g.

Voorbeeld XXI 25 Crème 1000 g Vaginale crème wordt uit de volgende soorten en hoeveelheden bestanddelen bereid: 9 U-57.930E of U-60.970E 50

Tegacid Regular1 150 30 Spermaceti 100

Propyleenglycol 50

Pdysorbaat 80 5

Methytparabeen 1

Ont-ioniseerd water, q.s. 1000 g 35 1 Zelf-emulgerend glycerylmonostearaat van Goldsmith Chemical Corporation, New York, N.Y.

Het Tagacid en de spermaceti worden tezamen gesmolten bij een temperatuur van 70-80°C. Het methylpa-rabeen wordt in circa 500 g water opgelost en de propyleenglycol, polysorbaat en U-57.930E of U-60.970E worden op hun beurt toegevoegd, waarbij de temperatuur op 75-80°C wordt gehouden. Het methyl para-40 beenmengsel wordt langzaam aan de smelt van Tegacid en spermaceti toegevoegd onder voortdurend roeren. Het toevoegen wordt onder voortdurend roeren ten minste 30 minuten voortgezet totdat de temperatuur tot 40-45°C is gedaald. De pH van de uiteindelijke crème wordt op 3,5 ingesteld door opnemen van 2,5 g citroenzuur en 0,2 g dibasisch natriumfosfaat, opgelost in circa 50 g water. Tenslotte wordt voldoende water toegevoegd voor het bereiken van een uiteindelijk gewicht van 1000 g en wordt het 45 preparaat geroerd zodat het homogeen blijft totdat het wordt gekoeld en gestold.

Dit preparaat is nuttig voor de behandeling van vaginale infecties bij de mens.

Voorbeeld XXII Oogsmeereel 50 1Ö00 g Oogsmeersel, dat 0,5% U-57.930E of U-60.970E bevat, wordt uit de volgende soorten en hoeveelheden bestanddelen bereid: 9 U-57.930E Of U-60.970E 5

Bacitracine 12,2 55 Polymyxine B sulfaat (10.000 eenheden/mg) 1

Lichte vloeibare petrolatum 250 21 19424(1 g U-57.93QE of U-60.970E 5

Wolvet 200 _ Witte petrolatum, q.s. 1000 g o

De vaste bestanddelen worden met behulp van een luchtmicroniseerinrichfing fijn verdeeld en aan de lichte vloeibare petrolatum toegevoegd. Het mengsel wordt door een colloTdmolen geleid, waardoor de gemicroni-seerde deeltjes gelijkmatig worden verdeeld. Het wolvet en de witte petrolatum worden samengesmolten, 10 gefiltreerd en de temperatuur wordt op 45-50°C ingesteld. De vloeibare petrolatumsuspensie wordt toegevoegd en het smeersel wordt geroerd, totdat het is gestold. Het smeersel wordt verpakt in tubes van 1 drachma

Dit smeersel wordt met voordeel op het oog aangebracht voor het behandelen van gelokaliseerde infectie bij mens en dier.

15 Met voordeel kan dit preparaat 5 g (0,5% methylprednisolon bevatten voor de behandeling van ontsteking en het bacitracine en polymyxine B sulfaat kunnen, eventueel, worden weggelaten.

Voorbeeld XXIII Oog-oordruppels 20 1000 cc Steriele waterige oplossing voor toepassing in oog of oor, die 10 mg U-57.930E of U-60.970E en 5 mg methylprednisolon per cc bevat, wordt uit de volgende soorten en hoeveelheden bestanddelen bereid: 9 U-57.930E of U-60.970E 10

Methylprednisolonfosfaat natrium 5 25 Natriumdtraat 4,5

Natriumfisulfiet 1

Polyethyleenglyool 4000 120

Polyvinylpyrrolidon 1

Myristytypicoliniumchloride 0,2 30 Ont-ioniseerd water, q.s. tot 1000 cc

De bestanddelen worden in hef water opgelost en de verkregen oplossing wordt door filtreren gesteriliseerd. De oplossing wordt aseptisch in steriele druppelhouders gebracht

Het aldus bereide preparaat is nuttig voor de topicale behandeling van ontsteking en infectie van oog en 35 oor evenals van andere gevoelige weefsels van het lichaam.

