MXPA04011912A

MXPA04011912A - Sales nuevas.

Info

Publication number: MXPA04011912A
Application number: MXPA04011912A
Authority: MX
Inventors: Sigfridsson Carl-Gustaf
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 2002-05-31
Filing date: 2003-05-27
Publication date: 2005-03-31
Also published as: AU2003232871B2; KR20050009726A; RU2004133388A; EP1513806B1; IS7598A; AR039937A1; AU2003232871A1; NO20044867L; TWI313173B; SI1513806T1; JP4541140B2; US7763597B2; ES2322048T3; RU2345064C2; IL165295A0; US20050234035A1; EP2055696A1; NZ536738A; TW200927094A; MY133333A

Abstract

Se proporcionan sales por adicion de acido, farmaceuticamente aceptables de compuestos de la formula (I), en donde R1 representa alquilo de 1 a 2 atomos de carbono sustituido por uno o mas sustituyentes fluor; R2 representa alquilo de 1 a 2 atomos de carbono; y n representa o, 1 o 2, cuyas sales son utiles como profarmacos de inhibidores competitivos de proteasas similares a tripisina, tales como trombina, y de este modo, en particular, en el tratamiento de condiciones en donde se requiere la inhibicion de trombina (por ejemplo, trombosis) como anticoagulantes.

Description

SALES NUEVAS Campo de la invención Esta invención se refiere a nuevas sales de compuestos que inhiben la trombina después de la administración a pacientes mamíferos, a las composiciones farmacéuticas que contienen tales sales, y a los procesos para su obtención.

Antecedentes de la Invención y Técnica Anterior En la formulación de composiciones de fármacos, es importante que la sustancia farmacológica esté en una forma que se pueda manejar y procesar convenientemente. Esto es de importancia, no solamente desde el punto de vista de la obtención de un proceso de fabricación comercialmente viable, sino también desde el punto de vista de la fabricación posterior de formulaciones farmacéuticas que comprenden el compuesto activo. Además, en la fabricación de composiciones de fármaco, es importante que se proporcione un perfil de concentración de plasma del fármaco, confiable, reproducible y constante después de la administración a un paciente . La estabilidad química, la estabilidad en estado sólido, y "vida en anaquel" de los ingredientes activos también son factores muy importantes. La sustancia fármaco, y las composiciones que la contienen preferentemente serian capaces de ser almacenadas efectivamente por periodos prolongados de tiempo, sin mostrar un cambio significativo en las características fisicoquímicas del componente activo (por ejemplo, su composición química, densidad, higroscopicidad " y solubilidad). Además, también es importante que sean capaces de proporcionar fármaco en una forma que sea tan químicamente pura como sea posible. La persona experta apreciará: que, típicamente, si un fármaco puede ser obtenido fácilmente en una forma estable, tal como una forma cristalina estable, se pueden proporcionar ventajas, en términos de facilidad de manejo, facilidad de preparación de formulaciones farmacéuticas apropiadas, y un perfil de solubilidad más confiable. La solicitud de patente internacional No. PCT/SE01/02657 (WO 02/44145 de fecha de prioridad anterior del 01 de diciembre del 2000, presentada el 30 de noviembre del 2001, publicada el 06 de junio del 2002) describe diferentes compuestos que son, o se metabolizan a compuestos que son, inhibidores competitivos de proteasas similares a tripsina tales como trombina. Los siguientes tres compuestos están entre aquéllos que se describen específicamente . a) P (3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-(S)Aze-Pab(OMe) : cuyo compuesto se denomina de aquí e adelante como Compuesto A; b) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)- (S)Aze-Pab(2, 6diF) (OMe) : cuyo compuesto se denomina de aquí en adelante como Compuesto B; y c) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(R)CH(OH)C(0)-(S)Aze-Pab(O e) : cuyo compuesto -se denomina de aqui en adelante como Compuesto C. Las abreviaturas se listan al final de esta especificación. Los Compuestos A, B y C, -de metoxiamidina son metabolizados después de la administración oral y/o parenteral a los compuestos de amidina libres correspondientes, cuyos últimos compuestos se ha encontrado que son inhibidores potentes de trombina. Los procesos para la síntesis de los Compuestos A, B y C se describen en los ejemplos 12, 40 y 22 (respectivamente) de la solicitud de patente internacional No. PCT/SE01/02657. Las sales farmacéuticamente aceptables, específicas de los Compuestos A, B y C no se describen en PCT/SE01/02657. Además, no se proporciona información con relación a cómo se pueden preparar las formas cristalinas de los Compuestos A, B o C, y particularmente las sales de los mismos.

Descripción de la invención De acuerdo a un primer aspecto de la invención, se proporciona una sal por adición de ácido, farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula en donde R1 representa alquilo de 1 a 2 átomos de carbono sustituido por une o más sustituyentes flúor; R2 representa alquilo de 1 a 2 átomos de carbono; y n representa 0, 1 ó 2; cuyas sales se denominan de aquí en adelante como "los compuestos de' la invención". Los compuestos de la invención pueden estar en la forma de un solvato, un hidrato, un solvato/hidrato mixto o, preferentemente, un ansolvato, tal como un anhidrato. Los soivatos pueden ser uno o más solventes orgánicos, tales como alcoholes de alquilo inferior (por ejemplo de 1 ' a 4 átomos de carbono) (por ejemplo metanol, etanol o iso- propanol), cetonas (tal como acetona), ésteres (tal como acetato de etilo) o mezclas de los mismos. Adicionalmente, los tautomeros de los compuestos de la invención también se incluyen. Las sales por adición de ácido, preferidas incluyen sales por adición de ácido inorgánico, tales como aquellas de ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y ácidos hidrohálicos, tales como ácido bromhídrico y ácido clorhídrico. Las sales por adición de ácido más preferidas incluyen aquellas de ácidos orgánicos tales como aquellas de ácido dimetilfosfórico; ácido sacarínico; ácido ciclohexilsulfámico; aquellas de ácidos carboxílicos (tales como ácido maleico, ácido fumárico, á'cido aspártico, ácido succínico, ácido malónico, ácido acético, ácido benzoico, ácido tereftálico, ácido hipúrico, ácido l-hidroxi-2-naftoico, ácido pamoico, ácido hidroxibenzoico y similares); aquellas de hidroxiácidos (tales como de ácido salicílico, ácido tartárico, ácido cítrico ácido mélico (incluyendo ácido L-(-)-málico y, ácido DfL-málico)r ácido glucónico (incluyendo ácido D-glucónico) , ácido glucólico, ácido ascórbico, ácido láctico y similares); aquellas de aminoácidos (tales como ácido glutámico (incluyendo ácidos D-glutámico, L-glutámico y D, L-glutámico) , arginina (incluyendo L-arginina) , lisina (incluyendo L-lisina y clorhidrato de L-lisina), glicina y similares); y, particularmente, aquellas de ácidos sulfónicos (tales como ácido 1, 2-etandisulfónico, ácidos canforsurfónicos (incluyendo ácido 1S- (+) -10-canforsulfónico y ácidos (+/-}-canforsulfónicos ) , ácido etansulfónico, un ácido propansulfónico (incluyendo ácido ' n-propansulfónico) , un ácido butansulfónico, un ácido pentansulfónico, un ácido toluensulfónico, ácido metansulfónico, ácido p-xilensulfónico, ácido 2-mesitilensulfónico, ácidos naftalensulfónicos (incluyendo ácido 1, 5-naftalensulfónico y ácido 1-naftalensulfónico ) , ácido bencensulfónico, ácidos hidroxibencensulfónicos, ácido 2-hidroxietansulfónico, ácido 3-hidroxietansulfónico y similares) . Las sales particularmente ' preferidas incluyen aquellas de ácidos aicansuifónicos de 1 a 6 átomos de carbono (por ejemplo de 1 a 4 átomos de carbono) , tales como ácido etansulfónico y ácido propansulfónico (por ejemplo ácido n-propansulfónico) y ácidos arilsulfónicos opcionalmente sustituidos (por ejemplo con uno o más grupos alquilo de 1 a 2 átomos de carbono) , tal como ácido bencensulfónico . Las sales particularmente preferidas, adicionales incluyen aquellas de ácidos aicansuifónicos de 1 a 6 átomos de carbono (por ejemplo de de 1 a 4 átomos de carbono) , tal como ácido etansulfónico y ácido propansulfónico (por ejemplo ácido n-propansulfónico) , ácidos arilsulfónicos opcionalmente sustituidos (por ejemplo con uno o más grupos alquilo de 1 a 2 átomos de carbono), tal como ácido bencensulfónico, y ácidos arildilsulfónicos opcionalmente sustituidos (por ejemplo con uno o más grupos alquilo de 1 a 2 átomos de carbono), tal como ácido 1,5-naftalendisulfónico (y ácido hemi-1 , 5-naftalendisulfónico) . Los compuestos preferidos de la fórmula I incluyen aquéllos en los cuales: R1 representa -OCHF2 o .-OCH2CH2F; R2 representa metilo; n representa 0 o 2. Los compuestos más preferidos de la fórmula I incluyen aquéllos en los cuales n representa 0, o aquéllos en los cuales n representa 2, proporcionando asi dos átomos de flúor localizados en las posiciones 2 y 6 (por ejemplo las dos posiciones orto con relación al punto de acoplamiento del anillo de benceno en el grupo -NH-CH2-). Los compuestos particularmente preferidos de la fórmula I incluyen el Compuesto B, el Compuesto C y, especialmente, el Compuesto A. Los compuestos de la invención se pueden producir por medio de técnicas, que pueden comprender la adición de una cantidad apropiada del ácido relevante a un compuesto de la fórmula I en la forma de base libre, por ejemplo como se describe más adelante, la conversión de una sal a otra (en el caso en donde existe diferencia en los valores pKa de los ácidos relevantes y las solubilidades de la sales respectivas); y cromatografía de pares de iones. De acuerdo a un aspecto adicional de la invención, se proporciona un proceso para la preparación de un compuesto de la invención, que comprende la adición de un ácido a un compuesto de la fórmula I. Las proporciones estequiométricas adecuadas de ácido a base libre están en el intervalo de 0.25:1.5 a 3.0:1, tal como 0.45:1.25 incluyendo 0.50:1 a 1:1. Los compuestos de la fórmula I se pueden preparar por los siguientes procesos (la información relevante también se incorpora en la presente a partir de la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/SE01/02657 (WO 02/44145, fecha de prioridad previa 01 diciembre del 2000, presentada el 30 de noviembre de 2001, publicada el 06 de unio de 2002) ) : (i) el acoplamiento de un compuesto de la fórmula II, II en donde R1 es corno se define anteriormente con un compuesto de la fórmula III, en donde n y R2 son como se definen anteriormente, po ejemplo en presencia de un agente de acoplamiento (por ejemplo cloruro de oxalilo en DMF, EDC, DCC, HBTU, HATU, PyBOP o TBTU) , una base apropiada (por ejemplo piridina, DMAP, TEA, 2, 4, 6-colidina o DIPEA) y un solvente orgánico adecuado (por ejemplo diclorometano, acetonitrilo, acetato de etilo o DMF) ; (ii) el acoplamiento de un compuesto de la fórmula IV, en donde R1 es como se define anteriormente con un compuesto de la fórmula V, en donde n y R son como se definen anteriormente, por- ejemplo bajo condiciones como se describe en el proceso (i) anterior; o (iii) la reacción de un derivado protegido de un compuesto correspondiente a un compuesto de la fórmula I, excepto que, en lugar del grupo OR2, esta presente un átomo de hidrógeno (por ejemplo un compuesto de amidina libre correspondiente) , cuyo derivado protegido es, por ejemplo, un compuesto de la fórmula VI, en donde Ra representa, por ejemplo, CH2CH2-Si (CH3) 3 o bencilo, y R1 y n son como se definen anteriormente, o un tautómero del mismo, con un compuesto de la fórmula VII, R2ONH2 VII en donde R2 es como se define anteriormente, o una sal por adición de ácido del mismo, por ejemplo a una temperatura entre la temperatura ambiente y la de reflujo en presencia de un solvente orgánico apropiado (por ejemplo THF, CH3CN, DMF o DMSO), seguido por la eliminación del grupo -C(0)ORa bajo condiciones conocidas por aquellos expertos en la técnica (po ejemplo mediante reacción con QF o TFA (por ejemplo como se describe más adelante)). Los compuestos de la fórmula II están disponibles utilizando técnicas estándares y/o conocidas. Por ejemplo los compuestos · de la fórmula II se pueden preparar mediante reacción de un aldehido de la fórmula VIII, en donde R1 es como se define anteriormente con: a) un compuesto de la fórmula R"CN IX en donde R" representa H o (CH3)3Si por ejemplo a temperatura ambiente, o a temperatura elevada (por ejemplo inferior a 100°C) en presencia de un solvente orgánico adecuado (por ejemplo cloroformo o cloruro de metileno) y, si es necesario, en presencia de una base adecuada (por ejemplo TEA) y/o un sistema catalizador adecuado (por ejemplo cloruro de bencilamonio o yoduro de zinc, o utilizando un catalizador quiral, por ejemplo como se describe en .Chem. Rev., (1999) 99, 3649), seguido por hidrólisis bajo condiciones que son bien conocidas por aquellos expertos en la técnica (por ejemplo como se describe más adelante) ; (b) NaCN o KCN, por ejemplo en presencia de NaHSO3 y agua, seguido por hidrólisis. c) cloroformo, por ejemplo a temperatura elevada (por ejemplo superior a la temperatura ambiente pero inferior a 100°C) , en presencia de un solvente orgánico adecuado (por ejemplo cloroformo) y, si es necesario en presencia de un sistema catalizador adecuado (por ejemplo cloruro de bencilamonio) , seguido por hidrólisis; d) un compuesto de la fórmula X, en donde M representa Mg o Li, seguido por escisión oxidativa (por ejemplo ozonolisis o catalizada por osmio o rutenio) bajo condiciones que son bien conocidas por aquellos expertos en la técnica; o e) tris (metiltio)metano bajo condiciones que son bien conocidas por aquellos expertos en la técnica, seguido por hidrólisis en presencia por ejemplo de HgO y HBF4. Los compuestos de la fórmula II se pueden preparar alternativamente por oxidación de un compuesto de la fórmula XI , o un derivado del mismo que se protege opcionalmente en el grupo idroxilo secundario, en donde R1 es como se define anteriormente, en presencia de un agente oxidante adecuado (por ejemplo una combinación de un oxidante de radical libre adecuado (tal como TEMPO) y una sal de hipoclorito apropiada (tal como hipoclorito de sodio)) bajo condiciones conocidas por aquellos expertos en la técnica, por ejemplo a temperatura entre -10°C y la temperatura ambiente, en presencia de un solvente adecuado (por ejemplo agua, acetona o una mezcla de las mismas), una sal apropiada (por ejemplo un haluro de metal alcalino tal como bromuro de potasio) y una base adecuada (por ejemplo un carbonato de metal alcalino o carbonato ácido tal como carbonato ácido de sodio) . En la formación de los compuestos de la fórmula II, la persona experta apreciara que la forma enantiomerica requerida se puede preparar por "medio de técnicas rutinarias de separación enantiomérica, por ejemplo mediante un paso de . ; paso de derivatizacion enantioespecifica . Esto se puede lograr, por ejemplo por un proceso enzimático. Tales' procesos enzimáticos incluyen, por ejemplo, transesterificacion del grupo -OH a temperatura entre la temperatura ambiente y la de reflujo {por ejemplo entre 45 y 65°C) en presencia de una enzima adecuada (por ejenplo lipasa PS Amano) , un éster apropiado (por ejemplo acetato de vinilo) y un solvente adecuado (por ejemplo éter metílico de ter-butilo) . El isómero derivatizado se puede entonces separar a partir del isómero si reaccionar mediante técnicas de separación convencionales (por ejemplo cromatografía) . Los grupos agregados a los compuestos de la fórmula II en tal paso de derivatizacion se pueden eliminar ya sea antes de cualesquier reacción adicional o en cualquier etapa posterior en la síntesis de compuestos de la fórmula I. Los grupos adicionales se pueden eliminar utilizando técnicas convencionales (por ejemplo para ésteres del grupo a-OH, hidrólisis bajo condiciones conocidas por aquellos expertos en la técnica (por ejemplo a -temperatura "entre la "temperatura ambiente -y la de reflu o en presencia de una base adecuada (por ejemplo NaOH) y un solvente apropiado (por ejemplo MeOH, agua o mezclas de los mismos ) ) ) . ' Los compuestos de la fórmula III se pueden preparar por acoplamiento de ácido (S) -azetidin-2-carboxílico a. un compuesto de la fórmula V, como se define anteriormente, por ejemplo bajo condiciones similares a aquellas descritas en la presente para la preparación de compuestos de la fórmula I. Los compuestos de la fórmula IV se pueden preparar por acopiamiento de un compuesto de la fórmula II como se define anteriormente al ácido (S) -azetidin-2-carboxílico, por ejemplo bajo condiciones similares a aquellas descritas en la presente para la preparación de compuestos de la fórmula I. Los compuestos de la fórmula VI se pueden preparar mediante reacción de un compuesto correspondiente de la fórmula II, como se define anteriormente, con un compuesto de la fórmula XII, eriormente, por ejemplo bajo condiciones similares a aquellas descritas anteriormente para la síntesis de compuestos de la fórmula I. ' Alternativamente, los compuestos de la fórmula VI se pueden preparar por reacción de un compuesto correspondiente a un compuesto de la fórmula I, excepto que, en lugar del grupo -0R2, está presente un átomo de hidrógeno (por ejemplo un compuesto de amidina libre correspondiente) , con un compuesto de la fórmula XIII, I^COOR* XIII en donde L1 representa un grupo saliente adecuado, tal como halo o nitrofenilo (por ejemplo 4-nitrofenilo) y Ra es como se define anteriormente, por ejemplo a temperatura ambiente o aproximadamente a la ambiente en presencia de base adecuada, (por ejemplo NaOH, por ejemplo en solución acuosa) y un solvente orgánico apropiado (por ejemplo cloruro de metileno) .

