CZ20014722A3

CZ20014722A3 - V podstatě krystalická forma melagatranu

Info

Publication number: CZ20014722A3
Application number: CZ20014722A
Authority: CZ
Inventors: Lena HEDSTRÖM; Anita Lundblad; Sofia Nagard
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 1999-07-02
Filing date: 2000-06-30
Publication date: 2002-05-15
Also published as: MY122760A; US6479078B1; EP1196431B1; EE200100646A; TWI250991B; HUP0202322A3; DE60030723T2; PT1196431E; TR200103855T2; ES2270849T3; AR035553A1; BR0012035A; CN1359389A; NO20016419L; HK1045529B; HUP0202322A2; SK18832001A3; NO20016419D0; NZ516187A; RU2243973C2

Description

Tento vynález se týká nových forem léčiva v tuhém stavu, farmaceutických prostředků s jejich obsahem a způsobů jejich výroby.

Dosavadní stav techniky

Ve formulaci léčivých prostředků je důležité, aby léčivá látka byla ve formě, ve které s ní může být příhodně zacházeno a ve které může být příhodně zpracována. To je důležité nejen z hlediska získání průmyslového výrobního způsobu, ale také z hlediska následné výroby farmaceutických prostředků obsahujících tuto aktivní sloučeninu.

Dále je při výrobě léčivých prostředků důležité poskytnout po podání pacientovi spolehlivý, reprodukovatelný a konstantní profil plasmatické koncentrace léčiva. To je obzvláště důležité při výrobě prostředků obsahujících antitrombotická činidla.

Chemická stabilita, stabilita v tuhém stavu a doba expirace aktivních činidel jsou rovněž velmi důležitými faktory. Léčivá látka a prostředky s jejím obsahem by měly být schopny efektivního skladování po významnou dobu, aniž by vykazovaly významnou změnu fyzikálně-chemických charakteristik aktivní složky (např. změnu chemického složení, hustoty, hygroskopicity a rozpustnosti).

·· · · · · · · ·· < · •999 9 9 · 9 9 9 «

99 99 9 ·'· · • 9 9 9999 999 ··· · · ·· ·9 99 9999

Navíc je důležité, aby bylo poskytnuto léčivo ve formě, která je chemicky co nej čistší.

Amorfní materiály mohou v tomto ohledu představovat významné problémy. S takovými materiály se například obtížně zachází a je obtížné je formulovat, vykazují nespolehlivou rozpustnost a~jsou často shledávány nestabilními a chemicky nečistými.

Odborník v oboru zjistí, že pokud lze léčivo snadno získat ve stabilní krystalické formě, mohou se výše uvedené problémy vyřešit.

Při průmyslové a farmaceuticky přijatelné výrobě léčivých prostředků je tedy důležité, kdekoli je to možné, poskytnout léčivo v podstatě v krystalické a stabilní formě.

Je však třeba poznamenat, že tohoto cíle nelze vždy dosáhnout. Ve skutečnosti obvykle není možné z molekulové struktury samotné předpovídat krystalizační chování sloučeniny. To lze stanovit pouze empiricky.

Mezinárodní patentová přihláška WO 94/29336 popisuje četné sloučeniny, které jsou užitečnými inhibitory serinpro^teas, jako je thrombin, včetně sloučeniny

HO₂C-CH₂-(R)-Cgl-(S)Aze-Pab-H kde Cgl představuje cyklohexylglycin, Aze představuje azetidin-2-karboxylat a Pab-H představuje 4-aminomethylamidinobenzen. Sloučenina je rovněž známa jako melagatran (glycin, N-[(IR))-2-[(2S)-2-[[[[4-(amino3 •· ·« ···· ·· · · • · · · » · · · · · « ··· · · · · · · • · ··· · · · · · · • · · · · · · · ·· • ·· · · ·· ·· · · ···· íminomethyl)fenyl]methyl]amino]karbonyl]-1-azetidínyl]-1cyklohexyl-2-oxoethyl]-).

Způsob syntézy této sloučeniny je popsán v příkladu 1 dokumentu WO 94/29336, kde se získá jako surový materiál odpařením reakčního rozpouštědla po konečném kroku odstranění chránící skupiny. Tato sloučenina se tak isoluje v amorfní formě.

Ve WO 94/29336 není popsáno, zda je možné získat melagatran v krystalické formě. Dále.není poskytnuta žádná informace týkající se toho, jak lze tuto sloučeninu získat v takové formě a, specifičtěji, jak ji lze získat v chemicky stabilní formě a/nebo ve stabilní formě v tuhém stavu.

Podstata vynálezu

Původci nalezli, že melagatran lze snadno zxskat v jedné nebo více formách, které jsou jak v podstatě krystalické, tak svou povahou stabilní.

Podle prvního aspektu tohoto vynálezu je tedy poskytnut melagatran v podstatě v krystalické formě (dále zde označovaný jako „sloučenina podle tohoto vynálezu) .

Ačkoliv původci nalezli, že je možné vyrobit melagatran ve formách, které jsou krystalické z více než 80 %, do pojmu „v podstatě krystalický se zahrnují formy, které jsou krystalické z více než 20 %, výhodně z víc<e než 30 % a výhodněji z více než 40 %. Stupeň (%) krystaliznity může odborník v oboru zjistit pomocí rentgenové difrakce v prášku (XPRD). Mohou být použity také další postupy, jako

- 4 • ·· ♦····· ·· ·· • · ♦ · · · · · « · « ··«··« · · « · · • · · · · · · ··· je NMR v tuhém stavu, FT-IR, Ramanova’spektroskopie,......

diferenciální skanovací kalorimetrie (DSC) a mikrokalorimetrie.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být ve formě solvátu, hydrátu nebo směsi solvát/hydrát. Solváty mohou být s jedním nebo více organickými rozpouštědly, jako jsou nižší alkanoly (např. alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku např. methanol, ethanol nebo isopropanol) nebo jejich směsi.

Původci nalezli, že sloučeniny podle tohoto vynálezu mají překvapivě zvýšenou stabilitu ve srovnání s melagatranem připraveným podle popisu ve WO 94/29336.

Podle dalšího aspektu tohoto vynálezu je tedy poskytnuta stabilní forma melagatranu.

Pojem „stabilita, jak je zde definován, zahrnuje chemickou stabilitu a stabilitu v tuhém stavu.

Do pojmu „chemická stabilita se zahrnuje skutečnost, že sloučenina se může za nevýznamného stupně chemické degradace nebo rozkladu skladovat v isolované tuhé formě nebo ve formě tuhého prostředku, ve které může být poskytnuta ve směsi s farmaceuticky přijatelnými nosiči, ředidly nebo pomocnými látkami, za obvyklých podmínek skladování.

Do pojmu „stabilita v tuhém stavu se zahrnuje skutečnost, že sloučenina se může za nevýznamného stupně transformace tuhého stavu (např. krystalizace, rekrystalizace, fázového přechodu tuhého stavu, hydra-tace,

- 5 « · φ φ φ · φ · φ φφ ·· φ··· · · φ φφφφ • φφ φφφ ·· φ • Φ φφφ φ φφφ φ φ dehydratace, solvatizace nebo desolvát*iz*áce) ‘skfadovát **** v isolované tuhé formě nebo ve formě tuhého prostředku, ve které může být poskytnuta ve směsi s farmaceuticky přijatelnými nosiči, ředidly nebo pomocnými látkami, za obvyklých podmínek skladování.

Příklady „obvyklých podmínek skladování zahrnují teploty od -80 do +50 °C (výhodně od 0 do 40 °C a výhodněji při teplotě místnosti, jako je teplota od 15 do 30 °C), tlacích od 10 do 200 kPa (výhodně při atmosférickém tlaku) a/nebo při expozici 406 lux UV/viditelného světla po delší dobu (tj. dobu delší nebo rovnou 6 měsícům). Za takových podmínek je možné shledat, že sloučeniny podle tohoto vynálezu chemicky degradovaly/rozložily se nebo u nich došlo k transformaci tuhého stavu, jak je příhodno, z méně než 15 %, výhodněji z méně než 10 % a obzvláště z méně než 5 %. Odborník v oboru zjistí, že výše uvedené horní a dolní limity teploty a tlaku představují krajní hodnoty obvyklých podmínek skladování a že jisté kombinace těchto krajních hodnot při obvyklém skladování nenastanou (např. teplota 50 °C a tlak 10 kPa).