Voorbeeld XXIV Tabletjes 10.000 Tabletjes worden bereid uit de volgende soorten en hoeveelheden bestanddelen: 40 g U-57.930E Of U-60.970E 100

Neomydnesulfaat 50

PolymyxIneB sulfaat (10.000 eenheden/mg) 1

Ethylamlnobenzoaat 50 45 Caldumstearaat 150

Poedervormige sucrose, q.s. 5000 g

De poedervormige stoffen worden grondig gemengd en daarna samengeperst tot tabletjes van 0,5 g onder toepassing van de gebruikelijke technieken voor het bereiden van samengeperste tabletten.

- 50 De zuigtabletjes worden in de mond gehouden en langzaam opgezogen voor de behandeling van mond en keel bij de mens.

Voorbeeld XXV Rectale zetpil 55 1000 Zetpillen, die elk 2,5 g wegen en 100 mg U-57.930E of U-60.970E bevatten, worden uit de volgende soorten en hoeveelheden bestanddelen bereid: 194240 22 9 U-57930E of U-60.970E 100

Polymyxine B sulfaat (10.000 eenheden/mg) 1.25

Methylprednisolon 1 5 Ethylaminobenzoaat 75

Zinkoxida 62,5

Propyleenglycol 162,5

Polyethyl eenglycol 4000 c.s. 2500 g 10 Het U-57.930E of U-60.970E, polymyxine B sulfaat, methylprednisolon, ethylaminobenzoaat en zlnkoxlde worden aan de propyleenglycol toegevoegd en het mengsel wordt gemalen totdat de poeders fijnverdeeid en gelijkmatig gedispergeerd zijn. De polyethyleenglycol 4000 wordt gesmolten en de propyleenglycol· dispersie wordt langzaam onder roeren toegevoegd. De suspensie wordt bij 40°C in ongekoelde vormen uitgegoten.

15 Men laat het preparaat afkoelen en vast worden, verwijdert het vervolgens uit de vorm en verpak elke zetpil in folie.

Deze zetpillen worden rectaal Ingebracht voor de plaatselijke behandeling van ontsteking en infectie.

Het preparaat kan ook worden bereid onder weglating van het steroTde.

20 Voorbeeld XXVI Borstsmeersel 1000 g Smeersel voor de behandeling van borstontsteking bij melkvee wordt uit de volgende soorten en hoeveelheden bestanddelen bereid: 9 25 U-57.930E of U-60.970E 25

Methylprednisolonacetaat 0,5

Lichte vloeibare petrolatum 300

Chloorbutanol, watervrij 5

Polysorbaat 80 5 30 2% Afuminiummonostearaat-aardnootolie gel 400

Witte petrolatum, q.s. 1000 g U-57.930E of U-60.970E en methylprednisolonacetaat worden met de lichte vloeibare petrolatum gemalen totdat zij fijn verdeeld en gelijkmatig gedispergeerd zijn. Het chloorbutanol, polysorbaat 80, aardnotenoliegel 35 en witte petrolatum worden op 40°C verwarmd waarbij een smelt wordt gevormd en de vloeibare petrda-tumdispersle wordt erin geroerd. Onder voortdurend roeren, laat men de dispersie afkoelen (en stollen) op kamertemperatuur en brengt deze in weggooi-borstspuitjes in doses van 10 g.

Voorbeeld XXVII 40 Diervoerder 1000 g Voedermengsel wordt uit de volgende soorten en hoeveelheden bestanddelen bereid: 8 U-57.930E of U-6Q.970E 10

Sojabon en meel 400 45 Vismeel 400

Tarwekiemolie 50

Sorghummolasse 140

De bestanddelen worden gemengd en tot persstukjes geperst Het preparaat kan als voeder worden 50 gegeven aan laboratoriumdieren, dat wil zeggen ratten, muizen, guinese biggetjes en hamsters als profylaxe tijdens vervoer.

Voor andere dieren, zoals pluimvee, bijvoorbeeld kuikens, eenheden kalkoenen en ganzen kan het preparaat aan het gebruikelijke voeder van het dier worden toegevoegd in een hoeveelheid, die erop berekend is de gewenste dosis aan U-57.930E of U-60.970E op te toveren.