Los compuestos de la fórmula VIII . están disponibles utilizando técnicas conocidas y/o estándares. Por ejemplo, estos se pueden preparar mediante: (i) metalación (en donde el metal puede ser, por ejemplo un metal alcalino tal como Li o, preferentemente, un metal bivalente tal como Mg) de un compuesto de la fórmula XIV, en donde Hal representa un átomo de halógeno seleccionado de cloro, bromo y yodo y R1 es como se define anteriormente, seguido- por reacción con una fuente apropiada del grupo formilo (tal como N,N- dimetilformamida) , por ejemplo, bajo condiciones descritas más adelante; (ii) reducción de un compuesto de la fórmula XV, XV en donde R1 es como se define anteriormente en presencia de un agente reductor adecuado (por ejemplo DIBAL-H); o (iii) oxidación de un compuesto de la fórmula XVI, en donde R1 es como se define anteriormente en presencia de un agente oxidante adecuado (por ejemplo Mn02, clorocromato de piridinio, una combinación de DMSO y cloruro de oxalilo, o complejo de S03-píridína en DMSO) . Los compuestos de la fórmula XII se pueden preparar mediante reacción de ácido (S) -azetidin-2-carboxílico con un compuesto de la fórmula XVII, en donde n y Ra son como se define anteriormente, por ejemplo bajo condiciones similares a aquellas descritas anteriormente para la síntesis de compuestos de la fórmula I .

Los compuestos de las fórmulas V, VII, IX, X, XI, XIII, XIV, XV, XVI, XVII y ácido (S ) -azetidin-2-carboxílico son comercialmente disponibles, o son conocidos en la literatura, o se pueden obtener ya sea por analogía con los procesos descritos en la presente, o mediante procedimientos sintéticos convencionales, de acuerdo con técnicas estándares, a partir de materiales iniciales fácilmente disponibles, utilizando reactivos y condiciones de reacción apropiados. Los equivalentes de amidina libre de compuestos de la fórmula I se pueden preparar de manera similar a los procesos descritos en - la presente para la preparación de coTapuestos de la fórmula I. Hemos encontrado que ciertos compuestos de la invención tienen la ventaja de que se pueden preparar en forma cristalina. De acuerdo a un aspecto adicional de la invención, se proporciona un compuesto de la invención en forma sustancialmente cristalina. Aunque hemos encontrado que es posible producir compuestos de la invención en formas que son más de 80% cristalinas, por "sustancialmente cristalinas" incluimos mayores de 20%, preferentemente mayores de 30%, y más preferentemente mayores de 40% (por ejemplo mayores de cualquiera de 50, 60, 70, 80 o 90%) cristalinas.

De acuerdo aun aspecto adicional de la invención también se proporciona un compuesto de la invención en forma parcialmente cristalina. Por "parcialmente cristalina" incluimos 5% o entre 5% y 20% de cristalina. El grado (%) de cristalinidad se puede determinar por la persona experta utilizando difracción de polvo de rayos X (XRPD) . Otras técnicas,, tales como NMR en estado sólido, FT-I , espectroscopia de Raman, calorimetría de exploración diferencial (DSC) y microcalorimetria, también se pueden utilizar. Los compuestos de la invención, y los compuestos particularmente cristalinos de la invención, pueden tener estabilidad mejorada cuando se comparan con compuestos descritos en PCT/SE01/02657. El término "estabilidad" como se define en la presente incluye estabilidad química y estabilidad en estado sólido. Por "estabilidad química"' incluimos lo que puede sej posible para almacenar compuestos de la invención en una forma aislada, o en la forma de una formulación en la que se proporciona en mezcla con portadores, diluyentes o adyuvantes farmacéuticamente aceptables (por ejemplo en una forma de dosificación oral, tal como una tableta, cápsula, etc.), bajo condiciones de almacenamiento normales, con un grado insignificante de degradación o descomposición química. Por "estabilidad en estado sólido", incluimos lo que puede ser posible para almacenar compuestos de la invención en una forma sólida aislada, o en la forma de una formulación sólida en la cual ésta se proporciona en mezcla ¦ con .portadores, diluyentes o adyuvantes farmacéuticamente aceptables ( por ejemplo en una forma de dosificación oral, tal como una tableta, cápsula, etc.), bajo condiciones de almacenamiento normales, con un grado insignificante de transformación del estado sólido (por ejemplo cristalización, recristalizacion, transición de fase de estado sólido, hidratación, deshidratación, solvatacion o desolvatacion) . Los ejemplos de "condiciones de almacenamiento normales" incluyen temperaturas de entre -80 y +50°C (preferentemente entre 0 y 40°C, y más preferentemente temperaturas ambientales, tales como de 15 a 30°C) , presiones de entre 0.1 y 2 bars (preferentemente a presión atmosférica) , humedades relativas de entre 5 y 95% (preferentemente de 10 a 60%), y/o exposición a 460 lux de luz UV/visible, por periodos prolongados, (por ejemplo mayores o iguales a 6 meses) . Bajo tales condiciones, se puede encontrar que los compuestos de la invención son menores de 15%, más preferentemente menores de 10% y especialmente menores de 5%, químicamente degradados/descompuestos, o transformados del estado sólido, como sea apropiado. La persona experta apreciará que los limites superior e inferior anteriormente mencionados para temperatura, presión y humedad relativa representan extremos de condiciones de almacenamiento normales, y que ciertas combinaciones de estos extremos no se experimentarán durante el almacenamiento normal (por ejemplo una temperatura de 50°C y una presión de 0.1 bar). Los compuestos preferidos de la invención que se pueden preparar de forma cristalina incluyen sales de ácidos alcansulfónicos de 1 a 6 átomos de carbono (por ejemplo de 2 a 6 átomos de carbono, tal como de 2 a 4 átomos de carbono) , tal como ácido etansulfónico, ácido propansulfónico (por ejemplo ácido n-propansulfónico y ácido arilsulfónicos opcionalmente sustituidos, tal como ácido bencensulfónico . . Puede ser posible cristalizar sales de los Compuestos A, B y C con o sin la presencia de un sistema de solvente (por ejemplo la cristalización puede ser a partir de una fusión, bajo condiciones supercríticas, o lograda por sublimación) . Sin embargo, preferimos que la cristalización ocurra a partir de un sistema de solvente apropiado.

Los sistemas solventes apropiados que se pueden utilizar en un proceso de cristalización pueden ser heterogéneos u homogéneos y de este modo pueden comprender uno o más solventes orgánicos, tales como acetatos de alquilo inferior (por ejemplo acetatos alquilo de 1 a 6 átomos de carbono lineales o ramificados, tales como acetato de etilo, acetato de iso-propilo y acetato de butilo); alcoholes de alquilo inferior (por ejemplo de 1 a 6 átomos de carbono, lineales o ramificados), tales como hexan-l-ol, 3-metilbutan-l-ol, pentan-l-ol, . pentan-2-ol, 4-metil-2-pentanol y 2-metil-l-propanol; metanol, etanol, n-propanol, isopropanol y butanol (por ejemplo n-butanol) / hidrocarburos alifáticos (por ejemplo alcanos de 5 a 8 átomos de carbono, lineales o ramificados, tales como n-pentano, n-heptano e iso-octano) ; hidrocarburos aromáticos (por ejemplo benceno, tolueno, o-xileno, m-xileno y p-xileno) ; alcanos clorados (por ejemplo cloroformo y diclorometano) ; cetonas de dialquilo (por ejemplo di-(alquilo de 1 a 6 átomos de carbono) ) (por ejemplo acetona, metil-iso-butil-cetona) , acetonitrilo, dimetilformamida, éteres de dialquilo (por ejemplo éter dietilico, éter di-iso-propílico, éter di-n-propilico, éter di-n-butilico y éter metílico de ter-butilo) ; y/o solventes acuosos tales como agua. Las mezclas de cualquiera de los solventes anteriormente mencionados se pueden utilizar.

Sales diferentes pueden tener solubilidades diferentes en cualquier solvente dado a cualquier temperatura dada» A este respecto, los compuestos de la invención pueden ser fácilmente solubles en ciertos solventes (incluyendo algunos de los mencionados anteriormente) , e incluso pueden ser menos solubles en otros. Los solventes en los que -los compuestos de la invención son escasamente solubles se pueden denominar "antisolventes" . Los solventas adecuados en los que los compuestos de la invención pueden ser fácilmen-te solubles incluyen alcoholes de alquilo inferior (tales como metanol, etanol iso-propanol . Los acetatos de alquilo inferior (tales como acetato de etilo y acetato de iso-propilo) , cetonas de dialquilo inferior (tales como metil-iso-butil-cetonas) , hidrocarburos alifáticos (tales como iso-octano y n-heptano) e hidrocarburos aromáticos (tal como tolueno) se pueden emplear como antisolventes. La cristalización de compuestos de la invención a partir de un sistema de solvente apropiado se puede lograr mediante la obtención de supersaturación en un sistema de solvente que comprende el compuesto de la invención (por ejemplo por enfriamiento, por evaporación del solvente y/o vía la adición de antisoivente) .

Se prefiere que los compuestos cristalinos de la invención (y particularmente los compuestos cristalinos A, B y C) se proporcionen por uno o más de los siguientes métodos: (i) preparación de un compuesto de la invención en forma amorfa, seguida por disolución de esa sal en un sistema de solvente apropiado, tal como un solvente polar (por* ejemplo un alcohol de alquilo inferior, un acetato de alquilo inferior, una cetona de dialquilo inferior, o una mezcla de estos solventes), y cristalización subsecuente (opcionalmente iniciada por siembra).- La cristalización se puede efectuar de esta manera por la disolución del compuesto de la invención en un solvente en el que es fácilmente soluble (por ejemplo un alcohol de alquilo inferior) , seguida por adición de antisolvente (por ejemplo un acetato de alquilo inferior o una cetona de di-alquilo inferior) , o por disolución del compuesto en una mezcla de un solvente en el que es fácilmente soluble y un antisolvente, y cristalización subsecuente; o (ii) cristalización por reacción (o precipitación) , que comprende agregar una cantidad apropiada de ácido a un compuesto de la fórmula I, y posteriormente ya sea: a) cristalización directa, por ejemplo a a partir de un sistema de solvente que comprende un antisolvente (por ejemplo un acetato de alquilo inferior, una cetona de dialquilo inferior o un hidrocarburo) ; o b) adición subsecuente de un antisolvente apropiado para facilitar la cristalización . (por ejemplo formación de un compuesto de la invención en un solvente en el que es fácilmente soluble (por ejemplo un alcohol de alquilo inferior) , seguido por adición de antisolvente (por ejemplo un acetato, una cetona de alquilo inferior o un hidrocarburo)), en ambos de tales procesos (a) y (b) , el ácido y/o base se pueden proporcionar inicialmente en- asociación con el sistema de solvente apropiado, y en ambos de tales procesos (a) y (b), la cristalización se puede iniciar por siembra. En el caso del proceso (i) anterior, los solventes preferidos pueden incluir metil-iso-butil-cetona, iso-propanol, acetato de etilo, acetato de iso-propilo y mezclas de los mismos. En el caso del proceso (ii) anterior, dependiendo de la sai que se va a formar: (a) los solventes preferidos para la cristalización "directa" pueden incluir iso-propanol, acetato de iso-propilo, acetato de n-butilo, ' tolueno o, preferentemente, metil-iso-butil-cetona o acetato de etilo; y (b) cuando la cristalización emplea antisolvente, los solventes preferidos en los que los compuestos de la invención son fácilmente solubles- pueden incluir metanol, etanol o, preferentemente, iso-propanol; y los antisolventes preferidos pueden incluir metil-iso-butil-cetona, acetato de n-butilo, tolueno, iso-octano, n-heptano o, preferentemente, acetato de etilo o acetato de iso-propilo. En cualquiera de los procesos (i) o (ii), la persona experta apreciaré que, después de la formación de la sal, al menos parte del o de lo-s solventes se puede eliminar, y entonces la mezcla resultante se redisuelve antes de la realización de una cristalización como se describe en la presente. Cuando el compuesto cristalino de la invención que se va a formar es una sal de etansulfonato del Compuesto A, y: (1) el proceso realizado es el proceso (i), la sal amorfa se puede convertir en suspensión, ya sea en metil-iso-butil-cetona o en una mezcla de iso-propanol y acetato de etilo; y (2) el proceso realizado es el proceso (ii), una cristalización directa se puede lograr mediante la adición de ácido etansulfónico, opcionalmente en la forma de una solución en metil-iso-butil-cetona, a una solución de Compuesto A en metil-iso-butil-cetona. Alternativamente, el ácido etansulfónico se puede agregar a una solución de Compuesto A en iso-propanol, y el acetato de etilo puede entonces agregarse como antisolvente. Cuando el compuesto cristalino de la invención que se va a formar es una sal de n-propansulfonato del Compuesto A, y: (I) el proceso realizado es el proceso (i), la sal amorfa se puede convertir en suspensión en una mezcla de iso-propanol y acetato de iso-propilo, o en una mezcla de iso-propanol y acetato de etilo; y - (II) el proceso realizado es el proceso (ii) , el ácido-propansulfónico se puede agregar a una solución de Compuesto A en iso-propanol y luego acetato de etilo, o acetato de iso-propilo, agregado como antisolvente. Cuando el compuesto cristalino de la invención que se va a formar es una sal de bencensulfonato del Compuesto A, y: (A) el proceso realizado es el proceso (i), la sal amorfa se puede convertir en suspensión en acetato de etilo, metil-iso-butil-cetona o acetato de iso-propilo; y (B) el proceso realizado es el proceso (ii), el ácido bencensulfónico se puede agregar a una solución de Compuesto A en acetato de etilo, y luego una pequeña cantidad de iso-propanol se agrega para facilitar la transformación en material cristalino. Alternativamente, el ácido bencensulfónico se puede agregar a una solución de Compuesto A en iso-propanol y luego el acetato de etilo se agrega como antisolvente. De acuerdo a un aspecto adicional de la invención, se proporciona un proceso para la preparación de un compuesto cristalino de la invención, que comprende cristalizar un compuesto de la invención a partir de un sistema de solvente apropiado. Las temperaturas de cristalización y los tiempos de cristalización dependen de la - sal que se va a cristalizar, la concentración de esa sal en solución, y el sistema de solvente que se utilice. La cristalización también se puede iniciar y/o efectuar por medio de técnicas estándares, por ejemplo con o sin siembra con cristales del compuesto cristalino, apropiado, de la invención. Los compuestos de la invención que son anhidratos contienen no más de 3%, preferentemente 2%, más preferentemente 1% y lo más preferentemente 0.5% (p/p) de agua, ya sea que tal agua esté mezclada (agua cristalina o de otra manera) o no. Las formas cristalinas diferentes de los compuestos de la invención se pueden caracterizar fácilmente utilizando métodos de difracción de polvo de rayos X (XRPD) por ejemplo como se describe más adelante. Con el fin de asegurar que se prepare una forma cristalina particular en ausencia de otras formas cristalinas, las cristalizaciones preferentemente se llevan a cabo por siembra con núcleos y/o cristales de siembra de la forma cristalina deseada en ausencia sustancialmente completa de núcleos y/o cristales de siembra de otras formas cristalinas. Los cristales de siembra del compuesto apropiado se pueden preparar, por ejemplo, por medio de evaporación lenta de solvente de una porción de solución de sal apropiada. Los compuestos de la invención se pueden aislar utilizando mezclas que son bien conocidas por aquellos expertos en el arte, por ejemplo decantación, filtración o centrifugación . Los compuestos se pueden secar utilizando técnicas estándares. La purificación adicional de los compuestos de la invención se puede efectuar utilizando técnicas que son bien conocidas por aquellos expertos en el arte. Por ejemplo, las impurezas se pueden eliminar por medio de recristalización a partir de un sistema de solvente apropiado. Las temperaturas y tiempos apropiados para la recristalización dependen de la concentración de la sal en solución, y del sistema de solvente que se utilice. Cuando los compuestos de la invención se cristalizan, o se recristalizan, como se describe en la presente, la sal resultante puede estar en una forma que tenga estabilidad química y/o en estado sólido, mejorada, como se mencionó anteriormente.

Preparaciones Farmacéuticas y Usos Médicos Los compuestos de la invención se pueden administrar parenteralmente u oralmente a pacientes mamíferos (incluyendo humanos), y después de esto se pueden metabolizar en el cuerpo para formar compuestos que son farmacológicamente activos (por ejemplo éstos actúan como "profármacos" de compuestos activos) . De este modo, los compuestos de la invención son útiles porque se metabolizan en el cuerpo después de la administración oral o parenteral, para formar compuestos que poseen actividad farmacológica. Los compuestos de la invención por lo tanto se indican como productos farmacéuticos . De acuerdo a un aspecto adicional de la invención, de este modo se proporcionan los compuestos de la 'invención para utilizarse como productos farmacéuticos.