Pojem „obvyklé podmínky skladování může také zahrnovat relativní vlhkosti od 5 do 95 % (výhodně od 10 do 75 %). V případě jistých krystalických forem podle tohoto vynálezu však mohou v důsledku expozice jistým krajním hodnotám relativních vlhkostí při obvyklých teplotách/tlacích nastat změny konformace nebo struktury krystalu hydratací a/nebo dehydratací. Původci například nalezli, že krystalické formy melagatranu, které jsou ve formě hydrátu (např. monohydrát) mohou být skladovány při 10% relativní vlhkosti nebo při vyšší vlhkosti při teplotě místnosti/normálním atmosférickém tlaku s nevýznamným

- 6 * ·· « · ···· • · · · · * « • · · · · · » · · · · · ·

99

9 99 «· »· ·· stupněm dehydratace. Původci však také nalezli, že krystalické formy melagatranu, které jsou ve formě anhydrátu musí být k zachování nevýznamného stupně hydratace skladovány při nižší než 40 % (výhodně nižší 30%, výhodněji nižší než 20%) relativní vlhkosti při teplotě místnosti/normálním atmosférickém tlaku.

než

Ačkoliv tedy sloučeniny podle tohoto vynálezu mají vyšší stabilitu v tuhém stavu než formy melagatranu popsané v dosavadním stavu techniky, jsou jisté sloučeniny podle tohoto vynálezu stabilnější než jiné. V tomto ohledu odborník v oboru zjistí, že podmínky skladování mohou být nastaveny tak, aby vyhovovaly skladované krystalické formě.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu se mohou výhodně získat krystalizací melagatranu.

Podle dalšího aspektu tohoto vynálezu je poskytnut způsob výroby sloučeniny podle tohoto vynálezu, který zahrnuje krystalizací melagatranu.

Ačkoliv melagatran lze krystalovat za, přítomnosti nebo nepřítomnosti systému rozpouštědel (např. krystalizace se může provádět z taveniny, za superkritických podmínek nebo jí lze dosáhnout sublimací), původci upřednostňují krystalizací z příhodného systému rozpouštědel.

Původci nalezli, že je možné získat krystalickou formu melagatranu krystalizací výhodně následující po rozpuštění a/nebo suspendování sloučeniny nebo, výhodněji, z reakčních roztoků, v nichž se sloučenina vytvořila.

' · ·· ·········· • · · · ·« · 9 · φ 9

9 · · · · ·· · · · ··· ·· ·· ·· ·· ····

Systém rozpouštědel může zahrnovat jedno nebo více organických rozpouštědel, jako jsou alkylacetaty (např. alkylacetaty a 1 až. 6 atomy uhlíku v alkylové části s přímým nebo rozvětveným řetězcem, jako je ethylacetát, isopropylacetat nebo butylacetat), nižší (např. s lineárním nebo rozvětveným řetězcem s 1 až 6 atomy uhlíku, výhodně se 2 až 4 atomy uhlíku) alkanoly (např. ethanol, isopropanol), alifatické a aromatické uhlovodíky (např. isooktan, n-heptan a toluen) dialkylketony (např. methylethylketon a methylisobutylketon), dialkylethery (např. diisopropylether) a acetonitril. Mohou být použity směsi kterýchkoli z výše uvedených rozpouštědel. Organická rozpouštědla mohou být smísena s vodou nebo vodnými roztoky.

Různé krystalické formy mohou mít při jakékoli dané teplotě různé rozpustnosti v různých organických rozpouštědlech. V tomto ohledu mohou být výše uvedená rozpouštědla použita jako „protirozpouštědla (tj. rozpouštědlo, v němž je sloučenina podle tohoto vynálezu špatně rozpustná) a mohou tedy napomoci procesu krystalízace. Výhodnými rozpouštědly jsou nižší alkanoly. Pokud se jako rozpouštědlo použijí nižší alkanoly, mohou být jako protirozpouštědla použita jiná výše uvedená rozpouštědla (zvláště acetonitril a ethylacetát).

Pokud krystalizace probíhá z reakčního roztoku, v němž se melagatran vytvořil, zahrnují vhodná rozpouštědla nižší alkanoly (např. methanol, ethanol nebo isopropanol, které mohou být ve směsi s vodou.

Krystalizace sloučenin podle tohoto vynálezu z příhodného systému rozpouštědel se dá dosáhnout navozením supernasyceného stavu v systému rozpouštědel obsahujících

- 8 ·♦ 99 9999 99 99

9.9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 · « · • · · · 9 9 9 9 9 9

999 99 99 99 99 9999 melagatran (např. ochlazením, odpařením rozpouštědla a/nebo přidáním vodného protirozpouštědla). Krystalizace se rovněž dá provádět snížením rozpustnosti látky přidáním soli (jako je chlorid sodný).

Odborník v oboru zjistí, že použitá koncentrace sloučeniny, která se má krystalovat, v roztoku a použitý systém rozpouštědel mohou ovlivnit krystalizační teploty a krystalizační časy.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být ve formě solvátu, hydrátu nebo smíšeného solvátu/hydrátu.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou také být ve formě anhydrátu. (Pojem „anhydrát, pokud je použit v tomto kontextu, zahrnuje rovněž sloučeniny, které jsou „ansolváty.) K zajištění produkování anhydrátu musí být rozpouštědlo, z nějž ke krystalizaci dochází, vysušené, buď před krystalizačním procesem nebo při něm, ke snížení obsahu vody pod kritickou úroveň, které by výhodně neměla být během krystalizace překročena. Rozpouštědlo může být během krystalizace vysoušeno, například snížením obsahu vody ve směsi sloučeniny určené ke krystalizaci a příhodného organického rozpouštědla/vodného systému rozpouštědel (např. zvýšením množství přítomného organického rozpouštědla a/nebo odpařením vody vytvořením azeotropní směsi s následnými destilacemi). „Kritická úoveň vody závisí na takových faktorech, jako je teplota, koncentrace sloučeniny určené ke krystalizaci v roztoku, profil nečistot a použitý systém rozpouštědel, ale může být určena bez uskutečnění vynálezeckého kroku.

^y · ·· ·♦ ···· ·· ·· ·· · · ·· · ····

99 9 9 9 ·· · • · 9 9 9 · 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 ··· ·· ·· ·· 99 9999

Anhydrát tedy může být vytvořen krystalizací ze systému rozpouštědel zahrnujícího jedno nebo více organických rozpouštědel (jako jsou nižší (např. se 2 až 6 atomy uhlíku) alkanoly (např. ethanol, isopropanol), acetonitril a/nebo ethylacetát) a/nebo vodu, kterýžto systém rozpouštědel je v podstatě prost vody, nebo se takovým během procesu krystalizace učiní. Do pojmu „v podstatě prost vody původci zahrnují skutečnost, že obsah vody v systému rozpouštědel je pod úrovní, která pro jakýkoli jednotlivý systém rozpouštědel a soubor krystalizačních podmínek povede k tvorbě, nanejvýš, 20 % monohydrátu.

K zajištění vytvoření monohydrátu musí být voda přítomna v rozpouštědle, ze kterého krystalizace probíhá. Obsah vody musí být během krystalizace výhodně nad kritickou úrovní (kterážto „kritická úroveň bude záviset na faktorech uvedených výše u výroby anhydrátu) .

Krystalický monohydrát se tedy může vyrobit krystalizací melagatranu ze systému rozpouštědel obsahujícího vodu a/nebo jedno nebo více organických rozpouštědel, zahrnujících ethylacetát, ethanol, isopropanol, methylisobutylketon, methyl-ethylketon, acetonitril a jejich směsi.

