MXPA02000826A - Analogos novedosos de biciclonucleosido. - Google Patents

Abstract

Esta invencion proporciona a analogos novedosos de biciclonucleosido que exhiben actividad anti-SIDA, e intermediarias para producir analogo de oligonucleotido, los cuales tienen actividad antisentido o anti gen asi como estabilidad in vivo; la presente invencion es un compuesto de la siguiente formula (1) o sus sales farmaceuticamente aceptables: (ver formula) en donde Rl representa un atomo de hidrogeno o grupo protector para un grupo hidroxi; R° representa un grupo azido o un grupo amino opcionalmente protegido, o similares; B representa un grupo purin-9-ilo o 2-oxo-1, 2-dihidropirimidin-l-ilo, los cuales estan opcionalmente substituido con substituyentes seleccionados de un grupo mostrado a continuacion: (Grupo a) atomo de halogeno, grupo alquilo que tiene 1-6 atomos de carbono, grupo hidroxi, grupo mercapto, grupo amino, y similares.

Description

ANÁLOGOS NOVEDOSOS DE BICICLONUCLEOSIDO CAMPO TÉCNICO Esta invención se refiere a análogos novedosos de biciclonucleósidos, los cuales son útiles para la síntesis de análogos de oligonucleótidos no naturales, los cuales exhiben una excelente actividad antisentido o anti-gen y estabilidad in vivo. Esta invención se refiere a análogos novedosos de oligonucleótidos, los cuales tienen una o más de las porciones de biciclonucleósidos. Además, esta invención se refiere a análogos novedosos de biciclonucleósidos modificados, los cuales exhiben actividad anti-SIDA.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los oligonucleótidos que tienen excelentes actividades antisentido o anti-gen y estabilidad in vivo se espera que sean medicamentos útiles. Sin embargo, se sabe que los oligonucleótidos naturales rápidamente se descomponen a través de varias nucleasas en la sangre o en las células. Para resolver estos problemas, se han sintetizado numerosos análogos de oligonucleótidos no naturales, y se ha tratado de desarrollarlos como medicamentos. Por ejemplo, se conocen los oligonucleótidos en donde el átomo de oxígeno que se une a la átomo de fósforo del enlace fosfodiéster está sustituido por un átomo de azufre, un grupo metilo, un átomo de boro. Además, también se conocen oligonucleótidos cuyas porciones de azúcar y/o base están químicamente modificadas. Más concretamente, ISIS Co. ha desarrollado un oligonucleótidos de tioato, ISIS2922, como un agente terapéutico para retinitis infectada por citomegalovirus humano y se ha vendido como Vitravene (nombre comercial) en los Estados Unidos. Cualesquiera análogos de oligonucleótidos no naturales descritos anteriormente, sin embargo, no han sido totalmente satisfactorios debido a su potencia y suficiente de actividad antisentido o anti-gen (es decir, la habilidad para formar estructuras de cadenas complementarias con ARNm o ADN) y estabilidad a varias nucleasas, y debido a los aspectos laterales causados por la unión no selectiva a varias proteínas in vivo. De esta manera, se ha deseado desarrollar análogos de oligonucleótidos no naturales que tengan actividades antisentido o anti-gen más potentes, estabilidad in vivo, y menos efectos laterales. Los compuestos que tienen una porción dioxab¡ciclo[2,2,1]heptano, un la cual está relacionada con aquella de la presente invención y que se muestra más adelante, se describe en WO 98/39352. Estos compuestos difieren de los compuestos de la presente invención en el substituyente en la posición 3' de ribosa. Además, no se ha sabido que éstos compuestos exhiben actividad anti-SIDA. en donde B° indica una base de ácido nucleico de pirimidina o purina o sus análogos, X e Y son iguales o diferentes y cada uno representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, un grupo alquenilo, un grupo alquinilo, un grupo cicloalquilo, un grupo aralquilo, un grupo arilo, un grupo acilo o un grupo sililo. Un objeto de la presente invención es proporcionar análogos novedosos de biciclonucleósido, los cuales sean útiles para la síntesis de oligonucleótidos no naturales que exhiban excelente actividad antisentido o anti-gen y estabilidad in vivo. Un objeto de la presente invención amena es proporcionar análogos novedosos de oligonucleótido que tengan una o más porciones de biciclonucleósido importantes. Además, otro objeto de la presente invención es proporcionar análogos novedosos de biciclonucleósido que tengan actividades anti-SIDA. Los inventores de la presente han realizado investigaciones cuidadosas para completar estos objetivos, y han encontrado que los análogos novedosos de biciclonucleósido que tengan una porción 2'-O, 4'-O-metileno son compuestos intermediarios importantes para sintetizar oligonucleótidos no naturales, los cuales tienen excelente actividad antisentido o anti-gen, así, estabilidad in vivo. Además, los inventores de la presente encontraron que los análogos novedosos de oligonucleótido que tienen una o más de las porciones de biciclonucleósido, exhiben excelente actividad antisentido o anti-gen así como estabilidad y vivo. Además, dichos análogos de biciclonucleósido tienen excelente actividad anti-SIDA. De esta manera, los inventores de la presente han completado la presente invención.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN 1) Los análogos novedosos de biciclonucleósido son los compuestos representados por la fórmula general (1) o sus sales farmacéuticamente aceptables, [En donde R1 es igual o diferente y cada uno representa un átomo de hidrógeno, un grupo protector para un grupo hidroxi en síntesis de ácido nucleico, un grupo de ácido fosfórico, un grupo de ácido fosfórico protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, o un grupo representado por la fórmula -P(R4a)R4b (en donde R4a y R4b son iguales o diferentes y cada uno representa un grupo hidroxi, un grupo hidroxi protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo mercapto, un grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo amino, un grupo amino protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo alcoxi que tienen 1-6 átomos de carbono, un grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo cianoalcoxi que tiene 1-7 átomos de carbono, o un grupo amino sustituido por un grupo alquilo que tiene unos-6 átomos de carbono), R2 representa un grupo azido, un grupo amino, o un grupo representado por la fórmula -NH-R3 (en donde R3 es igual o diferente y cada uno representa un grupo protector para un grupo amino en la síntesis de ácido nucleico, un grupo de ácido fosfórico, un grupo de ácido fosfórico protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, ó un grupo representado por la fórmula -P(R4a)R4b (en donde R4a y R4b son iguales o diferentes y cada uno representa un grupo hidroxi, un grupo a hidroxi protegido con un grupo protector en síntesis de ácido nucleico, un grupo mercapto, un grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo amino, un grupo amino protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo alcoxi que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo cianoalcoxi que tiene 1-7 átomos de carbono, o un grupo amino sustituido por un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono). B representa un grupo purin-9-ilo o un grupo 2-oxo-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, cada uno de los cuales está opcionalmente substituido con uno o más substituyentes seleccionados del siguiente grupo ].

(Grupo a). un grupo hidroxi, un grupo hidroxi protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo alcoxi que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo mercapto, un grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo amino, un grupo amino protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo amino sustituido por un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono, y un átomo de halógeno. Entre los compuestos de la presente invención, los compuestos preferidos son los siguientes: 2) los compuestos en donde R1 representa un átomo de hidrógeno, un grupo acilo alifático, un grupo acilo aromático, un grupo sililo, un grupo metilo substituido por uno a 3 grupos arilo, o un grupo metilo substituido por uno a 3 grupos arílo, en donde los anillos arilo están sustituido por un grupo alquilo el interior, un grupo alcoxi inferior, un átomo de halógeno, o un grupo ciano. 3) Los compuestos en donde R1 representa un átomo de hidrógeno, un grupo sililo, un grupo metilo substituido por 1 a 3 grupos arilo, o un grupo metilo substituido por uno a 3 grupos arilo en donde los anillos arilo están sus incluidos por un grupo alquilo el interior, grupo alcoxi, un átomo de halógeno, o un grupo ciano. 4) Los compuestos en donde R1 representa un átomo de hidrógeno, un grupo trimetilsililo, un grupo t-butildimetilsililo, un grupo t-butildifenilsililo, un grupo bencilo, un grupo trifenilmetilo, un grupo 4-metoxibencilo, un grupo metoxifenildifenilmetilo, grupo 4,4'-dimetoxitrifenilmetilo, o un grupo 4,4',4"-tr¡metoxitrifen¡lmetilo. 5) los compuestos en donde R2 representa un grupo azido, un grupo amino, o un grupo representado por la fórmula -NH-R3 (en donde R3 representa un grupo acilo alifático, grupo acilo aromático, un grupo metilo substituido por uno a 3 grupos arilo, un grupo y la sustituido por uno a 3 grupos arilo, en donde anillos arilo están sustituido por un grupo alquilo inferior, un grupo alcoxi inferior, un átomo de halógeno, un grupo ciano, un grupo sililo, un grupo fosforoamidita, un grupo fosfonilo, un grupo de ácido fosfórico o un grupo de ácido fosfórico sustituido por un grupo profesor en la síntesis de ácido nucleico), 6) Los compuestos en donde R2 representa un grupo azido, un grupo amino o un grupo representado por la fórmula -NH-R3 (en donde R3 representa un grupo acetilo, un grupo trifluoroacetilo, un grupo benzoilo, un grupo bencilo, un grupo p-metoxibencilo, un grupo ter-butildifenilsililo, un grupo representado por la fórmula -P(OC2H4CN)(HCH(CH3)2), un grupo representado por la fórmula -P(OCH3)NCH(CH3)2), un grupo fosfonilo, un grupo de ácido 2-clorofenil- o 4-clorofenilfosfórico), 7) los fosfatos en donde R2 representa un grupo azido o un grupo amino, 8) los compuestos en donde B representa 6-aminopurin-9-ilo (es decir, adeninilo), 6-amino-pirin-9-ilo, en donde el grupo arilo está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2,6-diaminopurin-9-ilo, en donde uno o ambos grupo amino están protegidos con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-cloropurin-9-ilo, 2-amino-6-cloropurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-fluoropurin-9-ilo, 2-amino-6-fluoropurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-bromopurin-9-ilo, 2-amino-6-bromopurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-hidroxipurin-9-ilo (es decir, guaninilo), 2-amino-6-hidroxipurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 6-amino-2-metoxipurin-9-ilo, 6-amino-2-metoxipurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 6-amino-2-cloropurin-9-ilo, 6-amino-2-cloropurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 6-amino-2-fluoropurin-9-ilo, 6-amino-2-fluoropurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2,6-dimetoxipurin-9-ilo, 2,6-dicloropurin-9-ilo, 6-mercaptopurin-9-ilo, 6-mercaptopurin-9-ilo en donde el grupo mercapto está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-oxo-4-am¡no-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo (es decir, citosinilo), 2-oxo-4-amino-1 ,2-dih¡dropirimidin-1-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 4-amino-2-oxo-5-fluoro-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, 4-amino-2-oxo-5-fluoro-1,2-dihidropirimidin-1-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 4-amino-2-cloro-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, 4-amino-2-cloro-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-oxo-4-metoxi-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, 2-oxo-4-mercapto-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, 2-oxo-4-mercapto-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, en donde el grupo mercapto está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2,3-dih¡droxipirimidin-1-ilo (es decir, uracililo), 2,4-dihidrox¡-5-metilpirimidin-1-ilo (es decir, timinilo), 4-amino-5-metil-2-oxo-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, o 4-amino-5-metil-2-oxo-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 9) Compuestos en donde B representa 6-benzo¡laminopurin-9-ilo, adeninilo, 2-benzoilamino-6-hidroxipurin-9-ilo, guaninilo, 2-oxo-4-benzoilamino-1 ,2-dih¡drop¡rimidin-1-ilo, citosinilo, uracililo o timinilo.

Los compuestos en donde R1 se selecciona de 2) a 4) anteriores, R2 se selecciona de 5) a 7) anteriores y B se selecciona de 8) o 9) anteriores también son preferidos. Los compuestos en donde R1 se selecciona de 2), R2 se selecciona de 5), y B se selecciona de 8), y en donde R1 se selecciona de 3), R2 se selecciona de 6) y B se selecciona de 8), y en donde R1 se selecciona de 4), R2 se selecciona de 6) y B se selecciona de 9), son particularmente preferidos. Los análogos novedosos de oligonucleótidos de la presente invención son: (1 ) análogos de oligonucleótidos y sus sales farmacéuticamente aceptables, teniendo una o más unidades estructurales de la fórmula (1a), siempre que cuando un oligonucleótidos tenga 2 o más unidades estructurales de la fórmula (1a) cada B es igual o diferente. (la) [En donde, B representa un grupo purin-9-ilo o un grupo 2-oxo-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, el cual podrá estar sustituido con substituyentes seleccionados del grupo que se presenta a continuación].