En particular, los compuestos de la invención se metabolizan después de la administración para formar inhibidores potentes de trombina, por ejemplo como se puede demostrar en las pruebas descritas entre otros en la solicitud de patente internacional No. PCT/SE01/02657 , asi como . en las solicitudes de patente internacional WO 01/87879 y WO 00/42059, las descripciones relevantes- en cuyos documentos se incorporan por referencia en la presente. Por "profármaco de un inhibidor de trombina", incluimos compuestos que forman un inhibidor de trombina, en una cantidad experimentalmente detectable, y en un tiempo predeterminado, (por ejemplo aproximadamente una hora}, después de la administración oral o parenteral. Se espera que los compuestos de la invención de este modo sean útiles en aquellas condiciones en donde se requiere la inhibición de trombina, y/o condiciones en donde se indica la terapia anticoagulante, incluyendo las siguientes: El tratamiento y/o profilaxis de trombosis e hipercoagulabilidad en la sangre y/o en tejidos de animales, incluyendo el ser humano. Se conoce que la hipercoagulabilidad puede conducir a enfermedades trombo-embólicas. Las condiciones asociadas con la hipercoagulabilidad y enfermedades trombo-embólicas que se pueden mencionar incluyen resistencia a la proteina C activada, heredada o adquirida, tal como la mutación del factor (V) (factor V Leiden) , y deficiencias heredadas o adquiridas en antitrombina III, proteina C, proteina S, cofactor II de heparina. Otras condiciones conocidas por estar asociadas con la hipercoagulabilidad y la enfermedad t ombo-embólica incluyen anticuerpos antifosfolipidos en circulación (anticoagulante de Lupus), homocisteinemia, trombocitopenia inducida por heparina y defectos en fibrinólisis , así como síndromes de coagulació (por ejemplo coagulación intravascular diseminada (DIC) ) y daño vascular en general (por ejemplo debido a cirugía) . El tratamiento de condiciones en donde existe un exceso indeseable de trombina sin signos de hipercoagulabilidad, por ejemplo en enfermedades neurodegenerativas, tal como la enfermedad de Alzheimer. Los estados de enfermedad particulares que se pueden mencionar incluyen el tratamiento terapéutico y/o profiláctico de trombosis venosa (por ejemplo DVT) y embolismo pulmonar, trombosis arterial (por ejemplo en infarto al miocardio, angina inestable, aplopejía basada en trombosis y trombosis arterial periférica) , y embolismo sistémico usualmente desde el atrio durante la fibrilación atrial (por ejemplo fibrilación atrial no valvular) o desde el ventrículo izquierdo después del infarto al miocardio transmural, o provocado por insuficiencia cardiaca congestiva; profilaxis de re-oclusión (por ejemplo trombosis) después de trombólisis, angioplastia trans- luminal percutánea (PTA) y operaciones de derivación coronaria; la prevención de re-trombosis después de microcirugia y cirugía vascular en general. Las indicaciones adicionales incluyen al tratamiento terapéutico y/o profiláctico de coagulación intra vascular diseminada provocada por bacterias, trauma múltiple, intoxicación o cualquier otro mecanismo; tratamiento anticoagulante cuando -la sangre está en contacto con superficies extrañas en el cuerpo tales como injertos vasculares, stents vasculares, catéteres vasculares, válvulas protésicas mecánicas y biológicas o cualquier otro tipo de dispositivo médico; y tratamiento anticoagulante cuando la sangre está en contacto con dispositivos médicos fuera del cuerpo tal como durante la cirugía cardiovascular utilizando una máquina de corazón-pulmón o en hemodiálisis; el tratamiento terapéutico y/o profiláctico del síndrome de distrés respiratorio del adulto e idiopático, fibrosis pulmonar después del tratamiento con radiación o quimioterapia, choque séptico, septicemia, respuestas inflamatorias, que incluyen, pero no están limitadas a, edema, aterosclerosis aguda o crónica tal como la enfermedad arterial coronaria y la formación de placas ateroscleróticas, enfermedad arterial cerebral, infarto cerebral, trombosis cerebral, embolismo cerebral, enfermedad arterial periférica, isquemia, angina (incluyendo angina inestable), daño por reperfusión, restenosis después de angioplastia trans-luminal percutánea (PTA) y cirugía de derivación arterial coronaria. Los compuestos de la invención que inhiben tripsina y/o trombina también pueden ser útiles en el tratamiento de pancreatitis. Los compuestos de la invención se indican de este modo en el tratamiento terapéutico - y/o profiláctico de estas condiciones. De acuerdo a un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método de tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina, el método comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención a una persona que sufre de, o es susceptible a, tal condición . Los compuestos de la invención normalmente se administrarán oralmente, intravenosamente, subcutáneamente, bucalmente, rectalmente, dérmicamente, nasalmente, traquealmente, bronquealmente, por cualquier otra ruta parenterai o vía inhalación, en la forma de preparaciones farmacéuticas que comprenden el compuesto de la invención en una forma de dosificación farmacéuticamente aceptable. Dependiendo del trastorno y del' paciente que va a ser tratado y de la ruta de administración, las composiciones se pueden administrar a dosis variantes. Los compuestos de la invención también se pueden combinar y/o coadministrar con uno o varios agentes antitrombóticos con un mecanismo diferente de acción, tal como uno o más de los siguientes: el ácido acetilsalicílico de agentes antlplaquetarios, ticlopidina y clopidogrel; receptor de tromboxano y/o inhibidores de sintetasa; antagonistas del receptor de fibrinógeno; imitaciones de prostaciclina; inhibidores de fosfodiesterasa; antagonistas del receptor ADP (P2T) ; e inhibidores de carboxipeptidasa U (CPU) . Los compuestos de la invención se pueden combinar adicionalmente y/o coadministrar con tromboliticos asi como uno o más de activador de plasminógeno tisular (natural, recombinante o modificado) , estreptocinasa, urocinasa, prourocinasa, complejo activador de plasminógeno-estreptocinasa anisoilado (APSAC) , activadores plasnainógenos de la glándula salival animal, y similares, en el tratamiento de enfermedades trombóticas, en particular infarto al miocardio. De acuerdo a un aspecto adicional de la invención, se proporciona una formulación farmacéutica que incluye un compuesto de la invención, en mezcla con un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable . Las dosis diarias adecuadas de. los compuestos de la invención en el tratamiento terapéutico de humanos son de aproximadamente 0.001-100 mg/kg de peso corporal en la administración peroral y de 0.001-50 mg/kg. de peso corporal en la administración parenteral, excluyendo el peso de cualquier contraión ácido. Para evitar cualquier duda, como se utiliza en la presente, el término "tratamiento" - incluye tratamiento terapéutico y/o profiláctico. Los compuestos de la invención tienen la ventaja de que son más eficaces, menos tóxicos, de actividad más prolongada, tienen un intervalo de actividad más amplio, son más potentes, producen menos efectos colaterales, se absorben más fácilmente, y/o tiene un mejor perfil farmacocinético (por ejemplo mayor biodisponibilidad oral y/o despejo inferior) , que, y/o tienen otras propiedades farmacológicas, físicas, o químicas, útiles sobre los compuestos conocidos en la técnica anterior. Los compuestos de la invención pueden tener la ventaja adicional de que se pueden administrar menos frecuentemente que los compuestos conocidos en la técnica anterior.

Los compuestos de la invención también pueden tener la ventaja de que están en una forma que proporciona facilidad de manejo mejorada. Además, los compuestos de la invención tienen la ventaja de que -se pueden producir en formas que pueden tener estabilidad química y/o en estado sólido mejoradas (incluyendo por ejemplo gracias a la higroscopicidad menor) . De este modo, tales compuestos de la invención pueden ser estables cuando se almacenan por periodos prolongados. Los compuestos de la invención también pueden tener la ventaja de que pueden ser cristalizados con buenos rendimientos, con una alta pureza, rápidamente, convenientemente, y a un bajo costo. La invención se ilustra, pero no se limita de ningún modo, por los siguientes ejemplos, con referencia a las figuras anexas, en las cuales: La figura 1 muestra un difractograma de polvo de rayos X para el compuesto A cristalino, sal de ácido etansulfónico. La figura 2 muestra un difractograma de polvo de rayos X para el compuesto A cristalino, sal de ácido bencensulfónico . La figura 3 muestra un difractograma de polvo de rayos X para el compuesto A cristalino, sal de ácido n-propansulfónico .

La figura 4 muestra un difractograma de polvo de rayos X para el compuesto A cristalino, sal de ácido n-butansulfónico . La figura 5 muestra un difractograma de polvo de rayos X para el compuesto B cristalino, sal de ácido hemi-1 , 5-naftalendisu1fónico .

Procedimientos Generales La TLC se realizó sobre gel de sílice. El análisis de HPLC quiral se realizó utilizando una columna Chiralcel OD de 46 mm X 250 mm -con una columna de protección de 5 cm. La temperatura de la columna se mantuvo a 35°C. Se utilizó una velocidad de flujo de 1.0 ml/min. Se utilizó un detector Gilson 115 UV a 228 nm. La fase móvil consistió de hexanos, etanol y ácido trifluoroacético y las proporciones adecuadas se listan para cada compuesto. Típicamente, el producto se disolvió en una cantidad mínima de etanol y ésta se diluyo con la fase móvil. En las preparaciones A a C siguientes, se realizó LC-MS/MS utilizando un instrumento HP-100 equipado con un inyector CTC-PAL y un ThermoQuest 5Tm, 4X100 mm, columna Hypersil BDS-C18. Se utilizó un detector de S API-3000 (Sciex) . La velocidad de flujo fue de 1.2 ml/min y la fase móvil (gradiente) consistió de 10-90% de acetonitrilo con 90-10% de acetato de amonio acuoso 4 mM, que contenían ambos ácido fórmico al 0.2%. De otra manera, los espectros de masa de baja resolución (LRMS) se registraron utilizando un espectrómetro Micromass ZQ en modo de ionización de cambio positivo-negativo ESI (m/z intervalo de masa 100-800); y los espectros de masa de alta resolución (HRMS) se registraron utilizando un espectrómetro Micromass LCT en modo de ionización negativa ES (m/z intervalo de masa 100-1000) con leucina-encefali a (C28H37NSO7) como estándar de masa interno. Los espectros de NMR 1H se registraron utilizando tetrametilsilano como el estándar interno. Los espectros de NMR 13C se registraron utilizando los solventes deuterados listados como el estándar interno. De otra manera, el MeOD se utilizó como solvente y la señal de MeOD como estándar interno (XH ? = 3.30 ppm; 13C ? = 49 ppm) . El análisis de difracción de polvo de rayos X (XRPD) se realizó utilizando ranuras variables sobre muestras preparadas de acuerdo a métodos estándares con o sin, utilizando cualquier estándar interno, por ejemplo aquéllos descritos en Giacovazzo, C. et al (1995), Fundamentáis of Crystallography, Oxford University Press; Jenkins, R. and Snyder, R. L. (1996), Introduction to X-Ray Powder Diffractometry, John Wiley & Sons, New York; Bunn, C. W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London; o Klug, H. P. & Alexander, L. E. (1974), X-ray Diffraction Procedures, John Wiley and Sonsf New York. Los análisis de rayos X se realizaron utilizando un difractómetro Siemens D5000 y un Philips X' Pert PD. La calorimetría de exploración diferencial (DSC) se realizó utilizando un instrumento Mettler DSC820, de acuerdo a métodos estándares, por ejemplo aquéllos descritos en Hohne, G. W. H. et al (1996), ¦ Differential Scanning Calorimetry, Springer, Berlín. El análisis termogravimétrico (TGA) se realizó utilizando un instrumento Mettler Toledo TGA850. Se apreciará por la persona experta que las formas cristalinas de compuestos de la invención se pueden preparar por analogía con procesos descritos en la presente y/o de acuerdo con los Ejemplos siguientes, y pueden mostrar esencialmente los mismos patrones de difracción de XRPD y/o termogramas DSC y/o TGA como aquéllos descritos en la presente. Por "esencialmente los mismos" patrones de difracción XRPD y/o termogramas DSC y/o TGA, incluimos aquellos casos en donde es claro a partir de los patrones relevantes y/o termogramas (tomando en cuenta el error experimental) que es esencialmente la misma forma cristalina que se ha formado. Cuando se proporcionan, las temperaturas de inicio de DSC pueden variar en un intervalo de ± 5°C (por ejemplo ± 2°C), y los valores de distancia de XRPD pueden variar en el intervalo de ± 2 en el último lugar decimal. Se apreciará por la persona experta que las intensidades de XRPD pueden variar cuando se miden para esencialmente la misma forma cristalina por diversas razones incluyendo, por ejemplo, la orientación preferida. La intensidad del dato de XRPD está generalmente dentro de un margen de error de aproximadamente más o menos 20 a 40%. Las intensidades relativas se pueden caracterizar de acuerdo a las siguientes definiciones: %Intensidad Relativa Definición 60-100 vs (muy fuerte) 21-59.9 s (fuerte) 7-20.9 m (media) 4-6.9 w (débil) <l-3.9 vw (muy débil) En la sección de Ejemplos, a no ser que se establezca de otro modo, cuando se realiza la siembra, las semillas se obtienen del primer Ejemplo en el que se obtiene el material cristalino de esa sal. Por ejemplo, en el Ejemplo 13, las semillas se obtienen del Ejemplo 11.

Preparación A: Preparación del compuesto A (i) 3-cloro-5-metoxibenzaldehído 74.0 g, 419 mmol de 3, 5-dicloroanisol en 200 mi de THF se agregó gota a gota a metal magnesio (14.2 g, 585 mmol, prelavado con HC1 0.5 N) en 100 mi de THF a 25°C.