K zajištění vytvoření solvátu musí být jako součást systému rozpouštědel, ze kterého krystalizace probíhá, přítomno příhodné organické rozpouštědlo schopné tvořit solvát. Lze připravit také solváty, které jsou ve formě „směsi solvát/hydrát. Původci například nalezli, že smísený solvát/hydrát s nižším alkanolem (např. s alkylem s 1 až 4 atomy uhlíku, tj. např. methanolem, ethanolem a/nebo isopropanolem) se může vyrobit krystalizací sloučenin.y

- 10♦' »· ·· 9 · • 99 • · · • · ·

999 9» • 9 9999 • 9 9 • 9 ·

9 9

9 9 9

9«

99

9 9 9

9 9

9 9 9

9 9 •9 9999 podle tohoto vynálezu ze směsi nižších alkanolů (např. methanolu, ethanolu a/nebo isopropanolu), vody a protirozpouštědla (např. acetonitrilu), jak je například popsáno zde dále.

Podle dalšího aspektu tohoto vynálezu je poskytnuta sloučenina podle tohoto vynálezu, která je ve formě solvátu, sloučenina podle tohoto vynálezu, která je ve formě mohohydrátu, sloučenina podle tohoto vynálezu, která je ve formě smíšeného nižšího (např. s 1 až 4 atomy uhlíku) alkanolatu/hydrátu (např. isopropanolový solvát/hydrát) a sloučenina podle tohoto vynálezu, která je ve formě anhydrátu.

Jak odborník v oboru může zjistit, závisí získaná krystalická forma jak na kinetice, tak na termodynamice krystalizačního procesu. Za jistých termodynamických podmínek (systém rozpouštědel, teplota, tlak a koncentrace sloučeniny podle tohoto vynálezu) může být jedna krystalická forma stabilnější než jiná (nebo ve skutečnosti kterákoli jiná). Jiné krystalické formy, které mohou mít ve srovnání relativně nízkou termodynamickou stabilitu, mohou však být kineticky výhodné. Kinetické faktory, jako je čas, profil nečistot, třepání, přítomnost krystalizačních jader atd., mohou tedy navíc také ovlivnit to, která forma vznikne. Zde diskutované postupy tedy mohou být odborníkem v oboru upraveny, jak je příhodno, k získání různých krystalických forem melagatranu.

K zajištění toho, že krystalické formy zde popsané se vyrobí bez přítomnosti jiné krystalické formy zde popsané se krystalizace výhodně provádí očkováním jádry a/nebo očkovacími krystaly požadované krystalické formy za

- II > 44 t 9 • ·« • 9 9 · • · · ·»· 94 úplné nepřítomnosti jader a/nebo očkovacích ·* ·*** * · • · • · » · 4

1· 49 • 9 94

9 9 4

9 4 » · » 9

9 9 • »· 9 4 4 · krystalů jiné krystalické formy zde popsané.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu, které jsou anhydráty neobsahují více než 3 %, výhodně více než 1 % a výhodněji více než 0,5 % (hmotnostně) vody, ať již je taková voda vázaná (krystalová voda nebo jinak) nebo nikoli. Solváty, hydráty a smísené hydráty/solváty neobsahují méně než 0,5 mol rozpouštědla a/nebo vody (jak je příhodno) na mol melagatranu.

Výhodné sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou sloučeniny, které jsou ve formě hydrátu, jako je monohydrát. Podle dalšího aspektu tohoto vynálezu je poskytnuta sloučenina podle tohoto vynálezu, která obsahuje alespoň 0,5, výhodně 0,85 a výhodněji 0,90 mol vody na mol melagatranu, ať již jde o vodu vázanou (krystalová voda nebo jinak) nebo nikoli.

Původci rovněž nalezli, že sloučeniny podle tohoto vynálezu v jedné krystalické formě mohou být převedeny na jinou krystalickou formu. Například krystalický monohydrát může být rovněž vytvořen vyloučením jiných krystalických forem (např. anhydrátů a/nebo solvátů) ve vodě nebo směsi dostatečného množství vody a jednoho nebo několika organických rozpouštědel (jako je ethanol, isopropanol, ethylacetát, acetonitril nebo methylisobutylketon) . Suspenze, která se vytvoří, se může výhodně očkovat krystaly krystalického monohydrátu k zajištění toho, že proběhne příslušná transformace.

Dále teploty sušení a časy sušení mohou ovl ivnit vlastnosti tuhého stavu a/nebo formy tuhého stavu sloučenin

- 12• · ♦ · • · podle tohoto vynálezu (např. solvátů, hydrátů nebo jejich směsí). Například v případě hydrátů může dojít při nízkých vlhkostech a/nebo zvýšených teplotách a/nebo sníženém tlaku k dehydrataci. Například po vytvoření krystalického monohydrátu existuje kritická úroveň vlhkosti, pod níž může být prováděno sušení, což může vést ke ztrátě krystalově vody, přičemž dojde k transformaci tuhého stavu na anhydrát. Opačně mohou anhydráty být převedeny (zcela nebo zčásti) na monohydráty v případech, kde jsou vystaveny atmosféře s dostatečně vysokou relativní vlhkostí.

Podle dalšího aspektu tohoto vynálezu je tedy poskytnut způsob konverze jedné krystalické formy sloučeniny podle tohoto vynálezu na jinou, který zahrnuje re-krystalizaci sloučeniny podle tohoto vynálezu z příhodného systému rozpouštědel a/nebo, v případě interkonverze anhydrátu a monohydrátu, vystavení krystalického anhydrátu nebo monohydrátu (jak je příhodno) atmosféře s příslušnou úrovní vlhkosti.

Výroba a vlastnosti mezi jinými anhydrátových, monohydrátových a solvátových/hydrátových forem sloučenin podle tohoto vynálezu jsou popsány dále. Různé krystalické formy sloučenin podle tohoto vynálezu.(např. anhydrát a monohydrát) mohou být snadno charakterizovány za použití metod rentgenové difrakce v prášku (XPRD), jak je například popsáno zde dále.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být isolovány za použití postupů, které jsou odborníkovi v oboru známy, například dekantací, filtrací nebo odstředěním.

Původci nalezli, že využitím krystalizačního procesu zde popsaného je možné vyrobit sloučeniny podle tohoto vynálezu s chemickou čistotou, která převyšuje chemickou čistotu melagatranu, který se isoluje v prvním případě.

Další čištění sloučenin podle tohoto vynálezu se může provádět za použití postupů, které jsou odborníkovi v oboru známy. Například nečistoty mohou být odstraněny rekrystalizací z příhodného systému rozpouštědel (např. nižšího alkonolu, jako je ethanol nebo isopropanol), který může obsahovat protirozpouštědlo (např. isooktan, acetonitril, ethylacetat, methylethylketon), vodu nebo kombinaci těchto rozpouštědel. Vhodné teploty a časy pro krystalizaci závisí na koncentraci sloučeniny, která má být krystalována, v roztoku a na použitém systému rozpouštědel.

Pokud se sloučeniny podle tohoto vynálezu krystalují nebo rekrystalují podle výše uvedeného popisu, je výsledná sloučenina ve formě, která má zlepšenou chemickou stabilitu a stabilitu v tuhém stavu uvedené zde výše.

Farmaceutické prostředky a lékařské použití

Podle tohoto vynálezu mohou být sloučeniny podle tohoto vynálezu podávány orálně, intravenózně, subkutánně, bukálně, rektálně, dermálně, nazálnš, tracheálně, bronchiálně, jakoukoli jinou parenterální cestou nebo ínhalačně ve formě farmaceutického prostředku obsahuj ícího sloučeninu podle tohoto vynálezu ve farmaceuticky přijatelné dávkové formě. Původci však upřednostňují, je-li

- 14···♦···· ···»·· · · · · · ·· · · · · · · ® · • · « · · · 9 -·· ·.· ··· sloučenina podle tohoto vynálezu ve formě vhodné pro orální nebo parenterální, jako je subkutánní, podání.