(Grupo a). un grupo hidroxi, un grupo hidroxi protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo alcoxi que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo mercapto, un grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo amino, un grupo amino protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo amino sustituido por un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono, y un átomo de halógeno. Aquí, los "análogos de oligonucleótidos" representan oligonucleótidos no naturales en donde las unidades de nucleósidos de un oligonucleótidos natural están sustituidas con una o más porciones de nucleósidos teniendo las estructuras anteriores (1a). Por ejemplo, los análogos de oligonucleótidos involucran derivados de azúcar modificada, derivados de tioato en donde los sitios de unión de fosfodiéster están tioatados, esteres en donde la porción de ácido fosfórico está esterificada, y derivados de amida en donde un grupo amino en una base de purina están amidados como otras porciones de nucleósidos o nucleótidos. Entre los análogos novedosos de oligonucleótidos de la presente invención, los análogos de oligonucleótidos preferidos son compuestos y sus sales farmacéuticamente aceptables, en donde: 2) B es un grupo o 6-aminopurin-9-ilo (es decir, un grupo adeninilo), un grupo 6-aminopurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo 2,6-diaminopurin-9-ilo un grupo 2-amino-6-cloropurin-9-ilo, un grupo 2-amino-6-cloropurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo 2-amino-6-fluoropurin-9-ilo , un grupo 2-amino-6-fluoropurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo 2-amino-6-bromopurin-9-ilo, un grupo o 2-amino-6-bromopurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo 2-amino-6-hidroxipurin-9-ilo (es decir, un grupo guaninilo), un grupo 2-amino-6-hidroxipurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo 2-amino-6-hidroxipurin-9-ilo en donde los grupos amino e hidroxi están protegidos con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo 6-amino-2-metoxipurin-9-ilo, 6-amino-2-cloropurin-9-ilo, 6-amino-2-fluoropurin-9-ilo, 2,6-dimetoxipurin-9-ilo, 2,6-dicloropurin-9-ilo, 6-mercaptopurin-9-ilo, 2-oxo-4-amino-1 , 2-dih¡dropirimid¡n-1-¡lo (es decir, un grupo citosinilo), 2-oxo-4-amino- 1 ,2-dihidrop¡r¡mid¡n-1-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo 2-oxo-4-amino-5-fluoro-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, 2-oxo-4-amino-5-fluoro-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo 4-amino-2-oxo-5-cloro-1 ,2-dihidropirimidin-1 -ilo,2-oxo-4-metox¡-1 , 2-dih¡dropirimidin-1 -ilo, 2-oxo-4-mercapto-1 ,2-dihidropirimidin-l-ilo, 2-oxo-4-hidroxi-1 ,2-dihidropirimidin-l-ilo (es decir, un grupo uracililo), 2-oxo-4-hidroxi-5-metil-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo (es decir, un grupo timinilo), 4-amino-5-metil-2-oxo-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo (es decir, un grupo 5-metilcitosinilo), o 4-amino-5-metil-2-oxo-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, y 3) compuestos y sus sales farmacéuticamente aceptables en donde B es un grupo 6-benzoilaminopurin-9-ilo, un grupo adeninilo, un grupo 2-isobutirilam¡no-6-hidroxipurin-9-ilo, un grupo guaninilo, un grupo 2-oxo-4-benzoilamino-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, un grupo citosinilo, un grupo 2-oxo-5-metil-4-benzo¡lamino-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, un grupo 5-metilcitosinilo, un grupo uracililo o un grupo timinilo. El "grupo protector para un grupo hidroxi en la síntesis de ácido nucleico" en la definición de R1 anterior no tiene limitación, ya que el grupo protector puede proteger el grupo hidroxi establemente en la síntesis de ácido nucleico. Ejemplos de grupos protectores son: "Un grupo acilo alifático", por ejemplo, un grupo alquilcarbonilo tal como formilo, acetilo, propinoilo, butirilo, isobutirilo, pentanoílo, pivaloílo, valerilo, isovalerilo, octanoílo, decanoílo, 8-metilnonanoílo, 3-etiloctanoílo, 3,7-dimetiloctanoílo, undecanoílo, tridecanoílo, hexadecanoílo, 14-metilpentadecanoílo, 13,13-dimetiltetradecanoílo, 1 -metilheptadecanoílo, nonadecanoílo, eicosanoílo y henicosanoílo, un grupo alquilcarbonilo carboxilado tal como un grupo succinoio, glutaroilo y adipoilo, un grupo halógeno alquilcarbonilo inferior tal como cloroacetilo, dicloroacetilo, tricloroacetilo y trifluoroacetilo, un grupo alcoxi inferior-alquilcarbonilo inferior tal como metoxiacetilo, y un grupo alquilcarbonilo insaturado tal como (E)-2-metil-2-butenoilo; "Un grupo acilo aromático", por ejemplo, un grupo arilcarbonilo tal como benzoilo, -naftoílo y -naftoílo, un grupo halogenoarilcarbonilo tal como 2-bromobenzoílo, 4-clorobenzoílo, un grupo arilcarbonilo inferior alquilado tal como 2,4,6-trimetilbenzoílo y 4-toluoilo, un grupo arilcarbonilo inferior alcoxilado tal como 4-anisoilo, un grupo arilcarbonilo carboxilado tal como 2-carboxibenzoílo, 3-carboxibenzoílo y 4-carboxibenzoílo, un grupo arilcarbonilo nitrado tal como 4-nitrobenzoílo y 2-nitrobenzoílo; un grupo arilcarbonilo inferior alcoxicarbonilado tal como 2-(metoxicarbonil) benzoílo, un grupo arilcarbonilo arilado tal como 4-fenilbenzoílo; un "grupo tetrahidropiranilo o tetrahidrotiopiranilo" tal como tetrahidropiran-2-ilo, 3-bromotetrahidropiran-2-ilo, 4-metoxitetrahidropiran-4-ilo tetrahidrotiopiran-2-ilo y 4-metoxitetrahidrotiopiran-4-ilo; "un grupo tetrahidrofuranilo o tetrahidrotiofuranilo", tal como tetrahidrofuran-2-ilo y tetrahidrotiofuran-2-ilo; "grupos sililo". por ejemplo un grupo sililo tri-alquilo inferior tal como trimetilsililo, trietilsililo, isopropildimetilsililo, t-butildimetilsililo, metildiisopropilsililo, metildi-t-butilsililo y triisopropilsililo, un grupo a sililo alquilo tri-inferior substituido por 1-2 grupos arilo tales como difenilmetilsililo, t-butildifenilsililo, difenilisopropilsililo y fenildiisopropilsililo; "un grupo alcoximetilo inferior" tal como metoximetilo, 1 ,1-dimetil-1 -metoximetilo, etoximetilo, propoximetilo, isopropoximetilo, butoximetilo y t-butoximetilo; "un grupo alcoximetilo inferior alcoxilado-inferior" tal como 2-metoxietoximetilo; "un grupo halógeno alcoximetilo inferior" tal como 2,2,2-tricloroetoximetilo y bis (2-cloroetoxi)metilo; "un grupo de etilo inferior alcoxilado" tal como 1-etoxietilo y 1-(isopropoxi)etilo; "un grupo etilo halogenado" tal como 2,2,2-tricloroetilo; un "grupo metilo substituido por 1 a 3 grupos arilo" tal como bencilo, a-naftilmetilo, ß-naftilmetilo, difenilmetilo, trifenilmetilo, a-naftildifenilmetilo o 9-antrilmetilo; "un grupo metilo substituido por 1 a 3 grupos arilo en donde el anillo o arilo está sustituido por alquilo inferior, alcoxi inferior, halógeno o grupos ciano", tales como 4-metilbencilo, 2,4,6-trimetilbencilo, 3,4,5-trimetilbencilo, 4-metoxibencilo, 4-metoxifenildifenilmetilo, 4,4'- dimetoxitrifenilmetilo, 4,4',4"-trimetoxitrifenilmetilo, 2-nitrobencilo, 4-nitrobencilo ,4-clorobencilo, 4-bromobencilo y 4-cianobencilo; un "grupo alcoxicarbonilo inferior" tal como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, t-butoxicarbonilo e isobutoxicarbonilo; un "grupo alcoxicarbonilo inferior substituido por un átomos de halógeno o un grupo alquil sililo tri-inferior" tal como 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, y 2-trimetilsililoetoxicarbonilo, "un grupo alqueniloxicarbonilo" tal como viniloxicarbonilo un grupo, y ariloxicarbonilo; un " grupo aralquiloxicarbonilo, en donde el anillo arilo puede estar sustituido por 1 o 2 grupos alcoxi inferior o nitro", tales como benciloxicarbonilo, 4-metoxibenciloxicarbonilo, 3,4-dimetoxidibenciloxicarbonilo, 2-nitrobenciloxicarbonilo y 4-nitrobenciloxicarbonilo. Los grupos protectores preferidos son un grupo acilo alifático, un grupo acilo aromático, un grupo metilo substituido por uno a 3 grupos arilo, un grupo metilo substituido por uno a 3 grupos arilo, en donde el anillo arilo está substituido por un grupo alquilo inferior, alcoxi inferior, átomos de halógeno o grupos ciano, o un grupo sililo. Los grupos protectores más preferidos son el grupo acetilo, benzoilo, bencilo, p-metoxibencilo, dimetoxitritilo, monometoxitritilo o ter-butildifenilsililo. Los grupos protectores en la síntesis de ácido nucleico descritos como "un grupo de ácido fosfórico protegido con un grupo protector en la llW->-d- síntesis de ácido nucleico" en la definición anterior de R1 y R3 no tiene limitación, ya que el grupo protector puede proteger al grupo de ácido fosfórico en la síntesis de ácido nucleico. Ejemplos de los grupos protectores son "un grupo alquilo inferior" tal como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, ter-butilo, n-pentilo, isopentilo, 2-metilbutilo, neopentilo, 1-etilpropilo, n-hexilo, isohexilo, 4-metilpentilo, 3-metilpentilo, 2-metilpentilo, 1-metilpentilo, 3,3-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 1 ,1 -dimetilbutilo, 1 ,2-dimetilbutilo, 1 ,3-dimetilbutilo, 2,3-dimetilbutilo y 2-etilbutilo; un "grupo alquilo inferior cianurado" tal como 2-cianoetilo y 2-ciano-1 ,1-dimetiletilo; "un grupo etilo substituido por un grupo sililo" tal como 2-metildifenilsililetilo, 2-trimetilsililetilo y 2-trifenilsililetilo; "un grupo alquilo inferior halogenado" tal como 2,2,2-tricloroetilo, 2,2,2-tribromoetilo, 2,2,2-trifIuoroetilo y 2,2,2-tricloro-1 ,1-dimetiletilo; "un grupo alquenilo inferior" tal como etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 1-metil-2-propenilo, 1 -metil-1 -propenilo, 2-metil-1 -propenilo, 2-metil-2-propenilo, 2-metil-2-propenilo, 1-butenilo, 2-butenilo, 1-metil-2-butenilo, 1-metil-1 -butenilo, 3-metil-2-butenilo, 1-metil-2-butenilo, 3-butenilo, 1-metil-3-butenilo, 2-metil-3-butenilo, 1 -etil-3-butenilo, 1-pentenilo, 2-pentenilo, 1-metil-2-pentenilo, 2-metil-2-pentenilo, 3-pentenilo, 1-metil-3-pentenilo, 2-metil-3-pentenilo, 4-pentenilo, 1-metil-4-pentenilo, 2-metil-4-pentenilo, 1 -hexenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 4-hexenilo, y 5-hexenilo; "un grupo cicloalquilo" tal como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciciohexilo, cicioheptilo, norbornilo y adamantilo; "un grupo alquenilo inferior cianurado" tal como 2-cianobutenilo; "un grupo aralquilo" tal como bencilo, a-naftilmetilo, ß-naftilmetilo, ¡ndenilmetilo, fenantrenilmetilo, antracenilmetilo, difenilmetilo, trifenilmetilo, 1 -fenetilo, 2-fenetilo, 1-naftiletilo, 2-naftiletilo, 1 -fenilpropilo, 2-fenilpropilo, 3-fenilpropilo, 1 -naftilpropilo, 2-naftilpropilo, 3-naftilpropilo, 1-fenilbutilo, 2-fenilbutilo, 3-fenilbutilo ,4-fenilbutilo, 1-naftilbutilo, 2-naftilbutilo, 3-naftilbutilo ,4-naftilbutilo, 1 -fenilpentilo, 2-fenilpentilo, 3-fenilpentilo, 4-fenilpentilo, 5-fenilpentilo, 1-naftilpentilo, 2-naftil pentilo, 3-naftilpentilo ,4-naftilpentilo, 5-naftilpentilo, 1 -fenilhexilo, 2-fenilhexilo, 3-fenilhexilo ,4-fenilhexilo, 5-fenilhexilo, 6-fenilhexilo, 1-naftilhexilo, 2-naftilhexilo, 3-naftilhexilo ,4-naftilhexilo, 5-naftilhexilo y 6-naftilhexilo; "un grupo aralquilo en donde el anillo arilo está substituido por un grupo nitro, y/o un átomo de halógeno" tal como 4-clorobencilo, 2-(4-nitrofenil)etilo, o-nitrobencilo, 4-nitrobencilo y 2 ,4-dinitrobencilo, 4-cloro-2-nitrobencilo, "un grupo arilo" tal como fenilo, indenilo, naftilo, fenantrenilo y antracenilo; "un grupo arilo sustituido por un grupo alquilo inferior, átomo de halógeno, y/o un grupo nitro" tal como 2-metilfenilo, 2,6-dimetilfenilo, 2-clorofenilo, 4-clorofenilo, 2,4-diclorofenilo, 2,5-diclorofenilo, 2-bromofenilo ,4-nitrofenilo ,4-cloro-2-nitrofenilo. Los grupos protectores preferidos son "un grupo alquilo inferior", "un grupo alquilo inferior substituido por un grupo ciano", "un grupo aralquilo", "un grupo aralquilo en donde el anillo arilo está substituido por un grupo nitro y/o átomo de halógeno", o "un grupo arilo sustituido por un grupo alquilo inferior, un átomo de halógeno, y/o grupo nitro". Los grupos muy preferidos son un grupo 2-cianoetilo, un grupo 2,2,2-tricloroetilo, un grupo bencilo, un grupo 2-clorofenilo o un grupo 4-clorofenilo. "Los grupos alquilo que tienen 1-6 átomos de carbono" en la definición del grupo a anterior son, por ejemplo, grupos alquilo de cadena recta o ramificada teniendo 1-6 átomos de carbono tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, ter-butilo, pentilo y hexilo. Los grupos preferidos son grupos alquilo que tienen 1-4 átomos de carbono, y los grupos alquilo muy preferidos son los grupos alquilo que tienen 1-2 átomos de carbono, del grupo muy preferido es un grupo metilo. El "grupo protector para un grupo amino en la síntesis de ácido nucleico" descrito en la definición de R2 anterior, no tiene limitación, ya que puede proteger grupos amino en la síntesis de ácido nucleico. Estos grupos protectores son, "Un grupo acilo alifático" por ejemplo, un grupo alquilcarbonilo tal como formilo, acetilo, propinoílo, butirilo, isobutirilo, pentanoílo, pivaloílo, valerilo, isovalerilo, octanoílo, decanoílo, 8-metilnonanoílo, 3-etiloctanoílo, 3,7-dimetiloctanoílo, undecanoílo, tridecanoílo, hexadecanoílo, 14-metilpentadecanoílo, 13,13-dimetiltetradecanoílo, 1-metilheptadecanoílo, nonadecanoílo, eicosanoílo y henicosanoílo; un grupo alquilcarbonilo carboxilado tal como succinoílo, glutaroílo y adipoílo; un grupo halógeno alquilcarbonilo inferior tal como cloroacetilo, dicloroacetilo, tricloroacetilo y trifluoroacetilo; un grupo alcoxi inferior-alquilcarbonilo inferior tal como metoxiacetilo, un grupo alquilcarbonilo nos ha cobrado tal como (E)-2-metil-2-butenoílo; "Un grupo acilo aromático", por ejemplo, un grupo arilcarbonilo tal como benzoílo, -naftoílo y -naftoílo; un grupo halogenoarilcarbonilo tal como 2-bromobenzoílo y 4-clorobenzoílo; un grupo alquilcarbonilo inferior alquilado tal como 2 ,4, 6-trimetilbenzoílo y 4-toluoílo; un grupo arilcarbonilo inferior alcoxilado tal como 4-anisoílo; un grupo arilcarbonilo carboxilado tal como 2-carboxibenzoílo, 3-carboxibenzoílo y 4-carboxibenzoílo; un grupo arilcarbonilo nitrurado tal como 4-nitrobenzoílo y 2-nitrobenzoílo; un grupo arilcarbonilo inferior alcoxicarbonilado tal como 2-(metoxicarbonil)benzoílo, un grupo arilcarbonilo arilado tal como 4-fenilbenzoílo; "un grupo alcoxicarbonilo inferior" tal como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, t-butoxicarbonilo e isobutoxicarbonilo; "un grupo alcoxicarbonilo inferior substituido por un átomo de halógeno o un grupo alquil sililo tri inferior" tal como 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo y 2-trimetilsililoetoxicarbonilo; "un grupo alqueniloxicarbonilo" tal como viniloxicarbonilo, y ariloxicarbonilo; "un grupo aralquiloxicarbonilo, en donde el anillo arilo puede estar sustituido por 1-2 grupos alcoxi inferior o nitro", tal como benciloxicarbonil o ,4-metoxibenciloxicarbonilo, 3,4-dimetoxibenciloxicarbonilo, 2-nitrobenciloxicarbonilo y 4-nitrobenciloxicarbonilo.

Entre estos, los grupos preferidos son "un grupo acilo alifático", "un grupo acilo aromático", o "un grupo araiquiloxicarbonilo, en donde el anillo arilo puede estar sustituido por 1-2 grupos alcoxi inferior o nitro". Los grupos muy preferidos son "un grupo acilo alifático" o "un grupo araiquiloxicarbonilo, en donde el anillo arilo puede estar sustituido por 1-2 grupos alcoxi inferior o nitro". Un grupo particularmente preferido es un grupo trifluoroacetilo un grupo benciloxicarbonil. El "grupo fosforamidita" descrito anteriormente, representa un grupo de la fórmula -P(OR3a)(NR3b) (en donde R3a representa un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono un grupo cianoalquilo que tiene 1-7 átomos de carbono, mientras que R3b representa un grupo alquilo teniendo 1-6 átomos de carbono). Los grupos preferidos son aquellos representados por la fórmula -P(OC2H4CN)(NCH(CH3)2) o la fórmula -P(OCH3)(NCH(CH3)2). "Átomo de halógeno" el descrito en la definición anterior del grupo es un átomo de flúor, cloro, bromo o yodo, y los átomos preferidos son átomos de flúor o cloro. "Grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono" descrito en la definición anterior de R4a, R4b y el grupo a es, por ejemplo, un grupo alquilo de cadena recta o ramificada teniendo 1-6 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, n-propil o, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, ter-butilo, pentilo y hexilo. Los grupos muy preferidos son los grupos metilo o de etilo.