Después de la adición, se agregó gota a gota 3.9 g, 20.8 ramol. de 1,2-dibromoetano. La mezcla café obscura resultante se calentó a reflujo por 3 horas. La mezcla se enfrió a 0°C, y se agregó 60 mi de N, N-dimetilformamida en una porción. La mezcla se dividió con 3 porciones de 400 mi de éter dietílico y 500 mi de HC1 6 N. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con .300 mi de salmuera, se secaron sobre Na2S04, se filtraron y se concentraron a vacío para dar un aceite. La cromatografía instantánea (2x) sobre gel de sílice eluyendo con Hex:EtOAc (4:1) proporcionó el compuesto del subtítulo (38.9 g, 54%) como un aceite amarillo. NMR XH (300 MHz , CDC13) d 9.90 (s, 1H) , 7.53 (s, 1H) , 7.38 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 3.87 (s, 3H) . ( ii ) 3-cloro-5-hidroxibenzaldehído Una solución de 22.8 g, 134 mmol de 3-cloro-5-metoxibenzaldehído (ver paso (i) anterior) en 250 mi de CH2C12 se enfrió a 0°C. Se agregó gota a gota durante 15 minutos 15.8 mi, 167 mmol de tribomuro de boro. Después de agitar la mezcla de reacción por dos horas, se agregó lentamente 50 mi de H20. La solución se extrajo posteriormente con 2 porciones de 100 mi de Et20. Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre a2S04, se filtraron y se concentraron a vacío. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con Hex:EtOAc (4:1) proporcionó el compuesto del subtítulo (5.2 g, 25%). NMR ¾ (300 MHz, CDC13) 5 9.85 (s, 1H) , 7.35 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 3.68 (s, 3H) . (iii) 3-Cloro-5-difluorometoxibenzaldehído Una solución de 7.5.g, 4.8 mmol (ver paso (ii) anterior) de 3-cloro-5-hidroxibenzaldehído en 250 mi de 2-propanol y 100 mi de KOH al 30%, se calentó a reflujo. Mientras se calentaba, se burbujeó CHC1F2 en la mezcla de reacción por dos horas. La mezcla de reacción se enfrió, se acidificó con HCl 1 N y se extrajo con dos porciones de 100 mi de EtOAc. Los materiales orgánicos se lavaron con 100 mi de salmuera, se secaron sobre Na2S04, se filtraron y se concentraron a vacío. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con Hex : EtOAc (4:1) proporcionó el compuesto del subtitulo (4.6 g, 46%). NMR XH (300 MHz, CDCI3) d 9.95 (s, 1H) , 7.72 (s, 1H) , 7.52 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.60 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1H) . (iv) . Ph ( 3-C1 ) ( 5-QCHF2) - ( R, S ) CH (OTMS ) CN Una solución de 4.6 g, 22.3 mmol (ver paso (iii) anterior) de 3-cloro-5-difluorometoxibenzaldehído en 200 mi de CH2C12 se enfrió a 0°C. Se agregaron 1.8g, 5.6 mmol de Znl2 y 2.8 g, 27.9 mmol de cianuro de trimetilsililo y la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó por 15 horas. La mezcla se concentró parcialmente a vacio, produciendo el compuesto del subtitulo como un liquido, el cual se utilizó directamente en el paso (v) siguiente sin purificación o caracterización adicional. (v) Ph (3-C1) (5-OCHF2) - (R,S) CH (OH) C(NH)OEt 6.82 g, asumiendo 22.3 mmol (ver paso (iv) anterior) de Ph ( 3-C1 ) ( 5-OCHF2 ) - (R,S ) CH (OTMS ) CN se agregó gota a gota a 500 mi de HCl/EtOH. La -mezcla de reacción se agitó 15 horas, luego se concentró parcialmente a vacio eluyendo el compuesto del subtitulo como un liquido, el cual se utilizó en el paso (vi) sin purificación o caracterización adicional. (vi) Ph ( 3-C1 ) ( 5-OCHF2 ) - ( R,S ) CH (OH) C (O) OEt 6.24 g, asumiendo 22.3 mmol (ver paso (v) anterior) de Ph (3-C1) (5-OCHF2) - (R,S) CH(OH) C (NH) OEt se disolvió en 250 mi de THF, se agregó 400 mi de H2S04 0.5 M y la reacción se agitó a 40°C por 65 horas, se enfrió y luego se concentró parcialmente a vacio para eliminar más del THF. La mezcla de reacción posteriormente se extrajo con tres porciones de 100 mi de Et20, se secó en Na2S04, se filtró y se concentró a vacío para proporcionar el compuesto del subtítulo como un sólido, el cual se utilizó en el paso (vii) sin purificación o caracterización adicional. (vii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R,S)CH(OH)C(0)OH 6.25 g, asumiendo 22.3 mmol (ver paso (vi) anterior) de Ph ( 3-C1 ) ( 5-OCHF2 ) - (R, S) CH (OH) C (O) OEt en 175 mi de 2-propanol y 350 mi de KOH "al 20%, se agitó a temperatura ambiente durante 15 horas. La reacción posteriormente se concentró a vacío para eliminar la mayoría del 2-propanol. La mezcla remanente se acidificó co H2SO< 1 M, se extrajo co tres porciones de 100 mi de Et20, se secó en Na2S04 y se concentró a vacío para dar un sólido. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con CHC13 :MeOH :NH4OH concentrado (6:3:1) proporcionó la sal de amonio del compuesto" del subtítulo. La sal de amonio luego se disolvió en una mezcla de 75 mi de EtOAc y 75 mi de H20 y se acidifico con HCl 2 N. La capa orgánica se separó y se lavó con 50 mi de salmuera, se secó en Na2S04 y se concentró a vacío para proporcionar el compuesto del subtítulo (3.2 g, 57% de los pasos (iv) a (vii) ) . NMR ½ (300 MHz, CD3OD) 8 7.38 (s, 1H) , 7.22 (s, 1H) , 7.15 (s, 1H), 6.89 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1H) , 5.16 (s, 1H) (viii) P (3-Cl) (5-QCHF2)-(R)CH(OH)C(0)OH (a) y Ph(3-Cl)(5- OCHF2)-(S)CH(OAc)C(0)OH (b) . Una mezcla de 3.2 g, 12.7 mmol (ver paso (vii) anterior) de Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R, S) CH (OH) C (O) OH y iipasa PS "Amano" (aprox. 2.0 g) en 125 mi de acetato de vinilo y 125 mi de MTBE se calentó a reflujo durante 48 horas. La mezcla de reacción se enfrió, se filtró a través de Celite® y la torta filtro se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró a vacío y se sometió a cromatografía instantánea sobre .gel de sílice eluyendo con CHCI3 :MeOH:NH4OH concentrado (6:3:1) produciendo las. sales de amonio de los compuestos del subtítulo (a) y (b) . El compuesto (a) como una sal se disolvió en ¾0, se acidificó con HC1 2 N y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en Na2SO,j, se filtró y se concentró a vacío para proporcionar el compuesto del subtítulo (a) (1.2 g, 37%). Para el compuesto (a) del subtítulo NMR 1H (300 MHz, CD3OD) d 7.38 (s, 1H) , 7.22 (s, 1H) , 7.15 (s, 1H), 6.89 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1H) , 5.17 (s, 1H) . (ix) Ph(3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc) A una solución de 1.1 g, 4. mmol (ver paso (viii) anterior) de Ph(3-Cl) (5-OCHF2)- (R) CH (OH) C (O) OH y H-Aze-Pab (Teoc) (ver solicitud de patente internacional O 00/42059, 2.6 g, 5.7 mmol) en 50 mi de DMF a 0°C se agregó 2.8 g, 5.3 mmol de PyBOP y 1.3 g, 10.6 mmol de colidina. La reacción se agitó a 0°C por 2 horas y luego a temperatura ambiente por 15 horas adicionales. La mezcla de reacción se concentró a vacío y se sometió a cromatografía 'instantánea sobre gel de sílice (3 x) , eluyendc rimeramente con CHCl3:EtOH (9:1), luego con EtOAc: EtOH (20:1) y finalmente eluyendo con CH2C12:CH30H (95:5)' para proporcionar el compuesto del subtítulo (1.0 g, 37%) como un sólido amorfo blanco. NMR XH (300 MHz, CD3OD, mezcla de rotámeros) d 7.79-7.85 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.15-7.48 (m, 5H) , 6.89 y 6.91 (t, JH-F = 71.1 Hz, 1H), 5.12 y 5.20 (s, 1H), 4.75-4.85 (m, 1H) , 3.97-4.55 (m, 6H), 2.10-2.75 (ra, 2H), 1.05-1.15 (m,. 2H), 0.09 (s, 9H) . MS (m/z) 611 (M+l)+ (x) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)- (R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc) 0.40 g, 0.65 mmol (ver paso (ix) anterior) de Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(Teoc) , se disolvió en 20 mi de acetonitrilo y se agregó 0.50 g, 6.0 mmol de clorhidrato de O-metil-hidroxilamina . La mezcla se calentó a 70 °C por 2 horas.. El solvente se evaporó y el residuo se dividió entre agua y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo dos veces más con acetato de etilo y la fase orgánica combinada se lavó con agua, salmuera, se secó en Na2S04, se filtró y se evaporó. Rendimiento: 0.4 g (91%). NMR ½ (400 MHz, CDCL3) : d 7.83 (t amplio, 1H) 7.57 (s amplio, 1H), 7.47 (d, 2H) , 7.30 (d, 2H) , 7.20 (m, 1H) , 7.14 (m, 1H), 7.01 (m, 1H) , 6.53 (t, lH), 4.89 (s, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.47 (m, 2H) , 4.4-4.2 (amplio, 1H), 4.17-4.1 (m, 3H) , 3.95 (s, 3H) , 3.67 (m, 1?) , 2.68 (m, 1H) , 2.42 (m, 1H) , 0.97 (m, 2H). , 0.01 (s, 9H) . (xi) Compuesto ? 0.40 g, 0.62 mmol {ver paso (x) anterior} de Ph(3-Cl) (5-0CHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(0me, Teoc) , se disolvió en 5 mi de TFA y se dejó reaccionar por 30 minutos. El TFA se evaporó y el residuo se dividió entre acetato de etilo y NaHC03 acuoso. La fase acuosa se extrajo dos veces más con' acetato de etilo y la fase orgánica combinada se lavó con agua, salmuera, se secó en Na2S04, se filtró y se evaporó. El producto se liofilizó a partir de agua/acetonitrilo. No fue necesaria la purificación. Rendimiento: 0.28 g (85%). NMR ¾ (600 MHz," CDCL3) : d 7.89(t amplio, 1H) , 7.57 (d, 2H) , 7.28 (d, 2H), 7.18 (m, 1H) , 7.13 (m, 1H) , 6.99 (m, 1H) , 6.51 (t, 1H), 4.88 (s, 1H) , 4.87 (m, 1H) , 4.80 (s amplio, 2H), 4.48 (dd, 1H) , 4.43 (dd, 1H) , 4.10" (m, 1H) , 3.89 (s, 3H), 3.68 (m, 1H), 2.68 (m, 1H) , 2.40 (m, 1H) . NMR 13C (125 MHz; CDC13) : (carbonilo y/o carbonos de amidina, rotámeros) 8 172.9, 170.8, 152.7, 152.6 HR S calculado para C22H23CI F2N4O5 (M-H) 495.1242, encontrado 495.1247 Preparación B: Preparación del compuesto B (i) 2, 6-Difluoro-4 [ (metilsulfinil ) (metiltio)metil] -benzonitrilo 7.26 g, 0.0584 mol de (metilsulfinil) (metiltio) metano se disolvió en 100 mi de THF anhidro bajo atmósfera de argón y se enfrió a -78°C. Se agregó butil-litio en hexano (16 mi,. 1.6 M, 0.0256 mol) gota a gota con agitación. La mezcla se agitó durante 15 minutos. Mientras tanto, se enfrió 4.0 g, 0.025 mmol de una solución de 3, , 5-trifluorobenzonitrilo en 100 mi de THF anhidro a -78 °C bajo atmósfera de argón y la solución anterior se agregó a través de una cánula a la última solución en un periodo de 35 minutos. Después de 30 minutos, el baño de enfriamiento se retiró y cuando la reacción hubo alcanzado la temperatura ambiente, se vació en 400 mi de agua. El THF se evaporó y la capa acuosa remanente se extrajo 3 veces con éter dietilico. La fase etérea se lavó con agua, se secó en Na2S04 y se evaporó. Rendimiento: 2.0 g (30%). NMR 2H (500 MHz, CDCL3) : d 7.4-7.25 (m, 2H) , 5.01 (s, 1H diastereoisómero) , 4.91 (s, 1H, diastereoisómero) , 2.88 (s, 3H, diastereoisómero), 2.52 (s, 3H, diastereoisómero ) , 2.49 (s, 3H, diastereoisómero), 2.34 (s, 3H, diastereoisómero), 1.72 (amplio, 1H) . (ii) 2, 6-Difluoro-4-formilbenzonitrilo 2.17 g, 8.32 mmol (ver paso (i) anterior) de 2,6- Difluoro- [ (metilsulfinil ) (metiltio)metil]benzonitrilo se disolvió en 90 mi de THF y se agregó 3.5 mi de ácido sulfúrico concentrado. La mezcla se dejó a temperatura ambiente por 3 días y posteriormente se vació en 450 mi de agua. La extracción 3 veces" con EtOftc seguida y la fase etérea combinada se lavó dos veces con bicarbonato de sodio acuoso y con salmuera, se secó en a2S0 y se evaporó. Rendimiento: 1.36 g (98%). La posición del grupo formilo se estableció por NRM -13C. La señal de los carbonos florados en 162.7 ppm mostró el patrón de acoplamiento esperado con dos constantes de acoplamiento en el orden de 260 Hz y 6.3 Hz respectivamente, correspondientes a un acoplamiento ipso y un ets a partir' de los" átomos de flúor'. NMR ?? (400 MHz, CDCL3) : d 10.35 (s, 1H) , 7.33 (m, 2H) (iii) 2, 6-Difluoro-4-hidroximetilbenzonitrilo 1.36 g, 8.13 mmol (ver paso (ii) anterior) de 2, 6-difluoro-4-formilbenzonitrilo se disolvió en 25 mi de metanol y se enfrió sobre un baño de hielo. Se agregó 0.307 g, 8.12 mmol de borohidruro de sodio en porciones con agitación, y la reacción se dejó por 65 minutos. El solvente se evaporó y el residuo se dividió entre éter dietilico y bicarbonato de sodio acuoso. La capa etérea se lavó con más bicarbonato de sodio acuoso y salmuera, se secó en Na2S04 y se evaporó. El producto crudo cristalizo rápidamente y pudo ser utilizado sin purificación adicional. Rendimiento: 1.24 g (90%). NMR ½ (400 MHz, CDCL3) : d 7.24 (m, 2H) , 4.81 (s, 2H) , 2.10 (amplio, 1H) . (iv) metansulfonato de 4-ciano-2, 6-difluorobencilo A una solución enfriada en hielo de 1.24 g, 7.32 mmol (ver paso (iii) anterior) de 2, 6-difluoro-4-hidroximetilbenzOnitrilo y 0.93 g, 8.1 mmol de cloruro de metansulfonilo en 60 mi de cloruro de metileno, se agregó 0.81 g, 8.1 mmol de trietilamina con agitación. Después de tres horas a 0°C, la mezcla se lavó dos veces con HC1 1 M y una vez con agua, se secó en a2S04 y se evaporó. El producto se pudo utilizar sin purificación adicional. Rendimiento: 1.61 g (89%). NMR XH (300 MHz, CDCL3) : d 7.29 (m, 2H) , 5.33 (s, 2H) , 3.07 (s, 3H) . • (v) 4-Azidometi1-2 , 6-difluorobenzonitrilo Una mezcla de 1.61 g, 6.51 mmol { ver paso (iv) anterior) de metansulfonato de 4-ciano-2, 6-difluorobencilo y 0.72 g, 0.0111 mol de azida de sodio en 10 mi de agua y 20 mi de DMF, se agitó a temperatura ambiente toda la noche. El producto resultante se vació posteriormente en 200 mi de agua y se extrajo tres veces con éter dietílico. La fase etérea combinada se lavó cinco veces con agua, se secó en Na2S04 y se evaporó. Una pequeña muestra se evaporó para fines de NRM y el producto se cristalizó. El resto se evaporó cuidadosamente pero no hasta -la sequedad completa. Se asumió que el rendimiento (teóricamente 1.26 g) es casi cuantitativo con base en NMR y HPLC analítica. NMR ½ (400 MHz, CDCL3) : d 7.29 (m, 2H) , 4.46 (s,2H). (vi } 4-Aminometil-2 6-difluorobenzonitrilo Esta reacción se llevó a cabo de acuerdo al procedimiento descrito en J. Chem. Res. (M) (1992) 3128. A una suspensión de 520 mg de Pd/C al 10% (50% de humedad) en 20 mi de agua, se agregó una solución de 0.834 g, 0.0221 mol de borohidruro de sodio en 20 mi de agua. Resultó la evolución de algo de gas. Se disolvió 1.26 q, 6.49 mmol (ver paso (v) anterior) de 4-Azidometil-2 , 6-difluorobenzonitrilo en 50 mi de THF y se agregó a la mezcla acuosa en un baño de hielo durante 15 minutos. La mezcla se agitó por 4 horas, después de esto se agregó 20 mi de HC1 2 M y la mezcla se filtró a través de Celite. El celite se enjuagó con más agua y la fase acuosa combinada se lavó con EtOAc y subsecuentemente se hizo alcalina con NaOH 2 M. La extracción tres veces con cloruro de metileno seguido y la fase orgánica combinada se lavó con agua, se secó en Na2S04 y se evaporó. Rendimiento: 0.87 g (80%). NMR ? (400 MHz, CDCI3) : d 7.20 (m, 2H) , 3.96 (s, 2H) , 1.51 (amplio, 2H) . (vii) - 2, 6-Difluoro-4-ter-butoxicarbonilaminometilbenzonitrilo Una solución de 0.876 g, 5.21 mmol (ver paso (vi) anterior) de 4-aminometil-2, 6-difluorobenzonitrilo se disolvió en 50 mi de THF y se agregó 1.14 g, 5.22 mmol de dicarbonato de di-ter-butilo en 10 mi de THF. La mezcla se agitó por 3.5 horas. El THF se evaporó y el residuo se dividió entre agua y EtOAc. La capa orgánica se lavó tres veces con HC1 0.5 M y agua, se secó en Na2S04 y se evaporó. El producto se pudo utilizar sin purificación adicional. Rendimiento: 1.38 g (99%). NMR XH (300 MHz, CDCL3) : 5 7.21 (m, 2H) , 4.95 (amplio, 1H) , 4.43 (amplio, 2H) , 1.52 (s, 9H) . (viii) Boc-Pab (2, 6-diF) (OH) Una mezcla de 1.38 g, 5.16 mmol (ver paso (vii) anterior) de 2, 6-difluoro-4-ter-butoxicarbonilaminometilbenzonitrilo, 1.08 g, 0.0155 mol de clorhidrato de hidroxilamina y 1.57 g, 0.0155 mol de trietilamina en 20 mi de etanoi, se agitó a temperatura ambiente por 36 horas. El solvente se evaporó y el residuo se dividió en agua y cloruro de metileno. La capa orgánica se lavó con agua, se secó en Na2S04 y se evaporó. El producto se pudo utilizar sin purificación adicional. Rendimiento: 1.43 g (92%). - NMR XH (500 MHz, CD3OD) 8 7.14 (m, 2H) , 4.97 (amplio, 1H) , 4,84 (amplio, 2H), 4.40 (amplio, 2H) , 1.43 (s, 9H) . (ix) Boc-Pa (2, 6-diF) x HOAc Esta reacción se llevó a cabo de acuerdo al procedimiento descrito por Judkins et al, Synth. Comm. (1998) 4351. 1.32 g, 4.37 mmol (ver paso (viii) anterior) de Boc-Pa ( 2 , 6-diF) (OH) , 0.477 g, 4.68 mmol de anhídrido acético y 442 mg de Pd/C al 10% (50% de humedad) en 100 mi de ácido acético, se hidrogenó a presión de 5 atmósferas por 3.5 horas. La mezcla se filtró a través de Celite, se enjuagó con etanoi y se evaporó. El residuo se liofilizó a partir de acetonitrilo y agua y unas pocas gotas de etanoi. El producto del subtítulo se pudo utilizar sin purificación adicional. Rendimiento: 1.49 g (99%). MR lH (400 MHz, CD3OD) 6 7.45 (m, 2H> , 4.34 (s, 2H) , 1.90 (s, 3H) , 1.40' (s, 9H) . (x) Boc-Pab (2, 6-diF) (teoc) A una solución de Boc-Pab (2, 6-diF) x HOAC (1.56 g, 5.49 mmol; ver paso (ix) anterior) en 100 mi de THF y 1 mi de agua, se agregó 1.67 g, 5.89 mmol de p-nitrofenil-carbonato de 2- (trimetilsilil ) etilo . Se agregó gota a gota en 5 minutos una solución de 1.57 g, 0.0114 mol de carbonato de potasio en 20 mi de agua. La mezcla se agitó durante toda la noche. El THF se evaporó y el residuo se dividió entre agua y cloruro de metileno. La capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno y la fase orgánica combinada se lavó dos veces con bicarbonato de sodio acuoso, se secó en Na2SC> y se evaporó. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice con heptano/EtOAc = 2/1 dieron 1.71 g (73%) del compuesto puro. NMR XH (400 MHz, CDCL3) : d 7.43 (m, 2H) , 4.97 (amplio, 1H) , 4.41 (amplio, 2H), 4.24 (m, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.11 (m, 2H), 0.06 (s, 9H) . (xi) Boc-Aze-Pab (2, 6-diF) (Teoc) 1.009 g, 2.35 mmol (ver paso (x) anterior) de Boc-Pab (2, 6-diF) (Teoc) se disolvió en 50 mi de EtOAc saturado con HC1 (g) . La mezcla se dejó por 10 minutos, se evaporó y se disolvió en 18 mi de DMF, y luego se enfrió sobre un baño de hielo. Se agregaron 0.450 g, 2.24 mmol de Boc-Aze-OH; 1.24 g, 2.35 mmol de PyBOP y finalmente 1.158 g, 8.96 mmol de diisopropiletilamina. La mezcla de reacción se agitó por dos horas y después, se vació en 350 mi de agua y se extrajo 3 veces con 'EtOAc. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera/ se secó en Na2S04 y se evaporó. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice con ept.ano : EtOAc (1:3) dieron 1.097 g (96%) del compuesto deseado. XH NMR (500 MHz, CDCL3) d 7.46 (m, 2H) , 4.65-4.5 (m, 3H) , 4.23 (m, 2H), 3.87 (m, 1H) , 3.74 (m, 1H), 2.45-2.3 (m, 2H) , 1.40 (s, 9H), 1.10 (m, 2H) , 0.05 (s, 9H) . (xii) Ph( 3-C1 ) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) -Aze-Pa (2,6-diF) (Teoc) 0.256 g, 0.500 mmol (ver paso (xi) anterior) de Boc-Aze-Pab (2, 6-diF) (Teoc) se disolvió en 20 mi de EtOAc saturado con HCl(g). La mezcla se dejó por 10 minutos y se evaporó y se disolvió en 5 mi de DMF. Se agregaron 0.120 g, 0.475 mmol (ver preparación A(viii) anterior) de Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)OH, 0.263g, 0.498 mmol de PyBOP y finalmente 0.245 g, 1.89 mmol de diisopropiletilamina. La mezcla de reacción se agitó por dos horas y luego se vació en 350 mi de agua y se extrajo tres veces con EtOAc . La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó en Na2S04 y se evaporó. La cromatografía instantánea sobre gel de sílice con EtOAc dio 0.184 g (60%) del compuesto del subtitulo deseado. NMR ?? (400 MHz, CD3OD, mezcla de rotámeros) d 7.55-7.45 (m, 2H) , 7.32 (m, 1H, rotámero mayor), 7.27 (m, 1H, . rotámero menor), 7.2-7.1 (ra, 2H) , 6.90 (t, 1H, rotámero mayor), 6.86 (t, 1H, rotámero menor), 5.15 (s, 1H, rotámero mayor), 5.12 (m, 1H, rotámero menor), 5.06 (s,. 1H, rotámero menor), 4.72 (m, 1H, rotámero mayor), 4.6-4.45 (m, 2H), 4.30 (m, 1H, rotámero mayor), 4.24 (m, 2H), 4.13 (m, 1H, rotámero mayor), 4.04 (m, 1H, rotámero menor), 3.95 (m, 1H, rotámero menor), 2.62 (m, 1H, rotámero menor), 2.48 (m, 1H, rotámero mayor), 2.22 (m, 1H, rotámero mayor), 2.10 (m, 1H, rotámero menor), 1.07 (m, 2H) , 0.07 (m, 9H) . (xiii) Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(2, 6-diF) (OMe,Teoc) Una mezcla de P ( 3-C1) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) -Aze-Pab (2, 6-diF) (OMe, eoc) (64 mg, 0.099, mmol; ver paso (xii) anterior) y 50 mg, 0.60 mmol de clorhidrato de 0-meti1-hidroxilamina en 4 mi de acetonitrilo se calentó a 70°C por 3 horas. El solvente se evaporó y el residuo se dividió entre agua y acetato de etilo. La capa acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo y la fase orgánica combinada se lavó con agua, se secó (Na2S04) y se evaporó. El producto pudo ser utilizado sin purificación adicional. Rendimiento: 58 mg (87%). NMR XH (400 MHz, CDC13) d 7.90 (t amplio, 1 H) , 7.46 (m, 1H), 7.25-6.95 (m, 5H) , 6.51 (t, 1H), 4.88 (s, 1H) , 4.83 (m, 1H), 4.6-4.5 (m, 2H), 4.4-3.9 (m, 4H), 3.95 (s, 3H) , 3.63 (m, 1H), 2.67 (m, 1H) , 2.38 (m, 1H) , 1.87 (amplio, 1H), 0.98 (m, 2H), 0.01 (S, 9H) . (xiv) Compuesto B Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-Aze-Pab(2,6-diF) (OMe,Teoc) (58 mg, 0.086 mmol; ver paso (xiii) anterior) se disolvió en 3 mi de TFA, se enfrió en un baño de hielo y se dejó reaccionar por 2 horas. El TFA se evaporó y el residuo se disolvió en EtOAc. La capa orgánica se lavó dos veces con carbonato de sodio acuoso y agua, se secó en Na2S04 y se evaporó. El residuo se liofilizó a partir de agua y acetonitrilo para dar 42 mg (92%) del compuesto del titulo. NMR XH (300 MHz, CDC13) d 7.95 (bt, 1H) , 7.2.7.1 (m, 4H) , 6.99 (m, 1H), 6.52 (t, 1H) , 4.88 (s, 1H, ) , 4.85-4.75 (m, 3H), 4.6-4.45 (m, 2H) , 4.29 (amplio, 1H), 4.09 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.69 (m, 1H) , 2.64 (m, 1H) , 2.38 (m, 1H) , 1.85 (amplio, 1H) NMR C (100 MHz; CDC13) : carbonilo y/o carbonos de amidina) 6 172.1, 169.8, 151.9. APCI-MS: (M+l) = 533/535 m/z Preparación C: Preparación del Compuesto C (i) metansulfonato de (2-monofluoroetilo) A una solución agitada magnéticamente de 5.0 gramos, 78.0 nunol de 2-fluoroetanol en 90 mi de CH2C12 bajo atmósfera de nitrógeno a 0°C e agregó 23.7 g, 234 mmol de trietilamina y 10.7 g, 93.7 mmol de cloruro de metansulfonilo. La mezcla se agitó a ,0°C por 1.5 horas, se diluyó con CH2C12 y se lavó con 100 mi de HC1 2N. La capa acuosa se extrajo con 50 mi CH2C12 y los extractos orgánicos combinados se lavaron con 75 mi de salmuera, se secaron en Na2S04, se filtraron y se concentraron a vacío para proporcionar el compuesto del subtítulo (9.7 g, 88%) como un aceite amarillo que se utilizó sin purificación adicional. NMR XH (300 MH , CDC13) d 4.76 (t, J = 4 Hz, 1H) , 4.64 (t, J = 4 Hz, 1H) , 4.52 (t, J = 1 Hz, 1H) , 4.43 (t, J = 4 Hz, 1H; 3.09 (s, 3H) . ( ii) 3-cloro-5-monofluoroetoxibenzaldehído A una solución de 8.2 gramos preparación A (ii) anterior hidroxibenzaldehido y 9.4 gramos, 68.2 mmol de carbonato de potasio en 10 mi de DMF bajo atmósfera de nitrógeno, se agregó una solución de 9.7 gramos, 68.2 mmol; ver paso (i) anterior de metansulfonato de 2-monofluoroetilo en 120 de DMF gota a gota a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a 100 °C por 5 horas y luego se agitó toda la noche a temperatura ambiente. La reacción se enfrió a 0°C, se vació sobre HC1 2N enfriado con hielo y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SC>4, se filtraron y se concentraron a vació. El aceite' café se sometió a cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con HexrEtOAc (4:1) para proporcionar el compuesto del subtítulo (7.6 gramos 71%) como un aceite amarillo. NMR XH (300 MHz, CDC13) d 9.92 (s, 1H) , 7.48 (s, 1H) , 7.32 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 4.87 (t, J = 4 Hz, 1H) , 4.71 (t, J = 3 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 3 Hz, 1H) , 4.24 (t, J = 3 Hz, 1H) . (iii) Ph (3-C1) (5-OCH2CH2F)- (R,S) CH(0TMS)CN A una solución de 7.6 gramos, 37.7 mmol; ver paso (ii) anterior de 3-cloro-5-monofluoroetoxibenzaldehído y 3.0 gramos, 9.38 mmol de yoduro de zinc en 310 mi de CH2C12 se agregó 7.4 gramos, 75.0 mmol de cianuro de trimetilsililo gota a gota a 0°C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó a 0°C por 3 horas y a temperatura ambiente toda la noche. La reacción se diluyó con 300 mi de H20, la capa orgánica se separó, se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró a vacío para proporcionar el compuesto del subtítulo (10.6 gramos, 94%) como un aceite café que se utilizó sin purificación o caracterización adicional. (iv) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) (R, S ) CH (OH) C (O) OH Se agregó 100 mi de ácido clorhídrico concentrado a 10.6 gramos, 5.8 mmol ver paso (iíi) anterior de Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F) - (R, S) CH (OTMS) CN y la ' solución se agitó a 100 °C por 3 horas. Después de enfriamiento a temperatura ambiente, la reacción se enfrió adicionalmente a 0°C, se basificó lentamente con NaOH 3N (aproximadamente 300 mi) y se lavó con 3 porciones de 200 mi de Et2Ü. La capa acuosa se acidificó con 80 mi de HC1 2N y se extrajo con 3 porciones de 300 mi de EtOAc. Los extractos combinados de EtOAc se secaron sobre Na2S04, se filtraron y se concentraron a vacío para proporcionar el compuesto del subtítulo (8.6 gramos, 98%) como un sólido amarillo pálido que se utilizó sin purificación adicional. Rf = 0.28 (90:8:2 CHCl3MeOH : H4OH concentrado) MR ½ (300 MHz, CDC13) d 7.09 (s, 1H) , 7.02 (s, 1H) , 6.93 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.77-4.81 (m, 1H), 4.62-4.65 (m, 1H), 4.25-4.28 (m, 1H) , 4.15-15.18 (m, 1H) . (v) Ph(3-Cl) (5-OCH2CH2F)-(S)CH(OAc)C(Q)OE (a) y Ph ( 3-C1 ) ( 5- QCH2CH2F)-( )CH(OH)C(0)OH (b) Una solución de 8.6 gramos, 34.5 mmol; ver paso (iv) anterior de Ph ( 3-C1 ) (5-OCH2CH2F) - (Rf S ) CH (OH) C (0) OH y 4.0 gramos, de Lipase PS "Amano" en 250 mi de acetato de vinilo y 250 mi de MTBE se calentó a 70°C bajo atmósfera de nitrógeno por 3 días. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y la enzima se eliminó por filtración a través de Celite®. La torta filtro se lavó con EtOAc y el filtrado se concentró a vacio. La cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con CHCl3:MeOH:Et3N (90:8:2) proporcionó la sal de trietilamina del compuesto del subtítulo (a) como un aceite amarillo. Además, se obtuvo. 4.0 gramos de la sal de trietilamina del compuesto del subtítulo (b) . La sal del compuesto del subtítulo (b) se disolvió en 250 mi de H20, se acidificó con HCl 2N y se extrajo con 3 porciones de 200 mi de EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04, se filtraron y se concentraron a vacío para proporcionar el compuesto del subtítulo (b) (2.8 gramos, 32%) como un aceite amarillo.