V závislosti na poruše a pacientovi, který má být léčen, stejně jako na cestě podání, mohou být sloučeniny podle tohoto vynálezu podávány v různých dávkách.

Podle dalšího aspektu tohoto vynálezu je poskytnut farmaceutický prostředek obsahující sloučeninu podle tohoto vynálezu ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem. Vhodné prostředky zahrnují prostředky popsané v mezinárodních patentových přihláškách WO 94/29336, WO 96/14084, WO 96/16671,

WO 97/39770, WO 97/45138, WO 98/16252 a WO 00/12043.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být před smísením s vhodným nosičem, ředidlem nebo pomocnou látkou dále zpracovány. Například krystalická forma může být mleta nebo drcena na menší částice.

Původci upřednostňují jsou-li prostředky obsahující sloučeninu podle tohoto vynálezu ve formě vhodné pro parenterální (např. subkutánní) podání. V tomto ohledu mohou být sloučeniny podle tohoto vynálezu smíseny se systémem nosičů vodných rozpouštědel (viz např. mezinárodní patentovou, přihlášku WO 00/12043) k poskytnutí farmaceutického prostředku, který je ve formě kapaliny a/nebo roztoku.

Množství sloučeniny podle tohoto vynálezu použité v takovém prostředku bude záviset na stavu a pacientovi, který má být léčen, stejně jako na použité sloučenině (použitých sloučeninách), což však lze stanovit bez využití • Φ ··· · · · · • · φ '· ·· · · • · φ · 9 ·· · · * * vynálezeckého kroku.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou užitečné, neboť mají farmakologickou aktivitu. Jsou tedy určeny jako farmaceutika.

Obzvláště jsou sloučeniny podle tohoto vynálezu mocnými inhibitory thrombinu, jak například ukázáno v testech popsaných ve WO 94/29336. U sloučenin podle tohoto vynálezu se očekává, že budou užitečné při léčbě stavů, které vyžadují inhibici thrombinu nebo při nichž je inhibice thrombinu žádoucí, včetně těch stavů, které jsou popsány například ve WO 94/29336 a ve WO 97/23499, jejichž poznatky jsou zde zahrnuty formou odkazu.

Vhodné dávky sloučeniny podle tohoto vynálezu při terapeutické a/nebo profylaktické léčbě savčího, obzvláště lidského, pacienta jsou v rozmezí od 0,4 do 40 mg za den a/nebo 0,0002 do 4 mg/kg (výhodně od 0,002 do 1 mg/kg) tělesné hmotnosti při parenterálním podání a od 2 do 1000 mg za den a/nebo od 0,001 do 100 mg/kg (výhodně od 0,01 do 25 mg/kg) tělesné hmotnosti při orálním podání.

Podle dalšího aspektu tohoto vynálezu je poskytnut způsob léčby stavu, při kterém je vyžadována nebo je žádoucí inhibice thrombinu, kterýžto způsob zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle tohoto vynálezu pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.

K zamezení pochybností původci pod pojem „léčba zahrnují terapeutickou léčbu stejně jako profylaxi stavu.

·,· · · · · ·

• · • · · • · · « · · · · ·

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mají tu výhodu, že jsou ve formě, která poskytuje snazší zacházení. Dále mají sloučeniny podle tohoto vynálezu tu výhodu, že mohou být vytvořeny ve formě, která má zlepšenou chemickou stabilitu a stabilitu v tuhém stavu. Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou tedy být při skladování po delší dobu stabilní.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou také mít tu výhodu, že mohou být vyrobeny s dobrým výtěžkem, s velkou čistotou, za kratší čas, příhodněji a za nižších nákladů než formy melagatranu vyráběné dříve.

Přehled obrázků na výkresech

Tento vynález je ilustrován, nikterak však omezen, následujícími příklady s odkazem na přiložené obrázky, ve kterých:

obr. 1 ukazuje rentgenový difraktogram v prášku krystalické formy anhydrátu melagatranu získaného způsobem z příkladu obr. 2 ukazuje rentgenový difraktogram v prášku krystalické formy monohydrátu melagatranu získaného způsobem z příkladu

4, obr. 3 ukazuje rentgenový difraktogram v prášku krystalické formy anhydrátu melagatranu získaného způsobem z příkladu 6

- 17« · · · · · obr. 4 ukazuje rentgenový difraktogram v prášku krystalické formy isopropanolatu/hydrátu melagatranu získaného způsobem z příkladu 10.

Příklady provedeni vynálezu

Obecné postupy

Analýza rentgenovou difrakcí v prášku (XRPD) se provádí na vzorcích připravených podle standardních postupů, například postupů popsaných v Giacovazzo, C. a kol., Fundamentals of Crystallography, Oxford University Press (1995); Jenkins,

R. a Snyder, R. L., Introduction to X-Ray Powder

Diffractometry, John Wiley & Sons, New York (1996); Bunn,

C. W., Chemical Crystallography, Clarendon Press, Londýn (1948) nebo Klug, Η. P. & Alexander, L. E. (1974), X-Ray Diffraction Procedures, John Wiley and Sons, New York. Rentgenové analýze se provádějí za použití difraktometru Siemens D5000 a/nebo Philips X'Pert MPD.

Diferenční skanovací kalorimetrie (DSC) se provádí za použití přístroje Mettler DSC820 podle standardních postupů, například postupů popsaných v Hóhne, G. W. H. a kol., Differential Scanning Calorimetry,

Springer, Berlín (1996).

Termogravimetrická analýza (TGA) se provádí za použití přístroje Mettler Toledo TGA850.

Formy vyrobené podle příkladů uvedených dále vykazují „v podstatě stejné vzory rentgenové difrakce v prášku a/nebo DSC termogramy jako jiné příklady popsané dále, když je z relevantních vzorů/termogramů (s výhradou

experimentální chyby) jasné, že se vytvořila stejná krystalická forma. Limity experimentální chyby pro nástupní teploty DSC mohou být v rozmezí + 5 °C (např. + 2 °C) a hodnoty vzdálenosti pro XPRD mohou být v rozmezí + 2 na posledním desetinném místě.

Syntéza monohydrátu melagatranu

Příklad 1 (a) Boc-(R)Cgl-(S)Aze-Pab-Z

4-Dimethylaminopyridin (3,0 ekv.) a Boc-(R)Cgl-(S)Aze-OH (1,0 ekv.) se rozpustí ve směsi ethylacetat:acetonitril (80:20 objemově) o objemu.18 litr/kg Boc- (R) Cgl-(Sj Aze-OH při teplotě 20 °C. Do výsledného roztoku se přidá Pab-Z x HCI (1,15 ekv.). Přidá se l-ethyl-3-(3dimethylaminopropyl)karbodiimid x HCI (1,4 ekv.) a suspenze se míchá při teplotě 25 °C asi 3 hodiny. Odebere se vzorek pro kontrolu během způsobu. Reakční roztok se zpracuje, když se stanoví, že proběhla alespoň 95% konverze. Suspenze se poté zfiltruje a filtrační koláč se promyje směsí ethylacetat:acetonitril (80:20 objemově). Přidá se vodný roztok chloridu sodného (10%, hmotnostně), hodnota pH se upraví na 4,0 pomocí kyseliny chlorovodíkové (4M). Roztok se alespoň 15 minut důkladně míchá. Vodná fáze se oddělí a organická fáze se extrahuje vodným roztokem chloridu sodného (20%, hmotnostně). Roztok se důkladně míchá alespoň 15 minut. Vodná fáze se oddělí a organická fáze se extrahuje vodným roztokem chloridu sodného (10%, hmotnostně). Hodnota pH se upraví na 8,0 vodným roztokem uhličitanu draselného (25%, hmotnostně). Roztok se důkladně míchá alespoň 15 minut. Vodná fáze se oddělí. Ethylacetát a acetonitril se odpařují

ve vakuu (okolo 15 kPa) při teplotě okolo 40 °C, až je objem v reakční nádobě přibližně 8 litr/kg výchozího materiálu. Během odpařování se přidá další ethylacetát (13 litr/kg výchozího materiálu). Odebere se vzorek k analýze obsahu vody. Poté se přidá ethanol (10% objemově celkového objemu) . Roztok se použije přímo, v dalším kroku.