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"Grupo hidroxilo protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico" descrito en la definición anterior de R4a, R4b y el grupo a, es un grupo similar a que el descrito previamente en el "grupo protector para un grupo hidroxi en la síntesis de ácido nucleico", en la definición anterior de R1. Los grupos preferidos son "un grupo acilo alifático", y "un grupo acilo aromático", y el grupo muy preferido es un grupo benzoilo. "El grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico" descrito en las definiciones anteriores de R4a, R4b y el grupo es, por ejemplo, "un grupo formador de disulfuros", por ejemplo, un grupo alquiltio tal como metiltio, etiltio y ter-butiltio, y un grupo ariltio tal como benciltio, además de los grupos descritos en el "grupo protector para un grupo hidroxi en la síntesis de ácido nucleico" en la definición de R1. Entre estos, los grupos preferidos son "un grupo acilo alifático", o "un grupo acilo aromático", y el grupo muy preferido es un grupo benzoilo. En la "grupo amino protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico" descrito en las definiciones anteriores de R a, R4b y el grupo a, es un grupo similar a aquellos descritos en "el grupo protector para un grupo amino en la síntesis de ácido nucleico", aquella ácido descrito en la definición de R2. Los grupos preferidos son "grupos acilo alifáticos" o "grupos acilo aromáticos", y el grupo muy preferido es un grupo benzoilo. "Un grupo alcoxi que tiene 1-6 átomos de carbono" descrito en las definiciones anteriores de R4a, R4b y el grupo a es, por ejemplo, un grupo alcoxi de cadena recta o ramificada teniendo 1-6 átomos de carbono, tales *****!**.**». como metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, isobutoxi, s-butoxi, ter-butoxi, pentiloxi y hexiloxi. Los grupos preferidos son los grupos metoxi o etoxi. "Grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono" descrito en las definiciones anteriores de R4a, R4b y el grupo a es, por ejemplo, un grupo metiltio, etiltio, propiltio, isopropiltio, butiltio, isobutiltio, s-butiltio, ter-butiltio, pentiltio o hexiltio. Los grupos preferidos son grupos metiltio o etiltio. "Grupo alquilamino substituido por un grupo alquilo teniendo 1-6 átomos de carbono" descrito en las definiciones anteriores de R4a, R4b y el grupo a es, por ejemplo, un grupo metilamino, etilamino, propilamino, ¡sopropilamino, butilamino, isobutilamino, s-butilamino, ter-butilamino pentilamino, hexilamino, dimetilamino, dietilamino, dipropilamino, diisopropilamino, dibutilamino, diisobutilamino, di(s-butil)amino, di(ter-butil)amino, dipentilamino o dihexilamino. Los grupos preferidos son los grupos metilamino, etilamino, dimetilamino o dietilamino. "Grupo cianoalcoxi que tiene de 1-7 átomos de carbono" descrito en la definición anterior de R4a y R4b es, por ejemplo, un grupo cianometoxi, cianoetoxi, cianopropiloxi, cianobutiloxi, cianopentiloxi o cianohexiloxi, y el grupo preferido es un grupo 2-cianoetoxi. "Sales farmacéuticamente aceptables de los mismos" como se describe anteriormente indican las sales de los análogos de oligonucleósido (1 ) ni los análogos de oligonucleótido que tienen la estructura química anterior (1a). Entre estas sales, las sales preferidas son, por ejemplo, sales metálicas tales como sales de metal alcalino, por ejemplo, sales de sodio, sales de potasio, sales de litio; sales de metal alcalinotérreo, por ejemplo, sales de calcio y sales de magnesio; sales de aluminio, sales de hierro, sales de zinc, sales de cobre, sales de níquel y sales de cobalto; las sales de amina tales como sales inorgánicas, por ejemplo, sales de amonio; sales orgánicas, por ejemplo, sales de t-octilamina, sales de dibencilamina, sales de morfolina, sales de glucosamina, sales de alquiléster de fenilglicina, sales de etilenodiamina, sales de N-metilglucamina, sales de guanidina, sales de dietilamina, sales de trietilamina, sales de diciclohexilamina, sales de N,N'-dibenciletilenodiamina, sales de cloroprocaína, sales de procaína, sales de dietanolamina, sales de N-bencil-fenetilamina, sales de piperazina, sales de tetrametilamonio y sales de tris(hidroximetil)aminometano; sales inorgánicas tales como sal de ácido hidrohalogénico, por ejemplo, sales de ácido fluorhídrico, sales de ácido clorhídrico, sales de ácido bromhídrico y sales de ácido yodhídrico; sales de ácido nítrico, sales de ácido perclórico, sales de ácido sulfúrico y sales de ácido fosfórico; sales de ácido orgánico tales como sales de éster alcansulfónico inferior, por ejemplo, sales de ácido metansulfónico, sales de ácido trifluorometansulfónico, y sales de ácido etansulfónico; sales de ácido arilsulfónico, por ejemplo, sales de ácido bencensulfónico y sales de ácido p-toluensulfónico; sales de ácido acético, sales de ácido málico, sales de ácido fumárico, sales de ácido succínico, sales de ácido cítrico, sales de ácido tartárico, sales de ácido oxálico y sales de ácido málico; y sales de aminoácidos tales como sales de glicina, sales de lisina, sales de arginina, sales de ornitina, sales de ácido glutámico y sales de ácido aspártico. Entre estas sales, se prefieren la sal de sodio, sal de potasio y sal de trietilamina para análogos de oligonucleótidos conteniendo la estructura de nucleósido (1a) y la forma libre de nucleósido se prefiere para los análogos de nucleósido (1 ). Los análogos de nucleósido (1) y análogos de oligonucleótido que tienen la estructura anterior (1a) en la presente invención absorben o adsorben agua para formar hidratos cuando se dejan en la atmósfera. Estas sales están incluidas en la presente invención. Los análogos de nucleósido (1 ) y análogos de oligonucleótido que involucran la estructura anterior (1a) en la presente invención absorben ciertos solventes para formar solvatos. Estas sales están incluidas en la presente invención. Algunos ejemplos típicos del compuesto (1 ) de la presente invención pueden ser ilustrados en los cuadros 1 y 2. Las abreviaturas utilizadas en los cuadros uno y 2 son las siguientes: Bn: un grupo bencilo, Bz: un grupo benzoilo, Me: un grupo metilo, PMBn: un grupo p-metoxibencilo, MMTr: un grupo 4-metoxitrifenilmetilo, DMTr: un grupo 4,4,-dimetoxitrifenilmetilo, TMTr un grupo 4,4',4"-trimetoxitrifenilmetilo, TMS: un grupo trimetilsililo, TBDMS: un grupo ter-butildimetilsililo, TBDPS: un grupo ter-butildifenilsililo.

CUADRO 1 (!') 10 15 20 10 CUADRO 2 ti") Entre los compuestos listados en estos cuadros, los compuestos preferidos son los siguientes (números del compuesto de ilustración): 1-3, 1-4, 1-7, 1-9, 1-10, 1-16, 1-17, 1-19, 1-20, 1-21 , 1-22, 1-23, 1-27, 1-28, 1 a 31 , 1 a 33, 1 a 34, 1-40, 1-41 , 1-43, 1-44, 1-45, 1-46, 1-47, 1-49, 1-50, 1-56, 1-57, 1-82, 1-83, 2-3, 2-4, 2-5, 2-6, 2-7, 2-8, 2-9, 2-10, 2-13, 2-14, 2-15, 2-16, 2-17, 2-18, 2-19, 2-20, 2-21 , 2-22, 2-48, 2-59, 2-60, y 2-61. Entre los compuestos muy preferidos, se encuentran los siguientes (números del compuesto de ilustración): 1-4, 1-22, 1-28, 1-46, 1-49, 1-50, 1-56, 1-57, 1-82, 1-83, 2-3, 2-4, 2-6, 2-13, 2- 14, 2-16, 2-21 , 2-22, 2-48, 2-59, 2-60 y 2-61. Los compuestos muy preferidos son como sigue (números del compuesto de ilustración): 2-4: S'-amino-S'-desoxi^'-O^'-C-metilen-d- metiluridina, 2-14: S'-azido-S'-desoxi^'-O^'-C-metilen-d- metiluridina, 2-36: 3'-azido-3,-desoxi-5,-0-(4,4,-dimetoxitritil)-2'-O,4,-C-metilen-5-metiluridina, 2-48: S'-acido-d'-O-ter-butildifenilsilil-S'-desoxi^'-O^'-C-metilen-d-metiluridina y 2-60:3,-amino-3,-desoxi-5'-O-(4,4'-dimetox¡tritil)-2,-O,4'-C-metilen-d-metiluridina. Los compuestos de la presente invención pueden ser sintetizados de acuerdo con el método A descrito más adelante.

En los procedimientos descritos anteriormente, R1, R2 y B son como se definieron previamente. R7 representa un grupo protector para un grupo hidroxi, y los grupos preferidos son grupos acilo aromático, por ejemplo, grupo arilcarbonilo tales como grupos benzoilo, a-naftoílo y ß-naftoílo; grupos arilcarbonilo inferior alquilado tales como 2,4,6-trimetilbenzoílo, y 4-toluoilo, el grupos arilcarbonilo arilado os tales como 4-fenilbenzoílo. El grupo muy preferido es un grupo benzoilo. R8 representa un grupo protector para un grupo hidroxi y los grupos preferidos son: "grupo sililo", por ejemplo, un grupo alquil sililo tri inferior tal como tri metil sililo, trietilsililo, isopropildimetilsililo, t-butildimetilsililo, metildiisopropilsililo, metildi-t-butilsililo y triisopropilsililo;-grupo alquil sililo tri inferior substituido por 1-2 grupos arilo tales como difenilmetilsililo, t-butildifenilsililo, difenilisopropilsililo y fenildiisopropilsililo; "un grupo metilo substituido por 1 a 3 grupos arilo", tales como bencilo, a-naftilmetilo, ß naftilmetilo, trifenilmetilo, trifenilmetilo, ß-naftildifenilmetilo y 9-antrilmetilo; "un grupo metilo substituido por 1 a 3 grupos arilo, en donde el anillo arilo está sustituido por alquilo inferior, alcoxi inferior, un átomo de halógeno o un grupo ciano" tal como 4-metilbencilo, 2,4,6-trimetilbencilo, 3,4,d-trimetilbencilo ,4-metoxibencilo, 4-metoxifenildifenilmetilo, 4,4'-dimetoxitrifenilmetilo, 4,4,,4"-trimetoxitrifenilmetilo, 2-nitrobencilo ,4-nitrobencilo, 4-clorobencilo ,4-bromobencilo y 4-cianobencilo. Los grupos muy preferidos son un grupo trimetilsililo, un grupo t-butildimetilsililo, un grupo t-butildifenilsililo, un grupo bencilo, un grupo trifenilmetilo, un grupo 4-metoxibencilo, un grupo 4-metoxifenildifenilmetilo, un grupo 4,4'-dimetoxitrifenilmetilo o un grupo 4,4,,4"-trimetoxitrifenilmetilo. R9 representa un grupo saliente y los grupos preferidos son un grupo alquilsulfonilo inferior tal como grupo metansulfonilo y etansulfonilo, un grupo alquilsulfonilo inferior substituido por átomos de halógeno tales como el grupo trifluorometansulfonilo, y un grupo ariisulfonilo tal como p-toluensolfonilo. Entre estos grupos, las grupos muy preferidos son el grupo metansulfonilo o el grupo p-toluensolfonilo. R10 representa un grupo protector para un grupo hidroxi y los grupos preferidos son: "grupos acilo alifático", por ejemplo, grupos alquilcarbonilo tales como formilo, acetilo, propínoilo, butirilo, isobutirilo, pentanoílo, pivaloílo, valerilo, isovalerilo, octanoílo, decanoílo, 1-metilheptadecanoílo, nonadecanoílo, eicosanoílo y henicosanoílo, grupos alquilcarbonilo carboxilado tales como grupos succinoílo, glutaroílo y adipoílo, grupos halógeno alquilcarbonilo inferior tales como grupos cloroacetilo, dicloroacetilo, tricloroacetilo y trifluoroacetilo, grupos alcoxi inferior-alquilcarbonilo inferior, tales como grupos metoxiacetilo, y grupos alquilcarbonilo insaturadoss tales como un grupo (E)-2-metil-2-butenoilo; "grupos acilo aromático", por ejemplo, grupos arilcarbonilo tales como grupos benzoilo, a-naftoílo y ß-naftoílo, grupos halógeno arilcarbonilo tales como grupos 2-bromobenzoilo y 4-clorobenzoilo, grupos arilcarbonilo inferior alquilado tales como 2 ,4, 6-trimetilbenzoilo y grupos 4-toluoilo, grupo arilcarbonilo inferior-alcoxilado tales como el grupo 4-anisoilo, grupos arilcarbonilo carboxilado tales como 2-carboxibenzoilo, 3-carboxibenzoilo y 4-carboxibenzoilo, grupos arilcarbonilo nitrurados tales como grupos 4-nitrobenzoilo y 2-nitrobenzoilo, grupos arilcarbonilo inferior alcoxicarbonilados tales como el grupo 2-(metoxicarbonil)benzoilo, el grupos arilcarbonilo arilado os tales como el grupo 4-fenilbenzoilo. Entre estos grupos, los grupos muy preferidos son los "grupos acilo alifáticos"-grupo particularmente preferido es un grupo acetilo. B1 representa el grupo purin-9-ilo o 2-oxo-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, el cual puede tener un no más substituyentes seleccionadas de grupo Alfal que se presenta a continuación.

(Grupo a1 ) un grupo hidroxi, un grupo hidroxi protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, grupos alcoxi que tienen de 1-6 átomos de carbono, un grupo mercapto, un grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo amino protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo amino sustituido por un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono, y átomos de halógeno. El método A es un procedimiento para sintetizar los compuestos de las fórmulas (1a), (1 b) y (1c) a partir del compuesto de partida (2) a través de la introducción de un substituyente B y cierre de anillo. Aquí, el compuesto de partida (2) es sintetizado a partir de diacetona-D-glucosa comercialmente disponible, utilizando un método similar a aquel descrito en la literatura [O. T. Schimdt, Methods in Carbohydr. Chem., 4, 318 (1964); J. S. Brimacombe y O. A. Ching, Carbohyd. Res., 8, 82 (1968); T. F. Tam y B. Fraser-Reid, Can. J. Chem., 67, 2818 (1979); S. A. Suzhkov, Nucleosides & Nucleotides, 13, 2283 (1994)]. Los detalles de cada procedimiento del método A serán descritos a continuación. ÍMétodo Al (Procedimiento A-1 ) Se prepara un compuesto (3) en este paso, el cual comprende la desprotección de un grupo protector de alcohol primario del compuesto de partida (2) en presencia de una base en un solvente inerte. El solvente empleados no tiene limitación, ya que el solvente es uno normalmente utilizado para hidrólisis, y puede ser agua; solventes orgánicos, por ejemplo, alcoholes tales como metanol, etanol y n-propanol, y que 3 tales como tetrahidrofurano y dioxano; o una mezcla de agua y los solventes orgánicos descritos anteriormente. Los solventes preferidos son alcoholes. La base empleada no tiene ninguna limitación, a menos café de otras porciones del compuesto. Las bases preferidas son alcóxidos de metal tales como metóxido de sodio; o carbonatos de metal alcalino tales como carbonato de sodio, carbonato de potasio y carbonato de litio; hidroxi 2 de metal alcalino tales como hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de litio que hidróxido de bario, o amoniaco tal como una solución acuosa de amoniaco y amoniaco-metanol concentrado. Las bases preferidas son carbonatos de metal alcalino. La temperatura de reacción y el tiempo de reacción dependen del material de partida, solvente y base empleados y no tienen ninguna limitación. Ordinariamente, la temperatura de reacciones de entre 0°C y 15°C, y el tiempo de reacciones de 1 hora a 10 horas. Después de terminada la reacción, el compuesto deseado (3) es recogido de la mezcla de reacción a través de métodos convencionales. Por ejemplo, la mezcla de reacción se neutraliza y se concentra, y al residuo se agrega agua-solvente orgánico no miscible con agua, tal como acetato de etilo. Después de lavar con agua, la base orgánica, incluyendo el compuesto deseado, es aislada, y se seca sobre sulfato de sodio anhidro, o similares. El compuesto deseado ya tiene a través de la evaporación de los solventes. El compuesto obtenido es, si es necesario, purificado a través de métodos convencionales tales como recristalización y/o cromatografía de columna de gel de sílice.