Claims

23 19424© Voorbeeld XXVIII Met de methode uit elk van de preparaatvoorbeelden XIII—XXVII wordt elk van de antibacterieel werkzame verbinding volgens de uitvinding in een equivalente hoeveelheid toegevoegd voor het bereiken van therapeutische eigenschappen in plaats van het in het voorbeeld aangegeven U-57.930E of U-60.970E 5 Op dezelfde wijze kan elk van de hoger genoemde vrije baseverbindingen in de vorm van een farmaceutisch (of farmacologisch) aanvaardbaar zuuradditiezout, bijvoorbeeld hydrochloride, sulfaat, nitraat, fosfaat, citraat, lactaaf, acetaat, tartraat, en sucdnaat, worden gebruikt Verder kan het 2-fosfaat en/of 2-palmitaat van elk der hoger genoemde antibacterieel werkzame verbindingen volgens de uitvinding als werkzaam bestanddeel worden gebruikt voor het bereiden van 10 preparaten met therapeutische eigenschappen. OcinicDustes

1. Uncosaminidederivaat met werking tegen microparasieten zoals bacteriën, coccidia of mycoplasma in mens en dier, met de algemene formule 1, waarin Y 7(S)-hydroxy, 7(R)-hydroxy, 7(S)-halogeen, 7(R)-halogeen, 7(S)-methoxy, 7-desoxy-7(S)-(methylthio), 7-desoxy-7(S)-(2-hydroxyethylthio) of 7-desoxy-7(S)-(3-hydroxypropylthio) voorstelt en Z een heteroatoombevattende groep is, met het kenmerk, dat de hetero-atoombevattende groep cyclisch is en voorgesteld wordt door de formule 2, waarin R1t die enkelvoudig of 20 meervoudig gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstofatoom dat niet aan de lincosaminidegroep gebonden is, gekozen wordt uit de groep bestaande uit waterstof, alkyl met 1-8 koolstofatomen, gesubstitueerde alkyl met 1-8 koolstofatomen, cycloalkyl, gesubstitueerde cycloalkyl, gesubstitueerde zuurstof, gesubstitueerde stikstof, halogeen, fenyl, gesubstitueerde fenyl, -(CH^-OH en -(CH2)n-NR4Rs, waarin n een geheel getal van 1-8 is en R4 en Rs waterstof of alkyl met 1-8 koolstofatomen zijn, de formule 3, waarin n 25 een geheel getal van 1-4 is, de stikstofbevattende ring gedeeltelijk onverzadigd kan zijn, R1 de bovengenoemde betekenis heeft en gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstofatoom dat niet aan de lincosaminidegroep gebonden is en R3 gekozen wordt uit de groep bestaande uit waterstof, methyl, ethyl en •CH2-CH2-OH, de formule 6, waarin A, B en E gekozen worden uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof, zwavel en CR^,, R1 de bovengenoemde betekenis heeft en gebonden kan zijn aan een willekeurig 30 ringkoolstofatoom dat niet aan de lincosaminidegroep gebonden is, met dien verstande dat wanneer B stikstof is A en E niet beide CR1R1 zijn, of de formule 7, waarin A, B, D en E worden gekozen uit de groep bestaande uit stikstof, zuurstof, zwavel en CRjR,, de heterocyclische ring gedeeltelijk onverzadigd kan zijn, R, de bovengenoemde betekenis heeft en gebonden kan zijn aan een willekeurig ringkoolstofatoom dat niet aan de lincosaminidegroep gebonden is, of farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan.

2. Verbinding volgens conclusie 1, waarbij de verbinding wordt gekozen uit de groep bestaande uit verbindingen met de formules 5, 5A, 5B, 5C, 72 en 73.

3. Therapeutisch preparaat voor het behandelen van mens en dier besmet met een microparasiet, zoals bacteriën, coccidia of mycoplasma, met het kenmerk, dat het preparaat per doseringseenheid 15-500 mg van een verbinding volgens conclusie 1 of 2 bevat Hierbij 9 bladen tekening