(b) H-(R)Cgl-(S)Aze-Pab-Z (i) Roztok z kroku (a) se ochladí na teplotu 10°C. Přidá se kyselina methansulfonová (7 ekv. na ekvivalent Boc-(R)Cgl-(S)Aze-Z), přičemž teplota se udržuje pod 20 °C. Teplota se upraví na 22 °C a reakční roztok se míchá (4 hodiny) až proběhne alespoň 95% konverze (stanoveno pomocí HPLC). Reakční roztok se ochladí na teplotu 10 °C a extrahuje se ochlazeným (10 °C) 25% (hmotnostně) vodným roztokem uhličitanu draselného (8 ekv. K₂CO₃) alespoň 15 minut. Teplota se upraví na 20 °C a vodná fáze se oddělí.

Organická fáze se promývá směsí vodného roztoku chloridu sodného (10%, hmotnostně) a uhličitanu draselného (1 ekv. K2CO3) alespoň 15 minut. Vodná fáze se oddělí. Roztok sloučeniny pojmenované v podzáhlaví se použije přímo v dalším kroku.

(ii) Sloučenina pojmenovaná v podzáhlaví se připraví v podstatě stejným způsobem jaký je popsán v kroku (b) (i.) uvedeném výše s tím rozdílem, že teplota se upraví na 25 °C a reakční směs se míchá 5 hodin po přidání kyseliny methansulfonové.

(c) Bzl-OC(0)-CH₂-(R)Cgl-(S)Aze-Pab-Z • ·

- 20• ·

(i) K reakčnímu roztoku z kroku (b)(i) uvedenému výše se přidá další ethylacetát, voda a uhličitan draselný (3,0 ekv. na ekvivalent H-(R)Cgl-(S)Aze-PabZ) a reakční směs se míchá až se uhličitan draselný rozpustí. Přidá se benzylbromacetat (1,2 ekv. na ekvivalent H-(R)Cgl(S)Aze-Pab-Z) a reakční teplota se zvýší na 40 °C. Teplota udržuje okolo 20 hodin. Odebere se vzorek pro analýzu pomocí HPLC. Až se dosáhneí 95% konverze, teplota se sníží na 20 °C a reakční směs nechá stát alespoň 20 minut. Vodná fáze se oddělí a roztok se ochladí na teplotu 10 °C. Přidá se vodný roztok chloridu sodného (4%, hmotnostně) hodnota pH se upraví na 4,0 pomocí 4M kyseliny chlorovodíkové. Dvoufázový systém se důkladně míchá alespoň 15 minut a nechá se oddělovat alespoň 20 minut. Vodná fáze se oddělí. Přidá se roztok chloridu sodného (4%, hmotnostně) hodnota pH se upraví na 4,0 pomocí 4M kyseliny chlorovodíkové. Roztok se důkladně míchá alespoň 15 minut a nechá se oddělovat alespoň 20 minut. Vodná fáze se oddělí. K výslednému roztoku, který se ochladí na teplotu 10 °C, se přidá voda. Hodnota pH se upraví na 2,5 pomocí 4M kyseliny chlorovodíkové. Dvoufázový systém se důkladně míchá alespoň 15 minut a alespoň 20 minut se nechá oddělovat. Vodná fáze oddělí a pomalu vloží do směsi uhličitanu draselného v ethylacetatu. Hodnota pH se upraví na 7,0 pomocí 25% (hmotnostně) vodného roztoku uhličitanu draselného a reakční směs alespoň 15 minut důkladně míchá při teplotě 20 °C a alespoň 20 minut se nechá oddělovat. Vodná fáze se oddělí. Ethylacetát se odpařuje ve vakuu (okolo 10 kPa) při maximální teplotě 40 °C až je objem v reakční nádobě asi 8,5 litru/kg Boc(R)Cgl(S)Aze-OH. Přidá se další ethylacetát (5 litrů/kg Boc-(R)Cgl-(S)Aze-OH) a znovu se odpařuje za sníženého tlaku až je objem v reakční nádobě okolo 8,5 litru/kg. Odebere se vzorek k analýze obsahu vody. Pokud je obsah ·« ····

- 21 • 4 · · * · · ·· ··· ·· ·· ♦· ·· vody nižší než 0‘, 5 % (hmotnost/objem), přidá se voda k dosažení celkového obsahu vody 0,5 až 2,0 % (hmotnost/objem). Teplota se upraví na 45 °C a reakční roztok se očkuje 2 % (hmotnostně) sloučeniny pojmenované v podzáhlaví a suspenze se důkladně míchá 10 hodin, poté se ochladí na teplotu 30 °C během 3 hodin a následně se míchá alespoň 3 hodiny. Přidá se toluen (5 litrů/kg sloučeniny pojmenované v podzáhlaví) a suspenze se míchá alespoň 15 minut. Ethylacetát a toluen se odpařují za sníženého tlaku (okolo 10 kPa) až je objem stejný jako před přidáním toluenu.

Přidá se toluen (5 litrů/kg sloučeniny pojmenované v podzáhlaví) a suspenze se míchá alespoň 30 minut. Ethylacetát a toluen se znovu odpařují za sníženého tlaku až je objem stejný jako před přidáním toluenu. Poté se přidá toluen na celkový objem asi 11 litrů/kg sloučeniny pojmenované v podzáhlaví. Suspenze se poté opatrně míchá alespoň 3 hodiny při teplotě 20 °C. Krystaly se odfiltrují a promyjí toluenem, a vysuší-ve vakuu (< 15 kPa) při teplotě přibližně 40 °C.

(ii) Sloučenina pojmenovaná v podzáhlaví se připraví v podstatě stejným způsobem jaký je popsán v kroku (c)(1) uvedeném výše s tím rozdílem, že:

(1) před snížením teploty na 20 °C po přidání benzylbromacetatu se dosáhne 96% konverze a (2) provádí se třetí extrakce při pH 4.

(d) Monohydrát melagatranu (i) Do reakční nádoby se vloží ethanol při teplotě 20 °C. Přidá se Pd/C (10% hmotnostně Bzl-OC(0)-ΟΗ₂- (R) Cgl- (S) Aze- 22 ··· ·· »· ·· ·· ····

-Pab-Z), vyloužený ve vodě. (Celkové množství vody je 6 % objemově celkového rozpouštědla.) Přidá se Bzl-0C(0)-CH₂-(R)Cgl-(S)Áze-Pab-Z . (z kroku (c) (i) uvedeného výše; 8 % hmotnost/objem celkového rozpouštědla) a teplota se zvýší na 25 °C. Na reakční směs, která se 5 hodin silně míchá, se aplikuje tlak vodíku 350 kPa. Když je reakce ukončena (stanoveno pomocí HPLC), upraví se teplota na 20 °C a reakční suspenze se zpracuje s aktivním uhlím (10 % hmotnostně výchozího materiálu) vylouženým vodou (0,5 litru/kg výchozího materiálu) během 0,5 hodiny. Katalyzátor a uhlí se odfiltrují a filtrační koláč se promyje ethanolem (5 litrů/kg anhydrátu melagatranu). Ethanol se poté odpařuje za sníženého tlaku až je objem 4 litry/kg anhydrátu melagatranu. Přidá se isopropanol (14 litrů/kg anhydrátu melagatranu) a roztok se znovu odpařuje za sníženého tlaku (při teplotě od 20 do 30 °C) na objem asi 7 litrů/kg anhydrátu melagatran. Roztok se zfiltruje a promyje isopropanolem (7 litrů/kg anhydrátu melagatranu). Ethanol/isopropanol se odpařují za sníženého tlaku (při teplotě od 20 do 30 °C) na objem okolo 4,4 litrů/kg anhydrátu melagatranu. Analyzuje se obsah vody a upraví se na 0,6 až 0,7 litru/kg anhydrátu melagatranu. Roztok se ohřeje na teplotu 45 °C a během 20 minut se přidá acetonitril (6,0 litrů/kg anhydrátu melagatranu), načež se očkováním sloučeninou pojmenovanou v záhlaví, získanou analogicky podle postupu v příkladu 4 uvedeném dále, 2 % hmotnostní produktu) započne krystalizace. Směs se míchá asi 15 hodin. Do reakční nádoby se přidá acetonitril (6,5 litrů/kg anhydrátu melagatranu). Suspenze se míchá při teplotě 40 °C 3 hodiny, poté se ochladí během 1 hodiny na teplotu 20 °C a nakonec se míchá při teplotě 20 °C alespoň 1 hodinu. Krystaly se isolují filtrací a promyjí se směsí acetonitril:isopropanol (9:1 (objemově), 3,5 litrů/kg·· ····

sloučeniny pojmenované v záhlaví), acetonitrilem (2 litry/kg sloučeniny pojmenované v záhlaví) a nakonec ethylacetatem (3 litry/kg sloučeniny pojmenované v záhlaví). Krystaly se vysuší při teplotě 40 °C a tlaku 15 až 20 kPa.