(Procedimiento A-2) Se prepara un compuesto (4) en este procedimiento, el cual comprende la reacción del compuesto (3) o tenido en el procedimiento A-1 con un agente hidroxi-protector en presencia de una base en un solvente inerte. El solvente empleados no tiene ninguna limitación, siempre que no inhiba la reacción y disuelva los materiales de partida a cierto grado y, por ejemplo, es un hidrocarburo alifático tal como hexano y heptano; un hidrocarburo aromático tal como benceno, tolueno y xileno; un hidrocarburo halogenado tal como cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono, dicloroetano, clorobenceno y diclorobenceno; un este tal como formato de etilo, acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de butilo y carbonato de dietilo; y ya sea el éter dietílico, éter diisopropílico, tetrahidrofurano, dioxano, dimetoxietano, y dimetil éter de glicol dietilénico, un nitrilo tal como acetonitrilo e isobutironitrilo; una amida tal como formamida, N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, N-metil-2-pirrolidon-N-metil-pirrolidinona, y hexametilfosforotriamida. El solvente preferido es cloruro de metileno. La base empleada no tiene limitación, siempre que se utilice como una base en reacciones convencionales. Por ejemplo, puede ser una base orgánica tal como N-metilmorfolina, trietilamina, tributilamina, diisopropiletilamina, diciclohexilamina, N-metilpiperidina, piridina, 2, 6-di(ter-butil)-4-met¡lpiridina, quinolina, N,N-dimet¡lanilina y N,N-dietilanilina. La base preferida es trietilamina. Los reactivos hidroxilo-protectores empleados son, por ejemplo, halogenuros de sililo tales como cloruro de t-butildimetilsililo, cloruro de trimetilsililo, cloruro de trietilsililo, bromuro de trietilsililo, cloruro de triisopropilsililo, cloruro de dimetildiisopropilsililo, cloruro de dietilisopropilsililo, cloruro de t-butildifenilsililo, cloruro de difenilmetilsililo y cloruro de trifenilsililo; tritilhalogenuros tales como cloruro de 4-metoxitrifenilmetilo, cloruro de 4,4'-dimetoxitrifenilmetilo, cloruro de 4,4,,4"-trimetoxitrifenilmetilo; y halogenuros de aralquilo tales como cloruro de bencilo, bromuro de bencilo y bromuro de p-metoxibencilo. El reactivo hidroxilo protector preferido es cloruro de t-butildifenilsililo. La temperatura de reacción usualmente es de entre -20°C y la temperatura de reflujo del solvente empleado. La temperatura preferida es de entre 0°C y la temperatura de reflujo del solvente empleado. El tiempo de reacción dependen principalmente de la temperatura de reacción, el compuesto de partida, la base y el solvente empleados. Ordinariamente, este es de 10 minutos a 3 días, y el tiempo de reacción preferida es de 1 hora 24 horas. Después de que termina la reacción, el compuesto deseado (4) en la reacción de la presente es recogido de la mezcla de reacción, de acuerdo con métodos convencionales. Por ejemplo, la mezcla de reacciones neutralizadas, y se agrega agua y un solvente orgánico no miscibles con agua, tal como acetato de etilo, a la mezcla de reacción neutralizada. Después de lavar con agua, la fase orgánica, incluyendo el compuesto deseado, es separada, y se seca sobre sulfato de sodio anhidro o similares. El compuesto deseado es obtenido través de la evaporación del solvente. El compuesto obtenido, si es necesario, es particularmente un producto en donde R8 es introducido al grupo hidroxi a las posiciones no deseadas, y es obtenido, se purifica adicionalmente a través de métodos convencionales, tales como recristalización y cromatografía de columna de gel de sílice.

(Procedimiento A-3) Se prepara un compuesto (5) en este procedimiento, el cual comprende la reacción del compuesto (4) obtenido en el procedimiento A-2 con un grupo saliente e introduciendo un reactivo en presencia de una base en un solvente inerte. El solvente empleado, por ejemplo, es un hidrocarburo alifático tal como hexano, heptano, ligroína y éter de petróleo; un hidrocarburo aromático tal como benceno, tolueno y xileno; un hidrocarburo halogenado tal como cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono, dicloroetano, clorobenceno y diclorobenceno; un éste tal como formato de etilo, acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de butilo y carbonato de dietilo; un éter tal como éter dietílico, éter diisopropílico, tetrahidrofurano, dioxano, di metoxi heptano y dimetil éter de glicol dietilénico; una cetona tal como acetona, metiletilocetona y metilisobutilcetona, isoforona, y ciclohexanona; un compuesto anhidro tal como nitroetano y nitrobenceno; un nitrilo tal como acetonitrilo e isobutironitrilo; una amida tal como formamida, N,N-dimetilformamida, N, N-dimetilacetamida, N-metil-2-pirrolidona, N-metilpirrolidinona, y hexametilfosforotriamida; un sulfóxido tal como sulfolano; o una piridina. Entre estos solventes, del solvente preferido es cloruro de metileno. Los catalizadores básicos preferidos empleados son bases tales como trietilamina, piridina y dimetilaminopiridina.

El reactivo de introducción del grupo saliente empleado es, por ejemplo, un halogenuros alquilsulfonilo tal como cloruro de metansulfonilo y bromuro de etansulfonilo; o un halogenuros de ariisulfonilo tal como un cloruro de p-toluensulfonilo. Los reactivos centros en el grupo saliente preferidos son cloruro de metansulfonilo y cloruro de p-toluensulfonilo. La temperatura de reacción depende del material de partida, solvente, reactivo de introducción del grupo saliente y base empleados. Usualmente, la temperatura es de entre 0°C y dO°C, y la temperatura preferida es de entre 10°C y 40°C. El tiempo de reacción depende del compuesto de partida, solvente, reactivo de producción del grupo saliente y base empleados. Un usualmente, el tiempo de reacciones de 10 minutos a 24 horas, y el tiempo de reacción preferido es de 1 hora a 1d horas. Después de terminar la reacción, el compuesto deseado (5) está reacción es recogido de la mezcla de reacción de acuerdo con métodos convencionales. Por ejemplo, la mezcla de reacción es neutralizada y concentrada conseguida se agregan al residuo agua y un solvente orgánico no miscible con agua, tal como acetato de etilo. Después de lavar con agua la fase orgánica, incluyendo el compuesto deseado, se separó, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, o similares, y después del compuesto deseado puede ser obtenido por evaporación de los solventes. El compuesto obtenido, si es necesario, es purificado través de métodos convencionales, tales como recristalización, y cromatografía de columna de gel de sílice, y similares.

(Procedimiento A-4) Se prepara un compuesto (6) en este procedimiento, del cual comprende la reacción del compuesto (d) obtenido en el procedimiento A-3 con un anhídrido ácido en presencia de un catalizador ácido en un solvente. El solvente empleado, por ejemplo, es un éter tal como éter dietílico, dioxano y tetrahidrofurano; un nitrilo tal como acetonitrilo e isobutironitrilo; una amida tal como formamida, N,N-dimetilformamida, N,N-dimetil-acetamida, N-metil-2-pirrolidona, N-metilpirrolidinona y hexametilfosforotriamida; o un ácido orgánico tal como ácido acético. El solvente preferido es ácido acético. El catalizador ácido empleado en el procedimiento A-4, por ejemplo, es un ácido en orgánico tal como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido nítrico. El ácido preferido es ácido sulfúrico (particularmente ácido sulfúrico concentrado). En la anhidro de ácido empleado es, por ejemplo, un anhídrido de ácido alifático inferior tal como anhídrido de ácido acético, anhídrido de ácido propiónico, y similares. El anhídrido ácido preferido es anhídrido acético. La temperatura de reacción depende del compuesto de partida, un solvente, catalizador ácido y anhídrido ácido empleados. Usualmente, la _^_H_a_^t_a_a_ temperatura de reacciones de entre 0°C y 50°C, y la temperatura de reacción preferida es de entre 10°C y 40°C. El tiempo de reacción depende del compuesto de partida, solvente, catalizador ácido, y anhídrido, y la temperatura de reacción empleada. Por lo general, el tiempo de reacciones de 10 minutos a 12 horas, y el tiempo de reacción preferido es de 30 minutos a 6 horas. Después de terminada la reacción, el compuesto deseado (6) está reacción se recoge de la mezcla de reacción, de acuerdo con métodos convencionales. Por ejemplo, se puede agregar a la mezcla de reacción agua y un solvente orgánico no miscible con agua, tal como acetato de etilo. Después de lavar con agua, un ser aislado la fase orgánica incluyendo el compuesto deseado, un se secó sobre sulfato de sodio anhidro o similares, y después el compuesto deseado puede ser obtenido a través de la evaporación del solvente. El compuesto obtenido, si es necesario, además es purificado través de métodos convencionales, tales como recristalización, cromatografía de columna de gel de sílice, y similares.

(Procedimiento A-5) Se prepara un compuesto de (7) en este procedimiento, el cual comprende la reacción de un compuesto (6) obtenido en el procedimiento A-4 con un derivado de trimetilsililo de una purina o pirimidina opcionalmente substituida, la cual se prepara de acuerdo con la literatura (H. Vorbrueggen, K.

Krolikiewicz y B. Bennua, Chem. Ver., 114, 1234-12dd (1981)), en presencia de un catalizador ácido en un solvente inerte. El solvente empleado es un hidrocarburo aromático tal como benceno, tolueno y xileno; un hidrocarburo halogenado tal como cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono, 1 ,2-dicloroetano, clorobenceno y diclorobenceno; un nitrilo tal como acetonitrilo e isobutironitrilo; una amida tal como formamida, N.N-dimetilformamida, N, N-dimetilacetamida, N-metil-2-pirrolidona, N-metil-pirrolidinona y hexametilfosforotriamida; o un disulfuro de carbono. El solvente preferido es 1 ,2-dicloroetano. El catalizador ácido empleado es, por ejemplo, un catalizador de ácido Lewis tal como AICI3, SnCI , TiCU, ZnCI2, BF3 y trifluorometansulfonato de trimetilsililo. El catalizador ácido preferido es un tetracloruro de estaño (SnCI4). La temperatura de reacción depende del compuesto de partida, solvente y catalizador ácido empleados. Usualmente, la temperatura de reacciones de entre 0°C y 100°C, y la temperatura de reacción preferida es de entre 30°C y 80°C. El tiempo de reacción depende del compuesto de partida, solvente, un catalizador ácido, y temperatura de reacción empleados. Un usualmente, tiempo de reacciones de 1 hora a 3 días, y el tiempo de reacción preferido es de 1 hora a 2 días. Después de la administración de la reacción, se recogió el compuesto deseado (7) está reacción, de la mezcla de reacción de acuerdo ---.-> .---« con métodos convencionales un seguido por ejemplo, la mezcla de reacciones neutralizadas, y se agregan a la mezcla de reacción agua y un solvente orgánico no miscible con agua, tal como acetato de etilo o cloruro de metileno. Después de lavar con agua, la fase orgánica, incluyendo el compuesto deseado, se separó, se secó sobre sulfato de sodio anhidro o similares, y después del compuesto deseado puede ser obtenido a través de la evaporación del solvente. El compuesto tenido, si es necesario, es purificado mediante métodos convencionales, por ejemplo recristalización, cromatografía de columna de gel de sílice, y similares.

(Procedimiento A-6) Se prepara un compuesto (1c) en este proceso, el cual comprende una a reacción de ciclización del compuesto (7) obtenido en el procedimiento A-d en presencia de un catalizador básico en un solvente inerte. El solvente empleado no tiene ninguna limitación, siempre que este no inhiba la reacción y disuelva el compuesto de partida a cierto grado. Los solventes preferidos son alcoholes tales como metanol, etanol, n-propanol, hizo propanol, n-butanol, isobutanol, t-butanol, alcohol isoamílico, trietilenglicol, glicerina, octanol, ciclohexanol y metil celosolvo. El solvente muy preferido es metanol. El catalizador básico empleado es, por ejemplo, un hidróxido de metal alcalino tal como hidróxido de sodio de hidróxido de potasio; un carbonato de metal alcalino tal como carbonato de sodio y carbonato de potasio; un alcoxido de metal alcalino tal como metóxido de sodio y etóxido de sodio; o una solución de amoniaco acuosa y similares. Los catalizadores básicos preferidos son carbonatos de metal alcalino, y el catalizador básico muy preferido es carbonato de sodio. La temperatura de reacción depende del compuesto de partida, solvente y catalizador básico empleados. Usualmente, la temperatura de reacciones de entre 0°C y dO°C, y la temperatura de reacción preferida es de entre 10°C y 30°C. El tiempo de reacción depende del compuesto de partida, solvente, catalizador básico y temperatura de reacción empleados. Usualmente el tiempo de reacción es de 1 hora a 3 días, y el tiempo de reacción preferido es de 3 horas a 2 días. Después de terminada la reacción, el compuesto deseado (1a) de esta invención es recogido de la mezcla de reacción de acuerdo con métodos convencionales. Por ejemplo, la mezcla de reacción es concentrada, y se agregan al residuo agua y un solvente orgánico no miscible con agua, tal como acetato de etilo. Después de lavarse con agua, la fase orgánica incluyendo el compuesto deseado, se separó, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, o similares, y después el compuesto deseado puede ser obtenido a través de la evaporación del solvente. El compuesto obtenido, si es necesario, es purificado a través de métodos convencionales, por ejemplo, recristalización, cromatografía de columna de gel de sílice, y similares.