Datos para el Compuesto del Subtítulo (b) : Rf = 0.28 (90:8:2 CHCl3:MeOH: concentrado NH4OH NMR XH (300 MHz, CDC13) d 7.09 (s, 1H) , 7.02 (s, 1H) , 6.93 <s, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.77-4.81 (m, 1H) , 6.62 4.65 (m, 1H), 4.25-4.28 (m, 1H) , 4.15-4.18 (m, 1H) . (vi) Compuesto C A una solución de 818 mg, 3.29 mmol; ver paso (v) anterior en 30 mi de Ph (3-C1) (5-0CH2CH2F) - (R) CH (OH.) C (O) OH en 30 mi DMF bajo atmósfera de nitrógeno a 0°C, se agregó 1.43 gramos, 4.27 mmol de HAze-Pab (OMe) «2HC1 (ver solicitud de patente internacional WO 00/42059), 1.89 gramos, 3.68 mmol de PyBOP, y 1.06 gramos, 8.23 mmol de DIPEA. La reacción se agitó a 0°C por 2 horas y luego a temperatura ambiente toda la noche. La mezcla se concentró a vacio y el residuo se sometió a cromatografía dos veces sobre gel de sílice, eluyendo primeramente con CHCl3:EtOH (15:1) y en segundo lugar con EtOAc: EtOH (20:1) para proporcionar el compuesto del título (880 mg, 54%) .

Rf = 0.60 (10:1 CHCl3:EtOH) NMR 1H (300 MHz, CD30D, mezcla de complejos de rotámeros) d 7.58-7.60 (d, J = 8 Hz, 2H) , 7.34 (d, J = 7 Hz, 2H) , 7.05-7.08 (m, 2H), 6.95-6.99 (m, 1H), 5.08-5.13 (m, 1H) , 4.77-4.82 (m, 1H), 4.60-4.68 (m, 1H), 3.99-4.51 (m, 7H) , 3.82 (s, 3H) , 2.10-2.75 (m, 2H) .

NMR 13C (150 MHz CD3OD) : (carbonilo y/o carbonos de amidina) d 173.3, 170.8, 152.5. APCI-MS: (M+l) = 493 m/z Ejemplos 1 y 2: Preparación de Sales del Compuesto A Ejemplo 1: Método General para la Preparación de Sal Se empleó el siguiente método genérico para preparar sales del compuesto A: 200 mg del Compuesto A (ver Preparación A anterior) se disolvieron en 5 mi de MeOH. A esta solución se agregó una solución del ácido relevante (1.0 equivalente molar) disuelto en 5 mi de MeOH. Después de agitar por 10 minutos a temperatura ambiente, el solvente se eliminó por medio de un evaporador rotatorio. El material sólido remanente se redisolvió en 8 mi de acetonitrilo:H20 (1:1). La liofilización proporcionó un material amorfo incoloro en cada caso. Ácidos empleados : (1S) - (+) -10-canforsulfónico málico ciclohexilsulfámico fosfórico dimetilfosfórico p-toluensulfónico L-lisina clorhidrato de L-lisina sacarinico · metansulfónico clorhídrico En la' tabla 1 se muestran los datos de caracterización apropiados.

Tabla 1 Sal PM ácido Pm sal LRMS ? ppm (MeOD) H18, H19, H24 (ver estructura al final del Ejemplo 9 más adelante) (1 S)-(+)- 10-canforsulfonato 232.20 729.20 230.9 7.57, 7.68, 3.97 495.1 497.0 727.3 Maleato 116.07 612.97 114.8 7.45, 7.64, 3.89 495.1 497.0 Ciclohexil-sulfamato 179.24 676.14 177.9 7.44, 7.64, 3.89 495.1 496.9 Clorhidrato 36.46 533.36 495.1 7.55, 7.67, 3.95 496.9 531.1 532.5 535.2 Todas las sales formadas en este Ejemplo fueron amorfas.

Ejemplo 2 Las sales amorfas adicionales del Compuesto A se producen utilizando técnicas similare's a las descritas en el Ejemplo 1 anterior, a partir de los siguientes ácidos: Ácido bromhídrico (sal 1:1) Ácido clorhídrico (sal 1:1) Ácido sulfúrico (sal 1:0.5) Ácido 1 , 2-etandisulfónico (sal 1:0.5) Ácido lS-canforsulfónico (sal 1:1) Ácido {+/-) -canforsulfónico (sal 1:1) Ácido etansulfónico (sal 1:1) Ácido nítrico (sal 1:1) Ácido toluensulfónico (sal 1:1) Ácido metansulfónico (sal 1:1) Ácido p-xilensulfónico (sal 1:1) Ácido 2-mesitilensulfónico (sal 1:1) Ácido 1, 5-naftalensulfónico (sal 1:0.5) Ácido naftalensulfónico (sal 1:1) Ácido bencensulfónico (sal 1:1) Ácido sacarinico (sal 1:1) Ácido maleico (sal 1:1) Ácido fosfórico (sal 1:1) Ácido D-glutámico (sal 1:1) Ácido L-glutámico (sal 1:1) Ácido D, L-glutámico (sal 1:1) L-arginina (sal 1:1) L-lisina (sal 1:1) Clorhidrato de L-lisina (sal 1:1) Glicina (sal 1:1) Ácido salicilico (sal 1:1) Ácido tartárico (sal 1:1) Ácido fumárico (sal 1:1) Ácido cítrico (sal 1:1) Ácido L-(-)-málico (sal 1:1) Ácido D, L-glutámico (sal 1:1) Ácido D-glucónico (sal 1:1) Ejemplo 3: preparación de Compuesto Amorfo A, sal de ácido etansulfónico 203 mg, ver preparación A anterior del compuesto A se disolvieron en 3 mi de etanol y ácido etansulfónico (1 equivalente, 95%, 35 µ?) se agregó a la solución. La mezcla se agitó por unos pocos minutos, y luego se evaporó el solvente. El aceite resultante se convirtió en suspensión en iso-octano y se evaporó hasta sequedad hasta que se obtuvo un material sólido. Finalmente, la sustancia se volvió suspensión en iso-octano y el solvente se evaporó nuevamente, dando como resultado un sólido amorfo, anhidro, blanco. La sustancia se secó a . vacio a 40°C toda la noche.

Ejemplos 4 al 9 : preparación del Compuesto A Cristalino, sal de ácido etansulfónico Ejemplo 4: cristalización de Material Amorfo El Compuesto A Amorfo, la sal de ácido etansulfónico (17.8 mg; ver Ejemplo 3 anterior) se convirtió en suspensión metil-iso-butil-cetona (600 µ?) . Después de 1 semana se observaron agujas cristalinas, las cuales se filtraron y se secaron al aire.