(ii) Sloučenina pojmenovaná v záhlaví se připraví v podstatě stejným způsobem jaký je popsán ve způsobu jako krok (d)(i) uvedený výše s tím rozdílem, že:

(1) množství katalyzátoru použité na počátku je 12 % hmotnostně výchozího materiálu;

(2) celkové množství v reakční směsi je 7 % hmotnost/objem celkového rozpouštědla;

(3) filtrace po druhém odpaření se neprovádí;

(4) stanovení obsahu vody ve způsobu po odpaření se neprovádí (přidá se voda (0,6 litr/kg) , místo úpravy na 0,6 až 0,7 lítru/kg);

(5) množství promývacích rozpouštědel je:

(I) acetonitril:isopropanol - 3 litry/kg anhydrátu melagatranu;

(II) acetonitril - 3 litry/kg anhydrátu melagatranu a (III) ethylacetat - 5 litrů/kg anhydrátu melagatranu;

(6) teplota sušení je 45°C a (7) dolní hranice tlaku při sušení je 10 kPa.

·· ··*·

- 24·· • · · · ·· · · · • · · · · ·· ·· • ♦ · · • · · • ♦ · • * · »« ··· ·

Krystaly se analyzují pomocí XRPD, TGA, GC, DSC a Karl-Fischerovy titrace. Vykazují v podstatě shodný vzor XRPD a termogram DSC jako krystaly získané podle postupu v příkladu 4 uvedeném dále.

Krystalizace anhydrátu melagatranu Příklad 2

Reakční roztok (ethanol:voda) obsahující přibližně 64,8 g melagatranu, připravený analogicky podle postupu popsaného v příkladu 1 uvedeného výše (kromě posledního kroku krystalizace), v baňce s kulatým dnem, se odpařuje za sníženého tlaku až zbude 149 g roztoku. Poté se do nádoby vloží 200 ml absolutního ethanolu a roztok se znovu odpařuje až zbude 89,5 g. Vytvoří se bílá sraženina. Do nádoby se vloží dalších 250 ml absolutního ethanolu a suspenze se míchá při teplotě od 30 do 35 °C až se všechna rozpustná látka rozpustí. Roztok se znovu odpařuje až zbývá 78,9 g roztoku. Přidá se dalších 550 ml absolutního ethanolu a suspenze se míchá při teplotě 38 °C až se vše rozpustí. Obsah vody je 0,5 % (hmotnostně), stanoveno pomocí Karl-Fischerovy titrace. Roztok se zfiltruje a filtrát se promyje 200 ml absolutního ethanolu. Roztok se zahřívá na teplotu 30 °C pod atmosférou dusíku a do nádoby se po částech přidává acetonitril až je roztok zakalený (přidá se celkem 1380 ml acetonitrilu). Roztok se očkuje za použití očkovacích krystalů produktu pojmenovaného v záhlaví. Suspenze se míchá přes noc a ochladí se na teplotu místnosti. Krystaly se promyjí za sníženého tlaku 350 ml směsi ethanolu a acetonitrilu (1:5 (objemově)) a poté acetonitrílem (300 ml). Krystaly se poté suší při teplotě 40 °C (10 Pa). Po 4 hodinách sušení se částice rozemelou.

• · · ···· · · · ··» ·· ·· ·· ·· ····

Sušení poté pokračuje za stejných podmínek jako jsou podmínky uvedené výše 20 hodin.

Krystaly se analyzují pomocí XRPD, GC a KarlFischerovy titrace. Výsledek XRPD je uveden v tabulce dále (tabulka 1) a ukázán na obr 1.

Karl-Fischerova titrace ukazuje 1,1 % (hmotnostně) vody.

Tabulka 1

Hodnota	Intenzita	Hodnota d	Intenzita	Hodnota d	Intenzita
d (nm)	(%)	(nm)	(%)	(nm)	(%)
1,59	100	0, 60	5	0,408	10
1,51	30	0, 58	5	0,397	10
1,09.	55	0,55	5	0,382	5
0,89	5	0,53	20	0,376	5
0, 84	5	0, 50	15	0,366	5
0,80	20	0,487	30	0,344	5
0,70	10	0, 481	25	0,332	5
0,68 .	10	0, 471	10	0,320	5
0,64	10	0, 461	15
0, 62	5	0,445	5

Příklad 3 ml reakčního roztoku (ethanol) obsahujícího melagatran, připraveného analogicky podle způsobu popsaného v příkladu 1 uvedeném výše (kromě posledního krystalizačního kroku) se vloží do baňky s kulatým dnem o obj emu 500 ml. Roztok se odpařuje destilací (tlak: 5 kPa, teplota •V AAAA

- 26·«

A A « AA « ♦

• A aa aa^a lázně: 70 °C) až zbude 15,3 g roztoku. Přidají se 63 ml isopropanolu a roztok se znovu odpařuje za výše uvedených podmínek až zbude 14,8 g. Odebere se vzorek a KarlFischerovou titrací se stanoví obsah vody 0,93 % (objemově). K roztoku se přidá dalších 1,16 ml čištěné vody ke zlepšení filtrace. Baňka s kulatým dnem se umístí na olejovou lázeň udržovanou při teplotě 40 °C a roztok se míchá za použití rotační třepačky. Do míchaného roztoku se pomalu přidá 30 ml acetonitrilu. Do roztoku se přidá 80 mg očkovacích krystalů sloučeniny pojmenované v záhlaví, což navodí krystalizaci. Suspenze se míchá dalších 14 hodin při teplotě 40 °C a poté se přidají 23 ml acetonitrilu.

V míchání se pokračuje 3 hodiny při teplotě 40 °C, olejová lázeň se dá stranou a poté se suspenze míchá při teplotě místnosti 2 hodiny. Krystaly se odfiltrují ve vakuu, promyjí se směsí isopropanolu a acetonitrilu, poté čistým acetonitrilem a poté se za sníženého tlaku suší při teplotě 40 °C. Výtěžek je (založeno na množství zbývajícím v matečné kapalině) 84 %.

Krystaly se analyzují pomocí XRPD, GC a

Karl-Fischerovy titrace. Vykazují v podstatě shodný vzor XRPD jako krystaly získané podle postupu v příkladu 2 uvedeném výše.

Konverze krystalického anhydrátu melagatranu na krystalický monohydrát melagatranu

Příklad 4 g anhydrátu melagatranu (získané podle způsobu popsaného v příkladu 3 uvedeném výše) se spolu s 1 ml vody z vodovodu, 6 ml isopropanolu a 13,2 ml acetonitrilu vloží

- 27 ·· · · · » · • · · · · » · · · ·· ·· »· · · do Erlenmeyerovy baňky o objemu 50 ml. Baňka se umístí na třepačku a udržuje se při teplotě místnosti-. Krystaly se po 9 dnech míchání a třepání odfiltrují za použití vakua a poté se suší při teplotě místnosti v digestoři.