(Procedimiento A-7) Se prepara un compuesto (1 b) en este procedimiento que comprende la reacción del compuesto (1a) obtenido en el procedimiento A-6 con un agente de desprotección en un solvente inerte. En el caso de que la desprotección sea innecesaria, el nuevo procedimiento puede ser conducido sin este proceso. El procedimiento de desprotección depende de los grupos protectores empleados, y el reactivo de desprotección no tiene ninguna limitación, a menos que tenga un efecto adverso sobre la reacción. Por ejemplo, un la desprotección puede realizarse de acuerdo con métodos descritos en la literatura de "Protective Groups in Organic Synthesis" (Teodora W. Greene, 1981 , A Wiley-lnterscience Publication). Cuando existen diferentes tipos de grupos protectores, algunos de estos métodos son apropiadamente mezclados y cada uno de estos se realiza, a su vez. Particularmente, cuando los grupos protectores son (1 ) "grupos acilo alifáticos o acilo aromáticos", (2) "un grupo metilo substituido por uno a 3 grupos arilo", o "grupos metilo substituido por uno a 3 anillos arilo, en donde el anillo arilo está substituido por alquilo inferior, alcoxi inferior, grupos ciano o átomo de halógeno", (3) "grupos sililo", los grupos protectores puede ser desprotegidos con los siguientes métodos. (1 ) cuando los grupos protectores son grupos acilo alifático o acilo aromático, estos usualmente son desprotegidos a través de la reacción con bases y solventes inertes. Los solventes empleados no tienen limitación siempre y cuando se utilicen usualmente en hidrólisis. Por ejemplo, se utilizan agua; solventes orgánicos, por ejemplo, alcoholes tales como metanol, etanol, y n-propanol; éteres tales tetrahidrofurano y dioxano, o una mezcla de agua y los solventes orgánicos anteriores. Los solventes preferidos son alcoholes. La base empleada no tiene limitación a menos que afecte otras porciones de los compuestos. Las bases preferidas son alcóxidos de metal tales como metóxido de sodio; carbonatos de metal alcalino, tales como carbonato de sodio, carbonato de potasio y carbonato de litio; hidróxidos de metal alcalino tales como hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de litio e hidróxido de bario; o amoniaco tales como soluciones acuosas de amoniaco y amonio-etanol concentrados. Las bases preferidas son carbonatos de metal alcalino. La temperatura de reacción y el tiempo de reacción dependen del compuesto de partida, solvente, y base empleados. Usualmente, la temperatura de reacción es de entre 0°C y 1d0°C, y el tiempo de reacción es de 1 hora a 10 horas, con el fin de suprimir la producción de subproductos. Después del termino de la reacción, el compuesto (1b) deseado de esta reacción es recogido de la mezcla de reacción de acuerdo con métodos convencionales. Por ejemplo, la mezcla de reacción es concentrada, y se agregan agua y un solvente orgánico no miscible con agua, tal como acetato de etilo, al residuo. Después de lavar con agua, la fase orgánica, incluyendo el compuesto deseado, es separada, secada sobre sulfato de 5 sodio anhidro o similares, y después el compuesto deseado puede ser obtenido a través de evaporación del solvente. El compuesto obtenido, si es necesario, es purificado a través de métodos convencionales, por ejemplo recristalización, cromatografía de columna de gel de sílice, y similares. 10 (2) En el caso en el que el grupo protector sea "un grupo metilo sustituido por 1 a 3 grupos arilo" o " un grupo metilo sustituido por 1 a 3 grupos arilo, en donde el anillo arilo esta sustituido por alquilo inferior, alcoxi inferior, átomo de alógeno o un grupo ciano ", la desprotección se realiza a través de un reactivo de reducción en un solvente inerte. 15 Los solventes preferidos empleados son alcoholes tales como metanol, etanol e isopropanol; los éteres tales como éter dietílico, tetrahidrofurano y dioxano; hidrocarburos aromáticos tales como tolueno, benceno y xileno; hidrocarburos alifáticos tales como hexano y ciciohexano, esteres tales como acetato de etilo y acetato de propilo; ácidos orgánicos tales 20 como ácido acético; o mezclas de estos solventes orgánicos y agua. Los reactivos de reducción empleados no tienen limitación si estos se utilizan usualmente en reacciones catalíticas. Los agentes de reducción preferidos son paladio-carbono, níquel Raney, oxido de platino, ^^-^^ ^^^^M^^ negro de platino, oxido de rodio-aluminio, cloruro de trifenilfosfina-rodio y sulfato de paladio-bario. La presión de reacción no tiene limitación, usualmente este procedimiento se realiza bajo una 1 a 10 atmósferas. La temperatura de reacción es de entre 0°C y 60°C, y la temperatura de reacción preferida es de entre 20°C y 40°C. El tiempo de reacción es de 10 minutos a 24 horas, y el tiempo de reacción preferido es de 1 a 3 horas. Después del termino de la reacción, el compuesto (1b) deseado de esta reacción es recogido de la mezcla de reacción de acuerdo con métodos convencionales. Por ejemplo, el reactivo de reducción se remueve, y se agregan a la mezcla de reacción agua y un solvente orgánico no miscible con agua tal como acetato etilo. Después de lavar con agua, la fase orgánica, incluyendo el compuesto deseado, es separada, se seca sobre sulfato de sodio anhidro o similares, y después el compuesto deseado puede ser obtenido a través de evaporación del solvente. El compuesto obtenido, si es necesario, además es purificado a través de métodos convencionales, por ejemplo recristalización, cromatografía de columna de gel de sílice, y similares. Cuando el grupo protector es un "grupo metilo sustituido por 3 grupos arilo", es decir, cuando el grupo protector es un grupo tritilo, la desprotección también puede ser realizada utilizando un ácido. En este caso, se utilizaron los siguientes solventes, por ejemplo: hidrocarburos aromáticos tales como benceno, tolueno y xileno, hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono, 1 ,2-diocloroetano, clorobenceno y diclorobenceno; alcoholes tales como metanol, etanol, isopropanol y ter-butanol; nitrilos tales como acetonitrilo e isobutironitrilo; amidas tales como formamida, N, N-dimetil formamida, N, N-dimetilacetamida, N-metil-2-pyrrolidona, N-metil-pyrrolidinona, and hexametilfosoforotriamida, y ácidos orgánicos tales como ácido acético. Los solventes preferidos son ácidos orgánicos (particularmente ácido acético) y alcoholes (particularmente ter-butanol). El ácido preferido para utilizarse es ácido acético o ácido trifluoroacético. La temperatura de reacción es de entre 0°C y 60°C, y la temperatura de reacción preferida es de entre 20°C y 40°C. El tiempo de reacción es de 10 minutos a 24 horas, el tiempo de reacción preferido es de 1 a 3 horas. Después del termino de la reacción, el compuesto (1 b) deseado de esta reacción es recogido de la mezcla de reacción de acuerdo con métodos convencionales. Por ejemplo, la mezcla de reacción es neutralizada, se agregan agua y un solvente orgánico no miscible con agua, tal como acetato de etilo, a la mezcla resultante. Después de lavar con agua, la fase orgánica, incluyendo el compuesto deseado, es separada, se seca sobre sulfato de sodio anhídrido o similares, después el compuesto deseado puede ser obtenido mediante evaporación del solvente.

-TÉiffftmt El compuesto obtenido, si es necesario, además es purificado a través de métodos convencionales, por ejemplo recristalización, cromatografía de columna de gel de sílice, y similares. (3) En el caso de que el grupo protector "sea un grupo sililo", el grupo protector usualmente es desprotegido a través del tratamiento, con compuestos que producen un anión de flúor, tales como fluoruro de tetrabutilamonio, ácido fluorhídrico, ácido fluorhídrico-piridina, y fluoruro de potasio, o ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido metansulfónico, ácido paratoluensulfónico, ácido trifluoroacético, y ácido trifluorometansulfónico, o ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico. Cuando el grupo protector es desprotegido con un anión de flúor, la reacción, en algunos casos, es acelerada a través de la adición de un ácido orgánico tal como ácido fórmico, ácido acético o ácido propiónico. Los solventes utilizados no tienen limitación siempre y cuando no inhiban la reacción y disuelvan los materiales de partida a cierto grado. Sin embargo, los solventes preferidos son éteres tales como éter dietílico, éter diisopropílico, tetrahidrofurano, dioxano, y dimetoxietano y éter dimetílico de dietilenglicol; nitrilos tales como el cetonitrilo e isobutironitrilo; agua; ácidos orgánicos tales como ácido acético, y mezclas de estos solventes. La temperatura de reacción es de entre 0°C y 100°C, y la temperatura de reacción preferida es de entre 20°C a 70°C. El tiempo de reacción es de d minutos a 48 horas, y el tiempo de reacción preferido es de 1 a 24 horas.

Después del término de la reacción, el compuesto deseado (1 b) de esta reacción, es recogido de la mezcla de reacción de acuerdo con métodos convencionales. Por ejemplo, los solventes se evaporan y después el compuesto es purificado a través de cromatografía de columna de gel de sílice.

(Procedimiento A-8). Se preparó un compuesto (1c) en este procedimiento el cual comprende la reducción catalítica del grupo azido en el compuesto (1b) obtenido en el procedimiento A-7 a un grupo amino en presencia de hidrogeno y un catalizador en un solvente inerte y, si es necesario, la protección del grupo amino. Los solventes empleados no tienen limitación siempre y cuando no tengan un efecto adverso sobre esta reacción. Los solventes preferidos son alcoholes tales como metanol, etanol e ¡sopropanol; éteres tales como éter dietílico, tetrahidrofurano y dioxano; hidrocarburos aromáticos tales como tolueno, benceno y xileno; hidrocarburos alifáticos tales como hexano y ciciohexano; esteres tales como acetato de etilo y acetato de propilo; amidas tales como formamida, dimetil formamida, dimetilacetamida, N-metil-2-pirrolidona y hexametilfosoforotriamida; ácidos alifáticos tales como ácido fórmico y ácido acético; agua, o mezclas de estos solventes. Los catalizadores empleados no tienen limitación, si estos son usualmente utilizados en reducciones catalíticas. Los catalizadores preferidos ¡¿£^ga^^ son paladio sobre carbono, negro de paladio, níquel Raney, oxido de platino, negro de platino, oxido de rodio-aluminio, cloruro de trifenilfosfina-rodio, sulfato de paladio-bario. La presión de la reacción no tiene limitación, pero usualmente es de 1 a 10 atmósferas. La temperatura de reacción y el tiempo de reacción depende del material de partida, solvente y catalizador empleados. Usualmente, la temperatura de reacción es de entre 0°C y 100°C (temperatura de reacción preferida es de entre 20°C y 40°C), y el tiempo de reacción es de d minutos a 48 horas (tiempo de ración preferido es de 30 minutos a 10 horas). Después del término de la reacción, el compuesto deseado (1c) de esta reacción es recogido de la mezcla de reacción de acuerdo con métodos convencionales. Por ejemplo como el compuesto deseado puede ser obtenido a través de la remoción de los catalizadores mediante filtración y a través de evaporación del solvente a partir del filtrado. Si se desea, el grupo amino puede ser protegido de acuerdo con los métodos descritos en la técnica anterior (grupos protectores en síntesis orgánica, Protective Groups in Organic Síntesis). Un análogo de oligonucleótido de tipo N3'-Pd' en donde el átomo de nitrógeno en la posición 3' y el átomo de oxigeno en la posición d' son combinados a través de ácido fosfórico, puede ser preparado utilizando el compuesto (1d) de esta invención de acuerdo con el método B descrito a continuación. (9) En los procedimientos descritos anteriormente, B >11 . y, D R8° son como se definieron previamente. Sin embargo B1 en la formula (1d) y B1 en la formula (8) pueden ser iguales o diferentes. B11 representa una resina tal como vidrio de poro controlado por succinilo o Tentagel, el cual se emplea usualmente para la síntesis de oligonucleótidos. CEO representa un grupo 2-cianoetoxi. Cada procedimiento del método B será descrito a continuación con detalle.

(Procedimiento B-1 . Se preparó un compuesto (9) en este procedimiento, el cual comprende una reacción de acoplamientos de fosforilación oxidante del compuesto (1d) con el compuesto (8). Este procedimiento se realizo como se describió en la literatura (1 ) (Nucleic Acids Research, Vol. 23. No. 14, pp. 2661-2668, 1995). El grupo hidroxi en la posición 5' del compuesto (1 b) se protegió en el compuesto (1c) en el procedimiento A-8, y si existe un grupo amino en la base B, dicho grupo amino del compuesto (1d) es protegido. Además, el compuesto 8 puede ser preparado a partir del compuesto (1c) obtenido en el "procedimiento A-8" de acuerdo con la literatura (1 ).

(Procedimiento B-2) Este procedimiento es para producir oligonucleótido a partir del compuesto (9) obtenido en el "procedimiento B-1". El procedimiento comprende la desprotección del grupo hidroxilo quien protector R8del compuesto (9) a través de un procedimiento del proceso A.7, fosforilación de acuerdo con la literatura (1 ), reacción con el compuesto (1d) en un método similar a aquel descrito en procedimiento B-1 , seguido por repetición de estas reacciones para dar el oligonucleótido deseado. La longitud de secuencia de los oligonucleótidos obtenidos usualmente es de 2-dO unidades de nucleósido, y la longitud preferida es de 10-30 unidades de nucleósido. Los análogos de oligonucleótido obtenidos son resistentes a varias nucleasas. De esta manera, permanecen en el cuerpo durante un largo ii ?? l ?—M_M¡_Mtü_ tiempo de administración. Además, los análogos de oligonucleótido, por ejemplo, forman estructuras de cadena dobles estables con ARNm, e inhiben la biosíntesis de proteínas, las cuales contribuyen a la patogénesis, o inhiben la trascripción a ARNm formando tripletes con las estructuras de cadena 5 dobles de ADN en genomas o inhiben la proliferación de virus. De esta manera, los análogos de oligonucleótido, de la presente invención pueden disminuir las funciones especificas del genoma, y se espera que sean agentes terapéuticos útiles para el tratamiento de enfermedades tales como agentes anti-neoplasma, agentes antivirales o similares. 10 Se pueden preparar formulaciones no orales o formulaciones de liposoma de los análogos de oligonucleótido de esta invención, por ejemplo, a través de la adición de auxiliares convencionales tales como reguladores de f y/o estabilizadores. Los análogos de nucleótido pueden ser mezclados con vehículos farmacéuticos convencionales para preparar ungüentos, cremas, 15 líquidos o emplastos. Sus dosis son diferentes de acuerdo con los síntomas de la enfermedad, la edad del paciente, la ruta de administración. Por ejemplo, la dosis más baja del análogo de oligonucleótido es de 0.001 mg/kg del peso del cuerpo (de preferencia 0.01 mg/kg del peso del cuerpo), y la dosis, mas alta es 0 de 100mg/kg del peso del cuerpo (de preferencia 10mg/kg del peso del cuerpo) como una dosis individual. Es deseable de 1 a varias veces a través del día dependiendo de los síntomas del paciente. La presente invención ahora será descrita con mayor detalle a |¡^jy^g^^a través de los siguientes ejemplos y ejemplos de referencia. Sin embargo, la presente invención no esta limitada a estos ejemplos.

MEJOR MODO PARA REALIZAR LA INVENCIÓN EJEMPLO 1 3 -azido-5O-ter-butildifenilsHN-3 desoxi-2 -0,4 -C-metilen-5-metiluridina (compuesto de ilustración numero 2-48) Se agregó carbonato de potasio (41 mg, 0.29 mmoleses) a una solución de (7 ml) de metanol del compuesto obtenido en el ejemplo de referencia d (200mg, 0.27mmoles) a 0°C y la mezcla se agitó durante 4.d horas a temperatura ambiente. Se agregó a la mezcla mas carbonato de potasio (34mg, 0.2dmmoles), la cual se agitó durante 23 horas. Después de que el metanol se evaporó, el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. El extracto se lavó con una solución de cloruro de sodio acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Los solventes se evaporaron y el residuo se purificó a través de cromatografía de columna de gel de sílice (acetato de etilo: n-hexano=2:1 ) para dar el compuesto del título como cristales incoloros (142mg, 0.27mmoles ,100%). Pf 93-9d°C. IR vmax (KBr): 3169, 3047, 2966, 2888, 28d9, 2117, 1696, 1275, 1109 cnT1. 1H-NMR (CDCI3) d: 1.12 (9H, s) , 1.65 (3H, s) , 3.78, 3.84 (2H, AB, J = 8 Hz) , 3 .90, 4.08 (2H, AB, J = 12 .5 Hz) , 4 .02 (1 H,s), 4.67 (1 H, a), d.67 (1 H, s), 7.d4 (1 H, s), 7.39-7.48 (6H, m), 7.67-7.71 (4H, m), 8.4d (1 H, br s). 13C-NMR (CDCI3) d: 12.3, 19.5, 27.0, 58.7, 60.3, 71.4, 77.2, 78-6, 87.2, 90.1 , 110.8, 128.0, 130.1 , 130.2, 131.7, 132.3, 133.7, 135.1 , 136.4, 149.6, 163.6.