Ejemplos 5 al 7 : Cristalizaciones de Reacción (sin antisolvente) Ejemplo 5 277 mg, (ver preparación A anterior del Compuesto A) se disolvieron en 3.1 mi de metil-iso-butil-cetona. Se agregó ácido etansulfónico (1 equivalente, 95%, 48 µ?) . Ocurrió inmediatamente ia precipitación de la sal de etansulfonato amorfo. Se agregó 6 mi más de metil-iso- butil-cetona y la suspensión se trató con ultrasonido. Finalmente, se agregó una tercera porción de 3.6 mi de metil-iso-butil-cetona y luego la suspensión se dejó toda la noche con agitación (agitador magnético). Al siguiente dia, la sustancia se transformó en agujas cristalinas. La suspensión se filtró, se lavó con 0.5 mi de metil-iso-butil-cetona y se secó al aire.

Ejemplo 6 El Compuesto A (236 mg; ver preparación A anterior) se disolvió a temperatura ambiente en 7 mi de metil-iso-butil-cetona. Se mezcló un equivalente, 41 µ? de ácido etansulfónico con 2 mi de metil-iso-butil-cetona en un frasco. La solución del Compuesto A se sembró con el compuesto A cristalino, la sal de ácido etansulfónico (ver Ejemplos 4 y 5 anteriores) . Posteriormente, se agregó 250 µ? de la solución de metil-iso-butil-cetona de ácido etansulfónico en porciones durante 45 minutos. La solución se sembró nuevamente, y la temperatura se incrementó a 30°C. Posteriormente, se agregó 500 µ? de la solución de metil-iso-butil-cetona en aproximadamente 1 hora. La suspensión resultante se dejó toda la noche antes de que se agregara una cantidad final de la solución de metil-iso-butil-cetona/ácido en 20 minutos. El frasco se enjuagó con 1.5 mi de metil-iso-butil-cetona, que se agregó a la suspensión. Después de un periodo adicional de 6 horas, los cristales se filtraron, se lavaron con 2 mi de metil-iso-butil-cetona y se secaron a presión reducida a 40 °C. Se obtuvo un total de 258 mg de sal cristalina, que corresponde a un rendimiento de aproximadamente 87%.

Ejemplo 7 El compuesto A (2.36 gramos, ver Preparación A anterior) se disolvió en 90 mi de metil-iso-butil-cetona. 10 mg de cristales sembrados del compuesto A, sal de ácido etansulfónico (ver Ejemplos 4 a 6 anteriores) se agregaron a la solución, y luego se agregó 40 µ? de ácido etansulfónico en dos porciones. Posteriormente se agregaron 12 mg de cristales sembrados adicionales y 2 porciones de ácido etansulfónico (2 x 20 µ?) . La suspensión se diluyó con 15 mi metil-iso-butil-cetona antes de que se continuara la adición de ácido etansulfónico. Se agregó una cantidad total de 330 µ? de ácido etansulfónico, en porciones, durante 1 hora. Una pequeña cantidad de cristales sembrados se agregaron, y finalmente, la suspensión se dejó toda la noche con agitación. El siguiente día, los cristales se filtraron, se lavaron con dos porciones de 6 mi de metil-iso-butil-cetona y se secaron bajo presión reducida a 40°C. Después del secado, se obtuvo un total de 2.57 gramos de producto cristalino blanco correspondiente a un rendimiento de 89%.

Ejemplos 8 y 9: Cristalizaciones de Reacción (con antisolvente ) Ejemplo 8 El compuesto A (163 mg, ver preparación A anterior) se disolvió en 1.2 mi de isopropanol. La solución se calentó a 35°C. Se agregó 28 µ? de ácido etansulfónico. Posteriormente, se agregó 4.8 mi de acetato de etilo y la solución se sembró con el compuesto A cristalino la sal de ácido etansulfónico (ver Ejemplos 4 a 7 anteriores) . La cristalización comenzó casi inmediatamente. La suspensión se dejó por aproximadamente 80 minutos a 35°C antes de que se dejara enfriar a temperatura ambiente (21°C) . Dos horas más tarde, los cristales se filtraron se lavaron tres veces con acetato de etilo (3 x 0.4 mi), y se secaron bajo presión reducida a 40°C. Se obtuvo un total de 170 mg del producto cristalino del título, que corresponde a un rendimiento de aproximadamente 82% . · Ejemplo 9 El compuesto A (20.0 gramos; ver preparación A anterior) se disolvió en 146.6 mi de iso-propanol a 40°C y se agregó a la solución 3.46 mi, 95%, 1 equivalente de ácido etansulfónico . A la solución clara resultante, se agregaron cristales sembrados del compuesto A, sal de ácido etansulfónico (50 mg ver Ejemplos - 4 a 8 anteriores). Posteriormente, se agregó 234 mi de acetato de etilo en 10 minutos. La solución ligeramente opaca, resultante se sembró una vez más (70 mg) y se dejó por una hora a 40°C con agitación para dejar que iniciara la cristalización. Después de esto, se agregó un total de 352 mi de acetato de etilo a una velocidad constante durante una hora. Cuando se hubo agregado todo el acetato de etilo, la suspensión se dejó por una hora, antes de que se enfriara a 21 °C en 2 horas. La cristalización se dejó continuar por 1 hora a 21 °C antes de que los cristales se filtraran, se lavaron dos veces con acetato de etilo (50 mi + 60 mi) y finalmente, se secaron bajo presión reducida a 40°C toda la noche. Se obtuvo un total de 21.6 gramos de una sal cristalina blanca, correspondiente a un rendimiento de aproximadamente 9C%. El compuesto A, la sal de ácido etansulfónico se caracterizó por NMR como sigue: 23 mg de la sal se disolvieron en troscopy con 0.7 mi de metanol deuterado.

Se utilizaron experimentos de NMR en una combinación de ID (¾, 13C y NOE selectivo) y 2D (gCOSY, gHSQC y gHMBC) . Todos los datos estuvieron en concordancia con la estructura teórica de la sal, mostrada más adelante. La molécula existe en dos conformaciones en metanol. Con base en la integral del pico asignado a H5 (conformador dominante) y el pico asignado a H5' (otro conformador), se encontró que la relación entre los dos conformadores es de 70:30. No se pudo observar H22 ya que estos protones estuvieron en intercambio rápido con el solvente CD3OD.

Ambas resonancias de protones y de carbono que corresponden a la posición i se , dividen debido al acoplamiento por giro con los dos núcleos de flúor en esa posición. Las constantes de acoplamiento son 2JHF=73 HZ y 1JCF=263 Hz. Las correlaciones de asignación de desplazamiento químico y protón-protón de NMR 1H y 13C se muestran en la Tabla 2.

Tabla 2 cs=singulete, t=triplete, m=multiplete, br=amplio, d=doblete dobtenido en el experimento gCOSY ela resonancia es un triplete debido al acoplamiento con los dos núcleos de flúor. 1JCF=263 HZ. HRMS calculado para C24H29CIF2 4O8S (M-H ) ~ 605.1284, encontrado 605.1296. Los cristales del Compuesto A, la sal de ácido etansulfónico (obtenida por medio de uno o más de los Ejemplos 4 a 9 anteriores) se analizaron por XRPD y los resultados se muestran en seguida (Tabla 3) y se muestran en la Figura 1.

Tabla 3 Valor d (A). Intensidad (%) Intensidad 16.5 10 m 12.2 74 vs 11.0 4 w 9.0 33 s 8.3 3 w 7.6 6 w 6.4 4 w 6.2 12 m 6.0 7 m DSC mostró una endoterma con una temperatura de inicio de fusión extrapolada de aproximadamente 131 °C. TGA mostró una disminución en la masa de aproximadamente 0.2% (p/p> alrededor del punto de fusión. El análisis DSC repetido con una muestra de contenido de solvente menor mostró una temperatura de inicio de fusión de aproximadamente 144 °C.

Ejemplo 10: Preparación de Compuesto A, sal de ácido bencensulfónico El compuesto A (199 mg; ver preparación A anterior) se disolvió en 2 mi de etanol. Se disolvió un equivalente, 90%, 70 mg de ácido bencensulfónico en 1 mi de etanol en un frasco. La solución de etanol del ácido se agregó a la solución del Compuesto A y el frasco se enjuagó con 1 mi de etanol, el cual se agregó a la mezcla. La mezcla se agitó por pocos minutos, y luego el etanol se evaporó hasta que se formó ün aceite. Se agregó 3 mi de acetato de etilo y el solvente se evaporó nuevamente hasta sequedad. Se formó un sólido amorfo.

Ejemplos 11 a 13: Preparación del Compuesto A cristalino, sal de ácido bencensulfónico Ejemplo 11: Cristalización de Material Amorfo El compuesto A amorfo, sal de ácido bencensulfónico (20.7 mg; ver Ejemplo 10 anterior) se convirtió en suspensión en 600 µ? de acetato de etilo. Después de 5 dias, se observaron en la suspensión agujas cristalinas.

Ejemplos 12 y 13: Cristalizaciones de Reacción Ejemplo 12 El compuesto A (128 mg; ver preparación A anterior) se disolvió en 3 mi de acetato de etilo. La solución se sembró con la suspensión del Ejemplo 11 anterior. Posteriormente, se agregó ácido bencensulf nico (1 equivalente, 90%, 45 mg) . Ocurrió inmediatamente la precipitación del ácido bencensulfónico. Se agregó isopropanol a la suspensión (0.8 mi) y la mezcla se sembró nuevamente. Dos dias más tarde, la sustancia se transformó en agujas cristalinas. La suspensión se filtró, se lavó con 3 porciones de 0.2 mi de acetato de etilo y se secó por un tiempo corto a vacio a 40°C. Se obtuvo un total de aproximadamente 140 mi .del sólido blanco.

Ejemplo 13 El compuesto A (246 mg;- ver preparación A anterior) se disolvió en 1.52 mi de isopropanol. Se agregó 88 mg, 90% de ácido bencensulfónico. A la solución clara, se agregó 3 mi de acetato de etilo, y luego la mezcla se sembró para iniciar la cristalización. Después de 1 hora, se agregó más acetato de etilo (2.77 mi). Finalmente, la suspensión se dejó cristalizar toda la noche, antes de que los cristales se filtraran, se lavaran con 3 porciones de 0.3 mi de acetato de etilo y se secaran a 40°C al vacío. Se obtuvo un total de 279 mg de sal, que corresponde a un rendimiento de aproximadamente 86%. El compuesto A, la sal de ácido bencensulfónico se caracterizó por NMR como sigue: 20 mg de la sal se disolvieron en 0.7 mi de metanol deuterado. Se utilizaron experimentos de NMR en una combinación de ID (??, 13C y NOE selectivo) y 2D (gCO'SY, gHSQC y gHMBC) . Todos los datos estuvieron en concordancia con la estructura teórica de la sal, mostrada más adelante. La molécula existe en dos conformaciones en metanol. Con base en la integral del pico asignado a H12 (conformador dominante) y el pico asignado a H12' (otro conformador), la relación entre los dos conformadores se encontró que era 70:30. No se pudo observar H22 ya que estos protones estuvieron en intercambio rápido con el solvente CD3OD.

Ambas resonancias de protones y de carbono correspondientes a la posición 1 se dividen, debido al acoplamiento por giro con los dos núcleos de flúor en esa posición. Las constantes de acoplamiento son 2JHF=74 HZ y 1JCF=260 Hz. Las correlaciones de asignación de desplazamiento químico y protón-protón de MR XH y 13C se muestran en la Tabla 4. aRelativo a la resonancia del solvente* a 49.0 ppm. bRelativo a la resonancia del solvente a 3.30 ppm. cs=singulete, t=triplete, m=multiplete, br=amplio, d=doblete. dObtenido en el experimento gCOSY eLa resonancia es un triplete debido al acoplamiento con los dos núcleos de flúor. 1JCF=260 HZ. fdificultad de conectividad para determinarse debido al traslape entre la resonancia 102 y 103 HRMS calculado para C28H29CIF2 4O8S (?-?G 653.1284, encontrado 653.1312. Los cristales del Compuesto A, sal de ácido bencensulfónico (obtenida por medio de uno o más de los ejemplos 11 a 13 anteriores) se analizaron por XRPD y los resultados se tabulan en seguida (Tabla 5) y se muestran en la Figura 2.

Tabla 5 Valor d (Á) Intensidad (%) Intensidad 14. 12 m 12.6 55 s 10.2 49 s 7.5 8 m 6.4 5 w 6.3 30 s 6.1 5 w 5.9 100 vs 5.7 20 m 5.4 9 m 5.3 11 m 5.1 10 m 4.96 3 w 4.83 27 s 4.73 72 s .54 23 s .50 10 m .35 28 s .30 38 s 4.24 24 s 4.17 28 s 4.09 60 vs 4.08 61 s 3.96 29 s 3.91 15 m 3.77 22 s 3.62 11 m 3.52 20 m 3.31 44 s 3.19 8 m 3.15 11 m 3.09 8 m 3.00 7 m 2.89 3 2.86 4 w 2.79 7 m 2.76 6 w 2.72 5 w 2.59 6 w 2.56 9 m 2.54 9 m 2.49 7 m 2.38 8 m 2.16 4 W Ejemplo 14: Preparación del Compuesto A amorfo, sal de ácido n-propansulfónico El compuesto A (186 mg; < ver Preparación A anterior) se disolvió en 1.39 mi de isopropanol y se agregó ácido n-propansulfónico (1 equivalente; 95%, 39 µ?) . Se agregó 5.6 mi de acetato de etilo y el solvente se evaporó hasta que se formó un sólido amorfo anhidro.

Ejemplos 15 y 16: Preparación del compuesto A cristalino, sal de ácido n-propansulfónico Ejemplo 15: Cristalización de Material Amorfo El compuesto A amorfo, sal de ácido n- propansulfónico (20 mg; ver _Ejemplo 14 anterior) se disolvió en 60 µ? de isopropanol y se agregó 180 µ? de acetato de iso-propilo. Se observaron agujas cristalinas después de tres días.

Ejemplo 16; Cristalización de Reacción El compuesto A (229 mg; ver Preparación A anterior) se disolvió en 1.43 mi de isopropanol. Se agregó ácido n-propansulfónico (1 equivalente; 95%, 48 µ?) . Se agregó 2 mi de acetato de etilo, y luego la solució se sembró con sal cristalina del Ejemplo 15 anterior. Se agregó 5 ral de acetato de etilo adicipnal y la suspensión se dejó cristalizar toda la noche. Los cristales se filtraron, se lavaron co 3 porciones de 0.3 ml.de acetato de etilo y se secaron a vacio a 40°C. - El compuesto A, sal de ácido n-propansulfónico se caracterizó por NMR como sigue: 13 mg de la sal se disolvió en troscopy de metanol deuterado (0.7 mi). Se utilizaron experimentos de NMR en una combinación de ID (1H y 13C) y 2D (gCOSY) . Todos los datos . estuvieron en concordancia con la estructura teórica de la sal, mostrada en seguida. La molécula existe en dos conformaciones en metanol. Con base en la integral del pico asignado a H12 (conformador dominante) y el pico asignado a H12' (otro conformador) , la relación entre los dos conformadores se encontró que era de 65:35. No se pudo observar H22 ya que estos protones estuvieron en intercambio rápido con el solvente CD3OD.

Ambas resonancias de protones y de carbono correspondientes a la posición 1 se dividen debido al acoplamiento por giro con los dos núcleos de flúor en esa posición. Las constantes de acoplamiento son 2JHF=74 HZ y 1JCF=260 Hz. Las correlaciones de asignación de desplazamiento químico y protón-protón de NMR 1H y 13C se muestran en la Tabla 6.

DSC mostró una endoterma con una temperatura de inicio de fusión extrapolada de aproximadamente 135°C. TGA no mostró disminución en la masa alrededor del punto de fusión.

Ejemplo 17 Ejemplo 17-A: Preparación del Compuesto A amorfo, sal de ácido n-butan-sulfónico Se disolvió 277 mg del. Compuesto A amorfo en 1.77 mi de IPA y se agregó ácido butan-sulfónico (aproximadamente 1 equivalente, 70 µ?) . Se agregó 6 mi de acetato de etilo y el solvente se evaporó hasta que se formó un sólido amorfo anhidro.

Ejemplo 17-B: Preparación del Compuesto A cristalino, sal de ácido butan-sulfónico El compuesto A amorfo, sal de ácido butan-sulfónico (71.5 mg; ver preparación anterior) se convirtió en suspensión en 500 µ? de acetato de etilo toda la noche. Los cristales se filtraron y se secaron al aire. El compuesto A, sal de ácido butansulfónico se caracterizó por NMR como sigue: 21.6 mg de la sal se disolvió en 0.7 mi de sulfóxido de dimetilo deuterado y se investigó con espectroscopia de NMR 1H y 13C. Los espectros son muy similares a otras sales en el mismo compuesto y están de acuerdo con la estructura mostrada en seguida. La mayoría de las resonancias en los espectros están presentes como conjuntos de dos picos debido a la rotación lenta alrededor del enlace C9-N10, lo que da como resultado dos atropisómeros que existen simultáneamente en la solución. Esto se muestra por otras sales del mismo compuesto.

Los dos núcleos de flúor en la posición 1 dan origen a resonancias divididas para el protón y el carbón en esa posición. Las constantes de acoplamiento son Hz y 1JCF=258 Hz. Los desplazamientos químicos para protones y carbonos se presentan en la Tabla 1. Los protones en la posición 22 y 24 no se detectan debido al intercambio químico. Existe una cresta muy amplia entre 8 y 9 ppm en el espectro de protones correspondiente a estos protones.