Krystaly se analyzují pomocí XRPD, DSC, TGA, GC a Karl-Fischerovy titrace.

Výsledek XPRD je uveden v tabulce dále (tabulka 2) a je ukázán na obr. 2. .

DSC vykazuje jednu endotermu s nástupní teplotou okolo 83 °C s asociačním teplem -125 J/g (v důsledku dehydratace) a jednu při teplotě okolo 210 °C (v důsledku tání).

TGA vykazuje snížení hmotnosti okolo 4,3 % při teplotě okolo 95 °C, což odpovídá monohydrátu a rozklad počínající při teplotě okolo 220 °C. Karl-Fischerova titrace vykazuje 4,3 % (hmotnostně) vody.

Tabulka 2

Hodnota d	Intenzita	Hodnota d	Intenzita	Hodnota d	Intenzita
(nm)	(%)	(nm)	(%)	(nm)	(%)
2,11	65	0,507	55	0,363	15
1,05	75	0,490	25	0,352	20
0,76	90	0,475	60	0,339	5
0,70	100	0,468	50	0,327	10
0,67	10	0,435	15	0,323	5
0,64	5	0,419	20	0,312	20
0, 62	25	0,400	10	0,309	10
0,57	5	0,394	5	0,306	5

•· «· · · · · · ·

Hodnota d	Intenzita	Hodnota d	Intenzita	Hodnota d	Intenzita
(nm)	(%)	(nm)	(%)	(nm)	(%)
0,54	10	0,385	20	0,275	5
0,53	30	0,381	15	0,238	10
0,522	45	0,373	10	0,235	10
0,519	25	0,370	10

Příklad 5

139 kg ethylacetátu se vloží do reakční nádoby spolu s 10,3 kg anhydrátu melagatranu (z příkladu 9 uvedeného dále), následuje 1,9 kg vyčištěné vody (4,5 ekv.). Suspenze se 16 až 20 hodin míchá při teplotě 40 °C. Po ochlazení na teplotu 25 °C se suspenze míchá další 2 dny. Suspenze se poté zfiltruje za použití tlakové filtrace a reakční nádoba a filtrační kláč se promyjí 46 kg ethylacetátu. Krystaly se suší za sníženého tlaku (15 + 5 kPa) a teplotě 40 °C po několik dní.

Krystaly se analyzují pomocí XRPD, DSC, TGA, GC, a Karl-Fischerovy titrace. Vykazují v podstatě shodný vzor XRPD a termogram DSC jako krystaly získané podle postupu v příkladu 4 uvedeném výše. Karl-Fischerova titrace vykazuje obsah vody 4,0 % (hmotnostně).

Konverze jedné krystalické formy anhydrátu melagatranu na jinou krystalickou formu anhydrátu melagatranu 'Příklad 6

2,5 g anhydrátu melagatranu (získané podle způsobu popsaného v příkladu 2 uvedeném výše) se spolu s 6 ml isopropanolu, 1,0 ml vody z vodovodu a 13,2 ml

- 29• · · · acetonitrilu vloží do Erlenmeyerovy baňky o objemu 50 ml.

Baňka se umístí na třepačku, kde se nechá 9 dní. Krystaly se odfiltrují za použití vakua a poté se přes noc suší při teplotě 40 °C a tlaku nižším než 2 kPa.

Krystaly se analyzují pomocí XRPD, DSC, GC a Karl-Fischerovy titrace.

Výsledek XPRD je uveden v tabulce dále (tabulka 3) a je ukázán na obr. 3.

DSC vykazuje endotermu s extrapolovanou nástupní teplotou 210 °C s asociačním teplem -120 J/g.

Tabulka 3

Hodnota d	Intenzita	Hodnota d	Intenzita	Hodnota d	Intenzita
(nm)	(%)	(nm)	(%)	(nm)	(%)
1,78	100	0,443	5	0,328	1
0,8 9	45	0,438	15	0,324	1
0,81	20	0,433	10	0,317	1
0,75	10	0,414	5	0,309	1
0,69	5	0,412	10	0,301	1
0,63	5	0,405	10	0,296	5
0,59	25	0,391	10	0,283	1
0,56	10	0,373	10	0,254	1
0,55	10	0,361	5	0,24 9	1
0,54	10	0,358	5	0,241	1
0,53	5	0,356	5	0,238	5
0,52	5	0,347	5	0,235	1
0,50	10	0,340	5
0,471	10	0,336	5

- 30• A · ··· 9 9 9 9 φ · · · · · · «« · 9 * ·· *

9 9 9 9 9 9 9 * 9 • · ···· ··· »· ·· 99 99 9999

Příklad 7

3,0 g anhydrátu melagatranu (získané podle způsobu popsaného v příkladu 2 uvedeném výše) se spolu s 0,5 ml vody z vodovodu a 20 ml ethylacetátu vloží do Erlenmeyerovy baňky o objemu 50 ml. Baňka se umístí na třepačku, kde se nechá 9 dní. Krystaly se odfiltrují za použití vakua, promyjí se ethylacetátem a poté se přes noc suší při teplotě 40 °C a tlaku nižším než 2 kPa.

Krystaly se analyzují pomocí XRPD, DSC, GC a Karl-Fischerovy titrace. Vykazují v podstatě shodný vzor XRPD a termogram DSC jako formy získané podle postupu v příkladu 6 uvedeném výše.

Příklad 8

3,0 g anhydrátu melagatranu (získané podle způsobu popsaného v příkladu 2 uvedeném výše) se spolu s 0,5 ml vody z vodovodu a 20 ml methylisobutylketonu vloží do Erlenmeyerovy baňky o objemu 50 ml. Baňka se umístí na třepačku, kde se nechá 9 dní. Krystaly se odfiltrují za použití vakua, promyjí se methylisobutylketonem a poté se přes noc suší při teplotě 40 °C a tlaku nižším než 2 kPa.

Konverze krystalického monohydrátu melagatranu na krystalický anhydrát melagatranu *· ··· ·

- 31 «·· ··»♦ ·· ·· ·< ·· ·» ··

Příklad 9

Krystaly moohydrátu (získané podle způsobu popsaného v příkladu 1 uvedeném výše) se suší za sníženého tlaku (nižší než 1,5 až 2,0 kPa) a při teplotě 40 °C až je obsah vody nižší než 1,0 % (hmotnostně).

Krystalizace isopropanolatu/hydrátu melagatranu

Příklad 10 .2,0 g anhydrátu melagatranu (získané podle způsobu popsaného v příkladu 3 uvedeném výše) se vloží, do Erlenmeyerovy baňky. Poté se do baňky přidá 5,5 ml isopropanolu, 2,5 ml ethanolu, 1,4 ml vyčištěné vody a 24 ml acetonitrilu. Do baňky se umístí magnetické míchadlo a baňka se umístí na třepačku a udržuje se při tepltoě místnosti. Suspenze se míchá 7 dní. Krystaly se odfiltrují za použití vakua a poté se přes noc suší při teplotě 40 °C a tlaku nižším než 2 kPa.

Krystaly se analyzují pomocí XRPD, DSC, TGA, GC a Karl-Fischerovy titrace. Výsledek XPRD je uveden dále (tabulka 4) a je ukázán na obr. 4.

- 32 ··· · · * « · · • · · · · · ·»· · · • φ· · · ** * · ······

GC vykazuje 4,0 % (hmotnostně) isopropanolu a Karl-Fischerova titrace vykazuje 6,5 % (hmotnostně) vody. Výsledky ukazují, že se vytvořil smísený propanolat/hydrát.

TGA vykazuje snížení hmotnosti přibližně o 4,6 % při teplotě okolo 55 °C a snížení hmotnosti přibližně o 5,6 % při teplotě okolo 140 °C.