EJEMPLO 2 3'-Azido-3 -desoxi-2'-0,4'-C-metilen-5-metiluridina (compuesto de ilustración numero 2-14) Se agregó fluoruro de tetrabutilamonio anhidro (10 M en TF, 290 ul, 0.29 mmoleses) a una solución de dml de tetrahidrofurano anhidro del compuesto obtenido en el ejemplo 1 (140 mg, 0.26 mmoleses) en una corriente de gas nitrógeno y la solución se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. El solvente se evaporó y el residuo se purificó a través de cromatografía de columna de gel de sílice (acetato de etilo: n-hexano= 2d:1 ) y el compuesto del título se obtuvo como un polvo blanco (6d.7mg, 0.22mmoles, 85%). Pf 94-96°C. IR vmax (KBr): 3163, 3046, 2116, 1692, 1468, 1273, 1062 crt?1. 1H-NMR (CD3OD) d: 1.89 (3H, S), 3.76, 3.86 (2H, AB, J = 8 Hz), 3.8d, 3.9d (2H, AB, J = 13 Hz), 4.03 (1 H, s), 4.d8 (1 H, s), d.d8 (1 H, s), 7.70 (1 H, s). 13C-NMR (CD3OD) d: 12.8, 67.3, 61.2, 72.4, 79.8, 88.3, 91.0, 1 10.8, 136.3, 151 .5, 166.1 . 5 EJEMPLO 3 S -Amino-S -desoxi^'-O, 4 -C-metil-5-metiluridina (compuesto de ilustración numero 2-4) 10 Una solución de 3 ml de etanol del compuesto obtenido en el ejemplo 2 (64 mg, 0.22 mmoleses) se agregó a paladio-carbono al 10% (28 mg) suspendido en una solución de 5 ml de tetrahidrofurano anhidro en una corriente de gas hidrogeno, y la mezcla se agitó durante O.d horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró y el solvente del filtrado 15 se evaporó y el compuesto del título se obtuvo como un polvo blanco (59 mg, 0.22 mmoleses, 100%). Pf 243-246°C. IR vmax (KBr): 3469, 3366, 1699, 1447, 1273, 1064 cm-1. 1H-NMR (C5D5N) d: 1.83 (3H, s), 3.62 (1 H, s), 3.92, 4.14 (2H, 20 AB, J = 8 Hz), 4.24 (2H, s), 4.64 (1 H, s), d.97 (1 H, s), 7.90 (1 H, s) . 13C-NMR (C5D5N) d: 12.8,-54.2, 57.2, 71.6, 81.4, 91.1 , 109.6, 160.8, 164.3. __^.¿. Jto...a.,.-«-»)fe.....^.«.i m. . _ . _, „ . __. _ EJEMPLO 4 3 -Azido-3 -desoxi-S'-O^^ -dimetoxitritip-S -O^ -C-metilen-S-metiluridina (compuesto de ilustración numero 2-36) Se agregaron cloruro de dimetoxitritilo (41 d mg, 1.22 mmoleses) y dimetil aminopiredina (12.6 mg, 0.10 mmoles) a una solución de 6ml de piridina del compuesto obtenido en el ejemplo 2 (300 mg, 1.02 mmoles) en una corriente de gas nitrógeno y la solución se agitó durante 20.6 horas a temperatura ambiente. Se agregó una solución de carbonato ácido de sodio acuosa saturada a la mezcla de reacción, y la mezcla resultante se extrajo con diclorometano. La fase orgánica se lavó con agua y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se evaporó bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo= 2:1 1 :1 ) y se obtuvo el compuesto del título como una espuma de color amarillo pálido (462 mg, 0.78 mmoles, 76%). Pf 126-128°C. 1H-NMR (CDCI3) d: 1.66 (3H, s), 3.32, 3.65 (2H, ABq, J = 11 Hz), 3.78 (2H, s), 3.80 (6H, s), 4.13 (1 H, s), 4.63 (1 H, 8), 5.67 (1 H, s), 6.86 (4H, dd, J = 2 Hz, 9 Hz), 7.23-7.45 (9H, m), 7.73 (1 H, s), 8.04 (1 H, hrs).

EJEMPLO 5 S'-Amino-S'-desoxi-S^-O^ '-dimetoxitritiD^'-O^'-C-metilen-S- metiluridina (compuesto de ilustración numero2.60) 5 Se agregó trifenilfosfina (94.0 ml, 0.36 mmoles) a una solución de a una solución de 2.5 ml de piridina ver compuesto obtenido en el ejemplo 4 (110 mg, 0.18 mmoles) en una corriente de nitrógeno la mezcla se agitó durante 3.5 horas a temperatura ambiente. Se agregó una solución al 28% de 5.6 ml de amoniaco acuoso a la mezcla de reacción, la cual se agitó durante 10 24 horas a temperatura ambiente. El solvente se evaporó bajo presión • reducida y el producto se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (cloroformo: etanol= 20:1) y el compuesto del título se obtuvo como una espuma de color amarillo pálido (462mg, 0.78mmoles, 76%). Pf 131-134°C. 15 1H-NMR (Pyridina-ds) d: 1.89 (3H, s), 3.71 (6H, s), 3.77 (1 H, s), 3.84 (2H, s), 3.99, 4.20 (2H, ABq, J = 8 Hz) , 4.69 (1 H, s), 6.04 (1 H, s), 7.03- 7.87 (13H, m), 8.58 (1 H, S).

EJEMPLO 6 Ester 2-cianoetílico de 3>-amino-3 -desoxi-5'-O-(4.4 -dimetoxitritil)-2^-0,4'- C-metilen-5-metiluridinil-(3>D5 .-3 -O-(tertbutild¡metilsilii. timidina Una solución de 0.3 ml de tetracloruro de carbono del compuesto obtenido en el ejemplo 5 (10.0 mg, 18 mmoles), y una solución de trietilamina (0.05 ml, 0.36 mmoles) en 0.12 ml de acetonitrilo, se agregaron a una solución de 0.13 ml de acetonitrilo del compuesto obtenido en el ejemplo de referencia 6 (14.5 mg, 0.28 mmoles) en una corriente de gas nitrógeno, y la solución se agitó durante 14. d horas a temperatura ambiente. El solvente se evaporó bajo presión reducida y el producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo = 1:1 D0:1) y se obtuvo el compuesto del título como un polvo blanco (13.0 mg, 12.6 mmoles, 71%). Pf 101-10d°C. 31p-NMR (CDCL 3) d: 7.68, 8-24. Masa (FAB): m/2 1043 (M+H).

EJEMPLO 7 Ester metílico de 3 -Amino-3 -desoxi-5,-0-(4.4>-dimetoxitritil)-2 -0,4^-C- metilen-5-metiluridin¡l-(3 l5 -3'-O-(tertbutildimetilsilin timidina Una solución de 0.3 ml de tetracloruro de carbono del compuesto obtenido en el ejemplo 5 (10 mg, 18 mmoles), y una solución de M-^^ ?t^ trietilamina (O.Od ml, 0.36 mmoles) en 0.2 ml de acetonitrilo, se agregaron a una solución de 0.3 ml de acetonitrilo del compuesto obtenido en el ejemplo de referencia 7 (22.1 mg, 51 mmoles) en una corriente de gas nitrógeno, y la solución se agitó durante 18 horas a temperatura ambiente. Se agregó agua a la mezcla de reacción y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se evaporó bajo presión reducida y el producto crudo se evaporó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (diclorometano: metanol =20:1 , 30:1 ) y se obtuvo el compuesto del título como un polvo blanco (6.9mg, 6.87mmoleses, 39%). Pf 118-122°C 31p-NMR (CDCL 3 ) : 11.20, 11.30. Masa (FAB): m/2 1026 (M+ +Na).

EJEMPLO 8 Ester S -Amino-S'-desoxi-S'-O^^ -dimetoxitritiD^ -O '-C-metilen-S- metiluridin¡l-(3' 5')- timidina Una solución de tetrahidrofurano de fluoruro de tetrabutil amonio (1.0 M, 15 ml, 16 mmoles) se agregó a una solución del ml de tetrahidrofurano del compuesto obtenido en el ejemplo 7 (13.9 mg, 14 mmoles) en una corriente de gas nitrógeno, y la solución se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. El solvente se evaporó bajo presión reducida y el producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (acetato de etilo: etanol= 5:1 ) y el compuesto del título se obtuvo como un polvo incoloro (9.7 mg, 10.9 mmoles, 78%). Pf 157-160°C. 5 31 p-NMR (CDCL 3) : 11.20, 11.30. Masa (FAB): m/2 1026 (M+ +Na).

EJEMPLO 9 Ester metílico de S'-Amino-S'-desoxi-S'-O-^ '-dimetoxitritiQ^'-O^'-C- 10 metilen-5-metiluridinil-(3' 5')-2-(cianoetoxi,disopropilamino)fosfino) timidina Se agregaron 0.2 ml de tetrahidrofurano a una solución de 0.6 ml de acetonitrilo del compuesto obtenido en el ejemplo 8 (10.0 mg, 11 mmoles) 15 y tetrazolida de isopropilamonio (15.5 mg, 77 mmoles), después se agregó 2 cianoetildiisopropilclorofosforamidita (39.8 mg, 132 mmoles) en una corriente de gas nitrógeno y la solución se agitó durante 25 horas a temperatura ambiente. El solvente se evaporó bajo presión reducida. El compuesto del residuo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice 20 (acetato de etilo: trietilamina=99:1 acetato de etilo: etanol: trietilamina=100:10:1 ). El producto se volvió a precipitar con dicloroetano y n- hexano y el compuesto del título se obtuvo como un polvo blanco (3.8mg, 3.5mmoleses, 31%).

-III? 1???MÜIMl ...._.—.. — ., .

Pf 113-116°C 31p-NMR (CD3 OD) :8.67, 8.77, 9.07, 9.28, 148.53, 148.93, 148.99, 149.03. 5 EJEMPL0 10 Síntesis de análogos de oligonucleótido Utilizando un sintetizador de ADN (fabricado por Farmacia Co., Gene Assembler Plus), se sintetizaron automáticamente oligonucleótidos a 10 una escala de 0.2mmoleses. Los solventes y concentraciones de los reactivos y fosforamidita en cada proceso de la producción son idénticos a aquellos en la producción de oligonucleótidos naturales. Los solventes, reactivos y fosforamiditas de nucleósidos naturales empleados fueron aquellos provistos de Farmacia. El grupo DMTr de Universal QCPG (0.2mmoles fabricado por 15 Glen Research) fue desprotegido con ácido tricloroacético, y el grupo hidroxi producido fue tratado con el compuesto obtenido en el ejemplo 9 o amiditas utilizadas en la síntesis de nucleótidos naturales. Este procedimiento de condensación se repitió para obtener análogos de oligonucleótido de secuencias deseadas. El ciclo sintético fue como sigue: 20 Ciclo de síntesis. 1) Destitulación de tricloroacetato/diclorometano: 60 segundos. 2) Acoplamiento de fosforamidita (25 eq) tetrasol/acetonitrilo; 2 minutos o 30 minutos. ^ - " ^ .---***- .--~ . 3) Bloqueo de 1-metilimidazol/acetonitrilo, ácido acético anhidro/ 2, 4, 6-colidina/acetonitrilo; 36 segundos. 4) Oxidación con yoduro/agua/piridina/acetonitrilo; 60 segundos. Cuando el compuesto obtenido en el ejemplo 10 se hace reaccionar en el ciclo 2 anterior, el tiempo de reacción es de 30 minutos, y cuando se emplean otras fosforamiditas, el tiempo de reacción es de 2 minutos. Después que el oligonucleótido, teniendo la secuencia deseada, es sintetizado, el ciclo sintético se conduce hasta el ciclo 1 descrito anteriormente, el grupo dimetoxitritilo en la posición 5' se desprotege, y después, siguiendo métodos convencionales, el oligómero se separa de su sustancia de soporte con una solución acuosa concentrada de amoniaco, el grupo protector del grupo cianoetilo en el átomo de fósforo se desprotege, y los grupos protectores en las bases de ácido nucleico se desprotegen. El oligómero fue purificado a través de HPLC de fase inversa y se obtuvo el oligonucleótido deseado. De acuerdo con este método, el análogo de oligonucleótido, 5'-ttttttttttnt-3' (numero de secuencia 1 en la tabla de secuencias) de donde n en el numero base 11 fue 3'-amino-3'-desoxi-2'-0,4'-C-met¡len-5-metiluridina (de aquí en adelante denominado "oligonucleótido (1 )"), fue obtenido. (Rendimiento del 8.5 nmol, 4,3 %). Los análogos de oligonucleótido obtenidos fueron purificados a través de HPLC de fase inversa (HPLC: modelo 302, columna fabricada por GILSON; CHEMCO CHEMCOBOND 5-ODS-H (7.8 <300mm); 0.1 M de una _^M&^^^^^g£|i solución de acetato de etilamina acuosa (TEAA), f7; 10 12.5% CH3CN/40 minutos, gradiente linear; 50°C; 2.5ml/minuto; 254nm), y la fracción eluida a 25.4 minutos fue recogida.

EJEMPL0 11 Síntesis de análogos de oligonucleótido 1 Utilizando 5-O-dimetox¡tritil-N-4-benzoil-5-metil-2'-desoxicitidin- 3'-O-(2.cianoetil)N,N-diisopropillfosforamidita (fabricado por Farmacia Co.), se obtuvo un análogo de nucleótido teniendo la secuencia representada comod'-tttttmtntmtmtmt-3'(numero de secuencia 2 en la tabla de secuencia) en donde n representa 5-metil-2'-desoxicitirina y n representa 3'-amino-3'-desox¡-2'- 0,4'-C-metilen-5-metiluridina, (de aquí e n adelante denominada como "oligonucleótido (2)", (rendimiento del 7.1 nmoles, 3.5 %). El análogo de oligonucleótido modificado, el cual fue obtenido, se purificó con HPLC de fase inversa (HPLC: modelo 302, columna fabricada por GILSON; CHEMCO CHEMCOBOND 5-ODS.H (7.8* 300mm); 0.1 M de una solución acuosa de acetato de trietilamina (TEAA), f7; 10 12%CH3 CN / 40 minutos, gradiente lineal; 50°C; 2.5ml/minuto; 254nm), y la fracción eluida a 22.5 minutos fue recogida.

EJEMPLO DE REFERENCIA 1 3-azido-3-desoxi-4-hidroximetil-1.2-O-isopropiliden-a-D-ribofuranosa Se agregaron carbonato de potasio (380 mg, 2.75 mmoles) y 15 ml de agua a una solución de 85ml de metanol de 3-azido-3-desoxi-4-hidroximetil-1,2-0-isopropiliden-a-D-ribofuranosa (4.13g, 9.15 mmoles) preparada de acuerdo con la literatura (Zurzhykov S.A., Krayevsky A. A., Nucleosides Nucleotides, 13, 2283-2305 (1994)) a 0°C, y la mezcla se agitó durante 4.5 horas a 0°C. Después, la mezcla de reacción se neutralizó con una solución de ácido clorhídrico al 10% a 0°C, y el metanol se evaporó. Se agregó agua al residuo, después, y después de la extracción con acetato de etilo los extractos se lavaron con una solución de cloruro de sodio acuosa saturada. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se evaporó. El sólido blanco obtenido se lavó con n-hexano frió y el compuesto deseado se obtuvo como un polvo blanco (1.93g, 7.87mmoleses, 86%). Pf 113-115°C ( tolueno) IR vmax (KBr). 3460, 3417, 2999, 2951 , 2907, 211 1 crrf1. 1H-NMR (CDCI3) d: 1.62 (3H, s), 1.35 (3H, s) 2.65 (2H, br, s), 3.81 , 3.65 (2H, AB, J = 12 Hz), 3.59, 4.00 (2H, AB, J = 12.5 Hz), 4.28 (1H, d, J = 5.5 Hz), 4.82 (1H, dd, J = 4 Hz, 5.5 Hz), 5. 85 (1H, d, J = 4 Hz) . 13C-NMR (CDCI3) d: 25.7, 26.2, 61.9, 62.1, 63.2, 79.9, 67.3, 104.4, 1 1 3.6.

EJEMPLO DE REFERENCIA 2 3-az¡do-5-O-ter-putildifenilsilil-3-desoxi-4-h¡droxidimetil-1.2-O- isopropiliden- -D-ribofuranosa Se agregaron trietilamina (3.5g, 4.82ml, 34.6mmoleses) y cloruro de t-butildifenilsililo (9.75mg, 9,22ml, 35.46mmoleses) a una solución de 73ml de cloruro de metileno anhidro del compuesto obtenido en el ejemplo de referencia 1 (2.56mg, 10.5mmoleses) y la solución se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Después, se agregó una solución de carbonato ácido de sodio acuosa saturada a la mezcla de reacción, y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo y los extractos se lavaron con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después, el solvente se evaporó, el residuo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de silicio (acetato de etilo: n-hexano=1 :6). El compuesto deseado se obtuvo como un polvo blanco (3.13 g, 6.47 mmoles, 62%). Pf 99.5-100.5°C (n-hexano). I R vmax (KBr): 3504, 2936, 2852, 21 1 1 crtT1. 1H-NMR (CDCI3) d: 1 .07 (9H, s), 1 .36 (3H, s), 1 .62 (3H, s), 3.62, 3.92 (2H , AB, J = 12 Hz), 4.38 (1 H, d, J = 6 Hz), 4.84 (1 H, dd, J = 4 Hz, 5.5 Hz), 3.82, 3.70 (2H, AB, J = 1 1 Hz), 4.84 (1 H, d , J . = 4 H2, 5.5 Hz), 5.86 (1 H, d, J = 4 Hz), 7.36-7.44 (6H, m), 7.64-7.67 (4H, m). 13C-NMR (CDCI3) d: 19.2, 26.1 , 26.3, 26.8, 62.2, 62.3, 65.2, 80.4, 88.0, 104.5, 113.7, 127.7, 127.8, 129.8, 129.9, 132.7, 132.8, 135.5.