Tabla 8 Asignación de desplazamiento químico de NMR 1H 13C del Compuesto A, sal de n-butansulfonato en sulfóxido dimetilo deuterado a 25°C.

Relativo a lá resonancia del solvente a 49.0 ppm Relativo a la resonancia del solvente a 3.30 ppm s=singulete, d=doblete, dd=doblete de =triplete, m=multiplete. dla resonancia es un triplete . debido al acoplamiento con los dos núcleos de flúor Fl . 1JCF=258 Hz. eel acoplamiento 4JHH con los protones meta no se observó totalmente. na=no aplicable, nd=no determinado HRMS calculado para C26H32CI F2N4O8 S (M-H) " 633.1597, encontrado 633.1600.

Los cristales del Compuesto A, sal de ácido n- butansulfónico (obtenida como se describe anteriormente en el Ejemplo 17-B) se analizaron por XRPD y los resultados se tabulan en seguida (Tabla 9) y se muestran en la Figura 4.

Tabla 9 DSC mostró una endoterma con una temperatura de inicio de fusión extrapolada de aproximadamente 118 °C y TGA mostró una pérdida en peso aproximada de 0.04% entre 25 y 150°C.

Ejemplo 18: Preparación de sales del Compuesto B Ejemplo 18-A: Método General para Preparación de sal Se empleó el método genérico siguiente para preparar sales del compuesto B: 200 mg del compuesto B (ver preparación B anterior) se disolvió en 5 mi de MIBK (metil- isobutil-cetona) . A esta solución se agregó una solución del ácido relevante (1.0 o 0.5 equivalente molar, como se indica en la Tabla 10) disuelta en 1.0 mi de MIBK. Después de agitación por 10 minutos a temperatura ambiente, el solvente se eliminó por medio de un evaporador rotatorio. El material sólido remanente se redisolvió en aproximadamente 9 mi de acetonitrilo : H20 (1:1). La liofilización proporcionó un material amorfo incoloro en cada caso. Ácidos empleados: Esilato (ácido etansulfónico) Besilato (ácido bencen-sulfónico) Ciclohexilsulfamato Sulfato Bromuro p-toluensulfonato 2-naftalensulfonato Hemisulfato Metansulfonato Nitrato Clorhidrato Los datos de caracterización apropiados muestran en la Tabla 10 Tabla 10 Sal PM de ácido PM de sal MS ES- Esilato 110.13 643.01 108.8 531.1 641.0 Besilato 158.18 691.06 156.8 531.1 689.2 Ciclo exil-sulfamato 179.24 712.12 177.9 531.2 710.4 Sulfato 98.08 630.96 531.1 Bromuro 80.91 613.79 531.2 613.1 p-toluensulfonato 172.20 705.08 170.9 531.1 703.1 2-naftalensulfonato 208.24 741.12 206.9 531.1 739.3 Hemisulfato 98.07 1163.8 531.1 (1:2) 631.0 630.85 (1:1) Metansulfonato 96.11 628.99 531.1 627.1 Nitrato 63.01 595.89 531.0 569.0 Clorhidrato 36.46 569.34 531.0 569.0 Todas las sales formadas en este Ejemplo fueron amorfas - Ejemplo 18-B Las sales amorfas adicionales del compuesto B se produjeron utilizando técnicas análogas a las descritas en el Ejemplo 18-A anterior para los siguientes ácidos: 1 , 2-etandisulfónico (0.5 sal} IS-canforsulfónico (+/-) canforsulfónico p-xilensulfónico 2-mesitilensulfónico Sacarina Maleico Fosfórico D-glutámlco L-arginina L-lisina L-lisina * HC1 Ejemplo 18-C: Preparación de Compuesto B amorfo, sal del ácido hemi-1, 5-naftalensulfónico Se disolvió 110.9 mg de Compuesto B amorfo en 2.5 mi de 2-propanol y se agregó 0.5 equivalente de ácido 1,5-naftalen-disulfónico tetrahidratado (disuelto en 1 mi de 2-propanol). La muestra se agitó toda la noche. Solamente se observaron pequeñas partículas (amorfas) o gotas de aceite por el microscopio. La muestra se evaporó hasta sequedad.

Ejemplo 18-D: Preparación del Compuesto B Cristalino, sal de ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico El experimento de cristalización se llevó a cabo a temperatura ambiente. 0.4 gramos del compuesto B amorfo se disolvió en 1.5 mi de etanol y se agregó 0.5 equivalentes de ácido 1, 5-naftalen-disulfónico tetrahidratado (1.35 gramos, 10% en etanol). Posteriormente se agregó 0.7 mi de heptano hasta que la solución se volvió ligeramente turbia. Después de aproximadamente 15 minutos, la solución se volvió turbia. Después de aproxinadamente 30 minutos, la suspensión fluida se obtuvo y se agregó 1.3 mi de heptano adicional. La suspensión se dejó toda la noche para su maduración. Para diluir la suspensión espesa, se agregó una mezcla de etanol y heptano (1.5 mi y 1.0 mi respectivamente). Después de aproximadamente 1 hora, la suspensión se filtró y los cristales se lavaron con una mezcla de etanol y heptano (1.5:1) y finalmente con heptano puro. Los cristales sé secaron a temperatura ambiente en un' día. Los cristales secos pesaron 0.395 g.

Ejemplo 18-E: Preparación del Compuesto B cristalino, sal de ácido hemi-1 , 5-naftalendisulfónico Se disolvió 1.009 gramos del Compuesto B amorfo en 20 mi de 2-propanol + 20 mi de acetato de etilo. Se agregó gota a gota 351.7 mg de ácido 1 , 5-naftalen-disulfónico tetrahidratado, disuelto en 20 mi de 2-propanol. La precipitación ocurrió en aproximadamente 5 minutos. La suspensión se agitó toda la noche y luego se filtró.

Ejemplo 18-F: Preparación de Compuesto B Cristalino, sal de ácido hemi-1 , 5-naftalendisulfónico 430.7 mg de la sal de ácido 1, 5-naftalen-disulfónico se disolvió en 30 mi de 1-propanol. La solución se calentó a ebullición con el fin de disolver la sustancia. La solución se dejó toda la noche a temperatura ambiente para la cristalización y luego los cristales se filtraron.

Ejemplo 18-G: Preparación de Compuesto B Cristalino, sal de ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico El liquido madre, proveniente del Ejemplo 18-F se evaporó y el resto del sólido (61.2 mg) se disolvió en 6 mi de acetonitrilo/l-propanol, proporción 2:1. La solución se dejó toda la noche a temperatura ambiente para cristalizar y luego los cristales se filtraron.

Ejemplo 18-H: Preparación de Compuesto B Cristalino, sal de ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico La muestra del Ejemplo 18-C se disolvió en aproximadamente 2 mi de metanol . Se agregó aproximadamente 3 mi de etanol como antisolvente a temperatura ambiente y se agregaron las semillas. No ocurrió cristalización, de modo que los solventes se evaporaron (aproximadamente la mitad de la cantidad) y se agregó una nueva porción de aproximadamente 2 mi de etanol y semillas. Las partículas cristalinas se formaron cuando se agitó a temperatura ambiente durante la noche.

Ejemplo 18-1: Preparación de Compuesto B Cristalino, sal de ácido hemi-1 , 5-naftalendisulfónico Se disolvió 104.1 mg del Compuesto B amorfo en 2-propanol y se agregó 1 equivalente de ácido 1,5-naftalendisulfónico, disuelto en 2-propanol. En total, la cantidad de 2-propanol fue de aproximadamente 2.5 mi . La solución se agitó a 44 °C por aproximadamente 80 minutos y se formó un precipitado. Las partículas eran cristalinas de acuerdo a microscopía de luz polarizada. La muestra se filtró.

Ejemplo 18-J: Preparación de Compuesto B Cristalino, sal de ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico Se disolvió el Compuesto B, sal de ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico en 1.5 mi de metanol. Se agregó 3 i de metil-etil-cetona . Se agregaron semillas a la solución y comenzó la cristalización. Los cristales se filtraron, se lavaron con metil-etil-cetona y se secaron al aire.

Ejemplo 18-K: Preparación de Compuesto B Cristalino, sal de ácido hemi-1, 5-naftalendisulfonico Se disolvió 161.0 mg de Compuesto B amorfo en 3.5 mi de 1-butanol y la solución se calentó a 40°C. En otro vaso de laboratorio, 57.4 mg de ácido naftalen-disulfónico tetrahidratado se disolvió en 3 mi' de 1-butanol. Se agregaron un par de gotas de la solución ácida a la solución del Compuesto B. Posteriormente se agregaron semillas a la solución y después de 2 horas, el resto de la solución ácida se agregó lentamente a 40°C. En seguida la temperatura se disminuyó lentamente hasta la temperatura ambiente y el experimento se dejó con agitación toda la noche. La suspensión se filtró, se lavó con 1-butanol y se secó a vacío a 44 °C por 2 horas. El rendimiento fue de 83%.

Caracterización Los cristales del Compuesto B, sal de ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico, obtenido por medio del Ejemplo 18-D anterior, se caracterizaron por R como sigue: 21.3 mg de la sal se disolvió en metanol deuterado, se investigó 0.7 mi con espectroscopia NMR. Se utilizó una combinación de experimentos de NMR ID (XH, 13C y NOE selectivo) y 2D (gCOSY, gHSQC y gHMBC) . Todos los datos están en concordancia con la estructura propuesta, mostrada en seguida. Todos los carbonos y los protones acoplados a los carbonos se asignaron. Los protones acoplados a los heteroátomos se intercambiaron por deuterio del solvente y no se detectaron. La mayor parte de las resonancias en los espectros de NMR ID ¾ y 13C están presentes como conjuntos de dos picos.* La razón de esto es una lenta rotación alrededor del enlace C9-N10, lo que da como resultado dos atropisómeros que existen simultáneamente en la solución. El experimento ID NOE es una evidencia de esto. Cuando se irradia una resonancia de atropisómero, la saturación se transfiere al pico correspondiente del otro atropisómero. Las resonancias correspondientes al contraión 1 , 5-naftalendisulfonato no muestran atropisomerismo.

Existen cuatro átomos de flúor en la molécula. Éstos dan origen a resonancias divididas para algunos protones y carbonos. Ambas resonancias de protones y de carbonos correspondientes a la posición 1 se dividen debido al acoplamiento por giro con los dos núcleos de flúor en esa posición. Las constantes de acoplamiento son 2JHF=73 HZ y \ICF=263 Hz. Además, la resonancia de protones correspondiente a H19 es un doblete distorsionado con 3JHF=6.9 HZ debido al acoplamiento por giro con los núcleos de flúor en la posición 18. Las resonancias de carbono correspondientes a C17, C18, C19 y C20 también muestran acoplamientos con estos núcleos de flúor. Las resonancias de C17 y C20 son tripletes con Hz, respectivamente. La resonancia de C18 es un doblete de dobletes con constantes de acoplamiento 1JCF=251 HZ y 3JCF=8 Hz. La resonancia de C19 es un multiplete. Comparando las magnitudes de integrales para resonancias que corresponden al contraión 1,5- fLa resonancia es un triplete debido al acoplamiento a los dos núcleos de flúor F18. 2JCF=19 HZ. gLa resonancia es un doblete de dobletes debido al acoplamiento a los dos núcleos de flúor F18. 1JCF=251 Hz y ¾a resonancia es un multiplete debido al acoplamiento a los dos núcleos de flúor F18. kLa resonancia es un triplete debido al acoplamiento a los dos núcleos de flúor F18. 3JCF=11 Hz. nEl acoplamiento 4JHH con los protones meta no se resuelve totalmente. na=no aplicable, nd=no se determinó.

Los cristales del Compuesto B, sal de ácido hemi- 1 , 5-naftalendisulfónico (obtenido por medio del Ejemplo 18-I anterior, se analizaron por XRPD y los resultados se tabulan en seguida (Tabla 12) y se muestran en la Figura 5.

Tabla 12 Valor d (Á) Intensidad (%) Intensidad 18.3 99 s 12.5 22 s 9.9 22 s 9.1 67 vs 8.0 18 m 7.5 17 m 6.8 37 s 6.7 59 s 6.1 39 s 6.0 21 s 5.6 66 s 5.5 98 vs 4.94 48 s 4.56 59 s 4.39 35 s 4.27 33 s 4.13 81 s 4.02 87 s 3.86 88 vs 3.69 69 s 3.63 100 vs 3.57 49 s 3.48 53 s 3.23 35 s 3.19 · 43 s 3.16 38 s DSC mostró una endoterma con una temperatura de inicio de fusión extrapolada de aproximadamente 183°C y TGA mostró una pérdida en peso de 0.3% entre 25-110°C.

Ejemplo 19: sal de ácido Ph (3-C1) (5-0CHF?) - (R) CH (OH) C (0) -(S)Aze-Pab (OMe) N-metilmorfolina: NMM Tetrafluoroborato de 0- (1-H-benzotriazol-l-il) -1, 1,3,3-tetrametiluronio: TBTU A una solución agitada de 12.6 g, 50 mmol de Ph(3-Cl) (5-ÓCHF2) -[R)CH(OH)C(0)OH en 126 mi de acetato de etilo a 0°C se agrega 16.5 mi, 150 mmol de N-metilmorfolina, HAze-Pab (OMe) «2HC1 (16.8 g, 50 mmol; ver descripción del Compuesto C (vi) en la presente) y 16.7, 50 mmol de TBTU. La reacción se dejó calentar a temperatura y se agitó toda la noche. La mezcla de reacción se lavó con agua, solución de carbonato de potasio al 15% p/v, agua, salmuera y agua, se secó y se concentró. A la solución concentrada parcialmente de 115 mi de acetato de etilo se agrega una solución de 7.1 g, 45 mmol de ácido bencensulfónico en 38.4 mi de 2-propanol a 40°C. La solución se sembró y se agitó por 2 horas a 40°C seguido por agitación toda la noche a temperatura ambiente. Cuando se completa la precipitación de la sal de besilato, el producto se filtra, se lava y se seca a vacio a 40 °C, para proporcionar el compuesto del subtitulo (22.6 g, 69%).

Ejemplo 20; Ph ( 3-C1) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S) Aze-Pab (2, 6-diF) (OMe) La reacción de acoplamiento del Ejemplo 19 se puede repetir utilizando HAze-Pab (2, 6-diF) (OMe) , y el producto final precipita, por ejemplo, como la sal de ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico . A una solución agitada .de 10.6 g, 42 mmol de Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)OH en 66 mi de acetato de etilo a 0°C se agrega 6.2 g, 61.2 mmol de N-metilmorfolina, HAze-Pab (2, 6-diF) (OMe) (fácilmente preparado a partir de la prep. Cpd B (xi), 12.0 g, 38.2 mmol) y 15.3 g, 48 mmol de TBTU. La reacción se deja calentar a temperatura ambiente y se agita toda la noche. La mezcla de reacción se lava con agua, con dos porciones de solución de carbonato de potasio al 15% p/v, agua, salmuera, se seca y se concentra parcialmente. La solución se seca con 24 g de sulfato de sodio anhidro, el agente de secado se filtra y el filtrado se concentra hasta una espuma (12.2 g, 60%).

Abreviaturas acetilo ionización química a presión atmosférica (en relación a MS) ionización a presión atmosférica (en relación a MS) acuoso Aze (y (S)-Aze) (S) -azetidin-2-carboxilato ser que se especifique de otro modo ) ' ter-butiloxicarbonilo amplio (en relación a NMR) ionización química (en relación a MS) día(s) doblete (en relación a NMR) diciclohexil-carbodiimida doblete de dobletes (en relación a NMR) hidruro de di-isobutilaluminio diisopropiletilamina 4- (?,?-dimetilamino) piridina N, -dimetilformamida sulfóxido de dimetilo Calorimetría de exploración diferencial trombosis venosa profunda clorhidrato del- (3-dimetilaminopropil ) -3-etilcarbodiimida equivalentes electrorrocío interfaz de electrorrocío Et etilo éter éter dietilico EtOAc acetato de etilo EtOH etanol Et20 éter dietilico FT-IR espectroscopia de infrarrojo de transformación Fourier gCOSY espectroscopia correlacionada selectiva de gradiente gHMBC espectroscopia de correlación de enlace múltiple heteronuclear selectiva de gradiente gHSQC coherencia cuanto simple heteronuclear selectiva de gradiente HATU hexafluorofosfato de 0- (azabenzotriazol-l-il ) -?,?,?' ,?' - tetrametiluronio HBTU [hexafluorofosfato de ?,?,?',?'- tetrametil-O- (benzotriazol-l-il ) - uronio HC1 ácido clorhídrico, gas de cloruro de hidrógeno o sal de clorhidrato (dependiendo del contexto) Hex hexanos ácido acético cromatografía líquida de al resolución cromatografía líquida multiplete (en relación a NMR) metilo metano! minuto (s) estroscopia de masa éter ter-butílico de metilo mejoramiento' nuclear Overhauser resonancia magnética nuclear acetato para-amidinobencilamino para-amidinobencilamina paladio sobre carbono fenilo hexafluorofosfato c (benzotriazol-1-iloxi ) tripirrolidinofosfonio cuartete (en relación a NMR) fluoruro de tetrabutilamonio temperatura ambiente singulete (en relación a NMR) triplete (en relación a NMR) [tetrafluoroborato de ?,?, ?',?' tetrametil-O- (benzotriazol-1- il) uronio trietilamina 2- (trimetilsilil ) etoxicarbonilo radical libre 2, 2, 6, 6-tetrametil l-piperidiniloxi ácido trifluoroacético análisis termogravimétrico tetrahidrofurano cromatografía en capa delgada ultravioleta difracción de polvo de rayos X Los prefijos n-, s-, i-, t- y ter- tienen sus significados usuales: normal, secundario, iso, y terciario.