Tabulka 4

Hodnota d	Intenzita	Hodnota d	Intenzita	Hodnota d	Intenzita
(nm)	(%)	(nm)	(%)	(nm)	(%)
1,97	25	0,54	15	0,367	10
1,31	100	0,52	25	0,361	5
1,14	95	0,495	5	0,349	15
0,99	35	0,477	5	0,331	5
0,96	10	0,466	45	0,318	5
0,86	40	0,462	25	0,305	5
0,69	60	0,455	10	0,299	5
0,66	10	0,440	25	0,285	5
0,62	15	0,429	35	0,280	5
0,59	15	0,420	15	0,269	5
0,57	20	0,411	25	0,262	1
0,56	15	0,402	20	0,240	5
0,55	15	0,388	15	0,233	5

Zkratky (S)Aze = (S)-azetidin-2-karboxylat

Boc = terč.-butoxykarbonyl

- 33 Bzl = benzyl (R)Cgl = (R)-cyklohexylglycin

Pab-H = 4-aminomethylamidinobenzen = benzyloxykarbonyl

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY JýůčH '

1. V podstatě krystalická forma melagatranu.
2. Stabilní forma melagatranu.
3. Melagatran ve formě, která má vysokou stabilitu.
4. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, která je ve formě hydrátu.
5. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, která obsahuje alespoň 0,5 mol vody na mol melagatranu.
6. Sloučenina podle nároku 4 nebo 5, která má křivku diferenční skanovací kalorimetrie, při rychlosti zahřívání 10 °C/min v uzavřené nádobě s dírkou pod atmosférou protékajícího dusíku, vykazující endotermu s extrapolovanou nástupní teplotou okolo 83 °C a asociačním teplem okolo -125 J/g a vzor rentgenové difrakce v prášku, který má krystalické píky s hodnotami d 2,11, 1,05, 0,76, 0,70,

0,67, 0,64, 0,62, 0,57, 0,54, 0,53, 0,522, 0,519, 0,507,

0,490,

0,381,

0,312,

0,475

0,373

0,309

0,468

0,370

0,306

0,435

0,363

0,275

0,419, 0,400, 0,394, 0,385, 0,352, 0,339, 0,327, 0,323, 0,238 a 0,235 nm a/nébo obsah vody 4,3 % (hmotnostně).
7. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, která je ve formě anhydrátu.
8. Sloučenina podle nároku 7, která má vzor rentgenové difrakce v prášku, který má krystalické píky s hodnotami d 1, 59, 1,51, 1,09, 0, 89, 0, 84, 0, 80, 0,70, 0,68, 0, 64, 0, 62,

0,60, 0,58, 0,55, 0,53, 0,50, 0,487, 0,481, 0,471, 0,461, 0,445, 0,408, 0,397, 0,382, 0,376, 0,366, 0,344, 0,332 a 0,320 nm.
9. Sloučenina podle nároku 7, která má křivku diferenční skanovaci kalorimetrie, při rychlosti zahřívání 10 °C/min v uzavřené nádobě s dírkou pod atmosférou protékajícího dusíku, vykazující endotermu s extrapolovanou nástupní teplotou okolo 210 °C a asociačním teplem okolo

-120 J/g a/nebo vzor rentgenové difrakce v prášku, který má krystalické píky s hodnotami d 1,78, 0,89, 0,81, 0,75, 0.69, 0,63, 0,59, 0,56, 0,55, 0,54, 0,53, 0,52, 0,50,

0,471, 0,443, 0,438, 0,433, 0,373, 0,361, 0,358, 0,356, 0,324, 0,317, 0,309, 0,301, 0,241, 0,238 a 0,235 nm.

0,414, 0,412, 0,405, 0,391, 0,347, 0,340, 0,336, 0,328, 0,296, 0,283, 0,254, 0,249,
10. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, která je ve formě smíšeného isopropanolatu/hydrátu.
11. Sloučenina podle nároku 10, která má vzor rentgenové difrakce v prášku, který má krystalické píky s hodnotami d 1, 97, 1,31, 1,14, 0,99, 0, 96, 0,86, 0,69, 0, 66, 0,62, 0,59, 0, 57, 0,56, 0, 55, 0, 54, 0, 52, 0, 495, 0, 477, 0, 466, 0,462, 0,455, 0,440, 0,429, 0,420, 0,411, 0,402, 0,388, 0,367, 0,361, 0,349, 0,331, 0,318, 0,305, 0,299, 0,285, 0,280, 0,269, 0,262, 0,240 a 0,233 nm.
12. Způsob výroby sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 11, vyznačující se tím, že zahrnuje krystalizaci melagatranu.
13. Způsob podle nároku 12, vyznačující se

- 36» · · · * · • ·· · · · · · · ··»··· · · · · · « · · ···· ··· ·«·«· ·♦ 9 9 9 9 9999 tím, že zahrnuje krystalizací melagatranu z rozpouštědla.
14. Způsob podle nároku 13, vyznačující se tím, že rozpouštědlo je zvoleno ze skupiny: nižší alkylacetaty, nižší alkanoly, alifatické a aromatické uhlovodíky, dialkylethery, dialkylketony, acetonitril, vodné roztoky nebo jejich směsi.
15. Způsob podle nároku 14, vyznačující se tím, že rozpouštědlo je zvoleno ze skupiny: alkylacetaty s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, alkanoly s 1 až 6 atomy uhlíku, alifatické uhlovodíky s 5 až 12 atomy uhlíku, aromatické uhlovodíky se 6 až 10 atomy uhlíku, dialkylethery s 1 až 6 atomy uhlíku v každé alkylové části, dialkylketony s 1 až 6 atomy uhlíku v každé alkylové části, acetonitril, voda nebo jejich směsi.
16. Způsob podle nároku 15, vyznačující se tím, že rozpouštědlo je zvoleno ze skupiny: ethylacetat, ethanol, isopropanol, isooktan, n-heptan, toluen, diisopropylether, methylisobutylketon, acetonitril, voda nebo jejich směsi.
17. Způsob podle kteréhokoli z nároků 12 až 16, vyznačující se t i m, že nižší alkanol a/nebo voda se . použije jako rozpouštědlo a acetonitril a/nebo ethylacetat se použije jako protirozpouštědlo.
18. Způsob výroby sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 7 až 9, vyznačuj ícíse tím, že zahrnuje způsob podle kteréhokoli z nároků 13 až 17, kde je rozpouštědlo v podstatě prosté vody.

- 37 • · · · · * · · · · · * • · ' · * , · · ·· ·

9« 9 9 9 · · ·

9 9 9 9 9 · · » · 9 • 9 · · · 9 9 · · ·· *· ♦· ·· ····
19. Způsob výroby sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 4 až 6, vyznačující se tím, že zahrnuje způsob podle kteréhokoli z nároků 13 až 17, kde rozpouštědlo obsahuje vodu.
20. Způsob konverze jedné krystalické formy sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 3 na jinou, vyznačující se tím, že zahrnuje rekrystalizaci první krystalické formy z příhodného systému rozpouštědel.
21. Způsob interkonverze anhydrátové sloučeniny podle nároku 7 nebo nároku 9 a hydrátové sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 4 až 6, vyznačující se t í m, že zahrnuje vystavení krystalického anhydrátu nebo hydrátu (jak je příhodno) atmosféře s příhodnou hladinou relativní vlhkosti.
22. Sloučenina, kterou lze získat způsobem podle kteréhokoli z nároků 12 až 21.
23. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 11 nebo 22 pro použití jako léčivo.
24. Farmaceutický prostředek, vyznačující se t í m, že obsahuje sloučeninu podle kteréhokoli z nároků 1 až 11 nebo 22 ve směsi s farmaceuticky přijatelnou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem.
25. Prostředek podle nároku 24, vyznačující se t í m, že zahrnuje vodný roztok sloučeniny.
26. Použití sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 11

- 38 ·· ·«···· ·· ·· • · · · · · · ·· · φ · · · ······ 4··· · ·· · · · · · · · ·

4 · * ·· 4 4 ·· · · ··· nebo 22 pro výrobu léčiva pro léčení stavu, kde je inhibice thrombinu vyžadována nebo žádoucí.
27. Způsob léčení stavu, kde je inhibice thrombinu vyžadována nebo žádoucí, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 11 nebo 22 pacientovi, který takové léčení potřebuje.