EJEMPLO DE REFERENCIA 3 3-Azido-5-O-ter-butildifenilsilil-3-desoxi-4-(p-toluenesulfoniloxi-metil)-1,2- O.isopropiliden a-D-ribofuranosa Se agregaron trietilamina (137 mg, 180 ml, 1.29 mmoles), cloruro de p-toluensulfonilo (63.3 mg, .33 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (4 mg, 0.03 mmoles) a una solución de 2 ml de cloruro de metileno anhidro el compuesto obtenido en el ejemplo de referencia 2 (100 mg, 0.21 mmoles) a 0°C en una corriente de gas nitrógeno, y la solución se agitó durante 14 horas a temperatura ambiente. Después, se agregó una solución acuosa saturada de carbonato ácido de sodio a la mezcla de reacción, y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo y los extractos se levaron con una solución de cloruro de sodio saturada. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después el solvente se evaporó, el residuo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (acetato de etilo: n-hexano=1 :6). El compuesto deseado se obtuvo como un polvo blanco (130mg, 0.20mmoleses, 98%). Pf 122-124°C (acetato de etilo-n-hexano) IR vmax (KBr): 3069, 2935, 2114, 1366, 1183, 1109 cm"1. 1H-NMR (CDCI3) d: 1.03 (9H, s), 1.27 (3H, s), 1.31 (3H, s), 2.41 (3 H, s),n 3.60, 3.72 (2H, AB, J = 10.5 Hz), 4.33, 4.40 (2H, AB, J = 10 Hz), 4.55 (1 H, d, J = 5.5 Hz), 5.00 (1 H, dd, J = 3.7 Hz, 5.5 Hz), 5.82 (1 H, d, J = 3.7 Hz), 7.23 (2H, d, J = 8.5 Hz), 7.36-7.45 (6H, m), 7.61-7.63 (4H, m), 7.72 (2H, d, J = 8.5 Hz) . 13C-NMR (CDCI3) d: 19.1 , 21.5, 25.9, 26.0, 26.7, 63.1 , 64.7, 68.9, 80.1 , 85.6, 104.4, 113.8, 127.8, 128.0, 129.6, 129.9, 132.4, 132,5, 135.4, 144.6.

EJEMPLO DE REFERENCIA 4 3-Azido-5-O-ter-butildifenilsilil-3-desoxi-4-(p-toluensulfonilox¡-metil)-1,2- di-O-acetil-D-rubofuranosa Se agregaron anhídrido acético (406 mg, 375 ml, 3.98 mmoles) y ácido sulfúrico concentrado (6.5 mg, 3.5 µl, 3.98 mmoles) a una solución de 3.5 ml de ácido acético del compuesto obtenido en el ejemplo de referencia 3 (230 mg, 036 mmoles) en una corriente de gas nitrógeno y la solución se agitó durante 5 horas a temperatura ambiente. Después se agregó hielo-agua a la mezcla de reacción, y después de agitar durante 30 minutos se agregó una solución de cloruro de sodio acuosa saturada. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después de que el solvente se evaporó, el residuo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (acetato de etilo: n-hexano=4:1 ). El compuesto deseado, el cual es una mezcla de a: ß= aproximadamente3:7, se obtuvo como un aceite incoloro (230 mg, 0.34 mmoles, 94%). IR vmax (KBr): 3048, 2935, 2864, 2117, 1756.cprf1. 1H-NMR (CDCI3) [ß form] d: 1.06 (9H, s), 1.83 (3H, s), 2.08 (3H, s), 2.40 (3H, s), 3.54, 3.80 (2H, AB, J = 11 Hz), 4.12, 4.26 (2H, AB, J = 10 Hz), 4.37 (1 H, d, J = 5.5 Hz), 5.32 (1H, d, J = 5.5 Hz), 5.98 (1H, s), 7.29 (2H, d, J = 8 Hz), 7.37- 7.46 (6H, m), 7.59-7.65 (4H, m), 7.76 (2H, d, J = 8 Hz). [a form] d: 1.05 (9H, s) , 2. 02 (3H, s) , 2,13 (3H, s) , 2.39 (3H, s), 3.51 , 3.68 (2H, AB, J = 11 Hz) , 4.12, 4.21 (2H, AB, J = 10.5 Hz), 4.40 (1H, d, J = 7 Hz), 5.32 (1H, m), 6.31 (1 H, d, J = 4.5 Hz), 7.25 (2H, d, J = 8.5 Hz), 7.37-7.46 (6H, m), 7.59-7.65 (4H, m), 7.70 (2H, d, J = 8.5 Hz). 13C-NMR (CDCI3) d: 19.0, 19.1 , 20.0, 20.6, 20.9, 21.1 , 21.5, 26.6, 61.0, 63.2, 65.1 , 68.4, 68.8, 72.2, 75.5, 85.4, 86.5, 93.6, 96.0, 97.3, 127.8, 127.9, 128.0, 129.6, 129.9, 130.0, 132.0, 132.3, 132.4, 135.4, 144.7, 168.5, 169.2, 169.3, 169.4.

EJEMPLO DE REFERENCIA 5 SO-Acetil-S -azido-S -O-ter-butildifenilsilil-S -desoxi^ ^p-toluen- sulfoniloximetil)-5-metilur¡dina Se agregaron O,O'-bis (trimetilsilil) timina (240 mg, 0.93 moles) y tetracloruro de estaño (253 mg, 114 µl, 0.97 mmoles) a una solución de 6ml de 1 ,2-dicloroetano anhidro del compuesto obtenido en el ejemplo de referencia 4 (300 mg, 0.44 mmoles), a 0°C en una corriente de gas nitrógeno, y la solución se agitó durante 43 horas a temperatura ambiente. Después, la mezcla de reacción se diluyó con diclorometano en un baño de hielo, se agregó una solución de carbonato ácido de sodio acuosa saturada a la mezcla de reacción, la cual después se extrajo, con diclorometano. Los extractos se lavaron una solución de cloruro de sodio acuosa saturada. Después, la fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, el solvente se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (acetato de etilo: n-hexano=1 :2-1 :0). El compuesto deseado se obtuvo como un polvo blanco (300 mg, 0.4 mmoles, 91%). Pf 158.5-159.5°C (acetato de etilo-n-hexano). 1H-NMR (CDCI3) d: 1.11 (9H, s), 1.59 (3H, s), 2.15 (3H, s), 2.41 (3H, a), 3.80, 3.84 (2H, AB, J = 11.5 Hz), 4.34, 4.10 (2H, AB, J = 11 Hz), 4.47 (1 H, d, J = 6 Hz), 5.53 (1 H, t, J 6.5 Hz), 5.94 (1 H, d, J = 7 Hz), 7.18 (1 H, s), 7.29 (2H, d, J = 7.5 HZ), 7.37-7.47 (6H, m), 7.61-7.55 (4H, m), 7.71 (2H, d, J = 7.5 Hz), 9.68 (1 H, br s). 13C-NMR (CDCI3) d: 11.8, 19.2, 20.9, 21.5, 26.9, 62.3, 65.9, 68,3, 74.2, 64.8, 86.1 , 118.9, 127.9, 128.0, 129.7, 130.1 , 131.5, 132.2, 135.2, 135.3, 135.5, 145.0, 150.4, 163.6, 169.9.

EJEMPLO DE REFERENCIA 6 3'-O-.ter-butildimet¡lsMil)timidin-5'-(2-cianoetil)fosfonato Se agregó 2-cianoetiltetraisopropilforforiamidita (132 mg, 0.44 5 mmoles) durante 5 minutos a una solución de 4ml de acetonitrilo de 3'-O-(ter- butildimetilsilil) timidina. (descrito por K.M Fríes, C.Joswing and R.F. Borch, J. Med. Chem, 38, 2672 (1995) (100 mg .0.34 mmoles) en una corriente de gas nitrógeno y la solución se agitó durante 2.2 horas a temperatura ambiente. Después, se agregó una solución de 0.88ml de acetonitrilo de tetrazol (30.8 10 mg, 0.44 mmoles) y la solución se agitó durante 1.5 horas a temperatura ambiente. Se agregó agua a la mezcla de reacción, la cual se extrajo con dicloroetano. La fase orgánica se lavó con una solución de cloruro de sodio acuosa saturada, y después se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se evaporó bajo presión reducida y el producto crudo se purificó 15 mediante cromatografía de columna de gel de sílice (cloroformo: metanol=30:1 , n-hexano: acetato de etilo = 5?0:1). El compuesto del título se obtuvo como un aceite incoloro (98.4 mg, 0.21 mmoles, 70%). 1H-NMR (CDCI3) d: 0.10 (6H, s), 0.90 (9H, s), 1.96 (3H, s), 2.18- 2.28 (2H, m), 2.77-2.82 (2H, m), 4.09-4.41 (6 H , m) , 6.28 (1H, dd, J = 7 20 Hz, 11 Hz), 6.98 (1 H, d, J = 720 Hz), 7.36 ( 1 H , d, J = 8 Hz), a .20(1 H, brs). 31p-NMR (CDCI3) d: 7.70, 8.94.

EJEMPLO DE REFERENCIA NUMERO 7 3'-O-.ter-butildimetilsiH0tvmidin-5'-metilfosfanato.

Se agregó clorodiisopropilaminometoxifosfina (69.2 mg, 0.35 mmol) durante 5 minutos a una solución de 2ml de diclorometano de 3'-O-(ter-butildimetilsilil) timidina (100 mg, 0.28 mmoles) en una corriente de gas nitrógeno, y la solución se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Después, se agregó una solución de 2ml de acetonitrilo de tetrazol (56.0 mg, 0.80 mmoles) y la solución se agitó durante 40 minutos a temperatura ambiente. Se agregó agua a la mezcla de reacción, la cual se extrajo con dicloroetano, y la fase orgánica se lavó con una solución de cloruro de sodio acuosa saturada y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. El solvente se evaporó bajo presión reducida y el producto crudo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (n-hexano: acetato de etilo: 1 :1 0:1 n-hexano: acetato de etilo = 1 :4). El compuesto del título se obtuvo como un aceite incoloro (109mg, 0.25mmoleses, 91 %). 31p-NMR (CDCL3 ) : 9.13, 10.07.

EJEMPLO DE PRUEBA 1 Medición de Tm para la determinación de la actividad del triplete Una solución demuestra las cantidades de oligonucleótido (2), el cual forma un triplete y un oligonucleótido natural con ADN de estructura de cadena doble (concentración final de casa nucleótido es de 1.5 µM) en 7 nM de una solución de regulador de fosfato de sodio (pH de 7.0) conteniendo 140 nM de KCl y 10 nM de MgCfe (o una solución sin 10 nM de MgCI2) se sumergió en un baño de agua hirviendo. Después, la solución se enfrió lentamente a temperatura ambiente durante 12 horas, y además se enfrió a 4°C y se dejo a 4°C durante 1 hora. La solución demuestra en una celda de un espectrofotómetro (Du650 fabricado por Beckman Instrument Inc.) se calentó gradualmente de 5°C a 85°C (0.5°C/minutos) y se determino la absorción ultravioleta de la muestra a 260 nm. Los oligonucleótidos naturales que tienen ADN de cadena de estructura doble con la secuencia de 5'-gctaaaaagaaagagagatcg-3' (numero de secuencia 3 en la tabla de secuencias) y su estructura de cadena complementaria con la secuencia de -cgatctctctttctttttagc-3' fueron utilizados. Además, se utilizo un oligonucleótido que forma un triplete, con la secuencia de 5'tttttmtttmtmtmt-3', en donde m es 5-metil-2'-desoxisitirina (de aquí en adelante denominada "como oligonucleótido (3)"). Los resultados de las mediciones de Tm del ADN de estructura de cadena doble con el oligonucleótido (2) y (3) se muestran en el cuadro 3.

CUADRO 3 Tm (°C) Oligonucleótido (2) Oligonucleótido (3) Obtenido en ejemplo 11 Con MgCI2 55 44 Sin MgCI2 44 32 Como se demostró claramente, los análogos de oligonucleótido de la presente invención mostraron valores de Tm más altos en tripletes que los análogos de oligonucleótido natural. Esto indica que los análogos de oligonucleótido de la presente invención muestran una alta actividad en la formación de tripletes.

EJEMPLO DE PRUEBA 2 (Determinación de tolerancia a nucleasas) Se agregaron 0.2 µg de 3'exonucleasa (fosfodiesterasa de Crotalus durissus (Boehringer Mannheim). A 320ul de una solución reguladora de f (50mM Tris (f 8.0) y 10mM MgCI2 ), conteniendo varios oligonucleótidos (10 µg), y la mezcla se mantuvo a 37°C. Después de un tiempo predeterminado, la actividad de la enzima se extinguió calentando (90°C) una porción de la mezcla resultante mediante 2 minutos. La cantidad restante de oligonucleótido en la mezcla resultante se determino a través de HPLC de fase inversa y se determino el cambio en la cantidad de oligonucleótido con el tiempo, en presencia de nucleasas. Los resultados se muestran en la figura 1.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA FIGURA La figura 1 demuestra el tiempo de cambios en la cantidad de oligonucleótido en presencia de nucleasas.

..,..J¡^,.m kJ La ordenada indica la relación (porcentaje) de la cantidad de oligonucleótidos que permanecen en la cantidad a 0 minutos. La abcisa indica el tiempo (minutos) después de iniciar la reacción. Oligonucleótidos empleados en la prueba: 1 ) Oligonucleótido (1 ) obtenido en el ejemplo 10. 2) Oligonucleótido con una frecuencia de5'ttttttttttnt-3' (numero de secuencia 1 en la tabla de secuencias), en donde n es 2 O, 4-C-metilen-5-metiluridina (de aquí en adelante denominada como "oligonucleótido (4)"). 3) Oligonucleótido natural con una secuencia de tttttttttttt-3' (numero de secuencia 6 en la tabla de secuencias), (de aquí en adelante denominado como "oligonucleótido (5)"). Loa análogos del oligonucleótido de la presente invención demostraron una resistencia notable a nucleasa comparado con los análogos del oligonucleótido natural. Además, los análogos de oligonucleótido de esta invención mostraron ejercer una resistencia mas potente a nucleasas que los análogos de oligonucleótido no naturales conocidos. La actividad de formación de híbrido y la actividad anti-VIH de los análogos de oligonucleótido de la presente invención fueron capaces de ser determinadas utilizando los siguientes métodos.

Método 1 Se midieron las temperaturas de fusión (valores Tm) de los productos de fijación entre las estructuras de cadena antisentido, las cuales -*&- «&* fueron los varios análogos de oligonucleótido obtenidos, y las estructuras de cadena sentido naturales basadas en ADN o ARN para investigar la habilidad de hibridación de los análogos de oligonucleótido de la presente invención para ADN complementario y ARN. Cada solución demuestra (500 µl) con concentraciones finales de 100 mM de cloruro de sodio, 10mM de regulador de f de sodio (f 7.2), 4mM de estructura de cadena antisentido, y 4 µM de estructura de cadena sentido más respectivamente, se calentó en un baño de agua en ebullición, y se enfrió lentamente a temperatura ambiente durante 10 horas. La solución de la muestra en una cámara de celda de un espectrofotómetro (v-2100PC, fabricado por Shimadzu Cor.,) se enfrió gradualmente a 5°C , se mantuvo a 5°C durante un periodo adicional de 20 minutos, y después se inicio la medición, en una corriente de gas nitrógeno con el fin de evitar la condensación de la humedad. La temperatura de la muestra se elevo a una velocidad de 0.2°C /minuto hasta 90°C, y se midió la absorción ultravioleta a 260nm a intervalos de 0.1 °C. Con el fin de evitar cambios en la concentración de la muestra con incrementos en la temperatura, se utilizo una celda con cubierta, y se aplico una gota de un aceite mineral sobre la superficie de la solución de muestra durante la medición.