Los aspectos particulares se proporcionan en seguida: Cuando los aspectos se refieren a otros aspectos, esta referencia también incluye sub-aspectos. Por ejemplo, la referencia al aspecto 14 incluye la referencia a los aspectos 14 y 14A. 1. Una sal por adición de ácido, farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula I, en donde R1 representa alquilo de 1 a 2 átomos de carbono sustituido por uno o más sustituyentes . flúor; R2 representa alquilo de 1 a 2 átomos de carbono; y n representa 0, 1 ó 2. 2. Un compuesto como se describe en el aspecto 1, en donde el ácido es un ácido orgánico. 3. Un compuesto como se describe en el aspecto 2, en donde el ácido es un ácido sulfónico. 4. Un compuesto como se describe en el aspecto 3, en donde el ácido es ácido 1 , 2-etandisulfónico, un ácido canforsulfónico, ácido etansulfónico, un ácido propansulfónico, un ácido butansulfónico, un ácido pentansulfónico, un ácido toluensulfónico, ácido metansulfónico, ácido p-xilensulfónico, ácido 2-mesitilensulfónico, un ácido naftalensulfónico, ácido bencensulfónico, un ácido hidroxibencensulfónico, ácido 2- hidroxietansulfónico ó ácido 3- idroxietansulfónico . 5. Un compuesto como se describe en el aspecto 3, en donde el ácido es un ácido alcansulfónico de 1 a 6 átomos de carbono o un ácido arilsulfónico opcionalmente sustituido o un ácido arildisulfónico opcionalmente sustituido. 6. Un compuesto como se describe en el aspecto 4 ó aspecto 5, en donde el ácido es' ácido etansul ónico, ácido n-propansulfónico o ácido bencensulfónico. 6A. Un compuesto como se describe en el aspecto 4 Ó aspecto 5, en donde el ácido es ácido etansulfónico, ácido n-propansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido 1,5-naftalendisulfónico, o ácido n-butansulfónico. 7. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 6, en donde R1 representa -OCHF2 o -OCH2CH2F. 8. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 7, en donde R2 representa metilo. 9. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 8, en donde n representa 0 ó 2. 10. Un compuesto como se describe en el aspecto 9, en donde, cuando n representa 2, los dos átomos de flúor están localizados en las dos posiciones orto con relación al punto de acoplamiento del anillo de benceno al grupo -NH-C¾-. 11. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 10, en donde el compuesto de la fórmula I es Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-(S)Aze-Pab(OMe) . 12. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 10, en donde el compuesto de la fórmula I es Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-(S)Aze-Pab(2,6-diF) (O e) . 13. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 10, en donde el compuesto de la fórmula I es Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-(S)Aze-Pab(OMe) . 14. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 13, en forma sustancialmente cristalina. 14A. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 13, en forma parcialmente cristalina. 15. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 9, 11 ó 14, que es Ph (3-C1) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0)- (S)Aze-Pab(OMe) , sal de ácido etansulfónico. 16. Un compuesto como se describe en el aspecto 15, caracterizado por una curva de calorimetría de exploración diferencial, a una velocidad de calentamiento de 10°C/minuto en un recipiente cerrado con un orificio minúsculo bajo flujo de nitrógeno, que muestra una endoterma con una temperatura de inicio extrapolada de aproximadamente 131 °C; y/o un patrón de difracción de polvo de rayos X caracterizado por picos con valores d en 16.5, 12.2, 9.0, 7.6, 6.2, 6.0, 5.9, 5.5, 5.4, 5.1, 4.66, 4.60, 4.31, 4.25, 4.19, 4.13, 4.00, 3.87, 3.83, 3.76, 3.72, 3.57, 3.51, 3.47, 3.31, 3.26, 3.21, 3.03, 2.74, 2.56, 2.50, 2.46, y 2.21 Á, y/o esencialmente como se define en la Tabla 3 y/o en la Figura 1. 16A. Un compuesto como se describe en el aspecto 16, caracterizado por un patrón de difracción de polvo de rayos X caracterizado por picos con intensidad fuerte y muy fuerte como se define en la Tabla 3. 17. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 9, 11 ó 14, que es Ph (3-C1) (5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0)-(S)Aze-Pab(OMe) , sal de ácido bencensulfónico. 18. Un compuesto como se describe en el aspecto 17, caracterizado por una curva de calorimetría de exploración diferencial, a una velocidad de calentamiento de 10°C/minuto en un recipiente cerrado con un orificio minúsculo bajo flujo de nitrógeno, que muestra una endoterma con una temperatura de inicio extrapolada de aproximadamente 152°C; y/o un patrón de difracción de polvo, de rayos X caracterizado por picos con valores d en 14.2, 12.6, 10.2, 7.5, 6.4, 6.3, 6.1, 5.9, 5.7, 5.4, 5.3, 5.1, 4.83, 4.73, 4.54, 4.50, 4.35, 4.30, 4.24, 4.17, 4.09, 4.08, 3.96, 3.91, 3.77, 3.62, 3.52, 3..31, 3.19, 3.15, 3.09, 3.00, 2.79, 2.76, 2.72, 2.59, 2.56, 2.54, 2.49 y 2.38 Á, y/o esencialmente como se define en la Tabla 5 y/o en la Figura 2. 18A. Un compuesto como se describe en el aspecto 18, caracterizado por un patrón de difracción de polvo de rayos X caracterizado por picos con intensidad fuerte y muy fuerte como se define en la Tabla 5. 19. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 9, 11 ó 14, que es P (3-C1) (5-OCHF2) - (R)CH (OH) C(0) - (S) Aze-Pab (OMe) , sal de ácido n-propan-sulfónico. 20. Un compuesto como se describe en el aspecto 19, caracterizado por una curva de calorimetría de exploración diferencial, a una velocidad de calentamiento de 10°C/minuto en un recipiente cerrado con un orificio minúsculo bajo flujo de nitrógeno, que muestra una endoterma con una temperatura de inicio extrapolada de aproximadamente 135°C; y/o un patrón de difracción de polvo de rayos X caracterizado por picos con valores d en 12.4, 10.0, 7.5, 6.2, 5.8, 5.7, 5.4, 5.3, 4.78, 4.68, 4.51, 4.49, 4.40, 4.32, 4.29, 4.25, 4.19, 4.14, 4.07, 4.04, 3.94, 3.88, 3.73, 3.48, 3.28, 2.97, 2.54, 2.51 y 2.46 Á, y/o esencialmente como se define en la Tabla 7 y/o en la Figura 3. 20A. Un compuesto como se describe en el aspecto 20, caracterizado por un patrón de difracción de polvo de rayos X caracterizado por picos con intensidad fuerte y muy fuerte como se define en la Tabla 7. 20B. Un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 10, 12, 14 ó 14A, en donde el compuesto de la fórmula I es Ph ( 3-C1 ) (5-0CHF2) - (R) CH (OH) C (0) - (S )Aze- Pa (2, 6-diF) (OMe) , sal de ácido hemi-1,5-naftalendisulfónico. 20C. Un compuesto como ' se describe en el aspecto 20B, caracterizado por un patrón de difracción de polvo de rayos X caracterizado por picos con intensidad fuerte y muy fuerte como se define en la Tabla 12. 21. Un proceso para la preparación de un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 20, cuyo proceso comprende la adición de un ácido a un compuesto de la fórmula I como se define en el aspecto 1. 22. Un proceso para la preparación de un compuesto como se describe en el aspecto 14, o cualquiera de los aspectos 15 a 20 (en cuanto sea dependiente del aspecto 14), cuyo proceso comprende la cristalización de un compuesto como se describe en cualquiera de los aspectos 1 a 13. 23. Un proceso para la preparación de un compuesto como se describe en el aspecto 14, o cualquiera de los aspectos 15 a 20 (en cuanto sea dependiente del aspecto 14), cuyo proceso comprende un proceso como se describe en el aspecto 21 seguido por un proceso como se describe en el aspecto 22. 24. Un proceso como se describe en él aspecto 22 ó aspecto 23, que comprende la cristalización de un compuesto de un solvente. 25. Un proceso como se describe en el aspecto 24, en donde el solvente se selecciona del grupo: acetatos de alquilo inferior, alcoholes de alquilo inferior, cetonas de dialquilo inferior, hidrocarburos alifáticos e hidrocarburos aromáticos. 26. Un proceso como se describe en el aspecto 24, que comprende disolver un compuesto como se define en el aspecto 1 en forma amorfa en un solvente seleccionado del grupo de alcoholes de alquilo inferior, acetatos de alquilo inferior, cetonas de dialquilo inferior, y mezclas de los mismos, y cristalización subsecuente. 27. Un proceso como se describe en el aspecto 26, que comprende ya sea: (a) disolver el compuesto en un alcohol de alquilo inferior, y luego la adición de un acetato de alquilo inferior o una cetona de dialquilo inferior; o (b) disolver el compuesto en una mezcla de un alcohol de alquilo inferior y un acetato de alquilo inferior, o una mezcla de un alcohol de alquilo inferior y una una cetona de dialquilo inferior. 28. Un proceso como se describe en el aspecto 27, en donde los solventes se seleccionan del grupo: metil-iso-butil-cetona, iso-propanol, acetato de etilo, acetato de iso-propilo y mezclas de los mismos. 29. Un proceso como, se describe en el aspecto 24, que comprende un proceso como se describe en el aspecto 21, seguido por cristalización directa del compuesto así formado a partir de un sistema de solvente que comprende un acetato de alquilo inferior, una cetona de dialquilo inferior o un hidrocarburo. 30. Un proceso como se describe en el aspecto 29, en donde el sistema de solvente se selecciona del grupo: iso-propanol, acetato de iso-propilo, acetato de n-butilo, tolueno, metil-iso-butil-cetona, acetato de etilo y mezclas de los mismos. 31. Un proceso como se describe en el aspecto 24, que comprende pre-formar el compuesto de la fórmula I en un alcohol de alquilo inferior, seguido por la adición de un un acetato de alquilo inferior, una cetona de dialquilo inferior o un hidrocarburo. 31A. Un proceso como se describe en cualquiera de los aspectos 25 a 31, en donde el término alquilo inferior denota alquilo de 1 a , 4 átomos de carbono, lineal o ramificado. 32. Un proceso como se describe en el aspecto 31, en donde los solventes se seleccionan del grupo: metanol, etanol, iso-propanol, metil-iso-butil-cetona, acetato de n-butilo, tolueno, iso-octano, n-heptano, acetato de etilo y acetato de iso-propilo. 33. Un proceso para la preparación de un compuesto cristalino como se define en el aspecto 15 o el aspecto 16, que comprende formar como suspensión la sal preformada ya sea en metil-iso-butil-cetona o una mezcla de iso-propanol y acetato de etilo. 34. Un proceso para la preparación de un compuesto cristalino como se define en el aspecto 15 o el aspecto 16, que comprende agregar ácido etansulfónico (opcionaimente en la forma de una solución en metil-iso-butil-cetona) a una solución de Ph (3-C1) ( 5-OCHF2) - (R)CH(OH)C(0)-(S)Aze-Pab(OMe) en metil-iso-butil-cetona. 35. Un proceso para la preparación de un compuesto cristalino como se define en el" aspecto 15 o el aspecto 16, que comprende agregar ácido etansulfónico a una solución de Ph ( 3-C1 ) (5-OCHF2 )- (R) CH (OH) C (0) - {S ) Aze-Pab (OMe ) en iso-propanol y luego agregar acetato de etilo como antisolvente. 36. Un proceso para la preparación de un compuesto cristalino como se define en el aspecto 17 o el aspecto 18, que comprende formar como suspensión la sal preformada en acetato de etilo, metil-iso-butil-cetona o acetato de iso-propilo. 37. Un proceso para la preparación de un compuesto cristalino como se define en el aspecto 17 o el aspecto 18, que comprende agregar ácido bencensulfónico a una solución de Ph (3-C1) (5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) - (S)Aze-Pab (OMe) en acetato de etilo y luego agregar iso-propanol para facilitar la cristalización. 38. Un proceso para la preparación de un compuesto cristalino como se define en el aspecto 17 o el aspecto 18, que comprende agregar ácido bencensulfónico a una solución de Ph (3-C1) ( 5-OCHF2) - (R) CH (OH) C (0) - (S )Aze-Pab(OMe) en iso-propanol y posteriormente agregar acetato de etilo como antisolvente. 39. Un proceso para la preparación de un compuesto cristalino como se define en el aspecto 19 o el aspecto 20, que comprende formar como suspensión la sal preformada en una mezcla de iso-propanol y acetato de iso-propilo, o en una mezcla de iso-propanol y acetato de etilo. 40. Un proceso para la preparación de un compuesto cristalino como se define en el aspecto 19 o el aspecto 20, que comprende agregar ácido n-propansulfónico a una solución de Ph ( 3-C1) ( 5-0CHF2) - (R) CH (OH) C (O) - (S )Aze-Pab(OMe) en iso-propanol y posteriormente agregar acetato de etilo, o acetato de iso-propilo, como antisolvente. 41. Un compuesto obtenible por un proceso según cualquiera de los aspectos 21 a 40. 42. Un compuesto como se describe en cualquier de los aspectos 1 a 20 ó 41 para utilizarse como un medicamento . 43. Una formulación farmacéutica que incluye un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41 en mezcla con un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable. 44. Un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse como un producto farmacéutico. 45. Un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en el tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina . 46. Un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en el tratamiento de una condición en donde se indica la terapia anticoagulante. 47. Un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en el tratamiento de trombosis. 48. Un compuesto como se define- en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse como un anticoagulante . 49. El uso de un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, como un ingrediente activo para la fabricación de un medicamento para . el tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina. 50, El uso de un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, como un ingrediente activo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una condición en donde se indica la terapia anticoagulante . 51. El uso como se describe en el aspecto 49 o aspecto 50, en donde la condición es trombosis. 52. El uso como se describe en el aspecto 49 o aspecto 50, en donde la condición es hipercoagulabilidad en sangre y/o en tejidos. 53. El uso de un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, como un ingrediente activo para la fabricación de un anticroagulante . 54. Un método de tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina, cuyo método comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o. un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, a una persona que sufre de, o es susceptible a, tal condición. 55. Un método de tratamiento de una condición en donde se indica la terapia anticoagulante, cuyo método comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto como se define en cualquiera de los aspectos 1 a 20 ó 41, o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo, a una persona que sufre de, o es susceptible a, tal condición. 56. Un método como se describe en el aspecto 54 o el aspecto 55, en donde la condición es trombosis. 57. Un método como se describe en el aspecto 54 o el aspecto 55, en donde la condición es hipercoagulabilidad en sangre y/o en tejidos.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una sal por adición de ácido farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula 5 I, en donde R1 representa alquilo de 1 a 2 átomos de 0 carbono sustituido por uno o más sustituyentes flúor; R2 representa alquilo de 1 a 2 átomos de carbono; y n representa 0, 1 ó 2. 5

2. Una sal por adición de ácido según la rei indicación 1, en donde el ácido es un ácido sulfónico.

3. Una sal por adición de ácido según la reivindicación 1 ó la reivindicación 2, en donde el ácido C es ácido etansulfónico, ácido n-propansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido 1 , 5-naftalendisulfonico, o ácido n- butansulfónico .

4. Una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, . en donde R1 representa -OCHF2 ó -0CH2CH2F.

5. Una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 , . en donde R2 representa metilo.

6. Una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde n representa 0 6 2.

7. Una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, e donde el compuesto de la fórmula I es Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)- (S)Aze-Pab(OMe) o Ph(3-Cl) (5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(0)-(S)Aze-Pab(2,6-diF) (OMe) .

8. Una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en forma sustancialmente cristalina.

9. Una sal por adición ácido según cualquiera de las reivindicaciones 7 , en forma parcialmente cristalina.

10. Una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en donde n representa 0, en forma sustancialmente cristalina.

11. Una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 ó la reivindicación 9, en donde n representa 2, en forma parcialmente cristalina.

12. Una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 ó la reivindicación 10, que es sal de ácido bencensulfónico Ph{3-Cl) (5-OCHF2) - (R)CH(0H)C(0) - (S) Aze-Pab (OMe) , caracterizada por un patrón de difracción de polvo de rayos X caracterizado por picos de valores d en 5.9, 4.73, 4.09 y 4.08 A.

13. Una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, la reivindicación 9 ó la reivindicación 11, que es sal de ácido hemi-1, 5-naftalendisulfónico Ph (3-C1) (5-OCHF2) -(R) CH (OH) C (0) - (S) Aze-Pab (2, 6-diF) (OMe) , caracterizada por un patrón de difracción de polvo de rayos X caracterizado or picos con valores d en 18.3, 9.1, 5.6, 5.5, 4.13, 4.02, 3.86, 3.69, y 3.63 Á.

1 . Un proceso para la preparación de una sal por adición de ácido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, cuyo proceso comprende la adición de un ácido a un compuesto de la fórmula I como se define en la reivindicación 1.

15. Un proceso para la preparación de una sal por adición de ácido, según la reivindicación 14, cuyo proceso comprende cristalizar una sal por adición de ácido como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13.

16. Una formulación farmacéutica que comprende una sal por adición de ácido, según cualquiera de' las reivindicaciones 1 a 13, en mezcla con un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable.

17. Una sal por adición de ácido, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, para utilizarse en el tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina.

18. El uso de una sal por adición de ácido, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, como un ingrediente para fabricación de un medicamento para el tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina.

19. Un método de tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina, cuyo método comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal por adición de ácido, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, a una persona que sufre- de, o es susceptible a, tal condición.