Método 2 Determinación de actividad anti-VIH Se determinaron las actividades anti-VIH de los análogos de oligonucleótido de la presente invención, a través de un método similar a aquel descrito por R. Pauwel et al. (J. Virological Metod, 20, p. 309-321 (1988)). El precipitado de células se suspendió en un medio RPMI-1640, el cual no contuvo suero. A la suspensión se agregó VIH y la mezcla se incubo a 37°C durante una hora. Al final de este tiempo, la mezcla resultante se lavó con el medio RPNI-1640 conteniendo suero de bovino fetal al 10% (de aquí en adelante denominado "medio de suero") y se centrifugo (1000 x g, 5 min.). La célula infectada con VIH así obtenida y las células no infectadas con VIH se suspendieron en el medio de suero con el fin de tener una concentración de 4?105 /ml, respectivamente. Después, se colocaron 100ml de la suspensión en cada cavidad de una placa de 96 cavidades para cultivo de tejido, se incubaron durante 5 días a 37°C en presencia de gas dióxido de carbono sin agitación. Las células infectadas con VIH y las células no infectadas sin compuestos de prueba se incubaron en forma similar. Después de la incubación, las células vivientes se contaron utilizando MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolilo) y se determinaron las actividades inhibidoras de daño a célula de los compuestos de prueba. Se confirmo que el micoplasma no estuvo contenido en la solución de célula y la solución de virus se incubó. La actividad inhibidora del daño de célula en células no infectadas con VIH sin un compuesto de prueba se expreso como 100%, y la actividad inhibidora del daño de célula en células infectadas con VIH sin un compuesto de pruebas se expreso como 0%. La concentración del compuesto ----.---iriÉi ¿»*^* para inhibir el daño de célula en un 50% (EC5o ) fue determinada.

POSIBILIDAD DE UTILIZACIÓN INDUSTRIAL Los análogos novedosos biciclonucleósido de la presente invención exhiben excelentes actividades antisentido o anti-gen y son útiles como intermediarios para la producción de análogos de oligonucleótidos con estabilidad in vivo. Además, los análogos novedosos de oligonucleótido de la presente invención son estables in vivo y útiles como agentes antisentido o anti-gen. Además, los análogos novedosos biciclonucleósido tienen actividad anti-VIH y son útiles como agentes terapéuticos o profilácticos para SIDA.

LISTADO DE SECUENCIA <I I0> San?yo Coapany. Limi ted <12Q> ANÁLOGOS NOVEDOSOS DE BICICLO-NUCLEOSIDO <130 FP-200042 < 140> <141 > <1S0> JP HEI11-207170 <151> 1999-07-22 <160> 6 <170> Patepüp Ver. 2. 0 <210> 1 <2H> 12 <2l2> ADN <2l3> SECUENCIA ARTIFICIAL <220> <223> DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA ARTIFICIAL: OLIGONUCLEOTIDO SINTETIZADO PARA EVALUAR LA RESISTENCIA A NUCLEASA <220> 21 > BASE MODIFICADA <222> (11) <223> URIDINA MODIFICADA <400> 1 tttxtttxtt nt 12 <210> 2 <21 1> 15 <212> ADN <213> SECUENCIA ARTIFICIAL <220> <223> DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA ARTIFICIAL: OLIGONUCLEOTIDO SINTETIZADO PARA EVALUAR LA FORMACIÓN DE UNA TRIPLE HEBRA <220 <221 > BASE MODIFICADA <222> (6) <223> 5-METIL 2*-DE0XICITIDINA <220> <221> BASE MODIFICADA <222> (8) <223 3'-ANIN0-3*-DE0XI-2'-0, '-C-HETILEN-5-METILURIDINA <220> <221 > BASE MODIFICADA 222> ( 10) <223> 5-METIL 2'-DEOXICITIDINA <220> <221 > BASE-MODIFICADA <222> (12) <223> 5-METIL 2--DE0XICITIDINA <220> <221 > BASE MODIFICADA <222> (14) <223> 5-METIL 2'-DE0XICITIDINA <400> 2 tttttntntn mtnt 15 <210> 3 <211> 21 <212> ADN <213> SECUENCIA ARTIFICIAL <220> <223> DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA ARTIFICIAL: OLIGONUCLEOTIDO PARA EVALUAR LA FORMACIÓN DE UNA TRIPLE HEBRA <400> 3 _^t_H_4M_UttH gctaaaaaga aagagagatc g '1 <210> 4 <211 > 21 <212> ADN 212> SECUENCIA ARTIFICIAL <220> <223> DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA ARTIFICIAL: OLIGONUCLEOTIDO SINTETIZADA PARA EVALUAR LA FORMACIÓN DE UNA TRIPLE HEBRA <40O> 4 21 cgaLctctct ttctttttag c <210> 5 <211> 15 <212> A D H <213> SECUENCIA ARTIFICIAL <220> <223> DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA ARTIFICIAL: OLIGONUCLEOTIDO SINTETIZADO PARA EVALUAR LA FORMACIÓN DE UNA TRIPLE HEBRA <220> <221> BASE MODIFICADA <222> (6) <223> 5-METIL 2'-DE0XICITIDINA <220> <22l BASE MODIFICADA <222> (10) <223 5-METIL 2'-DE0XICITIDINA <220> <221> BASE MODIFICADA <222> (12) <223> 5-METIL 2--DE0XICITIDINA <220> <221> BASE MODIFICADA <222> (14) <223> 5-METIL 2'-DE0XICITIDINA <400> 5 tttttntttn tnxpt 15 <210> 6 <211> 12 <212> ADN <213> DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA ARTIFICIAL: OLIGONUCLEOTIDO SINTETIZADO PARA EVALUAR LA RESISTENCIA A NUCLEASA <220> <223> <400> 6 tttitttttt tt 12 -^-_-^-^-_-_ m» ??m

Claims (13)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto de la formula general (1 ) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, 0) [en donde R1 es igual o diferente y cada uno representa un átomo de hidrógeno, un grupo protector para un grupo hidroxi en síntesis de ácido nucleico, un grupo de ácido fosfórico, un grupo de ácido fosfórico protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, o un grupo representado por la fórmula -PÍR^R413 (en donde R43 y R4b son iguales o diferentes y cada uno representa un grupo hidroxi, un grupo hidroxi protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo mercapto, un grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo amino, un grupo amino protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo alcoxi que tienen 1-6 átomos de carbono, un grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo cianoalcoxi que tiene 1-7 átomos de carbono, o un grupo amino sustituido por un grupo alquilo que tiene unos-6 átomos de carbono), R2 representa un grupo azido, un grupo amino, o un grupo representado por la fórmula -NH-R3 (en donde R3 es igual o diferente y cada uno representa un grupo protector para un grupo amino en la síntesis de ácido nucleico, un grupo de ácido fosfórico, un grupo de ácido fosfórico protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, o un grupo representado por la fórmula -P(R4a)R4b (en donde R43 y R b son iguales o diferentes y cada uno representa un grupo hidroxi, un grupo a hidroxi protegido con un grupo protector en síntesis de ácido nucleico, un grupo mercapto, un grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo amino, un grupo amino protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, un grupo alcoxi que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono, un grupo cianoalcoxi que tiene 1-7 átomos de carbono, o un grupo amino sustituido por un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono); B representa un grupo purin-9-ilo o un grupo 2-oxo-1,2-dihidropirimidin-1-ilo, cada uno de los cuales está opcionalmente substituido con uno o más substituyentes seleccionados del siguiente grupo a]; (Grupo a); un grupo hidroxi; un grupo hidroxi protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico; un grupo alcoxi que tiene 1-6 átomos de carbono; un grupo mercapto; un grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico; un grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono; un grupo amino; un grupo amino protegido con un grupo protector en ia síntesis de ácido nucleico; un grupo amino sustituido por un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono; un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de -dai-. .*..*. ....... * .. ] carbono, y un átomo de halógeno.

2.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque R1 representa un átomo de hidrogeno, un grupo acilo alifático, un grupo acilo aromático, un grupo sililo, un grupo metilo sustituido por 1 a 3 grupos arilo, en donde el anillo arilo está sustituido por alquilo inferior, alcoxi inferior, átomo de alógeno o un grupo ciano.

3.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R1 representa un átomo de hidrogeno, un grupo sililo, un grupo metilo sustituido por 1 a 3 grupos arilo, o un grupo metilo sustituido por 1 a 3 grupos arilo, en donde los anillos arilo están sustituidos por un grupo alquilo inferior, grupo alcoxi inferior, átomo de alógeno o grupo ciano.

4.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además por que R1 representa un átomo de hidrógeno, un grupo trimetil sililo, grupo t-butildimetilsililo, grupo t-butildifenil sililo, grupo bencilo, grupo trifenil metilo, 4-metoxibencilo, grupo 4-metoxifenildifenilmetilo, grupo 4,4'-dimetoxidifenilmetilo, grupo 414',4"-trimetoxitrifenilmetilo.

5.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R2 representa un grupo azido, un grupo amino, un grupo representado por la fórmula -NH-R3 (en donde R3 representa un grupo acilo alifático, un grupo acilo aromático, un grupo metilo substituido por uno a 3 grupos arilo, un grupo metilo substituido por uno a 3 grupos arilo, en donde los anillos arilo están sustituidos por un grupo alquilo inferior, grupo alcoxi inferior, átomo de halógeno o grupos ciano, un grupo sililo, un grupo fosforamidita, un grupo fosfonilo, un grupo de ácido fosfórico un grupo de ácido fosfórico protegido con un grupo protector en la síntesis de se nucleico).

6.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R2 representa un grupo azido, un grupo amino, o un grupo representado por la fórmula -NH-R3 (en donde R3 representa un grupo acetilo, un grupo trifluoroacetilo, grupo benzoilo, grupo bencilo, grupo p-metoxibencilo, grupo ter-butildifenilsililo, un grupo representado por la fórmula -P(OC2H4CN)(NCH(CH3)2), un grupo representado por la fórmula P(OCH3)(NCH(CH3)2), un grupo fosfonilo, o un grupo de ácido 2-clorofenil- o 4-clorofenilfosfónico).

7.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R2 representa un grupo azido o un grupo amino.

8.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque B representa 6-aminopurin-9-ilo (es decir, adeninilo), 6-amino-pirin-9-ilo, en donde el grupo arilo está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2,6-diaminopurin-9-ilo, en donde uno o ambos grupo amino están protegi2 con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-cloropurin-9-ilo, 2-amino-6-clorourin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-fluoropurin-9-ilo, 2-amino-6-fluoropurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-bromopurin-9-ilo, 2-amino-6-bromopurin- 9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-hidroxipurin-9-ilo (es decir, guaninilo), 2-amino-6-hidroxipurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 6-amino-2-metoxipurin-9-ilo, 6-amino-2-metoxipurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 6-amino-2-cloropurin-9-ilo, 6-amino-2-cloropurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 6-amino-2-fluoropurin-9-ilo, 6-amino-2-fluoropurin-9-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2,6-dimetoxipurin-9-ilo, 2,6-dicloropurin-9-ilo, 6-mercaptopurin-9-ilo, 6-mercaptopurin-9-ilo en donde el grupo mercapto está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-oxo-4-amino-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo (es decir, citosinilo), 2-oxo-4-amino-1,2-dihidrop¡rimidin-1-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 4-amino-2-oxo-5-fluoro-1 ,2-dihidropirimidin-1 -ilo, 4-amino-2-oxo-5-fluoro-1 ,2-dihidropirimidin-1 -ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 4-amino-2-cloro-1,2-dihidropirimidin-1-ilo, 4-amino-2-cloro-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-oxo-4-metoxi-1 ,2-dihidropirimidin-1 -ilo, 2-oxo-4-mercapto-1 ,2-dihidropirimidin-1 -ilo, 2-oxo-4-mercapto-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, en donde el grupo mercapto está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2,3-dihidroxipirimidin-1-ilo (es decir, uracililo), 2,4-dihidroxi-5-metilpirimidin-1-ilo (es decir, timinilo), 4-amino-d-metil-2-oxo-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo, o 4-amino-5-metil-2-oxo-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo en donde ei grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico.

9.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque B representa 6-benzoilaminopurin-9-ilo, adeninilo, 2-benzoilamino-6-hidroxipurin-9-ilo, guaninilo, 2-oxo-4-benzoilamino-1,2-dihidropirimidin-1-ilo, citosinilo, uracililo o timinilo.

10.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque se selecciona del siguiente grupo: 3'-amino-3'-desoxi-2'-0,4'-C-metilen-5- metiluridina, S'-azido-S'-desoxi-Z-O^'-C-metilen-d-metiluridina, 3'-azido-3,-desoxi-5,-0-(4,4,-dimetoxitritil)-2'-O14,-C-metilen-5-metiluridina, S'-acido-d'-O-ter-butildifenilsilil-S'-desoxi-Z-O.^-C-metilen-d-metiluridina y 3'-amino-3,-desoxi-5'-O-(4,4,-dimetoxitritil)-2'-O,4,-C-metilen-d-metiluridina.

11.- Un análogo de oligonucleótido o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que tiene una o más unidades estructurales representadas por la siguiente fórmula general (1a), (la) siempre que cuando el oligonucleótido tenga 2 o más unidades estructurales de la fórmula (1a), cada B es igual o diferente, [en donde, B representa un grupo purin-9-ilo o un grupo 2-oxo-1,2-dihidropirimidin-1-ilo, el cual podrá estar sustituido con substituyentes selecciona2 del grupo Alfa que se presenta a continuación]. (Grupo a); un grupo hidroxi; un grupo hidroxi protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico; un grupo alcoxi que tiene 1-6 átomos de carbono; un grupo mercapto; un grupo mercapto protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico; un grupo alquiltio que tiene 1-6 átomos de carbono; un grupo amino; un grupo amino protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico; un grupo amino sustituido por un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono; un grupo alquilo que tiene 1-6 átomos de carbono; y un átomo de halógeno.

12.- Un análogo de oligonucleótido o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado además porque B representa 6-aminopurin-9-ilo (es decir, adeninilo), 6-aminopurin-9-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2,6-diaminopurin-9-ilo, 2-amino-6-cloropurin-9-ilo, 2-amino-6-cloropurin-9-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-fluoropurin-9-ilo, 2-amino-6-fluoropurin-9-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6-bromopurin-9-ilo, 2-amino-6-bromopurin-9-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-amino-6- hidroxipurin-9-ilo (es decir guaninilo), 2-amino-6-hidroxipurin-9-ilo en donde los grupos amino e hidroxilo están protegi2 con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 6-amino-2-metoxipurin-9-ilo, 6-amino-2-cloropurin-9-ilo, 6-amino-2-fluoropurin-9-ilo, 2,6-dimetoxipurin-9-ilo, 2,6-dicloropurin-9-ilo, 6-mercaptopurin-9-ilo, 2-oxo-4-amino-1 ,2-dihidropirimidin-1 -ilo (es decir citosinilo), 2-oxo-4-amino-1 , 2-dihidropirimidin-1-ilo donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 2-oxo-4-amino-d-fluoro-1 ,2-dihidro?irimidin-1 -ilo, 4-amino-2-oxo-d-fluoro-1 ,2-dihidropirimidin-1-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico, 4-amino-2-oxo-d-cloro-1 , 2-dihidropirimidin-1-ilo, 2-oxo^4-metoxi-1 , 2- ihidropirimidin-1 -ilo, 2-oxo-4-mercapto-1 , 2-dihidropirimidin-1-ilo, 2-oxo-4-hidroxi-1 , 2-dihidropirimidin-1 -ilo (es decir, uracililo), 2-oxo-4-hidroxi-d-metil-1 , 2-dihidropirimidin-1-ilo (es decir, timinilo), 4-amino-d-metil-2-oxo-1 , 2-dihidropirimidin-1-ilo (es decir, 5-metilcitosinilo), o 4-amino-5-metil-2-oxo-1 , 2-dihidropirimidin-1-ilo en donde el grupo amino está protegido con un grupo protector en la síntesis de ácido nucleico.

13.- Un análogo de oligonucleótido o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de conformidad con la reivindicación 11 , caracterizado además porque B representa 6-benzoilaminopurin-9-ilo, adeninilo, 2-isobutilamino-6-hidroxipurin-9-ilo, guaninilo, 2-oxo-4-benzoilamino-1 , 2-dihidropirimidin-1-ilo, citosinilo, 2-oxo-d-metil-4-benzoilamino-1 , 2-dihidropirimidin-1-ilo, d-metoxicitosinilo, uracililo o timinilo.